Phetoho ea Dopamine ea Dynamics e Fetoha nakong ea Bocha le ka morao Tlhahiso ea Joala ea Boithaopo (2014)

Nako ea bocha e amahanngoa le ho tsitsinyeha ho phahameng le ho ipeha kotsing, ho etsa hore batho ba lilemong tsa bocha ba rate ho sebelisa lithethefatsi. Tšebeliso ea lithethefatsi pejana e hokahanngoa le kotsi e kholo ea mathata a ts'ebeliso ea lithethefatsi hamorao bophelong empa motheo oa neurobiological ha o hlakileng. Boko bo tsoela pele ho hola ka nako ea bocha le pherekano ka nako ena bo khothalletsoa hore bo kenye letsoho tlokotsing ea ho ba kotsing. Phetoho ho tloha ho laoloang ho isa ts'ebetsong e qobelloang ea tšebeliso ea lithethefatsi le bokhoba ba eona e kenyelletsa liphetoho tse tšoarellang ho marangrang a neural ho kenyelletsa phetoho e tsoang ho li-nucleus bokellanya, litlamorao tse matlafatsang, ho hira ea dorsal striatum le tloaelo ea ho etsa. Boithuto bona bo ne bo ikemiselitse ho leka tšibollo ea tlhahiso ea tlhahiso ea dopamine e atileng kamora phephetso ea meriana ho litoeba tsa bongoana. Ho lokolloa ha dopamine ka potasiamo-evoke dopamine ho ile ha fuputsoa ho sebelisoa lirekoto tsa chronoamperometric dopamine hammoho le phephetso ke li-amphetamine litomong tsa pele le tsa morao tsa bocha le litlelong tsa batho ba baholo. Ntle le moo, litlamorao tsa ho noella ho itlopa joala ka boomo nakong ea bocha li ile tsa hlahlojoa. Lintlha li bonts'a keketseho ea butle-butle ea ho lokolloa ha dopamine ka botsofaling, ho tšehetsa liphuputso tse fetileng tse fanang ka maikutlo a hore letamo la dopamine e ka tsoaloang le eketseha ka lilemo. Ka lehlakoreng le leng, ho fokotseha hanyane ka hanyane ha motho a tsosoa le ho tsofala ho ile ha bonoa ka lebaka la amphetamine, ho tšehetsa letamo le leholo le lekanang la polokelo ea dopamine liphoofolong. Mehato ea Dopamine kamora ho itlopa joala ka boithaopo e hlahisitse li-amplople tse tlase tsa karabelo ho arabela potassium-chloride, e bonts'a hore joala bo ama letamo la dopamine mme sena se ka ba le litlamorao tsa ho ba kotsing ea ho lemalla le ts'oaetso e 'ngoe ea kelello e kenyeletsang dopamine ho dorsal striatum.

Lisebelisoa le mekhoa

Boitšoaro ba Melao

Liteko tsohle tsa liphoofolo li entsoe ka tlas'a protocol e lumelletsoeng ke Uppsala Animal Ethical Committee mme tsa latela tataiso ea Molao oa Sweden mabapi le Phuputso ea liphoofolo (Animal Welfare Act SFS1998: 56) le European Communities Council Directive (86 / 609 / EEC).

Animals

Likokoana-hloko tsa Wistar tse Tšoarehileng (RccHan: WI, Harlan Laboratories BV, Horst, The Netherlands) ba fihlile setsing sa liphoofolo ka Xstation letsatsi la 16. Liphoofolo li fihlile ka libeke tse fetang libeke tse 'maloa bakeng sa ho boloka nako ea lirekoto tsa chronoamperometric. Matamo a ne a bolokiloe a le mong ka har'a mekotla ea macrolon (59 cm x 38 cm × 20 cm) ka lijo tsa pellet (Mofuta R36; Lantmännen, Kimstad, Sweden) le metsi a pompo. ad libitum. Mekotla eo e ne e e-na le liphahlo tsa lehong le lipampiri tsa 40 × 60 cm; Cellstoff, Papyrus) 'me e ne e fetoloa hang ka beke ke basebetsi ba tlhokomelo ea liphoofolo. Kamore ea liphoofolo e ne e lula e lula e futhumetse (22 ± 1 ° C) le mongobo (50 ± 10%) ho potoloho e tloaelehileng ea 12 h e bobebe / e lefifi e nang le mabone ho 06: 00 am. Likamore tsohle li ne li e-na le lerata le thibang litsebe ho fokotsa melumo e sa lebelloang e ka ferekanyang liphoofolo.

