Jonathan P. Fadok, 1,2 Tavis MK Dickerson, 2 na Richard D. Palmiter2 *
J Neurosci. Kitabu cha Mwandishi; inapatikana katika PMC 2010 Machi 9.
Imechapishwa katika fomu ya mwisho iliyopangwa kama:
J Neurosci. 2009 Septemba 9; 29 (36): 11089-11097.
toa: 10.1523 / JNEUROSCI.1616-09.2009.
Programu ya Uzamili ya 1 katika Neurobiolojia na Tabia, Chuo Kikuu cha Washington, Seattle, WA 98195
Idara ya Biochemistry ya 2 na Taasisi ya Matibabu ya Howard Hughes, Chuo Kikuu cha Washington, Seattle, WA, 98195
* Mawasiliano inapaswa kushughulikiwa na: Richard D. Palmiter, HHMI na Idara ya Biolojia, Box 357370, Chuo Kikuu cha Washington, Seattle, WA 98195. Barua pepe: [barua pepe inalindwa]
Toleo la mwisho la mchapishaji la nakala hii linapatikana bure kwa J Neurosci
Angalia makala nyingine katika PMC ambayo inasema makala iliyochapishwa.
abstract
Dopamine (DA) inahusishwa na tabia nyingi, ikiwa ni pamoja na kazi ya magari, utambuzi, na usindikaji wa malipo; hata hivyo, jukumu la DA katika usindikaji wa hofu bado ni sawa. Ili kuchunguza jukumu la DA katika kujifunza kwa hofu, panya za dopamini (DD) zilijaribiwa katika mtazamo wa hofu inayotokana na hofu. Dawa ya awali inaweza kurejeshwa katika panya za DD kupitia utawala wa 3, 4-dihydroxy-L-phenylalanine (L-Dopa), na hivyo kuruhusu tathmini ya usindikaji wa hofu kwa hali ya DA-iliyofunguliwa au isiyofanywa. Hofu ya uwezekano wa hofu haikuwepo katika panya za DD lakini inaweza kurejeshwa na utawala wa L-Dopa mara baada ya hali ya hofu. Urekebishaji wa virusi uliochaguliwa wa virusi wa DA katika eneo la kijiji kikubwa kikamilifu kilichorejeshwa na hofu ya kujifunza katika panya za DD na kurejeshwa kwa awali ya DA kwa DA neurons zinazoelezea amygdala ya msingi iliyorejeshwa kumbukumbu ya muda mfupi, lakini si kumbukumbu ya muda mrefu au kuhimizwa kwa mshtuko. Tunaonyesha pia kuwa receptor DA D1 (D1R) na D2 kama receptors ni muhimu kwa kujifunza hofu ya kutegemea uchunguzi.
Matokeo haya yanaonyesha kuwa DA anayefanya kazi nyingi katika mikoa ya lengo nyingi husababisha utulivu wa kumbukumbu ya hofu.
Maneno: Dopamine, hofu, hofu inayotokana na hofu, amygdala, dopamine D1 receptor, dopamine receptor D2
kuanzishwa
Daur ya neuromodulator ni muhimu kwa tabia ya kujifunza na kupata madawa ya kulevya (Schultz, 2002; Wise, 2004), na ushahidi wa kusanyiko unaonyesha kwamba DA inaweza pia kuwa muhimu kwa kujifunza kuhusiana na hofu (Lamont na Kokkinidis, 1998; Guarraci et al ., 1999; Greba na Kokkinidis, 2000; Guarraci et al., 2000; Greba et al., 2001; Pezze na Feldon, 2004; de Oliveira et al., 2006). DA neurons ya midbrain ya mradi mradi wa sehemu za ubongo muhimu kwa ajili ya kujifunza hofu, na viwango vya DA katika maeneo haya ya ubongo huongezeka wakati wa matukio ya aversive (Abercrombie et al., 1989; Kalivas na Duffy, 1995; Doherty na Gratton, 1997; Inglis na Moghaddam , 1999). Zaidi ya hayo, baadhi ya neurons ya DA ya midbrain huongeza viwango vyao vya kupiga risasi kwa vizuizi vya kutisha na maelekezo ya kutabiri (Guarraci na Kapp, 1999; Horvitz, 2000; Joshua et al., 2008). Zaidi ya hayo, DA imeonyeshwa ili kuwezesha uwezekano wa muda mrefu, muhimu ya neural correlate ya kumbukumbu, katika maeneo muhimu ya kujifunza hofu, kama vile hippocampus na amygdala (Bissiere et al., 2003; Lemon na Manahan-Vaughan, 2006; Swant na Wagner, 2006).
Licha ya mafanikio yanayohusiana na physiologia ya neuron ya DA ya hofu, jukumu sahihi la DA na mapokezi yake ya ujuzi katika kujifunza kuhusiana na hofu bado haijafanywa. Majeraha ya wapinzani wa D1R kama mfumo, au katika amygdala, yameonyeshwa kuzuia upatikanaji au maelezo ya kujifunza kuhusiana na hofu; hata hivyo, wengine wameonyesha kuwa madawa haya hayana athari (Guarraci et al., 1999; Greba na Kokkinidis, 2000; de Oliveira et al., 2006). Zaidi ya hayo, agonists kama D1R wameonyeshwa kwa kuongeza au hawana athari juu ya hali ya hofu (Guarraci et al., 1999; Greba et al., 2000; Inoue et al., 2000; de Oliveira et al., 2006). Tofauti za awali zimepatikana katika tafiti za kutumia agonists au wapinzani kwa receptors D2R kama vile, 2000; Tofauti hizi zinaweza kutokana na mbinu za tabia, madhara ya tegemezi ya sindano ya madawa, au tofauti ya uchaguzi wa mawakala wa dawa. Kwa mfano, wapinzani wa DA wanapata tofauti sana katika uamuzi wao, na wakati baadhi ya tafiti zinaweza kupigana zaidi na kupokeza D2001 receptors, wengine wanaweza kuwa zaidi kupinga D2005, D2006, na D2 receptors (Missale et al., 2).
Ili kufafanua jukumu la DA katika kujifunza kuhusiana na hofu, tulitumia panya ambazo hazikuwa na DA (DD panya), pamoja na panya ambazo hazipatikani D1R au receptors DA D2 (D2R), na kuzijaribu kwa mtazamo wa hofu inayotokana na hofu. Hofu inayotokana na hofu ni mtazamo wa hali ya Pavlovian-hofu ambapo msukumo wa neutral huongeza kuongezeka kwa majibu ya mshtuko wa acoustic kufuatia jozi mbili na koti (Koch, 1999). Hofu ya uwezekano wa hofu ni mtazamo bora kwa masomo haya kwa sababu haitegemei tathmini ya tabia ya kufungia, ambayo ni vigumu kupima katika panya za DD hypoactive (Zhou na Palmiter, 1995). Kwa sababu panya za DD zinaweza kusomwa kwa hali ya DA-iliyofafanuliwa au hali ya DA inayowapa fursa nzuri ya kujifunza nafasi ya DA katika kujifunza na kuunda kumbukumbu. Zaidi ya hayo, kutumia utoaji wa virusi wa urekebishaji wa Cre, kuashiria DA kunaweza kurejeshwa kwa mikoa maalum kwa kuanzisha tena upungufu wa panya ya DD (Hnasko et al., 2006). Urejeshaji wa DA kwa maeneo maalum ya lengo huwezesha tathmini ya maeneo ya ubongo yaliyowekwa na DA kuashiria wakati wa hali ya hofu.
Vifaa na mbinu
Wanyama na matibabu
Panya za DD zilizalishwa kama ilivyoelezwa (Hnasko et al., 2006). Kwa kifupi, DD (Thfs / fs; DbhTh / +) panya hubeba alleles mbili zisizo za kazi tyrosine hydroxylase (Th) alleles, ambazo hazikuwezeshwa kupitia kuingizwa kwa jeni la neomycin (NeoR) likiwa na maeneo ya P lox kwenye intron ya kwanza ya Th gene . Panya hizi pia hubeba moja ya dopamini ya β-hydroxylase (Dbh) allele, na Dbh moja inakabiliwa na kuingizwa kwa lengo la jeni la Th. Kudhibiti wanyama kubeba angalau moja ya Th inakamilika na moja ya ndani ya Dbh allele. Ngazi za catecholamini zisizo za dopaminergic ni za kawaida katika wanyama wa DD na viwango vya catecholamines zote ni kawaida kwa wanyama kudhibiti (Zhou na Palmiter, 1995; Szczypka et al., 1999). Panya zilihifadhiwa kwenye mchanganyiko wa C57BL / 6 X 129 / Sv asili ya maumbile. Kutokana na hypophagia kali, panya za DD zilijeruhiwa kila siku (ip) na L-Dopa kwenye 50 mg / kg kwa kiasi cha 33 μl / g (Zhou na Palmiter, 1995), kuanzia siku ya baada ya kuzaa 10. Vidonge hivi vinarejesha kazi ya DA kwa 8 kwa 10 hr (Szczypka et al., 1999). Knockout ya D1R (KO) na panya za D2R KO zimeelezwa (Drago et al., 1994; Kelly et al., 1997). Matatizo hayo yote yalihifadhiwa kwenye background ya C57BL / 6. Kutokana na upunguzaji wa ukuaji katika panya za D1R KO, walimwagilia kwa wiki nne, na kisha wakalishwa chow iliyohifadhiwa ili kukuza ukuaji. Wanyama wote walikuwa na genotyped na uchambuzi wa PCR. Panya za kiume na za kiume zilikuwa zikijaribu kupima tabia kati ya miezi ya 2-5 miezi. Vipande vyote viliwekwa chini ya 12: mzunguko wa 12 (mwanga: giza) katika mazingira ya kudhibiti joto na chakula (5LJ5; Chakula cha PMI, St. Louis, MO) na maji inapatikana ad libitum. Majaribio yote ya tabia yalifanyika wakati wa mzunguko wa mwanga. Panya zote zilipatiwa kwa mujibu wa miongozo iliyoanzishwa na Taasisi za Afya za Taifa na Chuo Kikuu cha Washington Chakula cha Wanyama na Kamati ya Matumizi
Ili kutathmini kama vipokezi vingine vya D2 ni muhimu kwa ajili ya kujifunza hofu, panya za D2R KO zilisimamiwa D2-kama antagonist eticlopride (Sigma, St. Louis, MO) katika 0.5 mg / kg (ip). Eticlopride ilipasuka katika salini ya 0.9% na ilitolewa kwa kiasi cha mwisho cha 10 μl / g. Vipande vya aina ya D2R (WT) vilitumiwa na gari.
