Source
Кафедра клітинної та нейробіології Медичного факультету Кека, Університет Південної Каліфорнії, Лос-Анджелес, CA 90033, США.
абстрактний
Зловживання анаболо-андрогенними стероїдами (ААС) широко поширене. Більше того, ААС підсилюють, як показує самоуправління гризунами. Однак рецептори, які перетворюють посилюючу дію ААС, незрозумілі. AAS може зв'язуватися з класичними ядерними андрогенними рецепторами (ARs) або мембранними рецепторами. Ми використовували два підходи для вивчення ролі ядерних АР в самоуправлінні ААС. По-перше, ми протестували самоприйом андрогенів у щурів із мутацією фемінізації яєчок (Tfm), яка заважає зв'язуванню андрогенів. Якщо ядерні АР важливі для самоуправління ААС, самці Tfm не повинні самостійно вводити андрогени. Чоловіки Tfm та дикого типу (WT), що підлягають сміттю, самостійно вводять неароматизуючий андроген-дигідротестостерон (DHT) або носій внутрішньомозкового шлуночка (ICV) за графіком фіксованого співвідношення (FR) до FR5. І щури Tfm, і WT надавали перевагу активному носовому судом під час самостійного введення DHT (відповіді 66.4 +/- 9.6 / 4 h для Tfm та 79.2 +/- 11.5 для відповідей на WT / 4 h), а носові судини збільшувались Потреба в FR збільшена. Оцінки переваги були значно нижчими у щурів, що здійснювали самоуправління (42.3 +/- 5.3 відповіді / 4 h для Tfm та 19.1 +/- 4.0 відповіді / 4 h для WT). Ми також перевірили самовведення DHT, кон'югованого з бичачим сироватковим альбуміном (BSA) при C3 та C17, яке обмежується дією на клітинній поверхні. Хом'якам було дозволено самостійно вводити кон'югати DHT, BSA та DHT-BSA протягом днів 15 у FR1. Хом'яки виявляли значну перевагу для DHT (18.0 +/- 4.1 відповідей / 4 h) або DHT-BSA-кон'югатів (10.0 +/- 3.7 відповіді / 4 h і 21.0 +/- 7.2 відповіді / 4 h), але не для BSA (2.5 + / / -2.4 відповіді / 4 год). У сукупності ці дані демонструють, що ядерні АР не потрібні для андрогенного самовведення. Крім того, самоприйом андрогенів може бути опосередкований рецепторами плазматичної мембрани.
Авторські права 2010 Elsevier Ltd. Усі права захищені.
Анаболічно-андрогенні стероїди (ААС) - це зловживання наркотиками. Ці похідні тестостерону (Т) використовуються для спортивних та естетичних цілей (Єсаліс та ін., 1993). Побічні ефекти варіюються від гіпогонадизму та гінекомастії до серцевої та печінкової дисфункції (Лешнер, 2000). Крім того, накопичуються докази того, що зловживання ААС спричиняє зміни настрою (Папа і Кац, 1994), агресія (Чой і Папа, 1994, Kouri та ін., 1995) і може спричинити залежність (Броуер та ін., 1991, Броуер, 2002). Незважаючи на зростаючу стурбованість, основні механізми зловживання ААС були недостатньо вивчені.
У людей стверджується, що початок використання ААС значною мірою мотивовано анаболічними ефектами, але деякі зловмисники з часом розвивають залежність (Броуер, 2002). Докази досліджень на тваринах підтверджують цю гіпотезу. AAS викликає перевагу умовного місця (CPP) у мишей (Арнедо та ін., 2000) і щурів (Packard та ін., 1997, Packard та ін., 1998, Frye та ін., 2002). Крім того, хом'яки добровільно споживають ААС через пероральний (Дерево, 2002), внутрішньовенно (Wood et al., 2004) та внутрішньомозкового внутрішньовентрикулярного (ІКС) самовведення (DiMeo та Wood, 2004, Тріемстра і Вуд, 2004, Wood et al., 2004, DiMeo і Wood, 2006b).
У той час як самовведення ICV пропонує центральні місця дії, специфічні гормони та рецептори, що опосередковують посилення ААС, незрозумілі. Сучасні дані свідчать про те, що підсилюючий ефект T опосередковується андрогенами, а не через естрогени після ароматизації. Самці-хом'яки будуть самостійно вводити дигідротестостерон (ДГТ; DiMeo і Wood, 2006b) та інші неароматизуючі андрогени (Балард і Вуд, 2005). Крім того, T-введення блокується антиандрогенним флутамідом (Пітерс і Вуд, 2004). Тепер стає питанням: як передається андрогенний сигнал у мозку?
Андрогенний рецептор (AR) - класичний ядерний стероїдний рецептор, який функціонує як фактор транскрипції. АР рідкісні в структурах, пов'язаних із зловживанням наркотиками, такими як ядро акумен (Acb) та вентральна тегментальна область (ВТА); Simerly et al., 1990, Вуд і Ньюмен, 1999). Є також дані про гонадні стероїди, що діють через рецептори клітинної поверхні (Mermelstein та ін., 1996, Zhu et al., 2003, Thomas et al., 2006, Васудеван і Пфафф, 2007).
У поточному дослідженні ми використовували два підходи для визначення ролі класичного ядерного АР у андрогенному посиленні. Щоб мінімізувати можливу активацію естрогенних рецепторів (ER), ми протестували DHT для самостійного введення. У першому експерименті щури з мутацією фемінізації яєчок (Tfm) були випробувані на ICV для самостійного введення ДГТ. Tfm - це заміна однієї основи, що призводить до дефектних AR з обмеженим зв'язуванням ліганду (Yarbrough та ін., 1990). Самці щурів Tfm виявляють зовнішній фенотип жінки через недостатню андрогенну стимуляцію під час розвитку (Zuloaga та ін., 2008b). Якщо для посилення ААС потрібні функціональні ядерні АР, щури Tfm не повинні самостійно вводити ДГТ. Натомість щури Tfm отримали можливість самостійного управління ДГТ. У другому експерименті ми перевірили ICV самостійне введення мембранонепроникних форм ДГТ у хом'яків. Коли ДГТ кон'югується з бичачим сироватковим альбуміном (BSA), його дії обмежуються рецепторами клітинної поверхні. Якщо для посилення андрогенів необхідні ядерні АР, хом'яки не повинні самостійно вводити ДГТ, кон'юговані з BSA. Навпаки, хом'яки виявляли чітку перевагу DHT, кон'югованого з BSA. Разом ці дослідження показують, що ядерні АР не потрібні для андрогенного самовведення. Натомість посилення андрогенів може бути опосередковане мембранними АР.
