Erkaklar jinsiy xulq-atvori (2007) uchun gipokretin (oreksin)

mavhum

Kirish

1990-larda ochilganidan beri (Lecea va boshq., 1998; Sakurai va boshq., 1998), hypocretin (orexin; hcrt / orx) tizimi asosan hayajonli va ingichka xulq-atvor kontekstidaSutcliffe va de Lecea, 2002; Siegel, 2004). Noma'lum hcrt / orx signalizatsiya qiluvchi mutant sichqonchani uyqu va uyqusizlik o'rtasidagi tez-tez almashinuvlar bilan belgilanadigan uyg'un noodiylik naqshlariniMochizuki va boshq., 2004). Hcrt / orx peptidlarining miya tuzilishida (masalan, locus ceruleus, raphe) uyg'ongan faol aminergik hujayra guruhlariga mustahkam proektsiyalar bilan uzluksiz ta'sirlanishini engillashishiga ishoniladiPeyron va boshq., 1998; Nambu va boshq., 1999; Saper va uning hamkorlari, 2005). Hushyorlik va uyg'unlikni tartibga soladigan joylarga ularning prognozlaridan tashqari, hcrt / orx neyronlari ham ventral tegmental sohada (VTA) mesolimbik dopamin (ULARNING)Fadel va Deutch, 2002). Ushbu ulanish turi, bir qator tadqiqot guruhlariga hcrt / orx-ni mukofot bilan bog'liq mustahkamlashdagi rolini baholashga olib keldi (DiLeone va boshq., 2003; Xarris va boshq., 2005; Xarris va Aston-Jones, 2006).

Hayvonlarning harakatlanishi ad libitum hcrt / orx neyronlarının energiya, kashfiyotchi xatti-Mileykovskiy va boshq., 2005) va intraserebroventrikulyar hcrt / orx infuzionidan keyin kuchaytirilgan lokomotor chiqishi DA retseptorlari tomonidan bloklanganNakamura va boshq., 2000). Boshqa ishlar DA hujayralarining faolligini oshirdi in vitro tomonidan hcrt / orx (Korotkova va boshq., 2003), shuningdek, mustahkamlangan yadro akkumtsiyasi (NAc) DA ning chiqarilishi ning Vivo jonli hcrt / orx dasturidan keyin VTA (Narita va boshq., 2006). So'nggi paytlarda xulq-atvorli tadqiqotlar, hcrt / orx tizimining faollashishi, giyohvand moddalarni iste'mol qilishni rag'batlantirish uchun ajralmas bo'lishi mumkinligini aniqladi (Boutrel va boshq., 2005; Xarris va boshq., 2005; Borgland va boshq., 2006), shuningdek, mustahkamlash quvvatini gemostatik tarzda hipotalamik tuzilmalar bilan belgilab olgan tabiiy oziq-ovqat mukofotlari (Hoebel, 1969; Rolls va boshq., 1980; Fulton va boshq., 2000; Thorpe va boshq., 2005).

Exogenous hcrt / orx oziq-ovqat va oziq-ovqat qidirishniKotz, 2006), hrrt / orx ning intraxipotamal infuziyasi erkak jinsida jinsiy xatti-harakatni osonlashtiradi (Gulia va boshqalar, 2003). Klinik tasavvurlar asosida, bunda oziqlantirish yoki erkakning nusxa ko'chirish xatti-harakatlari hcrt / orx neyronlarni (masalan, hrrt / orx neyronlari) aniqlanganidan so'ng, lateral gipotalamik hududdagi (LHA)Vaughan va Fisher, 1962; Caggiula va Hoebel, 1966; Swanson va boshq., 2005), biz kopratsiya davrida hcrt / orx neyronlarning faollashuvi va orexin-1 retseptorlari (OX₁) blokadasi. Shuningdek, hcrt / orx tizimining kokteyl va gormonlarni almashtirish ta'sirini markaziy hcrt / orx tarkibida va hcrt / orx va steroid gormon retseptorlari uchun er-xotin immunolabeling ta'siri bilan o'lchab, nevroendokrinni reglamentga kiritdik. Va nihoyat, mesolimbic DA tizimining hcrt / orx tomonidan faollashtirilishi mumkinligini baholadi ning Vivo jonli va hcrt / orx kirishlarini olgan VTA'dagi DA neyronlari kopulatsiyani vaqtida Fos immunoreaktivligini (ir) ko'paytiradimi?

Materiallar va usullari

Fos immunohistokimyosi, xulq-atvori va hujayra hisoblagichlari.

Uzun-Evans kalamushlari (Harlan, Indianapolis, IN) jinsiy jihatdan tajribali erkaklar (~ 325 g) Milliy Sog'liqni saqlash institutlari Laboratoriya hayvonlarini saqlash va ulardan foydalanish bo'yicha qo'llanmava barcha protseduralar universitetlarning Hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish bo'yicha institutsional qo'mitalari tomonidan tasdiqlangan. Sinovdan bir hafta oldin, barcha hayvonlarga estradiol benzoat (1 mg, sc) va progesterondan 10 soat o'tgach (48 mg, sc; estrusga olib kelingan ovariektomizatsiyalangan ayol bilan kuniga to'rt soat davomida jinsiy tajriba o'tkazishga ruxsat berildi; 400 soat oldin berilgan sinov; Sigma, Sent-Luis, MO). Barcha tajribalarda xulq-atvorni sinash hayvonlarning odatdagi tungi davriga 4 soat davomida 2 Vt quvvatga ega bo'lgan qizil akkor lampochkaning nurlari ostida uy qafasida o'tkazildi. Kopulyatsiya tajribalari uchun bir guruh (n = 6) erkaklarga o'z uy qafasida estrus urg'ochi bilan bitta zaryadga qadar ko'payish uchun ruxsat berildi, so'ngra ayol olib tashlandi. Barcha hayvonlar deyarli darhol o'rnatilgan va bezovtalanmagan <4 min. Ushbu guruh uchun o'rtacha bo'shatish kechikishi 632.6 ± 169.64 s (o'rtacha ± SEM; n = 6). Nazorat guruhi (n = 6) faollik darajasini boshqarish uchun ishlatilgan. Ushbu hayvonlar 15 daqiqa davomida uyg'oq va faol ekanliklarini tekshirish uchun vizual ravishda kuzatildi, bu eksperimental guruhning kopulyatsiyani sinash davri davomiyligiga to'g'ri keldi. Ushbu 15 minut boshida va oxirida qafas qopqoqlari ochildi va yopildi, ammo aks holda hayvonlar bezovta qilinmadi. Ushbu davrda tinch bo'lgan nazorat hayvonlari ishlatilmadi. Hayvonlar, agar ular yon tomonida yoki boshi pastga qarab turgandek tuyulsa (tinchlangan) Espana va boshq., 2003). Hayvonlarga natriy pentobarbital (100 mg / kg) bilan chuqur tashvishga solingan va PBS ichida 0.1 m PBS, pH 7.4 va 4% paraformaldehid bilan perfuz qilingan. Braunlar 20% sukroz-PBSda kriyoprotektsiya qilingan va hipotalamik hcrt / orx hujayralari populyatsiyasining atrofidan har bir boshqa 40 mm kriostat qismi (har bir hayvon uchun 30) prepro-hcrt / orx (immuno-hcrt / orx) uchun (1: 100; Millipore1 ", 10,000'-diaminobenzidin (DAB) va nikel-kuchaygan DAB bilan Fos (3: 3; EMD Biosciences, San-Diego, KA) va bundan oldin tasvirlangan immunohistokimyoviy jarayonlarEspana va boshq., 2003; Sato va boshqalar, 2005). Hujayra hisoblagichlari bir Olympus (Tokio, Yaponiya) mikroskopi va kamerani bir bo'lakda izchil rostrocaudal darajasida (masalan, Anjir. 1B,C) (2.45 mm orqa tomondan bregma) (Swanson, 2004). Har bir yarim sharda ikkita 470 × 630mm hisoblash maydoniga tushgan hujayralar tekshiruvchi ko'r bilan eksperimental sharoitlarga asoslangan raqamli tasvirni tahlil qilish dasturi (Image-Pro Plus, Media Cybernetics, Silver Spring, MD) yordamida etiketlandi. Ikkala yarim sharlarda ham lateral hisoblash joylari figuralarni o'zlarining medial chegarasi sifatida ishlatgan. Meditsina hisoblash maydonchalari fojialarga o'zlarining lateral chegarasi sifatida ishlatilgan. Fos-faqat, hcrt / orx-faqat va hcrt / orx va Fos-ir bilan ikkita belgili xujayralar soni qayd etildi.

 

Ko'rinishni kengaytirish: 

• Ushbu sahifada
• Yangi oynada
• PowerPoint Slide sifatida yuklab olish

Shakl 1. 

Kopratsiya paytida hcrt / orx neyronlarda Fos immunoreaktivligini oshirdi. A, Hcrt / orx neyron (o'ngda) ko'rsatiladi. O'lcham paneli, 25 μm. B, O'ng tomondagi hisoblash maydonidan vaktsinatsiyalanmagan nazorat ostida erkaklardagi vakillik mikrografisi. O'lchamli satr A), 200 μm. C, Erkaklarga qarashli mikroskop. O'lcham paneli, 200 μm. Oklar fos-irni ko'rsatadigan hcrt / orx neyronlarni ko'rsatadi; yulduzlar hcrt / orx xujayrasidagi Fos-ir yadrolarini ko'rsatadi; fx, forniks.

