Диференціальна експресія білків FosB і потенційних цільових генів у вибраних ділянках мозку наркозалежних і депресивних пацієнтів (2016)

  • Паула А. Гаєвський,
  • Густаво Турецький,
  • Альфред Дж. Робісон

Опубліковано: серпень 5, 2016

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355

абстрактний

Хронічний вплив стресу чи зловживання наркотиками пов’язаний із зміною експресії генів у всьому організмі, а зміни експресії генів у дискретних областях мозку вважаються основою багатьох психіатричних захворювань, включаючи великі депресивні розлади та наркоманію. Доклінічні моделі цих розладів надали докази механізмів цієї зміненої експресії генів, включаючи фактори транскрипції, але докази, що підтверджують роль цих факторів у пацієнтів людини, з'являються повільно. Коефіцієнт транскрипції ΔFosB індукується в префронтальній корі (PFC) і гіпокампі (HPC) гризунів у відповідь на стрес або кокаїн, і його вираження в цих регіонах, як вважається, регулює їх "згори вниз" контроль схеми винагороди, включаючи ядро acumbens (NAc). Тут ми використовуємо біохімію для дослідження експресії FosB сімейство факторів транскрипції та їх потенційні генетичні мішені у зразках після ПМФ та ПХК від ПМК та пацієнтів з депресією та наркоманами з кокаїном. Ми демонструємо, що ΔFosB та інші ізоформи FosB є нормалізованими в HPC, але не PFC у мозку як депресивних, так і залежних людей. Далі ми показуємо, що потенційні цілі транскрипції ΔFosB, включаючи GluA2, також є регульованими в HPC, але не в PFC кокаїнових залежних. Таким чином, ми надаємо перші докази FosB експресія гена в HPC та PFC людини при цих психічних розладах, і, зважаючи на останні результати, що демонструють критичну роль HPC ΔFosB в моделях навчання та пам'яті гризунів, ці дані дозволяють припустити, що зниження ΔFosB в HPC може потенційно лежати в основі когнітивного дефіциту, що супроводжує хронічну зловживання кокаїном або депресія.  

Зразок цитирования: Gajewski PA, Turecki G, Robison AJ (2016) Диференціальна експресія білків FosB та потенційних цільових генів у відібраних регіонах мозку пацієнтів із залежністю та депресією. PLOS ONE 11 (8): e0160355. doi: 10.1371 / journal.pone.0160355

Редактор: Райан К. Бахтелл, Університет Колорадо Боулдер, США

Отримано: Лютий 29, 2016; Прийнято: Липень 18, 2016; Опубліковано: Серпень 5, 2016

Авторське право: © 2016 Gajewski та ін. Ця стаття з відкритим доступом розповсюджується за умовами Ліцензія Creative Commons Attribution, що дозволяє необмежене використання, розповсюдження та відтворення на будь-якому носії, за умови, що автор і джерело кредитуються.

Доступність даних: Усі відповідні дані містяться у статті.

Фінансування: Автор PAG отримав певну підтримку зарплати від гранту автору AJR від Фонду Уайтхолла. Фінансисти не брали ніякої ролі в розробці дослідження, збору та аналізу даних, ухваленні рішення про публікацію або підготовці рукопису.

Конкуруючі інтереси: Автори заявили, що конкурентних інтересів немає.

Вступ

Молекулярні та ланцюгові механізми психіатричних захворювань, таких як депресія та залежність, до кінця не вивчені, і ці знання мають вирішальне значення для раціональної розробки нових та кращих методів лікування. Зміни в експресії генів в ядрах ядра (NAc) та ділянках мозку, які здійснюють контроль зверху вниз над функцією NAc, як префронтальна кора (PFC) та гіпокамп (HPC), були залучені до патогенезу звикання та депресії багатьма дослідженнями як в модельних організмах, так і в післясмертному мозку людини [1-5]. Багато сучасних методів лікування депресії діють за допомогою хронічного посилення серотонінергічної та / або дофамінергічної сигналізації, і практично всі наркотики зловживань впливають на дофамінову сигналізацію в NAc. Крім того, звикання та депресія є дуже коморбідними; майже третина пацієнтів з великим депресивним розладом також мають порушення вживання наркотичних речовин та коморбідність, що призводить до більш високого ризику самогубств та більшої соціальної та особистісної вади [6, 7]. У сукупності ці дані говорять про те, що хронічні дезадаптації в мезолімбічному дофаміновому контурі та пов'язаних структурах можуть лежати в основі як звикання, так і депресії, і що зміни в експресії генів можуть зіграти вирішальну роль у цих дезадаптаціях.

Оскільки як депресія, так і звикання розвиваються з часом і можуть бути пов’язані з хронічним впливом стресу та / або зловживання наркотиками [8, 9], а тому, що типові антидепресанти, націлені на серотонінергічну та допамінергічну сигналізацію, потребують тижнів лікування, щоб бути ефективними [10], видається ймовірним, що патогенез цих захворювань та механізми їх лікування можуть бути пов’язані з довгостроковий зміни в експресії генів. Такі зміни можуть бути наслідком епігенетичних модифікацій структури генів, і справді є свідченням ключової ролі для метилювання ДНК та модифікації гістону як в залежності, так і в депресії [11-14]. Однак це не виключає потенційної ролі факторів транскрипції в цих процесах, особливо стабільних факторів транскрипції, викликаних хронічною активацією нейронів. Одним із таких факторів транскрипції є ΔFosB [1, 15, 16], варіант сплайсингу, виготовлений із FosB ген. На відміну від білка FosB у повному обсязі, ΔFosB є надзвичайно стабільним порівняно з іншими продуктами раннього раннього гена (період напіввиведення в мозку до 8 днів [17]), насамперед через усічення двох доменів дегрона в c-кінці [18], а також стабілізуюче фосфорилювання в Ser27 [19, 20]. ΔFosB викликається стресом у всьому мозку гризуна, включаючи NAc та споріднені структури [21-23], антидепресанти [22] та зловживання наркотиками [24]. Крім того, моделі гризунів позначають експресію ΔFosB в NAc в обох залежностях [20, 25] і депресія [26, 27], і останні дослідження свідчать про роль ΔFosB при цих захворюваннях у ПФК [21] та HPC [28]. У NAc експресія ΔFosB сприяє підвищенню психомоторної сенсибілізації до і стимулюванню психостимуляторів у гризунів [20, 25]. NAc ΔFosB також виступає фактором посилення в моделі хронічного соціального ураження миші депресією, і його експресія необхідна для антидепресантної функції [26]. Навпаки, експресія ΔFosB у PFC сприяє сприйнятливості до соціального стресового ураження у мишей [21], що дозволяє припустити, що ΔFosB грає дуже різні ролі в схемі винагороди та областях мозку, які її іннервують. Нарешті, ΔFosB індукується в спинному HPC миші шляхом навчання, і його функція необхідна для нормального формування просторової пам'яті [28], що забезпечує можливий механізм когнітивного дефіциту, що часто супроводжує хронічне опромінення наркотиків та / або депресію [29-31].

