Baada ya kunyunyizia kila siku juu ya suluhisho la sucrose, kunyimwa kwa chakula husababisha wasiwasi na kukusanyiko la dopamine / usawa wa usawa wa asidi (2008)

Kupungua kwa sukari kunaweza kuamsha njia za neural kwa njia sawa na kunywa dawa za unyanyasaji, na kusababisha dalili zinazohusiana za utegemezi.. Majaribio ya sasa yanajaribu ikiwa panya ambazo zimekuwa zikiziuma kwenye sucrose na kisha kufunga zinaonyesha ishara za kujiondoa kama opiate. Panya zilihifadhiwa kwenye kunyimwa kwa 12-h ikifuatiwa na ufikiaji wa 12-h kwa suluhisho la suti ya 10% na chow kwa siku za 28, kisha ikafungwa kwa 36 h. Wanyama hawa walitumia muda kidogo kwenye mkono wazi wa nyongeza ya nyongeza ikilinganishwa na kundi la tangazo la libish chow lililopuuzwa, na kupendekeza wasiwasi. Microdialysis ilifunua kuongezeka kwa usawa kwa acetylcholine ya nje na kupungua kwa kutolewa kwa dopamine kwenye ganda la nucleus accumbens. Matokeo haya hayakuonekana kuwa kwa sababu ya hypoglycemia. Matokeo hayo yanaonyesha kuwa lishe ya kupumua kwenye sucrose na chow ikifuatiwa na kufunga huunda hali ambayo inajumuisha wasiwasi na ilibadilika densi ya dopamine na usawa ya acetylcholine. Hii ni sawa na athari za naloxone, kupendekeza uondoaji-kama wa opiate. Hii inaweza kuwa sababu ya shida fulani za kula.

1.1. Njia za jumla

Panya za kiume za Sprague-Dawley zilipatikana kutoka Taconic Farms (Germantown, NY) au zilizowekwa katika vivarium cha Chuo Kikuu cha Princeton kutoka hisa inayotokana na Mashamba ya Taconic. Panya ziliwekwa moja kwa moja kwenye taa iliyobadilishwa ya 12-h: Mzunguko wa giza wa 12-h. Taratibu zote zilipitishwa na Kamati ya Utunzaji wa Wanyama wa Vyuo vikuu cha Princeton.

1.2. Jaribio la 1: Je! Wasiwasi unaonekana wakati wa kufunga kwenye panya za kuuma sukari?

Panya (300-450 g) katika kundi kuu la majaribio (sukari ya kuingilia + chow; n = 9) ilitunzwa kwenye mlo wa kunyimwa 12-h ikifuatiwa na ufikiaji wa 12-h kwa suluhisho la 10% (w / v) suluhisho la sucrose pamoja na panya la kawaida la vibent (LabDiet #5001, PMI, St. Louis, MO, 3.02 kcal / g) kuanzia 4 h kuingia katika eneo la giza kila siku kwa siku za 28 [13]. Kikundi cha kudhibiti (ad libitum chow; n = 7) iliruhusiwa ufikiaji wa matangazo ya tangazo kwa kiwango cha panya wastani. Wanyama wote walikuwa na maji yanayopatikana. Vikundi vingine (vipindi vya sukari na sukari ya bakteria) iliyotumiwa kwenye Majaribio 2 na 3 hawakujaribiwa kwa wasiwasi kwa sababu walishindwa kuonyesha dalili za tabia za kujiondoa kufuatia naloxone au kufunga katika ripoti ya zamani [3].

Siku ya 28, baada ya kunyimwa kwa kawaida kwa 12-h, panya kwenye kikundi cha majaribio zilikataliwa upatikanaji wa sukari na chow kwa 24 h ya ziada. Kikundi cha kudhibiti pia kilinyimwa kwa chow kwa 36 h. Wakati huu, wanyama waliendelea kupata ufikiaji wa maji kwa ad. Alafu wanyama waliwekwa kwa kibinadamu pamoja na maze ya juu ya 5 min kwa kutumia mbinu ya Faili, Lippa, Bia, na Lippa [14]. Vifaa vilikuwa na mikono minne, kila 10 cm kwa urefu wa 50 cm, na ilikuwa mwinuko wa 60 cm juu ya sakafu. Mikono miwili ya kinyume ilifunikwa na kuta za juu sana. Mikono mingine miwili ilikuwa haina ukuta wa kinga. Jaribio hilo lilifanywa chini ya taa nyekundu. Panya ziliwekwa katikati ya maze na zikabadilishwa inakabiliwa na mkono wazi au umefungwa. Kila jaribio la nyongeza lilionyeshwa video na alama kwa muda uliotumika na kichwa na utabiri kwenye mkono wazi, mkono uliofungwa au sehemu ya katikati ya maze na mwangalizi aliyeona hali ya matibabu.

