A metanfetamina actúa nas subpoboacións das neuronas que regulan o comportamento sexual en ratas machos (2010)

Neurociencia. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Xan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, RA sabio, Lehman MN, Coolen LM.

fonte

Departamento de Anatomía e Bioloxía Celular, Escola de Medicina e Odontoloxía de Schulich, Universidade de Western Ontario, Londres, ON, Canadá, N6A 5C1.

Abstracto

A metanfetamina (Meth) é un estimulante altamente adictivo. O abuso de metas adoita asociarse coa práctica do comportamento de risco sexual e o aumento da prevalencia de virus e métodos de virus da inmunodeficiencia humana reportan un maior desexo sexual, excitación e pracer sexual. A base biolóxica deste nexo entre drogas e sexos é descoñecida. O estudo actual demostra que a administración Meth en ratas macho activa neuronas nas rexións cerebrais do sistema mesolímbico que están implicadas na regulación do comportamento sexual. Específicamente, as células de co-activación de metas e núcleos no núcleo accumbens o núcleo e a cuncha, a amígdala basolateral e a cortiza cingulada anterior. Estes descubrimentos ilustran que, a diferenza das crenzas actuais, as drogas de abuso poden activar as mesmas células como un reforzador natural, é dicir, o comportamento sexual, e á súa vez poden influír na procura compulsiva desta recompensa natural.

Palabras clave: núcleo accumbens, amígdala basolateral, córtex prefrontal, abuso de substancias, reprodución, adicción

A motivación e recompensa están reguladas polo sistema mesolímbico, unha rede interconectada das áreas cerebrais composta polo núcleo accumbens (NAc) da área ventral tegmental (VTA), amígdala basolateral e córtex prefrontal medial (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas e Volkow, 2005). Hai abundantes evidencias de que o sistema mesolímbico está activado en resposta a ambas as substancias de abuso (Di Chiara e Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) e comportamentos naturalmente gratificantes como o comportamento sexual (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). O comportamento sexual masculino, e en particular a exaculación, é moi gratificante e reforzante nos modelos animais (Pfaus et al., 2001). Os roedores machos desenvolven a preferencia dun lugar condicionado (CPP) para a copulación (Agmo e Berenfeld, 1990, Martínez e Paredes, 2001, Tenk, 2008), e realizará tarefas operantes para acceder a unha femia receptiva sexualEveritt et al., 1987, Everitt e Stacey, 1987). As drogas de abuso tamén son gratificantes e reforzantes, e os animais aprenderán a autoadministrarse as sustancias do abuso, incluídos os opiáceos, a nicotina, o alcohol e os psicoestimulantes (Sabio, 1996, Pierce e Kumaresan, 2006, Feltenstein e See, 2008). Aínda que se sabe que ambas drogas de abuso e comportamento sexual activan áreas cerebrais mesolímbicas, actualmente non está claro si as drogas de abuso inflúen nas mesmas neuronas que median o comportamento sexual.

Os estudos electrofisiolóxicos demostraron que os alimentos e a cocaína activan neuronas no NAc. Non obstante, os dous reforzadores non activan as mesmas células dentro do NAc (Carelli et al., 2000, Carelli e Wondolowski, 2003). Ademais, a autoadministración de alimentos e sacarosa non causa alteracións a longo prazo das propiedades electrofisiolóxicas que son inducidas pola cocaína (Chen et al., 2008). En contraste, unha colección de evidencias suxire que o comportamento sexual masculino e as drogas de abuso poden realmente actuar nas mesmas neuronas mesolímbicas. Os psicoestimulantes e os opioides alteran a expresión do comportamento sexual en ratas macho (Mitchell e Stewart, 1990, Fiorino e Phillips, 1999a, Fiorino e Phillips, 1999b). Os datos recentes do noso laboratorio mostraron que a experiencia sexual modifica a capacidade de resposta aos psicoestimulantes, como evidencia unha resposta locomotora sensibilizada e unha percepción sensibilizada sobre a d-anfetamina en animais con experiencia sexual (Pitchers et al., 2009). Anteriormente observouse unha resposta similar coa exposición repetida á anfetamina ou a outras drogas de abuso (Lett, 1989, Shippenberg e Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren e Kalivas, 2000). Xuntos, estes resultados suxiren que o comportamento e as respostas sexuais ás drogas de abuso están mediadas polas mesmas neuronas do sistema mesolímbico. Polo tanto, o primeiro obxectivo do presente estudo é investigar a activación neural do sistema mesolímbico por comportamento sexual e administración de fármacos no mesmo animal. En particular, probamos a hipótese de que o psicoestimulante, a metanfetamina (Meth), actúa directamente nas neuronas que normalmente median o comportamento sexual.

