Chakula cha Mazao cha Juu cha Juu kinaongezeka kwa Utawala wa Usimamizi wa Sucrose Katika Panya Vijana (2013)

Hamu. Kitabu cha Mwandishi; inapatikana katika PMC 2014 Feb 1.

Imechapishwa katika fomu ya mwisho iliyopangwa kama:

Tamaa. 2013 Feb; 61 (1): 19-29.

Imechapishwa mtandaoni 2012 Sep 27. do: 10.1016 / j.appet.2012.09.021

PMCID: PMC3538965

NIHMSID: NIHMS411020

Dianne P. Figlewicz,^1,² Jennifer L. Jay,² Molly A. Acheson, Irwin J. Magrisso,⁴ Constance H. West,¹ Aryana Zavosh,² Stephen C. Benoit,³ na Jon F. Davis³

abstract

Hapo awali tumeripoti kwamba lishe ya kiwango cha juu cha mafuta huongeza motisha ya kujitokeza katika panya za watu wazima. Katika utafiti huu, tulijaribu athari za motisha, neva, na kimetaboliki ya lishe kubwa ya mafuta katika mabadiliko ya panya wa kiume kupitia ujana, wakati wa wiki za 5-8. Tuliona kuwa lishe kubwa ya mafuta iliongezeka kujibu kwa sucrose, ambayo ilikuwa huru na mabadiliko ya mabadiliko ya metabolic au mabadiliko ya metabolites ya catecholamine neurotransmitter katika kiini cha madini. Walakini, viwango vya AGRP mRNA katika hypothalamus viliinuliwa sana. Tulionyesha kuwa kuongezeka kwa uanzishaji wa neuron ya AGRP kunahusishwa na tabia ya motisha, na kwamba mambo ya nje (tatu cerebroventricular) Utawala wa AGRP ulisababisha kuongezeka kwa motisha kwa sucrose. Uchunguzi huu unaonyesha kwamba kujieleza na shughuli za AGRP katika medial hypothalamus zinaweza kusababisha kuongezeka kwa kujibu kwa sucrose iliyosababishwa na uingiliaji wa lishe kubwa ya mafuta. Mwishowe, tulilinganisha uhamasishaji wa sucrose katika panya za watu wazima na tuliona kuongezeka kwa motisha kwa panya, ambayo inaambatana na ripoti za zamani kwamba wanyama wachanga na wanadamu wana upendeleo ulioongezeka kwa ladha tamu, ikilinganishwa na watu wazima. Pamoja, masomo yetu yanaonyesha kuwa lishe ya nyuma ina jukumu kubwa la kuhamasisha kwa motisha kwa ladha tamu katika wanyama wa ujana.

Keywords: Kuhamasisha, thawabu ya chakula, lishe kubwa ya mafuta, ujana

kuanzishwa

Hapo awali tumeripoti kwamba mfiduo mfupi wa chakula chenye kiwango kikubwa cha mafuta (31.8%) husababisha motisha ya kuongezeka kwa panya kwenye panya wazima (Figlewicz et al., 2006). Ushawishi dhidi ya mazingira ya kibaolojia, au umoja wao, juu ya upendeleo wa chakula na motisha kwa vyakula vyenye mnene wa nishati vimethaminiwa zaidi ya muongo mmoja uliopita. Hii imeongeza umuhimu katika vijana, kwani ugonjwa wa kunona sana kwa watoto umeongezeka sana katika muongo mmoja uliopita (Ogden na Carroll, 2010). Kuongezeka kwa upendeleo wa ladha tamu kumeandikwa katika wanyama wadogo na kwa watoto wa watoto (Coldwell, Oswald, & Reed, 2009; Desor na Beauchamp, 1987; Desor, Greene, & Maller, 1975; Mennella, Pepino, & Reed, 2005; Meyers & Sclafani, 2006)), na ndio msingi wa mapema wa tasnia ya chakula kubuni na kuuza vyakula vilivyowekwa vifurushi na vinywaji vyenye sukari nyingi, kwa watoto. Walakini, athari za ushawishi wa mazingira, kama vile lishe ya nyuma, juu ya motisha ya sucrose katika panya za vijana haijatathminiwa kimfumo.

Makadirio ya sasa yanaonyesha kuwa 10-20% ya watoto na vijana nchini Amerika wanachukuliwa kuwa feta (Ogden na Carroll, 2010). Kwa wastani idadi ya watu wa Amerika hutumia 336 kcal ya sukari iliyoongezwa kila siku (Taasisi ya Saratani ya Kitaifa iliyotumiwa Programu ya Utafiti). Wakati idadi ya watu imejitenga na kuwa watu wazima (19 + umri wa miaka) na idadi ya watoto (2-18 umri wa miaka), nambari hii ni kubwa zaidi kwa watoto / vijana na chini kidogo kwa watu wazima. Kwa vijana, sukari nyingi zilizoongezwa hutoka kwa sukari, vinywaji vya nishati, na vinywaji vya michezo (Taasisi ya Saratani ya Kitaifa iliyotumiwa na Programu ya Utafiti). Mapitio ya kina ya utaratibu na uchambuzi wa meta umeonyesha kuwa ulaji wa kinywaji laini unahusishwa na ulaji mwingi wa nishati na uzito wa mwili (Vartanian, Schwartz, na Brownell, 2007). Idadi ya vijana (miaka 14-18) hutumia sukari iliyoongezwa kcal 444 kila siku, na watoto kati ya umri wa miaka 9 na 13 hutumia kcal 381 zilizoongezwa sukari kila siku (Taasisi ya Kitaifa ya Utafiti wa Taasisi ya Saratani). Matumizi haya ya ziada yanaweza kuhusishwa kwa sehemu na upendeleo mzuri wa tamu kwa watu wadogo dhidi ya watu wazima (Coldwell, Oswald, & Reed, 2009; Desor na Beauchamp, 1987; Desor, Greene, & Maller, 1975; Mennella, Pepino, & Reed, 2005). Uchunguzi umeonyesha kuwa watoto wa kati ya miaka ya 9 na umri wa miaka 15 wanapendelea suluhisho la sukari kwa viwango vya juu kuliko mkusanyiko wa sampuli ya watu wazima (Desor, Greene, & Maller, 1975). Masomo ya longitudinal yamejaribu upendeleo mzuri wa watoto hawa muongo mmoja baadaye katika maisha, wakati ambao upendeleo wao ulikuwa umepungua na haukuwa tofauti sana na upendeleo wa watu wazima (Desor na Beauchamp, 1987). Utafiti pia umeonyesha upendeleo kwa viwango vya juu vya sucrose kwa watoto ukilinganisha na mama zao (Mennella, Pepino, & Reed, 2005). Hii inaonyesha kwamba upendeleo wa sukari ya utoto ulioinuliwa hausababishiwi na vinasaba, lakini badala yake inaweza kuonyesha hali ya maendeleo. Utafiti pia umeonyesha upendeleo huu wa kuongezeka kwa sucrose katika panya (Meyers & Sclafani, 2006).

Mifumo mingi na huduma za kuunganishwa kwa CNS ni za plastiki wakati wa ujana kwa wanadamu na panya, pamoja na mfumo wa mesocorticolimbic na shughuli za dopaminergic katika kiunga cha nukta, tovuti muhimu ya upatanishi wa ujira na motisha (Ikemoto & Panksepp, 1996; Kelley na Berridge, 2002) (angalia Andersen & Teicher [2008] kwa hakiki ya hivi karibuni). Umuhimu wa utendaji wa mabadiliko haya ya anatomiki na neurochemical sasa yamewekwa wazi. Utafiti wa hivi karibuni kutoka kwa Bolaños na wenzake, na wengine, wamekuwa wakikagua athari za matibabu ya baada ya matibabu ya dopamine kupandisha mpinzani methylphendate (Ritalin) katika panya la kuchomeka, vijana. Kuna ripoti za neurochemistry iliyobadilishwa na tabia katika maisha ya watu wazima kama kazi ya matibabu ya ujana na ujana na methylphenidate (Bolaños et al., 2003; Bolaños, Glatt, & Jackson, 1998; Brandon, Marinelli, Baker, & White, 2001; Brandon, Marinelli, & White, 2003). Wakati matokeo hayatabadiliki kabisa, labda kutokana na mitindo tofauti ya wanyama waliosomewa, kwa pamoja masomo haya yanasisitiza kwamba kipindi cha ujana huonekana kuwa fursa ya maendeleo ya kubadilisha kazi ya dopamine. Chakula ni kichocheo cha asili kwa kutolewa kwa dopamine kutoka kwa makadirio ya eneo la eneo (VTA) kwa mkusanyiko wa nukta, na ulaji wa sucrose na panya husababisha kutolewa sana kwa dopamine (Roitman et al., 2004). Tunadanganya kwamba motisha ya sucrose inahusishwa na kuongezeka kwa dopamine ya nuksi, na mabadiliko ya mvuto wa mazingira yanaweza kuwa nyeti kwa kipekee wakati huu wa hatua ya ujana, wakati wa uchapishaji katika panya.

