Klinik Psychopharmacol Neurosci. 2012 dekabr; 10 (3): 136-43. doi: 10.9758 / cpn.2012.10.3.136. Epub 2012 Dek 20.
manba
Fishberg Nevrologiya bo'limi va Friedman Brain instituti, Sinay Tibbiyot maktabi, Nyu-York, AQSh.
mavhum
Gen ekspressionini tartibga solish giyohvandlikning mantiqiy mexanizmi hisoblanadi, chunki u giyohvandlik holatini aniqlaydigan xulq-atvorning barqarorligini ta'minlaydi. Ko'p sonli transkriptsiya omillari, muayyan genlarni tartibga soluvchi hududlarga bog'laydigan va shu bilan ularning ifoda darajalarini nazorat qiluvchi oqsillar so'nggi o'n yil ichida yoki ikkalasida giyohvandlik jarayoniga taalluqli. Bu erda, Fos oilasi oqsillari (DFOSB), cAMP javob elementlari bilan bog'laydigan protein (CREB) va yadroviy omil kappa B (NFKB) kabi bir nechta noyob transkriptsiya omillari, shuningdek, boshqalar qatorida giyohvandlikda . Ko'rinib turganidek, har bir omil miyaning mukofotlash tizimida giyohvand moddalarni iste'mol qilish bilan juda xilma-xil tartibga soladi va o'z navbatida, giyohvandlik fenotipining alohida jihatlariga vositachilik qiladi. Hozirgi sa'y-harakatlar ushbu transkriptsion omillarning funktsional ta'sirini va asosiy molekulyar mexanizmlarni ishlab chiqaradigan maqsad genlarni aniqlashga qaratilgan. Bu ish odatda giyohvandlikning molekulyar asosiga yangi tushunchalarni ochib berishga va'da beradi, bu esa o'z-o'zidan paydo bo'lgan buzilishlarni davolash uchun diagnostik testlar va terapevtikaga yordam beradi.
Kirish
Narkomaniyaning transkripsiyalash mexanizmlarini o'rganish gen ekspozitsiyasini tartibga solishni, giyohvand moddalarni surunkali ta'siriga duchor qilishning miyadagi uzoq davomli o'zgarishlarga olib keladi va bu o'z navbatida giyohvandlik holatini belgilovchi xatti-harakatlarning anomaliyalariga sabab bo'ladi.1,2) Ushbu gipotezaning natijasi shundaki, bir nechta neyronnotransmiter tizimlarining ishlashida paydo bo'lgan o'zgarishlar va miyada ma'lum neyronal hujayra turlarining morfologiyasida, surunkali dori vositachiligi bilan qisman genin ifodasini o'zgartirish orqali amalga oshiriladi.
Tabiiyki, giyohvand moddalari bilan bog'liq bo'lgan neyron va xulq-atvorli plastinka gen ekspressioni darajasida vositachilik qilmaydi, chunki biz transkativ va posttranslatsion modifikatsiyalar va oqsillarni odam savdosi bilan bog'liq bo'lgan hodisalarda muhim rol o'ynaydi. Boshqa tomondan, gen ekspozitsiyasini tartibga solish - bu markaziy mexanizm bo'lib, odatda giyohvandlikni tavsiflovchi hayotiy anomaliyalar uchun juda muhimdir. Haqiqatan ham, transkripsiyalashgan tartibga solish ushbu boshqa mexanizmlarning ishlashi ustidan shablonni taqdim etadi.
