Curr Neuropharmacol. 2011 mart 9 (1): 63-67.
Ushbu maqola tomonidan keltiriladi PMCdagi boshqa maqolalar.
mavhum
Ushbu tadqiqotning maqsadi, nikotin va metamfetamindan chiqarib yuborilganda miya mukofotining funktsiyasi kamayib ketishini tekshirish va bu mukofot funktsiyasining bu dori vositalaridan olib qo'yilishi paytida nafrat bilan bog'liqligini tekshirish. Shu maqsadda, erkak Sprague-Dawley kalamushlari kuniga xNUMX mg / kg nikotin bilan, yoki osmotik minipumps yordamida kuniga 9 mg / kg bilan metamfetamin bilan teri ostiga surilib borildi. Intracranial self-stimulation (ICSS) paradigmida, nikotin va metamfetaminning surunkali infuzioni lateral hipotalamik ICSS uchun eshiklarni pasaytiradi, ularning antagonistlari, mecamilamin va haloperidol, navbati bilan nikotin va metamfetamin bilan davolash qilingan kalamushlarda ICSS chegara qiymatini oshirdi. Konditsioner joylashtirilgan paradigmada mecamilamin va haloperidol nikotin va metamfetamin bilan infektsiyalangan kalamushlarda mos keladi. Qiziqarli tomoni shundaki, ICSS-ning eng yuqori darajadagi chegara punktlari va meksamilamin-nikotinni chiqarib tashlashda xafagarchiliklar haloperidol-cho'kindi metamfetamin chiqishi davomida kuzatilgani kabi deyarli bir xil bo'lgan. Ushbu tadqiqot, nikotin va metamfetamin chiqishi paytida 6) beyin funktsiyasi funktsiyasi kamayganligini va mukofot vazifasini pasayishi nikotin va metamfetamindan chiqarib yuborilganda salbiy ta'sir holatini aks ettirishi mumkinligini ko'rsatadi (1).
1. Kirish
Klinik dalillar shuni ko'rsatadiki, abstinent sindromining affektiv belgilari giyohvand iste'mol qilish va kompulsiv giyohvandlikka qayta tiklash uchun ko'proq ahamiyatga ega bo'lishi mumkin,1-3]. Shuning uchun giyohvandlikka bog'liqlikning ta'sirchan tomonlari har xil eksperimental paradigmalar yordamida keng qamrovli tarzda tekshirildi. Ular orasida intrakranial o'z-o'zidan ogohlantirish usuli (ICSS) miya mukofotini o'lchash funktsiyasi uchun keng qo'llaniladi. Hayvonlarni tadqiq qilishda, suiiste'mol dori-darmonlarini o'tkir usulda qo'llash ICSS mukofotining chegara qiymatini kamaytiradi [4, 5] va stimulyatsiya uchun bu yuqori sezuvchanlik dori-darmonli eforiya o'lchovidir [6]. Bundan tashqari, ICSS mukofotining miya mukofot tizimlarining neuroadapted o'zgarishlari natijasida dori-darmonlarni muntazam qo'llash orqali zaiflashishi mumkin va bu preparatning olib tashlanishi vaqtida disforiyani aks ettiradi [7, 8]. Ko'plab tadqiqotlarda amfetamin, shu jumladan, turli turdagi giyohvandlik moddalari olib tashlanganda,9], giyoh [6], opiatlar [10], o'rganish [11] va nikotin [12], ularning barchasi yuqorida keltirilgan farazni qo'llab-quvvatlaydi. Shu sababli, ushbu tadqiqot ICSS-ning mukofot imtiyozlarini ko'tarilishi, psixostimulyator, nikotin va metamfetaminning ikkita turiga alohida e'tibor qaratilgan salbiy ta'sirchan vaziyatga bog'liqligini aniqlash uchun mo'ljallangan.
2. MATERIALLAR VA USLUBLAR
2.1. Hayvonlar
Clea Japan Inc. (Tokio) dan olingan yetmish ikki erkak Sprague-Dawley kalamush (332-396 g) 22 / 2 ning engil / qorong'i aylanishi bilan belgilangan alohida haroratda (12 ± 12 ºC) hayvon xonasida joylashtirilgan soat (8 da yonadi: 00 AM). Har bir ertak 15 kun oldin va 3 kundan keyin eksperiment davomida kuniga 7 g oziq-ovqat bilan ta'minlangan (erkin suv bilan ta'minlangan). Ushbu tajriba Jikei universitetining tibbiyot fakulteti laboratoriya hayvonlarini parvarish qilish tamoyillariga muvofiq amalga oshirildi.