Apparatus
Vipengele vya kuondokana na sauti (SR-Lab, San Diego Instruments, San Diego, CA) vilikuwa vinapimwa kupima vikwazo vilivyotangulia, majibu ya mshangao, na hofu inayotokana na hofu. Kwa majibu ya mwanzoni, masomo ya 65 1-msec yalichukuliwa, kuanzia mwanzo wa mapigo. Ili kupima majibu ya kuvua, masomo ya 500 XMUMX-msec yalichukuliwa, kuanzia mwanzo wa mshtuko. Upeo wa kilele cha majibu ulitumiwa kuhesabu kuzuia uharibifu, majibu ya mshangao, mshtuko wa kuogopa, na usumbufu wa kutisha. Sauti ya kelele nyeupe ilitolewa na msemaji wa juu-frequency ulio kwenye dari ya chumba. Sauti ya sauti ilihifadhiwa kwa kiwango cha mara kwa mara cha 1 dB. Viwango vya sauti vilipimwa katika decibels (kiwango) kwa kutumia msomaji wa kiwango cha sauti (RadioShack, Fort Worth, TX). Kitengo cha calibration kilitumiwa ili kuhakikisha utimilifu wa masomo ya majibu ya mshangao (San Diego Instruments, San Diego, CA). Nuru ya 65-watt ilikuwa imewekwa kwenye ukuta wa nyuma wa sanduku la kushangaa kwa matumizi kama cue.
Swala za majibu ya mwanzo
Kufuatia kipindi cha kawaida cha minne ya 5, wanyama waliwasilishwa na mfululizo wa majaribio saba na ngazi za sauti zinazoongezeka: kutoka 80 hadi 120 dB, na ITI ya sekunde ya 30. Mfululizo huu uliwasilishwa mara 10 kwa jumla ya majaribio ya 70. Katika majaribio yote, isipokuwa majaribio ya wazi ambayo hakukuwa na sauti, pigo la sauti lilikuwa 40 msec.
Kuzuia kabla ya vurugu
Wanyama walipewa kipindi cha muda wa 10 baada ya masomo ambayo yaliwasilishwa na 5 40-msec, 120-dB, majaribio ya pigo-peke yake. Panya kisha ziliwasilishwa na majaribio ya 50 ya majaribio ya mshtuko wa pekee, mojawapo ya majaribio matatu (5, 10, na 15-dB juu ya background), au jaribio la wazi ambalo hakuwa na kuchochea kwa sauti. Kipindi cha intertrial (ITI) chache cha 15 (sekunde 5-25). Jaribio la kushangaza lilikuwa na 40-msec, 120-dB pigo la kelele nyeupe. Majaribio yaliyojitokeza yalikuwa na muda wa 20-msec prepulse ya 70, 75, au 80-dB kiwango, kilichopita kabla ya 40-msec 120-dB pulse na 100 msec. Kuzuia maambukizi ilifanyika kwa kila ngazi ya kuenea kwa kutumia fomu ifuatayo:% inhibition = [(wastani wa majibu ya mshangao juu ya majaribio ya kutangulia / wastani wa jibu la kutisha juu ya jaribio la pigo-pekee) × 100]. Panya za DD zilijaribiwa katika hali ya DA iliyofunguliwa, 18-24 hr ifuatayo sindano ya L-Dopa.
Hofu inayoweza kutisha (siku ya 7-paradigm)
Siku ya 1 (msingi), ifuatayo kipindi cha muda wa 5, panya zilipewa mfululizo wa majaribio ya 20 ya pseudo-randomly, kupasuliwa sawasawa kati ya hali ya cue na hakuna-cue. Kwa majaribio yasiyo ya cue, wanyama waliwasilishwa na 40-msec, 105-dB acoustic pulse. Kwa majaribio ya cue, wanyama waliwasilishwa kwa cue ya 10-sec, ambayo ilizimishwa na 40-msec, 105-dB pulse. Mfumo wa ITI uliofanyika wastani wa 120 (umbali wa 60 hadi sekunde 180).
Mafunzo yalitokea siku 2, 4, na 6. Ufuatiliaji wa muda wa dakika ya 10, panya zilipewa maonyesho ya 10 ya mwanga wa cue, ambao umekamilika na 0.2-mA, na 0.5-sec footshock. Mfumo wa ITI uliofanyika wastani wa 120 (umbali wa 60 hadi sekunde 180). Vikao vya mtihani vilifanyika siku 3, 5, na 7 na vilifanana na kikao cha msingi kilichoelezwa hapo juu. Panya ya DD yalikuwa katika hali ya DA iliyopungua, 18 hadi 24 hr baada ya sindano yao ya mwisho ya L-Dopa, wakati wa msingi, mafunzo, na vipindi vya kupima. L-Dopa ilikuwa injected baada ya vikao vya mafunzo kama ilivyoonyeshwa katika hadithi za takwimu. Fomu ifuatayo ilitumiwa kuhesabu janga la kutisha:% potentiation = [(wastani wa majibu ya majaribio ya cue / wastani wa majibu ya majaribio yasiyo ya cue-1) × 100].
Hofu inayoweza kutisha (siku ya 3-paradigm)
Siku 1 na 3 (msingi na mtihani) wa dhana hii zilikuwa sawa na wale walioelezwa kwa mtazamo wa hofu ya kutisha wa 7-siku. Siku ya 2 (mafunzo), panya zilipokea jozi za 30 za mwanga wa 10-cue mwanga na 0.2-mA, 0.5-sec footshock. Maana ya ITI yalikuwa sekunde ya 120 (sekunde 60 hadi sekunde 180). Panya za DD zilikuwa za DA wakati wa msingi, mafunzo, na kupima.
Kumbukumbu ya muda mfupi
Vikao vya msingi na vipimo vya mtihani vilifanana na wale walioelezwa kwenye paradigm ya siku ya 7. Siku ya 2, ifuatayo kipindi cha kawaida cha minne ya 5, panya zilipewa jozi 30 za mwanga wa 10-sec, ambayo imekamilika kwa sekunde ya 0.5, 0.2-mA inakabiliwa. Kiwango cha ITI kilichopungua kwa 120 (umbali wa 60 hadi 180). Kufuatia mafunzo, panya ziliwekwa kwenye mabwawa yao ya nyumbani kwa minara ya 10 kabla ya kupima. Kumbukumbu ya muda mfupi ilipimwa kwa kutumia fomu hiyo hiyo inayotumiwa kwa hofu inayotokana na hofu.
Sensitization ya Mshtuko
Majibu kwa hali ya kukataa wakati wa kipindi cha muda mfupi cha kumbukumbu za msingi na vipimo vya kupimwa vilikuwa na wastani kwa kila mnyama na formula hii ifuatayo ilihesabu kuhamasishwa kwa mshtuko:% uhamasishaji = [(wastani wa jibu la mshangao wakati wa kupima / majibu ya kawaida ya mshangao juu ya msingi- 1) × 100].
Urekebisho wa Cre recombinase-mediated wa Th gene kazi
Isoflurane (1.5-5%) panya za anesthetized ziliwekwa kwenye chombo cha stereotaxic (David Kopf Instruments, Tujunga, CA). Kwa ajili ya marejesho ya Th gene inafanya kazi katika eneo la kijijini, virusi vya AAV1-Cre-GFP vilivyoandikwa (vyema katika 1.2 × 1012 chembe / ml) vilikuwa vimejitokeza bilaterally ndani ya midbrain ya kati (kuratibu mm: 3.5 posterior kwa Bregma, 0.5 imara kwa midline , Mstari wa 4.5 kwa Bregma; 0.5 μl / hemisphere). Kwa marejesho maalum ya BLA DA, virusi vya CV2-Cre vilivyotambuliwa (vyema katika vipengele vya 2.1 × 1012 / ml) vilikuwa vimejumuishwa bilaterally (kuratibu mm: 1.5 posterior kwa Bregma, 3.25 imara kwa midline, 5 ventral kwa Bregma; 0.5 μl / hemisphere) . Maelezo ya kina ya vectors wote virusi yamechapishwa (Hnasko et al., 2006; Zweifel et al., 2008). Virusi zilijeruhiwa kwa kipindi cha muda wa 10 kwa kutumia sindano ya sindano ya 32-sindano (Hamilton, Reno, NV) iliyounganishwa na pampu ndogo ya infusion (WPI, Sarasota, FL).
Immunohistochemistry
Kufuata anesthesia na 50 mg / ml pentobarbital sodiamu (0.2-0.3 ml / wanyama), panya walikuwa transcardially perfused na phosphate-buffered saline, ikifuatiwa na XMUMX% paraformaldehyde katika phosphate-buffered saline. Ubongo uliogawanyika ulitengenezwa baada ya usiku kwa XMUMX% paraformaldehyde, cryoprotected katika 4% sucrose katika phosphate-buffered saline, na kisha haraka-waliohifadhiwa katika isopentane. Sehemu za kondomu za bure (4 μm) zilikuwa zimehifadhiwa na panya au kupambana na TH (30: 30, Chemicon) au anti-TH (1: 1000, Chemicon). Immunoflourescence ilifikia kwa kutumia CyBNXX-au Cy1-conjugated antibodies ya IgG (2000: 2, Jackson ImmunoResearch). Sehemu zilizobakiwa zimewekwa kwenye slides, zimefungwa, na kupigwa picha na darubini yenye nguvu yenye nguvu (Nikon).
