Matumizi ya Mazao ya Magonjwa ya Magonjwa ya Magonjwa ya Magonjwa ya Magonjwa ya Magharibi yanaongoza kwenye plastiki ya kina na Mchapishaji wa Machapisho ya Gabeergic ndani ya Hypothalamus na Mshahara wa Njia kutoka Uzazi hadi Ukomavu wa Ngono katika Panya (2017)

. 2017; 8: 216.

Imechapishwa mtandaoni 2017 Aug 29. do:  10.3389 / fendo.2017.00216

PMCID: PMC5581815

abstract

Matumizi ya mama-mama ya kula chakula mnene huongeza hatari ya fetma kwa watoto. Hii inahusishwa na kupita kwa chakula kizuri ambacho kinatumiwa kwa mali yake ya hedonic. Utaratibu wa msingi ambao unaunganisha lishe ya mama na upendeleo wa watoto kwa mafuta bado haueleweki. Katika utafiti huu, tunakusudia kusoma juu ya ushawishi wa lishe ya mama-mafuta / sukari ya juu [lishe ya magharibi (WD)] wakati wa ujauzito na lactation kwenye njia za tuzo zinazodhibiti kulisha kwa watoto wa rat kutoka kuzaliwa hadi ukomavu wa kijinsia. Tulifanya ufuatiliaji wa muda mrefu wa watoto wa WD na Kudhibiti watoto kwa vipindi vitatu vya wakati muhimu (utoto, ujana, na watu wazima) na tukazingatia uchunguzi juu ya ushawishi wa uwekaji wa mwili kwa lishe bora kwenye (i) upendeleo wa mafuta, (ii) wasifu wa kujieleza kwa jeni , na (iii) mabadiliko ya neuroanatomical / usanifu wa mitandao ya dopaminergic ya mesolimbic. Tulionyesha kuwa kulisha kwa WD kumezuiliwa kwa kipindi cha kupumua kuna ushawishi wa wazi wa muda mrefu juu ya shirika la mizunguko ya ubongo ya homeostatic na hedonic lakini sio upendeleo wa mafuta. Tulionyesha kipindi fulani cha mabadiliko ya upendeleo wa mafuta ambayo tulishikamana na saini maalum za Masi ya ubongo. Katika watoto kutoka kwa mabwawa yaliyodhaminiwa na WD, tuliona wakati wa utoto kuwepo kwa upendeleo wa mafuta unaohusishwa na maelezo ya juu ya jeni muhimu inayohusika katika mifumo ya dopamine (DA); katika ujana, upendeleo wa mafuta mengi kwa vikundi vyote viwili, kupunguzwa polepole wakati wa jaribio la siku la 3 kwa kundi la WD na kuhusishwa na usemi uliopunguzwa wa jeni muhimu linalohusika katika mifumo ya DA kwa kundi la WD ambalo linaweza kupendekeza utaratibu wa fidia ya kuwalinda kutoka kwa mfiduo zaidi wa mafuta; na mwishowe wakati wa watu wazima, upendeleo kwa mafuta ambao ulikuwa sawa kudhibiti panya lakini ulihusishwa na mabadiliko makubwa katika jeni muhimu zilizohusika katika mtandao wa asidi ya γ aminobutyric, receptors za serotonin, na ukarabati wa utegemezi wa asidi ya asidi-NCAM ya hypothalamus. Kwa jumla, data hizi zinaonyesha kuwa WD ya mama, iliyozuiliwa kwa kipindi cha hatari, haina athari endelevu juu ya nishati ya homeostasis na upendeleo wa mafuta baadaye katika maisha ingawa njia mpya ya kushughulikia njia ya hypothalamic ya nyumbani na njia ya thawabu inayohusika katika tabia ya kula ilitokea. Majaribio zaidi ya kazi yangehitajika kuelewa umuhimu wa mzunguko huu wa mzunguko.

Keywords: malipo, DOHaD, upendeleo wa chakula, lishe, asidi γ-aminobutyric, safu ya chini ya wiani

kuanzishwa

Mazingira ya maisha ya mapema na matukio sasa yanatambuliwa vyema kuchangia utabiri wa afya na magonjwa baadaye katika maisha (-). Wazo la uchapishaji wa kimetaboliki limependekezwa kuelezea jinsi mabadiliko katika mazingira ya lishe na homoni wakati wa kipindi cha hatari yanaweza kusababisha uzao kwa ugonjwa wa kunona sana na njia zake zinazohusiana baadaye. Suala muhimu la njia yetu ya maisha ya kitisho ni lishe kupita kiasi kama matokeo ya matumizi ya chakula mnene wa nishati. Kwa kweli, watu ambao wako wazi kwa ulaji wa mama ya aina hii ya chakula wako kwenye hatari kubwa ya kukuza ugonjwa wa kunona na ugonjwa wa metabolic (, ). Tafiti nyingi zimeonyesha kuwa lishe ya mama yenye mafuta mengi (HFD) kupitia ujauzito na kunyonya ina athari ya muda mrefu kwa kimetaboliki ya watoto (-). Mbali na njia zilizoingizwa katika kanuni za kimetaboliki, mifumo ya ujira wa ubongo pia inachukua jukumu muhimu katika tabia ya kulisha (, ). Mesolimbic dopamine (DA) neurotransuction, iliyosomwa kwa undani katika muktadha wa thawabu na ulevi, inabadilishwa kwa fetma iliyochochea ulaji kwa wanadamu wote wawili (-) na wanyama (-). Makisio ya DA yanaendelea, kwa sehemu kubwa, baada ya siku (), na kwa hivyo maendeleo yao yanaweza kuathiriwa na lishe ya mapema. Katika miaka michache iliyopita, majaribio ya panya yalithibitisha kwamba ulaji wa HFD ya mama huongeza kulisha kwa heoniki kwa watoto (, ). Ingawa uchunguzi huu ulihusisha mabadiliko kadhaa katika kazi ya mfumo wa DA (-), data ndogo zinapatikana kuhusu kizazi na kurekebisha njia za ujira wakati wa maisha ya mapema (). Zaidi ya ikiwa sehemu isiyo ya DA ya kuashiria malipo ya mfumo wa malipo kama vile mfumo wa GABA (γ-aminobutyric) inaweza kuathiriwa na msongo wa lishe ya kumbukumbu haijaandikwa. Kwa kweli, neurons za GABA zinaonekana kuwa na jukumu muhimu katika thawabu na ubadilishaji. Sehemu ya Ventral tegmental (VTA) Gaba neurons hupokea muundo kama huo wa pembejeo kutoka kwa maeneo tofauti ya ubongo (), na uchunguzi wa hivi karibuni wa tabia ya msingi wa optogenetic unaonyesha jukumu kuu la VTA GABA katika hali ya kuzidisha mahali pa usalama () na katika malipo malipo tabia). Nucleus accumbens (NAc) huundwa haswa na makadirio ya neuroni ya kati ya GABAergic na inafanya kazi kama kiunganishi cha mguu-kiungo kinachojumuisha ishara zinazotokana na mfumo wa limbus na kuzigeuza kuchukua hatua kupitia pato kwa pallidum ya ventral (VP) na waendeshaji wengine wa magari (). Na mwishowe, hypothalamus ambayo imeundwa na viunganisho vingi vya GABA kwenye LH () na msukumo wa kuongezeka, unajumuisha ishara za njaa na kutosheka ().

Utafiti huu unalenga kutambua ushawishi wa ulaji wa mama ya magharibi (WD) katika kizazi cha panya kutoka kwa kuzaliwa hadi ukomavu wa kijinsia (i) juu ya upendeleo wa mafuta (ii) kwenye maelezo mafupi ya jeni ya mfumo wa DA, mfumo wa GABAergic na utangazaji wa hypothalamus , na (iii) juu ya mabadiliko ya neuroanatomical / usanifu wa mitandao ya dopaminergic ya mesolimbic kwa kipindi hicho hicho. Kwa hivyo tulipima uchunguzi juu ya uchunguzi wa muda mrefu (kutoka kwa kuwachisha, P25, hadi ukomavu wa kijinsia, P45 na watu wazima, P95), athari ya WD ya wajawazito juu ya ukuaji wa uzani wa mwili na ukuaji wa tishu za adipose ya kizazi kilichohifadhiwa chini ya uleji wa kawaida. Kwa bahati nzuri, tulifanya majaribio ya upendeleo wa mafuta ikifuatiwa na uchambuzi wa maandishi ya kujitolea na uchambuzi wa sehemu kuu ya (PCA) ya uteuzi wa alama kwa ulaji wa chakula, uchaguzi na mifumo ya udhibiti ya motisha. Matokeo yetu yanaimarisha sana matokeo ya hivi karibuni yanayozingatia programu ya lishe ya mfumo wa DA.

Vifaa na mbinu

Taarifa ya Maadili

Majaribio yote yalifanywa kwa mujibu wa miongozo ya kamati ya ustawi wa wanyama wa ndani, EU (maelekezo 2010 / 63 / EU), Institut National de la Recherche Agronomique (Paris, Ufaransa), na Idara ya Mifugo ya Ufaransa (A44276). Itifaki ya majaribio ilikubaliwa na kamati ya maadili ya taasisi na kusajiliwa chini ya kumbukumbu APAFIS 8666. Kila tahadhari ilichukuliwa ili kupunguza mkazo na idadi ya wanyama wanaotumiwa katika kila safu ya majaribio.

Wanyama na mlo

Wanyama walitunzwa katika mzunguko wa taa ya 12 h / 12 h mwanga / giza katika 22 ± 2 ° C na chakula na maji ad libitum. Panya thelathini na mbili za Sprague-Dawley panya (uzito wa mwili: 240-290 g) siku ya ujauzito 1 (G1) ilinunuliwa moja kwa moja kutoka kwa Janvier (Le Genest Saint Isle, Ufaransa). Waliwekwa nyumba moja kwa moja na walishwa ama lishe ya kudhibiti (CD) (5% nyama ya ng'ombe na 0% sucrose) kwa 16 yao au WD (21% nyama ya nyama ya ng'ombe na 30% sucrose) ya 16 yao wakati wa ujauzito na kipindi cha kuzaa (tazama Jedwali Jedwali1: 1: muundo wa lishe katika asilimia kcal kutoka ABdiet Woerden, Uholanzi). Wakati wa kuzaliwa, saizi ya takataka ilibadilishwa kuwa watoto wanane kwa takataka moja na 1: 1 kiume kwa uwiano wa kike. Tuliweka 12 nje ya mabwawa ya 16 na takataka lililo na wanaume wa 4 na wanawake wa 4 kwa kila kundi. Kwa kuchomwa (P21), watoto waliozaliwa kwa mabwawa ya CD na WD walikuwa wamehifadhiwa kwenye kiwango cha kawaida hadi mwisho wa jaribio (Vielelezo (Takwimu1A, B) .1A, B). Uzito wa mwili wa Pup ulirekodiwa wakati wa kuzaliwa na baadaye kila siku huko 10: 00 am mpaka P21 (weaning). Baada ya kuchelewesha na hadi mwisho wa jaribio, panya zilikuwa na uzito kila siku za 3. Tunawasilisha data juu ya watoto wa kiume tu. Panya za kike zilitumiwa kwa uchunguzi mwingine (Mchoro (Kielelezo11).