Kwa kuzingatia upendeleo wa juu wa ladha tamu kwa watoto na panya wachanga, tuliona ni muhimu pia kuamua vigezo vya motisha kwa kujitokeza katika fimbo za ujana. Katika msururu huu wa tafiti, tulitathmini athari za uingiliaji wa chakula kingi cha mafuta juu ya uhamasishaji wa kujitokeza katika panya wakati zilikua kutoka kwa kuchomoka baada ya kuzaa. Baadaye tulifanya tathmini ya metabolic na CNS ili kugundua mabadiliko ya kimetaboliki, endokrini, au mabadiliko ya neural yanayohusiana na uingiliaji wa chakula. Ikilinganishwa na yale ambayo tumeripoti katika panya za watu wazima, lishe ya kiwango cha juu cha mafuta (31.8%) ilikuwa na ufanisi katika kuongeza hali ya kujitawala. Tulijaribu pia ikiwa kuna athari ya matibabu ya baada ya lishe juu ya motisha ya watu kwenye watu wazima kama vijana, kulinganisha na aina za athari za maisha ya baadaye zilizoripotiwa kwa tabia zingine. Masomo yetu yanaonyesha kuwa panya wachanga huonyesha motisha kwa sucrose wakati kulishwa chakula kingi cha mafuta ambayo inaweza kupatanishwa na Orexigenic, hypothalamic peptide AGRP; kwamba kunaonekana hakuna athari yoyote ya uingiliaji wa chakula cha mapema, kuwa mtu mzima wa baada ya kuzaa; na tabia hiyo inajidhihirisha ingawa panya ni za kimetaboliki kawaida, na za kuharibika kabla. Mwishowe, panya za pembeni zinaonyesha motisha kwa jamaa ya kujitokeza kwa panya za watu wazima.

Vifaa na mbinu

Masomo

Mada walikuwa panya wa kiume Albino kutoka Simonsen (Gilroy, CA). Panya zilitunzwa kwenye chow (Maabara ya Panya ya Maabara ya 5001, LabDiet) au lishe ya wastani ya mafuta (31.8%; Utafiti wa Lishe Inc) ad libitum. Lishe hiyo inaendana na yaliyomo ya jumla ya wanga (58% kcal dhidi ya 51% kcal kwa mafuta ya chini dhidi ya mafuta ya juu, mtawaliwa). Chini ya mafuta ya chini ina sukari ya bure ya 6.23 gm% na lishe ya juu ya mafuta ina 29 gm% sucrose. Zilitunzwa kwenye 12: Mzunguko wa-giza wa 12 h na taa kwenye 6 AM. Isipokuwa imeonyeshwa vinginevyo, panya zililetwa katika umri wa wiki za 3, mara baada ya kuchomoka, na ziliwekwa kwaajili ya viboreshaji hadi wiki za 5 za umri. Katika umri huu, mlo na / au mafunzo ya tabia na upimaji vilianza. Itifaki maalum zimeelezewa kwa kina hapa chini, na zimefupishwa kwa muhtasari Meza 1. Kwa sababu panya wa kiume hupitia ujana kwenye 6^th-7^th Wiki ya umri, muda wa masomo ulibuniwa kusoma panya wakati wanapitia hatua hii ya maendeleo. Taratibu zote zilizofanywa kwenye panya zilifuata miongozo ya NIH ya utunzaji wa wanyama, na iliidhinishwa na Kamati ndogo ya Utunzaji na Matumizi ya Kamati ndogo ya Kamati ya Utafiti na Maendeleo katika Mfumo wa Huduma ya Afya ya VA Puget.

Itifaki za majaribio

Sucrose binafsi utawala

Itifaki ya Jumla. Taratibu zilitokana na mbinu yetu iliyochapishwa (Figlewicz et al., 2008; Figlewicz et al., 2006). Taratibu zote za mafunzo na upimaji zilifanyika kati ya 0700 na 1200 hr. Jaribio hilo lilijumuisha awamu za 2-3: mafunzo ya uundaji wa muda na mafunzo ya uwiano (FR) uliowekwa; upasuaji na kupona katika vikosi maalum (ona Meza 1); na mafunzo ya uwiano wa hatua kwa hatua (PR) ukitumia algorithm PR ya Richardson na Roberts (Richardson na Roberts, 1996). Algorithm PR inahitaji 1, 2, 4, 6, 9, 12, 16, 20, 28, 36, 48, 63, 83, 110, 145, 191, 251, XNUM nk) vyombo vya habari vya usambazaji wa kufanikiwa kwa malipo ndani ya kikao, na ni mtihani mgumu wa uhamasishaji na thawabu (331). Panya zilifunzwa kujisimamia mwenyewe 437% sucrose (malipo ya 575 ml) yaliyotolewa ndani ya starehe ya kioevu. Sanduku linalofanya kazi, lililodhibitiwa na Mfumo wa Washirika wa Med (Georgia, VT), lilikuwa na levers mbili, lakini lever moja tu (lever hai, inayoweza kutolewa tena) aliamsha pampu ya kuingiza. Vyombo vya habari kwenye lever nyingine (kisicho na nguvu, kilicho na vituo) pia vilirekodiwa. Suluhisho la sucrose lilikabidhiwa ndani ya sanduku la kushuka kwa kioevu kwa matumizi ya mdomo (Mer Associates). Mafunzo ya awali yalifanywa wakati wa vikao vya saa moja kwa siku za 759 chini ya ratiba ya uimarishaji inayoendelea (FR999: kila waandishi wa habari waliimarishwa), na upeo mkubwa wa tuzo za sufuria za 999 zilizotolewa kwa kila kikao. Kila kikao kilianza na kuingizwa kwa lever hai na taa ya nyumba nyeupe iliyobaki kwa kipindi chote. Toni ya 27-s (5 Hz, 0.5 dB hapo juu) + nyepesi (10 W taa nyeupe juu ya lever hai) saruji ya kiwanja cha diski iliyoambatana na kila uwasilishaji wa malipo, ikifuatiwa na wakati wa 1-sec baada ya kila kujifungua. Mafunzo ya PR yalifanywa kwa kiwango cha juu cha 50 h / siku kwa siku kumi. Vipindi vya kila siku vilimalizika baada ya dakika ya 5 ya hakuna vyombo vya habari vya kuvuja kujibu, wakati huo taa ya nyumba ilizimwa na lever hai ikatolewa.

Athari za AGRP juu ya kujitawala kwa hali ya juu

Kama matokeo yetu yalionyesha kuongezeka kwa kujieleza kwa AGRP mRNA katika panya za chakula kulisha chakula kingi cha mafuta, tulitaka kudhibiti kwamba AGRP inaweza kuongeza kujitawala kwa hali ya juu. Panya za zamani za kulishwa za 5-wk zilichukuliwa kupitia mafunzo ya FR, kisha zilipokea bangi ndani ya patri ya tatu ya ubongo (ICV). Kufuatia wiki ya kupona, uthibitisho wa kuwekwa na jaribio la majibu ya kunywa ya angiotensin II (tazama Figlewicz et al., [2006]), na kikao kimoja cha mafunzo ya FR upya, panya zilianzishwa kwenye dhana ya kujitawala ya PR. Baada ya PR Day 1, panya walipewa moja ya vikundi viwili kama hiyo inamaanisha utendaji wa Siku ya PR 1 haukutofautiana kati ya vikundi viwili (gari la bandia CSF, aCSF; au AGRP, 2 μl ya 0.01 nmol). Walipokea sindano za aCSF (n = 8) au AGRP (n = 7) kwa siku PR 2, 5, na 8. Jumla ya ulaji wa chakula cha kila siku kiliongezwa wakati wa mafunzo ya PR.

Athari za uzee juu ya kujitawala kwa hali ya juu

Tulilinganisha tabia ya kujisimamia kati ya panya za pubertal na watu wazima vijana, kulishwa chow au lishe ya mafuta ya 31.8%. Panya zilikuwa na wiki mbili za kuongeza kiboreshaji kwenye VAPSHCS vivarium (3-5wk au 8-10 wk). Walipokea lishe wakati wa kipindi chote cha mtihani / mafunzo (4 wk). Kwa hivyo, kama katika majaribio ya awali, panya za pubertal zilisomwa kwa 5-8 wk ya umri. Wazee wachanga walisomewa umri wa 10-13 wk.

Uamuzi wa muundo wa mwili

Ubunifu wa mwili ulipimwa kwa kutumia visasi vya uchunguzi wa nguvu ya seli (QMR [Nixon et al., 2010]) kuamua maji ya mwili yaliyomo ndani ya panya, ambayo mafuta ya mwili huhesabiwa. Wanyama waliwekwa kwa wamiliki wa silinda, na kisha wamiliki huingizwa kwenye mashine ya QMR kwa skati ya dakika ya 2, ambayo hufanya vipimo mara tatu. Takwimu zimehifadhiwa kwenye kompyuta iliyojumuishwa (EchoMRI, Mifumo ya Matibabu ya Echo, Houston, TX) kwa hesabu ya haraka ya maji ya mwili mzima, mafuta, na konda.

Upimaji wa uvumilivu wa sukari ya ndani (IVGTT)

Ufahamu wa IVGTTs ulifanywa kwa panya na bangi zilizoingizwa kwa muda mrefu za IV, ambazo zilifungwa haraka usiku mmoja kabla ya kusoma, kwa kutumia mbinu iliyotegemea Frangioudakis, Gyte, Loxham, na Poucher (2008). Mabango ya ndani ya mwili yalipandikizwa wiki mbili kabla ya kusoma, kama mbinu yetu iliyoanzishwa (Figlewicz et al., 2009). Sampuli za msingi zilichorwa kwa kiwango cha t-10 (0.5 ml kwa uamuzi wa insulini na sukari, wakati wote wa hatua) na dakika ya T0. Panya zilipokea infusion ya glucose ya 1 gm / 2ml / kg zaidi ya sekunde 15-20 ikifuatiwa na 0.5 ml flush ya saline. Sampuli za damu zilichukuliwa kwa 5, 15, 30, 60, 90, na 120 min. Kwa sababu ya kung'oa catheter wakati wa utaratibu (kwa hivyo, kutokuwa na uwezo wa kupata sampuli za damu), majibu ya mwisho ya data ya msingi / IVGTT iliyowasilishwa ni 7-8 ya panya lenye kulishwa na 8 kwa lishe iliyolishwa 31.8% ya mafuta (Meza 3). Insulin ya plasma imedhamiriwa kutumia vifaa vya insulin ratulin RIA kits (# RI-13K na SRI-13K, Linco) na glucose ya plasma imedhamiriwa kwenye YSI Glucose Analyzer. Eneo chini ya Curve (AUC) kwa majibu kutoka kwa msingi ulihesabiwa kwa 5 min na 120 min. Kielelezo cha HOMA kilihesabiwa kama kufunga (glucose [mM] × insulinm [U / L]) / 22.5 na kilihesabiwa kwa kutumia sampuli za kufunga za terminal zilizopimwa kwa insulini na sukari.

