Η Εφημερίδα της Νευροεπιστήμης, 6 Σεπτέμβριος 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4, να Jane R. Taylor1
1.Η αλληλογραφία θα πρέπει να απευθύνεται στην Jane R. Taylor, Τμήμα Ψυχιατρικής, Τμήμα Μοριακής Ψυχιατρικής, Ιατρική Σχολή του Πανεπιστημίου Yale, Ribicoff Research Facilities, Κέντρου Ψυχικής Υγείας του Κοννέκτικατ, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[προστασία μέσω email]
Περίληψη
Μεταβολές των κινήτρων έχουν εμπλακεί στην παθοφυσιολογία πολλών ψυχιατρικών διαταραχών, συμπεριλαμβανομένης της κατάχρησης ουσιών και της κατάθλιψης. Η επανειλημμένη έκθεση σε φάρμακα κατάχρησης ή στρες είναι γνωστό ότι προκαλεί επίμονα τον παράγοντα μεταγραφής ΔFosB στον πυρήνα accumbens (NAc) και το ραχιαίο ραβδωτό σώμα, τα αποτελέσματα που υποτίθεται ότι συμβάλλουν σε νευροδιατάξεις σε σηματοδότηση που ρυθμίζεται από τη ντοπαμίνη. Ωστόσο, λίγα είναι γνωστά για τη συγκεκριμένη συμμετοχή του ΔFosB στην απορύθμιση των συμπεριφορών με όρεξη. Παρουσιάζουμε εδώ ότι επαγώγιμη υπερέκφραση του ΔFosB στο ΝΑο και στο ραχιαίο ραβδωτό σώμα των bitransgenic ποντικών ή ειδικώς στον πυρήνα ΝΑο των αρουραίων με τη χρήση γονιδιακής μεταφοράς με μεσολάβηση του ιού, ενισχυμένη οργανική απόδοση ενισχυμένη με τροφή και προοδευτική αναλογία ανταποκρίσεως. Πολύ παρόμοια συμπεριφορικά αποτελέσματα διαπιστώθηκαν μετά από προηγούμενη επαναλαμβανόμενη έκθεση σε κοκαΐνη, αμφεταμίνη, MDMA [(+) - 3,4-μεθυλενοδιοξυμεθαμφεταμίνη] ή νικοτίνη σε αρουραίους. Αυτά τα αποτελέσματα αποκαλύπτουν την ισχυρή ρύθμιση των κινητήριων διεργασιών από το ΔFosB και παρέχουν στοιχεία ότι οι προκαλούμενες από το φάρμακο μεταβολές στην γονιδιακή έκφραση μέσω της επαγωγής του ΔFosB εντός του πυρήνα NAc μπορεί να διαδραματίσουν κρίσιμο ρόλο στην επίδραση των κινητήριων επιδράσεων στην οργανική συμπεριφορά.
Εισαγωγή
Η επανειλημμένη έκθεση στο φάρμακο προκαλεί προσωρινά δυναμικές μεταβολές στην μεταγραφή γονιδίου που προκαλούν διαρκείς νευροδιατάξεις εντός του nucleus accumbens (NAc) (Nestler, 2004). Αυτή η περιοχή του εγκεφάλου διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο τόσο στις μεθόδους ενίσχυσης φαρμάκων όσο και στη φυσική ενίσχυση (Kelley και Berridge, 2002), αν και λίγα είναι γνωστά σχετικά με τους παράγοντες μεταγραφής που επηρεάζουν τη συμπεριφορά που προκαλείται από μη ογκογόνα, ορεκτικά ενισχυτικά όπως τα τρόφιμα. Το ΔFosB είναι ένας παράγοντας μεταγραφής που ενεργοποιείται εντός του NAc και του ραχιαίου ραβδωτού σώματος με χρόνια έκθεση σε φάρμακο (Konradi et αϊ., 1994; Nye κ.ά., 1995; Chen κ.ά., 1997; Pich κ.ά., 1997; Shaw-Lutchman κ.ά., 2003) και την υποχρεωτική λειτουργία του τροχού (Werme κ.ά., 2002). Παράγεται επίσης σε αυτές τις περιοχές με διάφορες μορφές χρόνιας καταπόνησης (Perrotti et αϊ., 2004). Η ενίσχυση των διαδικασιών ενίσχυσης του φαρμάκου που συνδέονται με την επαγωγή του ραχιαίου ΔFosB είναι καλά καθιερωμένη (Kelz et αϊ., 1999; Colby et αϊ., 2003; Zachariou et αϊ., 2006). Οι συνέπειες των αυξημένων επιπέδων ΔFosB σε αυτές τις περιοχές στην οργανική συμπεριφορά που προκαλείται από φυσικές ενισχυτικές ουσίες, δεν είναι γνωστές.
Η απόδοση των οργανικών απαντήσεων είναι απαραίτητη συνιστώσα της συμπεριφοράς λήψης ναρκωτικών ουσιών που μπορεί να καταστεί δυσρυθμισμένη ή άκαμπτη καθώς η μετάβαση στην εξάρτηση εξελίσσεται (Jentsch και Taylor, 1999; Berke και Hyman, 2000; Berridge και Robinson, 2003; Everitt και Robbins, 2005). Το NAc εμπλέκεται σε πολλαπλές πτυχές της οργανικής συμπεριφοράς που σχετίζονται με τον εθισμό (Balleine και Killcross, 1994; Corbit et αϊ., 2001; de Borchgrave et αϊ., 2002; Di Ciano και Everitt, 2004b; Everitt και Robbins, 2005). Επομένως, είναι πιθανό οι νευροπροσδιορισμοί που προκαλούνται από το φάρμακο εντός του NAc να επηρεάσουν την απόδοση των ενόργανων ενεργειών. Πράγματι, η χρόνια έκθεση στην κοκαΐνη ενισχύει την ενισχυμένη από σακχαρόζη οργάνου απόδοση (Miles et αϊ., 2004) και οι χειρισμοί που πιστεύεται ότι εμποδίζουν τη νευροπλαστικότητα εντός του πυρήνα του NAc, συμπεριλαμβανομένης της αναστολής της ΡΚΑ (πρωτεϊνική κινάση Α) ή της πρωτεϊνικής σύνθεσης, παρεμβαίνουν στις οργανικές αποκρίσεις που ανταμείβονται με τροφή (Baldwin et αϊ., 2002a; Hernandez κ.ά., 2002). Ο πυρήνας NAc επίσης μεσολαβεί στην κινητήρια επίδραση των εξαρτημένων επιδράσεων στην οργανική συμπεριφορά (Parkinson et αϊ., 1999; Corbit et αϊ., 2001; Hall et αϊ., 2001; Di Ciano και Everitt, 2004a; Ito et αϊ., 2004), παρέχοντας ένα νευροβιολογικό υπόστρωμα στο οποίο η επαγωγή του ΔFosB θα μπορούσε να επηρεάσει δυναμικά την οργανική απόδοση και το κίνητρο για οσφρητικές ενισχύσεις όπως τροφή, νερό ή φάρμακα κατάχρησης.
Εδώ, ερευνήσαμε τις επιδράσεις του ΔFosB στην οργανική συμπεριφορά που βασίζεται στην τροφή χρησιμοποιώντας δύο συμπληρωματικές γενετικές προσεγγίσεις: (1) επαγώγιμη υπερέκφραση του ΔFosB εντός του NAc και του ραχιαίου ραβδωτού σώματος των bitransgenic ποντικών (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) και (2) υπερέκφραση του ΔFosB στον πυρήνα ΝΑο ειδικά με τη χρήση μεταβίβασης γονιδίου που προκαλείται από ιούς σε αρουραίους. Αξιολογήσαμε επίσης εάν η προηγούμενη επαναλαμβανόμενη έκθεση σε κοκαΐνη, αμφεταμίνη, (+) - 3,4-μεθυλενοδιοξυμεθαμφεταμίνη (MDMA) ή νικοτίνη υπό συνθήκες που ανέφεραν ότι αυξάνουν το ΔFosB θα ενίσχυε την ανταπόκριση και / όπως έχει δειχθεί για ενισχυμένη από φάρμακο αυτο-χορήγηση (Horger et αϊ., 1990, 1992; Piazza et αϊ., 1990; Vezina et αϊ., 2002; Miles et αϊ., 2004). Τα αποτελέσματά μας επιδεικνύουν επίμονα αποτελέσματα του ΔFosB στην οργανική συμπεριφορά και υποδηλώνουν ότι αυτός ο μεταγραφικός παράγοντας μπορεί να δρα στον πυρήνα NAc ως ρυθμιστής της κινητήριας λειτουργίας.
Υλικά και Μέθοδοι
Ζώα και φροντίδα των ζώων
Πειραματικά αφελείς αρουραίοι Sprague Dawley αποκτήθηκαν από Charles River Laboratories (Wilmington, ΜΑ). Αρσενικοί μεταγονιδιακοί ποντικοί 11A προήλθαν από διασταύρωση μεταξύ ομόζυγων διαγονιδιακών ποντικών που εκφράζουν πρωτεΐνη διενεργοποίησης τετρακυκλίνης (γραμμή Α) ειδικής για νευρώνα (NSE) -tTA και γραμμή ποντικών που εκφράζουν TetOp (υποκινητή αποκρίσεως τετρακυκλίνης) -ΔFosB (γραμμή 11). οι γονικές γραμμές διατηρήθηκαν σε ένα αναμεμιγμένο ανάμεικτο υπόβαθρο (50% ICR και 50% C57BL6 × SJL) (Chen κ.ά., 1998; Kelz et αϊ., 1999). Αυτοί οι δυο διαγονιδιακοί ποντικοί 11A εκφράζουν ΔFosB μόνο όταν: (1) και τα δύο διαγονίδια υπάρχουν στο ίδιο κύτταρο και (2) η μεταγραφική ενεργοποίηση από το tTA δεν παρεμποδίζεται από την παρουσία αντιβιοτικών τετρακυκλίνης όπως η δοξυκυκλίνη. Η χορήγηση δοξυκυκλίνης σε αυτούς τους ποντικούς μπορεί έτσι να ασκήσει έναν προσωρινό έλεγχο πάνω στην έκφραση του ΔFosB και να χρησιμοποιηθεί για την πρόληψη της έκφρασης κατά την ανάπτυξη. πράγματι, η χορήγηση δοξυκυκλίνης συσχετίζεται με μη ανιχνεύσιμη έκφραση διαρροής ΔFosB (Chen κ.ά., 1998; Kelz et αϊ., 1999). Επιπλέον, η σειρά 11A των bitransgenic ποντικών επιλέχθηκε για τα παρόντα πειράματα επειδή παρουσιάζουν ένα σχήμα έκφρασης που περιορίζεται αρχικά σε νευρώνες ραβδωτού περιεχόντων δυννορίνη (τόσο ΝΑο όσο και ραχιαίο ραβδωτό σώμα), πολύ παρόμοιο με το πρότυπο της επαγωγής του ΔFosB από το χρόνιο φάρμακο έκθεσης (Kelz et αϊ., 1999). Επιπλέον, ο ποσοτικός προσδιορισμός αυτής της ραβδωτής έκφρασης του ΔFosB έχει ποσοτικοποιηθεί προηγουμένως (Chen κ.ά., 1998; Kelz et αϊ., 1999). Τα ποντίκια δημιουργήθηκαν στο University of Texas Southwestern και διατηρήθηκαν και δοκιμάστηκαν στις εγκαταστάσεις του Yale. Κατά τη διάρκεια της κυήσεως και της αναπτύξεως, όλοι οι ποντικοί διατηρήθηκαν σε δοξυκυκλίνη μέχρι την εβδομάδα ηλικίας 8-9 σε συγκέντρωση 100 μg / ml στο πόσιμο νερό, συνθήκες που είναι γνωστό ότι διατηρούν τα διαγονίδια που οδηγούνται από το TetOp στην «off» κατάσταση και χρησιμοποίησαν το 6 εβδομάδες μακριά από τη δοξυκυκλίνη όταν η έκφραση ΔFosB γίνεται μέγιστη (Kelz et αϊ., 1999). Όλα τα πειράματα περιλάμβαναν τη σύγκριση των δυο διαγονιδιακών ποντικών σε σχέση με την εκτός δοξυκυκλίνης, η οποία από μόνη της δεν έχει καμία επίδραση στην παρακινημένη συμπεριφορά (Kelz et αϊ., 1999; McClung και Nestler, 2003; Zachariou et αϊ., 2006).
Όλα τα πειραματικά άτομα φιλοξενούνται σε ζεύγη (αρουραίοι) ή σε ομάδες (ποντικοί, τέσσερις έως πέντε ανά κλωβό) υπό ελεγχόμενες συνθήκες θερμοκρασίας και υγρασίας κάτω από έναν κύκλο 12 h φωτός / σκότους (φωτισμός σε 7: 00 AM και off σε 7: 00 ΜΕΤΑ ΜΕΣΗΜΒΡΙΑΣ). Επιτράπηκε τουλάχιστον στο 7 d να προσαρμοστεί στις εγκαταστάσεις στέγασης πριν από οποιαδήποτε μελέτη. Τα ζώα είχαν πρόσβαση ad libitum στο νερό ανά πάσα στιγμή και περιορισμένη πρόσβαση σε τρόφιμα όπως περιγράφεται παρακάτω. Η χρήση όλων των ζώων διεξήχθη σύμφωνα με τον Εθνικό Οδηγό Υγείας για τη Φροντίδα και Χρήση Εργαστηριακών Ζώων και εγκρίθηκε από τις Επιτροπές Φροντίδας και Χρήσης των Ζώων του Πανεπιστημίου Southwestern του Πανεπιστημίου του Yale και του Πανεπιστημίου Yale.