2.2. Giyohvand moddalar
(Sigma, Sent-Luis, MO, AQSh), meksamilamin gidroxlorid (Sigma), (-) metamfetamin gidroxlorid (Dainipponn Seiyaku, Yaponiya) va haloperidol gidroxloridi (Sigma) sho'r suv bilan eritilib, 1.0 ml / kg hajmlari.
2.3. İntrakraniyal o'z-o'zini ta'minlash
2.3.1. Qurilma
Bir qo'li va qo'lning ustidagi nishon yoritgichi bilan jihozlangan 29.5 (V) x 23.5 (L) x 28.7 (H) sm (ENV-008; Med Associates, Inc., St Albans, VT, AQSh) ning standart operativ xonasi old devorda va orqa devorda uyning nuri ishlatilgan. Sidewalls shaffof Plexiglasdan tayyorlangan.
2.3.2. Jarrohlik
Sichqoncha natriy pentobarbital (XNUMxmg / kg, ip) bilan behush holatga keltirildi va lateral gipotalamusda zanglamaydigan po'latdan bipolyar elektrod (Neuroscience, Yaponiya) bilan tayyorlandi (bemorlarga 50mm orqadan koordinat, 3.8mm lateraldan o'rta chiziqqa, 1.4mm ventral to dura) Paxinos va Watson atlasiga [13]. Mumkin assimetriyalarni muvozanatlash uchun, yaralarning yarmi miyaning o'ng tomoniga implantlar, ikkinchisi chap tomonda edi.
2.3.3. Jarayonlar
ICSS o'quv mashg'ulotlarida uyning yorug'ligi va nishon nuri yoqilgan va sichqonchani qo'lni bosganidan so'ng har gal elektr signallari berilgan. Stimulyatorlar 1.5 mts - 100 μs uchun 150 μA uchun sobit bo'lgan oqim bilan 120 Hz tomonidan etkazilgan 15 msec to'rtburchaklar katodal pulslardan iborat. Har bir mashg'ulot 6 daqiqa davom etdi. ICSS ta'limi kamida 30 kun uchun berildi va qo'lda matbuot soni 3 kun ketma-ketligi uchun XNUMX dan ortiq bo'lganiga qadar davom etdi.
ICSSga javob berishning asosiy bosqichini o'lchash uchun har bir ICSS chegara testidan oldin 15 min uchun dastlabki sinov o'tkazildi. Dastlabki sinovdan o'tish tartibi ICSS treningida bo'lgani kabi bir xil edi. ICSS chegirmasi sinovi 11 daqiqadan 3 daqiqadan ajratilgan 1 daqiqalaridan iborat edi. Vaqt o'tishi bilan uyning yorug'ligi va nishon chiroqlari o'chirilgan. Har bir test stantsiyasida bu chiroqlar yoqilgan va har bir qo'lni bosgandan so'ng kalamushlar elektr stimulyatsiyasini oldilar. Omborlar bo'ylab elektr stimulyatsiya oqimi 10 mAA dan 120 mAA ga kamayib, kamida bir marta 20 mA ga kamaydi.
Barcha minalar uchun minppumplarni implantatsiyadan oldin ICSSga javob berishning qat'iy bazasi o'rnatildi. 1 kunida salmonda nikotin yoki metamfetamin bilan to'ldirilgan 2001 mi / h oqim tezligi bilan ozmotik minipump (Alzet 1.03, Alza korporatsiyasi, KA, AQSh) dietileter bilan anesteziya qilingan kalamushlarda teri ostiga implantatsiyalangan edi. Nikotin va metamfetamin kontsentratsiyasi tana vaznidagi farqlar uchun o'rnatildi, lekin taxminan 116 va 77.3 mg / ml bo'lib, nikotinga kuniga 9 mg / kg miqdorida va 6 mg / kg tezlikda doimiy teri osti infuziyasiga olib keldi avvalgi tekshirish usuli bo'yicha metamfetaminning kuniga [14]. ICSS chegara testi kunduzi 2, 4 va 6 da minipumpslarni joylashtirilgandan so'ng amalga oshirildi.
Minipump joylashtirilgandan keyin kuniga 7da kalamushlar nikotin va sho'r-to'yingan guruhlarda meksamilamin (0.0, 0.1, 0.5, 1.0 mg / kg, sc) yoki haloperidol (0.0, 0.1, 0.25, 0.5 mg / kg, SC) metamfetamin va sho'r moddalar bilan to'ldirilgan guruhlarda ICSS chegara test sessiyasining boshlanishidan oldin 15 min ichida, Lotin-kvadrat konstruktsiyani qo'llagan holda. Hayvonlar keyinchalik antagonist yoki vosita in'ektsiyasiga qadar kamida bitta ICSS sessiyasi uchun asosiy ICSS chegara darajalariga qaytishi kerak edi.
