DeltaFosB в Nucleus Accumbens є критичним для посилення наслідків сексуальної винагороди. (2010)

КОМЕНТАРИ: Delta FosB є маркером для всіх залежностей, як поведінкових, так і хімічних. Оскільки ця молекула збільшується в ланцюзі винагороди, зростає і звикання до поведінки. Це одна з молекул, яка бере участь у нейропластичних змінах. Цей експеримент показує, що він збільшується із сексуальним досвідом, подібно до того, як це відбувається при наркоманії. В експерименті вони застосували генну інженерію, щоб підвищити її рівень, що перевищує "нормальний". Це призвело до посилення полегшення статевої активності. Ми вважаємо, що це трапляється із порнозалежністю.

ПОВНА ВИВЧЕННЯ

Глечики KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Гени Brain Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 серпня 16.

Кафедра анатомії та клітинної біології, школа медицини і стоматології Шуліха, Університет Західного Онтаріо, Лондон, Онтаріо, Канада.

РЕЗЮМЕ

Сексуальна поведінка у самців щурів є корисним і підсилює. Однак мало відомо про конкретні клітинні і молекулярні механізми, що опосередковують сексуальну винагороду або посилюють вплив винагороди на подальше вираження сексуальної поведінки. Це дослідження перевіряє гіпотезу про те, що ΔFosB, стабільно виражена урізана форма FosB, відіграє важливу роль у зміцненні сексуальної поведінки та стимулює статеву мотивацію та продуктивність.

Показано, що статевий досвід викликає накопичення ΔFosB в кількох лімбічних областях головного мозку, включаючи nucleus accumbens (NAc), медіальну префронтальну кору, вентральну тегментальну область і хвостатий путамен, але не медіальне преоптичне ядро.

Далі, індукцію c-Fos, нижньої (репресованої) мішені ΔFosB, вимірювали у статево досвідчених і наївних тварин. Кількість індукованих спаровуванням c-Fos-імунореактивних клітин була значно знижена у статево досвідчених тварин порівняно з контролем, що не застосовувався статевим шляхом.

Нарешті, рівні ΔFosB та його активність в NAc маніпулювали за допомогою перенесення генів, опосередкованих вірусом, для вивчення його потенційної ролі в опосередкуванні статевого досвіду та стимульованого досвіду. Тварини з надчутливою експресією ΔFosB проявляли посилене полегшення статевої діяльності при сексуальному досвіді відносно контролю. На відміну від цього, експресія ΔJunD, домінуючого негативного зв'язуючого партнера ΔFosB, послаблювала індуковану сексуальним досвідом полегшення статевої діяльності і затримку довготривалого підтримання фасилітації порівняно з зеленим флуоресцентним білком і ΔFosB перенапруженням.

Разом ці висновки підтримують критичну роль для вираження ΔFosB в NAc для посилення ефектів сексуальної поведінки та індукованого сексуального досвіду.

ВСТУП

Сексуальна поведінка є дуже корисним і підсилює для чоловіків гризунів (Coolen et al. 2004; Pfaus та ін, 2001). Крім того, сексуальний досвід змінює наступну сексуальну поведінку та винагороду (Тенк та ін, 2009). При неодноразовому досвіді спарювання статева поведінка полегшується або «посилюється», про що свідчить зменшення затримок для ініціації спарювання та полегшення сексуальної діяльності (Бальфур та ін, 2004; Pfaus та ін, 2001). Однак основні клітинні та молекулярні механізми сексуального нагородження та підкріплення слабо вивчені. Показано, що статева поведінка та обумовлені сигнали, які передбачають спарювання, тимчасово індукують експресію негайного раннього гена c-fos в мезолімбічної системі самців щурів (Бальфур та ін, 2004; Pfaus та ін, 2001). Крім того, нещодавно було продемонстровано, що сексуальний досвід індукує тривалу нейропластичність у мезолімбічній системі самців щурів (Frohmader та ін, 2009; Глечики та ін, 2010). Крім того, у самців щурів статевий досвід, як було показано, індукує ΔFosB, a Член сім'ї Фос, в ядрі accumbens (NAc) (Уоллес та ін, 2008). ΔFosB, укорочений варіант злиття FosB, є унікальним членом сімейства Fos завдяки його більшій стабільності (селюк та ін, 2007; Улері-Рейнольдс та ін, 2008; Ulery та ін, 2006) і відіграє важливу роль у підвищенні мотивації та винагороди за наркотичні засоби та довготривалу нейральну пластичність, що опосередковує залежність (Nestler та ін, 2001). ΔFosB утворює гетеромерний комплекс транскрипційного фактора (активатор білок-1 (AP-1)) з білками Jun, переважно JunD (Chen та ін, 1995; Hiroi та ін, 1998). За допомогою індукованої надмірної експресії ΔFosB, переважно обмеженого стриатумом з використанням бі-трансгенних мишей, фенотип поведінки, подібного до наркотичної залежності, виробляється, незважаючи на відсутність попереднього впливу на лікарський засіб (McClung та ін, 2004). Цей поведінковий фенотип включає сенсибілізований руховий відповідь на кокаїн (Kelz та ін, 1999), збільшення переваги кокаїну (Kelz та ін, 1999) і морфіну (Захаріо та ін, 2006) та посилення самоврядування кокаїну (Колбі та ін, 2003).

Подібно до винагороди за лікарські засоби, ΔFosB регулюється природною корисною поведінкою і опосередковує вираження цієї поведінки. Надмірна експресія ΔFosB в NAc з використанням моделей гризунів підвищує добровільність роботи колеса (Werme та ін, 2002), інструментальна відповідь на їжу (Олаусон та ін, 2006), споживання сахарози (Уоллес та ін, 2008), і полегшує самця (Уоллес та ін, 2008) і жінки (Бредлі та ін, 2005) сексуальна поведінка. Таким чином, ΔFosB може бути залученим до опосередкування ефектів природного корисного досвіду. TНинішнє дослідження розширює попередні дослідження, спеціально досліджуючи роль ΔFosB в NAc в довгострокових результатах сексуального досвіду з подальшого спаровування і нервової активації в мезолімбічної системі.