Meth é unha das drogas ilícitas máis maltratadas no mundo (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) Ae foi frecuentemente ligado a un comportamento sexual alterado. Curiosamente, os usuarios de Meth informan un maior desexo sexual e unha excitación sexual, así como un pracer sexual mellorado (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). Ademais, O abuso de metas adoita asociarse a un comportamento sexual compulsivo (Rawson et al., 2002). Os usuarios a miúdo denuncian ter numerosas parellas sexuais e teñen menos probabilidade de usar protección que outros consumidores de drogas (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Desafortunadamente, os estudos que indican o uso de met como predictor de comportamento de risco sexual son limitados xa que dependen de autoinformes non confirmados.Elifson et al., 2006). Polo tanto, é necesaria unha investigación sobre a base celular de cambios inducidos por metidos no comportamento sexual nun modelo animal para comprender este complexo nexo entre drogas e sexos.

Tendo en conta as evidencias descritas anteriormente, o que suxire que as drogas de abuso e, en particular, Meth, poden actuar sobre neuronas normalmente implicadas na mediación do comportamento sexual, o obxectivo do presente estudo foi investigar a activación neuronal por comportamento sexual e administración do método psicostimulante. Este estudo implementou unha técnica neuroanatómica, utilizando a visualización inmunohistoquímica dos xenes tempranos inmediatos Fos e a fosforilada Map Kinase (pERK) para detectar a activación neuronal concorrente por comportamento sexual e Meth respectivamente. Fos só se expresa no núcleo das células, cun nivel máximo de expresión 30-90 minutos despois da activación da neurona. Hai amplas evidencias de que a actividade sexual induce a expresión de Fos no cerebro (Pfaus e Heeb, 1997, Veen and Coolen, 1998), incluído o sistema mesocorticolímbico (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). Hai tamén evidencias de que as drogas de abuso inducen a expresión de PERK no sistema mesocorticolímbico (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). En contraste coa expresión de Fos, a fosforilación de ERK é un proceso altamente dinámico e só ocorre 5-20 minutos despois da activación neuronal. Os distintos perfís temporais de Fos e PERK convértenos nun conxunto ideal de marcadores para a posterior activación neuronal por dous estímulos diferentes.

PROCEDEMENTOS EXPERIMENTAIS

Temas

As ratas Sprague Dawley do macho adulto (210-225 g) obtidas dos Laboratorios Charles River (Montreal, QC, Canadá) aloxáronse dúas por gaiola en gaiolas de plexiglás estándar (gaiolas domésticas). O cuarto dos animais mantívose nun ciclo de luz inversa 12 / 12 h (apagouse en 10.00 h). Existían alimentos e auga ad libitum. Todas as probas realizáronse durante a primeira metade da fase escura baixo unha iluminación vermella escura. As femias de estímulo usadas para o comportamento sexual foron ovariantomizadas de forma bilateral baixo anestesia profunda (13 mg / kg de ketamina e 87 mg / kg xilazina) e recibiron un implante subcutáneo que contén 5% benzoato de estradiol (EB) e 95% de colesterol. A receptividade sexual foi inducida por administración subcutánea (sc) de 500 μg de progesterona en 0.1 ml de aceite de sésamo 4 h antes do ensaio. Todos os procedementos foron aprobados polo comité de coidados con animais da Universidade de Western Ontario e están de acordo coas directrices descritas polo Consello canadense de coidados con animais.

