DeltaFosB en The Nucleus Accumbens é crítico para reforzar os efectos da recompensa sexual. (2010)

COMENTARIOS: Delta FosB é un marcador para todas as adiccións, tanto conductuais como químicas. A medida que esta molécula aumenta no circuíto de recompensa, tamén aumentan os comportamentos adictivos. É unha das moléculas implicadas nos cambios neuroplásticos. Este experimento demostra que aumenta coa experiencia sexual, de xeito similar a como sucede coas drogodependencias. No experimento empregaron a enxeñaría xenética para aumentar os seus niveis máis aló do "normal". Isto deu lugar a unha maior facilitación da actividade sexual. Cremos que isto ocorre coa adicción ao porno.

ESTUDO COMPLETO

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Xenes Brain Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 agosto 16.

Departamento de Anatomía e Bioloxía Celular, Escola de Medicina e Odontoloxía de Schulich, Universidade de Western Ontario, Londres, Ontario, Canadá.

RESUMO

O comportamento sexual nas ratas macho é gratificante e reforzante. Non obstante, sábese pouco sobre os mecanismos específicos celulares e moleculares que median a recompensa sexual ou os efectos de reforzo da recompensa na posterior expresión do comportamento sexual. Este estudo proba a hipótese de que ΔFosB, a forma truncada de FosB expresamente estable, xoga un papel crítico no reforzo do comportamento sexual e na facilitación inducida pola experiencia de motivación e rendemento sexuais.

A experiencia sexual demostrou que causa a acumulación de BFosB en varias rexións cerebrais límbicas, incluíndo o núcleo accumbens (NAc), o córtex prefrontal medial, a área tegmental ventral e o putamen caudado, pero non o núcleo preoptico medial.

A continuación, a inducción de c-Fos, un obxectivo de baixa (reprimida) de BFosB, foi medido en animais con experiencia sexual e inxenua. O número de células c-Fos-inmunorreactivas inducidas polo apareamiento diminuíu significativamente en animais con experiencia sexual en comparación cos controis sexuais.

Finalmente, os niveis de ΔFosB e a súa actividade no NAc foron manipulados mediante a transferencia de xenes mediada por virus para estudar o seu papel potencial na mediación da experiencia sexual e na facilitación de rendemento sexual inducida por experiencias. Os animais con sobreexpresión BFosB mostraron unha maior facilitación do rendemento sexual con experiencia sexual en relación aos controis. En contraste, a expresión de DJunD, un compañeiro de vinculación negativa dominante de FosB, atenuou a facilitación de rendemento sexual inducida pola experiencia sexual e retardou o mantemento a longo prazo da facilitación en comparación coa proteína de fluorescencia verde e os grupos sobreexpresores ΔFosB.

Xuntos, estes resultados apoian un papel crítico para a expresión inFosB no NAc para os efectos reforzantes do comportamento sexual e facilitación inducida por experiencia sexual.

Introdución

O comportamento sexual é moi gratificante e reforzante para os roedores masculinos (Coolen et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Ademais, a experiencia sexual modifica o seguinte comportamento e recompensa sexualTenk et al. 2009). Coa repetida experiencia de apareamiento, o comportamento sexual é "reforzado", evidenciado por diminución das latencias para iniciar o apareamiento e facilitación do desempeño sexual.Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Non obstante, os mecanismos celulares e moleculares subxacentes de recompensa e reforzo sexuais non son ben comprendidos. O comportamento sexual e os sinais condicionados que predicen o apareamiento inducen a expresión transitoria do xene c-fos inmediato-precoz no sistema mesolímbico de ratas macho (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Ademais, demostrouse recentemente que a experiencia sexual induce unha neuroplasticidade de longa duración no sistema mesolímbico de rata masculino (Frohmader et al. 2009; Jarra et al. 2010). Ademais, nos ratos machos, demostrouse que a experiencia sexual induce ΔFosB, a Membro da familia Fos, no núcleo accumbens (NAc)Wallace et al. 2008). ΔFosB, unha variante de empalme truncada de FosB, é un membro único da familia Fos debido á súa maior estabilidade (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) e desempeña un papel na mellora da motivación e recompensa por drogas de abuso e pola adicción mediadora da plasticidade neural a longo prazoNestlé et al. 2001). ΔFosB forma un complexo de factor de transcrición heteromérica (activador proteína-1 (AP-1)) con proteínas de xuño, preferentemente JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). A través da sobreexpresión inducible de FosB, restrinxida principalmente ao estriado usando ratos bi-transxénicos, prodúcese un fenotipo de comportamento similar ao de drogas, a pesar da ausencia de exposición previa á droga. (McClung et al. 2004). Este fenotipo de comportamento inclúe unha resposta locomotora sensibilizada á cocaínaKelz et al. 1999), aumento da preferencia por cocaínaKelz et al. 1999) e morfina (Zachariou et al. 2006), e aumento da autoadministración de cocaínaColby et al. 2003).

Similar á recompensa de drogas, ΔFosB está regulado por comportamentos gratificantes naturais e media a expresión destes comportamentos. A sobreexpresión de FosB no NAc con modelos de roedores aumenta o funcionamento da roda voluntaria (Werme et al. 2002), resposta instrumental para a comida (Olausson et al. 2006), inxestión de sacarosa (Wallace et al. 2008), e facilita o home (Wallace et al. 2008) e femia (Bradley et al. 2005) comportamento sexual. Así, ΔFosB pode estar implicado na mediación dos efectos das experiencias gratificantes naturais. To estudo actual expande estudos anteriores investigando específicamente o papel de ΔFosB no NAc nos resultados a longo prazo da experiencia sexual no comportamento de apareamiento posterior e na activación neural no sistema mesolímbico.

En primeiro lugar, estableceuse que rexións cerebrais implicadas no circuíto de recompensa e no comportamento sexual expresan BFosB inducida por experiencias sexuais.
A continuación, o efecto da BFosB inducida por experiencias sexuais na expresión inducida por c-Fos do apareamiento, un obxectivo de baixada reprimido por ΔFosB (Renthal et al. 2008), foi investigado.
Finalmente, o efecto da manipulación da actividade de ΔFosB no NAc (expresión excesiva de xenes e expresión dun compañeiro dominante de unión negativa) sobre o comportamento sexual e facilitación inducida pola experiencia de motivación e rendemento sexuais foi determinada usando tecnoloxía viral de entrega de vectores.