Meza 1 

Mchanganyiko wa lishe katika asilimia kcal kutoka kwa kila sehemu ya lishe ya mama inayoendeshwa wakati wa ujauzito na kumeza na lishe ya kawaida kwa watoto.
Kielelezo 1 

Design ya majaribio. (A) Mchoro wa muundo wa muundo wa masomo. Panya thelathini na mbili za wanawake papo hapo wakati wa ujauzito 1 (G1) walipewa lishe ya kudhibiti 16 yao au lishe ya magharibi kwa wengine wakati wa uja uzito na kipindi cha kujifungua. Wakati wa kumwachisha, uzao ...

Mazoea (Mtihani wa Chaguo-Mbili cha chupa)

Vipindi vitatu muhimu vya maendeleo vilisomewa (P21 hadi P25: vijana, P41 hadi P45: ujana na P91 hadi P95: vijana wazima). Watoto wa kiume wa 24 (n = 12 kwa kila kikundi) walichaguliwa bila mpangilio na kuwekwa kwenye ngome ya kibinafsi kufanya jaribio la bure la uchaguzi wa chupa mbili (Takwimu (Takwimu1A, B) 1A, B) (-). Mtihani huu ulitumiwa kusoma hususani kuvutia kwa ladha ya mafuta kwa kuutenganisha na ladha tamu na iwezekanavyo kwa athari ya ulaji wa kalori. Hakika, matumizi ya suluhisho la mafuta ya nafaka ya 1% inahusishwa na ulaji wa 0.09 kcal / ml tu. Baada ya siku moja ya makazi kwa uwepo wa chupa mbili, mtihani ulifanywa kwa siku zaidi ya 2 huko P25 na zaidi ya siku 4 huko P41 na P91 (Kielelezo. (Kielelezo1A) .1A). Kwa maelezo, kwa kumwachisha (P21), watoto wa 24 waliwekwa kibinafsi kwa siku za 2 (Kielelezo (Kielelezo1A): 1A): siku ya 1, awamu ya makazi, siku ya 2, panya walipewa chupa mbili bila malipo kati ya emulsion ya mafuta ya mahindi ya 1% katika 0.3% xanthan gum (Sigma Aldrich, St Quentin Fallavier, Ufaransa) na suluhisho la gamu ya xanthan ( 0.3%). Katika P41 na P91, watoto wa 24 walitumiwa na chaguo la bure la chupa mbili ilipendekezwa kwa siku tatu mfululizo. Matumizi ya suluhisho la xanthan gumthan na suluhisho la ladha (mafuta ya mahindi 1%) ilirekodiwa kila siku huko 11: 00 am kwa siku za 3 (P45 na P95). Nafasi ya chupa hizo mbili ilibadilishwa kila siku kuzuia upendeleo wa upendeleo. Alama ya upendeleo wa mafuta ilihesabiwa kama uwiano wa kiasi cha "suluhisho la mafuta" kinachotumiwa kwa jumla ya kiasi kinachotumiwa katika 24 h. Panya zote zilihifadhiwa chini ya lishe ya kawaida ya wastani wakati wote wa jaribio la tabia.

Ukusanyaji wa vifungo na Sampuli za Damu

Siku iliyofuata siku ya mwisho ya jaribio la bure la chupa mbili, nusu ya panya (n = 6 kwa kila kikundi) ziliimarishwa haraka kati ya 09:00 na 12:00 asubuhi na CO2 kuvuta pumzi. Damu ilikusanywa kwenye mirija na EDTA (Laboratoires Léo SA, St Quentin en Yvelines, Ufaransa) na centrifuged kwa 2,500 g kwa dakika 15 saa 4 ° C. Plasma iligandishwa kwa −20 ° C. Organs na amana ya mtu binafsi ya mafuta iliondolewa na kuzidiwa uzito. Ubongo uliondolewa haraka na kuwekwa kwenye matrix ya ubongo (WPI, Sarasota, FL, USA rat 300-600 g). Kwanza hypothalamus ilitengwa [kulingana na uratibu wa atlinos ya Paxinos: −1.0 hadi −4.5 mm kutoka Bregma ()] basi, kwa kila panya, vipande viwili vya koroni ya unene wa 2 mm katika kiwango cha NAc na mwingine mwingine katika kiwango cha VTA walipatikana. Sampuli za kulia na za kushoto NAc na kulia na kushoto VTA (sampuli nne kwa jumla ya wanyama) zilipatikana haraka kwa kutumia alama mbili za biopsy tofauti (Maabara ya Stiefel, Nanterre, Ufaransa) (kipenyo cha 4 mm kwa NAc na 3 mm kwa kitovu cha katikati). Sampuli hizo zilinyunyizwa waliohifadhiwa katika nitrojeni kioevu na zilihifadhiwa at80 ° C kwa uamuzi wa baadaye wa usemi wa jenasi na safu ya chini ya wiani (TLDA).

Panya zingine (n = 6 kwa kila kikundi) walikuwa wamechomwa sana na pentobarbital (150 mg / kg ip) na kupakwa marashi ya chumvi ya kisaikolojia ya mwili na ikifuatiwa na barafu-baridi 4% paraformaldehyde katika bafa ya phosphate (PB), pH 7.4. Ubongo uliondolewa haraka, kuzamishwa kwenye fixative sawa kwa 1 h saa 4 ° C, na mwishowe kuhifadhiwa katika 25% PB sucrose kwa 24-48 h. Ubongo wakati huo ulikuwa umegandishwa katika isopentane saa -60 ° C, na mwishowe kuhifadhiwa -80 ° C hadi utumike. NAc, hypothalamus na VTA zilikatwa katika sehemu za 20 serialm serial coronal with a cryostat (Microm, Microtech, Francheville, France). Mfululizo mbili au tatu za slaidi za glasi 10 zilizo na sehemu 4-6 zilifanywa kwa kila eneo la ubongo. Kwa kila glasi slaidi sehemu za serial zimewekwa 200 µm (Kielelezo (Kielelezo66).

Kielelezo 6 

Uthibitisho wa neurons za TH / NeuN chanya katika eneo la kuvuta pumzi (VTA) na nyuzi za wiani wa TH kwenye msongamano wa nukta (NAc) kutoka kwa unyonyeshaji hadi mtu mzima kwa watoto kutoka kwa lishe ya magharibi (WD) au lishe ya kudhibiti (CD) iliyolishwa. (A) Mpango kutoka Paxinos na Watson's ...

Plasma ya biochemical Inachambua

Plasma ya EDTA iliyokusanywa kwenye P25, P45, na P95 panya zilitumiwa kupima sukari ya plasma, NEFA (asidi isiyo mafuta ya mafuta), insulini, na leptin. Glucose na NEFA walipimwa kwa kutumia athari ya enzymatic ya athari ya rangi na vifaa maalum (sukari na vifaa vya NEFA PAP 150, BioMérieux, Marcy-l'Etoile, Ufaransa). Homoni ziliwashwa na vifaa maalum vya ELISA kufuatia maagizo ya mtengenezaji wa insulini na leptin (panya / panya insulin ELISA kit, panya la leptin ELISA, Utafiti wa Linco, St Charles, MO, USA).

Immunohistochemistry

Slaidi za glasi zilizo na sehemu za VTA za serial na NAc zilizuiliwa kwa mara ya kwanza kwa 3-4 h na kisha kuzikwa mara moja kwa 4 ° C na mchanganyiko wa antibodies zifuatazo: kipanya anti-NeuN (1: 500; IgM; Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, USA) na sungura anti-TH (1: 1,000; Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, USA). Baada ya kujumuisha na antibodies za msingi na kuosha baadae na PB, sehemu ziliwekwa ndani ya mchanganyiko wa antibodies ya sekondari: Alexa 488 ilibadilisha punda wa kupambana na panya IgM na Alexa 568-conjugated punda anti-sungura IgG (1: 500; Attitrogen, ThermoFisher kisayansi, Waltham , MA, USA) kwa 2 h. Sehemu ziliwekwa katika slaidi za dhahabu nzuri zaidi (Sayansi ya ThermoFisher, Waltham, MA, USA), kavu-hewa, na kufunikwa na ProLong ™ Gold antifade reagent (Attitrogen, ThermoFisher kisayansi, Waltham, MA, USA).

Hesabu za Neurons katika VTA

Kwa kila panya, seli za TH-zilizohesabiwa kama zilivyoelezewa hapo awali () kwa viwango vitatu tofauti vya rostrocaudal ya VTA: katika kiwango cha kutoka kwa ujasiri wa tatu (umbali wa jamaa na Bregma: −5.3 mm), 200 µm rostral na 200 µm caudal kwa kiwango hiki (Kielelezo (Takwimu6A) .6A). Kwa upande wa kushoto na upande wa kulia, picha ya dijiti inayojumuisha VTA nzima kutoka kwa njia ya upotezaji ya kituo cha kati hadi mpaka wa baadaye wa mesencephalon ilipatikana kwa kutumia ukubwa wa x 40 wa skanning ya NanoZoomer-XR C12000 (Hamamatsu, Japan). Mstari uliandaliwa kuzunguka eneo la VTA kwa kila sehemu. Mipaka ilichaguliwa kwa kuchunguza sura ya seli na kurejelea picha za Paxinos na Watson. Neuropu ya dopaminergic ilifafanuliwa kama mwili wa seli wa NeuN (+) / TH (+) na kiini kinachoonekana wazi. Kutumia programu ya NIH Image J (kiini cha kukabiliana na seli), seli za NeuN (+) / TH (+) zilihesabiwa na watu wawili tofauti wasio na ufahamu wa vikundi vya wanyama. Makosa ya kuhesabu seli-yaligawanywa kwa kutumia fomula ya Abercrombie (), wapi N = n[t/(t + d)] ((N = jumla ya seli; n = idadi ya seli zilizohesabiwa; t = unene wa sehemu; na d = kipenyo cha seli), na sababu hii ya marekebisho ilikuwa 0.65. Takwimu zinaonyeshwa kuwa za maana [NeuN (+) / TH (+) kushoto na kulia VTA] ± SEM.

Uzani wa nyuzi wa nyuzi katika NAc

Yaliyomo protini ya TH katika vituo vya ujasiri wa dopaminergic ya NAc ilikadiriwa na uchambuzi wa densitometric ya anatomical ya sehemu za TH immunolabeled. Unene wa nyuzi za TH uligawanywa katika viwango vitatu vya usuluhishi kando ya mhimili wa rostrocaudal wa NAc (Bregma 2.20, 1.70, na 1.20 mm) (Kielelezo. (Kielelezo6B) .6B). Kwa kifupi, picha ya dijiti inayojumuisha striatum nzima na NAc iliyopatikana kwa kutumia ukuzaji wa X 40 wa skana ya nanoZoomer-XR ya dijiti C12000 (Hamamatsu, Japan) zilipatikana. Kwa NAc iliyopewa, mstari ulivutwa kuzunguka kiini nzima kufafanua eneo la kipimo cha macho (OD) kipimo (Mchoro. (Kielelezo6B) .6B). Thamani iliyopatikana ilifanywa kawaida na nambari ya OD iliyopimwa kutoka eneo la mviringo linalotolewa kwenye corpos callosum (eneo ambalo halijazuiliwa kwa chanjo ya TH) ya sehemu hiyo hiyo kwa kutumia programu ya picha ya NIH Takwimu zinaonyeshwa kama njia ya uwiano wa OD (Thamani ya OD katika NAC / OD thamani katika corpos callosum ya sehemu hizo tatu) ± SEM.