Kakaretso ea tlhahlobo ea liteko e ka fumanoa ho Setšoantšo sa 1. Litala tse hlahileng ka letsatsi le le leng (letsatsi la kamora ho pepa (PND) 0) li ile tsa matlafatsoa ho kenyelletsa banna ba 6 le basali ba 4 bakeng sa taolo ea khatello ea maikutlo ea ho tsamaisoa ke bo-mme, boits'oaro ba bo-mme le lefutso. Malinyane a ile a khoesoa PND 22 'me a beoa 3 ka terata ho fihlela PND 28 (letsatsi la 1) kapa PND 42 (letsatsi la 1) ha ho ne ho rekisoa chronoamperometric. Ke malinyane a banna feela a sebelisitsoeng thutong ena. Sehlopha sa likhoto tsa banna tse mashome a mararo se ile sa fuoa monyetla oa ho ithaopa joaloka 20% ethanol ka paradigm e se nang khetho ea libotlolo tse peli ho tloha PND28 ho ea PND65. Liphoofolo li ile tsa fuoa lihora tsa 24 ho fihlella ethanol ka matsatsi a mararo a latellanang ka beke, ke hore ka Labobeli ho fihlela ka Labone bakeng sa libeke tse tšeletseng, kakaretso ea mananeo a 18. Bakeng sa mehato ea ho kenella ka har'a ethanol, libotlolo li ne li lekantsoa kamora nako e 'ngoe le e' ngoe 'me kamora' ngoe le e 'ngoe' me ho baliloe ligrama tse hloekileng tsa 'mele ka kilo. Boemo ba botlolo bo ile ba fetoloa lipakeng tsa linako ho qoba maemo a khethiloeng. Liphoofolo tse noang ethanol li ne li bolokoa ka bomong ho tloha PND 28 ho fihlela PND 70. Liphoofolo tse nang le "cumulative ethanol intakeol" (g / kg) e phahameng ka ho fetisisa li ile tsa khethoa 'me lirekoto tsa elektroike li ile tsa etsoa ka PND 70 (matsatsi a 2). Lisebelisoa tsa tahi tsa metsi tse tala ea lilemo li ne li boetse li beoa ka bonngoe ka nako e ts'oanang.

Download:  

• PPT

  Slide sa PowerPoint

• PNG

  setšoantšo se seholoanyane (23KB)

• TIFF

  setšoantšo sa pele (89KB)

Setšoantšo sa 1. Lethathamo la liteko.

E = ho nooa hoa ethanol, PND = letsatsi la kamora ho beleha, W = ho nwa metsi.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g001

Rekoto ea Chronoamperometric ea Dopamine In vivo

Lisebelisoa.

Inactin, tharollo ea Nafion 5%, dopamine hydrochloride, L-ascorbic acid, chloride ea potasiamo, sodium chloride, sodium phosphate, calcium chloride le d-amphetamine sulfate li fumanoe ho Sigma-Aldrich, LLC (St Louis, MO, USA). Wax ea Kerr e khang e fumanoe ho DAB LAB AB (Upplands Väsby, Sweden). Li-microelectrodes tsa Carbon fiber (SF1A; bolelele ba 30 µm bokantle ba X XUMUM µm) li ile tsa rekoa ho Quanteon, LLC (Nicholasville, KY, USA), setsing sa polokelo ea motlakase sa tšepe (150 µm, Teflon-insured) se ile sa rekoa ho AM Systems Inc. ( Carlborg, WA, USA) le likhalase tsa khalase (bophara ba 200 mm kahare) bakeng sa li-micropipette li ile tsa rekoa ho World Precision Instruments Ltd (Stevenage, UK).

Phekolo.

Lirekoto tsa Dopamine li entsoe ka PND 28 (± 1 day), PND 42 (day 1 day) kapa PND 70 (matsatsi a ± 2). Ho buoa ho ile ha etsoa hang-hang pele ho rekoto ea electrochemical. Sekhele se futhumatsang metsi (Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, New York) se ne se sebelisetsoa ho boloka mocheso oa 'mele. Liphoofolo tsena li ne li sa anngoe ka Inactin 125 mg / kg intraperitoneally (ip) mme li behiloe ka har'a mochini o thellang (Stoelting Co, Wood Dale, IL, USA). Ho ile ha phunngoa lesoba ka hara leqhetsoana holim'a sebaka sa ho rekota bakeng sa elektrone, mme leqhubu le leng la chesoa hole le sebaka sa ho rekota bakeng sa polokelo ea "electrode" ea Ag / AgCl.

Lirekoto tse phahameng tsa chronoamperometric tse phahameng tsa ho lokolloa ha dopamine le ho ts'oaroa.

Litekanyo tsa chronoamperometric tse phahameng ka lebelo le phahameng (tekanyo ea sampole ea 1 Hz, kakaretso ea 200 ms) li ile tsa etsoa ho sebelisoa mokhoa oa ho rekota oa FAST16-mkII (Fast Analytical Sensing Technology, Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, USA) ho latela mokhoa o neng o hlalositsoe pele [16]. Carbon fiber microelectrodes (SF1A) e ne e koaetsoe ka liaparo tse tharo tsa Nafion ka ho futhumatsa ka 5 min ho 200 ° C pele ho koala ea pele le kamora kobo e ngoe le e ngoe. [17]. Li-electrod li ne li se li lekantsoe a vitro ho 0.05 M phosphate buffered saline ho tseba ho khetha, moeli oa ho lemoha (LOD) le letsoalo pele o sebelisoa Ka vivo [16]. Li-microelectrodes li bonts'itse likarabo tse hlakileng ho tlatsetso ea serial ea dopamine (2-6 µM), e nang le coeffnty e lekanang ea (R2) ea 0.999 ± 0.0003. Khetho e tloaelehileng bakeng sa li-elektrone tsohle tse sebelisitsoeng thutong ena e ne e le 14482 ± 3005 µM ​​ea dopamine ka ascorbic acid. LOD e tloaelehileng e ne e le 0.026 ± 0.004 µM ​​dopamine, 'me sebaka se phahameng se ne se le −1.00 ± 0.03 nA / µM dopamine. Tekanyo e tlase ea ho fokotsa / oxidation e lekantsoeng nakong ea likarabo tsa tlhoro ea dopamine e ne e le 0.67 ± 0.02, e leng sesupo sa ho fumanoa ha dopamine e atileng haholo [17]. Ho ile ha kenngoa terata ea silevera, 'me e sebelisoa joalo ka Ka vivo Electrode ea Ag / AgCl [18].