Ναρκωτικά
Η υδροχλωρική κοκαΐνη [παρέχεται ευγενικά από το Εθνικό Ινστιτούτο Κατά της Κατάχρησης Φαρμάκων (NIDA)], θειική d-αμφεταμίνη (Sigma, St. Louis, ΜΟ), υδροχλωρική MDMA (προσφέρεται ευγενικά από το NIDA) και τρυγικό υδρογόνο (- ) διαλύθηκαν σε αποστειρωμένο φυσιολογικό ορό (0.9%) και ενέθηκαν ενδοπεριτοναϊκά σε όγκο 5 ml / kg (ποντίκια) ή 2 ml / kg (αρουραίοι). Το ρΗ του διαλύματος νικοτίνης ρυθμίστηκε με διττανθρακικό νάτριο πριν από την ένεση.
Ιογενείς φορείς
Η γονιδιακή μεταφορά με τη μεσολάβηση του ιού πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως (Carlezon κ.ά., 1998; Perrotti et αϊ., 2004). Εν συντομία, cDNAs που κωδικοποιούν τις συγκεκριμένες πρωτεΐνες εισήχθησαν στο αμπλικόνιο ιού απλού έρπητα (HSV) HSV-PrPUC και συσκευάστηκαν στον ιό χρησιμοποιώντας τον βοηθό 5dl1.2. Οι φορείς που οδηγούν έκφραση είτε HSV-LacZ, που κωδικοποιούν την πρωτεΐνη ελέγχου β-γαλακτοσιδάση, είτε HSV-ΔFosB, που κωδικοποιούν για ΔFosB, ακολούθως εγχύθηκαν στον πυρήνα ΝΑο σύμφωνα με το πειραματικό πρωτόκολλο.
Πειραματική διαδικασία
Περίγραμμα.
Το πείραμα 1 εξέτασε τις επιδράσεις προηγούμενης επανειλημμένης έκθεσης του φαρμάκου σε ενισχυμένη από τροφή οργάνου και προοδευτική ανταπόκριση. Οι αρουραίοι χωρίστηκαν τυχαία σε πέντε πειραματικές ομάδες (n = 9-10 / ομάδα). Αυτές οι ομάδες έλαβαν δύο φορές ημερησίως ενέσεις (ενδοπεριτοναϊκά, σε 9: 00 AM και 5: 00 ΡΜ) με αλατούχο ή με ένα από τα ακόλουθα φάρμακα: νικοτίνη, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; κοκαΐνη, 15 mg / kg; ή αμφεταμίνης, 2.5 mg / kg για διαδοχικές ημέρες 15. Οι δόσεις επιλέχθηκαν με βάση τα προηγούμενα δημοσιευμένα δεδομένα (Taylor και Jentsch, 2001; Olausson et αϊ., 2003) και η επαγόμενη από το φάρμακο κινητική διέγερση παρακολουθήθηκε στις ημέρες θεραπείας 1 και 15. Μετά το 5 d της απόσυρσης, τα ζώα εκπαιδεύτηκαν με την οργανική απόκριση για 10 διαδοχικές ημέρες και ακολούθως δοκιμάστηκαν σε προοδευτική αναλογία που ανταποκρίθηκε την επόμενη ημέρα. Δύο ζώα εξαιρέθηκαν από τη στατιστική ανάλυση επειδή δεν απέκτησαν την οργανική ανταπόκριση, πραγματοποιώντας μόνο μία ενεργή απάντηση μοχλού σε κάθε μία από τις τρεις τελικές συνεδρίες κατάρτισης.
Τα πειράματα 2 και 3 εξέτασαν τα αποτελέσματα επαγώγιμης υπερέκφρασης του ραβδωτού σώματος του ΔFosB σε δυρανδενικούς ποντικούς επί της οργανικής απόδοσης και ανταποκρινόμενοι σε μια προοδευτική αναλογία ενίσχυσης. Η επαγώγιμη υπερέκφραση του ΔFosB σε αυτούς τους ποντικούς έχει αποδειχθεί προηγουμένως ότι μιμείται τις επιδράσεις της επαναλαμβανόμενης έκθεσης του φαρμάκου στην κινητική δραστηριότητα και τα παρατιθέμενα χαρακτηριστικά προτιμώμενης θέσης (Kelz et αϊ., 1999; Zachariou et αϊ., 2006). Αυτά τα ποντίκια μπορούν να παράσχουν κρίσιμες πληροφορίες σχετικά με τη συμβολή του ραβδωτού ΔFosB σε συγκεκριμένες συμπεριφορικές διεργασίες. Γονιδιωμένοι αρσενικοί ποντικοί διατηρήθηκαν σε δοξυκυκλίνη ή μετατράπηκαν σε νερό της βρύσης σε εβδομάδες ηλικίας 8. Τα πειράματα ξεκίνησαν μετά από εβδομάδες 6 απόσυρσης δοξυκυκλίνης, οπότε η έκφραση διαγονιδίων είναι μέγιστη (Kelz et αϊ., 1999). Στο πείραμα 2 τα ζώα (n = 16) περιορίστηκαν στην τροφή και εκπαιδεύτηκαν με τη βοηθητική διαδικασία που περιγράφεται παρακάτω (βλ. Παρακάτω, Δοκιμασία απόκρισης σε όργανο και προοδευτική αναλογία) για διαδοχικές ημέρες 10. Μετά την ολοκλήρωση του οργάνου ελέγχου, αξιολογήθηκε η επαγόμενη από κοκαΐνη κινητική διέγερση σε αυτούς τους ποντικούς. Στο πείραμα 3, μια ξεχωριστή ομάδα ποντικών (n = 18) εκπαιδεύτηκε στην οργανική απόκριση για διαδοχικές ημέρες 10 υπό συνθήκες κατά τις οποίες παραδόθηκαν μέγιστα ενισχυτικά 50. Την ημέρα 11, όλα τα ποντίκια δοκιμάστηκαν σε προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται. Την ημέρα 12 προσδιορίσαμε τις επιδράσεις της υποτίμησης του ενισχυτή με προ-τροφοδοσία στην προοδευτική ανταπόκριση.
Τα πειράματα 4 και 5 εξέτασαν τα αποτελέσματα της υπερεκφράσεως του ΔFosB με τη μεσολάβηση του ιού ειδικά εντός του NAc. Το πείραμα 4 εξέτασε τα αποτελέσματα της υπερέκφρασης του ΔFosB στις επιδόσεις των οργάνων. Εδώ, αρουραίοι εγχύθηκαν με HSV-ΔFosB (η = 8) ή HSV-LacZ (n = 8) στον πυρήνα NAc και εκπαιδεύτηκαν με την οργανική διαδικασία ξεκινώντας 40 h αργότερα. Μετά τις συνεδρίες καθημερινής κατάρτισης 10, τα επίπεδα της βασικής δραστηριότητας αξιολογήθηκαν για όλα τα ζώα στον εξοπλισμό παρακολούθησης της κινητικής δραστηριότητας όπως περιγράφεται παρακάτω (βλ. Παρακάτω, Δραστηριότητα κινητικότητας). Το πείραμα 5 αξιολόγησε τις επιδράσεις της υπερέκφρασης NAc ΔFosB συγκεκριμένα στην προοδευτική αναλογία απόκρισης. Εδώ, οι αρουραίοι αρχικά εκπαιδεύτηκαν για διαδοχικές ημέρες 15, εκχωρήθηκαν σε πειραματικές ομάδες και ακολούθως εγχύθηκαν με HSV-ΔFosB (η = 8) ή HSV-LacZ (η = 7) στον πυρήνα NAc. Τα ζώα αφέθηκαν μη δοκιμασμένα και δεν υποβλήθηκαν σε αγωγή για το 4 d για να επιτραπεί η έκφραση του ΔFosB στην κορυφή. Κατά την ημέρα 5 μετά την έγχυση, όλα τα ζώα ελέγχθηκαν για το πάτημα του μοχλού στο πρόγραμμα προοδευτικής αναλογίας. Μετά την τελευταία ημέρα της δοκιμής, όλοι οι αρουραίοι θανατώθηκαν και η τοποθέτηση καναλιών έγχυσης στον πυρήνα NAc επαληθεύθηκε ιστοχημικά. Με βάση την τοποθέτηση καναλιών έγχυσης, δύο αρουραίοι εξαιρέθηκαν από το πείραμα 4 και ένας αρουραίος από το πείραμα 5.
Χαρακτηρισμός της γονιδιακής έκφρασης έγινε σε μια ξεχωριστή ομάδα ζώων. Εδώ, το HSV-LacZ εγχύθηκε στον πυρήνα NAc και τα ζώα σκοτώθηκαν 3 d αργότερα. Η έκφραση της β-γαλακτοσιδάσης αξιολογήθηκε στη συνέχεια ανοσοϊστοχημικά.
Κινητική δραστηριότητα.
Η κινητική δραστηριότητα μετρήθηκε χρησιμοποιώντας μετρητές δραστηριότητας (παρακολούθηση δραστηριότητας Digiscan ζώων · Omnitech Electronics, Columbus, ΟΗ). Οι μετρητές δραστηριότητας ήταν εξοπλισμένοι με δύο σειρές υπέρυθρων φωτοαισθητήρων, κάθε σειρά αποτελούμενος από αισθητήρες 16 τοποθετημένους σε απόσταση 2.5 cm. Οι μετρητές δραστηριότητας ελέγχονταν από τα δεδομένα μετρητή δραστηριότητας που συλλέχθηκαν από υπολογιστή υπολογιστή χρησιμοποιώντας το λογισμικό Micropro (Omnitech Electronics).
Τα πειραματόζωα τοποθετήθηκαν σε διαφανείς πλαστικές συσκευασίες (25 Χ 45 Χ ΧΙΝΜΧ cm) οι οποίες τέθηκαν σε μετρητές δραστηριότητας. Αρχικά τα ζώα αφέθηκαν να συνηθίσουν τον εξοπλισμό καταγραφής κινητικής δραστηριότητας για το λεπτό 20. Σε μερικά πειράματα, τα ζώα στη συνέχεια ελήφθησαν, εγχύθηκαν με κοκαΐνη, αμφεταμίνη, νικοτίνη ή όχημα σύμφωνα με τον πειραματικό σχεδιασμό και τοποθετήθηκαν πίσω στα κουτιά. Η κινητική δραστηριότητα καταγράφηκε στη συνέχεια για 30 λεπτά, ξεκινώντας το 60 λεπτό μετά την ένεση του φαρμάκου για να αποφευχθεί η μη ειδική εξειδίκευση που προκαλείται από ένεση. Όλα τα πειράματα εκτελέστηκαν κατά τη διάρκεια της ελαφριάς φάσης των ζώων (μεταξύ των 5: 9 AM και 00: 6 ΡΜ).
Δοκιμασία απόκρισης σε όργανο και προοδευτική αναλογία.
Η απόκριση των οργάνων αξιολογήθηκε με τη χρήση τυποποιημένων θαλάμων χειριστή για αρουραίους (30 × 20 × 25 cm) ή ποντικούς (16 × 14 × 13 cm) που ελέγχονται από το λογισμικό MedPC (Med Associates, St. Albans, VT). Κάθε θάλαμος στεγάστηκε σε εξωτερικό θάλαμο εξασθένησης του ήχου εξοπλισμένο με γεννήτρια λευκού θορύβου και ανεμιστήρα για τη μείωση της πρόσκρουσης του εξωτερικού θορύβου. Ένα φωτισμό σπιτιού τοποθετημένο στο πίσω τοίχωμα φωτίζει το θάλαμο. Ένας διανομέας σφαιριδίων παρέδωσε σφαιρίδια τροφίμων (20 ή 45 mg, Bio-Serv, Frenchtown, NJ) ως ενισχυτικό μέσα στο περιοδικό. Οι καταχωρήσεις κεφαλής ανιχνεύθηκαν από φωτοκύτταρο τοποθετημένο πάνω από το δοχείο ενίσχυσης. Σε αυτό το περιοδικό υπήρχε ένα ερέθισμα. Για τους αρουραίους τοποθετήθηκε ένας μοχλός σε κάθε πλευρά του γεμιστήρα. Για τα ποντίκια, τοποθετήθηκαν δύο ανοίγματα στο πίσω τοίχωμα των θαλάμων (δηλαδή, απέναντι από τον γεμιστήρα οπλισμού).