Deseños experimentais

Experimentos 1 e 2: As ratas macho (n = 37) permitíanse agrupar cunha femia receptiva a unha eyaculación (E) ou a 30 min, que xamais chegou primeiro en gaiolas de proba limpas (60 × 45 × 50 cm) durante cinco veces - Sesións de apareamiento pre-semanais para gañar experiencia sexual. Durante as dúas últimas sesións, rexistráronse todos os parámetros estándar para o rendemento sexual, incluíndo: latencia de montaxe (ML; tempo desde a introdución da femia ata a primeira montaxe), latencia de intromisión (IL; tempo desde a introdución da femia ata a primeira montaxe con penetración vaxinal), latencia de ejaculação (EL, tempo desde a primeira intromisión á ejaculação), intervalo de post ejaculación (PEI; tempo da exaculación á primeira intromisión posterior), número de monturas (M) e número de intromisións (IM) (Agmo, 1997). Todos os machos recibiron 1 ml / kg de inxección diaria de 0.9% NaCl (solución salina; sc) 3 días consecutivos antes do día da proba, para habituación a manipulación e inxeccións. Un día antes do día da proba, todos os homes eran solteiros. Nos machos experimentados, Fos pode ser inducido por sinais contextuais condicionados asociados á experiencia sexual previa (Balfour et al, 2004). Polo tanto, todas as manipulacións de apareamiento e control durante as probas finais leváronse a cabo na gaiola doméstica (evitando pistas condicionadas por predicción) para evitar a activación inducida por indicadores condicionados nos machos control non asociados. Os machos foron distribuídos en oito grupos experimentais que non difiren en ningunha medida de rendemento sexual durante as dúas últimas sesións de apareamiento (datos non mostrados). Durante a proba final, os machos foron autorizados a aparearse na súa gaiola ata que presentaron unha exaculación (sexo) ou non recibiron parella (sen sexo). Todos os machos aparecidos foron perfundidos minutos 60 despois do inicio do apareamiento para permitir a análise da expresión de Fos inducida por apareamiento. Os machos recibiron unha inxección de 4 mg / kg Meth ou 1 ml / kg de solución salina (sc) (n = 4 cada), 10 (experimento 1) ou 15 (experimento 2) min antes da perfusión, para a análise da fosforilación inducida por fármacos de MAP quinase. A dose e o tempo antes da perfusión baseáronse en informes anteriores (Choe et al., 2002, Choe e Wang, 2002, Chen e Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Os grupos de control incluían machos que non se apareaban, pero recibiron o método 10 (n = 7) ou 15 (n = 5) antes do sacrificio ou inxeccións de solución salina 10 (n = 5) ou 15 (n = 4) antes do sacrificio . Despois do sacrificio, os cerebros foron procesados ​​para a inmunohistoquímica.

Experimento 3: Como se empregou unha dose alta de Meth no experimento 1 e 2, realizouse un experimento neuroanatómico adicional para investigar se o comportamento sexual e unha dose máis baixa de Meth inducen patróns dependentes da dose de activación neural superpuesta. Este estudo levouse a cabo do mesmo xeito que os experimentos 1 e 2. Non obstante, na proba final, os grupos asociados e non asociados (n = 6 cada un) recibiron 1 mg / kg Meth (sc) 15 min antes do sacrificio.

Experimento 4: Para probar se a activación neural causada polo sexo e Meth é específica de Meth, este experimento investigou se patróns similares de activación neural superpuestos puideron ser vistos co psostimulante d-anfetamina (Amph). Este experimento levouse a cabo dun xeito idéntico aos experimentos 1 e 2. Non obstante, na proba final, administráronse machos Amph (5 mg / kg) ou solución salina (1 mg / kg) (sc) 15 min antes do sacrificio (n = 5 cada). Os machos controlados non recibiron salina ou Amph 15 minutos antes do sacrificio. Un resumo dos grupos experimentais utilizados nos experimentos 1 – 4 está indicado en Táboa 1.

Táboa 1      

Descrición xeral dos grupos experimentais incluídos nos experimentos 1 – 4.

Preparación de tecidos

Os animais foron anestesiados con pentobarbital (270 mg / kg; ip) e perfundidos transcardialmente con 5 ml de solución salina seguido de 500 ml 4% paraformaldehído en tampón fosfato 0.1 M (PB). Os cerebros retiráronse e fixáronse por 1 h a temperatura ambiente no mesmo fixador, logo inmersos en 20% sacarosa e 0.01% Azida sódica en 0.1 M PB e almacenados a 4 ° C. As seccións coronais (35 μm) cortáronse nun microtomo de conxelación (H400R, Micron, Alemania), recollidos en catro series paralelas en solución crioprotector (sacarosa 30% e glicol de etileno 30% en 0.1 M PB) e almacenadas a 20 ° C ata máis procesamento.

Inmunohistoquímica

Todas as incubacións realizáronse a temperatura ambiente con agitación suave. As seccións flotantes libres laváronse extensivamente con solución salina tamponada con fosfato 0.1 M (PBS) entre incubacións. As seccións foron incubadas en 1% H2O2 para 10 min, entón bloqueado en solución de incubación (PBS que contén albumina de soro bovino 0.1% e 0.4% Triton X-100) para 1 h.