1.3. Jaribio la 2: Je! Panya-unaopata sukari umebadilika DA na ACh kutolewa kwenye viboreshaji wakati wa kufunga?

Kundi tofauti la panya (350-450 g) lilifanywa upasuaji ili kuingiza bangi za mwongozo wa kipaza sauti. Panya zilishughulikiwa na 20 mg / kg xylazine na 100 mg / kg ketamine (ip) iliyoongezewa na ketamine inahitajika (100 mg / kg, ip). Bilateral 21 chaneli cha mwongozo cha chuma cha pua ililenga ganda la nyuma la medali ya kujilimbikizia (ya nje: + 1.2 mm, baadaye: 0.8 mm na ventral: 4.0 mm, kwa kuzingatia bregma, midsagittal sinus, na uso wa fuvu la ngazi, mtawaliwa) kutumia chombo cha stereota sumu.

Panya waliruhusiwa kupona kutoka kwa upasuaji kwa angalau wiki ya 1. Sawa na taratibu katika Jaribio la 1, kikundi cha majaribio (n = 6) ilitunzwa juu ya kunyimwa kila siku kwa 12-h ikifuatiwa na ufikiaji wa 12-h kwa suti ya 10% na kiwango cha panya, kuanza 4 h katika awamu ya giza, kwa siku za 28 kuleta uchovu (yaani, sukari ya katikati). Kundi moja la udhibiti lilidumishwa kwa ratiba moja bila sucrose (vipindi vya kuingiliana, n = 7), wakati kundi lingine lilidumishwa kwenye matangazo ya kila siku ya matangazon = 6). Siku ya 28, kila panya ilihamishwa ndani ya chumba cha maabara na uchunguzi uliingizwa na kuwekwa mahali na saruji ya akriliki 14-16 h kabla ya jaribio ili kuruhusu urejesho wa neurotransmitter utulivu. Uchunguzi wa uchunguzi wa microdialysis ulijengwa kwa sindano ya glasi ya silika (kipenyo cha ndani cha 37 µm, Polymicro Technologies Inc., Phoenix, AZ) ndani ya bomba la chuma cha pua la 26 na ncha ya uchunguzi wa virutubisho kilichowekwa muhuri mwishoni na epoxy (Spectrum Medical Co, Los Angeles, CA, 6000 MW, 0.2 mm kipenyo cha nje x 2.0 mm urefu) [15]. Propu ilionyesha mm 5 mm kutoka kwa cannula ya mwongozo kufikia tovuti iliyokusudiwa kwenye ganda la kukusanya. Chaguzi zilitekelezwa na suluhisho la Ringer lililosongezwa (142 mM NaCl, 3.9 mM KCl, 1.2 mM CaCl₂, 1.0 mM MgCl₂, 1.35 mM Na₂HPO₄, 0.3 mM NaH₂PO₄, pH7.35) kwa kiwango cha mtiririko wa 0.5 µL / min kwa kipindi cha utulivu na saa 1.3 µL / min 2 h kabla na wakati wa majaribio. Neostigmine (0.3 µM) iliongezwa kwa suluhisho la Ringer kuboresha ahueni ya ACh kwa kuzuia uharibifu wake wa enzymatic.

Wakati kipindi cha mwisho cha upatikanaji wa suti ya 12-h kilipomalizika Siku ya 28, chow, sucrose na maji viliondolewa kutoka kwa panya zote. Maji yaliondolewa kwa 36 h ya majaribio ya dial kwa sababu maji ya kunywa yanaweza kubadilisha viwango vya msingi vya DA na ACh [16], ambayo ingechanganya matokeo. Sampuli za Microdialysis zilikusanywa kwa sampuli za 1 h (3 × 20-min) baada ya 12, 24 na 36 h ya kufunga (hakuna chakula, sukari au maji). Kila sampuli iligawanywa, nusu kwa uchambuzi wa DA na nusu kwa ACh.