Uchambuzi wa Takwimu
Uchunguzi uliofanywa ulijumuisha hatua za mara kwa mara na njia moja ya ANOVA, baada ya hoja ya Fisher, na majaribio ya T ya Mwanafunzi kama ilivyoelezwa katika matokeo. Uchambuzi wa takwimu ulifanyika kwa kutumia programu ya Statistica (Statsoft, Tulsa, Oklahoma).
Matokeo
Panya za DD zimekuwa na majibu ya mshangao mkali wa acoustic na kuzuia kawaida ya kuzuia
Mshangao unaotokana na hofu unahitaji majibu ya acoustic ya startle na kupigwa kwa sensorimotor. Kuamua kama jibu la mshtuko wa acoustic hubadilishwa kwa kutokuwepo kwa DA, majibu ya panya za DD zilizopoteza DA (18 hadi 24 hr baada ya L-Dopa) kwa kiwango cha sauti nyingi za decibel zilipimwa na ikilinganishwa na udhibiti (Kielelezo 1A). Vipimo vya mara kwa mara ANOVA haikuonyesha athari kuu ya genotype na hakuna mwingiliano mkubwa kati ya bandia na kiwango cha sauti.
Kielelezo 1
DA ni muhimu kwa kujifunza mshtuko unaoweza kusababishwa na woga. A, Mwitikio wa mshtuko wa kusikika wa udhibiti (n=10, miraba nyeusi) na panya DD (n=10, miraba iliyo wazi) kwa milipuko tofauti ya sauti. Majibu yanaripotiwa katika vitengo vya kiholela. B, Kizuizi cha Prepulse kilijaribiwa kwa nguvu 3 tofauti za prepulse katika udhibiti (n=10, pau nyeusi) na panya DD (n=10, pau wazi). Nyota huashiria p<0.05, hatua zinazorudiwa ANOVA. C, Mpangilio unaoonyesha dhana ya mshtuko inayowezekana ya siku 7. Katika siku za awali na za majaribio, panya walipokea mawasilisho 10 ya no-cue (uwasilishaji wa muda wa 40-msec wa mpigo wa kushtua wa 105-dB) na mawasilisho 10 ya majaribio ya cue (sekunde 10 ya nuru ya kumaliza pamoja na mshindo wa kushtukiza) kwa njia ya uwongo. agizo. Katika siku za mafunzo, panya walipokea jozi 10 za alama ya mwanga ya sekunde 10 ambayo ilimaliza pamoja na muda wa sekunde 0.5, mshtuko wa miguu wa 0.2-mA. Mafunzo yalitathminiwa katika siku za majaribio kama asilimia ya uwezekano kwenye majaribio ya vidokezo ikilinganishwa na majaribio yasiyo ya kidokezo. D, DD panya (n=10, baa wazi) waliopewa L-Dopa saa 3 baada ya mafunzo (siku ya 2 na 4) hawakujifunza (Mtihani wa 1 na 2). Hata hivyo, panya wa DD walipodungwa mara tu baada ya mafunzo (siku ya 6) walionyesha mshtuko mkubwa unaoweza kuwa na hofu (Jaribio la 3). Nyota huashiria p<0.05, hatua zinazorudiwa ANOVA. E, Vipimo vya utendakazi wa mshtuko wakati wa vipindi vya mafunzo (Dhibiti n=10, pau nyeusi; DD n=10, pau wazi). Majibu yanaripotiwa katika vitengo vya kiholela. F, Kiratibu inayoonyesha dhana ya mshtuko inayowezekana ya siku 3 inayotumiwa kubainisha kipindi muhimu cha wakati ambapo DA ni muhimu. Jozi zote 30 za mshtuko zilitolewa siku moja ya mafunzo na panya wa DD walitibiwa na L-Dopa mara moja, saa 1, au 3 hr baada ya mafunzo. G, Udhibiti pekee (n=8, pau nyeusi thabiti, C) na panya wa DD waliodungwa mara tu baada ya mafunzo (n=7, milia wima, saa 0) walionyesha mshtuko unaoweza kuwa na hofu siku ya jaribio. Kiwango hiki cha mshtuko unaoweza kuwa na hofu kilikuwa cha juu zaidi kuliko kile kinachoonekana kwenye panya wa DD waliopewa L-Dopa 1hr (n=6, milia ya mshazari) au saa 3 (n=6, baa zilizo wazi) baada ya mafunzo. Nyota huashiria p<0.05 ikilinganishwa na msingi, Fisher post-hoc.Thamani zote zilizoripotiwa ni maana ± SEMDA-depleted DD na panya udhibiti pia walijaribiwa katika dhana ya kuzuia prepulse, ambayo ni kawaida kutumika kugundua upungufu katika sensorimotor mlango. Kizuizi cha prepulse kiliimarishwa katika panya wa DD (Mchoro 1B; hatua zinazorudiwa ANOVA, genotype: F1, 18=5.37; p<0.05; hakuna genotype muhimu kwa mwingiliano wa kiwango cha prepulse iligunduliwa). Data hizi zinaonyesha kuwa panya wa DD hawana upungufu katika majibu ya mshtuko au hupungua kwa njia za kupata sensorimotor wakiwa katika hali ya upungufu wa DA na kuhalalisha matumizi yao katika majaribio ya mshtuko yanayowezekana na hofu.
Dopamine ni muhimu kwa wakati mgumu wa kujifunza hofu inayoweza kutisha
Ili kubaini kama DA ni muhimu kwa ajili ya kujifunza kazi ya kudhibiti hofu, DD na panya wa kudhibiti waliwekewa dhana ya mshtuko inayowezekana ya siku 7 (Mchoro 1C). Panya wa DD walifunzwa na kujaribiwa katika hali ya DA-depleted. Ilipojaribiwa saa 24 baada ya mafunzo, panya wa kudhibiti walionyesha mshtuko unaoweza kuwa na hofu baada ya kipindi kimoja cha mafunzo ambacho hakikuonekana kwenye panya DD (Mchoro 1D; hatua zinazorudiwa ANOVA, genotype, F1, 18=7.4590, p<0.05). Hata baada ya kipindi cha ziada cha mafunzo, panya wa DD walishindwa kueleza mshtuko unaoweza kusababishwa na woga, ilhali panya wa kudhibiti waliendelea kueleza kujifunza kwa nguvu. Inafurahisha, walipopewa L-Dopa mara tu baada ya mafunzo siku ya 6, panya wa DD walionyesha mshtuko unaoweza kuhofiwa ambao ulikuwa wa juu zaidi kuliko msingi (ANOVA F1 ya njia moja, 18=9.1999, p<0.01) na haukutofautiana na viwango vya udhibiti ( Kielelezo 1D). Shughuli ya mshtuko katika siku zote za mafunzo ya DD na panya wa kudhibiti hazikuwa tofauti sana kati ya aina za jeni katika siku yoyote ya mafunzo, ikionyesha kuwa nakisi ya kujifunza katika panya wa DD haikutokana na kutoweza kuhisi mshtuko wa miguu (Mchoro 1E). Ili kubainisha wakati muhimu wa dirisha. kwa hatua ya DA, utafiti wa ziada ulitofautisha muda wa usimamizi wa L-Dopa. DD na panya wa kudhibiti walipewa kipindi cha mafunzo kilichojumuisha jozi 30 za mshtuko wa mwanga (Kielelezo 1F) na kisha kudungwa L-Dopa mara moja, saa 1, au 3 baada ya mafunzo na walijaribiwa saa 24 baadaye. Panya wa DD waliodungwa mara tu baada ya mafunzo walionyesha mshtuko mkubwa unaoweza kusababishwa na woga siku ya jaribio, sawa na ule wa vidhibiti, ilhali panya wa DD waliodungwa kwa L-Dopa saa 1 au 3 baada ya mafunzo hawakuonyesha kujifunza (Mchoro 1G; hatua zinazorudiwa ANOVA; matibabu × kikao F3, 23=5.1032, p<0.01). Data hizi zinaonyesha kuwa DA ni muhimu ndani ya muda mfupi wa kujifunza katika dhana ya mshtuko inayowezekana na hofu. Walakini, DA sio lazima kwa usemi wa kumbukumbu ya woga kwani wanyama wa DD walijaribiwa kila wakati bila DA. Zaidi ya hayo, kutokuwepo kwa DA hakuathiri utendakazi wa mshtuko.
D1R ni muhimu kwa hofu inayotokana na hofu
Ili kugundua ni vipokezi vipi vya DA vinavyohitajika kwa mshtuko unaoweza kusababishwa na woga, tulichambua kwanza panya wa D1R KO. D1R KO na udhibiti, panya wa aina ya mwitu (WT) walijaribiwa katika viwango vingi vya nguvu ya mshtuko, kama ilivyoelezewa kwa panya wa DD (Mchoro 2A). Hakukuwa na tofauti kubwa kati ya panya wa D1R KO na WT katika kiwango chochote cha sauti kilichojaribiwa, ikionyesha kwamba panya wa D1R KO wana itikio kamili la mshtuko wa akustisk. Kwa kukubaliana na tafiti za awali, tumeona kizuizi kisichobadilika cha prepulse katika panya wa D1R KO (Ralph-Williams et al., 2002). Ilipojaribiwa katika dhana ya mshtuko inayowezekana ya siku 7, panya wa D1R KO walishindwa kueleza jinsi walivyojifunza katika siku zozote za majaribio (Mchoro 2B; hatua zinazorudiwa ANOVA genotype × siku ya majaribio F3, 48=6.28; p<0.01), ilhali WT panya walikuwa na mshtuko mkubwa unaoweza kuhofiwa katika siku za majaribio 2 na 3 (p<0.05 na p<0.01, udhibiti wa msingi dhidi ya mtihani wa 2 na 3, mtawalia, Fisher baada ya hoc). Panya wa D1R KO walikuwa na utendakazi mkubwa wa mshtuko kuliko WT katika siku zote tatu za mafunzo (Mchoro 2C; hatua zinazorudiwa ANOVA, genotype F1, 16=10.18; p<0.01; hakuna genotype muhimu × siku ya mafunzo ilizingatiwa). Kwa hivyo, ingawa panya wa D1R KO wameinua mwitikio wa mshtuko wa miguu ikilinganishwa na panya wa WT, wameathiri kwa kiasi kikubwa mshtuko unaosababishwa na hofu, hata baada ya siku 3 za mafunzo. Data hizi zinaonyesha kasoro ya kujifunza kwa wanyama wa D1R KO na kuhusisha D1R katika kupatanisha athari za DA katika hali ya uwoga inayotegemewa. A, Mwitikio wa mshtuko wa sauti wa D2R WT (n=1, miraba nyeusi) na KO (n=1, miraba wazi) panya. B, Matokeo ya dhana ya hofu inayowezekana ya siku 9 na panya wa D9R. Panya wa D7R WT (n=1, pau nyeusi dhabiti) lakini si panya wa D1R KO (n=9, pau zilizofunguliwa), zimeonyeshwa mshtuko unaoweza kuhofiwa siku ya 1 ya jaribio. Nyota huashiria p<9, ikilinganisha KO na WT, Fisher post- hoc. C, Vipimo vya utendakazi wa mshtuko. Panya za D3R KO (n=0.01, pau zilizofunguliwa) zina majibu ya juu zaidi kwa mshtuko wa miguu kuliko WT (n=1, pau thabiti). Nyota huashiria p<9, hatua zinazorudiwa ANOVA. Thamani zote zinazoripotiwa ni njia ± SEM Kwa majibu ya mshtuko na utendakazi tena wa mshtuko, nambari zilizoripotiwa katika vitengo kiholela.