Viwango vya Metabolic¹

Kufunga vigezo vya metabolic

Panya kutoka kwa Jaribio 1 zilifungwa mara moja kabla ya ugonjwa wa euthanasia, siku chache baada ya kukamilika kwa IVGTT. Panya zilishughulikiwa sana na kuvuta pumzi ya isoflurane na kuzidishwa. Wabongo waliondolewa haraka na waliohifadhiwa katika nitrojeni kioevu kwa kipimo cha hypothalamic peptide mRNA na kiini cha mkusanyiko wa nucleus. Plasma ya terminal au seramu ilitumiwa kwa kipimo cha insulini ya kufunga, sukari, leptin, na triglycerides. Kwa triglycerides, Point Sayansi ya Triglyceride GPO Kit # T7531-400 (Fisher # 23-666-418) na viwango KIT # 7531-STD (Fisher # 23-666-422) ilitumika. Plasma leptin ilipimwa na Millipore Linco RIA Kit # RL 3K.

Mbinu za Catecholamine HPLC [Davis et al., 2008]

Panya ziliendeshwa na anesthesia ya isoflurane, na akili ziliondolewa kwa haraka, waliohifadhiwa, na kuhifadhiwa kwa −80 ° C. Vipimo vidogo vya punje za nukta (NAcc) vilitengwa kutoka kwa kila mnyama. Ingawa uangalifu mkubwa ulichukuliwa ili kupunguza uchafuzi wa mazingira ya ubongo wa karibu, kwa sababu ya maumbile na ukubwa wa kila njia ndogo haikuturuhusu kutofautisha vifungu (yaani NAcc msingi dhidi ya ganda) ndani ya NAcc. Kwa uchambuzi wa kiwango cha juu cha kioevu cha chromatografia (HPLC), suluhisho la antioxidant (0.4 N perchlorate, 1.343 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) na 0.526 mM sodium metabisulfite iliongezwa kwa sampuli zilizofuatwa na homogenization kwa kutumia homogenizer ya tishu ya gomoa (BiologicsA; Gaines Vain Sehemu ndogo ya tishu homogenate ilifutwa katika 2% sodium dodecyl sulfate (SDS) (w / v) kwa uamuzi wa proteni (Pierce BCA Protein Reagent Kit; Rockford, IL). Kusimamishwa kwa iliyobaki kulirudiwa huko 14,000 g kwa 20 min kwenye centrifuge ya majokofu. Mkuu huyo alihifadhiwa kwa HPLC.

Sampuli zilitengwa kwenye safu ya Microsorb MV C-18 (5 Am, 4.6_250 mm, Varian; Walnut Creek, CA) na kukaguliwa kwa wakati mmoja kwa asidi ya DA, 3,4-dihydroxyphenylacetic (DOPAC) na asidi ya homovanillic (HVA), zote mbili ni alama. ya uharibifu wa dopamine, 5-HT na 5-HIAA. Viwanja viligunduliwa kwa kutumia kizuizi cha safu ya ujuaji ya safu ya 12-Coulometric (CoulArray 5200, ESA; Chelmsford, MA) iliyowekwa kwenye Mfumo wa Uwasilishaji wa Mafuta ya Waters 2695 (Maji; Milford, MA) chini ya hali ifuatayo: kiwango cha mtiririko wa 1 ml / min; kugundua uwezekano wa 50, 175, 350, 400 na 525 mV, na; kugundua uwezo wa 650 mV. Awamu ya rununu ilikuwa na suluhisho la methanoli ya 10% katika dist₂O yenye 21 g / l (0.1 M) asidi ya citric, 10.65g / l (0.075 M) Na2HPO4, 176 mg / l (0.8 M) heptanesulfonic acid na 36 mg / l (0.097 mM) EDTA kwa pH ya 4.1. Sampuli ambazo hazijajulikana zilitengwa dhidi ya Curve kiwango cha kiwango cha 6 na kiwango cha chini cha R² ya 0.97. Sampuli za kudhibiti ubora ziliingizwa kila kukicha ili kuhakikisha uhawilishaji wa HPLC.

Peptides za Orexigenic mRNA qPCR

Tulipima usemi wa peptides za hypothalamic ambazo zinachochea kulisha na zimeingizwa katika motisha na tabia za malipo (Figlewicz & Sipols, 2010): neuropeptide Y (NPY [ Hahn, Breininger, Baskin, & Schwartz, 1998; Jewett et al., 1995; Kelley, Nannini, Bratt, & Hodge, 2001]); peptidi inayohusiana na agouti (AGRP [Aponte, Atasoy, & Sternson, 2011; Barnes, Argyropoulos, na Bray, 2010; Broberger et al., 1998; Hagan et al., 2000; Hahn, Breininger, Baskin, & Schwartz, 1998; Kaushik et al., 2011; Krash et al., 2011; Rossi et al., 1998; Tracy et al., 2008]); na orexin (Cason et al., 2010; Choi, Davis, Fitzgerald, & Benoit, 2010). Panya zilisisitizwa na anesthesia ya isoflurane, na akili ziliondolewa haraka, kugandishwa na kuhifadhiwa -80 ° C hadi usindikaji. Hypothalamus ya kati na ya baadaye ilichaguliwa kama kitalu kimoja kwa kutumia ndege ya kufungia ya AHP-1200CPV (Thermoelectric Cooling America, Chicago, Il) ambayo ilidumisha joto la mara kwa mara la 12 ° C wakati wa mchakato wa kutenganisha. Jumla ya RNA kutoka kwa tishu zilizo na microdissected ilitengwa na reagent ya Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA) na kusafishwa kwa kutumia RNeasy Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA) kulingana na maagizo ya mtengenezaji. Jumla ya RNA ilitibiwa kuondoa uchafuzi wowote wa DNA ya genomic kwa kutumia RNase bure DNase (Promega, Madison, WI), na ilihesabiwa kwa kutumia kipaza sauti cha NanoVue (GE Healthcare, Cambridge, UK). Ubora wa RNA ulithibitishwa na kiwango cha agarose gel electrophoresis. DNA inayosaidia (cDNA) ilibadilishwa tena (RT) kutoka 1-2 μg ya jumla ya RNA na mchanganyiko wa hexamers za nasibu na oligo DT inayotumia Script cDNA Synthesis Kit (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA). Athari zisizorejeshwa tena (hakuna RT) pia ziliandaliwa kutoka kwa kila sampuli kudhibiti uchafuzi wa DNA ya genomic. Udhibiti wa cDNA na hakuna-RT ulipunguzwa, na 5-10 ng ya templeti cDNA kutoka kwa kila sampuli ilitumika kupima usemi wa mRNA wa jeni zilizochaguliwa kwa muda halisi PCR inayotumia Mfumo wa Ugunduzi wa Real-Time PCR (Bio-Rad, Hercules Vipimo mara mbili kwa kila sampuli ziliendeshwa kwa sahani za kawaida za ICycler 96, pamoja na hakuna udhibiti wa templeti (NTC) kugundua uchafuzi wa msalaba, kwa ujazo wa 20 μl ulio na 10 μl 2 × IQ Sybr Green Supermix (Bio- Rad, Hercules, CA), 2 μl ya 0.2-0.5 μM kila utangulizi, 3 μl maji ya DEPC, na 5 μl ya templeti. Athari zote za qPCR zilijumuisha uchanganuzi wa curve ili kuyeyusha ishara maalum. Usemi wa jamaa kwa kila jeni la kupendeza ulihesabiwa kwa kuongezewa kwa curve ya kawaida inayoendeshwa kwa kila sahani na inayotokana na upunguzaji wa serial wa sampuli iliyokusanywa ya rejeleo cDNA, na kugeuzwa kawaida kwa usemi wa jamaa wa jeni za rejea (tindikali ya ribosomal phosphoprotein 36B4 kwa usemi wa jeni katika tishu ya hypothalamic, na protini ya mitochondrial ribosomal L32 kwa kujieleza katika kiini cha mkusanyiko). Utaratibu ufuatao wa utangulizi (IDT, San Diego, CA) ulitumiwa kukuza panya prero-orexin, NPY, na AGRP: Prepro-orexin, Mbele: 5'-TTCCTTCTACAAAGGTTCCCT-3 ′, 5'-GCAACAGTTCGTAGAGACGGAG-3 '; NPY: Mbele, 5- TACTCCGCTCTGCGACACTACATC-3 ′; Kubadilisha: 5'-CACATGGAAGGGTCTTCAAGCC-3 '; AGRP, mbele: 5'-GCAGAAGGCAGAAGCTTTGGC-3 '; Kubadilisha: 5'-CCCAAGCAGGACTCGTGCAG-3 '.

