Jukumu la ghrelin katika malipo ya chakula: athari ya ghrelin juu ya sucrose binafsi utawala na macholimbic dopamine na acetylcholine receptor jeni expression (2012)

PMCID: PMC3298643

Makala hii imekuwa imetajwa na makala nyingine katika PMC.

Nenda:

abstract

Uamuzi wa kula unaathiriwa sana na sababu zisizo za nyumbani kama vile kupendeza kwa chakula. Kwa kweli, thawabu na thawabu ya chakula inaweza kupuuza ishara za homeostatic, na kusababisha kuongezeka kwa matumizi na kwa hivyo, fetma. Ghrelin, homoni ya orexigenic inayotokana na utumbo, ina jukumu kubwa katika kulisha homeostatic. Hivi karibuni, hata hivyo, imeibuka kama moduli yenye nguvu ya njia ya malipo ya dopaminergic ya mesolimbic, ikipendekeza jukumu la ghrelin katika tuzo ya chakula. Hapa, tulitafuta kujua ikiwa ghrelin na vipokezi vyake ni muhimu kwa kuimarisha motisha kwa thawabu ya sukari ya asili kwa kuchunguza jukumu la kusisimua kwa ghrelin receptor (GHS-R1A) na kuzuia kwa hali ya utendaji wa uwiano wa sucrose, utaratibu unaotumiwa kupima msukumo wa motisha kwa pata tuzo. Ghrelin inayosimamiwa pembezoni na katikati iliongeza zaidi kujibu kwa mwendeshaji na kwa hivyo, motisha ya motisha kwa sucrose. Kutumia mpinzani wa GHS-R1A JMV2959, tulionyesha kwamba kizuizi cha ishara ya GHS-R1A kilipunguza mwendeshaji aliyejibu sucrose. Tulichunguza zaidi athari za ghrelin kwenye nodi kuu za malipo ya mesolimbic, eneo la sehemu ya ndani (VTA) na kiini accumbens (NAcc), kwa kukagua athari za matibabu sugu ya ghrelin ya kati juu ya usemi wa jeni zinazojumuisha vipokezi vikubwa vya wapokeaji wa neurotransmitter, ambayo ni dopamine na acetylcholine. Matibabu ya Ghrelin ilihusishwa na kuongezeka kwa dopamine receptor D5 na asetilikolini receptor nAChRβ2 kujieleza kwa jeni katika VTA na kupungua kwa usemi wa D1, D3, D5 na nAChRcy3 katika NAcc. Takwimu zetu zinaonyesha kuwa ghrelin ina jukumu muhimu katika motisha na uimarishaji wa sucrose na athari kwenye usemi wa dopamine na jeni la usimbuaji wa acetylcholine kwenye mzunguko wa malipo ya mesolimbic. Matokeo haya yanaonyesha kuwa wapinzani wa ghrelin wana uwezo wa matibabu ya matibabu ya fetma na kukandamiza ulaji wa chakula kitamu.

Keywords: Acetylcholine, dopamine, motisha ya chakula, ghrelin, GHS-R1A, hali ya uendeshaji

UTANGULIZI

Inasisitizwa vizuri kwamba homoni inayozunguka ghrelin ina jukumu muhimu katika udhibiti wa usawa wa nishati (Kojima et al. 1999; Nogueira, Tschöp & Zigman 2008). Iliyotolewa hasa na tumbo (Dornonville de la Cour et al. 2001), ghrelin inatia madhara makubwa ya orexigenic katika panya na kwa mwanadamu (Wren et al. 2000, 2001) kupitia kuchochea kwa mfumo wake mkuu wa neva (CNS) receptor (Salomeet al. 2009a), receptor ya homoni ya kukuza (GHS-R1A) (Howard et al. 1996). Kwa hakika, malengo ya ghrelin yanakabiliwa na nyaya za hypothalamic na ubongo zinazohusika katika homeostasis kulisha na nishati (Dickson, Leng & Robinson 1993; Bailey et al. 2000; Hewson & Dickson 2000; Faulconbridge et al. 2003, 2008). Kulisha tabia, hata hivyo, sio tu inayohamasishwa na haja ya uharibifu wa virutubisho (yaani, haja ya kurejesha homeostasis); vyakula vyema vya mafuta na / au sukari vinaweza kuchochea ulaji licha ya hali ya satiety (Zheng et al. 2009). Kuongezeka zaidi kwa kuimarisha asili kama vile sukari ni sababu kuu ya kuendesha ugonjwa wa fetma wa sasa. Inabakia kuamua kama mfumo mkuu wa kugundua ghrelin ni muhimu kwa matumizi yasiyo ya homeostatic sukari, na hivyo kutoa lengo muhimu la matibabu ya kuzuia ulaji wa vyakula vya kalori, vyema vyema na vyema.

Uliongozwa na matokeo ya hivi karibuni ambayo ghrelin inakabiliana na maeneo ya macholi yanayohusika katika kulisha zisizo za homeostatic / reward (Yeremia et al. 2007), tulijitahidi kuchunguza jukumu la ghrelin na receptor yake katika msukumo wa chakula na tabia iliyoongozwa na lengo la kukupatia thawabu. Maeneo haya ya macholimbic kwa muda mrefu imekuwa mwelekeo wa utafiti wa madawa ya kulevya kama ni lengo kuu la madawa ya kulevya wengi (Engel 1977; Koob 1992). Njia ya macho ya ghrelin ya lengo ni pamoja na makadirio ya dopamini kutoka eneo la kijiji cha VCT (VTA) hadi kiini cha kukusanyiko (NAcc) (Yeremia et al. 2006, 2007), njia inayotolewa na madawa ya kulevya na madhara ya asili, ikiwa ni pamoja na chakula (Koob 1992). Kushangaza, GHS-R1A inaonyeshwa kwenye neuroni za dopaminergic (Abizaid et al. 2006), inayoashiria athari za moja kwa moja za ghrelin kwenye mfumo wa VTA dopamine. Takwimu hizi za immunohistochemical zinaongezewa na ushahidi wa tabia na elektroni ya kisaikolojia ya athari ya ghrelin katika VTA. Kwa mfano, usimamizi wa ndani-VTA wa ghrelin huongeza shughuli za VTA dopamine neurons (Abizaid et al. 2006) na huongeza kutolewa kwa dopamini kwenye NAcc (Yeremia et al. 2007). Ghrelin pia huongeza shughuli za kiunga cha cholinergic-dopaminergic, njia muhimu ya thawabu. Kwa kweli, angalau sehemu ya athari za ghrelin kwenye dopamine zinaonekana kupatanishwa na mfumo wa cholinergic (Yeremia et al. 2007).

Ingawa imara kwamba ghrelin ina athari kubwa ya orexigenic wakati chakula kinapatikana kwa urahisi, haijajulikana kama madhara ya orexigenic ya ghrelin yanaweza kupanuliwa ili ni pamoja na kubadilisha motisha na kuimarisha vipengele vya kuimarisha asili kama vile chakula cha kuvutia (yaani kuongezeka kwa unataka, na jitihada / kazi moja ni tayari kuweka katika kutibu tamu). Uhamasishaji na ufanisi wa madawa ya kulevya unaweza kuhesabiwa katika utawala wa kibinafsi, mtindo wa hali ya hewa. Hali ya uendeshaji ni utaratibu mkuu wa uchambuzi wa tabia iliyohamasisha ambayo inapatikana na tabia ya hiari iliyoelekezwa ili kupata thawabu. Kwa kupima kiasi cha kazi somo ambalo linatumia kujipatia tuzo, inatoa kipimo cha thamani cha thamani (Hodos 1961). Mikoa ya Mesolimbic ni muhimu kwa masuala ya kisaikolojia ya tabia ikiwa ni pamoja na kulisha na ni dhahiri kuwa ghrelin huathiri shughuli za neuronal katika mikoa inayofaa ya upasuaji. Kitu ambacho hakijaonyeshwa bado ni athari ya moja kwa moja ya ghrelin juu ya msukumo wa chakula cha sukari. Lengo la msingi la utafiti wetu ni kuchunguza kama mfumo mkuu wa kuashiria ghrelin una jukumu katika hedonic / motisha au imara ya kuimarisha mali ya malipo ya sukari ya juu na kama kukandamiza mfumo huu, kwa kutumia riwaya ya kuchagua GHS-R1A antagonist JMV2959 (Salomeet al. 2009a), inaweza kuzuia msukumo wa kupata pipi. Wapinzani wa GHS-R1A kwa sasa wanapimwa matibabu katika wagonjwa wa kisukari wa 2 kama kukandamizwa kwa dalili za ghrelin kuna athari za manufaa kwenye homeostasis ya glucose (Sun et al. 2006), madhara ambayo pia yanafaidika na ulaji mdogo wa vyakula vya tamu. Machapisho kadhaa ya ushahidi yanaonyesha kwamba neurotransmission ya dopaminergic na cholinergic ina jukumu muhimu katika tabia ya malipo yenye motisha. Kwa hiyo, ili kufafanua zaidi madhara ya ghrelin kwenye mzunguko wa malipo ya kati, tathmini ya athari za matibabu ya ghrelin kwenye dopamini na uelewaji wa jenereta wa jeni la acetylcholine mabadiliko katika nodes muhimu za malipo, VTA na NAcc, baada ya matibabu ya ghrelin.

MBINU

Wanyama

Panya za kiume za Sprague-Dawley (200-250 g, Charles River, Ujerumani) ziliwekwa katika mzunguko wa mwanga wa saa 12 na chow mara kwa mara na maji inapatikana ad libitum, isipokuwa unapoonyeshwa vinginevyo. Taratibu zote za wanyama zilifanywa kwa idhini ya kimaadili na kwa mujibu wa Chuo Kikuu cha Gothenburg Institutional Animal Care na Maagizo ya Kamati ya Matumizi.

