Kugundua mabadiliko ya molekuli katika methamphetamini iliyoanzishwa na Fos-expressing neurons kutoka kwenye kamba moja ya kukimbia kwa panya kwa kutumia ufuatiliaji wa kiini uliofanywa na fluorescence (FACS) (2013)

Methamphetamine na madawa mengine kuamsha sehemu ndogo ya neurons zote katika ubongo. Tulikuwa na maendeleo ya njia ya kusambaza kiini (FACS) iliyochaguliwa kwa uendeshaji wa kiini (fluorescence) ili kutafsiri mabadiliko ya Masi ikiwa huchaguliwa katika neurons iliyoanzishwa inayoeleza Fos alama ya shughuli za Fos. Hata hivyo, njia hii inahitaji kuunganisha sampuli kutoka panya nyingi. Sasa tunaelezea njia iliyobadilishwa ya FACS ili kutafsiri mabadiliko ya molekuli katika neurons za kujifungua za fos-zinazoelezea Fos kutoka kwenye panya moja kwa kutumia mkakati wa kuimarisha multiplex.

Fos na NeuN (marker neuronal) immunohistochemistry zinaonyesha kwamba 5-6% ya neurons ya dorsa striatum ilianzishwa minara ya 90 baada ya sindano kali za methamphetamine (5 mg / kg, ip) wakati chini ya 0.5% ya neurons ilianzishwa na sindano za salini.

Tulitumia FACS kutenganisha neurons zilizosajiliwa na NeuN katika neurons za Fos-chanya na Fos-hasi na kutathmini mRNA kujieleza kwa kutumia RT-qPCR kutoka kama vile neurons tano Fos-chanya. Methamphetamine iliongeza ongezeko la 3-20 ya jeni la haraka la jeni la awali, homer-2, c-fos, fosB, na isoforms (ΔfosB na isoform ya riwaya ΔfosB-2) katika fos-chanya lakini sio Fos-negative neurons. Uvumbuzi wa haraka wa jeni mRNA ulikuwa ni 10 mara ya chini au haipo wakati unapotathminiwa katika sampuli zisizosafirishwa kutoka homogenates moja ya dorsa. Njia yetu iliyobadilishwa inafanya iwezekanavyo kujifunza mabadiliko ya kipekee ya Masi katika neurons yaliyoamilishwa na madawa ya kulevya au yanayohusiana na madawa ya kulevya katika mifano ngumu ya kulevya.

Methamphetamine na madawa mengine kuamsha sehemu ndogo ya neurons zote katika ubongo. Sisi hapa tunatoa ripoti ya kuboresha njia ya kubadili mabadiliko ya Masi ikiwa huchaguliwa katika neurons iliyoanzishwa inayoelezea Fos alama ya shughuli za shughuli. Tulitumia FACS pamoja na kupitishwa kwa PCR iliyosababishwa ili tathmini ya kujieleza kwa jeni ya methamphetamine iliyosababishwa kutoka kwa wachache kama neurons za 5 za Fos-zinazoonyesha kutoka kwenye kamba moja ya kupiga panya ya panya. Methamphetamine iliongeza ongezeko la 3-20 mara kwa mara za jeni za mapema (IEGs) katika fos-chanya lakini sio fos-negative neurons. Upimaji wa PCR uliotengwa hufanya uwezekano wa kujifunza mabadiliko ya molekuli ya pekee katika neurons iliyoanzishwa na dawa za kulevya au zinazohusiana na madawa ya kulevya katika mifano ngumu ya kulevya.

Imechapishwa 2013. Makala hii ni kazi ya Serikali ya Marekani na iko katika uwanja wa umma nchini Marekani.