NHẬN XÉT: Mặc dù cả căng thẳng, thuốc lạm dụng và một số phần thưởng tự nhiên nhất định kích hoạt sự tích lũy DeltaFosB, căng thẳng kích hoạt các tế bào xuôi dòng khác nhau và sau đó là các thụ thể và gen khác nhau. Nói cách khác, nghiện và chống lại căng thẳng dựa trên các cơ chế khác nhau cơ bản
J Neurosci. 2010 tháng 10 27; 30 (43): 14585-92.
Vialou V, Mê cung I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ.
nguồn
Khoa thần kinh học Fishberg, Trường Y khoa Mount Sinai, New York, New York 10029, Hoa Kỳ.
Tóm tắt
Các cơ chế phân tử làm cơ sở cho sự thích nghi thần kinh do căng thẳng và do thuốc gây ra chưa được hiểu đầy đủ. Một phân tử có liên quan đến sự thích nghi như vậy là ΔFosB, một yếu tố phiên mã tích lũy trong nhân gặm nhấm (NAc), một khu vực thưởng cho não, để đối phó với căng thẳng mãn tính hoặc tiếp xúc nhiều lần với các loại thuốc lạm dụng. TCác cơ chế phiên mã ngược dòng kiểm soát cảm ứng ΔFosB bởi các kích thích môi trường này vẫn còn khó nắm bắt. Ở đây, chúng tôi xác định yếu tố phiên mã phụ thuộc vào hoạt động, yếu tố phản ứng huyết thanh (SRF), như một yếu tố trung gian ngược dòng mới của stress-, nhưng không phải cocaine-, gây ra ΔFosB. SRF được điều hòa ở NAc của cả bệnh nhân trầm cảm và chuột thường xuyên bị căng thẳng thất bại xã hội. Sự điều hòa này của SRF không có ở những động vật kiên cường. Thông qua việc sử dụng phương pháp gây đột biến cảm ứng, chúng tôi cho thấy rằng cảm ứng qua trung gian căng thẳng của FosB, xảy ra chủ yếu ở những con chuột kiên cường, phụ thuộc vào biểu hiện SRF ở vùng não này. Hơn nữa, việc xóa gen di truyền đặc hiệu NAc của SRF thúc đẩy một loạt các kiểu hình giống như prodepantant và proanxiety và làm cho động vật nhạy cảm hơn với các tác động xấu của căng thẳng mãn tính. Ngược lại, chúng tôi chứng minh rằng SRF không có vai trò trong tích lũy ΔFosB trong NAc để đáp ứng với phơi nhiễm cocaine mạn tính. Hơn nữa, việc loại bỏ SRF đặc hiệu NAc không ảnh hưởng đến các hành vi do cocaine gây ra, cho thấy căng thẳng thất bại xã hội mãn tính và phơi nhiễm cocaine lặp đi lặp lại điều chỉnh sự tích lũy ΔFosB và độ nhạy hành vi thông qua các cơ chế độc lập.
Giới thiệu
Hạt nhân accumbens (NAc), một khu vực thưởng cho não quan trọng, rất quan trọng để tích hợp các yếu tố đầu vào cảm giác và nhận thức thúc đẩy các hành vi có liên quan đến động lực để đáp ứng với các kích thích môi trường (Nestler và Carlezon, 2006; Sesack và Grace, 2010). NAc cũng có liên quan đến những bất thường về hành vi liên quan đến nghiện ma túy và trầm cảm. Theo đó, nhắm mục tiêu NAc với kích thích não sâu đã được chứng minh là làm giảm bớt các hành vi giống như trầm cảm và nghiện ở cả người và động vật gặm nhấm (Schlaepfer et al., 2008; Vassoler et al., 2008; Heinze et al., 2009; al., 2009).
Phơi nhiễm liên tục với các loại thuốc lạm dụng hoặc căng thẳng gây ra sự thay đổi mô hình biểu hiện gen ở NAc, có khả năng gây ra chứng nghiện mãn tính và trầm cảm (Berton et al., 2006; Krishnan và cộng sự, 2007; Maze et al., 2010; Vialou et al ., 2010). Điều thú vị là, yếu tố phiên mã ΔFosB, một sản phẩm ghép của gen fosB, tích lũy trong NAc để đáp ứng với việc tiếp xúc với thuốc hoặc căng thẳng lặp đi lặp lại (Nestler, 2008; Perrotti và cộng sự, 2008; Vialou et al., 2010). FosB đã được đề xuất như một công tắc phân tử tiềm năng hướng dẫn sự chuyển đổi từ sử dụng ma túy giải trí sang trạng thái nghiện mãn tính (Nestler et al., 1999; McClung et al., 2004; Renthal et al., 2009), khi sự tích lũy của nó trong NAc tăng cường trả lời khen thưởng cho một số loại thuốc lạm dụng. Gần đây, vai trò của cảm ứng ΔFosB trong NAc sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính (Nikulina et al., 2008; Vialou et al., 2010) đã được làm sáng tỏ: FosB thúc đẩy phản ứng đối phó tích cực với các kích thích căng thẳng và tăng khả năng phục hồi. Mặc dù cảm ứng ΔFosB xảy ra theo cách phụ thuộc vào kích thích, các cơ chế chịu trách nhiệm tích lũy FosB do thuốc và căng thẳng gây ra trong NAc vẫn chưa được biết.
Yếu tố đáp ứng huyết thanh (SRF) là một yếu tố phiên mã cần thiết cho hoạt động phiên mã phụ thuộc vào hoạt động của một số gen ban đầu tức thì, bao gồm c-fos, fosb, Egr1 và Arc (Knöll và Nordheim, 2009). Các nghiên cứu gần đây đã chứng minh tác động của SRF đối với các đặc tính hình thái và kiến trúc tế bào của tế bào thần kinh, bao gồm điều chỉnh hoạt động của khớp thần kinh và sự hình thành mạch trong não người lớn (Knöll và Nordheim, 2009). Những phát hiện này đã thúc đẩy chúng tôi điều tra xem SRF có được điều chỉnh về mặt chức năng hay không khi tiếp xúc mãn tính với thuốc lạm dụng hoặc căng thẳng, cũng như tác động tiềm tàng của quy định đó đối với cảm ứng ΔFosB trong những điều kiện này.
Ở đây, chúng tôi mô tả một cơ chế mới mà qua đó việc điều tiết SRF trong NAc sẽ thúc đẩy các kiểu hình gây trầm cảm và lo âu, cuối cùng làm tăng tính dễ bị tổn thương của động vật đối với các tác động có hại của căng thẳng mãn tính. Những tác động này một phần là do mất cảm ứng ΔFosB trong NAc của động vật bị stress. Sự giảm biểu hiện SRF và ΔFosB trong mô NAc sau khi chết thu được từ bệnh nhân trầm cảm cho thấy sự liên quan của những phát hiện của chúng tôi với bệnh trầm cảm ở người. Điều thú vị là, cơ chế kiểm soát sự tích tụ ΔFosB này dường như đặc trưng cho căng thẳng: tiếp xúc với cocaine mãn tính không ảnh hưởng đến biểu hiện SRF, việc loại bỏ SRF khỏi NAc không có tác động đến sự tích tụ ΔFosB sau khi tiếp xúc với cocaine mãn tính và việc loại bỏ SRF như vậy không ảnh hưởng đến cocaine- các hành vi gây ra. Sự tương tác mới lạ này giữa SRF và ΔFosB, trong bối cảnh căng thẳng, có thể đại diện cho một cơ chế cân bằng nội môi quan trọng điều chỉnh độ nhạy cảm của một cá nhân đối với căng thẳng mãn tính.
Vật liệu và phương pháp
Động vật
Chuột đực C57BL / 6J tám tuần tuổi (Phòng thí nghiệm Jackson) đã được sử dụng trong tất cả các thí nghiệm về hành vi và sinh hóa. Tất cả các động vật đã được làm quen với cơ sở động vật trong ít nhất tuần 1 trước khi thao tác thử nghiệm và được duy trì ở 23 đấu 25 ° C trên một chu kỳ sáng / tối của 12 (bật sáng từ 7: 00 AM đến 7: 00 PM) tiếp cận với thực phẩm và nước. Các thí nghiệm được thực hiện theo hướng dẫn của Hiệp hội Khoa học thần kinh và ủy ban chăm sóc và sử dụng động vật tại Viện Y học Mount Sinai.
Đối với các thí nghiệm cocaine [phương pháp kích thích miễn dịch nhiễm sắc thể phương Tây và định lượng (ChIP)], người ta đã sử dụng chuột C8BL / 10J nam tuần tuổi. Động vật đã nhận được bảy lần tiêm trong màng bụng hàng ngày bằng nước muối hoặc cocaine (57 mg / kg cocaine-HCl; Sigma). Chuột đã được sử dụng 6 h sau khi điều trị cuối cùng. Đối với các thí nghiệm hành vi, chuột được nuôi nhốt đơn lẻ và được điều trị bằng 20 mg / kg (nhạy cảm vận động) hoặc 24 mg / kg (ưu tiên nơi điều hòa) cocaine-HCl trong màng bụng, như được mô tả dưới đây.