1.4. Dopamine na asthilini ya acetylcholine

DA na metabolites yake 3,4-dihydroxy-phenylacetic acid (DOPAC) na asidi ya homovanillic (HVA) ilichambuliwa na awamu ya nyuma, chromatografia ya kioevu ya juu na kugunduliwa kwa umeme (HPLC-EC). Sampuli ziliingizwa kwenye kitanzi cha sampuli ya 20-µL inayoongoza kwa safu ya 10-cm na 3.2 mm-bore na 3 µm, Ufungashaji wa C18 (Brownlee Co Model 6213, San Jose, CA). Awamu ya simu ilikuwa na 60 mM sodiamu ya sodiamu, 100 µM ​​EDTA, 1.24 mM heptanosulfonic acid, na 5% vol / vol methanol. DA, DOPAC na HVA walikuwa kipimo na kizuizi coulometric (ESA Co Model 5100A, Chelmsford, MA) na hali ya kuweka uwezo wa kuweka + 500 mV, na uwezo wa seli ya kufanya kazi katika −400 mV.

ACh ilipimwa na awamu ya nyuma HPLC-EC kwa kutumia kitanzi cha sampuli cha 20-withL na safu ya uchambuzi ya C-10 cm (Chrompack Inc., Palo Alto, CA) ACh ilibadilishwa kuwa betaine na peroksidi ya hidrojeni na kiunga cha enzyme isiyo na nguvu (acetylcholinesterase na choline oxidase kutoka Sigma, St Louis, MO na safu kutoka kwa Chrompack Inc., Palo Alto, CA). Awamu ya rununu ilikuwa fosforasi ya potasiamu 18 mM katika pH 200. Kigunduzi cha amperometric kilitumika (Utafiti uliotumiwa wa EG&G Princeton, Lawrenceville, NJ). Peroxide ya haidrojeni ilikuwa iliyooksidishwa kwenye elektroni ya platinamu (BAS, West Lafayette, IN) iliyowekwa kwa 8.0 mV kwa elektroni ya kumbukumbu ya Ag-AgCl (Utafiti uliotumiwa wa EG&G Princeton).

Sampuli tatu, 20-min zilikusanywa katika 12, 24 na 36 h ya kufunga. Kwa kila saa, data ya sampuli hizi tatu zilirekebishwa. Takwimu za DA na ACh zilibadilishwa kuwa asilimia ya wakati wa kunyimwa wa 12-h kwa kila kundi, wakati panya zilizopikwa na kawaida zinaweza kutarajia chakula.

1.5. Historia

Mwishowe ya historia ya majaribio ilifanywa ili kudhibiti uwekaji wa uchunguzi wa kipaza sauti. Panya zilipokea overdose ya pentobarbital ya sodiamu na wakati ilipotibiwa kwa undani ilipotibiwa kwa chumvi ya 0.9% ikifuatiwa na 10% formaldehyde. Wabongo waliondolewa, waliohifadhiwa, na aliyejaribu akagundua sehemu hizo wakati zilikuwa zimekatwa (vipande vya 40 µm, kuanzia nje kwa kifusi) hadi tovuti za vidokezo vya uchunguzi zinapatikana. Mara tu nyimbo za uchunguzi zilionekana, walipangwa njama kwa kutumia rangi ya Paxinos na Watson [17].