Upasuaji

Kwa majaribio ya tabia inayolenga CNS, kanuni ya tatu ya mwongozo wa ventrikali (26 gauge; Plastics One, Roanoke, VA, USA; inaratibu: katikati, 2 mm nyuma ya bregma, na 5.5 mm ventral kwa dura mater, na injector iliyolenga 7.5 mm ventral kwa dura) ilipandikizwa chini ya anesthesia ya isoflurane. Cannulae aliambatanishwa na fuvu na akriliki ya meno na screws za vito na akafungwa na kijiti, kama ilivyoelezewa hapo awali (Skibicka, Alhadeff na Grill 2009). Uwekaji wa cannula kwenye ventricle ya tatu ilikuwa kuthibitishwa wiki moja baada ya upasuaji kwa kipimo cha majibu ya glycemic ya sympathoadrenal kati ya sindano ya kati ya 5-thio-D-glucose [210 μg katika 2 μl ya gari (saline)] (Ritter, Slusser na Jiwe 1981). Katika prototi hii ya uthibitisho wa uwekaji, upungufu wa baada ya kuongezeka kwa asilimia 100 ya ngazi ya msingi ya glucose ya plasma ilihitajika kwa kuingizwa kwa somo. Kwa jaribio la jitihada za jeni, panya zilikuwa za kupimwa na damu (60-75 mg / kg Ketalar na 0.5 mg / kg Domitor ip; Pfizer, Sweden, Orion Co, Finland) na cannula ya muda mrefu ya intracerebroventricular (ICV) (Alzet Brain Infusion Kit II, DURECT Corp, Cupertino, CA, USA) imeingizwa ndani ya ventricle ya utilifu kwa kutumia kuratibu zifuatazo: 0.6 mm posterior kutoka bregma, 1.4 mm mstari kutoka midline, 2.3 ventral kutoka fuvu. Mchanga uliunganishwa kupitia catheter ya polyethilini kwenye minipump ya osmotic (Alzet Mini-Osmotic Pump Model 2002, Durect, Cupertino, kiwango cha mtiririko, 0.5 μl / saa kwa muda wa siku 14) zilizoingizwa chini ya wanyama.

Mfano wa hali ya uendeshaji

Apparatus

Majaribio ya hali ya uendeshaji yalifanyika katika vyumba nane vya hali ya uendeshaji vinavyotengenezwa kwa panya (30.5 × 24.1 × 21.0 cm; Matibabu-Associates, Georgia, VT, USA), ambazo ziliwekwa katika baraza la mawaziri lililopigwa kwa sauti. Kila chumba kilikuwa na sakafu ya gridi ya metali, levers mbili zilizoondolewa na balbu nyeupe za taa juu yao na displeer ya chakula ya pellet ambayo inaweza kutoa pellets ya 45 mg sucrose (GlaxoSmithKline, Diet Test, Richmond, IN, USA) kwenye tray ya chakula. Ukusanyaji wa data na usindikaji ulidhibitiwa na programu ya MED-PC (Medical-Associates, Georgia, VT, USA).

Mafunzo

Utaratibu uliotumiwa kwa hali ya uendeshaji ulibadilishwa kutoka (La Fleur et al. 2007) na (Tracy et al. 2008). Panya zote zilishughulikiwa na tabia kali ya kizuizi cha chakula wakati ambapo uzito wao wa mwili ulipungua kwa kasi kwa 90% kwa kipindi cha wiki moja. Kwa panya za chumvi za ICV, mafunzo ilianza wiki moja baada ya upasuaji. Kabla ya kuwekwa kwenye masanduku ya uendeshaji, panya zilionekana kwenye pellets za sucrose katika mazingira ya ngome ya nyumbani angalau mara mbili. Kisha, panya zilijifunza kuchapisha jitihada za saruji kwa saruji za saruji chini ya ratiba ya FR1 uwiano uliowekwa na vikao viwili kwa siku. Katika FR1, vyombo vya habari moja juu ya lever ya kazi imetoa utoaji wa pelrose pellet moja. Vipande vyote vya FR vilikuwa na dakika ya 30 au mpaka panya zilipata pellets za 100, chochote kilichotokea kwanza. Panya nyingi zilipata pellets za 100 kwa kigezo cha kikao baada ya 10 kwa vikao vya 15. Vyombo vya habari kwenye lever isiyohusika havikuandikwa lakini havikuwepo matokeo. Vikao vya ratiba vya FR1 vilifuatiwa na FR3 na FR5 (yaani vyombo vya habari vitatu na tano kwa pete, kwa mtiririko huo). Tena, kiwango cha chini cha majibu ya 100 kwa kikao kwenye lever ya kazi ilihitajika ili kuendeleza hadi ratiba inayofuata; panya nyingi zilihitajika moja hadi mbili ratiba ya FR3 na FR5 ili kufikia kiwango hiki. Ratiba ya FR5 ilifuatiwa na ratiba ya uwiano (PR) wakati ambapo gharama za malipo zinaongezeka kwa kasi kwa kila malipo zifuatazo ili kutambua kiasi cha kazi panya inayotaka kuifanya ili kupata thawabu. Mahitaji ya kukabiliana yanaongezeka kulingana na usawa wafuatayo: uwiano wa majibu = [5e (0.2 × idadi ya infusion)] - 5 kupitia mfululizo wafuatayo: 1, 2, 4, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50 , 62, 77, 95, 118, 145, 178, 219, 268, 328. Kipindi cha PR kilimalizika wakati panya imeshindwa kupata thawabu ndani ya dakika ya 60. Hatua ya kuvunja ilifafanuliwa kama uwiano wa mwisho uliokamilika kabla ya kikao cha kumalizika. Kujibu ilikuwa kuchukuliwa imara wakati idadi ya pellets ya chakula iliyopatikana kwa kikao haikutofautiana zaidi ya 15% kwa vikao tatu vya mfululizo. Katika hali nyingi, kuitikia imetulia ndani ya vikao vya tano hadi saba. Mtihani wa PR ulifanyika somo / siku moja. Vikao viliendelea, kwa wastani, dakika ya 75, ingawa panya zote zilikaa kwenye masanduku ya kazi hadi dakika ya 120 ili kuruhusu vikao vyote vya mwisho. Panya hizo zilihamishwa kwenye mabwawa ya nyumbani kwa saa moja ya kutosha kwa ulaji wa ulaji wa chow. Mwishoni mwa mafunzo na kabla ya kupima, panya zilirudi ad libitum ratiba ya kulisha.

Design ya majaribio

Panya zote zilipata intraperitoneal (IP) au katika kundi tofauti la panya, sindano ya tatu ya ventricle (tatu ya ICV) mapema katika mzunguko wa mwanga (kwa ajili ya vipimo vya ghrelin) na mwishoni mwa mzunguko wa mwanga wa majaribio ya kupambana na ghrelin masaa 20 kabla ya kuanza ya kupima kwa uendeshaji. Masharti yote yalitenganishwa na masaa ya chini ya 48 na kukimbia kwa njia tofauti (kila panya ilipata hali zote kwa siku tofauti za kupima).

Jaribio la 1: athari ya utawala wa pembeni au wa kati ya ghrelin kwa waendeshaji wa PR kujibu kwa sucrose katika panya

Kwa panya zote, majibu ya kuvuja levu yalifuatiliwa baada ya hali mbili: matibabu ya IP na salini au panya ya ghrelin iliyohifadhiwa (Tocris, Bristol, UK; 0.33 mg / kg uzito wa mwili katika 1 ml / kg). Kipimo cha IP cha ghrelin kilichochaguliwa kimetambuliwa awali ili kushawishi majibu ya kulisha katika panya (Wren et al. 2000) na pia kuhamasisha kutolewa kwa dopamine na shughuli za kupiga simu katika panya (Mtaa wa 2008). Baada ya kupima kwa uendeshaji, panya ziliruhusiwa kupata ufikiaji wa chow, na ulaji wa chow ulipimwa baada ya saa moja. Kisha, katika kundi tofauti la panya, tulipitikia majibu baada ya utoaji wa madawa ya kulevya ya CNS baada ya hali tatu kama ifuatavyo: hali ya kudhibiti na saline ya tatu ya ventricle, 0.5 μg au 1.0 μg ya panya ya ghrelin iliyohifadhiwa (Tocris) kwa kiasi cha 1 μl. Damu zilizochaguliwa za ghrelin zimeonyeshwa hapo awali ili kukuza majibu ya kulisha (Nakazato et al. 2001). Kwa ICV wote na tafiti za ghrelin za IP, majaribio ya kuongezeka kwa lever yalifanyika katika hali iliyopangwa (yaani, wakati ulaji wa chakula utakaendeshwa na mali yenye malipo ya chakula badala ya anatoa homeostatic). Pia, katika masomo mawili, baada ya kupima kwa uendeshaji, panya ziliruhusiwa kupata ufikiaji wa chow, na ulaji wa chow ulipimwa baada ya saa moja.

Jaribio la 2: athari ya pembeni au matibabu ya kati na mhusika wa ghrelin receptor (GHS-R1A) (JMV2959) juu ya msukumo wa motisha kwa panya

Majibu ya uendeshaji wa PR yalifuatiwa baada ya hali tatu kama ifuatavyo: hali ya kudhibiti na salini ya IP, 1 mg / kg au 3 mg / kg ya JMV2959 (AEZS-123, AeternaZentaris GmBH, Frankfurt, Ujerumani). Kipimo cha JMV2959 kilichaguliwa kulingana na Yeremia et al. (2009) Na Egecioglu et al. (2010) na data ya awali, iliyoonyeshwa hapo awali ili kupungua tabia ya kupendekezwa mahali ambapo haipatikani lakini haina athari ya kujitegemea kwenye shughuli za uendeshaji. Baada ya kupima kwa uendeshaji, panya ziliruhusiwa upatikanaji wa bure kwa chow. Kutathmini athari za hatua moja kwa moja ya wapinzani mkuu, katika kundi tofauti la panya, tabia ya uendeshaji ilifuatiliwa baada ya hali tatu zifuatazo: hali ya kudhibiti na sindano ya tatu ya ventricle saline, 5 μg au 10 μg ya JMV2959 kwa kiasi cha 1 μl. Dalili za ICV zilizochaguliwa za dozi za JMV2959 zilizingatia Salomeet al. (2009a) ambayo hatua ya orexigenic ya 1 μg ghrelin-inayomilikiwa ICV ilikuwa imefungwa. Baada ya kupima kwa uendeshaji, panya ziliruhusiwa kupata ufikiaji wa chow na ulaji wa chow ulipimwa baada ya saa moja na pia saa za 24 baada ya sindano ya awali. Mafunzo na mgongano wa GHS-R1A, kinyume na wale waliofanywa na ghrelin (angalia mapema), walifanyika kwenye panya baada ya kizuizi cha saa ya 16 kabla ya sindano ili kuhakikisha viwango vya juu vya ghrelin inayozunguka (endogenous circulation ghrelin (Cummings et al. 2001).