  • По-перше, було встановлено, які ділянки мозку, залучені до схеми винагороди та сексуальної поведінки, виражають індукований статевим досвідом ΔFosB.
  • Далі, вплив індукованого статевим досвідом osFosB на індуковану спарову експресію c-Fos, цільової репресії ΔFosBRenthal та ін, 2008), був досліджений.
  • Нарешті, вплив маніпулювання активністю ΔFosB в NAc (експресія гена і експресія домінуючого партнера з негативним зв'язуванням) на сексуальну поведінку і спрощення індукції статевої мотивації та продуктивності, обумовлене досвідом, було визначено за допомогою технології доставки вірусних векторів.
Перейти до:

МЕТОДИ

Звірята

У дорослих самців щурів Sprague Dawley (200 – 225 грамів) отримували від Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Тварин розміщували в клітинах з оргскла з тунельною трубкою в парах однієї статі протягом експериментів. Колонійний зал регулювався температурою та підтримувався на світло-темному циклі 12 / 12 hr з наявними продуктами та водою ad libitum окрім під час поведінкового тестування. Самки стимуляторів (210 – 220 грамів) для сеансів спарювання отримали підшкірний імплантат, що містить 5% естрадіол бензоат і 95% холестерину після двосторонньої оваріектомії під глибоким наркозом (0.35g ketamine / 0.052g xylazine). Статеву сприйнятливість індукували введенням прогестерону 500µg в оліях кунжуту 0.1 мл приблизно за 4 годин до тестування. Всі процедури були схвалені Комітетами з догляду за тваринами та Університетом Західного Онтаріо та відповідали інструкціям CCAC, які стосувалися хребетних тварин у дослідженні.

Сексуальне поведінка

Сімейство спаровування відбувалося під час ранньої темної фази (між 2 – 6 годин після настання темного періоду) під затемненим червоним освітленням. Перед початком експерименту тварини були випадковим чином розділені на групи. Під час сеансів спарювання самцям щурів дозволялося копулювати до еякуляції або 1 годину, а параметри сексуальної поведінки були записані, включаючи: латентність монтування (ML; час від введення жінки до першого монтування), затримка втручання (IL; час від введення жіноча до першого монтування з вагінальним проникненням), латентність еякуляції (EL; час від першого вторгнення до еякуляції), інтервал після еякуляції (PEI; час від еякуляції до першого наступного втручання), кількість монтувань (M; проникнення), кількість втручань (IM, гора, включаючи вагінальне проникнення) та ефективність копуляції (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Число монтувань і інтромісій не були включені в аналіз для тварин, які не показали еякуляцію. Латентність монтування та втручання є параметрами, що вказують на сексуальну мотивацію, тоді як затримка еякуляції, кількість підйомів та ефективність копуляції відображають сексуальну продуктивність (Корпус 2002).

Експеримент 1: Вираз ΔFosB

Статевонеактивним щурам-самцям дозволяли спаровуватися в чистих тест-клітинах (60 × 45 × 50 cm) для 5 послідовних, щоденних сеансів спарювання або залишилися сексуальними наївними. Додаткова таблиця 1 окреслює поведінкову парадигму для експериментальних груп: наївний секс (NNS; n = 5), наївний секс (NS; n = 5), досвід не статевий (ENS; n = 5) і досвідчений секс (ES; n = 4). NS та ES тварини були забиті 1 годину після еякуляції в останній день спарювання, щоб дослідити спаровування індукованої c-Fos експресії. NNS тварин забивали одночасно з ENS тваринами 24 годин після остаточного сеансу спарювання для вивчення індукованого статевим досвідом osFosB. Статево досвідчені групи були підібрані для сексуальної поведінки перед подальшим тестуванням. Не було виявлено суттєвих відмінностей між групами за будь-які поведінкові заходи в межах відповідного сеансу спарювання, а індуковане статевим досвідом полегшення сексуальної поведінки було виявлено обома досвідченими групами (Додаткова таблиця 2). Контрольні заходи включали чоловіків-сексуальних підлітків, які обробляли одночасно з шлюбними тваринами, забезпечуючи вплив жіночих запахів і вокалізацій без прямого жіночого контакту.

Для жертвопринесення, тварин глибоко анестезували, використовуючи пентобарбітал натрію (270mg / кг; ip), і перфузировали внутрішньосердечно 50 мл фізіологічного розчину 0.9%, потім 500 мл 4% параформальдегіду в фосфатному буфері 0.1 M (PB). Мозок видаляли і фіксували після 1 h при кімнатній температурі в тому ж фіксаторі, потім занурювали в 20% сахарозу і 0.01% азиду натрію в 0.1 M PB і зберігали при 4 ° C. Корональні зрізи (35 мкм) розрізали заморожуючим мікротомом (H400R, Micron, Germany), зібраним у чотири паралельні серії в розчині кріопротектора (30% сахарози і 30% етиленгліколю в 0.1 M PB) і зберігали при -20 ° C. Вільні плаваючі ділянки промивали щільно фосфатно-сольовим розчином 0.1 M (PBS; рН 7.3 – 7.4) між інкубаціями. Секції піддавалися впливу 1% H2O2 для 10 хв при кімнатній температурі для руйнування ендогенних пероксидаз, потім блокували в PBS + інкубаційному розчині, який є PBS, що містить 0.1% бичачого сироваткового альбуміну (артикул 005-000-121; лабораторії Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) і 0.4% Triton X -100 (пункт каталогу BP151-500; Sigma-Aldrich) для 1 h. Зрізи потім інкубували протягом ночі при 4 ° C в пан-FosB кролячому поліклональному антитілі (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Каліфорнія, США). Антитіло pan-FosB піднімали проти внутрішнього регіону, поділеного FosB і ΔFosB. Клітини ΔFosB-IR були специфічно ΔFosB-позитивними, тому що в пост-стимулюючий час (24 годин) всі FosB, індуковані стимулом, детектуються (Перротті та ін, 2004; Перротті та ін, 2008). Крім того, в цьому експерименті тварин, спаровуються в останній день (NS, ES), забивають 1 h після спарювання, таким чином, до вираження FosB. Вестерн-блот-аналіз підтвердив виявлення ΔFosB приблизно в 37 kD. Після первинної інкубації антитіл зрізи інкубували протягом 1 год у кон'югованому біотином козячому IgG кролика (1: 500 в PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) і потім 1 h в пероксидазі авідін-біотин-хосери (ABC elite) 1: 1K в PBS, Vector Laboratories, Burlingame, CA, США). Наступні інкубаційні секції були оброблені одним з наступних способів:

1. Єдине маркування пероксидази

Розділи тварин NNS і ENS використовували для аналізу мозку при накопиченні ΔFosB, викликаного статевим досвідом. Після інкубації ABC візуалізували пероксидазний комплекс після обробки 10 хвилин до хромогенного розчину, що містить тетрагідрохлорид 0.02% 3,3'-диаминобензидина (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), посилений 0.02% сульфатом нікелю в 0.1 M PB з пероксид водню (0.015%). Зрізи ретельно промивали в 0.1 M PB для припинення реакції і встановлювали на кодовані слайди Superfrost плюс скла (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) з 0.3% желатину в ddH20. Після дегідратації всі слайди накривали з допомогою DPX (ксилол дибутилфталат).

