Orexin jinsiy irsiy erkak jinsida jinsiy xatti-harakatlarning boshlanishiga yordam beradi, ammo jinsiy ishlash uchun muhim emas (2011)

Horm Behav. Muallifning qo'lyozmasi; PMC 2011 da Aug 1 da mavjud.

Nihoyasida tahrirlangan shaklda nashr etilgan:

PMCID: PMC2917508

Nashriyotning ushbu maqolaning so'nggi tahrirlangan versiyasi bilan bu erda tanishishingiz mumkin Horm Behav

PMCdagi boshqa maqolalarga qarang keltirilgan nashr qilingan maqola.

O'tish:

mavhum

Hipotalamik neuropeptid oreksin oziq-ovqat mahsulotlarini o'z ichiga olgan xushchaqchaqlik, uyqu va tabiatni baxtli xulq-atvor vositachilik qiladi. Erkak jinsiy xatti-harakati orexin retseptorlari - 1 agonistlari yoki antagonistlari tomonidan o'zgartirilib, bu tabiiy ravishda mukofotlash uchun A-Aga rolni taklif qiladi. Biroq, erkak jinsiy xulq-atvorining turli qismlarida endogen orexin-A yoki B ning o'ziga xos roli hozircha noma'lum. Shuning uchun mavjud tadqiqotlar nekroar faollashuv va orexin hujayra o'ziga xos lezyonlar uchun markerlarni ishlatgan, bu esa, orelin jinsiy motivatsiya va erkakning kalamushlarida ishlashi uchun juda muhim ahamiyatga ega bo'lgan gipotezani sinab ko'radi. Birinchidan, orexin neyronlaridagi cFos ifodasi juftlikning turli elementlari tomonidan faollashtirilmasdan, retseptiv yoki retseptiv bo'lmagan ayolning taqdimotidan so'ng ko'rsatildi. Keyin orexinning funktsional roli, orexin-B konjugatlangan saporin yordamida tekshirildi, natijada gipotalamustagi orexin hujayrali tana lezyonlari paydo bo'ldi. Lezyonlar jinsiy irsiy erkaklarda o'tkazildi va keyinchalik jinsiy xulq-atvorda to'rt nafar sud jarayonida qayd etildi. Lezyonli erkaklar dastlabki, lekin keyinchalik juftlashishga oid ishlarni bajarish uchun qisqartirilgan lattalarni ko'rsatib, keyinchalik jinsiy aloqada bo'lmagan jinsiy aloqada jinsiy aloqada bo'lishni engillashtirganini, ammo tajribasiz erkaklarni nazarda tutishini ko'rsatdi. Xuddi shunday, lezyonlar tajribali erkaklar jinsiy turtki ta'sir qilmaydi, ular uchish-qo'nish testlari bilan belgilanadi. Nihoyat, yuqoriroq plazma labirinti testlari lezyonli erkaklardagi anksiyete shunga o'xshash xatti-harakatlarini namoyish etdi va naif hayvonlarda ayolga birinchi marotaba ta'sir qilish bilan bog'liq tashvishlanmada oreksin rolini qo'llab-quvvatladi. Umuman olganda, bu topilmalar erkakning jinsiy ishlashi yoki motivatsiyasi uchun oreksin uchun muhim emasligini ko'rsatib turibdi, ammo naif hayvonlarda jinsiy xatti-harakatlar bilan shug'ullanish va bezovtalikda rol o'ynashi mumkin.

Kalit so'zlar: orexin, gipokretin, jinsiy xulq, nusxa ko'chirish, neyrotar faollashuv, motivatsiya, gipotalamus, yangilik, xushchaqchaqlik, tashvish

Kirish

Orexin, shuningdek, hipokretin deb nomlanuvchi, oziqlanish xatti-harakati uchun muhim bo'lgan gipotalamik neyropeptiddir (Lecea va boshq., 1998; Sakurai va boshq. 1998, Sakurai, 2006; Benoit va uning hamkorlari, 2008uyqu va uyquChemelli va boshq., 1999; Lin va boshqalar, 1999, Sakurai, 2007; Furlong va Carrive, 2007; Furlong va boshq., 2009; Carter va boshq., 2009). Orexin neyronlari lateral gipotalamik hududga (LHA) va periferik dorsomedial hipotalamusa (PFA-DMH) lokalize qilinadi va ikkita nevropeptid, orexin-A va BLecea va boshq., 1998; Sakurai va boshq., 1998). Orexin neyronlari eroziya vositasida, lokus keruleus, tuberomammillar yadrosi va pedukulopontin tegmental nukleus (jumladan,Peyron va boshq., 1998; Hagan va boshq., 1999; Horvath va boshq., 1999; Baldo va boshq., 2003). Orexin shuningdek, oziq-ovqat va giyohvandlik bilan bog'liq giyohvand moddalar bilan bog'liq bo'lgan mukofot va motivatsiyaAston-Jones va boshq., 2009a; Aston-Jones va boshq., 2009b) va orexin neyronlari mezolimbik tizimda, shu jumladan ventral tegmental hududi (VTA) va yadroli akumbens (NAc)Peyron va boshq., 1998; Fadel va Deutch, 2002; Martin va boshq., 2002; Baldo va boshq., 2003). Orexin neyronlari oziq-ovqat va preparatlar bilan bog'liq bo'lgan shartli kontekstli narsalar bilan faollashadi (Xarris va boshq., 2005; Lecea va boshq., 2006; Choy va boshq., 2010) va mukofotga asoslangan boqish xulq-atvorida rol o'ynashi ko'rsatilgan (Choy va boshq., 2010). Bundan tashqari, orexin retseptorlari 1 (ORX1) antagonistining intraserebroventrikulyar (ICV) yoki intraperitoneal administratsiyasi mazali taomlar uchunThorpe va boshq., 2005; Nair va boshq., 2008), ammo ICV orexin-A ma'muriyati ushbu motivatsiyani qayta tiklashi mumkin (Boutrel va boshq., 2005).

Boshqa mukofotlash xatti-harakatlarida orexinning roli hozirgi kunda noma'lum, biroq ko'plab tadqiqotlar erkak sıçanlarda jinsiy xulq-atvorni nazorat qilish uchun orexin uchun rol o'ynaydi. Bundan oldin orexin neuronlarının erkak sıçanlarda kopulasyonu bilan faollashtirilganMuschamp va boshq., 2007). Bundan tashqari, medial preoptik hududga (mPOA) orexin-A ning kiritilishi, past lattsiyalarda o'rnatilgan va intromit bilan tasdiqlangan jinsiy samaradorlikka olib keldi,Gulia va boshqalar, 2003). Aksincha, ICV ning orexin-A administratsiyasi ayollarni afzal ko'rishni kamaytirish orqali jinsiy motivatsiyani susaytirmoqda, faqat yuqori darajada jinsiy motivlarga ega bo'lgan erkaklarda (Bai va boshqalar, 2009). ORX1 antagonistlarini qo'llash bo'yicha ishlar ham ziddiyatli ma'lumotlarni ko'rsatdi, chunki ORX1 antagonistining tizimli administratsiyasi jinsiy xatti-harakatlarning boshqa parametrlariga ta'sir qilmasdan intrakitratsiyani kechiktirilishini oshirib,Muschamp va boshq., 2007), ORX1 antagonistining ICV idorasi jinsiy turtki (nervlarni) ta'sir qilmagan (Bai va boshqalar, 2009). Shu bilan birga, bu tadqiqotlar exogen orexin-A ning qo'llanilishi jinsiy ishlash va motivatsiyaga ta'sir qiladi; Biroq, endojen oreksin jinsiy axloq tuzatish vositasida muhim rol o'ynashi mumkin emas (Bai va boshqalar, 2009). Shuning uchun, bu ish maqsadi, er jinsi jinsiy motivasyon va ishlashi uchun endojen oreksinin muhim yoki yo'qligini aniqlash edi.

Birinchidan, jinsiy xatti-harakatlar paytida orexin neyronlari faollashtirilganda, neekronsning neuronlari mukofotlashni rag'batlantiruvchi vosita kiritilgandan so'ng, gipotezasi sinovdan o'tkazildi. Bundan tashqari, jinsiy tajriba jinsiy ishlashga ta'sir ko'rsatadiDewsbury, 1969) va jinsiy xulq-atvorining foydali xususiyatlari (Tenk va boshqalar, 2009), jinsiy tajriba juftlik paytida neyron faollashuviga ta'sir qiladimi yoki yo'qmi aniqlandi. Nihoyat, orexin jinsiy motivatsiya va hujayra organizmidagi orexin neyronlarning o'ziga xos lezyonlari yordamida bajarilishida muhim rol o'ynashi tekshirildi.

