Proc Natl Acad Sci US A. Jan 19, 2010; 107 (3): 1217-1222.
Iliyotangaza mtandaoni Desemba 29, 2009. do: 10.1073 / pnas.0911998107
PMCID: PMC2824263
Neuroscience
Yan Liu,a,b Brandon J. Aragona,c Kimberly A. Young,a,b David M. Dietz,b,d,e Mohamed Kabbaj,b,d Michelle Mazei-Robison,e Eric J. Nestler,e na Zuoxin Wanga,b,1
Makala hii imekuwa imetajwa na makala nyingine katika PMC.
abstract
Mkutano wa sifa (Microtus ochrogaster) ni spishi ya aina ya monogamous ya kijamii ambayo huunda vifungo baada ya kuoana, tabia ambayo dopamine kuu (DA) imeingizwa. Hapa, tulitumia voles za adume ya kiume kuchunguza athari za mfiduo wa dawa za kulevya kwenye bonding na mzunguko wa neural unaohusiana. Katika jaribio letu la kwanza, tabia ya kutiwa motisha ya amphetamine (AMPH) ilichunguzwa kwa kutumia upendeleo wa mahali pa kupendelea (CPP) na ilionyeshwa kupatanishwa na uanzishaji wa receptors za D1-kama DA. Ifuatayo, tukachunguza athari za kufichua mara kwa mara kwa AMPH juu ya dhamana. Wanaume wenye nguvu na wenye nguvu wa kudhibitiwa walio na nguvu ya saline walionyesha matakwa ya mwenzi anayeshawishi, wakati wanaume walijifanya na AMPH kwenye kipimo cha kushawishi CPP walishindwa kuonyesha matakwa ya mpenzi anayeshawishi. Tiba kama hiyo ya AMPH pia iliboresha D1, lakini sio D2, usemi wa receptor wa DA katika mkusanyiko wa nukta (NAcc). Kwa kuongezea, kizuizi cha kifua kikuu cha receptors za D1 kama DA katika NAcc iliyookoa matakwa ya mwenzi anayeshawishiwa katika wanaume waliotibiwa na AMPH. Pamoja, data zetu zinaonyesha kuwa mfiduo wa kurudiwa wa AMPH kunaweza kupunguza tabia ya tabia ya safari za waume kupitia mfumo maalum wa receptor katika NAcc, kusababisha uharibifu wa malezi ya vifungo vya jozi.
Inakubaliwa sana kuwa tabia ya motisha na ya kihemko ambayo inakuza usawa wa mwili inadhibitiwa na mzunguko wa tuzo za ubongo pamoja na mfumo wa mesolimbic dopamine (DA) (1, 2). Ingawa mfumo huu mara nyingi unahusishwa na ulaji wa chakula na tabia ya kingono (3, 4), imeathiriwa pia kwa tabia zingine zinazotokea za asili, kama mchezo wa kijamii kati ya vijana na uhusiano wa kijamii kati ya mzazi na watoto (5-9). Mara nyingi huwasilishwa katika utafiti ni vifungo vya kijamii vinavyoundwa kati ya wenzi wazima, yaani, vifungo vya jozi. Uchunguzi wa hivi karibuni ukitumia spishi ya jamii ya monogamous panya, mkoa wa prairie (Microtus ochrogaster) (10-12), zinaonyesha kuwa sehemu kubwa ya kanuni ya msingi ya dhamana ya malezi na matengenezo hufanyika ndani ya mkusanyiko wa kiini (NAcc) (13-15) - eneo la ubongo wa mesolimbic muhimu kwa upatanishi wa tabia za kuhamasisha (1, 2, 16).
Ingawa uhamasishaji wa motisha ulitokea kukuza tabia ya kuongeza usawa kama vile kulisha, kupandisha, na kifungo cha kijamii (1, 17), ina hatari ya kuchukua ushuru wa bandia na dawa za kulevya (8). Kwa mfano, usimamizi wa dawa za psychostimulant za unyanyasaji, kama vile cocaine na amphetamine (AMPH), husababisha mabadiliko yanayoendelea ya shughuli za mesolimbic DA (18, 19). Athari kubwa kwenye mzunguko huu na hizi na dawa zingine zilizopendekezwa imependekezwa kupunguza thamani inayotambuliwa ya motisha za asili (20), pamoja na ile ya asili ya kijamii (8). Ingawa inajulikana kuwa walevi wa dawa za kulevya huonyesha tabia mbaya ya kijamii (21), kanuni ya neural ya mwingiliano kati ya uzoefu wa dawa na kiambatisho cha kijamii haueleweki. Hii ni kwa sababu, kwa sehemu, maingiliano kama haya ni ngumu kuiga katika panya za jadi za maabara ambazo hazionyeshi dhamana ya kijamii kati ya washauri wazima.