PERK / Fos

O tecido foi incubado durante a noite cun anticorpo policlonal de coello contra as pinas de p42 e p44 ERK1 e ERK2 (pERK; 1: experimento 400 1; 19: experimento 1 e 4.000 2; Cat Signaling Cat # 3;), seguido por 21 h incubacións con burro biotinilado anti-coello IgG (9101: 1; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) e complexo avidin-peroxidasa de rábano (ABC Elite; 1: 500; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Entón, o tecido foi incubado para min 1 con tyramida biotinilada (BT; 1000: 10 en PBS + 1% H2O2; Kit de amplificación de sinais de Tyramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) e para 30 min con estrepavidina Alexa 488 conxugada (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). A continuación, incubouse o tecido durante a noite cun anticorpo policlonal de coello contra c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), seguido por unha incubación de min 30 con Alexa 555 anti-coello de cabra (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Despois da tinguidura, as seccións foron lavadas a fondo en 0.1 M PB, montadas en diapositivas de vidro con 0.3% de gelatina en ddH20 e cuberto cun medio acuoso de montaxe (Gelvatol) que contén axente anti-esvaecido 1,4-diazabiciclo (2,2) octano (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Os controis inmunohistoquímicos incluían a omisión dun ou dous anticorpos primarios, o que resultou na ausencia de etiquetaxe na lonxitude de onda adecuada.

Análise de Datos

Comportamento sexual

Para os catro experimentos, os parámetros estándar para o desempeño sexual rexistráronse como se describiu anteriormente e analizáronse mediante a análise da varianza (ANOVA). A análise dos datos sobre o comportamento sexual durante o día final da proba non revelou diferenzas significativas entre os grupos en ningún dos parámetros do rendemento sexual.

PERK / Fos Cell Counts

Contáronse células etiquetadas dobre e dobre para Fos e PERK nos niveis caudais do núcleo de NAc e subregiones de cunchas, amígdala basolateral (BLA), amígdala medial posterodorsal (MEApd), amígdala central (CeA), núcleo preoptico medial (MPN), posteromedial e núcleo da cama posterolateral da estría terminal (BNSTpm e BNSTpl), e as subregións da área cingulada anterior (ACA), prelimbic (PL) e infralimbic (IL) do mPFC. As imaxes foron capturadas mediante unha cámara CCD enfriada (Microfire, Optronics) conectada a un microscopio Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Alemaña) e software Neurolucida (MicroBrightfield Inc) con axustes de cámara fixos para todos os suxeitos (usando obxectivos de 10x). Usando o software neurolucida, as áreas de análise foron definidas a partir de marcos (Swanson, 1998) único para cada rexión cerebral (ver figura 1). As áreas estándar de análise empregáronse en todas as áreas excepto o núcleo de NAc e shell. Nas últimas áreas, a expresión pERK e Fos non era homoxénea e aparecía en patróns parches. Polo tanto, o núcleo e a cuncha enteiros foron esbozados en base a puntos de referencia (ventrículo lateral, comisión anterior e illas de Calleja). As áreas de análise non varían entre os grupos experimentais e foron 1.3 mm2 no núcleo NAc e shell. As áreas de análise estándar para as áreas restantes foron: 1.6 mm2 no BLA, 2.5 e 2.25 mm2 no MEApd e CeA respectivamente, 1.0 mm2 no MPN, 1.25 mm2 nas subregións BNST e mPFC e 3.15 mm2 no VTA. Contáronse dúas seccións bilateralmente para cada rexión cerebral por animal, e calculáronse o número de células marcadas simples e dobres para pERK e Fos, así como as porcentaxes de células pERK que expresaron o marcador de Fos. Para os experimentos 1, 2 e 4, comparáronse as medias de grupo mediante ANOVA de dous sentidos (factores: apareamiento e medicamento) e LSD de Fisher para post hoc comparacións a un nivel de significación de 0.05. Para o experimento 3, comparáronse as medias de grupo mediante probas de t de pareado a un nivel de significación de 0.05.

figura 1      

Debuxos e imaxes esquemáticas que ilustran as áreas de análise do cerebro. As áreas de análise indicadas estaban baseadas en puntos de referencia únicos para cada rexión cerebral, non diferían entre grupos experimentais e eran 1.25 mm.2 en subregións mPFC (a), 1.3 mm2 no ...

imaxes

Imaxes dixitais para figura 3 foron capturados usando a cámara CCD (DFC 340FX, Leica) unida a un microscopio Leica (DM500B) e foron importados ao software Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, San Jose, CA). As imaxes non foron alteradas de ningún xeito excepto para o axuste do brillo.

figura 3      

Imaxes representativas das seccións NAc inmunodeñadas para Fos (vermello; a, d, g, j) e pERK (verde; b, e, h, k) dos animais de cada grupo experimental: Non sexo + Sal (a, b, c) Sexo + Sal (d, e, f), Non sexo + Meth (g, h, i) e Sexo + Meth (j, k, l). Os paneles dereita son ...