Оскільки ΔFosB є фактором транскрипції, зазвичай вважається, що він проявляє свої біологічні ефекти через модуляцію експресії вибраних генів-мішеней, і багато з цих цільових генів були причетні до депресії та залежності. ΔFosB регулює експресію декількох субодиниць α-аміно-3-гідрокси-5-метил-4-ізоксазолпропіонової кислоти (AMPA) - і N-метил-D-аспартату (NMDA) -рецепторів глутамату [25, 26, 32], і ці рецептори були безпосередньо причетні до наркоманії [33, 34], депресія [35, 36] та антидепресант [36, 37]. ΔFosB також регулює експресію сигнальних молекул, як кальцій / кальмодулін-залежна протеїнкіназа II α (CaMKIIα), що було пов'язано з багатьма психіатричними розладами [38], і ми показали, що ця регуляція експресії CaMKII у мишей призводить психомоторну сенсибілізацію до кокаїну [20] та антидепресантної функції [27]. Крім того, ΔFosB регулює експресію циклін-залежної кінази 5 (cdk5) [39], що індукується в стриатумі через психостимулюючий вплив та стрес [40-42] та регулює психомоторні та мотиваційні реакції на кокаїн [43]. Таким чином, у моделях гризунів є вагомі докази того, що індукція ΔFosB у кількох регіонах мозку через стрес, антидепресанти та зловживання наркотиками може регулювати поведінку, пов’язану з депресією та залежністю, модулюючи експресію вибраних генів-мішеней у дискретних регіонах мозку.

Хоча доклінічні моделі наркоманії та депресії були досить плідними, важливо підтримувати результати досліджень на тваринах доказами людських досліджень, якщо ми очікуємо перекласти потенційні молекулярні механізми в нові варіанти лікування. Раніше ми продемонстрували, що ΔFosB є регульованим у NAc наркоманів, кокаїну людини [20] та знижена NAc депресивних людей [26]. Однак регулювання FosB експресія генових продуктів у HPC та PFC, критичних регуляторах активації нейрона НАА, раніше не вивчалася в людському мозку, а також не регулювалася потенційна експресія цільового гена ΔFosB. Тому ми вивчили вираз FosB генних продуктів, а також експресія потенційних цільових генів ΔFosB в ПФК та ​​ВПС пацієнтів, які страждають від головного депресивного розладу або залежності від кокаїну.

Матеріали та методи

Зразки людини

Посмертні тканини головного мозку людини були отримані від Мозгового банку Дугласа Белла-Канада (Інститут психічного здоров'я Дугласа, Монреаль, Квебек, Канада). Інформацію про вживання речовин щодо наркоманів, кокаїну людини, хворих на депресію та відповідних засобів контролю можна знайти в Таблиця 1. Збереження тканини протікало по суті, як описано [44]. Коротко кажучи, після вилучення мозок поміщають на мокрий лід у ящик з пінопласту та мчать до закладів мозкового банку Douglas Bell-Canada. Півкулі негайно відокремлюються сагітальним зрізом посередині мозку, стовбура мозку та мозочка. Кровоносні судини, шишкоподібна залоза, судинне сплетення, половина мозочка та половина стовбура головного мозку зазвичай розсікаються з лівої півкулі, яку потім коронально розрізають на зрізи товщиною 1 см перед заморожуванням. Останню половину мозочка розрізають сагітально на скибочки товщиною 1cm перед заморожуванням. Тканини заморожують спалахом у 2-метилбутані при -40 ° C протягом ~ 60 сек. Усі заморожені тканини зберігають окремо в пластикових пакетах при -80 ° C для тривалого зберігання. Конкретні ділянки мозку розсікають із заморожених коронкових шматочків на пластині з нержавіючої сталі із сухим льодом навколо, щоб контролювати температуру навколишнього середовища. Зразки ПФК беруть з області Бродмана 8 / 9, а зразки HPC беруть з центральної маси гіпокампальної формації (Рис 1).

слайдами

завантажити:

Слайд PowerPoint

збільшене зображення (1.61MB)

оригінальне зображення (1.59MB)

Рис 1. Діаграма областей розсічення зразків мозку людини.

Малюнки представляють передній (A) і задній (B) корональний відділи мозку людини, використовувані для розсічення зразків PFC та (C) зразків HPC. Червоні поля виділяють області розсічення. SFG: покращена лобова звивина; МФГ: середня лобова звивина; ІГ: острівкова звивина; ФуГ: веретеноподібна звивина.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g001

слайдами

завантажити:

Слайд PowerPoint

збільшити зображення (529KB)

оригінальне зображення (1.02MB)

Таблиця 1. Залежність від речовин, токсикологія та використання антидепресантів у наркоманів від кокаїну, пацієнтів із депресією та контрольних груп.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.t001

Зразки миші

Дослідження слідувало рекомендаціям, описаним у Посібник з догляду та використання лабораторних тварин, восьме видання (Інститут лабораторних тваринних ресурсів, 2011). Перед будь-яким тестуванням усі експериментальні процедури були затверджені Інституційним комітетом з догляду та використання тварин при Мічиганському державному університеті. Якщо у будь-якої тварини спостерігається відсутність догляду, інфекції, сильної втрати ваги або нерухомості, тварина евтаназується. Жодна тварина не потребувала такої евтаналізації до експериментальної кінцевої точки в поточному дослідженні. Після прибуття до закладу, миші-самці C7BL / 57 старі 6 (лабораторія Джексона, Бар-Харбор, штат Міссурі, США) були розміщені у групі 4 за клітку в кімнаті колонії, встановленій при постійній температурі (23 ° C) принаймні, щонайменше 3 днів до експерименту в циклі світла / темності 12 з ad libidum їжа та вода. Мишам вводили хронічний (7 днів) або гострий (разова ін'єкція) кокаїн (15 мг / кг) або стерильний фізіологічний розчин (фізіологічний розчин 0.9%) через внутрішньочеревну (ip) ін'єкцію та жертвували дислокацією шийки матки через годину після остаточної ін'єкції. Тканина була заготовлена ​​негайно (Рис 2) або в різні часові моменти після жертви (Рис 3).