So'nggi 15 yil ichida olib borilgan ishlar, giyohvandlikda gen ekspressionining roli to'g'risida tobora ko'payib borayotgan dalillarni keltirib chiqardi, chunki bir nechta transkripsiya omillari - maqsadli genlarning targ'ibotchi hududlarida aniq javob elementlari bilan bog'langan va ushbu genlarning ekspressionini tartibga soluvchi oqsillar. giyohvand moddalarni iste'mol qilishda. Ushbu sxemaga muvofiq, ko'rsatilgan Anjir. 1, zo'ravonlik dori vositalari, sinapsda dastlabki harakatlar orqali neyronlarga signal beruvchi va ko'p sonli transkriptsiya omillari va transkripsiyoniy normativ proteynlarning ko'plab turlarini tartibga soluvchi neyronlarda o'zgarishlar keltirib chiqaradi.3) A Bu yadroviy o'zgarishlar asta-sekin va bosqichma-bosqich ravishda takrorlangan dori ta'siriga ega bo'lib, o'ziga xos maqsadli genlarni ifodalovchi barqaror o'zgarishlarni boshdan kechiradi, bu o'z navbatida narkologik funktsiyaning davomiy o'zgarishiga hissa qo'shadi.1,4)
Ushbu sharhda giyohvandlikda muhim rol o'ynashi ko'rsatilgan bir nechta transkripsiya omillariga e'tibor qaratiladi. Biz ko'proq miyaning mukofot tizimidagi giyohvand moddalar bilan tartibga solinadigan transkripsiya omillariga, odatda odamning tabiiy mukofotlarga bo'lgan munosabatini (masalan, oziq-ovqat, jinsiy aloqa, ijtimoiy o'zaro ta'sir) tartibga soluvchi, ammo giyohvandlikning surunkali ta'siridan buzilgan miya sohalariga e'tibor qaratamiz. Ushbu miya mukofotlash sxemasi o'rta miyaning ventral tegmental sohasidagi dopaminerjik neyronlarni va ular innervatsiya qiladigan limbik oldingi miyaning bir nechta mintaqalarini, shu jumladan yadro akumbenslari (ventral striatum), prefrontal korteks, amigdala va hipokampusni va boshqalarni o'z ichiga oladi. Ko'rinib turganidek, hozirgi kunga qadar giyohvandlikning transkripsiyaviy mexanizmlari bo'yicha olib borilgan tadqiqotlarning aksariyati akumbens yadrosiga qaratilgan.
DFB
DFOSB tomonidan kodlangan FosB gen va F-Fos, FosB, Fra1 va Fra2 kabi boshqa Fos oilasi transkripsiyasi omillari bilan homologiyani almashtiradi.5) Bu Fos oilasi oqsillari transgenatsiyani tartibga solish uchun muayyan genlarni qo'llab-quvvatlovchi AP1 saytlariga bog'laydigan faol faollashtiruvchi oqsil-1 (AP1) transkriptsiya omillarini yaratish uchun Jun oilaviy proteynlari (c-Jun, JunB yoki JunD) bilan heterodimerlashadi. Ushbu Fos oilaviy oqsillari ko'plab giyohvandlik moddalarining o'tkir tarzda qo'llanilishidan so'ng, ma'lum miya hududlarida tez va vaqtincha indüklenir (Anjir. 2).2) Ushbu javoblar yadro gabaritlari va dorsal striatumda eng ko'zga ko'ringan, biroq boshqa miya joylarida ham ko'rish mumkin.6) Biroq, bu Fos oilasi oqsillari barchasi yuqori darajada beqaror va preparatni qo'llash soatlari ichida bazal darajalariga qaytadilar.
Dori vositalarini surunkali iste'mol qilishdan keyin turli xil javoblar mavjud (Anjir. 2). DFOSB (M.) Ning biokimyoviy o'zgartirilgan izoformlarir 35-37 kD) takrorlangan dori ta'siridan keyin bir xil miya hududlarida to'planadi, barcha Fos oila a'zolari esa sabrlilikni namoyon etadi (ya'ni dastlabki dori ta'siriga nisbatan indüksiyani kamaytiradi).7-9) DFOSBning bunday to'planishi deyarli barcha giyohvandlik vositalari uchun kuzatilgan bo'lsa-da, turli dorilar yadroli akumbens yadrolaridagi qobiq, dorsal striatum va boshqa miya hududlari nisbatan sezilarli darajada indüksiyon darajasida bir-biridan farq qiladi.2,6) Hech bo'lmaganda ba'zi bir suiiste'mol qilish uchun DFOSB induktsiyasi striatal hududlarda asosan D1 dopamin retseptorlarini ifoda etadigan o'rta murtak neyronlarning dinorfin o'z ichiga olgan qismi uchun tanlangan ko'rinadi. DFOSB ning 35-37 kD izoformalari asosan JunD bilan kamayadi va ushbu miya mintaqalarida faol va uzoq muddatli AP-1 kompleksini hosil qiladi,7,10) ammo ba'zi