Neurobiolojia ya kiambatisho cha kijamii kama hicho, haswa dhamana kati ya watu wazima, imesomwa sana katika eneo la sifa (10-12), na hivi karibuni, spishi hii imeanzishwa kama kielelezo bora cha kuchunguza thamani ya motisha ya AMPH (22). Kwa kuongezea, malezi ya dhamana zote mbili na uimarishaji wa AMPH hupatanishwa, angalau kwa sehemu, na maambukizi ya DA ndani ya NAcc (14, 15, 23). Kwa hivyo, utafiti uliopo ulitumia kielelezo kizuri cha sifa ya kuanzisha kielelezo cha tabia ya kusoma athari za utaftaji wa dawa za kulevya kwenye dhamana ya kijamii na ililenga mfumo wa ishara wa NAcc DA kufunua utaratibu wa neural unaosababisha athari hizi za kitabia.
Matokeo
Upendeleo wa Nafasi Iliyosimamishwa ya Nafasi ya AMPH (CPP) Imepatanishwa na DA katika Mbinu Maalum ya Receptor.
Uundaji wa CPP ulifafanuliwa na ongezeko kubwa la wakati uliotumiwa katika ngome iliyochorwa-AMPH wakati wa kuzaa, baada ya siku za 3 za hali ya AMPH, ikilinganishwa na udanganyifu. Sio sindano za saline wala chumvi iliyo na kipimo cha chini cha AMPH iliyopimwa (0.1 na 0.5 mg / kg) upendeleo uliobadilishwa wa ngome (Mtini. 1A). Walakini, wanaume walikuwa na kipimo cha kiwango cha juu cha AMPH, pamoja na 1.0 (t = 2.87, P <0.01), 3.0 (t = 3.63, P <0.01), au 5.0 mg / kg (t = 3.03, P <0.01), imeonyeshwa CPP (Mtini. 1A).
Kwa sababu AMPH inaongeza sana neurotransuction ya DA katika voles za prairie (24), na DA inaingilia uimarishaji wa AMPH katika spishi zingine (23), tukaangalia tena sheria ya receptor ya DA (DAR) ya CPP iliyochochewa katika vichochoro vya wanaume wa kiume. Vipengee vilidanganywa katika dhana ya CPP, kutibiwa na saline au saline iliyo na kipimo tofauti cha upinzani wa DAR antagonist (haloperidol) kabla ya sindano za AMPH (1.0 mg / kg) wakati wa siku za 3, na kisha kupimwa kwa CPP katika kipindi cha baadae. Masomo yaliyotibiwa na saline (t = 2.69, P <0.01) au salini iliyo na dozi mbili za chini kabisa za haloperidol (0.1 mg / kg; t = 3.62, P <0.01; 1.0 mg / kg; t = 3.89, P <0.01) kabla ya hali ya AMPH kuonyeshwa CPP iliyosababishwa na AMPH, wakati haloperidol kwa 5.0 mg / kg ilizuia CPP iliyosababishwa na AMPH, ikionyesha ushiriki wa DAR katika athari za tabia za AMPH (Mtini. 1B). Ili kubaini ni DPNUMX ndogo iliyoingiliana na AMP iliyoingiliana na PCP, baadaye tumesimamia ama D1-kama mpinzani fulani (SCH23390) au mpinzani maalum wa D2-kama antxonist (eticlopride) kabla ya sindano za AMPH wakati wa sharti. Upinzani kama D2-haikuzuia CPP iliyochochewa na AMPH (t = 3.15, P <0.01 kwa 0.5 mg / kg na t = 2.60, P <0.05 kwa 5.0 mg / kg eticlopride) lakini kizuizi cha vipokezi kama D1 vimeondoa CPP iliyosababishwa na AMPH (Mtini. 1B), inayoonyesha kuwa CPP iliyochochewa na AMPH imeingiliwa na uanzishaji wa D1-kama, lakini sio D2-kama, receptors katika voles za kiume za watu.