RESULTADOS

Activación neural do sistema límbico por administración de compostos e compostos sexuais

Experimento 1: Análise de células marcadas simples e dobres para Fos inducida por apareamiento e PERK inducida por metidos en machos que recibiron Meth 10 minutos antes do sacrificio revelaron Fos inducido por apareamiento no MPN, BNSTpm, núcleo NAc e shell, BLA, VTA, e todas as subregións de mPFC, consistentes cos estudos previos que demostraron a expresión de Fos inducida por apareamiento nestas áreas (Baum e Everitt, 1992, Pfaus e Heeb, 1997, Veen and Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Xestión de métodos 10 minutos antes de sacrificar pERK inducido no núcleo de NAc e shell, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl e rexións de mPFC, consistentes cos patróns de activación inducidos por outros psicoestimulantes (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Ademais, observáronse tres patróns de coexpresión da activación neural por comportamento sexual e primeiro: identificáronse áreas cerebrais onde o sexo e as drogas activaron poboacións neurais non superpuestas (Táboa 2). En concreto, no CeA, MEApd, BNSTpl e mPFC, aumentos significativos tanto en pERK inducido por drogas (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) como en Fos inducido por sexo (F (1,16, 16.53) = 158.83-0.001; p <1,16) observáronse. Non obstante, nestas rexións non houbo aumentos significativos nas neuronas marcadas dobre en machos tratados con metanfetamina. A única excepción foi a MEApd, onde se atopou un efecto de apareamento sobre o número de células con dobre etiquetaxe (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Non obstante, non houbo efecto global do tratamento farmacolóxico e a dobre etiquetaxe nos grupos tratados con metanfetamina non foi significativamente maior que nos grupos tratados con solución salina, polo que non foi causada pola droga (Táboa 2). En segundo lugar, identificáronse áreas cerebrais onde só se inducía a activación neural por apareamiento (Táboa 3). Especificamente, as MPN, BNSTpm e VTA activáronse só por apareamiento, e contiñan aumentos significativos na Fos inducida polo apareamiento (F (1,16) = 14.99-248.99; p ≤ 0.001), pero non hai PERK inducido por Meth.

Táboa 2      

Resumo da expresión de Fos e expresión inducida por aparición de PERK en áreas cerebrais onde o sexo e as drogas activan poboacións neurais non superpuestas.
Táboa 3      

Resumo da expresión de Fos e expresión inducida por pERK de Fos nos apareamiento en áreas do cerebro onde a activación neuronal só foi inducida por apareamiento.

Finalmente, atopáronse áreas do cerebro onde o sexo e as drogas activaban superposicións de poboacións de neuronas (figura 2 E3) .3). No núcleo e na carcasa de NAc, BLA e ACA, houbo efectos globais de apareamento (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) e tratamento farmacolóxico (F (1,16) = 6.39- 52.68; p = 0.022- <0.001), así como unha interacción entre estes dous factores (F (1,16) = 5.082-47.27; p = 0.04- <0.001; sen interacción significativa en ACA) en números de células que expresan ambos FOS inducido por apareamento e PERK inducido por metanfetamina. A análise post hoc revelou que o número de neuronas con dobre etiquetaxe foi significativamente maior en machos inxectados con metanfetamina aparellados en comparación con homes tratados con metanfetamina non aparellados (p = 0.027- <0.001) ou machos tratados con solución salina apareados (p = 0.001- <0.001) (figura 2 E3) .3). Cando os datos expresáronse como porcentaxes de neuronas activadas por fármacos, 39.2 ± 5.3% no núcleo NAc, 39.2 ± 5.8% no shell NAc, 40.9 ± 6.3% no BLA e 50.0 ± 5.3% das neuronas ACA foron activadas por ambos apareamiento e Meth.

figura 2      

Expresión de FER e de PERK inducida por Fos por sexo en neuronas NAc, BLA e ACA 10 min logo da administración de 4 mg / kg Meth. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) e células marcadas dobre (c, f, i, l) no núcleo NAc (a, ...