2. Подвійна імунофлуоресценція

Для аналізу ΔFosB і c-Fos використовували зрізи всіх чотирьох експериментальних груп, що містять NAc і mPFC. Після інкубації ABC зрізи інкубували протягом 10 хв з биотинилированним тирамидом (BT; 1: 250 в PBS + 0.003% H).2O2 Комплект ампліфікації сигналу тираміди, NEN Life Sciences, Бостон, Массачусетс) і для 30 хв з амплітудно-кон'югованим стрепавидином (488: 1; лабораторії Jackson Immunoresearch, West Grove, PA). Потім секції інкубували протягом ночі з кролячим поліклональним антитілом, специфічно розпізнаючи c-Fos (100: 1; sc-150; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), з подальшою інкубацією 52 min з козячим анти-кроликом Cy30-кон'югованим вторинним антитілом. (3: 1; лабораторії Jackson Immunoresearch, West Grove, PA, США). Після фарбування зрізи ретельно промивали в 200 M PB, змонтованих на кодованих предметних стеклах з 0.1% желатином в ddH20 і покривають-прослизали водною установочною середовищем (Gelvatol), що містить протизам'ящаючий агент 1,4-діазабіцикло (2,2) октан (DABCO; 50 мг / мл, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Імуногістохімічні контролі включали опущення одного або обох первинних антитіл, що призводило до відсутності мічення у відповідній довжині хвилі.

Аналіз даних

Аналіз мозку ΔFosB

Два експериментатори, сліпі до лікування, провели широке сканування мозку на кодованих слайдах. ΔFosB-імунореактивні (-IR) клітини у всьому мозку були піддані кількісного аналізу з використанням шкали для представлення кількості ΔFosB-позитивних клітин, як зазначено в Таблиця 1. Крім того, на підставі напівкількісних результатів, кількість чисел ΔFosB-IR підраховували, використовуючи стандартні області аналізу в ділянках мозку, що беруть участь у винагороді та сексуальній поведінці, використовуючи трубку для малювання lucida, прикріплену до мікроскопа Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar) , Німеччина): NAc (ядро (C) і оболонка (S); 400 × 600µm) проаналізовано на трьох рострально-каудальних рівнях (Бальфур та ін, 2004); вентральна тегментальна область (VTA; 1000 × 800µm), проаналізована на трьох рострально-каудальних рівнях (Бальфур та ін, 2004) і хвостом VTA (Перротті та ін, 2005); префронтальна кора (область передньої cinglulate (ACA); попередня кора (PL); інфлімбічна кора (IL); 600 × 800µm кожна); хвостатий путамен (CP; 800 × 800µm); і медіальне преоптичне ядро ​​(MPN; 400 × 600 мкм) (Додаткові малюнки 1 – 3). Дві секції підраховували на субрегіон і усереднювали на одну тварину для розрахунку середнього значення групи. Неактивні та досвідчені групові середні показники ΔFosB-IR клітин порівнювали для кожного субрегіону з використанням непарних t-тестів.

Таблиця 1    

Підсумок експресії ΔFosB у статевозрілих та досвідчених тварин
Аналіз ΔFosB і c-Fos

Знімки були зняті за допомогою охолодженої камери CCD (Microfire, Optronics), приєднаної до мікроскопа Leica (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Німеччина) та програмного забезпечення Neurolucida (MicroBrightfield Inc) з фіксованими параметрами камери для всіх предметів (з використанням цілей 10x). Кількість клітин, що експресують c-Fos-IR або ΔFosB-IR в стандартних областях аналізу в NAc ядрі і оболонці (400 × 600µm кожен; Додатковий малюнок 1) і ACA mPFC (600 × 800µm; Додатковий малюнок 3) вручну підраховували спостерігачем, засліпленим для експериментальних груп, в секціях 2 на одну тварину з використанням програмного забезпечення Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) і усереднювали на одну тварину. Групові середні значення клітин c-Fos або ΔFosB порівнювали за допомогою двостороннього ANOVA (фактори: статевий досвід і статева активність) і LSD Фішера для пост-го порівняння на рівні значимості 0.05.

Експеримент 2: маніпуляція виразом ΔFosB

Вірусний векторний перенос гена

Статево наївні чоловічі щури Sprague Dawley були випадковим чином розподілені на групи перед стереотаксичною хірургічною операцією. Всі тварини отримували двосторонні мікроін'єкції рекомбінантних адено-асоційованих вірусних (rAAV) векторів, що кодують GFP (контроль; n = 12), дикого типу ΔFosB (n = 11) або домінантно-негативного зв'язуючого партнера ΔFosB, який називається ΔJunD (n = 9) в NAc. ΔJunD знижує транскрипцію, опосередковується ΔFosB, шляхом конкурентного гетеродимеризации з ΔFosB перед зв'язуванням області AP-1 в межах промоторів гена (Winstanley та ін, 2007). Титр вірусу визначали за допомогою qPCR і оцінювали в природних умовах до початку дослідження. Титр був 1 – 2 × 1011 інфекційні частинки на мл. Вектори rAAV вводили в обсязі 1.5 мкл / сторона протягом 7 хвилин (координати: AP + 1.5, ML +/- 1.2 від Bregma; DV-7.6 з поверхні черепа за Paxinos і Watson, 1998) за допомогою шприца Гамільтона (5µL) Harvard Apparatus, Holliston, MA, США). Вектори не виробляють ніякої токсичності більше, ніж тільки контрольні інфузії (Winstanley et al., 2007; деталі приготування AAV див Hommel et al., 2003). Поведінкові експерименти розпочалися 3 тижнів після ін'єкцій з допомогою векторів, що дозволило отримати оптимальну та стабільну вірусну інфекціюУоллес та ін, 2008). Експресія трансгену в мишачих видах досягає піків у 10 днів і залишається підвищеною протягом принаймні 6 місяців (Winstanley та ін, 2007). Наприкінці експерименту тварини були транскардиально перфузовані і NAc-секції були иммунопреципированними для GFP (1: 20K; кроляче анти-GFP антитіло; Molecular Probes) з використанням реакції ABC-пероксидаза-DAB (як описано вище) на гістологічно перевірити сайти ін'єкцій, використовуючи GFP як маркер (Додатковий малюнок 4). ΔFosB і ΔJunD вектори також містять сегмент, що експресує GFP, розділений внутрішньою ділянкою рибосомного введення, що дозволяє перевірити місце ін'єкції шляхом візуалізації GFP у всіх тварин. Тільки тварини з місцями ін'єкції та розповсюдженням вірусу, обмеженого NAc, були включені до статистичного аналізу. Поширення вірусу, як правило, обмежувалося частиною NAc і не поширювалося рострально-каудально по всьому ядру. Більш того, поширення вірусу виявилося в основному обмеженим або оболонкою, або ядром. Однак зміна місць ін'єкцій та поширення в межах NAc не впливали на вплив на поведінку. Нарешті, ін'єкції GFP не впливали на сексуальну поведінку або індуковане досвідом полегшення сексуальної поведінки в порівнянні з попередніми дослідженнями (не хірургічні тварини) (Бальфур та ін, 2004).