Mshangao unaotokana na hofu ni intact katika panya za D2R KO, lakini inahitaji vibali vingine vya D2 kama vile
Ili kuchunguza kama vibali vya D2 kama vile ni muhimu kwa hofu inayotokana na hofu, D2R KO na panya za WT zimewekwa chini ya majibu ya janga na vipimo vya hofu vinavyotokana na hofu. WT na D2R KO panya wana majibu sawa ya mshangao katika viwango vyote vya dB vilivyojaribiwa, na kuonyesha kwamba panya za D2R KO zina mwitikio wa mkali wa acoustic mkali (Kielelezo 3A). Sawa na panya za D1R KO, tumeona kuwa panya za D2R KO zimekuwa na nguvu ya kuzuia maambukizi (Ralph-Williams et al., 2002). Ilipojaribiwa katika mtazamo wa hofu ya kushangaza ya siku ya 7, Wice wa WT na D2R KO walionyesha kushangaza kwa hofu inayotokana na hofu kwa viwango sawa na siku zote za majaribio ya 3 (Kielelezo 3B) na ufanisi wa kutisha haukuwa tofauti kati ya vikundi (Kielelezo 3C). Takwimu hizi zinaonyesha kuwa D2R sio lazima kwa kujifunza kushangaza kwa hofu inayotokana na hofu.
Kielelezo 3
Panya wa D2R KO wana mshtuko kamili unaoweza kuhofiwa. A, Mwitikio wa mshtuko wa sauti wa D2R WT (n=8, miraba nyeusi) na KO panya (n=8, miraba wazi). B, Matokeo ya dhana ya hofu inayowezekana ya siku 7 na panya wa D2R. WT (n=8, pau dhabiti) na KO (n=8, pau zilizo wazi) zilionyesha viwango muhimu vya mshtuko unaoweza kuwa na hofu. C, Vipimo vya reactivity ya mshtuko wakati wa mafunzo (WT, n=8, baa imara; KO, n=8, baa wazi). D, WT na D2R KO panya (n=11 kila mmoja) walikabiliwa na dhana ya mshtuko inayowezekana ya siku 3. Panya wa D2R KO waliwekwa eticlopride (0.5 mg/kg) kabla ya mafunzo na kushindwa kueleza mshtuko unaoweza kuhofiwa na majaribio. Nyota huashiria p<0.01, KO dhidi ya WT, Fisher baada ya hoc. Thamani zote zilizoripotiwa ni wastani ± SEM Kwa majibu ya mshtuko na utendakazi wa mshtuko, majibu yanaripotiwa katika vitengo visivyo vya kawaida. Tafiti za awali zimeonyesha kuwa usimamizi wa wapinzani wanaofanana na D2, ama kwa utaratibu au moja kwa moja kwenye amygdala, hudhoofisha woga uliowekwa (Guarraci et al., 2000; Greba et al., 2001; Ponnusamy et al., 2005). Ili kuchunguza tofauti kati ya matokeo yao na yetu, panya wa D2R KO walisimamiwa eticlopride inayofanana na D2R (0.5 mg/kg; iliyotolewa ip) kabla ya mafunzo katika dhana ya mshtuko inayowezekana ya siku 3. Walipojaribiwa saa 24 kufuatia mafunzo, panya wa WT waliodungwa kwenye gari walionyesha mshtuko wenye nguvu unaoweza kuhofiwa, ilhali panya wa D2R KO waliodungwa eticlopride hawakuonyesha mafunzo (Mchoro 3D; hatua zinazorudiwa ANOVA genotype × siku F1, 20=7.5698, p<0.05) . Matokeo haya yanapendekeza kwamba, pamoja na D1R, mwanachama wa familia inayofanana na D2 ya vipokezi vya DA, lakini si D2R, ni muhimu kwa mshtuko unaoweza kuwa na hofu.
Kumbukumbu ya muda mfupi ni mbaya katika DD na D1R KO panya
DA inahitajika ndani ya saa moja kufuatia mafunzo ili kujifunza mshtuko wa hofu. Katika majaribio haya, kumbukumbu ya muda mrefu ya mshtuko wenye hofu ilijaribiwa saa 24 baada ya mafunzo. Tuliamua kujaribu ikiwa DA pia inahitajika kwa kumbukumbu ya muda mfupi. Wanyama na udhibiti wa DD walifanywa na dhana ya siku 2 ambayo ilijaribu kumbukumbu ya muda mfupi 10 min baada ya mafunzo (Kielelezo 4A). Siku ya jaribio, uhamasishaji wa mshtuko na kumbukumbu ya muda mfupi zilipimwa. Kumbukumbu la muda mfupi lilifafanuliwa kama kuongezeka kwa tegemeo kwa majibu ya kushangaza, wakati uhamasishaji wa mshtuko ni uwezekano wa kutegemea muktadha wa majibu ya mshtuko wa sauti kufuatia upepo ambao haujitegemea cue (McNish et al., 1997; Richardson, 2000; Risbrough et. al., 2008). Panya DD alikuwa na uhamasishaji wa mshtuko mdogo kuliko udhibiti (Kielelezo 4B, p <0.05; Jaribio la mwanafunzi t). Vivyo hivyo, panya za kudhibiti zilionyesha kumbukumbu madhubuti ya muda mfupi ambayo haikuwepo katika panya za DD (Kielelezo 4B, p <0.05, DD dhidi ya udhibiti, mtihani wa Wanafunzi). Takwimu hizi zinaonyesha kwamba DA inahitajika kwa kumbukumbu ya muda mfupi na ya muda mrefu ya mshtuko wenye hofu. Kwa kuongezea, DA ni muhimu kwa ujifunzaji wa hofu inayotegemea muktadha, kama inavyojaribiwa na uhamasishaji wa mshtuko. Data hizi pia huimarisha hitimisho la awali kwamba DA inahitajika katika kipindi muhimu kwa uimarishaji wa ufuatiliaji wa kumbukumbu ya hali ya hofu.Mchoro 4 Kumbukumbu ya muda mfupi na uhamasishaji wa mshtuko hutegemea DA. A, Ubunifu wa dhana ya tabia. Siku ya 1, majibu ya mshtuko ya msingi yalipatikana. Siku ya 2, panya walipokea jozi zote za mshtuko wa 30 na kisha wakarudishwa kwenye nyumba yao ya nyumbani kwa dakika 10 kabla ya kupimwa. B, Panya za kudhibiti (n = 10, baa nyeusi) zina uhamasishaji mkubwa zaidi wa mshtuko na mshtuko wa hofu ikilinganishwa na DD (n = 10, baa wazi). Asterisks inaashiria p <0.05; Jaribio la mwanafunzi. C, WT (n = 7, baa nyeusi) na D1R KO (n = 7, baa wazi) panya zina uhamasishaji usiofaa wa mshtuko. WT tu ndio wanaoweza kutisha wakati wa jaribio la kumbukumbu ya muda mfupi. Asterisks inaashiria p <0.05, KO dhidi ya WT; Jaribio la mwanafunzi. D, WT (n = 8, baa nyeusi) panya wana uhamasishaji mkubwa zaidi kuliko D2R KO (n = 8, baa wazi). Ngazi za uwezekano wa hofu ni sawa kati ya panya za WT na D2R KO. Asterisks inaashiria p <0.05, KO dhidi ya WT; Jaribio la mwanafunzi. Thamani zote zinazoripotiwa ni njia ± SEMTKuchunguza ni aina gani za vipokezi vinavyopatanisha jukumu la DA katika kumbukumbu ya muda mfupi na uhamasishaji wa mshtuko, panya wa D1R na D2R KO walijaribiwa kwa dhana sawa na panya wa DD. Panya D1R KO alikuwa na viwango vya chini sana vya kumbukumbu ya muda mfupi kuliko panya WT (Kielelezo 4C, p <0.05; Jaribio la mwanafunzi t); Walakini, hakukuwa na tofauti kubwa kati ya viwango vya uhamasishaji wa mshtuko katika D1R KO na panya za kudhibiti zinazoonyesha kuwa ujifunzaji unaotegemea muktadha haukuwa sawa. Panya D2R KO alikuwa na viwango vya chini vya uhamasishaji wa mshtuko kuliko WT (Kielelezo 4D, p <0.05; Jaribio la mwanafunzi), lakini hakukuwa na tofauti kubwa kati ya viwango vya panya vya WT na KO vya kumbukumbu ya muda mfupi.
