КОМЕНТАРІ: ΔFosB є хімічною речовиною, необхідною для виникнення наркоманії. І лікарська, і поведінкова залежність корелюють з накопиченням Delta FosB. Блок Дельта ФосБ і наркоманія припиняються. Тут показано, що сексуальний досвід збільшує Delta FosB, і призводить до сенсибілізації центру винагороди. Сенсибілізація викликає більш високий вивільнення дофаміну, що робить діяльність або препарат більш привабливим. По суті секс є процесом залежності. Це дослідження також генетично збільшило Delta FosB, що збільшило корисні аспекти сексу вище і поза нормальними рівнями. Чи може використання інтернет-порно викликати зростання Delta FosB вище і поза нормальними рівнями? Чи призведе це до звикання і перезавантаження нервових шляхів? Здається розумним.
ПОВНА ВИВЧЕННЯ: ΔFosB Надлисна експресія в ядрах посилює сексуальну нагороду у жіночих сирійських хом'ячків
Гени Brain Behav. 2009 червень; 8 (4): 442 – 449. doi: 10.1111 / j.1601-183X.2009.00491.x.
Хеджес В.Л., 1 S. Chakravarty, 2 EJ Nestler, 2 і RL Meisel1
абстрактний
Повторна активація мезолімбічної дофамінової системи призводить до стійких поведінкових змін, що супроводжуються структурою нейропластики в nucleus accumbens (NAc). Оскільки накопичення транскрипційного фактора ΔFosB може бути важливою складовою цієї пластичності, питанням, що розглядається в нашому дослідженні, є те, чи ΔFosB регулюється сексуальним досвідом у жінок. Ми показали, що жіночі сирійські хом'яки, які отримують сексуальний досвід, мають кілька поведінкових змін, включаючи підвищену сексуальну ефективність з наївними хом'ячками, сексуальною нагородою та підвищеною чутливістю до психомоторних стимуляторів (наприклад, амфетаміну).
Нещодавно ми продемонстрували, що сексуальний досвід підвищив рівень ΔFosB в NAc жіночих сирійських хом'ячків. У центрі уваги цього дослідження було вивчення функціональних наслідків цієї індукції шляхом визначення, чи є конститутивна гіперекспресія ΔFosB за допомогою адено-асоційованих вірусних (AAV) векторів в NAc може імітувати поведінкові ефекти сексуального досвіду.
Тварини з AAV-опосередкованою сверхэкспрессией ΔFosB в NAc показали ознаки сексуальної винагороди в умовах кондиційного місця Парадигма в умовах, в яких контрольні тварини, які отримували ін'єкцію AAV-зеленого флуоресцентного білка (GFP) в NAc, не робили. Тести сексуальної поведінки далі показали, що чоловіки у парі з жінками AAV-ΔFosB мали підвищену ефективність копуляції, виміряну часткою горів, що включали інтромісію, порівняно з самцями, які були спарені з жінками AAV-GFP. Ці результати підтверджують роль ΔFosB в опосередкуванні природно-мотивованої поведінки, в цьому випадку сексуальної поведінки жінок, і надають нове уявлення про можливі ендогенні дії ΔFosB.
Вступ
Досвід застосування препаратів зловживання, мотивованої поведінки, поведінки під час роботи колеса або інструментального навчання призводить до активації мезолімбічної системи дофаміну та стійких змін у ядрі accumbens (NAc) (Беккер та інші, 2001, Ді Кьяра та інші, 1998, Харріс та інші, 2007, Кумаром та інші, 2005, Meisel & Mullins, 2006, Nestler, 2008, Олаусон та інші, 2006, Перротті та інші, 2008, Пірс і Кумаресан, 2006, вовк та інші, 2004). Структурні зміни, зокрема, формування дендритних шипів, є важливою складовою пластичності на основі цього досвіду (Аллен та інші, 2006, Подветренний та інші, 2006, Li та інші, 2003, Meisel & Mullins, 2006, Норрхолм та інші, 2003, Робінзон і Колб, 2004), який залишається довгим після того, як припинився або поведінковий досвід, або прийом ліків (McClung & Nestler, 2008, Meisel & Mullins, 2006, вовк та інші, 2004).
Фактор транскрипції ΔFosB має молекулярні властивості, які роблять його хорошим кандидатом для опосередкування стійких структурних і поведінкових модифікацій, що виникають внаслідок поведінкового або лікарського досвіду (Chen та інші, 1997, Chen та інші, 1995, Колбі та інші, 2003, Doucet та інші, 1996, Сподіватися та інші, 1994, Kelz та інші, 1999, McClung & Nestler, 2003, McClung та інші, 2004, McDaid та інші, 2006, Nakabeppu & Nathans, 1991, Nestler, 2008, Ная та інші, 1995, Олаусон та інші, 2006, Перротті та інші, 2008, Уоллес та інші, 2008, Werme та інші, 2002, Захаріо та інші, 2006). ΔFosB є альтернативним сплайсингом продукту безпосереднього раннього гена fosB (Mumberg та інші, 1991, Nakabeppu & Nathans, 1991і, на відміну від повнорозмірного білка FosB, усічений ΔFosB має незвичайну стабільність, що призводить до накопичення білка після повторної стимуляції (Chen та інші, 1997, Chen та інші, 1995, Сподіватися та інші, 1994, Kelz та інші, 1999, Перротті та інші, 2008, Захаріо та інші, 2006). Хоча механізм, за допомогою якого здійснюється fosАльтернативно сплайсинг B гена залишається невідомим, укорочення білка разом з фосфорилюванням захищає білок від швидкої деградації протеасом, що забезпечує більш високий рівень транскрипційної активності порівняно з більш чутливими членами сімей FosB (селюк та інші, 2007, Ulery & Nestler, 2007, Ulery та інші, 2006). Постулат полягає в тому, що накопичення білка ΔFosB виробляє закономірності експресії генів, які можуть лежати в основі впливу досвіду на довгострокову поведінкову і клітинну пластичність (McClung & Nestler, 2008).