Сексуальне поведінка

Три тижні після доставки вірусного вектора, тварини, спаровані до однієї еякуляції (або за 1 годину) для послідовних сеансів 4, щоденні спарювання, для отримання сексуального досвіду (сеансів досвіду) і були потім перевірені на довгострокове вираження індукованого досвідом полегшення сексуальної поведінки 1 і 2 тижнів (тестові сеанси 1 і 2) після останньої сесії. Параметри сексуальної поведінки записувалися під час всіх сеансів спарювання, як описано вище. Статистичні відмінності для всіх параметрів під час кожного сеансу спарювання порівнювалися в межах і між групами з використанням двосторонніх повторних вимірювань ANOVAs (фактори: сеанс лікування і спарювання) або односторонні ANOVA (латентність еякуляції, кількість опіків і інтромій; фактор: лікування або спаровування). сеансу), за якими слідують Фішер LSD або Ньюман-Кеулс-тести для пост-го порівняння на рівні значимості 0.05. Зокрема, полегшуючий вплив сексуального досвіду на параметри спарювання порівнювали між досвідом 1 (наївною) та досвідом 2, 3 або 4, а також між експериментальними групами протягом кожної сесії. Більш того, для аналізу ефектів лікування (вектора) на довгострокове полегшення сексуальної поведінки, параметри спарювання порівнювали між досвідом сеансу 4 і тестом 1 і 2 в кожній групі лікування і порівнювали між експериментальними групами протягом кожної тестової сесії.

Перейти до:

РЕЗУЛЬТАТИ

Статевий досвід викликає накопичення ΔFosB

Спочатку було проведено напівкількісне дослідження накопичення ΔFosB в усьому мозку у чоловіків, що мають досвід сексуально, у порівнянні з контролем, при якому не було сексуальних засобів. Короткий виклад загальних висновків наведено в Таблиця 1. Аналіз ΔFosB-IR доповнювався визначенням чисел ΔFosB-IR клітин в декількох лімбічно-асоційованих областях мозку з використанням стандартних областей аналізу. малюнок 1 демонструє репрезентативні зображення DAB-Ni, що забарвлює NAc статевозрілих і досвідчених тварин. Значна регуляція ΔFosB була виявлена ​​в субрегіонах mPFC (Малюнок 2A), NAc ядро ​​і оболонка (2B), хвостатий путамен (2B) і VTA (2C). В NAc значні відмінності існували на всіх рострально-каудальних рівнях в ядрі і оболонці NAc, а дані, наведені в малюнок 2 - це середнє значення по всіх ростро-каудальних рівнях. На відміну від цього, не було значного збільшення ΔFosB-IR в гіпоталамічному медіальному преоптичному ядрі (NNS: Avg 1.8 +/− 0.26; ENS: Avg 6.0 +/− 1.86).

малюнок 1    

 

Репрезентативні зображення, що показують ΔFosB-IR клітини (чорні) в NAc непівотної статі (A) і не відчувають жодних статевих (B) груп. aco: передня спайка Масштабна шкала показує 100 µm.
малюнок 2     

Кількість клітин ΔFosB-IR в: A. інфралімбічних (IL), попередніх (PL) і передніх поясних поясах (ACA) субрегіонів медіальної префронтальної кори; Б. Ядро збігається ядро ​​і оболонка, і хвостатий путамен (КП); С. Ростральний, середній, каудальний і хвіст ...

Статевий досвід послаблює індуковану спарою c-Fos

Вплив сексуального досвіду на рівні ΔFosB в NAc підтверджували за допомогою флуоресцентного фарбування. Крім того, були проаналізовані ефекти сексуального досвіду на експресію c-Fos. малюнок 3 демонструє репрезентативні зображення ΔFosB- (зеленого) і c-Fos (червоного) -IR клітин у всіх експериментальних групах (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES). Статевий досвід значно збільшив експресію ΔFosB в ядрі NAc (Малюнок 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) і оболонки (Малюнок 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Навпаки, спаровування 1 за годину до перфузії не впливало на вираз ΔFosB (Фігура 4A, C) і не виявлено взаємодії між статевим досвідом і спаровуванням безпосередньо перед перфузією. Існував загальний ефект спарювання перед перфузією на експресії c-Fos в обох ядрах NAc (Малюнок 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) і оболонка (Малюнок 4D: F1,15 = 39.4; р <0.001). Більше того, загальний ефект сексуального досвіду був виявлений в ядрі NAc (Малюнок 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) і оболонки (Малюнок 4D: F1,15 = 1.7; p = 0.211) і взаємодія між статевим досвідом і спарюванням до перфузії було виявлено в ядрі NAc (F)1,15 = 6.5; p = 0.022), з трендом в оболонці (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Post hoc аналіз продемонстрував індуковане спарову експресію c-Fos в серцевині і оболонці чоловіків, які не були сексуальними.Малюнок 4B, D). Проте у чоловіків, що мають статевий досвід, c-Fos істотно не збільшився в ядрі NAc (Малюнок 4B) і значно ослаблені в оболонці (Малюнок 4D). Таким чином, сексуальний досвід викликав зменшення індукованого спаровуванням вираз c-Fos. P-значення для конкретних парних порівнянь наведені на малюнках.

