Індукція DeltaFosB в підтипах Striatal Medium Spiny Neuron у відповідь на хронічні фармакологічні, емоційні та оптогенетичні стимули (2013)

J Neurosci. 2013 Nov 20; 33 (47):18381-95. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013.

Лобо МК, Zaman S, Damez-Werno DM, Koo JW, Багот RC, Діньєрі JA, Nugent A, Фінкель Е, Чаудхури Д, Чандра Р, Ріберіо Е, Рабкін J, Mouzon E, Cachope R, Cheer JF, Han MH, Дієц ДМ, Self DW, Херд Ю.Л., Vialou V, Nestler EJ.

Source

Кафедра анатомії та нейробіології, Медичний університет Мерілендського університету, м. Балтимор, штат Меріленд, 21201, кафедра нейрознавства та Інститут мозку Фрідмана, Медична школа Ікана на горі Синай, Нью-Йорк, Нью-Йорк, 10029, кафедри психіатрії та фармакології та систем Терапевтичні засоби, Медична школа Ікана на Маунт-Сінаї, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10029, кафедра психіатрії, Техаський університет Південно-Західного медичного центру, Даллас, Техас 75390, кафедра фармакології та токсикології та Науково-дослідний інститут наркоманії, Державний університет Нью-Йорка в Буффало, Нью-Йорк, Нью-Йорк 14214, та Інституті національної сантехніки та речерешних медікалей, U952, Національному національному центрі загальної науки, Університетському містечку 7224, UPMC, Париж, 75005, Франція.

абстрактний

Фактор транскрипції, ΔFosB, сильно та наполегливо індукується в стриатумі кількома хронічними подразниками, такими як зловживання наркотиками, антипсихотичні препарати, природні винагороди та стрес. Однак дуже мало досліджень вивчало ступінь індукції ΔFosB у двох підтипах колючого нейрону колючих нейронів (MSN). Ми використовуємо флуоресцентні репортерні BAC-трансгенні миші для оцінки індукції ΔFosB в допаміновому рецепторі 1 (D1), збагаченому рецепторами допаміну 2 (D2), збагаченими MSN у вентральній смугаті, ядрі acumbens (NAc), оболонці та серцевині та в дорсальному стриатумі (drsal striatum) ) після хронічного впливу кількох наркотиків, що зловживають, включаючи кокаїн, етанол, Δ (9) -тетрагідроканабінол та опіати; антипсихотичний препарат, галоперидол; збагачення неповнолітніх; пиття сахарози; обмеження калорій; антидепресант зворотного захоплення селетоніну, флуоксетин; і соціальний стрес поразки. Наші результати показують, що хронічне опромінення багатьма подразниками викликає ΔFosB в селективній схемі підтипу MSN у всіх трьох смугастих областях. Для дослідження ланцюгової індукції ΔFosB в стриатумі ми використовуємо оптогенетику для посилення активності в лімбічних областях мозку, які посилають синаптичні входи до NAc; ці регіони включають вентральну тегментальну область і кілька глутаматергічних аферентних областей: медіальну префронтальну кору, мигдалину та вентральний гіпокамп. Ці оптогенетичні умови призводять до дуже чітких моделей індукції ΔFosB в підтипах MSN в ядрі та оболонці NAc. Разом ці дані встановлюють селективні закономірності індукції ΔFosB у стритальних підтипах MSN у відповідь на хронічні подразники та дають нове розуміння механізмів механізму індукції ΔFosB в смугаті.

Вступ

Хронічні подразники, включаючи зловживання наркотиками, антипсихотичні препарати, стрес та природні винагороди, викликають стабільне накопичення ΔFosB, усіченого продукту FosB ген, у стриатумі (наприклад, Hope et al., 1994; Hiroi і Graybiel, 1996; Hiroi et al., 1997; Moratalla et al., 1996; Perrotti et al., 2004, 2008; Мюллер і Унтервальд, 2005; McDaid et al., 2006; Teegarden і Bale, 2007; Wallace et al., 2008; Солінас та ін., 2009; Vialou et al., 2010, 2011; Kaplan et al., 2011). Це накопичення призводить до двонаправленої регуляції багатьох генів ΔFosB в цій області мозку (McClung і Nestler, 2003; Renthal et al., 2008, 2009; Vialou et al., 2010; Робісон і Нестлер, 2011). Стриатум складається в основному (∼95%) з колючих нейронів середньої проекції GABAergic (MSN), які поділяються на два підтипи на основі збагачення багатьох генів, включаючи рецептор дофаміну 1 (D1) або рецептор дофаміну 2 (D2) (Герфен, 1992; Graybiel, 2000; Lobo et al., 2006; Heiman et al., 2008) та за їх різними результатами для різних підкіркових структур (Albin et al., 1989; Герфен, 1992; Kalivas et al., 1993; Graybiel, 2000; Нікола, 2007; Smith et al., 2013). Останнім часом з'явилося велика кількість звітів, що демонструють чітку молекулярну та функціональну роль цих підтипів MSN у вентральному стриатумі (nucleus acumbens [NAc]) та дорсальному стриатумі (dStr) в опосередкуванні мотиваційної та рухової поведінки (Лобо і Нестлер, 2011; Gittis і Kreitzer, 2012).

Попередні дослідження показали, що ΔFosB індукується головним чином у D1-MSN хронічним лікуванням кокаїном або хронічним бігом колесом, формою природного винагороди (Moratalla et al., 1996; Werme et al., 2002; Lee et al., 2006), тоді як хронічний стримуючий стрес викликає ΔFosB в обох підтипах MSN (Perrotti et al., 2004). Крім того, переконливі дані щодо трансгенних клітинних типів трансгенних ліній або вірусно-опосередкованого передачі генів демонструють, що індукція ΔFosB в D1-MSN збільшує поведінкову та структурну пластичність на кокаїн, поведінкові реакції на морфін, біг за кермом, винагороду за їжу та стійкість до хронічного соціального ураження стрес, тоді як індукція ΔFosB у D2-MSN негативно регулює поведінкові реакції на біг колеса (Kelz et al., 1999; Werme et al., 2002; Colby et al., 2003; Olausson et al., 2006; Zachariou et al., 2006; Vialou et al., 2010; Grueter et al., 2013; Robison et al., 2013).

Враховуючи вирішальну роль для ΔFosB у регулюванні цих хронічних мотиваційних стимулів, з чіткими ефектами D1-MSN та D2-MSN, ми проводимо тут всебічне дослідження закономірностей індукції ΔFosB у підтипах MSN кількома хронічними подразниками, включаючи хронічне вплив на наркотики зловживань, хронічного лікування антипсихотичним препаратом, хронічного впливу змінених стимулів навколишнього середовища та апетитів, хронічного соціального стресового ураження та хронічного лікування антидепресантом. Для розуміння механізмів ланцюга, що керують індукцією ΔFosB в стриатумі кількома аферентними лімбічними областями мозку, ми використовуємо оптогенетичні технології для багаторазової активації клітинних тіл в дофамінергічних або глутаматергічних аферентних областях мозку та дослідження отриманої індукції ΔFosB в підтипах MSN. Наші результати дають нове уявлення про індукцію ΔFosB у смугастих D1-MSN та D2-MSN хронічними подразниками та вперше демонструють індукцію ΔFosB, опосередковану ланцюгом, у стриатумі та в селективних підтипах MSN.

Матеріали та методи

Тварини.

D1-GFP or D2-GFP миші гемізиготи (Gong et al., 2003) на тлі C57BL / 6 підтримували на світлому темному циклі 12 h з ad libitum їжа та вода. Усі дослідження проводилися відповідно до вказівок, встановлених Комітетами з догляду та використання тварин Інституту тварин у Медичній школі Мерілендського університету та Медичною школою Ікана на горі Синай. Миші-самці (вік 8 тижнів) були використані для всіх експериментів. Всі миші були перфузовані, а мозок був зібраний у другій половині дня світлового циклу. Гемізигота D1-GFP та D2-GFP миші на фоні C57BL / 6 або FVB / N показали, що вони еквівалентні мишам дикого типу щодо поведінки, фізіології D1-MSN та D2-MSN та розвитку MSN (Lobo et al., 2006; Чан та ін., 2012; Nelson et al., 2012). Більше того, загальні закономірності індукції ΔFosB, що спостерігаються в цьому дослідженні, порівнянні з тими, що спостерігаються у тварин дикого типу з неселективними інструментами, що не відповідають клітинам (наприклад, Perrotti et al., 2004, 2008).

Лікування кокаїном

D1-GFP (n = 4 на обробку) та D2-GFP (n = 4 на обробку) миші отримували 7 щоденні внутрішньочеревні ін'єкції кокаїну (20 мг / кг) або 0.9% фізіологічного розчину в домашній клітці. Для ін'єкцій кокаїну 1 або 3 d (20 мг / кг) миші отримували 6 або 4 d ін'єкцій фізіологічного розчину 0.9 з наступним введенням кокаїну 1 або 3 d відповідно. Усім мишам перфузували 24 год після останньої ін'єкції. Ця доза кокаїну була обрана на основі попередніх досліджень (наприклад, Maze et al., 2010).

Лікування галоперидолом.

D1-GFP (n = 3 або 4 на обробку) та D2-GFP (n = 4 на обробку) миші отримували галоперидол (2 мг / кг) у питній воді, рН 6.0 (Narayan та ін., 2007), або звичайна питна вода, pH 6.0, протягом 3 тижнів (21 d). Мишей перфузували в день 22.

Лікування морфіном.

D2-GFP миші (n = 4 або 5 на лікування) на короткий час знеболювали ізофлураном та отримували підшкірні імплантати морфіну (25 мг) або шахрайських гранул на день 1 та день 3, як описано раніше (Mazei-Robison et al., 2011). Мишей перфузували в день 5.

Обробка етанолом.

D2-GFP миші (n = 4 або 5 на обробку) потрапляли під дію етанолу 10% (EtOH), дози, яку було показано, що C57BL / 6 п'є (Yoneyama та ін., 2008). Мишам було проведено тест вибору двох пляшок для 10% EtOH (пляшка А) та води (пляшка В), тоді як D2-GFP контролює отриману воду в обох пляшках (пляшки А і В) протягом 10 d. Всі миші, що отримували EtOH-пляшки, демонстрували перевагу EtOH, обчислену (100 × флакон A об'єм / [пляшка A об'єм + об'єм флакона B]). Миші, які отримували пляшку 10% EtOH, споживали значно більше EtOH порівняно з водою, тоді як миші, які отримували воду в обох пляшках, не демонстрували різниці в споживанні рідини. Ввечері дня 10 всім мишам давали нормальну питну воду і перфузували в день 11.

Лікування Δ (9) -тетрагідроканабінолом (Δ (9) -THC).

D2-GFP (n = 3 на лікування) миші отримували внутрішньочерепні ін'єкції Δ (9) -THC (10 мг / кг) або носій (0.9% фізіологічний розчин із 0.3% Tween) два рази на день протягом 7 d (Perrotti et al., 2008). Мишам перфузували 24 год після останньої ін'єкції.

Кокаїнове самоуправління.