Materiallar va usullari

Voyaga etmagan erkak Sprague Dawley kalamushlari (200-250g) Harlan (Indianapolis, IN) yoki Charlz River laboratoriyalaridan (Sherbrooke, Quebec, Kanada) olingan va Plexiglas hujayralarida shaxsiy tajribaga (quyida keltirilgan) qarab alohida yoki juft holda joylashtirilgan. Koloni xonasi 12 / 12 reversed nur-qorong'i siklida (10 amda o'chib turadi) saqlanib, oziq-ovqat va suv mavjud edi ad libitum xulq-atvorda testdan tashqari. Ayol Sprague-Dawley kalamushlari Harlan (Indianapolis, IN) yoki Charlz River laboratoriyalarida (Sherbrooke, Quebec, Kanadada) ikki tomonlama ovaryektomizatsiya qilindi va 5% 17-b-estradiol benzoat silastik kapsulalari bilan teri ostiga implantatsiya qilindi. Jinsiy retseptivlik progesteronning subkutan in'ektsiyasi bilan (500ml susam yog'ida 0.1 ig) taxminan 4 soatda juftlash seanslaridan oldin kelib chiqdi. Barcha tartiblar Cincinnati universitetida va G'arbiy Ontario universitetida Hayvonlarni parvarishlash bo'yicha qo'mitalar tomonidan tasdiqlangan va Milliy Sog'liqni Saqlash Instituti va Kanada Hayvon Xizmatlari Kengashining ko'rsatmalariga muvofiq keltirilgan. Barcha xatti-harakatlarni sinovdan o'tkazish qorong'u bosqichning birinchi yarmi davomida qizil rangli yorug'lik ostida o'tkazildi.

Eksperimental dizayn

cFos ifoda ishlashi

Erkak sichqonchani (n = 48) alohida-alohida joylashtirildi va hayvonlarning yarmi 5-da haftasiga ikki marotaba juftlashuv seanslari vaqtida uy qafasida jinsiy tajribaga ega bo'ldi. Turli xil juftlik arenasiga ta'sir qilish orqali kelib chiqadigan uyg'unlik va cFos ifodasini yo'q qilish uchun uyda qafas testlari o'tkazildi va oldingi juftlik bilan bog'liq bo'lgan shartli qiziqishlarga (Balfour va boshq., 2004). Uy qafasiga qabul qiluvchi ayol kiritildi va erkaklar bir juftlik yoki 60 daqiqaga qadar turmushga chiqishga ruxsat berildi. Har bir test davomida jinsiy xatti-harakatlar kuzatildi. Qatlamlar va intramediyalarning umumiy soni, shuningdek, birinchi marta ko'tarilish va intromilatsiyalash uchun latentalar (qabul qiluvchi ayolni birinchi tog'oraga yoki intruziyaga topshirish vaqtidan) va bo'shatilish (birinchi intromiladan zaryadga o'tish vaqti) qayd etildi (Agmo, 1997). Hayvonlarning qolgan yarmi jinsiy jihatdan soddagina qoldi. Bu hayvonlarni jinsiy jihatdan tajribali erkaklar bilan birga xonaga joylashtirdilar, ular odatdagidan ko'ra, xushbo'y hidlar va husnbuzarlarga duchor bo'ldilar, biroq ular turmushga chiqmadi. Naima va tajribali hayvonlarning har biri 6 tajriba guruhiga bo'linadi (guruhda har bir n = 4). 6 naif va tajribali guruhlar quyidagilardir: jinsiy axloqqa ta'sir qilmaydigan erkaklar (Home Cage); 15 daqiqagacha uyqu hujayrasida bo'lmagan retseptiv ayolga duch kelgan erkaklar (Anestrous Female). Erkaklar tekshirishi va o'zaro ta'sir qilishi mumkin, biroq ayollarning retseptivligi yo'qligi sababli juftlashmagan; 15 daqiqadan so'ng (Estrous Female) uy qafasining yuqori qismida tel qoplama qutisiga joylashtirilgan qabul qiluvchi ayolning hidlariga uchragan erkaklar; qatlamlarni ko'rsatadigan, ammo vaginal maskelenmiş urg'ochi (tog') bilan intramisyonlar yoki boşalmama; Faqat ulash va intrüsyonlar ko'rsatgan erkaklar (Intromission); va bir bachadonga o'ralgan erkaklar (Bezirish). Sinov tugaganidan bir soat keyin, erkaklar cFos ifodasini tahlil qilish uchun qurbon bo'lishdi. Jinsiy jihatdan tajribali guruhlar jinsiy xatti-harakatlar parametrlariga moslashgan va oxirgi testdan oldin guruhlar o'rtasida sezilarli farq yo'q edi. Bundan tashqari, final testida naushniklar va tajribali guruhlar orasida minoralar va ortiqcha intruziyalar o'rtasida sezilarli farq yo'q edi.

Perfusions: cFos ifodasi

Barcha erkaklar natriy pentobarbitol (270 mg / ml) bilan chuqur anesteziyalangan va 4% paraformaldehid (500 ml; PFA) bilan transkardial perfuziyalangan. Perfusizatsiyadan so'ng darhol chiqarildi va bir soat davomida shu fiksatgichga o'rnatildi, keyinchalik kriyoprotektsiya uchun 20% sukroz eritmasiga o'tdi. Braunlar 35 ìm ning koronal qismlarida muzlatuvchi mikrotom (Microm, Walldorf, Germaniya) bo'yicha kesilib, kriyoprotektant eritmasida (4% etilen glikol va 30% natriy azid o'z ichiga olgan 0.1 M PBda 30% sukroz) va 0.01 parallel qismlarida to'plangan va saqlangan keyingi ishlov berishgacha - 20 ° C da.

Immunohistokimyo

Barcha inkübasyonlar nozik ajitasyon bilan xona haroratida amalga oshirildi. Bepul suzuvchi bo'limlar 0.1M sho'rlangan tamponli natriy fosfat (PBS) bilan keng tarqalgan. Bo'limlar 1% H bilan bloklandi2O2 (30% aktsiyadorlik eritmasi) PBS ichida 10 daqiqa uchun, so'ngra PBS bilan yana ko'p marta yuviladi. Bo'limlar 0.1 soat uchun inkubatsion eritma (0.4% bovin sarum albumin va 100% Triton X-1 o'z ichiga olgan PBS) bilan inkübe qilindi. Birlamchi antikor inkubatsiyasi inkubatsiya eritmasida xona haroratida kecha davomida o'tkazildi. Bo'yinlarning quyidagi qismlari PBS bilan yuvilib, plyus shisha oynalar ustiga o'rnatildi va dibutil ftalat xylen (DPX) bilan qoplangan.

cFos / Orexin

Bir qator bo'limlar cFos va orexin uchun immunopresitga ega bo'lgan. Bo'limlar quyon bilan birga quyonni ko'tarib antifordani cFos (quyon anti-cFos, sc-52, 1: 10 000, Santa Cruz Biotexnologiya, Santa Cruz, KA) ni taniydilar va keyin biotinli echkilarga qarshi quyon bilan 1 soat inkubatsiyasini (1: 500 , Vorun Laboratoriyalari, Burlingame, KA) va avidin go'shtli peroksidaza kompleksi (1: 1000, ABC to'plami, Vektor Laboratoriyalari, Burlingame, KA). 10% vodorod periksni va 0.02% nikel sulfat o'z ichiga olgan 0.1M fosfat tampon (PB) ichida 0.012% diaminobenzidin (DAB) (Sigma, Sent-Luis, miloddan avvalgi) 0.08 daqiqa uchun 003 daqiqa inkubated, natijada ko'k-qora reaktsiya mahsuloti. Keyinchalik bo'limlar quyon bilan birga quyon ko'tarib, orexin-A (quyon anti-oreksin-A, H-30-1; 20: 000 1, Feniks Pharmaceuticals, Burlingame, CA) ni taniydi va keyin biotinli echkiga qarshi 10 soat inkubatsiyani yuqorida ta'riflanganidek, kovaklar va ABC. Nihoyat, bo'limlar 0.02% vodorod periks o'z ichiga olgan 0.1M PB ichida 0.012% DAB bilan XNUMX daqiqa inkübe qilindi va natijada qizg'ish jigarrang reaktsiya mahsuloti paydo bo'ldi.

Barcha antikorlar oldindan xarakterlanadi (Chen va boshq., 1999; Satoh va boshq., 2004; Solomon va boshq., 2007). Immunohistokimyoviy tekshiruvlar asosiy antijismlar etishmovchiligini, tegishli vaznda (cFos) yagona bantlarni ko'rsatadigan g'arbiy blok tahlilini va orexin B-saporin lezyonlari (orexin) bilan immunohistokimyoviy orexin signalini yo'qotilishini o'z ichiga oladi.

Ma'lumotlarni tahlil qilish

cFos / Orexin

Oreksin yoki orexin va cFos uchun belgilangan neyronlar hayvonlarga uchta vakillik bo'limida ikki tomonlama deb hisoblangan, ular orexin neuronal populyatsiyasining maksimal soniSakurai va boshq., 1998) -2.3 dan mmgacha -3.6 mm dan bregma (Paxinos va Watson, 1998) (Shakl 1), Leica mikroskopiga (Leica Microsystems, Wetzlar Germaniya) biriktirilgan chiziqli naychani, eksperimental guruhlarga ko'r bo'lgan holda ko'rdi. PFA-DMH va LHA forniksning joylashuviga asoslanib ajratilgan (Shakl 1a). CFos ifodalovchi orexin neyronlarning ulushi har bir hayvon uchun hisoblangan va yarim sharda o'rtacha hisoblangan va guruh vositalari hisoblab chiqildi. Guruhlar orasidagi statistik ahamiyatga ega, test natijalari davomida jinsiy tajriba va jinsiy xulq-atvorli ikki tomonlama ANOVA yordamida Fisher LSD testlari 95% ishonchlilik darajasiga ega bo'lgan omillar sifatida aniqlandi.

Shakl 1 

Hipotalamusdagi orexin neyronlarning joylashishi. (A) gipotalamusdagi orexin neyronlarning anatomik joylashuvi. (Paxinos va Watson, 1998), O'lchov satri: 200 mm. (B) PFA-DMH ning bir nechta etiketli orexin neyronlari unmired nazorat hayvonida. (C) Orexin ...