bir dalillar mavjud in vitro DFF ning homodimerlarini hosil qilishi mumkin bo'lgan tadqiqotlar.11) Nucleus accumbens-da DFS ning preparatning kiritilishi preparatning farmakologik xususiyatlariga javob sifatida ko'rinadi boshiga tushgan va giyohvand moddalarni iste'mol qilish bilan bog'liq emas, chunki giyohni o'z-o'zidan boshqaradigan yoki bo'yinturuqli giyohvand moddalarni in'ektsiyasini olgan hayvonlar bu miya hududida transkriptsiya faktori ekvivalentini ko'rsatadilar.6) Aksincha, ayrim boshqa mintaqalarda, masalan, orbitofrontal korteksdagi DFBning indüksiyasiyasi, iloji boricha dori vositasini boshqarishni talab qiladi.12)
35-37 kD DFOSB izoformlari surunkali dori ta'siriga ega bo'lib, ular juda uzoq umr ko'rishlari mumkin.7-13) Uning barqarorligi natijasida DFOSB proteini neyronlarda dori ta'siridan keyin kamida bir necha hafta davomida saqlanib qoladi. Endi biz ushbu barqarorlik ikki omilga bog'liq: 1) to'liq FosB va boshqa barcha Fos-oilaviy oqsillarning C-uchida mavjud bo'lgan va bu oqsillarni tez buzilish uchun maqsadli bo'lgan ikkita degronli ta'sir maydonining DFSda yo'qligi va 2) DFOSB ning N-terminali fosforilatsiyasini xom-kinaz 2 va ehtimol boshqa protein kinazlari bilan ifodalaydi.14-16) DFosB izoformalarining barqarorligi, giyohvand moddalarni iste'mol qilishning nisbatan uzoq muddatiga qaramay, gen ekspressionidagi dori ta'siridagi o'zgarishlar davom etishi mumkin bo'lgan yangi molekulyar mexanizmni ta'minlaydi. Shuning uchun biz DFOSB doimiy "molekulyar kalit" sifatida ishlaydi, bu esa qaram holatni boshlashga va keyinchalik saqlab turishga yordam beradi.1,2)
Qo'shadi-dagi roli
DFF ning giyohvandlikda rolini anglash asosan, DFB ning kattalar hayvonlarining yadroli akumbens va dorsal striatumi ichida tanlanishi mumkin bo'lgan bitransjenik sichqonlarni o'rganishdan kelib chiqqan.17) Eng muhimi, bu sichqon DFFB ni donorni indüktireceğine ishongan dynorphin o'z ichiga olgan o'rta zararli nöronlarda selektif ravishda bosim qiladi. O'tkir va surunkali administratsiyadan so'ng DFOSB-ovseksinlashtiruvchi sichqonlarga kokainning kengaygan lokomotor ta'sirini ko'rsatadi.17) Bundan tashqari, kokain va morfinin joyini aniqlash tajribalarida joy olib,17-19) va kokainning quyi dozalarini o'z-o'zini boshqarish va giyohvand moddalarga nisbatan ko'proq ishlaydi.20) Bundan tashqari, nukleus akumbensida DF-dan ortiq ekspressiya opiat jismoniy jihatdan qaramlikning rivojlanishini oshiradi va opiat analjezik toleransini rivojlantiradi.19) Aksincha, FosB ekspresyon qiladigan sichqonchalar Morris suv mazzasida baholangan mekansal o'rganishni o'z ichiga olgan boshqa qiziqarli sohalarda normaldir.17) Virus orqali yuboriladigan genlarni o'tkazish orqali DFOSB eksperksepsiyasini yadro moslashuvchanlarga maxsus aniqlashtirish teng ma'lumotga ega bo'ldi.19)
Aksincha, yadroli akumbens va dorsal striatumda (asosan D2 dopaminli retseptorlari eksprese qilgan) enkepaxlin o'z ichiga olgan o'rta zarrachali neyronlarga DFosB ifodasini bitransjenik sichqonlarning turli sathlarida maqsad qilib qo'yish bu xatti-harakat fenotiplarining ko'pini ko'rsatolmaydi.19) DFosB ning haddan tashqari ekspressiyasidan farqli o'laroq, AP1 vositachiligidagi transkripsiyaning dominant salbiy antagonisti sifatida ishlaydigan mutant Jun oqsilining (ΔcJun yoki ΔJunD) haddan tashqari ekspressioni - bitransgen sichqonlar yoki virus vositachiligida gen uzatilishi yordamida qarama-qarshi xulq-atvor ta'sirini keltirib chiqaradi.18,19,21) Ushbu ma'lumotlar shundan dalolat beradiki, DFosB ning yadrosi akumbensning dinorfinli o'rta murtakli neyronlarida hayvonning kokain va boshqa suiiste'mol qilinadigan dori-darmonlarga nisbatan sezgirligi oshadi va giyohvand moddalarga nisbatan uzoq muddatli sezgirlik mexanizmini aks ettirishi mumkin.