слайдами

завантажити:

Слайд PowerPoint

збільшити зображення (649KB)

оригінальне зображення (878KB)

Рис 2. Порівняння білків FosB людини та миші.

(A) Вестерн-блот білків гіпокампа з антитілом FosB виявляє безліч додаткових смуг у типовому зразку HPC для наркоманів, кокаїну людини, порівняно з хронічним кокаїном, обробленим мишею (15 мг / кг протягом 7 днів). Нові смуги очевидні при 20 kDa, 23 kDa (біла стрілка) та 30 kDa (чорна стрілка). (B) Кореляційні та лінійні регресійні графіки експресії білка для кожної смуги у зразках людини з інтервалом після посмертного періоду (час між смертю та заморожуванням мозку) для кожного зразка людини. Пунктирні лінії представляють довірчий інтервал 95%; жоден лінійний нахил регресії суттєво не відрізнявся від 0.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g002

слайдами

завантажити:

Слайд PowerPoint

збільшити зображення (214KB)

оригінальне зображення (317KB)

Рис 3. Експресія білків FosB в HPC миші після тривалих постмортенових інтервалів.

Мозок мишей, що отримали гостру ін'єкцію кокаїну (15 мг / кг ip), залишився на місці для 0, 1 або 8 годин після жертви перед збиранням HPC. Вестерн-блот виявляє накопичення діапазону kDa 23 у тварин 8 год, але не показує інших смуг, знайдених у зразках HPC людини.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g003

Вестерн Блотінг

Мозги миші екстрагували швидко на льоду, а потім нарізали на ділянки 1 мм, а спинний гіпокамп видаляли пуансоном 12 і негайно заморожували на сухому льоду. І людські, і миші зразки гомогенізували світловим ультразвуком у модифікованому буфері RIPA (10 mM Tris основа, 150 мМ хлорид натрію, 1 mM EDTA, 0.1% натрію додецилсульфат, 1% тритон X-100, 1% дезоксихолат натрію, pH 7.4, інгібітори протеази та фосфатази [Sigma Aldrich]). Концентрацію вимірювали за допомогою аналізу білка DC (BioRad) і зразки гелю нормалізували на загальний білок. Білки відокремлювали на гелях градієнта 4 – 15% поліакриламід (Criterion System, BioRad), а вестерн-блоттінг проводили за допомогою хемілюмінесценції (SuperSignal West Dura, Thermo Scientific). Загальний білок аналізували за допомогою мембранної плями Swift (G Biosciences), а білки кількісно визначали за допомогою програмного забезпечення ImageJ (NIH). Первинні антитіла використовували для виявлення ізоформ FosB (5G4; 1: 500; Клітинна сигналізація, 2251), GluA2 / 3 (1: 1,000; Millipore, 07 – 598), CaMKIIα (1: 1,000: 05: 532: 5: 1: 1,000: 173: 1: 20,000: 21185: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNUMX: XNXX Milum (XNUMX: XNUMX; Санта-Крус, sc-XNUMX), GAPDH (XNUMX: XNUMX; Стільниковий сигнал, XNUMX).

Статистика

Всі статистичні аналізи проводилися за допомогою програмного пакету Prism 6 (GraphPad). Лінійний регресійний аналіз був використаний для визначення, чи є експресія FosB Генні продукти корелювали з постмортеновим інтервалом. Нахил кожної лінійної регресійної лінії тестували на значну різницю від нуля. Т-тести Стьюдента використовувались для всіх парних порівнянь між контрольними та кокаїновими особами (вказані в Результатах, де вказано значення t). Односторонні ANOVA використовувались для всіх багаторазових порівнянь між контрольними групами, депресивними людьми з антидепресантами на борту або депресивними особами без антидепресантів (вказано в Результатах, де вказано значення F). За одностороннім ANOVA слідували Тукі Постфактум тест. P <0.05 вважали значущим.

результати

Наші останні дослідження вказують, що три основні продукти FosB ген головного мозку, повнорозмірний FosB (~ 50 kDa), ΔFosB (~ 35 – 37 kDa) і Δ2ΔFosB (~ 25 kDa), диференційовано індукуються у регіонах, пов'язаних з нагородою мозку миші, у відповідь на стрес та лікування антидепресантами [22], та інші антигени, пов'язані з Fos, ймовірно, що продукуються FosB Ген спостерігали також у мозку миші [45-47]. Тому ми спершу прагнули визначити, чи виражає людський мозок закономірність FosB генні продукти, подібні до того, що знаходиться в мозку миші. Ми порівнювали типовий зразок ВПЧ від наркомана від кокаїну людини (Таблиця 2) до HPC від миші, яка отримувала хронічний кокаїн (15 мг / кг, ip протягом 7 днів). Усі три основні FosB генні продукти були виявлені як у миші, так і в тканинах мозку людини, але додаткові смуги спостерігалися в зразку людини порівняно з мишами (Фіг. 2A). Найбільш помітні смуги при ~ 30 kDa, ~ 23 kDa та ~ 20 kDa з'явилися у зразках людини, але їх не спостерігали у зразках миші. Ми постулювали, що ці смуги можуть представляти протеолітичні продукти, що виникають внаслідок деградації FosB або ΔFosB внаслідок розширеного інтервалу після посмертки (PMI) у наших зразках людини (Таблиця 2). Однак не було виявлено кореляції між інтенсивністю цих нових діапазонів та PMI (Фіг. 2B) або між PMI та основними генними продуктами, FosB, ΔFosB та Δ2ΔFosB (Фіг. 2B), тобто жодна з регресійних ліній не мала нахилу, істотно відмінного від нуля. Таким чином, ці нові смуги можуть не бути продуктами протеолітичної деструкції внаслідок тривалого часу між смертю та заморожуванням тканин.

слайдами

завантажити:

Слайд PowerPoint

збільшити зображення (279KB)

оригінальне зображення (504KB)

Таблиця 2. Демографічні показники наркоманів від кокаїну, хворих на депресію та контрольні групи.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.t002

Для подальшого дослідження цього питання ми дали мишам одну ін'єкцію кокаїну (15 мг / кг, ip) або фізіологічного розчину і пожертвували їх дислокацією шийки матки через годину. Потім мізки залишили на місці за нуль, одну або вісім годин до взяття зразків. Ми відзначили деякі продукти деградації (Рис 3), найвизначнішою з яких є ~ 23 kDa, але отримана картина не імітувала цю картину в зразках HPC людини. У сукупності ці дані свідчать про те, що в мозку людини є додаткові антигени, пов’язані з Фосом, які можуть представляти собою нове FosB генних продуктів і навряд чи буде результатом протеолізу FosB або ΔFosB.

