DeltaFosB Induction katika Subtypes Striatal Medium Spiny Subtypes katika Jibu la Chronic Pharmacological, Kihisia, na Optogenetic Stimuli (2013)

J Neurosci. 2013 Nov 20; 33 (47):18381-95. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013.

Lobo MK, Zaman S, Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, Nugent A, Finkel E, Chaudhury D, Chandra R, Riberio E, Rabkin J, Mouzon E, Cachope R, JF JF, Han MH, Dietz DM, Kujitegemea DW, Aliumia YL, Vialou V, Nestler EJ.

chanzo

Idara ya Anatomy na Neurobiology, Chuo Kikuu cha Maryland Shule ya Tiba, Baltimore, Maryland 21201, Fishberg Idara ya Neuroscience na Fryman Brain Institute, Icahn School of Medical at Mount Sinai, New York, New York 10029, Departments of Psychiatry and of Chemacology and Systems Therapeutics, Icahn Shule ya Tiba huko Mount Sinai, New York, New York 10029, Idara ya Saikolojia, Chuo Kikuu cha Texas Kusini Magharibi Kituo cha Matibabu, Dallas, Texas 75390, Idara ya Pharmacology na Toxicology na Taasisi ya Utafiti juu ya Madawa, Chuo Kikuu cha Jimbo la New York huko Buffalo, New York, New York 14214, na Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, U952, Kituo cha kitaifa cha kitaalam cha Sayansi, Kituo cha Mchanganyiko cha Hoteli za RecNche 7224, UPMC, Paris, 75005, Ufaransa.

abstract

Sababu ya uandishi, ΔFosB, inashawishiwa kwa nguvu na inazidi kusukuma moyo na motisha kadhaa sugu, kama vile madawa ya kulevya, dawa za antipsychotic, tuzo za asili, na mafadhaiko. Walakini, tafiti chache sana zimechunguza kiwango cha uingizwaji wa ΔFosB katika subtypes mbili za striatal kati spiny neuron (MSN). Tunafanya matumizi ya mwandishi wa umeme wa fluorescent BAC transgenic panya kukagua ujanibishaji wa ΔFosB katika dopamine receptor 1 (D1) utajiri na dopamine receptor 2 (D2) utajiri wa MSNs katika stralatum ya cyral, nucleus accumbens (NAc) kigingi na msingi. ) baada ya kudhihirisha sugu kwa dawa kadhaa za dhuluma ikiwa ni pamoja na cocaine, ethanol, Δ (9) -tetrahydrocannabinol, na opiates; dawa ya antipsychotic, haloperidol; ujana wa ujana; sucrose kunywa; kizuizi cha kalori; serotonin kuchagua kuchagua kuzuia inhibitor antidepressant, fluoxetine; na dhiki ya kijamii iliyoshindikana. Matokeo yetu yanaonyesha kuwa mfiduo sugu kwa vichocheo vingi vya kuchochea ΔFosB katika muundo wa kuchagua wa MSN-subtype katika mikoa yote mitatu ya kitabia. Kuchunguza uingilishaji wa upatanishwaji wa mzunguko wa ΔFosB katika striatum, tunatumia optogenetics kuongeza shughuli katika mikoa ya ubongo ya kiungo inayotuma pembejeo za synaptic kwa NAc; Mikoa hii ni pamoja na eneo la utengamano wa ndani na maeneo kadhaa ya ushirika ya glutamatergic: Cortex ya matibabu ya asili, amygdala, na hippocampus ya ventral. Hali hizi za optogenetic husababisha muundo tofauti sana wa uingizwaji wa ΔFosB katika subtypes za MSN kwenye msingi wa NAc na ganda. Pamoja, matokeo haya yanaanzisha mifumo ya kuchagua ya ΔFosB katika shughuli ndogo za MSN kukabiliana na uchochezi sugu na kutoa uelewa wa riwaya katika mifumo ya mzunguko wa uingiliaji wa ΔFosB katika striatum.

kuanzishwa

Shawishi ya mara kwa mara, pamoja na dawa za udhalilishaji, dawa za antipsychotic, mkazo, na thawabu asili, husababisha mkusanyiko thabiti wa ΔFosB, bidhaa iliyopunguzwa ya FosB jeni, katika striatum (kwa mfano, Hope na al., 1994; Hiroi na Graybiel, 1996; Hiroi et al., 1997; Moratalla et al., 1996; Perrotti et al., 2004, 2008; Muller na Unterwald, 2005; McDaid et al., 2006; Teegarden na Bale, 2007; Wallace et al., 2008; Solinas et al., 2009; Vialou et al., 2010, 2011; Kaplan et al., 2011). Mkusanyiko huu husababisha udhibiti wa maini ya jeni nyingi na ΔFosB katika mkoa huu wa ubongo (McClung na Nestler, 2003; Renthal et al., 2008, 2009; Vialou et al., 2010; Robison na Nestler, 2011). Striatum imeundwa hasa (∼95%) ya GABAergic makadirio ya kati ya sponi neurons (MSNs), ambayo imegawanywa katika subtypes mbili kulingana na utajiri wao wa jeni nyingi, pamoja na recopor 1 (D1) au dopamine receptor 2 (D2) (Gerfen, 1992; Graybiel, 2000; Lobo et al., 2006; Heiman et al., 2008) na kwa matokeo yao tofauti ya muundo tofauti wa subcortical (Albin et al., 1989; Gerfen, 1992; Kalivas et al., 1993; Graybiel, 2000; Nicola, 2007; Smith et al., 2013). Hivi majuzi, kumekuwa na ripoti nyingi zinazoonyesha majukumu tofauti ya kimisuli na ya kazi ya subtypes hizi za MSN katika hali ya hewa ya ndani (nucleus accumbens [NAc]) na dorsal striatum (dStr) katika kupatanisha tabia ya motisha na motor (Lobo na Nestler, 2011; Gittis na Kreitzer, 2012).

Uchunguzi wa awali umeonyesha kuwa ΔFosB imeandaliwa kimsingi katika D1-MSN na matibabu sugu na cocaine au gurudumu sugu, fomu ya thawabu ya asili (Moratalla et al., 1996; Werme et al., 2002; Lee et al., 2006), ilhali mafadhaiko sugu ya kujizuia husababisha ΔFosB katika vitongoji vyote vya MSNPerrotti et al., 2004). Zaidi ya hayo, ushahidi wa kulazimisha kutoka kwa mistari maalum ya kiini cha seli au uhamishaji wa jeni-virusi huonyesha kuwa uingizaji wa ΔFosB katika D1-MSNs huongeza tabia ya kitabia na ya kimuundo kwa cocaine, majibu ya tabia kwa morphine, kukimbia gurudumu, thawabu ya chakula, na uvumilivu kwa kushindwa sugu kwa kijamii mkazo, wakati ΔFosB induction katika D2-MSNs inadhibiti vibaya majibu ya tabia kwa kukimbia gurudumu (Kelz et al., 1999; Werme et al., 2002; Colby et al., 2003; Olausson et al., 2006; Zachariou et al., 2006; Vialou et al., 2010; Grueter et al., 2013; Robison et al., 2013).

Kwa kuzingatia jukumu muhimu kwa ΔFosB katika kudhibiti uhamasishaji huu wa muda mrefu, na athari dhahiri katika D1-MSNs dhidi ya D2-MSNs, tunafanya uchunguzi kamili juu ya mifumo ya uingizwaji wa ΔFosB katika subtypes kadhaa za sugu, pamoja na mfiduo sugu wa dawa. unyanyasaji, matibabu sugu na dawa ya antipsychotic, mfiduo sugu kwa mabadiliko ya mazingira na hamu ya chakula, mkazo wa kutofaulu kwa jamii, na matibabu sugu na antidepressant. Kuelewa mifumo ya mzunguko kudhibiti uingiliaji wa ΔFosB kwa kutekelezwa na maeneo kadhaa ya ubongo wa mshirika, tunatumia teknolojia za optogenetic kuamsha kurudia miili ya seli katika maeneo ya ubongo wa dopaminergic au glutamatergic na kuchunguza uingilizi wa ΔFosB katika subtypes za MSN. Matokeo yetu hutoa uelewa wa riwaya juu ya kuletwa kwa ΔFosB katika D1-MSNs na D2-MSNs na uchochezi sugu na, kwa mara ya kwanza, kuonyesha induction-iliyoingiliana ya ΔFosB katika striatum na ndani ya subtypes ya kuchagua ya MSN.

Vifaa na mbinu

Wanyama.

D1-GFP or D2-GFP panya za hemizygote (Gong et al., 2003) kwenye msingi wa C57BL / 6 ilitunzwa kwenye mzunguko mweusi wa 12 h na ad libitum chakula na maji. Uchunguzi wote ulifanywa kwa mujibu wa miongozo iliyowekwa na Kamati za Utunzaji wa Wanyama na Kamati za Matumizi katika Chuo Kikuu cha Matibabu cha Shule ya Tiba ya Maryland na Shule ya Tiba ya Icahn huko Mount Sinai. Panya za kiume (wiki 8 wiki) zilitumiwa kwa majaribio yote. Panya zote zilikamilishwa mafuta, na akili zilikusanywa wakati wa mchana wa mzunguko wa taa. Hemizygote D1-GFP na D2-GFP panya kwenye C57BL / 6 au FVB / N imeonyeshwa kuwa sawa na panya wa aina ya porini kwa heshima na tabia, fizikia ya D1-MSNs na D2-MSNs, na maendeleo ya MSNs (Lobo et al., 2006; Chan et al., 2012; Nelson et al., 2012). Kwa kuongezea, mifumo ya jumla ya uingilishaji wa ΔFosB inayoonekana katika utafiti huu ni kulinganishwa na ile inayoonekana katika wanyama wa aina ya porini na zana zisizo za kuchagua kiini-kiini (kwa mfano, Perrotti et al., 2004, 2008).

Matibabu ya Cocaine.

D1-GFP (n = 4 kwa matibabu) na D2-GFP (n = 4 kwa matibabu) panya walipokea sindano za ndani za 7 za kila siku za cocaine (20 mg / kg) au 0.9% saline kwenye ngome ya nyumbani. Kwa sindano za 1 au 3 d cocaine (20 mg / kg), panya zilipokea 6 au 4 d ya sindano za salini za 0.9% ikifuatiwa na 1 au 3 d ya sindano za cocaine, mtawaliwa. Panya zote zilitumiwa 24 h baada ya sindano ya mwisho. Dozi ya cocaine ilichaguliwa kulingana na masomo ya zamani (kwa mfano, Maze et al., 2010).

Matibabu ya haloperidol.

D1-GFP (n = 3 au 4 kwa matibabu) na D2-GFP (n = 4 kwa matibabu) panya walipokea haloperidol (2 mg / kg) katika maji ya kunywa, pH 6.0 (Narayan et al., 2007), au maji ya kunywa ya kawaida, pH 6.0, kwa wiki za 3 (21 d). Panya walitapeliwa siku 22.

Matibabu ya morphine.

D2-GFP panya (n = 4 au 5 kwa matibabu) zilitunzwa kwa kifupi na isoflurane na zilipokea implanti za kuingiza morphine (25 mg) au phalets za sham siku ya 1 na siku 3 kama ilivyoelezwa hapo awali (Mazei-Robison et al., 2011). Panya walitapeliwa siku 5.

Matibabu ya ethanoli.

D2-GFP panya (n = 4 au 5 kwa matibabu) ilifunuliwa na 10% ethanol (EtOH), kipimo ambacho C57BL / 6 imeonyeshwa kunywa (Yoneyama et al., 2008). Panya walipewa mtihani wa kuchagua chupa mbili kwa 10% EtOH (chupa A) na maji (chupa B), wakati D2-GFP udhibiti ulipokea maji katika chupa zote mbili (chupa A na B) ya 10 d. Panya zote zinazopokea chupa za EtOH zilionyesha upendeleo kwa EtOH kama ilivyohesabiwa na (chupa ya 100 × Kiasi / [chupa Kiasi cha chupa cha B]]. Panya zilizopokea 10% EtOH chupa zilizotumiwa sana EtOH ikilinganishwa na maji, wakati panya zinazopokea maji kwenye chupa zote mbili zilionyesha hakuna tofauti katika matumizi ya kioevu. Jioni ya siku 10, panya wote walipewa maji ya kawaida ya kunywa na walikamilishwa siku ya 11.

Δ (9) -tetrahydrocannabinol (Δ (9) -THC) matibabu.