Boshqa miya hududlarida DFOSB indüksiyonunun o'rni kamroq yaxshi tushuniladi. So'nggi yillarda o'tkazilgan tadqiqotlarda aytilishicha, orbitofrontal korteksdagi DFSB induktsiyasi giyohvand moddalarni iste'mol qilishni yanada yaxshilashga xizmat qilishi mumkin bo'lgan ayrim kognitiv-buzuvchi oqibatlarga olib keladi.12,22)
DFOSB maqsadli genlar
DFosB transkripsiya omili bo'lganligi sababli, u boshqa genlarning ekspressionini kuchaytirish yoki repressiya qilish yo'li bilan ushbu qiziq xulq-atvor fenotipini yadro akumbenslarida hosil qiladi. DFosB yoki uning dominant salbiy ΔcJun-ni haddan tashqari oshirib yuboradigan induktiv, bitransgenik sichqonlarimizdan va Affymetrix chiplaridagi gen ekspressionini tahlil qilib, biz - akumbens yadrosida ning Vivo jonli -DFosB asosan transkripsiyaal faollashtiruvchi vosita bo'lib, u genlarning kichik kismiga repressor vazifasini bajaradi.18) Ushbu tadqiqotda DFOSBning kokainning genomik ta'sirini avtomatlashtirishda ustun roli ham namoyon bo'ldi: DFB, surunkali kokain tomonidan yadro gulxanlaridan ta'sirlangan barcha genlarning to'rtdan biriga yaqinlashadi.
Ushbu genomga oid yondashuv, shuningdek, bir nechta nomzod genlarini parallel ravishda o'rganish bilan bir qatorda, DFOSning bir necha maqsadli genlarini yaratdi va ular o'zlarining qiziqishlariga oid fenotipiga ta'sir ko'rsatdi. Bir nomzod gensi GOA2, AMPA glutamat retseptorlari bo'limi bo'lib, DFOSB tomonidan yadroli akkumbenlarda hosil bo'ladi.17) GluA2 o'z ichiga olgan AMPA kanallari ushbu subunitni o'z ichiga olmayotgan AMPA kanallari bilan taqqoslaganda kamroq umumiy o'tkazuvchanlikka ega bo'lgani sababli, Nukleus akumbensdagi GluA2 ning kokain va DFosB vositachiligidagi upregulyatsiyasi, hech bo'lmaganda qisman, glyutamatergik reaktsiyalarda surunkali dori ta'siridan keyin ushbu neyronlar.23)
Nucleus accumbens-da DFF ning yana bir nomzod maqsad geni opioid peptid, dynorphin. DFF ning bu miya mintaqasida dynorphin ishlab chiqaruvchi hujayralarda maxsus ravishda suiiste'mol qilingan dorilar tomonidan paydo bo'lishini eslaylik. Favqulodda giyohvandlik dynorphin ekspresyonuna murakkab ta'sir ko'rsatadi, ishlatiladigan davolash sharoitlariga qarab, ortadi yoki kamayadi. DFF ning indüksiyonu, nucleus accumbens'teki dynorphin gen ekspresyonunu repressiyasini ko'rsatdi.19) Dynorphin ventral tyumen maydoni (VTA) dopamin neyronlari bo'yicha k opioid retseptorlarini faollashtiradi va dopaminerjik uzatishni inhibe qiladi va shuning uchun mukofot mexanizmlarini kamaytiradi.24,25) Demak, dinorfin ekspressionining DFOSB repressiyasi ushbu transkripsiya faktori vositachiligidagi mukofot mexanizmlarini takomillashtirishga yordam berishi mumkin. Hozirda DFOSB ning xulq-atvorli fenotipida dinorfin geni repressiyasining ishtirokini qo'llab-quvvatlovchi to'g'ridan-to'g'ri dalillar mavjud.19)