Uboreshaji wa uzoefu wa AMPH Ulinganishaji wa Mpangilio wa Washirika.
Ingawa CPP iliyochochewa na AMPH inahitajika uanzishaji wa receptors za D1-kama (Mtini. 1B), tumeonyesha hapo awali kuwa uanzishaji wa receptors za D1-kama huzuia malezi ya vifungo vya jozi ya kupandisha (14). Kwa hivyo, tulibaini kuwa upendeleo wa AMPH ungeingilia kati na kushawishi uhusiano wa jozi wa kupeana katika voles za kiume za watu wa kiume. Wanaume wamegawanywa katika vikundi vinne ambavyo havipokea sindano (intact), sindano za saline, au sindano za 1.0 au 5.0 mg / kg AMPH kwa siku 3 (paradigm ya sindano ya kutosha kushawishi CPP). Katika siku ya nne, wanaume wote walikuwa wamechorwa na mwanamke anayepokea ngono kwa 24 h na kisha akapimwa kwa upendeleo wa mwenzi. Kuhusiana na masomo ya zamani (14, 25-27), wanaume na wanaume ambao hawakupata sindano za saline kwa siku 3 kabla ya kuoana walionyesha matakwa ya mwenzi anayeshawishi (wanaume wazuri; t = 3.05, P <0.01, wanaume wenye sindano ya chumvi; t = 3.21, P <0.01; Mtini. 2A). Walakini, wanaume ambao walionekana kuwa na kipimo chochote cha AMPH kwa siku 3 kabla ya kukomaa walishindwa kuonyesha upendeleo wa mshirika.Mtini. 2A). Kwa maana, uchukuzi wa AMPH haukuathiri masafa ya kupandisha wakati wa kupendeza (F(3, 26) = 0.26, P = 0.85; Mtini. 2B) au shughuli za wakati wa jaribio la upendeleo wa mwenzi (F(3, 26)= 2.34, P = 0.10; Mtini. 2C), kuonyesha kwamba AMPH imeingilia moja kwa moja matakwa ya mwenzi anayeshawishi.
Uzoefu wa AMPH Upandisha D1 Receptors katika NAcc.
Kwa kuzingatia kwamba upendeleo wa upungufu wa wazi wa upungufu wa mkojo wa AMPH na CPP zote zilizochochewa na AMP (tazama hapo juu) na dhamana ya jozi (14) zimedhibitiwa na NAcc DA, tulidokeza kwamba AMPH ingebadilisha sana mzunguko wa DA ya mesolimbic katika voles za kiume za watu. Akili za masomo kutoka kwa jaribio la tabia lililotajwa hapo juu zilishughulikiwa kwa kuweka alama ya alama za mRNA za DA. Wanaume waliotibiwa na AMPH (1.0 mg / kg) walionyesha ongezeko kubwa la receptor ya D1 (D1R; t = 3.06, P <0.01), lakini sio kipokezi cha D2 (D2R), kuandikishwa kwa mRNA ndani ya NAcc, ikilinganishwa na wanaume wanaopata matibabu ya chumvi mapema (Mtini. 3 A-C). Walakini, hakuna tofauti za kikundi zilizopatikana katika wiani wa uandikishaji wa mRNA kwa tyrosine hydroxylase (TH), msafirishaji wa DA (DAT), au D2Rs ndani ya eneo la sehemu ya ndani (VTA) - mkoa wa ubongo ambao hutoa pembejeo ya msingi ya dopaminergic kwa NAcc (Mtini. 3 D-G). Kuongezeka kwa kujieleza kwa D1Rs katika NAcc kulithibitishwa zaidi na kufutwa kwa Magharibi (t = 1.90, P <0.05; Mtini. 3 H na I). Kwa pamoja, data hizi zinaonyesha kuwa mfiduo wa AMPH una athari za receptor- na maalum kwenye mfumo wa mesolimbic DA wa voles prairie ya kiume-kuongeza kiwango cha D1Rs katika NAcc.
D1 Receptors katika NAcc Mediate AMPH Uharibifu wa Mapendeleo ya Mshirika.
