Mae niwrolastrledd dopaminergig a achosir gan opioid endogenaidd yn yr ardal fentral yn dylanwadu ar wobr naturiol a opiad (2014)

SYLWADAU: Mae adroddiadau Astudiaethau DeltaFosB rydym yn aml yn dyfynnu pob ffocws y cnewyllyn accumbens (canolfan wobrwyo), a chanfod bod rhyw yn baglu'r un mecanweithiau ymennydd â meth a chocên. O'r astudiaeth nodedig gan yr un ymchwilydd hwn (Deddf Gwobrwyo Naturiol a Chyffuriau ar Fecanweithiau Plastigrwydd Niwedol Cyffredin gyda ΔFosB fel Cyfryngwr Allweddol (2013)):

Felly, mae gwobrau naturiol a chyffuriau nid yn unig yn cydgyfarfod ar yr un llwybr niwral, maent yn cydgyfarfod ar yr un cyfryngwyr moleciwlaidd, ac yn debygol yn yr un niwronau yn y Niwclews Accumbens, i ddylanwadu ar amlygrwydd cymhelliant ac “eisiau” y ddau fath o wobr

Mae cymryd i ffwrdd: meth, cocên, a rhyw i gyd yn gwneud yr un pethau sylfaenol i'r un celloedd nerfau yn y ganolfan wobrwyo (cnewyllyn nuumbens), beth bynnag y gallant ei wneud yn wahanol mewn mannau eraill yn yr ymennydd. Roedd hyn yn datgymalu'r pwynt siarad arferol bod gwobrau a chyffuriau naturiol yn wahanol o ran mecanweithiau ac effeithiau.

Archwiliodd yr astudiaeth newydd hon yr hyn y mae rhyw yn ei wneud i'r VTA. Y VTA yw lle mae'r celloedd nerfol sy'n cynhyrchu dopamin yn cychwyn - ac maen nhw'n canghennu i'r niwclews accumbens, cortecs blaen, ac amygdala. Yn y bôn y VTA yw ffynhonnell (wellspring) y rhan fwyaf o'n dopamin. Gweler y 2 lun hyn o'r gylched wobrwyo: Pic1, Pic2

Canfu ymchwilwyr fod rhyw (uchafbwynt) yn achosi i gyrff y celloedd yn yr VTA grebachu dros dro (mewn gwrywod). Cyrff cell a'u dendrites cynnwys mater llwyd yr ymennydd. Dyma'n union beth mae caethiwed heroin yn ei wneud i'r VTA (Dim defnydd un tro o heroin, ond defnydd heroin cronig). Noder bod yr un peth yn crebachu yn y celloedd VTA yn digwydd mewn pobl sy'n gaeth i heroin.

Mae'r crebachu yn y gell a achosir gan ryw yn para am o leiaf ddyddiau 7. Roedd y newidiadau a achoswyd gan ryw wedi dychwelyd i normal ar ddiwrnodau 30, ond dim ond diwrnodau 1, 7, a 30 a aseswyd gan yr ymchwilwyr yn unig.

Mae crebachu cyrff y celloedd mewn caethiwed i heroin yn arwain at dopamin is yn y niwclews accumbens - neu'r hyn rydyn ni'n ei alw desensitization. Gweinyddodd yr ymchwilwyr forffin i'r llygod mawr i asesu eu hymateb (ar ôl rhyw), ond ni ddigwyddodd dim. Fel arfer mae'r llygod mawr yn hoffi'r morffin lawer, ond yma cawsant eu dadsensiteiddio dros dro. Yn fyr, nid oedd cylched wobrwyo llygod mawr ôl-alldaflu yn ymatebol i'r lefel isel o heroin. Roedd ymchwilwyr o'r farn y byddai angen dosau uwch i gael adwaith llygod mawr “normal”.

I grynhoi - Mae rhyw (dros dro) yn gwneud yr un peth yn union yn y VTA ag y mae caethiwed i heroin: crebachu cyrff dopamin sy'n cynhyrchu dopamin. Mae hyn yn arwain at dopamin is yn y ganolfan wobrwyo, a llai o ymatebolrwydd i narcotics - ac mae'n cymryd o leiaf 7 diwrnod i ymennydd llygod mawr wella.

 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

Pitswyr KK1, Coedlannau CM2, Beloate LN3, Fuller J2, Van S2, Frohmader CA2, Laviolette SR2, Lehman MN4, LM Coolen5.

Crynodeb

Mae gwobrwyo naturiol a chyffuriau cam-drin yn cydgyfarfod ar y llwybr mesolimbic ac yn ysgogi mecanwaith cyffredin o blastigedd nerfol yn y cnewyllyn nuumbens. Mae amlygiad cronig i opiates yn cymell plastigrwydd mewn niwronau dopaminergig yn yr ardal resymol fentrol (VTA), sy'n rheoleiddio goddefgarwch gwobr morffin.

Yma, rydym yn profi'r rhagdybiaethau bod rhyddhau cymysgiad o opioidau mewndarddol yn y VTA yn achosi newidiadau morffolegol i gelloedd dopamin VTA mewn llygod mawr gwrywaidd, sydd yn ei dro yn rheoleiddio'r mynegiant hirdymor o atgyfnerthu ymddygiad rhywiol o ganlyniad i brofiad.

Yn gyntaf, lleihaodd profiad rhywiol VTA dopamine rhyw ddydd 1 maint a 7, ond nid 30 diwrnod ar ôl y sesiwn paru ddiwethaf. Cafodd yr effaith hon ei blocio â naloxone cyn pob sesiwn paru; felly, roedd plastigrwydd cell dopamine VTA yn ddibynnol ar weithredu opioidau mewndarddol.

Yn ei dro, roedd VTA plasticity yn gysylltiedig â gwobr opiad newidiol, gan nad oedd gwrywod a brofwyd yn rhywiol yn ddewis lle amodol ar gyfer 0.5 mg / kg o forffin.

Nesaf, penderfynwyd a yw gweithredu opioid endogenaidd yn cyfryngu gwobr rhywiol a chof mewn llygod mawr gwrywaidd sy'n cael eu trin â naloxone yn ystod profiad paru, naill ai yn systematig neu o fewn VTA. Ni wnaeth Naloxone atal y hwyluso cychwynnol o ymddygiad rhywiol a achoswyd gan brofiad dros sesiynau paru ailadroddus, neu ddewis lle cyflyru ar gyfer paru. Fodd bynnag, roedd triniaeth naloxone yn gwanhau'r mynegiant tymor hwy o hwyluso profiad a achosir gan ymddygiad rhywiol ac actifadu nerfol mewn ardaloedd mesolimbic a achoswyd gan giwiau cyflyru cysylltiedig â matsio.

Gyda'i gilydd, mae'r data hyn yn dangos bod opioidau mewndarddol yn ystod cymathu yn achosi plastigrwydd niwral mewn niwronau dopamin VTA sy'n ymddangos yn hanfodol ar gyfer gwobr morffin a chof hirdymor am ymddygiad gwobrwyo naturiol.

 

Cyflwyniad

Mae ymddygiad gwobrwyo naturiol yn cael ei gyfryngu gan y system mesocorticolimbicMeisel a Mullins, 2006; Hoebel et al., 2009; Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a; Young et al., 2011; Blum et al., 2012). Mae cyffuriau cam-drin yn achosi newidiadau niwral yn y system hon, sydd yn ei dro yn cyfrannu at ddatblygu a mynegi cam-drin sylweddau (Hyman et al., 2006; Nestler, 2012). Yn y gorffennol, penderfynasom fod profiad gydag ymddygiad gwobrwyo naturiol, hy profiad rhywiol mewn llygod mawr gwrywaidd, hefyd yn achosi plastigrwydd niwral yn y cnewyllyn cnewyllol (NAc), gan gynnwys meingefnau dendritig cynyddol (Pitchers et al., 2010a) a deltaFosB (Pitchers et al., 2013). Yn ei dro, mae'r plastigrwydd hwn a ysgogir gan ryw yn hanfodol ar gyfer effeithiau profiad rhyw wrth gymysgu wedyn, a amlygir fel hwyluso ymddygiad rhywiol a pherfformiad (Pitchers et al., 2010b, 2012, 2013). At hynny, mae profiad rhyw yn newid ymatebolrwydd i seicostimulayddion, gan gynnwys sensiteiddio gweithgaredd locomotif a gwobrwyo gwell (Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a, 2013).

Mae'r NAc yn un targed i lawr yr afon o'r niwronau dopaminergig yn yr ardal resymol fentrol (VTA). Mae niwronau dopamin VTA yn cael eu hysgogi yn ystod paru ac yn dilyn dod i gysylltiad â chiwiau wedi'u cyflyru gan ragfynegi gwobr rywiol (Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010a), drwy peptid opioid endogenaidd (EOP) - sy'n rhwymo wrth dderbynyddion μ-opioid (MORs; Matthews ac Almaeneg, 1984; Johnson a Gogledd, 1992; Klitenick et al., 1992; Ikemoto et al., 1997; Balfour et al., 2004). Felly, mae dod i gysylltiad â ciwiau wedi'u cyflyru yn rhagfynegi ymddygiad rhywiol yn achosi rhyddhau EOP a VTA dopamine-cell activation, sy'n hwyluso cymhelliant rhywiol (Mitchell a Stewart, 1990; van Furth et al., 1995; van Furth a van Ree, 1996a) rhyddhau dopamin yn y NAc (Fiorino et al., 1997).

Mae amlygiad mynych i opiadau exogenous yn achosi newidiadau morffolegol yn y VTA (Mazei-Robison et al., 2011; Mazei-Robison a Nestler, 2012), llai o faint o niwronau dopamin VTA (Sklair-Tavron et al., 1996; Spiga et al., 2003; Chu et al., 2007; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011), lefelau is o broteinau niwrolamentiad (Beitner-Johnson et al., 1992), mwy o gyffurdeb o gelloedd dopamin, ac allbwn isoplasmig is ac allbwn dopamin i NAc (Beitner-Johnson et al., 1992; Mazei-Robison et al., 2011). Mae'r newidiadau niwron dopamin VTA hyn yn achosi goddefgarwch o ran gwobr morffin ac maent yn fyrhoedlog wrth iddynt ymledu o fewn mis i ymwrthod â chyffuriau (Russo et al., 2007). Ar hyn o bryd, mae'n aneglur a yw plastigrwydd yn y niwronau dopamin VTA yn unigryw i weithredoedd opiadau neu os cânt eu cynhyrchu hefyd trwy ryddhau EOP yn ystod ymddygiadau sy'n rhoi boddhad naturiol.

Yma, rydym yn profi'r ddamcaniaeth bod profiad gwobrwyo naturiol yn achosi niwroplastigedd tebyg i'r hyn a achosir gan opiadau, ac felly, bod opiadau yn cydgyfeirio ar fecanwaith plastigrwydd sy'n hanfodol ar gyfer gwobrwyo naturiol a gwobrwyo cof. Rydym yn profi a yw profiad rhywiol mewn llygod mawr gwrywaidd yn lleihau maint niwronau dopamin VTA trwy broses sy'n dibynnu ar weithredu EOP yn y VTA. Ymhellach, rydym yn ymchwilio i weld a yw newidiadau a ysgogir gan EOP mewn niwronau dopamin VTA yn gysylltiedig ag atgyfnerthu ymddygiad sy'n rhoi boddhad naturiol a phriodoldeb priodoldeb cymhelliant i giwiau sy'n gysylltiedig â gwobr naturiol, gan achosi croes-oddefgarwch i wobr morffin.

Deunyddiau a Dulliau

Anifeiliaid

Cafwyd llygod mawr Sprague-Dawley gwryw (200 – 225 g) gan Charles River ac fe'u lleolir mewn parau mewn ystafelloedd wedi'u goleuo'n artiffisial ar gylch golau / tywyll 12 h ym mhob arbrawf (diffoddwch yn 10: 00 AC ac eithrio'r arbrawf goddefgarwch morffin , goleuadau oddi ar 5: 00 PM). Roedd bwyd a dŵr ar gael ad libitum ac eithrio yn ystod profion ymddygiad. Roedd benywod benywaidd yn ovariectomized ac yn cael eu mewnblannu â chansiwlau SANASTIG 5% 17-β-estradiol yn wresog (diamedr mewnol 1.98 mm, hyd 0.5, Dow-Corning). Cafodd chwistrelliadau o progesteron (isgroenol, 500 μg yn 0.1 ml o olew sesame) eu rhoi 3 – 6 h cyn profi i gymell derbyniad rhywiol. Cymeradwywyd yr holl weithdrefnau gan Brifysgol Gorllewin Ontario a Phwyllgorau Gofal Anifeiliaid Prifysgol Michigan, a chydymffurfiwyd â chanllawiau Cyngor Canada ar Ofal Anifeiliaid a Sefydliadau Iechyd Cenedlaethol yn ymwneud ag anifeiliaid asgwrn cefn mewn ymchwil.

Mae cwrs amser VTA dopamin yn newid maint

Sesiynau paru dyddiol.

I astudio'r cwrs amser o newidiadau mewn niwronau dopamin, mae maint rhai yn yr VTA, anifeiliaid rhywiol profiadol a naïf yn cael eu lladd yn 1, 7, neu 31 d (n = 5 – 8 fesul grŵp) ar ôl diwrnod olaf paru (profiadol) neu drin (naïf). Cafodd grwpiau â phrofiad rhywiol eu cydweddu ar gyfer ymddygiad rhywiol yn ystod y sesiwn paru olaf, yn ogystal â chyfanswm yr ejaculations dros y pum sesiwn (cyfartaledd o 5 ar gyfer pob grŵp), ac nid oeddent yn wahanol mewn unrhyw baramedr o ymddygiad rhywiol.

Sesiynau cynhesu.

