Int J Biol Sci 2015; 11 (10): 1150 – 1159
เผยแพร่ออนไลน์ 2015 ส.ค. 1 ดอย: 10.7150 / ijbs.12044
PMCID: PMC4551751
จินยองคิม,1 Jong-Ho Lee,1,✉ Doyun Kim,1,2 Soung-Min Kim,1 JaeHyung Koo,2 และ จองวอนจ๋าง1,✉
นามธรรม
การศึกษาครั้งนี้ตรวจสอบผลกระทบของอาหารอร่อยในช่วงวัยรุ่นที่มีต่อการรบกวนทางจิตใจและประสาทที่เกิดจากประสบการณ์ความเครียดชีวิตในวัยเด็กของหนูเพศเมีย ลูกสุนัข Sprague-Dawley ตัวเมียถูกแยกออกจากเขื่อนเป็นเวลา 3 ชั่วโมงทุกวันในช่วงสองสัปดาห์แรกของการเกิด (MS) หรือไม่ถูกรบกวน (NH) ผู้หญิงครึ่งหนึ่งของ MS ได้รับสิทธิ์เข้าใช้คุกกี้ช็อคโกแลตฟรี โฆษณาฟรี อาหารจากวันหลังคลอด 28 ลูกจะถูกทดสอบพฤติกรรมในช่วงวัยหนุ่มสาว พลาสมาคอร์ติโคสเตอโรนตอบสนองต่อความเครียดเฉียบพลัน, ΔFosBและระดับ neurotrophic factor (BDNF) ที่ได้มาจากสมองในบริเวณสมอง ปริมาณแคลอรี่รวมและน้ำหนักตัวที่เพิ่มขึ้นตลอดระยะเวลาการทดลองไม่แตกต่างกันในกลุ่มทดลอง การเข้าถึงคุกกี้ในช่วงวัยรุ่นและเยาวชนปรับปรุงพฤติกรรมวิตกกังวล / ซึมเศร้าโดยประสบการณ์ MS expression การแสดงออกของ FosB ลดลง แต่ BDNF เพิ่มขึ้นในนิวเคลียสของผู้หญิง MS และการแสดงออกของΔFosBเป็นมาตรฐานและ BDNF เพิ่มขึ้นอีกหลังจากการเข้าถึงคุกกี้ Corticosterone ตอบสนองต่อความเครียดเฉียบพลันถูกทื่อโดยประสบการณ์ MS และการเข้าถึงคุกกี้ไม่ได้ปรับปรุง ผลการวิจัยชี้ให้เห็นว่าการเข้าถึงคุกกี้ในช่วงวัยรุ่นช่วยเพิ่มความไม่สงบทางจิตใจของผู้หญิงเพศหญิงและการแสดงออกของΔFosBและ / หรือ BDNF ในนิวเคลียส accumbens อาจมีบทบาทในกลไกของระบบประสาท
บทนำ
มีหลักฐานเพิ่มขึ้นเรื่อย ๆ ว่าการรับประทานอาหารที่เหมือนกันสามารถมีการตอบสนองที่แตกต่างกันระหว่างเพศ ในระดับโมเลกุลจะแสดงให้เห็นว่ามีการตอบสนองทางเพศ dimorphic transcriptome hippocampal ระหว่างหนูเพศผู้และหนูเพศเมียที่สัมผัสกับอาหารชนิดเดียวกัน 1. ในระดับเมตาบอลิซึม / neuroendocrine หนูเพศเมียจะแสดงการตอบสนองของนิวโทรเปปไทด์ที่แตกต่างกันในอาหารที่มีไขมันสูงเป็นเวลานาน 2 และความจุสูงกว่าเพศชายเพื่อชดเชยการไหลเข้าของไขมันสูง 3. เพศหญิงที่ได้รับอาหารไขมันสูงในระยะสั้นได้ลดระดับ mRNA ของตัวรับ glucocorticoid ในฮิปโปแคมปัสและแกน hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) ที่ตอบสนองต่อความเครียดที่แตกต่างจากเพศชาย 4, 5. ในระดับพฤติกรรมการได้รับหนูในระยะสั้นจากอาหารที่มีไขมันจะช่วยลดความวิตกกังวลและเพิ่มการสำรวจในเพศชายในขณะที่มันมีผลตรงกันข้ามในเพศหญิง 6. วัยแรกรุ่นเป็นช่วงเวลาการพัฒนาที่สำคัญโดดเด่นด้วยปั้นพลาสติกต่อมไร้ท่อที่เพิ่มขึ้นและการเปลี่ยนแปลงในการตอบสนองความเครียด 7. การศึกษาได้แนะนำว่าอาหารที่มีไขมันสูงหลังหย่านมสามารถปรับเปลี่ยนกิจกรรมแกน HPA พื้นฐานและการตอบสนองต่อมไร้ท่อต่อความเครียดเฉียบพลันโดยมีผลกระทบต่อความเครียดและผู้ไกล่เกลี่ยการเผาผลาญในลักษณะทางเพศ dimorphic 8, 9. ก่อนหน้านี้เราพบว่าการบริโภคอาหารที่มีประโยชน์สูงอย่างต่อเนื่องในช่วงวัยรุ่นเพิ่มพฤติกรรมวิตกกังวลและซึมเศร้าในหนูตัวผู้ แต่ไม่ใช่ในหนูตัวเมียs 10. การบริโภคอาหารโรงอาหารเป็นเวลานานที่มีไขมันสูง (ปริมาณไขมัน 32%) ปรับปรุงพฤติกรรมเชิงรุกทั้งในหนูตัวผู้และตัวเมียที่อยู่ภายใต้โปรโตคอลการแยกมารดา (MS) ที่คล้ายกันซึ่งใช้ในการศึกษานี้ 11. ความผิดปกติทางพฤติกรรมและระบบประสาทที่ตรวจพบในหนูหนูเพศเมีย 12 ดูเหมือนจะแตกต่างจากคนในหนู MS 13, 14.