1.6. Jaribio la 3: Je! Kuna mabadiliko katika viwango vya sukari ya damu kwa sababu ya kuumwa sana na sucrose?

Panya (300-350 g) katika vikundi vitatu vilitunzwa kwa siku 28 kwenye (a) sukari iliyopitishwa + kupungua (12-h kunyimwa ikifuatiwa na ufikiaji wa 12-h kwa suluhisho la suti ya 10% na chow, ikianza 4 h kuingia katika hatua ya giza ; n = 10), (b) vipindi vya kuingiliana (12-h kunyimwa ikifuatiwa na ufikiaji wa 12-h kwa kiwango cha panya (hakuna sucrose), ikianza 4 h hadi awamu ya giza; n = 10), au (c) ad libitum chow (n = 9). Chow na sukari ziliondolewa na sampuli za damu-mkia zilikusanywa kufuatia 12, 24 na 36 h ya kunyimwa. Damu ilikusanywa kutoka ncha ya mkia na mmoja wa majaribio akimshikilia kwa upole mnyama wakati mwingine alitengeneza sura ndogo kuhusu 5 mm kutoka ncha ya mkia na scalpel laini. Damu ilikusanywa kwenye tube ya capillary, centrifuged na serum ilichambuliwa kwa viwango vya sukari na Analox GM7 Fast Enzymatic Metabolizer (Analox, Lunenburg, MA). Katika kipindi cha siku cha kupata 28, sukari na ulaji wa chow walikuwa walipimwa kila siku, na uzani wa mwili ulikuwa kipimo kila wiki. Uzito wa mwili pia ulipimwa katika kila wakati wa wakati wa kunyimwa.

1.7. Takwimu

Takwimu zaidi za uchambuzi zilichambuliwa na Mwanafunzi mmoja-tailed, bila malipo t-tatu. Cohen's d, ambayo hupima ukubwa wa athari [18], na p_mwakilishi, ambayo hutoa uwezekano wa replication [19], pia zilihesabiwa. Takwimu za DA na ACh zilichambuliwa kama tofauti ya asilimia kutoka msingi wa kawaida kama ilivyoelezwa hapo juu, kwa kutumia hatua mara mbili za kurudia ANOVA ikifuatiwa na vipimo vya post hoc Tukey. Viwango vya sukari ya damu, uzito wa mwili na data ya ulaji zilichambuliwa na hatua za kurudiwa kwa njia mbili ANOVA.

2.1. Uzito wa mwili, ulaji wa sukari na ulaji wa chow

Takwimu zilizokusanywa wakati wa kipindi cha siku cha 28 katika Jaribio la 3 ilifunua kuwa panya na ufikiaji wa kupachika kwa sucrose iliongezea ulaji wao wa kipindi cha siku cha kufichua 28 (F(27, 279) = 4.9, p <0.001; Kielelezo 1A), ugunduzi sawa na ulioonyeshwa katika ripoti zetu za zamani na sucrose au sukari [3,20]. Idadi ya ulaji wa Chow ilionyesha tofauti kubwa kati ya vikundi. Panya zilizo na upatikanaji wa sukari wa kawaida zilikula chini ya kokwa kuliko matangazo ya tangazo na vikundi vya vipindi vya kuingiliana (F(2,26) = 60.8, p <0.001; Kielelezo 1B). Walakini, hakukuwa na tofauti kati ya vikundi kwa ulaji wa caloric wa kila siku (Kielelezo 1C).

  

Mtini. 1

Ulaji wa sukari na chow wakati wa kipindi cha siku cha 28 cha ufikiaji. A) Panya na sukari ya kawaida + chow iliongezea ulaji wa sukari ya kila siku kwa wakati. B) Panya zilizo na sukari ya kawaida + chow zilila gramu chache za chow kuliko ile ya mp na pazo la tangazo ...

Hakukuwa na tofauti katika uzani wa mwili kati ya vikundi wakati wa kipindi cha siku cha 28; Walakini, kulikuwa na athari ya wakati, na vikundi vyote vitatu kupata uzito zaidi ya siku za 28 (F(4,104) = 298.9, p <0.001). Wakati wa 36 h ya kunyimwa, uzito wa mwili ulipungua kwa muda kwa vikundi vyote (F(2,52) = 1957.8, p <0.001), bila tofauti kati ya vikundi wakati wowote (12, 24 au 36 h).

2.2. Jaribio la 1: Fahirisi za mwenendo wa wasiwasi baada ya kufunga katika panya za kupindisha sukari

Wakati kuwekwa katika nyongeza pamoja ya maze kwa 5 min, baada ya 36 h ya chakula kunyonya panya ambayo hapo awali ilikuwa inahifadhiwa juu ya sukari ya kawaida + chow alitumia wakati mdogo (18 ± 4 s, 6% of the whole hand of maz-plus ikilinganishwa na kikundi cha tangazo cha uwasilishaji kilichopunguzwa haki ambacho hakikuwa na uzoefu wa kujitokeza (34 ± 8 s, 11% ya jumla ya wakati; t(16) = 2.01, p <0.05, d = 1.03, ambapo 0.8 au juu inachukuliwa kuwa saizi kubwa ya athari [18], na p_mwakilishi = 0.87; Mtini. 2).