Roedd dynion gwrywaidd rhywiol yn cael eu neilltuo i naill ai dau gyflwr arbrofol: rhywiol naïf neu brofiad rhywiol. Caniatawyd i anifeiliaid â phrofiad rhywiol gymysgu bum gwaith ar ddiwrnodau olynol gyda merched derbyniol mewn cewyll prawf petryal (60 × 45 × 50 cm) nes arddangos ejaculation neu hyd at 1 h (pa un bynnag ddaeth gyntaf). Glanhawyd y cewyll yn drylwyr gyda thoddiant ethanol 70% ac ychwanegwyd dillad gwely ffres rhwng sesiynau paru. Perfformiwyd ymddygiad rhywiol yn ystod y cyfnod tywyll (2-6 h ar ôl dechrau'r tywyllwch). Dim ond anifeiliaid a oedd yn ymledu yn ystod o leiaf pedair o'r pum sesiwn paru a ystyriwyd yn brofiadol yn rhywiol ac wedi'u cynnwys mewn arbrofion. Arsylwyd yr holl sesiynau paru a chofnodwyd ymddygiad rhywiol. Nifer y mowntiau (M) (M) sy'n gosod cudd (ML; amser; cyflwyniad o'r fenyw i'r cyntaf), latency intraction (IL; amser o gyflwyno'r fenyw i'r cyntaf), a latency ejaculation (EL; cofnodwyd amser o'r ymyriad cyntaf i ejulation)Agmo, 1997). Gosodwyd anifeiliaid naïf mewn cawell prawf glân ar gyfer 1 h ar yr un pryd â gwrywod â phrofiad rhywiol yn paru yn yr un ystafell, fel eu bod yn agored i arogleuon benywaidd pell, a lefelau tebyg o aflonyddwch a newydd-deb amgylcheddol fel dynion profiadol.

Labelu imiwnofflwlyddoledd.

Cafodd anifeiliaid eu hanestheiddio'n ddwfn gan ddefnyddio sodiwm pentobarbital (270 mg / kg, ip) a'u tyllu mewn modd cynhenid ​​â 50 ml o halen 0.9%, wedi'i ddilyn gan 500 ml o baraformaldehyde 4 mewn byffer sodiwm phosphate 0.1 m (PB). Tynnwyd Brains ac fe'u gosodwyd ar ôl ar gyfer 1 h ar dymheredd ystafell (RT) yn yr un trwsio, ac yna'u trochi mewn swcros 20 a asid sodiwm 0.01% yn 0.1 m PB i'w storio yn 4 ° C. Torrwyd adrannau coronaidd yn 35 μm ar ficrotome rhewi (H400R, Microm) a chawsant eu casglu mewn pedair cyfres gyfochrog mewn toddiant cryoprotectant (swcros 30%, 30% glycol mewn 0.1 m PB) ac yna ei storio yn 20 ° C. Perfformiwyd pob deorfa yn RT gyda chythrwfl ysgafn a rinsio helaeth gyda 0.1 m PBS, pH 7.35, rhwng deoriadau. Roedd yr adrannau'n agored i 1% H2O2 ar gyfer 10 min i ddinistrio perocsidasau mewndarddol, yna eu blocio ar gyfer 1 h mewn datrysiad deori (PBS +: PBS sy'n cynnwys 0.4 Triton X-100; Sigma-Aldrich) a serum albumin buchol 0.1 (Labordai Ymchwil Immuno Jackson). Nesaf, cafodd adrannau eu deor dros nos ar RT mewn tyrosine llygoden hydroxylase (TH) -antibody (1: 20 000; Millipore). Ar ôl deoriad gwrthgyrff sylfaenol, cafodd adrannau eu deor yn gwrthgorffyn gwrth-lygoden AlexaFluor 555-cyfunedig (1: 100; Invitrogen, Eugene, NEU) ar gyfer 30 min. Yn olaf, golchwyd adrannau â PN m 0.1, wedi'u gosod ar sleidiau gwydr Superfrost Plus, wedi'u sychu a'u gorchuddio â gelvatol sy'n cynnwys octan yr asiant gwrth-pylu 1,4-diazabicyclo (2,2) (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Dadansoddi data: maint niwronau.

Cymerwyd delweddau o niwronau im-imiwnyddol (IR) yn yr VTA ar chwyddhad 40 × ar dair lefel frodorol i lefel geudal (Balfour et al., 2004). Ni chanfuwyd unrhyw wahaniaethau rhwng celloedd ar y gwahanol lefelau. Dadansoddwyd rhywfaint o faint niwronau TH-IR gan ddefnyddio ImageJ (Sefydliadau Iechyd Cenedlaethol). Mesurwyd arwynebedd cymedrig, perimedr, a chylchedd fel y disgrifiwyd gan Sklair-Tavron et al. (1996). Dadansoddwyd cyfartaledd o gelloedd 25 fesul anifail (ynghyd â phob lefel VTA XNUM) a dim ond celloedd â niwclews amlwg oedd wedi'u cynnwys. Ar gyfer pob anifail, cyfrifwyd yr arwynebedd cymedrig, y perimedr a'r cylchrediad. Ar gyfer dadansoddiad ystadegol defnyddiwyd ANOVA dwy ffordd [ffactorau: profiad rhywiol (rhyw a brofwyd neu ryw naïf) ac amser (3, 1, neu 7 d)] wedi'i ddilyn gan post hoc cymariaethau gan ddefnyddio dull Holm-Sidak gyda lefel arwyddocâd 0.05.

Newidiadau di-dopamin VTA

Sesiynau paru biweekly.

Er mwyn profi a oes angen profiad rhywiol yn ystod sesiynau paru dyddiol ar gyfer gostyngiadau mewn maint niwronau TH-IR, dadansoddwyd niwronau VTA dopamine o anifeiliaid a oedd wedi paru yn ystod pum sesiwn paru biweekly. Roedd y sesiynau cwympo fel y disgrifiwyd uchod, ond dros gyfnod o wythnosau 2.5. Casglwyd Brains 7 d ar ôl paru neu drin.

Labelu Immunoperoxidase.

Yn ogystal, cafodd ei brofi p'un a fyddai defnyddio technegau staenio sensitif gyda imiwneddocsidas a chromogen yn canfod hefyd y byddai delweddu TH-IR yn newid maint. Roedd prosesu tylwyth a meinwe yn ymddygiad fel y disgrifiwyd uchod. Yn dilyn triniaeth gyda 1% H2O2 a PBS +, cafodd adrannau eu deor dros nos ar RT mewn tyrosine polyclonal hydroxylase (TH) llygoden -antibody (1: 20 000; Millipore). Ar ôl y deoriad gwrthgyrff sylfaenol, dechreuwyd deorio'r adrannau â geifr gwrth-gwningen biotin-cyfun IgG (1 h, 1: 500 mewn PBS +; Labordai fector), perocsidas rhuddygl-biotin-horseradish (1 h, elit ABC; 1: 1 000 yn PBS Labordai fector, a tetrahydrochloride 3,3′-diaminobenzidine (min 10, 0.02%, DAB; Sigma-Aldrich) wedi'i wella â sylffad nicel i mewn (0.02% mewn 0.1 m PB) gyda hydrogen perocsid (0.015%). Golchwyd adrannau'n drylwyr yn 0.1 m PB i derfynu'r adwaith a'u gosod ar Superfrost codedig ynghyd â sleidiau gwydr (Fisher) gyda gelatin 0.3% yn ddH2O. Ar ôl dadhydradu, roedd yr holl sleidiau wedi'u gorchuddio â mowntiwr DPX (xylene dibutyl phthalate; Sigma-Aldrich).

Dadansoddi data: maint niwronau.

Dadansoddwyd celloedd TH-IR ar gyfer arwynebedd, perimedr a chylcholdeb fel y disgrifir uchod. Yn ogystal, dadansoddwyd celloedd TH-IR yn substantia nigra (SN), yn yr un adrannau a ddefnyddir i ddadansoddi celloedd VTA TH-IR. Yn olaf, yn dilyn dadansoddiad o gelloedd VTA a SN TH-IR, gwrth-ddaliwyd adrannau gan ddefnyddio fioled cresyl a dadansoddwyd celloedd nad ydynt yn rhai TH-IR gan ddefnyddio'r un dulliau â'r rhai a ddisgrifir uchod. Cymharwyd y gwahaniaethau rhwng grwpiau naïf a grwpiau profiadol gan ddefnyddio Myfyrwyr dwy gynffon t profion gyda lefel arwyddocâd 0.05.

Effeithiau nalocson ar leihad dopamin sy'n cael ei ysgogi gan brofiad, sef lleihau maint

Er mwyn penderfynu a oedd MORs yn chwarae rhan mewn newidiadau a achoswyd gan brofiad rhyw mewn maint niwronau dopamin, cafodd MOR ei flocio yn ystod ymddygiad rhywiol. Enillodd hanner yr anifeiliaid brofiad rhywiol, tra bod yr hanner arall wedi cael eu trin ond yn aros yn naïf yn rhywiol. Caniatawyd i anifeiliaid â phrofiad rhywiol gymysgu ar 5 o ddyddiau olynol. O fewn y grwpiau â phrofiad rhywiol a naïf, cafodd anifeiliaid eu trin â naloxone antagonist MOR (10 mg / kg, sc; Sigma-Aldrich, wedi'i hydoddi mewn 0.9% halen) neu funud 30 hallt cyn cyflwyno'r fenyw (profiadol) neu cyn ei thrin (naïf); a thrwy hynny greu pedwar grŵp arbrofol: halen naïf yn rhywiol (Naive Sal), naloxone naïf yn rhywiol (Naive NLX), halen sydd â phrofiad rhywiol (Exp Sal), a naloxone â phrofiad rhywiol (Exp NLX; n = 5 – 8 fesul grŵp). Ni chafodd triniaeth nalocson effeithiau ystadegol arwyddocaol ar unrhyw baramedr o ymddygiad rhywiol, ar unrhyw un o'r 5 d, ac roedd grwpiau naloxone a thrin halwynog yr un fath mewn profiad rhywiol. Lladdwyd pob anifail trwy darlifiad mewnwythiennol 7 d ar ôl y sesiwn paru ddiwethaf. Cynhaliwyd rhannu, gwrthimiwnocemeg, a dadansoddi data (ANOVA dwy ffordd; ffactorau: profiad rhyw a thriniaeth cyffuriau) ar gyfer maint dopamin fel y disgrifir uchod.

Dewis lle wedi'i gyflyru â morffin

Dylunio arbrofol.

Yn flaenorol, Russo et al. (2007) dangos bod morffin cronig yn cymell goddefgarwch i wobr morffin. Gan fod profiad rhywiol a morffin cronig yn achosi gostyngiadau tebyg mewn niwtronau dopamine mewn maint VTA, profwyd perthnasedd swyddogaethol y newidiadau morffolegol a achoswyd gan ryw ar gyfer gwobr morffin. Rhannwyd anifeiliaid â phrofiad rhywiol a naïf yn chwe grŵp arbrofol gwahanol (n = 9 – 13 fesul grŵp) yn seiliedig ar ymddygiad rhywiol (rhywiol naïf neu brofiadol) a dos morffin (0.5, 5.0, neu 10.0 mg / kg, ip) a chawsant eu profi ar gyfer dewis lle cyflyredig â morffin (CPP).

Morffin-CPP.

Cynhaliwyd cyflyru 1 d ar ôl y sesiwn paru ddiwethaf a chafodd grwpiau eu paru ar gyfer perfformiad rhywiol yn ystod y sesiwn paru ddiwethaf. Roedd y patrwm CPP a ddefnyddiwyd yn cynnwys esgus, dyddiau cyflyru, ac ôl-brawf, ac roedd cyfarpar yn seiliedig ar Tenk et al. (2009). Yn fyr, roedd y cyfarpar CPP (MED Associates) yn cynnwys tair siambr wahanol. Rhwng pob sesiwn, cafodd y cyfarpar ei lanhau'n drylwyr gyda hydoddiant ethanol o 70% er mwyn sicrhau cyn lleied â phosibl o giwiau arogleuol. Er mwyn penderfynu ar ddewisiadau unigolion, cynhaliwyd pretest lle cafodd anifeiliaid fynediad am ddim i'r cyfarpar cyfan am 15 munud. Fel grŵp, ni ddangosodd anifeiliaid ffafriaeth sylweddol am siambr benodol, ond roedd gan bob anifail unigol ychydig o ddewis cychwynnol. Cafodd llygod mawr a ddangosodd ffafriaeth sylweddol am un o'r siambrau (> gwahaniaeth 200 s rhwng yr amser a dreuliwyd ym mhob un o'r siambrau; <5% o anifeiliaid) yn ystod yr ornest eu heithrio o'r astudiaeth. Yn ystod cyflyru, cafodd cyffur ei baru naill ai i siambr a ffefrir i ddechrau neu heb ei ddewis gan ddefnyddio patrwm diduedd (Tzschentke, 2007) ac anifeiliaid wedi'u cyfyngu i'r siambrau ar gyfer min 30. Cafodd anifeiliaid eu chwistrellu â halen (ip) yn y bore (9: 00 AC i 12: 00 PM) a'u cyfyngu i'r siambr halen-baru (rheolaeth). Yn y prynhawn (1: 00 – 4: 00 PM), cafodd anifeiliaid eu chwistrellu â morffin (ip, 0.5 mg / kg, 5.0 mg / kg neu 10.0 mg / kg; sylffad morffin wedi'i hydoddi mewn halen 0.9%, Johnson Matthey) ac wedi'i gyfyngu i'r siambr mewn parau morffin. Roedd dau ddiwrnod cyflyru ar anifeiliaid. Y diwrnod wedyn (3 d ar ôl diwrnod olaf y paru), cynhaliwyd prawf ôl-brawf, yn union yr un fath â'r esgus. Ar gyfer dadansoddiad ystadegol, cymharwyd yr amser a dreuliwyd yn y siambr mewn parau morffin yn ystod yr ôl-brawf â'r amser a dreuliwyd yn y siambr halen-bâr yn ystod y prawf ar gyfer dynion a oedd yn rhywiol naïf neu ddynion profiadol o fewn pob dos gan ddefnyddio pâr t prawf. p Ystyriwyd bod <0.05 yn ystadegol arwyddocaol. Derbyniodd grwpiau rheoli ychwanegol o anifeiliaid rhywiol naïf a phrofiadol halwynog mewn siambrau pâr a heb bâr i wasanaethu fel rheolyddion negyddol. Ni chanfuwyd unrhyw wahaniaethau yn yr amser a dreuliwyd rhwng siambrau ar gyfer y naill grŵp na'r llall.