MÉTODOS

animais

Os ratos Sprague Dawley do macho adulto (gramos 200-225) obtivéronse nos laboratorios Charles River (Senneville, QC, Canadá). Os animais foron aloxados en gaiolas de plexiglás cun tubo de túnel en parellas do mesmo sexo ao longo de experimentos. A sala da colonia estaba regulada por temperatura e mantívose nun ciclo escuro de luz escura 12 / 12 con alimentos e auga dispoñibles ad libitum excepto durante as probas de comportamento. As femias de estímulo (210-220 gramos) para as sesións de apareamiento recibiron un implante subcutáneo que contiña 5% benzoato de estradiol e colesterol 95% tras a ovariectomía bilateral baixo anestesia profunda (0.35g ketamina / 0.052g Xylazine). A receptividade sexual foi inducida pola administración de 500µg progesterona en 0.1 ml de aceite de sésamo aproximadamente 4 horas antes da proba. Todos os procedementos foron aprobados polos comités de uso e cuidado de animais da Universidade de Western Ontario e conformáronse coas directrices do CCAC sobre animais vertebrados na investigación.

Comportamento sexual

As sesións de apareamiento producíronse durante a fase escura cedo (entre 2 – 6 horas despois do inicio do período escuro) baixo unha iluminación de vermello escuro. Antes do inicio da experiencia, os animais dividíronse aleatoriamente en grupos. Durante as sesións de apareamiento permitíuselles que as ratas masculinas copulásense á eyaculación ou á hora de 1, e rexistráronse parámetros para o comportamento sexual, incluíndo: latencia de montaxe (ML; tempo desde a introdución da femia ata a primeira montaxe), latencia de intromisión (IL; a femia ata a primeira montaxe con penetración vaxinal), a latencia da exaculación (EL, o tempo desde a primeira intromisión á ejaculação), o intervalo de ejaculación (PEI; o tempo desde a exaculación ata a primeira intromisión posterior), o número de monturas (M; empuxe pélvico sen vaxinal penetración), número de intromisións (MI, montaxe, incluíndo penetración vaxinal) e eficacia da cópula (CE = IM / (M + IM))Agmo 1997). Non se incluíron números de montajes e intromisións na análise de animais que non mostraban exaculación. As latencias de montaxe e de intromisión son parámetros indicativos da motivación sexual, mentres que a latencia da ejaculação, o número de montajes e a eficacia da copulación reflicten o rendemento sexual (Casco 2002).

Experimento 1: expresión de ΔFosB

Se lles permitiu que as ratas macho inxenuos sexuais se xuntasen en gaiolas de proba limpas (60 × 45 × 50 cm) para 5, sesións de apareamiento diarias ou permaneceu sexualmente inxenua. Táboa complementaria 1 describe o paradigma de comportamento para grupos experimentais: sexo inxenuo (NNS; n = 5), sexo inxenuo (NS; n = 5), non experimentou sexo (ENS; n = 5) e sexo experimentado (ES; n = 4). Os animais NS e ES sacrificáronse 1 horas despois da exaculación o último día de apareamiento para investigar a expresión c-Fos inducida polo apareamiento. Os animais de NNS sacrificáronse simultáneamente con animais de ENS horas 24 despois da sesión de apareamiento final para examinar o BFosB inducido pola experiencia sexual. Os grupos con experiencia sexual coincidían con comportamentos sexuais antes de probas posteriores. Non se detectaron diferenzas significativas entre grupos para ningunha medida de comportamento dentro da sesión de apareamiento adecuada e os dous grupos con experiencia mostraron a facilitación de comportamento sexual inducida pola experiencia sexual.Táboa complementaria 2). Os controis incluían machos sexuais inxenuos tratados simultáneamente con animais de procreación que aseguran a exposición a cheiros femininos e vocalizacións sen contacto feminino directo.

Para o sacrificio, os animais foron profundamente anestesiados empregando pentobarbital sódico (270mg / kg; ip) e perfundidos intracardialmente con 50 mL de solución salina 0.9%, seguido de 500 ml de paraformaldehído 4% en tampón fosfato 0.1 M (PB). Os cerebros retiráronse e fixáronse por 1 h a temperatura ambiente no mesmo fixador, despois sumíronse en 20% sacarosa e 0.01% sodio azida en 0.1 M PB e almacenados a 4 ° C. As seccións coronais (35 µm) cortáronse cun microtomo de conxelación (H400R, Micron, Alemania), recollidas en catro series paralelas en solución crioprotector (30% sacarosa e 30% etilenglicol en 0.1 M PB) e almacenadas en −20 ° C. As seccións flotantes libres laváronse extensivamente con solución salina tamponada con fosfato 0.1 M (PBS; pH 7.3-7.4) entre as incubacións. As seccións foron expostas a 1% H₂O₂ para 10 min a temperatura ambiente para destruír peroxidasas endógenas, entón bloqueado en solución de incubación PBS +, que é PBS que contén albumina de soro bovino 0.1% (elemento do catálogo 005-000-121; Laboratorios de InmunoResearch de Jackson, West Grove, PA) e 0.4% Triton X -100 (elemento do catálogo BP151-500; Sigma-Aldrich) para 1 h. As seccións foron entón incubadas durante a noite en 4 ° C nun anticorpo policlonal de coello pan-FosB (1: 5K; sc-48 Biotecnoloxía Santa Cruz, Santa Cruz, CA, EUA). O anticorpo pan-FosB levantouse contra unha rexión interna compartida por FosB e ΔFosB. As células BFosB-IR eran específicamente ΔFosB-positivas porque no tempo posterior ao estímulo (horas 24) todo o FosB inducido polo estímulo detectable é degradado (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Ademais, neste experimento, os animais que se acoplan no último día (NS, ES) sacrificáronse 1 h despois do apareamento, polo tanto, antes da expresión de FosB. A análise de Western blot confirmou a detección de ΔFosB aproximadamente en 37 kD. Despois da incubación de anticorpos primarios, incubáronse seccións para 1 h en IgG anti-coello de cabra conxugada con biotina (1: 500 en PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, EUA) e despois 1 h en peroxidasa de avidina-biotina-hoseradish (elite ABC ; 1: 1K en PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, EUA). Seguindo estas seccións de incubación procesáronse nunha das seguintes formas:

1. Etiquetaxe de peroxidasa única

As seccións de animais NNS e ENS utilizáronse para unha análise cerebral da acumulación BFosB inducida pola experiencia sexual. Despois da incubación de ABC, visualizouse o complexo de peroxidasa despois do tratamento de minutos 10 a unha solución de cromóxeno que contiña 0.02% 3,3'-diaminobenzidina tetrahidrocloruro (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) reforzada con sulfato de níquel 0.02% en 0.1 M PB con peróxido de hidróxeno (0.015%). As seccións laváronse a fondo en 0.1 M PB para finalizar a reacción e montáronse en diapositivas codificadas de Superfrost plus glass (Fisher, Pittsburgh, PA, EUA) con 0.3% de gelatina en ddH₂0. Despois da deshidratación, todas as diapositivas cubríronse con DPX (dibutilftalato xileno).

2. Inmunofluorescencia dobre

Para a análise de ΔFosB e c-Fos usáronse seccións dos catro grupos experimentais que conteñen NAc e mPFC. Despois da incubación de ABC, as seccións foron incubadas para 10 min con tyramida biotinilada (BT; 1: 250 en PBS + 0.003% H₂O₂ Kit de amplificación de sinais de Tyramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) e para 30 min con strepavidina Alexa 488-conxugada (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). As seccións foron entón incubadas durante a noite cun anticorpo policlonal de coello que recoñece específicamente a c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), seguido por unha incubación de min 30 con anticorpo secundario conxugado Cy3 de cabra. (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, EUA). Despois da tinguidura, as seccións foron lavadas a fondo en 0.1 M PB, montadas sobre láminas de vidro codificadas con 0.3% de gelatina en ddH₂0 e cubrimento escorregado cun medio de montaxe acuoso (Gelvatol) que contén o axente anti-decoloración 1,4-diazabiciclo (2,2) octano (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Os controis inmunohistoquímicos incluían a omisión dun ou dous anticorpos primarios, o que resultou na ausencia de etiquetaxe na lonxitude de onda adecuada.

Análise de Datos

Análise cerebral de BFosB

Dous experimentadores cegos ao tratamento realizaron a exploración en ancho do cerebro en diapositivas codificadas. As células ΔFosB-inmunorreactivas (-IR) en todo o cerebro analizáronse semi-cuantitativamente usando unha escala para representar o número de células ΔFosB-positivas como se indica no Táboa 1. Ademais, en base a resultados semi-cuantitativos, o número de células ΔFosB-IR foi contado usando áreas estándar de análise en áreas do cerebro implicadas na recompensa e no comportamento sexual usando unha cámara lúdica de tubo de debuxo unida a un microscopio Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Alemaña): NAc (núcleo (C) e shell (S); 400 × 600µm) analizados a tres niveis rostral-caudales (Balfour et al. 2004); área tegmental ventral (VTA; 1000 × 800µm) analizada a tres niveis rostral-caudalesBalfour et al. 2004) e cola VTA (Perrotti et al. 2005); córtex prefrontal (área cinglulate anterior (ACA); cortical prelímbico (PL); cortiza infralímbica (IL); 600 × 800µm cada un); putamen caudado (CP; 800 × 800µm); e núcleo preóptico medial (MPN; 400 × 600 µm) (Figuras complementarias 1 – 3). Contáronse dúas seccións por subregión e fixáronse unha media por animal para o cálculo da media do grupo. Comparáronse as medias de grupo sexuais e experimentadas de células BFosB-IR para cada subregión usando probas-t sen par.

Resumo da expresión BFosB en animais con experiencia sexual e inxenua

Análise de ΔFOSB e c-Fos

As imaxes foron capturadas mediante unha cámara CCD enfriada (Microfire, Optronics) conectada a un microscopio Leica (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Alemaña) e software Neurolucida (MicroBrightfield Inc) con axustes de cámara fixos para todos os suxeitos (usando obxectivos de 10x). Número de células que expresan c-Fos-IR ou ΔFosB-IR en áreas estándar de análise no núcleo NAc e shell (400 × 600µm cada; Figura complementaria 1) e ACA do mPFC (600 × 800µm; Figura complementaria 3) foron contados manualmente por un observador cegado aos grupos experimentais, en seccións 2 por animal utilizando o software Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) e promediado por animal. Comparáronse as medias de grupo de células c-Fos ou ΔFosB usando ANOVA de dous sentidos (Factores: experiencia sexual e actividade sexual) e Fisher LSD para comparacións post hoc a un nivel de significación de 0.05.