Ми використовували жіночу сексуальну поведінку у сирійських хом'ячків як модель пластичності мозку, яка базується на досвіді (Бредлі та інші, 2005a, Бредлі та інші, 2005b, Бредлі і Мейзел, 2001, Бредлі та інші, 2004, Kohlert & Meisel, 1999, Kohlert та інші, 1997, Мейсел та інші, 1993, Meisel & Joppa, 1994, Мейсел та інші, 1996, Meisel & Mullins, 2006). Перевагою для роботи з сексуальною поведінкою є здатність контролювати рівень досвіду тварини, маючи або повністю сексуальних наївних тварин, або диференційно піддаючи тварин різним рівнем сексуального досвіду. Раніше ми показали, що повторний статевий досвід призводить до сенсибілізації мезолімбічної дофамінової системи, аналогічної до такої зловживань (Бредлі та інші, 2005b, Бредлі і Мейзел, 2001, Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Сподіватися та інші, 1992, Kelz та інші, 1999, Kohlert & Meisel, 1999, Пірс і Калівас, 1995 рік, Пірс і Калівас, 1997а, Пірс і Калівас, 1997б, Робінзон і Колб, 1999а). Наприклад, як і дії наркотиків, повторний сексуальний досвід збільшує дендритні шипи в середніх колючих нейронах NAc (Подветренний та інші, 2006, Li та інші, 2003, Meisel & Mullins, 2006, Норрхолм та інші, 2003, Робінсон та інші, 2001, Робінзон і Колб, 1997, Робінзон і Колб, 1999а, Робінзон і Колб, 1999б, Робінзон і Колб, 2004). Крім того, ми виявили, що фарбування ΔFosB / FosB постійно підвищується в NAc після повторного сексуального досвіду (Meisel & Mullins, 2006).
Враховуючи, що сексуальний досвід може дати довготривалу експресію членам сім'ї FosB, метою цього дослідження було маніпулювати виразом ΔFosB, щоб імітувати поведінкові наслідки повторного сексуального досвіду. Після вірусного перена експресії ΔFosB в NAc жіночі сирійські хом'яки тестувалися на підвищену кондиційну перевагу місцевості, а також підвищували ефективність копуляції з наївними хом'ячками-чоловіками, дві кінцеві точки, які раніше виявляли вплив повторного сексуального досвіду (Бредлі та інші, 2005b, Meisel & Joppa, 1994, Мейсел та інші, 1996, Meisel & Mullins, 2006). WТут ми повідомляємо, що завдяки постійному надмірному експресуванню ΔFosB в NAc жіночих хом'яків, які отримують мінімальний сексуальний досвід, ми можемо проводити зміни поведінки, подібні до тих жінок, які мають більш широкий сексуальний досвід.
Матеріали та методи
Експериментальні суб'єкти
Чоловічі і жіночі сирійські хом'яки доставляли приблизно за 60 добу від Charles River Breeding Laboratories, Inc. (Вілмінгтон, Массачусетс). Самки розміщувалися індивідуально в пластикових клітинах (50.8 см довжиною × 40.6 ширина × 20.3 см заввишки), в той час як тварини чоловічого стимулу були розміщені в однакових клітинах у кількості від трьох або чотирьох. Тваринна кімната підтримувалася при контрольованій температурі 22 ° C з 14: 10 hr світло-темний графік (вимикання між 1: 30 і 11: 30 pm). Їжа і вода були доступні тваринам ad libitum.
Всі процедури, що використовувалися в цьому експерименті, відповідали Національним інститутам охорони здоров'я Рекомендації з догляду та використання лабораторних тварин і були схвалені Комітетом з догляду та використання тварин Purdue.
Хірургія
Жіночі хом'ячки були двосторонньо овариэктомированы під анестезією пентобарбіталом натрію (Nembutal; 8.5 мг на 100 gm ваги тіла, ip), отримували додатковий анестетик і потім проходили двосторонню стереотаксичну хірургію для доставки вірусних векторів. Під час стереотаксичної хірургії голова була виголена, а шкіра і м'язи втягнуті. У черепі було пробурено невелике отвір, а шприц ХІНМКС мкл Hamilton був знижений до рівня NAc з бічного кута 5 °, щоб забезпечити очищення бічних шлуночків головного мозку. Шприц залишався на місці для 2 хв до ін'єкції, а потім або адено-асоційований вірус (AAV) -GFP, або AAV-ΔFosB (5 мкл) був доставлений в NAc протягом 0.7 хв, після чого шприц зберігався на місці додаткові 7 хв. Цю процедуру повторювали для контралатеральної сторони мозку.
Вірусні вектори
AAV характеризується здатністю ефективно трансфектувати нейрони, а також підтримувати специфічну експресію трансгену протягом тривалого періоду часу (Чемберлін та інші, 1998). Вектори AAV існують у різних серотипах на основі характеристики капсидного білкового покриття. Цей експеримент використовував AAV2 (серотип 2) з Stratagene з титром над 108/ мкл, що експресує зелений флуоресцентний білок (AAV-GFP), а також вектор AAV, який має конструкції для ΔFosB і GFP (AAV-ΔFosB-GFP). Вірусні вектори ін'єктували в NAc щонайменше за 3 тижнів до поведінкового тестування, щоб дозволити розвиватися ΔFosB з надмірною експресією. Ці вектори AAV опосередковують експресію трансгену у щурів і мишей, які стають максимальними протягом 10 днів введення і потім зберігаються на цьому рівні протягом щонайменше 6 місяців (Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006). Важливо, що вектори інфікують тільки нейрони і не виробляють ніякої токсичності, більшої, ніж тільки інфузії з транспортним засобом. Деталі виробництва та використання цих векторів надані в попередніх публікаціях (Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006).