Далі ми прагнули визначити, чи пов’язана залежність від кокаїну, нелікована депресія або депресія в поєднанні з впливом антидепресантів. FosB генні продукти в HPC або PFC людини. Пацієнтів та суб'єктів контролю було обрано таким чином, що не було суттєвих відмінностей у середньому віці, статі, рН мозку або ІМП (Таблиця 1). У зразках пацієнтів, залежних від кокаїну, Вестерн-блот не виявив відмінностей у вираженні будь-якої ізоформи FosB в ПФК порівняно з контролем (Фіг.8 4A і 4B). Однак ми спостерігали помітне зниження рівня HPC людей, що залежать від кокаїну, в повному FosB (t(35) = 2.67, p = 0.012), ΔFosB (t(31) = 2.81, p = 0.009), а також у всіх трьох нових діапазонах, 30 kDa (t(34) = 2.71, p = 0.011), 23 кДа (t(15) = 2.7, p = 0.016) і 20 kDa (t(13) = 2.43, p = 0.031) і тенденція до зниження Δ2ΔFosB (t(29) = 2.03, p = 0.052). Аналогічно, у зразках пацієнтів, які страждають депресією, не було відмінностей у експресії будь-якої ізоформи FosB у ПФУ, тоді як ВПС показало зменшення повнорозмірного FosB (F (2,35) = 1.98, p = 0.048) та ΔFosB ( F (2,30) = 1.38, p = 0.027), а також в діапазоні 23 kDa (F (2,21) = 2.05, p = 0.022) і діапазоні kNa 20 (F (2,18) = 0.97, p = 0.028) (Рис. 4C і 4D). Ці дані говорять про це FosB експресія гена в HPC знижується при множинних психіатричних станах, тоді як експресія PFC не впливає.

слайдами

завантажити:

Слайд PowerPoint

збільшене зображення (1.19MB)

оригінальне зображення (1.98MB)

Рис 4. Експресія білків FosB у ВПЧ та ПФК у хворих на кокаїнову залежність та депресію.

(A) Вестерн-блот білків FosB від HPC та PFC залежних від кокаїну людини (Coc) та контролів (Con). (B) Кількісне визначення виявляє залежність від кокаїну зменшення багатьох білків FosB в HPC, але не PFC (*: p <0.05, #: p = 0.05). (C) Вестерн-блот білків FosB з HPC та PFC у пацієнтів із депресією людини поза (Dep) або на антидепресантах (Dep + AD) та контролі (Con). (D) Кількісне визначення виявляє залежність від депресії зниження деяких білків FosB в HPC, але не PFC (*: p <0.05). Смужки помилок позначають середнє значення +/- SEM.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g004

Прямі докази генетичних мішеней регуляції транскрипції ΔFosB в HPC мізерні, тільки циклінна залежна протеїнкіназа 5 (cdk5) підтверджена мішень після електросудомної стимуляції у мишей [39]. Однак багатьом іншим генам відомі мішені для регуляції транскрипції ΔFosB в інших регіонах мозку, особливо в NAc. Сюди входить ряд генів, необхідних для функціонування клітин гіпокампа та синаптичної пластичності, таких як GluA2 [48] та CaMKII [20]. Тому ми використовували Вестерн-блот для оцінки рівнів потенційних генних мішеней ΔFosB в HPC та PFC пацієнтів, що залежать від кокаїну та депресії. Ми не виявили суттєвих відмінностей в рівнях білка кандидат-генів-мішеней у ПФК осіб, залежних від кокаїну, в той час як HPC показав значне зниження GluA2 (t (34) = 2.31, p = 0.027) та сильну тенденцію до зниження Рівень CaMKII (t (35) = 1.99, p = 0.053), а cdk5 залишається незмінним (Фіг.8 5A і 5B). У ПФК та ​​ВПС пацієнтів з депресією не спостерігалося змін у експресії цільових генів ΔFosB (Рис. 5C і 5D). Ці дані говорять про те, що ΔFosB може регулювати експресію потенційних цільових генів у ВПЧ людини, і ця регуляція може бути специфічною для області мозку та захворювання.

слайдами

завантажити:

Слайд PowerPoint

збільшити зображення (546KB)

оригінальне зображення (1.01MB)

Рис 5. Експресія можливих цільових білків ΔFosB у ВПЧ та ПФК у пацієнтів із кокаїновою залежністю та депресією.

(A) Вестерн-блот потенційних цільових білків гена ΔFosB від HPC та PFC людей, які зловживають кокаїном (Coc) та контролів (Con). (B) Кількісне визначення виявляє залежність від кокаїну зниження всіх GluA2 і CaMKII в HPC, але не PFC (*: p <0.05, #: p = 0.05). (C) Вестерн-блот потенційних цільових білків гена ΔFosB від HPC та PFC пацієнтів із депресією людини поза (Dep) або на антидепресантах (Dep + AD) та контролях (Con). (D) Кількісне визначення не виявляє змін, що залежать від депресії. Смужки помилок позначають середнє значення +/- SEM.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g005

Обговорення

Тут ми представляємо першу збірку FosB аналіз на генний продукт та ΔFosB-цільовий білок у гіпокампі та префронтальній корі залежних від кокаїну та хворих на депресію. Ці регіони мозку, як відомо, відіграють ключову роль у патофізіології цих захворювань, а використання відміжок після смерті людини дозволяє нам: 1) визначити, чи є молекулярні зміни, виявлені в добре вивчених моделях гризунів цих захворювань, рекапітульовані у людей. ; 2) визначають нові шляхи дослідження на моделях гризунів для потенційного терапевтичного втручання. Наш аналіз зосередився на вираженні FosB генні продукти, оскільки їх експресія в цих регіонах пропонується відігравати роль у депресії та викликана впливом кокаїну в моделях гризунів [21, 22, 24]. Спочатку вивчаючи рівень білка FosB у наших зразках людини, було зрозуміло, що наші антитіла FosB виявляли більше смуг, ніж раніше повідомлялося в зразках мозку гризунів нашою групою та багатьма іншими [1, 22]. Оскільки мізки людини замерзли через години після смерті, тоді як зразки миші були вилучені та заморожені протягом двох хвилин жертви, ми залишили мозкові миші на місці після жертви протягом восьми годин, щоб визначити, чи з'являться подібні групи. Однак, оскільки ми не спостерігали однакову схему білків FosB, знайдених у зразках людини, а також тому, що ми також не знайшли кореляції між довжиною PMI та рівнями різних смуг у людських зразках, ми зробили висновок, що багато з груп у зразки людського мозку навряд чи будуть наслідком протеолітичної деградації більших ізоформ FosB. Хоча ми не можемо виключити відмінності в протеолітичному механізмі між видами, ми б припустили, що деякі людські смуги можуть бути результатом диференціального сплайсингу мРНК FosB, і майбутні дослідження нашої групи будуть вирішувати це питання.