cFos Immunocytochemistry (ICC) na Idadi

ICC ya fluorescence ilitumiwa kutambua miili ya seli ya neuroni iliyo na Fos-chanya na AGRP katika medial hypothalamus, kulingana na mbinu yetu iliyoanzishwa (Figlewicz et al., 2011). Siku ya mwisho (PR Day 10), panya waliwekwa kwenye vyumba vyao vya kujitawala kama kawaida, kwa dakika 90. Mara tu kufuatia kikao hicho cha mwisho cha dakika 90, panya walikuwa wamechomwa sana na kuvuta pumzi ya isoflurane na kupakwa na NaCl ya 0.9% ikifuatiwa na suluhisho baridi la 4% ya paraformaldehyde. Wakati wa anesthetic na euthanasia ulitegemea wakati wa kujulikana wa usemi wa kilele cha protini ya cFos katika hafla ya 90-120 min-post. Kwa hivyo usemi wa cFos ungeonyesha uanzishaji wa CNS mwanzoni mwa kazi ya tabia, badala ya kuwa matokeo ya wanyama wanaopata kazi hiyo. Akili ziliondolewa na kuwekwa kwa paraformaldehyde siku kadhaa, kisha zikawekwa katika 20% sucrose-PBS, kisha suluhisho la 30% ya sucrose-PBS. Wabongo walikuwa wamegawanywa kwenye fuwele (Leica CM 3050S cryostat) ya kinga ya mwili Tulitumia mbinu yetu iliyoanzishwa kupima protini ya cFos isiyo na kinga katika sehemu za ubongoFiglewicz et al., 2011). Sehemu za kutu za kutu za 12 μm zilizowekwa na ubongo zilanawa mara tatu katika saline iliyojaa phosphate (PBS, OXOID, Hampshire, England). Sehemu zilanawa kwa dakika ya 20 na maji ya 100% ethanol / DI (50%, v / v) ikifuatiwa na safisha ya PBS, kisha ikazuiwa kwa saa ya 1 kwa joto la kawaida kwenye PBS iliyo na 5% ya kawaida ya mbuzi au seramu ya punda. Sehemu zilikuwa zikanawa mara nyingi katika PBS na kuzikwa mara moja saa 4 ° C katika suluhisho la msingi la antibody linaloundwa katika PBS. Sehemu zilanawa mara tatu katika PBS na kisha zikaingia gizani kwa joto la kawaida katika suluhisho la antibody la pili linaloundwa katika PBS kwa saa ya 1. Sehemu zilisambazwa baadaye katika PBS, na kuwekwa na kufunikwa-kufunikwa katika Vectashield ngumu kuweka kati (Vector; Burlingame, CA) kati. Picha za dijiti za sehemu zilipatikana kwa kutumia darubini ya Nikon Eclipse E-800 fluorescence iliyounganishwa na kamera ya kukamata ya digital ya Qimaging Retiga kwa kutumia programu ya NIS Elements (Nikon).

Kulingana na tafiti za PCR zinazoonyesha kuongezeka kwa viwango vya AGRP mRNA, tulizingatia maeneo ya matibabu ya mwili, haswa kiini cha ventromedial na kiini cha arcuate (ARC). Sehemu za Atlas-zilizofanana na 12 μm zilitathminiwa kwa kujielezea kwa cFos na idadi katika sehemu na mikoa inayolingana, kwa msingi wa ukumbi wa Paxinos na Watson [2005]. Kwa uongezaji (kwa ukubwa wa 40 ×), mikoa iliyofanana na atlas ilichaguliwa. Programu ya NIS Elements (Nikon) ilitumiwa kupiga picha ya eneo linalotaka. Eneo lilifanywa kwa kuhesabu na kizingiti cha hesabu chanya za seli zilianzishwa. Sehemu sawa na msingi (kizingiti) kilitumiwa kwa sehemu kutoka kwa vikundi husika vya majaribio, na hesabu ya programu ya seli chanya (hesabu) ilifanyika katika kikao hicho hicho kwa vikundi vyote vya majaribio, kuzuia mabadiliko kati ya kikao katika mpangilio wa nyuma. Kwa uchanganuzi wa takwimu, hesabu zilichukuliwa kutoka kwa panya ya mtu binafsi ikiwa tu sehemu zinazolingana au kamili kupitia kila eneo zilipatikana; data ya eneo fulani haikuchukuliwa kutoka kwa panya ikiwa hakukuwa na uwakilishi kamili wa nchi moja kwa eneo hilo.

Mbali na upimaji wa cFos, idadi kubwa ya chapa mbili ya immunohistochemistry ya cFos na AGRP ilifanywa. Kwa sababu hatukutaka kusumbua utendaji wa wanyama, hawakuwa wametibiwa mapema na colchicine ili kuongeza taswira ya AGRP. Kwa hivyo taswira ya neurons chanya za AGRP zinaweza kudharauliwa. Utaratibu wa kuchafua mara mbili kwa AGRP ulilinganishwa na majaribio ya cFos-immunoreactivity peke yake, isipokuwa sehemu hizo zilizuiwa kwa saa moja kwenye joto la kawaida kwenye seramu ya Punda-5%. Halafu, mchanganyiko wa kingamwili za kimsingi za fos-Ab na AGRP zilitumika kwa incubation ya usiku mmoja saa 4 ° C; vivyo hivyo kingamwili zote za sekondari zilikuwa katika suluhisho moja na ziliwekwa kwa saa moja gizani kwenye joto la kawaida. Uchunguzi wa awali wa uboreshaji ulifanywa ili kuamua upunguzaji unaofaa wa kingamwili za msingi. Antibodies ya kimsingi iliyotumiwa ni anti-cFos ya sungura (1: 500) (sc-52) na anti-AGRP ya mbuzi (1: 100) (18634) (Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA). Antibodies za sekondari zilizotumiwa walikuwa anti-sungura wa punda wa cy3-conjugated (Jackson Immunoresearch; West Grove, PA), na Alexa fluor 488 punda anti-mbuzi IgG (Masi ya Uchunguzi, Eugene, AU); kingamwili zote za sekondari zilipunguzwa saa 1: 500.

Uchambuzi wa takwimu

Takwimu za kikundi zinawasilishwa kama njia ± makosa ya kawaida ya maana (SEM) katika maandishi, Jedwali, na Takwimu. Umuhimu hufafanuliwa kama p ≤ 0.05. Ulinganisho wa takwimu hufanywa kati ya vikundi vya majaribio, kama inavyowasilishwa chini ya "Matokeo" kwa kutumia 'testest' ya Wanafunzi wasiostahili (kwa mfano, lishe, umri, au kulinganisha matibabu). 'Usawazishaji' wa data hufafanuliwa kama inavyotumika.

Matokeo

Athari za lishe ya wastani ya mafuta juu ya uhamasishaji wa peri-pubertal kwa sucrose

Panya hulisha lishe ya mafuta ya 31.8% wakati wa wks 5-8, wakati katika vikao vya kujisimamia, walikuwa na msukumo ulioinua sana wa sucrose, ikilinganishwa na panya zilizopewa mafuta. Kama inavyoonekana katika Kielelezo 1a, hakukuwa na tofauti ya utendaji wakati wa mafunzo ya awali ya FR (wastani wa vyombo vya habari vya FRDAY 1-10 lever, 38 ± 5 dhidi ya 39 ± 2 kwa chow dhidi ya lishe ya 31.8%, kwa mtiririko huo). Walakini, wakati panya zilibadilishwa kwa kazi ngumu zaidi ya PR, kulikuwa na ongezeko kubwa la idadi ya mashine ya kazi, na idadi ya tuzo zilizochukuliwa, lakini sio kwa urefu wa kikao kwa ujumla.Kielelezo 1b). Hakukuwa na athari ya matibabu ya lishe sugu kwa idadi ya mashine ya kazi ya lever. Wakati panya zilipewa lishe kubwa ya mafuta wakati wa wks 5-8 lakini baadaye ikarudi kwenye lishe ya chow iliyochukuliwa kupitia mafunzo ya FR na PR wakati wa wiki 9-12, kulikuwa na hali lakini hakuna tofauti kubwa katika mashine ya kazi ya lever. Kwa hivyo, inaonekana hakuna athari ya kubeba-juu ya lishe ya kiwango cha juu cha mafuta inayotumiwa wakati wa wakati wa wakati wa peri-pubertal. Takwimu ya param ya PR ya cohorts hizi imefupishwa kwa muhtasari Meza 2. Ili kuanza kufafanua utaratibu wa kuchangia (s) kwa kuongezeka kwa motisha inayosababisha chakula, tulichukua vipimo kadhaa vya metabolic na CNS.

Kielelezo 1

PR inayohamasishwa kujibu tuzo za sucrose imeongezeka katika panya za pembeni hulishwa lishe ya mafuta ya 31.8% (n = 8). 1a. Karibu na vikao vya FR, hakukuwa na athari ya chakula, lakini athari ya lishe inadhihirishwa wakati panya hubadilishwa kwa dhana ya PR. 1b. Takwimu ni ...

Athari za Lishe ya Peri-Pubertal High Fat juu ya Utendaji wa Viwango vya Maendeleo kwa Matokeo ya Siri

Athari za lishe ya wastani ya mafuta kwenye vigezo vya metabolic

Mara tu baada ya kumalizika kwa majaribio ya tabia, muundo wa mafuta ya mwili uliamuliwa kwenye panya ambayo ilikuwa na uingiliaji wa lishe na tabia ya tabia wakati wa wks 5-8. Panya halafu zilipokea cannulas sugu za mishipa kwa (vipimo) vya vipimo vya uvumilivu wa sukari ya IV (IVGTTs). Baadaye, plasma ya kufunga na terminal ilipatikana kwa hatua za ziada za metabolic. Kama inavyoonekana katika Meza 3, hakukuwa na tofauti katika muundo wa mwili, uzito wa mwili, insulini ya kufunga au hatua ya sukari, unyeti wa insulini (hesabu ya HOMA) au majibu ya IVGTT, kati ya panya lenye mafuta na lishe kubwa. Vipimo vya kufunga vya leptin na vipimo vya triglyceride havikuwa tofauti kati ya vikundi viwili. Kwa hivyo, ingawa matibabu ya lishe yalikuwa na athari kubwa kwa motisha kwa sucrose, inaonyesha mwitikio wa tabia katika panya nyingi zilizo na mafuta ambazo ni za zamani.