Ho protocol ea liteko tsa vivo.

Micropipette (10-15 µm bophara ba ka hare) e ne e tletse tharollo ea isotonic potasium chloride (120 mM KCl, 29 mM NaCl, 2.5 mM CaCl₂· 2H₂O) (pH 7.2-7.4) o sebelisa nale e tlatsang polasetiki (28G, Lisebelisoa tsa Lefatše tsa Precision, Aston, UK). Micropipette e ne e khabisitsoe hoo e ka bang 150-200 µm ho tloha ntlheng ea fiber fiber e sebelisang bokahare. Electrode e behiloe ka mokhoa o tsitsitseng ho dorsal striatum, AP: + 1.0 mm, L: + 3.0 mm ho tloha bregma, bar ea incisor e ile ea fetoloa ho latela lilemo le boima [19], [20]. Electrode qalong e ne e behiloe dorsal (−3.0 mm) sebakeng sa ho rekota, e sebelisa micromanipulator (Narishige International Ltd, London, UK) ho e theola, 'me e lumelletsoe ho fihlela motheo o tsitsitseng oa hoo e ka bang 45-60 min pele e theoloa ho botebo ba −4.0 limilimithara ho tloha bregma. Ka nako eo electrode e ile ea lumelloa metsotso e meng ea 5-10 ho tsitsa sebakeng sa ho rekota pele phello ea ente e le 'ngoe ea potasiamo chloride ho lokolloeng ha dopamine e ne e emisitsoe. Tharollo ea potasiamo e sebelisitsoe sebakeng sa heno e sebelisoa khatello ea khatello e laoloang ke PicoSpritzer III (Parker Hannifin Corporation, Pine Brook, NJ, USA) le khatello (10-20 psi) le nako (0.5-1.0 s) e ile ea fetoloa ho tlisa 100 nl ea tharollo ea potasiamo, e lekantsoeng ke microscope e tlatsitsoeng ka sefahleho sa mahlo [21].

Ho lokolloa ha potasiamo ho sebelisitsoe hammoho le ente ea subcutaneous ea amphetamine kapa saline. Ho ile ha hlahisoa litlhōrō tse tharo tse tšoanang le tsa bophahamo tse tšoanang ka boholo ba 10 min. Metsotso e mehlano ka mor'a tlhoro ea ho qetela ea litšupiso, likhoto li ile tsa fuoa 2 mg / kg amphetamine kapa palo e lekanang ea letsoai (1 ml / kg) mme kamora ho lokolloa ha e 'ngoe ea minera ea 5 e ile ea ts'oaroa hape ka 10 min, e hlahisa litlhoro ho 5, 15, 25 , 35, 45, 55 le 65 min kamora ho kenngoa ka har'a ente ea systemic, bona Setšoantšo sa 2A bakeng sa moemeli. Tekanyetso ea amphetamine e ile ea khethoa ho ipapisitse le litlamorao tsa boits'oaro lithutong tsa boitšisinyo le boitlhahlobo [22]-[24].

Download:  

• PPT

  Slide sa PowerPoint

• PNG

  setšoantšo se seholoanyane (43KB)

• TIFF

  setšoantšo sa pele (194KB)

Setšoantšo sa 2. Letšoao la moemeli.

A) Letšoao la oxidation la hajoale bakeng sa lere ka letsatsi la ho beleha 28 le amohelang amphetamine le B) haufi-ufi le tlhoro ea bobeli ea pontšo bakeng sa phoofolo e le 'ngoe e bonts'a hore na amplitude le T80 li baliloe joang. Amp = amplitude, Base = basement, Ref = index.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g002

Netefatso ea ho beoa le li-electrode.

Li-elektrone li ile tsa khaoloa tsa ba tsa sala li le teng kamora hore tlhahlobo e felileng le masapo a bohloa a qojoe. Sebaka se ne se netefalitsoe ka ho arolelana le likhoele tsa leqhoa. Ho tsoa ho liphoofolo tsa 12 ho PND28, 1 e ile ea qheleloa ka thoko ka lebaka la ho beoa ka phoso, le 2 ka lebaka la liphoso tsa ho rekota. Bakeng sa liphoofolo tsa 12 ho PND 42, phoofolo ea 1 e ile ea qheleloa ka thoko ka lebaka la ho beoa ka phoso. Bakeng sa liphoofolo tsa 16 ho PND 70, 3 ha ea kenyelletsoa ka lebaka la liphoso tsa ho rekota. Bakeng sa liphoofolo tse noang li-ethanol tsa 16 ho PND 70, 2 ha e qheleloe ka thoko ka lebaka la liphoso tsa ho rekota. Liphoso tsa ho rekota li kenyelletsa ho koaloa ha polasetiki le likhathatso tsa motlakase tse kang ho khaoha ha motlakase le litšitiso tsa phepelo ea motlakase ka kakaretso setsing sa ho rekota.

Tlhahlobo ea lintlha.