Chuột Srffl / fl đã được tạo ra như mô tả trước đây (Ramanan et al., 2005). Loại bỏ Srf đặc hiệu NAc đã đạt được thông qua tiêm stereotaxic và sự biểu hiện quá mức virus sau đó của Cre recombinase (Cre) hợp nhất với protein huỳnh quang màu xanh lá cây (GFP) bằng cách sử dụng các vec tơ liên quan đến adeno (AAV). Một Cre không xóa bản thân đã được sử dụng. AAV-GFP đã được tiêm thay cho AAV-Cre-GFP ở chuột Srffl / fl dưới dạng đối chứng. Tóm lại, chuột được gây mê bằng cách sử dụng hỗn hợp ketamine (10 mg / kg) và xylazine (10 mg / kg), với các tọa độ lập thể sau đây được sử dụng để phân phối virus: + 1.6 (trước / sau), + 1.5 (sau) 4.4 (mặt lưng / bụng) ở góc 10 ° so với đường giữa (so với bregma). Tổng số 0.5 μl virus đã được tinh chế đã được phân phối song phương trong khoảng thời gian tối thiểu 5 (0.1 μl / phút), sau đó là phần còn lại của 5. Chuột đã được thử nghiệm 2 tuần sau khi phẫu thuật, khi biểu hiện virus là tối đa và các vị trí tiêm virus được xác nhận cho tất cả các động vật sử dụng phương pháp mô học tiêu chuẩn. Hiệu quả của biểu hiện Cre qua trung gian virus đã được xác nhận bằng hóa mô miễn dịch và bằng phương pháp PCR phiên mã ngược cho Srf được tiến hành trên các cú đấm NAc siêu nhỏ từ động vật được đưa AAV-Cre-GFP và AAV-GFP vào NAc. Các virus AAV-GFP và AAV-Cre-GFP đã được tạo ra như mô tả trước đây (Maze et al., 2010).
Thủ tục hành vi
Thất bại xã hội căng thẳng.
Chuột C57BL / 6J đã bị căng thẳng thất bại xã hội mãn tính trong những ngày liên tiếp như đã mô tả trước đó (Berton et al., 10; Krishnan và cộng sự, 2006; Vialou et al., 2007). Một thời gian ngắn, mỗi con chuột được tiếp xúc với một con chuột giống đã nghỉ hưu CD2010 lạ và hung dữ trong 1 mỗi ngày. Sau khi tương tác trực tiếp với kẻ xâm lược CD5, động vật sau đó được đặt vào một ngăn bên cạnh của cùng một chuồng cho 1 h tiếp theo với cảm giác nhưng không tiếp xúc vật lý. Động vật đối chứng được nhốt trong những chiếc lồng tương đương nhưng với các thành viên cùng chủng. Các thử nghiệm tương tác xã hội đã được thực hiện 24 h sau ngày thất bại cuối cùng.
Sự né tránh xã hội đối với một con chuột đực CD1 không quen thuộc được đánh giá theo các giao thức đã xuất bản (Berton và cộng sự, 2006; Krishnan và cộng sự, 2007; Vialou và cộng sự, 2010). Lần đầu tiên, con chuột thí nghiệm được đưa vào một cánh đồng mở có lồng lưới thép rỗng trong 2.5 phút. Trong phiên thứ hai, một con chuột đực CD1 không quen thuộc đã được đưa vào lồng có dây. Thời gian ở trong vùng tương tác (hành lang rộng 8 cm bao quanh lồng) được đo. Việc phân tách những con chuột bị đánh bại thành các quần thể phụ nhạy cảm và có khả năng phục hồi được thực hiện như đã mô tả trước đây (Krishnan và cộng sự, 2007; Vialou và cộng sự, 2010). Vì phần lớn chuột đối chứng dành nhiều thời gian tương tác với mục tiêu xã hội hơn là với mục tiêu trống, tỷ lệ tương tác 100 (thời gian tương tác trong vùng tương tác khi có mặt và không có mục tiêu xã hội bằng nhau) được đặt làm ngưỡng. Những con chuột có điểm <100 được dán nhãn là nhạy cảm và những con có điểm ≥100 được dán nhãn là có khả năng phục hồi. Các phân tích hành vi, sinh hóa và điện sinh lý học mở rộng hỗ trợ giá trị của các quần thể phụ nhạy cảm và đàn hồi khác biệt này (Krishnan và cộng sự, 2007; Wilkinson và cộng sự, 2009; Vialou và cộng sự, 2010).
Để kiểm tra tính dễ bị tổn thương của chuột Srffl / fl đối với căng thẳng thất bại xã hội, những con chuột này đã tiêm hai bên bằng AAV-GFP hoặc AAV-Cre-GFP, đã bị ba liên tiếp đánh bại trong cùng một ngày và sau đó được thử nghiệm về tương tác xã hội 24 h sau đó. Quy trình đánh bại dưới mức tối ưu này đã được xác nhận trước đây để tiết lộ các kiểu hình có thể xảy ra sau các thao tác di truyền (Krishnan và cộng sự, 2007; Vialou et al., 2010).
Học bất lực.
Chuột Srffl / fl biểu hiện quá mức AAV-GFP hoặc AAV-Cre-GFP đã phải tuân theo quy trình bất lực đã học như mô tả trước đây (Berton et al., 2007). Một thời gian ngắn, những con chuột đã tiếp xúc với những cú sốc chân không liên tục, không thể giải thích được đối với 1 h trong những ngày liên tục 2 (thời gian 0.45 mA, 5). Vào ngày thử nghiệm, những con chuột được giới thiệu lại vào hộp cho các thử nghiệm trốn thoát liên tiếp 15. Trong mỗi thử nghiệm, một cú sốc liên tục được đưa ra và những con chuột được cho cơ hội trốn thoát bằng cách vào khoang bên cạnh, không được chọn lọc. Sau khi thoát thành công, cánh cửa đã tự động đóng lại và độ trễ thoát được ghi lại. Khi chuột không trốn thoát trong 25, thử nghiệm đã bị chấm dứt và được ghi nhận là thất bại. Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng biểu hiện virus ở NAc và các khu vực khác không ảnh hưởng đến hành vi thoát cơ sở khi không có căng thẳng (Newton và cộng sự, 2002; Berton và cộng sự, 2007).
Nhạy cảm vận động.
Hai tuần sau khi tiêm AAV-GFP hoặc AAV-Cre-GFP hoặc AAV-Cre-GFP vào bên trong NAc, chuột Srffl / fl bị nhạy cảm với vị trí. Chuột được tập trung vào đấu trường vận động trong 30 phút mỗi ngày trong 4 ngày. Sau khi sinh sống, động vật được tiêm vào màng bụng với 10 mg / kg cocaine-HCl và đặt vào hộp định vị. Các hoạt động định vị của động vật được ghi lại bằng cách sử dụng hệ thống photobeam (San Diego Instruments) khi chùm tia cứu thương ngắt trong 30 phút mỗi ngày. Sự nhạy cảm về vị trí được ghi lại trong khoảng thời gian 6 ngày.
Điều kiện ưu tiên nơi.
Quy trình điều hòa vị trí được tiến hành như đã mô tả trước đây (Maze và cộng sự, 2010), với những sửa đổi sau. Tóm lại, 18 ngày sau khi truyền AAV-GFP hoặc AAV-Cre-GFP trong NAc vào chuột Srffl / fl, động vật được đưa vào các buồng điều hòa, bao gồm ba môi trường khác nhau theo ngữ cảnh. Những con chuột có biểu hiện ưa thích đáng kể đối với một trong hai buồng điều hòa đã bị loại khỏi nghiên cứu (<10% tổng số động vật). Các nhóm điều hòa đã được cân bằng hơn nữa để điều chỉnh cho bất kỳ sai lệch buồng nào vẫn có thể tồn tại. Vào những ngày tiếp theo, động vật được tiêm nước muối và nhốt trong một buồng vào buổi chiều trong 30 phút, sau đó tiêm cocaine (7.5 mg / kg, ip) và nhốt trong 30 phút ở buồng khác vào ngày hôm sau, tương đương với tổng số hai vòng đào tạo liên kết cho mỗi lần điều trị (hai cặp nước muối và hai cocaine). Vào ngày thử nghiệm, chuột được đưa trở lại thiết bị mà không cần xử lý trong 20 phút và được thử nghiệm để đánh giá mức độ ưa thích bên. Các phản ứng của cơ địa đối với cocaine được đánh giá thông qua sự phá vỡ chùm tia trong các khoang ghép nối với cocaine để đảm bảo hiệu quả của việc điều trị bằng thuốc. Đối với tất cả các nhóm, sự vận động cơ bản khi phản ứng với nước muối đã được đánh giá để đảm bảo rằng sự vận động của trẻ không bị ảnh hưởng bởi việc điều trị bằng virus.
Các xét nghiệm hành vi khác.
Chuột Srffl / fl đã được thử nghiệm trong các thử nghiệm ngoài trời, sáng / tối và bơi cưỡng bức dựa trên các giao thức được công bố (Vialou et al., 2010). Hoạt động của chuột trong trường mở được ghi lại trong 5 phút bằng hệ thống theo dõi video (Ethovision) trong điều kiện ánh sáng đỏ. Đối với thử nghiệm sáng / tối, chuột được phép tự do khám phá một hộp hai ngăn gồm một đấu trường được chiếu sáng lớn kết nối với một đấu trường kín nhỏ hơn. Chuột đã được thử nghiệm trong một khoảng thời gian 5 tối thiểu để đánh giá lượng thời gian sử dụng trong cả hai chuồng. Trong các thử nghiệm trường mở và sáng / tối, thời gian ở trung tâm và trường ánh sáng, tương ứng, được đánh giá là một chỉ số nghịch đảo của các phản ứng liên quan đến lo âu. Một thử nghiệm bơi bắt buộc 1 d đã được thực hiện trong một khoảng thời gian 5 tối thiểu. Thời gian bất động gia tăng trong bài kiểm tra bơi cưỡng bức được hiểu là một hành vi giống như người phụ nữ. Thử nghiệm bơi cưỡng bức 1 d đã được sử dụng rộng rãi trên chuột và được xác nhận là thước đo hiệu lực dự đoán, trong đó các liệu pháp chống trầm cảm làm giảm thời gian bất động.