Effeithiau nalocson systemig ar hwyluso ymddygiad rhywiol o ganlyniad i brofiad

Dylunio arbrofol.

Mae profiad rhywiol yn arwain at hwyluso ymddygiad rhywiol sy'n cael ei gynnal am o leiaf fis 1 (Pitchers et al., 2012). I ddadansoddi effaith blocio MOR ar hwyluso ymddygiad rhywiol o ganlyniad i brofiad, derbyniodd anifeiliaid â phrofiad rhywiol naill ai nalocson neu halen cyn y pum sesiwn paru yn olynol (n = 12 yr un) fel y disgrifir uchod. Un wythnos ar ôl y sesiwn paru ddiwethaf, cynhaliwyd prawf paru terfynol lle caniatawyd i bob anifail gymysgu nes un ejaculation neu hyd at 1 h. Ni roddwyd unrhyw driniaeth naloxone na halwynog cyn paru ar y diwrnod prawf terfynol. Cymharwyd paramedrau paru i benderfynu a oedd naloxone yn effeithio ar hwylusiad paru a achoswyd gan ryw (diwrnod 1 vs diwrnod 5) neu gynnal yr hwylusiad hwn (diwrnod 5 vs test) gan ddefnyddio ANOVA [ffordd: triniaeth (halwynog yn erbyn naloxone ) a dull dydd (1 dydd, diwrnod 5, neu brawf)] a Holm – Sidak ar gyfer post hoc cymariaethau. Ar gyfer pob prawf ystadegol, p Ystyriwyd bod <0.05 yn ystadegol arwyddocaol.

Arbrofion rheoli ychwanegol

Naloxone systemig ar ddiwrnod y prawf.

Er mwyn dangos nad oedd ymddygiad rhywiol newidiol ar ddiwrnod y prawf paru terfynol oherwydd absenoldeb nalocson, gwnaethom weinyddu naill ai naloxone neu halen ar y diwrnod prawf paru olaf i anifeiliaid a oedd yn paru â naloxone wrth iddynt gael profiad rhywiol. Yn benodol, derbyniodd pob anifail bigiad naloxone (10 mg / kg, sg) 30 munud cyn paru i un ejulation yn ystod 5 diwrnod yn olynol. Ar ddiwrnod prawf 7 d yn ddiweddarach, cafodd tua hanner yr anifeiliaid bigiad o naloxone (10 mg / kg, n = 7) neu halen (n = 6) 30 min cyn cyflwyno menyw dderbyngar. Arsylwyd a chofnodwyd ymddygiad rhywiol. Cymharwyd paramedrau paru i benderfynu a oedd naloxone yn effeithio ar hwylusiad paru a achoswyd gan ryw (diwrnod 1 vs diwrnod 5) neu gynnal yr hwylusiad hwn (diwrnod 5 vs test) gan ddefnyddio ANOVA [ffordd: triniaeth (halwynog yn erbyn naloxone ) a dull dydd (1 dydd, diwrnod 5, neu brawf)] a Holm-Sidak ar gyfer post hoc cymariaethau. Ar gyfer pob prawf ystadegol, p Ystyriwyd bod <5% yn ystadegol arwyddocaol.

Effeithiau nalocson ar fynegiant tymor byr o ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso.

Cafodd effeithiau triniaeth naloxone (10 mg / kg, sc) yn ystod paru ei brofi ar ymddygiad rhywiol dilynol yn ystod diwrnod prawf paru terfynol, a gynhaliwyd dim ond 1 d ar ôl paru diwethaf (halen, n = 5; naloxone, n = 4).

Cyn-driniaeth naloxone systemig.

I benderfynu a yw nalocson yn cael ei drin dro ar ôl tro yn achosi amhariad ar ymddygiad rhywiol 7 d ar ôl y driniaeth ddiwethaf, derbyniodd anifeiliaid rhywiol naïf bum pigiad naloxone (10 mg / kg, sc) neu halen hallt bob dydd yn olynol cyn prawf paru 7 d ar ôl y naloxone terfynol neu chwistrelliad halwynog. Ar y diwrnod prawf terfynol hwn, ni chafodd anifeiliaid unrhyw bigiad. Arsylwyd a chofnodwyd ymddygiad rhywiol fel y disgrifir uchod. Cymharwyd paramedrau paru rhwng grwpiau a oedd yn defnyddio heb eu paru t profion. Ar gyfer pob prawf ystadegol, p Ystyriwyd bod <5% yn ystadegol arwyddocaol.

Gwobr naloxone systemig a rhyw.

Un posibilrwydd ar gyfer effeithiau gwanhau naloxone ar arddangos cynnal a chadw ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso yw bod naloxone yn blocio effeithiau buddiol ymddygiad rhywiol. I brofi'r posibilrwydd hwn, cynhaliwyd y patrwm CPP ar gyfer ymddygiad rhywiol yn syth ar ôl pigiad naloxone neu halwynog mewn gwrywod heb unrhyw brofiad rhywiol blaenorol. Roedd y weithdrefn CPP yn debyg i'r hyn a ddisgrifiwyd uchod ar gyfer morffin-CPP, gan gynnwys pretest, diwrnodau cyflyru, ac ar ôl y prawf.

Cafodd ymddygiad rhywiol ei baru gyda'r siambr nad oedd yn cael ei chyfeirio i ddechrau. Mewn modd gwrthbwyso, cafodd pob anifail bigiad o naloxone (n = 12) neu halen (n = 11) 30 min cyn cael mynediad i fenyw dderbyngar. Hyd cyfartalog y sesiwn paru oedd ∼13 munud. Un funud yn dilyn ejaculation, rhoddwyd yr anifail yn y siambr barau ar gyfer min 30. Ar y diwrnod cyflyru arall, cafodd anifeiliaid bigiad o naill ai nalocson neu halen (pa un bynnag a gawsant cyn paru), ac fe'u gosodwyd yn y siambr ddigymell ar gyfer min 30. Nesaf, cynhaliwyd prawf ôl-weithredol, yn union yr un fath â'r esgus. Er mwyn pennu dewis siambr, cymharwyd yr amser a dreuliwyd yn y siambr barau yn ystod y prawf ac ar ôl y prawf. Ar gyfer dadansoddiad ystadegol, paru t defnyddiwyd profion i gymharu sgoriau ffafriaeth a gwahaniaeth, ac amser mewn siambr mewn parau yn ystod y prawf ac ôl-brawf i benderfynu a ffurfiwyd CPP sylweddol ar gyfer ymddygiad rhywiol. p Ystyriwyd bod <0.05 yn arwyddocaol.

Effeithiau nalocson mewn-VTA ar hwyluso ymddygiad rhywiol o ganlyniad i brofiad

Dylunio arbrofol.

I benderfynu a oedd gweithredu EOP yn benodol yn y VTA, yn gyfrifol am effeithiau newidiadau a achoswyd gan brofiad rhywiol ar ymddygiad rhywiol, cafodd anifeiliaid eu trwytho'n lleol o naloxone neu halen i'r VTA cyn pum sesiwn paru dyddiol. Roedd patrwm ymddygiadol yn debyg i'r arbrawf naloxone systemig. Caniatawyd i anifeiliaid â phrofiad rhywiol gyfateb yn ystod 5 o ddyddiau olynol hyd nes y byddai un ejaculation neu hyd at 1 h. Pymtheg munud cyn cyflwyno'r fenyw dderbyngar, derbyniodd y llygod mawr wrywodion dwyochrog o naill ai nalocson (cyfaint 10 μg / μl fesul hemisffer; cyfaint 0.5 μl; toddedig mewn halen 0.9%) neu halen (0.5 μl fesul hemisffer). Gweinyddwyd micro-bigiadau dwyochrog ar gyfradd llif o 0.5 μl / min dros gyfnod min 1 ac yna munud 1 ychwanegol gyda'r canwla pigiad ar ôl ar gyfer trylediad. Yna cafodd y canwla pigiad ei ddisodli gan y canwla ffug a'r cap llwch. Un wythnos ar ôl y diwrnod paru (diwrnod prawf), roedd pob anifail yn paru unwaith eto i ejaculation heb trwyth o naloxone neu halen. Ffigur 3A yn amlinellu'r dyluniad arbrofol. Cynhaliwyd dadansoddiad data fel y'i disgrifiwyd mewn arbrawf naloxone systemig.

Llawdriniaeth canwleiddio.

Roedd llygod mawr gwrywaidd yn cael eu anaestheiddio gyda chwistrelliad mewn-beritoneol (0.1 ml / kg) o getamin (0.87 mg / ml) a xylazine (0.13 mg / ml), a'u rhoi mewn cyfarpar stereotaxic (Offerynnau Kopf). Cafodd canulas canllaw lled-21 dwyochrog (Plastics Un) eu gostwng trwy dyllau dril bach yn y benglog i'r ymennydd tuag at yr VTA ar −4.8 mm AP, N 0.75 mm o DV mm mm o g7.8 o ben y benglog yn ôl Paxinos a Watson (2013). Sicrhawyd Cannulas gyda acrylig deintyddol a oedd yn cadw at dri sgriw a osodwyd yn y benglog. Rhoddwyd cyfnod adfer 2 i anifeiliaid, a chawsant eu trin yn ddyddiol ar gyfer cyfuniad o driniaethau a gweithdrefnau chwistrellu a ddefnyddiwyd yn ystod profion ymddygiad.

Dilysu lleoliad Cannula.

Archwiliwyd lleoliad y canulas gan ddefnyddio TH-immunostaining i gadarnhau bod y VTA wedi'i dargedu'n gywir. Dim ond anifeiliaid â lleoliadau priodol a gynhwyswyd mewn dadansoddiadau (meintiau grwpiau terfynol: halen profiadol) n = 8; wedi profi naloxone n = 6). Cafodd tri anifail ychwanegol a dderbyniodd bigiadau naloxone o fewn VTA a gyfeiriwyd y tu allan i'r VTA eu grwpio gyda'i gilydd mewn grŵp chwistrelliad “a gollwyd”. Dadansoddwyd y grŵp a gollwyd ar wahân i weithredu fel rheolaethau anatomegol a Mann-Whitney U defnyddiwyd prawf i gymharu ymddygiad ar ddiwrnod prawf terfynol gyda gwrywod profiadol naloxone a thrin halen.

Mynegiant PERK cyd-destunol a achosir gan gatiau

Dylunio arbrofol.

Dangoswyd bod dod i gysylltiad â'r cawell lle mae dynion yn ennill profiad paru yn achosi actifadu MOR yn y gweithgaredd VTA a nerfol yn VTA a NAc (Balfour et al., 2004). Felly, mae'r amgylchedd paru yn gweithredu fel ciw sy'n rhagfynegi gwobr rywiol. Profodd yr astudiaeth gyfredol a oes angen actifadu MOR yn ystod profiad rhywiol ar gyfer actifadu nerfol ciw-ysgogedig dilynol. Cafodd Naloxone neu saline ei weinyddu'n systematig (ip) 30 min cyn ei leoli yn yr aren paru a chyflwyno menyw dderbyniol ar gyfer paru (profiadol), neu cyn y driniaeth reoli a oedd yn cynnwys lleoli yn y cawell trin heb gyflwyno'r fenyw (heb fod yn niwtral amgylchedd; naïf). Felly, crëwyd pedwar grŵp arbrofol: Naive Sal, Naive NLX, Exp Sal, a Exp NLX. Un wythnos ar ôl y sesiwn paru olaf, cafodd hanner yr anifeiliaid ym mhob grŵp eu hamlygu i'r cawell paru (Gwrywod Exp: ciwiau cyflymedig sy'n gysylltiedig â rhyw) neu gawell trin (gwrywod naïf: ciwiau naws / niwtral), tra nad oedd yr hanner arall yn agored i unrhyw giwiau ac yn hytrach yn aros yn y cewyll cartref (i bennu mynegiant PERK gwaelodlin). Cynhyrchodd y patrwm arbrofol hwn grwpiau 8: Naï Sal-No Cue, Salwch Naïf + Ciw, Naïf NLX-No Ciw, Naïf NLX + Ciw, Exp Cu-No Ciw, Exp Sal ​​+ Ciw, Exp NLX-No Ciw, Exp NLX + Ciw (n = 4 yr un ac eithrio Ciw Nive NLX-No, n = 3). Cafodd yr anifeiliaid eu tyllu gan 10-15 munud ar ôl dod i gysylltiad â ciw. Symudwyd anifeiliaid rheoli o'u cewyll cartref a'u tyllu ar yr un pryd.

Immunohistochemistry.

Cynhaliwyd adrannu ac imiwnostegiaeth fel y disgrifiwyd uchod. Yma, gwnaethom ddefnyddio gwrthgyrff polyclonal cwningen yn erbyn p42 a p44 MAP Kinases ERK1 a ERK2 (PERK; 1: 4 000; Technoleg Arwyddion Cell). Nodweddwyd y gwrthgyrff sylfaenol yn helaeth yn y llenyddiaeth (Roux a Blenis, 2004; Murphy a Blenis, 2006; Frohmader et al., 2010b). At hynny, roedd hepgor y gwrthgyrff sylfaenol yn atal yr holl ddadansoddiad imiwnoreactactig a blot Gorllewinol o feinwe'r ymennydd llygod mawr yn datgelu dau fand ar y pwysau moleciwlaidd priodol.

Dadansoddi data.

cafodd celloedd pERK-immunoreactive (-IR) eu cyfrif mewn nifer o ranbarthau ar yr ymennydd gan ddefnyddio tiwb llun lucida camera ynghlwm wrth Leica Microsgop DMRD: NAc [craidd (C) a chragen (S); 400 × 600 μm; cortecs rhagflaenol cyfryngol; mPFC; ardal ciwio anterior (ACA); prelimbic cortex (PL); cortecs infralimbic (IL); 600 × 800 μm yr un], caudate-putamen (CP; 800 × 800 ,m), ac amygdala basolateral (BLA; 900 × 1200 μm; Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010b; Pitchers et al., 2010b). Cyfrifwyd dwy adran fesul rhanbarth ymennydd a chyfrifwyd nifer y celloedd yn y meysydd dadansoddi safonol wedyn fel niferoedd y celloedd fesul mm2. Cyfartaleddwyd y ddau gyfrif fesul anifail ar gyfer cyfrifo modd grŵp. Cymharwyd cyfartaleddau grŵp o fewn grwpiau â phrofiad rhywiol neu naïf gan ddefnyddio ANOVA [ffactorau: triniaeth cyffuriau (NLX neu Sal) dwy ffordd a ciw (dim ciw neu ddim ciw)] wedi'i ddilyn gan post hoc cymariaethau gan ddefnyddio profion swm Holm-Sidak neu Mann-Whitney lle bo'n briodol gyda lefel arwyddocâd o p <0.05. Yn y gragen NAc o anifeiliaid â phrofiad rhywiol, roedd tuedd gref tuag at arwyddocâd y ffactorau ac felly, cynhaliwyd cymariaethau pâr i gymharu grwpiau halwynog (Sal-No Cue) a grwpiau ciw hallt (Sal + Cue) yn unig.