Κατά τη διάρκεια του 5 d αμέσως πριν από την έναρξη της εκπαίδευσης, τα ζώα περιορίστηκαν στην πρόσβαση 90 min σε τρόφιμα την ημέρα και εκτέθηκαν σε σφαιρίδια τροφίμων με βάση τα δημητριακά (ποντίκια, 20 mg · αρουραίοι, 45 mg) στα κλουβιά τους. Κατά τη διάρκεια της περιόδου δοκιμής, σφαιρίδια τροφής παρέχονταν κατά διαστήματα στους θαλάμους χειρουργείου σύμφωνα με το πρωτόκολλο συμπεριφοράς (βλέπε παρακάτω) καθώς και σε απεριόριστες ποσότητες στον οικιακό κλωβό για 90 λεπτά, ξεκινώντας 30 λεπτά μετά την καθημερινή δοκιμαστική περίοδο. Αυτό το πρόγραμμα πρόσβασης στα τρόφιμα επιτρέπει σε κάθε μεμονωμένο ζώο να φτάσει στο ατομικό σημείο κορεσμού του και μειώνει τη μεταβλητότητα που προκαλείται από τον ανταγωνισμό μεταξύ κυρίαρχων και υποδεέστερων ζώων. Στα χέρια μας, αυτό το πρόγραμμα επιτρέπει μια αργή αύξηση βάρους μετά την αρχική απώλεια βάρους σε ~85-90% των βαρών ελεύθερης τροφοδότησης. Τα βάρη των ζώων παρακολουθήθηκαν καθ 'όλη τη διάρκεια του πειράματος.
Όλα τα υποκείμενα είχαν αρχικά συνηθίσει στη συσκευή δοκιμής για το 2 d. κατά τη διάρκεια αυτών των συνεδριών, τα σφαιρίδια τροφίμων παραδόθηκαν στο περιοδικό οπλισμού σε χρονοδιάγραμμα 15 s (FT-15) σταθερού χρόνου. Αρχίζοντας την επόμενη μέρα, τα άτομα έλαβαν καθημερινά εκπαιδευτικά σεμινάρια για 10 συνεχόμενες ημέρες. Η ανταπόκριση για τα τρόφιμα δοκιμάστηκε βάσει προηγουμένως δημοσιευμένων διαδικασιών προετοιμασίας οργάνου (Baldwin et αϊ., 2002b). Η απάντηση στον σωστό (δηλαδή ενεργό) μοχλό / άξονα ενισχύθηκε, ενώ η απόκριση στον άλλο (αδρανές) μοχλό / nosepoke δεν είχε προγραμματισμένες συνέπειες. Η θέση του ενεργού nosepoke ή του μοχλού (αριστερά / δεξιά) ήταν ισορροπημένη για όλες τις πειραματικές ομάδες. Η συμπλήρωση της απαίτησης απόκρισης (βλ. Παρακάτω) οδήγησε στην εμφάνιση του φωτός ερεθίσματος του περιοδικού, ακολουθώντας το 1 s αργότερα με την παράδοση ενός μόνο σφαιριδίου τροφίμων. Δύο δευτερόλεπτα αργότερα, η λυχνία διέγερσης απενεργοποιήθηκε. Οι πρώτοι ενισχυτές 10 ελήφθησαν μετά την επιτυχή ολοκλήρωση της αποκρίσεως σύμφωνα με ένα πρόγραμμα σταθερής αναλογίας (FR1), μετά την οποία τα σφαιρίδια ήταν διαθέσιμα μετά την αντίδραση σε ένα πρόγραμμα μεταβλητής αναλογίας (VR2). Η σύνοδος διήρκεσε για 15 λεπτά.
Τα πειράματα 3 (ποντίκια) και 5 (αρουραίοι) χρησιμοποίησαν εναλλακτικά προγράμματα κατάρτισης για να αποφευχθούν οι πιθανές επιπτώσεις των διαφορών στην οργανική απόδοση κατά τη διάρκεια της εκπαίδευσης σε επακόλουθο προοδευτικό λόγο ανταπόκρισης (αναλυτικά παρακάτω). Στο πείραμα 3, οι ποντικοί εκπαιδεύτηκαν σε ένα πρόγραμμα FR1 για το 2 d και κατόπιν σε ένα πρόγραμμα FR2 για το 8 d. Το πρώτο 3 d των δοκιμών χρησιμοποίησε 60 min συνεδρίες. Στις τελευταίες ημέρες εκπαίδευσης 7, η σύνοδος τερματίστηκε όταν είχαν αποκτηθεί ενισχυτές 50. Στο πείραμα 5, οι αρουραίοι εκπαιδεύτηκαν στο πρόγραμμα FR1 / VR2 σε συνόδους min 15 όπως περιγράφηκε παραπάνω για όλα τα άλλα πειράματα με δύο εξαιρέσεις. Πρώτον, παραδόθηκε ένας μέγιστος αριθμός σφαιριδίων 150 / συνεδρία. Δεύτερον, αυτά τα ζώα έλαβαν 5 επιπλέον ημέρες εκπαίδευσης (δηλ. Ένα σύνολο 15 d) για να επιτρέψουν τη δημιουργία σταθερών επιδόσεων πριν από οποιοδήποτε πειραματικό χειρισμό.
Τα πειραματόζωα δοκιμάστηκαν επίσης για την ανταπόκριση για τρόφιμα με ένα προοδευτικό πρόγραμμα αναλογίας ενίσχυσης. Σε αυτή τη δοκιμή, η απαίτηση απόκρισης για λήψη τροφής ξεκίνησε ως πρόγραμμα FR1, αλλά προοδευτικά αυξήθηκε με 2 για να ληφθεί μια επακόλουθη ενισχυτική (δηλαδή, 1, 3, 5, 7 ..., X + 2 αποκρίσεις). Στο πείραμα θεραπείας φαρμάκου με χρήση αρουραίων, το πρόγραμμα αυξήθηκε προοδευτικά με το 5, αποδίδοντας ένα τελικό πρόγραμμα των 1, 6, 11, 16 ..., X + 5. Όλες οι άλλες παράμετροι διατηρήθηκαν πανομοιότυπες με τη διαδικασία εκπαίδευσης που περιγράφεται παραπάνω. Η δοκιμή τερματίστηκε όταν δεν είχε γίνει ενεργή απόκριση για το λεπτό 5.
Υποτίμηση υποβιβαστή.
Η επίδραση της υποτίμησης του ενισχυτή εξετάστηκε με τη χρήση ειδικών για τον ενισχυτή προθερμάνσεων. Εδώ, τα ποντίκια είχαν τη δυνατότητα να τρώνε απεριόριστα σφαιρίδια τροφών με βάση το σιτάρι στο κλουβί τους κατά τη διάρκεια του 3 h πριν από τη δοκιμή στο πρόγραμμα προοδευτικής αναλογίας ενίσχυσης όπως περιγράφεται παραπάνω.
Χειρουργικές τεχνικές.
Τα ζώα αναισθητοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας Equithesin [ένα μείγμα που περιέχει πεντοβαρβιτάλη (35 mg / kg) και ένυδρη χλωράλη (183.6 mg / kg) σε αιθανόλη (10% κ.ό.) και προπυλενογλυκόλη (39% κ.ό.). χορηγήθηκε σε 4.32 ml / kg, ip]. Οι Cannulas (Plastics One, Roanoke, VA) εμφυτεύθηκαν χειρουργικά με στόχο τον πυρήνα NAc, χρησιμοποιώντας στερεοτακτικό εξοπλισμό Kopf. Οι στερεοτακτικές συντεταγμένες που χρησιμοποιήθηκαν σε σχέση με το βράγμα ήταν οι εξής: πρόσθια / οπίσθια, + 1.5 mm, πλάγια / μέση, ± 1.5 mm. κοιλιακή / ραχιαία, -6.0 mm (Παξίνος και Γουάτσον, 1986). Οι σωληνίσκοι αγκυρώθηκαν στο κρανίο χρησιμοποιώντας βίδες και οδοντικό τσιμέντο. Εγκλωβιστές τοποθετήθηκαν στους οδηγούς σωληνίσκους για να εμποδίσουν την παρεμπόδιση. Μετά τη χειρουργική επέμβαση, τα ζώα υποβλήθηκαν σε τυποποιημένη μετεγχειρητική φροντίδα και αφέθηκαν να αναρρώσουν για το 5 d πριν από την έναρξη οποιουδήποτε πειράματος.
Εγχύσεις.
Ενδοεγκεφαλικές εγχύσεις ιικών φορέων διεξήχθησαν διμερώς 40 h πριν από την έναρξη της προπόνησης (βλ. Παρακάτω). Οι σύριγγες έγχυσης (δείκτης 31), οι οποίες εκτείνονται κατά 1 mm κάτω από την άκρη των οδηγών σωληνίσκων, μειώθηκαν βραδέως ταυτόχρονα στο αριστερό και το δεξί NAc και το 1.0 μΐ / πλευρά εγχύθηκε σε μια ελάχιστη περίοδο 4 με ρυθμό έγχυσης 0.25 μl / min χρησιμοποιώντας μία αντλία μικροενύξεως (PHD-5000, συσκευή Harvard, Holliston, ΜΑ). Οι βελόνες έγχυσης έμειναν στη θέση τους για 1 λεπτό μετά την ολοκλήρωση της έγχυσης και αντικαταστάθηκαν οι ψευδο-σωληνίσκοι. Οι τοποθετήσεις σωληναρίων επαληθεύθηκαν ιστολογικά μετά την ολοκλήρωση των πειραμάτων συμπεριφοράς (βλέπε σχήμα 6B) και μόνο τα ζώα με σωστά τοποθετημένους σωληνίσκους συμπεριλήφθηκαν στη στατιστική ανάλυση των πειραματικών δεδομένων.
Ιστολογικές αναλύσεις και ανοσοχρώσεις.
Μετά την ολοκλήρωση των πειραμάτων, ζώα που είχαν λάβει χειρουργικές επεμβάσεις ως μέρος του πειράματος αναισθητοποιήθηκαν με Equithesin και διαχύθηκαν διακαρδίως με 0.1 m PBS (5 min) και 10% φορμαλίνη (10 min) σύμφωνα με πρότυπες διαδικασίες. Οι εγκέφαλοι ρυθμίστηκαν με φορμαλίνη και ακολούθως τοποθετήθηκαν σε διάλυμα σακχαρόζης ρυθμισμένο με φωσφορικά (30%). Όλοι οι εγκέφαλοι κόπηκαν έπειτα σε τομές 40 μm σε ένα μικροτόμο και χρησιμοποιήθηκαν για ιστολογικές αναλύσεις τοποθέτησης σωληνίσκων και έκφρασης πρωτεϊνών.
Η τοποθέτηση των σωληνίσκων έγινε σε τμήματα αντεστραμμένα με ουδέτερο κόκκινο και τοποθετήθηκαν σε αντικειμενοφόρους πλάκες μικροσκοπίου σε πλαστικοποιητή διανυσίου και ξυλόλιο (DPX) μετά από αφυδάτωση αιθανόλης. Η ανοσοϊστοχημεία διεξήχθη όπως περιγράφηκε προηγουμένως (Hommel et αϊ., 2003). Εν συντομία, η έκφραση της β-γαλακτοσιδάσης μετά από έγχυση HSV-LacZ προσδιορίστηκε με χρώση ανοσοφθορισμού χρησιμοποιώντας πρωτεύον αντίσωμα αντι-β-γαλακτοσιδάσης κατσίκας (1: 5000, Biogenesis, Kingston, ΝΗ). Μετά από επώαση όλη την νύχτα, τα τμήματα ξεπλύθηκαν και ακολούθως επωάστηκαν με ένα δευτερογενές αντίσωμα φλεγμονώδους γαϊδάρου αντι-κατσίκας συζευγμένο με Cy2 (1: 200, Jackson ImmunoResearch, West Grove, ΡΑ). Οι τομές πλύθηκαν πάλι ακολουθούμενες από αφυδάτωση αιθανόλης και τοποθέτηση σε DPX. Τα γειτονικά τμήματα ελέγχου υποβλήθηκαν σε ταυτόσημη επεξεργασία χωρίς την ενσωμάτωση πρωτογενών αντισωμάτων. Ο ανοσοφθορισμός εκτιμήθηκε σε 520 nm χρησιμοποιώντας α Zeiss (Oberkochen, Γερμανία) μικροσκόπιο με φίλτρο FITC και εικόνες που συλλέχθηκαν με τους ίδιους χρόνους έκθεσης με Zeiss Σύστημα ψηφιακής απεικόνισης Axiovision.
Σε Πραγματικό Χρόνο
Τα δεδομένα από όλα τα πειράματα αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας ένα, δύο, ή τριών κατευθύνσεων ANOVA ακολουθούμενο από το τεστ Scheffe ή Dunnett post hoc, διόρθωση για πολλαπλές συγκρίσεις, όπου κρίθηκε σκόπιμο, χρησιμοποιώντας τη δοκιμή διαδοχικής απόρριψης του Holm. Μια τιμή p ≤ 0.05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική.