D2-GFP миші (n = 4 або 5 за кожну обробку) спочатку навчалися виконувати притиск важелів для гранул цукрози 20 mg за фіксованим співвідношенням графіку зміцнення 1 (FR1) до досягнення критерію придбання гранул сахарози 30, спожитого протягом послідовних тестових днів 3, згідно стандартних процедур (Larson et al., 2010). Мишам, які навчилися виконувати натиск, хірургічно імплантували внутрішньовенним яремним катетером, щоб забезпечити подальше внутрішньовенне введення кокаїну. Через тиждень після операції мишей були введені до парадигми самостійного введення під час щоденних сеансів 2 h за графіком посилення FR1. Обладнання для самоуправління (Med Associates) було запрограмовано таким чином, що реакція на активний важіль призвела до доставки (понад 2.5 с) кокаїну (0.5 мг / кг / інфузія за правильний натиск важеля), тоді як відповідь на неактивний важіль не мав програмованих наслідків. Мишам кокаїну, що вводиться самостійно, за графіком FR1 в щоденних сеансах 2, 5 д на тиждень, протягом 3 тижнів. D2-GFP миші, які отримували ін'єкції фізіологічного розчину 0.9% протягом еквівалентного періоду часу, використовували в якості контролю. Мишам перфузували 24 год після останнього введення кокаїну чи сольового розчину.

Героїнове самоуправління.

До самоврядування героїном, D2-GFP миші (n = 4 за кожну обробку) проходили навчання для використання важельних прес для шоколадних гранул (BioServ, Dustless Precision Pellets) протягом семи щоденних сеансів 1. Мишам, які навчилися виконувати натиск, хірургічно імплантували внутрішньовенним яремним катетером, щоб забезпечити наступне внутрішньовенне введення героїну. Через тиждень після операції мишей вводили до парадигми самостійного введення під час щоденних сеансів 3 h за графіком посилення FR1 згідно стандартних процедур (Navarro та ін., 2001). Обладнання для самостійного адміністрування (Med Associates) було запрограмовано таким чином, що реакція на активний важіль призвела до доставки (понад 5 с) героїну (30 мкг / кг / ін’єкція; програма постачання наркотиків NIDA), тоді як відповідь на неактивну важіль не мав програмованих наслідків. Тваринам було надано доступ до процедури самостійного введення героїну для 14 d. D2-GFP миші, які отримували ін'єкції фізіологічного розчину 0.9% протягом еквівалентного періоду часу, використовували в якості контролю. Мишам перфузували 24 год після останнього введення героїну чи сольового розчину.

Екологічне збагачення неповнолітніх.

D2-GFP (n = 4 на групу) мишей відлучили в збагачене середовище або нормальні умови проживання в післяпологовий день 21 (P21) з використанням парадигми, адаптованої від щурів (Green et al., 2010). Збагачене середовище складалося з більшої клітки хом'яка з підстилкою для збагачення кобза (постільна білизна Andersons Laboratory), наповненою пристроями для збагачення, які включали тунелі миші, купол і колеса, кулі для повзання, хатини (Bio Serv) та інші іграшки. Миші залишалися в умовах утримання протягом 4 тижнів до P50 і потім були перфузовані.

Лікування цукрози.

D2-GFP миші (n = 4 або 5 на обробку) було проведено тест вибору у двох флаконах на сахарозу 10%, аналогічний попередньому дослідженню (Wallace et al., 2008). Мишам давали 10% сахарози (пляшка А) та води (пляшка В), тоді як D2-GFP контролює отриману воду в обох пляшках протягом 10 d. Усі миші, що отримували сахарозні пляшки, виявляли перевагу сахарози, як обчислювали (100 × пляшка Об'єм / флакон A Обсяг + флакон B об'єм). Миші, які отримали пляшку сахарози 10%, споживали значно більше сахарози порівняно з водою, тоді як миші, які отримували воду в обох пляшках, не демонстрували різниці в споживанні рідини. Ввечері дня 10 всім мишам давали нормальну питну воду і перфузували в день 11.

Обмеження калорій.

D2-GFP миші (n = 4 на генотип) пройшов протокол обмеження калорій, в якому вони отримували 60% ad libitum калорій щодня (Vialou et al., 2011) для 10 d. D2-GFP контрольні миші отримали повний доступ до чау. Увечері дня 10 всі миші отримали повний доступ до чау і були перелиті в день 11.

Соціальний поразковий стрес.

D2-GFP миші (n = 4 або 5 на групу) зазнав 10 d соціального стресового ураження, як описано раніше (Berton et al., 2006; Krishnan та ін., 2007). Миші піддавалися дії агресивних селекціонерів CD1 у відставці протягом 5 хв у великій клітці хом'яків. Потім мишей розміщували протягом 24 год в тій же клітці з іншого боку перфорованого подільника для підтримки сенсорного контакту. Наступного дня мишей піддавали дії нової миші CD1 при тих же умовах та житлі. Це повторювалось для 10 d з новим CD1 щодня. Контрольних мишей розміщували в подібних умовах без поразкового стресу. Мишей тестували на соціальну взаємодію на день 11. Спочатку мишей випробовували на час, витрачений на взаємодію з новою камерою у вільному полі без іншої миші (без мети), а потім потім тестували на час, витрачений у взаємодії з новою мишею CD1 (мішенню), яка містилася позаду камери (Berton et al., 2006; Krishnan та ін., 2007). Мишей були розділені на чутливі або стійкі групи на основі раніше описаних параметрів (Krishnan та ін., 2007). Сюди входило загальний час, проведений з новою мишею, і коефіцієнт взаємодії: (час, витрачений на ціль / час, витрачений без цілі) × 100. Показано, що цей захід надійно визначає сприйнятливі та стійкі групи і сильно корелює з іншими поведінковими відмінностями (Krishnan та ін., 2007). Усім мишам переливали 24 год після тесту на соціальну взаємодію (48 год після останнього епізоду соціальної поразки).

Лікування флуоксетином.

D2-GFP миші (n = 3 або 4 на групу) отримували щоденні внутрішньочеревні ін'єкції 14 флуоксетину (20 мг / кг) або носія (0.9% фізіологічний розчин з 10% циклодекстрину) (Berton et al., 2006). Мишам перфузували 24 год після останньої ін'єкції.

Стереотаксична хірургія.

D2-GFP мишам знеболили кетамін (100 мг / кг) / ксилазин (10 мг / кг), помістили в стереотаксичний інструмент для тварин, і поверхня їх черепа була опромінена. Тридцять три калібрувальні голки використовувались для одностороннього введення 0.5 – 1 мкл зі швидкістю 0.1 мкл на хвилину вірусу двосторонньо у вентральну тегментальну область (VTA), медіальну префронтальну кору (mPFC), мигдалину або вентральний гіпокамп ( vHippo). AAV [адено-асоційований вірус] -hSyn-ChR2 [каналродопсин 2] -EYFP або AAV-hSyn-EYFP вливали у VTA D2-GFP миші (n = 5 на групу) при стереотаксичних координатах (передній-задній, −3.3 мм; бічний – медіальний, 0.5 мм; спинно-вентральний, −4.4 мм, кут 0 °). Далі йшли двосторонні канюлі (26-датчик), довжиною 3.9 мм, імплантація над VTA (передньо-заднє, −3.3 мм; бічно-медіальне, 0.5 мм; спинно-вентральне, −3.7 мм) (Koo та ін., 2012; Chaudhury et al., 2013). AAV-CaMKII-ChR2-mCherry або AAV-CaMKII-mCherry вводили в mPFC (n = 4 або 5 на групу), амігдала (n = 3 або 4 на групу), або vHippo (n = 3 або 4 на групу) D2-GFP мишей з подальшою імплантацією 105 мкм хронічних імплантованих оптичних волокон (Sparta et al., 2011). Координати були такими: mPFC (інфралімбічний був націлений, але ми спостерігали перенесення вірусу в прелімбічні регіони: передньо-заднє, 1.7 мм; бічне – медіальне, 0.75 мм; спинно-вентральне, −2.5 мм, кут 15 °) та оптичне волокно (спинно-вентральний, −2.1 мм); мигдалина (базолатеральна мигдалина була націленою, але ми спостерігали розплив вірусу в центральне ядро ​​мигдалини; переднє-заднє, −1.6 мм; бічно-медіальне, 3.1 мм; спинно-вентральне, −4.9 мм, кут 0 °) та оптичний волокно (спинно-вентральне, −4.9 мм); vHippo (вентральний субкулюм був націленим, але ми спостерігали перекидання вірусу в інші ділянки вентрального гіпокампу; передньо-заднє, −3.9 мм; бічне – медіальне, 3.0 мм; спинно-вентральне, −5.0 мм, кут 0 °) та оптичне волокно (спинно-вентральний, −4.6 мм).

Оптогенетичні умови.

для в природних умовах оптичний контроль випалу нейронів VTA, змінений накладний шнур оптичного волокна 200 мкм змінено для приєднання до канюлі. Коли волокно було закріплене на канюлі, кінчик волокна простягнувся на ∼0.5 мм за межі канюлі (Lobo et al., 2010; Chaudhury et al., 2013). Для в природних умовах оптичне управління mPFC, мигдалиною та vHippo нейронним випалом, на імплантовані волокна кріплення головки прикріплювали розщеплений волокнистий шнур 62.5 мкм (Sparta et al., 2011). Оптичні волокна були прикріплені через адаптер FC / PC до синього лазерного діода 473 nm (Crystal Lasers, BCL-473-050-M), а світлові імпульси генерувалися через стимулятор (Agilent, 33220A). Для VTA, фазових імпульсів синього світла (473 нм), 20 Гц для 40 мс (Chaudhury et al., 2013), були доставлені протягом 10 хв на день протягом 5 d. Для mPFC, амігдали та vHippo імпульси синього світла (473 нм), 20 Гц за 30 с, постачалися протягом 10 хв на день протягом 5 d. Подача світла відбулася в клітку додому, і всі миші перфузували 24 год після останньої світлової стимуляції.

Патч-затискача електрофізіологія in vitro.

Цільноклітинні записи отримували з дофамінових нейронів VTA або глутаматергічних нейронів mPFC в гострих зрізах головного мозку від мишей, яким вводили віруси, зазначені вище. Записи зрізів проводили на мишах без в природних умовах стимуляція, але з 1 d стимуляції скибочки (1 d) або 4 d в природних умовах стимуляція та 1 d стимуляції зрізів (5 d). Щоб мінімізувати стрес і отримати здорові шматочки, мишей анестезували негайно після доставки до зони електрофізіології та перфузували протягом 40 – 60 s крижаним aCSF, який містив 128 мм NaCl, 3 мм KCl, 1.25 мм NaH2PO4, 10 мм d-глюкози, 24 мм NaHCO3, 2 мм CaCl2, і 2 мм MgCl2 (оксигенований 95% O2 і 5% CO2, pH 7.4, 295 – 305 mOsm). Гострі зрізи мозку, що містять mPFC або VTA, вирізали за допомогою мікросхеми (Ted Pella) у холодній сахарозі-aCSF, яку отримували шляхом повної заміни NaCl на сахарозу 254 мм і насиченою 95% O2 і 5% CO2. Зрізи витримували в утримувальній камері з aCSF протягом 1 год при температурі 37 ° C. Патч-піпетки (3 – 5 MΩ) для цілоклітинного струму заповнювали внутрішнім розчином, що містить: 115 мм глюконат калію, 20 мм KCl, 1.5 мм MgCl2, 10 мм фосфокреатин, 10 мм HEPES, 2 мм магнію АТФ і 0.5 мм GTP (pH 7.2, 285 mOsm). Записи суцільних клітин проводили за допомогою aCSF при температурі 34 ° C (швидкість потоку = 2.5 мл / хв). Потяги синього світла (20 Гц для mPFC або фазовий 20 Гц, 40 мс для VTA) генерували стимулятором, підключеним через адаптер FC / PC до синього лазерного діода 473 нм (OEM) і доставляли на mPFC і VTA фрагменти через 200 мкм оптичного волокна. Експерименти із струмовим затисканням проводилися за допомогою підсилювача Multiclamp 700B, а збирання даних проводилося в pClamp 10 (Molecular Devices). Серійний опір контролювали під час експериментів, а мембранні струми та напруги фільтрували при 3 кГц (фільтр Бесселя).