Попередні результати досліджень на гризунах виявили збільшення ізоформ FosB у HPC та PFC після хронічного кокаїну [24]. Однак з нашої групи осіб, залежних від кокаїну, ми виявили зменшення всіх ізоформ FosB в HPC, без зміни ПФК порівняно з контрольними. Ми вважаємо, що це може бути пов'язано з властивими відмінностями між дослідженнями на гризунах та випадками залежності людини. Дослідження кокаїнової залежності тривають лише незначну частину життя гризуна, і жодне індукційне дослідження ΔFosB на сьогоднішній день не вийшло за рамки 14 днів безперервного впливу кокаїну [1, 20]. Люди, що вживають кокаїн, можуть бути залежними протягом набагато більш тривалих періодів часу, що може викликати гомеостатичний вплив, що спричиняє FosB ген для репресії в HPC. Більше того, багато досліджень продемонстрували, що тривала звикання до психостимуляторів супроводжується зниженою когнітивною функцією [9, 49]. Наша недавня робота демонструє, що HPC ΔFosB відіграє вирішальну роль у навчанні [28], і, таким чином, зниження ВРС FosB Експресія генів у наркоманів, кокаїну, показана тут, може представляти механізм зниження когнітивного пристрастя до психостимуляторів. При зниженій експресії FosB гена HPC, ми також спостерігали зниження рівня білка кандидатних генів-ΔFosB-мішеней GluA2 та CaMKII, і обидві ці молекули також є критичними для функціонування та навчання HPC [50] і раніше були пов'язані із залежністю [38, 51].

У HPC депресивних пацієнтів ми спостерігали зменшення кількох білків FosB, залежно від того, приймали пацієнти антидепресанти. Це може свідчити про те, що антидепресанти мають різний вплив на сплайсинг або стабільність FosB генних продуктів, хоча наші попередні дослідження на гризунах не виявили таких відмінностей [22]. Однак не було відмінностей в експресії потенційних цільових генів ні в HPC, ні в PFC цих пацієнтів. Хоча велика депресія часто супроводжується когнітивними проблемами [52], ймовірно, що HPC ΔFosB - не єдиний фактор, змінений у відповідь на депресію. У той час як наркомани кокаїну демонстрували зміни в HPC ΔFosB та в експресії гена-мішені, депресія може призвести до різних компенсаторних механізмів, що запобігають зменшенню експресії GluA2 або CaMKII. Таким чином, майбутні дослідження з’ясують, чи виникають зміни в експресії генів HPC в депресії та залежності від подібних механізмів.

Важливо відзначити, що людські популяції, які використовуються для цього дослідження, не мають однорідності доклінічних моделей гризунів чи приматів. Наприклад, п'ятеро депресивних пацієнтів страждали від алкоголізму, а двоє мали опіати на борту під час смерті. Аналогічно, шість осіб, залежних від кокаїну, вживали антидепресанти за три місяці до смерті. Хоча це не дивно, оскільки депресія та залежність мають високий рівень коморбідності [6, 7], це ускладнює інтерпретацію результатів. Ми не спостерігаємо суттєвої різниці в жодному з наших біохімічних заходів між суб'єктами, що залежать від кокаїну, які мали на борту антидепресанти, та тими, хто цього не робив, і не спостерігаємо відмінностей між депресивними пацієнтами, які мали залежність від речовин, і тими, хто цього не зробив (дані не показані ). Однак це виключає перекриття чи синергетичний вплив депресії та залежності на наші заходи. Навпаки, коли ми спостерігаємо аналогічні зменшення експресії ізоформ HPC FosB з депресією та залежністю, можливо, зниження рівня HPC FosB експресія генів є загальним механізмом між двома умовами і може сприяти коморбідності. Дослідження цієї гіпотези потребуватиме значно більших груп людей, а також додаткових доклінічних досліджень.

На закінчення ми знаходимо це кратне FosB Генні продукти є нормалізованими в HPC, але не в PFC, людей, які страждають залежністю та депресією. Хоча ми не можемо встановити етіологічний зв'язок між цим явищем та станами хвороби, можливо, що зниження ВРС ΔFosB та / або інших ізоформ FosB може частково лежати в основі когнітивного дефіциту, пов’язаного з депресією та залежністю, або сприяти коморбідності цих психіатричних розлади.

Подяки

Автори хотіли б подякувати Кеннету Муну за чудову технічну допомогу.

Внески автора

  1. Задумані та розроблені експерименти: AJR PAG.
  2. Виконали експерименти: AJR GT PAG.
  3. Проаналізовано дані: PAG AJR.
  4. Реагенти / матеріали / інструменти для аналізу: GT.
  5. Написав папір: PAG AJR.