Статевий досвід
Всі жіночі хом'ячки овариэктомизировали для сексуального досвіду один раз на тиждень, надаючи дві щоденні підшкірні ін'єкції естрадіолу бензоату (10 мкг в 0.1 мл бавовняного масла) приблизно за 48 год. І 24 год. До тесту на сексуальну поведінку з підшкірною ін'єкцією прогестерону. (500 мкг в 0.1 мл бавовняного масла) 4 – 6 год до тесту на сексуальну поведінку. Жінки, які отримали сексуальний досвід, були представлені сексуально досвідченим чоловічим хом'яком для сеансу 10 min 4 – 6 hr після ін'єкції прогестерону. Кожному чоловікові і жінці попарили тільки один раз під час тестування сексуального досвіду.
Умовні переваги місця
У цьому експерименті була використана упереджена парадигма переваг місцяТсшентек, 1998). Наші апарати кондиційного місця (Meisel & Joppa, 1994, Мейсел та інші, 1996) складається з одного білого та одного сірого відсіку (60 × 45 × 38 cm), з'єднаних прозорим центральним відділенням (37 × 22 × 38). Основні компартменти були додатково диференційовані за посадкою з осики (Harlan Laboratories, IN) у сірому відсіку та постільній частині кукурудзяного кукурудзи (Harlan Laboratories, IN) в білому відсіку. Овариектомированние жіночі хом'яки були гормонально праймедіровані до проведення попередніх тестів, сеансів статевого кондиціонування і після тесту. Під час попереднього тестування тварина поміщали в чітку центральну камеру і вільно мандрували по різних відділеннях за 10 хв, щоб встановити початкову перевагу для кожного відділення. Оскільки всі тварини показали початкову перевагу для білої камери, кондиціонування проводили в сірій камері. Гормональне грунтовку повторювали під час 2 (Групи 2 – 5) або 5 тижнів (Група 1) кондиціонування. Під час кондиціонування жінки отримували сексуальний досвід з чоловіком в сірому відсіку за 10 хв, з виміряними жіночими параметрами копуляції (затримка лордозу і тривалість загального лордозу). Через один год після тесту на сексуальний досвід самку помістили поодинці в білу камеру за 10 хв. Контрольна група жінок, які не отримували сексуального досвіду, були гормонально прайменовані, але поміщені окремо в кожній камері протягом 10 хв. Після 2 або 5 тижнів кондиціонування, тваринам давали пост-тест, в якому вони знову мали можливість вільно бродити по камерах за 10 хв. Незалежно від групи, всі посттести були проведені через 7 тижнів після стереотаксичної хірургії, і тому всі тварини були забиті з однаковим рівнем вірусної експресії. У цьому експерименті були групи 5 тварин: група позитивних контрольних тварин отримувала двосторонній AAV-GFP і давали 5 щотижневі спаровування сексуальної поведінки з чоловіком (група 1, n = 8). Дві негативні контрольні групи не отримували ніякого сексуального кондиціонування протягом 2 тижнів і отримували або AAV-ΔFosB (група 2, n = 5) або AAV-GFP (група 3, n = 4). Нарешті, існували тварини, які отримували 2 тижнів спарювання сексуальної поведінки з самцем з двосторонньої ін'єкцією або AAV-ΔFosB (група 4, n = 7) або AAV-GFP (група 5, n = 7).
Експеримент наївного чоловіка
Попередні дослідження показали, що статево досвідчені хом'ячки можуть поліпшити ефективність копуляції взаємодій зі своїми сексуальними наївними партнерами-чоловіками (Бредлі та інші, 2005b). Цей тест давали приблизно через один тиждень після кондиційного місця після тесту до двох груп тварин, які отримували 2 тижнів статевого кондиціонування (групи 4 і 5). Самки були гормонально примикані до сексуального досвіду, як описано. Під час тесту 10 min, сексуальний наїв чоловічого хом'яка був введений в домашню клітку жінки, і сеанс тестування був записаний на відеозапис для подальшого аналізу. Кількість відеозаписів та втручань (у тому числі еякуляцій) чоловіків, а також частка загальної кількості монстрів, що включали інтромісію (коефіцієнт удару), були визначені з відеозапису.
Імуногістохімія
Імуноокрашивание проводили на всіх тваринах, щоб перевірити як місце ін'єкції вірусу, так і анатомічну ступінь експресії білка. Жінки отримували передозування Sleepaway (0.2 мл ip, Fort Dodge Laboratories, Fort Dodge, IA) і внутрішньосерцево перфузировали з 25 mM фосфатним сольовим розчином (PBS) за 2 хв (приблизно 50 мл), потім 4% параформальдегіду в 25 mM PBS за 20 хв (приблизно 500 мл). Мозок видаляли і фіксували після 2 в 4% параформальдегіду, потім поміщали в розчин 10% сахарози в PBS протягом ночі при 4 ° C. Тварини, які отримували тільки двосторонні AAV-GFP, мали серійні корональні зрізи (40 мкм), вирізані з замороженої тканини в 25 мМ PBS плюс 0.1% бичачого сироваткового альбуміну (BSA) (промивний буфер), потім встановлювали безпосередньо на предметне скло н-пропіл галат в гліцерині. Тварини, які отримували двосторонній AAV-ΔFosB, мали серійні корональні зрізи (5 мкм), вирізані з замороженої тканини, а потім промивали 40 раз для 3 хв в промивному буфері. Тварини AAV-ΔFosB аналізували тільки на експресію ΔFosB і тому інкубували в первинному антитілі ΔFosB / FosB (10: 1, sc-10000 Santa Cruz Biotechnology Inc., Санта-Крус, Каліфорнія) в промивному буфері плюс 48% Triton-X 0.3 кімнатну температуру протягом 100 год. і потім переміщують до 24 ° C протягом 4 год. Цю концентрацію первинних антитіл вибирали, оскільки вона продукує тільки мінімальне ендогенне фарбування ΔFosB / FosB. Після інкубації в первинному антитілі зрізи промивали 24 раз для 3 хв в промивному буфері, а потім інкубували в биотинилированном-вторинному антитілі за 10 хв при кімнатній температурі (45: 1, Vector, Burlingame, CA). Зрізи потім промивали 200 разів для 3 хв у промивному буфері перед інкубуванням у кон'югаті стрептавидина Alexa Fluor 10 (594: 1, Molecular Probes, Eugene, OR). Після цієї інкубації зрізи промивали 500 раз для 3 хв у промивному буфері, потім встановлювали на предметне скло і покривали за допомогою вологого 10% н-пропіл галату в гліцерині.