Jaribio la 3: mabadiliko ya ghrelin-yaliyotokana na kujieleza kwa jeni la dopamine-na asidi ya acetylcholine katika VTA na NAcc

Hapa, tuliamua athari za infusion sugu ya ICV ghrelin kwa wiki mbili juu ya usemi wa jeni zilizochaguliwa zinazohusika na usafirishaji wa dopaminergic na cholinergic katika node mbili kuu za njia ya malipo ya mesolimbic, VTA na NAcc. Jeni zilizochaguliwa zinazohusiana na dopamine zilikuwa jeni zinazojumuisha vipokezi vya dopamini (D1A, D2, D3, D5), catechol-O-methyltransferase, tyrosine hydroxylase (katika VTA tu) na monoamine oxidase A. Jeni zinazohusiana na acetylcholine zilikuwa: vikundi vya kipokezi cha nikotini (α3 α6, β2, β3). Jeni tulilochagua kutathmini hapo awali lilikuwa limehusishwa na athari za ghrelin na / au tuzo / tabia ya motisha (Kelley et al. 2002; Figlewicz et al. 2006; Yeremia et al. 2006, 2007; Sibilia et al. 2006; Dalley et al. 2007; Kuzmin et al. 2009; Lee et al. 2009; Nimitvilai & Brodie 2010; Perello et al. 2010). Itifaki ya infusion ya ghrelin / saline ya muda mrefu ilitumiwa kwa kupendekezwa kwa sindano ya papo hapo ili kuongeza nafasi ya kuona athari juu ya kujieleza kwa jeni; zaidi ya hayo, ikiwa ghrelin ni mdhibiti muhimu wa mfumo wa malipo kwa muda mrefu, kukuza chakula cha kutolea na unenevu, athari zake za kudumu kwa kubadilisha njia za malipo muhimu zinaweza kuwa muhimu sana.

Usimamizi wa madawa ya kulevya na dissection ya tishu

Catheter na pampu ya osmotic zilijaa ghrelin ya kibinadamu iliyopendekezwa (zawadi kutoka kwa Rose Pharma, Copenhagen, Denmark) suluhisho (8.3 μg / panya / siku) au suluhisho la gari la saline (0.9% NaCl); kipimo hiki na urefu wa tiba umekuwa umeonyeshwa ili kuathiri kujieleza kwa jeni katika hypothalamus (Salomeet al. 2009b). Siku kumi na nne baada ya kuimarishwa kwa minipumps, panya ziliuawa na kupungua. Ubongo uliondolewa haraka na VTA na NAcc zilikusanywa kwa kutumia tumbo la ubongo (mipaka ya kila mikoa ilitambuliwa kulingana na Paxinos na Watson 1986), waliohifadhiwa katika nitrojeni ya maji na kuhifadhiwa katika -80 ° C kwa uamuzi wa baadaye wa mRNA.

RNA kutengwa na kujieleza kwa mRNA

Sampuli za ubongo za kibinafsi zilifanywa homogenized huko Qiazol (Qiagen, Hilden, Ujerumani) kwa kutumia TissueLyzer (Qiagen). Jumla ya RNA ilitolewa kwa kutumia RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (Qiagen) au RNeasy Micro Kit (Qiagen), zote na matibabu ya ziada ya DNAse (Qiagen). Ubora na idadi ya RNA ilipimwa na vipimo vya spectrophotometric (Nanodrop 1000, Teknolojia za NanoDrop, Wilmington, DE, USA). Kwa usanisi wa cDNA, jumla ya RNA ilibadilishwa ikinunuliwa kwa kutumia hexamers zisizo za kawaida (Applied Biosystems, Sundbyberg, Sweden) na Superscript III reverse transcriptase (Invitrogen Life Technologies, Paisley, Uingereza) kulingana na maelezo ya mtengenezaji. Recombinant RNaseout Ribonuclease Inhibitor (Invitrogen) iliongezwa kuzuia uharibifu wa RNase-mediated. Athari zote za cDNA ziliendeshwa mara tatu. PCR ya usajili wa wakati halisi ilifanywa kwa kutumia jaribio la TaqMan Custom Array. Zilibuniwa na uchunguzi wa TaqMan na seti za vianzio vya jeni lengwa zilizochaguliwa kutoka kwa orodha ya mkondoni (Applied Biosystems). Kila bandari kwenye majukwaa ya TaqMan Array ilipakiwa na cDNA inayolingana na 100 R jumla ya RNA pamoja na maji yasiyo na nuclease na 50 Tal TaqMan Gene Expression Master Mix (Applied Biosystems) kwa ujazo wa 100 µl. Mpangilio wa TaqMan ulichambuliwa kwa kutumia mfumo wa 7900HT na Upandishaji wa TaqMan Array (Applied Biosystems). Hali ya baiskeli ya joto ilikuwa: 50 ° C kwa dakika mbili, 94.5 ° C kwa dakika 10, ikifuatiwa na mizunguko 40 ya 97 ° C kwa sekunde 30 na 59.7 ° C kwa dakika moja.

Maadili ya maonyesho ya Gene yalihesabiwa kulingana na ΔΔCt njia (Livak na Schmittgen 2001), ambapo kundi la kutibiwa kwa salini lilichaguliwa kuwa calibrator. Kwa kifupi, ΔCt inawakilisha mzunguko wa kizingiti (Ct) ya jeni lengo isipokuwa ile ya gene rejea na ΔΔCt inawakilisha ΔCt ya kikundi cha ghrelin kinachotendewa kichafu kuliko cha calibrator. Kiasi kikubwa kiliamua kutekelezwa kwa kiasi cha jamaa = 2-DCt. Kwa sampuli ya calibrator, equation ni kiasi cha jamaa = 2-0, ambayo ni 1; Kwa hiyo, kila sampuli nyingine inaonyeshwa kuhusiana na hii. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase ilitumika kama gene ya kumbukumbu.

Takwimu

Vigezo vyote vya utendaji vimezingatiwa na uchambuzi wa tofauti iliyofuatwa na muda mfupi baada ya Mtihani wa Tukey au t-tenda kama inafaa. Uchambuzi wa takwimu ulifanyika kwa kutumia programu ya Statistica (Tulsa, OK, USA). Ili kuchambua athari za matibabu ya muda mrefu ya ghrelin juu ya kujieleza kwa jeni, t-test ilitumiwa, na P- mahesabu yaliyotumiwa kwa kutumia ΔCt-a maadili. Tofauti zilizingatiwa kuwa muhimu P <0.05. Takwimu zinaonyeshwa kama maana ± SEM.

MATOKEO

Jaribio la 1: athari ya utawala wa pembeni au wa kati ya ghrelin kwa waendeshaji wa PR kujibu kwa sucrose katika panya