Kastryalash tajribalari va immunoblotlanish.

Kattalar erkak (tajribalarning boshida ~ NNUMX g). Uzoq-Evans kalamushlarni behushlik bilan (325 mg / kg ketamin HCl va 75 mg / kg xylazine HCl, ip) va kastrit qilindi. Hayvonlarga behushlik va perfuziyadan oldin jarrohlikdan so'ng 10, 7 yoki 14 d hayvonlarga ruxsat berildi va ularning miyasiga prepro-hcrt / orx uchun immunodabeledildi (barcha guruhlar, n = 5). Ushbu hayvonlarni xuddi behushlik ostida qorin bo'shlig'ini kesib olgan sham-n = 5). Shams 28 d da o'ldirilgan. Hujayra hisoblagichlari pastki kattalashtirishda yuqorida ko'rsatilgan koronal tekislikda bajarilgan.

Alohida tajribada 28 d castrates (n = 5) va soxta tekshiruvlar (n = 5) natriy pentobarbital (100 mg / kg) bilan chuqur behushlik qilindi va ularning miyalari olib tashlandi va quruq muz bilan sovutilgan 2-metilbutanda tezda muzlatildi. Keyin muzlatilgan gipotalamiya ikkita koronal kesik bilan to'sib qo'yildi, ulardan biri medial preoptik maydon (mPOA) orqali oldingi komissuraning dekussiyasigacha rostral, ikkinchisi esa uchinchi qorinchaning gipotalamus va uning bo'linishiga kaudal bo'lgan orqa hipotalamus yadrosi orqali. sut bezlari. Bloklar keyinchalik ikkala miya pedunkulasining medial uchida va uchinchi qorinchaning gipotalamus chuqurchasining dorsal uchida gorizontal kesim bilan ikkita sagittal kesik bilan kesilgan. Keyin to'qimalar bloklari sonikatsiya bilan bir hil holga keltirildi, protein proteaz inhibitörleri (Roche Complete Mini proteaz aralashmasi; Roche Diagnostics, Indianapolis, IN) bilan modifikatsiyalangan radioimmunoprecipitatsiya tamponiga, pH 8.0 ga chiqarildi va ekstraktlar santrifüjdan so'ng alikotu qilindi. Har bir predmetdan olingan ekstraktlar uchun umumiy protein konsentratsiyasini aniqlagandan so'ng, har bir hayvondan 40 mkg oqsil 15% SDS-PAGE gelining alohida quduqlariga yuklandi. Laemmli usuli bo'yicha elektroforetik ajratish, poliviniliden difloridli membranalarga (Bio-Rad, Gerkules, CA) o'tish va immunolabellash amalga oshirildi (Klivlend va boshq., 19771: 1000: oldingi anti-prepro-hcrt / orx antikorining 1 va keyinchalik 2000: 1 anti-b-aktin (Sigma) va 5000: 5 echki quyonlarga qarshi IgG (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA ) Tris-tamponli eritmadagi 40% chang sutda. Proteinli choklar kimyoviy birikmalar to'plamini (ECL; GE Healthcare, Piscataway, NJ) va Kodak (Rochester, NY) BioMax filmlari orqali namoyish etildi. Filmlar XNUMX s va raqamli skanerdan o'tkazildi va optik zichliklari ochiq bo'lgan ImageJ dasturidan foydalanib o'lchandi. Har bir hayvon uchun b-aktin yukining nazorati foiziga hcrt / orx uchun optik zichlik qiymatlari aniqlandi va statistik tahlil qilindi.

Uchinchi tajribada, yuqorida ta'rif etilganidek, erkak sichqonlarga sham operatsiyasin = 3) yoki kastratlangan va 28 d uchun dihidrotestosteron (500 mg, sc; n = 4), estradiol benzoat (20 ig, sc; n = 3) yoki yog 'transport vositasi (0.1 mL; n = 3). Har ikki gormon Sigma'dan sotib olingan. Gastrogut dozalari kastritalarda koplanishni davom ettirish uchun avvalgi tadqiqotlar bo'yicha qobiliyatlari uchun tanlangan (Putnam va boshq., 2005). Operatsiyadan keyingi 28-kuni hayvonlarni o'ldirishdi va ularning gipotalamalari yuqorida aytib o'tilgan G'arbiy immunoblotning prepro-hcrt / orx tarkibini o'lchash uchun bloklandi.

Steroid gormon retseptorlari va hcrt / orx ikki tomonlama immunohistokimyo.

Sog'lom, jinsiy ozuqadan bo'lgan kattalar erkak (LXA) ning uzun-Evans kalamushlarining LHA dan olingan miya qismlari androgen retseptorlari (AR) uchun immunodalandi (350: 1; n = 6; Santa Cruz biotexnologiyasi) yoki estrogen retseptorlari (ERa) (1: 2500; n = 9; Santa Cruz biotexnologiyasi) nikel kuchaygan DAB yordamida. Keyinchalik, AR-etiketli bo'limlar prepro-hcrt / orx (yuqorida ko'rsatilgan) uchun er-xotin etiketlidir va ERa-etiketli bo'limlar prepro-hcrt / orx (n = 5). O'rnatishdan so'ng, atlasda LHA ning to'rtta koronali qatlamlaridan biriga mos keladigan bo'limlar Swanson (2004) mikroskop ostida qo'l kamerasi lucida biriktirgich yordamida chizilgan va har bir bo'limda ikki va bitta etiketli xujayralar etiketlangan. Tasvirlar raqamli skanerdan o'tkazildi va Adobe (San-Xose, KA) Illustrator yordamida atlaslar sathiga qo'shildi va har bir hujayra populyatsiyasi atlas tasvirlariSwanson, 2004). ERa-plyus-hcrt / orx-etiketli bo'linmalarda ikkita va bitta belgili hcrt / orx neyronlari soni hisobga olingan.

Farmakologiya va nusxa ko'chirish xatti.

Katta yoshdagi erkak (tajribalarning boshida ~ NNXX g) Uzun-Evans kalamushlari (n = 9) xatti-harakatni tekshirishdan oldin bir hafta davomida jinsiy qabul qiluvchi ayol bilan to'rtta 1 soatlik jinsiy tajriba mashg'ulotlari o'tkazildi. Yakuniy testning dastlabki 30 daqiqasida kamida bir marta zaryadga chiqa olmagan hayvonlar tajribadan chetlashtirildi. Tajriba mashg'ulotlari va xulq-atvor sinovlari hayvonning tungi vaqtiga 40 soat davomida 2 Vt qizil cho'g'lanma nur ostida o'tkazildi. Kopulyatsion xatti-harakatlar testlari erkakning uy qafasida o'tkazildi va davomiyligi 30 min. Erkaklarning kopulyatsion xatti-harakatlarining o'ziga xos xususiyatlari (ya'ni, o'rnatish, kirish va bo'shatish) kuzatuvchi tomonidan ko'r-ko'rona eksperimental muolajalar yordamida har bir xulq-atvor hodisasi uchun chastota va kechikish ma'lumotlarini yozib olgan kompyuterning maxsus dasturiy ta'minotidan foydalangan. Xulq-atvorni sinashdan XNUMX daqiqa oldin hayvonlarga OX ukol qilingan₁ antagonist N- (2-metil-6-benzoksazolil) -N "-1,5-naftiridin-4-il karbamid (SB 334867) (20 mg / kg, ip) yoki DMSO vositasi (0.5 ml / kg). Tajriba sub'ektlararo muvozanatlashtirilgan dizayni asosida amalga oshirildi, birinchi sinovda beshta hayvonlar, qolgan to'rttasi esa transport vositasini qabul qilishdi. 48 soat davomida giyohvand moddalarni yuvish davri o'tgach, birinchi kuni dori bilan davolangan hayvonlarga transport vositasi berildi va aksincha.

Elektrofizyologiya.