Мікроскопічний аналіз
Слайди аналізували світловим мікроскопом Leica DM4000B з флуоресцентною здатністю, приєднаною до цифрової камери Leica DFC500. Цифрові зображення як правого, так і лівого місць ін'єкцій кожної секції були серійно проаналізовані флуоресцентною мікроскопією, щоб розмістити ін'єкційне розміщення в NAc. Розрізи кожної тварини аналізували, щоб виявити ростральне до каудального поширення вірусної експресії, а також анатомічне розташування найбільшого діаметра експресії. Крім того, в цих розділах в ImageJ були записані цифри забарвлених клітин FosB із збережених цифрових зображень. Оскільки наша мета полягала лише в тому, щоб отримати приблизну кількість клітин, стереологічні методи не використовувалися.
результати
Час протікання вірусу опосередковано надекспресією ΔFosB в NAc жіночих сирійських хом'ячків
Окрему групу тварин спочатку використовували для виявлення тимчасового перебігу вірусно-опосередкованої ΔFosB-надмірної експресії у жіночого хом'яка. Аналіз експресії ΔFosB в тижневих точках 3 (n = 5), 6 (n = 6) і 9 (n = 2) показав, що 3 тижнів після стереотаксичної хірургії дали рівень гіперекспресії ΔFosB, який підтримувався за допомогою 6 і 9 тижнів після стереотаксичної хірургії. Вірусна експресія була в основному ядерною, але також була виявлена в цитоплазмі і навіть в дендритах деяких клітин з надвиразкою. З тринадцяти тварин, що включали експеримент по ходу часу, чотири тварини мали ростові NAc-серцеві вірусні ін'єкції, одна з яких поширювалася в ядро ложа stria terminalis (BNST). Решта дев'ять тварин мали каудальні місця ін'єкції, сім - у хвостовому ядрі та два - у хвостовій оболонці NAc. Тільки одна з каудальних ін'єкцій оболонки перейшла каудально в BNST, а шість ін'єкцій у хвостовому ядрі перейшли каудально в BNST. Знайдено, що середні найбільші діаметри вірусної експресії для кожної часової точки складають 0.9 мм, 1.2 мм і 1.0 мм для 3, 6 і 9 тижнів, відповідно. Ці середні діаметри піддавалися дисперсійному аналізу і не виявилися суттєво різними. Таким чином, у наступних поведінкових експериментах, поведінкове тестування почалося близько 3 тижнів після стереотаксичної хірургії, і тварини були забиті навколо 9 тижнів після стереотаксичної хірургії, щоб гарантувати, що вірусна експресія підтримувалася на постійному рівні.
Імуногістологічний аналіз вірусних ін'єкцій AAV-ΔFosB і AAV-GFP
Секції мозку від кожної тварини, що використовувалися в поведінкових експериментах, були серійно проаналізовані в коронарній площині для анатомічного розташування вірусної ін'єкції. У загальній складності тварин 12 аналізували на їх двосторонню експресію ΔFosB шляхом підрахунку клітин, і розміщення ін'єкцій, яке визначали шляхом відстеження залишкових доріжок голки. Хоча ін'єкційне розміщення аналізувалося в корональному розрізі (малюнок 1), експресія білка розширена в рострально-каудальному еліпсі з місця ін'єкції, а також поширена в дорсально-вентральному еліпсі з місця ін'єкції. З п'яти тварин, проаналізованих з групи 2, 70.5% клітин з надвиразкою були в NAc (медіана = клітини 16,864, нижній квартиль = клітини 7,551, верхній квартиль = клітини 20,002, інтерквартильний діапазон = 12,451). Сім тварин, проаналізованих з групи 4, показали гіперекспресію вірусу 65.6% у NAc (медіана = клітини 9,972, нижній квартиль = клітини 5,683, верхній квартиль = клітини 11,213, інтерквартильний діапазон = 5530.). Ці кількості клітин являють собою швидку експресію вірусу, а не ендогенне фарбування внаслідок цілеспрямованого розведення первинного антитіла.
З двосторонніх місць ін'єкції 24, дванадцять були в ростральному ядрі NAc, шість з яких мали вірусну експресію, яка каудально поширилася в BNST. Залишилися дванадцять ін'єкційних місць в каудальному NAc. Один з дванадцяти ін'єкцій перебував у хвостовій оболонці і поширювався каудально в BNST. Останні одинадцять місць ін'єкції були в каудальному ядрі NAc, вісім з яких поширювалися каудально в BNST. Всі ін'єкції були зосереджені навколо передньої коміссури, за винятком однієї ін'єкції в каудальній оболонці NAc, яка була трохи більш медіальною, ніж передня комісура (малюнок 2). Всі тварини показали відповідну гіперекспресію або GFP, або ΔFosB і тому використовувалися в подальшому поведінковому аналізі. Жодних тварин не виключали з дослідження з-за поганого розміщення анатомічних ін'єкцій. Далі, оскільки всі ін'єкції були націлені на аккумальное ядро і тільки одна ін'єкція включала оболонку, статистичний аналіз не проводився на місцях ін'єкцій.