Методи та матеріали
Тематика
Щури
Дорослі самці Tfm щури та дикі типи (WT) послідовники були отримані з колонії в Мічиганському державному університеті. Їх генотип був верифікований за допомогою ПЛР, аналогічно описаним раніше методам (Fernandez et al., 2003). Коротко, вушні затиски розщеплювали протягом ночі при температурі 55 ° C у буфері лізису, що містить протеїназу К, після чого нагрівали інактивували при 95 ° протягом 30 хв. AR ампліфікували за допомогою прямого праймера 5'-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 'і зворотного праймера 5'-TGAAAACCAGGTCAGGTTCC-3 ', даючи продукт 135bp. Потім ампліфіковані зразки розщеплювали рестрикційним ферментом Sau96I (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) протягом ночі при температурі 37 ° C і обробляли на агарозному гелі 3%. За допомогою цього ферменту рестрикції розрізають лише WT AR, залишаючи дві смуги нижче 100bp, тоді як Tfm AR залишається невирізаним. ТФМ тварин також перевіряли фенотипом, наявністю сосків, жіночої аногенітальної відстані та черевних яєчок. Тфм щури раніше використовувались для демонстрації негеномних андрогенних ефектів у гіпокампі (MacLusky et al., 2006). На початку експерименту щури WT були у віці від 75 до 140 дня, а Tfm щури - від 75 до 138 дня.
Хом'яки
Сирійські хом'яки для дорослих чоловіків (130 - 150 г) були отримані з лабораторій Чарльз-Рівер (Вілмінгтон, Массачусетс). Тварин утримували поодиноко на циклі зворотного світла (14L: 10D) з доступною їжею та водою. ad libitum. Усі експериментальні процедури були затверджені інституційними комітетами з догляду та використання тварин відповідних установ та проводилися відповідно до норм Посібник з догляду та використання лабораторних тварин (NationalResearchCouncil, 1996).
Хірургія
Усім тваринам імплантували направляючі канюлі з нержавіючої сталі 22g (Plastic One, Roanoke, VA) в бічний шлуночок [щур: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ∼ -5.0 (Паксинос і Уотсон, 1998); хом'як: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 (Морін і Вуд, 2001), мм від брегми], під Na+ пентобарбітальна анестезія (щур: 50 мг / кг, хом'як: 100mg / kg), як описано раніше (Wood et al., 2004). Всі хірургічні процедури проводилися в асептичних умовах відповідно до Принципи догляду за лабораторними тваринами (NIH, 1985). Тваринам дозволяли видужувати щонайменше тиждень після операції перед тестуванням.
Наркотики
DHT, DHT-карбоксиметил-оксим (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-гемісукцинат (Hemis) та DHT-Hemis-BSA були отримані від стералоїдів (Newport, RI). У DHT-CMO-BSA DHT кон'югується з BSA у положенні C3 з CMO в якості лінкера. Аналогічно, DHT пов'язаний з BSA у положенні C17 через Hemis, щоб утворити DHT-Hemis-BSA. Обидва DHT-CMO-BSA (Гетсон та ін., 2006) та DHT-Hemis-BSA (Браун і Томас, 2003) раніше використовувались для дослідження можливого впливу андрогенів на плазматичну мембрану. ДГТ розчиняли у водному розчині 13% β-циклодекстрину (βCD, Сігма-Олдріх, Сент-Луїс, Міссурі) в кількості 1μg / мкл. Як було визначено в нашому попередньому дослідженні на хом'яків, ця доза дає надійний оперант, який реагує під час самовведення ICV (DiMeo і Wood, 2006b). Похідні ДГТ розчиняли в тому ж середовищі при молярній еквівалентній концентрації DHT (DHT-CMO: 1.25 мкг / мкл, DHT-CMO-BSA: 8.7 мкг / мкл, DHT-геміс: 1.34 мкг / мкл, DHT-Hemis-BSA : 8.83µg / мкл). BSA (Sigma-Aldrich) розчиняли в тому ж середовищі при 7.45 мкг / мкл для досягнення молярної еквівалентної концентрації BSA, як у DHT-CMO-BSA та DHT-Hemis-BSA. Препарати, що містять BSA, готували щодня безпосередньо перед використанням, щоб уникнути деградації, і всі розчини фільтрували через 0.22 мкм-фільтр. Попередні дослідження показали, що лише невелика частка стероїдів дисоціює з BSA (Stevis та ін., 1999), і ця кількість є недостатньою, щоб викликати значні андрогенні ефекти (Лібергер і Гросс, 1994, Гетсон та ін., 2006). Аналогічно, наше попереднє дослідження показало, що ДГТ призначається самостійно при 1.0 мкг / мкл, але не при 0.1 мкг / мкл (DiMeo і Wood, 2006b). Отже, малоймовірно, що вільний ДГТ (> 10%) дисоціює від BSA в достатній кількості для підтримки самовведення.
Апарат
Тваринам було дозволено самостійно вводити розчин лікарського засобу або транспортного засобу 4 год / добу, дні 5 / тиждень у операційній камері (Med Associates, St. Albans, VT), укладеній у звукозаглушаючу камеру з примусовою вентиляцією. Кожна камера була обладнана освітлювальним отвором 2 для носа, а також шприцевим насосом, керованим комп'ютером, підключеним до рідини, що обертається на руці балансу. Розчини зі скляного шприца 100 мкл доставляли тварині через трубку Tygon, з'єднану з поворотом. Трубка, що з'єднувала поворотний і ICV-канюлю, була захищена металевою пружиною. Розчин або носій лікарського засобу доставляли через внутрішню канюлю 28-ga, вставлену у направляючу канюлю безпосередньо перед випробуванням. Кожна інфузія доставляла 1 мкл розчину при 0.2 мкл / с. Носові отвори були розміщені 6 см від підлоги під будинком. Один з носових отворів позначався як активний отвір для носа. Відповідь на цю дірку реєстрували як активний носовий судин (R: активно-підсилений) і рахували до вимоги відповіді (FR1 до 5) для запуску інфузії. Після запуску інфузії світло будинку було погашене, а активна дірка підсвічувалась під час вливання 5-s, щоб допомогти дискримінації діючої носової лунки. Носовий тик в активному отворі протягом цього періоду часу очікування 5 був зафіксований, але не враховувався до подальшого підсилення (NR: активно-не посилений). Реакція на інший носовий отвір була зафіксована як неактивний носовий судин (I), але не призвела до вливання. Розташування активного отвору, що накопичується носом, спереду або ззаду камери було врівноважене, щоб контролювати переваги бічних сторін. Дані були записані програмним забезпеченням WMPC (Med Associate) на ПК з Windows.