Імуногістохімія.

Мишей анестезували хлоральним гідратом і перфузували 0.1 m PBS з подальшим 4% параформальдегіду в PBS. Мозок післяфіксували в 4% параформальдегіду протягом ночі, а потім цироконсервували в 30% сахарози. Мозок секціонували на кріостаті (Leica) при 35 мкм в PBS з 0.1% азидом натрію. Для імуногістохімії секції блокували в нормальній сироватці осла 3% з 0.01% тритоном-X в PBS протягом 1 год на шейкері при кімнатній температурі. Потім секції інкубували в первинних антитілах в блоці протягом ночі на шейкері при кімнатній температурі. Використовувані антитіла були: кролячі анти-FosB (1: 2000, каталог # sc-48, Santa Cruz Biotechnology), миші анти-NeuN (1: 1000, каталог #MAB377, Millipore), курячі анти-GFP (1: 5000 , каталог № 10-20, Aves) та кролячий анти-CREB (білок, що зв'язує елемент cAMP; 1: 1000, каталог # 06-863, Millipore). Наступного дня зрізи промивали в PBS з наступною інкубацією 1 h у вторинних антитілах: ослячий анти-кролик Cy3, віслюк проти миші Cy5 і віслюк проти курячого DyLight-488 або Alexa-488 (Jackson ImmunoResearch Laboratories). Для імуногістохімії mCherry і тирозин гідроксилази експерименти проводили, як описано раніше (Lobo et al., 2010; Mazei-Robison et al., 2011). Розрізи промивали в PBS, встановлювали на гірки і накривали кришками.

Зображення та підрахунок комірок.

Іммунофлуоресценцію зображували на контаксовому мікроскопі Зейса або Аксиос Bx61. Підрахунок клітин проводили за допомогою програмного забезпечення ImageJ. Зображення для відбору проб брегми 1.42 – 1.1 NAc (ядро та оболонка) та дорзального стриатуму були взяті з відділів мозку / тварини 2 або 3 (див. Рис. 1A). Всього клітин 400 – 500 підраховували на область мозку на мишу, використовуючи зображення 250 мкм × 250 мкм. Клітини підраховували за допомогою програмного забезпечення ImageJ, подібного до попереднього дослідження (Lobo et al., 2010). Приблизно 400 – 500 загальну кількість клітин NeuN підраховували на область мозку на мишу, а потім кількість GFP+, GFP+: ΔFosB+, GFP-та GFP-: ΔFosB+ клітини підраховували в кожній області. Дані були кількісно оцінені так: (GFP+: ΔFosB+ нейрони × 100%) / (загальний GFP+ нейрони) та (GFP)-: ΔFosB+ нейрони × 100%) / (загальний GFP- нейрони). Статистичний аналіз проводили за допомогою програмного забезпечення GraphPad Prism. Двосторонні ANOVA з подальшими пост-тестами Бонферроні були використані для всіх аналізів підрахунку клітин.

Малюнок 1.  

Хронічний кокаїн селективно індукує ΔFosB в D1-MSN в смугастих регіонах. A, Для підрахунку клітин використовувались смугасті відрізки від брегми + 1.42 до + 1.10. Зображення а D2-GFP смугастий розріз демонструє три досліджувані три смугасті області: серцевина NAc, ...

результати

ΔFosB індукується різним чином у D1-MSN та D2-MSN після повторного впливу кокаїну проти галоперидолу

Ми вперше дослідили індукцію ΔFosB в підтипах MSN в D1-GFP та D2-GFP мишей, що використовують хронічні умови кокаїну, раніше показано, що переважно індукують білок ΔFosB в D1-MSN (Moratalla et al., 1996). D1-GFP та D2-GFP Трансгенні миші BAC, які експресують посилений зелений флуоресцентний білок під геном D1 або D2 рецептора (Рис. 1A), отримували внутрішньочеревні ін'єкції кокаїну (20 мг / кг) або фізіологічного розчину протягом 7 d, а мізки збирали 24 год після остаточної ін'єкції (Рис. 1B). Потім ми виконували імуногістохімію на відділах головного мозку, використовуючи антитіла проти NeuN, GFP або FosB, та візуалізували та підраховували клітини в ядрі NAc, оболонці NAc та dStr (Рис. 1A,C). Тоді як антитіло проти FosB розпізнає повнорозмірні FosB та ΔFosB, численні дослідження, що застосовують вестерн-блот або імуногістохімію, підтвердили, що ΔFosB - єдиний вид, який можна виявити, присутній у точці часу виведення 24 h (наприклад, Perrotti et al., 2008). Тому ми використовували годинник 24 h або довший час для збору мізків після всіх умов цього дослідження, щоб переконатися, що ми виявляємо лише ΔFosB. Оскільки смугасті МСН містять ∼95% усіх нейронів у стриатумі, ми використовували імуномаркирування NeuN для ідентифікації GFP- нейрони, які збагачені протилежним підтипом MSN (тобто D2-MSN в D1-GFP мишей та D1-MSN у D2-GFP мишей). Ми це виявили D1-GFP миші, оброблені кокаїном, демонструють значну індукцію ΔFosB в GFP+/ NeuN+ нейрони (D1-MSN) в ядрі NAc, оболонці NAc і dStr, тоді як GFP-/ NeuN+ клітини (D2-MSN) не показали значної індукції ΔFosB у всіх смугастих областях (Рис. 1D): двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин F(1,12) = 16.41, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; Оболонка NAc: препарат × тип клітини F(1,12) = 12.41, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.001; dStr: препарат × тип клітини F(1,12) = 12.07, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01. Відповідно до цих висновків ми спостерігали в D2-GFP мишей не має значної індукції ΔFosB в GFP+/ NeuN+ нейрони (D2-MSN), але значна індукція ΔFosB в GFP-/ NeuN+ (D1-MSN) у всіх смугастих регіонах після лікування кокаїном (Рис. 1D): двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин F(1,12) = 15.76, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.0001; Оболонка NAc: препарат × тип клітини: F(1,12) = 20.33, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; dStr: препарат × тип клітини: F(1,12) = 35.96, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.001. Ми досліджували кінетику індукції ΔFosB в MSN після ін'єкцій 1, 3 або 7 днів кокаїну (20 мг / кг, в / в). Ми спостерігали значну індукцію ΔFosB у D1-MSN з 3 або 7 днями лікування кокаїном порівняно з лікуванням сольовим розчином у всіх смугастих областях (Рис. 1F): репрезентативний графік від dStr; двостороння ANOVA, тип клітини × добу F(2,13) = 17.87, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.01, p <0.001. Це узгоджується з тимчасовим ходом накопичення ΔFosB у смугастому тілі, який спостерігався раніше Вестерн-блоттингом (Hope et al., 1994) і підтверджує селективну індукцію ΔFosB виключно в D1-MSN протягом усього періоду дії кокаїну.

Далі ми дослідили індукцію ΔFosB імуногістохімією в підтипах MSN після хронічного впливу галоперидолу (Рис. 2). Попередня робота побічно передбачала, що хронічний галоперидол може спричинити перевагу ΔFosB переважно у D2-MSN (Hiroi і Graybiel, 1996; Atkins et al., 1999), хоча це до цього часу не досліджувалося безпосередньо. D1-GFP та D2-GFP миші отримували галоперидол (2 мг / кг) у питній воді, рН 6.0, тоді як D1-GFP та D2-GFP контрольні миші отримували регулярну питну воду, pH 6.0, протягом 21 d (3 тижнів), а мізки збирали в день 22 (Рис. 2A). Як і у випадку з кокаїном, ми знаємо, що вся FosB-подібна імунореактивність у стриатумі в цей момент часу являє собою ΔFosB, а не повнорозмірний FosB (Atkins et al., 1999). Ми це виявили D1-GFP миші, які отримували галоперидол, не показали значної індукції ΔFosB в GFP+/ NeuN+ нейрони (D1-MSN) в ядрі NAc, оболонці NAc або dStr; однак, значне збільшення ΔFosB спостерігалось у GFP-/ NeuN+ нейрони (D2-MSN) у всіх смугастих областях (Рис. 2B,C): двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин: F(1,10) = 23.29, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; Оболонка NAc: препарат: препарат × тип клітини: F(1,10) = 30.14, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; dStr: препарат × тип клітини: F(1,10) = 37.63, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p <0.0001. Це було підтверджено експертизою D2-GFP мишей: ми спостерігали значну індукцію ΔFosB в GFP+/ NeuN+ нейрони (D2-MSN) у всіх трьох смугастих областях, але суттєвих змін ΔFosB у GFP не було-/ NeuN+ (D1-MSN) після лікування галоперидолом (Рис. 2B,C): двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин: F(1,12) = 24.30, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.05; Оболонка NAc: препарат × тип клітини: F(1,12) = 26.07, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.001; dStr: препарат × тип клітини: F(1,12) = 21.36, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.01. Враховуючи те, що ми спостерігали подібну закономірність індукції ΔFosB в D1-MSN при багаторазовому впливі кокаїну в обох D1-GFP (GFP)+/ NeuN+) і D2-GFP (GFP)-/ NeuN+) мишей і повторним галоперидолом у D2-MSN в D1-GFP (GFP)-/ NeuN+) і D2-GFP (GFP)+/ NeuN+) мишей, що залишилася в наших експериментах D2-GFP мишей для дослідження індукції ΔFosB в D1-MSN (GFP)-/ NeuN+) і D2-MSN (GFP)+/ NeuN+) після інших хронічних подразників.

Малюнок 2.  

Хронічний галоперидол селективно індукує ΔFosB в D2-MSN в смугастих областях. A, Часовий курс лікування 21 d галогеридолом (2 мг / кг у питній воді) або водою. B, Імуногістохімія оболонки NAc D1-GFP та D2-GFP мишей після галоперидолу ...

В якості контролю ми досліджували рівні експресії CREB в умовах кокаїну та галоперидолу, щоб визначити, чи можна наші висновки узагальнити до інших факторів транскрипції (Рис. 3). Ми не спостерігали суттєвої різниці в експресії CREB між контрольними та лікувалими препаратами мишами. Крім того, ми не спостерігали різниці в рівнях CREB між D2-MSN і D1-MSN (Рис. 3B,C).