2.3.4. Histologiya
Ratlar natriy pentobarbital tomonidan chuqur behushlik bilan qurbon qilingan. Miya olib tashlandi va 10% formaldegid eritmasida saqlandi. Miya 100 mkm qalinligida kesilgan va elektrodning uchi mikroskopik tekshiruvdan o'tkazilgan.
2.4. Vaziyatni joylashtirish
2.4.1. Apparatus
Konditsioner Suzuki uslubiga ko'ra o'tkazildi va boshq. [15, 16]. Apparat bir shkaf qutisi (30 × 60 × 30 sm: w × l × h) dan iborat bo'lib, u ikki o'lchovli teng hajmga bo'lingan. Bir xonada tekislangan qavat oq edi, ikkinchisi esa tekis zaminli qora edi.
2.4.2. Jarayonlar
1 kunida, kalamushlar ICSS o'rganish uchun ta'riflanganidek, xuddi shunday sharoitlarda nikotin, metamfetamin yoki sho'r-ichiga ozmotik minipumps bilan tayyorlangan.
9 kunida nikotin yoki metamfetamin infuzionida ertalab (00: 7) sinov dori (mecamilamin yoki haloperidol) yoki sho'r (1.0 ml / kg) antagonisti teri ostiga AOK qilindi va darhol 60 daqiqa sinov qurilmasi. Kechqurun (21: 00), xuddi shu kuni, kalamushlarni sho'r yoki antagonist (mecamylamine yoki haloperidol) bilan muomala qilingan va 60 min uchun boshqa xonaga joylashtirilgan. In'ektsiya (antagonist yoki sho'rsin) va xonaning (oq yoki qora) juftligi barcha sub'ektlar bo'yicha muvozanatlashgan. Nikotin, metamfetamin va sho'r-quyuq guruhlardagi nazorat kalamushlari shamollash davrida mecamilamin yoki haloperidol o'rniga sho'rlangan eritraga kiritildi. Sho'rlangan in'ektsiyalardan so'ng, kalamushlar ertalab bir xonaga va kechqurun boshqa xonaga joylashtirilgan.
8 kuni ertalab, shamollatish sinovlari quyidagicha amalga oshirildi: ikkita bo'linmani ajratib bo'luvchi taglikdan 12 santimetrga ko'tarildi va neytral platforma bo'laklarni ajratib turuvchi daryo bo'yiga o'rnatildi. 900 sessiyasidagi har bir xonada o'tkaziladigan vaqt infraqizil nur sensori tomonidan avtomatik ravishda o'lchandi (kn-80, Natsyme Seisakusho, Tokio, Yaponiya).
2.5. Somatik pulni olish belgilarini baholash
ICSS eksperimentida, har bir kalamush silindrsimon plastmassa kuzatuv kamerasiga joylashtirildi, shundan so'ng ICSS-ning sovg'a eshiklari majmuasi meksamilamin yoki haloperidolni qo'llashdan so'ng va 10 daqiqa davomida badandagi olib tashlash belgilari kuzatildi. Somatik ajralish belgilarini baholashda, nikotin yoki metamfetaminni yo'qotish uchun o'zgartirilgan, opiyat-abstinans shkalasi yordamida utilizatsiya belgilarining chastotasi qayd etildi [1]. Eksperimentchilar har bir ćolatni davolashda ko'r bo'lgan. CPP eksperimentida somatik ajralish belgilari, ICSS eksperimentida bo'lgani kabi, CPP apparatida somatik abstinent belgilari kuzatilganligini hisobga olish bilan bir xil tarzda kuzatildi.
2.6. Ma'lumotlarni tahlil qilish
ICSSga javob berish o'lchovi uchun o'lchov sifatida har bir binaga minimal kuchlanish miqdori ishlatilgan. Sinov kunlari, har bir elektr tokining kuchaytirilishi, o'sha kundan boshlab olinadigan bazaning foiziga aylantirildi. ICSS chegara qiymatini aniqlash uchun S-shakl egri sigmoid-Gompertz modeliga ko'ra alohida o'rnatildi. Ushbu modeldan foydalanib, dastlabki javobning 50% ni indiren elektr tokini ICSS chegara sifatida aniqlandi. Barcha ma'lumotlar ANOVAda davolanish sharoitlarining statistik jihatdan ahamiyatli ta'sirini kuzatishdan so'ng, ikki tomonlama interaktiv chastotalar yordamida farqni tahlil qilish (ANOVA) va keyin Tukey ning Studentized Interval uslubi yordamida tahlil qilindi.