Maonyesho ya Gene na TLDA na TaqMan

RNA ilitengwa kutoka kwa snap-waliohifadhiwa NAc, sampuli zilizoimarishwa za VTA, na hypothalamus, kwa kutumia kitengo cha proteni cha NucleoSpin RNA / proteni (Macherey-Nagel, Hoerdt, Ufaransa). Jumla ya RNA iliwasilishwa kwa digestion ya DNase kufuatia maagizo ya mtengenezaji, idadi hiyo ilikadiriwa na ngozi ya 260 / 280 nm UV, na ubora ulipimwa kwa kutumia Mfumo wa Bioanalyzer wa Agilent 2100, nambari ya uaminifu ya RNA (RIN) ilihesabiwa. Sampuli zilizo na RIN chini ya 8 zilitupiliwa mbali. Virusi moja ya jumla ya RNA ilirekebishwa kuwa CDNA kwa kutumia kiwango cha juu cha uwezo wa RT (Imetumika biosystems, Foster City, CA, USA) kwa jumla ya 10 µl.

Kama ilivyoelezewa hapo awali (), TLDA ni kadi ya X -UMX-ndogo-umeme ambayo 384 wakati huo halisi PCR zinaweza kufanywa (Kutumika Biosystems, Foster City, CA, USA). Tulitumia TLDA iliyoundwa iliyoundwa kufunika familia tofauti za jeni zinazohusiana na ujamaa na udhibiti wa ulaji wa chakula. Kila kadi maalum ilirekebishwa kama mistari ya upakiaji ya sampuli ya 384 × 2 iliyo na vyumba vya athari vya 4 x 2 (kumbukumbu: 48a). Seti ya jeni ya 96 (Jedwali S1 katika Nyongeza ya Nyenzo) na jeni nne za kutunza nyumba (18S, Gapdh, Polr2a, na Ppia) zilisomewa. PCR ya wakati halisi ilifanywa kwa kutumia Life Technologies TaqMan reagents na inaendeshwa kwa mfumo wa utambuzi wa mlolongo wa ABI Prism 7900HT (Imetumika Biosystems, Foster City, CA, USA). Takwimu mbichi za fluorescence zilikusanywa kupitia PCR kutumia programu ya SDS 2.3 (Imetumika biosystems, Foster City, CA, USA), ambayo ilizalisha mzunguko wa kizingiti Ct na uamuzi wa moja kwa moja wa msingi na kizingiti. Baada ya kuchuja kwa kutumia programu ya wingu ya ThermoFisher (ThermoFisher, USA) ili kubagua kukimbia kwa PCR, wahusika kwa mfano walikuwa n = 6 (n = 5 kwa kikundi cha WD kwa P25). Takwimu hizo zilichambuliwa na ThermoFisher Cloud App (ThermoFisher, USA) kwa hesabu ya jamaa. Kiwango cha jamaa cha usemi wa jeni (RQ) kilitegemea njia ya kulinganisha ya Ct kwa kutumia equation RQ = 2−ΔΔCt, ambapo ΔΔCt kwa lengo la jeni moja ilikuwa mabadiliko yake ya Ct yalitolewa kutoka kwa sampuli ya calibrator na kurekebishwa kwa udhibiti wa asili. Kwa usahihi, tuliamua gene ya kutunza nyumba iliyo salama zaidi kwa kutumia algorithm ya geNorm (ThermoFisher Cloud App RQ, ThermoFisher, USA). Kati ya jeni nne za kutunza nyumba, Gapdh ilifafanuliwa kama udhibiti wa asili wa NAc na hypothalamus, na Ppia kwa VTA na hii ilikuwa kweli kwa sampuli zote kutoka kwa vipindi vitatu vilivyochambuliwa. Uwakilishi wa picha ya maumbile ya jeni ulibuniwa kwa mikono ya kupeana rangi moja kwa nyongeza ya 10% ya jaribio la jeni kwenye kikundi cha CD. Tofauti kubwa, kwa kutumia mtihani usio saini wa Wilcoxon-uliowekwa saini, ilibainika na ugonjwa wa kuzaa.

Takwimu ya Uchambuzi

Matokeo yameonyeshwa kama maana ± SEM katika meza na takwimu. Mann-Whitney jaribio lisilokuwa la parametric lilitumika kwa uchambuzi wa Uzito wa Mwili kwa wakati tofauti, upendeleo wa Mafuta, na uwiano wa OD uliopatikana kutoka kwa chanjo ya mwili.

Ili kutathmini umuhimu wa upendeleo wa mafuta wa siku wa 3, tulifanya uchambuzi wa takwimu kwa safu kila siku. Kwa kila kikundi, matumizi ya suluhisho la mafuta na suluhisho la kudhibiti lilipimwa kwa kutumia jaribio la saini ya kiwango isiyo ya parametric Wilcoxon. Tulilinganisha thamani ya maana ya upendeleo na thamani ya hypothetical ya 50% (mstari mwembamba ulio na alama). Tofauti kubwa ilibainika na ugonjwa nyekundu. Tulitumia mtihani kama huo kwa uchambuzi wa thamani ya qPCR; tulilinganisha thamani ya maana ya RQ na thamani ya hypothetical ya 1. Tofauti kubwa ilibainika na asterisk (Mchoro (Kielelezo44).

Kielelezo 4 

Usemi wa jeni katika kiunga cha mkusanyiko wa damu (NAc), eneo la sehemu ya ndani (VTA), na hypothalami kutoka kwa chakula cha pori-la magharibi kulishwa panya na panya-kudhibiti lishe ya panya kwa vipindi vitatu. Utaftaji wa wakati huo huo wa usemi wa jeni ...

Kwa uchambuzi wa mfano wa plasma, tulifanya mtihani wa Mann usio na kipimo na Whitney. Idadi ya seli za TH-chanya zilichambuliwa na ANOVA ya njia mbili na p Thamani ilihesabiwa. Kwa sababu ya kuzidisha kwa vipimo vilivyotekelezwa, Bonferroni muda mfupi baada ya marekebisho yalitumika tu kufuatia jaribio hili. Uchanganuzi wa takwimu ulifanywa kwa kutumia programu ya Prism 6.0 (Programu ya GraphPad Inc., La Jolla, CA, USA).

PCA isiyodhibitiwa ilifanywa kwa mara ya kwanza kwa vigezo vya 130 (TPLA, tabia, na data ya plasma) kwa wakati tofauti kwa kila punje za biopsy za ubongo (VTA, NAc, na hypothalamus) kuibua muundo wa jumla wa data iliyowekwa (i.e, PCA tatu za ulimwengu kwa wakati wa wakati). PCA inaweza kufafanuliwa kama makadirio ya orthogonal ya data kwenye nafasi ya chini ya mlalo, ili kwamba kutofautisha kwa data iliyokadiriwa kukuzwa katika eneo la msaada. Kwanza tulichuja aina za jeni ambazo hazijaonyeshwa au kuonyeshwa kidogo (Mchoro (Kielelezo5) .5). Maadili ya watoto kutoka kwa mabwawa ya CD yaliyokaidiwa na kutoka kwa mabwawa yaliyodhaminiwa na WD yalionekana kwa rangi tofauti katika viwanja vya PCA ya mtu binafsi ili kuona ikiwa vikundi hivi viwili vya majaribio vimetenganishwa na sehemu za PCA ambazo hazijasimamiwa. Mchanganuo huu unabagua vikundi vya jeni ambavyo huonyeshwa tofauti kati ya vikundi viwili vya watoto. Baadaye, PCAs zilizolenga zilifanywa kwa nguzo tofauti za alama za mRNA: plastikiity (kiambatisho kiini, cytoskeleton, sababu ya neurotrophic, synaptogenesis, na udhibiti wa maandishi), njia ya DA, njia ya GABAergic, moduli za epigenetic (histone deacetylase na histone acetyl kuhamishwa). PCAs hizi zilizolenga humuhusu mtu kuibua sawia wakati huo huo uhusiano kati ya chakula cha mama na alama na uhusiano kati ya jeni maalum la familia. Kiwango cha ubora kilitumika kwa uchambuzi wa PCA na PCA iliyozingatia: +++: kujitenga mzuri sana; ++: kujitenga mzuri na panya moja upande mbaya wa mgawanyiko wa PCA; +: kujitenga kizuri kabisa na panya mbili (moja ya kila kikundi) upande mbaya, -: hakuna kujitenga wazi.

Kielelezo 5 

Mchanganuo wa sehemu kuu (PCA). Alama ya kutawanya kwa njama ya PCA (A, B). (A) PCA ya kimataifa kutoka kwa sampuli za nukta (NAc) za wanaume wa P95. Pembetatu nyeusi zinahusiana na watoto kutoka kwa lishe ya kudhibiti (CD) mabwawa ya kulishwa na pembetatu nyekundu zinahusiana na watoto ...

Matokeo

Uzito wa Mwili na Ukuaji

Ulaji wa WD wa mama wakati wa ujauzito (kutoka G1 hadi G21) hakuathiri uzito wa mwili wa watoto wakati wa kuzaliwa (Kielelezo (Kielelezo2) 2) (CD: 6.55 ± 0.07 g vs WD: 6.54 ± 0.05 g p = 0.9232) (Takwimu (Takwimu2A, B) .2A, B). Upataji uzito wa mwili kutoka kwa kuzaliwa hadi kunyunyizia ulikuwa 21% juu kwa watoto waliozaliwa kutoka kwa mabwawa ya WD kuliko watoto kutoka kwa mabwawa ya CD na uzani wa mwili kwa kiwango cha juu zaidi kutoka kwa watoto waliozaliwa kutoka kwa mabwawa ya WD (36.19 ± 0.90 g vs 47.32 X 1.48 g p <0.001) (Kielelezo (Kielelezo2C) .2C). Kutoka kuachisha hadi mwisho wa jaribio (P95), panya zilishwa na chakula wastani na uzito wa mwili ulibaki juu kwa watoto kutoka kwa mabwawa ya WD kuliko kutoka kwa watoto wa mabwawa ya CD. Kwa maelezo: wakati wa ujana (P39) (Vielelezo (Takwimu2A, D), 2A, D), CD: 176.8 ± 3.3 g vs WD: 192.2 ± 3.3 g p = 0.0016 na kwa P93 (kijana mzima) (Takwimu (Takwimu2A, E) 2A, E) CD: 478 ± 9.9 g vs WD: 508.6 ± 10.3 g p = 0.0452.