AAV вектор надекспресії ΔFosB в NAc жіночих сирійських хом'ячків призводить до посиленої сексуальної винагороди
Щоб оцінити, чи має надмірна експресія ΔFosB в NAc вплив на сексуальну винагороду, ми скористалися парадигмою умовних переваг місця. У цьому тесті тварини зазнали або 0, 2, або 5 тижнів статевого кондиціонування. Під час статевого кондиціонування затримку лордозу і тривалість реєстрували для кожного хом'яка. Ні затримки лордозу (група 1: 553 сек ± 7 сек, група 4: 552 сек ± 7 сек, група 5: 561 сек ± 7 сек,) ні тривалість lordosis (група 1: 485 сек ± 15 сек, група 4: 522 сек ± 10 сек, група 5: 522 сек ± 12 сек) під час статевого кондиціонування істотно відрізнялася серед груп протягом тестування незалежно від вірусної ін'єкції. Тому жодна гіперекспресія GFP і ΔFosB не впливала на рецептивну поведінку самок.
Кожну групу з процедури кондиційного місця було проаналізовано окремо з повторним вимірюванням t-тесту між кількістю часу, проведеного в кондиціонуючому відділенні (сірий відсік) під час попереднього тестування і після тесту. Статистичний аналіз не поширювався між групами. Попередні дослідження показали, що п'ять умовних сексуальних вражень є достатніми для виявлення значних змін у місцеположенні (Meisel & Joppa, 1994, Мейсел та інші, 1996). Дійсно, група позитивного контролю, що складається з тварин тварин, які перенапружують GFP в NAc, яким давали п'ять кондиційних статевих відчуттів, витрачали значно більше часу під час пост-тесту в сірій камері в парі з сексуальним досвідом порівняно з результатом попереднього кондиціонування, т (8). ) = −3.13, P<0.05. Як і передбачалося, тварини, яким не проводили кондиціонування сексуального досвіду, не змінювали суттєво кількість часу в будь-якій камері незалежно від ін’єкції вірусу. Жінки, які надмірно виражали GFP, які отримували 2 кондиціонуючі сексуальні переживання, не демонстрували кондиціонування місця, тоді як жінки, які отримували два кондиціонуючі сексуальні переживання із надмірним вираженням ΔFosB, провели значно більше часу в камері в парі зі статевим досвідом під час цього тесту, t (7) = −2.48, P <0.05 (малюнок 3).
Сверхэкспрессия вектора ААВ ΔFosB в NAc жіночих сирійських хом'ячків покращує ефективність їх копуляції у неінфекційних чоловіків
Через один тиждень після проведення тесту з кондиційним місцем жінки, жінки з 2 тижнями тестів статевого кондиціонування (групи 4 і 5) піддавалися тесту на сексуальну поведінку чоловіка. У цьому тесті AAV-ΔFosB жінки з 2 попередніми тестами статевого досвіду значно поліпшили свою ефективність копуляції більше, ніж AAV-GFP жінки з 2 до попереднього статевого досвіду (малюнок 4). Частота ударів (частка загальних зрізів, які включали інтромісію) чоловіків, що не їли статево, які були в парі з жінками AAV-ΔFosB, була значно вищою, ніж частота ударів наївних чоловіків у парі з жінками AAV-GFP, t (14) = 4.089 п <0.005.
Обговорення
Попередні експерименти, які використовували вектори AAV для надекспресії ΔFosB, були проведені в модельних системах щура або миші (Уоллес та інші, 2008, Winstanley та інші, 2007, Захаріо та інші, 2006). Ми перевірили моделі експресії вірусу в мозку хом'яка шляхом імуногістохімічного фарбування. Цей аналіз продемонстрував ефективну експресію ΔFosB, яка з'явилася відразу після 3 тижнів після внутрішньочерепної ін'єкції і залишалася підвищеною протягом 9 тижнів в нашому аналізі часу і до 12 тижнів в поведінкових експериментах.
У нашій моделі статевого досвіду повторні копуляторні взаємодії чоловічої статі призводять до сенсибілізації вивільнення дофаміну в NAc (Kohlert & Meisel, 1999, Kohlert та інші, 1997) що має підсилюючі наслідки в умовах, що обумовлюють сприятливе місцем (Meisel & Joppa, 1994, Мейсел та інші, 1996). Ця дофамінова сенсибілізація, а також здатність хом'яків регулювати успішну інтромісію чоловіка, що росте, в результаті повторних сексуальних контактів, демонструє асоціативний відповідь (Бредлі та інші, 2005b). Ми показали, що ця посилена сексуальна поведінка може бути підвищена шляхом надмірної експресії ΔFosB в NAc в контексті підпорогового сексуального досвіду, аналогічного посиленню в інструментальних відповідях на кокаїн, морфін або споживання їжі після подібної гіперекспресії ΔFosB (Колбі та інші, 2003, Олаусон та інші, 2006, Захаріо та інші, 2006). Це покращення статевих взаємодій з чоловіком після сексуального досвіду було відображене придбанням умовного місцеположення. It to to to as a to ne us to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to to.
Враховуючи, що підвищення ΔFosB викликає ці ефекти, слід враховувати основні механізми. Існує дуже мало ідентифікованих молекулярних наслідків, які є наслідком накопичення ΔFosB. МДослідження з використанням мікрочіпів мишей, які надекспресують ΔFosB, вказують на збільшення серин / треонін циклін-залежної кінази-5 (Cdk5), ядерний фактор каппа B (NF-κB), субодиниця GluR2 рецептора глутамату і динорфін (Анг та інші, 2001, Bibb, 2003). Незрозуміло, як ці молекулярні події можуть впливати на пластичність і формування дендритного хребта, хоча Cdk5 має відому роль у збільшенні дендритної щільності хребта (Bibb, 2003, Cheung та інші, 2006, Кумаром та інші, 2005, Норрхолм та інші, 2003), а субодиниці GluR2 або NF-κB були залучені до синаптичнихАнг та інші, 2001, Nestler, 2001, Пікмен та інші, 2003). У майбутніх дослідженнях ми плануємо зосередитися на цих та інших потенційних цілях транскрипції ΔFosB, щоб визначити, як їхня активність коливається з накопиченням ΔFosB після повторної сексуальної поведінки.