  

Mtini. 2

Asilimia ya muda uliotumika kwenye mkono wazi wa muinuko zaidi wa nyongeza. Panya ambazo hapo awali zilikuwa zimelishwa sukari ya kupindukia + chow zilitumia wakati kidogo kwenye mkono wazi kufuatia 36 h ya kufunga ikilinganishwa na kundi la tangazo la libisho chow lililokataliwa. ...

2.3. Jaribio la 2: Panya unaopata sukari umepunguza DA ya nje na kuongeza ACh kwenye ganda la NAc wakati wa kufunga.

Kulikuwa na mwingiliano mkubwa kati ya kikundi na wakati (12, 24 na kunyimwa kwa 36 h)F(4,28) = 2.86, p <0.05; Kielelezo 3A). Baada ya 24 h ya kufunga, kutolewa kwa DA kupungua hadi 68 ± 6% kwa kundi hapo awali kulishwa sukari + chow, na 72 ± 5% kwa kikundi cha ad libitum chow, wakati kilibaki bila kubadilika kwa kundi la vipindi (95 ± 7%) . Baada ya 36 h ya kufunga nje ya seli ya DA kubaki chini kwa kikundi cha mpito sucrose + chow (61 ± 14%), na kwa wakati huu kilikuwa chini sana kuliko kikundi cha ad libitum chow (113 ± 14%, p <0.05) na kikundi cha chow cha vipindi (104 ± 15, p <0.05).

  

Mtini. 3

DA ya ziada na ACh katika NAc ifuatayo 24 na 36 h ya kufunga. A) Baada ya kufunga ya 36 h, kutolewa kwa DA katika kundi la sukari + chow (bar nyeusi) ilikuwa chini sana kuliko vipindi vya kuingiliana (kizuizi kijivu) na tangazo libitum chow (nyeupe ...

Hakukuwa na tofauti kati ya vikundi baada ya 12 h ya kunyimwa kwa ama DA au ACh (sukari ya kuingiliana + chow = 1.6 ± 0.3 pg na 0.4 ± 0.1 pmol / sampuli; intermittent chow = 1.5 ± 0.4 pm na sampuli ya 0.7 ± libitum chow = 0.3 ± 1.4 pg na 0.3 ± 0.7 pmol / sampuli; DA na ACh, mtawaliwa).

Baada ya kufunga kwa 24 h, viwango vya DOPAC vilipunguzwa kwa vikundi vyote (F(2,34) = 33.8, p <0.001). Mwelekeo sawa, ingawa haukuwa muhimu ulizingatiwa saa 36 za kufunga. Kulikuwa na athari ya muda kwenye kutolewa kwa HVA (F(2,34) = 6.97, p <0.001). Kama DOPAC na DA, HVA ilipunguzwa saa 24 ya kufunga kwa vikundi vyote (Meza 1). Walakini, na 36 h ya kufunga, HVA ilikuwa juu kwa kikundi cha sukari cha kuingiliana (119 ± 20%), lakini kilibaki kidogo kupungua kwa tangazo la sebitum chow na vikundi vya vipindi vya katikati.

  

Meza 1

Thamani za viwango vya DOPAC na HVA katika Jaribio la 2

Extracellular ACh ilibadilika kwa mwelekeo tofauti wa DA. Kulikuwa na mwingiliano mkubwa kati ya kikundi na wakati (F(4, 30) = 4.81, p <0.005; Kielelezo 3B). ACh iliongezeka baada ya 24 h ya kufunga kwa mpito sucrose + chow group (115 ± 10%; p <0.05), lakini sio kwa kikundi cha ad libitum chow (77 ± 13%) au kikundi cha chow cha vipindi (90 ± 15%). Tofauti hii iliboreshwa baada ya 36 h ya kufunga, na ACh ikiongezeka kwa kikundi cha vipindi cha sucrose + chow (164 ± 14%) ikilinganishwa na viwango vilivyoonekana kwenye ad libitum chow (97 ± 17%; p <0.05) na chow ya vipindi (104 ± 15%; p <0.05) vikundi vya kudhibiti.