Delweddau.

Cafodd delweddau digidol eu dal gan ddefnyddio camera CCD (Macrofire, Optronics) ynghlwm wrth a Leica microsgop (DM5000B) gyda gosodiadau camera sefydlog. Mewnforiwyd delweddau i feddalwedd Adobe Photoshop 9.0. Ni newidiwyd delweddau mewn unrhyw ffordd ac eithrio ar gyfer addasu disgleirdeb a chyferbyniad.

Canlyniadau

Newidiadau a achosir gan brofiad rhyw yng nghelloedd dopamine VTA

Arweiniodd profiad rhywiol at ostyngiad ym maint dopamine VTA (Ffig. 1A-C). Profiad rhywiol wedi lleihau arwynebedd a pherimedr celloedd VTA TH-IR yn sylweddol (ardal: F(1,31) = 23.068, p <0.001; perimedr, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Roedd prif effaith sylweddol amser hefyd (ardal: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; perimedr, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) a rhyngweithio sylweddol rhwng profiad ac amser (ardal: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; perimedr, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Datgelodd cymariaethau Pairwise fod arwynebedd a pherimedr celloedd TH-IR wedi'u lleihau'n sylweddol 1 a 7 d ar ôl diwrnod olaf ymddygiad rhywiol mewn anifeiliaid a brofwyd yn rhywiol o'u cymharu â rheolaethau naïf rhywiol [Ffig. 1B, ardal: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 d); C, perimedr: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 d)]. Gwasgarodd effaith ymddygiad rhywiol pan ddilynir y cyfnod ymatal gwobr wrth i faint soma niwronau TH-IR ddychwelyd i waelodlin 31 d ar ôl y sesiwn paru ddiwethaf (Ffig. 1B, ardal: p = 0.798; C, perimedr: p = 0.785). Ni chanfuwyd newidiadau a achoswyd gan brofiad rhywiol mewn cylchrediad yn unrhyw un o'r pwyntiau amser (Ffig. 1D). Nid oedd gostyngiad maint VTA dopamine soma yn ddibynnol ar sesiynau paru dyddiol, gan fod profiad paru yn ystod pum sesiwn paru biweekly hefyd wedi cynhyrchu maint dopamine VTA llai (Ffig. 2A,B, E – H, ardal: p = 0.004; perimedr: p <0.001). Mewn cyferbyniad, ni wnaeth profiad rhyw effeithio ar faint soma TH-IR yn y substantia nigra (Ffig. 2C, I – J, ardal: p = 0.13; perimedr: p = 0.16) nac wedi newid rhyw faint yn niwronau VTA nad ydynt yn TH-IR gerllaw (Ffig. 2D, E – H, ardal: p = 0.46; perimedr: p = 0.45).

Ffigur 1. 

Newidiadau endogenaidd opioid-a achosir gan faint o niwronau dopamin VTA. A, Delweddau cynrychioladol o niwronau dopamin VTA o anifeiliaid rhywiol naïf a phrofiadol sy'n dangos y gostyngiad yn y maint 7 d ar ôl y sesiwn paru olaf. Bar graddfa, 5 μm. Data meintiol yn dangos bod profiad rhywiol (Exp, bariau du) wedi achosi lleihad sylweddol yn yr ardal (B; mewn μm2) a pherimedr (C; mewn μm) o gelloedd dopamine VTA, 1 d (Naive, Exp; n = 6) a 7 d (Naive, n = 5; Exp, n = 6), ond nid 31 d (Naive, n = 6; Exp, n = 8) ar ôl paru terfynol, o'i gymharu â rheolaethau naïf yn rhywiol (Naive, bariau gwyn). Gostyngwyd yr ardal i 84% mewn dynion profiadol o gymharu â rheolaethau naïf yn 1 neu 7 d. Gostyngwyd perimedr i 91.6 a 90% mewn grwpiau profiadol o gymharu â rheolaeth yn 1 a 7 d resp. Nid oedd unrhyw effaith ar gylchrediad (D). Plastigedd y gell dopamin hwn yn yr ardal (E) a pherimedr (Fwedi'i atal gan naloxone (NLX, n = 8), ond nid halen (Sal, n = 7) yn ystod paru, 7 d ar ôl y sesiwn paru olaf o'i gymharu â rheolaethau naïf rhywiol (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Data SEM cymedrig yw data; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â rheolaethau naïf rhywiol yr un diwrnod (B, Cneu o gymharu â rheolaethau naïf rhywiol sydd wedi'u trin â halwynau a gwrywod â phrofiad rhywiol nalocsone (E, F).

Ffigur 2. 

Nid oedd profiad rhywiol yn lleihau rhyw faint mewn niwronau dopamine niara nigra neu niwronau nitopamine VTA. Ardal niwron soma VTA TH-IR (A; mewn μm2) a pherimedr (B; mewn μm) mewn anifeiliaid rhywiol naïf (gwyn) a phrofiadol (du) a gafodd brofiad drwy gymysgu ddwywaith yr wythnos yn hytrach nag yn ystod diwrnodau olynol. Ardal Substantia nigra TH-IR soma (Cac ardal VTA nad yw'n TH-IR soma (D) mewn anifeiliaid rhywiol naïf (gwyn) a phrofiadol (du). Data SEM cymedrig yw data; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â rheolaethau naïf rhywiol. Delweddau cynrychioliadol yn dangos niwronau TH-IR (brown) yn VTA o naïf rhywiol (E), a phrofiadol (F) dynion. G, H, Delwedd uwch-chwyddo o'r niwron a ddangosir gan y saeth i mewn E ac F yn y drefn honno. Dangosir niwronau nissl-staen mewn glas yn y delweddau hyn. Delweddau cynrychioliadol yn dangos niwronau TH-IR yn SN o naïf rhywiol (I) a phrofiadol (J) dynion. Bariau Graddfa: E-J, 20 μm.

Mae lleihad yn nosbarthiad niwronau VTA VTA o ran profiad-rhyw yn dibynnu ar weithredu derbynnydd opioidaidd

Cafodd y lleihad mewn maint niwronau dopamin VTA a achoswyd gan brofiad rhywiol ei rwystro gan y antagonist MOR anymweithredol, a weinyddwyd cyn pob sesiwn paru. Cafodd triniaeth Naloxone cyn sesiynau paru effaith sylweddol ar yr ardal (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) ac yn tueddu tuag at effaith sylweddol ar berimedr (F(1,22) = 2.892, p = 0.052). Canfuwyd rhyngweithio sylweddol rhwng profiad a thriniaeth naloxone ar gyfer yr ardal (F(1,22) = 5.578, p = 0.027) a pherimedr (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Dangosodd cymariaethau Pairwise fod profiad rhywiol mewn anifeiliaid a gafodd eu trin â halen yn lleihau arwynebedd a pherimedr niwronau dopamin VTA 7 d ar ôl y sesiwn paru olaf o'i gymharu â gwrywod naïf a driniwyd yn hallt (Ffig. 1E, ardal: p = 0.018; F, perimedr: p = 0.007). Mewn cyferbyniad, nid oedd anifeiliaid a driniwyd yn rhywiol â phrofiad rhywiol yn wahanol i anifeiliaid naïf a driniwyd gan nalocson (Ffig. 1E, ardal: p = 0.483; F, perimedr: p = 0.330). Yn ogystal, gwelwyd gostyngiad sylweddol yn nifer yr anifeiliaid heli profiadol o gymharu ag anifeiliaid profiadol naloxone (Ffig. 1E, ardal: p = 0.002; F, perimedr: p = 0.002). Roedd yr effaith hon o naloxone yn benodol ar gyfer profiad rhywiol, gan nad oedd triniaeth naloxone yn unig yn effeithio ar gell TH-IR rywfaint mewn dynion naloxone a driniwyd yn rhywiol naïf o gymharu â rheolaethau wedi'u trin â halen (Ffig. 1E,F). Ar ben hynny, nid oherwydd effaith nalocson ar ymddygiad rhywiol yr oedd yr effaith hon o leihad o ran maint a achoswyd gan brofiad yn deillio o effeithiau naloxone, gan nad oedd ymddygiad paru yn wahanol iawn i ddynion naloxone-a gafodd eu trin â halen, heblaw am amser hirach i gychwyn paru ar ôl ejaculation (egwyl ar ôl ejaculation) mewn gwrywod sydd wedi'u trin â naloxone yn ystod y sesiwn paru gyntaf a'r pumed (p = 0.03 a p = 0.004, yn y drefn honno). Roedd dynion gwrywaidd a nalocson yn cael eu hefelychu yn ystod pob un o'r pum sesiwn paru.

Goddefgarwch gwobrwyo morffin a achosir gan brofiad rhywiol

Mae effeithiau profiad rhywiol ar faint VTA dopamine soma yn ôl gweithred EOP yn yr VTA yn debyg i'r rhai a adroddwyd ar gyfer opiadau exogenous (Sklair-Tavron et al., 1996; Russo et al., 2007). Felly, cafodd ei brofi a yw plastigrwydd dopamine VTA sy'n cael ei ysgogi gan wobrau yn naturiol yn effeithio ar wobr am y morffin opiad. Yn wir, achosodd profiad rhywiol oddefgarwch gwobr morffin, yn debyg i effeithiau opiadau cronig (Russo et al., 2007). Methodd gwrywod â phrofiad rhywiol ddatblygu CPP am ddos ​​morffin 0.5 mg / kg; tra bod dynion gwryw naïf yn ffurfio CPP ar gyfer y dos hwn, fel y dangoswyd drwy dreulio mwy o amser yn y siambr barau morffin o'i gymharu â'r siambr bâr hallt yn ystod y prawf ôl-brawf (Ffig. 3; p = 0.039). Treuliodd y ddau grŵp rhywiol naïf a phrofiadol lawer mwy o amser yn y siambr barau morffin o gymharu â'r siambr halen-baru â dosau uwch o forffin: 5.0 mg / kg (Ffig. 3; Naïf: p = 0.029; Exp: p = 0.012) a 10.0 mg / kg (Ffig. 3; Naïf: p <0.001; Exp: p = 0.002).

Ffigur 3. 

Effeithiau profiad rhywiol ar wobr morffin. Amseroedd a dreuliwyd mewn siambrau halwynog (Sal) neu forffin (Mor; 0.5, 5 neu 10 mg / kg) yn ystod yr ôl-brawf mewn naïf rhywiol (Naive, n = 10 – 13) neu brofiadol (Exp, n = Dynion 9-13). Data a gyflwynir fel cymedr ± SEM; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â siambr â pharau Sal o fewn yr un anifeiliaid. NS, Ddim yn arwyddocaol.

Mae hwyluso ymddygiad paru a achosir gan ryw yn dibynnu ar ysgogiad derbynyddion opioid

Mae'r canfyddiadau hyd yn hyn yn dangos bod EOP sy'n gweithredu yn yr VTA yn ystod sesiynau paru byr bob dydd 5 yn achosi plastigrwydd y niwronau dopamin VTA sy'n debyg i effeithiau morffin cronig neu hunanweinyddu heroin (Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Gwnaethom ragdybio bod gostyngiad VTA dopamine soma-size yn hanfodol ar gyfer gwobrwyo dysgu ac yn benodol ar gyfer hwyluso ymddygiad rhyw a achosir gan ryw o ran cymhelliant a pherfformiad. Profwyd y ddamcaniaeth hon gan flocio MOR gan ddefnyddio naloxone yn ystod paru ac archwilio'r effeithiau ar hwyluso ymddygiad rhywiol a achoswyd gan brofiad rhywiol yn ystod y pum sesiwn paru dyddiol. Cyflwynir data i mewn Ffigur 4 ar gyfer y sesiynau paru cyntaf a'r pumed yn unig, gan mai'r rhain yw'r data sy'n dangos y ffordd orau o hwyluso ymddygiad paru a achoswyd gan brofiad. Ar ben hynny, mae effeithiau tymor hirach triniaeth naloxone yn ystod y sesiynau paru yn cael eu profi ar gynnal hwyluso profiad paru o ganlyniad i brofiad, yn ystod prawf paru terfynol 1 wythnos yn ddiweddarach. Ffigur 4A yn dangos y dyluniad arbrofol. Roedd yna brif effaith sylweddol o sesiwn paru ar bob paramedr o ymddygiad rhyw (cwymp mynydd: F(2,55) = 11.286, p <0.001; hwyrni intromission: F(2,55) = 8.767, p <0.001; hwyrni alldaflu: F(2,55) = 10.368, p <0.001) a thriniaeth naloxone ar latencies i mowntio (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) a mewnwelediad (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Dangosodd cymariaethau Pairwise fod triniaeth naloxone yn effeithio ar ymddygiad rhywiol yn ystod y sesiwn paru gyntaf oherwydd bod gan anifeiliaid naloxone argyfyngau llawer hirach i'r mynydd cyntaf (p = 0.002) a mewnwelediad (p = 0.002) o'i gymharu â rheolaethau halwynog ar ddiwrnod cyntaf paru. Cafodd yr effaith naloxone hon ar ymddygiad rhyw cychwynnol ei lleihau gan brofiad rhywiol ac ni arsylwyd arni yn ystod unrhyw un o'r sesiynau paru dilynol (Tabl 1). At hynny, ni wnaeth gweinyddu naloxone cyn pob un o'r pum sesiwn paru atal hwyluso cychwynnol ymddygiad rhywiol gyda phrofiad rhywiol. Yn gyson ag effeithiau atgyfnerthu profiad rhywiol, roedd dynion a driniwyd yn hallt yn arddangos llai o argyfyngau i mount (Ffig. 4B; p = 0.032)Ffig. 4C; p = 0.033) ac ejulation (Ffig. 4D; p <0.001) yn ystod y bumed sesiwn paru o'i gymharu â'r sesiwn paru gyntaf, a nododd hwyluso ymddygiad rhywiol. Yn yr un modd, roedd gwrywod a gafodd eu trin â naloxone yn arddangos haenau llawer byrrach i'w mowntio (Ffig. 4B; p <0.001), ymyrraeth (Ffig. 4C; p <0.001), ac alldaflu (Ffig. 4D; p = 0.017) ar y pumed o'i gymharu â'r diwrnod cyntaf. At hynny, nid oedd dynion gwrywaidd a driniwyd yn wahanol i reolaethau halwynog yn unrhyw un o'r argyfyngau yn ystod y pumed sesiwn paru.