Kurejesha kwa DA kwa amygdala ya msingi ni kutosha kuruhusu kumbukumbu ya muda mfupi
Amygdala ya msingi ni muhimu kwa upatikanaji wa kumbukumbu ya hofu inayotokana na hofu (Maren, 2003; Maren na Quirk, 2004; Sigurdsson et al., 2007). Aidha, kuna ushahidi unaoonyesha jukumu muhimu kwa DA katika kuwezesha kazi ya amygdala ya msingi (Rosenkranz na Grace, 2002, Bissiere et al., 2003; Marowsky et al., 2005). Ili kuchunguza kama DA katika amygdala ya chini ya ardhi inahitajika kwa hofu inayotokana na hofu, DD na panya za kudhibiti zimejitokeza bilaterally na vector CAV2-Cre katika amygdala ya msingi (Kielelezo 5A). Vector hii inaruhusiwa kusafirishwa kutoka kwenye tovuti ya sindano kwa DA neurons ambapo inarudi shughuli za Th gen (Hnasko et al., 2006). Immunohistochemistry ilibainisha kwamba TH ilikuwapo katika amygdala ya msingi ya panya ya DV ya CV2-Cre (Kielelezo 5J), lakini haipo katika striatum ya dorsal na kiini accumbens (Kielelezo 5G). TH ilikuwa hasa kurejeshwa kwa idadi ndogo ya neurons katika sehemu ya caudal ya eneo ventral tegmental (Kielelezo 5D). Kulikuwa na wachache zaidi ya seli za 10 TH kwa chanzo cha 30-μm katika panya za DD zilizojitokeza, ambazo zimefanana na idadi ndogo za neurons za DA za amygdala-projecting zilizoripotiwa katika vitabu (Ford et al., 2006; Lammel et al. , 2008; Margolis et al., 2008).
Kielelezo 5
Urejesho maalum wa Mkoa wa maneno ya endogenous ya TH katika panya DD. A, Schematic inayoonyesha uratibu uratibu kwa basolateral amygdala (BLA) majaribio ya kuwaokoa. DD (n = 7) na kudhibiti (n = 7) panya zilijitokeza bilateral katika BLA na VVV-CV (2 L / hemisphere). B, Mpangilio unaoonyesha uratibu wa sindano kwa majaribio ya uokoaji wa eneo la VRA. AAV0.5-Cre-GFP ilikuwa injected bilaterally (1 L / hemisphere) katika VTA ya DD (n = 0.5) na kudhibiti panya (n = 7). Takwimu zilibadilishwa kutoka kwa Paxinos na Franklin, 10. C-E, Kulinganishwa kwa uchafu wa TH katika kipande cha kamba (2001 × kukuza) kuonyesha midbrain ya mviringo ya kudhibiti WT injected virusi, BLA-injected DD, na VTA-injected DD. C, TH immunohistochemistry katika kudhibiti midbrain inaonyesha kuwepo kwa neurons DA katika VTA na substantia nigra pars compacta (SNpc; inahitajika kwa mshale). D, panya za DD zilizookolewa na BLA zilikuwa na idadi ndogo ya neurons TH-positive katika VTA. Inset ni ukubwa wa 4 ya kanda iliyoandikwa, inayoonyesha maelezo ya TH katika soma na taratibu. E, VTA-waliokolewa panya za DD walikuwa na maelezo ya TH sana katika VTA. Kumbuka kuwa hakuna uwepo wa TH katika SNpc (unaonyeshwa na mshale). F-H, sehemu ya Coronal (ukubwa wa 40) kutoka kwa udhibiti wa sindano ya virusi vya WT, kudhibitiwa kwa BLA, na VTA-kuokolewa kwa panya, kuonyesha uelewa wa TH katika storum na kiini accumbens. F, udhibiti wa sindano ya virusi vya WT una uelewa wa TH kwa ukamilifu wa dorsa (unaonyeshwa na mshale) na striatum ya msingi. G, Hakuna neno la TH lililogunduliwa katika striatum ya panya za DLA zilizookolewa na BLA. H, VTA-waliokolewa panya za DD wana maelezo ya TH katika kiini cha accumbens, na uovu tu wa kudanganya katika striatum ya dorsal (iliyoonyeshwa na mshale). I-K, sehemu ya Coronal (4 × kupanua) inayoonyesha msongamano wa TH katika BLA ya kudhibiti WT-injected kudhibiti virusi, BLA-waliokolewa, na VTA-waliokolewa DD panya.
Panya waliodungwa sindano ya amygdala waliwekwa chini ya dhana ya mshtuko inayowezekana ya siku 3. Kumbukumbu ya muda mfupi na uhamasishaji wa mshtuko ulitathminiwa dakika 10 baada ya mafunzo na kumbukumbu ya muda mrefu kwa mshtuko unaoweza kuhofiwa ilitathminiwa saa 24 baada ya mafunzo (Mchoro 6A). Inashangaza, kumbukumbu ya muda mfupi tu ilirejeshwa katika panya za DD zilizoingizwa na amygdala. Viwango vya kumbukumbu ya muda mfupi vilikuwa sawa na vidhibiti, lakini viwango vya kumbukumbu ya muda mrefu (p<0.05; Jaribio la t la Mwanafunzi) na uhamasishaji wa mshtuko (p<0.05; Jaribio la t la Mwanafunzi) vilikuwa chini sana kuliko vidhibiti. Wakati wa mafunzo, viwango vya utendakazi wa mshtuko vilikuwa sawa kati ya vikundi (Udhibiti: 1613±333 dhidi ya DD iliyookolewa na BLA: 1758±260). Takwimu hizi zinaonyesha kwamba makadirio ya DA kwa amygdala ya msingi, inayotoka hasa kutoka kwa sehemu ya caudal ya eneo la ventral tegmental, yanatosha kwa upatikanaji wa muda mfupi wa kumbukumbu ya hofu, lakini makadirio ya DA kwa maeneo mengine ya gamba au limbic ubongo ni muhimu kwa kujifunza kwa muktadha na uimarishaji wa muda mrefu wa ufuatiliaji wa kumbukumbu ya woga.Mchoro 6 Panya wa DD waliookolewa wa Basolateral amygdala (BLA) wamerejesha kumbukumbu ya muda mfupi, ilhali panya wa DD waliookolewa wa eneo la ventral tegmental (VTA) wamerejesha kujifunza kikamilifu. A, Udhibiti wa WT uliodungwa na Virusi (n=7) na panya wa DD waliookolewa na BLA (n=7) waliwekwa chini ya dhana ya hofu inayowezekana ya siku 3. Kushoto, Uhamasishaji wa Mshtuko uko chini sana katika panya waliookolewa na BLA. Kumbukumbu ya kati, ya muda mfupi (STM) ilirejeshwa kwa viwango vya udhibiti katika panya waliookolewa na BLA. Kulia, Kumbukumbu ya muda mrefu (LTM), iliyotathminiwa saa 24 baada ya mafunzo, haipo katika panya waliookolewa na BLA. B, Matokeo kutoka kwa udhibiti wa WT (n=10) na panya wa DD waliookolewa na VTA (n=7) katika dhana ya hofu inayowezekana ya siku 3. Kushoto, Uhamasishaji wa Mshtuko katika panya wa DD waliookolewa na VTA haukuwa tofauti sana na udhibiti. Kati na Kulia, Viwango vya kumbukumbu ya STM na LTM vilikuwa sawa na udhibiti katika panya za uokoaji za VTA. Nyota huashiria p<0.05, uokoaji dhidi ya udhibiti, Jaribio la t la Mwanafunzi. Thamani zote zilizoripotiwa zinamaanisha ± SEM
Marejesho ya TH kwa eneo la msingi la neurons DA linatosha kujifunza
Kuna mizunguko mawili makubwa ya DA inayotoka katikati ya midbrain; mzunguko wa mimba, unachochea kimsingi kutoka kwa mraba wa nigra pars compacta, na mzunguko wa mesocorticolimbic, unaojitokeza hasa kutoka eneo la kijiji. Miradi ya mzunguko wa mesocorticolimbic sana kwa nuclei ya ubongo inayojulikana kuwa muhimu kwa hali ya hofu ya kutegemea cue, ikiwa ni pamoja na amygdala ya msingi (Bjorklund na Dunnett, 2007; Lammel et al., 2008). Kuchunguza ikiwa marejesho kamili ya DA ya mesocorticolimbic inahitajika kwa kumbukumbu ya muda mrefu na uhamasishaji wa mshtuko; DD na udhibiti wa panya zilijitokeza bilaterally na vector AAV1-Cre-GFP katika eneo la kijiji cha kijiji ili kuondokana hasa na Th gene endogenous (Kielelezo 5B).
Immunohistochemistry ilitumiwa kuchunguza ni neuroni za DA na malengo gani ambayo yalirejesha neno la TH. Madoa haya haipo katika panya zisizookolewa DD (Hnasko et al., 2006). Immunohistochemistry ilibainisha kuwa marejesho ya TH katika pande za ndani ya jitihada za DD zilizojitokeza zilikuwa maalum sana kwa eneo la eneo la msingi na malengo yake (Kielelezo 5E, H, K). Kulikuwa na udhaifu wa TH iliyosababishwa na striatum ya dorsal, lengo kubwa la neurons za DA zinazoanzia kikubwa cha nigra pars compacta (Kielelezo 5H), ambapo kiini cha kukusanyiko na amygdala ya msingi yalikuwa na nguvu ya kujieleza (Fig. 5H, K).
Vipande vidogo vidogo vilivyojitokeza vilikuwa vimewekwa kwenye hali sawa ya siku ya 3 ya hofu inayotokana na hofu kama vile panya ya amygdala-injected ya msingi (Kielelezo 6B). Ushawishi wa mshtuko, kumbukumbu ya muda mfupi na kumbukumbu ya muda mrefu zilirejeshwa kwa ngazi za kudhibiti katika panya za DD zinazojitokeza eneo la ndani. Uchezaji wa mshtuko wakati wa mafunzo ulikuwa sawa kati ya vikundi (Udhibiti: 1653 ± 268 dhidi ya VTA-iliyotolewa DD: 1602 ± 198). Takwimu hizi zinaonyesha kwamba makadirio ya DA kutoka kwa eneo la kijiji cha kutosha ni ya kutosha kwa kuunda kumbukumbu ya muda mfupi na ya muda mrefu ya hofu ya kishio pamoja na uhamasishaji wa mshtuko wa kutegemea mazingira.