D2-GFP (n = 3 kwa matibabu) panya walipokea sindano za ndani za Δ (9) -THC (10 mg / kg) au gari (0.9% saline na 0.3% Kati) mara mbili kwa siku kwa 7 d (Perrotti et al., 2008). Panya zilitumiwa 24 h baada ya sindano ya mwisho.

Utawala wa Cocaine.

D2-GFP panya (n = 4 au 5 kwa matibabu) hapo awali ilipewa mafunzo ya kusukuma vyombo vya habari vya 20 mg sucrose petets ya urekebishaji uliowekwa 1 (FR1) hadi kiashiria cha kupatikana cha pellets za 30 zilizotumiwa kwa siku za mtihani wa 3 mfululizoLarson et al., 2010). Panya ambazo zimejifunza kwa vyombo vya habari vilivyochorwa viliingizwa kwa nguvu na catheter ya ndani ya juria ili kuruhusu utawala wa ndani wa kokaini. Wiki moja baada ya upasuaji, panya zilianzishwa kwa harakati ya kujitawala wakati wa vikao vya kila siku vya 2 h kwenye ratiba ya uimarishaji ya FR1. Vifaa vya kujisimamia (Media Associates) viliandaliwa kwa kuwa majibu kwenye lever inayofanya kazi yalisababisha utoaji (zaidi ya 2.5 s) ya kokeini (0.5 mg / kg / kg / infusion kwa vyombo vya habari vya lever sahihi), wakati majibu juu ya lever isiyotumika hakuwa na matokeo yaliyopangwa. Cocaine nzuri inayojiendesha kwenye ratiba ya FR1 katika vipindi vya kila siku vya 2 h, 5 d kwa wiki, kwa wiki za 3. D2-GFP panya zilizopokea sindano za saline za 0.9% kwa muda sawa zilitumika kama udhibiti. Panya zilitumiwa 24 h baada ya mwisho wa kahawa au utawala wa saline.

Heroin kujitawala.

Kabla ya kujitawala kwa heroin, D2-GFP panya (n = 4 kwa kila matibabu) walipewa mafunzo ya kupeana vyombo vya habari vya chokoleti za chokoleti (BioServ, Pellets Dustless Precision) katika vipindi saba vya 1 h kila siku. Panya ambazo zimejifunza kwa vyombo vya habari vilivyochorwa viliingizwa kwa nguvu na catheter ya ndani ya jugular ili kuruhusu utawala wa ndani wa heroin. Wiki moja baada ya upasuaji, panya zilitambulishwa kwa dhana ya kujitawala wakati wa vikao vya kila siku vya 3 h kwenye ratiba ya uimarishaji ya FR1 kulingana na taratibu za kawaida (Navarro et al., 2001). Vifaa vya kujisimamia (Media Associates) viliandaliwa kwa kuwa majibu kwenye lever inayofanya kazi yalisababisha utoaji (zaidi ya 5 s) ya heroin (30 /g / kg / sindano; Mpango wa Ugavi wa Dawa za NIDA), wakati majibu ya kutofanya kazi lever hakuwa na matokeo yaliyopangwa. Wanyama walipewa ufikiaji wa utaratibu wa kujisimamia wa heroin wa 14 d. D2-GFP panya zilizopokea sindano za saline za 0.9% kwa muda sawa zilitumika kama udhibiti. Panya walitumiwa 24 h baada ya mwisho wa heroin au utawala wa saline.

Uboreshaji wa mazingira wa vijana.

D2-GFP (n = 4 kwa kila kikundi) panya walilazimishwa kwa mazingira bora au hali ya kawaida ya makazi katika siku za baada ya 21 (P21) kwa kutumia paradigm iliyobadilishwa kutoka kwa panya (Green na al., 2010). Mazingira yenye utajiri yalikuwa na ngome kubwa ya hamster iliyo na matanda ya kulisha-o-cob (Andersons Maabara ya maabara) iliyojazwa na vifaa vya kujumlisha ambavyo ni pamoja na vichungi vya panya, dome na magurudumu, mipira ya kutambaa, vibanda (Huduma ya Bio), na vitu vingine vya kuchezea. Panya alibaki katika hali ya makazi kwa wiki ya 4 hadi P50 na kisha kukamilishwa.

Toa matibabu.

D2-GFP panya (n = 4 au 5 kwa matibabu) walipewa mtihani wa kuchagua chupa mbili kwa suti ya 10% sawa na utafiti uliopita (Wallace et al., 2008). Panya walipewa 10% sucrose (chupa A) na maji (chupa B), wakati D2-GFP udhibiti ulipokea maji katika chupa zote mbili za 10 d. Panya zote zinazopokea chupa za sucrose zilionyesha upendeleo kwa sucrose kama ilivyohesabiwa na (chupa ya 100 × Kiasi / chupa Kiasi + chupa B kiasi). Panya zilizopokea chupa ya suti ya 10% inayotumiwa kwa urahisi zaidi ikilinganishwa na maji, wakati panya zinazopokea maji kwenye chupa zote mbili zilionyesha hakuna tofauti katika matumizi ya kioevu. Jioni ya siku 10, panya wote walipewa maji ya kawaida ya kunywa na walikamilishwa siku ya 11.

Kizuizi cha kalori.

D2-GFP panya (n = 4 kwa aina ya genotype) walipitia itifaki ya kuzuia calorie, ambayo walipokea 60% ya ad libitum kalori kila siku (Vialou et al., 2011) kwa 10 d. D2-GFP kudhibiti panya kupatikana ufikiaji kamili wa chow. Jioni ya siku 10, panya wote walipata ufikiaji kamili wa chow na walipishwa mafuta kwa siku 11.

Dhiki ya kijamii kushindwa.

D2-GFP panya (n = 4 au 5 kwa kila kikundi) ilifadhaika kwa dhiki ya kushindwa kwa jamii kama ilivyoelezewa hapo awali (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007). Panya waliwekwa wazi kwa wafugaji wasaafu wa CD1 waliostaafu kwa dakika ya 5 kwenye ngome kubwa ya hamster. Panya waliwekwa kwa 24 h kwenye ngome ile ile upande wa pili wa mgawanyaji aliyepakwa mafuta ili kudumisha mawasiliano ya hisia. Panya wa siku iliyofuata waliwekwa panya mpya ya CD1 chini ya hali sawa na makazi. Hii ilirudiwa kwa 10 d na CD1 mpya kila siku. Panya za kudhibiti ziliwekwa chini ya hali sawa bila dhiki ya kushindwa. Panya walijaribiwa kwa mwingiliano wa kijamii siku ya 11. Panya walijaribiwa kwanza kwa muda uliotumika kuingiliana na chumba cha riwaya kwenye sanduku la uwanja bila panya lingine (hakuna lengo) na kisha kupimwa baadaye kwa muda uliotumika kuingiliana na panya ya riwaya ya CD1 (lengo) ambayo ilikuwa nyuma ya chumba (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007). Panya waligawanywa katika vikundi vinavyohusika au vilivyo na nguvu kulingana na vigezo vilivyoelezewa hapo awali (Krishnan et al., 2007). Hii ni pamoja na wakati wote uliotumika na panya ya riwaya na uingiliano wa mwingiliano: (wakati uliotumika na lengo / wakati uliotumika bila lengo) x 100. Hatua hii imeonyeshwa kutambua kwa kweli kutambua vikundi vinavyohusika na vilivyo na nguvu na inaendana sana na tofauti zingine za tabia (Krishnan et al., 2007). Panya zote zilitekelezwa 24 h baada ya jaribio la mwingiliano wa kijamii (48 h baada ya kipindi cha mwisho cha kushindwa kwa kijamii).

Matibabu ya Fluoxetine.

D2-GFP panya (n = 3 au 4 kwa kila kikundi) walipokea sindano za ndani za 14 za kila siku za fluoxetine (20 mg / kg) au gari (0.9% saline na 10% cyclodextrin) (Berton et al., 2006). Panya zilitumiwa 24 h baada ya sindano ya mwisho.

Upasuaji Stereotaxic.

D2-GFP panya walikuwa anesthetized na ketamine (100 mg / kg) / xylazine (10 mg / kg), kuwekwa katika chombo kidogo cha mifereji ya wanyama, na uso wa fuvu lao wazi. Sindano za sindano thelathini na tatu zilitumika kupenyeza 0.5-1 μl, kwa kiwango cha 0.1 μl kwa dakika, ya virusi mara mbili ndani ya eneo la sehemu ya vizio (VPS), medial pre mbeleal cortex (mPFC), amygdala, au hralocampus ya ventral. vHippo). Virusi vya AAV [adeno-vinavyohusishwa] -hSyn-ChR2 [channelrhodopsin 2] -EYFP au AAV-hSyn-EYFP iliingizwa kwenye VTA ya D2-GFP panya (n = 5 kwa kila kikundi) katika kuratibu za stereota sumu (anterior-posterior, −3.3 mm; lateral-medial, 0.5 mm; dorsal-ventral, −4.4 mm, 0 ° angle). Hii ilifuatiwa na cannula ya pande mbili (26-chachi), na urefu wa 3.9 mm, kuingizwa juu ya VTA (anterior-posterior, −3.3 mm; lateral-medial, 0.5 mm; dorsal-ventral, −3.7 mm) (Koo et al., 2012; Chaudhury et al., 2013). AAV-CaMKII-ChR2-mCherry au AAV-CaMKII-mCherry iliingizwa kwenye mPFC (n = 4 au 5 kwa kila kikundi), amygdala (n = 3 au 4 kwa kila kikundi), au vHippo (n = 3 au 4 kwa kila kikundi) cha D2-GFP panya ikifuatiwa na kuingizwa kwa nyuzi za 105 μm zinazoingiliana sugu za macho (Sparta et al., 2011). Coordinates walikuwa kama ifuatavyo: mPFC (infralimbic ililenga, lakini tuliona spillover ya virusi kwa mikoa ya prelimbic: anterior-posterior, 1.7 mm; lateral-medial, 0.75 mm; dorsal-ventral, −2.5 mm, angle ya 15 °) na nyuzi za macho (dorsal-ventral, −2.1 mm); amygdala (basolateral amygdala ililenga, lakini tuliona spillover ya virusi kwenye kiini cha kati cha amygdala; anterior-posterior, −1.6 mm; lateral-medial, 3.1 mm; dorsal-ventral, −4.9 mm, angle ya 0 °) na macho nyuzi (dorsal-ventral, −4.9 mm); vHippo (subralulum ya ventral ililenga, lakini tuliona spillover ya virusi kwenye mikoa mingine ya hippocampus ya ventral; anterior-posterior, −3.9 mm; lateral-medial, 3.0 mm; dorsal-ventral, −5.0 mm, angle ya 0 °) na nyuzi za macho (dorsal-ventral, −4.6 mm).

Hali ya optogenetic.

kwa katika vivo Udhibiti wa macho ya uporaji wa neva wa VTA, kamba ya kizio cha msingi cha 200 μm ilibadilishwa ili kushikamana na cannula. Wakati nyuzi zilihifadhiwa kwenye cannula, ncha ya nyuzi iliongezwa ∼0.5 mm zaidi ya cannula (Lobo et al., 2010; Chaudhury et al., 2013). Kwa katika vivo Udhibiti wa macho ya mPFC, amygdala, na vHippo kurusha kwa neuronal, kamba ya mgawanyiko wa 62.5 splitm iliunganishwa na nyuzi za mlima wa kichwa (Sparta et al., 2011). Nyuzi za Optic ziliunganishwa kupitia adapta ya FC / PC kwa diode ya bluu ya 473 nm bluu laser (Crystal Lasers, BCL-473-050-M), na pulses rahisi zilitolewa kupitia kichocheo (Agilent, 33220A). Kwa VTA, taa nyepesi ya bluu (473 nm) phasic, 20 Hz ya 40 ms (Chaudhury et al., 2013), zilitolewa kwa dakika 10 kwa siku zaidi ya 5 d. Kwa mPFC, amygdala, na vHippo, taa za bluu (473 nm), 20 Hz kwa 30 s, zilifikishwa kwa 10 min kwa siku kwa 5 d. Uwasilishaji wa mwangaza ulitokea kwenye ngome ya nyumbani, na panya zote zilitunukiwa 24 h baada ya kusisimua kwa mwisho.

In vitro patch-clamp electrophysiology.