малюнок 3     

Репрезентативні зображення, що показують ΔFosB (зелений) і c-Fos (червоний) в NAc для кожної експериментальної групи. Масштабна шкала показує 100 µm.
малюнок 4     

Індукований статевим досвідом ΔFosB і індукований спарюванням c-Fos. Числа иммунореактивних клітин ΔFosB (Core, A; Shell, C; ACA, E) або c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) для кожної групи: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) або ES (n = 4). Дані виражені ...

Ефект сексуального досвіду на індукованих спаровуванням рівнях c-Fos не обмежувався NAc. Подібне послаблення експресії c-Fos спостерігалося в АСА у тварин, що мають досвід сексу, у порівнянні з контролем, що не застосовувався статевим шляхом. Статевий досвід значно вплинув на експресію ΔFosB в ACA (Малюнок 4E: F1,15 = 154.2; р <0.001). Спаровування до перфузії не впливало на експресію ΔFosB (Малюнок 4C), але значно збільшили c-Fos (Малюнок 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) в ACA. Більше того, індукована спаровуванням експресія c-Fos в АСА значно зменшилася через сексуальний досвід (Малюнок 4F: F1,15 = 15.8; p = 0.001). Для експресії c-Fos було виявлено двосторонню взаємодію між статевим досвідом і спаровуванням до перфузіїМалюнок 4F: F1,15 = 15.1; р <0.001). Значення P для конкретних порівнянь по парах наведені у легендах малюнка. Нарешті, не відбулося значного зниження експресії c-Fos, спричиненої спарюванням, у медіальному преоптичному ядрі (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), області, де досвід спаровування не спричинив значного збільшення експресії ΔFosB, що вказує на те, що індукована спаровуванням експресія c-Fos не впливала на всі ділянки мозку.

ΔFosB в NAc опосередковує посилення сексуальної поведінки

Для вивчення потенційного молекулярного механізму посилення сексуальної поведінки, продемонстрованого полегшенням статевої поведінки, викликаним досвідом, були визначені ефекти локальних маніпуляцій з рівнями ΔFosB та його транскрипційної активності. Статевий досвід протягом чотирьох послідовних сеансів досвіду значно вплинув на затримку монтування (Малюнок 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), затримка входу (Малюнок 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) та затримка еякуляції (Малюнок 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). Контрольні тварини GFP демонстрували очікуване полегшення сексуальної поведінки, яке було викликане досвідом, і виявили значно менші затримки для першого монтування, першого втручання та еякуляції під час сеансу досвіду 4 порівняно з досвідом 1 (Малюнок 5A – C; див. малюнок легенди для p-значень). Таке полегшення сексуальної поведінки, викликане досвідом, також спостерігалося в групі ΔFosB для латентності монтування та інтромісії, але не було виявлено істотної різниці в латентності еякуляції (Малюнок 5A – C). На відміну від цього, тварини ΔJunD демонстрували затримку у стані росту; незважаючи на те, що затримки для монтування, інтромісій і еякуляцій зменшувалися при повторних сеансах спарювання, жоден з цих параметрів не досягав статистичної значущості при порівнянні між сеансами досвіду 1 і 4 (Малюнок 5A – C). Між груповими порівняннями для кожного сеансу досвіду показують, що ΔJunD мав значно більш тривалі затримки для монтування, інтроміту і еякуляції під час сеансів досвіду порівняно з ΔFosB і GFP (Малюнок 5A – C). Крім того, як сексуальний досвід, так і лікування мали значний вплив на ефективність копуляції (Малюнок 5F: сексуальний досвід, F1,12 = 22.5; р <0.001; лікування, F1,12 = 3.3; p = 0.049). Чоловіки ΔFosB мали підвищену ефективність копуляції під час сеансу досвіду 4 у порівнянні з досвідом 1 (Малюнок 5F). Крім того, тварини ΔFosB мали значно менше монтувань, що передували еякуляції під час досвіду 4, порівняно з досвідом 1 (Малюнок 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004), і що самці ΔJunD мали значно більшу кількість попередніх еякуляцій, що значно знизило ефективність копуляції, ніж будь-яка з двох інших груп (Малюнок 5D і F). Таким чином, тварини GFP і ΔFosB виявляли спричинені досвідом полегшення ініціації сексуальної поведінки і сексуальної діяльності, тоді як ΔJunD тварини цього не робили.

малюнок 5     

Статева поведінка тварин GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) та ΔJunD (n = 9): латентність монтування (A), затримка інтромісії (B), затримка еякуляції (C), кількість монтувань (D), кількість інтромісій (Е) і ефективність копуляції (F). Дані виражені ...

Для перевірки гіпотези, що експресія ΔFosB є критичною для довгострокового вираження індукованої досвідом фасилітації сексуальної поведінки, тварин тестували 1 тиждень (1 тестового сеансу) і 2 тижнів (тестовий сеанс 2) після кінцевої сесії досвіду. Дійсно, полегшена сексуальна поведінка підтримувалася як у групах GFP, так і в групах ΔFosB, оскільки жоден з поведінкових параметрів не відрізнявся між тестовими сеансами 1 або 2 і кінцевим досвідом 4, в межах GFP і ΔFosB груп (Малюнок 5A – C; за винятком латентності еякуляції та ефективності копуляції в тесті 1 для тварин ΔFosB). Значні відмінності між тваринами ΔJunD та групами GFP або ΔFosB були виявлені в обох сеансах тестування для всіх параметрів сексуальної поведінки (Малюнок 5A – F). Не було виявлено жодних відмінностей між або всередині груп при порівнянні чисел інтромісій, PEI або відсотків тварин, які еякулювали (100% чоловіків у всіх групах, еякульованих протягом останніх чотирьох сеансів спарювання).

Перейти до:

ОБГОВОРЕННЯ

Нинішнє дослідження показало, що сексуальний досвід викликає накопичення ΔFosB в декількох лімбічно-асоційованих областях мозку, включаючи ядро ​​NAc і оболонку, mPFC, VTA і хвостатий путамен. Крім того, статевий досвід послаблює індуковану спарову експресію c-Fos в NAc і ACA. Нарешті, ΔFosB в NAc виявився критичним у опосередкуванні сприяння спарюванню під час придбання сексуального досвіду та довгострокового вираження спрощеної сексуальної поведінки, викликаної досвідом.. Конкретно, зменшення ΔFosB-опосередкованої транскрипції послаблює індуковану досвідом полегшення сексуальної мотивації і продуктивності, в той час як надмірна експресія ΔFosB в NAc викликало посилене полегшення сексуальної поведінки, з точки зору підвищення сексуальної продуктивності з меншим досвідом. Разом, поточні висновки підтверджують гіпотезу, що ΔFosB є критичним молекулярним посередником для довгострокової нейронної та поведінкової пластичності, індукованої сексуальним досвідом.