Orexin Lesion tadqiqotlar

jarrohlik

Erkaklar alohida joylarga joylashtirilgan va lezyon va sham operatsiyasidan oldingi retseptiv ayol bilan oldindan testdan o'tgan juftakning suhbati o'tkazildi. Jinsiy xatti-harakatlar yuqorida tavsiflangan tarzda qayd etilgan va guruhlar juftlik xulq-atvorining parametrlari asosida topilgan. Erkak kalamushlari izoflurani (Abbot Laboratories, St. Laurent, Quebec, Kanadada) bilan Surgivet Isotec4 gaz apparati (Smiths Medical Vet Division, Markham, Ontario, Kanada) yordamida behushlikda va stereotaksik apparatga joylashtirilgan (Kopf Instruments, Tujunga, KA) behushlikni saqlab turish uchun burun va og'zini yopadigan gaz maskasi. Bosh suyagi va lambdani aniqlash uchun kesma qilingan va bregma topilgan va balandligi aniqlangan. Dremel matkap (Dremel, Racine, WI) va shisha mikropipetalar (40mi diametri, World Precision Instruments Inc, Sarasota, FL) yordamida tanadagi toksin orexin-B saporin (IT-20, Advanced Targeting tizimlari, San-Diego, CA, PBS ichida 200ng / mL); (AT-21, Advanced Targeting Systems, San-Diego, CA, PBS ichida 200ng / mL, sham nazorati) gipotalamusga tushirildi. Ushbu maqsadli toksinni orexin retseptorlari 2 (ORX2) ifodalangan hujayralarga yuqori yaqinligi bilan bog'langan va ORX1 (Gerashchenko va boshq., 2001) va hipotalamusda (yoki) neyronlargaFrederik-Duus va boshq., 2007). 1 mL (xamisfera boshiga 2) ning ikki tomonlama infuziyalari quyidagi koordinatalarga AOK qilindi: AP = -2.8 va -3.2; ML = 0.7 va 0.8; DV = -9.0 (Paxinos va Watson, 1998). Har infuziondan so'ng, igna 3 daqiqada difüzyona ruxsat berish uchun qoldirildi. Ignalar asta-sekin olib tashlandi va yaralar jarohatlangan kliplar bilan yopildi. Lezyon cerrahisinden ikki hafta o'tgach, barcha erkak to'rt jinsiy aloqa paytida jinsiy tajriba uchun sinov qilingan va undan keyin pistte va / yoki yuqori artı labirent mesh (pastga qarang) ta'sir qolgan. Operatsiyalar bir necha hafta davomida ajratilgan uchta guruhda amalga oshirildi.

Jinsiy xatti-harakatlar

Barcha erkaklar uy qafasida har ikkinchi kunda o'tkazilgan 4 juftlashuv seanslari davomida jinsiy xatti-harakatlar uchun sinovdan o'tkazildi. Har bir mashg'ulot vaqtida, erkaklar bir ayolni zaryadga yoki 60 daqiqaga, qaysi biri birinchi bo'lib kelganiga qaramay, uyg'unlashdi. Yuqorida tavsiflanganidek, ikki tomonlama xulq-atvor qayd etilgan va hisoblash samaradorligi ham hisoblab chiqilgan [intromissions / (sonlar soni + intromissions soni)]. Jinsiy ko'rsatkichlarning statistik jihatlaridan farqli o'laroq, har bir sinov uchun lezyon va sham guruhlari o'rtasida bir xil ANOVA bilan lezyon jarrohligi omil sifatida va Fisher LSD testida 95% ishonchlilik darajasi bilan yoki solishtirganda parametrik bo'lmagan testlar Kruskal-Wallis bir tomonlama ANOVA va omil sifatida lezyon operatsiyalari va 95% ishonchlilik darajasi bilan Dann testi. Bundan tashqari, har bir guruh uchun ma'lumotlar juftlashgan t-testlaridan foydalanib, jarrohlikdan oldin ma'lumotlarga solishtirildi.

Jinsiy turtki: yugurish sinalishi

Jinsiy xatti-harakatdan so'ng, endi jinsiy yo'l bilan tajribali erkaklarning kichik guruhi to'g'ri yo'ldan chiqish apparati (MED Associates Inc., St Albans, VT) (120 sm uzunligi; Lopez va uning hamkorlari, 1999). Erkaklar xuddi shu kuni olib borilgan ikkita 10 daqiqali sud jarayonida uchish-qo'nish qurilmasiga joylashdilar. Keyin ikkita test sinovi o'tkazildi. Dastlabki sinov davomida uchish-qo'nish yo'lining oxirida teshikli bo'linmali maqsadli qutichga ogohlantiruvchi hayvon (estrous, anestrous female or male) joylashtirildi. Ruhlantiruvchi hayvonlarning hidini erkalarga etkazib yuborish uchun fan ishlatilgan. Tajribali erkaklar boshlang'ich maydoniga joylashtirildi, eshik ochildi va yo'l-yo'lakay kirishga ruxsat berildi va maqsad qutiga erishish vaqti qayd etildi. Maqsadga etib borgach, erkaklar ekranni orqasidagi ogohlantiruvchi hayvon bilan o'zaro muloqot qilish uchun 30 soniya berildi. 1 soatdan so'ng, xuddi shunday ikkinchi sinov o'tdi. 1 va sinov 2 o'rtasidagi maqsadli qutiga erishish uchun vaqtlar o'rtasidagi statistik ahamiyatga ega bo'lib, 95% ishonchlilik darajasi bilan bog'langan t-testlar yordamida tahlil qilindi. Guruhlar orasidagi statistik ahamiyatga ega, bir tomonlama ANOVA yordamida lesion operatsiyalari bilan faktor bo'lib, Fisher LSD testlari 95% ishonchlilik darajasi bilan aniqlandi.

Anksiyete kabi xatti: Elevated Plus Maze

Hozirgi vaqtda jinsiy tajribaga ega bo'lgan erkaklarning kichik guruhi anksiyete kabi xatti-harakatlarda jinsiy samaradorlik yoki motivatsiya bo'yicha orexin lezyonlarining oqibatlarini tashvish yoki hayajonli o'zgarishlar bilan bog'liqligini aniqlash uchun sinovdan o'tkazildi. Erkaklar yorug'lik davrining oxirida yorqinroq nurli xonada baland plyus labirint apparatiga (EPM, MED Associates Inc., St Albans, VT) ta'sir qilishgan. EPM 4 qurolidan iborat bo'lib, har bir 50 sm uzunlikdagi o'rta burchakka cho'zilib, 75 sm balandlikda edi. Labirentning ikkita qo'li tashqi atrof-muhit uchun ochiq, ikkinchisi esa 40 sm balandlikdagi qorong'i sideyla bilan qoplangan. Hayvonlar EPMga joylashtirilgan va besh daqiqa davomida kuzatilgan. Ochiq va yopiq qurollarga sarf qilingan vaqt va har bir qo'lga kiritilgan yozuvlarning umumiy soni fotomaydoqli qatorlar yordamida qayd etildi. Guruhlar orasidagi statistik ahamiyatga ega bo'lib, bir tomonlama ANOVA yordamida lezyon bilan faktor bo'lib, Fisher LSD testlari 95% ishonchlilik darajasiga ega bo'lgan.

Perfusiya va juftlashtirilgan indikator cFos

Barcha xulq-atvor sinovlaridan so'ng, barcha erkaklarga natriy pentobarbitol (XNUMxmg / ml) bilan chuqur anesteziya qilingan va ilgari ta'riflanganidek, 270 ml 500% PFA bilan transkardial perfuziya qilingan. Bundan tashqari, oreksin lezyonlarini juftlashtirilgan indikatorli CFOS ekspresyoniga ta'sirini sinab ko'rish uchun, sham va lezyon guruhlari bir juft ezikatsiyaga qadar turmushga chiqdi. Yuvalatsiyadan keyingi 1 soatdan keyin, erkaklar yuqorida aytib o'tilganidek, 4% PFA bilan transkardial perfuziyalangan. Ushbu guruhdagi erkaklarning yarmi ayolga kiritilmagan va uy bekasi tomonidan nazoratdan o'tkazilmasdan foydalanish uchun perfüze qilingan.

Immunohistokimyo

4 parallel seriyali 35 mm tomondagi koronali seksiyalarda muzlatuvchi mikrotom yordamida va yuqorida ta'riflangan tarzda saqlangan miyalar belgilangan. Lezyonni tekshirish uchun, barcha lezyonlardagi tajribalardan gipotalamusni o'z ichiga olgan bir qator ketma-ketlik yuqorida tavsiflangan aynan quyon anti-orexin-A va DAB protokoli yordamida orexin uchun etiketli qilingan. Yovvoyi hayvonlardan olingan bir qator bo'limlar yuqorida aytib o'tilganidek, cFos va orexin uchun bo'yalgan.