Majadiliano
Matokeo haya yanaonyesha kwamba DA inahitajika kwa hali ya hofu ya vikombe kama inavyohesabiwa na hofu inayotokana na hofu. Panya za DD hazifanikiwa kuonyesha maajabu yanayoweza hofu isipokuwa DA ikarejeshwa mara baada ya mafunzo. Panya za DD pia zimeharibika kumbukumbu za muda mfupi na uhamasishaji wa mshtuko. Muhimu sana, kuzuia uharibifu haukuwa chini katika panya za DD zilizopunguzwa, na kuonyesha kwamba kupigwa kwa sensorer si kupungua kwa kukosekana kwa DA. Utafiti uliopita umeonyesha kuwa psychostimulants ambazo zinaimarisha maambukizi ya DA zinaweza kupunguza chini ya kuzuia maambukizi (Schwarzkopf et al., 1992; Bubser na Koch, 1994; Ralph et al., 1999; Swerdlow et al., 2006; Doherty et al., 2007) na wengine wameonyesha kwamba kuzuia dawa za pharmacological ya receptors ya dopamini huongeza kuzuia maambukizi (Schwarzkopf et al., 1993; Depoortere et al., 1997). Kwa mujibu wa matokeo haya, panya za DD zilikuwa na ongezeko ndogo lakini kubwa katika kuzuia maambukizi juu ya panya za udhibiti. Uchunguzi uliopita pia umeonyesha kwamba kuzuia pharmacological ya receptors DA inaweza kupunguza jibu acoustic response (Davis na Aghajanian, 1976; Schwarzkopf et al., 1993). Panya za DD za Dopamine zilizopunguzwa hazijabadilika sana majibu ya mshtuko wa acoustic; hata hivyo, kulikuwa na mwenendo kuelekea majibu ya kupunguzwa ikilinganishwa na udhibiti, hasa kwa nguvu za kuchochea juu, kulingana na ripoti zilizopita (Schwarzkopf et al., 1993).
Takwimu zilizowasilishwa hapa zinaonyesha wazi kwamba DA haifai kwa kurejesha au kujieleza kwa kumbukumbu ya hofu inayotokana na hofu kwa sababu panya za DD hazihitaji DA wakati wa kikao cha mtihani ili kuelezea hofu inayotokana na hofu iliyopatikana hapo awali kwa kuingiza L-Dopa mara moja baada ya mafunzo. Aidha, majaribio yetu yanasema dhidi ya DA inahitajika kwa ajili ya usindikaji wa awali wakati wa mafunzo, kwa sababu panya za DD zilikuwa zimeharibiwa wakati wa vikao vyote vya mafunzo. Badala yake, takwimu zetu zinaonyesha kwamba DA ni muhimu kwa utulivu wa mapema ya kumbukumbu ya kumbukumbu kwa sababu panya za DD hazieleze kumbukumbu za muda mfupi, na kumbukumbu ya muda mrefu huonekana tu wakati L-Dopa inapotolewa mara moja, lakini si 1 hr, baada ya mafunzo. Labda, injecting DD panya na L-Dopa mara baada ya mafunzo imethibitisha kumbukumbu ya kumbukumbu, kuruhusu kuingia fomu ya muda mrefu. Aversive stimuli husababisha kuongezeka kwa muda mrefu katika viwango vya DA ndani ya maeneo ya ubongo muhimu kwa hali ya hofu ambayo itawawezesha utulivu wa kumbukumbu za hofu (Abercrombie et al., 1989; Kalivas na Duffy, 1995; Doherty na Gratton, 1997, Inglis na Moghaddam, 1999). Kwa mujibu wa data zetu, wengine wameonyesha kwamba kazi za mafunzo ya baada ya mafunzo ya DA zinabadilisha kumbukumbu ya hofu inayohusiana na hofu (Bernaerts na Tirelli, 2003; Lalumiere et al., 2004; LaLumiere et al., 2005).
Matokeo yetu yanaonyesha kwamba subtypes nyingi DA receptor ni muhimu kwa hofu ya uwezekano wa hofu. D1R KO panya hawana kumbukumbu ya muda mfupi na ya muda mrefu kwa hofu inayotokana na hofu, inayoonyesha jukumu muhimu kwa subtype hii ya mapokezi katika kupatanisha madhara ya DA katika kujifunza kwa hofu inayotokana na hofu. Kushangaza, kujifunza kwa hofu ya utegemezi wa mazingira ilikuwa intact katika panya za D1R KO. Takwimu hizi zinashiriki masomo mengine yanayoonyesha kwamba wapinzani wa D1R wanapunguza ujasiri wa kujifunza kwa hofu bila kuathiri uhamasishaji wa mshtuko, na kuonyesha kuwa shughuli za pharmacological katika majaribio hayo zilikuwa maalum kwa D1R (Lamont na Kokkinidis, 1998; Guarraci et al., 1999) . Takwimu hizi pia ni thabiti na tafiti zinazoonyesha jukumu muhimu kwa D1R katika dhana nyingine za kujifunza-tegemezi (Smith et al., 1998; Eyny na Horvitz, 2003).
D2R KO ilikuwa na hofu iliyo na uwezo wa hofu, lakini haukuwa na uhamasishaji mshtuko. Greba et al. (2001) imeonyesha kuwa upinzani wa intra-amygdalar wa D2R imesababisha uharibifu wa kuhamasishwa kwa mshtuko na hofu inayoweza kuogopa bila kuathiri mshangao wa msingi au majibu ya kukuza. Utekelezaji wa D2R unasababisha uingizaji wa uwezekano wa muda mrefu katika BLA, ambayo inawezekana itakuwa muhimu kwa kumbukumbu ya hofu inayotokana na hofu (Bissiere et al., 2003). Takwimu zetu zinaonyesha kuwa D2R sio muhimu kwa kujifunza kwa hofu ya kutegemea cue lakini badala ya kwamba hii DA ya receptor subtype ni muhimu kwa uhamasishaji wa mshtuko wa kutegemea mazingira. Injecting D2R KO panya kwa mfumo na mpinzani wa D2 kama eticlopride kabla ya mafunzo kuzuia hofu inayotokana na hofu; Kwa hivyo, inawezekana kwamba receptors nyingine za D2R, ambazo pia zinazuiwa na eticlopride, ni muhimu katika hofu inayotokana na hofu (Sigala et al., 1997, Bernaerts na Tirelli, 2003; Laviolette et al., 2005; Swant na Wagner , 2006). Hivyo, kuharibika kwa kujifunza kwa tegemezi inayotokana na wasiwasi wa D2 katika masomo ya awali kunaweza kuhusishwa na dawa hizi kuzuia wanachama wengine wa familia ya D2R.
Urejesho wa kuchagua wa endogenous TH hasa kwa eneo la kijiji cha uongozi uliosababisha marejesho ya kujifunza katika panya za DD. Immunohistochemistry ilionyesha kwamba TH ilirejeshwa kwenye kiini muhimu cha limbic kama vile kiini accumbens na amygdala ya msingi, lakini si kwa striatum ya dorsal. Zaidi ya hayo, kulikuwa na neurons machache sana kwa TH katika sehemu kubwa ya nigra pars. Takwimu hizi zinaonyesha kuwa DA kutoka kwa neurons ya eneo la msingi ni muhimu kwa hali ya hofu ya kikapu na ya kikabila.
Panya pamoja na marejesho ya DA ya msingi kwa amygdala ya msingi yalionyesha kumbukumbu ya muda mfupi, lakini si kumbukumbu ya muda mrefu au kuhimiza mshtuko. Uchunguzi uliopita umeonyesha kuwa DA inawezesha kazi ya amygdala kupitia mabadiliko katika tone la kizuizi la GABAergic na athari hii imepatanishwa na D1R au D2R (Bissiere et al., 2003; Kroner et al., 2005; Marowsky et al., 2005). Takwimu zilizowasilishwa hapa zinaonyesha kwamba DA katika amygdala ya msingi ni muhimu kwa upatikanaji wa kumbukumbu ya muda mfupi kwa hofu inayotokana na hofu, lakini haitoshi kwa utulivu wa muda mrefu wa kumbukumbu. Marejesho ya kumbukumbu ya muda mfupi hubaliana na namba ndogo ya viwango vya DA vilivyotokana na amygdala-projecting vinavyotoka eneo la kijiji. Urejesho mkubwa zaidi wa TH endogenous katika pande zote za eneo-kupunguzwa panya za DD zimesababisha kumbukumbu ya muda mfupi na ya muda mrefu; kwa hiyo, marejesho ya TH kwa mizunguko mengine ya mesocorticolimbic inahitajika kuanzisha kumbukumbu ya muda mrefu kwa hofu inayoweza kutisha. Tafiti zilizopita zinaonyesha kwamba kiini accumbens na kamba ya prefrontal pia inaweza kuwa malengo muhimu ya DA wakati wa hali ya hofu (Kalivas na Duffy, 1995; Murphy et al., 2000; Pezze et al., 2003; LaLumiere et al., 2005; Laviolette et al., 2005; Floresco na Tse, 2007). Kwa hiyo, inawezekana kwamba DA ishara katika aidha kiini accumbens au cortox prefrontal inahitajika kwa ajili ya malezi ya kumbukumbu ya muda mrefu.