Ffigur 4. 

Mae opioidau mewndarddol yn chwarae rhan hanfodol yn y broses o hwyluso ymddygiad rhywiol a achosir gan brofiad. A, Dylunio arbrofol. B-D, Paramedrau ymddygiad rhywiol ar gyfer dynion sy'n cael eu trin â halen (Sal, bariau gwyn, n = 11) neu naloxone (NLX; bariau du, n = 12) gyda gweinyddiaeth systemig. Mae'r data a ddangosir yn hwyr i mount (B; eiliadau), intromission (C; eiliadau), ac ejaculation (D; eiliadau) ar ddiwrnodau 1 a 5 o bum diwrnod yn olynol o gydweddu. Yn ogystal, dangosir data ar gyfer y prawf paru terfynol, 7 d ar ôl y pumed sesiwn paru. Cyflwynir data fel cymedr ± SEM; + yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng dyddiau 1 a 5 o fewn triniaeth; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng diwrnod prawf a diwrnod 5 o fewn triniaeth; # yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng grwpiau naloxone a halen o fewn y dydd.

Edrychwch ar y tabl hwn: 

Tabl 1. 

Gweinyddu Naloxone cyn paru mwy o argyfyngau i fynnu a thresmasu ar ddiwrnod cyntaf paru yn unig

Ar y llaw arall, roedd triniaeth naloxone yn ystod sesiwn profiad rhywiol yn amharu ar gynnal a chadw ymddygiad rhywiol a achoswyd gan brofiad ar ddiwrnod y prawf paru terfynol. Cynhaliwyd diwrnod y prawf 7 d ar ôl y sesiwn paru olaf yn absenoldeb pigiad naloxone. Roedd gwrywod rheoli wedi'u trin â halwynau yn arddangos y hwyluso ymddygiad disgwyliedig o ymddygiad rhywiol. Yn benodol, nid oedd argyfyngau i osod, ymyrryd ac ejacio yn wahanol rhwng y pumed sesiwn paru a'r diwrnod prawf terfynol (Ffig. 4B-D). Tra bod dynion naloxone-drin yn dangos cynnydd sylweddol mewn argyfyngau i mount (Ffig. 4B; p = 0.033), mewnlifiad (Ffig. 4C; p = 0.036) ac ejulation (Ffig. 4D; p = 0.049) ar ddiwrnod y prawf o'i gymharu â'r pumed sesiwn paru. Hefyd, ar y diwrnod prawf, gwelwyd bod anifeiliaid naloxone yn llawer arafach na gwrywod wedi'u trin â halen fel yr arddangoswyd gan argyfyngau hirach i mount (Ffig. 4B; p = 0.017) a mewnwelediad (Ffig. 4C; p = 0.043). Felly, ataliodd triniaeth naloxone y gwaith cynnal a chadw, ond nid y datblygiad cychwynnol, o hwyluso profiad a achosir gan ymddygiad rhywiol. Mae'r canfyddiadau hyn yn dangos rôl hanfodol ar gyfer plastigrwydd niwronau dopamin VTA a ysgogir gan EOP ar fynegiant hirdymor o atgyfnerthu ymddygiad gwobrwyo naturiol.

Cynhaliwyd nifer o arbrofion rheoli ychwanegol i benderfynu bod effeithiau gwarchae derbynnydd opioid ar golli ymddygiad hirdymor o ymddygiad rhywiol yn annibynnol ar ddiffyg gweinyddu naloxone ar ddiwrnod y prawf paru terfynol (Ffig. 5A,B), yn benodol i golli gwaith cynnal paru tymor hir, ond nid yn y tymor byr (Ffig. 5E,F), ni chawsant eu hachosi gan amlygiad dyddiol i naloxone yn unig (Ffig. 5C,D), ac ni chawsant eu hachosi gan golli gwobr rhywiol mewn gwrywod a driniwyd gan naloxone (Ffig. 5G,H). Yn gyntaf, i ddangos nad oedd ymddygiad rhywiol newidiol ar y prawf paru terfynol oherwydd absenoldeb nalocson, cafodd naill ai nalocson neu halwyn ei weinyddu ar ddiwrnod y prawf paru olaf i anifeiliaid a oedd yn cael paru gyda naloxone wrth iddynt gael profiad rhywiol (Ffig. 5A). Roedd prif effaith y diwrnod paru ar argyfyngau i fynnu (Ffig. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) a mewnwelediad (Tabl 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Nid oedd unrhyw effaith fawr ar ddiwrnod paru ar guedd i ejaculation (Tabl 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Yn debyg i'r hyn a ddisgrifiwyd uchod, nid oedd triniaeth naloxone yn ystod paru yn effeithio ar hwyluso ymddygiad rhywiol yn ystod y pum sesiwn profiad rhywiol cychwynnol. Dangosodd y ddau grŵp (grwpiau wedi'u trin â halen a nalocson fel y'u pennwyd gan y driniaeth a dderbyniwyd yn ystod y prawf paru terfynol; y naill a'r llall yn derbyn naloxone yn ystod paru) ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso ar y diwrnod 5 o'i gymharu â diwrnod 1 a dangoswyd bod yr argyfyngau yn fyrrach o lawer i'r cyntaf (Ffig. 5B; halen: p = 0.033; nalocson: p = 0.014) a mewnwelediad (Tabl 2; halen: p = 0.034; nalocson: p = 0.026). Roedd anifeiliaid a dderbyniodd naill ai nalocson neu halen ar ddiwrnod y prawf paru olaf yn cael eu hychwanegu at gyfnodau hwy (Ffig. 5B; halen: p = 0.018; nalocson: p = 0.029) a mewnwelediad (Tabl 2; halen: p = 0.019; nalocson: p = 0.020) o'i gymharu â'r pumed diwrnod o brofiad paru. Felly, nid oedd gweinyddu naloxone neu halwynog ar y diwrnod prawf yn union cyn y paru yn dylanwadu ar effaith triniaeth naloxone yn ystod sesiynau profiad rhywiol ac roedd gwanhau hwyluso ymddygiad rhywiol yn yr hirdymor yn union yr un fath â'r hyn a ddangosir mewn anifeiliaid na chawsant unrhyw bigiad ar ddiwrnod prawf paru terfynol (Ffig. 4).

Ffigur 5. 

Mae opioidau mewndarddol yn bwysig yn y mynegiant hirdymor o hwyluso ymddygiad a achosir gan brofiad o ymddygiad rhywiol. A, Cynllun arbrofol ar gyfer arbrawf i effaith triniaeth NLX ar ddiwrnod y prawf. B, Mount latency ar ddiwrnodau 1 a 5 o bum diwrnod yn olynol o gydweddu a diwrnod prawf paru terfynol (Prawf) yn dilyn pigiad halen (llwyd) neu naloxone (du). Mae data yn cynrychioli cymedr EM SEM. * yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng 1 dydd a 5 dydd o fewn triniaeth. # yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng diwrnod Prawf a Diwrnod 5 o fewn triniaeth. C, Dylunio arbrofol ar gyfer arbrawf i brofi effaith cyn-driniaeth naloxone yn unig heb brofiad rhywiol ar ymddygiad paru. D, Mount latency ar y diwrnod prawf paru terfynol, diwrnodau 7 yn dilyn 5 diwrnod o naill ai chwistrelliad halwynog neu naloxone yn absenoldeb paru. Mae data yn cynrychioli cymedr EM SEM. E, Dylunio arbrofol ar gyfer arbrawf i brofi a yw triniaeth naloxone yn effeithio ar yr arddangosfa tymor byr o ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso mewn anifeiliaid sydd â phrofiad rhywiol. F, Mount latency ar ddiwrnod 1 a diwrnod 5 o bum diwrnod yn olynol o gydweddu a diwrnod prawf paru terfynol, 1 diwrnod ar ôl dydd 5 ym mhresenoldeb pigiad halen (llwyd) neu naloxone (du). Mae data yn cynrychioli cymedr EM SEM. * yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng 1 dydd a 5 dydd o fewn triniaeth. G, Dylunio arbrofol ar gyfer arbrawf i brofi a yw triniaeth naloxone yn rhwystro effeithiau boddhaol ymddygiad rhywiol. H, Amser a dreulir mewn paru siambr mewn parau (mewn eiliadau) yn ystod y rhagbrawf (gwyn) ac ôl-brawf (du) ar gyfer anifeiliaid sy'n derbyn naill ai nalocson neu halen cyn paru. Data SEM cymedrig yw data; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â phreswyl.

Edrychwch ar y tabl hwn: 

Tabl 2. 

Y data a ddangosir yw argyfyngau i ymyrryd ac ejaculation (eiliadau) o arbrofion rheoli a gynhaliwyd i bennu bod effeithiau gwarchae MOR ar golli ymddygiad rhywiol yn y tymor hir yn annibynnol ar ddiffyg gweinyddu naloxone ar y diwrnod prawf paru terfynol

Er mwyn penderfynu a oedd yn driniaeth naloxone pan gafodd ei pharu â phrofiad rhywiol ac na chafodd ei ailadrodd i naloxone per se a achosodd amhariad ar ymddygiad rhywiol 7 d ar ôl y driniaeth ddiwethaf, cafodd anifeiliaid rhywiol naïf naill ai bum pigiad dyddiol o bigiadau naloxone neu halwynog cyn prawf paru terfynol 7 d yn ddiweddarach (Ffig. 5C). Ni chanfuwyd unrhyw wahaniaethau sylweddol ar gyfer unrhyw baramedr paru rhwng grwpiau halwynog a nalocsone a gafodd eu trin ymlaen llaw (Ffig. 5D; gosod latency; latency intromission: halen 139.7 ± 40.3 vs naloxone 121.83 ± 42.55; latency ejaculation: halen 887.9 ± 70.0 vs naloxone 1050.8 ± 327.31). Mae'r canlyniadau hyn yn dangos nad yw naloxone yn unig yn ddigonol i newid ymddygiad rhywiol dilynol, yn debyg i ddiffyg effeithiau naloxone yn unig ar blastigrwydd niwron dopamin VTA.

Rydym yn damcaniaethu bod triniaeth naloxone yn ystod caffael profiad rhywiol yn amharu ar fynegiant hirdymor o hwyluso rhyw o ran ymddygiad rhywiol. Er mwyn profi hyn ymhellach, profwyd effeithiau triniaeth naloxone yn ystod paru ar ymddygiad rhywiol dilynol yn ystod prawf paru terfynol, a gynhaliwyd dim ond 1 d ar ôl paru diwethaf (dylunio arbrofol; Ffig. 5E). Roedd prif effaith y diwrnod paru ar y mynydd yn sylweddol (Ffig. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) a hwyrni ymyrraeth (Tabl 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Nid oedd unrhyw brif effaith sylweddol y dydd ar hwyrni alldaflu (Tabl 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Yn debyg i'r hyn a ddisgrifir uchod, roedd pob gwryw (er gwaethaf y triniaethau halen neu naloxone) yn dangos bod ymddygiad rhywiol yn cael ei hwyluso yn ystod y pum sesiwn profiad rhywiol a nodwyd gan argyfyngau llawer byrrach i fynnu (Ffig. 5F; halen: p = 0.002; nalocson: p = 0.018) a mewnwelediad (Tabl 2; halen: p = 0.006; nalocson: p = 0.009) ar y diwrnod 5 o'i gymharu â diwrnod 1. Yn yr un modd, dangoswyd ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso ar ddiwrnod y prawf o'i gymharu â diwrnod 1 a nodwyd gan argyfyngau llawer byrrach i fynnu (Ffig. 5F; halen: p = 0.001; nalocson: p = 0.020) a mewnwelediad (Tabl 2; halen: p = 0.004; nalocson: p = 0.009). Yn bwysicach na dim, nid oedd triniaeth naloxone yn ystod paru yn effeithio'n sylweddol ar hwyluso ymddygiad rhyw a achoswyd gan ryw pan brofwyd 1 d ar ôl profiad rhyw, yn annibynnol ar driniaeth naloxone ar y diwrnod prawf paru terfynol hwn.

Yn olaf, gwnaethom brofi'r posibilrwydd bod effeithiau gwanhau naloxone ar fynegiant tymor hir ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso oherwydd effaith blocio naloxone ar briodweddau gwobrwyol ymddygiad rhywiol. Fodd bynnag, ni wnaeth naloxone a weinyddwyd yn union cyn paru newid ffurfiad CPP ar gyfer paru (Ffig. 5G), gan awgrymu na wnaeth triniaeth naloxone newid gwobr rywiol. Roedd grwpiau a driniwyd gan halwynau a nalocson yn ffurfio CPP sylweddol ar gyfer ymddygiad rhywiol fel y nodwyd gan yr amser a dreuliwyd yn sylweddol uwch mewn siambr rhyw (Ffig. 5H; halen: p = 0.038; nalocson: p = 0.002) yn ystod y prawf ar ôl y prawf. Felly, nid yw naloxone yn cael effaith andwyol ar gynnal ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso drwy flocio'r wobr sy'n gysylltiedig ag ymddygiad rhywiol.