Lezyon tekshiruvi

Har bir hayvonda orexin uchun immunoreaktiv bo'lgan orexin neyronlar soni 3 bo'limlarida PFA-DMH va LHA-da ikki tomonlama bo'lib, jarrohlik bo'lmagan tekshiruvlarda maksimal miqdorda orexin hujayralarini ifodalaydi, yuqorida aytib o'tilganidek, 2.3 dan -3.6 mmgacha bregma. Yarimferadagi har bir hayvon uchun o'rtacha hisoblangan hujayralar va guruh vositalari aniqlandi. Nekrozsiz neyronlarning aniqlanmagan / boshlang'ich sonini aniqlash uchun jarrohlik bo'lmagan hayvonlarni tekshirish (cFos eksperimentlaridan) va ma'lumotlar jarrohlik tekshiruvi bo'lmagan erkaklar bilan solishtirganda foizlarda ifodalangan (Shakl 2). Jarrohlik bo'lmagan hayvonlarga nisbatan 20% orexin hujayralaridan kamroq bo'lgan erkaklar lezyon guruhiga kiritildi. Qisman lezyonlar guruhiga 20% dan ko'proq, ammo 80% dan kam bo'lgan hayvonlar kiritilgan. Shamni nazorat qilish orexin hujayralari sonida sezilarli o'zgarishlarga ega emas edi. Sham, qisman va to'liq lesion hayvonlar o'rtasidagi statistik ahamiyatlilik bir tomonlama ANOVA va Fisher LSD testi yordamida 95% ishonchlilik darajasi bilan aniqlandi.

Shakl 2 

Lezyon tekshiruvi. BLANK-saporin bilan birlashtirilgan shamli lezyon hayvonida orexin (A) va MCH (B) hujayralarini ko'rsatadigan vakillik suratlari. Oreksin hujayralarining (C) yo'qolishini ko'rsatadigan vakillik suratlari, ammo orkeksiya bilan yuborilgan zararlangan hayvonlarda buzilgan MCH hujayralari (D) ...

Lezyonning o'ziga xosligi

Lezyonlar neyronlarga orkali chegaralanganligini tekshirish uchun sham va lesion hayvonlarning pastki qismidan (n = 20) gipotalamusni o'z ichiga olgan bir qator epitoplar melanotsitlar konsentratsiyali gormon (MCH) uchun immunoproksiya qilingan. kolokalizatsiya), orexin neyronlari bilanBroberger va boshq., 1998), ilgari aytib o'tilgan MCH (quyon anti-MCH, H-070-47, 1: 150 000, Feniks Pharmaceuticals, Burlingame, CA) va DABni tanigan quyon-ko'tarilgan antikorni qo'llash orqali. MCH neuronlari ORX1 (Bäckberg va boshq., 2002), lekin ORX2 (Volgin va boshq., 2004) va B-saporinning orexinidan keyin sezilarli darajada kamaytirilmaydi (Frederik-Duus va boshq., 2007). MCH immunoreaktiv hujayralari orexin neyronlari uchun tahlil qilinganlarga muqobil bo'limlarni qo'llash orqali hayvonlarning har ikkala qismida (sham: n = 7, lesion n = 5) ikki tomonlama tarzda hisoblandi. Lezyonlar PFA-DMH yoki LHA-da MCH neuronlar sonini sezilarli darajada kamaytirmadi (1 stol; Shakl 2b, g; PFA-DMH: p = 0.47; LHA: p = 0.33). Bundan tashqari, juftlashtirilgan indikatorli cFos ifodasi, oreksin neyronlari uchun tahlil qilinganlarga muqobil bo'limlardan foydalangan holda, hayvonning bir vakillik qismida (sham: n = 4, lesion n = 3) ikkitomonlama tarzda hisoblandi. Lezyonlar PFA-DMH yoki LHA-da juftlashtirilgan indikatorli cFos ifodasini ta'sir qilmadi (1 stol; PFA-DMH: p = 0.53; LHA: p = 0.82). Nihoyat, kresol nayzasidan foydalangan holda (6 g, krezil vena asetat (C-6, Sigma, Sent-Luis, miloddan avvalgi), Neksl (N-5), nekroz (xam: n = 5042) 0.5 g natriy asetat trihidrat (S209, Thermo Fisher Scientific, Ottava, Ontario, Kanada), 1L pH qiymatida glacial asatik kislotali (AX0073-6, EMD Chemicals, Mississauga, Ontario, Kanada) 3.14L juft distillangan suv: 250). Nekslning bo'yalgan neyronlari orexin neyronlarning umumiy joyida standart (200mx × XNUMXmm) tahlil sohalarida amalga oshirildi. Nissl lekeli neyronlarning soni sham va lezyon guruhlari o'rtasida farq qilmadi (1 stol; PFA-DMH: p = 0.23; LHA: p = 0.33).

1 stol 

Lezinning o'ziga xosligini tekshirish: Nissl, MCH yoki ingichka ichak tutilgan cFos uchun bo'yalgan neyronlar sonining tahlili shuni ko'rsatadiki, umuman Neyronlarning yo'qotilishi, MCH xujayralari yoki PFA-DMHdagi juftlashtirilgan neyron faollashuvi yoki ...

Sichqoncha ichida narkolepsiyaga hissa qo'shish uchun orexin etishmasligiChemelli va boshq., 1999), itlar (Lin va boshqalar, 1999) va odamlar (Siegel, 1999; Nishino va boshq., 2000; Peyron va boshq., 2000; Thannickal va boshq., 2000) narkoleptik fenotipning yo'qligini ta'minlaydigan hayvonlar kuzatilgan. Hayvonlarning ushbu tadqiqotda bildirilgan barcha qiziqishlariga oid testlar davomiyligi kuzatilgan va narkolepsiyaning har qanday xususiyatlarini ko'rsatmagan.

Hayvonlarga zarar etkazuvchi indikatorli cFos ifodasi

CFos-immunoreaktiv hujayralar soni ventral tegmental hududida (VTA, 3 × 900 mmm), mPOA (900 × 400 mmm) standart sohalarida hayvonlar uchun 600 qismida ikki tomonlama hisoblanadi; yadroli akumbens (NAc) yadrosi va qobig'i (400 × 600 mmm) va medial prefrontal korteks (mPFC) ning prelimbik, infralimbik va oldingi singulat pastki hududlari (har bir kichik viloyat uchun 600 × 800 mm) . Har bir hayvon uchun o'rtacha hisoblangan va guruh vositalari hisoblab chiqilgan. Statistik ahamiyatga ega, 95% ishonchlilik darajasiga ega Fisher LSD testidan keyin omillar sifatida jinsiy tajriba va lezyon bilan ikki tomonlama ANOVA yordamida aniqlandi.

natijalar

Jinsiy xulq-atvorda Orexin neyron faollashuvi

Oksin neyronlarda CFOS ifodasini sezilarli darajada oshirish PFA-DMH (F(5,31) 63.4; p <0.001; Shakl 3a) va LHA (F.(5,31) 10.4; p <0.001; Shakl 3b), jinsiy tajriba ta'siri yo'q. Ayniqsa jinsiy irsiy va tajribali hayvonlarda jinsiy xatti-harakatlarning turli parametrlarini aks ettiradigan barcha erkaklarning eksperimental guruhlari (anestratsion ayollarning tekshiruvi, estrada ayol hidlarining ta'sir qilishi, montaj qilish, ichish yoki bo'shatish) eksperimental guruhlar orasidagi farqsiz LHA (60-80%) ga nisbatan PFA-DMH (14-33%) bilan faollashtirilgan orexin hujayralarining yuqori foizli qafas elementlari mavjud. Ushbu natijalar, oreksin nöronların jinsiy ishlash paytida qo'shimcha aktivizatsiya qilmasdan, ogohlantiruvchi ayol ta'siridan keyin faollashtirilganligini ko'rsatadi. Bundan tashqari, faollashuv ayolning ogohlantiruvchining rag'batlantirilishiga bog'liq emas, chunki jinsiy jihatdan tajribali erkaklar uchun ham retseptiv va retseptiv urg'ochi ayollarni faollashtiradi.

Shakl 3 

PFA-DMH (A) va LHA (B) dagi Orexin neyronlari naif va tajribali hayvonlarda juftlashishning barcha parametrlarini hisobga olgan holda cFos ni ifodaladi. Qisqartmalar: HC, uy qafasi; AF: anestrous ayol; EF, estrous ayol; M, Tog'lar; IM, Intromission; E, suyuqlik. ...

Oksinning zararlanish ta'siri

Jinsiy xatti-harakatlar

Oreksin lezyonlari jinsiy axloqni yaxshilashga olib keldi (kechikish vaqti: F.(2,47) 3.962; p = 0.034; intromission kechikish: H = 9.104; p = 0.011). Birinchi juftlashuv jarayonida lezyon erkaklarda mo'ynali hayvonlar bilan taqqoslaganda qisqa muddatli lattalar paydo bo'ldi (kechikish vaqti: p = 0.03, intromission kechikish vaqti: p = 0.01; Shakl 4a-b) va jarrohlikdan oldingi jarrohlik jarayonida latentlarga solishtirilgan (kechikish vaqti: p = 0.02, intromission kechikish: p = 0.03; Ma'lumotlar ko'rsatilmagan). Qisman lezyonlar erkaklarning shamlardan farq qilmasligi aniqlandi, va ikkala guruh ham operatsiyadan oldin juftlashish jarayonidan farq qilmadi. Lezyonların montaj va intrasisyon gecikmelerine ta'siri jinsiy tajribalar bilan zayıflatıldı, chunki guruhlar o'rtasida hech qanday farq yo'q edi, keyingi sinovlar davomida (sinov 4 Shakl 4a-b). Ejakulyatsion kechikishlar (Shakl 4c), minoralar soni (Shakl 4d) va intromitsiyalar (Shakl 4e), shuningdek koplanish samaradorligi (Shakl 4f) guruhlar orasidagi sinovlar davomida yoki har bir guruh ichida birinchi juftlashuv jarayoni va jarrohlikdan oldin test o'rtasida sezilarli farq yo'q edi.