Unha observación inesperada foi que o comportamento sexual afectou o PERK inducido por metais. Aínda que Met induce significativamente os niveis de PERK en grupos pareados e non inxeridos, en NAc, BLA e ACA, a etiqueta de pERK foi significativamente menor nos machos inxectados con metado en comparación cos machos inxectados con metas (Figura 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Este descubrimento pode apoiar aínda máis a hipótese de que o sexo e as drogas actúan sobre as mesmas neuronas, pero tamén pode ser indicativo de alteracións inducidas polo apareamento no metabolismo ou absorción de drogas que á súa vez causan respostas neuronais modificadas a Meth. Para investigar se o comportamento sexual provoca un patrón temporal diferente de activación inducida por fármacos, as seccións do NAc, BLA e ACA foron tinguidas para machos sacrificados nun momento posterior (15 min) despois da administración do fármaco (experimento 2).

Experimento 2: A análise de células marcadas individuais e duales confirmou os resultados descritos anteriormente que o comportamento sexual e a exposición posterior a minutos de sacrificio 15 antes do sacrificio resultaron en aumentos significativos de inmunolabelización de Fos e pERK no núcleo de NAc e shell, BLA e ACA. Ademais, atopáronse de novo nestas áreas co-expresión significativa de Fos inducida por apareamiento e PERK inducida por metilhões.figura 4; efecto de apareamiento: F (1,12) = 15.93-76.62; p = 0.002- <0.001; efecto drogas: F (1,12) = 14.11-54.41; p = 0.003- <0.001). O número de neuronas con dobre etiquetaxe en machos inxectados con metamfetamina aparellada foi significativamente maior en comparación cos homes tratados con metanfetamina sen parella (p <0.001) ou homes tratados con solución salina aparellada (p <0.001). Cando os datos se expresaron como porcentaxes de neuronas activadas por drogas, 47.2 ± 5.4% (núcleo NAc), 42.7 ± 7.6% (casca NAc), 36.7 ± 3.7% (BLA) e 59.5 ± 5.1% (ACA) de neuronas activadas por apareamento tamén foron activados por Meth. Ademais, o pERK inducido por drogas non difería entre os animais aparellados e os non aparellados (Figura 4b, e, h, k), en todas as áreas agás o ACA (p <0.001). Estes datos indican que o comportamento sexual provoca unha alteración do patrón temporal de indución de pERK por metanfetamina.

figura 4      

Expresión de FER e de PERK inducida por Fos por sexo en neuronas NAc, BLA e ACA 15 min logo da administración de 4 mg / kg Meth. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) e células marcadas dobre (c, f, i, l) no núcleo NAc (a, ...

Activación neural despois do comportamento sexual e 1 mg / kg de metilo

Ata agora os resultados revelaron que o comportamento sexual e 4 mg / kg Meth activaron as poboacións superpuestas de neuronas no núcleo NAc e shell, BLA e ACA. To Investigar a influencia da dose farmacéutica nesta superposición na activación, tamén se estudaron os patróns de activación neuronal usando unha dose máis baixa de Meth. O núcleo e shell NAc, BLA e ACA analizáronse para a activación inducida polo sexo e Meth. De feito, o comportamento sexual e a posterior exposición a Meth resultaron en aumentos significativos de inmunolabelización de Fos e pERK nas subcomarcas de núcleo e shell NAc, o BLA, así como as neuronas na rexión ACA do mPFC (figura 5). Curiosamente, a menor dose de Meth deu lugar a un número similar de neuronas etiquetadas con pERK inducidas por 4 mg / kg Meth nas catro rexións cerebrais analizadas. Máis importante, o núcleo de NAc e shell, BLA e ACA mostraron aumentos significativos no número de células dobre etiquetadas (Figura 5c, f, i, l) en comparación cos machos inxectados con metanfetamina non aparellados (p = 0.003- <0.001). Cando os datos se expresaron como porcentaxes de neuronas activadas por drogas, 21.1 ± 0.9% e 20.4 ± 1.8% no núcleo de NAc e cuncha respectivamente, 41.9 ± 3.9% no BLA e 49.8 ± 0.8% das neuronas ACA foron activadas por sexo e metanfetamina.

figura 5      

Expresión de FER e de PERK inducida por Fos por sexo en neuronas NAc, BLA e ACA 15 min logo da administración de 1 mg / kg Meth. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) e células marcadas dobre (c, f, i, l) no núcleo NAc (a, ...