Kumbuka kwamba hatua za msingi zilichukuliwa baada ya 12 ya kwanza ya kufunga wakati vipindi vya kawaida vya sucrose + chow na panya za kawaida zinaweza kupata chakula. Kwa hivyo, hatua ya kufunga ya 36-h ilikuwa hasa 24 h baada ya kipimo cha 12-h. Katika hatua hii katika mzunguko wa vikundi vikundi vya udhibiti vya chow-havikuonyesha mabadiliko katika DA au ACh, wakati kikundi cha kupeana sukari kilikuwa na kiwango cha chini cha DA na ACh ya juu.

Historia ilithibitisha kwamba uwekaji wa probe kimsingi ulikuwa kwenye ganda la NAc (Mtini. 4).

  

Mtini. 4

Uwekaji wa track ya Probe unaonyesha kuwa sampuli za kipaza sauti zilichorwa kutoka kwa ganda laial na NAc kwa ndege 1.2 na 1.7 nje hadi bregma [17]. CPu = caudate putamen, AcbC = kukusanya msingi, AcbSh = shell ya kukusanya.

2.4. Jaribio la 3: Ishara za kujiondoa kufuatia kufunga katika panya-unaopindisha sukari hazihusiani moja kwa moja na hypoglycemia

Hakukuwa na tofauti kubwa katika viwango vya sukari ya damu kati ya vikundi (anuwai ya 12 h = 5.1-7.8 mmol, masafa kwa 24 h = 4.6-6.9 mmol, masafa kwa 36 h = 4.2-6.4 mmol). Kulikuwa na, hata hivyo, athari ya wakati, viwango vya sukari ya damu vikishuka kwa vikundi vyote wakati wa 36 h ya kunyimwa (F(2,52) = 52.8, p <0.001).

3.1. Dalili za mwenendo wa wasiwasi wakati wa kufunga katika panya-kuumwa na sukari

Maze iliyoinuliwa pamoja ni moja ya majaribio ya wanyama yanayotumiwa sana ya wasiwasi [14,21], na imethibitishwa sana kwa wasiwasi wa jumla [22] na wasiwasi unaosababishwa na uondoaji wa dawa za kulevya [23]. Matokeo ya Jaribio la 1 yanaonyesha kwamba kufunga kufuatia lishe ya upatikanaji wa sukari kwa muda mfupi kunaweza kusababisha wasiwasi kama ilivyo kipimo na kiwango cha juu cha macho. Panya ambazo hapo awali zilikuwa zikiziuma sukari zilitumia 6% ya wakati huo kwenye mkono wazi wa maze, ikilinganishwa na 11% kwa kikundi cha ad libitum chow. Hizi data ziko katika anuwai ya maadili yaliyopatikana na wengine, na matokeo ni sawa na yale ambayo kawaida hupatikana kwa kutumia utaratibu huu [24,25]. Utaftaji huu ni sawa na upunguzaji wa mkono wa wazi uliopungua baada ya kujiondoa kujiondoa kutoka morphine [26]. Katika masomo ya zamani, wanyama ambao wamehifadhiwa kwenye lishe ya tangazo la sukari na chow hawakuonyesha dalili zozote za wasiwasi wakati unasimamiwa naloxone, wakati wanyama waliowekwa kwenye sukari ya kawaida na chakula cha chow walionyesha wasiwasi wakati wa kupeana kipimo sawa cha naloxone [3]. Upataji wa sukari ya tangazo la sukari pia imeshindwa kutoa ishara zingine za tabia ya utegemezi, pamoja na uhamasishaji wa msalaba kwa amphetamine [27] na uzingatiaji wa kunywa pombe [28]. Ufikiaji wa sukari kwa usawa haitoi tabia hizi. Umuhimu wa ufikiaji wa muda mfupi katika kuongeza athari zilizotazamwa unashauriwa zaidi na matokeo ambayo kujizuia kwa tangazo la sebcharin hakujasababisha tabia kama ya kufadhaisha [29], ambayo ni tabia nyingine ambayo inaweza kuzingatiwa wakati wa kujiondoa. Kwa sababu ya masomo haya ya zamani, sukari ya adhibitum haikujaribiwa katika jaribio la sasa.