Voyaga etmagan erkak Sprague Dawley kalamushlari (~ NNUMX g) xloral hidratlar (350 mg / kg, indüksiyon uchun ip), 400 mg · kg^-1 · H^-1 keyinchalik parvarish qilish uchun) va stereotaksik asbobga o'rnatiladi. VTA ni o'z ichiga oluvchi miya yarimi mintaqasida bosh suyagi va dura o'chirildi. Har bir hayvon oldindan sun'iy CSF (aCSF) infuzionini oldi [0.5 ml / 5 min; lambda, anteroposterior, + 2.6 yoki + 3.4 mm dan; mediolateral, ± 0.8 mm; dorsoventral, -7.0 mm; stereotaksik atlaska ko'ra, tekis bosh suyagi (Paxinos va Watson, 1998)], VTA ning bir tomonida 32 ga Hamilton ukol (0.5 ml / 5 min) bilan. Keyinroq, 10 daqiqadan keyin, VTA ning ipsilateral tomonida yo'l-yo'riqlar uchun tanlab olish jarayoni amalga oshirildi. Keyinchalik hayvonlar, hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol, n = 4; 1.4 nmol, n = 5; yoki 140 nmol, n = 6 aCSFda eritilgan; Amerikalik peptid, Sunnyvale, KA) qarshi tarafdagi VTA ichiga joylashtirildi. In'ektsiyalar yarmida va oldingi yoki orqada joylashgan inyeksiya joyida muvozanatlashdi. Ekstrakelulyar yagona birlikli yozuvlar 1.5 m NaCl bilan to'ldirilgan va bir qismli singan shkafi mikropipetlar (2 mm diametri olishdan oldin, World Precision Instruments, Sarasota, FL) bilan amalga oshirildi. 2da elektrod empedansı 4 dan 135 MŌ gacha o'zgargan. ULARNING Neyronlari ko'pincha taniqli boshlang'ich segment / somatodendritik (IS / SD) uzilish, keng ko'lamdagi potentsial davomiyligi, sekin otish tezligi va tartibsiz bir burchakka yoki portlash chizish naqshiga ega bo'lgan ijobiy-salbiy hujayra-hujayra ta'sir potentsiallari bilan aniqlandi (Greys va Bunney, 1983). Kuzatuv elektrodi VTA (2.8-3.4 mm oldida lambda, 0.6-1.0 mm lateraldan o'rta tasmaga, miya yuzasidan 6.5-8.5 mm) tizimli ravishda stereotaksik ravishda aniqlangan blok orqali o'tkazildi olti marta. Har bir aniqlangan DA neyroni 2-5 min uchun On-layn rejimida Grafik ma'lumotlar yig'ish tizimidan (AD asboblari, Mountain View, KA). VTA DA neyron populyatsiyasi faolligi indekslari har bir hayvondan (elektrokardi boshiga hujayradan) har bir elektrod yo'lida duch kelgan o'z-o'zidan faol DA neyronlarning o'rtacha soni edi. DA neyronlarning o'rtacha otishni o'rganish darajasi har bir guruh ichidagi barcha hayvonlardan olingan barcha DA neyronlardan aniqlandi.

140 nmol hcrt / orx guruhida depolarizatsiya inaktivatsiyasini sinash uchun apomorfin HCl (20 mkg / kg, ip; n = 4; Sigma) post-hrrt-1 / orx-A namunasi tugagandan so'ng darhol kiritildi. Apomorfin in'ektsiyasidan o'n daqiqa o'tgach, oldingi hcrt-1 / orx-Ani olgan VTA tomonida oltita qo'shimcha elektrod izlari aniqlandi.

Behavior, uch o'lchovli immunohistokimya va hujayra hisoblashlari.

Erkaklar (~ 300 g) erkaklarga Long-Evans kalamushlariga yuqorida aytib o'tilganidek, to'rtta 1 jinsiy jinsiy tajriba seansi berildi. Oldindan (1 soat) behushlik, perfüzyon va immuno-etiketleme uchun to'qimalarni tayyorlash, hayvonlar (n = 6) bitta zaryadga moslashishga ruxsat berildi. Yuqorida aytib o'tilganidek, hayvonlarning deyarli zudlik bilan o'rnatilgani va intromitatsiya qilinganligi va bu guruh uchun bo'shashish kechiktirilishi 588.50 ± 85.03 s (o'rtacha ± SEM) edi. Eksperimental guruh jinsiy jihatdan tajribaga ega bo'lgan tekshiruvlar bilan taqqoslandi.n = 6). Yuqorida aytib o'tilganidek, sinov 2 soat davomida hayvonning odatdagi tungi davrida qizil cho'g'lanma nur ostida sodir bo'ldi. Hayvonlar o'ldirilgandan, fiksatsiya qilinganidan va sovuq mikrotomadan bo'linib bo'lgandan so'ng (yuqoridagi kabi), immunohistokimyo uchun VTA ning to'rtta rostrokadaal darajasini ifodalovchi har bir hayvondan to'rtta qism tanlab olindi. Mavzular soni uchun (n), har bir darajada hujayra hisoblash uchun ishlatiladi, qarang 4 stol. Bo'limlar yuqoridagi kabi DAB bilan Fos (1: 7500; Santa Cruz Biotexnologiya) uchun etiketlandi. Keyin bo'limlar prepro-hcrt / orx (1: 500) va tirozin gidroksilaza (TH; 1: 2000; Milliporesiyanin-konjuge floresan ikkilamchi antikorlari bilan (1: 200, Cy3 va Cy2, Jekson ImmunoResearch, West Grove, PA). Hujayra hisoblagichlari a (40 ×) kengaytmasi ostida a Leika (Nusslok, Germaniya) DM 4000B mikroskop yordamida Stereo tergovchisi dasturiy ta'minot (MBF Bioscience, Williston, VT) eksperiment markazining davolanish sharoitlari tufayli ko'r. Stereo tergovchisi dastur VTA ning har bir darajasidagi barcha DA kameralarini o'z ichiga olgan hisoblash maydonini aniqlash uchun ishlatilgan. VTA ning 4 ta rostrokudal darajasining har birida bitta fokal uzunlikda beshta hujayra turi belgilandi: TH-musbat neyronlar, Fos-irni ko'rsatadigan TH-musbat neyronlar, somatik plazmalemaga to'g'ridan to'g'ri ko'rsatadigan TH-musbat neyronlar hcrt / orx lifleri, Fos-ir va hcrt / orx ilovalarini ko'rsatadigan TH-musbat neyronlar, va nihoyat, TH neyronlarida emas, faqat Fos-musbat yadrolari.

Ma'lumotlarni tahlil qilish.

Fos eksperimentida hujayralar sonini aniqlash uchun guruhlar va birinchi bunday tajribadan Western blotlarning optik zichlik o'lchovlari mustaqil namunalar bilan taqqoslandi. t sinov. Taqdim etilgan namunalar t test OX dan mablag 'bilan amalga oshirildi₁ antagonistik xulq-tajriba. Kastrada hujayralar soni, uch o'lchovli yorliqli tajribalar va o'rtacha otishni o'rganish tezligi va peritoneal hujayra o'lchovlari ANOVAga ta'sir ko'rsatdi.

natijalar

Kastrasyon hcrt / orx immunoreaktivitesini va gipotalamus oqsilini pasaytiradi

Soxta tekshiruvlar bilan solishtirilganda, hcrt / orx-ir neuronlar soni kastratsiya qilinganidan keyin 28 d hujayra sonining sezilarli kamayishiga olib keldi (Anjir. 2A) (F_(3,16) = 7.60; p <0.005). Bu kuzatilgan populyatsiyada hujayralar sonining 31.8% kamayganligini anglatadi. Post hoc (Tukey) tekshiruvi sham bilan ishlaydigan kalamushlar yoki 7 yoki 14 gastrotsitlari orasida sezilarli farq yo'qligini aniqladi. Hipotalamik prepro-hcrt / orx ning keyingi g'arbiy immunoblot tahlillari 28 dastratlaridagi hcrt / orx bantlarining o'rtacha optik zichligini sezilarli darajada pasaygan.Anjir. 2B) (t₍₈₎ = 2.99; p <0.05.).

 

Ko'rinishni kengaytirish: 

• Ushbu sahifada
• Yangi oynada
• PowerPoint Slide sifatida yuklab olish

Shakl 2. 

Kastratsiya erkaklar gipotalamusida hcrt / orx-irni pasaytiradi. A, Bir yarim sharda hcrt / orx-etiketli neyronlarning vakillik mikrograflari kastratadan keyin 28 d bilan hujayra sonida sezilarli pasayishlarni ko'rsatadi. Inset qiymatlari har ikkala yarmi uchun o'rtacha hujayra hisoblagichlari ± SEM; **p <0.005. Shkalasi bar, 200 mikron; fx, fornix. B, G'arbiy immunoblotslar 28 d kastratlarining hipotalamik prepro-hcrt / orxlarida sezilarli pasayishlarni ko'rsatmoqda. Har bir guruh ikkala guruhdagi bitta hayvonning signalini ifodalaydi. Qiymatlar b-aktinga nisbatan hcrt / orx uchun o'rtacha ± SEM optik zichlik (od) birliklari; *p <0.05. C, 28 d castratalarida prepro-hcrt / orx uchun immunoblots E ko'rsatiladi₂ yog 'bilan ishlov beriladigan nazoratlarga nisbatan shamslarga o'xshash hipotalamik hcrt / orx tarkibini saqlab qolish. Xuddi shu kichik harfli guruhlar sezilarli darajada farq qilmaydi (p <0.05).

ERa hcrt / orx bilan birgalikda va hcrt / orx neyronlarning anatomik jihatdan alohida populyatsiyasida

Yadroli AR asosiy hcrt / orx neyron populyatsiyasidan ventralal tarzda chiqarilib, mediatrik tarzda yoy yadrosidan optik yo'lga tarqaldi. Hech qanday holatda bir xil neyronda yadroviy AR va hcrt / orx topilmadi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). ERa gipotalamusning ventral darajasida shunga o'xshash taqsimot modelini ko'rsatgan bo'lsa-da, ventromedial yadroda ERa yorlig'i kengroq edi. Ko'proq dorsal ravishda ERa yorlig'i zona incertta ostidagi ichki kapsuladan dorsomedial gipotalamusga (DMH) medialgacha cho'zilgan toraygan hujayralar tasmalarida topilgan. ERa yorlig'i kamdan-kam hollarda hcrt / orx neyronlarida topilgan (so'ralgan aholining <1%). ERa hcrt / orx bilan kokalizatsiyalashganini ko'rganida, u odatda DMH ichidagi neyronlarda yoki shunchaki rostralda (Anjir. 3). Shu sababli, hipotalamustagi ERAni ifodalangan juda kam sonli hcrt / orx neyronlari bo'lsa, DMH ichida yoki uning yonida joylashganlarning katta nisbati (~ 65%)Anjir. 3).