Athari za lishe ya wastani ya mafuta kwenye CNS homeostatic na malipo ya neurochemistry

Kwa kuongeza vipimo vya kimetaboliki vya terminal, akili kutoka kwa cohort ambayo ilikuwa na uingiliaji wa lishe na mafunzo ya tabia wakati wa wiki 5-8 ilipimwa kwa maelezo ya amini profaili (n = 4 kwa kikundi cha lishe) au kiwango cha mRNA cha peptides za hypothalamic orexigenic. Kama inavyoonekana katika Meza 4, hakukuwa na athari kubwa ya lishe kubwa ya mafuta kwenye dopamine, norepinephrine, au metabolites za serotonin kwenye mkusanyiko wa nuksi, tovuti kuu ya malipo na shughuli za motisha (Ikemoto & Panksepp, 1996; Kelley na Berridge, 2002) ambayo kila moja ya mifumo hii ya neurotransmitter ina jukumu muhimu la udhibiti. Ndani ya dondoo za hypothalamic, viwango vya mRNA vya peptidi za orexigenic, NPY, AGRP, na orexin zilipimwa. Mwelekeo wenye nguvu lakini sio muhimu kwa kuongezeka kwa AGRP katika panya zilizonona mafuta ulionekana katika kikundi hiki (n = 8 kwa lishe yoyote); kwa hivyo tulirudia dhana / mafunzo ya kitabia katika kikundi cha nyongeza na kipimo cha NPY, AGRP, na orexin mRNA katika hypothalamus. Katika vikundi vya pamoja, tuliona ongezeko kubwa (p <0.05) katika AGRR mRNA katika panya waliolisha lishe yenye mafuta mengi dhidi ya vidhibiti vya chow (Kielelezo 2), lakini hakuna mabadiliko makubwa katika NPY au kujieleza kwa orexin. Ili kutathmini uunganisho unaowezekana kati ya kujieleza kwa AGRP na tabia ya kujisimamia, tulipima cFos na neuron za kinga za AGRP katika hypobalamus ya kati. Vikundi vya panya vilishwa mafuta ya chow au 31.8% ya mafuta; zingine zilichukuliwa kupitia itifaki ya kujitawala (wiki 5-8) na zingine zilishughulikiwa kama udhibiti wa tabia. Kielelezo 3a inaonyesha mfano wa ujanibishaji wa cFos na AGRP katika neuron ya mucous ya arcuate. Kama muhtasari katika Meza 5, uanzishaji wa neuroni ya AGRP (uwasilishaji wa cFos-ICC na AGRP-ICC ndani ya seli zinazofanana) ilihusishwa na shughuli za kujisimamia. Hii imeonyeshwa katika Kielelezo 3b, ambapo idadi ya neuroni iliyoamilishwa (cFos-chanya) inaonyeshwa kama hesabu ya seli ya neuronal, au kama asilimia ya jumla ya neuroni zenye AGRP: kuna uanzishaji mkubwa wa neuroni za AGRP kwenye panya zinazojiendesha, dhidi ya udhibiti wa utunzaji. , katika vikundi vya pamoja vya lishe. Ulinganisho wa matibabu ya ndani ya nambari ya neurons iliyoamilishwa ya AGRP katika kikundi cha kujisimamia yenyewe dhidi ya udhibiti imeonyesha hali ambayo haikufikia umuhimu wa takwimu (chow, p = .078; 31.8% lishe ya mafuta, p = .073) . Kwa kweli, sio tu kwamba data hizi zinaunganisha uanzishaji wa neuroni ya AGRP na tabia ya kujitawala, lakini kwa sababu ya muda wa kipimo cha cFos (dakika za 90 baada ya panya kuwekwa kwenye vyumba vyao vya kujisimamia), usemi wa cFos unaonyesha shughuli ya neuroni ya AGRP katika matarajio ya, au mwanzoni mwa shughuli za kujisimamia. Kulikuwa na mwenendo usio muhimu kwa kuongezeka kwa jumla ya AGRP-chanya kwenye kikundi cha kujisimamia mwenyewe (dhidi ya udhibiti wa utunzaji, p = 0.16). Katika panya hizo, ambapo uandishi wa nguvu wa kupandikiza ulifanywa kati ya vikundi vya lishe, idadi ya neuron-chanya ya AGRP pia ililinganishwa. Hakukuwa na athari ya matibabu ya lishe peke yako kwa idadi ya neuroni-AGRP-chanya kwenye panya la kudhibiti tabia.

Kielelezo 2

Athari ya lishe ya mafuta ya 31.8% kwa usemi wa wastani wa peptidi mRNA ya hypothalamic. Takwimu zinarekebishwa kwa panya zenye mafuta mengi (n = 17) dhidi ya ile ya vidhibiti vya chow (n = 16). MRNA ya AGRP imeinuliwa sana (p <0.05).

Kielelezo 3

Uanzishaji wa neuroni za AGRP mwanzoni mwa kujitawala kwa hali ya juu. 3a. Ujanibishaji wa ujanibishaji wa cFos na AGRP katika arcuate ya nuksi ya noni, ukuzaji wa 60x. 3b. Idadi ya activates (cFos-immunopositive) AGRP-immunopositive neurons katika hypobalamus ya kati ...

Nucleus Accumbens Amine Metabolites

Uanzishaji wa Agrp Neuron: Lishe na Matibabu ya Tabia

Athari za usimamizi wa AGRP juu ya uhamasishaji wa sucrose

Tafsiri yetu ya utaftaji huu ni kwamba maelezo ya AGRP kwenye panya ya pubertal ni njia muhimu inayosimamia usimamiaji wa uboreshaji wa panya la mafuta ya kulisha mafuta mengi. Ili kudhibitisha kwa ufanisi wa AGRP kuongeza motisha kwa sucrose, AGRP ilitekelezwa kupitia njia ya tatu kwa panya-iliyosababishwa na panya wakati wa sehemu ya PR ya dhana ya kitabia. Usajili wa kipimo hiki cha AGRP kilikuwa kizingiti cha kuchochea ulaji wa chow katika kipindi cha wiki mbili za dhana ya PR, lakini ilisababisha kwa kiasi kikubwa kujitawala kwa kujitawala, kama inavyoonyeshwa katika Kielelezo 4. (Kumbuka kuwa kila thawabu ya sucrose ina maudhui ya kalori ya 0.1 kcal, kwa hivyo shughuli ya kujitawala ya kujitolea inachangia kalori zisizo sawa kwa jumla ya ulaji wa kila siku.) Meza 6 inaonyesha data ya param ya kujitawala katika paradigm ya siku ya 9, na AGRP au aCSF iliyojeruhiwa ICV kwenye Siku 2, 5, na 8. Katika panya zilizotibiwa na AGRP, idadi ya vyombo vya habari vya lever vilivyoongezeka viliongezeka kwa jumla katika siku zote za PR XXUMX-2 (p = 10), na kwa siku zisizo za sindano (p = 0.03) na mwelekeo kuelekea kuongezeka kwa (wastani) siku za sindano. Kwa kuongeza, Muda wa kuacha (ambayo inaonyesha wakati wote uliotumika katika kazi ya kujisimamia) iliongezeka sana siku zisizo za sindano (p = 0.048) na mwelekeo kuelekea kuongezeka kwa jumla, na siku za sindano. Idadi ya tuzo za sucrose iliongezeka kwa jumla kwa siku PR za 0.02-2 (p = 10). Hakukuwa na athari ya matibabu ya AGRP juu ya kushinikiza kwa lever isiyokamilika, ikilinganishwa na udhibiti wa kutibiwa na aCSF, au kati ya siku za sindano- na zisizo za sindano. Matokeo yanaunga mkono tafsiri ya athari endelevu ya AGRP kuongeza kujitawala kwa kujisimamia: panya hushinikiza zaidi juu ya lever anayerudisha, alipokea tuzo za kujitosheleza zaidi, na alitumia wakati mwingi kushiriki katika kazi hiyo.

Tatu ventricular (ICV) AGRP (0.01 nmol) huchochea usimamiaji wa kujiendesha katika dhana ya PR, lakini haina athari kwa ulaji wa chakula cha kila siku katika kipindi chote cha masomo (PR Siku 2-10, na sindano kwenye Siku za 2, 5, na 8) . Data AGRP (n = 9) imeonyeshwa ...

Athari za ICV AGRP dhidi ya aCSF juu ya Utendaji wa Viwango vya Maendeleo kwa mafanikio ya Sucrose

Athari za hatua ya maisha juu ya upendeleo na motisha kwa sucrose

Katika jaribio la mwisho, tulitathmini ikiwa motisha ya kujitokeza inatofautiana kati ya panya wa kizima na kizima. Hapo awali, panya za zamani za 5-na 10-wk zilipewa mtihani wa upendeleo wa sucrose na chaguzi za suluhisho kutoka 0 hadi 20% sucrose, kabla ya kuanza kwa ujaribio na mafunzo ya kujitawala. Kama inavyoonekana katika Kielelezo 5a, na sanjari na matokeo yaliyoripotiwa katika fasihi, panya za mapema huonekana kupendelea suluhisho tamu kuliko panya wa watu wazima: panya nyingi za mapema zilikuwa na ulaji mkubwa wa 20% sucrose solution, wakati panya wazima walionyesha ulaji mkubwa. ya 15% sucrose. Baadaye, vikundi vyote vya umri viligawanyika kati ya panya na chakula kingi cha mafuta wakati wa mafunzo na ujifunzaji wa mwenyewe. Kulikuwa na ongezeko ndogo lakini la takwimu kwa idadi ya mashine ya kazi ya panya-pubertal dhidi ya watu wazima (45 ± 3 dhidi ya 37 ± 2, p = 0.05) iliyofikiwa katika vikao vyote vya FR, bila kutofautishwa kwa idadi ya fanya tuzo nzuri au idadi ya mashine kwenye lever isiyofanya kazi. Kama inavyoonekana katika Kielelezo 5b, kulikuwa na athari kubwa ya jumla ya uzee, katika vipindi vyote vya PR, na kushinikiza kwa nguvu kwa nguvu ya uchapishaji kwa pubertal (n = 15) dhidi ya vijana wazima (n = 14) panya (2-way ANOVA, PRDay × age; athari ya uzee, p = 0.017, hakuna athari ya kujitegemea ya PRDay, hakuna mwingiliano muhimu). Tthere ilikuwa mwelekeo wa athari kubwa ya uzee katika hali ya kulishwa sana na mafuta lakini hii haikufaulu umuhimu wa takwimu (p = .13). Meza 7 inaorodhesha vigezo vya tabia vya PR: kwa kuongeza mashine ya kazi zaidi ya lever, panya-pubertal panya zimepokea tuzo kubwa za kujitolea, na zilionyesha mwelekeo kuelekea kuongezeka kwa Wakati wa kuacha. Kwa kuongezea, panya-pubertal panya alikuwa na ongezeko dogo lakini kubwa la mashinisho juu ya kazi isiyokamilika (yaani, isiyo na thawabu), ingawa kwa panya-pubertal na panya za watu wazima, idadi ya mashinari ya lever isiyokuwa na kazi ilikuwa takriban% 10% ya vyombo vya habari vya lever. Matokeo haya yanaonyesha kuwa panya-panya-panya hupendelea na utatafuta vyakula vya kuonja tamu zaidi, na athari inaweza kuboreshwa na asili ya lishe kubwa.