Experiencia 2: manipulación da expresión BFosB

Transferencia de xenes mediada por vector viral

As ratas Sprague Dawley de sexo masculino inxenuo sexual foron divididas aleatoriamente en grupos antes da cirurxía estereotáxica. Todos os animais recibiron microinjeccións bilaterais de vectores virales (rAAV) asociados á recombinación que codifican GFP (control; n = 12), ΔFosB de tipo salvaxe (n = 11) ou un compañeiro vinculante dominante de BFosB chamado DJunD (n = 9) no NAc. DJunD diminúe a transcrición mediada por ΔFosB por heterodimerización competitiva con ΔFosB antes de unir a rexión AP-1 dentro dos promotores do xene (Winstanley et al. 2007). O título de virus foi determinado por qPCR e foi avaliado in vivo antes do inicio do estudo. O título foi 1 – 2 × 10¹¹ partículas infecciosas por ml. Os vectores rAAV foron inxectados nun volume de 1.5 µL / lateral durante minutos 7 (coordenadas: AP + 1.5, ML +/− 1.2 de Bregma; DV −7.6 da superficie do cráneo segundo Paxinos e Watson, 1998) usando unha xeringa Hamilton (5µL ; Aparello de Harvard, Holliston, MA, EUA). Os vectores non producen toxicidade maior que as infusións de control só (Winstanley et al, 2007; para máis detalles sobre a preparación do AAV, consulte Hommel et al., 2003). Os experimentos de comportamento comezaron 3 semanas despois de inxeccións de vectores que permitían unha infección viral estable e óptima (Wallace et al. 2008). A expresión do transxénio nas especies murinas alcanza os días 10 e permanece elevada durante polo menos 6 meses (Winstanley et al. 2007). Ao final do experimento, os animais foron perfundidos transcarcadamente e as seccións de NAc foron procesadas por GFP (1: 20K; anticorpo de coello anti-GFP; Sondas moleculares) usando unha reacción de ABC-peroxidasa-DAB (como se describiu anteriormente). verifique os sitios de inxección usando GFP como marcadorFigura complementaria 4). Os vectores ΔFosB e ΔJunD tamén conteñen un segmento que expresa GFP separado por un sitio de entrada ribosómico interno, permitindo a verificación do sitio de inxección mediante a visualización de GFP en todos os animais. Na análise estatística só se incluíron animais con lugares de inxección e propagación do virus restrinxido ao NAc. A propagación do virus limitouse generalmente a unha porción do NAc e non se estendeu rostral-caudalmente por todo o núcleo. Ademais, a propagación do virus aparecía restrinxida á maioría de shell ou núcleo. Non obstante, a variación dos sitios de inxección e a propagación dentro do NAc non influíron nos efectos sobre o comportamento. Finalmente, as inxeccións de GFP non afectaron o comportamento sexual nin a facilitación de comportamento sexual inducida por experiencias en comparación con animais non cirúrxicos de estudos anteriores (Balfour et al. 2004).

Comportamento sexual

Tres semanas despois da entrega de vectores virais, os animais uníronse a unha eyaculación (ou a 1 hora) para as sesións de apareamiento diarias de 4 para obter experiencia sexual (sesións de experiencia) e foron probadas posteriormente para expresar a longo prazo a experiencia facilitada por comportamento sexual 1 e 2 semanas (sesións de proba 1 e 2) despois da sesión de experiencia final. Os parámetros de comportamento sexual rexistráronse durante todas as sesións de apareamiento como se describiu anteriormente. Comparáronse diferenzas estatísticas para todos os parámetros durante cada sesión de apareamiento dentro e entre grupos mediante ANOVAs de medidas repetidas de dous sentidos (Factores: tratamento e sesión de apareamento) ou ANOVA de sentido único (latencia de ejaculação, número de monturas e intromisións; sesión) seguido das probas Fisher LSD ou Newman-Keuls para comparacións post hoc a un nivel de significación de 0.05. En concreto, os efectos facilitadores da experiencia sexual nos parámetros de apareamiento foron comparados entre as sesións de experiencia 1 (inxenua) e as experiencias 2, 3 ou 4 cada un, así como entre grupos experimentais dentro de cada sesión de experiencia. Ademais, para analizar os efectos do tratamento (vector) na facilitación a longo prazo do comportamento sexual, comparáronse os parámetros de experiencia entre a sesión de experiencia 4 ea sesión de proba 1 e 2 dentro de cada grupo de tratamento e comparáronse entre grupos experimentais dentro de cada sesión de proba.

RESULTADOS

A experiencia sexual provoca unha acumulación de FOSB

Inicialmente, realizouse unha investigación semi-cuantitativa da acumulación de BFosB en todo o cerebro en machos con experiencia sexual en comparación cos controis sexuais. Un resumo das conclusións xerais preséntase en Táboa 1. A análise de -FosB-IR foi reforzado determinando o número de células BFosB-IR en varias rexións cerebrais asociadas ao límbico usando áreas estándar de análise. figura 1 demostra imaxes representativas de DAB-Ni tinción do NAc de animais sexuais e experimentados. Atopouse unha elevada regulación de BFosB en subregións mPFC (Imaxe 2A), Núcleo e shell NAc (2B), putamen caudado (2B) e VTA (2C). En NAc, existían diferenzas significativas en todos os niveis rostraludales no núcleo de NAc e na shell, e os datos mostrados en figura 2 é a media en todos os niveis rostro-caudais. En contraste, non houbo un aumento significativo de ΔFosB-IR no núcleo preóptico medial hipotalámico (NNS: Av. 1.8 +/− 0.26; ENS: Avg 6.0 +/− 1.86).

Imaxes representativas que mostran células BFosB-IR (negras) no NAc de inxenuidade sen sexo (A) e non experimentan grupos de sexo (B). aco: a comissura anterior A barra de escala indica 100 µm.

Número de células BFosB-IR en: A. subregións de cortical cofreiro anterior (AC), prelíbico (PL) e cingulado anterior (PLA) da cortiza prefrontal media; B. Nucleus accumbens core and shell e caudate putamen (CP); C. Rostral, medio, caudal e cola ...

A experiencia sexual atenúa a c-Fos inducida polo apareamiento

O efecto da experiencia sexual nos niveis de BFosB no NAc confirmouse mediante técnicas de tinción de fluorescencia. Ademais, analizáronse os efectos da experiencia sexual na expresión de c-Fos. figura 3 demostra imaxes representativas das células BFosB- (verde) e c-Fos (vermello) en todos os grupos experimentais (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES). A experiencia sexual aumentou significativamente a expresión BFosB no núcleo de NAcImaxe 4A: F_1,15 = 12.0; p = 0.003) e shell (Imaxe 4C: F_1,15 = 9.3; p = 0.008). Pola contra, a procreación de horas 1 antes da perfusión, non tivo un efecto na expresión ΔFosB (Figura 4A, C) e non se detectou ningunha interacción entre a experiencia sexual e a procreación antes da perfusión. Houbo un efecto global de apareamiento antes da perfusión na expresión de c-Fos en ambos o núcleo de NAc (Imaxe 4B: F_1,15 = 27.4; p <0.001) e shell (Figura 4D: F_1,15 = 39.4; p <0.001). Ademais, detectouse un efecto global da experiencia sexual no núcleo de NAc (Imaxe 4B: F_1,15 = 6.1; p = 0.026) e shell (Figura 4D: F_1,15 = 1.7; p = 0.211) e detectouse unha interacción entre a experiencia sexual e a procreación antes da perfusión no núcleo de NAc (F.)_1,15 = 6.5; p = 0.022), cunha tendencia no shell (F.)_1,15 = 1.7; p = 0.211; F_1,15 = 3.4; p = 0.084). As análises post hoc demostraron a expresión de c-Fos inducida polo apareamiento no núcleo e na cuncha de machos sexuais inxenuos (Figura 4B, D). Con todo, en machos con experiencia sexual, o c-Fos non aumentou significativamente no núcleo de NAc (Imaxe 4B) e significativamente atenuada na cuncha (Figura 4D). Deste xeito, a experiencia sexual causou unha redución da expresión c-Fos inducida polo apareamiento. Os valores P para comparacións específicas en pares están nas figuras de lendas.