Малюнок 3.  

Хронічний кокаїн або галоперидол не викликає CREB у підтипах MSN. A, Імунологічне забарвлення для CREB та GFP у стриматі D2-GFP мишей після хронічного кокаїну або хронічного галоперидолу (Рис. 1 та І22 легенди про лікування препаратами). Шкала шкала, 50 мкм. ...

Виразні закономірності індукції ΔFosB у підтипах MSN шляхом зловживання наркотиками

Оскільки попередні дослідження показали, що інші зловживання наркотиками можуть потужно викликати ΔFosB у стритальних субрегіонах (Perrotti et al., 2008), ми дослідили ΔFosB у підтипах MSN після хронічного впливу опіатів, EtOH або Δ (9) -THC. Ми спочатку вивчили, чи індукує хронічне опромінення морфіну ΔFosB у специфічних підтипах MSN у смугастих областях. D2-GFP миші отримали два підшкірні імплантати шахрайської або морфінової (гранулометричної) гранули в дні 25 і 1, а мізки були зібрані в день 3 (Рис. 4A) коли індукується ΔFosB, але не FosB (Zachariou et al., 2006). Вражаючи на відміну від кокаїну, обидва підтипи MSN показали значне (і приблизно порівнянне) збільшення ΔFosB в ядрі NAc, оболонці NAc та dStr у групі морфіну порівняно з контрольованими контролями, без індукції диференціальної клітини підтипу ΔFosB, що спостерігається у всіх смугастих регіони (Рис. 4A): двостороння ANOVA; Ядро NAc: лікарський засіб F(1,14) = 75.01, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); Оболонка NAc: препарат F(1,14) = 62.87, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); dStr: препарат F(1,14) = 60.11, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Малюнок 4.  

Наркотики, що зловживають, індукують ΔFosB у підтипах MSN у смугастих регіонах. A, Хронічне лікування морфіном (гранули 25 мг у дні 1 та 3) у D2-GFP мишей призводить до значної індукції ΔFosB в обох підтипах MSN в ядрі NAc, оболонці NAc та dStr ...

Далі ми дослідили схему індукції ΔFosB у підтипах MSN після хронічного впливу EtOH. D2-GFP мишам було проведено тест на вибір у двох пляшках для 10% EtOH (пляшка А) та води (пляшка В), тоді як D2-GFP контролі отримували воду в обох пляшках (пляшки А і В), для 10 d і мізки збирали в день 11 (Рис. 4B). Миші, які отримували пляшку 10% EtOH, споживали значно більше EtOH порівняно з водою, тоді як миші, які отримували воду в обох пляшках, не демонстрували різниці у споживанні рідини (Рис. 4B): перевага для групи води з пляшки А: 50.00 ± 4.551%, групи EtOH: 84.44 ± 8.511%; Студентська t тест p <0.05. Хронічне введення EtOH призвело до значної індукції ΔFosB селективно в D1-MSN в ядрі NAc, оболонці NAc та dStr, без змін у D2-MSN (Рис. 4B): двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин: F(1,14) = 24.58, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.05; Оболонка NAc: препарат × тип клітини: F(1,14) = 36.51, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.01; dStr: препарат × тип клітини: F(1,14) = 29.03, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p < 0.01.

D2-GFP мишей також обробляли Δ (9) -THC (10 мг / кг, ip) двічі на день протягом 7 d, а мізки збирали 24 год після останньої ін'єкції. Подібно до умов кокаїну та EtOH, ми спостерігали значне збільшення селективних ΔFosB у D1-MSN у всіх смугастих регіонах у мишей, які отримували хронічний Δ (9) -THC (Рис. 3E): двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин F(1,8) = 26.37, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.01; Оболонка NAc: препарат × тип клітини: F(1,8) = 44.49, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.001; dStr: препарат × тип клітини F(1,8) = 29.30, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p < 0.01.

Далі ми вивчили, чи спостерігається спостережувана закономірність індукції ΔFosB у підтипах MSN шляхом введення кокаїном або опіатами дослідників у умовних парадигмах, в яких миші вольово самостійно вводять наркотики. Спочатку, D2-GFP мишей навчали самостійно вводити кокаїн (0.5 мг / кг / інфузія) за графіком FR1 протягом дня 2 на 3 тижнів, а мозок збирали 24 год після останньої інфузії (Рис. 4D), коли, як відомо, індукується ΔFosB, але не FosB (Larson et al., 2010). Миші витрачали значно більше часу, натискаючи на активний та неактивний важіль (Рис. 4D; Студентська t тест p <0.01). Середня добова доза кокаїну становила 19.1 мг / кг внутрішньовенно (Рис. 4D), аналогічно внутрішньочеревній дозі 20 мг / кг, що використовується вище (Рис. 1). Як і у випадку кокаїну, що не враховує (Рис. 1) ми виявили, що самовведення кокаїну спричиняло значну індукцію ΔFosB лише у D1-MSN у всіх смугастих областях порівняно з опроміненням фізіологічним розчином (Рис. 4D): двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин F(1,14) = 21.75, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; Оболонка NAc: препарат × тип клітини: F(1,14) = 26.52, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.01; dStr: препарат × тип клітини F(1,14) = 33.68, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p <0.001. Так само, подібно до неконтентного опіату (морфію) (Рис. 4A), ми це виявили D2-GFP миші, які самостійно вводили героїн (30 мкг / кг на інфузію), за графіком FR1 в день 3 ha протягом 2 тижнів, досліджених 24 год після останнього опромінення препарату, виявили значну індукцію ΔFosB в обох D2-MSN та D1-MSN у всіх смугастих регіони (Рис. 4E): двостороння ANOVA, NAc ядро: препарат F(1,12) = 68.88, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); Оболонка NAc: препарат F(1,12) = 80.08, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: препарат F(1,12) = 63.36, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p < 0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN). Середня добова доза героїну становила 0.459 мг / кг, і миші проводили значно більше часу, натискаючи на активний та неактивний важіль ( t тест p <0.05) (Рис. 4E).

Збагачення навколишнього середовища та апетитні стимули викликають ΔFosB як у D1-MSN, так і в D2-MSN

Оскільки попередні дослідження показали, що природні винагороди індукують ΔFosB в смугастих регіонах (Werme et al., 2002; Teegarden і Bale, 2007; Wallace et al., 2008; Солінас та ін., 2009; Vialou et al., 2011), з індукцією колесо, що працює на колесах, для D1-MSN (Werme et al., 2002), ми перевірили, чи показана індукція іншими природними винагородами клітинної специфічності. Ми вперше застосували парадигму збагачення неповнолітніх, в якій D2-GFP мишей розміщували в збагаченому середовищі після відлучення (3 тиждень) протягом тижня 4 (Рис. 5A). Раніше показано, що такий підхід викликає ΔFosB у миші NAc та dStr (Солінас та ін., 2009; Леманн і Геркенхем, 2011). Порівняно з нормальними умовами житла, збагачене середовище значно збільшило ΔFosB у всіх смугастих регіонах, але це не було зроблено специфічно для клітинного типу, із порівнянною індукцією, що спостерігається у D1-MSN та D2-MSN (Рис. 5A): двостороння ANOVA, NAc ядро: навколишнє середовище F(1,12) = 89.13, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.0001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); Оболонка NAc: навколишнє середовище F(1,12) = 80.50, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: середовище F(1,12) = 56.42, p <0.01, пост-тест Бонферроні: p <0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Малюнок 5.  

Збагачення навколишнього середовища та апетитні стимули викликають ΔFosB в обох підтипах MSN. A, D2-GFP миші, які були розміщені в збагаченому середовищі, починаючи з P21 протягом 4 тижнів, демонструють індукцію ΔFosB в обох підтипах MSN у всіх смугастих ...

Далі ми дослідили експресію ΔFosB у підтипах MSN після хронічних апетитних подразників. Ми вперше протестували ефекти хронічного пиття сахарози, що раніше було продемонстровано, що викликає ΔFosB у NAc щурів (Wallace et al., 2008). D2-GFP мишам було проведено тест на вибір у двох пляшках на сахарозу 10% (пляшка А) та воду (пляшка В), тоді як D2-GFP контролі отримували воду в обох пляшках (пляшки А і В) для 10 d, а мізки збирали в день 11 (Рис. 5B). Миші, які отримували сахарозу 10%, споживали значно більше сахарози, тоді як миші, які отримували воду в обох флаконах, не демонстрували різниці у споживанні рідини (Рис. 5B): перевага для пляшки А, води: 50.00 ± 4.749%, сахарози: 89.66 ± 4.473%; Студентська t тест p <0.001. Ми виявили, що хронічне споживання сахарози індукує ΔFosB в ядрі NAc, оболонці NAc та dStr, і це трапляється в обох підтипах MSN (Рис. 5B): двостороння ANOVA, NAc ядро: лікування F(1,12) = 76.15 p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); Оболонка NAc: лікування F(1,12) = 63.35, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: лікування F(1,12) = 63.36, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Нарешті, ми дослідили експресію ΔFosB у підтипах MSN після обмеження калорій, оскільки цей стан, який збільшує опорно-рухову активність та мотиваційний стан, раніше показав підвищення рівня ΔFosB у NAc миші (Vialou et al., 2011). D2-GFP мишей пройшли протокол з обмеженою калорійністю, в якому вони отримували 60% ad libitum калорій щодня за 10 d та мізки збирали в день 11 (Рис. 5C). Обмеження калорійності збільшило рівень ΔFosB в ядрі NAc та оболонці NAc, як було показано раніше (Vialou et al., 2011), а також підвищив рівень ΔFosB у dStr. Однак ми не спостерігали диференціальної індукції в D1-MSN порівняно з D2-MSN (Рис. 5C): двостороння ANOVA, NAc ядро: лікування F(1,12) = 67.94 p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); Оболонка NAc: лікування F(1,12) = 67.84, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.001 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: лікування F(1,12) = 82.70, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN).

Хронічний соціальний стрес поразки та лікування антидепресантами викликають диференційовану індукцію ΔFosB у підтипах MSN

Ми раніше демонстрували, що ΔFosB підвищується в NAc мишей після хронічного соціального стресового ураження (Vialou et al., 2010). Хоча ця індукція спостерігалася як у сприйнятливих мишей (тих, у яких виявляються шкідливі наслідки стресу), так і у мишей, які стійкі (ті, що уникають більшості цих шкідливих ефектів), індукція ΔFosB була більшою у стійкій підгрупі та була показана безпосередньо опосередковувати стан стійкості. У цьому дослідженні ми виявили вражаючу клітинну специфічність для індукції ΔFosB у цих двох фенотипічних групах. D2-GFP мишей піддавали 10 d соціального стресового ураження та розділяли на сприйнятливі та стійкі популяції на основі міри соціальної взаємодії (Рис. 6A), що сильно корелює з іншими поведінковими симптомами (Krishnan та ін., 2007). У мишей, які розвинули сприйнятливу поведінку після стресу соціального ураження, було виявлено значну індукцію ΔFosB в D2-MSN в ядрі NAc, оболонці NAc та dStr порівняно з контрольними та стійкими мишами, при цьому індукція не виявлялась у D1-MSN. Вражаючий контраст, пружні миші виявляли значну індукцію ΔFosB у D1-MSN по всіх смугастих областях порівняно з чутливими та контрольними мишами, без індукції, що спостерігається у D2-MSN (Рис. 6A; двостороння ANOVA, NAc ядро: група × тип клітин F(1,20) = 20.11, p <0.05, пост-тест Бонферроні: D2-MSN / сприйнятливий p <0.05, D1-MSN / еластичний p <0.05; Оболонка NAc: група × тип клітини F(1,20) = 27.79, p <0.01, пост-тест Бонферроні: D2-MSN / сприйнятливий p <0.001, D1-MSN / еластичний p <0.01; dStr: група × тип комірки F(1,20) = 19.76, p <0.01, пост-тест Бонферроні: D2-MSN / сприйнятливий p <0.05, D1-MSN / еластичний p <0.01).