ในการศึกษาก่อนหน้าของเราการเข้าถึงอาหารอร่อยเป็นระยะเวลานานอาหารไขมันปานกลาง (~ 21% ไขมัน) 6, 15ในช่วงวัยรุ่นและวัยรุ่นมีอาการดีขึ้นบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับความวิตกกังวลและความผิดปกติของแกน HPA ในหนูเพศผู้ MS 14. การศึกษาได้แนะนำว่าการปรับฟังก์ชั่นแกนความเครียดนั้นมีส่วนเกี่ยวข้องในพฤติกรรมทางอารมณ์เชิงบวกโดยการรับประทานอาหารที่น่าพอใจ นั่นคือ; การได้รับอาหารที่ต้องการอย่างมากมีไขมันสูงก็แนะนำให้ลดความไวต่อความเครียด 16; ผู้ที่นำเสนอด้วยอาหารที่อร่อยมากมีอารมณ์ที่ถูกใจเช่นความพึงพอใจความเพลิดเพลินและความปรารถนา 17 และการบริโภคอาหารอร่อยลดการตอบสนองความเห็นอกเห็นใจจากความเครียดทางจิตวิทยาและภูมิคุ้มกัน 18ความเครียดระดับฮอร์โมนยับยั้งชั่งใจ 19 และพฤติกรรมที่คล้ายความวิตกกังวลในระหว่างการทดสอบเขาวงกตบวกกับเขาในหนู 20. อย่างไรก็ตามในการศึกษานี้อาหารไขมันปานกลาง (~ 21% ไขมัน) ในช่วงวัยรุ่นและเยาวชนไม่ได้ปรับปรุงความผิดปกติของแกน HPA ของ MS หญิงแม้ว่ามันจะปรับปรุงไม่เพียง แต่ความวิตกกังวล - แต่ยังพฤติกรรมที่คล้ายกับภาวะซึมเศร้า
เพื่อที่จะตรวจสอบกลไกทางประสาทที่เกี่ยวกับผลกระทบของอารมณ์ทางจิตของการเข้าถึงอาหารที่มีความน่าพอใจสูงในผู้หญิง MS ของเราเราได้ตรวจสอบปัจจัยทางประสาทที่มาจากสมอง (BDNF) และระดับΔFosBในนิวเคลียส accumbens (NAc) NAc ซึ่งเป็นโครงสร้างพื้นฐาน forebrain ที่ประกอบไปด้วยทางเดิน dopaminergic mesolimbic มีบทบาทในการให้รางวัลแรงจูงใจและการเสริมแรง 21. การพัฒนาของ Anhedonia ซึ่งเป็นอาการหลักของโรคซึมเศร้าได้ถูกกำหนดให้เป็นความผิดปกติของเส้นทางการให้รางวัลซึ่ง NAc มีบทบาทสำคัญ 22, 23. เซลล์ประสาท NAc ถูกกระตุ้นให้ตอบสนองต่อกระบวนทัศน์ความเครียดทางพฤติกรรม 24, 25และมีส่วนเกี่ยวข้องในความผิดปกติของความวิตกกังวล 26, 27. กิจกรรม dopaminergic mesolimbic และการเปิดใช้งานที่เกิดความเครียดของเซลล์ประสาท NAc ถูกทื่อในหนูหนู MS ของเราที่แสดงความวิตกกังวลและพฤติกรรมเหมือนภาวะซึมเศร้า 13, 28. BDNF แนะนำให้มีส่วนร่วมในการให้อาหารแบบ hedonic ผ่านการปรับระบบ dopamine mesolimbic 29, 30และการได้รับสารอาหารอร่อยเพิ่มระดับ BDNF และΔFosBและตัวรับ dopamine D1 ใน NAc 16, 31, 32.
วัสดุและวิธีการ
สัตว์
ซื้อ Sprague-Dawley (Samtako Bio, Osan, Korea) และได้รับการดูแลในบริเวณที่ปราศจากเชื้อโรคเฉพาะซึ่งควบคุมอุณหภูมิได้อย่างต่อเนื่อง (22 ± 1 ℃) ความชื้น (55%) และ 12 / 12 ชั่วโมง วงจรไฟ / มืด (เปิดเครื่องที่ 07: 00 AM) อาหารห้องปฏิบัติการมาตรฐาน (Purina Rodent Chow, Purina Co. , Seoul, Korea) และเยื่อกรองน้ำบริสุทธิ์ที่มีอยู่ โฆษณาฟรี. สัตว์ได้รับการดูแลตามแนวทางการทดลองสัตว์ 2000 แก้ไขโดยสถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์เกาหลีซึ่งสอดคล้องกับแนวทาง NIH สำหรับการดูแลและการใช้สัตว์ทดลองแก้ไข 1996 การทดลองสัตว์ทั้งหมดได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการเพื่อการดูแลและการใช้สัตว์ทดลองที่มหาวิทยาลัยแห่งชาติโซล
โปรโตคอลทดลอง
เพศเมียที่ใช้ค่า Nulliparous และพ่อพันธุ์แม่พันธุ์ที่ผ่านการพิสูจน์แล้วถูกนำมาใช้ในการเพาะพันธุ์ในห้องปฏิบัติการของสัตว์และลูกสุนัขถูกเลี้ยงในลักษณะควบคุมเพื่อลดและสร้างมาตรฐานการกระตุ้นสิ่งแวดล้อมที่ไม่พึงประสงค์จากมาตรฐาน ในมดลูก ชีวิต. สิบสองชั่วโมงหลังจากยืนยันการจัดส่ง [วันหลังคลอด (PND) 1] มีการจัดการลูกสุนัขตามที่เราอธิบายไว้ก่อนหน้า 13, 14, 33 - 35. แต่ละครอกถูกกำหนดสำหรับกลุ่มการแยกมารดา (MS) หรือสำหรับกลุ่มที่ไม่มีการจัดการ (NH) ลูกสุนัข MS ถูกนำออกจากเขื่อนและกรงบ้านและวางไว้ใกล้ ๆ กันในกรงใหม่ที่ปูด้วยไม้แกะ (Aspen shaving, Animal JS Bedding, Cheongyang, Korea) ในช่วงเวลา 9-00 น. จากนั้นจึงกลับไปที่บ้าน กรงและเขื่อน ไม่มีการรักษาเพิ่มเติมเพื่อให้ลูกสุนัขอบอุ่นในช่วงระยะเวลาการแยกตัว MS ดำเนินการทุกวันตั้งแต่ ภ.ง.ด. 12 ถึง 00 จากนั้นลูกสุนัขจะถูกปล่อยทิ้งไว้โดยไม่ถูกรบกวนจนกว่าจะหย่านมใน ภ.ง.