Поточні дослідження продовжують попередні дослідження, що показують, що ΔFosB, індукований статевим досвідом у NAc у самців щурів (Уоллес та ін, 2008) і жіночі хом'яки (Хеджес та ін, 2009). Wallace et al. (2008) показали, що rAAV-Надмірна експресія ΔFosB в NAc посилювала сексуальну поведінку у тварин, які не мали сексуального насіння, під час першого сеансу спарювання, про це свідчить менша кількість інтроміусів до еякуляції та коротші пост-еякуляторні інтервали, але не мали ефекту у чоловіків, що мають статевий досвід (Уоллес та ін, 2008).

На відміну від цього, нинішнє дослідження не продемонструвало ефектів надмірної експресії ΔFosB у чоловіків, які не мали сексуального вжитку, під час першого тесту, а скоріше під час і після придбання сексуального досвіду. ΔFosB-експресори продемонстрували підвищену сексуальну продуктивність (підвищена ефективність копуляції) порівняно з GFP-тваринами.

Крім того, нинішнє дослідження випробувало роль ΔFosB, блокуючи ΔFosB-опосередковану транскрипцію, використовуючи ΔJunD-експресуючий вірусний вектор. Запобігання індукованого досвідом збільшення ΔFosB-експресії перешкоджало стимулюванню досвіду статевої мотивації (підвищені латентності монтування та інтромісії), а також сексуальні показники (збільшення латентності еякуляції та кількості монтувань) і подальше тривале вираження полегшеної сексуальної поведінки.

Отже, ці дані є першими, які вказують на обов'язкову роль FFosB у набутті спрощеного досвіду для полегшення сексуальної поведінки. Більш того, ці дані показують, що ΔFosB також критично бере участь у довгостроковому вираженні спрощеної поведінки, викликаної досвідом. Ми пропонуємо, що це довгострокове вираження полегшеної поведінки є формою пам'яті для природного винагороди, отже ΔFosB в NAc є посередником пам'ятної нагороди. Статевий досвід також підвищує рівні ΔFosB в VTA і mPFC, ділянках, які втягуються в винагороду і пам'ять (Бальфур та ін, 2004; Філліпс та ін, 2008). Необхідні майбутні дослідження, щоб з'ясувати потенційну значущість ΔFosB-регулювання в цих областях для пам'ятної винагороди.

Експресія ΔFosB є високостабільною, тому має великий потенціал як молекулярний медіатор стійких адаптацій головного мозку після хронічних збурень (Nestler та ін, 2001). Показано, що ΔFosB поступово збільшує NAc протягом декількох ін'єкцій кокаїну і зберігається протягом декількох тижнів (Сподіватися та ін, 1992; Сподіватися та ін, 1994). Ці зміни в експресії ΔFosB NAc пов'язані з сенсибілізацією і пристрастю до наркотиків (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung та ін, 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler та ін, 2001; Захаріо та ін, 2006). Навпаки, роль FFosB в опосередкуванні природної винагороди була недостатньо вивченою. Останнім часом з'явилися свідчення про те, що індукція ΔFosB в NAc бере участь у природному винагороді. Рівні ΔFosB аналогічно збільшуються в NAc після всмоктування сахарози і запуску колеса. Надмірне випромінювання ΔFosB в смугастому тілі з використанням біс-трансгенних мишей або вірусних векторів у щурів викликає збільшення споживання сахарози, підвищена мотивація до їжі та збільшення спонтанної роботи колеса (Олаусон та ін, 2006; Уоллес та ін, 2008; Werme та ін, 2002). Поточні дані суттєво додають до цих звітів і надалі підтримують уявлення про те, що ΔFosB є критичним посередником для підкріплення нагороди і природного винагороди.

ΔFosB може опосередковувати індуковане досвідом посилення сексуальної поведінки за допомогою індукції пластичності в мезолімбічної системі. Дійсно, сексуальний досвід викликає ряд тривалих змін мезолімбічної системи (Bradley & Meisel 2001; Frohmader та ін, 2009; Глечики та ін, 2010). t поведінковий рівень, сенсибілізований локомоторний відповідь на амфетамін та поліпшену винагороду амфетаміну були показані у статево досвідчених самців щурів (Глечики та ін, 2010); Зміни локомоторної реакції на амфетамін також спостерігалися у жіночих хом'яків (Bradley & Meisel 2001). Крім того, збільшилася кількість дендритних шипів і складність дендритних альтанок після періоду утримання від сексуального досвіду у самців щурів (Глечики та ін, 2010). Нинішнє дослідження показує, що ΔFosB може бути специфічним молекулярним посередником довгострокових результатів сексуального досвіду. За згодою, недавно було показано, що ΔFosB є важливим для індукування змін дендритних хребтів у відповідь на хронічне введення кокаїну (Дитц та ін, 2009; Лабіринт та ін, 2010).

Незрозуміло, який передній нейромедіатор (и) є відповідальним за індукування ΔFosB в NAc, але DA був запропонований як кандидат (Ная та ін, 1995). Практично всі наркотики, включаючи кокаїн, амфетамін, опіати, каннабіноїди, етанол, а також природні винагороди, збільшують ΔFosB в NAc (Перротті та ін, 2005; Уоллес та ін, 2008; Werme та ін, 2002). Як препарати зловживання, так і природні винагороди підвищують концентрацію синаптичної DA в NAc (Дамса та ін, 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). Індукція ΔFosB лікарськими засобами зловживання показана в клітинах, що містять DA рецептор, і кокаїн-індукований ΔFosB блокується антагоністом D1 DA рецепторат (Ная та ін, 1995). Отже, вивільнення DA гіпотезу стимулює експресію ΔFosB і тим самим опосередковує пов'язану з винагородою нейропластичность. Подальша підтримка ідеї, що рівні ΔFosB залежать від DA, є висновком про те, що ділянки мозку, де змінений рівень сексуального досвіду ΔFosB, отримують сильний допамінергічний вхід з VTA, включаючи медіальну префронтальну кору і базолатеральную мигдалину.