Rekodi za seli nzima zilipatikana kutoka kwa neuroni za dopamine za neurons au mPFC glutamatergic neurons kwenye vipande vya ubongo vya papo hapo kutoka kwa panya walioingiwa na virusi vilivyoainishwa hapo juu. Rekodi za kipande zilifanywa kwenye panya bila katika vivo kusisimua, lakini na 1 d ya kuchochea kwa kipande (1 d) au 4 d ya katika vivo kusisimua na 1 d ya kuchochea kwa kipande (5 d). Ili kupunguza mafadhaiko na kupata vipande vya afya, panya zilifutwa kazi mara tu baada ya kuletwa katika eneo la elektroni na kutekelezwa kwa 40-60 s na ACSF ya barafu, ambayo ilikuwa na 128 mm NaCl, 3 mm KCl, 1.25 mm NaH2PO4, 10 mm d-glucose, 24 mm NaHCO3, 2 mm CaCl2, na 2 mm MgCl2 (oksijeni na 95% O2 na 5% CO2, pH 7.4, 295-305 mOsm). Vipande vya ubongo vya papo hapo vyenye mPFC au VTA vilikatwa kwa kutumia darubini (Ted Pella) kwenye sucrose-aCSF, ambayo ilichukuliwa kwa kuchukua nafasi kamili ya NaCl na suti ya 254 mm na iliyojaa 95% O2 na 5% CO2. Vipande vilihifadhiwa katika chumba cha kushikilia na aCSF kwa 1 h kwa 37 ° C. Mabomba ya kiraka (3-5 MΩ), kwa seli ya sasa, imejawa na suluhisho la ndani lililo na yafuatayo: 115 mm potasiamu gluconate, 20 mm KCl, 1.5 mm MgCl2, 10 mm phosphocreatine, 10 mm HEPES, 2 mm magnesium ATP, na 0.5 mm GTP (pH 7.2, 285 mOsm). Rekodi za seli nzima zilifanywa kwa kutumia aCSF kwa 34 ° C (kiwango cha mtiririko = 2.5 ml / min). Mafunzo ya taa nyepesi (20 Hz ya mPFC au phasic 20 Hz, 40 ms kwa VTA) yalitolewa na kichocheo kilichounganika kupitia adapta ya FC / PC kwa 473 nm bluu laser diode (OEM) na kupelekwa kwa vipande vya MPFC na VTA kupitia 200 μ nyuzi za macho. Majaribio ya sasa-clamp yalifanywa kwa kutumia amplifier ya Multiclamp 700B, na upatikanaji wa data ulifanywa katika pClamp 10 (vifaa vya Masi). Upinzani wa safu ulizingatiwa wakati wa majaribio, na mikondo ya membrane na voltages zilichujwa katika 3 kHz (chujio cha Bessel).

Immunohistochemistry.

Panya zilishughulikiwa na hydrate ya klorini na kutumika kwa 0.1 m PBS ikifuatiwa na 4% paraformaldehyde katika PBS. Wabongo walihamishwa katika 4% paraformaldehyde mara moja na kisha cyropres iliyohifadhiwa katika suti ya 30%. Wabongo waligawanywa kwenye cryostat (Leica) saa 35 μm ndani ya PBS na 0.1% sodiamu ya sodiamu. Kwa immunohistochemistry, sehemu zilizuiliwa katika seramu ya kawaida ya punda ya 3% na 0.01% Triton-X katika PBS ya 1 h kwenye shaker kwenye joto la kawaida. Sehemu zilikuwa zikiwa zimewekwa kwenye antibodies za msingi kwenye block mara moja kwenye shaker kwenye joto la kawaida. Vizuia kinga vilivyotumika vilikuwa vifuatavyo: anti-sungura-FosB (1: 2000, catalog # sc-48, Santa Cruz Biotechnology), anti-NeuN (1: 1000, catalog #MAB377, Millipore), anti-GFP (1: 5000 , catalog # 10-20, Aves), na anti-sungura-CREB (protini ya majibu ya cAMP; 1: 1000, orodha ya # 06-863, Millipore). Siku iliyofuata, sehemu zilitiwa mafuta katika PBS ikifuatiwa na incubation ya 1 h katika antibodies ya pili: anti-sungura Cy3, anti-panya Cy5, na punda-kuku DyLight-488 au Alexa-488 (Jackson ImmunoResearch Laboratories). Kwa mCherry na tyrosine hydroxylase immunohistochemistry, majaribio yalifanywa kama ilivyoelezwa hapo awali (Lobo et al., 2010; Mazei-Robison et al., 2011). Sehemu zilitiwa mafuta katika PBS, ikawekwa kwenye slaidi, na ikafunika.

Kuiga na kuhesabu kiini.

Immunofluorescence ilionyeshwa kwenye darubini ya siri ya Zeiss au Olympus Bx61 darubini ya siri. Kuhesabu kiini kulifanywa na programu ya ImageJ. Picha za sampuli ya bregma 1.42-1.1 ya NAc (msingi na ganda) na dorsal striatum zilichukuliwa kutoka sehemu za 2 au 3 za ubongo / mnyama (angalia Mtini. 1A). Jumla ya seli za 400-500 zilihesabiwa kwa kila mkoa wa ubongo kwa panya kwa kutumia picha za 250 μm × 250 μm. Seli zilihesabiwa kwa kutumia programu ya ImageJ sawa na utafiti uliopita (Lobo et al., 2010). Takriban seli za 400-500 jumla ya seli za NeuN zilihesabiwa kwa kila mkoa wa ubongo kwa panya, kisha idadi ya GFP+, GFP+: ΔFosB+, GFP-, na GFP-: ΔFosB+ seli zilihesabiwa katika kila mkoa. Takwimu zilikadiriwa kama ifuatavyo: (GFP+: ΔFosB+ neurons × 100%) / (jumla ya GFP+ neurons) na (GFP-: ΔFosB+ neurons × 100%) / (jumla ya GFP- neurons). Uchambuzi wa takwimu ulifanywa kwa kutumia programu ya GraphPad Prism. ANOVA za njia mbili zilizofuatwa na vipimo vya chapisho la Bonferroni zilitumiwa kwa uchambuzi wote wa uhesabuji wa seli.

Kielelezo 1.  

Cocaine sugu inachagua ΔFosB katika D1-MSNs katika mikoa ya striatal. ASehemu za Striatal kutoka bregma + 1.42 hadi + 1.10 zilitumika kwa kuhesabu seli. Picha ya D2-GFP sehemu ya dhihirisho inaonyesha mikoa mitatu ya starehe iliyosomwa: msingi wa NAc, ...

Matokeo

ΔFosB inashawishiwa tofauti katika D1-MSNs na D2-MSNs baada ya kufichuliwa mara kwa mara na cocaine dhidi ya haloperidol

Kwanza tulichunguza uingizwaji wa ΔFosB katika subtypes za MSN D1-GFP na D2-GFP panya kwa kutumia hali sugu ya cocaine iliyoonyeshwa hapo awali kupendeza proteni ya ΔFosB katika D1-MSNs (Moratalla et al., 1996). D1-GFP na D2-GFP Panya ya transgenic ya BAC, inayoonyesha protini ya fluorescent iliyoboreshwa chini ya jeni la D1 au D2 receptor (Mtini. 1A), walipokea sindano za ndani za cocaine (20 mg / kg) au saline ya 7 d, na akili zilikusanywa 24 h baada ya sindano ya mwisho (Mtini. 1B). Kisha tulifanya immunohistochemistry kwenye sehemu za ubongo kutumia antibodies dhidi ya NeuN, GFP, au FosB na picha na kuhesabiwa seli katika msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr (Mtini. 1A,C). Wakati anti-FosB antibody inagundua urefu kamili wa FosB na ΔFosB, tafiti nyingi kwa kutumia blotting Western au immunohistochemistry zimethibitisha kuwa ΔFosB ndio spishi pekee inayoweza kugundulika katika eneo la uondoaji la 24 h (mfano, Perrotti et al., 2008). Kwa hivyo tulitumia wakati wa 24 h au wakati mrefu zaidi kukusanya akili baada ya masharti yote katika utafiti huu ili kuhakikisha kuwa tunagundua ΔFosB tu. Kwa sababu striatal MSNs inaunda ∼95% ya neurons zote kwenye striatum, tulitumia kinga ya NeuN kutambua GFP- Neuroni, ambazo zina utajiri katika sehemu ndogo ya MSN (yaani, D2-MSNs katika D1-GFP panya na D1-MSNs katika D2-GFP panya). Tulipata hiyo D1-GFP panya zilizotibiwa na cocaine zinaonyesha induction kubwa ya ΔFosB katika GFP+/ NeuN+ neva (D1-MSNs) katika msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr, wakati GFP-/ NeuN+ seli (D2-MSNs) zilionyesha hakuna induction kubwa ya ΔFosB katika mikoa yote ya kitabia (Mtini. 1D): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x F(1,12) = 16.41, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; NAC shell: dawa × aina ya seli F(1,12) = 12.41, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001; dStr: dawa × aina ya seli F(1,12) = 12.07, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01. Sambamba na matokeo haya, tuliona katika D2-GFP panya hakuna induction muhimu ya ΔFosB katika GFP+/ NeuN+ neurons (D2-MSNs) lakini induction muhimu ya ΔFosB katika GFP-/ NeuN+ (D1-MSNs) katika mikoa yote ya baada ya matibabu ya kahawa (Mtini. 1D): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x F(1,12) = 15.76, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.0001; NAC shell: dawa x aina ya seli: F(1,12) = 20.33, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; dStr: dawa x aina ya seli: F(1,12) = 35.96, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001. Tulichunguza kinetiki ya kuingizwa kwa ΔFosB katika MSNs baada ya sindano ya 1, 3, au 7 d ya cocaine (20 mg / kg, ip) sindano. Tuliona uingizaji mkubwa wa ΔFosB katika D1-MSNs na 3 au 7 d ya matibabu ya cocaine ikilinganishwa na matibabu ya salini katika maeneo yote ya uzazi (Mtini. 1F): graph ya mwakilishi kutoka dStr; ANOVA ya njia mbili, aina ya seli × siku F(2,13) = 17.87, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01, p <0.001. Hii ni sawa na kozi ya wakati wa mkusanyiko wa osBFosB katika striatum iliyoonekana mapema na blotting ya Magharibi (Hope na al., 1994) na inadhibitisha uingizwaji wa kuchagua wa ΔFosB tu katika D1-MSNs wakati wote wa mfiduo wa cocaine.

Sisi tukachunguza ujanibishaji wa uctionFosB na immunohistochemistry katika subtypes ya MSN baada ya mfiduo sugu wa haloperidol (Mtini. 2). Kazi ya hapo awali ilionyesha moja kwa moja kuwa haloperidol sugu inaweza kusababisha ΔFosB haswa katika D2-MSNs (Hiroi na Graybiel, 1996; Atkins et al., 1999), ingawa hii haijachunguzwa moja kwa moja. D1-GFP na D2-GFP panya zilipokea haloperidol (2 mg / kg) katika maji ya kunywa, pH 6.0, ilhali D1-GFP na D2-GFP kudhibiti panya zilizopokea maji ya kunywa mara kwa mara, pH 6.0, kwa 21 d (wiki za 3) na akili zilikusanywa siku 22 (Mtini. 2A). Kama ilivyo kwa cocaine, tunajua kuwa chanjo zote za FosB kama striatum wakati huu zinawakilisha ΔFosB, sio urefu kamili wa FosB (Atkins et al., 1999). Tulipata hiyo D1-GFP panya zilizopokea haloperidol hazionyeshi ujanibishaji muhimu wa ΔFosB katika GFP+/ NeuN+ neurons (D1-MSNs) katika msingi wa NAc, ganda la NAc, au dStr; Walakini, ongezeko kubwa la ΔFosB lilizingatiwa katika GFP-/ NeuN+ neurons (D2-MSNs) katika mikoa yote ya kitabia (Mtini. 2B,C): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x: F(1,10) = 23.29, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; Ganda la NAc: dawa ya kulevya: aina ya seli: F(1,10) = 30.14, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; dStr: dawa x aina ya seli: F(1,10) = 37.63, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.0001. Hii ilithibitishwa na uchunguzi wa D2-GFP panya: tuliona uingizwaji mkubwa wa ΔFosB katika GFP+/ NeuN+ neurons (D2-MSNs) katika mikoa yote mitatu, lakini hakuna mabadiliko makubwa katika ΔFosB katika GFP-/ NeuN+ (D1-MSNs) baada ya matibabu ya haloperidol (Mtini. 2B,C): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x: F(1,12) = 24.30, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.05; NAC shell: dawa x aina ya seli: F(1,12) = 26.07, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001; dStr: dawa x aina ya seli: F(1,12) = 21.36, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01. Kwa kuwa tuliona muundo kama huo wa kuingizwa kwa ΔFosB katika D1-MSNs kwa kufichua cocaine mara kwa mara katika zote mbili D1-GFP (GFP+/ NeuN+) Na D2-GFP (GFP-/ NeuN+) panya, na kwa haloperidol ya kurudiwa katika D2-MSNs in D1-GFP (GFP-/ NeuN+) Na D2-GFP (GFP+/ NeuN+) panya, mabaki ya majaribio yetu yaliyotumiwa D2-GFP panya kuchunguza uctionFosB induction katika D1-MSNs (GFP)-/ NeuN+) na D2-MSNs (GFP+/ NeuN+) baada ya uchochezi mwingine sugu.