 

Ko'rinishni kengaytirish: 

• Ushbu sahifada
• Yangi oynada
• PowerPoint Slide sifatida yuklab olish

Shakl 3. 

ERa hcrt / orx bilan birgalikda ishlaydi. ERa yadrolari yopiq doiralar bilan ifodalanadi, hcrt / orx neyronlari ochiq doiralar bilan ifodalanadi va er-xotin yoritilgan ERA plyus hcrt / orx xujayralari yulduzlar bilan ifodalanadi. Raqamlar, bregma uchun kaudal bo'lgan millimetrga teng. AHN, oldingi gipotalamik yadro; fx, fornix; ot, optik trakt; PVN, paraventrikulyar yadro; VMH, ventromedial gipotalamus; 3v, uchinchi qorincha.

Hcrt-1 / orx-A VTA DA neyronlarning otish tezligi va populyatsion faolligini oshiradi va depolylizatsiyani inaktivatsiyalashga sabab bo'ladi

Hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol) ning eng kam dozasi o'rtacha VTA DA neyronlarning otish tezligi avtomobilga ishlov berish nazorati bilan taqqoslaganda (Anjir. 4B,C) (parallel taqqoslash; F_(1,18) = 13.83, p <0.01; aralash 2 × 3 ANOVA dan keyin, F_(1,10) = 13.67, p <0.005), ammo hcrt-1 / orx-A boshqa dozalari bu ta'sirga ega emas edi. Ushbu doz 2 × 3 ANOVA da aniqlangan hcrt / orx ning otishni o'rganish tezligiga muhim ta'siriga javobgar ko'rinadi. A post hoc (Tukey) testi dozada ASF bilan davolash qilingan nazorat guruhlari orasida nisbatlarda sezilarli farq yo'qligini aniqladi. Hcrt-1.4 / orx-A ning 1 nmol dozu VTA DA neyron populyatsiyasi faolligini sezilarli darajada oshirdi (har bir elektrod yo'lida aniqlangan o'z-o'zidan faol neyronlar soniAnjir. 4D) (parallel taqqoslash, F_(1,24) = 6.42, p <0.05; 2 × 3 aralash ANOVAda sezilarli shovqindan so'ng, F_(2,10) = 16.71, p <.001). Hcrt-1 / orx-A ning eng yuqori dozasi (140 nmol) DA neyronlarining populyatsion faolligini sezilarli darajada pasaytirdi (har bir yo'l uchun hujayralar) (Anjir. 4D) (140 nmol dozasida bir tomonlama takroriy ANOVA o'lchovlari, F_(2,6) = 12.20; p <0.01). Ushbu pasayish tizimli apomorfin in'ektsiyasi bilan tiklandi (Tukey's) post hoc sinov).

 

Ko'rinishni kengaytirish: 

• Ushbu sahifada
• Yangi oynada
• PowerPoint Slide sifatida yuklab olish

Shakl 4. 

Hcrt / orx VTA DA neyronal faoliyatni tartibga soladi ning Vivo jonli. A, Odatdagi VTA DA neyronining to'lqin shakli, xarakterli keng harakat potentsiali va IS / SD uzilishlari. B, Tepa, otishni o'rganish nisbati va odatdagi portlashni ko'rsatadigan bir xil transport vositasi bilan ishlangan neyron naqsh; pastki qismida, 0.014 nmol hcrt 1 / orx A ning mahalliy infuzionidan keyin tez uchadigan neyronn = 4). C, D, Vca DA neyronlarning otish tezligi va populyatsion faolligi bo'yicha mahalliy hcrt-1 / orx-A ning doz munosabatlari. Hcrt-1 / orx-A (1.4 nmol; n = 5) aholining faolligini oshiradi. 140 nmol hcrt 1 / orx A (n = 4) tizimli apomorfin (20 μg / kg) bilan almashtirilgan. Har bir novda ichidagi raqamlar saqlangan neuronlar sonini ko'rsatadi. Ko'rsatilgan - SEM. *p <0.05; **p <0.01.

muhokama

Ko'pgina bemorlar keyinchalik LHAda hcrt / orx neyronlaridagi Fos-irning ko'payishi, bu hujayralarni faollashishi erkakning reproduktiv xatti-harakatigaMorgan va Curran, 1991). Ushbu ma'lumotlar oldingi 2-deoksigluzoz tadqiqotlari bilan uyg'unlashib, estroziy ayol odorsidan ta'sirlanganidan keyin LHAda metabolik faollikni oshirdi (Orsini va boshqalar, 1985). Ushbu ta'sir mPOA kabi hcrt / orx neyron terminali hududlarida rivojlangan hcrt / orx uzatilishini aks ettirishi mumkin, bu erda erkak nusxa ko'chirish xatti-harakatini engillashtirish uchun hcrt / orx ko'rsatildiGulia va boshqalar, 2003). Hcrt / orx neyronlarida jinsiy aloqada bo'lgan Fos induksiyasi hcrt / orx neyronlari tabiiy mustahkamlovchilarga sezgir degan tushunchaga mos keladi. Yaqinda o'tkazilgan bir tadqiqot shuni ko'rsatdiki, kalamushlarning hcrt / orx neyronlarida oziq-ovqat mukofotini kutish uchun shartli ravishda Fos-ir ko'paygan va Fos-irdagi bu o'sish shartli joy afzalligi paradigmasida hayvonlarning afzallik ballari bilan bog'liq (Xarris va boshq., 2005). Hcrt / orx neyronlarning faollashuvi mukofot bilan bog'liq bo'lgan hodisa bo'lishi mumkin, chunki yuqoridagi tadqiqotda yangi ob'ektni rag'batlantirishga duchor bo'lgan hayvonlarning Fos-ir hcrt / orx hujayralarida mustahkam o'sishning yo'qligi ko'rsatildi. Ushbu mualliflar biz xabar beradigan ma'lumotlarga mos keladigan bazaviy (15%), yangilangan (18%) va oziq-ovqat bilan ta'minlangan (50%) Fos-irni ifodalovchi hcrt / orx neyronlarning foizlari haqida hisobot beradi (12% bazal vs 40 % koplamadan iborat). Ushbu kuzatishlar hcrt / orx neyronlarning oziq-ovqat va jinsiy aloqa kabi tabiiy foyda bilan faollashishini ko'rsatadi.

Bu erda tasvirlangan hcrt / orx ning estrogenik regulyatsiyasi erkaklar jinsiy xatti-harakatlarining yuzaga kelishi mumkin bo'lgan hipokretinerjik tekshiruvi uchun qo'shimcha dalillar keltirib chiqaradi. Shuni ta'kidlash kerakki, bu erda hcrt / orx yo'qotish vaqtining klassik xulq-atvor ma'lumotlari bilan mos kelishi, erkak jinsiy xulqning kastratsiya qilinganidan keyin bir necha haftaga pasayishi va bundan tashqari, u E₂ xatti-harakatni tiklash uchun zarur bo'lgan DHT o'rnigaHull va boshq., 2006). Keyinchalik eksperiment o'tkazmasdan, agar bizda yo'q bo'lsa, hcrt / orx ning doimiy mavjudligi asosida mexanizmlar haqida spekulyatsiya qilishimiz mumkin.₂. Eng oddiy tushuntirish, hcrt / orx darajasining kamayishi uchun kechikish muddati transmitterning vesikulyar do'konlarida osonlik bilan miqdoriy kamayib ketishiga qarab kechikishni aks ettirishi mumkin. Quyida muhokama qilinganidek, hcrt / orx neyronlaridagi ER ning yo'qligi bu retseptorlarni o'z ichiga olgan nöronlardan olingan ma'lumotlar bo'yicha hcrt / orx ifodasini o'zgartirishni nazarda tutadi. Neyropeptid sintezi (Enyeart va uning hamkorlari, 1987), harakatlanish (Shakiryanova va boshq., 2005), va faoliyatga qarab faoliyatga bog'liq bo'lgan hodisalar (Fulop va uning hamkorlari, 2005), hcrt / orx nöronal eksitabiliteliğinde biron-bir postcastratasyon kamayadi (Smit va boshq., 2002) bu jarayonlarga salbiy ta'sir ko'rsatishi mumkin, shuning uchun peptidning kinetikasini sekinlashtiradi, shuning uchun sintezning past darajalari bir muncha vaqtgacha aniq bo'lmasligi mumkin. Har qanday mexanizm yordamida, steroidning ta'siri peptidning bazal darajasini saqlab turish uchun mas'ul bo'lgan kompleks kaskadning birinchi elementidir.