Konditsionerlik ballari giyohvand moddalar bilan bog'langan joyda transport vositasi bilan bog'langan joyda kam vaqt sarflagan vaqtni bildiradi va o'rtacha ± SEM sifatida ifodalanadi. Xatti-harakatlar ma'lumotlari ikki tomonlama takroriy me'yoriy ANOVA bilan baholanadi, bu aniqlash uchun ishlatilgan. davolashni antagonist bilan indikatsiyaga uchragan joyga ta'siri. ANOVA muhim ta'siri borligini ko'rsatganida, Tukey ning Studentized Interval uslubiga qo'shimcha tahlil qilindi.
3. Natijalar
3.1. ICSS eshiklari
Surunkali davolash vaqtida nikotin (F (2, 35) = 5.28, P<0.01) va metamfetamin (F (2, 35) = 7.62, P<0.01) ICSS mukofotining cheklovlari sezilarli darajada kamaydi. Shaxsiy vositalarni taqqoslash nikotin bilan infuzionning 4-kuni va 5-kunida sezilarli ta'sir ko'rsatdi (P<0.05) va metamfetamin infuziyasining 2-kuni, 4-kuni va 5-kuni (P
Shakl11), surunkali nikotin bilan to'yingan va metamfetamin bilan to'ldirilgan kalamushlarda, mecamilaminF (1, 47) = 9.59, P<0.01) va haloperidol (F (1, 47) = 10.64, P<0.01) navbati bilan ICSS mukofot chegaralarida sezilarli ko'tarilishlarni keltirib chiqardi. Shaxsiy vositalarni taqqoslashda 1.0 mg / kg mekamilaminda sezilarli ta'sir ko'rsatildi (P<0.05) va 0.25 va 0.5 mg / kg haloperidol (P<0.05). Nikotin quyilgan kalamushlarda ham dozaning sezilarli ta'siri bo'lmagan (F (3, 47) = 1.87, P> 0.05) yoki metamfetamin quygan kalamushlarda (F (3, 47) = 2.24, P> 0.05) yoki nikotin quyilgan kalamushlarda davolanish × dozali o'zaro ta'sir (F (3, 47) = 1.56, P> 0.05) yoki metamfetamin quygan kalamushlarda (F(3, 47) = 1.77, P> 0.05).
3.2. Konditsioner joylashadigan joy (CPA)
Shakl22), sho'r-nazorat faralari ikkala oraliq uchun ham afzal ko'rilmagan. Makelamilin va haloperidol sho'rlangan infektsiyali kalamushlarda muhim ahamiyatga ega bo'lgan joyni afzal ko'rmaydilar yoki joydan chiqmaydi. Boshqa tomondan, mecamtlamine (F (1, 47) = 8.62, P<0.01) va haloperidol (F (1, 47) = 11.28, P<0.01) surunkali nikotin va metamfetamin quygan kalamushlarga mos keladigan nafratni keltirib chiqardi. 1.0 mg / kg mecamylamine-da sezilarli darajada joy nafratlanish kuzatildi (P<0.01) va 0.25 va 0.5 mg / kg haloperidol (P <0.05 va P <0.01). Nikotin quyilgan kalamushlarda ham dozaning sezilarli ta'siri bo'lmagan (F (3, 47) = 1.98, P> 0.05) yoki metamfetamin quygan kalamushlarda (F (3, 47) = 2.56, P> 0.05) yoki nikotin quyilgan kalamushlarda davolanish × dozali o'zaro ta'sir (F (3, 47) = 1.74, P> 0.05) yoki metamfetamin quygan kalamushlarda (F (3, 47) = 2.28, P> 0.05).
3.3. Somatik belgilar
Somatik belgilarning umumiy miqdori nikotin va sho'rlangan ishqorlar orasida meksamilinni yuborish paytida yoki ICSS eksperimentida farq qilmadi (F (1, 47) = 2.02, P> 0.05) yoki CPA tajribasida (F (1, 47) = 1.87, P> 0.05). Bundan tashqari, ular haloperidolni yuborishda metamfetamin va sho'r suv bilan ishlangan kalamushlar orasida ham ICSS tajribasida farq qilmagan (F (1, 47) = 1.53, P> 0.05) yoki CPA tajribasida (F (1, 47) = 2.33, P> 0.05).
3.4. Histologik tahlil
Histologik tahlil natijalari ko'rsatadiki, elektrod uchlari oldingi / orqa oraliqda - xNUMX dan -3.84 mmgacha bregma oralig'ida lateral gipotalamus hududida joylashgan. Elektrodning nazorat qilish va eksperimental hayvonlarning joylashuvi o'rtasida hech qanday farq yo'q edi (6-rasm). 33).