Hali ham qo'shimcha maqsadli genlar aniqlandi. DFB bosimlarni qaytaradi c-Fos Molekulyar almashinuvni yaratishda yordam beradigan gen - qisqa muddatli Fos oilaviy oqsillarini induktsiyasidan, giyohvand moddalarning o'tkir ta'siridan so'ng, surunkali dori ta'siridan keyin DFOSB ning to'planishiga qadar - ilgari keltirilgan.9) Aksincha, siklinga qaram bo'lgan kinaz-5 (Cdk5) surunkali kokain tomonidan yadro gulxanlarida paydo bo'ladi, biz ko'rsatgan ta'sir DFB orqali vositachilik qiladi.18,21,26) Cdk5 - bu DF fosbning muhim maqsadi, chunki uning ifodasi yadro akkumbenlari o'rta tirnoqli neyronlarning dendritik orqa miya zichligi,27,28) surunkali giyohni qo'llash bilan bog'liq bo'lgan yadroli akumbenslarda.29,30) Haqiqatan ham, DFOSB indüksiyonu, yaqinda, giyoh tomonidan indüklenen dendritik omurilik o'sishida zarur va etarli bo'lishi ko'rsatilgan.31)
Yaqinda biz DFOSB maqsadli genlarini aniqlash uchun chromatin immunoprecipitatsiyasini (ChIP), keyinchalik promoter chipini (ChIP chip) yoki chuqur sekvestrlash (ChIP-seq) yordamida qo'lladik.32) Ushbu tadqiqotlar, ilgari keltirilgan DNK ekspresiyasi massivlari bilan bir qatorda, to'g'ridan-to'g'ri yoki bilvosita - DFosB tomonidan yo'naltirilgan ko'plab qo'shimcha genlarning boy ro'yxatini taqdim etadi. Ushbu genlar orasida qo'shimcha nörotransmitter retseptorlari, pre va postsinaptik funktsiyalarga aloqador oqsillar, ko'plab ion kanallari va hujayra ichidagi signal beruvchi oqsillar, neyronlarning sitoskeletlari va hujayralar o'sishini boshqaruvchi oqsillar va xromatin tuzilishini tartibga soluvchi ko'plab oqsillar mavjud.18,32) Ushbu ko'plab oqsillarni tasdiqlash uchun qo'shimcha ishlar qilish kerak halollik bilan, insof bilan DFOSB orqali faoliyat yuritadigan kokainning maqsadlari va har bir proteinning kokain ta'sirining murakkab neyron va xatti-harakatlariga vositachilik qilishda aniq rolni o'rnatish.
CREB
Cyclic AMP reaktsiyasi elementi bog'lovchi protein (CREB) nevrologiyada eng ko'p o'rganilayotgan transkriptsiya omillaridan biri bo'lib, neytral plastisitikaning turli jihatlariga taalluqlidir.33) Jinsiy AMP javob elementlari (CRE) da genlarni bog'laydigan homodimerlar hosil qiladi, lekin birinchi navbatda, SerxNUMXda (bir necha protein kinazdan har qanday kishi tomonidan) fosforilatlanganidan keyin transkripsiyani faollashtiradi, bu esa CREB-bog'lovchi proteinga (CBP) transkripsiyani targ'ib qiladi. CREBni aktivlashtiradigan mexanizm ma'lum genlarni ifodalaydigan repressiya mexanizmi kamroq tushuniladi.