Mae hwyluso ymddygiad rhywiol yn dibynnu ar weithredu EOP yn yr VTA

Cadarnhau bod EOP yn gweithredu'n benodol yn yr VTA i ysgogi hwyluso ymddygiad rhywiol yn y tymor hir, y cynllun arbrofol a amlinellir yn Ffigur 3A ailadroddwyd gyda mewnlifiadau naloxone o fewn VTA yn hytrach na phigiadau systemig. Roedd y canlyniadau yr un fath â gweinyddiaeth systemig a ddisgrifir uchod. Roedd prif effaith y diwrnod paru ar bob paramedr o ymddygiad rhyw yn sylweddol (Ffig. 6A, gosod latency: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, latency intromission: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, latency ejaculation: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) a thriniaeth naloxone o fewn VTA ar argyfyngau i mount (F(1,33) = 7.345, p = 0.011) a mewnwelediad (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Nid oedd naloxone o fewn VTA yn atal y hwyluso cychwynnol o ymddygiad rhywiol a achoswyd gan brofiad yn ystod y 5 d o gydweddu, wrth i ddynion a driniwyd gan naloxone ddangos bod llai o argyfyngau iFfig. 6A; p = 0.001), mewnlifiad (Ffig. 6B; p <0.001), ac alldaflu (Ffig. 6C; p = 0.001) ar y diwrnod 5 o'i gymharu â diwrnod 1. Nid oedd gwrywod a driniwyd gan Naloxone yn wahanol i ddynion a gafodd eu trin â halen ar y pumed diwrnod o gydweddu yn unrhyw un o'r argyfyngau. Mae triniaeth o fewn VTA naloxone, fel gweinyddiaeth systemig, wedi achosi cynnydd sylweddol ym mynydd (Ffig. 6A; p <0.001) a hwyrni ymyrraeth (Ffig. 6B; p <0.001) ar y diwrnod paru cyntaf o'i gymharu â gwrywod wedi'u trin â halen, na welwyd yn ystod sesiynau paru dilynol (pan nad oedd gwrywod wedi'u trin â naloxone a halwynog yn wahanol). Un sylw annisgwyl oedd, yn yr arbrawf hwn, nad oedd gwrywod a gafodd eu trin â halwynog yn dangos hwyluso ystadegol arwyddocaol o hwyrni mowntio neu ymyrraeth (fel y dangoswyd ym mhob arbrawf a ddisgrifir uchod), a dim ond hwyrni alldaflu a fyrhawyd ar y pumed diwrnod o'i gymharu â'r diwrnod cyntaf. (halwynog: p = 0.001).

Ffigur 6. 

Mae opioidau mewndarddol yn yr VTA yn cyfryngu hwyluso ymddygiad a achosir gan brofiad a'i gynhaliaeth hirdymor. Paramedrau ymddygiad rhywiol ar gyfer dynion sy'n cael eu trin â halen (Sal, bariau gwyn, n = 8) neu NLX (bariau du, n = 6) gyda gweinyddiaeth o fewn VTA. Mae'r data a ddangosir yn hwyr i mount (A), ymyrraeth (B), ac ejaculation (C) ar ddiwrnodau 1 a 5 o bum diwrnod yn olynol o gydweddu. Yn ogystal, dangosir data ar gyfer y diwrnod prawf paru terfynol, 7 d y diwrnod canlynol 5 yn absenoldeb pigiad halwynog neu naloxone. Data SEM cymedrig yw data; + yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng dyddiau 1 a 5 o fewn triniaeth; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng diwrnod prawf a diwrnod 5 o fewn triniaeth; # yn dangos gwahaniaeth sylweddol rhwng grwpiau naloxone a Sal o fewn y dydd. Darluniau sgematig o adrannau VTA coronaidd (H, −4.60; I, −5.00; J, −5.25 o bregma) yn dangos safleoedd chwistrelliad o fewn VTA ar gyfer pob anifail yn Arbrawf 5 (halwyn; gwyn; nalocson, du; Wedi colli, llwyd), gan ddefnyddio lluniadau templed o Fapiau Swanson Brain (Swanson, 2004). Roedd Cannulas yn ddwyochrog, ond cynrychiolir safleoedd chwistrellu yn unochrog er hwylustod eu cyflwyno. fr, retroflexus Fasciculus; ML, Medial lemniscus; SN, provenia nigra.

Roedd triniaeth naxolone o fewn VTA wedi rhwystro cynnal ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso a welwyd mewn gwrywod â phrofiad rhywiol, yn debyg i effeithiau naloxone systemig. Yn benodol, ar y diwrnod prawf olaf roedd gan ddynion a driniwyd gan naloxone argyfyngau hirach i mount (Ffig. 6A; p = 0.011), mewnlifiad (Ffig. 6B; p = 0.010), ac ejulation (Ffig. 6C; p = 0.015) o'i gymharu â'u pumed sesiwn paru a'u cymharu â'r gwrywod a driniwyd yn hallt ar ddiwrnod y prawf terfynol (Ffig. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). Mewn cyferbyniad, nid oedd anifeiliaid wedi'u trin â halwynau yn wahanol o ran argyfyngau i fowntio ac ymyrryd rhwng diwrnod prawf a diwrnod terfynol y prawf 5 o gymysgu. Roedd yr effeithiau hyn yn ymwneud yn benodol â chyflwyno naloxone i'r VTA, fel gwrywod â safleoedd canu gerllaw ond nid yn targedu'r VTA (Ffig. 6D; n = 3) yn arddangos hwyluso ymddygiad rhywiol yn y tymor hir yn debyg i reolaethau wedi'u trin â halen (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 ac yn sylweddol wahanol o'i gymharu ag anifeiliaid naloxone mewn-VTA ar ddiwrnod y prawf paru terfynol (ML, IL: p = 0.029; EL: p = 0.0395).

Mae angen gweithredu EOP ar gyfer actifadu nerfol ciw-achosedig sy'n gysylltiedig â rhyw

Yn seiliedig ar y canfyddiadau hyd yn hyn, rydym wedi rhagdybio bod actifadu EOP yn VTA yn ystod profiad paru a lleihad maint VTA dopamine dilynol yn hanfodol ar gyfer priodoli cymhelliant cymhelliant i ysgogiadau sy'n gysylltiedig â gwobrwyo ac o ganlyniad, cynnal ymddygiad rhywiol wedi'i hwyluso. Er mwyn profi'r ddamcaniaeth hon, archwiliwyd effeithiau blocio derbynyddion opioid yn ystod profiad paru ar weithgarwch niwral a achoswyd gan amlygiad dilynol i giwiau cyd-destunol cyflymedig â rhagfynegiad o wobr rywiol (ciwiau cyd-destunol cysylltiedig â rhyw). Roedd anifeiliaid rhywiol naïf hefyd yn agored i giwiau amgylcheddol, ond nid oedd y rhain yn gysylltiedig â phrofiad paru blaenorol, felly roedd yn giwtiau niwtral. Yn olaf, pennwyd lefelau pERK gwaelodlin mewn grwpiau rheoli â phrofiad rhywiol a naïf a arhosodd yn y cartref ac nad oeddent yn agored i unrhyw giwiau (- Dim Cue). Cadarnhau ac ehangu canfyddiadau blaenorol (Balfour et al., 2004), amlygiad i giwiau cyd-destunol sy'n gysylltiedig â gwobr rhyw flaenorol wedi cynyddu'n sylweddol mynegiant PERK mewn dynion gwryw yn y NAc (Ffig. 7a mPFC (Ffig. 8A-C), ond ni achosodd actifadu niwronol yn y BLA (Ffig. 8Dneu CPu (ni ddangosir y data). Roedd prif effeithiau datguddiad ciw yng nghraidd NAc (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), ACA (F(1,12) = 5.541, p = 0.038), a PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041), a thriniaeth naloxone yn y craidd NAc (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), ACA (F(1,12) = 15.242, p = 0.002), a PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). Roedd rhyngweithio sylweddol yng nghraidd NAc (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), ACA (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014), a IL (F(1,12) = 6.965, p = 0.022). Yn gyntaf, roedd datguddiad ciw sy'n gysylltiedig â matio yn cynyddu pERK yn sylweddol mewn anifeiliaid â phrofiad rhywiol halwynog (Exp Sal ​​+ Cue) o gymharu â rheolaethau nad oeddent yn agored i unrhyw giwiau ac a gymerwyd o'r cawell cartref (Exp Sal-No Cue) yng nghraidd NAc (Ffig. 7A; p <0.001), ac israniadau mPFC ACA (Ffig. 8A; p = 0.001), PL (Ffig. 8B; p = 0.003), a IL (Ffig. 8C; p = 0.029). Mewn cyferbyniad, mewn anifeiliaid di-haint a driniwyd yn hallt, nid oedd dod i gysylltiad â'r ciwiau cyd-destunol, nad oeddent yn gysylltiedig â gwobr rywiol, yn cymell pERK yn unrhyw un o feysydd yr ymennydd (Naive Sal + Cue o gymharu â Sal-No Cue naïf; Figs. 7, 8), gan ddangos bod sefydlu PERK yn benodol i amlygiad y ciwiau sy'n gysylltiedig â phrofiad rhywiol. At hynny, ni wnaeth profiad rhywiol yn unig newid mynegiant PERK gwaelodlin mewn unrhyw ran o'r ymennydd, gan nad oedd unrhyw wahaniaethau rhwng grwpiau a gymerwyd o'r cewyll cartref, boed yn naïf yn rhywiol neu'n brofiad, a'u trin â halen neu naloxone.

Ffigur 7. 

Mae angen gweithredu opioid endogenaidd ar gyfer actifadu niwral yn NAc a achosir gan giwiau wedi'u cyflyru sy'n gysylltiedig â rhyw. Niferoedd celloedd pERK-IR fesul mm2 yn y craidd cnewyllyn accumbens (A) a chragen (B) mewn anifeiliaid rhywiol naïf (gwyn) a phrofiadol (Est; du) a gafodd eu trin ymlaen llaw gyda NLX systemig neu halen (Sal) yn ystod sesiynau paru (Gwrywod Exp) neu sesiynau trin (gwrywod naïf). Roedd grwpiau naill ai'n agored i giwiau cyd-destunol (Ciwiau), sef ciwiau sy'n gysylltiedig â matio mewn gwrywod Exp a chiwiau niwtral mewn anifeiliaid Naïf, neu a gymerwyd o'r cewyll cartref (No Cue; a nodwyd gan ddiffyg label ciw). Cyflwynir data fel cymedr ± SEM; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â rheolaethau heb eu ciwio â halen hallt (Naive Sal-No Cue and Exp Sal-No Cue); # yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â gr ˆwp Exp Cue Sal-drin (Exp Sal ​​+ Cue). Delweddau cynrychioliadol o gelloedd pERK-IR y mm2 yng nghraidd NAc o ddynion â phrofiad rhywiol â Sal (C, Dneu NLX (E, F) a gymerwyd naill ai o'r cawell cartref (Dim Ciw, C, E), neu a oedd yn agored i'r ciwiau cyd-destunol sy'n gysylltiedig â matio (Ciw; D, F). N = 4 pob grŵp ac eithrio Naive NLX (Dim Ciw), n = 3. ac, Anterior commissure. Bar graddfa, 100 μm.

Ffigur 8. 

Effeithiau nalocson ar gymhariaeth mynegiant PERK a ysgogir gan ciw mewn rhanbarthau targed VTA eraill. Niferoedd celloedd pERK-IR fesul mm2 mewn anifeiliaid rhywiol naïf (gwyn) a phrofiadol (Exp; du) a gafodd eu trin ymlaen llaw gyda NLX systemig neu halen (Sal) yn ystod sesiynau paru a'u bod yn agored i'r ciwiau cyd-destunol (Cue) neu gawell cartref (dim ciwiau) yn yr ACA (A), PL (B), IL (C), a BLA (D). Data SEM cymedrig yw data; * yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â rheolaethau heb eu ciwio â halen hallt (Naive Sal-No Cue and Exp Sal-No Cue); # yn dangos gwahaniaeth sylweddol o'i gymharu â rheolaethau naïf rhywiol sy'n cael eu trin â chaws Sal (Naive Sal + Cue).

Er mwyn cefnogi ein damcaniaeth, mae triniaeth naloxone yn ystod profiad rhywiol wedi gwanhau ymsefydlu cynefin yn sylweddol gan y ciwiau cyflyru sy'n gysylltiedig â rhyw. Nid oedd mynegiant pERK yn y gwrywod profiadol hyn a gafodd eu trin â naloxone (Exp NLX + Cue) yn wahanol i fynegiant PERK gwaelodlin mewn unrhyw un o'r grwpiau rheoli naïf neu brofiadol rhywiol a gymerwyd o'r cewyll cartref (Naive Sal-No Cue neu Naive NLX- Dim ciw). Ar ben hynny, roedd mynegiant PERK yn y gwrywod profiadol a ddatgelwyd gan naloxone (Exp NLX + Cue) yn sylweddol is o gymharu ag anifeiliaid profiadol-agored â thriniaeth heli (Exp Sal ​​+ Cue) yng nghraidd NAc (Ffig. 7A; p Israniadau 0.002) a mpFC (Ffig. 8A, ACA: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p = 0.015).

Yn y gragen NAc, ni wnaeth y dadansoddiad ANOVA dwy ffordd arwain at effeithiau ystadegol arwyddocaol y ffactorau sy'n dod â chiwiau a thriniaeth naloxone. Fodd bynnag, dangosodd cymhariaeth pairwise fod datguddiad ciw yn ysgogi pERK yn y grwˆ p rhyw-brofiadol a driniwyd yn hallt (Exp SAL + Cue) o'i gymharu â grŵp rheoli naïf Saline nad yw'n agored i ciw (Ffig. 7B; Ciw Naive SAL-No: p = 0.0163).