ICV самоуправління
Щури
Самостійне введення DHT у щурів Tfm і WT дотримувалося графіку зростання з фіксованим співвідношенням (FR) від FR1 до FR5. Щурів спочатку тренували на FR1, де кожну реакцію на активний носовий твір посилювали. Після цього кількість відповідей, необхідних для отримання інфузії, збільшувались по одному кожні 5 дні. На FR5 для вливання потрібно було п’ять реакцій на активний носовий отвір. Загалом, щурів випробовували на FR1 протягом 10 днів та FR2 на FR5 (5 днів кожен), загалом 30 днів. Щури з кожного генотипу були випадковим чином віднесені до групи DHT або транспортного засобу (транспортного засобу), і їм було дозволено самостійно вводити DHT або βCD носій відповідно. Тридцять шість щурів (nWT = 19, nTFM = 17) були використані в цьому експерименті.
Хом'яки
Хом'яків випробовували за графіком FR1 протягом 15 днів. У попередніх дослідженнях, 15 днів самовведення ICV T є достатнім, щоб отримати перевагу перед активним носом. Хом'яки були випадковим чином присвоєні DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8) ) або групи BSA (n = 9).
Аналіз даних
Щури
Щоденні бали переваг для активного носового суда визначалися відніманням неактивних носових колів від суми активних підсилених та активних не підсилених носових колів (R + NR-I). Середній бал переваг обчислювали для кожної тварини з останніх 5 днів FR1 та протягом FR2 до FR5. Крім того, порівнювали середню кількість підкріплень за сеанс для кожної тварини на кожній ФР.
Дані аналізували за допомогою 3-шляху ANOVA з генотипом (WT або Tfm), препаратом (DHT або носій) та графіком FR (1 ∼ 5) як суб'єктними факторами. Графік ФР трактувався як фактор між факторами, оскільки деякі тварини не змогли виконати цілі дні тестування 30 через засмічення направляючої канюлі ICV. У цих випадках до аналізу були включені лише дані зі складених графіків. Кількість тварин, що входять до кожного стану, показано в Таблиця 1. Тристоронню ANOVA супроводжували відповідні ANOVA нижнього порядку для отримання простих ефектів. Тест Ньюмена-Кельса для порівнюваних парних порівнянь використовувався, коли це було необхідно.
Таблиця 1
Хом'яки
Для аналізу даних використовувались окремі засоби R, NR та я. Оцінку переваг для кожної тварини визначали шляхом віднімання середнього неактивного носового кока (I) від середнього активного носового кока (R + NR-I). Середній бал переваг аналізували на одній вибірці t-тест проти 0 (тобто відсутність переваг) для кожної групи. Крім того, кількість отриманих підкріплень була усереднена для кожної тварини. Середнє підкріплення, отримане для кожної групи препаратів, порівнювалося з контролем BSA з незалежними зразками 2 t-тест. Тварин, які не змогли виконати мінімум сеансів 5, були виключені з аналізу (1 кожен із груп DHT-Hemis та DHT-Hemis-BSA).
Всі статистичні аналізи проводилися за допомогою SPSS 12 (SPSS Inc., Чикаго, штат Ілінойс). Для всього аналізу, p <0.05 вважали статистично значущим. Дані представлені як середнє значення ± SEM за 4 години сеансу.
результати
WT і Tfm щури самостійно вводять DHT
Оператор відповідає
Фіг. 1 ілюструє середню перевагу щодо активного тикання носом (R + RN - I) у кожному FR для груп DHT та Veh. Щури, які самостійно застосовували ДГТ, виявляли більшу перевагу щодо активного тикання носом (73.1 ± 7.6 відн. / 4 год.) Порівняно з контролем транспортного засобу (29.8 ± 3.5 од. / 4 год .; F1,145 = 31.77, p <0.001). Також був основний ефект від розкладу ФР (F4,145 = 4.25, p <0.01), взаємодія генотип-лікарський засіб (F1,145 = 5.27, p = 0.02) та взаємодії з графіком наркотиків та FR (F4,145 = 2.60, p = 0.02). Основного ефекту генотипу не було, інші взаємодії не мали суттєвого значення.
малюнок 1
Пост-тест виявив, що щури, які самостійно вводили ДГТ, показали значно більшу перевагу перед графіком FR (F4,73 = 4.18, p <0.01), збільшуючи перевагу з FR1 (33.4 ± 4.4 відп. / 4 год.) До FR4 (110.8 ± 26.7 од. / 4 год.) Та FR5 (106.4 ± 18.9 од. / 4 год.). В цій групі ефекту генотипу не спостерігалось (схема генотипу-FR: F4,73 = 0.13, нс; генотип: F1,73 = 0.86, нс).
На відміну від цього, щури, які самостійно вводили транспортний засіб, не показали жодних змін у перевазі перед графіком FR (F4,72 = 0.31, нс), і немає взаємодії з графіком генотипу-FR (F4,72 = 0.12, нс). На відміну від DHT, щури Tfm виявляли більшу перевагу, ніж WT у цій групі (42.3 ± 5.3 та 19.1 ± 4.0 resps / 4h відповідно; F4,72 = 11.81, p <0.01).
настої
Середня кількість інфузорій ДГТ та транспортних засобів, отриманих на кожній ФР, показана в Рис. 2. В цілому щури отримували більше інфузій, коли їм було дозволено самостійно вводити ДГТ (26.9 ± 2.2 мкг / 4h) проти носія (15.4 ± 1.9 мкл / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Також був основний ефект від розкладу ФР (F1,145 = 3.32, p = 0.01) та взаємодія генотип-лікарський засіб (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Всі інші взаємодії та основні ефекти не мали суттєвого значення.
малюнок 2
Середнє добове споживання DHT у всіх графіках FR було подібним у щурів Tfm (24.3 ± 2.9 мкг / 4hr) та WT (29.4 ± 3.4 мкг / 4h). В обох групах споживання наркотиків залишалося постійним, оскільки графік ФР збільшувався (F4,73 = 0.54, нс). Під час FR1, Tfm та WT чоловіки самостійно застосовували DHT при 24.5 ± 2.3 мкг / 4h та 37.3 ± 6.7 мкг / 4h відповідно. Згідно з графіком FR5, DHT для самостійного введення становив усереднене значення 18.3 ± 4.5 мкг / 4h для Tfm і 23.9 ± 5.9 мкг / 4h для щурів WT. Ця група не виявила відмінностей, що базуються на графіку генотипу або генотипу (FR) (F1,73 = 1.17, нс; Ж4,73 = 0.34, нс відповідно).
Навпаки, як у Tfm, так і у WT щурів, кількість вливань транспортних засобів значно зменшилася, оскільки потреба в FR збільшувалася (F4,72 = 4.73, p <0.01). Щось дивно, щури Tfm самостійно вводили приблизно вдвічі більше транспортного засобу (20.7 ± 2.4 мкл / 4 год), ніж щури WT (10.7 ± 1.4 мкл / 4 год, F1,72 = 7.77, p <0.01). У щурів Tfm на FR1 кількість інфузій транспортного засобу (39.9 ± 13.2 мкл / 4 год) перевищувало кількість інфузій ДГТ (24.5 ± 2.3 мкл / 4 год). Однак до кінця експерименту самовведення самолетів зменшилось до 10.3 ± 2.4 мкл / 4 год. Подібним чином, щури WT самостійно вводили транспортний засіб 18.6 ± 4.1 мкл / 4 год при FR1, який знизився до 6.6 ± 1.8 мкл / 4 год при FR5.