Ikkala psixostimulyatorlar (kokain va amfetamin) va afyunlar CREB faolligini keskin va surunkali ravishda oshiradi - ko'p miqdordagi fosfo-CREB (pCREB) yoki CRE-LacZ transgenik sichqonlarda reportyor gen faolligi bilan o'lchanadi - ko'plab miya hududlarida, shu jumladan yadro va akustik omurgalar va dorsal striatum. .34-36) Ushbu aktivlashtirishning davomiyligi DFB tomonidan namoyish qilinganidan juda farq qiladi. Rasmda ko'rsatilganidek Anjir. 2, CREBning faollashuvi o'tkir dori vositachiligiga javoban juda o'tkir bo'lib, bir-ikki kun ichida oddiy darajalarga qaytariladi. Bundan tashqari, CREB faollashishi ham o'rta tishli neyronlarning dynorphin va enkephalin subtipalarida uchraydi.34) Kokain va opiyatlardan farqli o'laroq, CREB boshqa giyohvandlik moddalariga nisbatan murakkab va turli xil javoblarni ko'rsatadi.4)
Bitransgen sichqonlarda yoki virusli vektorlarda CREB yoki dominant salbiy mutantning induktsiya qilinadigan haddan tashqari ekspressionini o'z ichiga olgan eksperimentlar shuni ko'rsatdiki, CREB ning faollashuvi DFOSBdan farqli o'laroq - yadro akumbensida kokain va opiatlarning foydali ta'sirini kamaytiradi. tahlillar.37,38) Shunga qaramasdan, CREF faollashishi, masalan, DFSB indüksiyonu, dori o'zini o'zi boshqarishini ta'minlaydi.39) Eng muhimi, salbiy salbiy CREB bilan ta'sir endojen CREB faoliyati inducible knockdowns bilan tasdiqlangan.39-41) Qizig'i shundaki, transkriptsiya omillari ham iloji boricha giyohvand moddalarni iste'mol qilishni boshlaydi; Ehtimol, DFosB ijobiy mustahkamlash orqali buni amalga oshiradi, CREB esa bu fenotipni salbiy mustahkamlash orqali indamoqda. Oxirgi imkoniyat, bu miya mintaqasida CREB faoliyati salbiy hissiy holatga olib keladigan muhim dalillar bilan mos keladi.34,42)
CREB faoliyati nukleus akumbens o'rta zarrachali neyronlarning funktsional faoliyati bilan bevosita bog'liq. CREB eksperksepsiyasi ortadi, ammo dominant-salbiy CREB kamayadi, o'rta tuproqli neyronlarning elektriksiz qo'zg'aluvchanligi.43) Dynorphin va enkephalin neyronlari orasidagi farqlar hali aniqlanmagan. Virus orqali vositachilik qiladigan K ning eksperimentini kuzatish+ kanalning kichik bo'lagi, o'rta zararli neyronlarning qo'zg'aluvchanligini kamaytiradigan, kokainga qarshi lokomotiv ta'sirini kuchaytiruvchi, CREB neyronlarning ta'sirlanishini yuqorilash yo'li bilan giyohga nisbatan sezuvchanlik hissiyotini buzishga xizmat qiladi.43)
Narkotik moddalarni suiiste'mol qilish CREBni bir necha miya hududlarida yadro gulxanlaridan tashqari harakatga keltiradi. Masalan, kokain yoki opiatning surunkali administratsiyasi dopaminerjik va non-dopaminerjik neyronlar ichida CREBni faollashtiradigan ventral tegmental sohadir. Ushbu ta'sir ventral tegmental hududning pastki qismiga qarab, suiiste'mol dori-darmonlarining ijobiy javoblarini rag'batlantirish yoki kamaytirish kabi ko'rinadi.