Αποτελέσματα
Πείραμα 1: επιδράσεις της επαναλαμβανόμενης έκθεσης του φαρμάκου στις οργανικές επιδόσεις και σταδιακή ανταπόκριση του λόγου
Για να επιβεβαιωθεί ότι το επαναλαμβανόμενο παράδειγμά μας έκθεσης φαρμάκου προκάλεσε λειτουργικά σημαντικές νευροπροσαρμογές, αξιολογήσαμε αρχικά την κινητική ευαισθητοποίηση ως πρωτότυπο μέτρο συμπεριφοράς της χρόνιας δράσης φαρμάκου. Οι αρουραίοι έλαβαν δύο φορές την ημέρα εγχύσεις νικοτίνης (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), κοκαΐνης (15 mg / kg) ή αμφεταμίνης (2.5 mg / kg) και η κινητική δραστηριότητα δοκιμάστηκε μετά την πρώτη ένεση ημέρες θεραπείας 1 και 15 (συμπληρωματική εικ. 1A-E, διαθέσιμη στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό). Η στατιστική ανάλυση αποκάλυψε μια σημαντική θεραπεία με την ημέρα αλληλεπίδρασης (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). Με την εξαίρεση του MDMA (p = 0.62), όλα τα φάρμακα προκάλεσαν σημαντικά μεγαλύτερη κινητική δραστηριότητα (δηλ. Ευαισθητοποίηση) την ημέρα 15 σε σύγκριση με την ημέρα 1 (νικοτίνη, p <xNUMX, κοκαΐνη, p <0.001, αμφεταμίνη, p <0.001). Επαναλαμβανόμενες ενέσεις αλατόνερου δεν είχαν καμία επίδραση. Καμία από τις θεραπείες φαρμάκων δεν αλλοίωσε την κινητήρια δραστηριότητα της βασικής γραμμής που μετρήθηκε κατά τη διάρκεια της περιόδου συνηθειών την ημέρα 0.01 (συμπληρωματική εικ. 15A, διαθέσιμη στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό).
Πέντε ημέρες μετά την τελευταία ένεση φαρμάκου, εξετάσαμε τα αποτελέσματα προηγούμενης επανειλημμένης έκθεσης νικοτίνης, MDMA, κοκαΐνης ή αμφεταμίνης σε ενισχυμένη με τροφή οργάνου. Τα δεδομένα παρουσιάζονται για κάθε φάρμακο χωριστά στο Εικόνα 1Α-Η χρησιμοποιώντας την ίδια ομάδα ελέγχου φυσιολογικού ορού για συγκρίσεις. Διαπιστώσαμε ότι η προηγούμενη έκθεση σε κάθε ένα από αυτά τα φάρμακα αύξησε σημαντικά και επιλεκτικά την ανταπόκριση σε ενισχυμένη με τροφή οργάνωση (θεραπεία με μοχλό κατά την ημέρα άσκησης, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01. μετα-hoc ανάλυση: νικοτίνη, p <xNUMX; MDMA, ρ <= 0.01. κοκαΐνη, p <xNUMX. αμφεταμίνη, p <xNUMX). Η επίμονη ανύψωση της ανταπόκρισης οργάνου που παρατηρήθηκε σε ασυμπτωτική απόδοση υποδεικνύει πιθανή ενίσχυση των κινήτρων, σύμφωνα με τις αναφερθείσες αυξήσεις μετά από επανειλημμένη έκθεση σε ψυχοδιεγερτικά (βλ. Συζήτηση). Επομένως, εξετάσαμε κατά πόσον η προηγούμενη επανειλημμένη έκθεση σε φάρμακο ενίσχυσε τα κίνητρα χρησιμοποιώντας ένα προοδευτικό πρόγραμμα αναλογίας. Υπήρξε στατιστική επίδραση της προηγούμενης έκθεσης του φαρμάκου στην ανταπόκριση στον ενεργό μοχλό (θεραπεία με αλληλεπίδραση με το μοχλό, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Σύκο. 2A) καθώς και το τελικό σημείο θραύσης (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Σύκο. 2ΣΙ). Η συμπληρωματική ανάλυση έδειξε ότι όλες οι θεραπείες αύξησαν τόσο τον αριθμό των ενεργών απαντήσεων (νικοτίνη, p <0.001, MDMA, p <0.05, κοκαΐνη, p <0.001, αμφεταμίνη, p <0.001) , p ≤ 0.001, κοκαΐνη, p <xNUMX, αμφεταμίνη, p <0.01), συνάδει με την επίδραση αυτών των θεραπειών στα κίνητρα. Λόγω της έλλειψης επίδρασης των φαρμάκων στην κινητική δραστηριότητα της γραμμής βάσης και της έλλειψης επίδρασης σε αδρανή πρέσες με μοχλούς, είναι απίθανο η αυξημένη ανταπόκριση για τα τρόφιμα υπό αυτές τις συνθήκες να αντικατοπτρίζει μη ειδική αύξηση της κινητικής δραστηριότητας.
Εικόνα 1.
Επίδραση προηγούμενων επαναλαμβανόμενων ενέσεων νικοτίνης (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), κοκαΐνης (15 mg / kg) ή αμφεταμίνης (2.5 mg / kg) δύο φορές την ημέρα για 15 d στην επακόλουθη οργανική συμπεριφορά. Τα ζώα εξετάστηκαν μαζί, αλλά για λόγους σαφήνειας τα αποτελέσματα κάθε φαρμάκου παρουσιάζονται ξεχωριστά, χρησιμοποιώντας την ίδια ομάδα ελέγχου που υποβλήθηκε σε αγωγή με φυσιολογικό ορό. A (ενεργές απαντήσεις) και Β (ανενεργές απαντήσεις) δείχνουν τα αποτελέσματα προηγούμενης έκθεσης στη νικοτίνη. C, D, MDMA. E, F, κοκαΐνη. G, H, αμφεταμίνη. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύονται ως μέσα ± SEM.
Εικόνα 2.
Επίδραση της προηγούμενης επαναλαμβανόμενης θεραπείας (δύο φορές ημερησίως, 15 d) με αλατούχο διάλυμα, νικοτίνη (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), κοκαΐνη (15 mg / kg) ή αμφεταμίνη (2.5 mg / kg) στην οργανική απόκριση σε ένα πρόγραμμα προοδευτικής αναλογίας ενίσχυσης. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσοι όροι ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01; * ρ <0.05. Sal, αλατούχο; Νικ, νικοτίνη; Κοκ, κοκαΐνη; Αμφ, αμφεταμίνη; PR, προοδευτική αναλογία.
Η προηγούμενη έκθεση σε φάρμακο δεν είχε επίσης καμία επίδραση στο σωματικό βάρος που καταγράφηκε πριν από τον περιορισμό της τροφής, την πρώτη ή την τελευταία ημέρα της οργανικής εκπαίδευσης ή αμέσως πριν από τη δοκιμασία προοδευτικής αναλογίας (συμπληρωματικό σχήμα 2B, διαθέσιμο στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό). Η περιορισμένη πρόσβαση τροφίμων για το 3 d είχε αρχικά μειώσει το σωματικό βάρος κατά μέσο όρο 91-92% των ελεύθερων βαρών τροφοδοσίας. Στο τέλος της δοκιμασίας συμπεριφοράς, τα βάρη είχαν επιστραφεί στο σωματικό βάρος 97-99% και δεν παρατηρήθηκαν διαφορές μεταξύ των ζώων που είχαν εκτεθεί σε φάρμακο και σε αλατούχα. Οι μεταβολές του σωματικού βάρους και οι διαφορές στην πείνα ή την όρεξη δεν πρέπει συνεπώς να συμβάλλουν σημαντικά στην παρατηρούμενη αύξηση της οργανικής απόδοσης ή του κινήτρου.
Πείραμα 2: επαγώγιμη υπερέκφραση του ΔFosB σε δυρανδενικούς ποντικούς. οργανική απόδοση
Στη συνέχεια ερευνήσαμε κατά πόσον η οργανική απόδοση αυξήθηκε επίσης στα δυσαγγενικά ποντίκια που υπερεκφράζουν επαγωγικά το ΔFosB με αξιοσημείωτη επιλεκτικότητα στο NAc και στο ραχιαίο ραβδωτό σώμα (Kelz et αϊ., 1999). Σε αυτό το πείραμα, τα ποντίκια που υπερεκφράζουν ΔFosB συγκρίθηκαν με μάρτυρες που δεν υπερεκφράζουν ΔFosB επειδή διατηρούνται σε δοξυκυκλίνη (βλέπε Υλικά και Μέθοδοι). Διαπιστώσαμε ότι η υπερέκφραση του ΔFosB αύξησε σημαντικά την ανταπόκριση που ενισχύθηκε με την τροφή (έκφραση γονιδίων με μοχλό κατά την ημέρα άσκησης, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Σύκο. 3ΕΝΑ). Ο αριθμός των αποκρίσεων nosepoke που έγιναν στο αδρανές άνοιγμα δεν ήταν διαφορετικό μεταξύ των δύο ομάδων (Σύκο. 3ΣΙ). Μαζί, αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι η υπερέκφραση του ΔFosB στο NAc και στο ραχιαίο ραβδωτό σώμα αύξησε επιλεκτικά την οργανική απόδοση
Εικόνα 3
Επίδραση επαγώγιμης υπερέκφρασης του ΔFosB στο ραβδωτό ποντίκι σε όργανα. Α, ενεργές απαντήσεις. Β, Ανενεργές απαντήσεις. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύονται ως μέσα ± SEM.
Για να αποκλείσουμε ότι η ενίσχυση της οργανικής απόδοσης στα ζώα που υπερεκφράζουν το ΔFosB μπορεί να εξηγηθεί από αλλαγές στην όρεξη ή την πείνα, καταγράφηκε σωματικό βάρος πριν από τον περιορισμό της τροφής και κατά την πρώτη και τελευταία ημέρα της εκπαίδευσης. Το ΔFosB δεν είχε καμία επίδραση στο βάρος του σώματος πριν από τον περιορισμό της τροφής, ούτε υπήρξε κάποια επίδραση στο σωματικό βάρος κατά τη διάρκεια της δοκιμασίας συμπεριφοράς. Εδώ, η περιορισμένη πρόσβαση τροφίμων για το 3 d μείωσε το σωματικό βάρος σε μέσο 87-89% ελεύθερων βαρών τροφοδοσίας. Στο τέλος της δοκιμασίας συμπεριφοράς, τα βάρη των ζώων ήταν 97-99% των σωματικών βαρών πριν από τον περιορισμό, με ισοδύναμες αλλαγές που παρατηρήθηκαν στους ποντικούς ΔFosB και στους μάρτυρες (συμπληρωματικό Σχ. 3A, διαθέσιμο στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό). Είναι επομένως απίθανο τα ενδεχόμενα αποτελέσματα της υπερέκφρασης του ΔFosB στην πείνα ή την όρεξη να μπορούν να επηρεάσουν τις παρατηρούμενες βελτιώσεις στην οργανική ανταπόκριση.
Όταν η δοκιμή επί της οργανικής απόδοσης είχε ολοκληρωθεί, η υπερέκφραση του ΔFosB δεν άλλαξε την βασική κινητική δραστηριότητα που μετρήθηκε κατά τη διάρκεια μιας ελάχιστης περιόδου 30 (συμπληρωματική εικ. 3B, διαθέσιμη στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό). Αυτή η παρατήρηση υποστηρίζει την άποψη ότι η μη ειδική αλλοίωση της δραστηριότητας δεν συμβάλλει στην αυξημένη οργανική απόδοση που παρατηρείται σε αυτά τα ζώα. Ωστόσο, έχουν αναφερθεί ότι τα bitransgenic ποντίκια που υπερεκφράζουν ΔFosB εμφανίζουν αυξημένες κινητικές αποκρίσεις σε οξεία και επαναλαμβανόμενη κοκαΐνη (Kelz et αϊ., 1999). Επειδή χρησιμοποιήσαμε ένα ελαφρώς διαφορετικό πρόγραμμα απόσυρσης από τη δοξυκυκλίνη για να προκαλέσουμε γονιδιακή έκφραση (εβδομάδες 6 με περιορισμό τροφής), ξεκινήσαμε να επιβεβαιώνουμε αυτόν τον φαινότυπο. Πράγματι, τα ποντίκια που υπερεκφράζουν ΔFosB επέδειξαν σημαντικά μεγαλύτερη αύξηση της κινητικής δραστηριότητας όταν εγχύθηκαν με κοκαΐνη σε σύγκριση με τους μάρτυρες που είχαν διατηρηθεί σε δοξυκυκλίνη (θεραπεία με γονιδιακή έκφραση, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (συμπληρωματική εικόνα 3C, διαθέσιμη στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό).