Imaxes representativas mostrando ΔFosB (verde) e c-Fos (vermello) en NAc para cada grupo experimental. A barra de escala indica 100 µm.

ΔFosB e c-Fos inducidos por apareamiento de experiencias sexuais. Números de células inmune reactivas ΔFosB (Core, A; Shell, C; ACA, E) ou c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) para cada grupo: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) ou ES (n = 4). Exprésanse datos ...

O efecto da experiencia sexual nos niveis de c-Fos inducidos polo apareamiento non estaba restrinxido ao NAc. Na ACA observouse unha atenuación similar da expresión de c-Fos en animais con experiencia sexual en comparación cos controis sexuais. A experiencia sexual tivo un efecto significativo na expresión BFosB na ACA (Figura 4E: F_1,15 = 154.2; p <0.001). O apareamento antes da perfusión non tivo efecto na expresión de osFosB (Imaxe 4C) pero aumentou significativamente c-Fos (Figura 4F: F_1,15 = 203.4; p <0.001) no ACA. Ademais, a expresión de c-Fos inducida polo apareamento na ACA diminuíu significativamente pola experiencia sexual (Figura 4F: F_1,15 = 15.8; p = 0.001). Detectouse unha interacción bidireccional entre a experiencia sexual e a procreación antes da perfusión para a expresión c-Fos (Figura 4F: F_1,15 = 15.1; p <0.001). Os valores P para comparacións específicas por parellas están nas lendas da figura. Finalmente, non houbo unha redución significativa na expresión de c-Fos inducida polo apareamento no núcleo preóptico medial (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), un área onde a experiencia de apareamento non causou unha significativa aumento da expresión de osFosB, o que indica que a expresión de c-Fos inducida polo apareamento non se viu afectada en todas as áreas cerebrais.

ΔFosB no NAc media o reforzo do comportamento sexual

Para explorar un mecanismo molecular potencial para o reforzo do comportamento sexual, como demostrou a facilitación de comportamento sexual inducida por experiencias, determináronse os efectos da manipulación local dos niveis de BFosB e da súa actividade transcripcional. A experiencia sexual durante as catro sesións de experiencia consecutivas tivo un efecto significativo na latencia do soporteImaxe 5A: F_1,23 = 13.8; p = 0.001), latencia de intromisión (Imaxe 5B: F_1,23 = 18.1; p <0.001) e latencia da exaculación (Imaxe 5C: GFP, F_11,45 = 3.8; p = 0.006). Os animais de control de GFP mostraron a facilitación esperada de comportamento sexual inducida pola experiencia e mostraron latencias significativamente máis baixas para a primeira montaxe, a primeira intromisión e a exaculación durante a sesión de experiencia 4 en comparación coa experiencia de sesión 1 (Figura 5A – C; vexa a lenda da figura para os valores p). Esta facilitación de comportamento sexual inducida por experiencias tamén se observou no grupo osFosB para as latencias de montaxe e de intromisión, pero non se detectou unha diferenza significativa na latencia da exaculación (Figura 5A – C). En contraste, "Os animais de DDI mostraban unha facilitada atraso; aínda que as latencias para montaxes, intromisións e ejaculações diminuíron con sesións de apareamiento repetidas, ningún destes parámetros alcanzou importancia estatística cando se comparan entre as sesións de experiencia 1 e 4 (Figura 5A – C). Entre as comparacións entre grupos para cada sesión de experiencia móstranse que DJunD tiña latencias significativamente máis longas para montarse, intromitarse e ejacular durante as sesións de experiencia en comparación con ΔFosB e GFP (Figura 5A – C). Ademais, tanto a experiencia sexual como o tratamento tiveron efectos significativos na eficacia da cópulaFigura 5F: experiencia sexual, F_1,12 = 22.5; p <0.001; tratamento, F_1,12 = 3.3; p = 0.049). Os machos BFosB aumentaron a eficiencia da copulación durante a sesión de experiencia 4 comparada coa experiencia da sesión 1 (Figura 5F). Ademais, os animais de FosB tiveron moito menos monturas antes da ejaculação durante o día de sesión de experiencia 4, en comparación coa experiencia de sesión 1 (Figura 5D: F_10,43 = 4.1; p = 0.004), e que os machos DJD tiveron monturas significativamente máis grandes que a ejaculação, diminuíndo significativamente a eficacia da copulación, que calquera dos outros dous grupos (Figura 5D e F). Deste xeito, os animais de GFP e ΔFosB mostraron unha facilitación inducida pola experiencia de iniciar o comportamento sexual e o rendemento sexual, mentres que os didJD non o fixeron.

Comportamento sexual de animais de GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) e ΔJunD (n = 9): latencia de montaxe (A), latencia de intromisión (B), latencia de eyaculación (C), número de monturas (D), número de intromisións (E) e eficacia da copulación (F). Exprésanse datos ...