Hóa mô miễn dịch
Chuột Srffl / fl đã được gây mê và tưới máu nội bộ với 4% paraformaldehyd / PBS. Não được loại bỏ và bảo vệ lạnh trong 30% sucrose / PBS. Các phần vành (30 m) đã được cắt trên microtome đóng băng và được xử lý để phân tích hóa mô miễn dịch. Xác nhận loại trừ Srffl / fl được thực hiện bằng cách sử dụng kháng thể đa dòng chống lại SRF (1 / 2000; Công nghệ sinh học Santa Cruz). Biểu hiện Cre được xác nhận thông qua biểu hiện GFP (polyclonal gà, 1 / 8000, Aves Labs) trong não bị mổ xẻ, vì Cre được hợp nhất với GFP. Để định lượng cảm ứng ΔFosB sau căng thẳng thất bại xã hội ở chuột hạ gục Srffl / fl, ΔFosB đã được phát hiện bằng cách sử dụng kháng thể đa dòng của thỏ được tăng lên chống lại vùng N-terminal của protein (1 / 1000; Công nghệ sinh học Santa Cruz). Hình ảnh được chụp bằng kính hiển vi đồng tiêu (độ phóng đại 20 ×; Zeiss). Số lượng tế bào miễn dịch GFP được tính là âm tính và dương tính với khả năng miễn dịch ΔFosB đã được định lượng trong nhiều hình ảnh cho mỗi động vật, với các giá trị trung bình sau đó được tính cho mỗi động vật. Mỗi động vật được coi là một quan sát riêng để phân tích thống kê.
Mô NAc sau khi chết của con người
Mô não sau khi chết của con người được lấy từ Bộ sưu tập Não Dallas, nơi mô được thu thập từ Văn phòng Giám định Y khoa Dallas và Chương trình Cấy ghép Mô của Đại học Texas (UT) Southwestern sau sự đồng ý của người thân. Mô được phân tích từ cả nam và nữ phù hợp với tuổi, khoảng thời gian sau khi chết, số lượng toàn vẹn RNA (RIN) và pH. Các yếu tố kích động cụ thể, bao gồm hôn mê, thiếu oxy, giảm oxy máu, co giật, mất nước, hạ đường huyết, suy đa cơ quan và ăn phải các chất gây độc thần kinh tại thời điểm chết ảnh hưởng đến tính toàn vẹn RNA trong các mô não sau khi chết (Tomita và cộng sự, 2004). Chúng tôi đã sử dụng thang điểm yếu tố nông nghiệp (AFS) để mô tả đặc điểm của các mẫu mô trên mỗi điều kiện trong số tám điều kiện này. Sự vắng mặt của một yếu tố nông nghiệp được cho điểm 0 và sự hiện diện của nó được cho điểm là 1 để cung cấp tổng điểm AFS từ 0 đến 8. Mô có điểm nông sản là 0 hoặc 1 phản ánh các mẫu chất lượng tốt; nhân khẩu học trường hợp được đưa ra trong Bảng 1. Chất lượng mô vượt trội đã được xác nhận bởi giá trị RIN cao. Vỏ hộp phải được bóc tách tiêu chuẩn trước khi đông lạnh nhanh trong isopentan -40 ° C và bảo quản ở -80 ° C; tiếp tục bóc tách NAc được thực hiện trên mô đông lạnh. Hội đồng đánh giá thể chế UT Southwestern đã xem xét và phê duyệt việc thu thập mô này để sử dụng cho nghiên cứu. Một cuộc phỏng vấn trực tiếp với người cung cấp thông tin được thực hiện đối với từng trường hợp trầm cảm vào một ngày sau đó, nơi thông tin về bệnh tình của trường hợp đó được ghi lại; một chẩn đoán đồng thuận về rối loạn trầm cảm nặng đã được thực hiện bằng tiêu chí DSM-IV bởi hai bác sĩ tâm thần nghiên cứu. Không có trường hợp nào được đưa vào nghiên cứu này có kết quả kiểm tra độc tính trong máu dương tính với các loại thuốc lạm dụng, rượu hoặc các loại thuốc kê đơn không phải là thuốc chống trầm cảm. Mặc dù được điều trị bằng thuốc chống trầm cảm, tất cả các đối tượng đều bị suy nhược lâm sàng tại thời điểm chết. Các mẫu mô được phân phát theo kiểu che mắt để phân tích.
Bảng 1.
Dữ liệu nhân khẩu học cho nghiên cứu sau khi chết của con người
Tây phương
Mẫu vật NAc của người và chuột đã được xử lý như mô tả trước đây (Maze et al., 2010). Mô đông lạnh được sonicated trong một bộ đệm ly giải 5 mM HEPES có chứa 1% SDS với protease (Roche) và chất ức chế phosphatase (Sigma). Nồng độ protein được xác định bằng xét nghiệm protein Dc (Bio-Rad). Một lượng mẫu protein tương đương đã bị SDS-PAGE và Western blot. Western blots đã được thử nghiệm bằng cách sử dụng một kháng thể đối với SRF (1 / 2000; Công nghệ sinh học Santa Cruz) hoặc GAPDH (1 / 1500; Abcam) và sau đó được quét và định lượng bằng hệ thống hình ảnh Odyssey (Licor).
Phân lập RNA và PCR định lượng
Phân lập RNA, PCR định lượng (qPCR) và phân tích dữ liệu đã được thực hiện như mô tả trước đây (Maze et al., 2010; Vialou et al., 2010). Tóm lại, RNA được phân lập bằng thuốc thử TriZol (Invitrogen) và được tinh chế thêm bằng bộ vi sinh RNAeasy từ Qiagen. Tất cả các mẫu RNA được xác định có giá trị 260 / 280 và 260 / 230 ≥1.8. Phiên mã ngược được thực hiện bằng iScript (Bio-Rad). qPCR sử dụng màu xanh lá cây SYBR (Quanta) đã được thực hiện với hệ thống PCR sinh học ứng dụng 7900HT RT với các thông số chu trình sau: 2 min ở 95 ° C; Các chu trình 40 của 95 ° C đối với 15 s, 59 ° C đối với 30 s, 72 ° C đối với 33 s; và phân loại gia nhiệt đến 95 ° C để tạo các đường cong phân ly để xác nhận các sản phẩm PCR đơn lẻ. Dữ liệu được phân tích bằng cách so sánh các giá trị C (t) của điều kiện điều trị (kiểm soát so với chuột nhạy cảm hoặc dễ phục hồi hoặc kiểm soát ở người so với bệnh nhân trầm cảm) với phương pháp ΔΔC (t) (Tsankova et al., 2006). PrimFosB qPCR mồi: foward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT và đảo ngược, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG.
Chip
ChIP đã được thực hiện như mô tả trước đây (Maze et al., 2010) trên các cú đấm NAc song phương gộp từ chuột kiểm soát, nhạy cảm và kiên cường (bốn cú đấm / chuột đo 14) 1 h sau trải nghiệm thất bại cuối cùng và từ nước muối và cocaine- động vật được xử lý 24 h sau khi điều trị cuối cùng. Mô được liên kết chéo trong 1% formaldehyd. Sự cố định sau đó đã bị gián đoạn thông qua ứng dụng glycine và mô được rửa và giữ ở 80 ° C cho đến khi sử dụng. Chất nhiễm sắc bị cắt được ủ qua đêm với kháng thể chống SRF (Công nghệ sinh học Santa Cruz) trước đây gắn với hạt từ tính (Dynabeads M-280; Invitrogen). Sau khi liên kết ngang và tinh lọc DNA, sự gắn kết của SRF với chất kích thích fosb được xác định bởi qPCR bằng cách sử dụng các đoạn mồi trải dài trên một vùng của trình khởi động fosb có chứa hai vị trí gắn yếu tố phản ứng huyết thanh. Các kéo xuống SRF được làm giàu đáng kể so với các biện pháp kiểm soát không có kháng thể. Chuột mồi gen kích thích gen fosb: chuyển tiếp, CCCTCTGACGTAATTGCTAGG và đảo ngược, ACCTCCCAAACTCTCCCTTC.
Phân tích thống kê
ANOVA một chiều được sử dụng để so sánh các phương tiện giữa chuột kiểm soát, nhạy cảm và chuột có khả năng phục hồi trong các phân tích sinh hóa và hành vi. ANOVA hai chiều được sử dụng để so sánh cảm ứng ΔFosB bằng cách đánh bại xã hội ở chuột loại trực tiếp Srf cục bộ, cũng như để so sánh tác động của loại trực tiếp Srf trong các giao thức bất lực và nhạy cảm vị trí đã học. Các bài kiểm tra t của học sinh được sử dụng để so sánh các phương tiện trong tác động của knock-out Srf đối với cảm ứng ΔFosB, và giữa các nhóm trong phân tích ChIP mô người và chuột. Sự khác biệt giữa các điều kiện thí nghiệm được coi là có ý nghĩa thống kê khi p ≤ 0.05.