Bophahamo bo boholo ba litlhoro tse emisitsoeng le nako ea tlhōrō ea litheko ho theohela ho 80% ea amplitude ea eona (T80) e ile ea baloa ho sebelisoa mofuta oa software ea FAST Analysis 4.4 (Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, USA), bona Setšoantšo sa 2B bakeng sa mohlala oa moemeli. Litlhōrō tse tharo tsa litšupiso li ne li lekantsoe mme liperesente tsa litlhoro tsena li ne li baloa bakeng sa litlhoro tse latelang tsa ente. Bakeng sa tlhahlobo ea lipalo-palo, tlhahlobo ea mehato e phetoang ea phapang (ANOVA) e sebelisitsoe ho bapisa data ea chronoamperometric ka nako e pakeng tsa lilemo kapa lihlopha tsa ho noa le kalafo (saline kapa amphetamine), e lateloe ke phapang ea bohlokoa ea Fisher (LSD) ea morao-rao. Bakeng sa tlhaiso-leseling e kenang ea ethanol, e neng e sa tsamauoe hangata, ho ile ha sebelisoa Friedman ANOVA Liphuputso tsa Statistical li entsoe ho sebelisoa Statistica 10 (StatSoft Inc., Tulsa, OK, USA). Liphapang li ne li nkuoa li le bohlokoa lipalo ho p <0.05.

Results

Liphello tse itšetlehileng ka lilemo

Ho bontšoa phapang lipapaling tse ngata pakeng tsa lihlopha tsa lilemo Setšoantšo sa 3. Mehato e pheta-phetoang ANOVA ha e bapisa lilemo le nako, e bontšitse phello e kholo ea lilemo [F (2,22) = 5.81; p = 0.009], empa ha ho na phello ea nako [F (2,44) = 1.43; p = 0.25] kapa phello efe kapa efe ea tšebelisano lipakeng tsa nako le lilemo [F (4,44) = 1.70; p = 0.17].

Download:  

• PPT

  Slide sa PowerPoint

• PNG

  setšoantšo se seholoanyane (28KB)

• TIFF

  setšoantšo sa pele (199KB)

Setšoantšo sa 3. Malebela a hloahloa a lipalo tsa batho ka lilemo tse fapaneng.

Amplitudes (µM) (mean ± SEM) ea litlhoro tse tharo tsa litšupiso pele ho kalafo e nang le amphetamine kapa saline lihlopheng tse tharo; letsatsi la kamora 'pelehi (PND) 28, 42 le 70. ** p <0.01.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g003

Ha ho na litlamorao tsa botsofe [F (2,24) = 1.02; p = 0.38], nako [F (2,48) = 0.94; p = 0.40] kapa nako le lilemo [F (4,48) = 0.22; p = 0.93] li fumanoe bakeng sa boleng ba T80. Phapang e hlalositsoeng ea ± phoso e tloaelehileng ea reisire (SEM) T80 boleng e ne e le 17.3 ± 1.3 ea PND 28, 19.5 ± 0.9 bakeng sa PND 42 le 20.5 ± 1.0 bakeng sa PND70.

Phapang pakeng tsa lihlopha tsa lilemo ho karabelo ea amplitite ho bontšitsoe ho Setšoantšo sa 4A-C. Kalafo ea Amphetamine e hlahisitse litlamorao tse kholo tsa lilemo [F (2,26) = 3.95; p = 0.03], kalafo [F (1,26) = 10.77; p = 0.003] le nako [F (6,156) = 3.32; p = 0.004], le litlamorao tsa tšebelisano lipakeng tsa nako le lilemo [F (12,156) = 2.23; p = 0.01], nako le kalafo [F (6,156) = 4.20; p <0.001], empa ha ho na tšebelisano lipakeng tsa lilemo le kalafo [F (2,26) = 2.37; p = 0.11] kapa nako, lilemo le kalafo [F (12,156) = 0.77; p = 0.68].

Download:  

• PPT

  Slide sa PowerPoint

• PNG

  setšoantšo se seholoanyane (118KB)

• TIFF

  setšoantšo sa pele (667KB)

Setšoantšo sa 4. Likarabo tsa likarabo tsa batho ba bangata le tsa T80 ha nako e ntse e feta lilemong tse fapaneng.

Likarabo ha nako e ntse e feta ka mora liente tsa subcutaneous (sc) tsa saline kapa amphetamine, joalo ka liperesente tsa boleng ba litšupiso (bolela ± SEM), bakeng sa li-amplopes ho A) letsatsi la kamora ho hlaha (PND) 28, B) PND 42 le C) PND 70, le bakeng sa boleng ba T80 ho D) PND 28, E) PND 42 le F) PND 70. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 ha e bapisoa le taolo ea letsoai, ^#p <0.05 ha e bapisoa le nako-e lekanang ea nako ho PND 42, ° p <0.05, °athatha p <0.01, ° </b> ^§p <0.05, ^§§p <0.01, ^§§§p <0.001 ha e bapisoa le ntlha-nako e lekanang ho PND 28.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g004

Karabelo ea T80 ho amphetamine e bontšitsoe ho Setšoantšo sa 4D-E. Ho ne ho se na tšusumetso e kholo ea lilemo [F (2,25) = 1.87; p = 0.17], empa ho bile le litlamorao tsa kalafo [F (1,25) = 26.52; p <0.001], nako [F (6,150) = 7.70; p <0.001] le phello ea tšebelisano ea nako le kalafo [F (6,150) = 12.29; p <0.001]. Ho ne ho se na tšebelisano lipakeng tsa lilemo le kalafo [F (2,25) = 1.29; p = 0.29], nako le lilemo [F (12,150) = 0.66; p = 0.78] le mokhoa o lebisang tšebelisanong lipakeng tsa nako, lilemo le kalafo [F (12,150) = 1.60; p = 0.098].