ด. 1 กลุ่ม NH ยังคงไม่ถูกรบกวนจนกว่าจะหย่านมยกเว้นการทำความสะอาดกรงเป็นประจำสัปดาห์ละสองครั้ง ในวันหย่านมลูกสุนัขตัวเมีย 14 ตัวและ MS 22 ตัวถูกสุ่มเลือกจากครอก NH หรือ MS แต่ละตัวตามลำดับและวางลูกสุนัข NH หรือ 2 ตัว 4 ตัวไว้ด้วยกันในแต่ละกรง ลูกสุนัข MS เพศเมียสองตัวที่อยู่ด้วยกันจะได้รับสิทธิ์เข้าถึงอาหารที่น่ารับประทาน (HPF) ฟรี (คุกกี้ Oreo, Kraft Foods Global, Inc. , East Hanover, NJ, USA) โฆษณาฟรี chow จาก PND 28 (กลุ่ม MS + HPF) และส่วนที่เหลือ X pups ตัวเมีย MS ตัวเมีย 2 ในแต่ละครอก (กลุ่ม MS) และ pups NH (กลุ่ม NH) ได้รับ chow มาตรฐานเท่านั้น สูตรองค์ประกอบของสารอาหารของเชาเชามาตรฐานและคุกกี้โอรีโอจะแสดงในตาราง Table1.1. บันทึกการรับประทานอาหารและน้ำหนักที่เพิ่มขึ้นทุกวันจาก PND 29 สำหรับการประเมินการบริโภคอาหารของ 24 ชั่วโมงปริมาณและปริมาณของ chow และคุกกี้ที่ได้รับการจัดเตรียมไว้ล่วงหน้าและในวันถัดไปจำนวนของ chow และคุกกี้ที่เหลือจะถูกชั่งน้ำหนักและหักออกจากค่าที่ให้ไว้ในวันก่อนหน้า การดูแลเป็นพิเศษรวมถึงการรั่วไหล ปริมาณแคลอรี่ถูกคำนวณตามสูตรองค์ประกอบทางโภชนาการของเชาเชาและคุกกี้ จำนวนรวมของอาหารที่ใช้โดยลูกในแต่ละกรงจะถูกหารด้วยจำนวนลูกในแต่ละกรงและแต่ละค่าที่คำนวณได้จะถูกพิจารณาเป็น n = 1 ทุกกลุ่มการทดลองสามารถใช้ได้น้ำได้อย่างอิสระและสภาพอาหารยังคงดำเนินต่อไปตลอดระยะเวลาการทดลองทั้งหมด แผนผังไดอะแกรมของโปรโตคอลการทดลองมีให้ในรูปที่ Figure11.
กิจกรรมผู้ป่วยนอก
ตัวเมีย NH, MS และ MS + HPF (n = 8 จาก 4 สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่แตกต่างกันในแต่ละกลุ่มลูกสุนัข 24 ทั้งหมดจากลูกครอก 8 ที่แตกต่างกัน) ถูกทดสอบโดยผู้ป่วยนอกใน PND 54 ในการทดลองแต่ละครั้งหนูถูกวางไว้ที่กึ่งกลางของห้องกิจกรรม (ความยาว 43.2 ซม., ความกว้าง 42.2 ซม. และความสูง 30.5 ซม., MED Associates, VT, USA), ห้องอะคริลิกโปร่งใสที่มีสองระนาบแนวนอน 16 เครื่องตรวจจับโฟโตเซลล์ตรวจจับโฟโตคู่วางใน x, y มิติที่เว้นระยะห่าง 2.5 ซม. และกิจกรรมผู้ป่วยนอกได้รับการตรวจสอบโดยระบบคอมพิวเตอร์เป็นเวลา 30 นาที สภาพแสงของห้องทดสอบนั้นได้รับการบำรุงรักษาที่ความเข้มเดียวกันกับห้องสัตว์ภายใต้สภาพแสงกลางวัน กิจกรรมผู้ป่วยนอกถูกวัดเป็นจำนวนรวมของการหยุดชะงักของลำแสงในเซ็นเซอร์แนวนอนในระหว่างช่วง 5 นาทีแต่ละเซสชันติดต่อกัน กิจกรรมถ่ายอุจจาระน้ำหนักของอุจจาระ boli ในระหว่างการทดสอบความทะเยอทะยานของหนูแต่ละคนก็ทำคะแนนเช่นกัน กิจกรรมกรูมมิ่งถูกวิเคราะห์เพิ่มเติม; กล่าวคือการแต่งกายด้วยมือและศีรษะนั้นถือเป็นการแต่งกายด้วยมือและร่างกายขาและหาง / การแต่งขนบริเวณอวัยวะเพศเป็นการแต่งกายแบบหางปลา 36. ห้องกิจกรรมได้รับการทำความสะอาดด้วยเอทานอล 70% หลังการใช้งานแต่ละครั้งเพื่อกำจัดสัญญาณการดมกลิ่นใด ๆ ของหนูทดสอบก่อนหน้านี้
ยกระดับเขาวงกตพลัส
สองวันหลังจากการทดสอบกิจกรรมผู้ป่วยนอก (PND 56) หนูจะได้รับการประเมินพฤติกรรมในเขาวงกตบวกยกระดับเขาวงกต acryl ที่มีรูปร่างบวกกับแขนเปิดสองข้างที่มีความยาว (50 ซม. และความกว้าง 10 ซม.) แขน (ความยาว 50 ซม., ความกว้าง 10 ซม. และความสูง 31 ซม.), ยื่นออกมาจากแพลตฟอร์มกลาง (10 ซม. x 10 ซม.) เครื่องมือทั้งหมดถูกยกระดับขึ้น 50 ซม. เหนือพื้น ขั้นตอนการทดสอบตามมาอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ 37. หนูแต่ละตัวถูกวางไว้ที่กึ่งกลางของเขาวงกตซึ่งหันหน้าไปทางแขนข้างหนึ่งเปิดแล้วอนุญาตให้สำรวจแขนที่เปิดหรือปิดของเขาวงกตเป็นเวลา 5 นาที เวลาที่ใช้ในแขนที่แตกต่างกันถูกบันทึกไว้ สี่อุ้งเท้าจะต้องอยู่ในแถวทางเข้าแขนแต่ละข้างซึ่งส่งสัญญาณการเริ่มต้นของเวลาที่ใช้ในแขนเฉพาะและจากนั้นจะบันทึกเวลาสิ้นสุดเมื่อทั้งสี่อุ้งเท้าอยู่นอกแถวอีกครั้ง เขาวงกตถูกทำความสะอาดด้วยเอทานอล 70% หลังจากการทดสอบแต่ละครั้งเพื่อป้องกันอิทธิพลของหนูที่ผ่านการทดสอบก่อนหน้านี้
การทดสอบว่ายน้ำบังคับ
สามวันหลังจากการทดสอบเขาวงกตบวก (PND 59) หนูถูกทดสอบว่ายน้ำแบบบังคับตามวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ 38. หนูแต่ละตัวได้รับอนุญาตให้ว่ายน้ำในกระบอกแก้ว (ความสูง 54 ซม. และเส้นผ่านศูนย์กลาง 24 ซม.) ที่เต็มไปด้วยน้ำในความลึก 40 ซม. (23-25 ℃) เป็นเวลา 5 นาทีและการทดสอบจะบันทึกโดยกล้องวิดีโอจาก ด้านข้างของกระบอกสูบ ระยะเวลาที่หนูไม่สามารถเคลื่อนไหวได้ในน้ำได้คะแนนจากวิดีโอเทปโดยใช้นาฬิกาจับเวลา การเคลื่อนที่ไม่ได้ถูกกำหนดให้เป็นสถานะที่หนูถูกตัดสินว่าทำการเคลื่อนไหวเฉพาะที่จำเป็นเพื่อให้ศีรษะอยู่เหนือผิวน้ำ