Kwa muhtasari, utafiti wetu ulitumia mchanganyiko wa mifano ya mazao ya maumbile, pharmacology, na uokoaji maalum wa kanda ili kuonyesha kwamba DA inahitajika kwa hofu inayotokana na hofu, kazi ya hali ya hofu inayotokana na hofu. Matokeo haya yalisisitiza jukumu muhimu kwa neurotransmitter hii nje ya usindikaji wa malipo. Zaidi ya hayo, utafiti wetu unaonyesha haja ya DA kutekeleza wapokeaji wengi wa DA wakati huo huo katika mikoa mbalimbali ya ubongo kwa hali ya hofu inayotokana na hofu. Uchunguzi wa hivi karibuni umebaini kuwa eneo la upepo wa dhahabu DA neurons hutofautiana kwa kiasi kikubwa katika mali zao za Masi na za kimwili kulingana na eneo la lengo (Ford et al., 2006, Margolis et al., 2006; Bjorklund na Dunnett, 2007; Lammel et al., 2008; Margolis et al., 2008). Majaribio tuliyofanya ambayo jeni la Th lilichaguliwa kwa makini katika neurons za DA zinazoelezea amygdala ya msingi zinaonyesha kuwa ni ndogo, chagua idadi ya watu wa eneo la neurons, badala ya dhamana za DA neurons inayoelekea kwenye maeneo mengine ya ubongo. Takwimu zetu, pamoja na tafiti zinazoonyesha uharibifu wa idadi ya watu wa DA, inasisitiza haja ya kuelewa jukumu la kila moja ya circuits hizi za DA. Kupanua ujuzi wa kazi nyingi za tabia na kisaikolojia za DA kuhusisha kujifunza kuhusiana na hofu zinaweza kusababisha uelewa bora wa matatizo yanayohusiana na hofu, kama ugonjwa wa shida baada ya mshtuko, ugonjwa wa shida, na matatizo ya kawaida ya wasiwasi.
Shukrani
Uchunguzi huu ulisaidiwa na sehemu ya Huduma ya Afya ya Umma, tuzo ya Taifa ya Huduma za Utafiti, T32 GM07270, kutoka Taasisi ya Taifa ya Sciences Mkuu wa Matibabu na Taasisi za Taifa za NIH za Matibabu Mkuu wa XMUMX R4 GM 25-058501. Tunamshukuru Ilene Bernstein, Lisa Beutler, Charles Chavkin, na Larry Zweifel kwa maoni ya manufaa juu ya maandiko, Albert Quintana kwa msaada wa histology, na Valerie Wall kwa ajili ya matengenezo ya koloni ya panya. Pia tunawashukuru Dk. Miguel Chillon (Kituo cha Vector Production of CBATEG katika Universitat Autonoma ya Barcelona) kwa CAV05 na Matthew Wakati wa virusi AAV2.
Marejeo
1. Abercrombie ED, Keefe KA, DiFrischia DS, Zigmond MJ. Tofauti tofauti ya dhiki kwenye kutolewa kwa dopamini katika striatum, kiini accumbens, na kamba ya mbele ya kati. J Neurochem. 1989; 52: 1655-1658. [PubMed]
2. Bernerts P, Tirelli E. Athari ya uwezeshaji ya agonisti ya kipokezi ya dopamini D4 PD168,077 kwenye uimarishaji wa kumbukumbu ya mwitikio wa kizuizi uliojifunza katika panya C57BL/6J. Behav Brain Res. 2003;142:41–52. [PubMed]
3. Bissiere S, Humeau Y, Luthi A. milango ya Dopamine LTP induction katika amygdala ya nyuma kwa kuzuia kuzuia feedforward. Nat Neurosci. 2003; 6: 587-592. [PubMed]
4. Bjorklund A, Dunnett SB. Dopamine neuron mifumo katika ubongo: update. Mwelekeo wa Neurosci. 2007; 30: 194-202. [PubMed]
5. Bubser M, Koch M. Uzuiaji wa prepulse wa majibu ya acoustic startle ya panya hupunguzwa na vidonda vya 6-hydroxydopamine ya cortex ya mbele ya kati. Saikolojia ya Dawa (Berl) 1994;113:487–492. [PubMed]
6. Davis M, Aghajanian GK. Madhara ya apomorphine na haloperidol kwenye mwitikio wa mshtuko wa sauti katika panya. Saikolojia ya Dawa (Berl) 1976;47:217–223. [PubMed]
7. de Oliveira AR, Reimer AE, Brandao ML. Dopamine D2 receptor utaratibu katika hotuba ya hofu iliyowekwa. Pharmacol Biochem Behav. 2006; 84: 102-111. [PubMed]
8. Depoortere R, Perrault G, Sanger DJ. Uwezo wa kuzuia prepulse ya reflex ya kushtua katika panya: tathmini ya kifamasia ya utaratibu kama kielelezo cha kugundua shughuli za antipsychotic. Saikolojia ya Dawa (Berl) 1997;132:366–374. [PubMed]
9. Doherty JM, Masten VL, Powell SB, Ralph RJ, Klamer D, Low MJ, Geyer MA. Michango ya Vipokezi vidogo vya Dopamine D1, D2 na D3 kwa Athari za Kusumbua za Cocaine kwenye Kizuizi cha Prepulse katika Panya. Neuropsychopharmacology. 2007;12:12.
10. Doherty MD, Gratton A. Vipokezi vya NMDA katika nucleus accumbens hurekebisha kutolewa kwa dopamini inayosababishwa na mkazo katika mkusanyiko wa nucleus na eneo la ventral tegmental. Synapse. 1997;26:225–234. [PubMed]
11. Drago J, Gerfen CR, Lachowicz JE, Steiner H, Hollon TR, Love PE, Ooi GT, Grinberg A, Lee EJ, Huang SP, et al. Utendakazi wa kuzaa uliobadilishwa katika panya inayobadilika isiyo na vipokezi vya dopamini ya D1A. Proc Natl Acad Sci US A. 1994;91:12564–12568. [Nakala ya bure ya PMC] [PubMed]
12. Eyny YS, Horvitz JC. Dhima zinazopingana za vipokezi vya D1 na D2 katika hali ya hamu ya kula. J Neurosci. 2003;23:1584–1587. [PubMed]
13. Floresco SB, Tse MT. Udhibiti wa Dopaminergic wa maambukizi ya kuzuia na ya kusisimua katika njia ya msingi ya amygdala-prefrontal cortical. J Neurosci. 2007;27:2045–2057. [PubMed]
14. Ford CP, Mark GP, Williams JT. Mali na uharibifu wa opioid ya neurons ya macholimbic ya dopamine inatofautiana kulingana na eneo la lengo. J Neurosci. 2006; 26: 2788-2797. [PubMed]
15. Greba Q, Kokkinidis L. Utawala wa pembeni na ndani ya amygdalar wa mpinzani wa kipokezi cha dopamini D1 SCH 23390 huzuia mshtuko unaoweza kuwa na hofu lakini si utendakazi wa mshtuko au uhamasishaji wa mshtuko wa mshtuko wa akustisk. Tabia ya Neurosci. 2000;114:262–272. [PubMed]
16. Greba Q, Munro LJ, Kokkinidis L. Kuhusika kwa vipokezi vya kolineji ya eneo la tumbo la sehemu ya hewa katika usemi wa woga uliowekwa katika hali ya kawaida kama inavyopimwa kwa mshtuko unaoweza kuwa na hofu. Res za Ubongo. 2000;870:135–141. [PubMed]
17. Greba Q, Gifkins A, Kokkinidis L. Uzuiaji wa vipokezi vya dopamini ya amygdaloid D2 huharibu ujifunzaji wa kihisia unaopimwa kwa mshtuko unaoweza kuwa na hofu. Res za Ubongo. 2001;899:218–226. [PubMed]
18. Guarraci FA, Kapp BS. Tabia ya electrophysiological ya neurons ya dopaminergic ya eneo la kijivu wakati wa hali tofauti ya hofu ya pavlovian katika sungura ya awake. Behav Ubongo Res. 1999; 99: 169-179. [PubMed]
19. Guarraci FA, Frohardt RJ, Kapp BS. Amygdaloid D1 dopamine receptor ushiriki katika hali ya hofu ya Pavlovian. Res za Ubongo. 1999;827:28–40. [PubMed]
20. Guarraci FA, Frohardt RJ, Falls WA, Kapp BS. Madhara ya infusions ya intra-amygdaloid ya mpinzani wa kipokezi cha D2 kwenye hali ya hofu ya Pavlovian. Tabia ya Neurosci. 2000;114:647–651. [PubMed]
21. Hnasko TS, Perez FA, Scouras AD, Stoll EA, Gale SD, Luquet S, Phillips PE, Kremer EJ, Palmiter RD. Urejeshaji wa upatanishi wa Cre recombinase wa dopamini ya nigrostriatal katika panya wenye upungufu wa dopamini hubadilisha hypophagia na bradykinesia. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103:8858–8863. [Nakala ya bure ya PMC] [PubMed]
22. Horvitz JC. Majibu ya dopamini ya Mesolimbocortical na nigrostriatal kwa matukio muhimu yasiyo ya zawadi. Neuroscience. 2000;96:651–656. [PubMed]
23. Inglis FM, Moghaddam B. Ukosefu wa usafi wa amygdala ni wajibu sana kwa shida. J Neurochem. 1999; 72: 1088-1094. [PubMed]
24. Inoue T, Izumi T, Maki Y, Muraki I, Koyama T. Athari ya mpinzani wa dopamini D(1/5) SCH 23390 juu ya kupata hofu yenye masharti. Pharmacol Biochem Behav. 2000;66:573–578. [PubMed]
25. Joshua M, Adler A, Mitelman R, Vaadia E, Bergman H. Midbrain neurons ya dopaminergic na interneurons ya uzazi wa kizazi hutofautiana kati ya malipo na matukio ya aversive katika wakati tofauti wa majaribio ya hali ya kawaida ya uwezekano. J Neurosci. 2008; 28: 11673-11684. [PubMed]