Hapo awali tumeonyesha kuwa, katika voles za kiume za kiume, uanzishaji wa D1Rs ndani ya NAcc ilizuia malezi ya upendeleo wa mpenzi (14), na utafiti wa sasa unaonyesha kuwa mfiduo wa AMPH unasimamia D1Rs katika NAcc (Mtini. 3). Kwa hivyo, tulijaribu nadharia ya kwamba uharibifu wa vichocheo vya AMPH-upendeleo wa upendeleo wa mwenzi hupatanishwa na D1Rs ndani ya NAcc. Wanaume walipokea cannulation ya sumu kwa lengo la pande zote kwenye ganda la NAcc (Mtini. 4A). Maji bandia ya cerebrospinal (CSF) peke yake au CSF iliyo na kipimo tofauti cha D1-kama receptor antagonist SCH23390 iliingizwa ndani ya NAcc kabla ya sindano za AMPH (1.0 mg / kg) wakati wa siku za 3. Baada ya hapo, masomo yalipakwa jozi na kike kwa 24 h na kisha ikajaribiwa kwa matakwa ya mwenzi. Kama ilivyo kwa jaribio hapo juu (Mtini. 2), Mfiduo wa AMPH ulizuia matakwa ya mwenzi anayeshawishi ya kupandikiza katika wanaume waliopokea sindano za intra-NAcc za CSF au kipimo cha chini cha SCH23390 (Mtini. 4B). Walakini, wanaume ambao waliingizwa na kipimo cha juu cha SCH23390 (100 ng / kg) walionyesha mapendeleo ya mshirika ((t = 2.55, P <0.05), ikionyesha kuwa kizuizi cha D1R katika NAcc kiliondoa upungufu wa AMPH wa malezi ya upendeleo wa wenzi (Mtini. 4B). Hakuna tofauti za kikundi zilizopatikana katika mzunguko wa kuogelea wakati wa shughuli za kufanya mazoezi ya pamoja au shughuli za wakati wa jaribio la upendeleo wa mwenzi.
Majadiliano
Katika utafiti huu, tunarudisha ugunduzi wetu wa hapo awali kuwa mfiduo wa AMPH huchochea CPP katika vichochoro vya wanaume wa sifa ((22) na kuonyesha kuwa uanzishaji wa D1R katika NAcc ni muhimu kwa tabia hii, matokeo sanjari na tafiti katika spishi zingine za panya (28). Utaftaji huu, pamoja na tafiti za zamani, unaonyesha kuwa mifumo tofauti ya DAergic katika NAcc inasimamia tabia ya AMPH- na tabia inayochochewa na mshirika: Tabia ya kuhamasishwa na AMPH (CPP) inaingiliana na D1R, wakati tabia inayochochewa na mwenzi (upendeleo wa mwenzi) imewezeshwa na D2R uanzishaji na imezuiliwa na uanzishaji wa D1R ndani ya NAcc (13-15). [Ni muhimu kutambua kuwa, katika uanzishaji wa NAcc, D2R inaingiliana na CPP iliyochochewa na dawa chini ya hali fulani (29) na uanzishaji wa D1R unahusika katika tabia zingine zinazochochewa na kijamii, kama zile zinazoelekezwa kwa watoto (7, 30)].
Tofauti ya Udhibiti wa DAergic ya CPP na malezi ya upendeleo wa mshirika unawezekana sana na tofauti katika kiwango cha mkusanyiko-kichocheo cha mkusanyiko wa DA-activation subtypes tofauti za DAR. Kwa sababu ya tofauti katika ushirika wa kisheria, mwinuko wa nguvu katika mkusanyiko wa DA inahitajika kuamsha ushirika wa chini wa D1R, wakati kuongezeka kwa kiwango cha juu kwa viwango vya DA kwa upendeleo kuamsha ushirika wa hali ya juu wa D2R (31). Katika safari za sifa, AMPH huamsha ongezeko kubwa zaidi katika mkusanyiko wa DA (24) ikilinganishwa na ile iliyosababishwa na kupandishwa (15, 25). Hizi data zinaonyesha kuwa kuongezeka kwa wastani kwa mkusanyiko wa DA wakati wa mwingiliano wa kijamii (15, 25) ruhusu uanzishaji maalum wa D2Rs za ushirika na hivyo kuwezesha malezi ya dhamana. Kinyume chake, kuongezeka kwa nguvu kwa mkusanyiko wa DA kufuatia utawala wa AMPH kunawezekana kuamsha ushirika wa chini wa D1R, na hivyo kuwezesha CPP iliyochochewa na AMPH.