Trafodaeth

Mae'r astudiaeth gyfredol yn dangos bod EOP sy'n gweithredu yn yr VTA yn ystod ymddygiad rhywiol, ymddygiad gwobrwyo naturiol, wedi achosi gostyngiad cadarn ond dros dro mewn maint maint celloedd dopamin VTA. Ni welwyd y lleihad ym maint soma mewn niwronau di-dopamin VTA, nac mewn niwronau dopamin yn y subsia nigra gerllaw, gan awgrymu bod y newid hwn yn benodol i gelloedd dopamin y VTA. Mae'r plastigrwydd dopamine VTA hwn yn ymddangos yn debyg i'r hyn sy'n cael ei achosi gan amlygiad opiadau cronig (Sklair-Tavron et al., 1996; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011) ac wedi achosi goddefgarwch tebyg i wobr opiad (morffin) exogenous. Gwnaethom ddangos bod VTA dopamine plasticity yn hanfodol ar gyfer (hirdymor) cynnal tymor hir (nid cynnal tymor byr), atgyfnerthu ymddygiad rhywiol a gweithgarwch nerfol ciw-gysylltiedig (pERK) mewn rhanbarthau targed VTA: NAc a mPFC. Mae'r canfyddiadau hyn yn arwydd o rôl ar gyfer plastigrwydd dopamine VTA wrth fynegiant tymor hir o gymhelliant cymelliannau ciwiau rhagfynegi naturiol neu gof gwobr.

Dogfennwyd yn dda bod profiad rhywiol yn arwain at hwyluso ymddygiad rhywiol dilynol, gan gynnwys dechrau'n gyflymach i ddechrau paru a pherfformiad gwell (Balfour et al., 2004; Pitchers et al., 2010a,b, 2012). Mae hwyluso neu atgyfnerthu ymddygiad rhywiol yn cael ei gynnal am o leiaf 28 d ar ôl paru (Pitchers et al., 2012). Yn ogystal, dangoswyd bod ymddygiad rhyw a chiwiau wedi'u cyflyru yn rhagfynegi achos gwobrwyo rhyw yn achosi mewnoliad MOR yn yr VTA a chymell actifadu niwronol drwy'r system mesolimbic, gan gynnwys niwronau VTA (nopopine a nondopamine), NAc, PFC, a BLA (Balfour et al., 2004, 2006). Mae'n niwronau dopamin VTA sydd wedi hen ennill eu plwyf yn chwarae rhan hanfodol yn y gwaith o ddysgu a phriodoli pa mor ddeniadol yw symbyliadau sy'n gysylltiedig â gwobr (Berridge a Robinson, 1998; Berridge et al., 2009; Flagel et al., 2011) ac yn hanfodol ar gyfer rhagfynegi gwobr (Schultz, 2010). Mae'r canfyddiadau presennol yn ymhelaethu ar ein gwybodaeth gyfredol trwy ddangos bod niwroplasticity VTA sy'n cael ei ysgogi gan wobrau yn hanfodol ar gyfer y swyddogaethau hyn, ac mae'n ddibynnol ar actifadu MOR gan EOP yn y VTA. Nid yw'n hysbys ar hyn o bryd pa EOP yw'r ligand MOR sy'n gweithredu yn yr VTA yn ystod ymddygiad rhywiol dynion. Er bod β endorphin ac enkephalin wedi bod yn gysylltiedig â chymhelliant cymhelliant i atgyfnerthwyr bwyd (Hayward et al., 2002), mae hyn yn dal i gael ei sefydlu ar gyfer ymddygiad rhywiol dynion. Rydym wedi dangos o'r blaen nad yw niwronau β-endorphin yn cael eu gweithredu yn ystod paru, ac nid oes unrhyw gynnydd yn POMC mRNA; felly, gan awgrymu nad yw or endorffin yw'r EOP critigol sy'n gweithredu yn yr VTA yn ystod paru (Davis et al., 2007). Roedd y plastigrwydd dopamine VTA hwn yn hanfodol ar gyfer gweithgarwch niwral yn y mPFC, NAc, a VTA yn dilyn dod i gysylltiad â ciwiau amgylcheddol rhagfynegi gwobrwyo rhywiol. Ar ben hynny, roedd VTA dopamine plasticity yn hanfodol ar gyfer mynegiant hirdymor ymddygiad a pherfformiad cynyddol ymddygiad rhywiol. Ar y llaw arall, nid oedd angen niwro-llawdriniaeth VTA a achoswyd gan brofiad rhywiol ar gyfer ymateb hedonig fel gwobr rhyw (a bennwyd gan CPP) ac roedd hwyluso byrdymor o gymhelliant a pherfformiad rhywiol (yn ystod profiad rhyw neu 1 d yn ddiweddarach) yn parhau i fod yn gyflawn er gwaethaf blocio MOR yn ystod paru (Mehrara a Baum, 1990). Yn hytrach, mae'r data'n awgrymu bod niwroplastigedd dopamin VTA yn cyfryngu'r tymor hirach (7 d ar ôl y profiad rhyw diwethaf; Pitchers et al., 2012) mynegiant o “eisiau” gwobr rhyw ac ymatebion cryfach â chymhelliant i giwiau paru (Miller a Baum, 1987; Berridge a Robinson, 1998).

Roedd anifeiliaid â phrofiad rhywiol yn dangos croes-oddefgarwch i wobr morffin, yn debyg i effeithiau rhedeg olwynion mewn llygod, ymddygiad arall sy'n rhoi boddhad naturiol, effaith wedi'i rhwystro â thriniaeth naloxone (Lett et al., 2001, 2002ac yn benderfynol o fod yn ddibynnol ar blastigrwydd celloedd dopamine VTA (canfyddiadau cyfredol). Yn debyg i wobrwyon naturiol, mae amlygiad dro ar ôl tro i'r opiadau yn forffin neu heroin yn arwain at ostyngiad dros dro o faint dopamine VTA (Sklair-Tavron et al., 1996; Spiga et al., 2003; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). At hynny, mae amlygiad opiadau â chyfnodau tynnu'n ôl byr yn achosi goddefgarwch o ran gwobrwyo, fel y mae'n ofynnol gan ddosau uwch o gyffuriau sy'n ofynnol i ffurfio cymdeithasau gwobrwyoShippenberg et al., 1987; Russo et al., 2007), ac yn achosi i anifeiliaid hunan-weinyddu waethygu cymeriant cyffuriau (Ahmed et al., 2000; Walker et al., 2003). Felly, mae EOP ac opiates yn gweithredu ar swbstradau nerfol cyffredin i gymell goddefgarwch yn ystod tynnu'n ôl yn gynnar, a allai adlewyrchu mecanwaith homeostatic cydadferol i wrthweithio ysgogiad trwy amlygiad dro ar ôl tro (Koob a Le Moal, 2005). Mewn cyferbyniad, yn ystod ymwrthod â chyffuriau opiad hir dymor, caiff goddefgarwch ei wrthdroi i sensitifrwydd i'r eiddo sy'n gwobrwyo'r cyffur (Harris ac Aston-Jones, 2003; Aston-Jones a Harris, 2004; Harris a Gewirtz, 2004). Yn ddiddorol, canfuwyd bod profiad rhywiol wedi'i ddilyn gan gyfnod ymwrthod rhywiol o 7-28 d wedi achosi traws-sensiteiddio ar gyfer gwobr seicostimulaidd (Pitchers et al., 2010a), sy'n ddibynnol ar fynegiant deltaFosB a achosir gan gymar a derbynnydd dopamin yn 1 activation yn y NAc (Pitchers et al., 2013). Felly, mae profiad gwobrwyo rhywiol yn achosi sensitifrwydd gwobrwyo opiad ar yr un pryd a sensitifrwydd gwobr seicostimulant, er bod cyfnod o ymwrthodiad rhyw hirach ar oddefgarwch gwobr morffin yn dal i gael ei brofi. Rydym yn honni y gall yr effeithiau croes hyn ar wobr cyffuriau gael eu cyfryngu gan wahanol fathau o blastigrwydd nerfol yn y gwahanol rannau o'r system mesolimbic: VTA EOP action and plasticity dopamine yn cyfryngu goddefgarwch gwobr opiad (astudiaeth gyfredol), tra bod NAc deltaFosB yn rheoli sensitifrwydd seicostimulaidd (Pitchers et al., 2013). Gall y ddau ddigwyddiad hyn gyfrannu at gynnydd mewn cymryd cyffuriau (Ahmed a Koob, 1998, 1999; Ahmed et al., 2000, 2002, 2003; Walker et al., 2003).

Mae'r anhwylderau moleciwlaidd y mae EOP yn dylanwadu arnynt niwronau dopamin VTA yn ystod ymddygiad gwobrwyo naturiol yn parhau i fod yn anhysbys. Mae'r llwybr IRS2-Akt-mTORC2 yn gyfryngwr o faint sydd wedi'i ostwng yn y VTA a achosir gan forffin dro ar ôl tro (Jaworski et al., 2005; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Gellir atal newidiadau a achosir gan weinyddu morffin mewn maint niwronau dopamin yn yr VTA drwy arllwysiadau o fewn VTA o ffactor niwrotroffig sy'n deillio o'r ymennydd (BDNF; Sklair-Tavron a Nestler, 1995). Mae BDNF yn actifadu'r llwybr hwn trwy signalau TrkB (Russo et al., 2007), derbynnydd kinase gyda affinedd uchel ar gyfer BDNF a rhan o lwybr IRS2-Akt (Seroleg a Gall, 1993; Numan a Seroogy, 1999), a'u mynegi ar niwronau dopamin a GABA yn yr VTA. Mae dadreoleiddio gwahanol gydrannau llwybr IRS2-Akt gan ddefnyddio technoleg trosglwyddo genynnau feirysol firaol yn dynwared effeithiau datguddiad opiadau cronig. At hynny, gellir achub effeithiau amlygiad opiadau drwy adfer y llwybr signalau hwn (Russo et al., 2007) a gor-orweddiad o gydran o mTORC2 yn atal gostyngiad dopamine VTA a achosir gan forffin (Mazei-Robison et al., 2011). Felly, mae gwaith blaenorol yn ymchwilio i effeithiau opiadau cronig ar faint VTA dopamine soma yn dangos bod dadreoleiddio a achoswyd gan forffin ar y llwybr IRS2-Akt-mTOR yn ddigonol ac yn angenrheidiol ar gyfer yr effaith hon (Mazei-Robison a Nestler, 2012). Felly, mae'n demtasiwn dyfalu bod effeithiau profiad rhywiol ar niwroplastigedd VTA dopamin yn cael eu cyfryngu yn yr un modd gan BDNF a'r llwybr IRS2-Akt-mTORC2.

I gloi, dangosodd yr astudiaeth bresennol fod neuroplasticity VTA yn cael ei achosi gan brofiad gydag ymddygiad sy'n rhoi boddhad naturiol, yn enwedig drwy ymddygiad rhywiol gwryw dro ar ôl tro. Yn benodol, mae EOP yn gweithredu yn yr VTA i leihau maint dopamine soma, sy'n cael ei ragdybio i fod yn gysylltiedig â mwy o gyffurdeb niwral a llai o allbwn dopamin sy'n arwain at system hypodopaminergig, ac sy'n newid gweithrediad system mesolimbic mewn ymateb i giwiau sy'n rhagfynegi gwobr rywiol. Ar ben hynny, mae niwroplasticity VTA yn hanfodol ar gyfer y cymhelliant cymhelliant a'r cof am wobr, ond nid ar gyfer effaith wenwynig ymddygiad rhywiol. Yn olaf, mae neuroplasticity VTA a achosir gan ymddygiad gwobrwyo naturiol wedi'i ddilyn gan gyfnod byr o ymwrthod â gwobrwyo yn dylanwadu ar wobr opiad ac felly gall effeithio ar ba mor agored i niwed yw datblygu caethiwed i gyffuriau.

Troednodiadau

  • Derbyniwyd 12 Ionawr, 2014.
  • Derbyniwyd yr adolygiad Mai 17, 2014.
  • Derbyniwyd Mai 20, 2014.

  • Cefnogwyd yr ymchwil hwn gan grantiau gan Sefydliad Ymchwil Iechyd Canada i LMC a'r Gwyddorau Naturiol a'r Cyngor Ymchwil Peirianneg i KKP

  • Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw fuddiannau ariannol cystadleuol.

  • Dylid cyfeirio gohebiaeth at Dr Lique M. Coolen, Prifysgol Mississippi, Canolfan Feddygol, Adran Ffisioleg a Bioffiseg, 2500 North State Street, Jackson, MS 39216-4505. [e-bost wedi'i warchod]

Cyfeiriadau

  1. ↵
    1. Agmo A

    (1997) Ymddygiad rhywiol llygod mawr gwryw. Protoc Res Brain Res 1: 203-209.

  2. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1998) Trosglwyddo o gymryd cyffuriau cymedrol i ormodol: newid mewn pwynt set hedonig. Gwyddoniaeth 282: 298-300.

  3. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1999) Cynnydd hirdymor yn y pwynt gosod ar gyfer hunan-weinyddu cocên ar ôl cynyddu mewn llygod mawr. Seicofarmacoleg 146: 303-312.

  4. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000) Cynnydd cyson yn y cymhelliant i gymryd heroin mewn llygod mawr sydd â hanes o ddwysáu cyffuriau. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.

  5. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Kenny PJ,
    3. GF Koob,
    4. Markou A

    (2002) Tystiolaeth niwrobiolegol ar gyfer allostasis hedonig sy'n gysylltiedig â defnydd cynyddol o gocên. Nat Neurosci 5: 625-626.

  6. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Lin D,
    3. GF Koob,
    4. Parsons LH

    (2003) Nid yw cynyddu hunan-weinyddu cocên yn dibynnu ar y cnewyllyn a achosir gan gocên a newidiwyd. J Neurochem 86: 102-113.

  7. ↵
    1. Aston-Jones G,
    2. Harris GC

    (2004) Gosodwch swbstradau ar gyfer mwy o chwilio am gyffuriau yn ystod y cyfnod hirfaith. Neuropharmacology 47: 167-179.

  8. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. LM Coolen

    (2004) Mae ymddygiad rhywiol a ciwiau amgylcheddol sy'n gysylltiedig â rhyw yn ysgogi'r system mesolimbic mewn llygod mawr gwrywaidd. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

  9. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Brown JL,
    3. Yu L,
    4. LM Coolen

    (2006) Cyfraniadau posibl eliffau o cortecs rhagflaenol cyfryngol i actifadu nerfol yn dilyn ymddygiad rhywiol yn y llygod mawr gwrywaidd. Niwrowyddoniaeth 137: 1259-1276.