Середня маса тіла на початок кожного графіку ФР та кількість тварин у кожному стані показані у Таблиця 1. Щури WT були значно важчі, ніж щури Tfm (F1,174 = 144.62, p <0.001), і всі групи з часом набирали вагу (F5,174 = 5.59, p <0.001). Не було виявлено впливу стану наркотиків (DHT проти Veh) на масу тіла (F1, 174 = 0.31, нс) або будь-яка взаємодія. Споживання ДГТ, скориговане на масу тіла, було аналогічним для обох генотипів у обох генотипів FR1 (WT: 77.9 мкг / кг, Tfm: 65.4 мкг / кг) та FR5 (WT: 46.5 мкг / кг, Tfm: 42.6 мкг / кг).
Сирійські хом'яки самостійно вводять ДГТ, кон'юговані з BSA
Оператор відповідає
Хом'яки, які самостійно вводять DHT та DHT, кон'югуються з BSA, але не BSA. Рис. 3a показує середню перевагу (активний - неактивний тиск у носі) для DHT, BSA, DHT-CMO-BSA та DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. Відповідно до наших попередніх досліджень, хом'яки розвивали перевагу до активного тикання носом під час самостійного введення ДГТ (t7 = 4.34, p <0.01), але не виявляв переваги під час самоконтролю BSA (t8 = 1.03, нс). Аналогічно, хом'яки виявляли перевагу активного коклюша з носом як з DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) і DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Якщо DHT прикріплений лише до лінкерів, хом'яки, які самостійно керували DHT-CMO (t8 = 3.91, p <0.01), але не виявляв суттєвих переваг при самостійному введенні DHT-Hemis (t10 = 1.87, p = 0.09). За допомогою DHT-Hemis реакції на активний носовий судин (40.5 ± 10.3 resp / 4h) були схожими на відповіді на DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), але ці самці також демонстрували підвищену реакцію на неактивний ніс -poke (28.7 ± 6.6 resp / 4h) порівняно з показниками для DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).
малюнок 3
настої
Кількість вливань для кожної групи показано в 3b. Хом'яки отримали значно більше вливань ДГТ-, ніж BSA (t15 = 3.04, p = 0.01). Так само хом’яки отримали більше інфузій, коли їм було дозволено самостійно вводити DHT-Hemis-BSA (t15 = 2.72, p = 0.02) або DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) порівняно з BSA. Кількість вливань, отриманих для груп DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 мкл / 4hr) та DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 мкл / 4hr), були подібними до груп, які самостійно вводять DHT, DHT-Hemis-BSA та DHT- ШМО. Тим не менш хом'яки не отримали значно більше DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) або DHT-Hemis (t18 = 1.91, p = 0.07) порівняно з BSA.
Передозування
Одинадцять хом'яків 55 померли до завершення всіх тестових сесій 15. Раніше були описані випадки смерті внаслідок передозування андрогенів під час прийому тестостерону (Пітерс і Вуд, 2005). У цьому дослідженні 2 чоловіків 8 (25%) загинув під час самостійного введення ДГТ, подібно до того, що 24% повідомляло про передозування тестостерону (Пітерс і Вуд, 2005). Самостійне введення DHT-CMO та DHT-Hemis було пов'язано з найвищими втратами (кожен 3 8 на групу, 38%), тоді як серед хом'яків, які самостійно вводять BSA, було мало випадків смерті (1 9, 11%) або DHT -Геміс-BSA (0 8). Як і при передозуванні тестостероном, жоден із хом'яків у цьому дослідженні не загинув під час самостійного застосування. Натомість хом'яки через кілька годин померли в своїх домашніх клітках, із сильним руховим рухом та пригніченням дихання.
Передозування тестостерону тісно пов’язана із споживанням тестостерону, особливо максимального споживання за сеанс (Пітерс і Вуд, 2005). Рис. 4 порівнює показники переваг, кількість отриманих підкріплень та пікове споживання хом'яків, які завершили всі тести 15, та тих, хто цього не зробив. Обидві групи виявили значну перевагу перед активним носовим судом (p <0.05). Однак переваги були значно більшими у хом'яків, які загинули під час самостійного введення (25.7 ± 5.2 відн. / 4 год.) Порівняно з тими, що вижили (9.5 ± 2.0 відн. / 4 год. t53 = 3.42, p <0.01). Хом'яки, які не змогли пройти 15 сеансів, отримували вдвічі більше вливань за сеанс (31.2 ± 5.0 інф / 4 год), ніж ті, хто пройшов усі сеанси (14.8 ± 1.1 інф / 4 год, t53 = 5.05, p <0.001). Крім того, для хом'яків, які померли під час дослідження, максимальне споживання на сеанс було значно вищим (77.0 ± 9.8 інф / 4 год), ніж для чоловіків, які вижили (36.1 ± 2.9 інф / 4 год, t53 = 5.41, p <0.001).
малюнок 4
Обговорення
Самоадміністрація андрогенів може бути опосередкована мембранно-асоційованими, але не ядерними андрогенними рецепторами
Нинішнє дослідження демонструє, що класичні ядерні АР не є важливими для самоуправління андрогенами. І щури Tfm, і WT розробили перевагу активного носового судом під час самостійного введення ДГТ. Крім того, вони змогли реагувати на зростаючий графік ФР, збільшуючи активні пригнічення в носі, тим самим підтримуючи стабільний рівень прийому наркотиків незалежно від графіку ФР. Навпаки, щури, які приймали транспортний засіб, не реагували на зміни у графіку ФР. Їх активні носові удари не суттєво зросли у відповідь на зміни в графіку ФР, і вони отримали менше вливань, оскільки потреба у відповіді зростала. Оскільки зв'язування ліганду з "класичним" ядерним рецептором андрогенів порушено в мутантах Tfm, це підтверджує нашу гіпотезу, що посилення андрогенів опосередковується альтернативними шляхами.