Udhibiti maalum wa tabia ya receptor na DA unaambatana na masomo ya nje ya elektroni ya seli katika panya zinazoenda kwa uhuru zinazoonyesha kuwa dawa za kulevya na msukumo wa asili zinashughulikiwa na idadi tofauti ya neuronal ndani ya NAcc (32). Ingawa masomo kama haya ya elektroni hayawezi kutambua ujasusi wa vipokezi vya DA vilivyoonyeshwa kwenye neuroni za mtu binafsi, tafiti za kiakili zinaonyesha kuwa NAcc inajumuisha neuroni za makadirio ambazo zinaonyesha ama D1R au D2R na uvumilivu mdogo sana (33). Psychostimulants hiari ya kwanza kuamsha njia za kuashiria za ndani za chini kutoka D1Rs (kama ilivyoamuliwa na phosphorylation iliyoongezeka ya molekuli za kuashiria) (34) na tumeonyesha hapo awali kuwa ongezeko la uanzishaji wa njia hizi za kuashiria huzuia malezi ya upendeleo wa washirika (35). Kwa hivyo, ingawa uwasilishaji wa DA ndani ya NAcc unachukua jukumu muhimu katika kukabiliana na AMPH na malezi ya upendeleo wa mwenzi, tabia hizi zinaweza kupatanishwa kupitia sehemu ndogo ndogo ambazo zinajumuisha mifumo ya makadirio ya dharura (33, 36). Hii ni ya kuvutia sana kwa sababu malezi ya dhamana ya jozi hupatanishwa na uanzishaji wa neuron zinazoonyesha D2R zinazoonyesha kuwa projekiti ya provenal pallidum (33), mkoa mwingine wa ubongo muhimu kwa dhamana ya jozi (26).
Katika utafiti huu, tunatoa uthibitisho kwamba uzoefu wa AMPH huzuia dhamana ya kupandikiza kupatika. Wakati majaribio ya upendeleo wa mwenzi katika majaribio haya yalifanywa 48 h baada ya udhihirisho wa mwisho wa AMPH (ie, baada ya dawa hiyo kutengenezewa kabisa), data hizi zinaonyesha athari inayoendelea ya AMPH juu ya dhamana ya kijamii. Utaratibu mmoja uwezo, sambamba na athari za AMPH katika spishi zingine (37, 38), ambayo AMPH inaweza kudhoofisha dhamana ya jozi ni kupitia kuongezeka kwa usemi wa D1R ndani ya NAcc. Wazo hili linaungwa mkono na jukumu la kupingana la NAcc D1Rs katika malezi ya upendeleo wa washirika (14, 24) na kwa data ya sasa inayoonyesha uokoaji wa upendeleo wa kushawishi wa kupandisha na kupeana kwa ndani na NAcc D1R blockade katika wanyama waliotibiwa na AMPH (Mtini. 4). Kwa kufurahisha, tumeonyesha hapo awali kuwa, katika voles za heshima za kiume, kanuni za NAcc D1Rs baada ya wiki za 2 za kuunganishwa kwa jozi kuwezesha uhasama wa kuchagua kwa wageni wasiowajua, pamoja na wanawake wanaokubali ngono, na kupendekeza kwamba upendeleo huu wa neural ni utaratibu uliobadilishwa ambao voles za kiume kudumisha vifungo vya jozi tayari (14). Utafiti wa sasa unaonyesha kuwa AMPH inasababisha kwa hiari ugonjwa huu, na kusababisha uharibifu wa jozi ya AMPH. Inawezekana pia kuwa wanaume wanaotibiwa na AMPH wanaweza kumshirikisha kike na hali ya kujiondoa ya kujiondoa kwa AMPH, na kwa hivyo ushirika huu hasi unaweza kusababisha udhalilishaji wa AMPH wa dhamana ya jozi. Utafiti uliopita ulionyesha kwamba kujiondoa kutoka kwa ratiba inayoongezeka ya tabia ya d-amphetamine iliyoharibika katika tabia ya kijinsia (39). Katika masomo yetu, hata hivyo, barua kutoka kwa vikundi tofauti vya matibabu zilionyesha njia zingine za kupandikiza (Mtini. 2B), kuonyesha kwamba labda hawakuwa katika hali ya kujiondoa kutoka kwa amphetamine. Walakini, uwezekano huu unahakikisha uchunguzi zaidi.