Kielelezo 5

Panya za vijana zimeongeza motisha kwa ujira wa sucrose ikilinganishwa na panya wazima. 5a. Vipimo vya upendeleo wa mafanikio vya vijana (peri-pubertal, n = 15) na vijana wazima (n = 14) panya. Panya zilikuwa na dakika ya 30 ya kunywa kutoka kwa aina ya viwango vya (0-20% sucrose). ...

Athari za uzee juu ya Utendaji wa Viwango vya Maendeleo^a kwa Sucrose

Majadiliano

Utaftaji mkuu wa utafiti huu ni kwamba lishe ya wastani ya mafuta inayotumiwa wakati wa kipindi cha ugonjwa wa kuzaa (kabla tu, wakati, na baada tu ya umri wa kubadilika katika kubalehe) iliongezeka kwa motisha kwa suluhisho la kujitokeza. Upataji huu ni sawa na uchunguzi wetu wa zamani, sawa, katika panya za watu wazima (Figlewicz et al., 2006). Katika wanyama hawa, na kwa nyongeza za umri- na matibabu yaliyolingana na umri, tulidhibitisha kupitia tabia ya kina ya kimetaboliki kwamba panya walikuwa wasio-feta au feta kabla na hawakuwa sugu ya insulini. Hatuwezi kuamuru uwezekano wa panya kuwa na upinzani wa ndani wa CNS kwa vitendo vya insulini au leptin, hata hivyo: homoni hizi zote zinachangia modulisho maalum wa tovuti ya CNS ya malipo ya chakula (Davis, Choi, & Benoit, 2010; Davis et al., 2011a; Figlewicz & Sipols, 2010).

Katika sehemu ndogo ya panya, tulipima neurotransmitters ya amine na metabolites zinazohusiana kwenye mkusanyiko wa nuksi, ambayo hupokea uwekezaji mzito wa makadirio ya dopaminergic kutoka mkunga, na inachukuliwa kama ufunguo na wa kati wa tovuti ya CNS kwa upatanishi wa malipo na tabia ya motisha (Ikemoto & Panksepp, 1996; Kelley na Berridge, 2002). Hatukuona mabadiliko yoyote katika viwango kabisa au uwiano wa yoyote ya metabolites hizi za kusambaza ambazo zinaonyesha kuwa shughuli za katekisimu zilizobadilishwa au serotonergic ndani ya mkusanyiko wa kiini sio njia ya msingi au kuu ya CNS inayosababisha motisha ya kuongezeka kwa sucrose. Hii ni sawa na ripoti ya hivi karibuni kutoka Davis et al. [2011 b], ambaye alionyesha kwa panya watu wazima kwamba ICV AGRP inaongeza mauzo ya dopamine kwenye gamba la uso wa mapema lakini sio kiunga cha kiini. Zaidi ya hayo, hatukuona athari ya "tabia ya kupikia" ya lishe wakati ilipimwa kwenye panya mara baada ya kubalehe, kama wazee. Hii ni tofauti na matokeo kutoka kwa Bolaños na wengine, kwa vigezo vya tabia na katekesi, kwenye panya za watu wazima zilizotibiwa na methylphenidate (Bolaños et al., 2003; Bolaños, Glatt, & Jackson, 1998; Brandon, Marinelli, Baker, & White, 2001; Brandon, Marinelli, & White, 2003). Hii inawezekana kwa sababu ya kulenga moja kwa moja kwa dopaminergic neurons na methylphenidate, na pia inaweza kuwa kazi ya muda wa uingiliaji wa lishe na wakati wa upimaji wa wanyama. Mwishowe, labda hatujaona athari za mzoga, kwa sababu katika utafiti huu, locus ya athari ya lishe inaonekana kama medial hypothalamus.

Katika utafiti huu, mistari mitatu ya ushahidi inaunga mkono jukumu muhimu kwa medial hypothalamic neuropeptide AGRP katika kujiendesha kwa hali ya juu ya kujiamulia katika panya zilizo na mafuta mengi. Kwanza, tuliona ongezeko la kujieleza kwa AGRP (mRNA) katika dondoo za hypothalamus nzima katika panya kulishwa chakula cha mafuta cha 31.8% na udhibiti wa chow. Walakini, viwango vya orexin mRNA na NPY mRNA hazibadilishwa. Kwa hivyo, athari ya lishe kubwa ya mafuta / tabia ya uharamia huonekana kuwa maalum kwa AGRP, na sio jumla ya neuropeptides ya orexigenic. Hii inasisitiza jukumu la AGRP katika kuhamasisha, au kutafuta chakula, na inaambatana na ripoti kadhaa za hivi karibuni kwenye fasihi (zilizojadiliwa hapo chini). Kazi yetu ya hivi karibuni imeonyesha jukumu muhimu la uanzishaji wa medial hypothalamic kwa kushirikiana na utendaji wa PR katika muundo wetu wa motisha, na usemi ulioongezeka wa cFos katika nukta kadhaa za matibabu ya methali (Figlewicz et al., 2011). Tumegundua pia ArC kama mkoa muhimu kwa athari za (exo asili) ya insulini kupungua kujitawala (Figlewicz et al., 2008). ARC inayo AGRP / NPY neurons (Broberger et al., 1998; Hahn, Breininger, Baskin, & Schwartz, 1998) ambayo hufanya ndani ya medial hypothalamus ili kuchochea kulisha kwa njia nyingi. Katika utafiti huu, hesabu ya immunocytochemical ya activated AGRP neurons ilionyesha kuongezeka kwa cFos / AGRP neurons katika panya ambazo zilifunzwa kujisimamia mwenyewe, ikilinganishwa na udhibiti wa tabia isiyofundishwa. Hii ni njia ya pili inayoongoza kwa tafsiri ambayo uanzishaji wa neuroni ya AGRP inachangia (mwanzo wa) kujitawala kwa kujisimamia. Tafiti zote mbili za mapema na za hivi karibuni zilihusiana na kujieleza na vitendo vya AGRP na ulaji wa upendeleo wa mafuta, kama lishe (Hagan et al., 2000) au kwa muktadha wa dhana ya motisha (Tracy et al., 2008); na kwa panya wazima ICV AGRP haswa mahali pa upendeleo mahali pa mafuta (Davis et al., 2011b). Uchunguzi wa hivi karibuni kutumia mbinu zilizolengwa za Masi zinazoruhusu uanzishaji maalum wa neuron ya AGRP katika panya (Aponte, Atasoy, & Sternson, 2011; Krash et al., 2011) wamethibitisha kwamba AGRP inasababisha nguvu kulisha, kuongezeka kwa utaftaji wa chakula, na kupunguza matumizi ya nishati. Inafurahisha kugundua kuwa katika vikundi vya majaribio kulishwa chakula kingi cha mafuta, ulaji wa jumla wa caloric ulikuwa chini sana ikilinganishwa na panya la kul-chow (Meza 8), ambayo ingeambatana na athari ya AGRP ya asili kupungua matumizi ya nishati. Athari hizi zinaambatana na matokeo ya mapema ya Hagan et al. [2000], athari za nje za AGRP kwenye nyanja zingine za usawa wa nishati zinaweza kuwa za muda mrefu. Kwa hivyo, kama njia ya tatu, matokeo yetu yanayoonyesha kuongezeka kwa hali ya juu ya kujisimamia na panya za chapertal zilizopewa ICV AGRP vivyo hivyo zinaonyesha kitendo ambacho ni endelevu. Ongezeko maalum la kujieleza kwa AGRP mRNA katika panya kulishwa chakula kingi cha mafuta kwa wiki nne inaambatana na utafiti wa hivi karibuni kutoka Kaushik na wenzake [2011] ambayo huunganisha asidi ya mafuta ya nje, asidi ya mafuta yanayotokana na seli, na ongezeko la usemi wa AGRP katika neurons ya hypothalamic. Kwa hivyo, kuongezwa kwa asidi ya oleic au ya Palmitic kwa seli za hypothalamic zilizosababishwa zilisababisha kuongezeka kwa usemi wa AGRP. Wakati lishe tuliyotumia ilikuwa imeongeza asidi kali, ya mawimbi, na asidi ya oleic, haiwezekani kujua ikiwa asidi hii ya mafuta imeongezwa katika katika vivo milieu ya hypothalamic, ikiwa viwango vyao vya ujanibishaji vingelingana na maelezo mafupi ya asidi ya lishe, na ikiwa moja au zaidi ya haya yangesababisha hasa usemi wa AGRP kuongezeka. Walakini, inajaribu kubashiri kwamba wadudu wa lishe wanaweza kuchangia kuongezeka kwa msukumo wa pipi kupitia hatua ya msingi kwenye medial hypothalamus.