หนูถูกวางไว้ในห้องทดสอบอย่างน้อย 2 ชั่วโมงก่อนการทดสอบแต่ละครั้งเพื่อลดผลกระทบจากความเครียดที่ไม่พึงประสงค์และทำการประเมินพฤติกรรมทั้งหมดระหว่าง 9: 00 AM และ 12: 00 PM ของวันเพื่อหลีกเลี่ยงอิทธิพลของความแปรปรวนในกระแสเลือด การให้คะแนนพฤติกรรมทำโดยผู้สังเกตการณ์ตาบอดในการรักษาหนู
พลาสมา corticosterone ทดสอบ
หนึ่งสัปดาห์หลังจากสิ้นสุดการฝึกพฤติกรรมหนูถูกขังไว้ในกล่องควบคุมเป็นเวลา 2 ชั่วโมงซึ่งหนูสามารถขยับแขนขาทั้งสี่ข้างได้ แต่ไม่เปลี่ยนการวางแนวของร่างกาย เลือดหางถูกรวบรวมที่ 0, 30, 60 และ 120 นาทีในช่วงเวลาที่ จำกัด และหมุนเหวี่ยงที่ 2,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที ตัวอย่างพลาสมาถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและเก็บไว้ที่ - 80 ° C จนกว่าจะนำไปใช้ในการทดสอบ ระดับคอร์ติโคสเตอโรนในพลาสมาถูกกำหนดโดยการใช้ radioimmunoassay 125ชุด Coat-A-Count ที่มีป้ายกำกับ (Siemens, CA, USA) ความไวของการทดสอบคือ 5.7ng / ml สัมประสิทธิ์ความแปรปรวนของการตรวจภายในคือ 4-12.2%
การวิเคราะห์แบบ Western blot
หนูที่ไร้เดียงสาจากการทดสอบพฤติกรรม (n = 6 จาก 3 ลูกครอกที่แตกต่างกันในแต่ละกลุ่มรวม 18 ลูกจาก 6 ลูกครอกที่แตกต่างกัน) ถูกสังเวยใน PND 62 สำหรับการวิเคราะห์ blot ตะวันตกของระดับΔFosBและ BDNF ในบริเวณสมอง แผ่นไขมัน Retroperitoneal ถูกรวบรวมในช่วงเวลาของการเสียสละและสมองจะถูกลบออกทันทีหลังจากการตัดหัว ตัวอย่างเนื้อเยื่อของนิวเคลียสแอคคัมเบน (NAc) และฮิปโปแคมปัสถูกชำแหละอย่างรวดเร็วบนน้ำแข็งแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและเก็บไว้ที่ - 80 ° C จนกว่าจะนำไปใช้ การผ่าเนื้อเยื่อ NAc ดำเนินการโดยใช้ใบมีดละเอียดตามวิธีการที่ใช้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ของเรา 28, 39; อย่างไรก็ตามการรวมเป็นไปได้ของ striatum ventro-medial ที่อยู่ใกล้เคียงไม่สามารถหลีกเลี่ยงได้ เนื้อเยื่อถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันใน lysis buffer เดียว (50 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCl; 1% Triton X-100, โปรติเอสและ phosphatase ค็อกเทล 0.5%)oค. สารเหนือตะกอนที่ถ่ายโอนไปยังท่อใหม่ได้รับการตรวจวัดปริมาณโปรตีนโดยใช้ชุดทดสอบโปรตีน (Biorad DC, Biorad, Inc. , Hercules, CA) โดยแยกส่วนที่ความเข้มข้น 80 μg / 20 μlใน lysis buffer และเก็บไว้ที่ - 80 ° C มิฉะนั้นจะใช้ในวันเดียวกัน ตัวอย่างถูกผสมกับโหลดบัฟเฟอร์ (Tris 100 mM, pH 6.8; 200 mM dithiothreitol; 4% SDS; กลีเซอรอล 20%; โบรโมฟีนอลสีน้ำเงิน 0.2%) ที่เจือจาง 1: 1 ต้มเป็นเวลา 5 นาทีแช่เย็นบนน้ำแข็งอย่างรวดเร็วจากนั้น electrophorazed ใน 12% SDS-polyacrylamide Tris-glycine gels โปรตีนที่ถ่ายโอนไปยังเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลส (Hybond-C, Amersham, Bucks, UK) ได้รับการบำบัดด้วยนมแห้งที่ไม่มีไขมัน 5% ในน้ำเกลือ 1X Tris-buffered-Tween (10 mM C4H11NO3; 0.145 M NaCl; 0.2% SDS; 0.1% Tween 20) ข้ามคืนที่ 40C. เมมเบรนทำปฏิกิริยากับกระต่ายโพลีโคลนแอนตี้ ∆FosB (เจือจาง 1: 1000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) หรือ anti-BDNF (1: 500 dilution; Millipore, Temecula, CA, USA) และ ตรวจพบแอนติบอดีที่ถูกผูกไว้ด้วย chemiluminescence ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (พื้นผิวที่มีแสง Lumi-light western blotting; Roche, Indianapolis, IN, USA) และวัดปริมาณโดยใช้ระบบวิเคราะห์ภาพดิจิทัล (LAS-1000, Fuji film, Tokyo, Japan) ค่าดิจิทัลของแต่ละตัวอย่างถูกทำให้เป็นมาตรฐานของตัวควบคุมการโหลดβ-actin จากนั้นค่าทั้งหมดจะถูกแปลงเป็นค่าสัมพัทธ์เป็นค่าเฉลี่ยของกลุ่ม NH
การวิเคราะห์ทางสถิติ
วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้หนึ่งหรือสองทาง [ข้อมูล corticosterone; การรักษา (การจัดการหรือสภาพอาหารระดับ 2 แต่ละครั้ง) X เวลา (ระดับ 4)] การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) และการเปรียบเทียบแบบวางแผนล่วงหน้าระหว่างกลุ่มดำเนินการโดย โพสต์เฉพาะกิจ การทดสอบ PLSD ของ Fisher เมื่อจำเป็นโดยใช้ซอฟต์แวร์ StatView (Abacus, Berkeley, CA, USA) ข้อมูลน้ำหนักตัวและการบริโภคอาหารได้รับการวิเคราะห์เพิ่มเติมโดยใช้มาตรการ ANOVA ซ้ำตามด้วยการแก้ไข Bonferroni สำหรับ P การปรับค่า ระดับความสำคัญถูกกำหนดไว้ที่ P <0.05 และค่าทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM
ผลสอบ
การรับประทานอาหารและน้ำหนักตัวเพิ่มขึ้น
ตัวเมีย MS ดูเหมือนจะเบากว่าตัวเมียที่จับคู่อายุ NH จนกระทั่ง PND 39 และไม่พบความแตกต่างของน้ำหนักหลังจากนั้น (Figure2A) .2A) ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) ระหว่าง NH และ MS เพศหญิงพบในช่วง ภ.ง.ด. 32-39 ยกเว้น ภ.ง.ด. 36 และ 37 การเข้าถึงอาหารที่อร่อยได้ลดความแตกต่างของน้ำหนักจากประสบการณ์ MS และความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติระหว่าง NH และ MS + HPF หายไปหลังจากภงด 36 ซ้ำ การวัด ANOVA พบว่าน้ำหนักตัวที่เพิ่มขึ้นเมื่อเวลาผ่านไปนั้นแตกต่างกันระหว่าง MS และ MS + HPF [F(1,780) = 2.146; P= 0.0008] แต่ไม่ใช่ระหว่าง NH และ MS ปริมาณการรับอาหารประจำวันของเพศเมีย MS ไม่แตกต่างจากเพศหญิงที่จับคู่อายุ NH (รูปที่ (Figure2B) .2B). การเข้าถึงคุกกี้ระงับการบริโภคอาหาร MS ในแต่ละวัน แต่ปริมาณแคลอรี่ต่อวันมีแนวโน้มที่จะเพิ่มขึ้นจากการเข้าถึงคุกกี้โดยไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ การวิเคราะห์ปริมาณแคลอรี่ด้วยการวัดซ้ำ ANOVA พบว่าไม่มีผลกระทบจากการแยกตัวของมารดาและสภาพอาหาร ปริมาณแคลอรี่ทั้งหมดในช่วงการทดลองทั้งหมด (ภ.ง.ด. 28 - 62) ไม่แตกต่างกันระหว่างกลุ่มทดลอง (รูปที่ (Figure2C) .2C) ประมาณ 40% ของแคลอรี่ทั้งหมดที่ใช้โดย MS + HPF ตัวเมียมาจากคุกกี้ (3259.921 ± 211.657 kcal จาก chow, 2184.641 ± 186.077 kcal จากคุกกี้) retroperitoneal fat pad ของ MS female ใน PND 62 ไม่แตกต่างจากเพศหญิง NH ที่จับคู่อายุและมีแนวโน้มที่จะเพิ่มขึ้นด้วยการเข้าถึงคุกกี้โดยไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ (P= 0.0833, MS เทียบกับ MS + HPF) (รูปที่ (Figure22D)
การประเมินพฤติกรรม
กิจกรรมผู้ป่วยนอกของสตรี NH, MS และ MS + HPF ถูกวัดในห้องกิจกรรมคอมพิวเตอร์บน PND 54 จำนวนผู้ป่วยนอกของ MS หญิงในช่วงแรก (0 - 15 นาที) และเซสชั่นต่อมา (15 - 30 นาที) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบ กับผู้หญิง NH; อย่างไรก็ตามการลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05) เทียบกับ NH พบเฉพาะในช่วงเซสชั่นต่อมาในกลุ่ม MS + HPF (รูปที่ (Figure3A) .3A) ระยะทางทั้งหมดที่เดินทางในช่วง 15 ขั้นต่ำครั้งแรกลดลงอย่างมากใน MS (P<0.05) แต่ไม่อยู่ใน MS + HPF เมื่อเทียบกับ NH (รูปที่ (Figure3B) .3B) พฤติกรรมการแต่งตัวและการถ่ายอุจจาระได้คะแนนในระหว่างการทดสอบกิจกรรมผู้ป่วยนอก (รูปที่ (Figure3C3C & D) ประสบการณ์ MS เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญการกรูมมิ่ง rostral (P<0.05, NH เทียบกับ MS) ในขณะที่การเข้าถึงคุกกี้ลดลง (P<0.05, MS เทียบกับ MS + HPF) (รูปที่ (Figure3C) .3C) กิจกรรมการถ่ายอุจจาระของ MS female มีแนวโน้มที่จะเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับ NH โดยไม่มีนัยสำคัญทางสถิติและการเข้าถึงคุกกี้ลดลงอย่างมาก (P<0.05, MS เทียบกับ MS + HPF) (รูปที่ (Figure33D)
เพื่อประเมินพฤติกรรมที่คล้ายกับความวิตกกังวลมากขึ้นหนูจะถูกทดสอบ 2 วันหลังจากการทดสอบผู้ป่วยนอก (PND 56) เวลาที่ใช้ในการเปิดแขนลดลงอย่างมากในเพศหญิง MSP <0.05) แต่ไม่อยู่ใน MS + HPF เมื่อเทียบกับ NH (รูปที่ (Figure4A) .4A) เปอร์เซ็นต์การเปิดแขนเปิดไม่แตกต่างกันในกลุ่มทดลอง (รูปที่ (Figure4B) .4B) เพื่อประเมินพฤติกรรมที่คล้ายกับโรคซึมเศร้าหนูถูกทดสอบว่ายน้ำแบบบังคับ 3 วันหลังจากการทดสอบยกระดับบวกเขาวงกต (PND 59) ระยะเวลาไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ในระหว่างการทดสอบว่ายน้ำขั้นต่ำของ 5 เพิ่มขึ้นอย่างมากในเพศหญิง MSP <0.05) เมื่อเทียบกับ NH และคะแนนการไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ของ MS + HPF ตัวเมียไม่แตกต่างจาก NH (รูปที่ (Figure44C)