Imeundwa vizuri kuwa ujumuishaji wa neural wa neural unaosababishwa na dawa ni muhimu kwa madawa ya kulevya (40). Wanasaikolojia hubadilisha sana uboreshaji wa muundo katika mfumo wa mesolimbic DA (41) na kuna ushahidi kupendekeza kuwa mabadiliko kama haya yanavumilia zaidi katika D1 inayoelezea neurons (37). Kwa kuongezea, tafiti za elektroni zimeonyesha kuwa uzoefu wa cocaine unaweza kupunguza neuroplasticity inayofuata ndani ya NAcc (42). Hakika, ujanibishaji wa neural uliosababishwa na madawa ya kulevya unapata muundo wa kawaida wa asili kufuatia kufichua riwaya katika mazingira magumu (43). Kwa hivyo, ingawa madawa ya kulevya hutambuliwa sana kama shida ya kujifunza na kumbukumbu (1, 40, 44), mara nyingi haifahamiki kwamba upotezaji unaosababishwa na dawa za kulevya kwa uwezekano wa mabadiliko zaidi katika duru za mesolimbic pia unaweza kuwa muhimu kwa ulevi. Kupunguzwa kama kwa plastiki kunaweza kuweka kikomo cha tabia kwa utaftaji wa dawa za kulevya. Kwa hivyo haishangazi kwamba voles zilizotibiwa na AMPH zilionyesha tabia iliyopunguzwa ya dhamana. Athari za sasa za mfiduo wa AMPH juu ya dhamana ya kuoana ni sawa na tafiti za zamani zinaonyesha athari za kisaikolojia juu ya tabia zingine za kijamii, pamoja na tabia ya mama (45-47) na kucheza kwa kijamii (48-50). Pamoja, kazi kama hii inatoa ahadi kwamba uchunguzi wa jinsi madawa ya kulevya na uchochezi wa kijamii unavyoingiliana katika ubongo zinaweza kupanua uelewa wetu wa maingiliano madhubuti kati ya tabia ya kijamii na utumiaji wa dawa za kulevya kwa wanadamu (21).
Vifaa na mbinu
Mada.
Masomo yalikuwa maonyesho ya kijinsia ya kiume ya kijeshi kutoka koloni la maabara la uzazi. Masomo yalipishwa kwa umri wa miaka 21 na kuwekwa katika jozi za ndugu wa jinsia moja katika mabwawa ya plastiki (12 × 28 × 16 cm) mahali ambapo maji na chakula vilitolewa. Sifi zote zilitunzwa chini ya 14: Mzunguko wa-giza wa 10, na hali ya joto ilikuwa takriban 20 ° C. Masomo yote yalikuwa juu ya siku za 90 za umri wakati wa kujaribiwa. Ugunduzi wa kizuizi na uingizwaji maalum wa dawa za DA zimeelezewa kwa undani mahali pengine (14).
Upimaji wa Maadili.
Upimaji wa CPP ulifanywa kama ilivyoelezwa hapo awali (22) isipokuwa zifuatazo. Upendeleo wa ngome ya kwanza kwa kila somo imedhamiriwa kwa ujanja wa 30-min siku ya 1. Vitu vilikuwa vimerudishwa, wakati wa vikao vya dakika za 40, na AMPH kwa ngome isiyosafirishwa na saline kwa ngome inayopendelea (sindano zote za AMPH na sindano zilipewa siku hiyo hiyo, 6 h mbali) kwa siku za 3 mfululizo (siku 2-4). Baada ya hapo, masomo yalipimwa (baada ya hapo) kwa uwepo wa CPP siku ya 5.
Upimaji wa upendeleo wa mwenzi ulifanywa kama ilivyoelezwa hapo awali (14). Kwa kifupi, vifaa vya upimaji vilikuwa na ngome ya kati (12 × 28 × 16 cm) iliyojumuishwa na zilizopo mashimo (7.5 × 16 cm) kwa mabweni mawili yanayofanana kila nyumba ya mnyama wa kichocheo. Wanyama wa kichocheo walikuwa "mwenzi" anayejulikana (mwenzi wa kike wa somo) na "mgeni" (mwanamke ambaye hakuwa amekutana na mada hiyo hapo awali) ambaye alitumbuliwa kwa urahisi ndani ya ndizi zao tofauti bila kuwasiliana moja kwa moja. Mwanzoni mwa jaribio la 3-h, masomo yamewekwa ndani ya ngome kuu na kuruhusiwa kusonga kwa uhuru wakati wote wa vifaa. Tabia ilirekodiwa kwa kutumia mfumo wa kurekodi video unaowacha wakati. Wataalam waliopuuzwa na ujanja walipitia mkanda huo na kurekodi tabia ya mada hiyo. Upendeleo wa mshirika ulifafanuliwa kama mada inayotumia wakati mwingi katika mawasiliano ya upande na mshirika kuliko mgeni, kama inavyoonyeshwa na sampuli za jozi. t mtihani (27).