посилання

  1. 1. Робісон AJ, Nestler EJ. Транскрипційний та епігенетичний механізми залежності. Nat Rev Neurosci. 2011; 12 (11): 623 – 37. Epub 2011 / 10 / 13. doi: 10.1038 / nrn3111 nrn3111 [pii]. pmid: 21989194; PubMed Центральний PMCID: PMC3272277.
  2. 2. Fass DM, Schroeder FA, Perlis RH, Haggarty SJ. Епігенетичні механізми при розладах настрою: орієнтація на нейропластичність. Неврознавство. 2014; 264: 112 – 30. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2013.01.041 pmid: 23376737; PubMed Центральний PMCID: PMC3830721.
  3. Переглянути статтю
  4. PubMed / NCBI
  5. Google Scholar
  6. Переглянути статтю
  7. PubMed / NCBI
  8. Google Scholar
  9. Переглянути статтю
  10. PubMed / NCBI
  11. Google Scholar
  12. Переглянути статтю
  13. PubMed / NCBI
  14. Google Scholar
  15. Переглянути статтю
  16. PubMed / NCBI
  17. Google Scholar
  18. 3. Menard C, Hodes GE, Russo SJ. Патогенез депресії: дані дослідження людини та гризунів. Неврознавство. 2015. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2015.05.053 pmid: 26037806.
  19. Переглянути статтю
  20. PubMed / NCBI
  21. Google Scholar
  22. Переглянути статтю
  23. PubMed / NCBI
  24. Google Scholar
  25. Переглянути статтю
  26. PubMed / NCBI
  27. Google Scholar
  28. Переглянути статтю
  29. PubMed / NCBI
  30. Google Scholar
  31. Переглянути статтю
  32. PubMed / NCBI
  33. Google Scholar
  34. Переглянути статтю
  35. PubMed / NCBI
  36. Google Scholar
  37. Переглянути статтю
  38. PubMed / NCBI
  39. Google Scholar
  40. Переглянути статтю
  41. PubMed / NCBI
  42. Google Scholar
  43. Переглянути статтю
  44. PubMed / NCBI
  45. Google Scholar
  46. Переглянути статтю
  47. PubMed / NCBI
  48. Google Scholar
  49. Переглянути статтю
  50. PubMed / NCBI
  51. Google Scholar
  52. Переглянути статтю
  53. PubMed / NCBI
  54. Google Scholar
  55. Переглянути статтю
  56. PubMed / NCBI
  57. Google Scholar
  58. Переглянути статтю
  59. PubMed / NCBI
  60. Google Scholar
  61. Переглянути статтю
  62. PubMed / NCBI
  63. Google Scholar
  64. Переглянути статтю
  65. PubMed / NCBI
  66. Google Scholar
  67. Переглянути статтю
  68. PubMed / NCBI
  69. Google Scholar
  70. Переглянути статтю
  71. PubMed / NCBI
  72. Google Scholar
  73. Переглянути статтю
  74. PubMed / NCBI
  75. Google Scholar
  76. Переглянути статтю
  77. PubMed / NCBI
  78. Google Scholar
  79. Переглянути статтю
  80. PubMed / NCBI
  81. Google Scholar
  82. Переглянути статтю
  83. PubMed / NCBI
  84. Google Scholar
  85. Переглянути статтю
  86. PubMed / NCBI
  87. Google Scholar
  88. Переглянути статтю
  89. PubMed / NCBI
  90. Google Scholar
  91. Переглянути статтю
  92. PubMed / NCBI
  93. Google Scholar
  94. Переглянути статтю
  95. PubMed / NCBI
  96. Google Scholar
  97. Переглянути статтю
  98. PubMed / NCBI
  99. Google Scholar
  100. Переглянути статтю
  101. PubMed / NCBI
  102. Google Scholar
  103. Переглянути статтю
  104. PubMed / NCBI
  105. Google Scholar
  106. Переглянути статтю
  107. PubMed / NCBI
  108. Google Scholar
  109. Переглянути статтю
  110. PubMed / NCBI
  111. Google Scholar
  112. Переглянути статтю
  113. PubMed / NCBI
  114. Google Scholar
  115. Переглянути статтю
  116. PubMed / NCBI
  117. Google Scholar
  118. Переглянути статтю
  119. PubMed / NCBI
  120. Google Scholar
  121. Переглянути статтю
  122. PubMed / NCBI
  123. Google Scholar
  124. Переглянути статтю
  125. PubMed / NCBI
  126. Google Scholar
  127. Переглянути статтю
  128. PubMed / NCBI
  129. Google Scholar
  130. Переглянути статтю
  131. PubMed / NCBI
  132. Google Scholar
  133. Переглянути статтю
  134. PubMed / NCBI
  135. Google Scholar
  136. Переглянути статтю
  137. PubMed / NCBI
  138. Google Scholar
  139. Переглянути статтю
  140. PubMed / NCBI
  141. Google Scholar
  142. Переглянути статтю
  143. PubMed / NCBI
  144. Google Scholar
  145. Переглянути статтю
  146. PubMed / NCBI
  147. Google Scholar
  148. Переглянути статтю
  149. PubMed / NCBI
  150. Google Scholar
  151. Переглянути статтю
  152. PubMed / NCBI
  153. Google Scholar
  154. 4. Keralapurath MM, Briggs SB, Wagner JJ. Самоконтроль кокаїну викликає зміни в синаптичній передачі та пластичності в вентральному гіпокампі. Біологія наркоманії 2015. doi: 10.1111 / adb.12345 pmid: 26692207.
  155. 5. Loureiro M, Kramar C, Renard J, Rosen LG, Laviolette SR. Канабіноїдна передача в гіпокампі активізує ядра накопичення нейронів і модулює нагороду та пов'язані з відразом емоційні виразності. Біологічна психіатрія. 2015. doi: 10.1016 / j.biopsych.2015.10.016 pmid: 26681496.
  156. 6. Девіс Л, Уезато А, Ньюелл Дж. М., Фрейзьєр Е. Основні депресії та порушення вживання супутніх речовин. Сучасна думка в психіатрії. 2008; 21 (1): 14 – 8. doi: 10.1097 / YCO.0b013e3282f32408 pmid: 18281835.
  157. 7. Супутня хвороба: наркоманія та інші психічні захворювання. В: Послуги USDoHaH, редактор: Національний інститут зловживання наркотиками; 2010.
  158. 8. Tafet GE, Nemeroff CB. Зв'язки між стресом та депресією: психоневроендокринологічні, генетичні та екологічні взаємодії. Журнал нейропсихіатрії та клінічних нейронаук. 2015: appineuropsych15030053. doi: 10.1176 / appi.neuropsych.15030053 pmid: 26548654.
  159. 9. Кадет Ж.Л., Бісаньо В. Нейропсихологічні наслідки хронічного вживання наркотиків: відповідність лікувальним підходам. Межі в психіатрії. 2015; 6: 189. doi: 10.3389 / fpsyt.2015.00189 pmid: 26834649; PubMed Центральний PMCID: PMC4713863.
  160. 10. Блієр П. Фармакологія можливих антидепресантних стратегій раннього початку. Eur Neuropsychopharmacol. 2003; 13 (2): 57 – 66. pmid: 12650947. doi: 10.1016 / s0924-977x (02) 00173-6
  161. 11. Januar V, Ancelin ML, Ritchie K, Saffery R, ​​Ryan J. BDNF метилювання промотору та генетичні зміни в депресії пізнього життя. Трансляційна психіатрія. 2015; 5: e619. doi: 10.1038 / tp.2015.114 pmid: 26285129; PubMed Центральний PMCID: PMCPMC4564567.