Πείραμα 3: επαγώγιμη υπερέκφραση του ΔFosB σε δυρανδενικούς ποντικούς. προοδευτική αναλογία
Δεδομένου ότι η προηγούμενη έκθεση σε φάρμακο προκαλεί ραχιαία ΔFosB (Nestler et αϊ., 2001) και βρέθηκε εδώ για να αυξήσει την προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται, εμείς στη συνέχεια ερευνήσαμε κατά πόσο η διαγονιδιακή υπερέκφραση του ραβδωτού σώματος του ΔFosB αυξάνει επίσης την απόδοση σε ένα προοδευτικό πρόγραμμα αναλογίας ενίσχυσης. Μία νέα ομάδα ποντικών εκπαιδεύτηκε στην ανταπόκριση των οργάνων υπό συνθήκες (βλέπε Υλικά και Μέθοδοι) που δεν παρήγαγαν σημαντικές διαφορές στην οργανική απόδοση πριν από τη δοκιμή σε προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται (F(1,16) <1). Ωστόσο, στο τεστ προοδευτικής αναλογίας παρατηρήσαμε μια σημαντική γονιδιακή έκφραση με αλληλεπίδραση μοχλού (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Σύκο. 4Α) και διαπίστωσαν ότι τα ποντίκια που υπερεκφράζουν ΔFosB, σε σύγκριση με τα ποντίκια που ελέγχονταν σε θυρεοειδή, διατηρούσαν μεγαλύτερο αριθμό ενεργών αποκρίσεων (p ≤ 0.05), ενώ ο αριθμός των ανενεργών αντιδράσεων μοχλών δεν ήταν διαφορετικός. Τα ποντίκια που υπερεκφράζουν το ΔFosB έφθασαν επίσης σε υψηλότερο σημείο θραύσης (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Σύκο. 4ΣΙ). Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι, όπως και η προηγούμενη έκθεση στον ψυχοδιεγερτικό, η υπερέκφραση ραβδωτού σώματος του ΔFosB αυξάνει τα κίνητρα. Επειδή ο αριθμός των ανενεργών αποκρίσεων δεν μεταβλήθηκε στους ποντικούς που υπερεκφράζουν το ΔFosB, οι μη ειδικές αυξήσεις της δραστηριότητας δεν είναι πιθανό να συμβάλλουν σε αυτά τα αποτελέσματα. Αυτή η άποψη υποστηρίχθηκε περαιτέρω από εκτιμήσεις της κινητικής δραστηριότητας βασικής γραμμής στην οποία δεν υπήρχε διαφορά μεταξύ των ποντικών που υπερεκφράζουν τους ΔFosB και τους ποντικούς μάρτυρες νεογνού που διατηρούνται σε δοξυκυκλίνη. Δεν παρατηρήθηκαν μεγάλες διαφορές στο σωματικό βάρος μεταξύ ζώων που υπερεκφράζουν ΔFosB και ζώων ελέγχου όπως μετρήθηκε κατά την ημέρα της δοκιμής. Έτσι, παρόλο που τα ζώα που υπερεκφράζουν το ΔFosB θα εκπέμπουν περισσότερες οργανικές απαντήσεις με κίνητρο από τροφή, δεν φαίνεται να καταναλώνουν περισσότερα τρόφιμα όταν είναι ελεύθερα διαθέσιμα. Η πιο πιθανή εξήγηση αυτής της παρατήρησης είναι ότι, παρόλο που τα κίνητρα καθορίζουν πόσο δύσκολο θα είναι ένα ζώο για να αποκτήσει έναν ενισχυτή, πολλοί πρόσθετοι παράγοντες (όρεξη, κορεσμός, μεταβολική κατάσταση κ.λπ.) επηρεάζουν τη διατροφική συμπεριφορά και την πραγματική κατανάλωση τροφής.
Εικόνα 4.
Επίδραση της επαγώγιμης υπερέκφρασης του FosB σε bitransgenic ποντίκια σε όργανα που ανταποκρίνονται σε ένα πρόγραμμα προοδευτικής αναλογίας ενίσχυσης, πριν και μετά την υποτίμηση του ενισχυτή που προκαλείται από κορεσμό. A, B, Baseline: αποκρίσεις μοχλού (A), σημείο διακοπής (B). C, D, Μετά την υποτίμηση ενισχυτή: αποκρίσεις μοχλού (C), σημείο θραύσης (D). Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσοι όροι ± SEM. * ρ <0.05.
Τα bitransgenic ποντίκια ΔFosB που χρησιμοποιούνται εδώ εκφράζουν ΔFosB σε όλο το ραβδωτό σώμα. Ενώ το κοιλιακό ραβδωτό σώμα (συμπεριλαμβανομένου του NAc) έχει εμπλακεί σε διαδικασίες κινητοποίησης, το ραχιαίο ραβδωτό σώμα υποστηρίζεται ότι εμπλέκεται στην απόκτηση συστημικών συνηθειών (Yin et αϊ., 2004; Faure et αϊ., 2005). Παρόλο που δεν παρατηρήσαμε διαφορές στην οργανική απόδοση κατά τη διάρκεια της φάσης κατάρτισης χρησιμοποιώντας ένα πρόγραμμα χαμηλών αναλογιών με μέγιστα όρια ενίσχυσης, συνθήκες σχετικά ανθεκτικές στην ανάπτυξη των συνθετικών συνηθειών (Dickinson, 1985), είναι πιθανό ότι η καθιέρωση συνηθειών θα μπορούσε να επηρεάσει την ανταπόκριση σύμφωνα με το προοδευτικό πρόγραμμα αναλογίας. Αυτή η πιθανότητα δοκιμάστηκε απευθείας αξιολογώντας την επίδραση της υποβάθμισης του ενισχυτή με προ-τροφοδοσία στην προοδευτική ανταπόκριση. Αυτός ο προ-τροφοδοσία εξάλειψε την επίδραση του ΔFosB σε προοδευτική αναλογία που αντιδρούσε, χωρίς διαφορές στα σημεία ανταπόκρισης ή θραύσης που παρατηρήθηκαν μεταξύ των ποντικών που υπερεκφράζουν το ΔFosB και των ποντικών ελέγχου (F(1,16) <1) (Σύκο. 4CD). Μαζί, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι η ραδιενεργό υπερέκφραση του ΔFosB δεν αλλοίωσε την ευαισθησία στις αλλαγές στην αξία των επιβραβευμένων αποτελεσμάτων χρησιμοποιώντας αυτό το πρόγραμμα δοκιμών. Αντίθετα, η οργανική απόκριση που παρατηρείται στην δοκιμασία προοδευτικής αναλογίας φαίνεται να είναι κατευθυνόμενη προς το στόχο και το αυξημένο σημείο θραύσης που παρατηρείται σε ποντίκια που υπερεκφράζουν ΔFosB είναι πιθανό να οφείλεται σε αυξημένα κίνητρα και όχι σε αυξημένη απόκριση παρόμοια με τη συνήθεια.
Πείραμα 4: υπερέκφραση με τη μεσολάβηση ιών του ΔFosB στον πυρήνα NAc: οργανική απόδοση
Για να εκτιμηθεί κατά πόσο η υπερέκφραση του ΔFosB επιλεκτικά στο ΝΑο μπορούσε να εξηγήσει τη συμπεριφορά που παρατηρήθηκε στα δυο διαγονιδιακά ποντίκια, εγχύσαμε HSV-ΔFosB ή HSV-LacZ ως μάρτυρα επιλεκτικά στον πυρήνα NAc των αρουραίων και μελέτησε την επίδραση αυτού του χειρισμού στα τρόφιμα - ενισχυμένη οργανική απόδοση (Σύκο. 5Α, Β). Μετά από την εκπαίδευση περιοδικών, το HSV-ΔFosB ή το HSV-LacZ εγχύθηκε στον πυρήνα NAc 40 h πριν από την έναρξη της συμπεριφοράς. Η θέση της έγχυσης και η έκταση της γονιδιακής έκφρασης με τη μεσολάβηση του ιού παρουσιάζονται στο Εικόνα 6, Α και Β. Οι NAC εγχύσεις του HSV-ΔFosB παρήγαγαν μια παρατεταμένη αύξηση στον αριθμό των ενεργών αποκρίσεων που έγιναν (γονιδιακή έκφραση με μοχλό, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Σύκο. 5Α), η οποία συνέχισε καθ 'όλη τη διάρκεια του πειράματος. Αυτές οι επιδράσεις ήταν επιλεκτικές, διότι δεν υπήρχαν σημαντικές επιδράσεις της υπερέκφρασης του ΔFosB εντός του πυρήνα NAc επί του αριθμού των ανενεργών αποκρίσεων (Σύκο. 5Β) ή στην κινητική δραστηριότητα της βασικής γραμμής που καταγράφηκε την ημέρα μετά την ολοκλήρωση του πειράματος (δεδομένα δεν φαίνονται). Η υπερέκφραση του ΔFosB στο NAc μιμούσε έτσι τα συμπεριφορικά αποτελέσματα της προηγούμενης έκθεσης του φαρμάκου ή της υπερέκφρασης του ΔFosB στο ραβδωτό σώμα.
Εικόνα 5.
Επίδραση των εγχύσεων του HSV-ΔFosB στον πυρήνα του NAc πριν από την εκπαίδευση στην απόκριση οργάνου. Α, ενεργές απαντήσεις. Β, Ανενεργές απαντήσεις. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύονται ως μέσα ± SEM.
Εικόνα 6.
Α, Τοποθετήσεις θέσεων έγχυσης για πειράματα ιικών φορέων. Κορυφή, Οι γεμάτοι μαύροι κύκλοι αντιστοιχούν στον προορισμό της θέσης έγχυσης. Μόνο οι εγχύσεις πραγματοποιούνται εντός ~Το 0.5 mm αυτής της περιοχής (δηλ., Εντός του πυρήνα NAc), όπως υποδεικνύεται από τον κύκλο, θεωρήθηκε αποδεκτό. Τα ζώα με εγχύσεις εκτός αυτής της περιοχής εξαιρέθηκαν από τις στατιστικές αναλύσεις. Bottom, θέση έγχυσης εντός του NAc σε αντιπροσωπευτικό ζώο. Β, ανοσοϊστοχημική επαλήθευση της έκφρασης πρωτεΐνης μετά από έγχυση του HSV-LacZ. Τα άνω πλαίσια αποκαλύπτουν έκφραση β-γαλακτοσιδάσης εντός του πυρήνα NAc (μεγέθυνση 2.5 και 10 ×). Τα κάτω πλαίσια αποκαλύπτουν την έλλειψη ανοσοφθορισμού σε παρακείμενα τμήματα ελέγχου χρησιμοποιώντας την ίδια ανοσοϊστοχημική διαδικασία χωρίς την ενσωμάτωση του πρωτεύοντος αντισώματος.
Πείραμα 5: υπερδιέγερση του ΔFosB με τη μεσολάβηση του ιού στον πυρήνα NAc: προοδευτική αναλογία
Το τελικό πείραμα καθόρισε απευθείας εάν η περιορισμένη υπερέκφραση του ΔFosB στον πυρήνα NAc χρησιμοποιώντας την μέθοδο μεταφοράς γονιδίων με τη μεσολάβηση του ιού ήταν επαρκής για την ενίσχυση της κινητοποίησης σε αρουραίους. Εδώ, το HSV-ΔFosB εγχύθηκε μόνο μετά την ολοκλήρωση της οργανικής εκπαίδευσης, εξαλείφοντας οποιαδήποτε πιθανή επίδραση της υπερέκφρασης του ΔFosB κατά τη διάρκεια της προπόνησης στην επόμενη δοκιμασία προοδευτικής αναλογίας. Μια νέα ομάδα αρουραίων εκπαιδεύτηκε, όπως και πριν, και χωρίστηκε σε ισορροπημένες πειραματικές ομάδες με βάση την απόδοσή τους στις τελευταίες ημέρες της εκπαίδευσης. Τα ζώα ακολούθως έλαβαν αμφίπλευρες εγχύσεις HSV-ΔFosB ή HSV-LacZ στον πυρήνα NAc και εξετάσθηκαν σε προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται μετά από 5 d υπερέκφρασης. Η στατιστική ανάλυση αποκάλυψε σημαντική γονιδιακή έκφραση με αλληλεπίδραση μοχλού (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Σύκο. 7ΕΝΑ). Οι αρουραίοι που εγχύθηκαν με HSV-ΔFosB έκαναν πιο δραστικές αποκρίσεις (p ≤ 0.01) σε σύγκριση με εκείνους που εγχύθηκαν με HSV-LacZ, ενώ η ανταπόκριση στον ανενεργό μοχλό δεν επηρεάστηκε. Σύμφωνα με αυτή την αύξηση, αρουραίοι που εγχύθηκαν με HSV-ΔFosB είχαν επίσης υψηλότερο σημείο θραύσης (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Σύκο. 7Β) από τα ζώα που εγχύθηκαν με HSV-LacZ. Δεν υπήρξε καμία επίδραση του ΔFosB στην κινητική δραστηριότητα βάσης που δοκιμάστηκε 1 h πριν από τη δοκιμασία προοδευτικής αναλογίας (συμπληρωματική Εικ. 4A, διαθέσιμη στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό). Δεν υπήρξαν επίσης διαφορές στο σωματικό βάρος την ημέρα της δοκιμασίας προοδευτικής αναλογίας (συμπληρωματικό σχήμα 4B, διαθέσιμο στο www.jneurosci.org ως συμπληρωματικό υλικό). Αυτά τα ευρήματα υποστηρίζουν τις παρατηρήσεις μας με διαγονιδιακά ποντίκια που υπερεκφράζουν ΔFosB και υποδεικνύουν ότι η επιλεκτική υπερέκφραση του ΔFosB στο ΝΑο είναι επαρκής για να ενισχύσει τα κίνητρα που σχετίζονται με τα τρόφιμα.
Εικόνα 7.
Επίδραση των εγχύσεων HSV-ΔFosB 5 d πριν από τη δοκιμή σε όργανο που ανταποκρίνεται σε ένα πρόγραμμα προοδευτικής αναλογίας ενίσχυσης. Α, απαντήσεις μοχλού. Β, σημείο διακοπής. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσοι όροι ± SEM. *** p <0.001; ** ρ <0.01.