Tšebeliso e Mpe ea Joala ea Bacha

Lintlha tsa ho kenella tsa Ethanol bakeng sa likhoto tsa 14 tse neng li sebelisoa ho rekoto ea chronoamperometric li bonts'itsoe ho Lethathamo 1. A Friedman ANOVA ha e bonts'e phapang ea bohlokoa ea ho ja ka nako e telele, leha ho ne ho e-na le mokhoa [χ² = 9.80; p = 0.08] mabapi le phapang e bakoang ke ho kenella nakong ea beke ea bobeli (PND 35-37), e neng e phahame hanyane ho feta libeke tse latelang. Friedman ANOVA ea likhetho o bontšitse keketseho ha nako e ntse e tsamaea [χ² = 19.7; p = 0.001], haholo ka lebaka la keketseho libekeng tse tharo tse qalang, bona Lethathamo 1.

Download:  

• PPT

  Slide sa PowerPoint

• PNG

  setšoantšo se seholoanyane (28KB)

• TIFF

  setšoantšo sa pele (167KB)

Tafole 1. Motsoako o lekaneng, o tlase le o fetelletseng oa joala (g / kg / 24 h) le khetho (%) bakeng sa libeke tse tšeletseng tsa phihlello ea joala le moedi, bonyane le bo boholo ba ho ja ka botlalo (g) kamora linako tsa 18.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.t001

Ho bontšoa phapang lipapatsong tse kholo pakeng tsa lihlopha tsa ethanol- le metsi a nooang Setšoantšo sa 5. Mehato e phetoang ANOVA e bapisang sehlopha le nako ea ho noa, e bonts'itse phello e kholo ea sehlopha sa ho noa [F (1,17) = 16.22; p <0.001], empa ha ho na phello ea nako [F (2,34) = 1.76; p = 0.19] kapa tšebelisano efe kapa efe lipakeng tsa nako le sehlopha sa ho noa [F (4,44) = 1.32; p = 0.28].

Download:  

• PPT

  Slide sa PowerPoint

• PNG

  setšoantšo se seholoanyane (27KB)

• TIFF

  setšoantšo sa pele (181KB)

Setšoantšo sa 5. Bontša litlhaselo tse phahameng haholo ho liphoofolo tse noang metsi kapa tsa ethanol.

Amplitudes (µM) (bolela ± SEM) ea litlhoro tse tharo tsa litšupiso pele ho kalafo e nang le amphetamine kapa letsoai lihlopheng tsa metsi le tsa ethanol. ** p <0.01, *** p <0.001.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g005

Ha ho na litlamorao tsa sehlopha sa ho nooa [F (1,18) = 0.04; p = 0.85], nako [F (2,36) = 1.96; p = 0.16] kapa nako le sehlopha sa joala [F (2,36) = 0.22; p = 0.81] li fumanoe bakeng sa boleng ba T80. Moelelo oa ± SEM reference T80 boleng e ne e le 20.5 ± 1.0 bakeng sa likhoto tse noang metsi, le 19.1 ± 1.3 bakeng sa likhoto tse noang ethanol.

Karabelo ea amphetamine ka har'a li-ethanol- le lihlopha tse noang metsi e bontšoa ho Setšoantšo sa 6. Bakeng sa lintlafatso, joalo ka ha ho bonts'itsoe ho Setšoantšo sa 6A, ho ne ho na le tšekamelo ea phello ea kalafo [F (1,19) = 3.01; p = 0.099] mme ho bile le phello e kholo ea nako [F (6,114) = 2.30; p = 0.04], empa ha ho na phello ea sehlopha sa ho nooa [F (1,19) = 0.39; p = 0.54] kapa litšebelisano life kapa life lipakeng tsa kalafo le sehlopha sa ho nooa [F (1,19) = 0.83; p = 0.37] kapa nako le kalafo [F (6,114) = 1.13; p = 0.35], nako le sehlopha sa ho nooa [F (6,114) = 0.44; p = 0.85] kapa nako, sehlopha sa kalafo le se nooang [F (6,114) = 0.27; p = 0.95].

Download:  

• PPT

  Slide sa PowerPoint

• PNG

  setšoantšo se seholoanyane (67KB)

• TIFF

  setšoantšo sa pele (305KB)

Setšoantšo sa 6. Karabo ea Amplople le T80 ha nako e ntse e feta liphoofolong tse noang metsi kapa ethanol.

Likarabo ha nako e ntse e feta kamora liente tsa subcutaneous (sc) tsa saline kapa amphetamine, joalo ka liperesente tsa boleng ba litšupiso (bolela ± SEM), bakeng sa A) amplitudes le B) litekanyetso tsa T80 ka metsing (W) - kapa lihlopha tse noang tsa ethanol (E) . * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 ha e bapisoa le taolo ea letsoai.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g006

Bakeng sa boleng ba T80, Setšoantšo sa 6B, ho bile le phello e kholo ea kalafo [F (1,19) = 17.35; p <0.001] le nako [F (6,114) = 2.42; p = 0.03], le tšebelisano pakeng tsa nako le kalafo [F (6,114) = 10.28; p <0.001]. Ho ne ho se na phello ea sehlopha sa ho noa [F (1,19) = 0.33; p = 0.57], kapa tšebelisano efe kapa efe lipakeng tsa kalafo le sehlopha sa ho noa [F (1,19) = 0.76; p = 0.40], sehlopha le sehlopha sa ho noa [F (6,114) = 1.66; p = 0.14], kapa nako, sehlopha sa kalafo le ho noa [F (6,114) = 1.75; p = 0.12].