ระดับ corticosterone ในพลาสมา
หนึ่งสัปดาห์หลังจากการทดสอบการว่ายน้ำหนูได้รับความเครียดจากการยับยั้งและเก็บเลือดที่หางที่ 0, 30, 60 และ 120 คะแนนเวลาต่ำสุดช่วง 2 ชั่วโมงของการยับยั้งพลาสม่าและใช้สำหรับพลาสมา corticosterone assay (Figure5) .5) ระดับ corticosterone พื้นฐาน (จุดเวลา 0) ไม่แตกต่างกันในกลุ่ม; อย่างไรก็ตามการเพิ่มขึ้นของระดับ corticosterone ที่เกิดจากความเครียดนั้นลดลงในผู้หญิง MS มากกว่า NH ที่ 30 และ 60 นาทีเวลาคะแนนหลังจากเริ่มมีความเครียด (P<0.05, NH เทียบกับ MS ในแต่ละจุดเวลา) ระดับคอร์ติโคสเตอโรนในพลาสมาของ MS + HPF ไม่แตกต่างจาก NH ที่ 30 นาทีหลังจากเริ่มเกิดความเครียด แต่ต่ำกว่า NH ที่จุดเวลา 60 นาที (P <0.05; 394.29 ± 38.35 ng / ml ใน NH เทียบกับ 247.48 ± 24.57 ng / ml ใน MS + HPF) การวิเคราะห์ระดับคอร์ติโคสเตอโรนที่เกิดความเครียดด้วย 2-way ANOVA พบผลกระทบหลักของการแยกจากมารดา [F(1,56) = 8.814, P= 0.0045] และเวลา [F(3,56) = 9.335, P<0.0001] และไม่มีผลกระทบต่อสภาพอาหาร ไม่พบปฏิสัมพันธ์ที่มีนัยสำคัญระหว่างการแยกทางของมารดากับเวลาหรือระหว่างสภาพอาหารและเวลา
westernFosB และ BDNF Western blots
Δระดับ FosB และ BDNF ใน NAc ได้รับการตรวจสอบด้วยการวิเคราะห์ blot ตะวันตก (รูปที่ (Figure6) .6) ΔFosBลดลงอย่างมีนัยสำคัญ แต่ BDNF เพิ่มขึ้นใน NAc ของผู้หญิง MS (P <0.05) เทียบกับ NH (รูปที่ (Figure6A6A & B) Δระดับ FosB ใน NAc ของ MS หญิงถูกทำให้เป็นมาตรฐานโดยการเข้าถึงคุกกี้ กล่าวคือไม่มีความแตกต่างระหว่าง NH และ MS + HPF และระดับ BDNF เพิ่มขึ้นอีก (P <0.05, MS เทียบกับ MS + HPF) ระดับ BDNF ในฮิปโปแคมปัสของ MS ตัวเมียลดลงอย่างเห็นได้ชัดเมื่อเทียบกับ NH (P <0.05) และไม่ได้รับการกู้คืนโดยการเข้าถึงคุกกี้ (รูปที่ (Figure66C)
การสนทนา
การเข้าถึงอาหารอร่อยช่วยปรับปรุงพฤติกรรมทางจิตอารมณ์ของ MS เพศหญิง
ในการศึกษานี้คะแนนพฤติกรรมที่แสดงถึงความวิตกกังวลและภาวะซึมเศร้าเช่นกิจกรรมผู้ป่วยนอก, การแต่งกายด้วยมือและการถ่ายอุจจาระในระหว่างการทดสอบกิจกรรม แขนที่เปิดอยู่ในระหว่างการทดสอบบวกเขาวงกต; การเคลื่อนไหวที่ไม่สามารถขยับได้ในระหว่างการทดสอบว่ายน้ำแบบบังคับนั้นได้รับการปรับปรุงให้ดีขึ้นในผู้หญิง MS โดยสามารถเข้าถึงคุกกี้โอรีโอได้ฟรีในช่วงวัยรุ่นและวัยรุ่น การตอบสนองของคอร์ติโคสเตอโรนต่อความเครียดเฉียบพลันถูกทื่อในเพศหญิง MS ตามรายงานในเพศชายของ MS 14. การตอบสนองของคอร์ติโคสเตอโรนทื่อดูเหมือนจะเป็นผลมาจากประสบการณ์ของ MS; นั่นคือประสบการณ์ของความเครียดซ้ำ ๆ เนื่องจากแกน HPA ตอบสนองต่อความท้าทายความเครียดเฉียบพลันดูเหมือนจะทู่หลังจากประสบการณ์ความเครียดซ้ำเรื้อรัง 40, 41. การศึกษาชี้ให้เห็นว่าการได้รับอาหารที่มีไขมันสูงเป็นที่ต้องการสูงสามารถปรับเปลี่ยนกิจกรรมของแกนเอชพีเอและการตอบสนองต่อมไร้ท่อต่อความเครียดเฉียบพลัน 9ปรับปรุงการตอบสนองความเครียด 17, 19 และลดพฤติกรรมที่คล้ายความวิตกกังวล 18, 20. นอกจากนี้การเข้าถึงคุกกี้โอรีโอฟรี (~ ปริมาณไขมัน 21%; อาหารที่มีไขมันปานกลาง) ระหว่างวัยรุ่นและวัยรุ่นทำให้ปกติการทำงานของแกน HPA ทื่อและปรับปรุงพฤติกรรมคล้ายความวิตกกังวลในหนูหนู MS 14. นั่นคือมีโอกาสที่การเข้าถึงคุกกี้ของวัยรุ่นอาจปรับปรุงฟังก์ชันแกน HPA แบบทื่อโดยประสบการณ์ MS, ความเครียดซ้ำ ๆ ในช่วงต้นชีวิตและแก้ไขความยากลำบากของพฤติกรรมได้ดีขึ้น อย่างไรก็ตามในการศึกษานี้การเข้าถึงคุกกี้ในช่วงวัยรุ่นและเยาวชนไม่ได้ปรับปรุงกิจกรรมแกน HPA ที่ตอบสนองต่อความเครียดเฉียบพลันในหนูหนูเพศเมีย มันบอกว่าประสิทธิภาพ Anxiolytic และ / หรือยากล่อมประสาทของการเข้าถึงคุกกี้วัยรุ่นในหนูหนู MS หญิงอาจไม่เกี่ยวข้องกับฟังก์ชั่นแกน HPA แม้ว่ามันจะอยู่ในหนูหนู MS หนูเพศผู้และเพศเมียมีความแตกต่างกันในพารามิเตอร์ทางระบบประสาทและพฤติกรรมและความอ่อนแอต่อความเครียดนั้นขึ้นอยู่กับเพศสภาพ 42, 43. การศึกษาก่อนหน้านี้รายงานว่าการทานอาหารที่มีไขมันระดับปานกลาง 7 วันนำไปสู่การปลดปล่อยคอร์ติโคสเตอโรนแบบโอ้อวดที่เป็นเพศชายซึ่งคัดเลือกโดยเพศชายหลังจากเกิดความเครียดรุนแรง 6.