Несподівано висока відповідь на транспортний засіб щурами Tfm навряд чи буде пов’язана з самим транспортним засобом. Ми спостерігали подібні явища в окремій групі щурів Tfm, які не отримували ніяких інфузій (дані не показані). Натомість це може бути пов'язано з фемінізованими рисами поведінки у чоловіків Tfm. Підвищені носові судини щурів Tfm можуть бути аналогічними більш високим дослідним занурам голови, що спостерігаються у щурів (Коричневий і Немес, 2008). Як варіант, відомо, що щури та миші Tfm демонструють посилену тривожну поведінку (Zuloaga та ін., 2006, Zuloaga та ін., 2008a). Можливо, седативні / анксіолітичні ефекти ДГТ (Agren та ін., 1999, Арнедо та ін., 2000, Фрай і Селіга, 2001, Berbos та ін., 2002, Пітерс і Вуд, 2005) придушили тривожну поведінку, коли щури Tfm самостійно застосовували ДГТ.
Крім того, самостійне введення кон'югатів DHT-BSA у хом'яків-самців дає свідчення того, що андрогени можуть діяти на плазматичну мембрану нейрона, щоб мати посилюючу дію. Хом'яки виявляли значну перевагу для обох кон'югатів DHT-BSA. Дози, які вводяться самостійно, відповідають нашим попереднім дослідженням щодо Т, ДГТ та часто зловживаних стероїдів (Балард і Вуд, 2005, DiMeo і Wood, 2006b). На противагу цьому хом'яки не виявляли переваги лише до BSA. Дані про смертність та споживання наркотиків демонструють ДГТ та його похідні можуть бути смертельними, розширюючи наші попередні дані щодо передозування Т (Пітерс і Вуд, 2005).
Поточне дослідження виявляє характерну для виду модель реагування оператора. Хом'яки не віддавали перевагу активному колючому носу під час самостійного введення транспортного засобу, як було показано раніше (Джонсон і Вуд, 2001, Дерево, 2002, DiMeo та Wood, 2004, Тріемстра і Вуд, 2004, Wood et al., 2004, Балард і Вуд, 2005, DiMeo і Wood, 2006b). Однак у щурів була чітка перевага активного ковтання в носі незалежно від прийому препарату. Ми спостерігали подібну тенденцію в нашому попередньому дослідженні щодо IV самостійного введення Т у щурів, хоча воно не було статистично значущим (Wood et al., 2004). Виходячи з такої видової різниці в поведінці при самостійному застосуванні, слід дотримуватися обережності при порівнянні даних про поведінку щурів і хом'яків.
Є кілька застережень, які потрібно враховувати при тлумаченні поточного дослідження. По-перше, ядерні АР зі значно погіршеним зв'язуванням ліганду все ще присутні у щурів Tfm (Yarbrough та ін., 1990), на відміну від мишей Tfm (He et al., 1991). Можливо, що ці мутовані ядерні АР є достатніми для опосередкування ефектів андрогенів у надфізіологічних дозах. По-друге, кон'югати DHT-BSA можуть погіршуватися в природних умовах, в результаті чого виходить безкоштовний DHT. Хоча це не виявилося суттєвим питанням пробірці (Лібергер і Гросс, 1994, Гетсон та ін., 2006), ступінь та час деградації DHT-BSA в природних умовах в мозку наразі невідомо. Нарешті, кон'югати DHT-BSA можуть істотно не проникати в тканини мозку. DHT-BSA значно більше, ніж DHT, тому ефекти DHT-BSA, що спостерігаються в поточному дослідженні, швидше за все, будуть опосередковані в місцях, близьких до шлуночків.
Незважаючи на ці застереження, ці два різні підходи дали послідовні результати, які суперечать суттєво проти необхідності ядерної АР у зміцненні андрогенів. Крім того, самостійне введення кон'югатів BSA говорить про те, що андрогени можуть діяти на плазматичну мембрану при андрогенному зміцненні. Наскільки нам відомо, сучасне дослідження надає перше в природних умовах докази поведінково важливих ефектів андрогенів на плазматичну мембрану.
Андрогени чинять швидкі ядерні AR-незалежні ефекти на винагороду
Кілька інших досліджень щодо андрогенної винагороди показали результати, що відповідають ефектам негеномних або плазматичних мембран. CPP розвивається протягом 30 хв системної Т-ін'єкції (Alexander et al., 1994), часовий курс, що відповідає гострим негеномним ефектам T. CPP, також може бути індукований внутрішньо-Acb вливаннями Т або його метаболіту (Packard та ін., 1997, Frye та ін., 2002), хоча у Acb є мало геномного AR. Крім того, VTA виражає Fos у відповідь на ICV T-інфузію (Дімео і Вуд, 2006a), незважаючи на відсутність там значної класичної експресії AR. Поточне дослідження не дає інформації щодо місця дії в мозку. Тим не менш, це вказує на те, що відносна відсутність ядерної АР не є достатньою причиною для виключення структур, таких як Acb і VTA, з потенційних ділянок, які можуть опосередковувати андрогенні ефекти.
Швидкі ефекти плазматичної мембрани стероїдів в дорсальній та вентральній смузі не обмежуються андрогенами. Як відомо, прогестини індукують CPP, можливо, через рецептори гамма-аміномасляної кислоти (GABA) в Acb (Фрай, 2007). Естрогени також здійснюють швидкі, опосередковані мембраною рецептори ефекти в спинному стриатумі (Mermelstein та ін., 1996, Беккер і Рудік, 1999). Мембрано-асоційований рецептор вже був виділений для прогестинів (Zhu et al., 2003), і докази накопичуються для рецепторів клітинної поверхні для естрогенів (розглянуто в Васудеван і Пфафф, 2007) та андрогени (рецензовано в Thomas et al., 2006). Хоча естрогени також підсилюють (DiMeo і Wood, 2006b), підсилююча дія Т виявляється переважно андрогенною. Хом'яки самостійно вводять неароматизуючі андрогени, такі як дростанолон та ДГТ (Балард і Вуд, 2005, DiMeo і Wood, 2006b). Додатково, антиандроген флутамід може блокувати Т-самовведення (Пітерс і Вуд, 2004). Хоча це може суперечити ролі мембранної АР, про яку повідомлялося в цьому дослідженні, повідомлялося, що флутамід також блокує активацію мембранної АР (Браун і Томас, 2003, Браун і Томас, 2004).
Властивості мембранних андрогенних рецепторів
Історично вважалося, що вплив стероїдів, включаючи андрогени, вважалося таким, що передається процесами, опосередкованими ядерними рецепторами. Однак повідомлення про швидкі андрогенні ефекти, імовірно, опосередковані мембранно-асоційованими рецепторами, були доступні протягом декількох десятиліть. Наприклад, в медіальній преоптичній зоні андрогени можуть змінювати стрілянину нейронів протягом декількох секунд (Ямада, 1979) до хвилин (Pfaff і Pfaffmann, 1969). Крім того, Орсіні та його колеги (Orsini, 1985, Orsini et al., 1985) показали швидку модифікацію частоти стрільби нейронів андрогенами в бічному гіпоталамусі (ЛГК). Цей ефект андрогенів при ЛГК може мати особливе значення для цього дослідження, оскільки ЛГК, як відомо, бере участь у схемі нагородження (Олдс і Мілнер, 1954) і ЛГК орексин / гіпокретин регулюються гональними стероїдами (Muschamp et al., 2007).