Hcrt / orx neyronlari energiya muvozanati bilan bog'liq hümoral faktörlere javob sifatida oziq-ovqat iste'molini tartibga soluvchi kabi ko'rinadiOlszewski va boshq., 2003; Burdakov va boshq., 2006), hcrt / orx neyronlari hormonal muhitga nisbatan sezgir bo'lib ko'rinadi va reproduktiv harakatlarga o'xshash tarzda yordam berishi mumkin. Bu erda keltirilgan ma'lumotlar bazal hcrt / orx ifodasini E tomonidan saqlab qolinishini ko'rsatadi₂. Gcrt / orx ning to'liq qo'shimchasini ifodalovchi gonadal buzilmagan hayvonlarda, bu transmitter erkak jinsiy xulq-atvor va mukofot uchun muhim bo'lgan tuzilmalarni qayta ishlashni osonlashtiradi. Hcrt / orx neyronlari mPOA, stria terminalis (BNST) yotoqli yadrosi va VTA (masalan,Peyron va boshq., 1998; Sakurai va boshq., 2005), erkak jinsiy xulq-atvorini ifodalash uchun muhimdir (o'rganish uchun, qarang Hull va boshq., 2006). Kastratsiyadan keyin hcrt / orx ning kamayishi ushbu tuzilmalar uchun muhim bo'lgan manba manbaini kamaytirishga olib keladi, bu esa xatti-harakatlarga putur etkazadi.

ERning faollashuvi bazal hcrt / orx ifodasini saqlab turish usuli qo'shimcha ishni kutadi; ammo ERA-ni ifodalovchi miya hududlaridan kelgan afferentslar LHA (Simerly va boshq., 1990; Yoshida va boshq., 2006), xususan, ba'zi bir eksitatory proektsiyalarga ega bo'lgan tuzilmalar (masalan, BNST va mPOA (Georges va Aston-Jones, 2002; Henny va Jones, 2006)]. Biz hcrt / orx bilan ARning hech qanday kolokalizatsiyasini bildirmadik va bir nechta hcrt / orx neyronlari ERA-immunopozitik bo'lishiga qaramasdan, bu hujayralar kastratsiyaning aniq ta'sirini tushuntirish uchun etarlicha ko'p emas va ularning kastratsiyadan keyin hcrt / orx tarkibi (Shakl. 2A, 3). Bundan tashqari, ER-yadroli va hcrt / orx neyronlari ko'pincha juxtaposed bo'lib, qo'shni ER-o'z ichiga olgan hujayralar tomonidan hcrt / orx neyronal va gen ekspresivligi faoliyatini mahalliy tartibga solish imkoniyatini oshiradi. Bunday turdagi lokal elektron harakatining ahamiyati hcrt / orx tizimida (Li va boshq., 2002). Biroq, kerakli anatomik eksperimentlar, ERA o'z ichiga olgan hujayralar hcrt / orx neyronlari orqali eksitatori sinapslarni ko'rsatgunga qadar hcrt / orx gormoniga bog'liq, afferent-driven ekspluatatsiyasini taxmin qilish mumkin emas. Hcrt ifodasi diornally (Taheri va boshq., 2000), homiladorlik paytida (Kanenishi va boshq., 2004) va turli dietali manipulyatsiyaga (Cai va boshqalar, 1999; Griffond va boshq., 1999). Dinamikasini tartibga soluvchi molekulyar mexanizmlar hcrt ifodalash xarakterli emas, shuning uchun yadrodan membranaga yo'lni izlaydi va hcrt / orx ifodasini ta'sir qiladigan nomzod signalli molekulalarning nomini o'zgartirish qiyin.

Hcrt / orx signalizatsiya jinsi kabi mustahkamlovchi xatti-harakatlar bilan shug'ullanishi OX bilan davolanishdan so'ng jinsiy axloqsizlikka putur yetkazadigan ma'lumotlar bilan ham qo'llab-quvvatlanadi₁ antagonist SB 334867 (2 stol). Kokainni o'z-o'zini boshqarishning stressni keltirib chiqaradigan tiklanishini blokirovka qilish uchun ishlatiladiganlarga o'xshash dozada (Boutrel va boshq., 2005), SB 334867 introtsional kechikish va sezilarli darajada ejekulyatsiya sonini sezilarli darajada oshirib yubordi, shuning uchun hcrt / orx transkripsiyasini blokirovkalash estrous urg'ochining rag'batlantiruvchi xususiyatlariga ta'sir qilishi mumkin.

DA, mukofotlar, rag'batlantirish motivatsiyasi va adaptiv xatti-harakatlari uchun muhim nörotransmiterdir (Berridge va Robinson, 1998; Ikemoto va Pansepp, 1999; Hikmatli, 2004). Biz hcrt / orx ning VTA DA neyron faolligiga kuchli dozaga bog'liq eksitatori ta'siri kuzatildi. Ushbu topilma hcrt / orx ning mustahkamlashdagi rolini qo'llab-quvvatlaydi va mesolimbik DA tizimining mPOA tashqarisida joylashganligini ko'rsatadi, bu erda hcrt / orx proektsiyalari erkak jinsiy xulq-atvorini kuchaytiradi. Eng kam dozada sinovdan o'tkazilgan (0.014 nmol), hcrt / orx populyatsiyaning faolligini (hujayralar / iz) ta'sir qilmagan holda otishni o'rganish tezligini oshirdi (Anjir. 4C). O'rtacha dozada (1.4 nmol) DA neyronlarning populyatsion faollashuvi kuchayib, ilgari susaygan, hiperpolarizatsiyalangan neonlarning faollashtirilganligini ko'rsatdi (Anjir. 4D). Eng yuqori dozada (140 nmol) VTA DA neyronlarning populyatsion faolligi kamaydi. Qizig'i shundaki, VTA DA neyron populyatsiyasi faolligida hcrt / orx bilan indikatsiyalangan pasayish DA agonist apomorfinni (Anjir. 4D). Oddiy hayvonlarda apomorfin autoreseptorlarni faollashtirib, ularning otish tezligi va populyatsion faolligini pasaytirish orqali DA neyronlarini giperpolarizlaydi. Biroq, surunkali antipsikotikli davolanish yoki dori-darmonlar bilan takroriy davolanishdan so'ng apomorfin populyatsiyaning faolligini kamaytirishi mumkin (Grace va boshq., 1997; Shen va Choong, 2006). Apomorfinning otilib chiqadigan hujayralarni repolarizatsiya qilishni davom ettirish uchun yetarli darajada depolarizatsiya inaktivatsiyasini bekor qilish kerakligi aytiladi. Birgalikda, bu ma'lumotlar hcrt / orx ning VTA DA neuronlariga qarshi dozaga qarama-qarshi ta'sir ko'rsatadigan ta'sir ko'rsatadi. in vitro ish (Korotkova va boshq., 2003).

LHA dan VTA ga tushadigan yo'ldan tushayotgan yo'llarning ahamiyati bir qator eksperimentlardaBielajew va Shizgal, 1986; Shizgal, 1989; Siz va boshqalar, 2001). Ushbu ma'lumotlar, NAc DA'nun hipotalamal sifatida vositachilik qilgan motivasyonlu harakatlariPfaus va boshq., 1990; Wenkstern va boshq., 1993) yoki oziqlantirish (Hernandez va Hoebel, 1988; Rada va boshq., 2005), bu tushayotgan prognozlarga tayanishi mumkin. Bunday proektsiyalar hcrt / orx ni o'z ichiga oladi, bu hcrt / orx ning ichki VTA kiritilgandan so'ng NAc DA oqimining kuchayishi kuzatilgan eksperimentlarNarita va boshq., 2006). Gipotalamus ichida serotonin [5-gidroksitriptamin (5-HT)] LHA-da hcrt / orx neyronlarni kuchsizroqLi va boshq., 2002). Selektiv serotoninni qayta yuklash inhibitorlari yoki 5-HT ning o'zi, hcrt / orx-eksperiment hujayralarining asosiy populyatsiyasi yaqinida LHA-ga teskari dializ qilinadi, bazal va qizarishli NAc DA chiqarilishini kamaytiradi vaLorrain va boshq., 1997, 1999). Yuqorida keltirilgan ma'lumotlar asosida hcrt / orx neyronlarning hcrt / orx tomonidan faollashtirilishi va VTA DA neyronlari faolligini ko'rsatadigan bo'lsak, VTA ga tushib ketgan hcrt / orx proektsiyalari jinsga bog'liq NAc DA chiqarilishiga vositachilik qilishi mumkinligini ta'kidlaymiz. Bundan tashqari, ushbu prognozlarni intra-LHA 5-HT tomonidan taqiqlash 5-HT ning NAC DA ning ozod etilishi va jinsiy xatti-harakatlaridagi inhibitiv ta'sirini tushuntirishi mumkin.

Hcrt / orx-DA interaktivligi uchun anatomik substrat bizning TH-musbat VTA neuronlari hcrt / orx tizimi tomonidan innervatsiya qilinganligini va koplamadan (masalan,Anjir. 5, 4 stol). Bu ta'sir, ham xulq-atvori va mekansal o'ziga xosligini ko'rsatdi, chunki hcrt / orx-appenditsion TH neyronlarida Fos indüksiyani faqat hayvonlarni tashiyotgan hayvonlar oldingi VTAda aniqlandi. VKA hujayralari faqatgina hcrt / orx neyronlarning asosiy populyatsiyasi uchun kaudal bo'lib turganligi sababli bu faollashtirishning bu turi VTA ning ushbu qismida namoyon bo'ladigan narsa bo'lishi mumkin emas, chunki uning tushgan tolalari bu hududni miya chizig'idaPeyron va boshq., 1998).