Ερωτήσεις - Συζήτηση
Η παρούσα μελέτη καταδεικνύει ότι η υπερέκφραση του ΔFosB εντός του NAc ενισχύει την οργανική συμπεριφορά που ενισχύεται από την τροφήr. Η προηγούμενη έκθεση σε κοκαΐνη, αμφεταμίνη, MDMA ή ενισχυμένη νικοτίνη προκάλεσε διαρκή αύξηση στις επόμενες οργανικές επιδόσεις. Αυτές οι εκθέσεις φαρμάκων αύξησαν επίσης τη συμπεριφορά που προκαλείται από τρόφιμα υπό ένα προοδευτικό πρόγραμμα αναλογίας ενίσχυσης. Αυτές οι επιδράσεις της προηγούμενης έκθεσης του φαρμάκου μιμούνται με περιορισμένη υπερέκφραση του ΔFosB στο ραβδωτό σώμα, χρησιμοποιώντας επαγώγιμους δυρανδενικούς (NSE-tTAxTetOP-ΔFosB) ποντικούς ή χρησιμοποιώντας ένα νέο ιικό φορέα για να εκφράζουν ΔFosB επιλεκτικά στο ΝΑο. Συγκεκριμένα, η υπερέκφραση του ΔFosB στον πυρήνα NAc, μετά από την απόκριση σε όργανα είχε ήδη αποκτηθεί, ενίσχυσε τα κίνητρα για τροφή σύμφωνα με το προοδευτικό πρόγραμμα αναλογίας. Τα ευρήματά μας προσδιορίζουν το ΔFosB στον πυρήνα του NAc ως πιθανό μεσολαβητή των νευροπροσαρμογών που προκαλούνται από το φάρμακο και μπορούν να προωθήσουν την οργανική συμπεριφορά, επεκτείνοντας το ρόλο αυτού του μεταγραφικού παράγοντα ώστε να συμπεριλάβει διαδικασίες σχετικές με τις παρακινητικές επιδράσεις στην απόδοση της συμπεριφοράς που ενισχύεται από την τροφή. Αυξάνουν επίσης την πιθανότητα ότι οι συνθήκες που προκαλούν έκφραση ΔFosB στο NAc μπορεί να επηρεάσουν τις κινητήριες ιδιότητες τόσο των φυσικών όσο και των ενισχυτικών φαρμάκων.
Το ΔFosB συσσωρεύεται σε ακτινωτά νευρώνες του ΝΑο και του ραχιαίου ραβδωτού σώματος σε μέσο έκφρασης της δυνορφίνης μετά από χρόνια, αλλά όχι οξεία, έκθεση σε φάρμακα κατάχρησης. Αυτό το περιφερειακό πρότυπο έκφρασης αναπαράγεται στους διεγέρσιμους δυρανδενικούς ποντικούς που υπερεκφράζουν ΔFosB που χρησιμοποιούνται εδώ. Σε αυτούς τους ποντικούς, τα αυξημένα επίπεδα ραβδώσεων του ΔFosB αυξάνουν την ευαισθησία των ζώων στην κοκαΐνη και τη μορφίνη, όπως μετράται από την προτιμώμενη θέση (Kelz et αϊ., 1999; Zachariou et αϊ., 2006). Αυξάνει επίσης την προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται στην κοκαΐνη, γεγονός που υποδηλώνει ότι η παρακίνηση για αυτοχορήγηση κοκαΐνης ενισχύεται από υπερέκφραση ραβδωτού ΔFosB (Colby et αϊ., 2003). Εδώ βρήκαμε ότι η υπερέκφραση striatal ΔFosB σε αυτά τα ποντίκια αύξησε επίσης την προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται σε ένα ενισχυτικό τροφίμου και ότι αυτά τα αποτελέσματα αναπαράγονται από περιορισμένη υπερεκφράση του ΔFosB που προκαλείται από ιούς στον πυρήνα NAc σε αρουραίο. Τα δεδομένα μας υποδεικνύουν ότι το ΔFosB μπορεί να λειτουργήσει ως μεταγραφικός διαμορφωτής των κινήτρων για πρωτογενείς ενισχυτές, είτε πρόκειται για τρόφιμα, φάρμακα είτε για άσκηση, μια ιδέα σύμφωνη με τις προκαταρκτικές παρατηρήσεις ότι η ραβδωτή έκφραση του ΔFosB αυξάνεται μετά από χρόνιο τρέξιμο ή κατανάλωση σακχαρόζηςMcClung et αϊ., 2004). Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι η υπερέκφραση NAcc του ΔFosB μπορεί να ενισχύσει την κινητήρια επίδραση τόσο των φυσικών όσο και των ενισχυτικών φαρμάκων.
Οι υποπεριφέρειες του NAc έχουν διατυπωθεί για να διαμεσολαβούν διαφορικά την επιρροή των διεργασιών παρορμητικής ή οργανικής ενθάρρυνσης στις οργανικές επιδόσεις (Corbit et αϊ., 2001; de Borchgrave et αϊ., 2002), ενώ οι γενικότερες κινητήριες επιδράσεις στις οργανικές επιδόσεις μπορεί να κωδικοποιούνται από άλλες περιοχές όπως ο κεντρικός πυρήνας της αμυγδαλής (Corbit και Balleine, 2005). Εντούτοις, ο πυρήνας NAc έχει προταθεί ως κρίσιμος χώρος για την απόκτηση οργάνου μάθησης με στόχο το στόχο (Smith-Roe και Kelley, 2000; Baldwin et αϊ., 2002a,b; Kelley, 2004). Παρουσιάζουμε ισοδύναμα αποτελέσματα από προηγούμενες εκθέσεις φαρμάκων και υπερέκφραση διαγονιδιακού ραβδωτού ΔFosB στην ενίσχυση της οργανικής συμπεριφοράς. Οι εγχύσεις του HSV-ΔFosB που περιορίστηκαν στον πυρήνα NAc αύξησαν επίσης την ανταπόκριση των ενισχυμένων με τροφή οργάνων. Αν και αυτά τα πειράματα δεν αποκλείουν μια συμβολή του ραχιαίου ραβδωτού σώματος σε αυτές τις συμπεριφορές, υποδεικνύουν έντονα ότι οι προκαλούμενες από ΔFosB μεταβολές στην έκφραση γονιδίων μέσα στο ΝΑο είναι επαρκείς για να αυξήσουν την ανταπόκριση με κίνητρο τροφής. Επειδή η προοδευτική ανταπόκριση αυξήθηκε επίσης όταν εκφράστηκε το ΔFosB μετά από την επίτευξη σταθερής οργανικής απόδοσης, φαίνεται πιθανό να επηρεαστούν οι παρακινητικές επιδράσεις στην οργανική συμπεριφορά. Ωστόσο, η πιθανότητα ότι οι χειρισμοί μας επηρεάζουν και τις διαδικασίες οργανικής μάθησης δεν μπορεί να αποκλειστεί εντελώς. Για να υποστηρίξουμε τα συμπεράσματά μας, η αύξηση της οργανικής απόδοσης που παρατηρήθηκε μετά από προηγούμενη έκθεση από κοκαΐνη από το στόμα (Miles et αϊ., 2004) έχει υποστηριχθεί ότι περιλαμβάνει μεταβολές κινήτρου συμβατές με την ικανότητα της χρόνιας θεραπείας με νικοτίνη να αυξάνει την προοδευτική αναλογία σε ποντίκια (Brunzell et αϊ., 2006). Επιπλέον, ποντίκια νοπαμίνης μεταφορέα ντοπαμίνης, στα οποία αυξάνονται τα επίπεδα εξωκυτταρικής ντοπαμίνης, εμφανίζουν αυξημένη ανοσοαντιδραστικότητα ΔFosB και κίνητρα που ενισχύεται από την τροφή, αλλά όχι αλλοιωμένη εκμάθηση (Cagniard κ.ά., 2006). Εξάλλου, διαπιστώσαμε ότι η υπερέκφραση του ραβδωτού ΔFosB σε ποντίκια δεν επηρέασε την απόδοση όταν το τρόφιμο "υποτιμήθηκε" με προφαγία. Αυτά τα δεδομένα δείχνουν ότι τα ζώα ήταν ευαίσθητα στην κινητήρια αξία του ενισχυτικού και ότι η ανταπόκριση ήταν κατευθυνόμενη προς το στόχο.
Η προηγούμενη επανειλημμένη έκθεση φαρμάκου μπορεί επίσης να ενισχύσει τον έλεγχο συμπεριφοράς που ασκείται από τα ελεγχόμενα ερεθίσματα που σχετίζονται με φυσικούς ενισχυτές, μετρούμενη με προσέγγιση pavlovian (Harmer και Phillips, 1998; Taylor και Jentsch, 2001; Olausson et αϊ., 2003), κλιματιστική ενίσχυση (Taylor και Horger, 1999; Olausson et αϊ., 2004) και μεταβίβαση από το παβλόφ προς το όργανο (Wyvell και Berridge, 2001). Υπάρχουν τώρα αναμφισβήτητες ενδείξεις ότι ο πυρήνας NAc, σε αντίθεση με το κέλυφος, εμπλέκεται στον έλεγχο της συμπεριφοράς που προκαλείται από φάρμακα από ερεθισμένα ερεθίσματα της PavlovianParkinson et αϊ., 1999, 2002; Hall et αϊ., 2001; Dalley et αϊ., 2002; Ito et αϊ., 2004). Τα αποτελέσματά μας μπορεί να υποδηλώνουν ότι η προκαλούμενη από φάρμακο διέγερση του ΔFosB στο NAc μπορεί να είναι ένας μηχανισμός με τον οποίο ο έλεγχος συμπεριφοράς ενισχύεται σε αυτές τις διαδικασίες. Είναι επίσης πιθανό ότι τα παμβολικά ελεγχόμενα ερεθίσματα, που δρουν ως ενισχυμένα ενισχυτικά, συμβάλλουν στις παρούσες συμπεριφορικές επιδράσεις. Ο ενισχυμένος έλεγχος επί της συμπεριφοράς από τέτοιους ελεγχόμενους ερεθισμούς που προκαλούνται από αυξήσεις στο ΔΡΑΣΒ ραβδωτού σώματος μπορεί επίσης να συνεισφέρει στην επίδραση της πρωτεΐνης στην προτιμώμενη θέση που προκαλείται από το φάρμακο (Kelz et αϊ., 1999; Zachariou et αϊ., 2006) και προοδευτική αναλογία για την κοκαΐνη (Colby et αϊ., 2003). Οι μεταβολές στις διαδικασίες κινητοποίησης έχουν υποτεθεί ότι συμβάλλουν στην ανάπτυξη και τη διατήρηση συμπεριφοράς εθισμού (Robinson και Berridge, 1993; Jentsch και Taylor, 1999; Robbins και Everitt, 1999; Nestler, 2004). Τα παρόντα δεδομένα είναι επίσης συμβατά με άλλες θεωρίες που δίνουν έμφαση στις πολλαπλές οργανικές και παβλόβιες διαδικασίες στη συμπεριφορά εθισμού (Everitt και Robbins, 2005). Επιπρόσθετα απαιτούνται πρόσθετες εργασίες για τον προσδιορισμό του ρόλου των νευροδιατασμάτων που προκαλούνται από φάρμακο και ΔFosB σε NAc και άλλες υποπεριφέρειες με μερική και ραβδωτούς περιορισμούς σε σχέση με τους συγκεκριμένους συνειρμικές ή κινητήριους παράγοντες που μπορούν να διευκολύνουν την οργανική απόδοση και να συμβάλλουν στην καταναγκαστική συμπεριφορά.