CREB uchun juda ko'p maqsadli genlar aniq va nomzod gen protseduralari orqali aniqlandi va bu va boshqa ta'sirlarni yadro akumbenslari o'rta tuproqli neyronlarga va natijada paydo bo'lgan CREB xarakati fenotipiga vositachilik qildi.18,32,36) Ochiq misollar orasida opioid peptid dinorfin,37) oldindan aytib o'tilganidek, yadroviy akumbenslarga dopaminerjik signallarni qaytaradi va bostiradi.24,25) Bundan tashqari, GluA1 AMPA pastki birligi va GluN2B NMDA pastki birligi kabi ma'lum glutamat retseptorlari pastki birligi va K+ va Na+ ion kanali subunitsiyalari, ular birgalikda yadro akumbens hujayralari qo'zg'aluvchanligini nazorat qilishlari kerak edi.43,44) BDNF, hali CREB uchun boshqa maqsadli gen bo'lib yadro akumbenslarda mavjud va bu ham CREB xulq-atvori fenotipini vositachilashda qo'llaniladi.35) CREB indüksiyonu, shuningdek, kokainning dendritik o'murtqa yadrosi akumbenslari o'rta orqa miya neyronlarini indüksiyasiga hissa qo'shishi mumkin.45)
CREB - bu CRE-larni bog'laydigan va maqsadli genlarning transkripsiyasini boshqaradigan bir nechta bog'liq oqsillardan biri. Tsiklik AMP javob elementi modulyatori (CREM) genining bir nechta mahsulotlari CRE vositachiligidagi transkripsiyani tartibga soladi. Mahsulotlarning bir qismi (masalan, CREM) transkripsiya faollashtiruvchisi, boshqalari (masalan, ICER yoki induktsiyali tsiklik AMP repressor) endogen dominant salbiy antagonist sifatida ishlaydi. Bundan tashqari, bir nechta faollashtiruvchi transkripsiya omillari (ATF) gen ekspressioniga CRE saytlari bilan bog'lanish orqali qisman ta'sir ko'rsatishi mumkin. Yaqinda o'tkazilgan tadqiqotlar ushbu turli xil transkripsiya omillarini giyohvand moddalarning ta'siriga ta'sir qildi. Amfetamin yadrodagi akumbenslarda ICER ekspressionini keltirib chiqaradi va ushbu mintaqada ICERning haddan tashqari ekspressioni, virusli vositalar yordamida genlarni uzatishni qo'llagan holda, hayvonning preparatning xatti-harakatlariga ta'sirchanligini oshiradi.46) Yuqorida keltirilgan topilmalar bilan solishtiradigan bo'lsak, dominant salbiy CREB mutantlarining mahalliy ekspressioni yoki CREBning lokal knockdowni shunga o'xshash ta'sir ko'rsatadi. Amfetamin shuningdek, ATF2, ATF3 va ATF4ni yadro akumbenslarida ham chiqaradi, ATF1 yoki CREM uchun hech qanday ta'sir ko'rinmaydi.47) ATF2 bu mintaqada ICERga o'xshash ortiqcha tushuntirish amfetaminga nisbatan xatti-harakatlarni kuchaytiradi, ATF3 yoki ATF4 overspression esa teskari ta'sirga ega. Bu turli CREB oilaviy oqsillari uchun maqsadli genlar haqida juda kam ma'lumotga ega, kelajakdagi tadqiqotlar uchun muhim yo'nalish.
NFKB
Yadro faktor-kB (NFKB), turli xil stimullar bilan tezkor ravishda faollashtirilgan transkriptsion faktor, uning yallig'lanish va immun reaktsiyalaridagi roli uchun yaxshi o'rganiladi. Keyinchalik yaqinda sinaptik plastika va xotirada muhim ahamiyatga ega bo'lganligi ko'rsatilgan.48) NFKB kokainni qayta ishlatish orqali yadro gulxanlarida paydo bo'ladi,49,50) bu erda kokainning dumg'aza dendritik tizmalarini induktsiyalash uchun yadro akumbenslari o'rta orqa miya neyronlari uchun talab qilinadi. NFBB ning bunday indüksiyasi preparatning foydali ta'siriga sezgirlikka yordam beradi.50) Hozirgi tadqiqotning asosiy maqsadi NFK ning ushbu uyali va xulq-atvorli plastisitikaga olib keladigan maqsadli genlarni aniqlashdan iborat.
Qizig'i shundaki, NFkB ning kokain indüksiyonu, DFOSB orqali amalga oshiriladi: DFF'nin, NFKB'yi FosB aşırı ekspresyonu, DcJun'un dominant salbiy bloklari, transkripsiyon faktörünün kokain indüksiyonunun haddan tashqari namoyishi.21,49) DFF tomonidan NFKBni tartibga solish dori-darmon bilan shug'ullanadigan murakkab transkripsiyent kaskadlarni tasvirlaydi. Bundan tashqari, NFKB striatal hududlarda metamfetaminning ba'zi neyrotoksik ta'siriga taalluqli.51) NFKB ning o'rta bo'g'imli neyron spinogenezidagi roli oxirgi paytlarda stress va depressiya modellariga,52) depressiya va giyohvandlikning komorbidligini hisobga olgan holda, ayniqsa, giyohvand moddalarni suiiste'mol qilishda stressni keltirib chiqaradigan noxush hodisalarni hisobga olgan holda alohida ahamiyatga ega.