 

Ko'rinishni kengaytirish: 

• Ushbu sahifada
• Yangi oynada
• PowerPoint Slide sifatida yuklab olish

Shakl 5. 

Kopratsiya hcrt / orx-appendix VTA DA neyronlari yordamida hosil bo'ladi. A, TH, hcrt / orx va FTA ning VTA etiketkasini ko'rsatuvchi mikrograflar. Oklar hcrt / orx ilovalari bilan Fos-musbat TH neyronlarini bildiradi; Yulduzlar ikkita belgili neyronlarni belgilanmagan holda belgilaydilar. O'lcham paneli, 45 μm. B, Fos-musbat TH neyronlarning detallari hcrt / orx butonlarining joylarini ko'rsatadigan strelkalar bilan. C, Qorin bo'shlig'i bo'limlari hisoblashda ishlatiladigan VTA ning rostrokudal darajasini ko'rsatmoqda (quyuq soyali). Har bir qismning chap qismidagi raqamlar bregma dan millimetrga teng. Yuqori o'ngdagi raqamlar o'rtacha darajadagi ± SEM hujayra zichlik darajasini ushbu darajada baholaydi. Ushbu qutidagi mikrograflar maydoni ko'rsatiladi A.

Ushbu ma'lumotlar gonadal steroidlarning motivatsion harakatlarga daxldor bo'lgan DA tizimlariga hipotalamal kirib ta'sir qilishi mumkin bo'lgan yangi yo'lni ko'rsatadi (Anjir. 6). Bundan tashqari, hcrt / orx tomonidan tartibga solingan xatti-harakatlar ro'yxatiga, jumladan xushchaqchaqlik, ingichka xulq-atvor va giyohvand moddalarni izlashga jinsiy munosabatda bo'lishadi.

 

Ko'rinishni kengaytirish: 

• Ushbu sahifada
• Yangi oynada
• PowerPoint Slide sifatida yuklab olish

Shakl 6. 

Hcrt / orxni gonadal steroidlar va VTA OA tomonidan hcrt / orx bilan tartibga solish uchun model. Aromataz tomonidan gonadal testosterondan sintezlangan estradiol BNST, mPOA va LHA da ERA o'z ichiga olgan neyronlarga ta'sir qiladi. Ushbu tuzilmalar hipertalamik hcrt / orx neyronlari uchun loyiha. Ushbu tuzilmalardan tashvishli proektsiyalar steroidga sezgir tarzda hcrt / orx neyronal va gen ekspresyon ta'siriga ta'sir qilishi mumkin. VKAga yuborilgan Hcrt / orx prognozlari erkak jinsiy xulq-atvori davrida o'rta diapazoni DA neyronal faolligini oshiradi. Ushbu ta'sir hrrt / orx faoliyatini inhibe qiluvchi, jinsiy xulq-atvorini buzadigan va NAc DA ning chiqarilishiga olib keluvchi 5-HT ning ichki LHA infuziyalari tomonidan bloklanishi mumkin.

Izohlar

• Aprelda qabul qilingan 21, 2006.
• Tahrir yanvar 23, 2007 bo'ldi.
• 8 fevral oyida qabul qilingan, 2007.

• Ushbu ish Amerika Qo'shma Shtatlari Davlat sog'liqni saqlash xizmati grantlari MH073314 (JWM), MH40826 va MH01714 (EMH) va AA12435 (R.-YS) tomonidan qo'llab-quvvatlandi. Doktor Samir Haj-Dahmanga o'zining foydali maslahatlari va doktor Zuoxin Vangga mikroskopik jihozlar uchun minnatdorchilik bildiramiz.

• Xat yozishni John Muschamp, Florida State University, Psixologiya bo'limi, Tallahassee, FL 32306-1270ga yuborish kerak. [elektron pochta bilan himoyalangan]

Manbalar

1. ↵
   1. Berrij KC,
   2. Robinson TE

   (1998) Dopaminning mukofotda qanday rol o'ynashi mumkin: hedonik ta'sir, mukofot olish yoki rag'batlantirish talablari? Brain Res Brain Qol Rev 28: 309-369.

   CrossRefMedlineGoogle Scholar
2. ↵
   1. Bielajew C,
   2. Shizgal P.

   (1986) Medial oldburchak to'plamini o'z-o'zini stimullashda tushuvchi elyaflarni ifodalovchi dalillar. J Neurosci 6: 919-929.

   mavhum
3. ↵
   1. Borgland SL,
   2. Taha SA,
   3. Sharti F,
   4. Maydonlar HL,
   5. Bonci A

   (2006) VTAdagi Orexin A kokainda sinaptik plastisitik va xulq-atvorni sezgirlash uchun juda muhimdir. Neyron 49: 589-601.

   CrossRefMedlineGoogle Scholar
4. ↵
   1. Boutrel B,
   2. Kenny PJ,
   3. Specio Yil,
   4. Martin-Fardon R,
   5. Marko A,
   6. Koob GF,
   7. da Lecea L

   (2005) Kokainni qidirish harakatlarida stressni keltirib chiqaradigan vositalarni davolashda gipokretinning ahamiyati. Proc Natl Acad Sci AQSh 102: 19168-19173.

   Xulosa / to'liq matn
5. ↵
   1. Burdakov D,
   2. Jensen LT,
   3. Aleksopulos H,
   4. Uilyams RH,
   5. Fearon IM,
   6. O'Kelly I,
   7. Gerasimenko O,
   8. Fugger L,
   9. Verkhratskiy A.

   (2006) Tandem-gözenekli K + kanali glyukoza bilan orexin neyronlarning inhibisyonuna vositachilik qiladi. Neyron 50: 711-722.

   CrossRefMedlineGoogle Scholar
6. ↵
   1. Caggiula AR,
   2. Hoebel B.G.

   (1966) posterior gipotalamusdagi "Kompilyatsiya-mukofot sayt". fan 153: 1284-1285.

   Xulosa / to'liq matn
7. ↵
   1. Cai XJ,
   2. Widdowson PS,
   3. Harrold J,
   4. Wilson S,
   5. Bukingem RE,
   6. Arch JR,
   7. Tadayyon M,
   8. Clapham JC,
   9. Wilding J,
   10. Uilyam G

   (1999) Hipotalamik oreksin ifodasi: qon glyukoza va oziqlantirish bilan modulyatsiya. diabet 48: 2132-2137.

   mavhum
8. ↵
   1. Klivlend DW,
   2. Fisher SG,
   3. Kirschner MW,
   4. Laemmli Buyuk Britaniya

   (1977) Natriy dodesil sulfatdagi cheklangan proteoliz bilan peptid xaritalash va jel elektroforez bilan tahlil qilish. J Biol Chem 252: 1102-1106.

   Xulosa / to'liq matn
9. ↵
   1. da Lecea L,
   2. Kilduff TS,
   3. Peyron C,
   4. Gao X,
   5. Foye pe,
   6. Danielson pe,
   7. Fukuhara S,
   8. Battenberg EL,
   9. Gautvik VT,
   10. Bartlett FS II.,
   11. Frankel WN,
   12. Van dan Pol AN,
   13. Bloom FE,
   14. Gautvik KM,
   15. Sutcliffe JG

   (1998). Hipokretinlar: hipotalamusga xos peptidlar, neyroexekitoriya faoliyati bilan. Proc Natl Acad Sci AQSh 95: 322-327.

   Xulosa / to'liq matn
10. ↵
    1. DiLeone RJ,
    2. Georgescu D,
    3. Nestler EJ

    (2003) Nafaqa va giyohvandlikda yanal hipotalamik nöropeptidlar. Hayot sci 73: 759-768.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
11. ↵
    1. Enyeart JJ,
    2. Sheu SS,
    3. Hinkle PM

    (1987) kuchlanish sezgir Ca2 + kanallarining dihidropiridin modulatorlari GH4C1 pituiter o'simta hujayralari tomonidan prolaktin ishlab chiqarishni boshqaradi. J Biol Chem 262: 3154-3159.

    Xulosa / to'liq matn
12. ↵
    1. Espana RA,
    2. Valentino RJ,
    3. Berridge CW

    (2003) Gipokretin-sintez va hypocretin-1 retseptorlari ifodalangan neyronlarning immunoreaktivligi: kunlik va kechqurun spontan uyg'onish, stress va gipokretin-1ning ta'siri. Neuroscience 121: 201-217.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
13. ↵
    1. Fadel J,
    2. Deutch AY

    (2002) Oreksin-dopamin shovqinlarining anatomik substratlari: ventral tegmental hududga lateral hipotalamik proektsiyalar. Neuroscience 111: 379-387.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
14. ↵
    1. Fulop t,
    2. Radabaugh S,
    3. Smit S

    (2005) Sichqoncha adrenal xromaffin hujayralarida faoliyatga qarab farqlovchi transmitter chiqishi. J Neurosci 25: 7324-7332.

    Xulosa / to'liq matn
15. ↵
    1. Fulton S,
    2. Woodside B,
    3. Shizgal P.