Para probar a hipótese de que a expresión FosB é fundamental para a expresión a longo prazo da facilitación inducida por experiencia no comportamento sexual, os animais foron probados a semana 1 (sesión de proba 1) e semanas 2 (sesión de proba 2) despois da sesión de experiencia final. De feito, o comportamento sexual facilitado mantívose nos grupos GFP e ΔFosB xa que ningún dos parámetros de comportamento difería entre as sesións de proba 1 ou 2 ea sesión de experiencia final 4, dentro dos grupos GFP e ΔFosB (Figura 5A – C; agás para a latencia da ejaculação e a eficacia da copulación na sesión de proba 1 para os animais BFosB). Detectáronse diferenzas significativas entre os grupos de animais xaponeses e os grupos GFP ou groupsFosB en ambas as sesións de proba para todos os parámetros de comportamento sexual (Figura 5A – F). Non se detectaron diferenzas entre e dentro dos grupos cando se comparan o número de intromisións, PEI ou porcentaxes de animais que ejacularon (% 100 de homes en todos os grupos ejaculados durante as catro últimas sesións de apareamiento).

Conversa

O estudo actual demostrou que a experiencia sexual provoca unha acumulación de BFosB en varias rexións cerebrais asociadas ao límbico, incluíndo o núcleo de NAc e a shell, mPFC, VTA e putamen caudado. Ademais, a experiencia sexual atenuou a expresión inducida por apareamiento de c-Fos no NAc e ACA. Finalmente, demostrouse que o inFosB no NAc era crítico na mediación da facilitación do apareamiento durante a adquisición da experiencia sexual e a expresión a longo prazo da facilitación inducida por experiencia no comportamento sexual. En concreto, reducindo a transcrición mediada por -FosB atenuou a facilitación da motivación e rendemento sexual inducida pola experiencia, mentres que a sobreexpresión de BFosB en o NAc provocou unha maior facilitación do comportamento sexual en termos de aumento do rendemento sexual con menos experiencia. Xuntos, os resultados actuais apoian a hipótese de que BFosB é un mediador molecular crítico para a plasticidade neuronal e comportamental conducida a longo prazo pola experiencia sexual.

Os achados actuais estenden estudos anteriores que amosan BFosB inducida por experiencias sexuais no NAc nos ratos machos (Wallace et al. 2008) e hámsters femininos (Hedges et al. 2009). Wallace et al. (2008) mostrou que rAAV-A sobreexpresión de BFosB no NAc mellorou o comportamento sexual en animais sexuais inxenuos durante a primeira sesión de apareamiento, como se evidencia por menos intromisións na eyaculación e intervalos post-eyaculatorios máis curtos, pero non tivo ningún efecto nos machos con experiencia sexual (Wallace et al. 2008).

En contraste, o estudo actual non demostrou efectos sobre a expresión excesiva de BFosB en machos sexuos durante a primeira proba, senón durante e despois da adquisición de experiencia sexual. Os excesos de expresores BFOSB demostraron un aumento do rendemento sexual (aumento da eficacia da copulación) en comparación cos animais de GFP.

Ademais, o estudo actual probou o papel de ΔFosB bloqueando a transcrición mediada por ΔFosB empregando un ingVector viral de expresión en Día. A prevención do aumento inducido por experiencias na expresión increaseFosB inhibiu a facilitación inducida pola experiencia de motivación sexual (aumento das latencias de montaxe e de intromisión) así como o desempeño sexual (aumento da latencia da exaculación e número de monturas) e posterior expresión a longo prazo de comportamento sexual facilitado.

Polo tanto, estes datos son os primeiros en indicar un papel obrigatorio para BFosB na adquisición de facilitación de comportamento sexual inducida por experiencias. Ademais, estes datos mostran que ΔFosB tamén está involucrado de forma crítica na expresión a longo prazo do comportamento facilitado por experiencias. Propoñemos que esta expresión a longo prazo do comportamento facilitado representa unha forma de memoria para a recompensa natural, polo que ΔFosB en NAc é un mediador da memoria recompensa. A experiencia sexual tamén aumentou os niveis de BFosB no VTA e mPFC, áreas implicadas na recompensa e na memoria (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Os estudos futuros están obrigados a dilucidar un significado potencial da elevada regulación de upFosB nestas áreas para a memoria recompensa.

A expresión BFosB é altamente estable, polo que ten un gran potencial como mediador molecular das adaptacións persistentes do cerebro logo de perturbacións crónicas (Nestlé et al. 2001). Demostrouse que BFosB aumenta gradualmente no NAc a través de múltiples inxeccións de cocaína e persiste ata varias semanas (Esperanza et al. 1992; Esperanza et al. 1994). Estes cambios na expresión NAc ΔFosB están asociados a sensibilización e adicción á recompensa de drogas (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestlé et al. 2001; Zachariou et al. 2006). En contraste, o papel de BFosB na mediación da recompensa natural foi subestimado. Xurdiron evidencias recentes que suxiren que a inducción de BFosB no NAc está implicada na recompensa natural. Os niveis de BFosB aumentan de xeito similar no NAc tras a inxestión de roda e de ingesta de sacarosa. O exceso de expresión de BFosB no estriado usando ratos bitransxénicos ou vectores virais en ratos causa un aumento na sacarosa. maior motivación para a alimentación e aumento da roda espontánea (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Os datos actuais contribúen substancialmente a estes informes e apoian aínda máis a idea de que BFosB é un mediador crítico para o reforzo de recompensas e a memoria de recompensa natural.

BFosB pode mediar o reforzo da conduta sexual inducido por experiencias mediante a inducción de plasticidade no sistema mesolímbico. De feito, a experiencia sexual provoca unha serie de cambios duradeiros no sistema mesolímbico (Bradley e Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; Jarra et al. 2010). ANo nivel de comportamento, mostrouse unha resposta locomotora sensibilizada á anfetamina e unha recompensa mellorada de anfetamina en ratas machos con experiencia sexual (Jarra et al. 2010); Tamén se observou unha resposta locomotora alterada á anfetamina con hámsters femininosBradley e Meisel 2001). Ademais, atopáronse aumentos no número de espiñas dendríticas e na complexidade dos arbóreos dendríticos despois dun período de abstinencia da experiencia sexual en ratos machos (Jarra et al. 2010). O estudo actual suxire que BFosB pode ser un mediador molecular específico dos resultados a longo prazo da experiencia sexual. De acordo, demostrouse que ΔFosB é importante para inducir cambios dendríticos da columna vertebral en resposta á administración crónica de cocaína (Dietz et al. 2009; Labirinto et al. 2010).