Itifaki za majaribio: Kcal Inayotumiwa

Utafiti wetu unaonyesha kwamba panya wachanga wameongeza motisha kwa sucrose ikilinganishwa na panya watu wazima. Hii ilionekana katika wakati wote wa usimamizi wa PR, na kulikuwa na hali ya lishe kubwa ya mafuta ili kuongeza athari ya uzee. Inawezekana kwamba hii haikufikia umuhimu wa takwimu kwa sababu ya ukubwa mdogo wa kikundi; kwa hivyo, data zinaonyesha kuwa katika wanyama wa densi (na labda wanadamu) mafuta yaliyoinuliwa kidogo katika lishe yanaweza kuchangia tabia bora ya kutafuta kupata vinywaji au vyakula vyenye sukari. Kwa mtazamo wa kijamii, inasisitiza hitaji la kulipa kipaumbele kwa sehemu ya mafuta ya "chakula" au lishe ya vijana, sio tu kwa sababu ya athari za moja kwa moja, hasi za kimetaboliki za mafuta ya kula zaidi, lakini pia kwa sababu inaweza kuchangia tabia hiyo. katika ulaji wa sukari ulioimarishwa. Kama ilivyopitiwa na hivi karibuni Stanhope [2012], Kuingiza sukari na mafuta kunaweza kuwa na athari kubwa za kimetaboliki. Mchanganyiko wa mafuta / sukari nyingi kwa wanadamu pia ni lishe duni ya (Drewnowski, 1998). Pamoja na kuongezeka kwa matukio ya ugonjwa wa sukari (Cizza, Brown, na Rother, 2012) na ini ya mafuta (Kohli et al., 2010) kutokea kwa idadi ya watoto, umuhimu wa lishe bora na yenye usawa katika ujana ni wazi. Tuliona ongezeko kubwa la mashinisho juu ya lever isiyokamilika kwenye panya ya pubertal (panya watu wazima), ingawa idadi ya mashine ya lever bado ilikuwa chini sana. Inawezekana lakini inaonekana uwezekano kwamba uboreshaji wa nguvu wa kazi ulioboreshwa unaweza kuhesabiwa kama athari isiyo "maalum" ya shughuli kwa jumla, kwani shughuli nyingi zilielekezwa kwa lengo la lever inayofanya kazi. Ingawa idadi halisi ya mashini ya kazi ya lever isiyoweza kuongezeka iliongezeka, idadi ya mashine ya kazi ya lever ilikuwa kulinganishwa kati ya peri-pubertal na panya za watu wazima, na mashine ya kuongezeka ya lever yanaweza kuonyesha muda mrefu zaidi katika vyumba vya kujisimamia. Katika dhana tofauti (kizuizi fulani cha chakula, matumizi ya vito vya chakula badala ya malipo mazuri, na ratiba ya FR1) Sturman, Mandell, na Moghaddam [2010] wameripoti hivi karibuni mabadiliko ya utendaji wa kazi katika panya za vijana. Hawakuona tofauti yoyote katika manyoya yaliyowasilisha pellets za chakula, kati ya vijana na panya wazima. Walifanya, hata hivyo, waliona kuongezeka kwa tabia ya uvumilivu wakati wa kutoweka, katika panya za vijana. Ikizingatiwa pamoja, masomo haya mawili yanasisitiza ushawishi wa umri na hatua ya ukuaji juu ya motisha kwa chakula, sanjari na ukuaji wa haraka wa panya. Katika utafiti huu tulipima panya za kiume, lakini sio za kike. Hivi sasa kuna masomo machache kulinganisha panya wa kiume na wa kike katika dhana ya uhamasishaji wa chakula, na tathmini ya utaratibu wakati wa kipindi cha pubertal inahitajika. Ikumbukwe kwamba katika uchunguzi wa vijana (wa binadamu), Coldwell na wenzake (2009) aliona ushirika kati ya alama ya ukuaji, na sio skuli za gonadal per se. Walakini, athari za kijinsia katika kikundi hiki zinastahili uchunguzi zaidi.

Kwa kumalizia, masomo yetu yanaonyesha motisha iliyoongezeka ya sucrose katika panya ya pubertal ikilinganishwa na watu wazima, na hii inaboreshwa na ufikiaji wa lishe ya kiwango cha juu cha mafuta. Athari za lishe kubwa juu ya motisha ya sucrose inaweza kupatanishwa na shughuli za AGRP zilizoongezeka katika medial hypothalamus. Huu ni uthibitisho zaidi wa uunganisho wa nguvu wa kazi wa CNS wa mzunguko ambao unasimamia homeostasis ya nishati na mzunguko unaosimamia malipo na msukumo. Uboreshaji wa motisha ya kujiuliza na lishe ya kiwango cha juu cha mafuta hutangulia upungufu wa kimetaboliki na kunona kupita kiasi na unaonyesha kwamba mwanzoni tabia inaweza kusababisha mabadiliko ya metabolic, badala ya kinyume chake. Kumeza kwa mafuta mengi, na vyakula vyenye tamu vyenye fructose, ingechangia kwa pamoja wasifu wa kimetaboliki ambao ni hatari kubwa kwa ugonjwa wa kisukari wa aina ya Type2 na ugonjwa wa moyo na mishipa. Matokeo haya yanasisitiza umuhimu wa kuzingatia mwelekeo wa kula na lishe wakati wa kubalehe, kwani hauathiriwa tu na mvuto wa kijamii na mazingira, lakini pia na marekebisho ya mitandao na tabia ya mnyama kama mnyama au ubinadamu kwa kipindi cha mabadiliko kadhaa ya kukomaa kwa ununuzi. uwezo wa kuzaa.

â € <

Lishe ya wastani ya mafuta huongeza motisha kwa sucrose katika panya wazima.
Katika utafiti huu, lishe kubwa ya mafuta huongeza motisha ya sucrose katika peri-pubertal panya.
Panya-pubertal panya alikuwa ameongeza motisha ya sucrose ikilinganishwa na watu wazima.
Kuhamasishwa kwa kuongezeka kwa sucrose kunaweza kupatanishwa na hypothalamic AGRP.
Hitimisho: Lishe kubwa ya mafuta hutoa motisha kwa pipi huru ya fetma.

Shukrani

Utafiti huu uliungwa mkono na NIH ruzuku DK40963. Dianne Figlewicz Lattemann ni Mwanasayansi Mkuu wa Taaluma ya Utafiti, Programu ya Utafiti wa Maabara ya Biomedical, Idara ya Maswala ya Mifugo ya Puget Sound Health, Seattle, Washington. Stephen Benoit aliungwa mkono na NIH DK066223 na Ethicon Endosurgery Inc. Waandishi wanamshukuru Dk. Tami Wolden-Hanson kwa kuungwa mkono na vipimo vya muundo wa mwili; Dr William Banks na Lucy Dillman kwa msaada na vipimo vya triglyceride; na Amalie Alver, na Samantha Thomas-Nadler kwa msaada wa masomo ya tabia.