Kielelezo 2 

Mageuzi ya uzani wa mwili wa watoto kutoka kuzaliwa hadi watu wazima. (A) Siku ya uzani wa 0 hadi siku 100. Kipindi cha kunyonya katika vipindi vyekundu na vya kupandisha (c) utoto, (d) ujana, na (e) watu wazima vijana kwa kijivu. Kwenye curve ya ukuaji, watoto wa kiume kutoka kwa lishe ya kudhibiti ...

Homoni na Alama za Metabolic kwa Kipindi tofauti cha Wakati

Plasma leptin, insulini, sukari, na viwango vya NEFA vilipimwa kwa P25, P45, na P95. Katika miaka yote, sukari ya plasma, NEFA na leptin ya watoto wa WD haikuwa tofauti na takwimu kutoka kwa watoto wa CD (Jedwali (Jedwali2,2, n = 6 kwa kila kikundi). Tuliona ongezeko kubwa la utuaji wa mafuta (retroperitoneal fat mass ratio) kwa watoto kutoka kwa mabwawa ya WD yaliyolishwa kwa P25 tu (p = 0.0327, Mann na mtihani wa Whitney).

Meza 2 

Urejeshaji wa uzito wa wingi wa mafuta na kipimo cha plasma: sukari; insulini, NEFA, na leptin.

Athari za WD ya Perinatal juu ya Upendeleo wa Mafuta kutoka kwa Kuleta uzito hadi Kuzeeka

Kuchunguza athari za WD juu ya upendeleo wa mafuta, tulitumia njia ya kuchagua chupa mbili kwa alama tatu wakati wa ukuaji. Mtihani huu ulitumiwa kusoma upendeleo wa ladha ya mafuta kwa kuzuia iwezekanavyo athari ya kimetaboliki ya kumeza kwake Tulionyesha kwamba tofauti za ulaji wa "kalori" zaidi kutoka kwa chupa (kwa P25, P45, na P95) sio muhimu kwa takwimu. kati ya vikundi (Kielelezo S1A-C katika Nyongeza ya Nyenzo). Kwa kuongeza tofauti ya utumiaji wa suluhisho la mafuta ya mahindi ya 1% husababisha ongezeko la kalori na 1% kwa panya za WD kwa P25 (WD: 4.9% vs CD: 3.9% ya kalori iliyingizwa) na 0.5% kwa panya za CD huko P45 (WD: 2% vs CD: 2.5% ya kalori iliyoingizwa) (Vielelezo S1D-F katika Nyongeza ya Nyenzo). Katika P25, watoto kutoka kwa mabwawa ya CD hawana upendeleo wa mafuta (44.87 ± 9.8%, p = 0.339); kwa panya tofauti za WD zinaonyesha upendeleo wa mafuta (75.12 ± 8.04%, p = 0.039 kufuatia mtihani wa saini ya Wilcoxon, kinyota nyekundu). Kwa kuongezea kuna tofauti ya kitakwimu kati ya vikundi viwili na p = 0.0347 (Jaribio la Mann na Whitney, tag nyeusi ya hash) (Kielelezo (Kielelezo33A).

Kielelezo 3 

Mabadiliko ya maendeleo ya upendeleo wa mafuta kutoka kwa kuleka kwa watu wazima. (A) Upendeleo wa kwanza wa mafuta huko P25, P45, na P95. Seti tofauti za wanyama zilitumika kila wakati wa kumweka (n = 6 / kikundi / hatua ya saa). (B) Siku tatu mfululizo za mafuta ...

Katika P45 na P95, vikundi viwili vina upendeleo mkubwa wa mafuta, yaani, tofauti sana na thamani ya nadharia ya 50% (kwa P45, CD: 80.68 ± 2.2% p = 0.0005 na WD: 78.07 ± 3.25% p = 0.0005; kwa P95, CD: 74.84 ± 8.4% p = 0.0425 na WD: 69.42 ± 8.9% p = 0.109 kufuatia mtihani wa saini ya Wilcoxon, kinyota nyekundu) (Kielelezo (Kielelezo3A) .3A). Maadili ya vikundi viwili hayakuweza kutambuliwa kufuatia siku moja ya uwasilishaji wa ladha (huko P45 p = 0.7857 na kwa P95 p = 0.9171 mtihani wa Mann-Whitney) (Kielelezo (Kielelezo33A).

Ili kujua jinsi panya inasimamia utumiaji wa mafuta yao kwa wakati, tulirudia uwasilishaji wa mafuta kwa siku tatu mfululizo huko P45 na P95 (Kielelezo (Takwimu3B, C) .3B, C). Inafurahisha huko P45, ni wanaume tu kutoka kwa mabwawa ya WD waliopotea upendeleo kwa suluhisho la mafuta (Mchoro. (Kielelezo3B) 3B) (siku ya tatu: 53.12 ± 8.36% p = 0.851 kufuatia mtihani wa saini ya Wilcoxon). Walakini, katika P95 (umri wa watu wazima) wanyama wote walipendelea mafuta bila mabadiliko wakati wa jaribio la siku 3 (Kielelezo (Kielelezo33C).

Kwa muhtasari, katika mfano huu, tuliona, katika hatua za mwanzo (utoto), upendeleo wa mafuta katika panya hulishwa na mabwawa ya WD na shida ya kuendelea kwa wakati wakati wa ujana. Hatukuona tofauti yoyote kati ya vikundi viwili vya panya kwa watu wazima.

Saini ya Masi ya Plastiki ya Ubongo na Duru za GABA Kufikiria tena katika Hypothalamus na Njia za Thawabu.

Kuamua ikiwa ulaji wa WD ya mama wakati wa ujauzito na kukomesha kuna athari kwenye hypothalamus na njia za thawabu za watoto, tulipima usemi wa jamaa wa sababu kadhaa za utaftaji wa ubongo, mfano wa ubongo, na alama za mzunguko wa neuronal zinazohusika katika ulaji wa chakula na epigenetic. wasimamizi. Tulitumia TLDA kuchambua wingi wao katika eneo tofauti la ubongo (yaani, hypothalamus, VTA, na NAc) (Jedwali S1 katika Nyongeza ya Nyenzo) kwa vipindi vitatu. Uchunguzi ulifanywa baada ya majaribio ya kuchagua chupa mbili huko P25, P45, na P95 (Kielelezo (Kielelezo1) 1) kwa wanaume sita waliozaliwa kutoka kwa mabwawa ya WD walio lishwa na wanaume sita waliozaliwa kutoka kwa mabwawa ya CD.

Katika P25 katika hypothalamus, jeni tano kutoka kwa makundi kumi na tatu tofauti zilionyesha kiwango cha chini cha kujielezea kwa mRNA haswa kwenye alama za alama za plastiki na alama za GABA zinazoanzia kati ya −20% (Gfap) na −40% (Gabra5) kwa watoto kutoka mabwawa ya WD walio lishwa. CD ililisha mabwawa. Katika malipo ya njia ya malipo ya njia ya malipo (VTA na NAc), jeni mbili zilionyesha kiwango cha juu cha takwimu za mRNA (D2R na Gabra1), yaani, ishara ya DA na receptors za GABA na gene moja kujieleza kwa chini (Hcrtr2) (yaani, orexin 2 receptor) katika NAc , wakati jeni nne zilionyesha kiwango cha juu cha maonyesho ya mRNA (Ramani2, Gabara1, Hcrtr1, and Hcrtr2) (mfano, alama za plastiki, vipokezi vya GABA na receptors za serotoninergic) katika VTA (Mchoro. (Kielelezo44).

Katika P45 katika hypothalamus, jeni tano kutoka kwa makundi kumi na tatu tofauti zilionyesha kiwango cha chini cha kujieleza cha mRNA kati ya −20% (Fos) na −50% (FosB) katika watoto kutoka mabwawa ya WD yaliyolishwa kwa kulinganisha na panya kutoka kwa mabwawa ya CD yaliyolishwa. Katika P45 katika njia ya malipo ya biopsies, jeni nne zilionyesha kiwango cha juu cha maonyesho ya mRNA (Gfap, Dat, Cck2r, na Kat5) na jeni mbili kujieleza kwa chini (Fos na FosB) katika NAc wakati aina tatu zilionyesha kiwango cha chini cha kujieleza kwa MRNA (Arc, FosB, na Th) na jeni moja kiwango cha juu (Gabrg2) katika VTA.

Katika P95 katika hypothalamus, jeni za 20 kutoka kwa aina kumi na tatu tofauti zilionyesha kiwango cha juu cha mRNA kuanzia kati ya + 20 na + 40% (Syt4 hadi Gjd2) na aina ya 3 ilionyesha kiwango cha chini cha MRNA (FosB, D1r, na Gabarb1 kutoka GXGUMXs kutoka GXGUMXD kutoka GXWUMX panya kulishwa ikilinganishwa na panya kutoka kwa mabwawa ya CD. Katika P95 katika njia ya malipo ya biopsies, jeni za 12 zilionyesha kiwango cha juu cha maonyesho ya mRNA kati ya + 20 na + 40% (Syn1 hadi Hcrt1) na 1 gene usemi wa chini (Th) katika NAc, 6 gene ilionyesha kiwango cha juu cha mRNA (Ncam1 , Gja1, Gjd2, Gabra5, Htr1a, na Htr1b), na aina ya 6 ilionyesha kiwango cha chini cha kujieleza kwa MRNA (Cntf, Igf1, Fos, Socs3, Gabrb2, na Hdac3) katika V.

Kisha tukafanya PCA tatu ambazo hazijasimamiwa sanjari na biopsies tatu za ubongo kwa kutumia vigezo vyote vilivyo na kipimo (kwa mfano, kipimo cha plasma, data ya tabia na tofauti za kujieleza kwa mRNA). Mgawanyiko dhahiri wa vikundi viwili ulipatikana tu P95 ya NAc na VTA (Jedwali (Jedwali33).

Meza 3 

Mchanganyiko wa sehemu kuu (PCA) awali: uchambuzi wa ubora wa mgawanyo wa kikundi cha PCA kwa PCA ya kimataifa na PCA inayozingatia.

Kulingana na mduara wa uunganisho wa PCA na data ya TLDA (inayowakilisha anuwai nyingi zilizojumuishwa katika PCA hii), tulielezea familia za jeni ambazo zinaweza kuwajibika kwa kutengana na kufanya PCA inayozingatia (Kielelezo (Takwimu5A, B, 5A, B, kwa mfano). PCA inayolenga ilifunua kuwa katika alama za DA za P25 katika NAc na alama za plastiki katika hypothalamus zinaweza kutenganisha vikundi viwili vya watoto (Jedwali (Jedwali33 kwa muhtasari). Hakuna ubaguzi kama huo uliopatikana P45. Walakini, uchambuzi kama huo huko P95 ulifunua kuwa alama tofauti za mfumo wa GABA katika NAc na hypothalamus, pamoja na alama za plastiki (katika hypothalamus, NAc na VTA) na wasanifu wa epigenetic (tu katika NAc) wanachangia kutenganisha vikundi viwili vya wanyama ( Kielelezo (Kielelezo5; 5; Jedwali Jedwali33).