Katika Maongezi ya Situ na Utunzaji wa Magharibi.
Mbinu maalum za antisense (Meza 1) zilitumika kwa D1R, D2R, TH, na DAT katika kuweka lebo ya mRNA. Kuweka alama iliendeshwa na 35Uchunguzi ulio na majina na udhibiti wa mRNA kwa kila alama ya DA kama ilivyoelezewa hapo awali (51). Kwa uchanganuzi wa Magharibi, proteni ya DAR ilitolewa kutoka kwa nguvu ya kukwepa tishu za NAcc na kudorora kama ilivyoelezwa hapo awali (52).
Utaratibu wa Takwimu na Uchambuzi.
Mapendeleo ya CPP na mpenzi yalidhamiriwa na sampuli za paired t vipimo. Tofauti za kikundi katika mateka ya kupandisha wakati wa kwanza wa 6 h ya kuoana na maingilio ya kike na ya ngome wakati wa jaribio la upendeleo wa mpenzi zilichambuliwa na ANOVA. Vipimo vya macho ya D1R na D2R mRNA iliyo na NACC na vile vile, hesabu ya D, na D2R mRNA iliyo kwenye VTA ilifukuzwa kutoka kwa vitorolii kwa kutumia programu ya picha ya kompyuta (NIH IMAGE 1.64). Takwimu ziliwasilishwa kama mabadiliko ya asilimia ya maana ya kikundi cha udhibiti wa saline na tofauti za kikundi zilichambuliwa na t vipimo. Mwishowe, msongamano wa macho wa D1R na D2R uliowekwa kwenye filamu ya x-ray kutoka kwa majaribio ya blotting Western yalichambuliwa na t vipimo.
Ubunifu wa Majaribio.
Jaribio la 1a lilianzisha Curve ya majibu-ya kipimo kwa CPP iliyochochewa na AMPH. Masomo yalidanganywa katika vifaa vya CPP siku ya 1, ilipewa kwa nasibu moja ya vikundi sita vya majaribio ambayo ilipata sindano ya ip (ip) ya chumvi iliyo na viwango tofauti vya AMPH [0 (n = 12), 0.1 (n = 8), 0.5 (n = 9), 1.0 (n = 12), 3.0 (n = 12), au 5.0 mg / kg (n = 13)] wakati wa siku za 3 (siku 2-4) ya hali, na kisha kupimwa kwa CPP katika siku za nyuma za 5.
Jaribio la 1b lilifunua majukumu ya receptors za DA katika CPP iliyochochewa na AMPH. Masomo yalibadilishwa katika vifaa vya CPP na kupewa kwa nasibu katika moja ya vikundi nane vya majaribio ambavyo vilipokea sindano ya sc (sc) ya chumvi (n = 10) au saline iliyo na viwango tofauti vya mpinzani wa upokezi wa receptor DA [haloperidol; 0.1 (n = 8), 1.0 (n = 8), au 5.0mg / kg (n = 8)], au maalum kama D1 (SCH23390; 0.5 (n = 7) au 5.0 mg / kg (n = 7)] au D2-kama maalum receptor antagonist [eticlopride; 0.5 (n = 8) au 5.0 mg / kg (n = 8)]. Dakika thelathini baadaye, kipimo cha kizingiti cha AMPH (1.0mg / kg), ambacho kilichochea CPP katika Jaribio la 1a, kilitumiwa kwa hali ya AMPH. Baada ya siku za 3 za hali ya AMPH, masomo yote yalipata posttest ya CPP.