Kết quả
Biểu hiện SRF và ΔFosB trong bệnh trầm cảm ở người và chuột bị đánh bại xã hội
Để khám phá vai trò tiềm năng của SRF trong việc phát triển các hành vi giống như trầm cảm, trước tiên, chúng tôi đánh giá sự biểu hiện protein SRF trong NAc của bệnh nhân trầm cảm sau khi chết. Các đối tượng trầm cảm được hiển thị mức SRF giảm đáng kể ở NAc so với nhóm chứng phù hợp với độ tuổi của họ (t (19) = 1.9; p <0.05) (Hình. 1A). Với vai trò của SRF trong việc điều chỉnh biểu hiện gen sớm phụ thuộc vào hoạt động (Ramanan và cộng sự, 2005), chúng tôi đưa ra giả thuyết rằng SRF có thể tham gia vào việc kiểm soát biểu hiện ΔFosB trong vùng não này. Để ủng hộ giả thuyết này, chúng tôi quan sát thấy rằng mức Δfosb mRNA cũng giảm đáng kể trong NAc của những người trầm cảm (t (16) = 1.8; p <0.05) (Hình 1B). Điều này cũng phù hợp với những phát hiện gần đây về mức độ giảm của protein ΔFosB trong những điều kiện này (Vialou và cộng sự, 2010).
Hình 1.
Sự ức chế SRF mãn tính do căng thẳng gây ra tương quan với giảm phiên mã ΔFosB trong NAc. A, B, Bệnh nhân trầm cảm sau khi chết có biểu hiện giảm mức protein SRF (n = 10 / nhóm; A) và biểu hiện mRNA Δfosb ở NAc (n = 8 / nhóm; B). C, Những con chuột phải chịu căng thẳng thất bại xã hội mãn tính (10 đ) được nhóm thành các quần thể con nhạy cảm và có khả năng phục hồi. D, Căng thẳng thất bại xã hội mãn tính làm giảm mức độ protein SRF trong NAc của những con chuột nhạy cảm, nhưng không phải là những con chuột có khả năng phục hồi, so với đối chứng 24 giờ sau khi thử nghiệm tương tác xã hội được hiển thị ở C. E, mức mRNA ΔfosB trong NAc không thay đổi ở những con chuột nhạy cảm, nhưng đáng kể được điều chỉnh ở động vật có khả năng chống chịu (n = 7–15 / nhóm). Protein F, SRF cho thấy sự gia tăng liên kết với gen thúc đẩy fosb sau khi bị stress xã hội mãn tính chỉ ở những con chuột có khả năng phục hồi và không nhạy cảm (n = 5 / nhóm). Dữ liệu hiển thị được biểu thị dưới dạng trung bình ± SEM (được biểu thị dưới dạng thanh lỗi). Con., Kiểm soát; Dep., Chán nản; Sus., Nhạy cảm; Kiên cường, kiên cường. * p <0.05 so với đối chứng; *** p <0.001 so với đối chứng; #p <0.05 so với nhạy cảm; ## p <0.01 so với nhạy cảm; ### p <0.001 so với nhạy cảm.
Để mở rộng những phát hiện này, chúng tôi đã sử dụng giao thức chống stress xã hội mãn tính ở chuột. Hai nhóm chuột bị đánh bại có thể phân biệt được, nhạy cảm và kiên cường, rõ ràng (Krishnan và cộng sự, 2007) dựa trên thước đo về sự né tránh xã hội, trong đó những động vật nhạy cảm có biểu hiện tương tác xã hội giảm đáng kể so với cả động vật đối chứng và có khả năng chống chịu 2,23) = 157.2; p <0.001; t kiểm tra với hiệu chỉnh Bonferroni, nhạy cảm với kiểm soát, p <0.001; đàn hồi so với kiểm soát, p <0.05; đàn hồi so với nhạy cảm, p <0.01) (Hình 1C). Hai ngày sau đợt thất bại cuối cùng, những con chuột đối chứng nhạy cảm, đàn hồi và không bị ức chế được phân tích biểu hiện SRF trong NAc. Tương tự như phát hiện ở người trầm cảm, mức protein SRF giảm đáng kể ở NAc của chuột nhạy cảm so với đối chứng, trong khi mức SRF không bị ảnh hưởng ở NAc của chuột có khả năng phục hồi (F (2,32) = 4.7; p <0.05; t thử nghiệm với a Hiệu chỉnh Bonferroni, nhạy cảm so với đối chứng, p <0.05; khả năng phục hồi so với nhạy cảm, p <0.05) (Hình 1D).
Tiếp theo, chúng tôi kiểm tra biểu hiện mRNA Δfosb trong NAc của ba nhóm động vật này và quan sát thấy sự gia tăng đáng kể trong biểu hiện Δfosb chỉ ở những động vật có khả năng phục hồi, với một xu hướng nhưng không tăng đáng kể ở những con chuột nhạy cảm (t (14) = 2.1; p <0.05 ) (Hình 1E). Để nghiên cứu sâu hơn các tương tác có thể xảy ra giữa mức SRF và phiên mã Δfosb, chúng tôi đã sử dụng ChIP để kiểm tra xem liệu sự liên kết SRF với gen khởi động fosb có bị thay đổi sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính trong các nhóm chuột nhạy cảm và đàn hồi riêng biệt hay không. Những con vật có khả năng phục hồi được tăng cường đáng kể liên kết SRF với promoter fosb trong NAc so với đối chứng (t (8) = 2.1; p <0.05) cũng như so với chuột nhạy cảm (t (8) = 2.0; p <0.05). Không có sự khác biệt nào được quan sát thấy giữa chuột đối chứng và chuột nhạy cảm, có thể phản ánh sự thiếu cảm ứng SRF ở chuột nhạy cảm (Hình 1F).
Để xác nhận vai trò của SRF trong việc điều chỉnh ΔFosB sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính, chuột Srffl / fl được sử dụng để kiểm tra ảnh hưởng của việc loại bỏ chọn lọc SRF khỏi NAc đối với cảm ứng căng thẳng của ΔFosB. Chuột Srffl / fl được tiêm theo phương pháp lập thể NAc vào trong với các vectơ AAV biểu hiện GFP hoặc Cre-GFP. Một loại SRF đặc hiệu NAc gây ra bởi AAV-Cre-GFP đã được xác nhận về mặt hóa mô miễn dịch (Hình 2A). Thật vậy, không có sự trùng lặp giữa nhuộm SRF và biểu hiện Cre, chứng tỏ hiệu quả của việc loại trực tiếp. Trong các lỗ NAc bị cắt vi mô, chúng tôi phát hiện thấy mức protein SRF giảm đáng kể 50% (t (11) = 4.3; p <0.001). Độ lớn có thể phản ánh thực tế là một phần nhỏ mô trong các vết nhiễm nhỏ như vậy không bị nhiễm virus.
Hình 2.
SRF làm trung gian cho cảm ứng ΔFosB bởi căng thẳng thất bại xã hội mãn tính. A, Tiêm AAV-Cre-GFP vào NAc của chuột Srffl / fl dẫn đến loại bỏ protein SRF trong các tế bào thần kinh biểu hiện Cre. Tiêm AAV-GFP không có hiệu quả rõ ràng. B, Việc loại bỏ SRF có chọn lọc như vậy khỏi NAc hoàn toàn ngăn chặn sự cảm ứng ΔFosB trong NAc sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính (n = 4 / nhóm). Dữ liệu hiển thị được biểu thị dưới dạng trung bình ± SEM (được biểu thị dưới dạng thanh lỗi). * p <0.05 so với đối chứng AAV-GFP; ** p <0.01 so với thất bại AAV-GFP.
Tiếp theo, chúng tôi thực hiện hóa mô miễn dịch định lượng cho ΔFosB trong NAc của những con chuột Srffl / fl bị đánh bại được tiêm NAc nội bộ với AAV-Cre-GFP hoặc AAV-GFP. Sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính, biểu hiện ΔFosB được gây ra đáng kể ở NAc của động vật được tiêm AAV-GFP (virus × tương tác điều trị, F (1,12) = 6.4; t kiểm tra với hiệu chỉnh Bonferroni, kiểm soát so với thất bại, p <0.05; AAV-Cre so với AAV-GFP, p <0.01). Tuy nhiên, cảm ứng này không được quan sát thấy ở chuột Srffl / fl nhận AAV-Cre-GFP (Hình 2B), chứng tỏ rằng cảm ứng ΔFosB trong NAc do căng thẳng mãn tính đòi hỏi SRF.