Малюнок 6.  

Хронічний соціальний стрес-поразка та хронічний флуоксетин викликають індукцію ΔFosB у різних підтипах MSN у стриматі. A, D2-GFP які сприйнятливі до перебігу напруги соціального ураження 10 d, демонструють індукцію ΔFosB у D2-MSNs у всіх смугастих ...

Хронічне лікування антидепресантом SSRI, флуоксетином, повертає депресивну поведінку, проявлену сприйнятливими мишами після хронічного соціального стресового ураження (Berton et al., 2006). Більше того, таке лікування індукує ΔFosB у NAc сприйнятливих, а також контрольних мишей, і ми показали, що така індукція необхідна для сприятливих поведінкових ефектів флуоксетину (Vialou et al., 2010). Таким чином, ми дослідили клітинну специфіку індукції ΔFosB після хронічного введення флуоксетину. D2-GFP миші отримували флуоксетин (20 мг / кг, ip) протягом 14 d, а мізки збирали в день 15 (Рис. 6B). Ми спостерігали значну індукцію ΔFosB у D1-MSN, але не у D2-MSN, у мишей, оброблених флуоксетином, порівняно з контрольними засобами (Рис. 6B; двостороння ANOVA, NAc ядро: наркотик × тип клітин F(1,10) = 14.59, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; Оболонка NAc: препарат × тип клітини: F(1,10) = 26.14, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; dStr: препарат × тип клітини F(1,10) = 8.19, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.001).

In vivo оптогенетичне маніпулювання NAc-аферентних областей мозку викликає чіткі закономірності індукції ΔFosB в смугастих областях та підтипах MSN

Враховуючи, що дофамінергічні та глутаматергічні аферентні входи до NAc можуть полегшити пошук винагород та змінити поведінку, що нагадує депресію (Tsai et al., 2009; Covington et al., 2010; Адамантидіс та ін., 2011; Witten та ін., 2011; Бріт та ін., 2012; Lammel et al., 2012; Stuber et al., 2012; Chaudhury et al., 2013; Kumar et al., 2013; Tye та ін., 2013), ми дослідили індукцію ΔFosB у стритальних підтипах MSN після маніпулювання активністю декількох ключових аферентних областей мозку. Ми вірусно виразили ChR2 в кожній з декількох областей і активували їх синім світлом (473 нм), як описано раніше (Gradinaru та ін., 2010; Yizhar та ін., 2011). Оскільки нещодавнє дослідження показало, що фазова стимуляція синім світлом після неклітинної селективної експресії ChR2 у VTA призводила до такого ж поведінкового фенотипу, що і селективна ChR2 фазова стимуляція дофамінових нейронів VTA (Chaudhury et al., 2013), ми виразили ChR2, використовуючи AAV-hsyn-ChR2-EYFP в VTA D2-GFP мишей; контрольним мишам вводили AAV-hsyn-EYFP. Розрізи VTA були одночасно забарвлені тирозин гідроксилазою та GFP для візуалізації експресії ChR2-EYFP (Рис. 7C). D2-GFP миші, що експресують ChR2-EFYP або EYFP самостійно у VTA, отримали 5 d 10 хв. фазової стимуляції синього світла VTA, як описано раніше (Koo та ін., 2012; Chaudhury et al., 2013) (Рис. 7A), а мозок збирали 24 год після останньої стимуляції. Не було десенсибілізації здатності ChR2 активувати дофамінові нейрони VTA після стимуляції 5 d (Рис. 7B). Ми виявили, що повторне фазове стимулювання нейронів VTA, що експресують ChR2-EYFP, збільшує ΔFosB в обох підтипах MSN в ядрі NAc, але тільки в D1-MSN в оболонці NAc (Рис. 7C; двостороннє ядро ​​ANOVA, NAc: оптогенетичні подразники F(1,16) = 51.97, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.001; (обидва підтипи MSN) Оболонка NAc: оптогенетичні подразники × тип клітини: F(1,16) = 13.82, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01). Ми не спостерігали індукції ΔFosB в dStr після фазової стимуляції синім світлом до експресуючого VTA ChR2-EYFP порівняно з контролем EYFP. Ці результати слід інтерпретувати з обережністю, оскільки ми не виборочно націлювали нейрони дофаміну VTA для оптичної стимуляції, а нещодавні дослідження продемонстрували нейдопамінергічну проекцію нейронів у VTA, а також значну неоднорідність VTA, що може призвести до різних поведінкових реакцій залежно від стрільби параметри та субпопуляції уражених нейронів (Tsai et al., 2009; Lammel et al., 2011, 2012; Witten та ін., 2011; Kim et al., 2012, 2013; Tan et al., 2012; van Zessen et al., 2012; Stamatakis and Stuber, 2012; Chaudhury et al., 2013; Tye та ін., 2013).

Малюнок 7.  

Оптогенетична активація областей мозку, які іннервують NAc, викликає чіткі закономірності індукції ΔFosB у підтипах MSN та смугастих областях. A, Парадигма оптогенетичного стимулювання для будь-яких умов. Мозок був зібраний 24 год після оптогенетичного 5 d ...

Далі ми використовували AAV-CaMKII-ChR2-mCherry і AAV-CaMKII-mCherry вектори для вираження ChR2-mCherry або mCherry в якості контролю як в контролі, в mPFC, amigdala або vHippo D2-GFP миші (Рис. 7D – F). Експресія ChR2 та mCherry, опосередкована вірусом CaMKII-ChR2, раніше було продемонстровано, що колокалізується експресією CaMKII, яка переважно мітить глутаматергічні нейрони (Gradinaru та ін., 2009; Warden та ін., 2012). Ми активували клітини, що експресують ChR2 в цих регіонах, синім світлом 20 Гц протягом 10 хв на день протягом 5 d, а мізки збирали 24 год після останньої стимуляції (Рис. 7A). Ця схема стимуляції викликала випал N27 – 33 Гц, головним чином завдяки спостереженому дублетному шипуванню. Не спостерігалося явної десенсибілізації ChR2 при 5 d стимуляції; проте ми спостерігали незначне збільшення вистрілу від 1 до 5 d (32 – 33 Гц) стимуляції. Ми виявили, що оптогенетична активація нейронів mPFC призводила до індукції ΔFosB в D1-MSN в ядрі NAc, тоді як індукція ΔFosB відбулася в обох підтипах MSN в оболонці NAc (Рис. 7D; двостороннє ядро ​​ANOVA, NAc: оптогенетичні подразники × клітинний тип F(1,14) = 10.31, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; Оболонка NAc: оптогенетичні подразники F(1,14) = 57.17, p <0.001, пост-тест Бонферроні: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN)). Зміни рівнів ΔFosB у dStr після активації mPFC не спостерігалося. На відміну від них, оптогенетична активація нейронів мигдалини індукує ΔFosB в обох підтипах MSN в ядрі NAc та селективно в D1-MSN в оболонці NAc, без змін у dStr (Рис. 7E; двостороннє ядро ​​ANOVA, NAc: оптогенетичні подразники F(1,10) = 78.92, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); Оболонка NAc: оптогенетичні подразники × тип клітини: F(1,10) = 30.31, p <0.0001, пост-тест Бонферроні: p <0.0001). Нарешті, оптогенетична активація нейронів vHippo викликала значну індукцію ΔFosB лише в D1-MSN як в ядрі NAc, так і в оболонці NAc, при цьому знову не спостерігається змін у dStr (Рис. 7F; двостороннє ядро ​​ANOVA, NAc: оптогенетичні подразники × клітинний тип F(1,10) = 18.30, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01; Оболонка NAc: оптогенетичні подразники × тип клітини: F(1,10) = 22.69, p <0.05, пост-тест Бонферроні: p <0.01).

Обговорення

У цьому дослідженні розглянуто індукцію ΔFosB в D1-MSN та D2-MSN в смугастих ділянках після декількох хронічних подразників (Таблиця 1). Спочатку встановлюємо доцільність використання D1-GFP та D2-GFP репортерські лінії для демонстрації селективної індукції ΔFosB в D1-MSN після хронічного кокаїну та в D2-MSN після хронічного галоперидолу. Висновки кокаїну відповідають попереднім дослідженням (Moratalla et al., 1996; Lee et al., 2006) та встановлену роль ΔFosB в D1-MSN в просуванні нагороди за кокаїн (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Grueter et al., 2013). Раніше ми показали, що кокаїн, який проводить дослідник і який самостійно вводить, викликає ΔFosB в еквівалентній мірі в NAc (Winstanley et al., 2007; Perrotti et al., 2008), і що важливо, ми показуємо, що обидва режими споживання кокаїну вибірково індукують ΔFosB в D1-MSN у всіх трьох смугастих областях. Наші результати узгоджуються з попередніми дослідженнями, що показують, що гострий кокаїн індукує інші негайні ранні гени та фосфорилювання декількох внутрішньоклітинних сигнальних білків лише у D1-MSN (Bateup et al., 2008; Bertran-Gonzalez та ін., 2008). Аналогічно, протилежна закономірність індукції ΔFosB після хронічного галоперидолу відповідає блокаді цієї індукції агоністами рецепторів, подібних D2 (Atkins et al., 1999), а також при гострій галоперидоловій селективній індукції безпосередніх ранніх генів та фосфорилюванню кількох сигнальних білків у D2-MSN (Bateup et al., 2008; Bertran-Gonzalez та ін., 2008).

Таблиця 1.  