Puisano

Litlamorao tse itšetlehileng ka lilemo tsa ho lokolloa ha dopamine le ho ts'oaroa ha lipatlisiso li ile tsa hlahlojoa tlas'a maemo a basal le ho arabela amphetamine lilemong tsa bocha le tsa morao tsa morao, hammoho le litšoelesa tsa batho ba baholo. Tšusumetso ea ho nooa ha joala nakong ea bocha e ile ea boela ea hlahlojoa mme ho latela tsebo ea rona, thuto ea pele e batlisisang tokollo le ho nka litheko tsa bo-'mampuli ba boithaopo ba boithaopo ka mokhoa oa chronoamperometric.

Liphello tse itšetlehileng ka lilemo

Phapang e itšetlehileng ka lilemo bakeng sa maqhubu a litšupiso e lumellana le thuto e fetileng e sebelisang voltammetry hammoho le tšusumetso ea motlakase, e bonts'ang hore likhoto tsa batho ba baholo li ntshitse dopamine ho feta ho hlohlelletsong ho feta likhoto tse nyane [12]. Nako ea nako ea bocha e sebelisitsoeng ke Stamford (1989) e ne e batla e le PND 30, empa ho tloha ka nako eo lithuto li bontšitse hore ho pota PND 40-45 ho na le litlhōrō lipakeng tsa dopamine tsa basal extracellular. [25]-[27] le dopamine receptor D₂ bongata ba tsona [28], ha maemo a tyrosine hydroxylase a le tlase ho feta bohlankana le boroetsaneng ba pele [29]. Boithuto ba hona joale bo kenyelelitse lintlha tsa nako nakong ea bocha, PND 28 le PND 42, e lekanang le bohlankana ba pele le morao [11]. Ho eketseha ha liphoofolo tsa bocha tse neng li le lilemong tsa bocha e ne e le lipakeng tsa maqhubu a lilemong tsa bocha le ho ba motho e moholo, ho bontša hore ntshetsopele ho tloha boseeng ho ba motho e moholo e kenyelletsa keketseho ea butle butle ea matla a ho lokolla dopamine ho arabela potasiamo chloride ho dorsal striatum. Sena se lumellana le litlaleho tsa maemo a eketsehang a dopamine ka har'a li-nucleus tse bokellaneng le ho ba motho e moholo ha li bapisoa le bocha. [30], [31]. Joalokaha ho boletsoe pejana, lithuto tse ling li boetse li bonts'a maemo a phahameng a PND 45 [25]-[27] mme ba ka boelanngwa le thuto ya hajoale ka litlaleho tsa litheko tse eketsehang tsa ho thunya ho pota PND e ts'oanang [32], [33]. Boithuto ba hajoale bo ne bo sa lekanye litekanyetso tsa basal extracellular mme ho ka etsahala hore tekanyo e ntseng e eketseha ea ho thunya e baka litekanyetso tse ntseng li eketseha tsa basal ntle le tlhoro efe kapa efe ho lokollotsoeng ha potasiamo. Ntle le moo, boithuto bo bong bo bonts'a maemo a extracellular a potasiamo ho bokaholimo ba methapo ea methapo ho nyoloha PND 42 [25] phapang pakeng tsa data ho tsoa dorsal striatum, ho tloha Stamford (1989) le thuto ea hona joale, e bonts'ang phapang ea tikoloho.

Mehato e nkeloang holimo, T80, ha ea ka ea senola liphapang lipakeng tsa lilemo thutong ea hajoale, athe Stamford (1989) e fumane hore sekhahla sa keketso se phahame ho litoeba tsa batho ba baholo. Sena se ka bakoa ke phapang ea mokhoa oa teng; T80 e kenyelletsa likarolo tsa mola le karoloana ea kotopo, athe Stamford o sebelisitse karolo e sephara ea kotopo [34]. Lits'enyehelo tse fihletsoeng thutong ena ke karolo ea leshome feela ea likhopolo tse bileng teng thutong e fetileng le V_{, max} ka hona ha ea lokela ho fihleloa. Ho sebelisa karolo e qalang ea khoro e phahameng ho sibolla sekhahla sa maemo a fihlang tlasa maemo ana ho tla hlahisa litefiso tse nyolohang feela tse ipapisitseng le maqhubu. [35]. T80 e ile ea khethoa hobane e boetse e nahanela karolo e katamelaneng ea curve, moo dopamine e tsepamisitsoeng tlase haholo mme e tebile ho feta ho dopamine uptake blockers [35], [36]. Ka tlholeho, T80 e boetse e its'etleha ho amplitude, empa joalo ka ha ho bonoa phuputsong ena, liphapang tsa amplitude ha li hlahise ho se tšoane ha T80, ho fana ka maikutlo a hore karo-karolelano ea ho hula e lokiselitsoe ho fihlela liphoofolo tse nyane. Ho ts'ehetsa liphumano tsa morao-rao ke lipatlisiso tse sebelisitseng boholo ba li-Microphalalization mme ha ua ka oa fumana phapang ho karolo ea ho tlosa, tekanyo e sa tobang ea litheko, ho li-ligus tsa li-rats ho PND 35, 45 le 60 [26].