Loại trực tiếp SRF trong NAc thúc đẩy các kiểu hình giống như prodepression- và proanxiety
Vì cảm ứng ΔFosB do căng thẳng thất bại xã hội mãn tính trước đây đã được chứng minh là trung gian cho khả năng phục hồi (Vialou và cộng sự, 2010), chúng tôi giả thuyết rằng sự điều hòa SRF giảm và dẫn đến mất cảm ứng ΔFosB, ở những động vật nhạy cảm có thể đại diện cho một sự thích nghi tiêu cực cuối cùng gây ra động vật dễ bị tổn thương hơn trước các tác động có hại của stress. Để kiểm tra giả thuyết này, chúng tôi đã gây ra sự xóa cục bộ NAc cụ thể của gen Srf ở chuột Srffl / fl trưởng thành như được mô tả ở trên, và những con chuột kết quả và đối chứng của chúng đã được thử nghiệm trong một loạt mô hình hành vi để đánh giá chứng trầm cảm cơ bản- và lo âu- thích hành vi. Sự loại bỏ NAc cục bộ của SRF đã thúc đẩy một hiệu ứng giống như tiền biểu hiện như được đo bằng thử nghiệm bơi cưỡng bức (t (30) = 2.5; p <0.05), cũng như hiệu ứng gây lo âu khi đo trong trường mở (t (38) = 1.9; p <0.05) và kiểm định sáng / tối (t (8) = 1.9; p <0.05). Do đó, những con chuột Srffl / fl nhận AAV-Cre-GFP vào NAc đã giảm độ trễ đến mức bất động trong thử nghiệm bơi cưỡng bức, ít thời gian hơn ở trung tâm của trường mở và ít thời gian hơn trong ngăn sáng của hộp sáng / tối so với động vật được tiêm AAV-GFP (Hình 3A – C). Tuy nhiên, sự xóa SRF trong NAc không làm thay đổi mức độ vận động ban đầu, cho thấy rằng các tác động hành vi quan sát được ở động vật loại SRF không phải do bất thường trong hoạt động vận động nói chung (Hình 3D). Những dữ liệu này rất thú vị dựa trên các báo cáo trước đây cho thấy rằng, mặc dù ΔFosB trong NAc điều chỉnh các hành vi giống như trầm cảm, nó dường như không liên quan đến các phản ứng liên quan đến lo lắng (Vialou và cộng sự, 2010). Các phát hiện hiện tại của chúng tôi cho thấy việc mất SRF gây ra các phản ứng gây lo lắng cho thấy rằng nó làm như vậy thông qua các mục tiêu khác ngoài ΔFosB.
Hình 3.
SRF loại trực tiếp từ NAc thúc đẩy các kiểu hình giống tiền trầm cảm và lo âu. A – C, loại bỏ SRF có chọn lọc từ NAc, đạt được thông qua tiêm AAV-Cre-GFP vào NAc của chuột Srffl / fl, làm giảm độ trễ đến bất động trong thử nghiệm bơi cưỡng bức (n = 14–18 / nhóm; A) và giảm thời gian ở trung tâm và thời gian ở ngăn sáng trong thử nghiệm trường mở (B) và ánh sáng / tối (C), tương ứng (n = 5–15 / nhóm). D, Không có sự khác biệt về hoạt động vận động cơ bản được quan sát thấy trong môi trường mở của những con chuột được tiêm AAV-GFP hoặc AAV-Cre-GFP trong NAc. E, F, Tăng tính nhạy cảm đối với sự bất lực đã học (n = 7–8 / nhóm; E) và căng thẳng thất bại trong xã hội (n = 5–6 / nhóm; F), được đo tương ứng, theo độ trễ để trốn thoát và thời gian tương tác xã hội . Dữ liệu hiển thị được biểu thị dưới dạng trung bình ± SEM (được biểu thị dưới dạng thanh lỗi). * p <0.05 so với GFP hoặc so với không có mục tiêu; ** p <0.01 so với GFP; *** p <0.001 so với GFP.
Tiếp theo, chúng tôi nghiên cứu xem liệu sự mất SRF trong NAc cũng làm tăng tính dễ bị tổn thương của động vật trước những tác động có hại của căng thẳng lặp đi lặp lại. Những con chuột Srffl / fl, được tiêm AAV-Cre-GFP hoặc AAV-GFP vào NAc, đã được kiểm tra trong hai mô hình trầm cảm, học được sự bất lực và căng thẳng thất bại xã hội mãn tính. Trong sự bất lực đã học được, động vật Srffl / fl nhận AAV-Cre-GFP cho thấy thời gian chờ tăng lên để thoát khỏi cú sốc chân sau khi tiếp xúc trước với căng thẳng sốc chân không thể tránh khỏi (điều trị × tương tác thử nghiệm, F (14,180) = 10.2; t kiểm tra với hiệu chỉnh Bonferroni, p <0.001; AAV-Cre so với AAV-GFP, p <0.01), cho thấy mức độ nhạy cảm tăng lên đối với các hành vi thiếu hụt do căng thẳng gây ra (Hình 3E). Tương tự, việc loại bỏ SRF cục bộ khỏi NAc cũng làm tăng ác cảm của xã hội (t (10) = 1.8; p <0.05) so với các động vật đối chứng được tiêm AAV-GFP sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính (Hình 3F), một hiệu ứng giống như trầm cảm.
Thiếu sự tham gia của SRF trong phản ứng osFosB và phản ứng hành vi với cocaine
Do ΔFosB cũng được tạo ra trong NAc để phản ứng với các loại thuốc lạm dụng như cocaine, nên cần nghiên cứu vai trò tiềm năng của SRF trong hoạt động của cocaine. Không giống như căng thẳng thất bại xã hội mãn tính, việc tiếp xúc với cocaine lặp đi lặp lại không làm thay đổi biểu hiện protein SRF ở NAc (t (14) = 0.8; p> 0.05) (Hình 4A) và không ảnh hưởng đến sự gắn kết SRF với gen khởi động gen fosB trong vùng não này (t (4) = 0.7; p> 0.05) (Hình 4B). Điều này cho thấy rằng, trái ngược với căng thẳng, cảm ứng ΔFosB sau khi cocaine mãn tính không qua trung gian SRF. Chúng tôi đã trực tiếp kiểm tra điều này bằng cách kiểm tra xem sự tích tụ ΔFosB sau khi cocaine mãn tính có bị thay đổi ở động vật Srffl / fl nhận AAV-Cre-GFP so với AAV-GFP thành NAc hay không. Chúng tôi thấy rằng việc loại bỏ SRF không ảnh hưởng đến sự tích tụ ΔFosB do cocaine gây ra trong vùng não này (Hình 4C).
Hình 4.
Mất SRF không ảnh hưởng đến việc kích thích cocaine đối với các hành vi do osFosB hoặc cocaine điều chỉnh. A, B, Phơi nhiễm cocaine lặp đi lặp lại (7 d, 20 mg / kg cocaine-HCl) không ảnh hưởng đến biểu hiện protein SRF ở NAc (A) hoặc trên SRF liên kết với chất kích thích gen fosB ở vùng não này (B) 24 h sau phơi nhiễm thuốc (n = 5 / nhóm). Tích lũy C, ΔFosB, được đo miễn dịch hóa học, sau khi tiếp xúc với cocaine mạn tính không bị ảnh hưởng bởi việc loại bỏ SRF đặc hiệu NAc. D, E, Xóa SRF cục bộ khỏi NAc cũng không có tác dụng đối với hoạt động vận động sau khi tiêm nước muối (d 1) lên hoạt động vận động và nhạy cảm của cocaine (n = 8 / nhóm) (d 1 Thẻ 7; D) hoặc về ưu tiên nơi điều hòa cocaine (n = 8 / nhóm; E). Dữ liệu được hiển thị được thể hiện dưới dạng trung bình ± SEM (được biểu thị dưới dạng các thanh lỗi).
Để theo dõi phát hiện đáng ngạc nhiên này, chúng tôi đã điều tra xem liệu một loại SRF có chọn lọc từ NAc có làm thay đổi phản ứng hành vi với cocaine hay không. Phù hợp với việc SRF thiếu quy định về cảm ứng ΔFosB bởi cocaine, việc loại bỏ SRF đặc hiệu NAc không có ảnh hưởng đến hoạt động vận động cơ do cocaine cấp tính hoặc nhạy cảm vận động cơ được thấy sau khi tiếp xúc với cocaine nhiều lần (điều trị × tương tác thời gian, F (4,80) = 0.3; p> 0.05) (Hình 4D). Tương tự như vậy, việc loại bỏ SRF dành riêng cho NAc không ảnh hưởng đến sở thích có cocaine (t (14) = 0.1; p> 0.05) (Hình 4E), cung cấp một thước đo gián tiếp về phần thưởng cocaine.
Thảo luận
Nghiên cứu này xác định SRF là một trung gian hòa giải mới của ΔFosB ở NAc sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính, và liên quan đến SRF trong việc phát triển các hành vi giống như trầm cảm và lo lắng. Chúng tôi cung cấp bằng chứng trực tiếp rằng căng thẳng thất bại xã hội mãn tính làm giảm nồng độ SRF ở NAc dễ bị tổn thương, nhưng không kiên cường, và sự điều hòa này ngăn ngừa cảm ứng ΔFosB ở vùng não này, mà chúng tôi đã chứng minh là cần thiết để đối phó với căng thẳng mãn tính, tức là khả năng phục hồi (Vialou et al., 2010). Một sự giảm tương tự biểu hiện SRF đã được tìm thấy ở NAc ở người bị trầm cảm, trong đó biểu hiện ΔFosB mRNA và protein cũng bị giảm. Ngược lại, nồng độ ΔFosB không giảm trong NAc của những con chuột nhạy cảm, mặc dù có sự điều hòa của SRF, trong đó có liên quan đến các cơ chế phiên mã khác, như chưa biết, trong việc kiểm soát biểu hiện ΔFosB. Vai trò nguyên nhân của SRF trong việc làm trung gian cảm ứng ΔFosB ở NAc sau khi căng thẳng mãn tính được thiết lập bằng cách sử dụng xóa gen di truyền SRF từ vùng não này. Phân tích hành vi của những con chuột bị loại SRF đặc hiệu NAc này liên quan đến SRF có vai trò chính trong việc phát triển cả hai hành vi cơ bản và trầm cảm do căng thẳng và lo lắng. Ngược lại, việc xóa SRF không ảnh hưởng đến cảm ứng ΔFosB để đáp ứng với việc sử dụng cocaine mạn tính hoặc tác dụng hành vi của cocaine. Những phát hiện này hỗ trợ vai trò đặc hiệu kích thích mới đối với SRF trong việc điều chỉnh cảm ứng ΔFosB và phản ứng hành vi đối với các nhiễu loạn môi trường khác biệt.