Існує велика література, яка постулює чіткі ролі, які оболонка і ядро NAc грають в мотивованій поведінці (Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Перротті та інші, 2008, Пірс і Калівас, 1995 рік). Попередні дослідження в нашій лабораторії незмінно визначали клітинні ефекти сексуального досвіду в ядрі аккумбенс (Бредлі та інші, 2005a, Бредлі та інші, 2005b, Бредлі і Мейзел, 2001, Бредлі та інші, 2004, Kohlert & Meisel, 1999, Kohlert та інші, 1997, Мейсел та інші, 1993), що є основою для націлювання ядра NAc в цьому дослідженні. Наш аналіз анатомічної ступеня надчуттєвої експресії ΔFosB показав, що хоча ін'єкції дійсно були спрямовані на каудальне ядро NAc, експресія ΔFosB часто поширювалася каудально в ростральний BNST. Хоча каудальний NAc і ростральний BNST безумовно є анатомічно різними ядрами, вони не обов'язково функціонально відрізняються, оскільки обидві регіони модулюють багато механістичних елементів, що є ключовими для мотиваційних процесів (наприклад, Koob et al., 2004). У наших дослідженнях мікродіалізу жіночих хом'яків (Kohlert та інші, 1997), ми відзначили нездатність розпізнавати розміщення рострального зонду BNST у тих, що знаходяться в каудальному NAc з точки зору базальних рівнів дофаміну, дофамінових відповідей на статеві взаємодії з чоловіками або закономірностей дофамінергічної аферентної іннервації. Замість того, щоб розглядати поширення інфекції в BNST як методологічно проблематичне, ці результати підтримують ідею функціонального континууму між NAc і BNST.
Хоча ми показали, що надекспресія ΔFosB у жіночих хом'яків є достатній для того, щоб створити умовне місце, віддаючи перевагу сексуальному реагуванню і підвищити копуляторні взаємодії з чоловіками, залишається невідомим, чи вираження ΔFosB також необхідно для цих поведінкових наслідків сексуального досвіду. Недавні дослідження використовували вірус AAV-ΔJunD, який знижує транскрипцію ΔFosB шляхом конкурентно-гетеродимеризуемого з ΔFosB перед зв'язуванням регіону AP-1 з генами (Winstanley та інші, 2007). Використовуючи AAV-ΔJunD для зниження ΔFosB-опосередкованої транскрипції, ми сподіваємося визначити, чи необхідний ΔFosB для поведінкової пластичності, яку ми спостерігали після досвіду сексуальної поведінки, що буде доповнювати результати дослідження, представленого тут. Якщо накопичення ΔFosB і його подальша активація цільових цілей викликають як поведінкову, так і клітинну пластичність, то в нокдаун ΔFosB слід скасувати ці ефекти.
Подяки
Ми хотіли б подякувати Аманді Маллінс, Меліссі МакКурлі та Челсі Бейкер за допомогу в поведінковому тестуванні, кондиціонуванні та обробці тканин. Цю роботу підтримали гранти NIH DA13680 (RLM) і MH51399 (EJN).
посилання
- Аллен П. Б., Захаріо V, Свеннінгсон П, Лепор AC, Центон D, Коста C, Россі С., Бендер Г, Чень Г, Фенг Дж, Снайдер Г.Л., Бернарді Г., Нестлер Е.Я., Ян З, Калабресі П, Грінгард П. для спинофилина і нейрабіну в дофаміно-опосередкованої пластичності. Неврологія. 2006;140: 897-911. [PubMed]
- Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Індукція ядерного фактора-капБ в nucleus accumbens при хронічному введенні кокаїну. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
- Becker JB, Rudick CN, Jenkins WJ. Роль дофаміну в nucleus accumbens і стриатуме під час сексуальної поведінки у самок щура. J Neurosci. 2001;21: 3236-3241. [PubMed]
- Бертон О, Covington HE, 3rd, Ebner K, Цанкова Н.М., Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Індукція дельта-FosB в періакудуальной сірої від стресу сприяє активному копінгу відповідей. Neuron. 2007;55: 289-300. [PubMed]
- Bibb JA. Роль Cdk5 в нейрональній сигналізації, пластичності і наркоманії. Нейросигнали. 2003;12: 191-199. [PubMed]
- Бредлі KC, Boulware MB, Jiang H, Doerge RW, Meisel RL, Mermelstein PG. Зміни в експресії генів в nucleus accumbens і striatum після сексуального досвіду. Гени Brain Behav. 2005a;4: 31-44. [PubMed]
- Бредлі KC, Haas AR, Meisel RL. Поразки 6-гідроксидопаміну у жіночих хом'ячків (Mesocricetus auratus) скасовують сенсибілізовані ефекти сексуального досвіду на копуляторних взаємодіях з чоловіками. Behav Neurosci. 2005b;119: 224-232. [PubMed]
- Bradley KC, Meisel RL. Індукція сексуальної поведінки c-Fos в ядрі accumbens і стимульованої амфетаміном рухова активність сенсибілізована попереднім статевим досвідом у жіночих сирійських хом'ячків. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
- Бредлі KC, Mullins AJ, Meisel RL, Watts VJ. Статевий досвід змінює виробництво циклічного АМФ, опосередкованого рецептором D1, в ядрі accumbens жіночих сирійських хом'ячків. Синапс. 2004;53: 20-27. [PubMed]
- Brenhouse HC, Stellar JR. Експресія c-Fos і deltaFosB диференційно змінюється в різних областях оболонки nucleus accumbens у щурів, сенсибілізованих кокаїном. Неврологія. 2006;137: 773-780. [PubMed]
- Cadoni C, Di Chiara G. Взаємні зміни реакції на дофамін в оболонці і ядрі nucleus accumbens і в дорсальній хворобливо-путамені у щурів, сенсибілізованих до морфіну. Неврологія. 1999;90: 447-455. [PubMed]
- Карл Т.Л., Оніші Ю.Н., Оніші Я.Г., Алібхай І.Н., Уілкінсон М.Б., Кумар А.І. Залежні від протеасом та незалежні механізми дестабілізації FosB: ідентифікація доменів FOSB та вплив на стабільність DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
- Чемберлін Н.Л., Ду Б, де Lacalle S, Saper CB. Рекомбінантний адено-асоційований вірусний вектор: використовують для експресії трансгену і відстеження антероградного тракту в ЦНС. Мозок Рес. 1998;793: 169-175. [PubMed]
- Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Хронічні Фос-антигени: стабільні варіанти deltaFosB, індуковані в мозку хронічними методами лікування. J Neurosci. 1997;17: 4933-4941. [PubMed]
- Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Регулювання дельта-FosB і FosB-подібних білків шляхом електросудомного вилучення і лікування кокаїном. Mol Pharmacol. 1995;48: 880-889. [PubMed]
- Cheung ZH, Фу АК, Ip NY. Синаптичні ролі Cdk5: наслідки вищих когнітивних функцій і нейродегенеративних захворювань. Neuron. 2006;50: 13-18. [PubMed]
- Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Стреатальная клітина, специфічна для сверхэкспрессии DeltaFosB, підвищує стимул для кокаїну. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
- Di Chiara G, Tanda G, Cadoni C, Acquas E, Bassareo V, Carboni E. Гомології та відмінності в дії наркотиків і звичайний підсилювач (їжа) на передачу допаміну: інтерпретаційний механізм механізму наркотичної залежності. Adv Pharmacol. 1998;42: 983-987. [PubMed]
- Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hope BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS. Хронічні зміни дофамінергічної нейротрансмісії призводять до стійкого підвищення дельта-FOSB-подібного білка (ів) як у стриатумі гризунів, так і приатів. Eur J Neurosci. 1996;8: 365-381. [PubMed]
- Harris GC, Hummel M, Wimmer M, Mague SD, Aston-Jones G. Піднесення FosB в nucleus accumbens під час вимушеного стримання кокаїну корелює з дивергентними змінами в функції винагороди. Неврологія. 2007;147: 583-591. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Надія Б, Кософський Б., Хайман С.Е., Нестлер Е.Я. Регулювання безпосередньої ранньої експресії генів і зв'язування AP-1 в ядрі щура щурячого хронічного кокаїну. Proc Natl Acad Sci США А. 1992;89: 5764-5768. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Надія BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Індукція тривалого комплексу AP-1, що складається з змінених Fos-подібних білків у мозку хронічним кокаїном та іншими хронічними методами лікування. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
- Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, молодший, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Чжан YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, DJ Surmeier, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Експресія фактора транскрипції deltaFosB в мозку контролює чутливість до кокаїну. Природа. 1999;401: 272-276. [PubMed]
- Kohlert JG, Meisel RL. Статевий досвід сенсибілізував пов'язані з спаровуваннями реакції дофаміну nucleus accumbens у жіночих сирійських хом'яків. Behav Brain Res. 1999;99: 45-52. [PubMed]
- Kohlert JG, Rowe RK, Meisel RL. Внутрішньорозмірна стимуляція від чоловіка збільшує вивільнення позаклітинного дофаміну з флуор-золото-ідентифікованих нейронів в середньому мозку жіночих хом'яків. Хорм Бехав. 1997;32: 143-154. [PubMed]
- Koob GF, Ahmed SH, Boutrel B, Chen SA, Kenny PJ, Markou A, O'Dell LE, Parsons LH, Sanna PP. Нейробіологічні механізми при переході від вживання наркотиків до наркотичної залежності. Неврологічні та біологічні огляди. 2004;27: 739-749. [PubMed]
- Кумар А, Чой Х., Ренталь W, Цанкова Н.М., Теобальд Д.Е., Труонг Х.Т., Руссо SJ, Лаплант Q, Сасакі Т.С., Уістлер К.Н., Неве Р.Л., Self DW. Хроматин ремоделювання є ключовим механізмом, що лежить в основі кокаїн-індукованої пластичності в striatum. Neuron. 2005;48: 303-314. [PubMed]
- Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Формування дендритного хребта, індукованого кокаїном у D1 та D2 дофамінових рецепторах середніх колючих нейронів nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci США А. 2006;103: 3399-3404. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Лі Я, Колб Б, Робінсон Т.Е. Розташування постійних індукованих амфетаміном змін щільності дендритних колючок на середніх колючих нейронах у nucleus accumbens і caudate-putamen. Neuropsychopharmacology. 2003;28: 1082-1085. [PubMed]
- McClung CA, Nestler EJ. Регулювання експресії генів та винагороди кокаїну CREB та DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
- McClung CA, Nestler EJ. Нейропластичність опосередковується зміненою експресією гена. Neuropsychopharmacology. 2008;33: 3-17. [PubMed]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: молекулярний перемикач для тривалої адаптації в мозку. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
- McDaid J, Graham MP, Napier TC. Індукована метамфетаміном сенсибілізація диференційно змінює pCREB і DeltaFosB на всьому протязі лімбічної схеми мозку ссавців. Mol Pharmacol. 2006;70: 2064-2074. [PubMed]
- Meisel RL, Camp DM, Робінсон Т.Е. Дослідження вентрального стриатального дофаміну під час сексуальної поведінки у сирійських хом'ячків. Behav Brain Res. 1993;55: 151-157. [PubMed]
- Meisel RL, Joppa MA. Умовні переваги місця у хом'яків після агресивних або сексуальних контактів. Physiol Behav. 1994;56: 1115-1118. [PubMed]
- Мейсел Р.Л., Джоппа М.А., Rowe RK. Антагоністи дофамінових рецепторів послаблюють кондиційне місце після сексуальної поведінки у сирійських хом'ячків. Eur J Pharmacol. 1996;309: 21-24. [PubMed]
- Meisel RL, Mullins AJ. Статевий досвід у жінок-гризунів: клітинні механізми та функціональні наслідки. Мозок Рес. 2006;1126: 56-65. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB. Підвищений позаклітинний допамін в nucleus accumbens і стриатум самок щури під час крокувального копулятивного поведінки. Behav Neurosci. 1995;109: 354-365. [PubMed]