  10. ↵
    1. Beitner-Johnson D,
    2. Guitart X,
    3. Nestler EJ

    (1992) Proteinau niwrofilament a'r system dopaminau mesolimbic: rheoleiddio cyffredin drwy forffin cronig a chocên cronig yn yr ardal resymol fentrigl. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. ↵
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Beth yw rôl dopamin mewn gwobr: effaith hedonig, gwobrwyo dysgu, neu gymhelliant anogaeth? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  12. ↵
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) Rhannu cydrannau o wobr: “hoffi”, “eisiau”, a dysgu. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.

  13. ↵
    1. Blum K,
    2. Werner T,
    3. Carnau S,
    4. Carnes P,
    5. Bowirrat A,
    6. Giordano J,
    7. M Oscar-Berman,
    8. M Aur

    (2012) Rhyw, cyffuriau, a roc roc: hypothesizing activation mesolimbic cyffredin fel swyddogaeth o polymorphisms genynnau gwobrwyo. J Cyffuriau Seicoweithredol 44: 38-55.

  14. ↵
    1. Chu NN,
    2. Zuo YF,
    3. Meng L,
    4. Lee DY,
    5. Han JS,
    6. Cui CL

    (2007) Roedd ysgogiad trydanol ymylol yn gwrthdroi'r lleihad mewn maint celloedd ac yn cynyddu lefel BDNF yn yr ardal resymol fentrigl mewn llygod mawr a driniwyd gan forffin. Brain Res 1182: 90-98.

  15. ↵
    1. Davis BA,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Brown JL,
    4. Amstalden KA,
    5. LM Coolen

    (2007) Ysgogi niwronau POMC yn ystod ymddygiad cyffrous cyffredinol ond nid ymddygiad rhywiol mewn llygod mawr gwrywaidd. Behav Neurosci 121: 1012-1022.

  16. ↵
    1. Fiorino DF,
    2. Cwrdd A,
    3. Phillips AG

    (1997) Mae newidiadau deinamig yn y niwclews yn cynyddu elifiant dopamin yn ystod effaith Coolidge mewn llygod mawr gwrywaidd. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. ↵
    1. Flagel SB,
    2. Clark JJ,
    3. Robinson TE,
    4. Mayo L,
    5. Czuj A,
    6. Willuhn I,
    7. Akers CA,
    8. Clinton SM,
    9. Addysg Gorfforol Phillips,
    10. Akil H

    (2011) Rôl ddetholus ar gyfer dopamin mewn dysgu ysgogiad-gwobrwyo. natur 469: 53-57.

  18. ↵
    1. Frohmader CA,
    2. Pitchers KK,
    3. Balfour ME,
    4. LM Coolen

    (2010a) Cymysgu pleserau: adolygiad o effeithiau cyffuriau ar ymddygiad rhyw mewn pobl a modelau anifeiliaid. Horm Behav 58: 149-162.

  19. ↵
    1. Frohmader CA,
    2. Wiskerke J,
    3. Wise RA,
    4. Lehman MN,
    5. LM Coolen

    (2010b) Mae methamffetamin yn gweithredu ar isboblogaethau niwronau sy'n rheoleiddio ymddygiad rhywiol mewn llygod mawr gwrywaidd. Niwrowyddoniaeth 166: 771-784.

  20. ↵
    1. Harris AC,
    2. Gewirtz JC

    (2004) Sillafu uchel yn ystod tynnu'n ôl o forffin aciwt: model o dynnu'n ôl o opiad a phryder. Seicofarmacoleg 171: 140-147.

  21. ↵
    1. Harris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2003) Cymhelliant a dysgu wedi newid yn dilyn tynnu allan o opiadau: tystiolaeth o ddadreoleiddio hirfaith o brosesu gwobrau. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.

  22. ↵
    1. MD Hayward,
    2. Pintar JE,
    3. Isel MJ

    (2002) Diffyg gwobr dethol mewn llygod heb beta-endorphin ac enkephalin. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. ↵
    1. Hoebel BG,
    2. Avena NM,
    3. Bocarsly ME,
    4. RADA P

    (2009) Caethiwed naturiol: model ymddygiad a chylched yn seiliedig ar gaethiwed siwgr mewn llygod mawr. J Addict Med 3: 33-41.

  24. ↵
    1. Hyman SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Mecanweithiau caethiwed niwral: rôl dysgu sy'n gysylltiedig â gwobr a chof. Annu Parch Neurosci 29: 565-598.

  25. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. Kohl RR,
    3. McBride WJ

    Mae rhwystr derbynnydd GABA (A) GABA (A) yn yr ardal gynefinol fentriglaidd yn cynyddu lefelau dopaminau allgellog yn y niwclews accumbens o lygod mawr. J Neurochem 69: 137-143.

  26. ↵
    1. Jaworski J,
    2. Spangler S,
    3. DP Seeburg,
    4. CC Hoogenraad,
    5. Sheng M

    (2005) Rheoli meistroli dendritig gan y targed phosphoinositide-3′-kinase-Akt-mammalaidd o lwybr rapamycin. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. ↵
    1. Johnson SW,
    2. RA y Gogledd

    (1992) Mae opioidau yn cyffroi niwronau dopamin trwy hyperddolennu rhyng-noddwyr lleol. J Neurosci 12: 483-488.

  28. ↵
    1. MA Klitenick,
    2. P DeWitte,
    3. PW Kalivas

    (1992) Rheoleiddio rhyddhau dopamin mewn somatodendritic yn yr ardal resymol fentrigl gan opioidau a GABA: astudiaeth microdialysis in vivo. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. ↵
    1. GF Koob,
    2. Le Moal M

    (2005) Plastigrwydd gwobrwyo neurocircuitry ac “ochr dywyll” caethiwed i gyffuriau. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

  30. ↵
    1. Lennette DA

    (1978) Cyfrwng mowntio gwell ar gyfer microsgopeg imiwnofflwffoleuedd. Am J Clin Pathol 69: 647-648.

  31. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT

    (2001) Mae Naloxone yn cynyddu'r dewis lle cyflyredig a achosir gan rediad olwyn mewn llygod mawr. Physiol Behav 72: 355-358.

  32. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT,
    4. Flynn G

    (2002) Mae profiad blaenorol gyda rhedeg olwyn yn cynhyrchu croes-oddefgarwch i effaith werthfawr morffin. Pharmacol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. ↵
    1. Matthews RT,
    2. DC yr Almaen

    (1984) Tystiolaeth electroffisiolegol ar gyfer cyffroi ardal resymol resymol llygod mawr niwronau dopamine trwy forffin. Niwrowyddoniaeth 11: 617-625.

  34. ↵
    1. MS Mazei-Robison,
    2. Koo JW,
    3. Friedman AK,
    4. Lansink CS,
    5. Robison AJ,
    6. Vinish M,
    7. Krishnan V,
    8. Kim S,
    9. Siuta MA,
    10. Galli A,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Horvath MC,
    14. Neve RL,
    15. Worley PF,
    16. Snyder SH,
    17. Hurd YL,
    18. JF Llawen,
    19. Han MH,
    20. Russo SJ,
    21. et al.

    (2011) Rôl ar gyfer signalau mTOR a gweithgaredd niwronaidd mewn addasiadau a achosir gan forffin yn ardal niwronau dopamin. Niwron 72: 977-990.

  35. ↵
    1. MS Mazei-Robison,
    2. Nestler EJ

    (2012) Plastigedd moleciwlaidd a chellol sy'n cael ei ysgogi gan opiad mewn ardal resymol fentrol a niwronau locus coeruleus catecholamine. Harb Harb Persb Med 2: a012070.

  36. ↵
    1. Mehrara BJ,
    2. Baum MJ

    (1990) Mae Naloxone yn tarfu ar y mynegiant ond nid ar lygod mawr gwrywaidd yn derbyn ymateb dewisol amodol i fenyw oestraidd. Seicofarmacoleg 101: 118-125.

  37. ↵
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Profiad rhywiol mewn cregynfilod benywaidd: mecanweithiau cellog a chanlyniadau swyddogaethol. Brain Res 1126: 56-65.

  38. ↵
    1. Miller RL,
    2. Baum MJ

    (1987) Mae Naloxone yn atal paru a dewis lle cyflyredig ar gyfer menyw estron mewn llygod mawr gwrywaidd yn fuan ar ôl ysbaddu. Pharmacol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. ↵
    1. Mitchell JB,
    2. Stewart J

    (1990) Hwyluso ymddygiadau rhywiol yn y llygod mawr gwrywaidd sy'n gysylltiedig â phigiadau o opiadau o fewn VTA. Pharmacol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. ↵
    1. Murphy LO,
    2. Blenis J

    Cysondeb signal MAPK (2006): y lle iawn ar yr amser cywir. Tueddiadau Biochem Sci 31: 268-275.

  41. ↵
    1. Nestler EJ

    (2012) Mecanweithiau trawsgrifiol o gaethiwed i gyffuriau. Niwroosci Clin Psychopharmacol 10: 136-143.

  42. ↵
  • ↵
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (2013) Yr ymennydd llygod mawr mewn cyfesurynnau stereotaxic (Academaidd, Boston), Ed 7.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Richtand NM,
    5. Yu L,
    6. LM Coolen

    (2010a) Neuroplasticity yn y system mesolimbic a achosir gan wobr naturiol ac ymwrthodiad gwobrwyo dilynol. Seiciatreg Biol 67: 872-879.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Frohmader CA,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. LM Coolen

    (2010b) Mae DeltaFosB yn y niwclews accumbens yn hanfodol ar gyfer atgyfnerthu effeithiau gwobrwyo rhywiol. Genes Brain Behav 9: 831-840.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Wang X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. LM Coolen

    (2012) Mae profiad gwobrwyo naturiol yn newid dosbarthiad derbynnydd AMPA ac NMDA ac yn gweithredu yn y cnewyllyn nuumbens. PLoS One 7: e34700.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Vialou V,
    3. Nestler EJ,
    4. Laviolette SR,
    5. Lehman MN,
    6. LM Coolen

    (2013) Mae gwobrau naturiol a chyffuriau yn gweithredu ar fecanweithiau plastigrwydd nerfol cyffredin gyda DeltaFosB fel cyfryngwr allweddol. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • ↵
    1. Roux PP,
    2. Blenis J

    (2004) ERK a kXes protein MAPX-actifadu MAPK: teulu o kinases protein sydd â swyddogaethau biolegol amrywiol. Microbiol Mol Biol Parch 68: 320-344.

  • ↵
    1. Russo SJ,
    2. CA Bolanos,
    3. Theobald DE,
    4. DeCarolis NA,
    5. Rhent Rhent,
    6. Kumar A,
    7. Winstanley CA,
    8. Renthal NE,
    9. Wiley MD,
    10. Hunan DW,
    11. Russell DS,
    12. Neve RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Nestler EJ

    (2007) Llwybr IRS2-Akt yn midbrain dopamine niwronau sy'n rheoleiddio ymatebion ymddygiadol a chellol i opiadau. Nat Neurosci 10: 93-99.

  • ↵
    1. Schultz W

    (2010) Swyddogaethau lluosog niwronau dopamin. Cynrychiolydd Biol F1000 2: 2.

  • ↵
    1. Seroogy KB,
    2. CM Gall

    (1993) Mynegiad o niwrotrophins gan niwronau dopaminergic midbrain. Exp Neurol 124: 119-128.

  • ↵
    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Kubik R,
    3. Herz A.

    (1987) Priodweddau cymhellol opioidau: tystiolaeth bod actifadu delta-dderbynyddion yn cyfryngu prosesau atgyfnerthu. Brain Res 436: 234-239.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Nestler EJ

    (1995) Gwrthwynebu effeithiau morffin a'r neurotrophins, NT-3, NT-4, a BDNF, ar locus coeruleus neurons in vitro. Brain Res 702: 117-125.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Shi WX,
    3. Lôn SB,
    4. Harris HW,
    5. BS Bunney,
    6. Nestler EJ

    (1996) Mae morffin cronig yn cymell newidiadau gweladwy ym morffoleg niwronau dopamine mesolimbic. Proc Natl Acad Sci UDA 93: 11202-11207.

  • ↵
    1. Spiga S,
    2. Meddyg Teulu Serra,
    3. Puddu MC,
    4. Foddai M,
    5. Diana M.

    (2003) abnormaleddau a ysgogir gan dynnu'n ôl o forffin yn y VTA: microsgopeg sganio laser confocal. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • ↵
    1. Swanson LW

    (2004) Mapiau yr ymennydd: strwythur yr ymennydd llygod mawr (Academaidd, San Diego), Ed 3.

  • ↵
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Pitchers KK,
    5. LM Coolen

    (2009) Gwobr rhywiol mewn llygod gwrywaidd: effeithiau profiad rhywiol ar ddewisiadau lle cyflyru sy'n gysylltiedig ag ejaculation ac ymyriadau. Horm Behav 55: 93-97.

  • ↵
    1. Tzschentke TM

    (2007) Mesur gwobrwyo gyda'r patrwm dewis lle wedi'i gyflyru (CPP): diweddariad o'r degawd diwethaf. Addict Biol 12: 227-462.

  • ↵
    1. WR Furth WR,
    2. van Ree JM

    (1996) Cymhelliant rhywiol: cynnwys opioidau mewndarddol yn yr ardal resymol fentrigl. Brain Res 729: 20-28.

  • ↵
    1. WR Furth WR,
    2. Wolterink G,
    3. van Ree JM

    (1995) Rheoleiddio ymddygiad rhywiol gwrywaidd: cymryd rhan mewn opioidau ymennydd a dopamin. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

  • ↵
    1. Walker JR,
    2. Chen SA,
    3. Moffitt H,
    4. CE Inturrisi,
    5. Koob GF

    (2003) Mae amlygiad opioid cronig yn cynhyrchu mwy o hunan-weinyddu heroin mewn llygod mawr. Pharmacol Biochem Behav 75: 349-354.

  • ↵
    1. KA Ifanc,
    2. Gobrogge KL,
    3. Liu Y,
    4. Wang Z

    (2011) Neurobioleg bondio pâr: mewnwelediadau o gnofil monogamous yn gymdeithasol. Neuroendocrinol Blaen 32: 53-69.

    •