Phiên mã qua trung gian SRF trước đây đã được chứng minh là đáp ứng với hoạt động của khớp thần kinh, phần lớn được kích hoạt bởi sự gia tăng canxi, cũng như tăng cường hoạt động thần kinh, đặc biệt là trong trường hợp yếu tố thần kinh có nguồn gốc từ não (BDNF) (Bading et al., 1993; Xia và cộng sự, 1996; Johnson và cộng sự, 1997; Chang và cộng sự, 2004; Kalita và cộng sự, 2006; Knöll và Nordheim, 2009). Điều này đặt ra câu hỏi thú vị về lý do tại sao SRF được điều hòa trong NAc của những con chuột nhạy cảm, nhưng không kiên cường, sau căng thẳng thất bại xã hội mãn tính. Quy định khác biệt này dường như không qua trung gian bởi tín hiệu dopamine hoặc BDNF, vì những con chuột nhạy cảm hiển thị mức protein BDNF tăng và tăng tín hiệu BDNF ở hạ lưu trong NAc cũng như tăng cường bắn ra các tế bào thần kinh dopamine ở vùng bụng (VTA). động vật có khả năng phục hồi hiển thị mức tín hiệu BDNF bình thường và tốc độ bắn VTA (Krishnan và cộng sự, 2007). Một khả năng khác là biểu hiện SRF bị ức chế trong NAc để đáp ứng với sự bảo tồn glutamatergic đã thay đổi của vùng não này, mà chúng tôi đã chỉ ra là quy định khác nhau ở những con chuột nhạy cảm và dễ phục hồi (Vialou et al., 2010). Cần làm thêm để nghiên cứu trực tiếp điều này và các cơ chế có thể khác.
Các nghiên cứu gần đây sử dụng phương pháp toàn bộ bộ gen và các phương pháp khác cho thấy rằng N5 ở 10% gen mục tiêu SRF trong tế bào thần kinh là các gen ngay lập tức (Philippar et al., 2004; Ramanan et al., 2005; Etkin et al., 2006; KnUMll; Nordheim, 2009). Điều này phù hợp với dữ liệu của chúng tôi chứng minh vai trò quan trọng đối với SRF trong việc tạo ra ΔFosB, một sản phẩm cắt ngắn của gen sớm fosb, do căng thẳng mãn tính. Thật thú vị, nhiều gen mục tiêu SRF được xác định trong các nghiên cứu khác nhau này cũng đại diện cho các mục tiêu đã biết của ΔFosB trong NAc (Kumar et al., 2005; Renthal et al., 2008, 2009; Maze et al., 2010). Trong số các gen thường được quy định này, có một số gen được biết là để điều hòa các tế bào thần kinh (ví dụ, Cdk5, Arc và Actb). Điều này, đến lượt nó, phù hợp với các báo cáo rằng SRF ảnh hưởng đến động lực học Actin và sự vận động của nơ-ron trong một số loại tế bào thần kinh (Alberti et al., 2005; Ramanan et al., 2005; Knöll et al., 2006), trong khi FosB được biết đến ảnh hưởng đến sự phát triển của cột sống lưng của các tế bào thần kinh NAc (Maze et al., 2010). Các điểm cuối chức năng phổ biến như vậy có thể phản ánh các tác động phối hợp của SRF, kết hợp với việc tạo ra ΔFosB, tác động lên một loạt các gen mục tiêu phổ biến để ảnh hưởng đến hình thái tế bào thần kinh và cuối cùng là hành vi phức tạp.
SRF cũng đã được chứng minh là đóng vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh tính dẻo của khớp thần kinh và biểu hiện và hành vi của gen phụ thuộc vào hoạt động thần kinh. Ví dụ, mất cảm ứng phụ thuộc SRF của các gen sớm ngay lập tức để đáp ứng với việc tự nguyện khám phá môi trường mới hoặc kích hoạt tế bào thần kinh bằng các cơn động kinh điện giật có liên quan đến sự suy yếu synap dài hạn ở vùng đồi thị của các dị nhân Srf (Ramanan et al. , 2005; Etkin và cộng sự, 2006). Hơn nữa, sự suy giảm SRF ở đồi hải mã đã được chứng minh là gây ra sự thiếu hụt trong trầm cảm khớp thần kinh dài hạn, biểu hiện gen sớm ngay lập tức do bối cảnh mới lạ và thói quen suy yếu trong quá trình khám phá môi trường mới lạ (Etkin et al., 2006). Những dữ liệu này thiết lập tầm quan trọng của SRF trong khả năng của động vật để thích ứng thích hợp với những xáo trộn của môi trường, như trong trường hợp đã nói ở trên là học cách làm quen với môi trường mới, hoặc, trong trường hợp thích nghi với các kích thích căng thẳng tiêu cực, để ngăn chặn sự phát sinh căng thẳng -các thiếu sót về hành vi gây ra, như trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi. Do đó, chúng tôi quan sát thấy rằng các loài động vật có biểu hiện suy giảm SRF, hoặc phản ứng với căng thẳng thất bại xã hội ở những cá thể nhạy cảm hoặc thông qua việc đánh bại SRF trực tiếp, biểu hiện các hành vi giống như trầm cảm và lo lắng gia tăng. Do đối tượng trầm cảm cũng có biểu hiện với mức SRF giảm trong NAc, có thể hình dung SRF đóng một vai trò cơ bản trong việc điều chỉnh khả năng thích ứng tích cực của một cá nhân với các kích thích tiêu cực từ môi trường, một phần thông qua việc điều chỉnh biểu hiện ΔFosB trong NAc.
CƠ CHẾ KHÁC BIỆT: THÊM
Một phát hiện đáng ngạc nhiên của nghiên cứu hiện nay là, mặc dù SRF là cần thiết cho sự tích lũy ΔFosB trong NAc để đáp ứng với căng thẳng mãn tính, nhưng không bắt buộc phải sử dụng ΔFosB trong cùng một vùng não để đáp ứng với cocaine mạn tính. Tương tự như vậy, SRF là không cần thiết cho các phản ứng hành vi bình thường với thuốc. Những dữ liệu này cho thấy, mặc dù thực tế là ΔFosB được tạo ra trong NAc để đáp ứng với nhiều loại kích thích (Nestler et al., 1999; Nestler, 2008), dường như có những con đường phân tử riêng biệt dẫn đến cảm ứng ΔFosB. Một lời giải thích có thể cho những phát hiện này là các loại tế bào khác nhau một phần cho thấy sự tích lũy ΔFosB để đáp ứng với căng thẳng so với cocaine. Căng thẳng mãn tính gây ra ΔFosB gần như bằng nhau trong hai quần thể chính của các tế bào thần kinh gai trung bình NAc, những người biểu hiện chủ yếu là các thụ thể dopamine D1 so với D2, trong khi cocaine mạn tính gây ra ΔFosB chủ yếu trong các tế bào thần kinh D1 + . Do đó, có thể các con đường phụ thuộc SRF có thể quan trọng đối với cảm ứng ΔFosB trong tế bào thần kinh D1999 +. Tuy nhiên, điều này sẽ không giải thích được sự mất hoàn toàn cảm ứng ΔFosB ở chuột hạ gục SRF sau khi bị căng thẳng mãn tính, do cảm ứng xảy ra ở cả hai loại tế bào thần kinh. Một cách giải thích khác là căng thẳng mãn tính và cocaine mạn tính ảnh hưởng đến các tầng tín hiệu nội bào khác biệt, nhờ vào các phương thức hoạt động riêng biệt của chúng đối với các tế bào thần kinh NAc, với căng thẳng mãn tính có thể hoạt động thông qua việc truyền glutamatergic đã thay đổi, như đã lưu ý trước đó và cocaine mạn tính hoạt động chủ yếu qua D1 tín hiệu thụ thể (Nestler, 2008). Một khả năng khác là cảm ứng ΔFosB do căng thẳng mạn tính so với cocaine mạn tính phụ thuộc vào các cơ chế phiên mã riêng biệt được kiểm soát khác nhau bởi các đầu vào thần kinh khác nhau có liên quan đến NAc từ các vùng chiếu glutamatergic khác nhau, ví dụ, một số vùng của vỏ não trước trán, đồi thị và đồi thị. Cần nhiều công việc hơn nữa để khám phá những điều này và các khả năng thay thế.
Cùng với nhau, những phát hiện của chúng tôi xác định một cơ chế phiên mã mới, qua đó ΔFosB được tạo ra trong NAc để điều hòa các phản ứng proresilience với các kích thích căng thẳng. Nghiên cứu này cũng cung cấp cái nhìn sâu sắc mới về vai trò của SRF ở cấp độ NAc trong việc điều chỉnh các hành vi giống như trầm cảm và lo lắng. Hiểu rõ hơn về vai trò phiên mã của SRF trong việc điều chỉnh các hành vi như vậy sẽ giúp xác định các mục tiêu gen mới liên quan đến khả năng phục hồi các rối loạn liên quan đến căng thẳng và có thể tạo điều kiện cho việc phát triển các liệu pháp chống trầm cảm hiệu quả hơn trong tương lai.