Hapa, sisi kutumia dhana kutumika katika madawa ya kulevya utafiti kuchunguza jukumu la ghrelin katika asili asili motisha chakula na kuimarisha mali ya sukari. Hasa, kutambua jukumu la utawala wa pirusi wa pembeni juu ya ufanisi wa malipo ya sucrose, tulichunguza utawala wa kibinafsi katika ratiba ya majibu ya kuendelea katika panya 20 dakika baada ya sindano ya IP ya gari au ghrelin. Hatua zote za tabia ya uendeshaji ziliongezeka kwa kiasi kikubwa kwa panya baada ya sindano ya ghrelin ya pembeni papo hapo.P <0.05 kwa alama zote za wakati), idadi ya vidonge vya sukari vilivyopatikana (P <0.005 kwa vidokezo vya wakati wote) na dakika ya kuvunja dakika 120 (P <0.005, 32.53 ± 3.4 na 41 ± 4.3 kwa gari na ghrelin, mtawaliwa; Kielelezo 1a, b). Fasihi kimsingi inasaidia tovuti kuu ya hatua kwa athari ya orexigenic ya ghrelin. Walakini, GHS-R1A pia imeonyeshwa nje ya CNS kwenye tovuti zinazofaa kwa udhibiti wa ulaji wa chakula, kwa mfano, kwenye ujasiri wa vagus; Kwa hivyo, haiwezi kuzingatiwa kuwa sehemu ya athari zilizozingatiwa za IP ghrelin hupatanishwa na vipokezi vya pembeni. Sindano ya kati ya kiwango cha chini na kipimo cha ghrelin, hata hivyo, huchochea tu CNS GHS-R1A. Kwa hivyo, ili kujua athari ya moja kwa moja ya CNS ya ghrelin juu ya ufanisi wa thawabu ya sucrose, tulifanya utafiti sambamba ambao gari au ghrelin ilisimamiwa na sindano ya tatu ya ventrikali, pia dakika 20 kabla ya dhana inayofanya kazi. Sambamba na tovuti kuu ya nadharia ya athari, sindano kali ya ICV ghrelin kwa panya (kipimo cha 0.5 1.0g na XNUMX µg) iliongeza kwa kiasi kikubwa hatua zote zilizotajwa hapo juu za tabia ya kufanya kazi (Kielelezo 2a, b). Kipindi cha wakati wa majibu ya kazi ya kiti kwenye utafiti wa ICH ghrelin ilibaini kuwa wakati athari iliibuka polepole wakati wa muda wa dakika ya 10 na 30, ilifikia umuhimu saa dakika ya 60 [leti ya kazi: dakika 10 F(2, 24) = 0.94, P = 0.41, dakika 30 F(2, 24) = 3.13, P = 0.06, dakika 60 F(2, 24) = 5.86, P <0.01, dakika 90 F(2, 24) = 6.42, P <0.01, dakika 120 F(2, 24) = 6.03, P <0.01; thawabu zilizopatikana: dakika 10 F(2, 24) = 0.26, P = 0.78, dakika 30 F(2, 24) = 2.76, P = 0.08, dakika 60 F(2, 24) = 8.31, P <0.005, dakika 90 F(2, 24) = 10.16, P <0.001, dakika 120 F(2, 24) = 11.93, P <0.001; na hatua ya kuvunja: F(2, 24) = 7.22, P <0.005 (17.31 ± 1.53, 33.15 ± 5.52, 36 ± 6.95 kwa gari, 0.5 µg na 1.0 µg ghrelin, mtawaliwa)], kozi ya wakati inayolingana na ripoti zingine za latency ya kulisha inayosababishwa na ghrelin wakati inaletwa na njia hii (Faulconbridge et al. 2003). Katika majaribio mawili, shughuli kwenye lever isiyokosawa ilikuwa ndogo na haikutofautiana sana kati ya vikundi vya matibabu tofauti (IP 4.1 ± 1.1, 4.1 ± 1.1 kwa gari na ghrelin, kwa mtiririko huo; ICV 3.9 ± 1.1, 2.1 ± 0.7, 3.5 ± 1.6 kwa gari, 0.5 μg na 1.0 μg ghrelin, kwa mtiririko huo), wakidai kuwa matibabu haina kuzalisha mabadiliko yasiyo ya msingi ya mabadiliko yaliyoelekezwa katika shughuli. Mara baada ya kupima kwa uendeshaji, panya zilirejeshwa kwenye mabwawa yao ya nyumbani na kuruhusu ufikiaji wa bure kwa chow; panya zilizoingizwa na ghrelin, ikiwa zimepewa pembeni (P <0.05) au katikati [F(2, 24) = 12.64, P <0.001], karibu mara mbili ya ulaji wao wa chow wakati wa saa ya kwanza ikilinganishwa na vikundi vilivyotibiwa na gari (Tini 1c & 2c). Kwa mujibu wa data zilizopita (Faulconbridge et al. 2003) kuonyesha kwamba wengi wa athari ya hyperphagic ya papo hapo ghrelin sindano hufanyika ndani ya masaa matatu baada ya sindano, hakuna athari juu ya ulaji wa chow alibainisha katika utafiti wetu saa tatu hadi 24 masaa baada ya ICV utawala wa kipimo cha ghrelin [17.4 ± 1.12, 18.42 ± 1.34, 19.12 ± 1.43 gari, 0.5 μg na 1.0 μg ghrelin, kwa mtiririko huo, F(2, 24) = 2.27, P = 0.13].

Kielelezo 1 

Mzunguko wa ghrelin ya pembeni huongeza msukumo wa kupata chakula kinachofaa katika mfumo wa uwiano wa uwiano wa PR. Idadi ya majibu juu ya lever ya kazi (a) na idadi ya mgongo wa 45 inapatikana (b) imeongezeka kwa kiasi kikubwa na ...
Kielelezo 2 

CNS (ya tatu ICV) utoaji wa ghrelin huongeza thamani ya malipo ya sucrose katika mfumo wa uwiano wa uwiano wa PR. Idadi ya majibu juu ya lever ya kazi (a) na nambari ya mgongo wa 45 hupata tuzo zilizopatikana (b) zinaongezeka sana kwa tatu ...

Jaribio la 2: athari ya pembeni au matibabu ya kati na mhusika wa ghrelin receptor (GHS-R1A) (JMV2959) kwa msukumo wa motisha kwa ajili ya kukupatia malipo katika panya

Kisha, tuliangalia madhara ya kuzuia dawa za dawa za GHS-R1A juu ya ufanisi wa malipo ya malipo. Kwa hiyo, sucrose utawala wa kibinafsi katika ratiba ya majibu ya kuendelea ilizingatiwa katika panya za mara moja za chakula ili kuhakikisha kiwango cha juu cha mzunguko wa ghrelin wa muda mrefu wa 20 baada ya sindano ya gari ya 1 mg / kg au 3 mg / kg ya JMV2959, GHS -R1A mpinzani. Hatua zote za tabia ya uendeshaji zilipungua sana katika panya baada ya sindano ya pembeni ya JMV2959 [leti ya kazi: dakika tano F(2, 24) = 11.53 P <0.0005, dakika 120 F(2, 24) = 11.27, P <0.001; thawabu zilizopatikana: dakika tano F(2, 24) = 23.39 P <0.0005, dakika 120 F(2, 24) = 9.26, P <0.001 na sehemu ya mapumziko saa 120: F(2, 24) = 5.98, P <0.01 (45.31 ± 6.45, 42.08 ± 5.80, 30.0 ± 5.89 kwa gari, 1 mg / kg na 3 mg / kg JMV2959, mtawaliwa)]. Chapisha chapisho uchambuzi umebaini kuwa athari kuu iliendeshwa na kipimo cha 3 mg / kilo (Kielelezo 3a, b). Kuamua jukumu la receptor ya kati ya ghrelin katika kufanikisha ufanisi wa malipo, utafiti huo ulifanyika kwa gari ambalo JMV2959 (5 μg au 10 μg) ilitumiwa kwa dakika ya tatu ya 20 kabla ya vipimo vya operesheni. Hatua zote zilizotaja hapo juu za tabia ya uendeshaji zilipungua sana katika panya baada ya infusion ya tatu ya ventricle ya vipimo vyote vya JMV2959 (Kielelezo 4a, b). Matokeo yaliyotajwa mara moja kama muda mfupi baada ya Uchunguzi umebaini tofauti kubwa kati ya vikundi vya matibabu tu baada ya dakika ya 10 ya shughuli katika chumba cha operesheni ambacho kimechukuliwa wakati wote wa kupima [lever ya kazi: dakika 10 F(2, 24) = 10.16, P <0.0005, dakika 30 F(2, 24) = 11.48, P <0.0005, dakika 60 F(2, 24) = 9.11, P <0.001, dakika 90 F(2, 24) = 8.30, P <0.001, dakika 120 F(2, 24) = 4.95, P <0.05; thawabu zilizopatikana: dakika 10 F(2, 24) = 21.23, P <0.0001, dakika 30 F(2, 24) = 25.08, P <0.0001, dakika 60 F(2, 24) = 19.24, P <0.0001, dakika 90 F(2, 24) = 20.04, P <0.0001, dakika 120 F(2, 24) = 5.44, P <0.01; na hatua ya kuvunja: F(2, 24) = 3.78, P <0.05 (51.4 ± 8.58, 38.13 ± 5.07, 33.67 ± 5.21 kwa gari, 5 µg na 10 µg JMV2959, mtawaliwa)].

Kielelezo 3 

Utoaji wa pembeni wa mpinzani wa ghrelin receptor, JMV2959. hupunguza msukumo kupata chakula kinachofaa katika mfumo wa uwiano wa uwiano wa PR. Idadi ya majibu juu ya lever ya kazi (a) na idadi ya mgongo wa 45 hupata malipo ...
Kielelezo 4 

Uzuiaji wa kati wa GHS-R1A na JMV2959 hupunguza msukumo wa kupata malipo ya chakula katika mfumo wa uwiano wa uwiano wa PR. Idadi ya majibu juu ya lever ya kazi (a) na idadi ya mgongo wa 45 inapatikana (b) imepungua kwa kiasi kikubwa ...

Kama ilivyotarajiwa (Hodos 1961; Jewett et al. 1995), katika makundi yote ya matibabu, ikiwa ni pamoja na njia za uendeshaji wa IP na ICV, athari za kunyimwa kwa chakula kwa majibu ya operesheni ya sucrose yalionekana (Tini 3a & 4a) na inatofautiana na yale yaliyotajwa katika hali ya satiated (Tini 1a & 2a). Shughuli kwenye lever isiyoathirika ilikuwa ndogo (IP 9.6 ± 3.0, 6.8 ± 2.2, 5.6 ± 1.9 kwa gari na 1 mg / kg au 3 mg / kg JMV2959; ICV 6.4 ± 1.3, 4.6 ± 1.3, 4.4 ± 1.7 kwa gari, 5 μg na 10 μg ya JMV2959, kwa mtiririko huo) na kama ilisimamiwa pembeni au katikati, JMV2959 haikuwa na athari kubwa katika shughuli hiyo (shughuli hii haikutofautiana sana kati ya vikundi vya matibabu tofauti). Kwa uchunguzi wa ICV, mara baada ya kupima kwa uendeshaji, panya zilirejeshwa kwenye mabwawa yao ya nyumbani na kuruhusu upatikanaji wa bure wa chow; kwa kushangaza, hakuna athari juu ya ulaji wa chow ulibainishwa kwa saa moja (Kielelezo 4c) au saa ya muda wa saa 24 (data hauonyeshwa). Hii inaweza kuonyesha kuwa wakati ghrelin ishara inavyotakiwa kwa msukumo wa chakula unaopunguzwa, haifai kwa ajili ya kulisha bure iliyotolewa na masaa ya 16 kunyimwa kwa chakula kwa sababu ya njia nyingine za kupunguzwa zilizofanywa wakati wa kunyimwa. Vipimo vyote vya kulisha bure vilifanyika baada ya dakika 140 baada ya kuambukizwa kwa madawa ya kulevya na hivyo hatuwezi kuacha kuwa ukosefu wa athari ni sehemu kutokana na kuosha nje ya madawa ya kulevya.