Однак, навпаки, ΔFosB не збільшується в медіальній преоптичній області, хоча ця область отримує допамінергічний вхід, хоча і з джерел гіпоталамусу (Miller & Lonstein 2009). Необхідні майбутні дослідження для перевірки того, чи індуковане спарову ΔFosB вираження і вплив сексуального досвіду на сексуальну мотивацію і продуктивність залежать від дії ДА. Роль DA для сексуальної допомоги у щурів-чоловіків наразі не повністю зрозуміла (Агмо і Беренфельд 1990; Pfaus 2009). Існує достатньо доказів того, що DA вивільняється в NAc під час впливу жінки або спарювання (Дамса та ін, 1992) і DA нейрони активуються під час сексуальної поведінки (Бальфур та ін, 2004). Проте, системні ін'єкції антагоніста DA рецепторів не запобігають спричиненому сприятливому місці перевагу, спричинене сексуальною винагородою (Агмо і Беренфельд 1990) і гіпотеза, що ДА є критично важливим для індукованого досвідом посилення спарювання, є неперевіреною.

Також незрозуміло, які медіатори впливають на сексуальну поведінку ΔFosB. Показано, що ΔFosB діє як активатор транскрипції, так і репресор через залежний від AP-1 механізм (McClung & Nestler 2003; Пікмен та ін, 2003). Виявлено численні гени-мішені, включаючи безпосередній ранній ген c-fos (Сподіватися та ін, 1992; Сподіватися та ін, 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal та ін, 2008; Zhang та ін, 2006), cdk5 (Бібб та ін, 2001), динорфін (Захаріо та ін, 2006), сіртуїн-1 (Renthal та ін, 2009), NFκB субодиниць (Анг та ін, 2001) Зі субъединицу глютаматного рецептора AMPA GluR2 (Kelz та ін, 1999). Нинішні результати показують, що індуковані спаровуванням c-Fos рівні були зменшені сексуальним досвідом у ділянках головного мозку з підвищеним ΔFosB (NAc та ACA). Придушення c-Fos виявляється залежним від періоду останнього спарювання і повторних сеансів спарювання, як і в попередніх дослідженнях, таке зниження c-Fos не було виявлено у самців щурів, які випробовували 1 тиждень після завершального сеансу спарювання (Бальфур та ін, 2004) або після сексуального досвіду, що складається лише з одного сеансу спарювання (Лопес і Еттенберг 2002). Більш того, поточний висновок узгоджується з доказом того, що ΔFosB пригнічує ген c-fos після хронічного впливу амфетаміну (Renthal та ін, 2008). Відповідно до цих висновків, індукція кількох безпосередніх ранніх мРНК генів (c-fos, fosB, c-jun, junB і zif268) була знижена після повторних ін'єкцій кокаїну в порівнянні з гострими ін'єкціями лікарського засобу (Сподіватися та ін, 1992; Сподіватися та ін, 1994), і амфетамін-індукований c-fos був пригнічений після відміни від прийому хронічних амфетамінів (Джабер та ін, 1995; Renthal та ін, 2008). Функціональна значимість понижуючої регуляції експресії c-Fos після хронічного лікування або сексуального досвіду залишається неясною, і було запропоновано бути важливим гомеостатичним механізмом для регулювання чутливості тварини до неодноразового винагороди (Renthal та ін, 2008).

На закінчення, поточне дослідження демонструє, що ΔFosB в NAc грає невід'ємну роль у пам'яті сексуальної винагороди, підтримуючи можливість того, що ΔFosB є важливим для загального підсилення винагороди та пам'яті.. Результати нинішнього дослідження ще більше пояснюють наше розуміння клітинних і молекулярних механізмів, які опосередковують сексуальну винагороду та мотивацію, і доповнюють літературу, яка показує, що ΔFosB є важливим гравцем у розвитку наркоманії, демонструючи роль ΔFosB у природному винагороді. армування.

Перейти до:

Додатковий матеріал

Supp Fig S1-S4 & Table S1-S2

Перейти до:

Подяки

Це дослідження було підтримано грантами від канадських інститутів досліджень в галузі охорони здоров'я LMC, Національного інституту психічного здоров'я EJN, а також науково-технічних дослідницьких рад Канади KKP і LMC.

Перейти до:

Посилання

  • Agmo A. Статева поведінка самців щурів. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
  • Агмо А, Беренфельд Р. Підсилюючі властивості еякуляції у самців щура: роль опіоїдів і дофаміну. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Індукція ядерного фактора-капБ в nucleus accumbens при хронічному введенні кокаїну. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Сексуальна поведінка та пов'язані з статтю екологічні сигнали активізують мезолімбічну систему у самців щурів. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Сагава ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Ефекти хронічного впливу кокаїну регулюються нейрональним білком Cdk5. Природа. 2001;410: 376-380. [PubMed]
  • Бредлі KC, Haas AR, Meisel RL. Поразки 6-гідроксидопаміну у жіночих хом'ячків (Mesocricetus auratus) скасовують сенсибілізовані ефекти сексуального досвіду на копуляторних взаємодіях з чоловіками. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. Індукція сексуальної поведінки c-Fos в ядрі accumbens і стимульованої амфетаміном рухова активність сенсибілізована попереднім статевим досвідом у жіночих сирійських хом'ячків. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Карл Т.Л., Оніші Ю.Н., Оніші Я.Г., Алібхай І.Н., Уілкінсон М.Б., Кумар А.І. Залежні від протеасом та незалежні механізми дестабілізації FosB: ідентифікація доменів FOSB та вплив на стабільність DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Чао Дж, Нестлер Е.Я. Молекулярна нейробіологія наркоманії. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Регулювання дельта-FosB і FosB-подібних білків шляхом електросудомного вилучення і лікування кокаїном. Молекулярна фармакологія. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Стреатальная клітина, специфічна для сверхэкспрессии DeltaFosB, підвищує стимул для кокаїну. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Центральна регуляція еякуляції. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
  • Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Статева поведінка збільшує передачу допаміну в nucleus accumbens і striatum самців щурів: порівняння з новизною і локомоції. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
  • Dietz DM, Maze I, Механік М., Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Суттєва роль ΔFosB в регуляції кокаїну дендритних шипів нейронів nucleus accumbens. Суспільство неврології Анотація. 2009
  • Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Змішування задоволень: Огляд впливу препаратів на статеву поведінку людей і тварин. Хорм Бехав. 2009 В пресі.
  • Хеджев В.Л., Чакраварти S, Нестлер Е.Я., Мейсел Р.Л. Перена експресію дельта ФосБ в ядрі accumbens посилює сексуальну винагороду у жіночих сирійських хом'ячків. Гени Brain Behav. 2009;8: 442-449. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Підживлення та гіпоталамічна стимуляція збільшують обороти допаміну в акумбензі. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Харчове винагороду і кокаїн збільшують позаклітинний дофамін в nucleus accumbens, виміряний за допомогою мікродіалізу. Наук про життя 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
  • Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Суттєва роль гена fosB в молекулярних, клітинних і поведінкових діях хронічних електроконвульсивних нападів. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
  • Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Локальний генний нокдаун в мозку з використанням вірусно-опосередкованої інтерференції РНК. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
  • Надія Б, Кософський Б., Хайман С.Е., Нестлер Е.Я. Регулювання безпосередньої ранньої експресії генів і зв'язування AP-1 в ядрі щура щурячого хронічного кокаїну. Proc Natl Acad Sci США А. 1992;89: 5764-5768. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Надія BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Індукція тривалого комплексу AP-1, що складається з змінених Fos-подібних білків у мозку хронічним кокаїном та іншими хронічними методами лікування. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Корпус EM, Meisel RL, Sachs BD. Сексуальна поведінка чоловіків. Хорм Бехав. 2002;1: 1-139.
  • Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Гострий і хронічний лікування амфетаміном різним чином регулює рівні нейропептидних РНК і імунореактивність Fos у нейронів стриатуса щурів. Неврологія. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
  • Jenkins WJ, Becker JB. Динамічне збільшення дофаміну під час кровоплинного копуляції у жіночих щурів. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, молодший, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Чжан YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, DJ Surmeier, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Експресія фактора транскрипції deltaFosB в мозку контролює чутливість до кокаїну. Природа. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Lopez HH, Ettenberg A. Експозиція самкам щурів дає відмінності в індукції c-fos між сексуально-наївними і досвідченими щурами-самцями. Мозок Рес. 2002;947: 57-66. [PubMed]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Механік М, Музон Е, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schhefer Y, Nestler EJ. Суттєва роль гистона метилтрансферази G9a в кокаїн-індукованої пластичності. Наука. 2010;327: 213-216. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Регулювання експресії генів та винагороди кокаїну CREB та DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: молекулярний перемикач для тривалої адаптації в мозку. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Miller SM, Lonstein JS. Допамінергічні проекції в медіальну преоптичну область післяпологових щурів. Неврологія. 2009;159: 1384-1396. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran Т. Стимуляція транскрипції зв'язування в нейронах: роль клітинних безпосередньо ранних генів. Тенденції неврозу. 1989;12: 459-462. [PubMed]
  • Nestler EJ. Молекулярні механізми наркоманії. Нейрофармакологія. 2004;47 Додаток 1: 24 – 32. [PubMed]
  • Nestler EJ. Нейробіологія кокаїнової залежності. Sci Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Nestler EJ. Огляд. Транскрипційні механізми наркоманії: роль DeltaFosB. Філос Транс Р Сок Лонд Б Біол Наук. 2008;363: 3245-3255. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: стійкий молекулярний перемикач для наркоманії. Proc Natl Acad Sci США А. 2001;98: 11042-11046. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Фармакологічні дослідження регуляції хронічної індукції антигену, пов'язаної з FOS, кокаїном в стриатуме і nucleus accumbens. J фармакологічної та експериментальної терапії. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB в nucleus accumbens регулює посилену їжею інструментальну поведінку і мотивацію. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Пікман МК, Колбі С, Перротті Л. І., Текумалла П, Карле Т, Улері П, Чао Дж, Думан С, Штеффен С, Монтегіа Л, Аллен МР, запас JL, Думан Р.С., МакНіш Дж. , Schaeffer E. Індуцибельна, специфічна для мозку область специфічна експресія домінуючого негативного мутанта c-Jun у трансгенних мишах зменшує чутливість до кокаїну. Мозок Рес. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB накопичується в популяції ГАМКергітних клітин в задньому хвості вентрального тегментального ділянки після лікування психостимулятора. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Індукція deltaFosB в структурах мозку, пов'язаних з винагородою, після хронічного стресу. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Відмінні закономірності індукції DeltaFosB в мозку наркотичними засобами. Синапс. 2008;62: 358-369. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Pfaus JG. Шляхи статевого потягу. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
  • Пфаус Ю.Г., Кіппін Т.Є., Центено С.С. Кондиціонування і сексуальна поведінка: огляд. Хорм Бехав. 2001;40: 291-321. [PubMed]
  • Філліпс А.Г., Вакка Г., Анн. С. Погляд зверху вниз на дофамін, мотивацію і пам'ять. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
  • Глечики KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Нейропластичність в мезолімбічної системі індукується природним винагородою і наступною винагородою за стриманість. Biol психіатрії. 2010;67: 872-879. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Кумар А, Монтгомері RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB опосередковує епігенетичну десенсибілізацію гена c-fos після хронічного впливу амфетаміну. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Renthal W, Kumar A, Сяо G, Уілкінсон М, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Робісон AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Руссо SJ, Vialou V, Чакраварти S, Кодадек TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Геномний аналіз регулювання хроматину кокаїном виявляє роль сиртуїнів. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Тенк CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Статева винагорода у самців щурів: вплив сексуального досвіду на сприятливі перевагу місцевості, пов'язані з еякуляцією та втручанням. Хорм Бехав. 2009;55: 93-97. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Фосфорилювання DeltaFosB опосередковує його стабільність in vivo. Неврологія. 2008
  • Ulery PG, Руденко Г., Нестлер Е.Я. Регулювання стабільності DeltaFosB фосфорилюванням. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Вплив DeltaFosB в ядро ​​accumbens на природну поведінку, пов'язану з винагородою. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB регулює рух колеса. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Індукція DeltaFosB в орбітофронтальній корі опосередковує толерантність до кокаїн-індукованої когнітивної дисфункції. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Захаріу V, Боланос С.А., Селлі Д.Е., Теобальд Д., Кесіді М.П., ​​Кельз М.Б., Шоу-Лучман Т, Бертон О, Сім-Селлі Л.Я., Ділеон Р.Я., Кумар А., Нестлер Е.Я. Істотну роль відіграє DeltaFosB в ядрі accumbens в дії морфіну. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • Чжан J, Чжан L, Цзяо H, Чжан Q, Чжан D, Лу D, Кац JL, Сюй М. c-Fos полегшує придбання і вимирання кокаїн-індукованих постійних змін. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]