Activación neuronal tras o comportamento sexual e administración de d-anfetamina

Para probar se os resultados anteriores eran específicos de Meth, levouse a cabo un experimento adicional para estudar a activación neural de inducción e de apareamiento. A análise de células marcadas simples e dobres para pERK e Fos mostrou que o comportamento sexual e posterior exposición a Amph resultaron en aumentos significativos de inmunolabelización de Fos e pERK no núcleo de NAc e shell e BLA (figura 6; efecto de apareamiento: F (1,15) = 7.38-69.71; p = 0.016- <0.001; efecto drogas: F (1,15) = 4.70-46.01; p = 0.047- <0.001). Ademais, o número de neuronas con dobre etiquetaxe foi significativamente maior nos homes tratados con Amph en comparación cos tratados con Amph non aparellados (p = 0.009- <0.001) ou con homes tratados con solución salina (p = 0.015- <0.001) machos (Figura 6c, f, i). Cando os datos expresáronse como porcentaxes de neuronas activadas por fármacos, 25.7 ± 2.8% e 18.0 ± 3.2% no núcleo e shell de NAc respectivamente, e 31.4 ± 2.0% de neuronas BLA foron activadas tanto por parecer como por Amph. A rexión ACA do mPFC mostrou niveis significativos de Fos inducidos por apareamientoFigura 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Non obstante, a diferenza de Meth, Amph non resultou en aumentos significativos nos niveis de PERK inducidos por drogas no ACA (Figura 6k) ou número de neuronas etiquetadas dobre no ACA (Figura 6l) cando se compara con ambos os machos inxectados con solución salina unidos e non asociados.

figura 6      

A expresión de PERK inducida por Fos e Amph inducida polo sexo en neuronas NAc, BLA e ACA 15 min logo da administración de 5 mg / kg Amph. Números medios ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) e células marcadas dobre (c, f, i, l) no núcleo NAc (a, ...

Conversa

O estudo actual demostra a nivel celular unha superposición entre a activación neuronal polo comportamento sexual reforzante natural e o método de psicostimulantes. Polo tanto, estes datos mostran que non só as drogas actúan nas mesmas rexións cerebrais que regulan a recompensa natural, senón que as drogas activan as mesmas células implicadas na regulación da recompensa natural. Especificamente, mostrouse aquí que o comportamento sexual e Meth co-activaron unha poboación de neuronas no núcleo de NAc e shell, BLA e rexión ACA do mPFC, identificando sitios potenciais onde Meth pode influír no comportamento sexual.

A actual constatación de que o comportamento sexual ea administración de Meth activan poboacións superpuestas de neuronas no NAc, BLA e ACA contrasta cos resultados doutros estudos que amosan que diferentes poboacións de neuronas NAc codifican a recompensa de drogas e naturais.

Específicamente, os estudos electrofisiolóxicos que compararon a activación neuronal durante a autoadministración de recompensas naturais (comida e auga) e cocaína intravenosa indicaron que a autoadministración de cocaína activou unha poboación diferencial e non superpuesta de neuronas que xeralmente non era sensible durante a resposta operante á auga. e reforzo dos alimentos (92%). Só o 8% das neuronas acumbal mostrou activación tanto por cocaína como por recompensa natural (Carelli et al., 2000).

En contraste, a maioría (65%) da célula na NAc mostrou activación por diferentes recompensas naturais (comida e auga), aínda que un reforzo fose máis saboroso (sacarosa) (Roop et al., 2002).

É posible que varios factores contribuíron á discrepancia cos resultados actuais. En primeiro lugar, usáronse diferentes enfoques técnicos para investigar a actividade neural. O estudo actual utilizou un método neuroanatómico para a detección da activación neuronal concorrente por dous estímulos diferentes usando dobre inmunocitoquímico fluorescente para Fos e PERK, permitindo a investigación da activación dunha soa célula en grandes espazos de áreas cerebrais. En contraste, os estudos realizados por Carelli e compañeiros de traballo utilizaron gravacións electrofisiolóxicas restrinxidas ao NAc de comportamentos animais para tratar de si a autoadministración de drogas de abuso activa o mesmo circuíto neuronal utilizado polas recompensas naturais.