Jaribio la 3: mabadiliko ya ghrelin-yaliyotokana na kujieleza kwa jeni la dopamine-na asidi ya acetylcholine katika VTA na NAcc

Katika somo la sasa, tulitambua pia kama jeni zinazohusiana na dopamine na acetylcholine zimebadilishwa na ghrelin katika nodes muhimu za macholi, VTA na NAcc, kwa kuchunguza madhara ya matibabu ya muda mrefu ya ghrelin juu ya maonyesho ya vipokezi vya dopamine na vipimo vya enzymes vinavyohusika katika uzalishaji wa dopamini na kimetaboliki, katika dhana iliyoanzishwa ili kuzalisha mabadiliko ya ghrelin yanayohusiana na jeni katika hypothalamus (Salomeet al. 2009b). Katika VTA receptor receptor D5 na receptor nicotinic acetylcholine (NAChRβ2) alikuwa na kuongeza mRNA kujieleza katika panya kutibu ghrelin ikilinganishwa na salini-kutibiwa kundi (Kielelezo 5a). Katika NAcc, kulikuwa na kupungua kwa mRNA kujieleza ya jeni encoding dopamine receptors D1A, D3 na D5 na pia receptor nicotinic acetylcholine NAChRα3 katika panya kutibu ghrelin ikilinganishwa na saline-kutibiwa kundi (Kielelezo 5b).

Kielelezo 5 

Dopamine na acetylcholine inayohusishwa na jeni katika VTA (a) na NAcc (b) baada ya ghrelin ya muda mrefu ya ICV au matibabu ya gari. Takwimu zinawakilisha maana ya mabadiliko ya karibu kuhusiana na tiba ya salini. D1, dopamine D1 receptor; D2 dopamine D2 receptor; D3, dopamine ...

FUNGA

Hapa, tunatoa jukumu la mfumo wa kugundua ghrelin katika uhamisho wa motisha ya motisha na kuimarisha mali ya malipo ya sucrose na kuonyesha athari ya matibabu ya muda mrefu ya ghrelin juu ya kujieleza kwa jeni ya receptors ya dopaminergic na cholinergic katika vitu muhimu vya upatikanaji wa macho. Matokeo yanaonyesha kuwa utoaji wa ghrelin kuu na wa pembeni huongeza kiasi cha kazi mnyama anayependa kufanya ili kupata thawabu ya sucrose. Zaidi ya hayo, utaratibu wa utaratibu au wa kati wa receptor ya ghrelin imekwisha kufanyiwa kazi ya kukabiliana na sucrose. Kwa hiyo, tunaweza kuwa na dalili ya ghrelin ya kudumu ni muhimu kwa motisha ya motisha kwa tuzo ya sucrose. Matokeo yetu yanahusiana na hypothesis kwamba jukumu muhimu la mfumo wa kugundua ghrelin ni kuongeza thamani ya motisha ya malipo, ikiwa ni pamoja na chakula. Kutokana na kwamba kizuizi cha chakula huongeza thamani ya malipo ya sucrose (Hodos 1961; Jewett et al. 1995) na viwango vya ghrelin vinainua wakati wa kizuizi cha chakula cha muda mfupi (Gualillo et al. 2002), inawezekana kwamba wakati wa hali ya chakula kizuizi / kunyimwa, ghrelin ni moja ya sababu zinazochangia ambazo huongeza thamani ya malipo ya motisha / chakula cha motisha. Kwa kweli, vidonge vya ghrelin vya pembeni viliongeza tabia ya uendeshaji kwa kiwango sawa na kile kilichopatikana katika panya zilizopwa na chakula, na kinyume chake, blockade ya ghrelin ishara ilipungua tabia ya uendeshaji kwa viwango vilivyotajwa katika panya zisizopunguzwa.

Sasa inaonekana wazi kuwa uwezekano wa kuongeza ulaji wa chakula unasababishwa na dysregulation ya mifumo ya kati ya malipo ya chakula, ikiwa ni pamoja na mambo ya hedonic na motisha. Kama kulisha bure na uhamasishaji wa kipaumbele huonekana kuwa matukio mawili yanayotengwa na tofauti za kudhibiti substrates za neuroanatomical (Salamone et al. 1991), ni muhimu kuchunguza wote wakati wa kutathmini jukumu la mawakala wanaohusika katika tabia ya kulisha. Athari zenye nguvu za orexigenic za Ghrelin zimesomwa sana katika modeli za ufikiaji wa bure ambazo itakuwa ngumu kutofautisha kati ya jukumu lake katika kurudisha virutubisho dhidi ya kulisha kwa motisha. Katika utafiti wa sasa, tuligundua kuwa ligs za GHS-R1A zinaingiliana na motisha ya thawabu ya sucrose, kwa kutumia mfano wa majaribio ambao umetumika katika hali zingine kuonyesha kutaka na motisha ya dawa za kulevya za dhuluma. Kuongezeka kwa tabia iliyochochewa ni kawaida kwa dawa zote za kemikali na kizuizi cha kalori na labda inahusisha kuingiliana kwa mifumo ya neurobiological. Katika utafiti wa sasa, tuligundua pia ongezeko linalosababishwa na ghrelin katika kulisha bure chakula cha chow kawaida katika wanyama wale wale ambao walitumia sana kazi zaidi ya chakula katika chumba cha waendeshaji. Kwa hivyo, data yetu, iliyochukuliwa pamoja na ripoti za mapema za athari za ghrelin katika modeli za kulisha bure (Wren et al. 2000), zinaonyesha kwamba ghrelin ina uwezo wa kuimarisha ulaji bure wote pamoja na motisha ya kulisha.

Kwa kuwa ghrelin receptor GHS-R1A iko katika hypothalamic muhimu, hindbrain na maeneo ya macholimbic zinazohusika katika usawa wa nishati na malipo (Zigman et al. 2006) na sindano kuu ya ventricular ya GHS-R1A ligands inawezekana kupata upatikanaji mkubwa wa maeneo haya ya CNS, kunaweza kuwa na substrates kadhaa za neuroanatomical zinazofaa kwa athari za msamaha wa malipo ya ghrelin iliyoonyeshwa hapa. Inaonekana inawezekana kuwa ghrelin hufanya moja kwa moja kwenye maeneo muhimu ya macho kama ghrelin inaleta VTA dopamine neurons (Abizaid et al. 2006) na utawala wa moja kwa moja wa ghrelin kwa VTA huongeza kutolewa kwa dopamine (Yeremia et al. 2007). Kulingana na hili, tumebainisha madhara ya grarelin ya intra-VTA ili kuongeza matumizi ya chakula chawadi / cha kuvutia katika fadhili za kulisha chaguo huru na pia kwamba vidonda vya VTA vilivyokuwa vyema vya kuchunguza vyema vya chakula (Egecioglu et al. 2010). NAcc inaweza pia kuwa lengo moja kwa moja kwa ghrelin katika kuimarisha mambo ya motisha ya ulaji wa chakula; wakati injected moja kwa moja katika eneo hili, ghrelin induces majibu ya kulisha (Naleid et al. 2005), ingawa kuwepo kwa GHS-R1A katika eneo hili katika panya hakuelezewa na wachunguzi wengine (Zigman et al. 2006) na hivyo, inahitaji ufafanuzi zaidi.

Kwa kuzingatia, pamoja na jukumu muhimu katika tabia zilizohamasishwa, jeni kadhaa ndani ya mfumo wa dopamine zilibadilishwa na matibabu ya kati ya ghrelin. Takwimu hizi huinua uwezekano kwamba udhibiti wa dopamini recepor kujieleza ni utaratibu wa muda mrefu kupitia ambayo ghrelin athari juu ya malipo kuhusiana na kazi na ishara. Tathmini ya receptors ya dopamini siyo muhimu tu katika tovuti ya kutolewa kama vile NAcc lakini pia katika VTA kama sababu ya dendamic kutolewa dopamine (Cragg & Greenfield 1997), inawezekana kwamba inafanya kazi ndani ya nchi ili kushawishi tabia za kuhamasisha malipo. Hapa, tumeona kuongezeka kwa kujieleza kwa D5 katika VTA baada ya matibabu ya ghrelin. Dopamine D5 receptors zipo kwenye miili ya seli ya neurons ya VP dopaminergic (Ciliax et al. 2000) na shughuli zao zinahitajika ili kurejesha shughuli za VTA dopamine neuron baada ya kipindi cha desensitization (Nimitvilai & Brodie 2010). Katika NAcc, tumeona uelewa uliopungua wa D1. Kwa kweli, kujieleza kupunguzwa kwa mpokeaji huu hivi karibuni umeonyeshwa katika kikovu cha NAcc kinachoweza kukabiliwa na fetma lakini sio panya ya kupindukia fetma kwenye chakula cha juu cha mafuta kinachoonyesha jukumu lake la uwezo katika NAcc katika fetma na uingizaji mkubwa (Alsio et al. 2010). Pia, maneno ya jeni encoding D3 yamepunguzwa na ghrelin, upatikanaji wa maslahi fulani kutokana na upungufu wa upatikanaji wa receptors wa D2 / D3 katika watumiaji wa panya na watumiaji wa madawa ya kulevya yanahusiana na kuongezeka kwa msukumo (Dalley et al. 2007; Lee et al. 2009). Kushangaza, hatukuona mabadiliko yoyote muhimu katika enzymes zinazohusika katika awali au uzalishaji wa dopamine.

Jukumu muhimu la mfumo wa acetylcholine kwa ajili ya malipo ya madawa ya kulevya na chakula ni vizuri kumbukumbu; hapa, tunaonyesha kwamba tiba ya ghrelin ilihusishwa na mabadiliko katika kujieleza kwa jeni kuunganisha subunits kadhaa za acetylcholine receptors, kutoa njia nyingine ambayo ghrelin inaweza uwezekano wa kubadilisha kazi ya malipo. Ghrelin inaweza kudhibiti neurons ya VTA ya dopaminergic moja kwa moja kupitia hatua yake kwenye neurons ya cholinergic katika eneo la laterodorsal tegmental (LDTg), eneo la tajiri katika GHS-R1A, ambayo ni muhimu kwa malipo ya pombe yanayohusiana na kupima cholinergic kwa mfumo wa VP dopamine. Kwa kweli, hapo awali, tulionyesha kwamba sindano ya ghrelin ya nchi mbili katika LDTg katika panya inasisitiza kutolewa kwa dopamine kwa namna inayopendana na cholinergic (Yeremia et al. 2007, 2008) na huongeza matumizi ya pombe kwa uhuru wa kunywa (pombe / maji)Yeremia et al. 2009). Kwa kweli, uchunguzi wa hivi karibuni umesababisha kiungo cha malipo cha cholinergic-dopamineric katika malipo ya chakula (Dickson et al. 2010). Mwingine uwezekano wa kuvutia ni kwamba ghrelin inaweza kuimarisha alama ya kiini katika VTA kupitia upregulation wa receptors cholinergic. Kwa hakika, data yetu ya sasa ya maelekezo ya jeni inaonekana kusaidia kwamba utaratibu kama VTA nAChRβ2 mRNA ngazi iliongezeka katika panya za kutibu ghrelin.