Shakl 4 

Oreksinli lezyonlar 1 sinovida jinsiy o'spirin erkaklar bilan aloqa qilish va intromilatsiyani kechiktirdi. Orexin lezyonlari erkaklar jinsiy tajriba orttirganidan so'ng, sinovda 4 paytida juftlashmaga ta'sir qilmadi. (A) Kechikish. (B) Kechiktiruvchi kechikish. (C) Ejakulyatsiya ...
Yugurish sinovi

Orexin lezyonlari jinsiy tajribali erkaklarda to'g'ri uchish testida baholangan jinsiy motivlarga ta'sir qilmadi. Ikkala test sinovi davomida, lezyon erkaklar birinchi sinovga nisbatan (p = 0.03; Shakl 5). Bunday o'sish muddati jinsiy turtki bo'lganligidan dalolat beradi (Lopez va uning hamkorlari, 1999). Xamma erkaklarda (p = 2) pomidor erkaklar uchun ahamiyatga ega bo'lmagan bo'lsa-da, 0.03 (p = 0.052) da qisman lezyon va sham erkaklar ham tezkor ayolga qarshi harakat qilishdi. Guruhlarning hech birida 2 sinovida anestratsiyali ayol yoki erkakga nisbatan tezroq tezlik kuzatildi. Bundan tashqari, sham, qisman va lezyon erkaklar o'rtasida har qanday ogohlantiruvchi hayvonga harakat qilish tezligi bo'yicha 1 yoki 2 sinovlarida hech qanday farqlar kuzatilmadi, bu esa uchish-qo'nish yo'lagidagi umumiy faoliyatdagi farqlar yo'qligini ko'rsatdi.

Shakl 5 

Orexin lezyonlari jinsiy tajribaga ega bo'lgan erkaklarda jinsiy turtki ta'sir qilmadi. 1 va 2 kabi ikkita sinov davomida uchish-qo'nish yo'lagi testida estrous ayolga erishish vaqti keltirilgan. * 2dagi ayolga nisbatan erishish uchun vaqtni sezilarli darajada pasaytirishni ko'rsatadi ...
Anksiyete kabi xatti-harakatlar

Natijalar shuni ko'rsatadiki, lezyonlar erkaklarda yangi ayolga duch kelganda yangilik va / yoki xavotirga o'xshash xatti-harakatlarga ta'sir ko'rsatish orqali naif hayvonlarda jinsiy xatti-harakatlarning boshlanishiga yordam berishi mumkin. Qo'llab-quvvatlashda, lezyon erkaklar EHMda anksiyete shunga o'xshash xatti-harakatlarini ko'rsatdi, bu esa yopiq qo'llarda sarf qilingan vaqtning pasayishi sifatida namoyon bo'ldi (p = 0.012; Shakl 6) va ochiq qo'llardagi vaqtning ko'payishi (p = 0.023; Shakl 6) sham erkaklarga nisbatan. Qisman lezyonlar sezilarli darajada ta'sir ko'rsatmadi. Ushbu ma'lumotlarga ko'ra, ushbu kasallik anksiyete shunga o'xshash xulqni kamaytiradi.

Shakl 6 

Oreksin lezyonlari yuqori plyus labirintida anksiyete-xatti-harakatni kamaytirdi. Yopiq qurolga (chapda) o'tkaziladigan vaqtning foizlari kamaydi va yaralangan erkaklarda ochiq qo'llarda (o'ngda) vaqtning ko'payishi kuzatildi. * muhim farqni ko'rsatadi ...
cFos ifodasi

Ichki orexinning orexin-innervatsiya qilingan miya hududlarida juftlashishni keltirib chiqaradigan nöronal faollashuvga hissa qo'shishini baholash uchun VTA, NAc yadrosi va qobig'ida, mPOA va mPFC-da juftlashishni keltirib chiqaradigan cFos ifodasi tahlili o'tkazildi. Har ikkala lezyon va sham erkaklarida, juftlashtirilgan barcha tahlil qilingan miya joylarida CFOS miqdori sezilarli darajada oshmadi2 stol). Giyohvand moddalar neytral faollashuvga ta'sir qilmadi, chunki sham va lesion hayvonlarning boshlang'ich yoki juftlashtirilgan indikatorli cFos ifodasi farq qilmadi.

2 stol 

Xuddi shikastlanmagan, qisman va lezyon guruhlari bilan bir xil lezyon holatiga bog'liq bo'lgan juftlashmagan tekshiruvlarga qaraganda indulangan cFos.

muhokama

Ushbu tadkikotlar erkak sıçanında jinsiy ishlash va motivasyonda endojen oreksinin o'rni araştırıldı. Jinsiy motivatsiya yoki ishlash uchun orexin zarur emasligi aniqlandi. Buning o'rniga, orexin neyronlari ayolning gormonal holatidan yoki erkakning jinsiy tajribasidan qat'i nazar, ayolning ogohlantirishi bilan faollashadi. Bundan tashqari, orexin hujayra o'ziga xos lezyonlar bilan endojen orexinni olib tashlash, tashvishga o'xshash xatti-harakatlarga olib keldi va jinsiy axloqsizlik bilan jinsiy munosabatda bo'lishni engillashtirdi. Shunday qilib, ushbu tadqiqot natijalari orexinning uyg'unlikdagi rolini qo'llab-quvvatlaydi (Lecea va boshq., 2006; Xarris va Aston-Jones, 2006; Sakurai, 2007; Boutrel va boshq., 2009; Furlong va Carrive, 2009; Furlong va boshq., 2009) va tashvish (Suzuki va boshqalar, 2005; Davis va boshq., 2009; Li va boshq., 2010), lekin jinsiy turtki yoki ishlashda orexin uchun muhim rolni qo'llab-quvvatlamaydi.

Ushbu tadkikotlar natijalari, endojen oreksin va farmakologik vositalar yordamida erkak jinsiy xatti-harakatlarida orexin rolini o'rganib chiqadigan avvalgi ishlarning ziddiyatli natijalarini aniqlab beradi. Exogenous orexin-A ichidagi inflyatsiya mozaikasi infektsiyalari jinsiy rivojlanishning kuchayishiga va jinsiy samaradorlikning yaxshilanishiga olib keldi, shuning uchun orexin mPOAda jinsiy xatti-harakatlarning motivatsiyasi va samaradorligini oshirish uchun harakat qilishi mumkinligini ko'rsatdiGulia va boshqalar, 2003). Ammo, aksincha, ICV infektsiyalari oreksin-A zaif jinsiy turtki va uyg'onish (Bai va boshqalar, 2009), bir orexin retseptorlari antagonisti jinsiy uyg'otishga hech qanday ta'sir ko'rsatmagan (Bai va boshqalar, 2009), endogen oreksinni ko'rsatib, jinsiy turtki berishda ishtirok etmasligi mumkin. Nihoyat, OR1 tizimiy inyeksiya bilan bloklanganligi faqatgina kopulatma ko'rsatkichini (masalan,Muschamp va boshq., 2007). Ushbu ziddiyatli ishlardan bir nechta xulosalar chiqarilishi mumkin. Birinchidan, exogenous orexin-A ilovasi xatti-harakatlarga ta'sir qilishi mumkin, ammo ORX1 blokadasi katta ta'sir ko'rsatmaydi, bu erkaklar jinsiy xatti-harakatini tartibga solishda endojen orexin uchun ahamiyatsiz rol o'ynaydiBai va boshqalar, 2009). Joriy natijalar ushbu imkoniyatni qo'llab-quvvatlaydi. Oreksinni hujayradan o'ziga xos lezyonlar yordamida olib tashlashni joriy tadqiqotlar endojen orexin jinsiy turtki yoki ishlash uchun zarur emasligini ko'rsatadi. Bai va boshqalar (2009). Shunga qaramasdan, yugurish yo'lakchasida jinsiy turtki bo'lishining orexin lezyonlari ta'sirining yo'qligi jinsiy motivatsiya sinovlaridan oldin jinsiy tajribani olganligi sababli bo'lishi mumkin, shuning uchun uchish-qo'nish testida ta'sir etishmasligi mumkin Erkaklar jinsiy tajribasiga. Kelajakdagi tajribalar, ushbu ogohlantirishni, beozor erkaklarda jinsiy motivlarga ta'sir qilishini tekshirish orqali hal qilishi mumkin.

Bundan tashqari, ikkita orexin ligandlari va orksin retseptorlarining ikki subtipasi (ORX1 va ORX2; Sakurai va boshq., 1998) jinsiy xatti-harakatni boshqa yo'nalishlarda tartibga solishi mumkin. Oreksin hujayra lezyoni texnikasi yordamida, orexin retseptorlari (orexin-A va B) ning har ikkala subtipasi uchun ligandlar mavjud ishda yo'q qilindi. Ikki retseptorlari subtipalari turli miya joylarida ifodalanadi (Trivedi va boshq., 1998; Marcus va boshq., 2001) va kukina bilan bog'liq kokainga mo'ljallangan (Smit va boshq., 2009). Jinsiy xatti-harakatlar bo'yicha avvalgi tadqiqotlar avvalo orexin-A va ORX1 (yuqoridagi munozarani ko'rib chiqing) roliga e'tibor qaratdi. Tadqiqotlar davomida ishlatiladigan orksin retseptorlari antagonisti SB334867, OREXIN-A uchun yuqori ta'sirga ega bo'lgan ORE1 ni aniqlaydi va orexin-B (Sakurai va boshq., 1998). Xuddi shunday, orexin-A avvalgi tadkikotlarda exogen orexin sifatida ishlatilgan (Gulia va boshqalar, 2003; Bai va boshqalar, 2009). Oksin-B va ORX2ning erkak jinsiy xulq-atvorini tartibga solishdagi rolini tadqiq qilish uchun kelajakdagi tadqiqotlar talab qilinadi.