26. Kalivas PW, Duffy P. Utekelezaji wa utekelezaji wa dopamine maambukizi katika shell ya kiini accumbens na stress. Resin ya ubongo. 1995; 675: 325-328. [PubMed]
27. Kelly MA, Rubinstein M, Asa SL, Zhang G, Saez C, Bunzow JR, Allen RG, Hnasko R, Ben-Jonathan N, Grandy DK, Low MJ. Haipaplasia ya lactotrofu ya pituitari na hyperprolactinemia sugu katika panya wenye upungufu wa vipokezi vya dopamini. Neuroni. 2;1997:19–103. [PubMed]
28. Koch M. Neurobiolojia ya mshangao. Prog Neurobiol. 1999; 59: 107-128. [PubMed]
29. Kroner S, Rosenkranz JA, Grace AA, Barrionuevo G. Dopamine hupunguza msukumo wa neurons ya amygdala ya msingi katika vitro. J Neurophysiol. 2005; 93: 1598-1610. [PubMed]
30. Lalumiere RT, Nguyen LT, McGaugh JL. Baada ya mafunzo intrabasolateral infusions amygdala ya dopamini modulate uimarishaji wa inhibitory kuepuka kumbukumbu: ushiriki wa mifumo ya noradrenergic na cholinergic. Eur J Neurosci. 2004;20:2804–2810. [PubMed]
31. LaLumiere RT, Nawar EM, McGaugh JL. Uwezeshaji wa kuimarisha kumbukumbu na msingi wa amygdala au kikaboni kichocheo huhitaji uingizaji wa dopamine ya receptor katika maeneo yote ya ubongo. Jifunze Mem. 2005; 12: 296-301. [Maelezo ya bure ya PMC] [PubMed]
32. Lammel S, Hetzel A, Hackel O, Jones I, Liss B, Roeper J. Sifa za kipekee za neurons za mesoprefrontal ndani ya mfumo wa dopamini ya mesocorticolimbic mbili. Neuroni. 2008;57:760–773. [PubMed]
33. Lamont EW, Kokkinidis L. Uingizaji wa mpinzani wa kipokezi cha dopamini D1 SCH 23390 kwenye amygdala huzuia kujieleza kwa hofu katika dhana inayoweza kutokea ya mshtuko. Res za Ubongo. 1998;795:128–136. [PubMed]
34. Laviolette SR, Lipski WJ, Grace AA. Idadi ndogo ya niuroni katika gamba la mbele la kati husimba ujifunzaji wa kihisia na misimbo ya mlipuko na masafa kupitia kipokezi kinachotegemea dopamini ingizo la msingi la amygdala. J Neurosci. 4;2005:25–6066. [PubMed]
35. Lemon N, Manahan-Vaughan D. Vipokezi vya Dopamine D1/D5 lango la upatikanaji wa taarifa za riwaya kupitia uwezo wa muda mrefu wa hippocampal na unyogovu wa muda mrefu. J Neurosci. 2006;26:7723–7729. [PubMed]
36. Maren S. Amygdala, plastiki ya synaptic, na kumbukumbu ya hofu. Ann NY Acad Sci. 2003;985:106–113. [PubMed]
37. Maren S, Quirk GJ. Ishara ya neuronal ya kumbukumbu ya hofu. Nat Rev Neurosci. 2004;5:844–852. [PubMed]
38. Margolis EB, Mitchell JM, Ishikawa J, Hjelmstad GO, Fields HL. Midbrain dopamine neurons: lengo la makadirio huamua muda wa uwezekano wa muda na dhibamu ya Dopamine D (2) ya upokeaji. J Neurosci. 2008; 28: 8908-8913. [PubMed]
39. Margolis EB, Lock H, Chefer VI, Shippenberg TS, Hjelmstad GO, Fields HL. Opioidi za Kappa hudhibiti kwa kuchagua niuroni za dopamineji zinazojitokeza kwenye gamba la mbele. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103:2938–2942. [Nakala ya bure ya PMC] [PubMed]
40. Marowsky A, Yanagawa Y, Obata K, Vogt KE. Kitengo maalum cha interneurons kinasaidia uendeshaji wa dopaminergic wa kazi ya amygdala. Neuron. 2005; 48: 1025-1037. [PubMed]
41. McNish KA, Gewirtz JC, Davis M. Ushahidi wa hofu ya kimazingira baada ya vidonda vya hipokampasi: usumbufu wa mshtuko unaoweza kuganda lakini usio na hofu. J Neurosci. 1997;17:9353–9360. [PubMed]
42. Missale C, Nash SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Vipokezi vya dopamine: kutoka kwa muundo hadi kazi. Physiol Rev. 1998;78:189–225. [PubMed]
43. Murphy CA, Pezze M, Feldon J, Heidbreder C. Ushiriki tofauti wa dopamini katika ganda na msingi wa kiini hujilimbikiza katika kujieleza kwa kizuizi kilichofichika kwa kichocheo kilicho na hali mbaya. Neuroscience. 2000;97:469–477. [PubMed]
44. Pezze MA, Feldon J. Mesolimbic njia dopaminergic katika hali ya hofu. Prog Neurobiol. 2004; 74: 301-320. [PubMed]
45. Pezze MA, Bast T, Feldon J. Umuhimu wa maambukizi ya dopamini katika gamba la mbele la mbele la panya kwa woga uliowekwa. Cereb Cortex. 2003;13:371–380. [PubMed]
46. Ponnusamy R, Nissim HA, Barad M. Uzuiaji wa mfumo wa D2-kama dopamine receptors huwezesha kuangamizwa kwa hofu katika panya. Jifunze Mem. 2005; 12: 399-406. [Maelezo ya bure ya PMC] [PubMed]
47. Ralph RJ, Varty GB, Kelly MA, Wang YM, Caron MG, Rubinstein M, Grandy DK, Low MJ, Geyer MA. Dopamini D2, lakini si D3 au D4, aina ndogo ya kipokezi ni muhimu kwa usumbufu wa kizuizi cha prepulse kinachozalishwa na amfetamini katika panya. J Neurosci. 1999;19:4627–4633. [PubMed]
48. Ralph-Williams RJ, Lehmann-Masten V, Otero-Corchon V, Low MJ, Geyer MA. Athari tofauti za agonists za dopamini za moja kwa moja na zisizo za moja kwa moja kwenye kizuizi cha prepulse: utafiti katika panya wa kugonga vipokezi vya D1 na D2. J Neurosci. 2002;22:9604–9611. [PubMed]
49. Richardson R. Uhamasishaji wa mshtuko wa mshtuko: woga uliojifunza au usiojifunza? Behav Brain Res. 2000;110:109–117. [PubMed]
50. Risbrough VB, Geyer MA, Hauger RL, Coste S, Stenzel-Poore M, Wurst W, Holsboer F. CRF(1) na CRF(2) Vipokezi Vinahitajika kwa Vipokezi Vinavyoweza Kuweza Kutokea hadi vya Muktadha lakini si vya Tofauti. Neuropsychopharmacology. 2008;19:19.
51. Rosenkranz JA, Grace AA. Mfumo wa kuingiliana wa Dopamine ya uwezekano wa harufu ya kutosha ya amygdala wakati wa hali ya pavlovian. Hali. 2002; 417: 282-287. [PubMed]
52. Schultz W. Kurasmishwa na dopamine na zawadi. Neuroni. 2002;36:241–263. [PubMed]
53. Schwarzkopf SB, Mitra T, Bruno JP. Kuingia kwa hisia katika panya kumepungua dopamini kama watoto wachanga: umuhimu unaowezekana kwa matokeo ya wagonjwa wa skizofreni. Biol Psychiatry. 1992;31:759–773. [PubMed]
54. Schwarzkopf SB, Bruno JP, Mitra T. Madhara ya haloperidol na SCH 23390 kwenye mshtuko wa akustisk na kizuizi cha prepulse chini ya hali ya basal na ya kusisimua. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 1993;17:1023–1036. [PubMed]
55. Sigala S, Missale C, Spano P. Madhara ya kinyume cha dopamine D2 na D3 receptors juu ya kujifunza na kumbukumbu katika panya. Eur J Pharmacol. 1997;336:107–112. [PubMed]
56. Sigurdsson T, Doyere V, Cain CK, LeDoux JE. Uwezo wa muda mrefu katika amygdala: utaratibu wa seli ya kujifunza hofu na kumbukumbu. Neuropharmacology. 2007;52:215–227. [PubMed]
57. Smith DR, Striplin CD, Geller AM, Mailman RB, Drago J, Lawler CP, Gallagher M. Tathmini ya tabia ya panya kukosa vipokezi vya dopamini ya D1A. Neuroscience. 1998;86:135–146. [PubMed]
58. Swant J, Wagner JJ. Kizuizi cha kisafirishaji cha dopamine huongeza LTP katika eneo la CA1 la hippocampus ya panya kupitia kuwezesha kipokezi cha dopamini ya D3. Jifunze Mem. 2006;13:161–167. [Nakala ya bure ya PMC] [PubMed]
59. Swerdlow NR, Shoemaker JM, Kuczenski R, Bongiovanni MJ, Neary AC, Tochen LS, Saint Marie RL. Utendakazi wa Forebrain D1 na sensorimotor gating katika panya: athari za kizuizi cha D1, vidonda vya mbele na upungufu wa dopamini. Neurosci Lett. 2006;402:40–45. [PubMed]
60. Szczypka MS, Rainey MA, Kim DS, Alaynick WA, Marck BT, Matsumoto AM, Palmiter RD. Tabia ya kulisha katika panya wasio na dopamini. Proc Natl Acad Sci US A. 1999;96:12138–12143. [Nakala ya bure ya PMC] [PubMed]
61. RA mwenye hekima. Dopamine, kujifunza na motisha. Nat Rev Neurosci. 2004;5:483–494. [PubMed]
62. Zhou QY, Palmiter RD. Panya ya upungufu wa Dopamine ni kali sana, ya adipsic, na ya aphagic. Kiini. 1995; 83: 1197-1209. [PubMed]
63. Zweifel LS, Argilli E, Bonci A, Palmiter RD. Jukumu la vipokezi vya NMDA katika niuroni za dopamini kwa unamu na tabia za kulevya. Neuroni. 2008;59:486–496. [Nakala ya bure ya PMC] [PubMed]
;