การเข้าถึงอาหารอร่อยและการทำงานของเซลล์ประสาทในหนูของหนูเพศเมีย
การศึกษาปัจจุบันแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของΔFosBลดลงและ BDNF เพิ่มขึ้นใน NAc ของหนูเพศเมียโดยประสบการณ์ของ MS มีรายงานว่าความเครียดทางจิตใจหรือเมตาบอลิซึมเพิ่มการแสดงออกของΔFosBใน NAc 44-46. การศึกษาได้แนะนำว่าปัจจัยการถอดความΔFosBเกี่ยวข้องกับการแสดงออกของ BDNF ในเซลล์ประสาท NAc 32, 47-49. เมื่อนำมารวมกันเราแนะนำว่าการลดลงของΔFosBและการแสดงออกของ BDNF ที่เพิ่มขึ้นใน NAc อาจเป็นผลมาจากความเครียดของ MS ในระยะยาวในระยะเริ่มแรกของชีวิต ฟังก์ชั่นเซลล์ประสาท NAc ได้รับการแนะนำให้ปรับโดยกระบวนทัศน์ความเครียดของพฤติกรรม 24, 25 และความผิดปกติของมันมีส่วนเกี่ยวข้องในภาวะซึมเศร้าและความผิดปกติของความวิตกกังวล 22, 23, 26, 27. แท้จริงแล้วสัญญาณ BDNF ที่เพิ่มขึ้นใน NAc นั้นได้รับการรายงานในแบบจำลองความเครียดที่เกิดจากภาวะซึมเศร้า 50-52และอาการซึมเศร้าที่เกิดจากความเครียดถูกทื่อในหนูที่แสดงออกเกินΔFosBใน striatum 53. ดังนั้นจึงมีความเป็นไปได้ที่พฤติกรรมซึมเศร้าและ / หรือความวิตกกังวลของหนูเพศเมียอาจสัมพันธ์กับΔFosBที่ลดลงและการแสดงออกของ BDNF ที่เพิ่มขึ้นใน NAc
ในการศึกษานี้การเข้าถึงคุกกี้ในช่วงวัยรุ่นเพิ่มการแสดงออกของΔFosBและ BDNF ในหนูหนูเพศเมีย MS ผลลัพธ์นี้สอดคล้องกับรายงานก่อนหน้านี้ที่แสดงให้เห็นว่าการได้รับอาหารที่น่ากินทำให้ระดับΔFosBใน NAc เพิ่มขึ้น 31และอาหารที่มีไขมันสูงนั้นเพิ่มระดับ BDNF ใน NAc ของΔFosBหนูที่แสดงออกมากเกินไป 32. เมื่อพิจารณาจากรายงานก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ osFosB ที่เพิ่มขึ้นใน striatum ทำให้เกิดความยืดหยุ่นต่อความเครียดที่เกิดจากความเครียด 53ก็สรุปได้ว่าเพิ่มขึ้นΔFosBใน NAc ของ MS หญิงของเราด้วยการเข้าถึงคุกกี้; เช่นปรับมาตรฐานให้อยู่ในระดับพื้นฐานอาจมีส่วนร่วมในการลดประสิทธิภาพของยาแก้ซึมเศร้าและ / หรือ Anxiolytic ของการเข้าถึงคุกกี้ของวัยรุ่น อย่างไรก็ตามยังไม่ชัดเจนหากระดับ BDNF ที่เพิ่มขึ้นใน NAc ของ MS เพศหญิงที่มีการเข้าถึงคุกกี้นั้นเกี่ยวข้องกับอาการซึมเศร้าและ Anxiolytic ของมันเนื่องจากการเพิ่มขึ้นของสัญญาณ BDNF ใน NAc นั้นส่วนใหญ่อยู่ในแบบจำลองอาการซึมเศร้า 50-52แต่ไม่ค่อยมีในรุ่นยากล่อมประสาท การศึกษาเพิ่มเติมจะรับประกัน
ผลของ MS และ HPF ต่อระดับ BDNF hippocampal
ระดับ BDNF ที่ลดลงในฮิบโปได้รับรายงานทั้งในหนูตัวผู้และตัวเมียที่อยู่ภายใต้โปรโตคอล MS ที่คล้ายกันที่ใช้ในการศึกษานี้ 54, 55. ในขณะเดียวกันระดับ BDNF ลดลงในฮิบโปของหนูเพศเมีย MS ของเราเมื่อเทียบกับการควบคุม NH ในการศึกษานี้ neurogenesis Hippocampal มีส่วนเกี่ยวข้องในอาการของความวิตกกังวลและภาวะซึมเศร้า 56, 57และฮิบโปแคมปัสเป็นที่รู้จักกันดีว่ามีส่วนร่วมในการควบคุมความคิดเห็นของกิจกรรมแกน HPA จำได้ว่ากิจกรรม HPA ถูกเปิดเผยในเพศหญิง MS ของเรามีแนวโน้มที่ระดับ BDNF ที่ลดลงในฮิบโปแคมป์อาจมีส่วนเกี่ยวข้องกับความวิตกกังวลและ / หรือความผิดปกติของภาวะซึมเศร้าโดยประสบการณ์ MS อาจเกี่ยวข้องกับกิจกรรมแกน HPA ทื่อ ความสัมพันธ์ระหว่างระดับ hippocampal BDNF และกิจกรรมแกน HPA ในเพศหญิง MS ของเราได้รับการสนับสนุนเพิ่มเติมจากข้อเท็จจริงที่ว่าการเข้าถึงคุกกี้ไม่ได้ปรับปรุงทั้งสองอย่างในการศึกษานี้ การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าการบริโภคอาหารไขมันสูงเป็นเวลานาน (32% ไขมัน) เพิ่มการแสดงออกของ BDNF ในฮิบโปคัสตัสของหนูเพศผู้ MS ที่อยู่ภายใต้โปรโตคอล MS ที่คล้ายกันที่ใช้ในการศึกษานี้ 58. ผลของการเข้าถึงคุกกี้ในช่วงวัยรุ่น (~ 21% ไขมัน) ต่อระดับ BDNF ของ hippocampal ของหนูเพศผู้ MS อยู่ในระหว่างการสอบสวน
ผลทางพฤติกรรมของปริมาณไขมัน / น้ำตาลในคุกกี้โอรีโอ