Utafiti umeonyesha pia kuwa sio usimamizi wa lishe ya sucrose, lakini kujiuzulu kwa muda mrefu kutoka kwa lishe ambayo huonyesha ishara za wasiwasi katika panya unaovutia. Hapo awali tumeripoti kwamba panya unaovuma sukari na ufikiaji wa kila siku wa 12-h, ikifuatiwa na kunyimwa kwa 12-h, haonyeshi dalili za wasiwasi, wito wa dhiki ya ultrasonic au wasiwasi juu ya kiwango cha juu cha maze kufuatia 12-h, kila siku kipindi cha kunyimwa chakula [3]. Matokeo ya sasa yanathibitisha kuwa kunyimwa kwa 36-h husababisha hali ya wasiwasi.

Upataji wa wasiwasi wakati wa kufunga katika Jaribio la 1 ni sawa na ishara za kujiondoa kama za opiate ambazo zinaweza kutolewa kwa mpinzani wa opioid, naloxone [3]. Sensitivity to naloxone katika panya-kuuma panya inaonyesha mabadiliko katika receptors endio asili kama matokeo ya chakula. Hii imethibitishwa katika ripoti zinazoonyesha kuwa kuumwa sana na mabadiliko ya chakula bora enkephalin mRNA na receptor ya μ-opioid inayofunga katika NAc [30-32]. Inawezekana kwamba ishara za kujiondoa kufuatia kunyimwa ambayo huzingatiwa katika utafiti uliopo ni kwa sababu ya ukosefu wa msukumo wa asili wa kupindukia katika wanyama wanaopiga sukari.

Matokeo haya yanakubaliana na ripoti zingine za ishara za kujiondoa kama za opiate zinazofuatia kufunga, au zinazojitokeza mara moja, kwenye panya ambazo hapo awali zilikuwa zikumwa na sukari. Mbali na ishara za shida za mtu [3], tabia ya fujo na kupungua kwa joto la mwili vimebainika [10]. Mabadiliko haya katika tabia na fiziolojia ni sawa na yale yanayotambuliwa wakati wa kujiondoa kutoka kwa opiates [33,34], na kuunga mkono nadharia kwamba lishe ya upatikanaji wa suluhisho la sukari inaweza kusababisha dalili za kujiondoa kama opiate.

3.2. DA ya ziada na ACh kwenye mkusanyiko wakati wa kufunga kwenye panya-kuumwa na sukari

Katika 36 h ya kufunga, ikilinganishwa na vikundi vyote viwili vya kudhibiti, viwango vya DA vilipunguzwa sana kwa kikundi cha sukari kinachoendelea + chow. Hii inaonyesha kuwa kunyimwa kwa chakula na maji kunaweza kusababisha upotezaji wa sauti ya DA kwenye panya na historia ya kupungukiwa na sukari. Wakati huo huo, ACh ya extracellular imeinuliwa, inapendekeza hali ya kujiondoa kama opioid.

Vikundi vya udhibiti havikuonyesha athari hii. Katika wakati huu wa wakati wa 36-h, ambayo ni hatua sawa ya mzunguko wa mwanga / giza kama wakati wa 12-h, DA ilikuwa imerejea katika viwango vya msingi vya kikundi cha ad libitum chow (Kielelezo 3A). Hii inaonyesha kuwa mkusanyiko wa DA kutolewa katika kikundi cha ad libitum chow kilifuata wimbo wa kuchoma, kama ilivyopendekezwa na Paulson na Robinson [35]. Wengine wamependekeza mabadiliko kama hayo katika msimamo [36,37]. Athari za diurnal hazikuzingatiwa na kundi la vipindi, labda kwa sababu kulisha kwa mzunguko kunaweza kubadilisha wimbo wa kawaida wa circadian wa kutolewa kwa DA.