  162. 12. Covington HE 3rd, Maze I, LaPlant QC, Vialou VF, Ohnishi YN, Berton O та ін. Антидепресантні дії інгібіторів гістондеацетилази. J Neurosci. 2009; 29 (37): 11451 – 60. Epub 2009 / 09 / 18. 29 / 37 / 11451 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1758-09.2009 pmid: 19759294; PubMed Центральний PMCID: PMC2775805.
  163. 13. Maze I, Covington HE 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ та ін. Суттєва роль гістон-метилтрансферази G9a в пластичності, викликаної кокаїном. Наука. 2010; 327 (5962): 213 – 6. Epub 2010 / 01 / 09. 327 / 5962 / 213 [pii] doi: 10.1126 / наука.1179438 pmid: 20056891; PubMed Центральний PMCID: PMC2820240.
  164. 14. Massart R, Barnea R, Dikshtein Y, Suderman M, Meir O, Hallett M та ін. Роль метилювання ДНК в ядрі накопичується в інкубації тяги кокаїну. Журнал нейронауки: офіційний журнал Товариства нейронаук. 2015; 35 (21): 8042 – 58. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.3053-14.2015 pmid: 26019323.
  165. 15. Рюфл ЖК. Молекулярна нейробіологія наркоманії: про що взагалі (Delta) FosB? Американський журнал зловживання наркотиками та алкоголем. 2014; 40 (6): 428–37. doi: 10.3109 / 00952990.2014.933840 pmid: 25083822.
  166. 16. Nestler EJ. FosB: транскрипційний регулятор стресу та антидепресантів. Eur J Pharmacol. 2014. doi: 10.1016 / j.ejphar.2014.10.034 pmid: 25446562.
  167. 17. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Фосфорилювання DeltaFosB опосередковує його стабільність in vivo. Неврознавство. 2009; 158 (2): 369 – 72. Epub 2008 / 12 / 02. S0306-4522 (08) 01596-0 [pii] doi: 10.1016 / j.neuroscience.2008.10.059 pmid: 19041372; PubMed Центральний PMCID: PMC2734485.
  168. 18. Карл Т.Л., Оніші Ю.Н., Оніші Й.Х., Алібхай І.Н., Вілкінсон М.Б., Кумар А та ін. Протеосомозалежні та незалежні механізми дестабілізації FosB: ідентифікація дегронових доменів FosB та наслідки для стабільності DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007; 25 (10): 3009 – 19. Epub 2007 / 06 / 15. EJN5575 [pii] doi: 10.1111 / j.1460-9568.2007.05575.x pmid: 17561814.
  169. 19. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Регулювання стабільності DeltaFosB фосфорилюванням. J Neurosci. 2006; 26 (19): 5131 – 42. Epub 2006 / 05 / 12. 26 / 19 / 5131 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4970-05.2006 pmid: 16687504.
  170. 20. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M та ін. Поведінкові та структурні реакції на хронічний кокаїн вимагають зворотного циклу, що включає DeltaFosB та залежну від кальцію / кальмодулін протеїнкіназу II в оболонці нуклеуса. J Neurosci. 2013; 33 (10): 4295 – 307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013 pmid: 23467346.
  171. 21. Vialou V, Bagot RC, Cahill ME, Ferguson D, Robison AJ, Dietz DM та ін. Префронтальний корковий контур для поведінки, пов’язаної з депресією та тривогою, опосередкований холецистокініном: роль DeltaFosB. J Neurosci. 2014; 34 (11): 3878 – 87. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1787-13.2014 pmid: 24623766; PubMed Центральний PMCID: PMC3951691.
  172. 22. Vialou V, Thibault M, Kaska S, Cooper S, Gajewski P, Eagle A та ін. Диференціальна індукція ізоформ FosB у всьому мозку флуоксетином та хронічним стресом. Нейрофармакологія. 2015; 99: 28 – 37. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2015.07.005 pmid: 26164345.
  173. 23. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, et al. Індукція deltaFosB у структурах мозку, пов’язаних із винагородою, після хронічного стресу. J Neurosci. 2004; 24 (47): 10594 – 602. Epub 2004 / 11 / 27. 24 / 47 / 10594 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004 pmid: 15564575.
  174. 24. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S та ін. Виразні закономірності індукції DeltaFosB в мозку наркотичними засобами. Синапс. 2008; 62 (5): 358 – 69. Epub 2008 / 02 / 23. doi: 10.1002 / syn.20500 pmid: 18293355; PubMed Центральний PMCID: PMC2667282.
  175. 25. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA Jr., Whisler K, Gilden L, Beckmann AM та ін. Експресія фактора транскрипції deltaFosB в мозку контролює чутливість до кокаїну. Природа. 1999; 401 (6750): 272 – 6. Epub 1999 / 09 / 28. doi: 10.1038 / 45790 pmid: 10499584.
  176. 26. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN та ін. DeltaFosB в ланцюгах нагород мозку опосередковує стійкість до стресу та антидепресантних реакцій. Nat Neurosci. 2010; 13 (6): 745 – 52. Epub 2010 / 05 / 18. nn.2551 [pii] doi: 10.1038 / nn.2551 pmid: 20473292; PubMed Центральний PMCID: PMC2895556.
  177. 27. Robison AJ, Vialou V, Sun HS, Labonte B, S AG, Dias C та ін. Флуоксетин епігенетично змінює промотор CaMKIIalpha в ядерних накопиченнях для регулювання зв'язування DeltaFosB та антидепресантів. Нейропсихофармакологія. 2013. doi: 10.1038 / npp.2013.319 pmid: 24240473.
  178. 28. Орел А.Л., Гаєвський П.А., Ян М, Кехнер М.Є., Аль Масраф Б.С., Кеннеді П.Д. та ін. Індукція, що залежить від досвіду, гіппокампа DeltaFosB контролює навчання. J Neurosci. 2015; 35 (40): 13773 – 83. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2083-15.2015 pmid: 26446228.
  179. 29. Папакостас Г.І., Кульпеппер Л. Розуміння та управління пізнанням у пацієнта з депресією. J Clin Psychiatry. 2015; 76 (4): 418 – 25. doi: 10.4088 / JCP.13086ah1c pmid: 25919832.
  180. 30. Evans VC, Iverson GL, Yatham LN, Lam RW. Зв'язок між нейрокогнітивним та психосоціальним функціонуванням при основних депресивних розладах: систематичний огляд. J Clin Psychiatry. 2014; 75 (12): 1359 – 70. doi: 10.4088 / JCP.13r08939 pmid: 25551235.
  181. 31. Wood S, Sage JR, Shuman T, Anagnostaras SG. Психостимулятори та пізнання: континуум поведінкової та когнітивної активації. Pharmacol Rev. 2014; 66 (1): 193 – 221. doi: 10.1124 / pr.112.007054 pmid: 24344115; PubMed Центральний PMCID: PMC3880463.