Hozirgi ishda orexinning uzoq muddatli yo'qolishi oqibatlari sinovdan o'tkazildi. Muschamp va boshq. (2007) jinsiy motivatsiya va ish faoliyatini yo'qotishi uchun keksinadan keyin orexinning uzoq muddatli pasayishi mumkinligini ilgari surdi. Ushbu gipoteza mavjud kashfiyotlar bilan ziddiyatga olib keldi, chunki orexin hujayra lezyonlari jinsiy turtki yoki ish faoliyatini kamaytirmadi. Hozirgi tadqiqotda uzoq muddatli orksin yo'qolishi kompensatuar mexanizmlarga olib kelgan bo'lishi mumkin, lekin jinsiy aloqa bilan bog'liq vosita orqali juftlashtirilgan neyron faollashuvida hech qanday o'zgarish aniqlanmagan. Shunga qaramasdan, oreksinning kamayishi yoki etishmasligi jinsiy xulq-atvorning oldini olmaydi. Bundan tashqari, ushbu tadqiqot natijalari cFos ifodasini jinsiy xulq-atvorda indeksatsiyalash uchun orexin uchun muhim rolni qo'llab-quvvatlamaydi. Oksenin VTA-da neyronlarning faollashuviga yordam berishi aniq ko'rsatildiKorotkova va boshq., 2003; Borgland va boshq., 2006; Narita va boshq., 2006; Vittoz va boshq., 2008). Shu bilan birga, oreksin hujayrasi lezyonlari VTA-da juftlashgan neyronlarning faollashuvini blokirovka qilmadi yoki sham erkaklarda faollashtirilgan neyronlarga yaqin joylashgan oreksin-immunoreaktiv tolalar mavjudligiga qaramasdan, mukofot bilan bog'liq boshqa miya hududlarida tahlil qilindi. Shunday qilib, bu miya hududlaridagi juftlashtirilgan neyron faollashuvi orexin ta'siriga bog'liq emas.

Hozirgi tadqiqotning kutilmagan natijasi jinsiy axloqsizlikning jinsiy munosabatda bo'lishiga ko'maklashish, yoki tajribali hayvonlarga ta'sir qilmaslik oqibatlarini keltirib chiqardi. Bu anksiyete kabi xatti-harakatlarning kamayishi bilan bog'liq. Shuning uchun orexin lezyonlarının jinsiy motivasyona va ishlashga ta'siri, tashvish va uyarılma ta'siri bilan ikkinchi bo'lishi mumkin. Haqiqatan ham, avvalgi tadqiqotlar anksiyete uchun orkeksiya rolini taklif qildi, chunki ICV infektsiyasini orexin-A sichqonchasida EPM ning ochiq qo'llarida kamroq vaqtSuzuki va boshqalar, 2005). Orein-A ning eritrotsitlar talamusining paraventrikulyar yadrosiga quyilishi, ochiq maydon xonasining markazida o'tkaziladigan vaqtni pasayishiga va yangi ob'ektni qidirishni kamaytirishga olib keladi, bu esa orksinni xavotirga o'xshash xatti-harakatlar (masalan,Li va boshq., 2010). Bundan tashqari, EPM'de yuqori xavf qabul qilish ko'rsatgan dominant erkak sıçanlarda mPFC'de ORX1 mRNA darajasiniDavis va boshq., 2009). Orexin ham stressga javoblarni o'zgartirishi ko'rsatilgan (Ida va boshq., 1999; Ida va boshq., 2000) va orexin retseptorlarini rag'batlantirish kortikotropinni chiqaruvchi omilni (Barazanji va boshq., 2001; Singareddy va boshq., 2006), kortikosteron (Ida va boshq., 2000; Kuru va boshq., 2000) va adrenokortikotropik gormon (Kuru va boshq., 2000). Orexin antagonistlari hozirda uyqusizlikni davolash uchun klinik mashg'ulotlarda, ko'pincha anksiyete kasalliklari bilan og'rigan bemorlarda (Sullivan va Neria, 2009) va anksiyete bozukluklarını davolash uchun orexin antagonistlerinin potansiyel sifatida foydalanish mumkin bo'lgan varsayımı (Mathew va boshq., 2008). Anksiyete va hayajonli muhitda orexin uchun rolning o'sib borishi haqidagi dalilni hisobga olsak, bu jarohatlar, yangi ogohlantiruvchi vositani, ya'ni ayolni tashvishga soladigan javoblarni kamaytirish orqali naif erkaklarda jinsiy xatti-harakatlarning boshlanishiga olib kelishi mumkin.

Oksin neyronlarning sezilarli faollashuvi, PFA-DMH va LHA-da, jinsi bilan na'muna va tajribali hayvonlarda jinsiy uyg'onish va jinsiy xulq-atvorda namoyon bo'ldi, navbati bilan cFos ifodalovchi orneksin hujayralari 60-80% va 14-33%. Oksin hujayralari populyatsiyasi ichida ornekin neyronal funktsiyasida dichotomiyani qo'llab-quvvatlovchi dalillar mavjud, PFA-DMH esa tanqidiy tarzda uyg'unlashuvga jalb qilingan va LHA mukofot bilan bog'liq xatti-harakatlar uchun muhimdir (Xarris va boshq., 2005; Xarris va Aston-Jones, 2006, Aston-Jones, 2009a). Shunday qilib, PFA-DMH ning orexin hujayralari ayolning stimulyatsiyasi bilan faollashishi orexinning uyg'unlikda faollashishi va o'ta muhimligi, shu jumladan naif va tajribali erkaklar jinsiy uyg'otishi va naif erkaklarda yangi ayolning ruxsati bilan bog'liq tashvishlarning mavjudligi haqidagi gipotezani qo'llab-quvvatlaydi. Biroq, PFA-DMH hujayralari erkaklar tajribasidan va ayolning gormonal holatidan qat'i nazar, shunga o'xshash darajalarda faollashdi, bu PFA-DMH hujayralarining umumiy xushbo'ylik paytida va jinsiy uyg'otish bilan emas, balki faollashishini ko'rsatdi. Bundan tashqari, bizning ishlarimiz butunlay dichotomous orexin hujayra populyatsiyasining mavjudligini to'liq qo'llab-quvvatlamaydi, chunki xatti-harakatlarning mukofoti bilan bog'liqmi-yo'qligiga qaramasdan, jinsiy uyg'onish va ishlashning barcha parametrlari ta'siridan so'ng LHA ning sezilarli faollashuvi kuzatildi. Shunday qilib, anestrous ayolga ta'sir qolgan tajribali erkaklar LHA'da ajralish jarayonida tajribali erkaklar bilan solishtirganda LXA'da teng darajada orneksin hujayrasi aktivatsiyasini ko'rsatdi. Biroq, faqat oxirgi guruh faqat juftlik uchun shartli joyni afzal ko'radi (Tenk va boshq., 2009); zaryadga chalinganlikning boshqa unsurlaridan ko'ra ko'proq pul topishi mumkinligini ko'rsatmoqda. Hozirgi tadqiqot jinsiy mukofotda orexinning rolini aniq tekshirmadi; shuning uchun ushbu savolga javob berish uchun kelgusidagi tadqiqotlar talab qilinadi.

Xulosa sifatida, ushbu tadqiqotlar natijalari, oreksinin jinsiy ishlash yoki motivasyon uchun muhim emasligini ko'rsatadi. Buning o'rniga, anksiyetani kamaytirish uchun orexin hujayralarining lezyonlari namoyon bo'ldi, bu endogen oreksiyani tashvishga solishda ishtirok etishini ko'rsatdi. Bundan tashqari, orexinni olib tashlash jinsiy axloqsizlik bilan bog'liq erkaklarda jinsiy xatti-harakatlarning boshlanishiga ko'maklashishga olib keldi va endogen oreksin juftlashning boshlanishiga to'sqinlik qilishi mumkinligini ko'rsatib, ehtimol yangi ogohlantirishga, ya'ni ayolga nisbatan tashvish tug'diradi. Bu topilmalar jinsiy ishlash va xavotirda ishtirok etgan neyron devorlarni aniqlab beradi va xushchaqchaqlik va xavotirlik vositachiligida orexinning rolini oshirishga qaratilgan adabiyotning kengayishiga olib keladi.

Rahmatlar

Tadqiqot Sog'liqni saqlash milliy institutlari (R01 DA014591), Kanada sog'liqni saqlash tadqiqot institutlari (RN 014705) va Kanada milliy fanlar va muhandislik tadqiqotlari kengashi (LNMX) tomonidan ochilgan granti (341710) tomonidan taqdim etildi.