Công trình này được hỗ trợ bởi các khoản tài trợ từ Viện Sức khỏe Tâm thần Quốc gia và Viện Quốc gia về Lạm dụng Ma túy và bởi một liên minh nghiên cứu với AstraZeneca. Chúng tôi cảm ơn David D. Ginty đã cung cấp chuột Srffl / fl.
Các thư tương ứng nên được gửi tới Eric J. Nestler, Khoa thần kinh học Fishberg, Trường Y khoa Mount Sinai, One Gustave L. Levy Place, Box 1065, New York, NY 10029-6574. [email được bảo vệ]
Bản quyền © 2010 các tác giả 0270-6474 / 10 / 3014585-08 $ 15.00 / 0
dự án
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Alberti S,
KHAI THÁC. Krause SM,
KHAI THÁC. Kretz O,
KHAI THÁC. Phi-líp,
KHAI THÁC. Lemberger T,
KHAI THÁC. Casanova E,
KHAI THÁC. Wiebel FF,
KHAI THÁC. Schwarz H,
KHAI THÁC. Frotscher M,
KHAI THÁC. Schütz G,
KHAI THÁC. Nordheim A
(2005) Di chuyển tế bào thần kinh trong dòng di cư của rostral đòi hỏi phải có yếu tố đáp ứng huyết thanh. Proc Natl Acad Sci USA 102: 6148 tầm 6153.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Xấu
KHAI THÁC. Ginty DD,
KHAI THÁC. Greenberg ME
(1993) Điều hòa biểu hiện gen trong các tế bào thần kinh vùng đồi thị bằng các con đường truyền tín hiệu canxi riêng biệt. Khoa học 260: 181 lên 186.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Berton O,
KHAI THÁC. McClung CA,
KHAI THÁC. Dileone RJ,
KHAI THÁC. KRG
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Russo SJ,
KHAI THÁC. Graham D,
KHAI THÁC. Tsankova NM,
KHAI THÁC. Bolanos CA,
KHAI THÁC. Rios M,
KHAI THÁC. Monteggia LM,
KHAI THÁC. Tự DW,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2006b) Vai trò thiết yếu của BDNF trong con đường dopamine mesolimbic trong căng thẳng thất bại xã hội. Khoa học 311: 864 lên 868.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Berton O,
KHAI THÁC. Covington HE 2rd.,
KHAI THÁC. Ebner K,
KHAI THÁC. Tsankova NM,
KHAI THÁC. Carle TL,
KHAI THÁC. Ulery P,
KHAI THÁC. Bhonsle A,
KHAI THÁC. Barrot M,
KHAI THÁC. KRG
KHAI THÁC. GM mới
KHAI THÁC. Singewald N,
KHAI THÁC. Birnbaum S,
KHAI THÁC. Không có RL,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2007) Cảm ứng FosB trong màu xám periaqueductal do căng thẳng thúc đẩy các phản ứng đối phó tích cực. Neuron 55: 289 tầm 300.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Trường SH
KHAI THÁC. Poser S,
KHAI THÁC. Tiểu Z
(2004) Một vai trò mới cho yếu tố phản ứng huyết thanh trong sự tồn tại của tế bào thần kinh. J Neurosci 24: 2277 tầm 2285.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Etkin A,
KHAI THÁC. Alarcón JM,
KHAI THÁC. SP Weisberg,
KHAI THÁC. Touzani K,
KHAI THÁC. Hoàng YY,
KHAI THÁC. Bắc Âu A,
KHAI THÁC. Kandel ER
. Neuron 2006: 50 tầm 127.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Heinze HJ,
KHAI THÁC. Heldmann M,
KHAI THÁC. Voges J,
KHAI THÁC. Hinrichs H,
KHAI THÁC. Marco-Pallares J,
KHAI THÁC. Hopf JM,
KHAI THÁC. Müller UJ,
KHAI THÁC. Galazky tôi,
KHAI THÁC. Sturm V,
KHAI THÁC. Không có B
KHAI THÁC. Münte TF
(2009) Chống lại sự nhạy cảm khuyến khích trong nghiện rượu nặng bằng cách sử dụng kích thích não sâu của hạt nhân accumbens: các khía cạnh khoa học cơ bản và lâm sàng. Mặt trước Hum Neurosci 3: 22.
Medline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Johnson CM,
KHAI THÁC. Đồi CS,
KHAI THÁC. Chawla S,
KHAI THÁC. Treisman R,
KHAI THÁC. Xấu
(1997) Canxi kiểm soát biểu hiện gen thông qua ba con đường riêng biệt có thể hoạt động độc lập với các tầng tín hiệu protein được kích hoạt Ras / mitogen (ERKs). J Neurosci 17: 6189 tầm 6202.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Kalita K,
KHAI THÁC. Kharebava G,
KHAI THÁC. Trịnh JJ,
KHAI THÁC. Hetman M
(Piano J Neurosci 2006: 1 tầm 1.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Kelz MB,
KHAI THÁC. Chen J,
KHAI THÁC. Carlezon WA Jr.,
KHAI THÁC. Thì thầm K,
KHAI THÁC. Gilden L,
KHAI THÁC. Beckmann,
KHAI THÁC. Steffen C,
KHAI THÁC. Trương YJ,
KHAI THÁC. Marotti L,
KHAI THÁC. Tự DW,
KHAI THÁC. Tkatch T,
KHAI THÁC. Baranauskas G,
KHAI THÁC. DJ Surmeier,
KHAI THÁC. Không có RL,
KHAI THÁC. Duman RS,
KHAI THÁC. Picciotto MR,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(1999) Biểu hiện của yếu tố phiên mã FosB trong não kiểm soát độ nhạy cảm với cocaine. Thiên nhiên 401: 272 lên 276.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Knlll B,
KHAI THÁC. Nordheim A
(2009) Tính linh hoạt chức năng của các yếu tố phiên mã trong hệ thống thần kinh: mô hình SRF. Xu hướng Neurosci 32: 432 tầm 442.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Knlll B,
KHAI THÁC. Kretz O,
KHAI THÁC. Fiedler C,
KHAI THÁC. Alberti S,
KHAI THÁC. Schütz G,
KHAI THÁC. Frotscher M,
KHAI THÁC. Nordheim A
(2006) Yếu tố đáp ứng huyết thanh kiểm soát sự lắp ráp mạch thần kinh ở vùng hải mã. Nat Neurosci 9: 195 tầm 204.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. KRG
KHAI THÁC. Hán MH,
KHAI THÁC. Graham DL,
KHAI THÁC. Berton O,
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Russo SJ,
KHAI THÁC. Laplant Q,
KHAI THÁC. Graham A,
KHAI THÁC. Lutter M,
KHAI THÁC. Lagace DC,
KHAI THÁC. Ghose S,
KHAI THÁC. Re R
KHAI THÁC. Tannous P,
KHAI THÁC. TA xanh,
KHAI THÁC. Không có RL,
KHAI THÁC. Luân xa S,
KHAI THÁC. Kumar A,
KHAI THÁC. Eisch AJ,
KHAI THÁC. Tự DW,
KHAI THÁC. Lee FS,
KHAI THÁC. et al.
(2007) Thích ứng phân tử dựa trên tính nhạy cảm và khả năng chống lại thất bại xã hội ở các khu vực thưởng cho não. Ô 131: 391 Gian 404.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Kuhn J,
KHAI THÁC. Bauer R,
KHAI THÁC. Pohl S,
KHAI THÁC. Lenartz D,
KHAI THÁC. Huff W,
KHAI THÁC. Kim EH,
KHAI THÁC. Klosterkoetter J,
KHAI THÁC. Sturm V
(2009) Các quan sát về việc cai thuốc lá không được trả tiền sau khi kích thích não sâu của các hạt nhân. Eur Addict Res 15: 196 tầm 201.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Kumar A,
KHAI THÁC. Choi KH,
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Tsankova NM,
KHAI THÁC. Theobald DE,
KHAI THÁC. Trường HT,
KHAI THÁC. Russo SJ,
KHAI THÁC. Laplant Q,
KHAI THÁC. Sasaki TS,
KHAI THÁC. Người huýt sáo KN,
KHAI THÁC. Không có RL,
KHAI THÁC. Tự DW,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2005) Tái cấu trúc Chromatin là một cơ chế quan trọng làm tăng tính dẻo của cocaine trong vân. Neuron 48: 303 tầm 314.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Mê cung tôi,
KHAI THÁC. Covington HE 2rd.,
KHAI THÁC. Ăn kiêng,
KHAI THÁC. LaPlant Q,
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Russo SJ,
KHAI THÁC. Cơ khí M,
KHAI THÁC. Mouzon E,
KHAI THÁC. Không có RL,
KHAI THÁC. Hagledy SJ,
KHAI THÁC. Ren Y,
KHAI THÁC. Sampath SC,
KHAI THÁC. Nhanh lên
KHAI THÁC. Nhà kính P,
KHAI THÁC. Tarakhovsky A,
KHAI THÁC. Schaefer A,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2010) Vai trò thiết yếu của histone methyltransferase G9a trong độ dẻo gây ra bởi cocaine. Khoa học 327: 213 lên 216.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. McClung CA,
KHAI THÁC. PGS
KHAI THÁC. Perrotti LI,
KHAI THÁC. Zachariou V,
KHAI THÁC. Berton O,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2004) DeltaFosB: một công tắc phân tử để thích nghi lâu dài trong não. Brain Res Mol Brain Res 132: 146 tầm 154.