  182. 32. Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, et al. Істотна роль гена fosB у молекулярних, клітинних та поведінкових діях хронічних електроконвульсивних припадків. J Neurosci. 1998; 18 (17): 6952 – 62. Epub 1998 / 08 / 26. pmid: 9712664.
  183. 33. Пірс RC, Wolf ME. Нейроадаптації, спричинені психостимуляторами, в ядрі споживають передачу AMPA-рецепторів. Перспективи в холодній весняній гавані в медицині. 2013; 3 (2): a012021. doi: 10.1101 / cshperspect.a012021 pmid: 23232118; PubMed Центральний PMCID: PMC3552338.
  184. 34. Люшер С. Викликана кокаїном синаптична пластичність збудливої ​​передачі у вентральній тегментальній області. Перспективи в холодній весняній гавані в медицині. 2013; 3 (5): a012013. doi: 10.1101 / cshperspect.a012013 pmid: 23637310; PubMed Центральний PMCID: PMC3633178.
  185. 35. Graybeal C, Kiselycznyk C, Holmes A. Стресовий дефіцит пізнання та емоційності: роль глутамату. Curr Top Behav Neurosci. 2012; 12: 189 – 207. doi: 10.1007 / 7854_2011_193 pmid: 22261703; PubMed Центральний PMCID: PMC3877736.
  186. 36. Думан Р.С. Патофізіологія депресії та інноваційні методи лікування: реконструкція глютаматергічних синаптичних зв’язків. Діалоги Clin Neurosci. 2014; 16 (1): 11 – 27. pmid: 24733968; PubMed Центральний PMCID: PMC3984887.
  187. 37. Zarate C, Duman RS, Li G, Sartori S, Quiroz J, Murck H. Нові парадигми щодо стійкої до лікування депресії. Енн Нью-Йорк Акад. Наук. 2013; 1292: 21 – 31. doi: 10.1111 / nyas.12223 pmid: 23876043; PubMed Центральний PMCID: PMC3936783.
  188. 38. Робісон AJ. Роль CaMKII у виникненні нервово-психічної хвороби. Тенденції Neurosci. 2014; 37 (11): 653 – 62. doi: 10.1016 / j.tins.2014.07.001 pmid: 25087161.
  189. 39. Chen J, Zhang Y, Kelz MB, Steffen C, Ang ES, Zeng L та ін. Індукція циклін-залежної кінази 5 в гіпокампі хронічними електроконвульсивними припадками: роль [Delta] FosB. J Neurosci. 2000; 20 (24): 8965 – 71. Epub 2000 / 01 / 11. 20 / 24 / 8965 [pii]. pmid: 11124971.
  190. 40. Mlewski EC, Krapacher FA, Ferreras S, Paglini G. Тимчасово посилена експресія активатора Cdk5 p25 після гострого та хронічного введення d-амфетаміну. Енн Нью-Йорк Акад. Наук. 2008; 1139: 89 – 102. doi: 10.1196 / annals.1432.039 pmid: 18991853.
  191. 41. Bignante EA, Rodriguez Manzanares PA, Mlewski EC, Bertotto ME, Bussolino DF, Paglini G та ін. Залучення септального Cdk5 до виникнення надмірної тривоги, викликаної стресом. Європейська нейропсіхофармакологія: журнал Європейського коледжу нейропсихофармакології. 2008; 18 (8): 578 – 88. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2008.02.007 pmid: 18406108.
  192. 42. Seiwell AP, Reveron ME, Duvauchelle CL. Підвищена експресія Cdk5 у щурів після короткого доступу до кокаїну, який самостійно вводять, але не після сеансів тривалого доступу. Neurosci Lett. 2007; 417 (1): 100 – 5. doi: 10.1016 / j.neulet.2007.02.043 pmid: 17339080; PubMed Центральний PMCID: PMC1876973.
  193. 43. Тейлор JR, Лінч WJ, Санчес H, Олауссон P, Nestler EJ, Bibb JA. Інгібування Cdk5 в ядрах посилюється опорно-руховий і стимулювально-мотиваційний вплив кокаїну. Proc Natl Acad Sci США A. 2007; 104 (10): 4147 – 52. Epub 2007 / 03 / 16. 0610288104 [pii] doi: 10.1073 / pnas.0610288104 pmid: 17360491; PubMed Центральний PMCID: PMC1820723.
  194. 44. Quirion R, Robitaille Y, Martial J, Chabot JG, Lemoine P, Pilapil C та ін. Авторадіографія рецепторів мозку людини з використанням цілих відділів півсфери: загальний метод, що мінімізує артефакти тканин. Синапс. 1987; 1 (5): 446 – 54. Epub 1987 / 01 / 01. doi: 10.1002 / syn.890010508 pmid: 2850625.
  195. 45. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y та ін. Індукція тривалого комплексу AP-1, що складається із змінених фос-білків білків у мозку хронічним кокаїном та іншими хронічними методами лікування. Нейрон. 1994; 13 (5): 1235 – 44. Epub 1994 / 11 / 01. 0896-6273 (94) 90061-2 [пій]. pmid: 7946359. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2
  196. 46. Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Фармакологічні дослідження регуляції хронічної індукції антигену FOS кокаїном у стриатумі та нуклеусі. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 275 (3): 1671 – 80. Epub 1995 / 12 / 01. pmid: 8531143.
  197. 47. Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Хронічні фос-антигени: стабільні варіанти дельтаФосБ, індуковані в мозку хронічними методами лікування. J Neurosci. 1997; 17 (13): 4933 – 41. Epub 1997 / 07 / 01. pmid: 9185531.
  198. 48. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM та ін. Експресія фактора транскрипції [Delta] FosB в мозку контролює чутливість до кокаїну. Природа. 1999; 401 (6750): 272 – 6. http://www.nature.com/nature/journal/v401/n6750/suppinfo/401272a0_S1.html. pmid: 10499584
  199. 49. Buchta WC, Riegel AC. Хронічний кокаїн порушує мезокортикальні механізми навчання. Мозок Рез. 2015; 1628 (Pt A): 88 – 103. doi: 10.1016 / j.brainres.2015.02.003 pmid: 25704202; PubMed Центральний PMCID: PMC4739740.
  200. 50. Shonesy BC, Jalan-Sakrikar N, Cavener VS, Colbran RJ. CaMKII: молекулярний субстрат для синаптичної пластичності та пам'яті. Прогрес у молекулярній біології та трансляційній науці. 2014; 122: 61 – 87. doi: 10.1016 / B978-0-12-420170-5.00003 – 9 pmid: 24484698.
  201. 51. Loweth JA, Tseng KY, Wolf ME. Адаптації в передачі рецепторів AMPA в ядрі сприяють інкубації тяги кокаїну. Нейрофармакологія. 2014; 76 Pt B: 287 – 300. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2013.04.061 pmid: 23727437; PubMed Центральний PMCID: PMC3836860.
  202. 52. Кульпепер Л. Вплив нелікованих основних депресивних розладів на пізнання та щоденну функцію. J Clin Psychiatry. 2015; 76 (7): e901. doi: 10.4088 / JCP.13086tx4c pmid: 26231021.