Marejeo

Andersen SL, Teicher MH. Mkazo, vipindi nyeti na hafla za kukandamiza unyogovu wa ujana. Mwenendo katika Neuroscience. 2008; 31: 183-191. [PubMed]
Aponte Y, Atasoy D, Sternson SM. Neuroni za AGRP zinatosha kupanga tabia ya kulisha haraka na bila mafunzo. Neuroscience ya Asili. 2011; 14: 351-355. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Barnes MJ, Argyropoulos G, Bray GA. Upendeleo kwa lishe kubwa ya mafuta, lakini sio hyperphagia kufuatia uanzishaji wa receptors mu opioid imezuiwa kwenye panya za AgRP. Utafiti wa ubongo. 2010; 1317: 100-107. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Bolaños CA, Barrot M, Berton O, Wallace-Black D, Nestler EJ. Matibabu ya Methylphenidate wakati wa kabla na periadolescence hubadilisha majibu ya tabia kwa kuchochea kihemko wakati wa watu wazima. Saikolojia ya Biolojia. 2003; 54: 1317-1329. [PubMed]
Bolaños CA, Glatt SJ, Jackson D. Subsensitivity kwa dopaminergic madawa ya kulevya katika periadolescent panya: uchambuzi wa tabia na neurochemical. Utafiti wa Ubongo wa Utafiti wa Ubongo. 1998; 111: 25-33. [PubMed]
Brandon CL, Marinelli M, Baker LK, White FJ. Kuongeza nguvu upya na mazingira magumu ya cocaine kufuata matibabu ya methylphenidate katika panya za ujana. Neuropsychopharmacology. 2001; 25: 651-61. [PubMed]
Brandon CL, Marinelli M, White FJ. Mfiduo wa ujana wa methylphenidate hubadilisha shughuli za neuroni ya dopamine ya panya. Saikolojia ya Biolojia. 2003; 54: 1338-1344. [PubMed]
Broberger C, Johansen J, Johansson C, Schalling M, Hoktima T. Utaratibu wa neuropeptide Y / agouti unaohusiana na jeni (AGRP) katika hali ya kawaida, anorectic, na panya za monosodium. Utaratibu wa Chuo cha kitaifa cha Sayansi. 1998; 95: 15043-15048. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Cason AM, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. Jukumu la orexin / hypocretin katika kutafuta tuzo na ulevi: athari za kunona sana. Fiziolojia na Tabia. 2010; 100: 419-428. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. Jukumu la orexin-A katika motisha ya chakula, tabia ya kulisha inayotegemea malipo na uanzishaji wa chakula ulioingizwa na neuronal katika panya. Neuroscience. 2010; 167: 11-20. [PubMed]
Cizza G, brown RJ, Rother KI. Matukio ya kuongezeka na changamoto za ugonjwa wa sukari kwa watoto. Mapitio ya mini. Jarida la Uchunguzi wa Endocrinological. 2012 epub Mei 8, 2012. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Coldwell SE, Oswald TK, Reed DR. Alama ya ukuaji hutofautiana kati ya vijana walio na upendeleo mkubwa wa sukari. Fiziolojia na Tabia. 2009; 96: 574-580. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Davis JF, Choi DL, Benoit SC. Insulin, leptin na thawabu. Mwenendo katika Endocrinology na Metabolism. 2010; 21: 68-74. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Davis JF, Choi DL, Schurdak JD, Fitzgerald MF, Clegg DJ, Lipton JW, Figlewicz DP, Benoit SC. Leptin inasimamia usawa wa nishati na uhamasishaji kupitia hatua kwenye mizunguko tofauti ya neural. Saikolojia ya Biolojia. 2011a; 69: 668-674. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Davis JF, Choi DL, Schurdak JD, Krause EG, Fitzgerald MF, Lipton JW, Sakai RR, Benoit SC. Melanocortins ya kati hutengeneza shughuli za mesocorticolimbic na tabia ya kutafuta chakula katika panya. Fiziolojia na Tabia. 2011b; 102: 491-495. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Clegg DJ, Benoit SC, Lipton JW. Mfiduo wa viwango vya juu vya mafuta ya kula hupokea thawabu ya psychostimulant na mauzo ya dopamine ya mesolimbic katika panya. Neuroscience ya Tabia. 2008; 122: 1257-1263. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Desor JA, Beauchamp GK. Mabadiliko ya muda mrefu katika upendeleo tamu kwa wanadamu. Fiziolojia na Tabia. 1987; 39: 639-641. [PubMed]
Desor JA, Greene LS, Upendeleo wa O. kwa kupendeza na chumvi katika 9- hadi wanadamu wa miaka XXUMX na watu wazima. Sayansi. 15; 1975: 190-686. [PubMed]
Drewnowski A. Uzito wa nishati, kuimarika, na satiety: athari kwa udhibiti wa uzito. Mapitio ya Lishe. 1998; 56: 347-353. [PubMed]
Figlewicz DP, Bennett JL, Aliakbari S, Zavosh A, Sipols AJ. Insulin hufanya kazi kwenye tovuti tofauti za CNS ili kupungua kulisha kwa sucrose ya papo hapo na kujisimamia mwenyewe kwa utawala wa panya. Jarida la Amerika la Fizikia. 2008; 295: R388-R394. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Figlewicz DP, Bennett JL, Naleid AM, Davis C, Grimm JW. Insulini ya ndani na leptini hupungua kujitawala kwa panya. Fiziolojia na Tabia. 2006; 89: 611-616. [PubMed]
Figlewicz DP, Bennett-Jay JL, Kittleson S, Sipols AJ, Zavosh A. Achirose utawala wa ubinafsi na uanzishaji wa CNS katika panya. Mimi J Jumuia. 2011; 300: R876-R884. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Figlewicz DP, Ioannou G, Bennett Jay J, Kittleson S, Savard C, Roth CL. Athari ya ulaji wastani wa vitamu kwenye afya ya kimetaboliki kwenye panya. Fiziolojia na Tabia. 2009; 98: 618-624. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Figlewicz DP, Sipols AJ. Ishara za udhibiti wa nishati na thawabu ya chakula. Dawa ya dawa, Baiolojia, na Tabia. 2010; 97: 15-24. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Frangioudakis G, Gyte AC, Loxham SJ, Poucher SM. Mtihani wa uvumilivu wa sukari ya ndani ndani ya panya zilizofutwa. Njia ya nguvu kwa tathmini ya vivo ya secretion ya sukari iliyochochewa na sukari. Jarida la Mbinu za Kiteknolojia na zenye sumu. 2008; 57: 106-113. [PubMed]
Hagan MM, Rushing PA, Pritchard LM, Schwartz MW, Strack AM, Van Der Ploeg LHT, Woods SC, Seeley RJ. Athari za muda mrefu za orexigenic ya AgRP- (83-132) zinahusisha mifumo mbali zaidi ya blockano ya receptor ya melanocortin. Jarida la Amerika la Fizikia. 2000; 279: R47-R52. [PubMed]
Hahn TM, Breininger JF, Baskin DG, Schwartz MW. Ushirikiano wa Agrp na NPY katika neurons ya haraka-iliyoamilishwa ya hypothalamic. Neuroscience ya Asili. 1998; 1: 271-272. [PubMed]
Uwiano wa Hodos W. Maendeleo kama kipimo cha nguvu za malipo. Sayansi. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
Ikemoto S, Panksepp J. Kutengana kati ya majibu ya hamu ya kula na kutetemesha kwa ghiliba za kiteknolojia za mkoa unaofaa wa ubongo. Neuroscience ya Tabia. 1996; 110: 331-345. [PubMed]
DC ya Jewett, Cleary J, Levine AS, Schaal DW, Thompson T. Athari za neuropeptide Y, insulini, 2-deoxyglucose, na kunyimwa kwa chakula kwa tabia ya motisha. Psychopharmacology. 1995; 120: 267-271. [PubMed]
Kaushik S, Rodriguez-Navarro JA, Arias E, Kiffin R, Sahu S, Schwartz GJ, Cuervo AM, Singh R. Autophagy katika hypothalamic AgRP neurons inasimamia ulaji wa chakula na usawa wa nishati. Metabolism ya seli. 2011; 14: 173-183. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Kelley AE, Berridge KC. Nadharia ya malipo ya asili: umuhimu wa madawa ya kulevya. Journal ya Neuroscience. 2002; 22: 3306-3311. [PubMed]
Kelley SP, Nannini MA, Bratt AM, Hodge CW. Neuropeptide-Y katika nukta ya paraventricular huongeza utawala wa ethanol. Peptides. 2001; 22: 515-522. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Kohli R, Boyd T, Ziwa K, Dietrich K, Nicholas L, Balistreri WF, Ebach D, Shashidkar H, Xanthakos SA. Kukua kwa haraka kwa NASH katika utoto. Jarida la Daktari wa watoto na Lishe. 2010; 50: 453-456. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Krashes MJ, Koda S, Ye CP, Rogan SC, Adams AC, Cusher DS, Maratos-Flier E, Roth BL, Lowell BB. Uamsho wa haraka wa kurudisha nyuma wa neurons ya AgRP anatoa tabia ya kulisha katika panya. Jarida la Uchunguzi wa Kliniki. 2011; 121: 1424-1428. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Mennella JA, Pepino WANGU, Reed DR. Maumbile ya maumbile na mazingira ya mtizamo wenye uchungu na mapendeleo matamu. Daktari wa watoto. 2005; 115: 216-222. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Myers KP, Sclafani A. Maendeleo ya upendeleo wa ladha wa kujifunza. Saikolojia ya Maendeleo. 2006; 48: 380-388. [PubMed]
Taasisi ya Saratani ya Kitaifa Iliyotumia Programu ya Utafiti. Vyanzo vya kalori kutoka sukari iliyoongezwa kati ya Idadi ya Watu wa Amerika, 2005-06. Imesasishwa 21 Disemba 2010. [Iliyopatikana 21 Septemba 2011]; 2010 Inapatikana kutoka: http://riskfactor.cancer.gov/diet/foodsources/added_sugars/
Nixon JP, Zhang M, Wang CF, Kuskowski MA, Novak CM, Levine JA, Billington CJ, Kotz CM. Tathmini ya mfumo wa upimaji wa viwango vya sumaku vya uchambuzi wa uchambuzi wa muundo wa mwili wote katika panya. Kunenepa sana. 2010; 18: 1652-1659. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Ogden CL, Carroll MD. Idara ya Uchunguzi wa Uchunguzi wa Afya na Lishe. Utangulizi wa ugonjwa wa kunona sana kati ya watoto na vijana: Merika, mwenendo wa 1963-1965 kupitia 2007-2008. [Iliyopatikana 21 Septemba 2011]; E-Stat E-Health. 2010 2010 Inapatikana kutoka: http://www.cdc.gov/nchs/fastats/overwt.htm.
Paxinos G, Watson C. Atlas ya ubongo wa panya katika kuratibu zaereti. 5th. San Diego CA: Elsevier Mafunzo ya Wanahabari; 2005.
Richardson NR, Roberts DC. Ratiba ya uwiano wa maendeleo katika masomo ya kujiendesha kwa madawa ya kulevya katika panya: njia ya kutathmini uimarishaji wa ufanisi. Jarida la Mbinu za Neuroscience. 1996; 66: 1-11. [PubMed]
Roitman MF, Stuber GD, Phillips PE, Wightman RM, Carelli RM. Dopamine inafanya kazi kama simulizi ndogo ya utaftaji wa chakula. Jarida la Neuroscience. 2004; 24: 1265-1271. [PubMed]
Rossi M, Kim M, Morgan D, Ndogo C, Edward C, Jua D, Abusnana S, Goldstone A, Russell S, Stanley S, Smith D, Yagaloff K, Ghatei M, Bloom S. kipande cha C-terminal cha Agouti- protini inayohusiana inaongeza kulisha na antagonize athari ya kuchochea homoni ya alpha-melanocyte katika vivo. Endocrinology. 1998; 139: 4428-4431. [PubMed]
Stanhope KL. Jukumu la sukari iliyo na gluctose katika milipuko ya ugonjwa wa kunona sana na ugonjwa wa metaboli. Mapitio ya Dawa ya kila mwaka. 2012; 63: 329-343. [PubMed]
Sturman DA, Mandell DR, Moghaddam B. Vijana wanaonyesha tofauti za kitabia kutoka kwa watu wazima wakati wa ujifunzaji wa haraka na kutoweka. Neuroscience ya Tabia. 2010; 124: 16-25. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Tracy AL, Clegg DJ, Johnson JD, Davidson TL, Woods SC. AgRP ya melanocortin antagonist (83-132) huongeza hamu ya kujibu mafuta, lakini sio wanga, kraftigare. Baolojia ya Famasia, na Tabia. 2008; 89: 263-271. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
Vartanian LR, Schwartz MB, Brownell KD. Athari za matumizi ya vinywaji laini juu ya lishe na afya: hakiki ya utaratibu na uchambuzi wa meta. Jarida la Amerika la Afya ya Umma. 2007; 97: 667-75. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]