Типи клітин з можливими мембранними АР включають гліальні (Гетсон та ін., 2006), гонад (Браун і Томас, 2003, Браун і Томас, 2004) та імунні клітини (Benten та ін., 1999, Guo et al., 2002), міоцити (Естрада та ін., 2003) та остеобластів (Лібергер і Гросс, 1994). Хоча молекулярна ідентичність ще не визначена, кандидати на мембрану AR включають мембранні рецептори з відомими стероїдними зв'язуючими сайтами, такі як GABA-A (розглянуто в Lambert et al., 2003) та субодиниці NR2 рецепторів N-метил-D-аспарагінової кислоти (Малаєв та ін., 2002). Альтернативно, Томас та його колеги (2004) повідомили про докази нового рецептора, пов'язаного з G-білком, як мембранного AR. Крім того, не можна виключити вплив андрогенів, пов'язаних із конкретним рецептором, у поточному дослідженні.
недавній пробірці дослідження дозволяють припустити, що на одному рецепторі існує кілька мембранних АР або більше ніж один зв'язуючий сайт, як запропоновано для мембранного рецептора прогестерону (Рамірес та ін., 1996). У багатьох типах клітин мембрана AR виявляється мембранним рецептором, з'єднаним з Gq / o (Лібергер і Гросс, 1994, Benten та ін., 1999, Zhu et al., 1999, Guo et al., 2002, Естрада та ін., 2003). Однак характеристики стероїдного зв'язування та чутливість до антиандрогенів передбачуваної мембрани AR сильно різняться залежно від типу клітини. Наприклад, антиандрогени можуть блокувати вплив DHT на клітини яєчників, що розвиваються (Браун і Томас, 2003, Браун і Томас, 2004), хоча вони не ефективні для інших типів клітин (Лібергер і Гросс, 1994, Benten та ін., 2004, Гетсон та ін., 2006), або навіть може проявляти агоністичну дію в клітинах гіпокампа (Щука, 2001, Nguyen et al., 2007) та кілька ліній ракових клітин (Peterziel та ін., 1999, Zhu et al., 1999, Evangelou та ін., 2000, Papakonstanti та ін., 2003). Крім того, про різні органи риб повідомлялося про різні Т-зв'язуючі характеристики (Браун і Томас, 2004).
Наш досвід роботи з AAS, що часто зловживається, свідчить про те, що основні модифікації на A-кільці (на C2 та / або C3) та на C17 мають тенденцію перешкоджати самоуправлінню (Балард і Вуд, 2005). Наприклад, станозолол, який має значну модифікацію на C2 та C3, а також метильна група, приєднана до C17, не призначається самостійно. У поточному дослідженні хом'яки призначали як BSA, кон'юговані при C3 (DHT-CMO-BSA), так і C17 (DHT-Hemis-BSA). Потрібні подальші дослідження для з'ясування характеристик андрогенів, які приймаються самостійно.
Клінічне значення
ААС, особливо Т, є на сьогодні найбільш поширеними засобами для підвищення продуктивності, які застосовують спортсмени, і складає майже половину позитивних допінгових тестів (Всесвітнє антидопінгове агентство, 2006). Враховуючи таке широке застосування, зловживання ААС має широкі наслідки для здоров'я. Серцеві та печінкові побічні ефекти від зловживання ААС добре встановлені (Лешнер, 2000). Вважається, що ці та анаболічні ефекти ААС опосередковуються через ядерну АР. Однак можливі ядерні AR-незалежні ефекти андрогенів говорять про те, що вплив ААС може виходити за рамки структур з ядерною експресією AR.
Що стосується подібності до інших наркотиків, що зловживають, ААС виробляють різні ефекти і мають різні механізми дії від стимуляторів. На відміну від стимуляторів (Graybiel et al., 1990), AAS викликає активацію c-Fos лише у VTA, а не в Acb (Дімео і Вуд, 2006a). Крім того, AAS послаблює вивільнення Acb DA, викликане стимулятором (Birgner et al., 2006) та інгібувати гостро вивільнення DA (Triemstra та ін., 2008). Поведінково ААС не індукують опорно-рухову активацію, характерну для стимуляторів (Пітерс і Вуд, 2005).
Натомість поведінкові реакції на гострий ААС нагадують реакцію на опіоїди або бензодіазепіни, можливо, надаючи адитивні ефекти, коли їх приймають разом. Гостре вплив на ААС пригнічує вегетативні функції, включаючи дихання та температуру тіла (Пітерс і Вуд, 2005). ААС-індукована вегетативна депресія нагадує симптоми передозування опіоїдів і блокується антагоністом опіоїдного налтрексону (Пітерс і Вуд, 2005). Крім того, нандролон, що часто застосовується ААС, посилює гіпотермічну дію морфіну та посилює симптоми відміни налоксону, осадженого налоксоном (Celerier та ін., 2003). Крім того, добре встановлено, що гострі ААС є седативними / анксіолітичними (Agren та ін., 1999, Арнедо та ін., 2000, Фрай і Селіга, 2001, Berbos та ін., 2002, Пітерс і Вуд, 2005), можливо опосередковане їх прямим впливом на рецептори GABA-A (Месонсіс та Маккарті, 1995, Месонсіс та Маккарті, 1996). Збільшення споживання етанолу у щурів, хронічно оброблених ААС, також може бути відображенням зміни GABAergic функції (Johansson et al., 2000).
Наші результати щодо передозування викликають додаткове занепокоєння щодо здоров’я. В даний час класифікація ААС як контрольних речовин заснована на їх анаболічних властивостях (Закон про контрольовані речовини, 1991). Однак, сучасне дослідження демонструє, що анаболічна ефективність ААС не обов'язково відповідає їх підсилюючим властивостям та ризикам передозування. На додаток до кон'югатів DHT-BSA, DHT-CMO, використовуваний у цьому дослідженні, не є контрольованою речовиною, хоча його посилюючі властивості та смертність від передозування виявляються досить схожими на DHT та T (Пітерс і Вуд, 2005). Модель передозування також нагадувала попередню інформацію про T (Пітерс і Вуд, 2005), де високе споживання призводило до смертності 24 до 48 годин пізніше. У світлі цих висновків, критерії, які використовуються для планування стероїду як контрольованої речовини, можуть вимагати перегляду для врахування його відповідальності за зловживання та токсичності, крім його анаболічної активності.
Результати поточного дослідження говорять про те, що ядерний АР, єдиний АР, виділений поки що, не має істотного значення для андрогенного посилення. Натомість результати говорять про те, що посилення андрогену перетворюється на плазматичну мембрану. Таким чином, необхідні подальші розслідування ідентичності передбачуваної мембрани AR, їх функціональних характеристик та анатомічного розподілу для з'ясування основного механізму зловживання ААС та його клінічних наслідків.