Khokahano e kholo ea potasiamo ha e le motho e moholo e ka ba ka lebaka la letamo le leholoanyane la dopamine [12] 'me ho ka ameha lintlha tse' maloa, joalo ka ho fapana ha lilemo ho latela dopamine synthet ke tyrosine hydroxylase [29], [37], vesicular monoamine transporter-2 (VMAT-2) -e na le li-vesicles [38], le kinetics ea VMAT-2 [39], le prunor ea D2 hammoho [28] le ts'ebetso [40]. Lintlha tsena li ka thusa ho hlalosa ho eketseha ho matla ha bonoa kamora amphetamine ho liphoofolo tsa pele. Hape, data ea hajoale e lumellana le data e bonts'ang keketseho e kholo ea tokollo ea dopamine ho bacha ha e bapisoa le liphoofolo tse kholo ho arabela nomifensine [12] e bonts'a hore likhoto tsa pele tsa bohlankana li na le letangoana le leholo la ho boloka, le ka lokolloang ha o hlohlelletsoa ke lintho tse ling. Sena se ts'ehetsoa hape ke data e bonts'ang keketseho e kholo ea dopamine e tsoakiloeng ka ntle ho dopamine kamora amphetamine ho liphoofolo tsa bocha [22]. Leha ho le joalo, ho na le lithuto tsa microdialysis tse bontšang maemo a tlase a tsoang ho dopamine kamora amphetamine ho bacha ba bapisoang le batho ba baholo. [30], [37], e hatisang hape hore monyetla oa keketseho ea tokollo e susumetsoang ha e bolele hore keketseho ea maemo a kantle ho naha le hore mekhoa e fapaneng e ka tlatsetsa tlhaiso-leseling.

Ha ho litlamorao tse tlisoang ke lilemo tsa T80 kamora hore amphetamine e fumanoe, e bonts'ang hore amphetamine e fana ka litlamorao tse ts'oanang le ho ts'oaroa ha dopamine ka mehla eohle. Sena se ts'ehetsoa hape ke liphetho tsa Stamford (1989), tse sa bonts'eng phapang ea boemo ba ntlafatso ka mor'a nomifensine lipakeng tsa lihlopha tsa lilemo. Ho boetse ho na le lithuto tse fanang ka maikutlo a hore phapang e amanang le lilemo ka sebopeho sa dopamine transporter le tšebetso li amana le sebaka se tlamang koae ka koae, empa eseng sebaka sa marang-rang se kopanyang amphetamine. [22] e ka bonts'a hore litlamorao tse tlisoang ke lilemo tsa amphetamine mabapi le ho ts'oaroa ha li eo. Leha ho le joalo, ho ne ho na le mokhoa o lebisang tšebelisanong lipakeng tsa nako, lilemo le kalafo, ho fana ka maikutlo a hore ba arabile ka tsela e fapaneng ha nako e ntse e feta ho amphetamine ho latela lilemo. Boithuto bo tsoelang pele ba ho etsa lipatlisiso ka ho sebelisa li-dopamine tsa kantle ho naha le bona bo ka thusa ho arola phaello e itšetlehileng ka matla ho tloha mosebetsing [41]-[43]. Boithuto ho likhoto tse tsohileng le tsona e ka ba tsa bohlokoa, hobane boithuto ba hajoale bo etsoa liphoofolong tse sa sebetseng. Anesthesia e sebelisitsoeng e ne e le barbiturate thiobutabarbital (Inactin), sebopeho se matla sa allrateic of gamma-aminobutyric acid (GABA) Receptors, e hlahisang ho loants'oa lithethefatsi ka nako e telele le ho tsitsitseng litsing [44]. GABA e ka ba le litlamorao tse fapaneng ho latela lilemo le nalane ea ho noha joala [45] ka hona, anesthesia e ka sebelisana le botsofe kapa kalafo mme ea hlahisa litlamorao tse nyarosang. Leha ho le joalo, pentobarbital, barbiturate e 'ngoe, e bontšitsoe hore e na le tšusumetso e fokolang maemong a dopamine ho striatum [46]. Ntle le moo, thutong ea hona joale, tokollo e entsoe ka tšebeliso ea potasiamo chloride mme ha ea ka ea itšetleha ka liketsahalo tse itlhahelang feela, tse lokelang ho fokotsa bohlokoa ba molumo oa lentsoe la GABAergic ka tokollo. Ha e le khopolo ea dopamine ho na le litlaleho tsa hore li-barbiturate li ka ama ho hloekisoa ha dopamine ka kotloloho [47], empa hore na ho ka ba le tšebelisano le lilemo kapa kalafo ha ho hlake.

Tšebeliso e Mpe ea Joala ea Bacha

Ho itlopa joala ba bacha ka ho ithaopa ka libeke tse tšeletseng ho felletse ka litekanyetso tse tlase tsa poelanyo ha li bapisoa le taolo ea ho noa metsi. Maemo a malelele a ne a tšoana le a bonoang litlalehong tsa pele tsa bocha. Kaha litlamorao li ile tsa bonoa ho amplople eseng ho nka nako, hoa utloahala hore joala bo ama lintlha tse laolang letamo la dopamine ho fapana le transporter ea dopamine mme ho na le data e tšehetsang ho ts'oaroa ho sa foleng ka mor'a joala ba lilemong tsa bocha. [14]. Ho boetse ho na le data ea microsalysis e bonts'ang litekanyetso tse eketsehileng tsa dopamine kamora ho pepesetsoa bongoana ka lijaneng tse kenelletseng tsa joala [14], [27], [48], 'me sena se hanyetsana le liphetho tsa hajoale tsa dopamine e theotsoeng e ka fokotsoang. Joalokaha ho boletsoe pejana, litekanyetso tse ntseng li eketseha tsa ho thunya e ka ba mokhoa oa ho hokahanya data ea Microbalal le data ea hajoale, empa ha ho na lithuto tse ts'ehetsang sena. Ntle le moo, ho na le lithuto tse bontšang hore mokhoa oa ho pepesetsoa joala, ke hore, ka boithaopo kapa ka ho qobelloa, o ka ba le litlamorao tse fapaneng ho neurobiology [49].