Jaribio la 2 limechunguza ikiwa uzoefu wa AMPH uliingiliana na dhamana ya jozi. Masomo yaligawiwa nasibu katika moja ya vikundi vitatu vya majaribio ambayo walipokea sindano za ip ya saline (n = 8) au chumvi iliyo na 1.0 mg / kg (n = 8) au 5.0 mg / kg (n = 7) AMPH mara moja kwa siku kwa siku 3 mfululizo - paradigm ambayo ilisababisha CPP katika voles za kiume za prairie. Siku ya nne, masomo yalipakwa rangi ya kike na primed ya kike ya 24 h (14), na kisha walijaribiwa katika jaribio la upendeleo la mpenzi wa 3-h. Ili kudhibiti athari inayoweza kutokea ya sindano kwenye kufungwa kwa jozi, kikundi cha majaribio cha nne cha wanaume ambao hawakupokea sindano yoyote (n = 6) iliratibiwa na wanawake walio na estro-primed kwa 24 h na kisha ikajaribiwa kwa upendeleo wa mwenzi. Vipimo vyote vya tabia viligongwa kwa video ya uhakiki wa kupandana. Muda wa masomo ya mawasiliano ya upande na mpenzi na mgeni yalipunguzwa. Kwa kuongezea, masafa ya kupungua kwa kasi wakati wa kwanza wa 6 h ya kuoanisha na shughuli za injini (iliyoonyeshwa na kuvuka kwa ngome) wakati wa jaribio la upendeleo wa mpenzi wa 3-h ulifutwa. Baada ya mtihani wa upendeleo wa mwenzi, masomo mara aliuawa. Akili zote zilivunwa, waliohifadhiwa kwenye barafu kavu, na kuhifadhiwa kwa −80 ° C kwa alama ya mseto ya mseto wa alama za DA.
Jaribio la 3 lilichunguza ikiwa dhamana ya jozi ya AMPH-iliyoharibika inahusishwa na mabadiliko katika shughuli za mesolimbic DA. Wabongo kutoka kwa masomo ambayo walipokea saline (n = 8) au 1.0 mg / kg AMPH (n = 8) katika Jaribio la 2 lilikatwa kwenye cryostat kuwa sehemu za coronia (unene wa 14 μm) ambao ulipowekwa kwenye slaidi za Superfrost / plus (Fisher kisayansi). Sehemu za ubongo katika vipindi vya 98-μm zilichakatwa kwa kuweka alama ya mseto ya D1R, D2R, TH, na mRNA. Kwa sababu voles zilizopatikana na 1.0 mg / kg AMPH zilionyesha kuongezeka kwa D1R, lakini sio D2R, lebo ya mRNA katika NAcc, ikilinganishwa na udhibiti wa sindano ya saline, vikundi viwili vya ziada vya masomo vilitolewa vilivyopokea sindano za saline (n = 6) au 1.0 mg / kg AMPH (n = 6), 24 h ya kupandisha, na kisha upimaji wa upendeleo wa mshirika, kama ilivyoelezwa hapo juu. Vipengee viliamuliwa na akili zilikatwa kwenye kilio cha unene wa 300 μm. Vipuli vya mateke vilivyochukuliwa pande zote kutoka NAcc vilishughulikiwa kwa D1R na D2R Western blotting.
Jaribio la 4 lilichunguza ikiwa uanzishaji wa receptors za aina ya D1 katika NAcc ulikuwa na jukumu la uharibifu wa AMPH wa bonding jozi. Vitu viliingizwa kwa mwongozo wa cannulae biliveally kwa lengo la ganda la Nacc. Baada ya siku za kupona 3, walipewa kwa nasibu katika moja ya vikundi vitatu vya majaribio ambayo walipokea sindano za intra-NAcc za CSF (200 nL / upande, n = 11), au CSF iliyo na 0.4 (n = 6) au 100 ng / upande (n = 7) SCH23390. Dakika thelathini baadaye, walipokea sindano za ip za 1.0 mg / kg AMPH. Utaratibu huu ulirudiwa kwa siku za 3 mfululizo. Katika siku ya nne, masomo yalipakwa rangi ya kike na iliyopangwa kwa estrojeni kwa 24 h na kisha ikajaribiwa kwa matakwa ya mwenzi.
Shukrani
Waandishi wanamshukuru Kyle Gobrogge, Claudia Lieberwirth, Kelly Lei, na Melissa Martin kwa kusoma kwa kina maandishi haya. Kazi hii iliungwa mkono na Taasisi za Kitaifa za Ruzuku ya Afya MHR01-58616, DAR01-19627, na DAK02-23048 hadi ZW
Maelezo ya chini
Waandishi hutangaza hakuna mgongano wa maslahi.
Makala hii ni Uwasilishaji wa PNAS moja kwa moja.
Marejeo