    (2000) leptin orqali miya mukofot tizimini modulyatsiyasi. fan 287: 125-128.

    Xulosa / to'liq matn
16. ↵
    1. Georges F,
    2. Aston-Jones G

    (2002) Ventral tegmental maydon hujayralarini stria terminalisning yotoq yadrosi bilan faollashishi: midbrain dopamin neuronlariga yangi ogohlantiruvchi amino kislotalar kiritish. J Neurosci 22: 5173-5187.

    Xulosa / to'liq matn
17. ↵
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS

    (1983) Nigral dopaminerjik neyronlarning hujayra va hujayradan tashqari elektrofizyologiyasi. 1. Identifikatsiya va tavsiflash. Neuroscience 10: 301-315.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
18. ↵
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS,
    3. Mur H,
    4. Todd CL

    (1997) Antipsikotik preparatlarning terapevtik harakatlariga namuna sifatida Dopamin hujayralari depolarizatsiya bloki. Trends Neurosci 20: 31-37.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
19. ↵
    1. Griffond B,
    2. Risold PY,
    3. Jacquemard C,
    4. Colard C,
    5. Fellmann D

    (1999) Insulin bilan bog'liq hipoglisemiya rat lateral hipotalamusli hududda preprohypocretin (orexin) mRNAsini oshiradi. Neurosci Lett 262: 77-80.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
20. ↵
    1. Gulia KK,
    2. Mallick HN,
    3. Kumar VM

    (2003) Medial preoptik sohadagi Orexin A (hipokretin-1) ilovasi kalamushlarda erkaklar jinsiy xarakatini kuchaytiradi. Neuroscience 116: 921-923.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
21. ↵
    1. Xarris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2006) Arousal va mukofot: oreksin funktsiyasidagi ikkiyoqlama. Trends Neurosci 29: 571-577.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
22. ↵
    1. Xarris GC,
    2. Wimmer M,
    3. Aston-Jones G

    (2005) Yaxshilikka asoslangan hipotalamik oreksin neyronlari uchun mukofot. tabiat 437: 556-559.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
23. ↵
    1. Henny P,
    2. Jones BE

    (2006) GABAerjik, glutamaterjik yoki xolinergik bazal forebrin terminali tomonidan orexin / gipokretin neuronlarini innervatsiya qilish, preinsaptik vaziküler transporter va postsinaptik iskala proteynlari uchun immun tizimini tasdiqlaydi. J Comp neurol 499: 645-661.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
24. ↵
    1. Hernandez L,
    2. Hoebel B.G.

    (1988) Oziq-ovqat mukofoti va giyoh mikrodializ bilan o'lchanadigan yadrodagi akumbenslarda hujayra dopaminini oshiradi. Hayot sci 42: 1705-1712.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
25. ↵
    1. Hoebel B.G.

    (1969) Oziqlantirish va o'z-o'zidan ogohlantirish. Ann NY Acad Sci 157: 758-778.

    MedlineGoogle Scholar
26. ↵
    1. Hull EM,
    2. Wood RI,
    3. McKenna KE

    (2006) Knobil va Neillning ko'payish fiziologiyasi, Erkaklarning jinsiy xulq-atvorining neyrobiologiyasi, Ed Neill JD (Elsevier, Nyu-York), Ed 3, 1729-1824-betlar.

    Google Scholar
27. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. Pansepp J.

    (1999) Dopaminning yadroviy aktyorlarining maqsadi - harakatchan harakatlarda ishtirok etishi: mukofotlash uchun maxsus murojaat bilan birlashtiruvchi talqin. Brain Res Brain Qol Rev 31: 6-41.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
28. ↵
    1. Kanenishi K,
    2. Ueno M,
    3. Momose S,
    4. Kuwabara H,
    5. Tanaka H,
    6. Sato C,
    7. Kobayashi T,
    8. Xino O,
    9. Sakamoto H,
    10. Xato T

    (2004) Homiladorlik davrida rat miyasida Prepro-oreksin mRNA ifodasi ortadi. Neurosci Lett 368: 73-77.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
29. ↵
    1. Korotkova TM,
    2. Sergeeva OA,
    3. Eriksson KS,
    4. Haas HL,
    5. Jigarrang RE

    (2003) Dopaminerjik va nondopaminerjik neyronlarning ventral tegmental hududini orexinlar / hipokretinlar bilan uyg'otish. J Neurosci 23: 7-11.

    Xulosa / to'liq matn
30. ↵
    1. Kotz CM

    (2006) Oziqlantirish va o'z-o'zidan paydo bo'ladigan jismoniy faoliyatni integratsiyasi: orexin uchun o'rin. Physiol Behav 88: 294-301.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
31. ↵
    1. Li Y,
    2. Gao XB,
    3. Sakurai T,
    4. Van dan Pol AN

    (2002) Hypocretin / orexin mahalliy glyutamat neyroni orqali gipokretinli neyronlarni hipotalamik xirurgiya tizimini orkestrlash uchun potentsial mexanizmni yaratadi. Neyron 36: 1169-1181.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
32. ↵
    1. Lorrain DS,
    2. Matuszewich L,
    3. Fredman RD,
    4. Hull EM

    (1997) Yonal hipotalamik hududdagi hujayra ichidagi serotonin postejulyatsiya oralig'ida kuchayadi va erkak sıçanlarda kopulasyonu buzadi. J Neurosci 17: 9361-9366.

    Xulosa / to'liq matn
33. ↵
    1. Lorrain DS,
    2. Riolo QK,
    3. Matuszewich L,
    4. Hull EM

    (1999) Yanal gipotalamusli serotonin yadroviy akumbens dopaminini inhibe qiladi: jinsiy to'qimalarga ta'sir qilish. J Neurosci 19: 7648-7652.

    Xulosa / to'liq matn
34. ↵
    1. Mileykovskiy BY,
    2. Kiyashchenko LI,
    3. Siegel JM

    (2005) Ma'lum xipokretin / orexin neyronlaridagi faoliyatning xarakterli korrelyatsiyasi. Neyron 46: 787-798.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
35. ↵
    1. Mochizuki T,
    2. Crocker A,
    3. McCormack S,
    4. Yanagisawa M,
    5. Sakurai T,
    6. Scammell TE

    (2004) Orexin knock-out sichqonlarining yurish-turishidagi davlatning beqarorligi. J Neurosci 24: 6291-6300.

    Xulosa / to'liq matn
36. ↵
    1. Morgan JI,
    2. Curran T

    (1991) Asab tizimida stimulyatsiya-transkripsiya birikmasi: indüklenebilen proto-onkogen fos va junning ishtiroki. Annu Rev Neurosci 14: 421-451.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
37. ↵
    1. Nakamura T,
    2. Uramura K,
    3. Nambu T,
    4. Yada T,
    5. Goto K,
    6. Yanagisawa M,
    7. Sakurai T

    (2000) Oreksin bilan hosil qilingan hiperrolokomiya va stereotipi dopaminerjik tizim orqali amalga oshiriladi. Brain Res 873: 181-187.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
38. ↵
    1. Nambu T,
    2. Sakurai T,
    3. Mizukami K,
    4. Hosoya Y,
    5. Yanagisawa M,
    6. K. K

    (1999) Katta sichqon miyaidagi orexin neyronlarning taqsimlanishi. Brain Res 827: 243-260.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
39. ↵
    1. Narita M,
    2. Nagumo Y,
    3. Hashimoto S,
    4. Xotib J,
    5. Miyatake M,
    6. Sakurai T,
    7. Yanagisawa M,
    8. Nakamachi T,
    9. Shioda S,
    10. Suzuki T

    (2006) Mezolimbik dopamin yo'lini faollashtirishda orexinergik tizimlarning bevosita ishtiroki va morfin bilan bog'liq bo'lgan xatti-harakatlar. J Neurosci 26: 398-405.

    Xulosa / to'liq matn
40. ↵
    1. Olszewski PK,
    2. Qopqoq,
    3. Greys MK,
    4. Billington CJ,
    5. Kotz CM,
    6. Levine AS

    (2003). Gri'linning lateral gipotalamusda ta'sir qiluvchi yokieksigenik ta'sirining neyro asoslari. Peptidlar 24: 597-602.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
41. ↵
    1. Orsini regiztri,
    2. Jourdan F,
    3. Cooper HM,
    4. Monmaur P.

    (1985) Erkak ratidagi lateral gipotalamusda ayollarning hidlarini ta'siri. Semiquantitative deoksiglioz analizlari. Physiol Behav 35: 509-516.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
42. ↵
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (1998) Stereotaksik koordinatlardagi kalamush miyasi (Academic, New York), Ed 4.

    Google Scholar
43. ↵
    1. Peyron C,
    2. Tighe DK,
    3. Van dan Pol AN,
    4. da Lecea L,
    5. Heller HC,
    6. Sutcliffe JG,
    7. Kilduff TS

    (1998) Neyronlarning hipokretin (orexin) loyihasini bir nechta neyron sistemalariga joylashtirish. J Neurosci 18: 9996-10015.