Kazi za necconi za KC nacc ya acetylcholine katika NAcc, kwa upande mwingine, zimekuwa na utata zaidi na baadhi ya ripoti zinazoonyesha jukumu la acetylcholine katika kuongeza tabia za mshahara (Pratt & Kelley 2005; Pratt & Blackstone 2009) lakini wengine wanaonyesha kuwa Ach katika NAcc anaweza kutenda ili kuzuia kulisha na kushiriki katika utaratibu wa satiety (Helm et al. 2003; Hoebel et al. 2007). Kwa kweli, matokeo yetu yanaonekana kuwa sawa na yale ya mwisho kwani matibabu ya ghrelin ilihusishwa na usemi uliopungua wa moja ya vikundi vya receptor vya nikotini, nAChRcy3. Ni muhimu kutambua kuwa masomo ya usemi wa jeni, wakati ni muhimu sana kuonyesha malengo ya chini ya ghrelin, pendekeza tu aina ya uhusiano (upregulation au upungufu wa sheria) unaohitajika kwa usemi wa jibu la orexigenic- / ujira wa ujira lakini usiifafanue kwani itakuwa ngumu kujitenga moja kwa moja na mabadiliko ya fidia. Kwa hivyo, masomo yetu ya usemi wa jeni yanaonyesha unganisho na hutoa jukwaa la masomo ya baadaye ya maumbile na ya kifamasia kuamua jukumu la jeni hizo katika athari za ghrelin juu ya kulisha bure na kwa motisha.

Ingawa eneo la hypothalamic na ubongo linaweza kuchangia kwenye kulisha homeostatic, hatuwezi kuachana na jukumu la moja kwa moja kwa mifumo ya hypothalamic na / au ubongo wa mchanganyiko katika nia ya malipo ya chakula ya ghrelin. Hakika, mradi wa neurons wa orexinergic kutoka hypothalamus ya kimaumbile kwa mzunguko wa malipo ya macho ikiwa ni pamoja na VTA na NAcc (Toshinai et al. 2003; Harris et al. 2005; Perello et al. 2010). Neuropeptide Y (NPY) / neurons ya AgRP ya kiini cha arcuate, lengo lingine kwa ligands GHS-R1A (Dickson na Luckman 1997; Keen-Rhinehart na Bartness 2007a,b), pia inaweza kuwa na jukumu muhimu. NPY imeonyeshwa kuongeza ufanisi wa malipo ya chow pamoja na sucrose (Brown, Fletcher na Coscina 1998), wakati AgRP inaonekana kuongeza ufanisi wa malipo ya chakula cha juu cha mafuta tu (Tracy et al. 2008). Ghrelin inaonekana kuwa na jukumu katika malipo ya sucrose (utafiti wa sasa) na katika malipo ya juu ya mafuta (Perello et al. 2010); hata hivyo, umuhimu wa jamaa wa neurons wa NPY / AgRP kwa madhara haya ya ghrelin bado yanaeleweka. Kwa muhtasari, ghrelin ina mali ya motisha ya chakula inayozunguka vipengele vya lishe na inaathiri zaidi maeneo kadhaa ya ubongo ili kuunganisha majibu ya tabia ya kuratibu ili kukuza kulisha.

Ingawa ghrelin usafiri ndani ya ubongo ni mdogo (Mabenki et al. 2002), ghrelin ya pembeni inaonekana kufikia na kufikia maeneo kama vile hippocampus (Diano et al. 2006) na VTA (Mtaa wa 2008). Ingawa bado kuna mjadala juu ya umuhimu wa neva ya vagus kama njia isiyo ya moja kwa moja ya athari kuu za ghrelin (Dornonville de la Cour et al. 2005; tarehe et al. 2002; Arnold et al. 2006), hatua moja kwa moja ndani ya CNS inaonekana inawezekana kama matokeo ya ghrelin ya pembeni kwenye ulaji wa chakula inaweza kuondokana na utawala wa intra-VTA wa wapinzani wa ghrelin (Abizaid et al. 2006). Ghrelin huzalishwa ndani ya ubongo (Cowley et al. 2003), ingawa inabakia kuamua jinsi hii inavyoelekezwa na ikiwa ghrelin inayotokana na ubongo hutoa ishara muhimu inayozalishwa kwa ulaji wa chakula na kwa msukumo wa kula. Inachukuliwa pamoja na ukweli kwamba ghrelin receptor GHS-R1A ni kivitendo kazi (yaani ina shughuli katika ukosefu wa ghrelin ligand) (Holst et al. 2003), swali linatokea kama mzunguko wa ghrelin hutoa ishara ya ubongo-ubongo inayofaa kwa ajili ya kuhamasisha chakula. Matokeo ya uchunguzi wa sasa, kuonyesha athari sawa na kazi ya malipo ya saruji zinaweza kupatikana kupitia utawala wa kati na wa pembeni wa ligand za GHS-R1A, zinaweza kuonyesha kwamba wote wawili walioachiliwa katikati pamoja na ghrelin iliyotolewa kwa njia inayoweza kuathiri nia ya chakula.

Kwa kumalizia, data yetu mpya inatoa ushahidi mpya kwamba kuashiria ghrelin ni muhimu kwa msukumo wa kupata thawabu ya sucrose na athari kwa densi ya dopaminergic na cholinergic katika njia ya malipo ya mesolimbic. Matokeo yetu yanahamasisha maswali muhimu kuhusu jukumu la ghrelin endogenous katika kuamua dhamana ya motisha kwa thawabu za asili kama sukari, tabia ya kawaida ya hamu na katika ugonjwa wa ugonjwa wa shida ya kula na fetma. Ingawa kazi muhimu inabaki kuelezea kwa sababu mabadiliko ya Masi katika mfumo wa dopamine na acetylcholine kuathiri ghrelin kwenye thawabu, data zetu zinaweza kuonyesha utaratibu wa riwaya ambao ghrelin inaathiri tabia ya malipo. Kuelewa jukumu la ghrelin katika michakato ya thawabu ni muhimu kwa uelewa wa neurobiology inayoingiliana ya shida za kula na ulevi wa dawa za kemikali na hutoa njia nzuri ya kuelewa etiolojia ya magonjwa haya na kwa maendeleo ya tiba mpya. Mwishowe, uwezekano wa kukandamiza ulaji wenye shida wa vyakula vitamu vitamu kwa kutumia wapinzani wa GHS-R1A inaweza kuwa na umuhimu wa kliniki na matibabu kwa athari zinazojitokeza za misombo kama hiyo ya kudhibiti sukari ya damu (Sun et al. 2006) kwa wagonjwa wa kisukari wa 2 (Esler et al. 2007).

Shukrani

Utafiti ulioungwa mkono na Baraza la Utafiti wa Kiswidi la Madawa (VR 2006-5663; 2009-S266), Umoja wa Ulaya Framework 7th (FP7-HEALTH-2009-241592; FP7-KBBE-2009-3-245009), ALF Göteborg (SU7601), Taasisi ya Kiswidi na Foundation Swedish kwa ajili ya Utafiti Mkakati kwa Sahlgrenska Kituo cha Utafiti wa Mishipa na Mabofuliki (A305-188). Tungependa pia kumshukuru Dk Daniel Perrissoud (AeternaZentaris, GmBH, Ujerumani) kwa kutoa mshtakiwa wa GHS-R1A JMV2959 na Anders Friberg kwa msaada wa kuwasilisha.

Waandishi wa Mchango

KPS imeanzishwa, imeundwa, imefanywa na kuchambuliwa masomo yote ya tabia. CH ilifanya na kuchambua tafiti zote za kujieleza majini. EE ilichangia kuanzishwa kwa utafiti. SLD alikuwa mwandishi mwandamizi, na alitoa usimamizi na msaada wa kifedha kwa masomo yote. Hati hiyo iliundwa na KPS na SLD, waandishi wote walichangia kwenye maandiko ya mwisho.