Kielelezo 2.  

Sugu haloperidol inasababisha ΔFosB katika D2-MSNs katika mikoa ya striatal. A, Kozi ya wakati ya matibabu ya 21 d ya haloperidol (2 mg / kg, katika maji ya kunywa) au maji. B, Immunohistochemistry ya NAc ganda la D1-GFP na D2-GFP panya baada ya haloperidol ...

Kama udhibiti, tulichunguza viwango vya usemi wa CREB katika hali ya cocaine na haloperidol ili kubaini ikiwa matokeo yetu yanaweza kuangaziwa kwa sababu zingine za uandishi.Mtini. 3). Hatukuona tofauti kubwa katika usemi wa CREB kati ya udhibiti na panya wanaotibiwa na dawa za kulevya. Zaidi, hatukuona tofauti yoyote katika viwango vya CREB kati ya D2-MSNs na D1-MSNs (Mtini. 3B,C).

Kielelezo 3.  

Cocaine sugu au haloperidol haitoi CREB katika subtypes ya MSN. A, Kinga ya CREB na GFP katika hali ya D2-GFP panya baada ya cocaine sugu au haloperidol sugu (Mtini. 1 na Na22 hadithi za matibabu ya dawa). Upeo wa wigo, 50 μm. ...

Aina tofauti za uingizwaji wa uctionFosB katika subtypes za MSN na dawa za unyanyasaji

Kwa sababu tafiti za zamani zimeonyesha kuwa dawa zingine za unyanyasaji zinaweza kuwachochea inFosB katika hali ndogo ndogo (Perrotti et al., 2008), tulichunguza ΔFosB katika subtypes ya MSN baada ya mfiduo sugu kwa opiates, EtOH, au Δ (9) -THC. Kwanza tuligundua ikiwa mfiduo sugu wa morphine huchochea ΔFosB katika sehemu ndogo za MSN katika maeneo ya mkoa. D2-GFP panya zilipokea implantiki mbili zilizoingiliana za sham au morphine (25 mg) kwa siku 1 na 3, na akili zilikusanywa siku ya 5 (Mtini. 4A) wakati ΔFosB, lakini sio FosB, inaingizwa (Zachariou et al., 2006). Kwa kulinganisha sana na cocaine, subtypes zote mbili za MSN zilionyesha ongezeko kubwa (na takriban kulinganisha) kuongezeka kwa ΔFosB katika msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr katika kikundi cha morphine ikilinganishwa na udhibiti wa sham, bila utaftaji wa kiini cha utengenezaji mdogo wa ΔFosB unaonekana kwa kila striatal mikoa (Mtini. 4A): njia mbili ANOVA; Msingi wa NAc: madawa ya kulevya F(1,14) = 75.01, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); Ganda la NAc: dawa F(1,14) = 62.87, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); dStr: dawa ya kulevya F(1,14) = 60.11, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Kielelezo 4.  

Dawa za unyanyasaji hushawishi ΔFosB katika subtypes za MSN katika mikoa ya striatal. A, Matibabu sugu ya morphine (25 mg pellets siku 1 na 3) ndani D2-GFP panya husababisha induction muhimu ya ΔFosB katika subtypes zote za MSN kwenye msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr ...

Tulichunguza mfano wa uctionFosB katika subtypes ya MSN baada ya mfiduo sugu wa EtOH. D2-GFP panya walipewa mtihani wa kuchagua chupa mbili kwa 10% EtOH (chupa A) na maji (chupa B), wakati D2-GFP udhibiti walipokea maji katika chupa zote mbili (chupa A na B), kwa 10 d na akili zilikusanywa siku 11 (Mtini. 4B). Panya zilizopokea 10% EtOH chupa zilizotumiwa sana EtOH ikilinganishwa na maji, wakati panya zinazopokea maji kwenye chupa zote mbili hazikuonyesha tofauti katika matumizi ya kioevu.Mtini. 4B): upendeleo kwa chupa Kikundi cha maji: 50.00 ± 4.551%, EtOH kikundi: 84.44 ± 8.511%; Ya Mwanafunzi t mtihani, p <0.05. Utawala sugu wa EtOH ulisababisha ushawishi mkubwa wa ΔFosB kwa hiari katika D1-MSN katika msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr, bila mabadiliko katika D2-MSNs (Mtini. 4B): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x: F(1,14) = 24.58, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.05; NAC shell: dawa x aina ya seli: F(1,14) = 36.51, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; dStr: dawa x aina ya seli: F(1,14) = 29.03, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01.

D2-GFP panya pia ilitibiwa na Δ (9) -THC (10 mg / kg, ip) mara mbili kwa siku kwa 7 d, na akili zilikusanywa 24 h baada ya sindano ya mwisho. Sawa na hali ya cocaine na EtOH, tuliona ongezeko kubwa la ΔFosB kwa hiari katika D1-MSNs katika mikoa yote ya panya katika panya zinazopokea chronic (9) -THC (Mtini. 3E): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x F(1,8) = 26.37, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; NAC shell: dawa x aina ya seli: F(1,8) = 44.49, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001; dStr: dawa × aina ya seli F(1,8) = 29.30, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01.

Tuligundua ijayo kama muundo unaozingatiwa wa uingizwaji wa ΔFosB katika subtypes ya MSN na uchunguzi wa upelelezi wa cocaine au opiates hufanyika kwa dhibitisho ambazo kwa kawaida panya hujitawala. Kwanza, D2-GFP panya walipata mafunzo ya kujisimamia cocaine (0.5 mg / kg / infusion) kwenye ratiba ya FR1 ya siku ya 2 ha kwa wiki za 3 na akili zilikusanywa 24 h baada ya uchochezi wa mwisho (Mtini. 4D), wakati ΔFosB, lakini sio FosB, inajulikana kuwa ikiwa (Larson et al., 2010). Panya alitumia wakati zaidi kusisitiza kazi hai dhidi ya lever isiyofanya kazi (Mtini. 4D; Ya Mwanafunzi t mtihani, p <0.01). Kiwango cha wastani cha cocaine kila siku kilikuwa 19.1 mg / kg ndani ya mishipa (Mtini. 4D), sawa na kipimo cha uingilizi wa 20 mg / kg inayotumiwa hapo juu (Mtini. 1). Kama ilivyo kwa mfiduo wa kahawa usio na marudio (Mtini. 1), tuligundua kuwa utawala wa kokaini ulisababisha uhamishaji mkubwa wa ΔFosB tu katika D1-MSNs katika mikoa yote ya jiji ukilinganisha na mfiduo wa saline (Mtini. 4D): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x F(1,14) = 21.75, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; NAC shell: dawa x aina ya seli: F(1,14) = 26.52, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; dStr: dawa × aina ya seli F(1,14) = 33.68, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001. Vivyo hivyo, vivyo hivyo kwa mfiduo wa opiate (morphine) isiyo ya kawaida (Mtini. 4A), tulipata hiyo D2-GFP panya wanaojiendesha heroin (30 μg / kg kwa infusion), kwenye ratiba ya FR1 ha 3 ha siku ya wiki za 2 ilichunguza 24 h baada ya mfiduo wa mwisho wa dawa, ilionyesha induction muhimu ya ΔFosB katika D2-MSNs na D1-MSN katika striatal zote. mikoa (Mtini. 4E): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: dawa ya kulevya F(1,12) = 68.88, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); Ganda la NAc: dawa F(1,12) = 80.08, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: dawa ya kulevya F(1,12) = 63.36, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p < 0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN). Kiwango wastani cha kila siku cha heroini kilikuwa 0.459 mg / kg, na panya walitumia wakati mwingi kubonyeza lever inayofanya kazi dhidi ya (Lever ya Wanafunzi. t mtihani, p <0.05) (Mtini. 4E).

Uboreshaji wa mazingira na hamu ya hamu ya kushawishi ΔFosB katika D1-MSN na D2-MSNs

Kwa sababu tafiti za zamani zilionyesha kuwa thawabu asilia huchochea ΔFosB katika mikoa ya densi (Werme et al., 2002; Teegarden na Bale, 2007; Wallace et al., 2008; Solinas et al., 2009; Vialou et al., 2011), na uingizwaji na gurudumu inayoendesha kuchagua kwa D1-MSNs (Werme et al., 2002), tulichunguza ikiwa uingizwaji na thawabu zingine za asili umeonyesha hali ya seli. Kwanza tulitumia ujumuishaji wa ujana ambao D2-GFP panya waliwekwa katika mazingira tajiri kutoka kwa weaning (wiki za 3) kwa kipindi cha wiki ya 4 (Mtini. 5A). Njia hii ilionyeshwa hapo awali kushawishi ΔFosB katika panya NAc na dStr (Solinas et al., 2009; Lehmann na Herkenham, 2011). Ikilinganishwa na hali ya kawaida ya makazi, mazingira yenye utajiri yaliongezeka sana ΔFosB katika mikoa yote lakini haikufanya hivyo kwa aina maalum ya seli, na ujanibishaji kulinganishwa unaonekana katika D1-MSNs na D2-MSN (Mtini. 5A): ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: mazingira F(1,12) = 89.13, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.0001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); Ganda la NAc: mazingira F(1,12) = 80.50, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: mazingira F(1,12) = 56.42, p <0.01, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Kielelezo 5.  

Utajiri wa mazingira na hamu ya kuchochea inachochea ΔFosB katika sehemu ndogo za MSN. A, D2-GFP panya ambazo ziliwekwa katika mazingira tajiri kutoka P21 kwa wiki za 4 zinaonyesha induction ya ΔFosB katika vitongoji vyote vya MSN kwa sehemu zote ...

Tulichunguza ijayo expressionFosB kujieleza katika kipindi cha MSN baada ya hamu ya muda ya hamu. Kwanza tulijaribu athari za kunywa sucrose sugu, ambayo ilionyeshwa hapo awali kushawishi toFosB katika rat NAc (Wallace et al., 2008). D2-GFP panya walipewa mtihani wa kuchagua chupa mbili kwa suti ya 10% (chupa A) na maji (chupa B), wakati D2-GFP udhibiti walipokea maji katika chupa zote mbili (chupa A na B) ya 10 d na akili zilikusanywa siku 11 (Mtini. 5B). Panya zilizopokea 10% sucrose zinazotumiwa kwa urahisi zaidi, wakati panya zinazopokea maji kwenye chupa zote mbili zilionyesha hakuna tofauti katika matumizi ya kioevu (Mtini. 5B): upendeleo wa chupa A, maji: 50.00 ± 4.749%, sucrose: 89.66 ± 4.473%; Ya Mwanafunzi t mtihani, p <0.001. Tuligundua kuwa matumizi sugu ya sucrose yalisababisha ΔFosB katika msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr na kwamba hii ilitokea katika sehemu ndogo zote za MSN (Mtini. 5B): njia mbili ANOVA, NAc msingi: matibabu F(1,12) = 76.15 p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); Ganda la NAc: matibabu F(1,12) = 63.35, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: matibabu F(1,12) = 63.36, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Mwishowe, tulichunguza kujieleza kwa ΔFosB katika subtypes ya MSN baada ya kizuizi cha kalori kwa sababu hali hii, ambayo huongeza shughuli za hali na hali ya motisha, hapo awali ilionyeshwa ili kuongeza viwango vya ΔFosB kwenye panya NAc (Vialou et al., 2011). D2-GFP panya walipitia itifaki iliyozuiliwa na kalori, ambayo walipokea 60% ya ad libitum kalori kila siku kwa 10 d na akili zilikusanywa siku 11 (Mtini. 5C). Uzuiaji wa kalori umeongeza viwango vya ΔFosB katika msingi wa NAc na ganda la NAc kama inavyoonyeshwa hapo awali (Vialou et al., 2011) na pia iliongezeka viwango vya ΔFosB katika dStr. Walakini, hatukuona kiingilio chochote cha kutofautisha katika D1-MSNs dhidi ya D2-MSNs (Mtini. 5C): njia mbili ANOVA, NAc msingi: matibabu F(1,12) = 67.94 p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); Ganda la NAc: matibabu F(1,12) = 67.84, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: matibabu F(1,12) = 82.70, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN).