Medline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2008) Cơ chế phiên mã của nghiện: vai trò của deltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 363: 3245 XN 3255.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Nestler EJ,
KHAI THÁC. Carlezon WA Jr.
(2006) Mạch thưởng dopamine mesolimbic trong trầm cảm. Tâm thần sinh học 59: 1151 tầm 1159.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Nestler EJ,
KHAI THÁC. Kelz MB,
KHAI THÁC. Chen J
(1999) FosB: một chất trung gian phân tử của tính dẻo thần kinh và hành vi dài hạn. Brain Res 835: 10 XN 17.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Newton SS,
KHAI THÁC. Thome J,
KHAI THÁC. Wallace TL,
KHAI THÁC. Shirayama Y,
KHAI THÁC. Schlesinger L,
KHAI THÁC. Sakai N,
KHAI THÁC. Chen J,
KHAI THÁC. Không bao giờ,
KHAI THÁC. Nestler EJ,
KHAI THÁC. RS Duman
(2002) Ức chế protein liên kết với yếu tố đáp ứng cAMP hoặc dynorphin trong nhân accumbens tạo ra hiệu ứng giống như thuốc chống trầm cảm. J Neurosci 22: 10883 tầm 10890.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Nikulina EM,
KHAI THÁC. Arrillaga-Romany I,
KHAI THÁC. Miczek KA,
KHAI THÁC. Búa RP
. Eur J Neurosci 2008: 27 tầm 2272.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Perrotti LI,
KHAI THÁC. Hadeishi Y,
KHAI THÁC. PGS
KHAI THÁC. Barrot M,
KHAI THÁC. Monteggia L,
KHAI THÁC. Duman RS,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2004) Cảm ứng ΔFosB trong các cấu trúc não liên quan đến phần thưởng sau khi bị căng thẳng mãn tính. J Neurosci 24: 10594 tầm 10602.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Perrotti LI,
KHAI THÁC. RR RR
KHAI THÁC. Cướp bóc,
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Mê cung tôi,
KHAI THÁC. Yazdani S,
KHAI THÁC. Elmore RG,
KHAI THÁC. Knapp DJ,
KHAI THÁC. Selley DE,
KHAI THÁC. Martin BR,
KHAI THÁC. Sim-Selley L,
KHAI THÁC. Bachtell RK,
KHAI THÁC. Tự DW,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2008) Các mô hình khác biệt của cảm ứng DeltaFosB trong não do lạm dụng thuốc. Synapse 62: 358 XN 369.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Phi-líp,
KHAI THÁC. Schratt G,
KHAI THÁC. Ăn kiêng C,
KHAI THÁC. Müller JM,
KHAI THÁC. Galgóczy P,
KHAI THÁC. Thu hút FB,
KHAI THÁC. Keat MT,
KHAI THÁC. Gertler F,
KHAI THÁC. Schüle R,
KHAI THÁC. Vingron M,
KHAI THÁC. Nordheim A
(2004) Fhl2 gen mục tiêu SRF đối kháng kích hoạt SRF phụ thuộc RhoA / MAL. Mol Cell 16: 867 XN 880.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Raman N,
KHAI THÁC. Thần Y
KHAI THÁC. Sarsfield S,
KHAI THÁC. Lemberger T,
KHAI THÁC. Schütz G,
KHAI THÁC. DJ Linden,
KHAI THÁC. Ginty DD
(2005) SRF làm trung gian cho sự biểu hiện gen do hoạt động và tính dẻo của khớp thần kinh nhưng không có khả năng tồn tại của tế bào thần kinh. Nat Neurosci 8: 759 tầm 767.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Carle TL,
KHAI THÁC. Mê cung tôi,
KHAI THÁC. Covington HE 4rd.,
KHAI THÁC. Trường HT,
KHAI THÁC. Alibhai I,
KHAI THÁC. Kumar A,
KHAI THÁC. Montgomery RL,
KHAI THÁC. Olson EN,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2008) Delta FosB làm trung gian giải mẫn cảm biểu sinh của gen c-fos sau khi tiếp xúc với amphetamine mãn tính. J Neurosci 28: 7344 tầm 7349.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Kumar A,
KHAI THÁC. Tiểu G
KHAI THÁC. Wilkinson M,
KHAI THÁC. Covington HE 5rd.,
KHAI THÁC. Mê cung tôi,
KHAI THÁC. Sikder D,
KHAI THÁC. Cướp bóc AJ,
KHAI THÁC. LaPlant Q,
KHAI THÁC. Ăn kiêng,
KHAI THÁC. Russo SJ,
KHAI THÁC. Vialou V,
KHAI THÁC. Luân xa S,
KHAI THÁC. Kodadek TJ,
KHAI THÁC. Chồng A,
KHAI THÁC. Kabbaj M,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2009) Phân tích toàn bộ bộ gen về điều hòa nhiễm sắc thể bằng cocaine cho thấy vai trò của sirtuins. Neuron 62: 335 tầm 348.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Schlaepfer TE,
KHAI THÁC. Cohen MX,
KHAI THÁC. Frick C,
KHAI THÁC. Kosel M,
KHAI THÁC. Nữ hoàng D,
KHAI THÁC. Axmacher N,
KHAI THÁC. Joe,
KHAI THÁC. Kreft M,
KHAI THÁC. Lenartz D,
KHAI THÁC. Sturm V
(2008) Kích thích não sâu để thưởng cho mạch làm giảm bớt anhedonia trong trầm cảm nặng chịu lửa. Thần kinh thực vật 33: 368 XN 377.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Vừng
XUẤT KHẨU. Ân sủng
(2010) Mạng lưới phần thưởng gangico-cơ sở: microcircuitry. Thần kinh thực vật 35: 27 XN 47.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Tomita H,
KHAI THÁC. Vawter MP,
KHAI THÁC. Walsh DM,
KHAI THÁC. Evans SJ,
KHAI THÁC. PV tự hào,
KHAI THÁC. Li J,
KHAI THÁC. Overman KM,
KHAI THÁC. Tôi,
KHAI THÁC. Myers RM,
KHAI THÁC. Jones,
XUẤT KHẨU. Watson SJ,
XUẤT KHẨU. Akil H,
KHAI THÁC. Bunney WE Jr.
(2004) Ảnh hưởng của các yếu tố agonal và postmortem lên hồ sơ biểu hiện gen: kiểm soát chất lượng trong các phân tích microarray hoặc não người sau khi chết. Biol Tâm thần 55: 346 tầm 352.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Tsankova NM,
KHAI THÁC. Berton O,
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Kumar A,
KHAI THÁC. Không có RL,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2006) Điều hòa nhiễm sắc thể hồi hải mã duy trì trong một mô hình chuột về trầm cảm và hành động chống trầm cảm. Nat Neurosci 9: 519 tầm 525.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Vassoler FM,
KHAI THÁC. HD HD
KHAI THÁC. Gerard ME,
KHAI THÁC. KR nổi tiếng,
KHAI THÁC. Ciraulo DA,
KHAI THÁC. Kornetsky C,
KHAI THÁC. Knapp CM,
KHAI THÁC. Đâm RC
(2008) Kích thích não sâu của vỏ hạt nhân accumbens làm suy giảm cocaine mồi gây ra sự phục hồi của việc tìm kiếm thuốc ở chuột. J Neurosci 28: 8735 tầm 8739.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Vialou V,
KHAI THÁC. Cướp bóc AJ,
KHAI THÁC. QC tạm thời,
KHAI THÁC. Covington HE 4rd.,
KHAI THÁC. Ăn kiêng,
KHAI THÁC. Ohqueri YN,
KHAI THÁC. Mouzon E,
KHAI THÁC. Vội vàng AJ 8rd.,
KHAI THÁC. ELts,
KHAI THÁC. Wallace DL,
KHAI THÁC. Iñiguez SD,
KHAI THÁC. Ohqueri YH,
KHAI THÁC. Steiner MA,
KHAI THÁC. Warren BL,
KHAI THÁC. KRG
KHAI THÁC. Bolaños CA,
KHAI THÁC. Không có RL,
KHAI THÁC. Ghose S,
KHAI THÁC. Berton O,
KHAI THÁC. Tamminga CA,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2010) FosB trong các mạch thưởng cho não làm trung gian cho khả năng phục hồi đối với các phản ứng căng thẳng và chống trầm cảm. Nat Neurosci 13: 745 tầm 752.
CrossRefMedline
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Wilkinson MB,
KHAI THÁC. Tiểu G
KHAI THÁC. Kumar A,
KHAI THÁC. LaPlant Q,
KHAI THÁC. Cho thuê W
KHAI THÁC. Sikder D,
KHAI THÁC. Kodadek TJ,
KHAI THÁC. Nestler EJ
(2009) Điều trị và khả năng phục hồi của Imipramine thể hiện sự điều tiết nhiễm sắc tương tự trong vùng thưởng não quan trọng. J Neurosci 29: 7820 tầm 7832.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
XUẤT KHẨU. ↵
KHAI THÁC. Tiểu Z,
KHAI THÁC. Dudek H,
KHAI THÁC. Miranti CK,
KHAI THÁC. Greenberg ME
(1996) Luồng canxi qua thụ thể NMDA tạo ra sự phiên mã gen ngay lập tức bằng cơ chế phụ thuộc MAP kinase / ERK. J Neurosci 16: 5425 tầm 5436.
Tóm tắt / MIỄN PHÍ Toàn văn
;