Ha re phekoloa ka amphetamine, ho ne ho se na phapang e kholo lipakeng tsa lihlopha tsa joala-le joala ba metsi ho amplitudes kapa T80. Leha ho le joalo, ho bile le ts'ekamelo e lebisang pheletsong ho lipolao, ka lebaka la keketseho e bonts'itsoeng ke sehlopha se noang joala. Ho boetse ho na le phapang e ngata karabong ea amphetamine sehlopheng sa batho ba noang joala, e ka bang ka lebaka la phapang ea joala, leha phapang ena e sa tsamaellane le karabo (ya data e sa bontsitsoeng). Hona ho supa tlamo le phuputso ena, e leng, hore litekanyetso tsa joala ba mali li ne li sa lekanyetsoe. Boithuto bona bo ne bo ipapisitse le phihlello e sa senyehang bakeng sa 24 h le hore maemo a joala a mali a lekantsoeng phihlello e ka be e lekanyelitsoe mme khatello ea ts'ebetso ea sampole ea mali e ka be e le kotsing ea ho senya mekhoa ea liphoofolo. Kahoo, khokahano lipakeng tsa karabelo le bongata ba joala ba mali e ke ke ea qheleloa ka thoko. Leha ho le joalo, lintlha tsa ho kenella tse hlahisitsoeng thutong ena li ts'oana le lithuto tse ling, li bonts'a litlamorao tsa joala, ho sebelisa likhoto tsa Wistar ka lilemo tse ts'oanang kapa lits'oants'o tsa ho ja[50]-[52]. Sena se fana ka maikutlo a hore ha se batho feela ba tloaelo ea ho ja haholo, empa hape le ba noang ka tekanyo e tlase ho karolo e akaretsang ea batho ka kakaretso, liphetoho tsa likotsi ho neurobiology kamora ho itlopa joala ka boithaopo ba lilemong tsa bocha.

Ha ho na phapang ea ho nka nako ka mor'a hore amphetamine a supe hore joala ba bongoana ha bo na ts'ebetso mosebetsing oa ho fetisetsa dopamine ho arabela amphetamine, empa o tla boela a rue molemo ka ho etsa lipatlisiso ka ts'ebeliso ea dopamine ea kantle ho tsoalo. [41]-[43].

Ntle le moo, ho hlahisitsoe lintlha tse peli tse khahlisang. Taba ea mantlha, li-amplopes tsa phapanyetsano ka mora ts'ebeliso ea joala li ts'oana le tse bonoang ho liphoofolo qalong ea nako ea ho noella joala, e leng PND 28. Taba ea bobeli, boholo ba keketseho ea maqhutsu kamora amphetamine liphoofolong tse noang joala bo ts'oana le likhoto tsa lilemong tsa bocha, e leng PND 42. Hore na liphumano tsena li amana le nts'etsopele ea letamo le khonehang le letamo la polokelo ea dopamine ka har'a methapo ea kutlo, re lokela ho hlakisoa. Boithuto ba hajoale bo ne bo sa kenyeletse sehlopha sa likhoto tsa batho ba baholo ba noang joala e le hore liqeto mabapi le monyetla oa litlamorao tse amanang le lilemo li se ke tsa ba teng. Leha ho le joalo, matšoao a liphetho tse amanang le lilemo tse itseng a ka fumanoa likhethong lipakeng tsa lithuto tsa bate tse butsoitseng tsa bongoaneng tse bonts'ang ts'oaetso ea dopamine e sa sebetseng. [14] le liphuputso tsa likhoto le litšoene tse pepesitsoeng joala tse bontšang joala tse bontšang joala bo bongata, empa ha ho na litlamorao ho tlatsitsoeng hoa dopamine. [53], [54]. Bakeng sa lithuto tsa nako e tlang, ka hona e tla ba ntho e khahlisang haholo ho etsa lipatlisiso ka ho pepesetsoa hoa joala le mekhoa e hlahisang phello ea eona lilemong tse fapaneng. Patlisiso e tsoelang pele mabapi le lintlha tse kang tyrosine hydroxylase, dopamine receptor density le tšebetso, le transporter ea vesicular monoamine e ka thusa ho hlakisa leseli mabapi le litlamorao tsa joala tse ikhethang bakeng sa letamo le khonehang le letamo la polokelo la dopamine. Ho tsebo ea rona, lintlha tsena ha lia ka tsa batlisisoa ka mor'a joala ba bongoaneng.

fihlela qeto e

Lintlha li bonts'a keketseho ea butle-butle ea dopamine e tsoakiloeng le lilemo, e ts'ehetsang lithuto tsa pejana tse khothaletsang hore letamo la dopamine le khonehang le eketseha ka lilemo. Ho fapana le moo, ho fokotseha butle-butle ha batho ba bangata ba tsofetse ka lilemo tse ngata ho ile ha bonoa karabelong ea amphetamine, ho tšehetsa letamo le leholo la polokelo la dopamine liphoofolong, ho li etsa hore li amehe haholo ka litlhare tse tlosang dopamine. Ho ja joala ba lilemong tsa bocha ho felletse ka ho pharalla ho feta taolong ea ho nooa ha metsi.

lumela hore baa fokola

Bangoli ba lakatsa ho leboha Mme Marita Berg bakeng sa thuso ea tekheniki le Dr. Martin Lundblad bakeng sa lipuisano tsa mokhoa.

Menehelo ea Mongoli

Rea tseba le ho hlophisa liteko: SP IN. O entse liteko: SP. Ho hlahlobisisa data: SP IN. Ngola pampiri: SP.