Izohlar

Nashriyotdan voz kechish: Bu nashrga qabul qilingan qabul qilinmagan qo'lyozma faylining PDF-fayli. Mijozlarimizga xizmat sifatida biz qo'lyozmaning ushbu dastlabki versiyasini taqdim etmoqdamiz. Qo'lyozma nusxa ko'chirish, nusxa olish va uning yakuniy shaklida nashr etilishidan oldin tasdiqlangan hujjatlarni ko'rib chiqadi. Iltimos, ishlab chiqarish jarayonida kontentga ta'sir qilishi mumkin bo'lgan xatolar aniqlanishi mumkin va jurnalga tegishli bo'lgan barcha qonuniy ogohlantirishlar tegishlidir.

Manbalar

  1. Agmo A. Erkaklar jinsiy aloqada bo'lishadi. Brain qobig'i Brain qoldiqlari protokoli. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Barazanji KA, Wilson S, Beyker J, Jessop DS, Harbuz MS. Markaziy orexin-A gipotalamus-pituiter-adrenal eksa faollashadi va ongli kalamushlarda hipotalamik kortikotropinni chiqaruvchi omil va arginin vazopressin neuronlarini rag'batlantiradi. J Neuroendokrinol. 2001; 13: 421-424. [PubMed]
  3. Aston-Jones G, Smit RJ, Moorman DE, Richardson KA. Yaxshilangan hipotalamik orexin neyronlarning mukofotni qayta ishlash va narkomaniyaga bo'lgan o'rni. Neyrofarmakologiya. 2009a; 56 Suppl 1: 112-121. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  4. Aston-Jons G, Smit RJ, Sartor GC, Moorman DE, Massi L, Tamsili-Fahadan P, Richardson KA. Lateral gipotalamus oreksin / gipokretin neyronlari: mukofotlash va o'ziga xoslikdagi rol. Brain Res. 2009b; 1314: 74-90. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  5. Bai YJ, Li YH, Zheng XG, Xan J, Yang XY, Sui N. Orexin A erkak ratlarda shartsiz jinsiy turtki kuchaytirmoqda. Farmakol Biochem Behav. 2009; 91: 581-589. [PubMed]
  6. Gipotalamusning kimyoviy jihatdan aniqlangan neyronlaridagi Bekckberg M, Xervie G, Wilson S, Meister B. Orexin retseptorlari-1 (OX-R1) immunoreaktivligi: oziq-ovqat va suvni iste'mol qilishni nazorat qilish bilan shug'ullanadigan oreksin maqsadlariga e'tibor qarating. Eur J. Neurosci. 2002; 15: 315-328. [PubMed]
  7. Baldo BA, Doniyor RA, Berrić CW, Kelley AE. Oksin / hipokretin- va dopamin-beta-gidroksilaz immunoreaktiv tolalarning miya miya hududlarida uyg'unlashuvi, motivatsiyasi va stressini keltirib chiqaruvchi dağılımları. J Comp neurol. 2003; 464: 220-237. [PubMed]
  8. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Jinsiy xulq-atvor va jinsga bog'liq ekologlar erkakning kalamushlarida mezolimbik tizimni faollashtiradi. Neyropopsikofarmakologiya. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  9. Benoit SC, Tracy AL, Davis JF, Choi D, Klego DJ. Oreksigenik gipotalamik peptidlarning yangi funktsiyalari: genlardan xulq-atvorga qadar. Oziqlanish. 2008; 24: 843-847. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  10. Vorgida Borgland SL, Taha SASF, Fields HL, Bonci A. Orexin A kokainda sinaptik plastisite va xulq-atvori sezgirligi uchun juda muhimdir. Neyron. 2006; 49 (4): 589-601. [PubMed]
  11. Boutrel B, Cannella N, de Lecea L. Hipokretinin rolik va maqsadga yo'naltirilgan xulq-atvorda roli. Brain Res. 2009 [PMC bepul maqola] [PubMed]
  12. Boutrel B, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Marko A, Koob GF, Lecea L. Qo'qonlarni qidirishda stressni keltirib chiqaradigan vositalarni bartaraf etishda gipokretinning roli. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 2005; 102: 19168-19173. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  13. Broberger C, De Lecea L, Sutcliffe JG, Hokfelt T. Hypocretin / orexin- va melanin-konsentrlangan gormonlarni ifodalovchi hujayralar kemiruvchi lateral gipotalamusda alohida populyatsiyalar hosil qiladi: Y va agouti gen bilan bog'liq protein tizimlariga aloqasi. J Comp neurol. 1998; 402: 460-474. [PubMed]
  14. Carter ME, Borg JS, de Lecea L. Miya gipokretinlari va ularning retseptorlari: allostatik yutuqlarning mediatorlari. Curr Opin Pharmacol. 2009; 9: 39-45. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  15. Chemelli RM, Villi JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Li S, Richardson JA, Uilyams SC, Xiong Y, Kisanuki Y, Fitch TE, Nakazato M, Hammer RE, Saper CB, Yanagisawa M. Narcolepsy orexin knockout sichqonchasida : uyqu rejimini molekulyar genetika. Hujayra. 1999; 98: 437-451. [PubMed]
  16. Chen CT, DUN SL, Kwok EH, Dun NJ, Chang JK. Sichqoncha miyasida Orexin A kabi immunoreaktivlik. Neurosci Lett. 1999; 260: 161-164. [PubMed]
  17. Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. Oziq-ovqatni rag'batlantirish, mukofotga asoslangan oziqlantirish xatti-harakatlarida va sichqonlarda oziq-ovqat bilan bog'liq bo'lgan nöronal faollashishda orexin-A ning ahamiyati. Neuroscience. 2010; 167: 11-20. [PubMed]
  18. Davis JF, Krause EG, Melhorn SJ, Sakai RR, Benoit SC. Dominant kalamushlar tabiiy xavf-xatarlarga duchor bo'lib, oziq-ovqat mukofoti uchun motivatsiyani oshiradi. Neuroscience. 2009; 162: 23-30. [PubMed]
  19. ham Lecea L, Jones BE, Boutrel B, Borgland SL, Nishino S, Bubser M, DiLeone R. Qo'shadi va xavotir: gipotalamik peptidlarning muqobil rollari. J. Neurosci. 2006; 26 (41): 10372-10375. [PubMed]
  20. Lecea L, Kilduff vagon, Peyron C, Gao X, Foye pe, Danielson pe, Fukuhara C, Battenberg EI, Gautvik VT, Bartlett FS, 2nd, Frankel WN, van dan Pol AN, Bloom FE, Gautvik KM, Sutcliffe JG. Hipokatalin: hipotalamusga xos peptidlar, neyroexekitoriya faoliyati bilan. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 1998; 95: 322-327. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  21. Dewsbury DA. Oldindan nusxa ko'chirish tajribasining vazifasi sifatida kalamushlarni (Rattus norvegicus) nusxa ko'chirish harakati. Anim Behav. 1969; 17: 217-223. [PubMed]
  22. Fadel J, Deutch AY. Oreksin-dopamin ta'sirining anatomik substratlari: ventral tegmental hududga lateral gipotalamik proektsiyalar. Neuroscience. 2002; 111: 379-387. [PubMed]
  23. Frederik-Duus D, Guyton MF, Fadel J. Kortikal asetilkolinni chiqarib yuborishda oziq-ovqatning oshishi ortishiga olib keladi. Neuroscience. 2007; 149: 499-507. [PubMed]
  24. Furlong TM, Carvis P. Periferik gipotalamusga asoslangan neyrotoksik lezyonlar konditsioner qo'rquvning kardiovaskulyar va xatti-harakatlariga kontekstga emas, balki cheklovga barham beradi. Brain Res. 2007; 1128: 107-119. [PubMed]
  25. Furlong TM, Vianna DM, Liu L, Carrive P. Hypocretin / orexin ba'zi bir ifoda etishiga yordam beradi, ammo stress va uyg'unlikning barcha shakllari emas. Eur J Neurosci. 2009; 8: 1603-1614. [PubMed]
  26. Gerashchenko D, Koxls MD, Greko M, Waleh NS, Salin-Paskal R, Klduff TS, Lappi DA, Shiromani PJ. Hipokretin-2-soporinning lateral gipotalamusli lezyonlari elinlarda narkoleptik shunga o'xshash uyqu harakatlarini hosil qiladi. J Neurosci. 2001; 21: 7273-7283. [PubMed]
  27. Gulia KK, Mallick HN, Kumar VM. Medial preoptik sohada Orexin A (hipokretin-1) ilovasi kalamushlarda erkaklar jinsiy xarakatini kuchaytiradi. Neuroscience. 2003; 116: 921-923. [PubMed]
  28. Hagan JJ, Leslie RA, Patel S, Evans ML, Vattam TA, Holmes S, Benham CD, Teylor SG, Routledge S, Hemmati P, Munton RP, Ashmeade TE, Shoh AS, Hatcher JP, Hatcher PD, Jones DN, Smit MI , Piper shahar, Hunter AJ, Porter RA, Upton N. Orexin A lokus koeruleus hujayra olovini faollashtiradi va sichqonchani uyg'otadi. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 1999; 96: 10911-10916. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  29. Harris GC, Aston-Jones G. Arousal va mukofot: orexin funktsiyasidagi ikkiyoqlama. Trends Neurosci. 2006; 29: 571-577. [PubMed]
  30. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Xarajatlarni izlashda lateral hipotalamik yokieksin neyronlari uchun rol. Tabiat. 2005; 437 (7058): 556-559. [PubMed]