ในการศึกษาครั้งนี้การเข้าถึงคุกกี้โอรีโอฟรีช่วยปรับปรุงความทุกข์ยากทางด้านจิตใจในหนูตัวเมียที่มีประสบการณ์เครียดตั้งแต่อายุยังน้อย คุกกี้โอรีโอเป็นคุกกี้ช็อคโกแลตไม่เพียง แต่มีไขมันสูง แต่ยังมีน้ำตาลสูงดังแสดงในตาราง Table1.1. ในการศึกษาของมนุษย์การกินช็อกโกแลตลดอารมณ์เชิงลบเมื่อเปรียบเทียบกับน้ำดื่มในขณะที่ไม่พบผลกระทบใด ๆ ต่ออารมณ์ที่เป็นกลางและบวก 59. และอารมณ์ของช็อคโกแลตที่ดีขึ้นนั้นขึ้นอยู่กับความอร่อยของช็อกโกแลต (ช็อกโกแลตนมกับช็อกโกแลตธรรมดา) ซึ่งบ่งบอกว่าการกินอาหารหวานอร่อยช่วยเพิ่มอารมณ์เชิงลบที่เกิดจากการทดลอง มีรายงานว่าความอยากทานซูโครสเพิ่มขึ้นในสัตว์ที่มีความเครียดต่ำและมีความอยากทานช็อกโกแลตนมเพิ่มขึ้นโดยเฉพาะในเรื่องที่มีอารมณ์หดหู่ 60. ตัวเลือกซูโครสฟรีและ / หรือน้ำมันหมูนอกจากนี้ยังมีการปรับการตอบสนองของแกนความเครียดต่อความเครียดแบบเฉียบพลัน 61. นอกจากนี้การได้รับอาหารไขมันระดับปานกลางในระยะสั้น (น้ำมันข้าวโพด 20% ปริมาณไขมันที่คล้ายกันกับคุกกี้โอรีโอ) ทำให้เกิด neuroendocrine และการปรับเปลี่ยนพฤติกรรมในลักษณะที่เสื่อมถอยทางเพศ 4-6. เมื่อนำมารวมกันก็สรุปได้ว่าปริมาณน้ำตาลและไขมันของคุกกี้โอรีโออาจมีส่วนช่วยในการปรับปรุงความก้าวหน้าทางประสาทและพฤติกรรมในผู้หญิง MS การศึกษาเพิ่มเติมได้รับการรับประกันเพื่อตรวจสอบว่าปริมาณไขมันหรือน้ำตาลในปริมาณเดียวกันกับการเข้าถึงคุกกี้ของ Oreo หรือไม่จะทำให้เกิดการปรับปรุงที่คล้ายกันในผู้หญิง MS ที่พบในการศึกษานี้
สุดท้ายคลังเก็บไขมัน retroperitoneal มีแนวโน้มที่จะเพิ่มขึ้นในเพศหญิง MS โดยการเข้าถึงคุกกี้ในการศึกษานี้ นอกจากผลของการมอดูเลตต่อฟังก์ชั่นแกนความเครียดแล้วการเข้าถึงอาหารอร่อยเพิ่มระดับ leptin และอินซูลินที่ไหลเวียนอย่างเด่นชัดพร้อมด้วยคลังไขมันที่เพิ่มขึ้น 15, 61. แนะนำให้ใช้ทั้ง leptin และ insulin ในการออกกฎระเบียบในระบบการให้รางวัล meso-limbic โดยเฉพาะอย่างยิ่งการเพิ่มขึ้นของอินซูลินในการแสดงออกของโดปามีนในบริเวณหน้าท้อง 62, 63. ดังที่อธิบายไว้ข้างต้นระบบการให้รางวัล meso-limbic นั้นมีส่วนเกี่ยวข้องอย่างมากในความผิดปกติทางจิตและอารมณ์ซึ่งสัมพันธ์กับการทำงานของแกนความเครียด 22-27. ดังนั้นการปรับสัญญาณเบื้องต้นถ้ามีในระบบการให้รางวัล meso-limbic โดยการเพิ่ม leptin และ / หรืออินซูลินที่เพิ่มขึ้นกับคลังไขมันที่เพิ่มขึ้นจะแนะนำให้มีบทบาทในการยกระดับอารมณ์โดยการเข้าถึงอาหารอร่อย แท้จริงแล้วการบริโภคอาหารไขมันสูงเป็นระยะเวลานาน (ปริมาณไขมัน 32%) ลดพฤติกรรมคล้ายความวิตกกังวลและเพิ่มระดับ leptin ในพลาสมาและอินซูลินที่เพิ่มขึ้นพร้อมกับเพิ่มคลังไขมันในหนูเพศเมียที่ใช้โปรโตคอล MS ที่คล้ายกัน 11. อย่างไรก็ตามยังไม่ชัดเจนว่าการปรับปรุงพฤติกรรมที่พบใน MS หญิงของเราด้วยการเข้าถึงคุกกี้หรือไม่ (อาหารไขมันปานกลางที่มีปริมาณไขมัน ~ 21%) มีความเกี่ยวข้องกับคลังไขมันที่เพิ่มขึ้นเนื่องจากการเพิ่มขึ้นของคลังไขมัน retroperitoneal โดยการเข้าถึงคุกกี้ ไม่ถึงสถิติที่มีนัยสำคัญและยิ่งไปกว่านั้นไม่ได้วัด leptin หรือ insulin ที่หมุนเวียนในการศึกษาปัจจุบัน
โดยสรุปความผิดปกติในแกน HPA, เซลล์ประสาท NAc และฮิบโปดูเหมือนจะมีส่วนเกี่ยวข้องในความทุกข์ยากทางจิตใจของหนูเพศเมีย MS หญิงจากประสบการณ์ของการแยกมารดาในช่วงสองสัปดาห์แรกของการเกิด การเข้าถึงอาหารที่มีความน่ากินสูงอาหารที่มีไขมันปานกลางในช่วงวัยรุ่นและวัยรุ่นทำให้เกิดพฤติกรรมวิตกกังวลและซึมเศร้าในผู้หญิง MS โดยไม่มีผลต่อการเพิ่มน้ำหนักของร่างกายและการปรับการทำงานในเซลล์ประสาท NAc อาจมีบทบาทในกลไกประสาท
กิตติกรรมประกาศ
ผู้เขียนขอขอบคุณดร. SB Yoo สำหรับความช่วยเหลือในการวิเคราะห์ทางสถิติและดร. JY Lee ด้วยเทคนิคการทดลอง การศึกษานี้ได้รับการสนับสนุนโดยทุนสนับสนุนจากมูลนิธิวิจัยแห่งชาติ (2013R1A1A3A04-006580) และผ่านศูนย์วิจัยความผิดปกติของ Oromaxillofacial สำหรับผู้สูงอายุที่มหาวิทยาลัยแห่งชาติโซล (2014050477)
อ้างอิง
;