Mchanganuo huu unaonyesha ushawishi wa muda mrefu wa lishe ya asili kwenye alama za GABAergic na vile vile vya plastiki na alama za epigenetic katika njia ya nyumbani na njia ya ujira iliyojumuishwa katika tabia ya kulisha.

Immunohistochemistry ya seli za T zilizothibitishwa Uchambuzi wa maandishi

Kwa sababu tuliona mabadiliko kadhaa katika TH mRNA katika NAc na VTA katika vipindi anuwai vya maendeleo, tulilenga kurekebisha matokeo haya na chanjo ya TH. Idadi ya seli chanya za TH / NeuN zilichambuliwa katika VTA ambapo miili ya seli za dopaminergic iko na OD ya TH immunolabeling ilikamilishwa katika miisho ya ujasiri iko katika NAc. Seli (+) zilikuwa hazizidi sana katika VTA ya WD ikilinganishwa na panya za CD kwenye P45 tu (Vielelezo (Takwimu6A, C, E; 6A, C, E; Kielelezo S2Katika Nyongeza ya Nyenzo). Hakukuwa na mwingiliano mkubwa kati ya kiwango cha sehemu na kipimo cha TH / NeuN kwa vipindi vitatu (P25 p = 0.9991, P45 p = 0.9026, na P95 p = 0.9170). Katika P45 tu, tofauti ya takwimu ilipatikana kati ya vikundi viwili vya watoto (p = 0.0002) (Kielelezo (Kielelezo6E) .6E). Kwa kuongezea, hatukuona tofauti yoyote katika OD ya TH ya chanjo ya NAc kwa P25 na P45 kati ya vikundi viwili (maadili ya uwiano wa OD kwa P25: 1.314 ± 0.022 katika CD vs 1.351 ± 0.026 katika WD, p = 0.2681; Thamani za uwiano wa OD kwa P45: 1.589 ± 0.033 katika CD vs 1.651 ± 0.027 katika WD, p = 0.1542). Walakini, upungufu mkubwa wa OD ya mwisho wa ujasiri wa TH ulipatikana katika NAc kutoka kwa kikundi cha WD kwa P95 (maadili ya uwiano wa OD kwa p95: 1.752 ± 0.041 katika CD vs 1.550 ± 0.046 katika WD, p = 0.0037) (Takwimu (Takwimu6B, D, F; 6B, D, F; Kielelezo S2B katika Nyongeza ya Nyenzo).

Majadiliano

Katika utafiti huu, tuligundua kwamba utapiamlo wa nguvu ya mama yaweza kushawishi mpango wa maendeleo wa njia za thawabu zinazohusika katika homeostasis ya nishati, uchaguzi wa chakula, na ulaji wa chakula kwa watoto. Tulichunguza kwa undani athari za ulaji wa WD wa mama kutoka kwa kuzaliwa hadi kulewa kwenye Gaba, serotonin, na njia za DA za maeneo maalum ya ubongo (VTA, NAc, na hypothalamus) katika kizazi, kutoka utoto hadi mtu mzima. Matokeo yetu yanaonyesha kuwa matumizi ya lishe, yenye mafuta mengi na tamu, yaliyowekwa kabisa kwa kipindi cha ugonjwa ina athari ya upendeleo wa mapema wa mafuta (utoto) katika kizazi kilichounganishwa na mabadiliko katika wasifu wa kujieleza kwa jeni na mabadiliko ya usanifu wa usanifu wa mesolimbic mitandao ya dopaminergic. Walakini, wakati kizazi kilipokuwa kikihifadhiwa chini ya lishe, tuliona katika ujana wa WD kulishwa kupotea kwa kuvutia kwa mafuta ambayo yaliratibishwa na usemi uliopunguzwa wa jeni wa mfumo wa DA na kupunguzwa kidogo kwa neurons za TH katika VTA. . Baadaye katika upendeleo wa mafuta ya maisha haikuwa tofauti kati ya vikundi hata ujazo muhimu wa mitandao ya GABAergic na mtandao wa nguvu wa homeostasis ya hypothalamus uligundulika katika panya kutoka kwa mabwawa ya WD yaliyodishwa (Mchoro. (Kielelezo77).

Kielelezo 7 

Uboreshaji wa picha. NAc, mkusanyiko wa nukta; VTA, eneo la kuvuta kwa mzunguko.

Athari za kwanza za ulaji wa -in-WD ambazo tuliona katika utafiti huu ni ongezeko la uzito wa mwili wa watoto kwa kumwachisha lakini hakuna tofauti wakati wa kuzaa. Hakika, wanyama wa kikundi cha WD hupata uzito wa 21% zaidi kuliko CD mwishoni mwa kipindi cha kunyonya. Uchunguzi wa awali umetoa matokeo yanayokinzana juu ya mabadiliko ya uzito wa kuzaliwa kwa watoto kutoka kwa mabwawa ya WD yaliyolishwa: uzani wa juu wa mwili (, ), uzito wa chini wa mwili (, , ) au hakuna tofauti (, ). Takwimu zetu zinaambatana na uchambuzi wa hivi karibuni wa meta-regression () iliyofanywa kwenye machapisho ya majaribio ya 171 ambayo ilimalizia kuwa mfiduo wa HFD ya mama haikuathiri uzito wa kuzaa lakini ilisababisha kuongezeka kwa uzito wa mwili mwishoni mwa kipindi cha kuzaa. Uzito wa mwili wa juu wa uzao wa WD labda unaonyesha mabadiliko katika muundo wa maziwa na / au utengenezaji wa maziwa ambao umeonyeshwa katika machapisho ya awali (, ). Kulingana na uzani wao wa kiwango cha juu cha mwili, uwiano wa mafuta ya kuzaliwa ya watoto wa WD ulikuwa juu sana kuliko ile ya watoto wa CD mwishoni mwa kipindi cha kunyonya (P25, Jedwali. Table2), 2), ambayo pia inaambatana na masomo ya zamani (, ). Walakini, umakini wa hali ya juu haukuendelea kwenye P45 na P95, na vigezo vingine vya metabolic kama insulin, NEFA, na plasma ya glucose hazikuwa tofauti kati ya vikundi. Matokeo yetu yalionyesha kuwa bila ugonjwa wa kunona wazi wa mama wakati wa ujauzito na kujifungua, lishe yenyewe haitoshi kuleta athari za metaboli za kudumu kwa kizazi (, , ).

Imeripotiwa kwamba ulaji wa HFD wa kawaida hulingana vyema na upendeleo wa watoto kwa chakula kinachoweza kustawi (). Katika utafiti wetu, tulifanya uchunguzi wa maelewano kwa lengo la kujaribu upendeleo wa mafuta kwa watoto ambao wamelishwa kwenye chow mara kwa mara.

Athari za WD ya Milele kwa Utoto (baada ya Kumwachisha)

Watoto wa pete wanakula chakula kigumu 19-20 siku baada ya kuzaliwa () wakati njia zao za ujazo wa kiwavi bado hazijakomaa (). Kwa hivyo ilikuwa ya kupendeza sana kusoma upendeleo wao mapema sana kwa mafuta na kurekebisha upendeleo huu wa mapema na uchambuzi wa maandishi ya ubongo. Baada tu ya kuchoka, tuliona upendeleo wa mafuta katika uzao wa WD ambao haukuthibitishwa katika panya za CD. Hii inaambatana na ripoti zingine zinazoonyesha uhusiano kati ya utapiamlo mbaya na upendeleo wa chakula na upendeleo wa chini wa mafuta katika umri mdogo kwa panya za kudhibiti ().

PCA ya ulimwengu haikuruhusu kubagua kundi la watoto kwa heshima na lishe ya mama wakati huo. Walakini, wakati PCA ililenga, iliyozuiliwa kwa alama za DA, ilifanywa, tulipata mgawanyiko mzuri wa vikundi. Hakika, kuna ongezeko la alama katika usemi wa D2 receptor mRNAs katika NAc katika watoto wa WD. Utaftaji wa kina wa postynaptic D2 katika NAc inaweza kuhusika kwa sehemu katika motisha ya juu ya mafuta (). Nakala zingine chache hubadilishwa katika watoto wa WD ikilinganishwa na pups za CD, kama kuongezeka kwa manjano ya alpha 1 GABAA katika NAc na VTA na kupungua kwa alpha 5 GABAA kujipenyeza kwenye hypothalamus inayoonyesha ujanibishaji wa receptors za GABAA kwenye neli hizi.

Matokeo ya WD ya Perini juu ya ujana

Katika P45, tuliona upendeleo sawa wa mafuta mengi kwa vikundi vyote siku ya kwanza ya uwasilishaji lakini, cha kufurahisha, panya za WD hatua kwa hatua zilipoteza hamu ya mafuta baada ya uwasilishaji mara kwa mara. Ujana ni kipindi muhimu cha kujipanga upya kwa muundo unaofaa kwa usindikaji wa utambuzi wa muda mrefu (), na tafiti kadhaa zilionyesha hatari ya kutambulika kwa athari mbaya ya utambuzi wa lishe ya mafuta (-). Matokeo haya ni katika kupingana dhahiri na kazi ya zamani ya kikundi cha Muhlhausler (, ) ambayo panya wachanga (wiki za 6) ilionyesha upendeleo wazi kwa chakula kisicho na chakula. Walakini, katika machapisho yao dhana ya majaribio ilikuwa tofauti kwani panya walikuwa na ufikiaji wa bure wa chakula cha kawaida na chakula cha junk kutoka kwa weaning hadi kwenye kafara (wiki ya 6).

Kwa bahati nzuri, tulipima ongezeko la Dat mRNA katika NAc na kupungua kwa Th mRNA katika VTA ambayo ilithibitishwa na chanjo ambayo ilionyesha nambari ya seli ya TH (+) iliyopunguzwa katika VTA ya panya za WD. Baada ya shughuli ya maandishi iliyoinuliwa kwa mfumo wa DA wakati wa kulisha, shughuli iliyopunguzwa huko P45 inaweza kuelezea riba ya chini ya chakula kinachoweza kusikika kwenye panya zetu za WD. Ikumbukwe pia kuwa kupungua kwa utaratibu wa Fos na FosB mRNA katika nuksi mbali mbali tulizozichambua kunaweza kuwa alama ya shughuli iliyopungua ya ubongo baada ya mfiduo wa WD wa mama.

Panya za ujana za WD zilionyesha kutokukataa haraka kwa mafuta ambayo ni kinyume na tabia yao ya mapema. Matumizi ya "kawaida" lishe wakati wa utoto inaonekana "kuwalinda" kuelekea upendeleo wa mafuta uliozidi wakati wa ujana. Kinyume chake wakati panya zina ufikiaji bure wa chakula cha junk baada ya kuyachisha, kama vile Ref. (, ), zinaonyesha katika ujana upendeleo kali kwa mafuta. Matokeo haya yanaonyesha kuwa wiki za 3 za chakula baada ya kuyamwaga zingeweza kupanga tena mizunguko na kumfanya mzao wa ujana asijali sana changamoto ya mafuta kali.

