जे न्युरोकेम एक्सएनयूएमएक्स जाने; एक्सएनयूएमएक्स (एक्सएनयूएमएक्स): एक्सएनयूएमएक्स-एक्सएनयूएमएक्स. doi: 2014 / jnc.128. एपब एक्सएनयूएमएक्स ऑगस्ट एक्सएनएमएक्स.
लिऊ क्यूआर1, रुबीओ एफजे, बॉस्टर जेएम, व्यापारी एनजे, कंटाळवाणा एस, हौ एक्स, शाहम वाई, आशा आहे बीटी.
सार
मेथमॅफेटाइन आणि इतर औषधे मेंदूतील सर्व न्यूरॉन्सचे लहान प्रमाण सक्रिय करतात. आम्ही यापूर्वी न्युरोल अ‍ॅक्टिव्हिटी मार्कर फॉस व्यक्त करणार्या सक्रिय न्यूरॉन्समध्ये निवडकपणे प्रेरित केलेल्या आण्विक बदलांचे वैशिष्ट्यीकृत करण्यासाठी फ्लोरोसेंसी-सक्रिय सेल सॉर्टींग (एफएसीएस)-आधारित पद्धत विकसित केली. तथापि, या पद्धतीत बर्‍याच उंदीरांकडील तलावाचे नमुने आवश्यक आहेत. आम्ही आता मल्टीप्लेक्स प्री-एम्प्लिफिकेशन व्यूहरचना वापरुन एका उंदरापासून फॉस-एक्स्प्रेसिंग डोर्सल स्ट्रायटल न्यूरॉन्समध्ये आण्विक बदल दर्शविण्यासाठी सुधारित एफएसीएस-आधारित पद्धतीचे वर्णन करतो.
फॉस आणि न्युएन (एक न्युरोनल मार्कर) इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्री असे दर्शविते की एक्सएनयूएमएक्स-एक्सएनयूएमएक्स% डोर्सल स्ट्रायटम न्यूरॉन्स तीव्र मेथाम्फॅटामाइन इंजेक्शन्स (एक्सएनयूएमएक्स मिलीग्राम / किलोग्राम, आयपी) नंतर एक्सएनयूएमएक्स मिनिट सक्रिय होते, तर क्षार इंजेक्शनद्वारे एक्सएनयूएमएक्स% पेक्षा कमी सक्रिय होते.
आम्ही एफएसीएस चा वापर न्युन-लेबल केलेल्या न्यूरॉन्सला फॉस-पॉझिटिव्ह आणि फॉस-नकारात्मक न्यूरॉन्समध्ये विभक्त करण्यासाठी केला आणि आरटी-क्यूपीसीआर वापरुन एमआरएनए अभिव्यक्तीचे मूल्यांकन पाच फॉस-पॉझिटिव्ह न्यूरॉन्समधून केले. मेथॅम्फेटामाइनने एक्सएनयूएमएक्स-एक्सएनयूएमएक्स-पट त्वरित लवकर जीन्स आर्क, होमर-एक्सएनयूएमएक्स, सी-फॉस, एफओएसबी आणि त्याच्या आयसोफार्मची वाढ (Osफोसबी आणि एक कादंबरी isoform BfosB-2) फॉस-पॉझिटिव्ह परंतु फॉस-नकारात्मक न्यूरॉन्समध्ये नाही. सिंगल पृष्ठीय स्ट्रायटम होमोजेनेट्सकडून अनसॉर्ट केलेल्या नमुन्यांमध्ये जेव्हा मूल्यमापन केले जाते तेव्हा त्वरित लवकर जीन एमआरएनए प्रेरण एक्सएनयूएमएक्स-पट कमी किंवा अनुपस्थित होते. आमच्या सुधारित पद्धतीमुळे गुंतागुंत व्यसनांच्या मॉडेल्समध्ये ड्रग्स किंवा ड्रग्ज-संबंधी संकेतांद्वारे सक्रिय केलेल्या न्यूरॉन्समधील अद्वितीय आण्विक बदलांचा अभ्यास करणे शक्य होते.
मेथमॅफेटाइन आणि इतर औषधे मेंदूतील सर्व न्यूरॉन्सचे लहान प्रमाण सक्रिय करतात. आम्ही येथे मज्जातंतू क्रियाकलाप मार्कर फॉस व्यक्त करणार्या सक्रिय न्यूरॉन्समध्ये निवडकपणे प्रेरित केलेल्या आण्विक बदलांची वैशिष्ट्यीकृत करण्यासाठी सुधारित पद्धतीचा अहवाल देतो. आम्ही एकाच उंदराच्या पृष्ठीय स्त्राव पासून एक्सएनयूएमएक्स फॉस-एक्सप्रेसिंग न्यूरॉन्स म्हणून क्वचितून तीव्र मेथॅम्फेटामाइन-प्रेरित जनुक अभिव्यक्तीचे मूल्यांकन करण्यासाठी आम्ही लक्ष्यित पीसीआर प्री-एम्प्लिफिकेशनसह एफएसीएसचा वापर केला. फॉस-पॉझिटिव्ह मध्ये मेथॅम्फेटामाइनने एक्सएनयूएमएक्स-एक्सएनयूएमएक्स-फोल्ड त्वरित लवकर जीन्स (आयईजी) ची वाढ केली परंतु फॉस-नकारात्मक न्यूरॉन्स नाही. लक्ष्यित पीसीआर प्री-एम्प्लिफिकेशन जटिल व्यसन मॉडेल्समध्ये ड्रग्स किंवा ड्रग्ज-संबंधित संकेतांद्वारे सक्रिय केलेल्या न्यूरॉन्समध्ये अद्वितीय आण्विक बदलांचा अभ्यास करणे शक्य करते.
2013 प्रकाशित केले. हा लेख यूएस सरकारचे काम आहे आणि यूएसए मध्ये सार्वजनिक डोमेन मध्ये आहे.
;