Індукція ΔFosB у підтипах СТРС після хронічних фармакологічних, емоційних та оптогенетичних подразниківa

Як і у випадку з кокаїном, ми виявили, що хронічне опромінення двома іншими наркотичними засобами зловживання, EtOH та Δ (9) -THC, селективно індукує ΔFosB у D1-MSN у всіх смугастих регіонах. Раніше ми демонстрували, що EtOH індукує ΔFosB в ядрі NAc, оболонці NAc і dStr, але Δ (9) -THC значно підвищує ΔFosB в ядрі NAc, з тенденцією, що спостерігається в інших регіонах (Perrotti et al., 2008). Ми аналогічно спостерігали тут найбільшу індукцію Δ (9) -THC ΔFosB в ядрі NAc в D1-MSN; наша здатність демонструвати індукцію в інших смугастих регіонах, ймовірно, завдяки використаному клітинному аналізу. Цікаво, що хронічне самовведення морфіну та героїну, на відміну від інших зловживань, викликало ΔFosB в обох підтипах MSN порівняно за всіма смугастими регіонами. Недавнє дослідження показало, що гострий морфін індукує c-Fos у D1-MSN, тоді як вивільнення, осаджене налоксоном після хронічного морфіну, індукує c-Fos у D2-MSN (Enoksson та ін., 2012). Хоча в нашому дослідженні ми не спостерігали ознак відміни опіату, можливо, що більш тонка відміна, що виникає при застосуванні морфіну чи героїну в досліджуваний момент часу, є причиною індукції ΔFosB в D2-MSN, що спостерігаються тут. Раніше ми показали, що ΔFosB у D1-MSN, але не D2-MSN, збільшує корисні реакції на морфін (Zachariou et al., 2006). Тепер було б цікаво перевірити можливість того, що індукція ΔFosB у D2-MSN сприяє противному впливу виведення опіату. Так само слід досліджувати потенційний внесок відміни наркотиків та тягу до індукції ΔFosB, що спостерігається у всіх лікарських засобів.

Попередні дослідження показують, що збагачення навколишнього середовища під час розвитку викликає ΔFosB в NAc та dStr (Солінас та ін., 2009; Леманн і Геркенхем, 2011). Наші дані показують, що це накопичення відбувається однаково у D1-MSN та D2-MSN у всіх смугастих регіонах. Раніше парадигма збагачення показала тупу нагородження та рухові реакції на кокаїн (Солінас та ін., 2009); однак, такий поведінковий фенотип, ймовірно, не є наслідком накопичення ΔFosB, оскільки індукція ΔFosB в D1-MSN тільки посилює поведінкові реакції на кокаїн, тоді як така індукція у D2-MSN не має помітного ефекту (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Grueter et al., 2013). Раніше було показано, що споживання хронічної сахарози збільшує ΔFosB в NAc, а надмірна експресія ΔFosB, або лише в D1-MSN, або в обох підтипах, у NAc збільшує споживання сахарози (Olausson et al., 2006; Wallace et al., 2008). Тут ми спостерігали порівнянну індукцію ΔFosB в обох підтипах MSN у NAc та dStr після пиття сахарози. Нарешті, ми раніше продемонстрували, що індукція ΔFosB в NAc опосередковує певну адаптивну реакцію на обмеження калорій за рахунок посилення мотивації їжі з високим вмістом жиру та зменшення витрат енергії (Vialou et al., 2011). В цілому ці результати показують, що накопичення ΔFosB в NAc і dStr відбувається як у D1-MSN, так і в D2-MSN у відповідь на кілька природних винагород. Цей висновок дивує, враховуючи, що спостереження, що ΔFosB накопичується в D1-MSN лише після чергового природного винагороди, хронічного бігу на колесі, і що перенапруження ΔFosB у D1-MSN посилює ходове колесо, тоді як ΔFosB надвираження у D2-MSNs зменшувало біг колеса (Werme et al., 2002). Однак біг на колесі може активувати різні моторні шляхи, які відповідають за різну схему індукції ΔFosB. У будь-якому випадку результати з іншими природними винагородами говорять про те, що вони по-різному контролюють ΔFosB у стриатумі порівняно з більш потужними винагородами за наркотики, такими як кокаїн, EtOH та Δ (9) -THC. Індукція ΔFosB в обох підтипах MSN за цих природних умов винагородження відповідає недавньому дослідженню, що демонструє, що ініціація дії за винагороду за їжу активує обидва підтипи MSN (Cui et al., 2013).

Хронічний соціальний стрес-поразка індукує ΔFosB в оболонці NAc сприйнятливих і пружних мишей, але в ядрі NAc лише у пружних мишей (Vialou et al., 2010). Крім того, перевиразка ΔFosB у D1-MSN сприяє стійкості після хронічного стресу соціального ураження. Хронічне лікування флуоксетином також спричиняє скупчення ΔFosB в NAc стресових наївних мишей та у сприйнятливих мишей після хронічного соціального стресового ураження; показано, що перенапруження ΔFosB опосередковує антидепресантні поведінкові реакції в останніх умовахVialou et al., 2010). Нарешті, попереднє дослідження продемонструвало індукцію ΔFosB в обох підтипах MSN після хронічного стримуючого стресу (Perrotti et al., 2004). Результати цього дослідження, де ми демонструємо селективну індукцію ΔFosB у D1-MSN у пружних та флюоксетин, оброблених мишами, але вибірково у D2-MSN у чутливих мишей, дають важливе розуміння цих попередніх знахідок та підтримують гіпотезу, що ΔFosB у D1- МСН опосередковує стійкість та антидепресантну дію, тоді як ΔFosB в D2-MSN може опосередковувати сприйнятливість. Для перевірки цієї гіпотези зараз потрібна подальша робота.

Останні роботи з використанням оптогенетики демонструють потужну роль дофамінергічних та глутаматергічних афекторів до NAc у модулюванні винагороди та стресових реакцій (див. Результати). Ми використовуємо ці оптогенетичні інструменти для дослідження індукції ΔFosB в D1-MSN і D2-MSN після повторної активації NAc-аферентних областей. Ми виявили, що фазова стимуляція нейронів VTA або активація в основному глутаматергічних нейронів в амігдалі індукує ΔFosB в D1-MSN в оболонці NAc і в обох підтипах MSN в ядрі NAc. На відміну від цього, активація mPFC нейронів призводить до протилежної картини індукції ΔFosB, при цьому підвищуються рівні D1-MSN в ядрі NAc, але індукція обох підтипів MSN в оболонці NAc. Нарешті, оптогенетична активація нейронів vHippo викликає накопичення ΔFosB тільки в D1-MSN в ядрі та оболонці NAc. Висновки vHippo узгоджуються з останніми дослідженнями, що показують, що введення гіпокампа значно слабкіше для D2-MSN порівняно з D1-MSN (MacAskill та ін., 2012) і що ці входи керують рухом кокаїну (Бріт та ін., 2012). Крім того, наша демонстрація індукції ΔFosB переважно в D1-MSN з усіма вхідними даними відповідає попереднім дослідженням, що показують, що ΔFosB в D1-MSN підвищує корисну реакцію на зловживання наркотиками, а також дослідження, що показують, що оптогенетичне стимулювання дофамінових нейронів VTA або mPFC, амігдала або термінали vHippo в NAc сприяють нагороді (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006; Tsai et al., 2009; Witten та ін., 2011; Бріт та ін., 2012; Grueter et al., 2013).

Нарешті, цілком ймовірно, що в цих двох підтипах MSN є селективні нейронні ансамблі, які диференційно активуються позитивними чи негативними подразниками. Це може пояснювати наше спостереження за індукцією ΔFosB в D2-MSN в певних умовах нагородження (опіати та природні винагороди), а також неприязні (соціальні поразки) умови. Стріатум дуже неоднорідний за межами підтипів MSN, включаючи відділення патча та матриці як в дорсальній, так і в вентральній смузі (Герфен, 1992; Watabe-Uchida та ін., 2012). Крім того, попередні дослідження демонструють активізацію дуже малого відсотка стриатальних нейронних ансамблів психостимуляторами з посиленою індукцією FosB гена в цих активованих нейронах (Гуз-Барбер та ін., 2011; Liu et al., 2013), хоча невідомо, чи є ці активовані нейрони D1-MSN або D2-MSN. Функція ΔFosB в ядрі проти оболонки в опосередкуванні нагородження та відвертості поведінки також невідома. Завищена експресія ΔFosB в D1-MSN збільшувала тихі синапси як в ядрі, так і в оболонці, але експресія в D2-MSN знижувала тихі синапси лише в оболонціGrueter et al., 2013). Крім того, індукція ΔFosB в ядрі проти оболонки, ймовірно, опосередковується за допомогою різних механізмів, оскільки ми виявили кокаїнову стабілізацію CaMKIIα CaMKIIα стабілізації ΔFosB в оболонці, але не в ядрі, що призводить до більшого накопичення ΔFosB в оболонці (Robison et al., 2013). Подальші дослідження, які вибірково орієнтуються на підтипи MSN в ядрах проти оболонки, активованих нейронних ансамблях або патчі проти матричних відділень, допоможуть визначити поведінкову роль ΔFosB у цих гетерогенних областях.

Загалом, ці схеми опосередкованої індукцією типу клітинної селективної клітинної індукції ΔFosB в NAc дозволяють стверджувати, що нагороджувальні та стресові стимули по-різному залучають різні NAc-аференти для кодування специфічних особливостей цих подразників. Наші результати не лише дають всебічне уявлення про індукцію ΔFosB у стритальних підтипах MSN хронічними подразниками, але й ілюструють корисність використання ΔFosB як молекулярного маркера для розуміння тривалих ефектів конкретних нейронних ланцюгів при впливі на функцію NAc.

Виноски

Автори заявляють про відсутність конкуруючих фінансових інтересів.