Non está claro que o (s) neurotransmisor (s) ascendente sexa responsable de inducir ΔFosB no NAc, pero propúxose DA como candidato (Non et al. 1995). Practicamente todas as drogas de abuso, incluíndo cocaína, anfetamina, opiáceos, cannabinoides e etanol, así como recompensas naturais, aumentan ΔFosB no NAc (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Ambas drogas de abuso e recompensas naturais aumentan a concentración sináptica de DA no NAc (Damsma et al. 1992; Hernández e Hoebel 1988a, b; Jenkins e Becker 2003). A indución de BFosB por drogas de abuso mostrouse nas células que conteñen o receptor DA e receptorFosB inducido pola cocaína está bloqueado por un antagonista do receptor D1 DAt (Non et al. 1995). Deste xeito, a hipótese da liberación DA estimula a expresión andFosB e, así, media a neuroplasticidade relacionada coa recompensa. Apoiar aínda máis a idea de que os niveis de BFosB dependen da DA é o descubrimento de que as áreas do cerebro onde a experiencia sexual alterou os niveis de levelsFosB reciben forte entrada dopaminérxica da VTA, incluíndo o córtex mediano prefrontal e a amígdala basolateral.

Non obstante, en contraste, ΔFosB non aumenta na área preoptica medial aínda que esta área recibe a entrada dopaminérxica, aínda que sexa a partir de fontes hipotálamas (Miller & Lonstein 2009). Os estudos futuros son necesarios para probar se a expresión osFosB inducida polo apareamiento e os efectos da experiencia sexual na motivación e rendemento sexual dependen da acción DA. O papel da DA na recompensa sexual en ratas macho actualmente non está completamente claro (Agmo e Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Hai amplas evidencias de que a DA é liberada no NAc durante a exposición a unha femia ou apareamientoDamsma et al. 1992) e as neuronas DA actívanse durante o comportamento sexual (Balfour et al. 2004). Non obstante, as inxeccións sistémicas de antagonistas do receptor DA non prevén a preferencia do lugar condicionado por recompensa sexual (Agmo e Berenfeld 1990) e a hipótese de que o DA é crítico para o reforzo do apareamiento inducido por experiencias non é probado.

Tampouco está claro cales son os mediadores de baixada dos efectos de onFosB sobre o comportamento sexual. Demostrouse que ΔFosB actúa como un activador e un represor transcricional a través dun mecanismo dependente de AP-1 (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Identificáronse numerosos xenes diana, incluíndo o xene precoz inmediato c-fos (Esperanza et al. 1992; Esperanza et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dinastia (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), Subunidades NFκB (Ang et al. 2001), Ee a subunidade do receptor GluR2 do glutamato AMPA (Kelz et al. 1999). Os resultados actuais demostran que os niveis de c-Fos inducidos polo apareamiento reducíronse por experiencia sexual en áreas cerebrais cun aumento de BFosB (NAc e ACA). A supresión de c-Fos aparece dependente do período desde a última procreación e as sesións de apareamiento repetidas, como en estudos anteriores, non se detectou tal diminución de c-Fos en ratas macho probadas 1 unha semana despois da sesión de apareamiento final (Balfour et al. 2004) ou despois dunha experiencia sexual que consiste só nunha única sesión de apareamiento (López e Ettenberg 2002). Ademais, o achado actual é consistente coa evidencia de que ΔFosB reprime o xene c-fos tras a exposición crónica á anfetamina (Renthal et al. 2008). En consonancia con estes resultados, a indución de varios xenes do ARNm cedo-inmediato (c-fos, fosB, c-jun, junB, e zif268) reduciuse tras inxeccións repetidas de cocaína en comparación coas inxeccións de drogas agudas (Esperanza et al. 1992; Esperanza et al. 1994), e c-fos inducido por anfetamina foi suprimido tras a retirada da administración crónica de anfetaminas (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). A relevancia funcional da baixa regulación da expresión c-Fos tras o tratamento crónico ou a experiencia sexual aínda non está clara, e suxeriuse que é un importante mecanismo homeostático para regular a sensibilidade dun animal á exposición de recompensas repetidas (Renthal et al. 2008).

En conclusión, o estudo actual demostra que ΔFosB no NAc xoga un papel integral na memoria da recompensa sexual, apoiando a posibilidade de que osFosB sexa importante para o reforzo e memoria de recompensa xeral. Os resultados do estudo actual dilucidan aínda máis a nosa comprensión dos mecanismos celulares e moleculares que median a recompensa e motivación sexual e engaden a un conxunto de literatura que demostra que BFosB é un xogador importante no desenvolvemento da adicción. reforzo.

Material complementario

Supoño Fig S1-S4 e táboa S1-S2

Fai clic aquí para ver.^{(167K, pdf)}

Grazas

Esta investigación foi apoiada por subvencións dos Institutos de Investigación Sanitaria do Canadá para o LMC, o Instituto Nacional de Saúde Mental de EJN e o Consello de Investigación de Ciencias Naturais e de Enxeñaría de Canadá a KKP e LMC.