Виноски
Заява видавця: Це PDF-файл неозброєного рукопису, який був прийнятий до публікації. Як послугу нашим клієнтам ми надаємо цю ранню версію рукопису. Рукопис буде підданий копіюванню, набору тексту та перегляду отриманого доказу до його опублікування в остаточній формі. Зверніть увагу, що під час виробничого процесу можуть бути виявлені помилки, які можуть вплинути на вміст, і всі правові застереження, які стосуються журналу, стосуються.
посилання
- Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Поведінкові анксіолітичні ефекти низькодозового анаболічного андрогенного стероїдного лікування у щурів. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Alexander GM, Packard MG, Hines M. Тестостерон має корисні афективні властивості у щурів-самців: наслідки для біологічної основи сексуальної мотивації. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. Нагороджувальні властивості тестостерону у неушкоджених мишей-самців: пілотне дослідження. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- Ballard CL, Wood RI. Внутрішньомозковий внутрішньовентрикулярний самоприйом часто зловживаних анаболо-андрогенних стероїдів у чоловічих хом'яків (Mesocricetus auratus): нандролон, дростанолон, оксиметолон та станозолол. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Becker JB, Rudick CN. Швидкий вплив естрогену або прогестерону на індуковане амфетаміном збільшення стриатального дофаміну посилюється за допомогою естрогенової грунтовки: дослідження мікродіалізу. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Gu Z, Krucken J, Wunderlich F. Швидкий вплив андрогенів у макрофаги. Стероїди. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Сигналізація про тестостерон через інтерналізовані поверхневі рецептори в макрофагах, що не містять андрогенних рецепторів. Клітина Moll Biol. 1999;10: 3113-3123. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Гострий поведінковий вплив анаболічних стероїдів: тривожність, стереотипія та опорно-рухова активність. Хорм Бехав. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Змінений рівень позаклітинної DOPAC та HVA в ядрі щурів обшивається оболонкою у відповідь на субхронічне введення нандролону та наступну проблему амфетаміну. Neurosci Lett 2006
- Браун А.М., Томас П. Андрогени інгібують синтез естрадіолу-17beta в яєчниках атлантичного кроку (Micropogonias undulatus) негеномним механізмом, ініційованим на поверхні клітин. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Браун А.М., Томас П. Біохімічна характеристика мембранного андрогенного рецептора в яєчнику атлантичного крокера (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Броуер KJ. Зловживання анаболічними стероїдами та залежність. Curr Psychiatr респ. 2002;4: 377-387.
- Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Симптоми та кореляти анаболо-андрогенної стероїдної залежності. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Браун Г.Р., Немес С. Дослідницька поведінка щурів в апараті для дощок: чи занурення головою є дійсним заходом неофілії? Процес Behav. 2008;78: 442-448. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Селеріє Е, Язді М.Т., Кастан А, Госланд S, Найберг Ф, Мальдонадо Р. Вплив нандролону на гостру реакцію на морфін, толерантність та залежність у мишей. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Чой П.Ю., Папа Римський, молодший Насильство над жінками та незаконне використання андрогенно-анаболічних стероїдів. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- Розділ 21, глава 13 - Профілактика та контроль за зловживанням наркотиками Закон про контрольовані речовини 1991
- ДіМео А.Н., Вуд РІ. Циркулюючі андрогени посилюють чутливість до тестостерону при самостійному введенні у хом'яків-чоловіків. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Дімео А.Н., Вуд Р.І. ICV тестостерон індукує Фос у мозку сирійського хом'яка. Психоневроендокринологія. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- ДіМео А.Н., Вуд РІ. Самостійне введення естрогену та дигідротестостерону у хом'яків-чоловіків. Хорм Бехав. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Естрада М, Еспіноза А, Мюллер М, Яимович Е. Тестостерон стимулює внутрішньоклітинне вивільнення кальцію та активовані мітогеном протеїнкінази через рецептор, пов'язаний з білком G, у клітинах скелетних м’язів. Ендокринологія. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Вниз-регулювання трансформації бета-рецепторів фактора росту андрогеном в ракових клітинах яєчників. Рак Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Молекулярний метод класифікації генотипів, отриманих у селекційній колонії від тестикулярних фемінізованих (Tfm) щурів. Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. Прогестини впливають на мотивацію, винагороду, кондиціонування, стрес та / або реакцію на зловживання наркотиками. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Ядро вживається як місце дії для відшкодування властивостей тестостерону та його метаболітів, знижених 5alpha. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Фрай CA, Селіга А.М. Тестостерон збільшує аналгезію, анксіоліз та когнітивні показники щурів-самців. Когнітивна, афективна та поведінкова неврологія. 2001;1: 371-381.
- Гетсон Дж. В., Каур Р, Сінгх М. Дігідротестостерон диференційовно модулює мітоген-активовану протеїнкіназу та фосфоінозитидні шляхи 3-кінази / Акт через ядерну та нову мембрану андрогенного рецептора в клітинах C6. Ендокринологія. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Робертсон HA. Амфетамін та кокаїн індукують специфічну для наркотиків активацію гена c-fos у відділах стратосоматричної матриці та лімбічних підрозділах стриатуму. Proc Natl Acad Sci США А. 1990;87: 6912-6916. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Го Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomic тестостерон сигналу кальцію. Генотропні дії в макрофагах, що не містять андрогенних рецепторів. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- Він WW, Kumar MV, DJ Tindall. Мутація зрушення кадрів в гені рецептора андрогенів викликає повну нечутливість до андрогенів у миші, що фемінізує яєчка. Нуклеїнові кислоти Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Анаболічні андрогенні стероїди впливають на споживання алкоголю, захисну поведінку та опіоїдні пептиди мозку у щура. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- Джонсон Л.Р., Wood RI. Пероральний прийом тестостерону у хом'яків-чоловіків. Нейроендокринологія. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- Kouri EM, Lukas SE, Pope HG, Jr, Oliva PS. Підвищена агресивна реакція у добровольців-чоловіків після введення поступово збільшуючих доз ципіонату тестостерону. Залежні від алкоголю препарати. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Нейростероїдна модуляція рецепторів GABAA. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Лешнер А.І. (Серія звітів про дослідження NIDA).Зловживання анаболічними стероїдами. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Андрогени підвищують внутрішньоклітинні концентрації кальцію та утворення інозитолу 1,4,5-трисфосфату та діацилгліцерину за допомогою коклюшу, чутливого до токсинів G-білка. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Ефекти андрогенів на кількість синапсів хребта гіппокампа CA1 зберігаються у щурів-самців Tfm з дефектними андрогенними рецепторами. Ендокринологія. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Малаєв А, Гіббс ТТ, Фарб DH. Інгібування відповіді NMDA прегненолоном сульфатом виявляє підтипову селективну модуляцію рецепторів NMDA сульфатованими стероїдами. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Мейсоніс А.Є., маккарті МП. Прямий вплив анаболічних / андрогенних стероїдів, станозололу та альфа-метилтестостерону 17 на зв'язування бензодіазепіну з. (а) рецептор гамма-аміномасляної кислоти. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- Мейсоніс А.Є., маккарті МП. Вплив андрогенного / анаболічного стероїдного станозололу на функцію рецепторів GABAA: стимульований GABA приплив 36Cl та зв'язування [35S] TBPS. J фармакологічної та експериментальної терапії. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Естрадіол зменшує струми кальцію в неостриатальних нейронах щурів через мембранний рецептор. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- Морін Л.П., Вуд РІ. Стереотаксичний атлас мозку Золотого Хом'яка. Академічна преса; Сан-Дієго: 2001.
- Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Роль гіпокретину (орексину) у сексуальній поведінці чоловіків. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- Рада НР, редактор. Національнадослідницька рада. Посібник з догляду та використання лабораторних тварин. Національна наукова рада; Вашингтон, округ Колумбія: 1996.
- Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Флутамід та ципротерон ацетат виявляють агоністичну дію: індукція андроген-залежної нейропротекції. Ендокринологія. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. Принцип лабораторного догляду за тваринами. Національний інститут охорони здоров'я; Бетесда, Меріленд: 1985.
- Олдс Дж, Мілнер П.М. Позитивне підкріплення виробляють шляхом електричної стимуляції області перегородки та інших областей мозку щурів. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Орсіні JC. Прямий вплив андрогенів на бічну активність нейронів гіпоталамусу у щурів-самців: II. Дослідження викиду тиску. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- Орсіні JC, Бароне ФК, Армстронг DL, Wayner MJ. Прямий вплив андрогенів на бічну активність нейронів гіпоталамусу у щурів: І. Мікроіонтофоретичне дослідження. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Нагородження афективних властивостей внутрішньоядерних ущільнює ін'єкції тестостерону. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Експресія переваги умовного тестостерону місця блокується периферичною або внутрішньосемейною ін'єкцією альфа-флупентіксола. Хорм Бехав. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Швидкий, негеномний, сигнальний шлях регулює реорганізацію актину, викликану активацією мембранних рецепторів тестостерону. Моль ендокринол. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. Мозок щурів: у стеротаксичних координатах. 4th. Академічна преса; Нью-Йорк: 1998.
- Петерс К.Д., Вуд Р.І. Анаболо-андрогенна стероїдна залежність передбачає андрогенні та опіоїдні рецептори. Матеріали 34-го щорічного засідання Товариства нейрознавства; Сан-Дієго, Каліфорнія. 2004.
- Петерс К.Д., Вуд Р.І. Андрогенна залежність у хом'яків: передозування, толерантність та потенційні опіоїдргічні механізми. Неврологія. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Швидка сигналізація андрогенним рецептором у клітинах раку передміхурової залози. Онкоген. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. нюхові та гормональні впливи на основний передній мозок щура-самця. Мозок Рес. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Пайк CJ. Тестостерон послаблює бета-амілоїдну токсичність у культивованих нейронах гіпокампа. Дослідження мозку. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- Папа Х.Г., молодший, Katz DL. Психіатричні та медичні наслідки вживання анаболо-андрогенних стероїдів. Контрольоване дослідження спортсменів 160. Arch Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Рамірес В.Д., Чжен Дж, Сіддік КМ. Мембранні рецептори естрогену, прогестерону та тестостерону в мозку щурів: фантазія чи реальність. Клітина Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Simerly RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Розподіл клітин, що містять андроген та естроген мРНК в мозку щурів: дослідження in situ гібридизації. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Диференціальні ефекти кон'югатів естрадіолу та естрадіолу-BSA. Ендокринологія. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, рецептори, пов’язані з естрогеном та андрогеном G-білками в рибних статевих залозах. Стероїди. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Тестостерон і ядро приєднує дофамін у самця сирійського хом'яка. Психоневроендокринологія. 2008;33: 386-394. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. Самостійне введення тестостерону у хом'яків жіночої статі. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Васудеван N, Pfaff DW. Мембранно ініційовані дії естрогенів у нейроендокринології: нові принципи. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Дерево RI. Пероральне самостійне введення тестостерону у чоловіків хом'яків: реакція на дозу, добровільне фізичне навантаження та індивідуальні відмінності. Хорм Бехав. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Підсилення тестостерону: внутрішньовенне та внутрішньомозкове внутрішньовентрикулярне самовведення у щурів та хом'яків-самців. Психофармакологія (Берл) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Wood RI, Newman SW. Імунореактивність рецепторів андрогенів у чоловічому та жіночому мозку сирійських хом'яків. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- WorldAnti-dopingAgency. Побічні аналітичні результати, про які повідомляють акредитовані лабораторії. Всесвітнє антидопінгове агентство; Монреаль, Канада: 2006.
- Ямада Я. Вплив тестостерону на одиничну активність у гіпоталамусі та перегородці щурів. Мозок Рес. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, French FS, Wilson EM. Одномісна мутація гена рецептора андрогену викликає нечутливість до андрогенів у фемінізованого яєчка щура. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- Єсаліс С.Є., Кеннеді Нью-Джерсі, Копштейн А.Н., Барк МС. Використання анаболо-андрогенних стероїдів у США. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- Чжу X, Лі Х, Лю JP, Funder JW. Андроген стимулює мітоген-активовану протеїнкіназу в клітинах раку молочної залози людини. Ендокринол клітини Mol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Чжу Y, CD з рису, Pang Y, Pace M, Thomas P. Клонування, експресія та характеристика мембранного рецептора прогестину і свідчать про те, що він є посередником у мейотичному дозріванні ооцитів риби. Proc Natl Acad Sci США А. 2003;100: 2231-2236. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Zuloaga DG, Morris JA, Jordan CL, Breedlove SM. Миші з мутацією фемінізації яєчок демонструють роль андрогенних рецепторів у регуляції поведінки, пов’язаної з тривожністю, і гіпоталамо-гіпофізарно-надниркової осі. Хорм Бехав. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. Роль андрогенних рецепторів у маскулінізації мозку та поведінці: те, що ми дізналися з мутації фемінізації яєчок. Хорм Бехав. 2008b;53: 613-626. [PMC безкоштовна стаття] [PubMed]
- Zuloaga DZ, Jordan CL, Breedlove SM. Щури з мутацією фемінізації яєчок (TFM) демонструють підвищені показники тривожності. Матеріали 36-го щорічного засідання Товариства нейрознавства; Атланта, штат Джорджія. 2006. Програма № 152.118.
;