    Xulosa / to'liq matn
44. ↵
    1. Pfaus JG,
    2. Damsma G,
    3. Nomikos GG,
    4. Wenkstern DG,
    5. Blaha CD,
    6. Phillips AG,
    7. Fibiger HC

    (1990) Jinsiy xatti-harakatlar erkak ratda markaziy dopamin transaminatsiyasini kuchaytiradi. Brain Res 530: 345-348.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
45. ↵
    1. Putnam SK,
    2. Sato S,
    3. Riolo QK,
    4. Hull EM

    (2005) Kastratlangan erkak sichqonlarda testosteron metabolitlarining kopulatsiyaga, medial preoptik dopaminga va NOS-immunoreaktivligiga ta'siri. Horm Behav 47: 513-522.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
46. ↵
    1. Rada P,
    2. Avena NM,
    3. Hoebel B.G.

    (2005) Shakar bo'yicha kundalik koptoklar akumbens qobig'ida dopaminni bir necha marta chiqaradi. Neuroscience 134: 737-744.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
47. ↵
    1. Rolls QILISh,
    2. Burton MJ,
    3. Mora F.

    (1980) Maymunada miya stimulyatori mukofotining neyrofizyologik tahlillari. Brain Res 194: 339-357.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
48. ↵
    1. Sakurai T,
    2. Amemiya A,
    3. Ishii M,
    4. Matsuzaki I,
    5. Chemelli RM,
    6. Tanaka H,
    7. Uilyams SC,
    8. Richardson JA,
    9. Kozlovski GP,
    10. Wilson S,
    11. Arch JR,
    12. Bukingem RE,
    13. Haynes AC,
    14. Carr SA,
    15. Annan RS,
    16. McNulty, ShU,
    17. Liu WS,
    18. Terret JA,
    19. Elshourbagy NA,
    20. Bergsma DJ,
    21. va boshq.

    (1998) Oreksinlar va orexin retseptorlari: gepotalamik neuropeptidlar va oziqlanish xatti-harakatini tartibga soluvchi G protein bilan biriktirilgan retseptorlari. hujayra 92: 573-585.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
49. ↵
    1. Sakurai T,
    2. Nagata R,
    3. Yamanaka A,
    4. Kawamura H,
    5. Tsujino N,
    6. Muraki Y,
    7. Kageyama H,
    8. Kunita S,
    9. Takahashi S,
    10. Goto K,
    11. Koyama Y,
    12. Shioda S,
    13. Yanagisawa M

    (2005) Sichqoncha ichida genetik kodli tomoshabin tomonidan aniqlangan oreksin / gipokretin neyronlarning kiritilishi. Neyron 46: 297-308.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
50. ↵
    1. Saper CB,
    2. Scammell TE,
    3. Lu J

    (2005) Uyqu va sirkadir ritmlarining gipotalamal regulyatsiyasi. tabiat 437: 1257-1263.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
51. ↵
    1. Sato S,
    2. Braham CS,
    3. Putnam SK,
    4. Hull EM

    (2005) Erkak kalamushlarni MPOA-da neyronal nitrat oksidli sintaz va gonadal steroid shovqinlari: birgalikda lokalizatsiya va testosteronning kopyalanmasının va nNOS-immunoreaktivligini restavratsiya qilish. Brain Res 1043: 205-213.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
52. ↵
    1. Shakiryanova D,
    2. Tully A,
    3. Hewes RS,
    4. Deitcher DL,
    5. Levitan ES

    (2005) Sinaptik neuropeptid vazikullarga faoliyatga bog'liq bo'lgan erkinlik. Nat Neurosci 8: 173-178.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
53. ↵
    1. Shax RY,
    2. Choong KC

    (2006) Metilfenidatni davolashdan so'ng, ventral tegmental sohada dopamin neyronlari va etanol ta'siridagi kalamushlarda turli xil moslamalar. Biol psixiatriyasi 59: 635-642.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
54. ↵
    1. Shizgal P.

    (1989) Intrakraniyali o'z-o'zini stimullashning hujayrali tahliliga qarshi: to'qnashuv tadqiqotlarining hissasi. Neurosci Biobehav Rev 13: 81-90.

    MedlineGoogle Scholar
55. ↵
    1. Siegel JM

    (2004) Hypocretin (orexin): odatdagi xatti-harakatlardagi va nöropatologiyada roli. Annu Rev Psychol 55: 125-148.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
56. ↵
    1. Qisqacha RB,
    2. Chang C,
    3. Muramatsu M,
    4. Swanson LW

    (1990) Sichqon miyaidagi androgen va ostrogen retseptorlari mRNA tarkibidagi hujayralarni taqsimlash: in situ hibridizatsiyalashni o'rganish. J Comp neurol 294: 76-95.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
57. ↵
    1. Smit MD,
    2. Jones LS,
    3. Wilson MA

    (2002) Hipokampal tilimning qo'zg'aluvchanlikdagi jinsiy farqlar: testosteronning ahamiyati. Neuroscience 109: 517-530.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
58. ↵
    1. Sutcliffe JG,
    2. da Lecea L

    (2002). Hipokretinlar: moyillikni o'rnatish. Nat Rev Neurosci 3: 339-349.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
59. ↵
    1. Swanson LW

    (2004) Miya xaritalari III: Sichqon miyasi tuzilishi (Elsevier, Nyu-York), Ed 3.

    Google Scholar
60. ↵
    1. Swanson LW,
    2. Sanches-Watts G,
    3. Watts AG

    (2005) Lateral lateral hipotalamus zonasining yangi parchalanish sxemasida melanin-konsentratsiyali gormon va gipokretin / orexin mRNA ifodalangan patologiyalarini taqqoslash. Neurosci Lett 387: 80-84.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
61. ↵
    1. Taheri S,
    2. Sunter D,
    3. Dakin C,
    4. Moyes S,
    5. Ko'rib chiqilgan L,
    6. Gardiner J,
    7. Rossi M,
    8. Ghatei M,
    9. Bloom S

    (2000) Oreksinda kunlik o'zgarish Sichqoncha markaziy asab tizimidagi immunoreaktivlik va prepro-oreksin mRNA. Neurosci Lett 279: 109-112.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
62. ↵
    1. Thorpe AJ,
    2. Cleary JP,
    3. Levine AS,
    4. Kotz CM

    (2005). Sichqoncha ichidagi shirin pelletlar uchun motivatsiya oshadi. Psixofarmakologiya (Berl) 182: 75-83.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
63. ↵
    1. Vaughan E,
    2. Fisher AE

    (1962) Intrakranial elektr stimulyatsiyasi orqali individ- fan 137: 758-760.

    Xulosa / to'liq matn
64. ↵
    1. Wenkstern D,
    2. Pfaus JG,
    3. Fibiger HC

    (1993) Jinsiy yo'l bilan qabul qilingan ayol sichqonlarga birinchi marotaba ta'sir qilish vaqtida erkak sichqonlarning yadro gumbazida Dopaminning uzatilishi kuchayadi. Brain Res 618: 41-46.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
65. ↵
    1. Hikmatli RA

    (2004) Dopamin, o'rganish va motivatsiya. Nat Rev Neurosci 5: 483-494.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
66. ↵
    1. Yoshida K,
    2. McCormack S,
    3. Espana RA,
    4. Crocker A,
    5. Scammell TE

    (2006) Yurak miya orneksin neyronlariga ta'sir qiladi. J Comp neurol 494: 845-861.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar
67. ↵
    1. Siz ZB,
    2. Chen YQ,
    3. Hikmatli RA

    (2001) Yanal hipotalamik o'z-o'zidan ogohlantirgandan so'ng yadrodagi akumbens va ventral tegmental sohada dopamin va glutamatning tarqalishi. Neuroscience 107: 629-639.

    CrossRefMedlineGoogle Scholar

Ushbu maqolaga asoslanib maqola

• Clomiphene sitrat (shifobaxsh chuqur miya hypothalamic modulatori) bilan davolashga chidamli primer SUNCT sindromini davolashni to'liq qisqartirish. Cephalalgia, 1 oktyabr 2014, 34 (12): 1021-1024
  • mavhum
  • To'liq matn
  • To'liq matn (PDF)
• Hypocretin (orexin) ventral tegmental sohada kotransmitter dynorphinning antirevard oqibatlarini yumshatish orqali mukofotni oshiradi PNAS, 22 Aprel 2014, 111 (16): E1648-E1655
  • mavhum
  • To'liq matn
  • To'liq matn (PDF)
• Orexin / Hypocretin Ventral Tegmental Dopamin Neyronlarning Prefrontal Aktivatsiyaga O'tkazilishiga javob beradi: Diqqatli Influence Neuroscience jurnali, 17 Noyabr 2010, 30 (46): 15585-15599
  • mavhum
  • To'liq matn
  • To'liq matn (PDF)
• Orexin A / Hypocretin-1 Pozitiv mustahkamlovchi uchun tanlab turtki beradi. Neuroscience jurnali, 9 sentyabr 2009, 29 (36): 11215-11225
  • mavhum
  • To'liq matn
  • To'liq matn (PDF)
• Oreksin-stimulyatsiya qilingan Map kinaz kaskadlari insonning H295R adrenokortik hujayralarida ko'p G-protein signalizatsiyasi yo'llari orqali faollashadi: A va B orexinlari uchun turli rollar Endokrinologiya jurnali, 1 avgust 2009, 202 (2): 249-261
  • mavhum
  • To'liq matn
  • To'liq matn (PDF)