Matokeo ya WD ya Perinat kwa watu wazima

Panya ya watu wazima haikuonyesha tena tofauti ya upendeleo kwa mafuta, hata baada ya uwasilishaji wa mafuta uliyorudiwa kama ilivyoelezea tayari (, ). Kwa bahati nzuri, tuliona kupungua kwa Th mRNA na protini katika NAc, na tabia ya usemi uliopunguzwa wa Dat mRNA katika VTA. Naef na mfanyakazi mwenzangu () tayari tumeripoti shughuli ya chini ya mfumo wa DA katika panya watu wazima hulishwa kwa kipindi cha hatari na HFD, na majibu ya DA blan ya amphetamine yaliyopimwa na kipaza sauti na msukumo wa kuongezeka kwa malipo ya mafuta (tazama meza iliyofupisha data ya hivi karibuni ya qPCR juu ya mfano huu, Jedwali S2 katika Nyongeza ya Nyenzo). Kizuizi moja cha Quanifying TH (mRNA na immunohistochemistry) katika NAc hutoka kwa ukweli kwamba seli za NAc pia zinaweza kuelezea Th mRNA na proteni na kisha zinaweza kupendelea upendeleo wa nyuzi za DA (, ). Walakini, matumizi ya kinga ya TH katika NAc yalifunua vituo vya axon zenye mnene kutoka kwa neuron ya katikati ya ubongo (VTA na SNc). Kawaida, neema za kuelezea za ujasiri wa mgongo na NAc zinaweza kutambuliwa tu kwa wanyama wenye leseni sana ya DA () na kwa hivyo inaweza kuwa vigumu kugundua katika sehemu zetu za picha. Katika utafiti huu, pia tuliona kuongezeka kwa nguvu kwa mmiliki wa opioid katika NAc wakati vikundi vingine, vilivyo na vielelezo tofauti, vilionyesha kupungua kwa sauti katika hali ya panya ya papo hapo iliyofunuliwa na HFD (wakati wa kujifungua na ishara ya ujauzito) (, ) au hakuna mabadiliko (). Marekebisho haya, yaliyopimwa katika kiwango cha mRNA tu, yanaweza kuonyesha shughuli kidogo ya mizunguko ya DA inayohusiana na unyeti wa juu wa opioid () ambayo labda haitoshi kuwa na athari kwenye mtihani wa tabia tuliofanya. Mawazo haya yanahitaji kudhibitishwa kwa kutumia njia za kufanya kazi. Kwenye jarida la hivi majuzi, lililokuwa na mfano kama huo, Romani-Perez et al., Hawakuweza kuona ongezeko kubwa la motisha katika sanduku za hali ya waendeshaji kwa watoto wa HFD lakini waligundua mfuatano mfupi wa kufikia sanduku la lengo kwenye duru ya mtihani wa barabara ya runway (). Licha ya kukosekana kwa upendeleo wa mafuta wa muda mrefu katika hali zetu za majaribio, tuligundua kuwa ulaji wa mwili wa WD una athari ya kudumu kwa mizunguko mingine ya ubongo ambayo inaelekezwa sana na kusanifiwa kwa GABA huko NAc na Hypothalamus. NAc inachukuliwa kama "hisia kali" kwa tabia ya kutimiza sheria (). Uchunguzi wa hivi karibuni umeonyesha kuwa ulaji wa chakula ulisitishwa na kizuizi cha GABA-kutolewa kwa LH neurons (). O'Connor et al. ilionyesha kuwa NAc D1R neurons (GABAergic inalenga neurons) kwa hiari inazuia neurons za LH VGAT kumaliza ulaji wa chakula (). Majaribio haya yanafunua mzunguko wa GABA (NAc / Hypothalamus) ambayo inaweza kuwajibika kudhibiti majibu ya tabia. Mfumo huu wa ventral striatum- hypothalamic hujumuisha mzunguko mwingine ambao unajumuisha kitovu cha misuli ya kitanda gia-kutolewa gia ya VGAT inayoua neuron kwa glutamate ikitoa neuron ya Vglut LH na kizuizi cha moja kwa moja cha lH vglut2 inalisha). Sehemu nyingine muhimu ya mzunguko wa kudhibiti hamu ambayo inajumuisha ganda la NAc ni makadirio ya kinga ya Gaba-kutolewa kwa VP (). Hizi data zinaonyesha jukumu muhimu la kuashiria kwa GABA katika mwingiliano kati ya hypothalamus na NAc kukuza kulisha. Katika somo letu, hatukuweza kubagua idadi ya watu waliohusika kwenye gaba kurekebisha na jinsi marekebisho haya yanaweza kubadilisha mitandao. Walakini, jukumu kuu la mizunguko ya GABA inastahili riba zaidi. Hasa, itakuwa ya kupendeza sana kufanya majaribio ya kazi zaidi ya duru hizi za GABA kwa kutumia njia za elektroni (). Tuliona pia uhamasishaji wa kimataifa wa maandishi ya mRNA kwa 5HT1a na 5HT1b receptors katika nukta tatu zilizosomewa. Nyingi ya nyuzi za serotonin zinazohusu huja kutoka kwa nuru ya dorsal raphe (DRN) na kati ya raphe kiini (MRN). Data ya hivi karibuni kutoka katika vivo rekodi na masomo ya kufikiria yalionyesha jukumu nzuri la 5HT katika tuzo (). Nyuzi za 5HT kutoka DRN zinahusika katika udhibiti wa msukumo (). Kuongeza 5HT1a katika VTA na NAc kunaweza kuwa njia ya fidia ambayo inaweza kudhibiti usumbufu. Katika hypothalamus, masomo ya kifamasia yanaonyesha kuwa 5HT1a receptor subtypes inaweza kukandamiza tabia ya kulisha iliyosababishwa na kuchochea kwa serotonin (, ). Kuongeza 5HT1a na b receptors katika hypothalamus kunaweza kuathiri hatua ya kukandamiza ya serotonin na kwa hivyo inaweza kuunda utaratibu wa fidia. Mawazo haya yanahitaji kudhibitishwa kwa kufanya majaribio sahihi ya kazi.

Mabadiliko haya ya mitandao yanahusishwa na marekebisho ya alama za plastiki kama Ncam mRNA. Katika hypothalamus ya panya watu wazima, tuliona kuongezeka kwa nakala za Ncam1 na St8sia4 kupendekeza na kuongezeka kwa saini ya polysialic acid (PSA). PSA ni glycan ya uso-seli ambayo moduli ya mwingiliano wa seli-kwa-seli. Polysialylation ya protini za wambiso za seli inahusika katika michakato kadhaa ya utegemezi wa upatanisho wa seli kwenye mfumo mkuu wa neva na imeripotiwa kuhitajika kwa utunzaji wa umeme wa synaptic wa mzunguko wakati wa kulisha wakati wa usawa mzuri wa nishati (, ). Kwa kuongezea wasimamizi wengine wa mwingiliano wa seli na synaptogenesis wanaweza kuhusika katika ubinifu huu wa hypothalamic.

Kwa kumalizia (Mchoro (Kielelezo7), 7), ulaji wa WD ya mama una ushawishi wa kudumu kwa shirika la mzunguko wa nyumbani na hedonic kudhibiti tabia ya kula katika kizazi. Kwa uchanganuzi wa vipindi vitatu vya wakati muhimu, tuliweza kuonyesha mabadiliko dhahiri ya upendeleo wa mafuta uliobadilishwa na saini maalum za Masi. Wakati wa utoto, upendeleo wa mafuta unaweza kuunganishwa na shughuli kubwa ya mfumo wa DA. Ujana, ulioonyeshwa na ubadilishaji wa upendeleo wa mafuta, ulihusishwa na usemi wa chini wa alama za mfumo wa DA unaonyesha utaratibu wa fidia. Jambo la kufurahisha sana kukuarifu ni kwamba, katika mfano huu, lishe bora baada ya kulewa inaweza kulinda panya ya vijana kutoka tabia mbaya ya kulisha kwa kupunguza hamu yao ya mafuta. Ingawa katika watu wazima vikundi hivi viwili vina upendeleo sawa wa mafuta, panya kutoka kwa mabwawa ya kulishwa ya WD ilionyesha ukarabati mkubwa wa mizunguko ya GABA. Je! Ni nini athari ya hii plastiki ya kudumu? Je! Ulaji wa ulaji wa obesogenic uliozidi wakati wa ujana utaboresha tena mfumo huu wa ujira ulio wazi? Maswali kama haya yanaweza kuwa muhimu katika ufuatiliaji wa lishe wa kuzaliwa upya na watoto walioinuka katika nchi za Magharibi.

Taarifa ya Maadili

Majaribio yote yalifanywa kwa mujibu wa miongozo ya kamati ya ustawi wa wanyama wa ndani, EU (maelekezo 2010 / 63 / EU), Institut National de la Recherche Agronomique (Paris, Ufaransa), na Idara ya Mifugo ya Ufaransa (A44276). Itifaki ya majaribio ilikubaliwa na kamati ya maadili ya taasisi na kusajiliwa chini ya kumbukumbu APAFIS 8666. Kila tahadhari ilichukuliwa ili kupunguza mkazo na idadi ya wanyama wanaotumiwa katika kila safu ya majaribio.

Msaada wa Mwandishi

JP na PB walifanya majaribio na kushiriki katika majadiliano na uandishi. TM ilifanya PCA na ilishiriki katika majadiliano na uandishi. SN ilichangia muundo wa jaribio na walishiriki katika majadiliano. PP ilichangia muundo wa jaribio, walishiriki kwenye majadiliano, na waliandika maandishi. VP iliyoundwa na kufanya majaribio, kuchambua data, na kuandika muswada.

Taarifa ya mashindano ya maslahi

Waandishi wanatangaza kuwa utafiti ulifanyika bila kutokuwepo na uhusiano wowote wa biashara au wa kifedha ambao unaweza kuitwa kama mgogoro wa maslahi.

Shukrani

Waandishi wangependa kumgundua Guillaume Poupeau na Blandine Castellano kwa kutunza wanyama wakati wote wa masomo, Anthony Pagniez kwa msaada wake katika uchimbaji wa mRNA na TLDA, Isabelle Grit kwa msaada wake katika uchambuzi wa sampuli za plasma, na Alexandre Benani na Marie-Chantal Canivenc kwa majadiliano yao ya msaada na muundo wa TLDA.

Maelezo ya chini

 

Fedha. Utafiti huu uliungwa mkono na mkoa wa des pout de la Loire ruzuku PARIMAD (VP), ruzuku ya msingi wa LCL (VP na PP), SanteDige msingi (VP) na INRA Metaprogram DIDIT (SN, VP, PP).

 

 

Vifaa vya ziada

Nyenzo ya ziada kwa ajili ya makala hii inaweza kupatikana mtandaoni saa http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/fendo.2017.00216/full#supplementary-material.