Marejeo

  • Abizaid A, Liu ZW, Andrews ZB, Shanabrough M, Borok E, Elsworth JD, Roth RH, Sleeman MW, Picciotto MR, Tschop MH, Gao XB, Horvath TL. Ghrelin huimarisha shirika na shughuli za pembejeo za pembejeo za midbrain ya dopamine neurons wakati wa kukuza hamu ya kula. J Clin Invest. 2006; 116: 3229-3239. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Alsio J, Olszewski PK, Norback AH, Gunnarsson ZE, Levine AS, Pickering C, Schioth HB. Dopamine D1 receptor gene kujieleza hupungua katika kiini accumbens juu ya mfiduo wa muda mrefu kwa chakula kuvutia na hutofautiana kulingana na lishe-ikiwa fetma phenotype katika panya. Neuroscience. 2010; 171: 779-787. [PubMed]
  • Arnold M, Mura A, Langhans W, Geary N. Gut Mahusiano ya vaginal sio lazima kwa athari ya kuchochea ya Ghrelin inakabiliwa na intraperitoneally katika panya. J Neurosci. 2006; 26: 11052-11060. [PubMed]
  • Bailey ART, Von Englehardt N, Leng G, Smith RG, Dickson SL. Sekta ya ukuaji wa siri ya homoni ya activation ya kiini kikubwa na ubongo hutokea kwa njia isiyo ya noradrenergic. J Neuroendocrinol. 2000; 12: 191-197. [PubMed]
  • Benki ya WA, Tschop M, Robinson SM, ML Heiman. Kiwango na mwelekeo wa usafiri wa ghrelin kwenye kizuizi cha damu-ubongo huthibitishwa na muundo wake wa kipekee wa msingi. J Pharmacol Exp Ther. 2002; 302: 822-827. [PubMed]
  • Brown CM, Fletcher PJ, Coscina DV. Neuropeptide Y-induced operesheni kukabiliana na sucrose si mediated na dopamine. Peptides. 1998; 19: 1667-1673. [PubMed]
  • Ciliax BJ, Nash N, Heilman C, Sunahara R, Hartney A, Tiberi M, Rye DB, Caron MG, Niznik HB, Levey AI. Dopamine D (5) immunolocalization katika panya na tumbili ubongo. Sambamba. 2000; 37: 125-145. [PubMed]
  • Cowley MA, Smith RG, Diano S, Tschop M, Pronchuk N, Grove KL, Strasburger CJ, Bidlingmaier M, Esterman M, ML Heiman, Garcia-Segura LM, Nillni EA, Mendez P, Low MJ, Sotonyi P, Friedman JM, Liu HY, Pinto S, Colmers WF, Cone RD, Horvath TL. Usambazaji na utaratibu wa utekelezaji wa ghrelin katika CNS unaonyesha mzunguko mpya wa mzunguko wa kudhibiti nishati ya nyumbani. Neuron. 2003; 37: 649-661. [PubMed]
  • Cragg SJ, Greenfield SA. Udhibiti wa autoreceptor tofauti wa somatodendritic na axon terminal dopamine kutolewa katika substantia nigra, eneo ventral tegmental, na striatum. J Neurosci. 1997; 17: 5738-5746. [PubMed]
  • Cummings DE, Purnell JQ, Frayo RS, Schmidova K, Wisse BE, Weka DS. Kupanda kwa preprandial katika ngazi ya plasma ghrelin unaonyesha jukumu katika kuanzisha chakula kwa binadamu. Kisukari. 2001; 50: 1714-1719. [PubMed]
  • Dalley JW, Fryer TD, Brichard L, Robinson ES, Theobald DE, Laane K, Pena Y, Murphy ER, Shah Y, Probst K, Abakumova I, Aigbirhio FI, Richards HK, Hong Y, Baron JC, Everitt BJ, Robbins TW . Nucleus accumbens D2 / 3 receptors kutabiri impulsivity sifa na cocaine kuimarisha. Sayansi. 2007; 315: 1267-1270. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Tarehe Y, Murakami N, Toshinai K, Matsukura S, Niijima A, Matsuo H, Kangawa K, Nakazato M. Jukumu la ujasiri wa vaginal ya gastric katika ugonjwa wa ghrelin unaosababishwa na kulisha na ukuaji wa homoni katika panya. Gastroenterology. 2002; 123: 1120-1128. [PubMed]
  • Diano S, Farr SA, Benoit SC, McNay EC, da Silva I, Horvath B, Gaskin FS, Nonaka N, Jaeger LB, Benki WA, Morley JE, Pinto S, Sherwin RS, Xu L, Yamada KA, Sleeman MW, Tschop MH, Horvath TL. Ghrelin udhibiti wa hippocampal mgongo synapse wiani na utendaji kumbukumbu. Hali ya neuroscience. 2006; 9: 381-388. [PubMed]
  • Dickson SL, Hrabovszky E, Hansson C, Jerjeria E, Alvarez-Crespo M, Skibicka KP, Molnar CS, Liposits Z, Engel JA, Egecioglu E. Kuzuia kati ya nikotini acetylcholine receptor inalenga ghrelin-induced ulaji wa vyakula katika panya. Neuroscience. 2010; 171: 1180-1186. [PubMed]
  • Dickson SL, Leng G, Robinson ICAF. Usimamizi wa utaratibu wa peptidi ya ukuaji wa homoni ya ukuaji hufanya neurons za hypothalamic. Neuroscience. 1993; 53: 303-306. [PubMed]
  • Dickson SL, Luckman SM. Utoaji wa asidi c-fos mjumbe ribonucleic katika neuropeptide Y na homoni ya ukuaji (GH) - hutoa kichocheo cha kipengele katika pembe iliyokimbia kiini baada ya sindano ya mfumo wa siri ya GH, ya GH-ikitoa peptide-6. Endocrinology. 1997; 138: 771-777. [PubMed]
  • CD ya Dornonville de la Cour, Björkqvist M, Sandvik AK, Bakke I, Zhao CM, Chen D, Håkanson R. Vipimo vya seli kama vile ghrelin na hazifanyi kazi chini ya kudhibiti gastrin. Regul Pept. 2001; 99: 141-150. [PubMed]
  • Dornonville de la Cour CD, Lindqvist A, Egecioglu E, Tung YCL, Surve V, Ohlsson C, Jansson JO, Erlanson-Albertsson C, Dickson SL, Hakanson R. Ghrelin tiba inaruhusu kupunguzwa kwa uzito na mafuta ya mwili katika panya iliyosawazishwa. Gut. 2005; 54: 907-913. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Egecioglu E, Jerjeria E, Skibicka S, Salomé N, Haage D, Bohlooly YM, Andersson D, Bjursell M, Perrissoud D, Engel JA, Dickson SL. Ghrelin huongeza ulaji wa chakula kinachofaa katika panya. Addict Biol. 2010; 15: 304-311. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Engel JA. Maendeleo ya hivi karibuni katika Utafiti wa Ulevivu (Excerpta Medica International Congress Series) Amsterdam: Excerta Medica; 1977. Mambo ya neurochemical ya europhoria yaliyotokana na dawa za kutegemea; pp. 16-22.
  • Esler WP, Rudolph J, Claus TH, Tang WF, Barucci N, Brown SE, Bullock W, Daly M, DeCarr L, Li YX, Milardo L, Molstad D, Zhu J, Gardell SJ, Livingston JN, Sweet LJ. Wapiganaji wa ghrelin receptor wadogo molekuli hupunguza uvumilivu wa glucose, kuzuia hamu ya chakula, na kukuza kupoteza uzito. Endocrinology. 2007; 148: 5175-5185. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Cummings DE, Kaplan JM, Grill HJ. Madhara ya hyperphag ya utawala wa ghrelin ya ubongo. Kisukari. 2003; 52: 2260-2265. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Grill HJ, Kaplan JM, Daniels D. Caudal ya utoaji wa akili ya ghrelin inasababisha fos kujieleza katika-kiini cha njia ya faragha, lakini si katika arcuate au paraventricular nuclei ya hypothalamus. Resin ya ubongo. 2008; 1218: 151-157. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Figlewicz DP, Bennett JL, Naleid AM, Davis C, Grimm JW. Intraventricular insulini na leptini hupunguza sucrose binafsi utawala katika panya. Physiol Behav. 2006; 89: 611-616. [PubMed]
  • Gualillo O, Caminos JE, Nogueiras R, Seoane LM, Arvat E, Ghigo E, Casanueva FF, Dieguez C. Athari ya kizuizi cha chakula kwenye ghrelin katika panya za kawaida za baiskeli na wakati wa ujauzito. Obes Res. 2002; 10: 682-687. [PubMed]
  • Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Jukumu la neurons ya orexin ya hypothalamic katika kutafuta kutafuta. Hali. 2005; 437: 556-559. [PubMed]
  • Helm KA, Rada P, Hoebel BG. Cholecystokinin pamoja na serotonini katika mipaka ya hypothalamus hukusanya kutolewa kwa dopamine huku kuongezeka kwa acetylcholine: utaratibu uwezekano wa satiation. Resin ya ubongo. 2003; 963: 290-297. [PubMed]
  • Hewson AK, Dickson SL. Usimamizi wa utaratibu wa ghrelin inasababisha protini za Fos na Egr-1 katika kiini cha hypothalamic kijivu cha panya zilizochwa na kulishwa. J Neuroendocrinol. 2000; 12: 1047-1049. [PubMed]
  • Uwiano wa Hodos W. Maendeleo kama kipimo cha nguvu za malipo. Sayansi. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
  • Hoebel BG, Avena NM, Rada P. Accumbens dopamine-acetylcholine usawa katika mbinu na kuepuka. Curr Opin Pharmacol. 2007; 7: 617-627. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Holst B, Cygankiewicz A, Jensen TH, Ankersen M, Schwartz TW. Uthibitisho wa juu wa kipengele cha ghrelin - utambulisho wa agonist wenye nguvu sana. Mol Endocrinol. 2003; 17: 2201-2210. [PubMed]
  • Howard AD, Feighner SD, Cully DF, Arena JP, Liberator PA, Rosenblum CI, Hamelin M, Hreniuk DL, Palyha OC, Anderson J, Paress PS, Diaz C, Chou M, Liu KK, McKee KK, Pong SS, Chaung LY , Elbrecht A, Dashkevicz M, Mbinguni R, Rigby M, Sirinathsinghji DJS, Mheshimiwa DC, Melillo DG, Patchett AA, Nargund R, Griffin PR, DeMartino JA, Gupta SK, Schaeffer JM, Smith RG, VanderPloeg LHT. Mpokeaji katika pituitary na hypothalamus ambayo inafanya kazi katika kutolewa kwa homoni ya ukuaji. Sayansi. 1996; 273: 974-977. [PubMed]