Kupungua kwa muda mrefu kwa DA ya nje katika kundi la sukari ya muda mfupi + ni sawa na ile iliyoripotiwa wakati wa kujiondoa mara moja kutoka kwa morphine [7], na inaweza kuchukua jukumu la kukuza kutekelezwa tena kwa ulaji wa sukari baada ya kukomesha [38]. Matokeo yaliyopatikana na kikundi cha kuingiliana kwa muda mfupi, ambayo ilionyesha mabadiliko kidogo katika kutolewa kwa DA wakati wowote, inaonyesha kwamba mchanganyiko wa kuumwa juu ya sukari na chow, sio tu chow, ni muhimu katika kutoa athari zilizotazamwa.

Ingawa DOPAC na HVA kawaida hufuata mifumo inayofanana na DA, hali hii sio kawaida. Katika jaribio la sasa, DOPAC na HVA hawakuonyesha mabadiliko ya kienyeji kama ile ya kuzingatiwa na DA, na badala yake walibakiza kwa muda. Ijapokuwa wengine wameripoti kushuka kwa thamani kwa mzunguko katika metabolites hizi katika NAc [35], hatujui karatasi yoyote ambayo imepima viwango hivi wakati wa kufunga kwa 36 h. Kwa hivyo, katika jaribio la sasa, kufunga kunaweza kuathiri metaboli ya DA katika kikundi cha kudhibiti chow.

Viwango vya ACh vilionyesha tofauti kubwa kati ya vikundi baada ya 36 h ya kufunga. ACh katika NAc imeingizwa katika tabia ya kumeza [39] na ujanja haswa [40-44], na, wakati DA ni chini, ACh inaweza kukuza uchukizo [40,45-48]. Ongezeko kubwa la ACh lililoonekana katika panya za sukari wakati wa kufunga wakati wa kufunga kwenye jaribio la sasa linaweza kuambatana na hali hasi za kunyimwa tuzo. Masomo ya awali yanaunga mkono nadharia kwamba matokeo yaliyoripotiwa hapa ni matokeo ya kunyimwa kutoka kwa lishe ya sucrose. Panya kuuma juu ya kutolewa kwa sucrose DA na kuonyesha kusudi la kutolewa kwa ACh katika NAc [20,49], ambayo ni kinyume cha matokeo ya sasa yanayoonekana wakati wa kunyimwa kwa muda mrefu. Usawa baina ya accumbens DA na ACh katika kikundi cha sukari + chow, lakini sio katika vikundi vya udhibiti, vinaweza kuchangia wasiwasi unaogunduliwa katika Jaribio la 1.

3.3. Viwango vya sukari ya damu wakati wa kufunga kwenye panya-kuumwa na sukari

Hypoglycemia inaweza kusababisha hali ya kuzururafa ambayo mnyama anaweza kujaribu kutoroka kwa kula. Behaviors inayohusishwa na jimbo hili la watazamaji ni sawa na ile inayotunzwa wakati wa utawala wa naloxone au kufunga katika panya zinazoingiliana [50]. Sababu nyingi zinaweza kushawishi mfumo wa ujira wa ubongo. Walakini, kwa sababu ya kufanana kati ya tabia inayotazamwa wakati wa hypoglycemia na ile iliyotunzwa wakati wa wasiwasi, uchunguzi huu ulipima viwango vya sukari ya damu ili kuhakikisha kuwa athari zilizogunduliwa hazikuwa tu kwa sababu ya hali ya ugonjwa wa glycemic. Viwango vya sukari ya damu vilikuwa sawa katika vikundi vyote na kwa hivyo haonekani kuwajibika kwa tofauti za tabia au mabadiliko katika kutolewa kwa DA na ACh. Inaweza kuingizwa ambayo inamaanisha viwango vya insulini vilivyobaki kuwa sawa kwa vikundi vyote, kwani mabadiliko katika viwango vya sukari ya damu hayakuzingatiwa na uzani wa mwili haukutofautiana kama matokeo ya ratiba za kulisha. Kwa hivyo, matokeo ya sasa, na vile vile katika ripoti yetu ya zamani [30], zinaonyesha mabadiliko ya tabia na neva sio matokeo ya tofauti katika viwango vya sukari ya damu. Badala yake zinaweza kuwa ni kwa sababu ya mchanganyiko wa mabadiliko katika opioid za endoid na mifumo ya DA.

Utafiti huu uliungwa mkono na ruhusa ya USPHS AA-12882 (kwa BGH) na DA-16458 na DK-79793 (ushirika na NMA).