посилання

  1. Адамантидіс А.Р., Цай Х.С., Ботрель Б, Чжан Ф, Стюбер Г.Д., Будигін Е.А., Туріньо С, Бончі А, Дейссерот К, де Лесея Л. Оптогенетичний допит дофамінергічної модуляції декількох фаз поведінки, що шукає нагороди. J Neurosci. 2011; 31: 10829 – 10835. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2246-11.2011. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  2. Альбін Р.Л., Янг АБ, Пенні Дж. Б. Функціональна анатомія розладів базальних гангліїв. Тенденції Neurosci. 1989; 12: 366 – 375. doi: 10.1016 / 0166-2236 (89) 90074-X. [PubMed] [Крест Реф]
  3. Atkins JB, Chlan-Fourney J, Nye HE, Hiroi N, Carlezon WA, Jr, Nestler EJ. Специфічна для регіону індукція δFosB шляхом багаторазового введення типових проти атипових антипсихотичних препаратів. Синапс. 1999; 33: 118–128. doi: 10.1002 / (SICI) 1098-2396 (199908) 33: 2 <118 :: AID-SYN2> 3.0.CO% 3B2-L. [PubMed] [Крест Реф]
  4. Bateup HS, Svenningsson P, Kuroiwa M, Gong S, Nishi A, Heintz N, Greengard P. Регуляція клітинного типу специфіки фосфорилювання DARPP-32 психостимулюючими та антипсихотичними препаратами. Nat Neurosci. 2008; 11: 932 – 939. doi: 10.1038 / nn.2153. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  5. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Цанкова Н.М., Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Важлива роль BDNF у мезолімбічному дофаміновому шляху при стресі соціального ураження. Наука. 2006; 311: 864 – 868. doi: 10.1126 / наука.1120972. [PubMed] [Крест Реф]
  6. Bertran-Gonzalez J, Bosch C, Maroteaux M, Matamales M, Hervé D, Valjent E, Girault JA. Протилежні закономірності активації сигналів у стриатированних доксамінових D1 та D2 рецепторних нейронах у відповідь на кокаїн та галоперидол. J Neurosci. 2008; 28: 5671 – 5685. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1039-08.2008. [PubMed] [Крест Реф]
  7. Бріт JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Синаптичний та поведінковий профіль декількох глутаматергічних входів у ядро ​​ядер. Нейрон. 2012; 76: 790 – 803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  8. Chan CS, Peterson JD, Gertler TS, Glajch KE, Quintana RE, Cui Q, Sebel LE, Plotkin JK, Heiman M, Heintz N, Greengard P, Surmeier DJ. Штам-специфічна регуляція стритального фенотипу у трансгенних мишей Drd2-eGFP BAC. J Neurosci. 2012; 32: 9124 – 9132. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0229-12.2012. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  9. Chaudhury D, Walsh JJ, Friedman AK, Juarez B, Ku SM, Koo JW, Ferguson D, Tsai HC, Pomeranz L, Christoffel DJ, Nectow AR, Ekstrand M, Domingos A, Mazei-Robison MS, Mouzon E, Lobo MK, Neve RL, Friedman JM, Russo SJ, Deisseroth K, et al. Швидке регулювання поведінки, пов’язаної з депресією, шляхом контролю дофамінових нейронів середнього мозку. Природа. 2013; 493: 532 – 536. doi: 10.1038 / природа11713. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  10. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB підсилює стимули до кокаїну. J Neurosci. 2003; 23: 2488 – 2493. [PubMed]
  11. Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Антидепресивний ефект оптогенетичної стимуляції медіальної префронтальної кори. J Neurosci. 2010; 30: 16082 – 16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  12. Cui G, Jun SB, Jin X, Pham MD, Vogel SS, Lovinger DM, Costa RM. Одночасна активація смугастих прямих та непрямих шляхів під час ініціювання дії Природа. 2013; 494: 238 – 242. doi: 10.1038 / природа11846. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  13. Enoksson T, Bertran-Gonzalez J, Christie MJ. Nucleus accumbens D2- та D1 -рецептори, що експресують середні колючі нейрони, селективно активуються шляхом виведення морфіну та гострого морфіну відповідно. Нейрофармакологія. 2012; 62: 2463 – 2471. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.02.020. [PubMed] [Крест Реф]
  14. Герфен CR. Мозаїка неостриатичного типу: багаторівнева організація компартментації в базальних гангліях. Annu Rev Neurosci. 1992; 15: 285 – 320. doi: 10.1146 / annurev.ne.15.030192.001441. [PubMed] [Крест Реф]
  15. Gittis AH, Kreitzer AC. Смугові порушення мікроциркуляції та руху. Тенденції Neurosci. 2012; 35: 557 – 564. doi: 10.1016 / j.tins.2012.06.008. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  16. Gong S, Zheng C, Doughty ML, Losos K, Didkovsky N, Smbrambra UB, Nowak NJ, Joyner A, Leblanc G, Hatten ME, Heintz N. Атлас експресії генів центральної нервової системи на основі бактеріальних штучних хромосом. Природа. 2003; 425: 917 – 925. doi: 10.1038 / природа02033. [PubMed] [Крест Реф]
  17. Градінару V, Могрі М, Томпсон К.Р., Хендерсон Дж. М., Дейссерот К. Оптична деконструкція паркінсонівських нейронних схем. Наука. 2009; 324: 354 – 359. doi: 10.1126 / наука.1167093. [PubMed] [Крест Реф]
  18. Градінару V, Чжан Ф, Рамакришнан С, Маттіс Дж, Пракаш Р, Дієстер І, Гошен І, Томпсон К.Р., Дейссерот К. Молекулярні та клітинні підходи для диверсифікації та розширення оптогенетики. Осередок. 2010; 141: 154 – 165. doi: 10.1016 / j.cell.2010.02.037. [PubMed] [Крест Реф]
  19. Graybiel AM. Базальні ганглії. Curr Biol. 2000; 10: R509 – R511. doi: 10.1016 / S0960-9822 (00) 00593-5. [PubMed] [Крест Реф]
  20. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, Graham AR, Unterberg S, Graham DL, Vialou V, Bass CE, Terwilliger EF, Bardo MT, Nestler EJ. Збагачення навколишнього середовища продукує поведінковий фенотип, опосередкований низькою циклічною активністю зв'язування аденозинофосфатного елемента (CREB) у ядрах ядер. Психіатрія біолів. 2010; 67: 28 – 35. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  21. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB по-різному модулює функцію прямих і непрямих шляхів у ядрах. Proc Natl Acad Sci США A. 2013; 110: 1923 – 1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  22. Guez-Barber D, Fanous S, Golden SA, Schrama R, Koya E, Stern AL, Bossert JM, Harvey BK, Picciotto MR, Hope BT. FACS ідентифікує унікальну регуляцію кокаїну генів у селективно активованих стритальних нейронах дорослої людини. J Neurosci. 2011; 31: 4251 – 4259. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.6195-10.2011. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  23. Heiman M, Schaefer A, Gong S, Peterson JD, Day M, Ramsey KE, Suárez-Farinas M, Schwarz C, Stephan DA, Surmeier DJ, Greengard P, Heintz N. Трансляційний підхід до профілювання молекулярної характеристики типів клітин ЦНС . Осередок. 2008; 135: 738 – 748. doi: 10.1016 / j.cell.2008.10.028. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  24. Хірой Н, Грейбіл А.М. Атипові та типові нейролептичні методи лікування викликають різні програми експресії фактора транскрипції в смугастому тілі. J Comp Neurol. 1996; 374: 70–83. doi: 10.1002 / (SICI) 1096-9861 (19961007) 374: 1 <70 :: AID-CNE5> 3.0.CO% 3B2-K. [PubMed] [Крест Реф]
  25. Hiroi N, Brown JR, Haile CN, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. Мутантні миші FosB: Втрата хронічної індукції кокаїном пов'язаних з Fos білків та підвищена чутливість до психомоторних та корисних ефектів кокаїну. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94: 10397–10402. doi: 10.1073 / pnas.94.19.10397. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  26. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Індукція тривалого комплексу AP-1, що складається із змінених фос-подібних білків у мозку хронічним кокаїном та іншими хронічними методами лікування. Нейрон. 1994; 13: 1235 – 1244. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2. [PubMed] [Крест Реф]
  27. Kalivas PW, Churchill L, Klitenick MA. ГАМК та проекція енкефаліну від ядра ярусу та вентрального блідості до вентральної тегментальної області. Неврознавство. 1993; 57: 1047 – 1060. doi: 10.1016 / 0306-4522 (93) 90048-K. [PubMed] [Крест Реф]
  28. Kaplan GB, Leite-Morris KA, Fan W, Young AJ, Guy MD. Сенсибілізація опіату індукує експресію FosB / ΔFosB в префронтальній кортикальній, стритальній та мигдаличній ділянках мозку. PLOS One. 2011; 6: e23574. doi: 10.1371 / journal.pone.0023574. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  29. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Експресія фактора транскрипції ΔFosB в мозку контролює чутливість до кокаїну. Природа. 1999; 401: 272 – 276. doi: 10.1038 / 45790. [PubMed] [Крест Реф]
  30. Кім К.М., Баратта М.В., Ян А, Лі Д, Бойден Е.С., CD Fiorillo. Оптогенетична імітація тимчасової активації дофамінових нейронів природним винагородою є достатньою для посилення оперантом. PLOS One. 2012; 7: e33612. doi: 10.1371 / journal.pone.0033612. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  31. Kim TI, McCall JG, Jung YH, Huang X, Siuda ER, Li Y, Song J, Song YM, Pao HA, Kim RH, Lu C, Lee SD, Song IS, Shin G, Al-Hasani R, Kim S, Tan MP, Huang Y, Omenetto FG, Rogers JA та ін. Інжекційна оптоелектроніка стільникового масштабу з додатками для бездротової оптогенетики. Наука. 2013; 340: 211 – 216. doi: 10.1126 / наука.1232437. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  32. Koo JW, Mazei-Robison MS, Chaudhury D, Juarez B, LaPlant Q, Ferguson D, Feng J, Sun H, Scobie KN, Damez-Werno D, Crumiller M, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Mouzon E, Dietz DM, Lobo MK, Neve RL, Russo SJ, Han MH, Nestler EJ. BDNF - негативний модулятор дії морфіну. Наука. 2012; 338: 124 – 128. doi: 10.1126 / наука.1222265. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  33. Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS та ін. Молекулярні адаптації, що лежать в основі сприйнятливості та стійкості до соціальної поразки у регіонах винагородження мозку. Осередок. 2007; 131: 391 – 404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Крест Реф]
  34. Kumar S, Black SJ, Hultman R, Szabo ST, DeMaio KD, Du J, Katz BM, Feng G, Covington HE, 3rd, Dzirasa K. Корковий контроль афективних мереж. J Neurosci. 2013; 33: 1116 – 1129. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0092-12.2013. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  35. Lammel S, Ion DI, Roeper J, Malenka RC. Програмно-специфічна модуляція синапсів нейронових дофаміну нейтральними та корисними стимулами. Нейрон. 2011; 70: 855 – 862. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.03.025. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  36. Lammel S, Lim BK, Ran C, Huang KW, Betley MJ, Tye KM, Deisseroth K, Malenka RC. Контроль, пов'язаний з входом, у нагоді та відразі у вентральній тегментальній області. Природа. 2012; 491: 212 – 217. doi: 10.1038 / природа11527. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  37. Larson EB, Akkentli F, Edwards S, Graham DL, Simmons DL, Alibhai IN, Nestler EJ, Self DW. Стритальна регуляція ΔFosB, FosB та cFos під час самостійного введення та відміни кокаїну. J Neurochem. 2010; 115: 112 – 122. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  38. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Формування дендриту хребта, спричинене кокаїном, у середніх колючих нейронах, що містять рецептори D1 та D2, містять рецептори дофаміну. Proc Natl Acad Sci США A. 2006; 103: 3399 – 3404. doi: 10.1073 / pnas.0511244103. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  39. Lehmann ML, Herkenham M. Збагачення навколишнього середовища надає стійкості до стресу до соціальної поразки через нейроанатомічний шлях, що залежить від кори кори. J Neurosci. 2011; 31: 6159 – 6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  40. Liu QR, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Hou X, Shaham Y, Hope BT. Виявлення молекулярних змін в нейронах, що експресують метамфетаміном, експресують фос з дорсального стриатуму одного щура, використовуючи сортування клітин, активоване флуоресценцією (FACS) J Neurochem. 2013 doi: 10.1111 / jnc.12381. doi: 10.1111 / jnc.12381. Заздалегідь онлайн-видання. Отримано липень 29, 2013. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  41. Lobo MK, Covington HE, 3rd, Chaudhury D, Friedman AK, Sun H, Damez-Werno D, Dietz DM, Zaman S, Koo JW, Kennedy PJ, Mouzon E, Mogri M, Neve RL, Deisseroth K, Han MH, Nestler EJ. Втрата клітинної типової втрати сигналу BDNF імітує оптогенетичний контроль за винагороду кокаїну. Наука. 2010; 330: 385 – 390. doi: 10.1126 / наука.1188472. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  42. Лобо МК, Nestler EJ. Стрияльний балансуючий акт у наркоманії: чіткі ролі прямих та непрямих шляхів середніх колючих нейронів. Передній Нейроанат. 2011; 5: 41. doi: 10.3389 / fnana.2011.00041. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  43. Lobo MK, Karsten SL, Grey M, Geschwind DH, Yang XW. Профілювання масиву FACS для підтипів нейронових проекційних нейронів у мозку для неповнолітніх та дорослих мишей. Nat Neurosci. 2006; 9: 443 – 452. doi: 10.1038 / nn1654. [PubMed] [Крест Реф]