  31. Horvath TL, Peyron S, Diano S, Ivanov A, Aston-Jones G, Kilduff TS, van Den Pol AN. Lokus koeruleus noradrenerjik tizimining hipokretin (oreksin) faollashuvi va sinaptik innervatsiyasi. J Comp neurol. 1999; 415: 145-159. [PubMed]
  32. Ida T, Nakahara K, Katayama T, Murakami N, Nakazato M. Yallig'lantiruvchi nevropeptid, oreksin va nevropeptidning lateral serebroventrikulyar enjeksiyasini kalamushlarning turli xil harakatlarga ta'siri. Brain Res. 1999; 821: 526-529. [PubMed]
  33. Ida T, Nakahara K, Murakami T, Hanada R, Nakazato M, Murakami N. Sichqonlarga stress reaktsiyasida orksinning ishtirok etishi mumkin. Biochem Biophys Res Commun. 2000; 270: 318-323. [PubMed]
  34. Korotkova TM, Sergeeva OA, Eriksson KS, Haas HL, Brown RE. Oreksinlar / gipokretinlar tomonidan ventral tegmental hududni dopaminerjik va nondopaminerjik neyronlarni chaqirish. J Neurosci. 2003; 23 (1): 7-11. [PubMed]
  35. Sichqoncha markazida boshqariladigan oreksin / gipokretin HPA oqi faollashtiradi. Quruq, M, Ueta Y, Serino R, Nakazato M, Yamamoto Y, Shibuya I, Yamashita H. Neuroreport. 2000; 11: 1977-1980. [PubMed]
  36. Li Y, Li S, Vey S, Vang X, Sui N, Kirouac GJ. Talamusning paraventrikulyar yadrosida orexin mikroinjeksiyonları tomonidan ishlab chiqarilgan hissiy munosabatda o'zgarishlar. Farmakol Biochem Behav. 2010; 95: 121-128. [PubMed]
  37. Uyqunlik buzilishi ximoyasi narkolepsiyasiga hypocretin (orexin) retseptorlari 2 geni mutatsiyasiga sabab bo'ladi, chunki u Lin L, Faraco J, Li R, Kadotani H, Rogers V, Lin X, Qiu X, de Jong PJ, Nishino S, Mignot E. . Hujayra. 1999; 98: 365-376. [PubMed]
  38. Lopez HH, Olster DH, Ettenberg A. Erkak ratidagi jinsiy motivatsiya: birlamchi imtiyozlarning roli va nusxa ko'chirish tajribasi. Horm Behav. 1999; 36: 176-185. [PubMed]
  39. Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee Idoralar, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M, Elmquist JK. Sichqoncha miyasida ornosin retseptorlari 1 va 2ning differentsial ifodasi. J Comp neurol. 2001; 435: 6-25. [PubMed]
  40. Martin G, Fabre V, Siggins GR, de Lecea L. Nukleus akumbensidagi neyrotransmitterlar bilan hipokretinlarning o'zaro ta'siri. Regul Pept. 2002; 104: 111-117. [PubMed]
  41. Mathew SJ, narx RB, Charney DS. Anksiyete bozukluklarının nörobiyolojisindeki so'nggi o'zgarishlar: yangi terapötikler uchun oqibatlarga. Am J Med Genet S Semin Med Genet. 2008; 148C: 89-98. [PubMed]
  42. Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shoh RY, Hull EM. Erkaklar jinsiy xulq-atvorda gipokretin (oreksin) uchun rol. J Neurosci. 2007; 27: 2837-2845. [PubMed]
  43. Nair SG, Golden SA, Shaham Y. 1 retseptorlari antagonisti SB 334867 ning yuqori yog 'bilan oziq-ovqat mahsulotlarini o'z-o'zini boshqarish va kalamushlarda oziq-ovqat izlashni tiklashiga ta'sir qilishi. Br J Pharmacol. 2008; 154: 406-416. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  44. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Xotib J, Miyatake M, Sakuray T, Yanagisava M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Mesolimbik dopamin yo'lini faollashtirishda orexinergik tizimlarning bevosita ishtiroki va morfin bilan bog'liq bo'lgan xulq-atvori. J Neurosci. 2006; 26: 398-405. [PubMed]
  45. Nishino S, Ripley B, Overeem S, Lammers GJ, Mignot E. Inson narkolepsiyasida gipokretin (oreksin) etishmovchiligi. Lancet. 2000; 355: 39-40. [PubMed]
  46. Paxinos G, Watson S Stereotaksik koordinatlarda Rat Brain. San-Diego, CA: Academic Press; 1998.
  47. Peyron S, Faraka J, Rogers V, Ripley B, Overeem S, Charnay Y, Nevsimalova S, Aldrich M, Reynolds D, Albin R, Li R, Hungs M, Pedrazzoli M, Padigaru M, Kucherlapati M, Fan J, Maki R , Lammers GJ, Bouras C, Kucherlapati R, Nishino S, Mignot E. Erta boshlangan narkolepsi va narkoleptik beyinlerde hipokretin peptidlerinin keng tarqalgan yo'qligi bilan bog'liq bir mutatsiya. Nat Med. 2000; 6: 991-997. [PubMed]
  48. Peyron C, Tighe DK, van dan Pol AN, Lecea L, Heller HC, Sutklif JG, Kilduff TS. Ko'p nöronal tizimlarga hypocretin (orexin) loyihasi bo'lgan neyronlar. J Neurosci. 1998; 18: 9996-10015. [PubMed]
  49. Sakurai T. Oziqlanish xatti-harakati va energiya homeostazasini markaziy tartibga solishda orexin va orexin retseptorlari rollari. CNS Nörolox Dori Dori Maqsadlari. 2006; 5: 313-325. [PubMed]
  50. Sakuray T. Oreksin neyron plyus (hipokretin): uyqu va uyg'unlikni saqlab qolish. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 171-181. [PubMed]
  51. Sakurai T, Amemiya A, Ishiy M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka X, Uilyams SC, Richardson JA, Kozlowski GP, Wilson S, Arch JR, Bukingem RE, Haynes AC, Carr SA, Annan RS, McNulty, DE, Liu WS , Terret JA, Elshourbagy NA, Bergsma DJ, Yanagisava M. Oreksinlar va orexin retseptorlari: gepotalamik neuropeptidlar va oziqlantirish xatti-harakatini tartibga soluvchi G protein bilan bog'langan retseptorlari. Hujayra. 1998; 92: 573-585. [PubMed]
  52. Preoptika hududining muscimol perfüzyonu so'ng, orexin nöronlarda FOS ekspresyonu Satoh S, Matsumura H, Fujioka A, Nakajima T, Kanbayashi T, Nishino S, Shigeyoshi Y, Yoneda H. Neuroreport. 2004; 15: 1127-1131. [PubMed]
  53. Siegel JM. Narcolepsy: Hipokretinlar (orexinlar) uchun muhim rol. 1999; 98: 409-412. [PubMed]
  54. Singareddy R, Uhde T, Komissar R. Hipokretinlarning shov-shuvli ta'sirlarga nisbatan salbiy ta'sirlari Fiziol Behav. 2006; 89: 650-655. [PubMed]
  55. Smit RJ, RE, Aston-Jones G. ga qarang. Oreksin 1 retseptorlari orqali Orexin / gipokretin signalizatsiyasi kookin-koidalar bilan bog'langan kokainga mo'ljallangan. Eur J Neurosci. 2009; 30: 493-503. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  56. Solomon A, De Fanti BA, Martinez JA. Periferik grelin glyukostatik signallarda orexin neyronlari bilan o'zaro ta'sir qiladi. Regul Pept. 2007; 144: 17-24. [PubMed]
  57. Sullivan GM, Neria Y. Shikastlanishdan keyingi stress buzilishida farmakoterapiya: tasodifiy boshqariladigan tekshiruvlardan dalillar. Curr Opin Investig giyohvand moddalari. 2009; 10: 35-45. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  58. Suzuki M, Beuckmann CT, Shikata K, Ogura H, Sawai T. Orexin-A (hipokretin-1), ehtimol, xavotirga o'xshash xulq-atvorda ishtirok etishi mumkin. Brain Res. 2005; 1044: 116-121. [PubMed]
  59. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Erkak kalamushlarida jinsiy mukofotlar: jinsiy tajribaning bo'shliq va aralashuv bilan bog'liq shartli joyga bog'liq imtiyozlarga ta'siri. Horm Behav. 2009; 55: 93-97. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  60. Thannickal TC, Mur RY, Nienhuis R, Ramanathan L, Gulyani S, Aldrich M, Cornford M, Siegel JM. Inson narkolepsiyasida kam sonli hipokretin neyronlarning soni. Neyron. 2000; 27: 469-474. [PubMed]
  61. Thorpe AJ, Cleary JP, Levine AS, Kots CM. Sichqoncha ichidagi shirin pelletlar uchun motivatsiya oshiriladi. Psixofarmakologiya (Berl) 2005; 182: 75-83. [PubMed]
  62. Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, Guan XM. Sichqon miyasida mRNA ning orexin retseptorlari tarqalishi. FEBS Lett. 1998; 438: 71-75. [PubMed]
  63. Vittoz NM, Schmeichel B, Berridge CW. Hypocretin / orexin imtiyozli ravishda kaudomedial ventral tegmental hududni dopamin neyronlarini faollashtiradi. Eur J Neurosci. 2008; 28: 1629-1640. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  64. Volgin DV, Swan J, Kubin L. Bitta hujayrali RT-PCR gen ekspresyonini keskin tarzda aniqlash. dissotsiatsiyalangan va immunitetokimyoviy aniqlangan markaziy neyronlar. J. Neurosci usullari. 2004; 136: 229-236. [PubMed]