Dhiki ya kutofaulu ya kijamii ya kufadhaika na matibabu ya kukandamiza husababisha induction tofauti ya ΔFosB katika subtypes ya MSN

Hapo awali tulionyesha kuwa ΔFosB imeongezeka katika NAc ya panya baada ya kufadhaika kwa dhiki ya jamii (Vialou et al., 2010). Ingawa ujanibishaji huu ulizingatiwa katika panya wote wanaoshambuliwa (zile zinaonyesha mpangilio wa kufadhaika) na vile vile kwenye panya ambazo zina nguvu (zile ambazo zinaepuka athari hizi mbaya), uanzishaji wa ΔFosB ulikuwa mkubwa kwenye kikundi kidogo cha uvumilivu na ilionyeshwa moja kwa moja. kupatanisha hali ya uvumilivu. Katika utafiti wa sasa, tuligundua umbo la rununu la kushangaza la kujiingiza kwa ΔFosB katika vikundi hivi viwili vya phenotypic. D2-GFP panya walikuwa wanakabiliwa na 10 d ya dhiki ya kijamii kushindwa na kutengwa katika wanahusika na resilient msingi wa kipimo cha mwingiliano wa kijamii (Mtini. 6A), ambayo inahusiana sana na dalili zingine za tabia (Krishnan et al., 2007). Panya ambazo ziliendeleza tabia inayoweza kushambuliwa baada ya dhiki ya kushindwa kwa kijamii ilionyesha ujanibishaji muhimu wa ΔFosB katika D2-MSNs katika msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr ikilinganishwa na udhibiti na panya wenye nguvu, bila dhibitisho dhahiri katika D1-MSN. Kinyume cha kushangaza, panya wenye nguvu walionyesha uingiliaji ΔFosB muhimu katika D1-MSNs katika wilaya zote ikilinganishwa na panya wanaohusika na kudhibiti, bila kujulikana dhahiri katika D2-MSNs (Mtini. 6A; ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: kundi la seli ya kiini F(1,20) = 20.11, p <0.05, jaribio la posta la Bonferroni: D2-MSN / wanahusika p <0.05, D1-MSN / ushujaa p <0.05; Ganda la NAc: kikundi x aina ya seli F(1,20) = 27.79, p <0.01, jaribio la posta la Bonferroni: D2-MSN / wanahusika p <0.001, D1-MSN / ushujaa p <0.01; dStr: kikundi x aina ya seli F(1,20) = 19.76, p <0.01, jaribio la posta la Bonferroni: D2-MSN / wanahusika p <0.05, D1-MSN / ushujaa p <0.01).

Kielelezo 6.  

Dhiki ya kushindwa kwa kijamii ya dhiki na sugu ya fluoxetine husababisha indFosB kujiingiza katika subtypes tofauti za MSN katika striatum. A, D2-GFP ambazo zinahusika na kozi ya 10 d ya maonyesho ya kukabiliana na mafadhaiko ya kijamii ΔFosB katika D2-MSNs katika striatal zote ...

Matibabu ya muda mrefu na antidepressant ya SSRI, fluoxetine, inabadilisha tabia kama ya unyogovu iliyoonyeshwa na panya wanaohusika baada ya dhiki ya kutofaulu ya mshindi wa kijamii (Berton et al., 2006). Kwa kuongezea, matibabu kama haya hushawishi ΔFosB katika NAc ya wanaoweza kuambukizwa na vile vile kudhibiti panya, na tumeonyesha kuwa utangulizi kama huo unahitajika kwa athari ya tabia ya fluoxetine.Vialou et al., 2010). Kwa hivyo tulichunguza uainishaji wa simu za rununu za ΔFosB baada ya utawala sugu wa fluoxetine. D2-GFP panya alipokea fluoxetine (20 mg / kg, ip) ya 14 d, na akili zilikusanywa siku 15 (Mtini. 6B). Tuliona uingizwaji mkubwa wa ΔFosB katika D1-MSNs, lakini sio katika D2-MSNs, katika panya zilizotibiwa na fluoxetine ikilinganishwa na udhibiti wa gari (Mtini. 6B; ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya dawa ya seli x F(1,10) = 14.59, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; NAC shell: dawa x aina ya seli: F(1,10) = 26.14, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; dStr: dawa × aina ya seli F(1,10) = 8.19, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001).

Katika udanganyifu wa vivo optogenetic ya mikoa ya ubongo wa mshirika wa NAc husababisha muundo tofauti wa indFosB ya kujishughulisha katika mikoa ya striatal na subtypes za MSN

Kwa kuzingatia kwamba pembejeo zinazohusiana na dopaminergic na glutamatergic kwa NAc zinaweza kuwezesha kutafuta malipo na kubadilisha tabia kama tabia ya unyogovu (Tsai et al., 2009; Covington et al., 2010; Adamantidis et al., 2011; Iliyoandikwa et al., 2011; Britt et al., 2012; Lammel et al., 2012; Stuber et al., 2012; Chaudhury et al., 2013; Kumar na al., 2013; Tye et al., 2013), tulichunguza uingizwaji wa ΔFosB katika sehemu ndogo za siri za MSN baada ya kudanganya shughuli za sehemu kadhaa muhimu za ubongo. Tulionyesha kwa ukawaida ChR2 katika kila mkoa kadhaa na kuamilishwa na taa ya bluu (473 nm) kama ilivyoelezea hapo awali (Gradinaru et al., 2010; Yizhar et al., 2011). Kwa sababu utafiti wa hivi karibuni ulionyesha kuwa kuchochea kwa phasic na taa ya bluu, baada ya usemi usio wa kuchagua wa ChR2 katika VTA, ilisababisha hali ya tabia kama ile ya kuchagua fizio za phric za VR dNNXX za vta dopamine (Chaudhury et al., 2013), tulielezea ChR2 kutumia AAV-hsyn-ChR2-EYFP katika VTA ya D2-GFP panya; panya kudhibiti walikuwa sindano na AAV-hsyn-EYFP. Sehemu za VTA zilichanganywa na tyrosine hydroxylase na GFP kuibua kujielezea kwa ChR2-EYFP (Mtini. 7C). D2-GFP panya akielezea ChR2-EFYP au EYFP peke yake katika VTA alipokea 5 d ya 10 min ya kuchochea mwanga wa phasic ya bluu ya taa kama ilivyoelezewa hapo awali (Koo et al., 2012; Chaudhury et al., 2013) (Mtini. 7A), na akili zilikusanywa 24 h baada ya kusisimua kwa mwisho. Hakukuwa na desensitization ya uwezo wa ChR2 kuamsha neurons ya VTA dopamine baada ya 5 d ya kusisimua (Mtini. 7B). Tuligundua kuwa kuchochea kurudiwa kwa phasic ya neuroni za VTA kuelezea ChR2-EYFP kunaongeza ΔFosB katika sehemu ndogo zote za MSN kwenye msingi wa NAc, lakini tu katika D1-MSNs kwenye ganda la NAc.Mtini. 7C; ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: ushawishi wa optogenetic F(1,16) = 51.97, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001; (zote mbili ndogo za MSN) NAC shell: vichocheo vya macho na aina ya seli: F(1,16) = 13.82, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01). Hatukuona uingizwaji wa ΔFosB katika dStr baada ya kusisimua kwa mwanga wa rangi ya samawati kwa VTA-ikionyesha ChR2-EYFP ikilinganishwa na udhibiti wa EYFP. Matokeo haya yanapaswa kutafsiriwa kwa uangalifu, kwani hatukulenga kulenga VTA dopamine neurons kwa kusisimua macho, na tafiti za hivi karibuni zimeonyesha nondopaminergic makadirio ya neurons katika VTA na pia tofauti kubwa ya VTA, ambayo inaweza kusababisha majibu ya tabia tofauti kulingana na kupigwa risasi. vigezo na idadi ndogo ya neva zilizoathiriwa (Tsai et al., 2009; Lammel et al., 2011, 2012; Iliyoandikwa et al., 2011; Kim et al., 2012, 2013; Tan et al., 2012; van Zessen et al., 2012; Stamatakis na Stuber, 2012; Chaudhury et al., 2013; Tye et al., 2013).

Kielelezo 7.  

Uanzishaji wa optogenetic ya mikoa ya ubongo ambayo inashughulikia NAc husababisha muundo tofauti wa indFosB ya kuingizwa katika subtypes za MSN na mikoa ya striatal. A, Paradigm ya uchochezi ya Optogenetic kwa hali zote. Wabongo walivunwa 24 h baada ya 5 d ya optogenetic ...

Tulitumia Tena AAV-CaMKII-ChR2-mCherry na AAV-CaMKII-mCherry kuelezea ChR2-mCherry, au mCherry pekee kama udhibiti, katika mPFC, amygdala, au vHippo ya D2-GFP panya (Mtini. 7D-F). ChR2 na usemi wa mCherry uliopatanishwa na virusi vya CaMKII-ChR2 hapo awali umeonyeshwa kuigiza kwa kujiamini na CaMKII, ambayo kwa kawaida huandika alama ya glutamatergic neurons (Gradinaru et al., 2009; Warden et al., 2012). Tuliwasha seli zilizoelezea ChR2 katika mikoa hii na taa ya bluu ya 20 Hz kwa dakika 10 kwa siku kwa 5 d, na akili zilikusanywa 24 h baada ya kusisimua mwisho (Mtini. 7A). Mtindo huu wa kuchochea ulisababisha ∼27-33 Hz kurusha, hasa kwa sababu ya spiking aliona mara mbili. Hakuna desensitization dhahiri ya ChR2 ilitokea na 5 d ya kusisimua; Walakini, tuliona kuongezeka kidogo kwa kurusha kutoka 1 hadi 5 d (32-33 Hz) ya kusisimua. Tuligundua kuwa uanzishaji wa optogenetic ya neuroni za mPFC ulisababisha ΔFosB kujiingiza katika D1-MSNs katika msingi wa NAc, wakati uanzishaji wa ΔFosB ulitokea kwa subtypes zote za MSN kwenye ganda la NAc (Mtini. 7D; ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya seli ya optogenetic F(1,14) = 10.31, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; Ganda la NAc: vichocheo vya macho F(1,14) = 57.17, p <0.001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN)). Hakuna mabadiliko katika viwango vya osBFosB yalionekana katika dStr baada ya uanzishaji wa mPFC. Kwa upande mwingine, uanzishaji wa macho ya macho ya amygdala ilisababisha ΔFosB katika sehemu zote za MSN katika msingi wa NAc, na kwa hiari katika D1-MSNs kwenye ganda la NAc, bila mabadiliko yanayotokea katika dStr (Mtini. 7E; ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: ushawishi wa optogenetic F(1,10) = 78.92, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); Ganda la NAc: vichocheo vya macho na aina ya seli: F(1,10) = 30.31, p <0.0001, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.0001). Mwishowe, uanzishaji wa macho ya vHippo neurons ilisababisha kuingizwa kwa ΔFosB tu katika D1-MSNs katika msingi wa NAc na ganda la NAc, bila mabadiliko yoyote yaliyoonekana katika dStr (Mtini. 7F; ANOVA ya njia mbili, msingi wa NAc: aina ya seli ya optogenetic F(1,10) = 18.30, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01; Ganda la NAc: vichocheo vya macho na aina ya seli: F(1,10) = 22.69, p <0.05, jaribio la chapisho la Bonferroni: p <0.01).

Majadiliano

Utafiti uliopo unachunguza uingilizi wa ΔFosB katika D1-MSNs na D2-MSN katika mikoa ya starehe baada ya kuchochea sugu kadhaa (Meza 1). Kwanza tunaanzisha uwezekano wa kutumia D1-GFP na D2-GFP mistari ya mwandishi kuonyesha kuonyesha ΔFosB ya kuchagua katika D1-MSNs baada ya cocaine sugu na katika D2-MSNs baada ya haloperidol sugu. Matokeo ya cocaine yanaambatana na tafiti zilizopita (Moratalla et al., 1996; Lee et al., 2006) na jukumu lililowekwa kwa ΔFosB katika D1-MSNs katika kukuza thawabu ya cocaine (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Grueter et al., 2013). Hapo awali tulionesha kuwa mpelelezi- na kahawa inayojisimamia mwenyewe huchochea ΔFosB kwa kiwango sawa katika NAc (Winstanley et al., 2007; Perrotti et al., 2008), na muhimu tunaonyesha hapa kwamba aina zote mbili za ulaji wa kokeini hushawishi ΔFosB kwa hiari katika D1-MSNs katika mikoa yote mitatu ya striatal. Matokeo yetu yanaendana na tafiti zilizopita zikionyesha kwamba cocaine kali huchukua aina nyingine za mapema na fosforasi ya protini kadhaa za kuashiria za ndani tu katika D1-MSNs (Bateup et al., 2008; Bertran-Gonzalez et al., 2008). Vivyo hivyo, muundo tofauti wa uctionFosB wa kuingiza baada ya haloperidol sugu ni sawa na kizuizi cha induction hii na D2-kama reconor agonists (Atkins et al., 1999), na kwa kuingizwa kwa papo hapo kwa haloperidol ya jeni za mapema na phosphorylation ya protini kadhaa zinazoashiria katika D2-MSNs (Bateup et al., 2008; Bertran-Gonzalez et al., 2008).