  44. MacAskill AF, Little JP, Cassel JM, Carter AG. Підклітинна зв'язок лежить в основі сигналу, що залежить від шляху в ядрі. Nat Neurosci. 2012; 15: 1624 – 1626. doi: 10.1038 / nn.3254. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  45. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Суттєва роль гістон-метилтрансферази G9a в пластичності, викликаної кокаїном. Наука. 2010; 327: 213 – 216. doi: 10.1126 / наука.1179438. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  46. Mazei-Robison MS, Koo JW, Friedman AK, Lansink CS, Robison AJ, Vinish M, Krishnan V, Kim S, Siuta MA, Galli A, Niswender KD, Appasani R, Horvath MC, Neve RL, Worley PF, Snyder SH, Hurd YL, Cheer JF, Han MH, Russo SJ та ін. Роль сигналізації mTOR та нейронної активності в адаптованих до морфіну адаптаціях в дофамінових нейронах вентральної тегментальної області. Нейрон. 2011; 72: 977 – 990. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.012. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  47. McClung CA, Nestler EJ. Регулювання експресії генів та винагороди за кокаїн CREB та ΔFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 – 1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Крест Реф]
  48. McDaid J, Graham MP, Napier TC. Сенсибілізація, викликана метамфетаміном, по-різному змінює pCREB і ΔFosB у всьому лімбічному ланцюзі мозку ссавців. Mol Pharmacol. 2006; 70: 2064 – 2074. doi: 10.1124 / mol.106.023051. [PubMed] [Крест Реф]
  49. Moratalla R, Vallejo M, Elibol B, Graybiel AM. Дофамінові рецептори класу D1 впливають на стійку експресію кокаїну експресії фосфатних білків у стриатумі. Нейрорепортаж. 1996; 8: 1 – 5. doi: 10.1097 / 00001756-199612200-00001. [PubMed] [Крест Реф]
  50. Мюллер DL, Unterwald EM. Рецептори дофаміну D1 модулюють індукцію δFosB у стриатумі щурів після періодичного введення морфіну. J Pharmacol Exp Ther. 2005; 314: 148 – 154. doi: 10.1124 / jpet.105.083410. [PubMed] [Крест Реф]
  51. Narayan S, Kass KE, Thomas EA. Хронічне лікування галоперидолом призводить до зниження експресії генів, пов'язаних з мієліном / олігодендроцитами, в мозку миші. J Neurosci Res. 2007; 85: 757 – 765. doi: 10.1002 / jnr.21161. [PubMed] [Крест Реф]
  52. Navarro M, Carrera MR, Fratta W, Valverde O, Cossu G, Fattore L, Chowen JA, Gomez R, del Arco I, Villanua MA, Maldonado R, Koob GF, Rodriguez de Fonseca F. Функціональна взаємодія між опіоїдними і канабіноїдними рецепторами в самостійне введення ліків. J Neurosci. 2001; 21: 5344 – 5350. [PubMed]
  53. Nelson AB, Hang GB, Grueter BA, Pascoli V, Luscher C, Malenka RC, Kreitzer AC. Порівняння стриатозалежної поведінки диких типів та гемізиготних трансгенних мишей Drd1a та Drd2 BAC. J Neurosci. 2012; 32: 9119 – 9123. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0224-12.2012. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  54. Нікола С.М. Ядро припадає на частину схеми виділення дії базальних ганглій. Психофармакологія. 2007; 191: 521 – 550. doi: 10.1007 / s00213-006-0510-4. [PubMed] [Крест Реф]
  55. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. ΔFosB в ядрі акумуляторів регулює харчову інструментальну поведінку та мотивацію. J Neurosci. 2006; 26: 9196 – 9204. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006. [PubMed] [Крест Реф]
  56. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Індукція δFosB у структурах мозку, пов’язаних із нагородами, після хронічного стресу. J Neurosci. 2004; 24: 10594 – 10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Крест Реф]
  57. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Виразні закономірності індукції DeltaFosB в мозку наркотичними засобами. Синапс. 2008; 62: 358 – 369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  58. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. ΔFosB опосередковує епігенетичну десенсибілізацію гена c-fos після хронічного впливу амфетаміну. J Neurosci. 2008; 28: 7344 – 7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  59. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Геномний аналіз регуляції хроматину кокаїном виявляє нову роль для сиртуїнів. Нейрон. 2009; 62: 335 – 348. doi: 10.1016 / j.neuron.2009.03.026. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  60. Робісон AJ, Nestler EJ. Транскрипційний та епігенетичний механізми залежності. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 623 – 637. doi: 10.1038 / nrn3111. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  61. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M, Wee S, Koob G, Turecki G, Neve R, Thomas M, Nestler EJ. Поведінкові та структурні реакції на хронічний кокаїн вимагають подачі циклу, що включає ΔFosB та залежну від кальцію / кальмодуліну протеїнкіназу II в оболонці ядра. J Neurosci. 2013; 33: 4295 – 4307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  62. Smith RJ, Lobo MK, Spencer S, Kalivas PW. Індуковані кокаїном адаптації в D1 та D2 присвячують проекційні нейрони (дихотомія, не обов'язково синонім прямих та непрямих шляхів). 2013; 23: 546 – 552. doi: 10.1016 / j.conb.2013.01.026. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  63. Solinas M, Thiriet N, El Rawas R, Lardeux V, Jaber M. Збагачення навколишнього середовища на ранніх життєвих етапах зменшує поведінковий, нейрохімічний та молекулярний вплив кокаїну. Нейропсихофармакологія. 2009; 34: 1102 – 1111. doi: 10.1038 / npp.2008.51. [PubMed] [Крест Реф]
  64. Sparta DR, Stamatakis AM, Phillips JL, Hovelsø N, van Zessen R, Stuber GD. Побудова імплантаційних оптичних волокон для тривалого оптогенетичного маніпулювання нейронними ланцюгами. Nat Protoc. 2012; 7: 12 – 23. doi: 10.1038 / nprot.2011.413. [PubMed] [Крест Реф]
  65. Стаматакіс А.М., Стубер Г.Д. Активація бічних входів габенули у вентральний середній мозок сприяє уникненню поведінки. Nat Neurosci. 2012; 24: 1105 – 1107. doi: 10.1038 / nn.3145. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  66. Стюбер Г.Д., Брітт Дж. П., Бончі А. Оптогенетична модуляція нейронних схем, що лежать в основі шукаючих нагород. Психіатрія біолів. 2012; 71: 1061 – 1067. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.11.010. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  67. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, Deisseroth K, Tye KM, Lüscher C. Неврони GABA приводу VTA обумовили відразання місця. Нейрон. 2012; 73: 1173 – 1183. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.015. [PubMed] [Крест Реф]
  68. Teegarden SL, Bale TL. Зниження дієтичних переваг викликає підвищену емоційність та ризик рецидиву харчування. Психіатрія біолів. 2007; 61: 1021 – 1029. doi: 10.1016 / j.biopsych.2006.09.032. [PubMed] [Крест Реф]
  69. Tsai HC, Zhang F, Adamantidis A, Stuber GD, Bonci A, de Lecea L, Deisseroth K. Фазового випалу в дофамінергічних нейронах достатньо для поведінкових кондицій. Наука. 2009; 324: 1080 – 1084. doi: 10.1126 / наука.1168878. [PubMed] [Крест Реф]
  70. Tye KM, Mirzabekov JJ, Warden MR, Ferenczi EA, Tsai HC, Finkelstein J, Kim SY, Adhikari A, Thompson KR, Andalman AS, Gunaydin LA, Witten IB, Deisseroth K. Dopamine нейрони модулюють нейронну кодування та експресію, пов'язану з депресією. поведінка. Природа. 2013; 493: 537 – 541. doi: 10.1038 / природа11740. [PubMed] [Крест Реф]
  71. van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. Активація нейронів VTA GABA порушує споживання винагороди. Нейрон. 2012; 73: 1184 – 1194. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.016. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  72. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA та ін. ΔFosB в ланцюгах нагород мозку опосередковує стійкість до стресу та антидепресантних реакцій. Nat Neurosci. 2010; 13: 745 – 752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  73. Vialou V, Cui H, Perello M, Mahgoub M, Yu HG, Rush AJ, Pranav H, Jung S, Yangisawa M, Zigman JM, Elmquist JK, Nestler EJ, Lutter M. Роль для ΔFosB в метаболічних змінах, викликаних обмеженням калорій . Психіатрія біолів. 2011; 70: 204 – 207. doi: 10.1016 / j.biopsych.2010.11.027. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  74. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iñiguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños-Guzmán CA. Вплив DeltaFosB у ядрі накопичується на природну поведінку. J Neurosci. 2008; 28: 10272 – 10277. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  75. Warden MR, Selimbeyoglu A, Mirzabekov JJ, Lo M, Thompson KR, Kim SY, Adhikari A, Tye KM, Frank LM, Deisseroth K. Префронтальна нейрональна проекція кори-мозку, яка контролює реакцію на поведінкові проблеми. Природа. 2012; 492: 428 – 432. doi: 10.1038 / природа11617. [PubMed] [Крест Реф]
  76. Watabe-Uchida M, Zhu L, Ogawa SK, Vamanrao A, Uchida N. Загальномозкове картографування прямих входів до нейронів середнього мозку дофаміну. Нейрон. 2012; 74: 858 – 873. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.03.017. [PubMed] [Крест Реф]
  77. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB регулює роботу колеса. J Neurosci. 2002; 22: 8133 – 8138. [PubMed]
  78. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Індукція ΔFosB в корі орбітофронтальної корені обумовлює толерантність до когнітивної когнітивної дисфункції. J Neurosci. 2007; 27: 10497 – 10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Крест Реф]
  79. Witten IB, Steinberg EE, Lee SY, Davidson TJ, Zalocusky KA, Brodsky M, Yizhar O, Cho SL, Gong S, Ramakrishnan C, Stuber GD, Tye KM, Janak PH, Deisseroth K. Рекомбіназа-лідер щурячих ліній: інструменти, методи та оптогенетичне застосування для посилення опосередкованого дофаміном. Нейрон. 2011; 72: 721 – 733. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.028. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  80. Yizhar O, Fenno LE, Davidson TJ, Mogri M, Deisseroth K. Оптогенетика в нервових системах. Нейрон. 2011; 71: 9 – 34. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.004. [PubMed] [Крест Реф]
  81. Yoneyama N, Crabbe JC, Ford MM, Murillo A, Finn DA. Добровільне споживання етанолу в інбредних мишах штамів 22. Алкоголь. 2008; 42: 149 – 160. doi: 10.1016 / j.alcohol.2007.12.006. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed] [Крест Реф]
  82. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Важлива роль DeltaFosB в ядрі, що накопичується в дії морфіну. Nat Neurosci. 2006; 9: 205 – 211. doi: 10.1038 / nn1636. [PubMed] [Крест Реф]