- Mumberg D, Lucibello FC, Schuermann M, Muller R. Альтернативно сплайсинг fosB транскриптів призводить до диференційно експресованих мРНК, що кодують функціонально антагоністичні білки. Гени Dev. 1991;5: 1212-1223. [PubMed]
- Nakabeppu Y, Nathans D. Природжена урізана форма FosB, що пригнічує транскрипційну активність Fos / Jun. Стільниковий 1991;64: 751-759. [PubMed]
- Nestler EJ. Молекулярні основи довгострокової пластичності, що лежить в основі наркоманії. Nat Rev Neurosci. 2001;2: 119-128. [PubMed]
- Nestler EJ. Транскрипційні механізми наркоманії: роль дельтаФосБ. Філос Транс Р Соц. 2008;363: 3245-3255. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Norrholm SD, Bibb JA, Nestler EJ, Ouimet CC, Taylor JR, Greengard P. Кокаїн-індукованої проліферації дендритних колючок в nucleus accumbens залежить від активності cyclin-залежної кінази-5. Неврологія. 2003;116: 19-22. [PubMed]
- Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Фармакологічні дослідження регуляції хронічної індукції антигену, пов'язаної з FOS, кокаїном в стриатуме і nucleus accumbens. J фармакологічної та експериментальної терапії. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
- Oades RD, Halliday GM. Система вентрального тегментала (A10): нейробіологія. 1. Анатомія і зв'язок. Мозок Рес. 1987;434(2): 117-165. [PubMed]
- Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB в nucleus accumbens регулює посилену їжею інструментальну поведінку і мотивацію. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
- Пікман МК, Колбі С, Перротті Л. І., Текумалла П, Карле Т, Улері П, Чао Дж, Думан С, Штеффен С, Монтегіа Л, Аллен МР, запас JL, Думан Р.С., МакНіш Дж. , Schaeffer E. Індуцибельна, специфічна для мозку область специфічна експресія домінуючого негативного мутанта c-Jun у трансгенних мишах зменшує чутливість до кокаїну. Мозок Рес. 2003;970: 73-86. [PubMed]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Відмінні закономірності індукції DeltaFosB в мозку наркотичними засобами. Синапс. 2008;62: 358-369. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Pfaus JG, Damsma G, Wenkstern D, Fibiger HC. Статева активність збільшує передачу дофаміну в nucleus accumbens і стриатум щурів-самців. Мозок Рес. 1995;693: 21-30. [PubMed]
- Pierce RC, Kalivas PW. Амфетамін продукує сенсибілізовані збільшення локомоції і позаклітинного допаміну переважно в оболонці nucleus accumbens щурів, яким вводили повторний кокаїн. J фармакологічної та експериментальної терапії. 1995;275: 1019-1029. [PubMed]
- Pierce RC, Kalivas PW. Схемотехнічна модель вираження поведінкової сенсибілізації до амфетаміноподібних психостимуляторів. Brain Res Brain Res Rev. 1997a;25: 192-216. [PubMed]
- Pierce RC, Kalivas PW. Повторний кокаїн змінює механізм, за допомогою якого амфетамін вивільняє дофамін. J Neurosci. 1997b;17: 3254-3261. [PubMed]
- Pierce RC, Kumaresan V. Мезолімбічна дофамінова система: остаточний спільний шлях посилення ефекту від наркотичних засобів? Neurosci Biobehav Rev. 2006;30: 215-238. [PubMed]
- Робінсон Т.Е., Горний Г., Міттон Е., Колб Б. Кокаїнне самоврядування змінює морфологію дендритів і дендритних колючок в nucleus accumbens і neocortex. Синапс. 2001;39: 257-266. [PubMed]
- Робінсон Т.Е., Колб Б. Стійкі структурні модифікації в ядрі accumbens і нейронах префронтального кори головного мозку, отримані попереднім досвідом роботи з амфетаміном. J Neurosci. 1997;17: 8491-8497. [PubMed]
- Робінсон Т.Е., Колб Б. Зміни в морфології дендритів і дендритних шипів в nucleus accumbens і префронтальній корі після повторного лікування амфетаміном або кокаїном. Eur J Neurosci. 1999a;11: 1598-1604. [PubMed]
- Робінсон Т.Е., Колб Б. Морфін змінює структуру нейронів у nucleus accumbens і неокортексі щурів. Синапс. 1999b;33: 160-162. [PubMed]
- Робінсон Т.Е., Колб Б. Структурна пластичність, пов'язана з впливом наркотиків. Нейрофармакологія. 2004;47(Поставка 1): 33-46. [PubMed]
- Tzschentke ТМ. Вимірювання винагороди за допомогою умовної парадигми місцеположення: комплексний огляд ефектів від наркотиків, останні досягнення та нові проблеми. Prog Neurobiol. 1998;56: 613-672. [PubMed]
- Ulery PG, Nestler EJ. Регулювання транскрипційної активності DeltaFosB фосфорилюванням Ser27. Eur J Neurosci. 2007;25: 224-230. [PubMed]
- Ulery PG, Руденко Г., Нестлер Е.Я. Регулювання стабільності DeltaFosB фосфорилюванням. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
- Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Вплив DeltaFosB в ядро accumbens на природну поведінку, пов'язану з винагородою. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB регулює рух колеса. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
- Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Індукція DeltaFosB в орбітофронтальній корі опосередковує толерантність до кокаїн-індукованої когнітивної дисфункції. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
- Вовк ME, Sun X, Mangiavacchi S, Чао СЗ. Психомоторні стимулятори і нейрональна пластичність. Нейрофармакологія. 2004;47(Поставка 1): 61-79. [PubMed]
- Захаріу V, Боланос С.А., Селлі Д.Е., Теобальд Д., Кесіді М.П., Кельз М.Б., Шоу-Лучман Т, Бертон О, Сім-Селлі Л.Я., Ділеон Р.Я., Кумар А., Нестлер Е.Я. Істотну роль відіграє DeltaFosB в ядрі accumbens в дії морфіну. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
;