Referencias

Agmo A. comportamento sexual masculino de ratos. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
Agmo A, Berenfeld R. Propiedades de reforzo da exaculación na rata masculina: papel dos opioides e da dopamina. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
Ang E, Chen J, P Zagouras, Magna H, Holanda J, E Schaeffer, EJ Nestler. Indución do factor nuclear kappaB no núcleo accumbens por administración crónica de cocaína. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
Balfour ME, Yu L, Coolen LM. O comportamento sexual e as indicacións ambientais asociadas ao sexo activan o sistema mesolímbico nas ratas macho. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
Os Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Os efectos da exposición crónica á cocaína son regulados pola proteína neuronal Cdk5. Natureza. 2001;410: 376-380. [PubMed]
Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. As lesións de 6-Hydroxydopamine en hámsters femininas (Mesocricetus auratus) abolen os efectos sensibilizados da experiencia sexual en interaccións copuladoras cos machos. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
Bradley KC, Meisel RL. A indución de comportamento sexual de c-Fos no núcleo accumbens e na actividade locomotora estimulada por anfetamina é sensibilizada pola experiencia sexual previa en hámsteres sirias femininas. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Mecanismos dependentes e independentes do proteasoma para a desestabilización de FosB: identificación de dominios de degron FosB e implicacións para a estabilidade de DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
Chao J, Nestler EJ. Neurobioloxía molecular da adicción ás drogas. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulación de proteínas tipo FosB e FosB mediante tratamentos electroconvulsivos e tratamento de cocaína. Farmacoloxía molecular. 1995;48: 880-889. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. A sobreexpresión específica do tipo de célula estriatal en DeltaFosB aumenta o incentivo para a cocaína. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Regulación central da eyaculación. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. O comportamento sexual aumenta a transmisión de dopamina no núcleo accumbens e no estriado das ratas macho: comparación coa novidade e a locomoción. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
Dietz DM, Maze I, Mecánico M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. O papel esencial para o BFosB na regulación da cocaína das espinas dendríticas do núcleo accumbens ás neuronas. Resumo da Sociedade para a Neurociencia. 2009
Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Mesturar os praceres: repaso dos efectos das drogas no comportamento sexual nos humanos e nos modelos animais. Horm Behav. 2009 En prensa.
Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. A sobreexpresión de Delta FosB no núcleo accumbens aumenta a recompensa sexual en hámsteres mulleres sirias. Genes Brain Behav. 2009;8: 442-449. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Hernández L, Hoebel BG. A alimentación ea estimulación hipotalámica aumentan o volume de negocio da dopamina nos accumbens. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
Hernández L, Hoebel BG. A recompensa de alimentos ea cocaína aumentan a dopamina extracelular no núcleo accumbens medida por microdiálisis. Vida Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Papel esencial do xene fosB en accións moleculares, celulares e de comportamento das crises electroconvulsivas crónicas. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Caída de xenes locais no cerebro mediante interferencia de ARN mediada por virus. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulación da expresión xenética inmediata e da unión AP-1 no núcleo de rato accumbens por cocaína crónica. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, MJ Iadarola, Nakabeppu Y, Duman RS, EJ Nestler. Indución dun complexo AP-1 de longa duración composto de proteínas similares a Fos no cerebro por cocaína crónica e outros tratamentos crónicos. Neurona. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
Casco EM, Meisel RL, Sachs BD. Comportamento sexual masculino. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Os tratamentos de anfetaminas agudas e crónicas regulan de forma diferente os niveis de ARN mensaxeiro de neuropéptido e a inmunorreactividade de Fos nas neuronas estratéxicas de ratos. Neurociencia. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
Jenkins WJ, Becker JB. Os aumentos dinámicos de dopamina durante a cópula do ritmo na femia. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, WA Carlezon, Jr, K Whisler, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, DW Self, Tkatch T, G Baranauskas, DJ Surmeier, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. A expresión do factor de transcrición deltaFosB no cerebro controla a sensibilidade á cocaína. Natureza. 1999;401: 272-276. [PubMed]
López HH, Ettenberg A. A exposición a ratas femininas produce diferenzas na indución de c-fos entre ratas macho inxenuo e experimentado. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mecánico M, Mouzon E, Neve RL, SJ Haggarty, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Papel esencial da histona metiltransferase G9a na plasticidade inducida pola cocaína. Ciencia. 2010;327: 213-216. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Regulación da expresión xénica e recompensa por cocaína por CREB e DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: un interruptor molecular para adaptación a longo prazo no cerebro. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
Miller SM, Lonstein JS. Proxeccións dopaminérxicas á área preoptica media de ratas posparto. Neurociencia. 2009;159: 1384-1396. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Morgan JI, Curran T. Acoplamento de estímulos-transcrición en neuronas: papel dos xenes inmediato celular. Tendencias Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
Nestler EJ. Mecanismos moleculares da adicción ás drogas. Neurofarmacoloxía. 2004;47 Suppl 1: 24 – 32. [PubMed]
Nestler EJ. A neurobioloxía da adicción á cocaína. Sci Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Nestler EJ. Repaso. Mecanismos de transcrición da adicción: papel de DeltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: un interruptor molecular sostido para a dependencia. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Estudos farmacolóxicos sobre a regulación da indución crónica de antíxeno relacionada coa FOS por cocaína no estriado e no núcleo accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB no núcleo accumbens regula o comportamento e motivación instrumental reforzado por alimentos. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ Schaeffer E. Inducible, a expresión específica da rexión cerebral dun mutante negativo dominante de c-Jun en ratones transxénicos diminúe a sensibilidade á cocaína. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB acumúlase nunha poboación de células GABAérxicas na cola posterior da área ventral tegmental despois do tratamento psicostimulante. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indución de deltaFosB en estruturas cerebrais relacionadas coa recompensa tras o estrés crónico. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distintos patróns de indución DeltaFosB no cerebro por drogas de abuso. Sinapsis. 2008;62: 358-369. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Pfaus JG. Camiños do desexo sexual. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condicionado e comportamento sexual: unha revisión. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Unha perspectiva de arriba abaixo sobre dopamina, motivación e memoria. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticidade no sistema mesolímbico inducida por recompensa natural e recompensa posterior pola abstinencia. Biol Psychiatry. 2010;67: 872-879. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB media a desensibilización epigenética do xene c-fos tras a exposición crónica á anfetamina. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. A análise de xenoma da regulación da cromatina por cocaína revela un papel para as sirtuínas. Neurona. 2009;62: 335-348. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, jarra KK, Coolen LM. Recompensa sexual en ratas macho: efectos da experiencia sexual en preferencias de lugares condicionados asociados á exaculación e intromisións. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. A fosforilación de DeltaFosB media a súa estabilidade in vivo. Neurociencia. 2008
Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulación da estabilidade DeltaFosB por fosforilación. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
Wallace DL, Vialou V, Ríos L, Carle-Florencia TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, TA verde, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. A influencia de DeltaFosB no núcleo é o comportamento relacionado coa recompensa natural. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB regula o funcionamento da roda. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachkell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. A inducción de DeltaFosB na cortiza orbitofrontal media a tolerancia á disfunción cognitiva inducida pola cocaína. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Un papel esencial para DeltaFosB no núcleo accumbens na acción da morfina. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos facilita a adquisición e extinción de cambios persistentes inducidas pola cocaína. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]