MEF2
Myocit kuchaytiruvchi omil - 2 (MEF2) kardiak myogenezni boshqarishda uning roli uchun topildi. Keyinchalik, MEF2 miya funktsiyasi bilan bog'liq.53) Bir nechta MEF2 izoformlari miyada, shu jumladan yadroli akumbenslarda o'rta tuproqli neyronlarda ifodalanadi, ular homo va heterodimerlarni hosil qiladi, ular gen transkripsiyasini faollashtiradilar yoki bosib chiqaradilar. Oxirgi ishda surunkali kokaindan MEX2ning yadrodagi akumbenslardagi faolligini qisman D1 retseptorlari-cAMP-ga bog'liq kalsinurin inhibisyonu, Ca2+mustaqil protein fosfataz.28) Shuningdek, ilgari aytib o'tilganidek, giyoh va DFB uchun maqsad bo'lgan Cdk5 ning kokainni tartibga solish ham jalb qilinishi mumkin. MEF2 faoliyatidagi bu kamayish o'rta dudli neyronlarga dendritik o'ramlarni kokain indüksiyasini talab qiladi. Mavjud ishning muhim yo'nalishi MEF2 orqali maqsadli genlarni aniqlash bu ta'sirni keltirib chiqaradi.
FOYDALANISh YO'LLARI
Yuqorida muhokama qilingan transkriptsiya omillari giyohvandlik modellarida yillar mobaynida o'rganilgan ko'pgina narsalar qatoriga kiradi. Narkomaniyaga aloqador bo'lganlar orasida glukokortikoid retseptorlari, nukleus akumbenslari 1 transkriptsiyali faktor (NAC1), erta o'sish omillari (EGR) va signal transduserlari va transkriptsiyaning faollashtiruvchilari (STATlar) mavjud.1,2) Faqatgina bir misol sifatida, glyukokortikoid retseptorlari kokain izlash uchun dopaminoceptive neyronlarda talab qilinadi.54) Kelajakdagi tadqiqotlarning maqsadi - giyohvandlikning surunkali ta'siriga duch keladigan yadro mo''tadillari va boshqa miya mukofotlari hududlarida yuzaga keladigan transkriptsion faktorlar haqida to'liqroq tasavvurni topish va ta'sir o'tkazish uchun ta'sir qiluvchi genlar oralig'ini aniqlash va xatti-harakatlarning fenotipiga hissa qo'shishdir giyohvandlik.
Kelajakdagi tadqiqotning boshqa asosiy maqsadi - bu turli transkripsiyalik omillarning maqsad genlarini tartibga soladigan nozik molekulyar bosqichlarni aniqlash. Shunday qilib, transkriptsiya omillari gen ekspozitsiyasini genlarni atrofida kromatinning tuzilishini tartibga soluvchi va keyinroq katalizlaydigan RNK polimeraza II kompleksini ishga tushiradigan ko-aktivator yoki ko-repressor oqsillarini birlashtirgan holda genlarni ifodalashni biladi transkripsiya.4) Misol uchun, yaqinda o'tkazilgan tadqiqotlarda DFOSB ning cdk5 genini indamasligi qobiliyatiga histon asetiltransferaza va shunga o'xshash kromatinni qayta tuzish oqsillarini genga jalb qilish bilan birgalikda namoyon bo'lishini ko'rsatdi.55) Aksincha, DFosbning c-Fos genini repressiya qilish qobiliyati gistondagi deasetilaza va ehtimol repressiv xiston metiltransferaza (masalan,Anjir. 3).2,9,31) Yuzlab kromatinning tartibga solinadigan oqsillari faollashtirilishi yoki bosimi bilan birgalikda genga to'planishi ehtimoli hisobga olinsa, bu ish kelgusi yillarda kashf qilinishi kerak bo'lgan katta miqdordagi ma'lumotlarning aysbergining uchi.
Giyohvand moddalarni tartibga soluvchi transkriptsiya omillari uchun maqsadli genlarni aniqlashda ilgarilash kabi, bu ma'lumot dori kashfiyoti yo'llarini ko'rsatish uchun qo'llanilishi mumkin bo'lgan tobora to'la shablonni ta'minlaydi. Narkomaniyani boshdan kechiradigan transkripsiya mexanizmlarini tushunishimizda ushbu dramatik o'zgarishlar asosida yangi dori-darmonlar ishlab chiqilishi umid qilinadi.