Kielelezo S1

Jumla ya ulaji wa nishati kutoka kwa mafuta ya mahindi yaliyo na chupa. (A) Ulaji wa kalori kutoka kwa chupa ya mafuta ya mahindi kwa 24 h kwa P25 kwenye pups kutoka lishe ya magharibi (WD) kulishwa mabwawa na watoto kutoka kwa lishe ya kudhibiti (CD) mabwawa ya kulishwa. (B) Ulaji wa kalori kutoka chupa ya mafuta ya mahindi kwa 24 h kwa P45 (siku ya tatu ya mtihani wa chupa). (C) Ulaji wa kalori kutoka chupa ya mafuta ya mahindi kwa 24 h kwa P95 (siku ya tatu ya mtihani wa chupa). Kwa paneli (A-C), data imeonyeshwa kuwa mbaya mean SEM, hakuna tofauti za takwimu (p > 0.05) ilizingatiwa, kufuatia mtihani wa Mann na Whitney ambao sio wa parametric, kwa miaka yote. (D) Asilimia ya ulaji wa kalori kutoka kwa chupa ya mafuta ya mahindi kulinganisha na ulaji wa jumla wa kalori (chupa ya mafuta ya mahindi + lishe ya kawaida) kwa 24 h kwa P25 katika watoto wa WD na watoto wa CD. (E) Asilimia ya ulaji wa kalori kutoka kwa chupa ya mafuta ya mahindi kulinganisha na ulaji wa jumla wa kalori (chupa ya mafuta ya mahindi + lishe ya kawaida) ya 24 h huko P45 (siku ya tatu ya mtihani wa chupa) katika watoto wa WD na watoto wa CD. (F) Asilimia ya ulaji wa kalori kutoka kwa chupa ya mafuta ya mahindi inalinganishwa na ulaji wa jumla wa kalori (chupa ya mafuta ya mahindi + lishe ya kawaida) kwa 24 h huko P95 (siku ya tatu ya mtihani wa chupa) katika watoto wa WD na watoto wa CD. Kwa paneli (D, E), data zinaonyeshwa kwa asilimia ya ulaji jumla wa kalori hakuna tofauti za takwimu (p > 0.05) ilizingatiwa, kufuatia chi-mraba na marekebisho ya Yates, kwa miaka yote.

Kielelezo S2

Picha za mwakilishi za uteketezaji wa TH katika mkusanyiko wa nukta (NAc) na eneo la kuvunjika kwa hewa (VTA) kwa sehemu tatu tofauti za wakati. (A) Photomicrograph ya TH / NeuN ya chanjo kwa kiwango cha VTA, −5.30 mm kutoka Bregma. Kuweka alama nyekundu ni kwa NeuN, na moja ya kijani kwa TH. Mshale mweupe unaonyesha kutokea kwa ujasiri wa tatu. (B) Photomicrograph ya TH ya kukamilisha kiwango cha NAc, + 1.70 mm kutoka Bregma. Maandishi ya kijani ni ya TH. Mshale mweupe unaonyesha umilele wa nje.

Jedwali S1

TaqMan orodha ya chini ya safu ya ujani na kanuni za maisha zinazolingana za uvumbuzi.

Jedwali S2

Muhtasari wa data iliyochapishwa kuhusu dopamine njia ya maandishi ya maandishi. Herufi nyekundu zinahusiana na kipindi cha utoto, zile za bluu kwa ujana, na zile nyeusi kwa watu wazima. =: inalingana na usemi sawa wa maandishi kati ya vikundi, +: inalingana na maelezo ya juu ya maandishi katika watoto kutoka kwa chakula cha kiwango cha juu cha caloric [chakula cha lishe, lishe ya magharibi (WD), au chakula cha juu cha mafuta (HFD) mabwawa ya kulishwa, na -: inalingana na kujielezea kwa maandishi ya chini kwa watoto kutoka kwa chakula cha kiwango cha juu cha caloric (chakula cha junk, WD au HFD) mabwawa ya kulishwa.