Jedwali 1.  

UctionFosB induction katika subtypes stenatal MSN baada ya sugu ya kitabibu sugu, kihemko, na ya optogenetica

Kama ilivyo kwa cocaine, tuligundua kuwa mfiduo sugu kwa dawa zingine mbili za unyanyasaji, EtOH na Δ (9) -THC, induces ΔFosB haswa katika D1-MSNs katika mikoa yote ya kitabia. Hapo awali tulionyesha kuwa EtOH inasababisha ΔFosB kwa msingi wa NAc, ganda la NAc, na dStr, lakini hiyo Δ (9) -THC inasimamia sana ΔFosB katika msingi wa NAc, na mwelekeo unaoonekana katika mikoa mingine (Perrotti et al., 2008). Vile vile tuliona hapa ind (9) -THC induction ya ΔFosB katika msingi wa NAc katika D1-MSNs; Uwezo wetu wa kuonyesha ujanibishaji katika maeneo mengine ya kitabia ni kwa sababu ya uchanganuzi maalum wa seli. Kwa kufurahisha, morphine sugu na usimamizi wa heroin, tofauti na dawa zingine za unyanyasaji, ilisababisha ΔFosB katika sehemu zote mbili za MSN kwa kiwango kulinganishwa katika mikoa yote ya kitabia. Utafiti wa hivi karibuni ulionyesha kuwa morphine ya papo hapo inashawishi c-Fos katika D1-MSNs, wakati uondoaji uliotumiwa na lexone baada ya morphine sugu inachukua c-Fos katika D2-MSNs (Enoksson et al., 2012). Ingawa hatukuona ishara za kujiondoa kwa opiate kwenye somo letu, inawezekana kwamba kujiondoa kwa hila zaidi kutokea na morphine au utawala wa heroin wakati wa masomo alisoma ni jukumu la ΔFosB katika D2-MSNs zinazoonekana hapa. Tulionyesha hapo awali kuwa ΔFosB katika D1-MSNs, lakini sio D2-MSNs, huongeza majibu mazuri kwa morphine (Zachariou et al., 2006). Ingekuwa inafurahisha sasa kujaribu uwezekano wa indFosB kujiingiza katika D2-MSNs inachangia athari za kupindua za kujiondoa kwa opiate. Vivyo hivyo, michango inayowezekana ya kujiondoa kwa madawa ya kulevya na kutamani kwa uctionFosB ya kujulikana inayoonekana na dawa zote inapaswa kuchunguzwa.

Uchunguzi wa awali unaonyesha kuwa uboreshaji wa mazingira wakati wa maendeleo huchochea ΔFosB katika NAc na dStr (Solinas et al., 2009; Lehmann na Herkenham, 2011). Takwimu zetu zinaonyesha kuwa mkusanyiko huu unafanyika kwa usawa katika D1-MSNs na D2-MSNs katika mikoa yote ya striatal. Paradigm ya kujumlisha ilionyeshwa hapo awali kujibu majibu mazuri na ya kupendeza ya cocaine (Solinas et al., 2009); Walakini, hali hii ya tabia haiwezekani sio matokeo ya mkusanyiko wa ΔFosB kwa sababu indFosB induction katika D1-MSNs peke yake huongeza majibu ya tabia kwa cocaine, wakati induction kama hiyo katika D2-MSNs haina athari dhahiri (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Grueter et al., 2013). Matumizi sucrose sugu ilionyeshwa hapo awali kuongeza ΔFosB katika NAc, na utaftaji wa ΔFosB, ama katika D1-MSNs peke yao au kwa watu wote wawili, katika NAc inakuza matumizi ya sucrose (Olausson et al., 2006; Wallace et al., 2008). Hapa, tuliona uinganisho wa kulinganisha wa BFosB katika subtypes zote za MSN katika NAc na dStr baada ya kunywa kwa sucrose. Mwishowe, tulionyesha hapo awali kuwa uhamishaji wa ΔFosB katika NAc upatanishi majibu fulani ya kukabiliana na uzuiaji wa kalori kupitia uhamasishaji ulioimarishwa wa chakula cha mafuta mengi na upunguzaji wa matumizi ya nishati (Vialou et al., 2011). Kwa jumla, matokeo haya yanaonyesha kuwa mkusanyiko wa ΔFosB katika NAc na dStr hufanyika kwa D1-MSN na D2-MSNs kujibu tuzo kadhaa za asili. Utaftaji huu unashangaza kwa sababu ya uchunguzi kwamba ΔFosB hujilimbikiza katika D1-MSNs tu baada ya thawabu nyingine ya asili, kukimbia gurudumu sugu, na kwamba utaftaji wa ΔFosB katika D1-MSNs umefanya gurudumu linaloendesha wakati ΔFosB overexpression katika D2-MSNs imepungua gurudumu la kuendesha (Werme et al., 2002). Walakini, kukimbia gurudumu kunaweza kuamsha njia tofauti za magari, ambazo zina jukumu la muundo wake tofauti wa uctionFosB. Kwa hali yoyote, matokeo na tuzo zingine za asili zinaonyesha kwamba wanadhibiti ΔFosB kwa mpangilio tofauti ikilinganishwa na tuzo kubwa za dawa, kama vile cocaine, EtOH, na Δ (9) -THC. Uingilizi wa osFosB katika vitongoji vyote vya MSN chini ya hali hizi za thawabu za asili ni sawa na utafiti uliofanywa hivi karibuni unaonyesha kwamba utangulizi wa hatua ya malipo ya thawabu ya chakula huamsha vitongoji vyote vya MSN (Cui et al., 2013).

Mkazo wa kushindwa kwa kijamii unasababisha ΔFosB katika ganda la NAc la panya wanaohusika na dhaifu lakini kwa msingi wa NAc tu katika panya wenye nguvu (Vialou et al., 2010). Zaidi ya hayo, ΔFosB overexpression katika D1-MSNs inakuza ushujaa baada ya dhiki ya kushindwa kwa jamii kwa muda mrefu. Matibabu sugu na fluoxetine pia husababisha mkusanyiko wa ΔFosB katika panya la mafadhaiko na na panya wanaohusika baada ya kufadhaika kwa dhiki ya kijamii, na ufafanuzi wa tabia wa ΔFosB ulionyeshwa kupatanisha majibu ya tabia kama ya antidepressant kama hali ya mwisho.Vialou et al., 2010). Mwishowe, uchunguzi uliopita ulionyesha uingilizi wa ΔFosB katika subtypes zote za MSN baada ya kufadhaika kwa hali ya kujizuia (Perrotti et al., 2004). Matokeo ya utafiti uliopo, ambapo tunaonyesha ΔFosB kujiingiza katika D1-MSNs kwenye panya zinazoathirika na fluoxetine, lakini kwa hiari katika D2-MSNs katika panya zinazoweza kuguswa, kutoa ufahamu muhimu katika matokeo haya ya mapema na kuunga mkono wazo kwamba ΔFosB katika D1- MSNs hupatanishi uvumilivu na hatua ya kukandamiza, wakati ΔFosB katika D2-MSN inaweza kupatanisha usumbufu. Kazi zaidi sasa inahitajika kujaribu nadharia hii.

Kazi ya hivi karibuni kwa kutumia optogenetics inaonyesha jukumu kubwa la washirika wa dopaminergic na glutamatergic kwa NAc katika kurekebisha majibu ya malipo na majibu ya dhiki (tazama Matokeo). Tunatumia zana hizi za optogenetic kuchunguza uingizaji wa ΔFosB katika D1-MSNs na D2-MSNs baada ya uanzishaji wa kurudia wa mikoa ya NAc. Tuligundua kuwa kusisimua kwa phasic ya neurons ya VTA, au uanzishaji wa neuroni za glutamatergic hasa katika amygdala, induces ΔFosB katika D1-MSNs katika safu ya NAc na kwa subtypes zote za MSN kwenye msingi wa NAc. Kwa kulinganisha, uanzishaji wa neuroni za mPFC husababisha muundo tofauti wa ΔFosB, na viwango vilivyoongezeka katika D1-MSNs katika msingi wa NAc lakini uingizwaji katika subtypes zote za MSN kwenye ganda la NAc. Mwishowe, uanzishaji wa optogenetic ya neurons ya vHippo husababisha mkusanyiko wa ΔFosB tu katika D1-MSNs katika msingi wa NAc na ganda. Matokeo ya vHippo yanaambatana na tafiti za hivi karibuni zinazoonyesha kuwa pembejeo za hippocampal ni dhaifu sana kwenye D2-MSNs ikilinganishwa na D1-MSNs (MacAskill et al., 2012) na kwamba pembejeo hizi zinadhibiti ujumuishaji wa cocaine (Britt et al., 2012). Kwa kuongezea, maandamano yetu ya osFosB ya kuletwa zaidi katika D1-MSN na pembejeo zote ni sawa na tafiti zilizopita zikionyesha kuwa ΔFosB katika D1-MSNs huongeza majibu yenye thawabu kwa dawa za unyanyasaji na vile vile masomo yanayoonyesha kuwa kuchochea kwa optogenetic ya VTA dopamine neurons au ya mPFC, amygdala, au vituo vya vHippo katika NAc kukuza thawabu (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006; Tsai et al., 2009; Iliyoandikwa et al., 2011; Britt et al., 2012; Grueter et al., 2013).

Mwishowe, kuna uwezekano kwamba kuna ensembles za kuchagua za neuroni ndani ya hizi ndogo ndogo za MSN ambazo zinaamilishwa tofauti na shawishi nzuri au hasi. Hii inaweza kusababisha uchunguzi wetu wa indFosB kuletwa katika D2-MSNs katika hali fulani za thawabu (opiates na tuzo za asili) na vile vile hali ya kutuliza (kushindwa kwa kijamii). Striatum ni nzito sana zaidi ya subtypes za MSN, pamoja na kiraka na muundo wa matrix kwenye striatum ya ndani na ya ndani (Gerfen, 1992; Watabe-Uchida et al., 2012). Zaidi ya hayo, tafiti za zamani zinaonyesha uanzishaji wa asilimia ndogo sana ya ensembles za neuroni za striatal na psychostimulants, pamoja na uhamishaji ulioimarishwa wa FosB jeni katika neva hizi zilizoamilishwa (Guez-Barber et al., 2011; Liu et al., 2013), ingawa haijulikani kama hizi neuroni zilizoamilishwa ni D1-MSNs au D2-MSN. Kazi ya ΔFosB katika msingi dhidi ya ganda katika kupatanishi tabia zenye kufadhili na zenye kuathirika vivyo hivyo haijulikani. ΔFosB overexpression katika D1-MSNs iliongezeka sauti za kimya katika msingi wote na ganda, lakini usemi katika D2-MSNs ulipunguza sauti za kimya katika ganda tu (Grueter et al., 2013). Zaidi ya hayo, uingilizi wa ΔFosB katika ganda la msingi dhidi ya ganda linaweza kupatanishwa kwa njia tofauti, kama tulivyopata utulivu wa CaMKIIα ya MFosB kwa ganda lakini sio msingi unaoongoza kwenye mkusanyiko mkubwa wa ΔFosB kwenye ganda (Robison et al., 2013). Masomo ya siku za usoni ambayo kwa uangalifu yanalenga subtypes za MSN katika msingi dhidi ya ganda, umati ulioamilishwa wa neuronal, au kiraka dhidi ya muundo wa matrix utasaidia kufafanua jukumu la tabia la ΔFosB ndani ya mkoa huu wa ulimwengu.

Kwa jumla, hizi mwelekeo wa upatanishi wa kuchagua wa seli unaojumuisha wa ΔFosB katika NAc unaonyesha kwamba ushawishi wenye kufurahisha na wenye kusisitiza wanahusika washirika tofauti wa NAc kushughulikia huduma maalum za kusisimua hizi. Matokeo yetu hayapei tu ufahamu kamili wa kuletwa kwa ΔFosB katika subtypes ya laini ya MSN na ushawishi sugu lakini pia yanaonyesha matumizi katika Kutumia ΔFosB kama alama ya Masi kuelewa athari za kudumu za duru maalum za neural katika kushawishi kazi ya NAc.