4. Munozara
Tadqiqot natijalari shuni ko'rsatmoqdaki, nikotin va metamfetaminning surunkali administratsiyasi ICSS mukofotining chegara darajasini pasaytiradi, ularning antagonistlari, mecamilamin va haloperidol ICSS-ning ajraladigan chegaralarini oshiradi va navbati bilan nikotin va metamfetamin bilan davolash qilingan kalamushlarda CPA ni keltirib chiqaradi. Chiqib ketish vaqtida miya sharaflash tizimida o'zgarishlar sodir bo'lishiga qaramasdan, asabiylashish rivojlanib borayotganligi sababli, neuroadaptations o'tkir davolanishdan keyingi suiiste'mollikning dori-darmonlarining kuchaytiruvchi yoki samarador ta'siriga vositachilik qiladigan bir xil miya davrlarida paydo bo'ladigan, bu salbiy ta'sirni ifodalashga olib keladigan giyohvand moddalarga qaramlikdan voz kechish belgisi [7, 8]. Ushbu tushunchaga muvofiq, ushbu izlanish nikotin bilan birga metamfetaminning ham o'tkir administratsiya davrida ICSS-ning ajralish chegaralarida kamayishini ko'rsatdi va antagonist-cho'kindi ajralib chiqish vaqtida ortadi. Kokain kabi boshqa giyohvand moddalar [6], opiatlar [10] va o'rganish [11] Shuningdek, ICSS mukofotiga nisbatan ta'sirlarning o'xshash naqshini keltirib chiqarishi haqida xabar berilgan. Miya mukofot tizimida bunday o'zgarishlarni olib tashlashning salbiy affektiv oqibatlarini tekshirish uchun etarli bo'lganligi haqida savol tug'iladi. EHM paradigmasi nikotinni ilgari surgan ilgari tadqiqotlarda qayd etilganidek, chekinishdan nafratlanishni aniqlash uchun foydali va sezgir xatti-15, 16] va opiyatlar [17, 10]. Ushbu ishda mecamylamine va haloperidol, ICSS uchun mukofot chegara qiymatlari ko'rsatgan dozlarda EBM ni keltirib chiqaradi va bu ICSS-da, nikotin va metamfetamindan chiqarib yuborilishida noxush holga kelishi mumkinligini ko'rsatadi. Boshqa tomondan, mecamylamine va haloperidol badandagi olib tashlash belgilarini keltirib chiqarolmadi. Psikostimulantlardan olingan somatik belgilar opiat, barbituratlar va spirtli ichimliklardagi zaifroqdir. Bundan tashqari, nikotin antagonistlari tomonidan o'z-o'zidan chiqarib yuborilganidan ko'ra, nikotin antagonistlari tomonidan shikastlangan badani ajralish belgilarini kuzatish qiyinroq [12]. Qizig'i shundaki, ushbu tadqiqotda, ICSS-ning mukofot pasayishi va nikotinni chiqarib tashlashdan nafratlanish deyarli bir xil bo'lib, metamfetamin chiqishi davomida kuzatilganidek farqlanadi. nikotin va metamfetamin o'rtasidagi intensivlikda, ushbu dori-darmonlarning mukofot tizimiga ta'siri qat'iy nazar. Boshqacha qilib aytganda, miya mukofot tizimida neyrokodatsatlanish nikotin va metamfetamin bilan deyarli bir xil darajada rivojlanishi nazarda tutilgan bo'lsa-da, mukofot tizimini boshqa darajadagi faol metamfetamin bilan o'tkir nikotinga qaraganda kuchliroq tarzda uyg'unlashtiradi. Biroq, ushbu savolga yanada kengroq miqdorda dori dozalari yoki eksperimental paradigmalarning boshqa turlarini qo'llash orqali aniqlik kiritish uchun keyingi tadqiqotlar zarur.
Natijada, ushbu tadqiqot nikotin va metamfetamin chiqishi davomida 1) beyin funktsiyasi funktsiyasi kamayganligini va mukofot vazifasini pasayishi nikotin va metamfetamindan chiqarib yuborilayotganda salbiy ta'sir holatini aks ettirishi mumkin (2).
Tushunchalar
Ushbu tadqiqot qisman Yaponiyaning Ta'lim, Madaniyat, Sport, Fan va Texnologiya Vazirligi (16591166) va Smoking Research Foundation tomonidan taqdim etilgan grantlar yordamida qisman qo'llab-quvvatlandi.
Adabiyotlar
;