Marejeo

1. Barker DJ. Asili ya fetasi ya magonjwa ya uzee. Euro J Clin Nutr (1992) 46 (Suppl 3): S3-9. [PubMed]
2. Desai M, Gayle D, Han G, Ross MG. Hyperphagia iliyopangwa kwa sababu ya kupunguzwa kwa mifumo ya anorexigenic katika kizuizi cha kizuizi cha ukuaji cha intrauterine. Reprod Sci Elfu Oaks Calif (2007) 14: 329-37.10.1177 / 1933719107303983 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
3. Goran MI, Dumke K, Bouret SG, Kayser B, Walker RW, Blumberg B. Athari ya obesogenic ya mfiduo wa hali ya juu wakati wa ukuzaji mapema. Nat Rev Endocrinol (2013) 9: 494-500.10.1038 / nrendo.2013.108 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
4. Levin BE. Uwekaji wa kimetaboliki: athari muhimu ya mazingira ya perinatal juu ya udhibiti wa homeostasis ya nishati. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci (2006) 361: 1107-21.10.1098 / rstb.2006.1851 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
5. Olson CM, Strawderman MS, Dennison BA. Upataji uzito wa mama wakati wa uja uzito na uzito wa mtoto katika miaka ya 3. Afya ya Mtoto wa Mtoto J (2009) 13: 839.10.1007 / s10995-008-0413-6 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
6. Chen H, Simar D, Morris MJ. Mzunguko wa hypothalamic neuroendocrine umeandaliwa na fetma ya mama: mwingiliano na mazingira ya lishe ya baada ya kuzaa. PLoS One (2009) 4: e6259.10.1371 / journal.pone.0006259 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
7. Muhlhausler BS, Adam CL, Findlay PA, Duffield JA, McMillen IC. Kuongezeka kwa mabadiliko ya lishe ya uzazi kwa mtandao wa hamu ya kudhibiti hamu katika ubongo. FASEB J (2006) 20: 1257-9.10.1096 / fj.05-5241fje [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
8. Samuelsson AM, Matthews PA, Argenton M, Christie MR, McConnell JM, Jansen EHJM, et al. Unyoaji wa ulaji wa chakula katika panya za kike husababisha hyperphagia ya watoto, adiposity, shinikizo la damu, na upinzani wa insulini. Hypertension (2008) 51: 383-92.10.1161 / HYPERTENSIONAHA.107.101477 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
9. Kenny PJ. Utaratibu wa kawaida wa seli na Masi katika fetma na madawa ya kulevya. Nat Rev Neurosci (2011) 12: 638-51.10.1038 / nrn3105 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
10. Denis RGP, Joly-Amado A, Webber E, Langlet F, Schaeffer M, Padilla SL, et al. Ufanisi unaweza kuendesha kulisha huru ya neurons za AgRP. Kiini Metab (2015) 22: 646-57.10.1016 / j.cmet.2015.07.011 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
11. Stice E, Spoor S, Bohon C, DM ndogo. Kuhusiana kati ya fetma na majibu ya blunated ya mshtuko kwa chakula ni wastani kwa TaqIA A1 allele. Sayansi (2008) 322: 449-52.10.1126 / science.1161550 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
12. Frank GK, Reynolds JR, Shott ME, Jappe L, Yang TT, Tregellas JR, et al. Anorexia amanosa na fetma zinahusishwa na majibu tofauti ya ujira wa ubongo. Neuropsychopharmacology (2012) 37: 2031-46.10.1038 / npp.2012.51 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
13. Green E, Jacobson A, Haase L, Murphy C. Kupunguza kiinitete kupunguka na kuamsha kiini cha caudate kwa ladha ya kupendeza inahusishwa na fetma kwa watu wazima. Brain Res (2011) 1386: 109-17.10.1016 / j.brainres.2011.02.071 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
14. Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Lipton JW, Clegg DJ, et al. Mfiduo wa viwango vya juu vya mafuta ya kula hupokea thawabu ya psychostimulant na mauzo ya dopamine ya mesolimbic katika panya. Behav Neurosci (2008) 122: 1257-63.10.1037 / a0013111 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
15. Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, Pothos EN. Mapungufu ya neurotransication ya mesolimbic dopamine katika fetma ya malazi. Neuroscience (2009) 159: 1193-9.10.1016 / j.neuroscience.2009.02.007 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
16. Rivera HM, Kievit P, Kirigiti MA, Bauman LA, Baquero K, Blundell P, et al. Lishe ya mama yenye mafuta mengi na ugonjwa wa kunona huathiri ulaji wa chakula na dopamine kuashiria katika watoto wasio wa kibinadamu. Fetma (2015) 23: 2157-64.10.1002 / oby.21306 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
17. Gugusheff JR, Ong ZY, Muhlhausler BS. Asili ya mapema ya upendeleo wa chakula: kulenga windows muhimu za maendeleo. FASEB J (2015) 29: 365-73.10.1096 / fj.14-255976 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
18. Bayol SA, Farrington SJ, Stickland NC. Chakula cha "chakula kisicho na afya" cha mama wakati wa ujauzito na kunyonyesha huongeza ladha inayokua kwa "chakula kisicho na chakula" na usawa mkubwa wa kunona sana kwa watoto wa panya. Br J Nutr (2007) 98: 843-51.10.1017 / S0007114507812037 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
19. Vucetic Z, Kimmel J, Totoki K, Hollenbeck E, Reyes TM. Milo inayobadilika ya kiwango cha juu cha chakula cha akina mama na usemi wa jeni wa dopamine na jeni zinazohusiana na opioid. Endocrinology (2010) 151: 4756-64.10.1210 / en.2010-0505 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
20. Naef L, Moquin L, Dal Bo G, Giros B, Gratton A, CD ya Walker. Ulaji wa ulaji wa juu wa mafuta hubadilisha kanuni ya presynaptic ya dopamine kwenye mkusanyiko wa kiini na huongeza motisha ya thawabu ya mafuta katika kizazi. Neuroscience (2011) 176: 225-36.10.1016 / j.neuroscience.2010.12.037 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
21. Ong ZY, Muhlhausler BS. Kulisha chakula cha mama-mkekaji wa mabwawa ya panya hubadilisha uchaguzi wa chakula na maendeleo ya njia ya ujira wa mesolimbic katika uzao. FASEB J (2011) 25: 2167-79.10.1096 / fj.10-178392 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
22. Romaní-Pérez M, Lépinay AL, Alonso L, Rincel M, Xia L, Fanet H, et al. Athari za mfiduo wa mwili kwa lishe yenye mafuta mengi na mafadhaiko juu ya majibu ya changamoto za lishe, tabia inayotokana na chakula na kazi ya dopamine ya mesolimbic. Int J Obes (Lond) (2017) 41 (4): 502-9.10.1038 / ijo.2016.236 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
23. Beier KT, Steinberg EE, DeLoach KE, Xie S, Miyamichi K, Schwarz L, et al. Usanifu wa mzunguko wa neurons ya VTA dopamine iliyofunuliwa na ramani za pembejeo za pembejeo. Kiini (2015) 162: 622-34.10.1016 / j.cell.2015.07.015 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
24. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, et al. Gaba neurons ya VTA inayoendesha gari mahali pa kuzidiwa. Neuron (2012) 73: 1173-83.10.1016 / j.neuron.2012.02.015 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
25. van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. Uanzishaji wa neuroni za VTA GABA usumbufu utumiaji wa tuzo. Neuron (2012) 73: 1184-94.10.1016 / j.neuron.2012.02.016 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
26. Hu H. Thawabu na chuki. Annu Rev Neurosci (2016) 39: 297-324.10.1146 / annurev-neuro-070815-014106 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
27. Stanley BG, Urstadt KR, Charles JR, Kee T. Glutamate na GABA katika mifumo ya hypothalamic inayodhibiti ulaji wa chakula. Physiol Behav (2011) 104: 40-6.10.1016 / j.physbeh.2011.04.046 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
28. Ancel D, Bernard A, Subramaniam S, Hirasawa A, Tsujimoto G, Hashimoto T, et al. Sensor ya lipid ya mdomo ya GPR120 sio muhimu kwa ugunduzi wa orosensory ya lipids ya kula katika panya. J Lipid Res (2015) 56: 369-78.10.1194 / jlr.M055202 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
29. Ackroff K, Lucas F, Sclafani A. Upendeleo wa upendeleo kama kazi ya chanzo cha mafuta. Physiol Behav (2005) 85: 448-60.10.1016 / j.physbeh.2005.05.006 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
30. Camandola S, mbunge wa Mattson. Pept-kama receptor 4 upatanishi mafuta, sukari, na upendeleo wa ladha ya umami na ulaji wa chakula na kanuni ya uzito wa mwili. Fetma (2017) 25: 1237-45.10.1002 / oby.21871 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
31. Coupe B, Amarger V, Grit I, Benani A, Programu ya Lishe ya Parnet inaathiri shirika la hypothalamic na majibu ya mapema kwa leptin. Endocrinology (2010) 151: 702-13.10.1210 / en.2009-0893 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
32. Paillé V, Brachet P, Damier P. Jukumu la leseli ya nigral katika genesis ya dyskinesias katika mfano wa panya wa ugonjwa wa Parkinson. Neuroreport (2004) 15: 561-4.10.1097 / 00001756-200403010-00035 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
33. Benani A, Hryhorczuk C, Gouazé A, Fioramonti X, Brenachot X, Guissard C, et al. Ulaji wa ulaji wa chakula na mafuta ya lishe inajumuisha rewiring inayotegemea PSA ya mfumo wa arcuate melanocortin katika panya. J Neurosci (2012) 32: 11970-9.10.1523 / JNEUROSCI.0624-12.2012 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
34. Kirk SL, Samuelsson AM, Argenton M, Dhonye H, Kalamatiaos T, Poston L, et al. Uzito wa akina mama unaosababishwa na lishe katika panya hushawishi kabisa michakato kuu ya kudhibiti ulaji wa chakula kwa watoto. PLoS One (2009) 4: e5870.10.1371 / journal.pone.0005870 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
35. Ong ZY, Muhlhausler BS. Kutumia lishe yenye mafuta kidogo kutoka kwa kulea hadi kuwa watu wazima hurejesha programu ya upendeleo wa chakula kwa kiume, lakini sio kwa kike, watoto wa "chakula kibaya" - mabwawa ya panya. Acta Physiol Oxf Engl (2014) 210: 127-41.10.1111 / tot.12132 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
36. Ribaroff GA, Wastnedge E, Drake AJ, Sharpe RM, Chumba TJG. Mitindo ya wanyama ya mfiduo wa chakula cha juu cha mama na athari za metaboli kwa watoto: uchambuzi wa meta-regression. Obes Rev (2017) 18 (6): 673-86.10.1111 / obr.12524 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
37. Bautista CJ, Montaño S, Ramirez V, Morales A, Nathanielsz PW, Bobadilla NA, et al. Mabadiliko katika muundo wa maziwa katika panya feta zinazokula lishe yenye mafuta mengi. Br J Nutr (2015) 115: 538-46.10.1017 / S0007114515004547 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
38. Rolls BA, Gurr MI, Van Duijvenvoorde PM, Rolls BJ, Rowe EA. Kujifungua katika panya mwembamba na feta: athari ya kulisha kahawa na unono wa chakula kwenye muundo wa maziwa. Physiol Behav (1986) 38: 185-90.10.1016 / 0031-9384 (86) 90153-8 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
39. White CL, Purpera MN, CD ya Morrison. Kunenepa kwa mama ni muhimu kwa programu ya athari ya lishe yenye mafuta mengi kwa watoto. Am J Fizikia ya Udhibiti wa Mchanganyiko wa Fumu ya Mwili (2009) 296: R1464.10.1152 / ajpregu.91015.2008 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
40. Jua B, Purcell RH, Terrillion CE, Yan J, Moran TH, Tamashiro KLK. Lishe ya mafuta yenye nguvu wakati wa kuzaa au kunyonya huathiri utambuzi wa leptin ya watoto na fetma. Ugonjwa wa kisukari (2012) 61: 2833-41.10.2337 / db11-0957 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
41. Berthoud HR. Metabolic na hedonic anatoa katika udhibiti wa neural wa hamu ya chakula: ni nani bosi? Curr Opin Neurobiol (2011) 21: 888-96.10.1016 / j.conb.2011.09.004 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
42. Henning SJ, Chang SS, Gisel EG. Ontogeny ya udhibiti wa kulisha katika kunyonya na kunyonya panya. Am J Fizikia ya Udhibiti wa Fumu ya Ujumuishaji wa Kiwango cha (1979) 237: R187-91. [PubMed]
43. Leibowitz SF, Lucas DJ, Leibowitz KL, Jhanwar YS. Mifumo ya maendeleo ya ulaji wa macronutrient katika panya wa kike na wa kiume kutoka kwa unyonyeshaji hadi ukomavu. Physiol Behav (1991) 50: 1167-74.10.1016 / 0031-9384 (91) 90578-C [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
44. Trifilieff P, Feng B, Urizar E, Winiger V, Ward RD, Taylor KM, et al. Kuongeza dopamine D2 receptor kujieleza katika nukta ya watu wazima hukusanya huongeza motisha. Mol Psychiatry (2013) 18: 1025-33.10.1038 / mp.2013.57 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
45. Spear LP. Ubongo wa ujana na dhihirisho la tabia linalohusiana na umri. Neurosci Biobehav Rev (2000) 24: 417-63.10.1016 / S0149-7634 (00) 00014-2 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
46. Vendruscolo LF, Gueye AB, Darnaudéry M, Ahmed SH, Cador M. sukari kupita kiasi wakati wa ujana hubadilisha motisha na kazi ya malipo katika panya za watu wazima. PLoS One (2010) 5: e9296.10.1371 / journal.pone.0009296 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
47. Boitard C, Viwanja SL, Cavaroc A, Tantot F, Castanon N, Layé S, et al. Kubadilisha lishe ya mafuta ya vijana kwa lishe ya kudhibiti watu wazima kunarekebisha mabadiliko ya neva. Mbele Behav Neurosci (2016) 10: 225.10.3389 / fnbeh.2016.00225 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
48. Naneix F, Darlot F, Coutureau E, Cador M. Upungufu wa kudumu kwa hedonic na kiini hujilimbikizia tena kwa thawabu tamu na unywaji wa sukari wakati wa ujana. Euro J Neurosci (2016) 43: 671-80.10.1111 / ejn.13149 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
49. Baker H, Kobayashi K, Okano H, Saino-Saito S. Matamshi ya hali ya hewa na mshtuko wa tyrosine hydroxylase mRNA katika neonatal na panya watu wazima. Kiini Mol Neurobiol (2003) 23: 507-18.10.1023 / A: 1025015928129 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
50. Jaber M, Dumartin B, Sagné C, Haycock JW, Roubert C, Giros B, et al. Tofauti ya udhibiti wa tyrosine hydroxylase katika genge basal ya panya kukosa transporter dopamine. Euro J Neurosci (1999) 11: 3499-511.10.1046 / j.1460-9568.1999.00764.x [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
51. Klietz M, Keber U, Carlsson T, Chiu WH, Höglinger GU, Weihe E, et al. Dyskinesia ya l-DOPA iliyoambatana inahusishwa na upungufu mdogo wa hesabu wa ugonjwa wa neuroni ya hydroxylase mRNA-inayoonyesha. Neuroscience (2016) 331: 120-33.10.1016 / j.neuroscience.2016.06.017 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
52. Kelley AE, Baldo BA, Pratt WE, Je MJ. Corticostriatal-hypothalamic circry na motisha ya chakula: ujumuishaji wa nishati, hatua na thawabu. Physiol Behav (2005) 86: 773-95.10.1016 / j.physbeh.2005.08.066 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
53. Jennings JH, Ung RL, Resendez SL, Stamatakis AM, Taylor JG, Huang J, et al. Kuona mienendo ya mtandao wa hypothalamic kwa tabia ya hamu ya kula na kutetemesha. Kiini (2015) 160: 516-27.10.1016 / j.cell.2014.12.026 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
54. O'Connor EC, Kremer Y, Lefort S, Harada M, Pascoli V, Rohner C, et al. Herufi za Accumbal D1R zinazojitokeza kwa hypothalamus ya baadaye idhibisha kulisha. Neuron (2015) 88: 553-64.10.1016 / j.neuron.2015.09.038 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
55. Jennings JH, Rizzi G, Stamatakis AM, Ung RL, Stuber GD. Usanifu wa mzunguko wa inhibitory ya orchestrates ya baadaye ya kulisha. Sayansi (2013) 341: 1517-21.10.1126 / science.1241812 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
56. Stratford TR, Wirtshafter D. Kuhusika kwa baadaye kwa hypothalamic katika kulisha kunukuliwa kutoka kwa uso wa ndani. Euro J Neurosci (2013) 37: 648-53.10.1111 / ejn.12077 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
57. Paille V, Fino E, Du K, Morera-Herreras T, Perez S, Kotaleski JH, et al. Duru za GABAergic zinadhibiti utunzaji wa wakati unaotegemea wa spike. J Neurosci (2013) 33: 9353-63.10.1523 / JNEUROSCI.5796-12.2013 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
58. Fonseca MS, Murakami M, Mainen ZF. Uanzishaji wa dorsal raphe serotonergic neurons inakuza kusubiri lakini sio kuimarisha. Curr Biol (2015) 25: 306-15.10.1016 / j.cub.2014.12.002 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
59. Doya K. Usanidi na neuromodulation. Neural Netw (2002) 15: 495-506.10.1016 / S0893-6080 (02) 00044-8 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
60. Leibowitz SF, Alexander JT. Hypothalamic serotonin katika udhibiti wa tabia ya kula, saizi ya unga, na uzito wa mwili. Biol Psychiatry (1998) 44: 851-64.10.1016 / S0006-3223 (98) 00186-3 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
61. Voigt JP, Fink H. Serotonin anayesimamia kulisha na kuteleza. Behav Brain Res (2015) 277: 14-31.10.1016 / j.bbr.2014.08.065 [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]
62. Brenachot X, Rigault C, Nédélec E, Laderrière A, Khanam T, Gouazé A, et al. Histone acetyltransferase MOF inamsha ugonjwa wa polyothalamic polysialylation kuzuia ugonjwa wa fetma uliosababishwa na panya. Mol Metab (2014) 3: 619-29.10.1016 / j.molmet.2014.05.006 [Makala ya bure ya PMC] [PubMed] [Msalaba wa Msalaba]