Maelezo ya chini

Waandishi hutangaza maslahi ya mashindano ya kifedha.

Marejeo

  1. Adamantidis AR, Tsai HC, Boutrel B, Zhang F, Stuber GD, Budygin EA, Touriño C, Bonci A, Deisseroth K, de Lecea L. Optogenetic kuhojiwa kwa mabadiliko ya dopaminergic ya hatua nyingi za tabia ya kutafuta zawadi. J Neurosci. 2011; 31: 10829-10835. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2246-11.2011. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  2. Albin RL, Young AB, Penney JB. Anatomy ya kazi ya shida ya gangal basilia. Mwenendo Neurosci. 1989; 12: 366-375. doi: 10.1016 / 0166-2236 (89) 90074-X. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  3. Atkins JB, Chlan-Fourney J, Nye HE, Hiroi N, Carlezon WA, Jr, Nestler EJ. Uingizaji maalum wa mkoa wa δFosB kwa usimamizi unaorudiwa wa dawa za kawaida za antipsychotic. Sambamba. 1999; 33: 118-128. doi: 10.1002 / (SICI) 1098-2396 (199908) 33: 2 <118 :: AID-SYN2> 3.0.CO% 3B2-L. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  4. Bateup HS, Svenningsson P, Kuroiwa M, Gong S, Nishi A, Heintz N, Greengard P. Aina maalum ya sheria ya fonforisi ya DARPP-32 na dawa za psychostimulant na antipsychotic. Nat Neurosci. 2008; 11: 932-939. doi: 10.1038 / nn.2153. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  5. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Jukumu muhimu la BDNF katika njia ya dopamine ya mesolimbic katika dhiki ya kushindwa kwa jamii. Sayansi. 2006; 311: 864-868. Doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  6. Bertran-Gonzalez J, Bosch C, Maroteaux M, Matamales M, Hervé D, Valjent E, Girault JA. Kupingana na mifumo ya kuashiria uanzishaji katika dopamine D1 na D2 receptor-inayoelezea neurons za striatal kujibu cocaine na haloperidol. J Neurosci. 2008; 28: 5671-5685. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1039-08.2008. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  7. Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA mwenye busara, Bonci A. Synaptic na wasifu wa tabia ya pembejeo nyingi za glutamatergic kwa kiunga cha mkusanyiko. Neuron. 2012; 76: 790-803. Doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  8. Chan CS, Peterson JD, Gertler TS, Glajch KE, Quintana RE, Cui Q, Sebel LE, Plotkin JK, Heiman M, Heintz N, Greengard P, Surmeier DJ. Udhibiti maalum wa taabu ya phenotype ya tumbo katika Drd2-eGFP BAC transgenic panya. J Neurosci. 2012; 32: 9124-9132. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0229-12.2012. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  9. Chaudhury D, Walsh JJ, Friedman AK, Juarez B, Ku SM, Koo JW, Ferguson D, Tsai HC, Pomeranz L, Christoffel DJ, Nectow AR, Ekstrand M, Domingos A, Mazei-Robison MS, Mouzon E, Lobo MK, Neve RL, Friedman JM, Russo SJ, Deisseroth K, et al. Udhibiti wa haraka wa tabia inayohusiana na unyogovu kwa udhibiti wa neuroni ya dopamine ya katikati. Asili. 2013; 493: 532-536. Doi: 10.1038 / nature11713. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  10. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Mwenyewe DW. ΔFosB huongeza motisha kwa cocaine. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  11. Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Athari ya kukandamiza ya kuchochea optogenetic ya cortex ya medali ya mapema. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  12. Cui G, Jun SB, Jin X, Pham MD, Vogel SS, Lovinger DM, Costa RM. Uanzishaji wa wakati mmoja wa njia za moja kwa moja na zisizo za moja kwa moja wakati wa uanzishaji wa hatua. Asili. 2013; 494: 238-242. Doi: 10.1038 / nature11846. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  13. Enoksson T, Bertran-Gonzalez J, Christie MJ. Nuksi hujilimbikiza D2- na D1-receptor inayoelezea viungo vya kati vya spiny huteuliwa kwa hiari na uondoaji wa morphine na morphine ya papo hapo, kwa mtiririko huo. Neuropharmacology. 2012; 62: 2463-2471. Doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.02.020. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  14. Gerfen CR. Mosaic ya ndani: Viwango vingi vya shirika katika eneo la basal ganglia. Annu Rev Neurosci. 1992; 15: 285-320. Doi: 10.1146 / annurev.ne.15.030192.001441. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  15. Gittis AH, Kreitzer AC. Microcircuitry ya tumbo na shida ya harakati. Mwenendo Neurosci. 2012; 35: 557-564. Doi: 10.1016 / j.tins.2012.06.008. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  16. Gong S, Zheng C, DBty ML, Losos K, Didkovsky N, Schambra UB, Nowak NJ, Joyner A, Leblanc G, Hatten ME, Heintz N. Aseta ya kujieleza ya mfumo mkuu wa neva kulingana na chromosomes bandia za bakteria. Asili. 2003; 425: 917-925. Doi: 10.1038 / nature02033. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  17. Gradinaru V, Mogri M, Thompson KR, Henderson JM, Deisseroth K. Utaftaji wa macho wa mzunguko wa parkinsonia neural. Sayansi. 2009; 324: 354-359. Doi: 10.1126 / science.1167093. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  18. Gradinaru V, Zhang F, Ramakrishnan C, Mattis J, Prakash R, Diester I, Goshen I, Thompson KR, Deisseroth K. Njia za seli na za mkononi za kupindukia na kupanua optogenetics. Kiini. 2010; 141: 154-165. Doi: 10.1016 / j.cell.2010.02.037. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  19. Greybiel AM. Gangal ya msingi. Curr Biol. 2000; 10: R509-R511. doi: 10.1016 / S0960-9822 (00) 00593-5. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  20. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, Graham AR, Unterberg S, Graham DL, Vialou V, Bass CE, Terwilliger EF, Bardo MT, Nestler EJ. Uboreshaji wa mazingira hutoa tabia ya phenotype inayoingiliana na shughuli za kujibu kwa cyclic adenosine monophosphate ya kujifunga (CREB) katika shughuli za kiini. Saikolojia ya Biol. 2010; 67: 28-35. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  21. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB hutofautisha kiini cha kiunzi cha kukusanya njia ya moja kwa moja na isiyo ya moja kwa moja. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110: 1923-1928. Doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  22. Guez-Barber D, Fanous S, Golden SA, Schrama R, Koya E, Stern AL, Bossert JM, Harvey BK, Picciotto MR, Tumaini BT. FACS inabaini kanuni ya jeni iliyochochewa ya aina ya cocaine katika hiari iliyoamilishwa ya watu wazima ya tumbo. J Neurosci. 2011; 31: 4251-4259. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.6195-10.2011. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  23. Heiman M, Schaefer A, Gong S, Peterson JD, Siku M, Ramsey KE, Suárez-Farinas M, Schwarz C, Stephan DA, Surmeier DJ, Greengard P, Heintz N. Mbinu ya utafsiri ya maelezo ya utambulisho wa Masi ya aina ya seli za CNS . Kiini. 2008; 135: 738-748. Doi: 10.1016 / j.cell.2008.10.028. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  24. Hiroi N, Graybiel AM. Matibabu ya kawaida na ya kawaida ya neuroleptic husababisha mipango tofauti ya usemi wa sababu ya ununuzi kwenye striatum. J Comp Neurol. 1996; 374: 70-83. doi: 10.1002 / (SICI) 1096-9861 (19961007) 374: 1 <70 :: AID-CNE5> 3.0.CO% 3B2-K. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  25. Hiroi N, Brown JR, Haile CN, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. Panya mutant panya: Kupoteza uingizaji wa cocaine sugu wa protini zinazohusiana na Fos na kuongezeka kwa unyeti kwa kisaikolojia ya cocaine na athari za kuthawabisha. Proc Natl Acad Sci Marekani A. 1997; 94: 10397-10402. doi: 10.1073 / pnas.94.19.10397. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  26. Matumaini BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Uingizaji wa AP-1 ngumu ya muda mrefu inayojumuisha protini-kama protini-kama katika ubongo na cocaine sugu na tiba zingine sugu. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  27. Kalivas PW, Churchill L, Klitenick MA. Makadirio ya GABA na enkephalin kutoka kwa mkusanyiko wa kiini na pallidum ya ventral hadi eneo la sehemu ya ventral. Neuroscience. 1993; 57: 1047-1060. doi: 10.1016 / 0306-4522 (93) 90048-K. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  28. Kaplan GB, Leite-Morris KA, shabiki W, Young AJ, Guy MD. Usikivu wa Opiate huchochea kujieleza kwa FosB / ΔFosB katika maeneo ya ubongo wa kitongoji, wa striatal na amygdala. PLoS Moja. 2011; 6: e23574. Doi: 10.1371 / journal.pone.0023574. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  29. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Uonyeshaji wa sababu ya maandishi ΔFosB kwenye ubongo inadhibiti usikivu wa cocaine. Asili. 1999; 401: 272-276. Doi: 10.1038 / 45790. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  30. Kim KM, Baratta MV, Yang A, Lee D, Boyden ES, Fiorillo CD. Uigaji wa Optogenetic wa uanzishaji wa muda mfupi wa neuropu ya dopamine na thawabu ya asili inatosha kwa uimarishaji wa mfanyakazi. PLoS Moja. 2012; 7: e33612. Doi: 10.1371 / journal.pone.0033612. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  31. Kim TI, McCall JG, Jung YH, Huang X, Siuda ER, Li Y, Wimbo J, Wimbo wa YM, Pao HA, Kim RH, Lu C, Lee SD, Wimbo IS, Shin G, Al-Hasani R, Kim S, Mbunge wa Tan, Huang Y, Omenetto FG, Rogers JA, et al. Inohitajika, optoelectronics za simu za rununu na matumizi ya optogenetics ya waya. Sayansi. 2013; 340: 211-216. Doi: 10.1126 / science.1232437. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  32. Koo JW, Mazei-Robison MS, Chaudhury D, Juarez B, LaPlant Q, Ferguson D, Feng J, Jua H, Scobie KN, Damez-Werno D, Crumiller M, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Mouzon E, Dietz DM, Lobo MK, Neve RL, Russo SJ, Han MH, Nestler EJ. BDNF ni dereva mbaya ya hatua ya morphine. Sayansi. 2012; 338: 124-128. Doi: 10.1126 / science.1222265. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  33. Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS, et al. Marekebisho ya Masi ya msingi unaowezekana na upinzani wa kushindwa kwa kijamii katika mikoa ya malipo ya ubongo. Kiini. 2007; 131: 391-404. Doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  34. Kumar S, SJ Nyeusi, Hultman R, Szabo ST, DeMaio KD, Du J, Katz BM, Feng G, Covington HE, 3rd, Dzirasa K. Udhibiti wa mpangilio wa mitandao. J Neurosci. 2013; 33: 1116-1129. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0092-12.2013. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  35. Lammel S, Ion DI, Roeper J, Malenka RC. Makadirio maalum ya makadirio ya sinopsi za neuropu za dopamine na msukumo wa wasaidizi na wenye thawabu. Neuron. 2011; 70: 855-862. Doi: 10.1016 / j.neuron.2011.03.025. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  36. Lammel S, Lim BK, Ran C, Huang KW, Betley MJ, Tye KM, Deisseroth K, Malenka RC. Udhibiti wa uingizwaji maalum wa thawabu na ubadilishaji katika eneo la mzunguko wa ventral. Asili. 2012; 491: 212-217. Doi: 10.1038 / nature11527. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  37. Larson EB, Akkentli F, Edward S, Graham DL, Simmons DL, Alibhai IN, Nestler EJ, Self DW. Usimamizi wa densi ya ΔFosB, FosB, na cFos wakati wa utawala wa kahawa na kujitoa. J Neurochem. 2010; 115: 112-122. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  38. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Cocaine-aliyechochea uundaji wa mgongo wa dendritic katika D1 na D2 dopamine receptor-zenye neva za kati za spiny katika nodi za nucleus. Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103: 3399-3404. Doi: 10.1073 / pnas.0511244103. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  39. Lehmann ML, Herkenham M. Utajiri wa mazingira hutoa ushujaa wa kushindikana kwa njia ya kijamii kwa njia ya njia kuu ya utegemezi wa kortini. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  40. Liu QR, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Hou X, Shaham Y, Tumaini BT. Ugunduzi wa mabadiliko ya Masi katika methamphetamine iliyoamilishwa Fos-kuelezea neurons kutoka kwa mpangilio mmoja wa dorsal striatum kutumia fluorescence-activated cell kuchagua (FACS) J Neurochem. 2013 doi: 10.1111 / jnc.12381. Doi: 10.1111 / jnc.12381. Tolea uchapishaji mtandaoni. Rudishwa Julai 29, 2013. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  41. Lobo MK, Covington HE, 3rd, Chaudhury D, Friedman AK, Sun H, Damez-Werno D, Dietz DM, Zaman S, Koo JW, Kennedy PJ, Mouzon E, Mogri M, Neve RL, Deisseroth K, Han MH, Nestler EJ. Upotezaji wa aina maalum ya kiini cha udhibiti wa ishara za BDNF za mfano wa malipo ya kokeini. Sayansi. 2010; 330: 385-390. Doi: 10.1126 / science.1188472. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  42. Lobo MK, Nestler EJ. Kitendo cha kusawazisha striatal katika ulevi wa madawa ya kulevya: majukumu tofauti ya njia za moja kwa moja na zisizo za moja kwa moja za njia ya spiny. Mbele Neuroanat. 2011; 5: 41. Doi: 10.3389 / fnana.2011.00041. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  43. Lobo MK, Karsten SL, Grey M, Geschwind DH, Yang XW. Uwekaji-safu wa FACS ya utabiri wa dharura ya neuron ndogo katika akili za vijana na wazima wa panya. Nat Neurosci. 2006; 9: 443-452. doi: 10.1038 / nn1654. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  44. MacAskill AF, Kidogo JP, Cassel JM, Carter AG. Ushirikiano wa subcellular msingi wa njia maalum ya kuashiria katika mkusanyiko wa kiini. Nat Neurosci. 2012; 15: 1624-1626. doi: 10.1038 / nn.3254. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  45. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Jukumu muhimu la histone methyltransferase G9a katika utunzaji wa cocaine-ikiwa. Sayansi. 2010; 327: 213-216. Doi: 10.1126 / science.1179438. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  46. Mazei-Robison MS, Koo JW, Friedman AK, Lansink CS, Robison AJ, Vinish M, Krishnan V, Kim S, Siuta MA, Galli A, Niswender KD, Appasani R, Horvath MC, Neve RL, Worley PF, Snyder SH, Aliumia YL, Cheer JF, Han MH, Russo SJ, et al. Jukumu la kuashiria kwa mTOR na shughuli za neuroni katika marekebisho yaliyosababishwa na morphine katika eneo la sehemu ya tezi ya dopamine ya ventral. Neuron. 2011; 72: 977-990. Doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.012. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  47. McClung CA, Nestler EJ. Udhibiti wa kujielezea kwa jeni na thawabu ya cocaine na CREB na ΔFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  48. McDaid J, mbunge wa Graham, Napier TC. Methamphetamine iliyochochea unyeti inabadilisha tofauti za pCREB na ΔFosB katika mzunguko wa nguvu wa ubongo wa mamalia. Mol Pharmacol. 2006; 70: 2064-2074. doi: 10.1124 / mol.106.023051. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  49. Moratalla R, Vallejo M, Elibol B, Greybiel AM. D1 ya darasa-dopamine receptors inathiri ushawishi unaoendelea wa protini ya proteni zinazohusiana na fos katika striatum. Neuroreport. 1996; 8: 1-5. doi: 10.1097 / 00001756-199612200-00001. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  50. Muller DL, Unterwald EM. D1 dopamine receptors inasimamia uingizaji wa δFosB katika hali ya panya baada ya utawala wa morphine wa muda. J Theracol Exp Ther. 2005; 314: 148-154. Doi: 10.1124 / jpet.105.083410. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  51. Narayan S, Kass KE, Thomas EA. Matibabu ya haloperidol ya muda mrefu husababisha kupungua kwa usemi wa jeni zinazohusiana na myelin / oligodendrocyte katika ubongo wa panya. J Neurosci Res. 2007; 85: 757-765. Doi: 10.1002 / jnr.21161. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  52. Navarro M, Carrera MR, Fratta W, Valverde O, Cossu G, Fattore L, Chowen JA, Gomez R, del Arco I, Villanua MA, Maldonado R, Koob GF, Rodriguez de Fonseca F. mwingiliano wa kazi kati ya opioid na receptors za cannabinoid usimamizi wa dawa za kulevya. J Neurosci. 2001; 21: 5344-5350. [PubMed]
  53. Nelson AB, Hang GB, Grueter BA, Pascoli V, Luscher C, Malenka RC, Kreitzer AC. Ulinganisho wa tabia ya kutegemeana ya densi katika aina ya mwitu na hemizygous Drd1a na Drd2 BAC transgenic panya. J Neurosci. 2012; 32: 9119-9123. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0224-12.2012. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  54. Nicola SM. Kiini hujilimbikiza kama sehemu ya mzunguko wa hatua ya uteuzi wa basal ganglia. Saikolojia. 2007; 191: 521-550. doi: 10.1007 / s00213-006-0510-4. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  55. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. ΔFosB kwenye mkusanyiko wa kiini husimamia tabia ya kraftigare ya chakula na motisha. J Neurosci. 2006; 26: 9196-9204. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  56. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Uingiliaji wa δFosB katika muundo unaohusiana na thawabu ya ubongo baada ya kufadhaika sugu. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  57. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Njia tofauti za DeltaFosB zinazoingia katika ubongo na dawa za kulevya. Shinikiza. 2008; 62: 358-369. Doi: 10.1002 / syn.20500. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  58. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. ΔFosB inaelekeza kukandamiza kwa jini ya c-fos baada ya kufichua sugu ya amphetamine. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  59. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Mchanganuo mpana wa sheria ya chromatin na cocaine inaonyesha jukumu la riwaya kwa Sirtuins. Neuron. 2009; 62: 335-348. Doi: 10.1016 / j.neuron.2009.03.026. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  60. Robison AJ, Nestler EJ. Utaratibu wa maandishi na epigenetic ya ulevi. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 623-637. Doi: 10.1038 / nrn3111. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  61. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M, Wee S, Koob G, Turecki G, Neve R, Thomas M, Nestler EJ. Majibu ya tabia na ya kimuundo ya cocaine sugu yanahitaji kitanzi kinachojumuisha ΔFosB na protini kinase II ya kalsiamu / utulivu wa protini. J Neurosci. 2013; 33: 4295-4307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  62. Smith RJ, Lobo MK, Spencer S, Kalivas PW. Marekebisho yaliyosababishwa na cocaine katika D1 na D2 hukusanya neurons za makadirio (dichotomy sio lazima inayohusiana na njia za moja kwa moja na zisizo za moja kwa moja) Curr Opin Neurobiol. 2013; 23: 546-552. doi: 10.1016 / j.conb.2013.01.026. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  63. Solinas M, Thiriet N, El Rawas R, Lardeux V, Jaber M. Utajiri wa mazingira wakati wa hatua za mwanzo za maisha hupunguza tabia, athari ya neva, na athari ya Masiasa ya kokeini. Neuropsychopharmacology. 2009; 34: 1102-1111. Doi: 10.1038 / npp.2008.51. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  64. Sparta DR, Stamatakis AM, Phillips JL, Hovelsø N, van Zessen R, Stuber GD. Ubunifu wa nyuzi za macho ambazo haziingiliwi kwa operesheni ya muda mrefu ya optogenetic ya mizunguko ya neural. Nat Protoc. 2012; 7: 12-23. Doi: 10.1038 / nprot.2011.413. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  65. Stamatakis AM, STD ya Stuber. Uanzishaji wa pembejeo za habenula za nyuma kwa kitamba cha hali ya hewa ya ndani huhimiza uzuiaji wa tabia. Nat Neurosci. 2012; 24: 1105-1107. doi: 10.1038 / nn.3145. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  66. Stuber GD, Britt JP, Bonci A. moduli za Optogenetic za mizunguko ya neural ambayo inatafuta malipo. Saikolojia ya Biol. 2012; 71: 1061-1067. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.11.010. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  67. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, Deisseroth K, Tye KM, Lüscher C. GABA neurons ya gari la VTA lililo na mahali pa kupingana. Neuron. 2012; 73: 1173-1183. Doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.015. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  68. Teegarden SL, Bale TL. Kupungua kwa upendeleo wa lishe huongeza hisia za kuongezeka na hatari ya kurudi tena kwa lishe. Saikolojia ya Biol. 2007; 61: 1021-1029. doi: 10.1016 / j.biopsych.2006.09.032. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  69. Tsai HC, Zhang F, Adamantidis A, Stuber GD, Bonci A, de Lecea L, Deisseroth K. Phasic kurusha katika neuropu ya dopaminergic inatosha kwa hali ya tabia. Sayansi. 2009; 324: 1080-1084. Doi: 10.1126 / science.1168878. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  70. Tye KM, Mirzabekov JJ, Warden MR, Ferenczi EA, Tsai HC, Finkelstein J, Kim SY, Adhikari A, Thompson KR, Andalman AS, Gunaydin LA, Witten IB, Deisseroth K. Dopamine neurons moderate neural encoding and expression of yanayohusiana tabia. Asili. 2013; 493: 537-541. Doi: 10.1038 / nature11740. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  71. van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. Uanzishaji wa neuroni za VTA GABA usumbufu utumiaji wa tuzo. Neuron. 2012; 73: 1184-1194. Doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.016. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  72. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ahnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, et al. ΔFosB katika duru za ujira wa ubongo zinaingiliana na kukabiliana na mafadhaiko na majibu ya kukandamiza. Nat Neurosci. 2010; 13: 745-752. doi: 10.1038 / nn.2551. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  73. Vialou V, Cui H, Perello M, Mahgoub M, Yu HG, Rush AJ, Pranav H, Jung S, Yangisawa M, Zigman JM, Elmquist JK, Nestler EJ, Lutter M. jukumu la ΔFosB katika mabadiliko ya kimetaboliki ya calorie. . Saikolojia ya Biol. 2011; 70: 204-207. doi: 10.1016 / j.biopsych.2010.11.027. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  74. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iñiguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños-Guzmán CA. Ushawishi wa DeltaFosB kwenye kiini hujilimbikiza kwenye tabia ya asili inayohusiana na thawabu. J Neurosci. 2008; 28: 10272-10277. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  75. Warden MR, Selimbeyoglu A, Mirzabekov JJ, Lo M, Thompson KR, Kim SY, Adhikari A, Tye KM, Frank LM, Deisseroth K. makadirio ya neuroni ya msingi ya cortex-brainstem ambayo hudhibiti kukabiliana na changamoto ya tabia. Asili. 2012; 492: 428-432. Doi: 10.1038 / nature11617. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  76. Watabe-Uchida M, Zhu L, Ogawa SK, Vamanrao A, Uchida N. Uwekaji wa ramani ya akili nzima ya pembejeo moja kwa moja kwa neuron ya dopamine ya tumbo. Neuron. 2012; 74: 858-873. Doi: 10.1016 / j.neuron.2012.03.017. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  77. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB inasimamia kazi ya gurudumu. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  78. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. UctionFosB kujiingiza katika cortex ya orbitofrontal inaingiliana na uchungu wa dysfunction ya cocaine-ikiwa. J Neurosci. 2007; 27: 10497-10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  79. IB Wired, Steinberg EE, Lee SY, Davidson TJ, Zalocusky KA, Brodsky M, Yizhar O, Cho SL, Gong S, Ramakrishnan C, Stuber GD, Tye KM, Janak PH, Deisseroth K. Recombinase-dereva wa mistari ya zana: zana, Mbinu, na programu ya optogenetic ya kuimarisha dopamine-Mediated. Neuron. 2011; 72: 721-733. Doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.028. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  80. Yizhar O, Fenno LE, Davidson TJ, Mogri M, Deisseroth K. Optogenetics katika mifumo ya neural. Neuron. 2011; 71: 9-34. Doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.004. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  81. Yoneyama N, Crabbe JC, Ford MM, Murillo A, Finn DA. Matumizi ya hiari ya ethanol katika aina ya panya za 22 zilizowekwa ndani. Pombe. 2008; 42: 149-160. Doi: 10.1016 / j.alcohol.2007.12.006. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
  82. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, mbunge wa Cassidy, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Jukumu muhimu kwa DeltaFosB katika kiini hujilimbikiza katika hatua ya morphine. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. doi: 10.1038 / nn1636. [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]