Αν και οι ακριβείς μοριακοί μηχανισμοί με τους οποίους μεταβολές εντός της επιρροής της NAc συμπεριφοράς που προκαλείται από πρωτογενείς ή κλιμακωτούς ενισχυτές δεν είναι γνωστοί (Kelley και Berridge, 2002), οι νευρώνες GABAergic του νευρικού μέσου του ΝΑο θεωρούνται κρίσιμο υπόστρωμα για την πλαστικότητα που εξαρτάται από το φάρμακο και την εμπειρία. Εδώ, η ντοπαμινεργική εισροή από την κοιλιακή περιοχή τρηματώματος και η γλουταμινεργική εισροή από τα κορτικοεμβολικά προσαγωγά συγκλίνουν σε κοινούς δενδριτικούς και δενδριτικούς αδένες (Sesack και Pickel, 1990; Smith και Bolam, 1990). Χρόνια έκθεση στον ψυχοδιεγερτικό αυξάνει την πυκνότητα τέτοιων σπονδύλων σε νευρώνες στο κέλυφος και στον πυρήνα NAc (Robinson και Kolb, 1999; Robinson et αϊ., 2001; Li et αϊ., 2003, 2004). Πρόσφατα, η επαγωγή της ευαισθητοποίησης συμπεριφοράς συνδέθηκε ειδικά με την αύξηση των δενδριτικών σπονδύλων εντός του πυρήνα NAc (Li et αϊ., 2004). Συγκεκριμένα, οι επαγόμενες από κοκαΐνη αυξήσεις της πυκνότητας της σπονδυλικής στήλης επιμένουν μόνο στο D1θετικούς νευρώνες που συν-εκφράζουν το ΔFosB (Robinson και Kolb, 1999; Lee et αϊ., 2006). Το ΔFosB στον πυρήνα NAc μπορεί έτσι να συμβάλει στη διαρκή συναπτική πλαστικότητα που θα μπορούσε να επηρεάσει την οργανική συμπεριφορά. Πράγματι, ένας κρίσιμος ρόλος για τη νευροδιαβίβαση ντοπαμίνης-γλουταμικού (Smith-Roe και Kelley, 2000), δραστικότητα πρωτεϊνικής κινάσης Α (Baldwin et αϊ., 2002a) και πρωτεϊνική σύνθεση de novo (Hernandez κ.ά., 2002) στο πλαίσιο του πυρήνα NAc σχετικά με τη λειτουργική απόδοση έχουν αναφερθεί προηγουμένως. Τώρα εντοπίζουμε το ΔFosB ως παράγοντα μεταγραφής που μπορεί να ενισχύσει επίμονα την ανταπόκριση που ενισχύεται από την τροφή όταν υπερεκφράζεται στον πυρήνα NAc. Τα συγκεκριμένα γονίδια ή οι πρωτεΐνες που εμπλέκονται σε αυτές τις επιδράσεις παραμένουν να ορίζονται με ακρίβεια. Το ΔFosB ρυθμίζει την έκφραση πολλαπλών πρωτεϊνών στο ΝΑο που εμπλέκεται στη νευροπλαστικότητα (McClung και Nestler, 2003). Μία πρόσφατη ανάλυση μικροσυστοιχίας που χαρακτήρισε πρότυπα γονιδιακής έκφρασης στο ΝΑο των δυρανδενικών ποντικών που εκφράζουν το ΔΡοοΒ που χρησιμοποιείται εδώ και αναγνώρισε ένα υποσύνολο γονιδίων τα οποία ρυθμίστηκαν από σχετικά βραχυχρόνια έκφραση ΔΡοδΒMcClung και Nestler, 2003). Το BDNF ήταν ένα τέτοιο γονίδιο και το BDNF σε αυτό το νευρικό κύκλωμα είναι γνωστό ότι ενισχύει την ανταπόκριση για τα συναισθήματα που σχετίζονται με φάρμακα και τρόφιμα (Horger et αϊ., 1999; Grimm et αϊ., 2003; Lu et αϊ., 2004). Ένα επιπλέον γονίδιο ενδιαφέροντος είναι εξαρτώμενη από κυκλίνη κινάση 5 (Bibb κ.ά., 2001), που επίσης προκαλείται από ΔFosB, και μπορεί να ρυθμίσει τόσο τη δομική πλαστικότητα που προκαλείται από την κοκαΐνη (Norrholm et αϊ., 2003) και το κίνητρο μετράται με προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται στα φυσικά ή ενισχυτικά φαρμάκων (JR Taylor, μη δημοσιευμένες παρατηρήσεις). Ακόμα πρόσθετοι υποψήφιοι είναι η υπομονάδα GluR2 των υποδοχέων γλουταμινικού AMPA (Kelz et αϊ., 1999) και τον παράγοντα μεταγραφής NFκΒ (πυρηνικός παράγοντας κΒ) (Ang et αϊ., 2001). Θα ήταν σημαντικό να αξιολογηθούν αυτές και άλλες ρυθμισμένες πρωτεΐνες στις υποπεριφέρειες NAc ως υποψήφιες για τη μεσολάβηση των συμπεριφορικών επιδράσεων του ΔFosB στις οργανικές επιδόσεις και κίνητρα.
Η η παρούσα σειρά πειραμάτων αποδεικνύει ότι η υπερέκφραση του ΔFosB εντός του NAc μπορεί να ενισχύσει τη συμπεριφορά που προκαλείται από τρόφιμα και επομένως να ρυθμίσει την οργανική απόδοση, όπως έχει ήδη αποδειχθεί για τις ανταμοιβές φαρμάκων. Αυτά τα δεδομένα παρέχουν νέες ενδείξεις ότι το ΔFosB μπορεί να λειτουργήσει ως ένας γενικός μοριακός διακόπτης που σχετίζεται με βελτιώσεις στις κινητήριες πλευρές των ενισχυτών στη συμπεριφορά που κατευθύνεται από το στόχο. Τα ευρήματά μας αναδεικνύουν την πιθανότητα η επαγωγή NAc ΔFosB, για παράδειγμα με εθιστικά φάρμακα, άγχος ή ίσως εξαιρετικά ανταμείβοντας τρόφιμα, μπορεί να είναι ένας κρίσιμος μηχανισμός με τον οποίο οι δυσλειτουργικές καταστάσεις κινήτρων οδηγούν σε ψυχιατρικές διαταραχές που συνδέονται με την καταναγκαστική συμπεριφορά.
Υποσημειώσεις
o Λήψη Μαρτίου 15, 2006.
o Η αναθεώρηση έλαβε τον Ιούνιο 23, 2006.
o Αποδεκτές τον Αύγουστο 2, 2006.
Το έργο αυτό υποστηρίχθηκε με επιχορηγήσεις από το Εθνικό Ινστιτούτο για την κατάχρηση ναρκωτικών, το Εθνικό Ινστιτούτο Ψυχικής Υγείας και το Εθνικό Ινστιτούτο Κατάχρησης Αλκοόλ και Αλκοολισμού. Ευχαριστούμε πολύ για την πολύτιμη βοήθεια της Dilja Krueger, της Drew Kiraly, του Dr. Ralph DiLeone, του Robert Sears και του Dr. Jonathan Hommel στο Τμήμα Ψυχιατρικής του Πανεπιστημίου Yale. Είμαστε επίσης ευγνώμονες στον Dr. Jennifer Quinn και στο Δρ Paul Hitchcott για την παροχή χρήσιμων σχολίων σε αυτό το χειρόγραφο.
Η αλληλογραφία θα πρέπει να απευθύνεται στην Jane R. Taylor, Τμήμα Ψυχιατρικής, Τμήμα Μοριακής Ψυχιατρικής, Ιατρική Σχολή του Πανεπιστημίου Yale, Ribicoff Research Facilities, Κέντρου Ψυχικής Υγείας του Κοννέκτικατ, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[προστασία μέσω email]
Copyright © 2006 Εταιρεία για τη Νευροεπιστήμη 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
αναφορές
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Ζαγκούρας Π,
4. Magna Η,
5. Holland J,
6. Schaeffer Ε,
7. Nestler EJ
(2001) Επαγωγή του NFκΒ στον πυρήνα accumbens με χρόνια χορήγηση κοκαΐνης. J Neurochem 79: 221-224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian Κ,
3. Holahan MR,
4. Kelley AE
(2002a) Η ορεκτική οργανική μάθηση εξασθενεί λόγω της αναστολής της εξαρτώμενης από cAMP πρωτεϊνικής κινάσης εντός του nucleus accumbens. Neurobiol Μάθετε Mem 77: 44-62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian Κ,
3. Kelley AE
(2002b) Η ορεκτική οργανική μάθηση απαιτεί ταυτόχρονη ενεργοποίηση του NMDA και της ντοπαμίνης D1 υποδοχείς εντός του μεσαίου προμετωπιαίου φλοιού. J Neurosci 22: 1063-1071.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
4. ↵
1. Balleine Β,
2. Killcross S
(1994) Επιδράσεις βλαβών του ιωβενικού οξέως του πυρήνα accumbens στη συνθετική δράση. Behav Brain Res 65: 181-193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) Εθισμός, ντοπαμίνη, και οι μοριακοί μηχανισμοί της μνήμης. Neuron 25: 515-532.
6. ↵
1. Berridge KC,
2. Robinson TE
(2003) Ανάλυση της ανταμοιβής. Τάσεις Neurosci 26: 507-513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson Ρ,
5. Nishi Α,
6. Snyder GL,
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10. Nairn AC,
11. Nestler EJ,
12. Greengard P
(2001) Οι επιδράσεις της χρόνιας έκθεσης στην κοκαΐνη ρυθμίζονται από τη νευρωνική πρωτεΐνη Cdk5. Φύση 410: 376-380.
8. ↵
1. Brunzell DH,
2. Chang JR,
3. Schneider Β,
4. Olausson Ρ,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) υποδοχείς νικοτινικού υποδοχέα ακετυλοχολίνης που περιέχουν βήτα 2 εμπλέκονται σε επαγόμενες από τη νικοτίνη αυξήσεις στην κλινική ενίσχυση αλλά όχι σε προοδευτική αναλογία που ανταποκρίνεται για τρόφιμα σε ποντίκια C57BL / 6. Ψυχοφαρμακολογία (Berl) 184: 328-338.
9. ↵
1. Cagniard Β,
2. Balsam PD,
3. Brunner D,
4. Zhuang X
(2006) Τα ποντίκια με χρόνια αυξημένη ντοπαμίνη παρουσιάζουν αυξημένα κίνητρα, αλλά όχι μάθηση, για ανταμοιβή τροφής. Νευροψυχοφαρμακολογία 31: 1362-1370.
10. ↵
1. Carlezon WA Jr.,
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi Ν,
7. Duman RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) Ρύθμιση της ανταμοιβής κοκαΐνης από την CREB. Επιστήμη 282: 2272-2275.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Ελπίδα ΒΤ,
4. Nakabeppu Y,
5. Nestler EJ
(1997) Χρόνια αντιγόνα που σχετίζονται με το Fos: σταθερές παραλλαγές του ΔFosB που επάγονται στον εγκέφαλο με χρόνιες θεραπείες. J Neurosci 17: 4933-4941.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai Ν,
5. Steffen C,
6. Shockett ΡΕ,
7. Picciotto MR,
8. Duman RS,
9. Nestler EJ
Διαγονιδιακά ζώα με επαγώγιμη, στοχευμένη γονιδιακή έκφραση στον εγκέφαλο. ΜοΙ Pharmacol 54: 495-503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler Κ,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Αυτο DW
(2003) Η υπερέκφραση του ΔFosB για το συγκεκριμένο κυτταρικό τύπο κυττάρων αυξάνει το κίνητρο για την κοκαΐνη. J Neurosci 23: 2488-2493.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Διπλή διάσπαση των βασεολατρικών και κεντρικών βλαβών της αμυγδαλής στις γενικές και εξειδικευμένες για την έκβαση μορφές μεταφοράς παβολόφωνου οργάνου. J Neurosci 25: 962-970.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) Ο ρόλος του πυρήνα accumbens στο όργανο conditioning: ενδείξεις μιας λειτουργικής διάστασης μεταξύ του πυρήνα accumbens και του κελύφους. J Neurosci 21: 3251-3260.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y,
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens ντοπαμίνη και εκμάθηση προσέγγισης διακρίσεων: αλληλεπιδραστικές επιδράσεις των αλλοιώσεων 6-υδροξυδωπαμίνης και συστηματική χορήγηση απομορφίνης. Ψυχοφαρμακολογία (Berl) 161: 425-433.
17. ↵
1. de Borchgrave R,
2. Rawlins JN,
3. Dickinson Α,
4. Balleine BW
(2002) Επιδράσεις κυτταροτοξικών βλαστοκυττάρων στις κλινικές συνθήκες σε αρουραίους. Exp Brain Res 144: 50-68.
18. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) Οι άμεσες αλληλεπιδράσεις μεταξύ της βαζολατρικής αμυγδαλής και του πυρήνα nucleus accumbens υποκρύπτουν τη συμπεριφορά αναζήτησης κοκαΐνης από τους αρουραίους. J Neurosci 24: 7167-7173.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
19. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Συνιστώμενες ενισχυτικές ιδιότητες ερεθισμάτων που συνδυάζονται με αυτοκατανόηση κοκαΐνης, ηρωίνης ή σακχαρόζης: επιπτώσεις στην εμμονή της συμπεριφοράς εθισμού. Νευροφάρμακο 47 ([Suppl 1]) 202-213.
20. ↵
1. Dickinson Α
(1985) Δράσεις και συνήθειες: ανάπτυξη αυτονομίας συμπεριφοράς. Philos Trans R Λον Β Biol Sci 308: 67-78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Νευρωνικά συστήματα ενίσχυσης για την τοξικομανία: από πράξεις σε συνήθειες σε καταναγκασμό. Nat Neurosci 8: 1481-1489.
22. ↵
1. Faure A,
2. Haberland U,
3. Conde F,
4. El Massioui N
(2005) Η βλάβη στο νωτιαίο ντοπαμινικό σύστημα διαταράσσει τον σχηματισμό συνήθειας διέγερσης-απόκρισης. J Neurosci 25: 2771-2780.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi Τ,
4. Ελπίδα ΒΤ,
5. Su TP,
6. Σάχαμ Υ
(2003) Χρονικά εξαρτώμενες αυξήσεις των επιπέδων πρωτεΐνης νευροτροφικού παράγοντα που προέρχονται από εγκεφάλους εντός του μεσο-λεκιθικού συστήματος ντοπαμίνης μετά την απομάκρυνση από την κοκαΐνη: επιπτώσεις στην επώαση της επιθυμίας κοκαΐνης. J Neurosci 23: 742-747.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
24. ↵
1. Hall J,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dickinson Α,
5. Everitt BJ
(2001) Συμμετοχή του κεντρικού πυρήνα του πυρήνα των αμυγδαλών και του πυρήνα nucleus accumbens στη διαμεσολάβηση των επιδράσεων του Pavlovian στη συνθετική συμπεριφορά. Eur J Neurosci 13: 1984-1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) Ενισχυμένη οσφρητική ρύθμιση μετά από επαναλαμβανόμενη προεπεξεργασία με d-αμφεταμίνη. Behav Pharmacol 9: 299-308.
26. ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadeghian Κ,
3. Kelley AE
(2002) Η έγκαιρη ενοποίηση της οργανικής μάθησης απαιτεί σύνθεση πρωτεϊνών στον πυρήνα accumbens. Nat Neurosci 5: 1327-1331.
27. ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Τοπικό γονιδιακό κτύπημα στον εγκέφαλο με χρήση παρεμβολών RNA που προκαλείται από ιούς. Nat Med 9: 1539-1544.
28. ↵
1. Ο Horger BA,
2. Shelton Κ,
3. Schenk S
(1990) Η προδιάθεση ευαισθητοποιεί τους αρουραίους στις ανταμείβοντας επιδράσεις της κοκαΐνης. Pharmacol Biochem Behav 37: 707-711.
29. ↵
1. Ο Horger BA,
2. Giles MK,
3. Schenk S
(1992) Η προδιάθεση έναντι της αμφεταμίνης και της νικοτίνης προδιαθέτει τους αρουραίους να αυτο-χορηγούν χαμηλή δόση κοκαΐνης. Ψυχοφαρμακολογία (Berl) 107: 271-276.
30. ↵
1. Ο Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Taylor JR
(1999) Ενίσχυση της κινητικής δραστηριότητας και κλινική ανταμοιβή στην κοκαΐνη από τον νευροτροφικό παράγοντα που προέρχεται από τον εγκέφαλο. J Neurosci 19: 4110-4122.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Διαφορικός έλεγχος της συμπεριφοράς αναζήτησης κοκαΐνης από τον πυρήνα και το κέλυφος nucleus accumbens. Nat Neurosci 7: 389-397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Impulsivity που προκύπτει από δυσλειτουργία του μετωπιαίου οστού κατά την κατάχρηση ναρκωτικών: επιπτώσεις για τον έλεγχο της συμπεριφοράς από ερεθίσματα που σχετίζονται με ανταμοιβή. Ψυχοφαρμακολογία (Berl) 146: 373-390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Ventral striatal έλεγχο των ορεκτικών κινήτρων: ο ρόλος στην καταπόνηση συμπεριφορά και η ανταμοιβή που σχετίζονται με τη μάθηση. Neurosci Biobehav Rev 27: 765-776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) Η νευροεπιστήμη των φυσικών ανταμοιβών: η συνάφεια με τα εθιστικά φάρμακα. J Neurosci 22: 3306-3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler Κ,
5. Gilden L,
6. Beckmann ΑΜ,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Αυτο DW,
11. Tkatch Τ,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Η έκφραση του μεταγραφικού παράγοντα ΔFosB στον εγκέφαλο ελέγχει την ευαισθησία στην κοκαΐνη. Φύση 401: 272-276.
36. ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) Η αμφεταμίνη ρυθμίζει την έκφραση γονιδίου στο ραβδωτό σώμα αρουραίου μέσω του παράγοντα μεταγραφής CREB. J Neurosci 14: 5623-5634.
37. ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P
(2006) Ο σχηματισμός δενδριτικής σπονδυλικής στήλης που επάγεται από κοκαΐνη σε D1 και D2 που περιέχουν υποδοχείς ντοπαμίνης που περιέχουν ακτινωτά νευρώνες στον πυρήνα nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci USA 103: 3399-3404.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb Β,
3. Robinson TE
(2003) Η θέση των επίμονων επαγόμενων από την αμφεταμίνη αλλαγών στην πυκνότητα των δενδριτικών σπονδύλων στους μεσοσπονδύλιους νευρώνες των πυκνών νευρώνων στον πυρήνα του πυρήνα και του ασβεστίου. Νευροψυχοφαρμακολογία 28: 1082-1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) Η επαγωγή της ευαισθητοποίησης συμπεριφοράς συνδέεται με την δομική πλαστικότητα που προκαλείται από κοκαΐνη στον πυρήνα (αλλά όχι στο κέλυφος) του πυρήνα accumbens. Eur J Neurosci 20: 1647-1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Σάχαμ Υ
(2004) Μία εφάπαξ έγχυση εγκεφαλικού νευροτροφικού παράγοντα στην κοιλιακή περιοχή τμηματοποίησης προκαλεί μακροχρόνια ενίσχυση της κοκαΐνης που αναζητά μετά την απόσυρση. J Neurosci 24: 1604-1611.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
41. ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) Ρύθμιση έκφρασης γονιδίων και ανταμοιβής κοκαΐνης από CREB και ΔFosB. Nat Neurosci 6: 1208-1215.
42. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Ζαχαρίου V,
5. Berton Ο,
6. Nestler EJ
(2004) ΔFosB: ένας μοριακός διακόπτης για μακροπρόθεσμη προσαρμογή στον εγκέφαλο. Brain Res Mol Εγκέφαλος Res 132: 146-154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson Α
(2004) Περιορισμένη δραστηριότητα και ενισχυτική ενίσχυση μετά από μακροχρόνια κατανάλωση κοκαΐνης από το στόμα από αρουραίους. Behav Neurosci 118: 1331-1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) Μοριακοί μηχανισμοί εθισμού στα ναρκωτικά. Νευροφάρμακο 47 ([Suppl 1]) 24-32.
45. ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot Μ,
3. Αυτο DW
(2001) ΔFosB: ένας παρατεταμένος μοριακός διακόπτης για τον εθισμό. Proc Natl Acad Sci USA 98: 11042-11046.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Greengard P
(2003) Ο επαγόμενος από κοκαΐνη πολλαπλασιασμός των δενδριτικών σπονδύλων στον πυρήνα accumbens εξαρτάται από τη δραστικότητα της εξαρτώμενης από κυκλίνη κινάσης-5. Νευροεπιστήμη 116: 19-22.
47. ↵
1. Nye HE,
2. Ελπίδα ΒΤ,
3. Kelz MB,
4. Iadarola Μ,
5. Nestler EJ
(1995) Φαρμακολογικές μελέτες της ρύθμισης της χρόνιας επαγωγής του αντιγόνου που σχετίζεται με το FOS από την κοκαΐνη στο ραβδωτό σώμα και στον πυρήνα του πυρήνα. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671-1680.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
48. ↵
1. Olausson Ρ,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) Η επανειλημμένη έκθεση σε νικοτίνη ενισχύει τη σχετική με τη ανταμοιβή μάθηση στον αρουραίο. Νευροψυχοφαρμακολογία 28: 1264-1271.
49. ↵
1. Olausson Ρ,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) Η επανειλημμένη έκθεση σε νικοτίνη ενισχύει την ανταπόκριση με την κλινική ενίσχυση. Ψυχοφαρμακολογία (Berl) 173: 98-104.
50. ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) Η διάσπαση σε επιδράσεις των βλαβών του πυρήνα πυρήνα και του κελύφους πυρήνα στην συμπεριφορά προσεκτικής προσέγγισης pavlovian και η ενίσχυση της κλινικής ενίσχυσης και της κινητικής δραστηριότητας από την d-αμφεταμίνη. J Neurosci 19: 2401-2411.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
51. ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. Cardinal RN,
4. Bamford Α,
5. Fehnert Β,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana Ν,
8. Halkerston ΚΜ,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) Η εξάντληση της ντοπαμίνης από το πυρηνικό οξύ προκαλεί αμφισβήτηση τόσο της απόκτησης όσο και της συμπεριφοράς της συμπεριφοράς της οσφυϊκής προσέγγισης Pavlovian: επιπτώσεις στη λειτουργία της ντοπαμίνης του mesoaccumbens. Behav Brain Res 137: 149-163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) Ο εγκέφαλος αρουραίου σε στερεοταξικές συντεταγμένες (Academic, Sydney).
53. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot Μ,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Επαγωγή του ΔFosB σε δομές εγκεφάλου σχετιζόμενες με ανταμοιβή μετά από χρόνιο στρες. J Neurosci 24: 10594-10602.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
54. ↵
1. Piazza PV,
2. Deminiere JM,
3. le Moal Μ,
4. Simon H
(1990) Η επαγόμενη από άγχος και φαρμακολογική συμπεριφορά ευαισθητοποίηση αυξάνει την ευπάθεια στην απόκτηση αυτοφανοποίησης της αμφεταμίνης. Brain Res 514: 22-26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari Μ,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R,
6. Chiamulera C
(1997) Κοινά νευρικά υποστρώματα για τις εθιστικές ιδιότητες της νικοτίνης και της κοκαΐνης. Επιστήμη 275: 83-86.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Εθισμός στα ναρκωτικά: οι κακές συνήθειες συσσωρεύονται. Φύση 398: 567-570.
57. ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC
(1993) Η νευρωνική βάση της λαχτάρας των ναρκωτικών: μια θεωρία ευαισθητοποίησης κινήτρου για τον εθισμό. Brain Res Brain Res Rev 18: 247-291.
58. ↵
1. Robinson TE,
2. Kolb B
(1999) Μεταβολές στη μορφολογία των δενδριτών και των δενδριτικών σπονδύλων στον πυρήνα accumbens και στον προμετωπιαίο φλοιό μετά από επαναλαμβανόμενη θεραπεία με αμφεταμίνη ή κοκαΐνη. Eur J Neurosci 11: 1598-1604.
59. ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton Ε,
4. Kolb B
(2001) Η αυτοδιαχείριση κοκαΐνης μεταβάλλει τη μορφολογία των δενδριτών και των δενδριτικών σπονδύλων στον πυρήνα accumbens και neocortex. Σύναψη 39: 257-266.
60. ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) Στον πυρήνα του μέσου πυρήνα οι πυκνοί πυρήνες, οι ιππόκαμποι και οι κατεχολαμινεργικοί τερματικοί συγκλίνουν σε ακανθώδεις νευρώνες και βρίσκονται σε εφαρμογή μεταξύ τους. Brain Res 527: 266-279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Θύελλα D,
4. Nestler EJ
(2003) Ρύθμιση της μεσολαβούμενης από CRE μεταγραφής σε εγκέφαλο ποντικού από αμφεταμίνη. Σύναψη 48: 10-17.
62. ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) Το νευρικό δίκτυο των βασικών γαγγλίων όπως αποκαλύπτεται από τη μελέτη των συναπτικών συνδέσεων των αναγνωρισμένων νευρώνων. Τάσεις Neurosci 13: 259-265.
63. ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) Συμπτωματική ενεργοποίηση του ΝΜϋΑ και της ντοπαμίνης D1 υποδοχείς μέσα στον πυρήνα nucleus accumbens απαιτείται για την ορεκτική οργανική μάθηση. J Neurosci 20: 7737-7742.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
64. ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) Η ενισχυμένη ανταπόκριση για την κλιμακωτή ανταμοιβή που παράγεται από την ενδοεμφανιζόμενη αμφεταμίνη ενισχύεται μετά την ευαισθητοποίηση της κοκαΐνης. Ψυχοφαρμακολογία (Berl) 142: 31-40.
65. ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) Η επαναλαμβανόμενη διαλείπουσα χορήγηση ψυχοκινητικών διεγερτικών φαρμάκων μεταβάλλει την απόκτηση συμπεριφοράς προσέγγισης pavlovian σε αρουραίους: διαφορικές επιδράσεις κοκαΐνης, d-αμφεταμίνης και 3,4-μεθυλενοδιοξυμεθαμφεταμίνης ("Ecstasy") Biol Ψυχιατρική 50: 137-143.
66. ↵
1. Vezina P,
2. Lorrain DS,
3. Arnold GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) Η ευαισθητοποίηση της αντιδραστικότητας του νευρώνα ντοπαμίνης του μεσεγκεφάλου προάγει την επιδίωξη της αμφεταμίνης. J Neurosci 22: 4654-4662.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
67. ↵
1. Werme Μ,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L,
5. Thoren Ρ,
6. Nestler EJ,
7. Brene S
(2002) Το ΔFosB ρυθμίζει τη λειτουργία του τροχού. J Neurosci 22: 8133-8138.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Ευαισθητοποίηση κινήτρων από την προηγούμενη έκθεση σε αμφεταμίνη: αυξημένη "θέληση" για ανταμοιβή σακχαρόζης. J Neurosci 21: 7831-7840.
Περίληψη / ΔΩΡΕΑΝ πλήρες κείμενο
69. ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) Οι βλάβες του dorsolateral striatum διατηρούν το προσδόκιμο έκβασης αλλά διαταράσσουν τη διαμόρφωση της συνήθειας στην οργανική μάθηση. Eur J Neurosci 19: 181-189.
70. ↵
1. Ζαχαρίου V,
2. Bolanos CA,
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman Τ,
8. Berton Ο,
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar Α,
12. Nestler EJ
(2006) Ένας βασικός ρόλος του ΔFosB στον πυρήνα accumbens στη δράση της μορφίνης. Nat Neurosci 9: 205-211.
;