  • Mstari E. Usimamizi wa mfumo wa ghrelin husababisha kupendekezwa kwa mahali na huchochea dopamini ya mgomo. Addict Biol. 2008; 13: 358-363. [PubMed]
  • Jr. E, Egecioglu E, Dickson SL, Andersson M, Svensson L, Engel JA. Ghrelin huchochea shughuli za uendeshaji na upungufu wa dopamini kwa njia ya kati ya cholinergic katika panya: matokeo ya ushiriki wake katika malipo ya ubongo. Addict Biol. 2006; 11: 45-54. [PubMed]
  • Jarida E, Egecioglu E, Dickson SL, Douhan A, Svensson L, Engel JA. Usimamizi wa Ghrelin katika maeneo ya uhamasishaji huchochea shughuli za uendeshaji na huongeza mkusanyiko wa ziada wa dopamini katika kiini cha accumbens. Addict Biol. 2007; 12: 6-16. [PubMed]
  • Jarida E, Egecioglu E, Dickson SL, Svensson L, Engel JA. Alpha-conotoxin Miti-sensitive nicotinic acetylcholine receptors ni kushiriki katika kupatanisha ghrelin-ikiwa stimulated locomotor na dopamine overflow katika kiini accumbens. Eur Neuropsychopharmacol. 2008; 18: 508-518. [PubMed]
  • Jarida E, Egecioglu E, Landgren S, Salomé N, Heilig M, Moechars D, Data R, Perrissoud D, Dickson SL, Engel JA. Mahitaji ya dalili kuu ya ghrelin kwa malipo ya pombe. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106: 11318-11323. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • DC ya Jewett, Cleary J, Levine AS, Schaal DW, Thompson T. Athari za neuropeptide Y, insulini, 2-deoxyglucose, na kunyimwa kwa chakula kwa tabia ya motisha. Psychopharmacology. 1995; 120: 267-271. [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. MTII huzuia ghrelin- na ongezeko la chakula la kunyimwa katika kuongezeka kwa chakula na ulaji wa chakula. Horm Behav. 2007a; 52: 612-620. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. Mpokeaji wa NPY Y1 huhusishwa katika ghrelin- na ongezeko la kufunga-kuongezeka kwa chakula, chakula cha chakula, na ulaji wa chakula. Am J Physiol Regul Integr Comp Comp Physiol. 2007b; 292: R1728-1737. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Kelley AE, Bakshi VP, Haber SN, Steinerer TL, Will MJ, Zhang M. Opioid modulation ya hedonics ladha ndani ya striatum ventral. Physiol Behav. 2002; 76: 365-377. [PubMed]
  • Kojima M, Hosoda H, Tarehe Y, Nakazato M, Matsuo H, Kangawa K. Ghrelin ni peptide ya kukua-homoni inayotokana na tumbo kutoka tumbo. Hali. 1999; 402: 656-660. [PubMed]
  • Koob GF. Dawa za unyanyasaji - anatomy, pharmacology na kazi ya njia za malipo. Mwelekeo Pharmacol Sci. 1992; 13: 177-184. [PubMed]
  • Kuzmin A, Jerjeria E, Liljequist S, Engel J. Athari za subunit kuchagua nACh receptors juu ya uendeshaji wa ethanol binafsi na utawala na relapse kama vile ethanol-kunywa tabia. Psychopharmacology. 2009; 203: 99-108. [PubMed]
  • la Fleur SE, Vanderschuren LJ, Luijendijk MC, Kloeze BM, Tiesjema B, Adan RA. Mchanganyiko wa usawa kati ya tabia ya motisha na chakula cha kutosha cha kula. Int J Obes. 2007; 31: 1286-1294. [PubMed]
  • Lee B, London ED, Poldrack RA, Farahi J, Nacca A, Monterosso JR, Mumford JA, Bokarius AV, Dahlbom M, Mukherjee J, Bilder RM, Brody AL, Mandelkern MA. Dopamine ya uzazi wa d2 / d3 upatikanaji wa receptor imepunguzwa katika utegemezi wa methamphetamine na unahusishwa na msukumo. J Neurosci. 2009; 29: 14734-14740. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Livak KJ, Schmittgen TD. Uchambuzi wa takwimu za kielelezo cha jeni kwa kutumia PCR ya muda halisi na njia ya 2 (-delta delta C (T)). Njia. 2001; 25: 402-408. [PubMed]
  • Nakazato M, Murakami N, Tarehe Y, Kojima M, Matsuo H, Kangawa K, Matsukura S. Jukumu la ghrelin katika kanuni kuu ya kulisha. Hali. 2001; 409: 194-198. [PubMed]
  • Naleid AM, Grace MK, Cummings DE, Levine AS. Ghrelin inasababisha kulisha katika njia ya malipo ya macholimbic kati ya eneo la eneo la kijiji na kikundi cha kukusanya. Peptides. 2005; 26: 2274-2279. [PubMed]
  • Nimitvilai S, Brodie MS. Kubadilika kwa kuzuia dopamini ya muda mrefu ya neurons ya dopaminergic ya eneo la kijiji. J Pharmacol Exp Ther. 2010; 333: 555-563. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Nogueiras R, Tschöp MH, Zigman JM. Mfumo wa neva wa kati wa udhibiti wa nishati kimetaboliki - ghrelin dhidi ya leptin. Ann NY Acad Sci. 2008; 1126: 14-19. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. Ushauri wa Panya katika Kuratibu za Stereotaxic. New York: Academic Press, New York; 1986.
  • Perello M, Sakata I, Birnbaum S, Chuang JC, Osborne-Lawrence S, Rovinsky SA, Woloszyn J, Yanagisawa M, Lutter M, Zigman JM. Ghrelin huongeza thamani ya thawabu ya chakula cha juu cha mafuta kwa namna ya kutegemea orexini. Biol Psychiatry. 2010; 67: 880-886. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Pratt WE, Blackstone K. Nucleus accumbens acetylcholine na ulaji wa chakula: kupungua kwa sauti ya muscarinic kunapunguza kulisha lakini si kutafuta chakula. Behav Ubongo Res. 2009; 198: 252-257. [PubMed]
  • Pratt WE, Kelley AE. Kupambana na ugonjwa wa uvimbe wa muscarinic hupunguza ulaji wa chakula 24-h kwa kushirikiana na kujieleza kwa jeni la preproenkephalin. Eur J Neurosci. 2005; 22: 3229-3240. [PubMed]
  • Ritter RC, Slusser PG, Stone S. Glucoreceptors kudhibiti kulisha na damu-glucose - mahali katika hindbrain. Sayansi. 1981; 213: 451-453. [PubMed]
  • Salamone JD, Steinpreis RE, McCullough LD, Smith P, Grebel D, Mahan K. Haloperidol na kiini accumbens dopamine kupungua huzuia lever kubwa kwa chakula lakini kuongeza ongezeko la chakula kwa njia ya riwaya ya utaratibu wa chakula. Psychopharmacology. 1991; 104: 515-521. [PubMed]
  • Salomé N, Haage D, Perrissoud D, Moulin A, Demange L, Egecioglu E, Fehrentz JA, Martinez J, Dickson SL. Vitendo vya anorexigenic na electrophysiological ya wapinzani wa ghrelin receptor (GHS-R1A) katika panya. Eur J Pharmacol. 2009a; 612: 167-173. [PubMed]
  • Salomé N, Hansson C, Taube M, Gustafsson-Ericson L, Egecioglu E, Karlsson-Lindahl L, Fehrentz JA, Martinez J, Perrissoud D, Dickson SL. Kwenye utaratibu wa kati unaosababisha athari sugu ya kunenepesha kwa ghrelin katika panya: ufahamu mpya kutoka kwa tafiti zinazotumia mpinzani wa mpokeaji wa ghrelin. J Neuroendocrinol. 2009b; 21: 777-785. [PubMed]
  • Sibilia V, Lattuada N, Rapetti D, Pagani F, Vincenza D, Kibulgaria I, Locatelli V, Guidobono F, Netti C. Ghrelin inhibitisha maumivu ya kuvimba katika panya: kuhusika kwa mfumo wa opioid. Neuropharmacology. 2006; 51: 497-505. [PubMed]
  • Skibicka KP, Alhadeff AL, Grill HJ. Hindbrain cocaine- na amphetamine-iliyoandikwa nakala induces hypothermia mediated na GLP-1 receptors. J Neurosci. 2009; 29: 6973-6981. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Sun Y, Asnicar M, Saha PK, Chan L, Smith RG. Ablation ya ghrelin inaboresha ugonjwa wa kisukari lakini si zaidi ya phenotype ya panya ob / ob. Kiini cha Metab. 2006; 3: 379-386. [PubMed]
  • Toshinai K, Tarehe Y, Murakami N, Shimada M, Mondal MS, Shimbara T, Guan JL, Wang QP, Funahashi H, Sakurai T, Shioda S, Matsukura S, Kangawa K, Nakazato M. Ghrelin-induced ulaji wa chakula ni mediated kupitia njia ya orexin. Endocrinology. 2003; 144: 1506-1512. [PubMed]
  • Tracy AL, Clegg DJ, Johnson JD, Davidson TL, Benoit SC. Mgongano wa mgonjwa wa melanocortin AgRP kwa mafuta, lakini si (83-132) huongeza kabohaidreji ya majibu ya kupendeza, kuimarisha. Pharmacol Biochem Behav. 2008; 89: 263-271. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Wren AM, Muhuri LJ, Cohen MA, Brynes AE, Frost GS, Murphy KG, Dhillo WS, Ghatei MA, Bloom SR. Ghrelin huongeza hamu ya kula na huongeza ulaji wa chakula kwa wanadamu. J Clin Endocrinol Metab. 2001; 86: 5992-5995. [PubMed]
  • Wren AM, CJ ndogo, Wilaya ya HL, Murphy KG, Dakin CL, Taheri S, Kennedy AR, Roberts GH, Morgan DGA, Ghatei MA, Bloom SR. Peptide ghrelin ya riba ya hypothalamic huchochea ulaji wa chakula na ukuaji wa homoni. Endocrinology. 2000; 141: 4325-4328. [PubMed]
  • Zheng H, Lenard NR, Shin AC, Berthoud HR. Udhibiti wa chakula na udhibiti wa nishati katika dunia ya kisasa: ubongo unaotokana na malipo huwa zaidi ya ishara za kufuta. Int J Obes. 2009; 33 (Suppl. 2): S8-S13. [Makala ya bure ya PMC] [PubMed]
  • Zigman JM, Jones JE, Lee CE, Saper CB, Elmquist JK. Ufafanuzi wa mrNA ya ghrelin receptor katika ubongo na panya ubongo. J Comp Neurol. 2006; 494: 528-548. [PubMed]