En segundo lugar, o estudo actual investigou unha recompensa natural diferente, é dicir, o comportamento sexual en comparación cos estudos anteriores, que usaban comida e auga en ratas restrinxidas (Carelli, 2000). A comida e a auga poden ter un valor menos gratificante que a procreación. O comportamento sexual é moi gratificante e as ratas forman pronto o CPP á cópula (Agmo e Berenfeld, 1990, Martínez e Paredes, 2001, Tenk, 2008). Aínda que os ratos con dieta restrinxida forman CPP para a auga (Agmo et al., 1993, Perks e Clifton, 1997) e comida (Perks e Clifton, 1997), dOs ratos non restrinxidos poden consumir e formar CPP para alimentos máis saborososJarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

En terceiro lugar, os nosos estudos incluíron diferentes fármacos de abuso en comparación con estudos anteriores, utilizando metanfetamina e anfetamina no canto de cocaína.. Os resultados actuais demostran que específicamente Meth e, en menor medida, anfetamina, resultaron na activación de neuronas tamén activadas por comportamento sexual. A experiencia de drogas pode ter desempeñado un papel importante nos nosos descubrimentos. Os estudos actuais utilizaron animais que foron experimentados sexualmente, pero drogas inxenuas. En contraste, os estudos electrofisiolóxicos de Carelli e compañeiros de traballo utilizaron animais "ben adestrados" que recibiron exposicións repetidas á cocaína.

De aí, é posible que a activación inducida por metan de neuronas activadas polo comportamento sexual vólvese alterada en ratos experimentados con drogas. Non obstante, os estudos preliminares do noso laboratorio suxiren que é improbable que a experiencia de drogas sexa un factor importante como o comportamento sexual e o tratamento de Meth en homes tratados crónicamente con Meth, que porcentaxes similares de neuronas activadas por drogas activaron como se informou no estudo actual. (20.3 ± 2.5% en núcleo NAc e 27.8 ± 1.3% en shell NAc; Frohmader e Coolen, observacións inéditas).

Finalmente, o estudo actual investigou a acción "directa" de drogas que utilizan a administración pasiva. Polo tanto, a análise actual non revela información sobre os circuítos neuronais implicados na procura de drogas ou en pistas asociadas á recompensa de drogas, senón que revela a actividade neural causada pola acción farmacolóxica da droga. Nos estudos electrofisiolóxicos anteriores, a actividade neuronal da NAc producida en poucos segundos de respostas reforzadas non é o resultado da acción farmacolóxica da cocaína, senón que depende moito de factores asociativos no paradigma de autoadministración (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Especificamente, a actividade neuronal de NAc está influenciada por presentacións independentes da resposta de estímulos asociados coa entrega de cocaína por vía intravenosa, así como por continxencias instrumentais (é dicir, presión de panca) inherentes a este paradigma comportamental.Carelli, 2000, Carelli e Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli e Wightman, 2004). En resumo, os nosos descubrimentos de co-activación por recompensa natural e de drogas poden ser específicos para a activación por comportamento sexual e administrados pasivamente Meth e Amph.

As poboacións de neuronas no núcleo de NAc e metanfetamina e sexo están activadas e depende dunha dose dependente. As neuronas co-activadas na NAc poden mediar efectos potenciais de Meth na motivación e as propiedades gratificantes do comportamento sexual como lesións do NAc interromper o comportamento sexual.Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Ademais, estas neuronas son potencialmente un locus para efectos de drogas dependentes da dose sobre o apareamento, xa que a dose máis baixa de Met (1 mg / kg) reduciu o número de células dobre marcadas por 50% en comparación coa maior dose de Meth (4 mg / kg). Aínda que este estudo non identifica o fenotipo químico de neuronas co-activadas, estudos anteriores demostraron que a expresión pERK e Fos inducida por fármacos no NAc depende tanto dos receptores de dopamina (DA) como de glutamato (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Aínda que non está claro se a activación neuronal inducida polo apareamento no NAc depende destes receptores, isto demostrouse noutras rexións do cerebro, particularmente na zona preoptica medial (Lumley e Hull, 1999, Dominguez et al., 2007). TMeth, pode actuar en neuronas tamén activadas durante o comportamento sexual a través da activación de receptores de dopamina e glutamato. O papel do glutamato de NAc no comportamento sexual actualmente non está claro, pero está ben establecido que a DA xoga un papel crítico na motivación do comportamento sexual (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Os estudos de microdialisis informaron aumento do fluxo de NAc DA durante as fases apetitiva e consumatoria do comportamento sexual masculinoFiorino e Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) e o efluxo mesolímbico DA correlacionouse coa facilitación do inicio e mantemento do comportamento sexual de ratos (Pfaus e Everitt, 1995). Ademais, os estudos de manipulación da DA mostran que os antagonistas DA na NAc inhiben o comportamento sexual, mentres que os agonistas facilitan o inicio do comportamento sexualr (Everitt et al., 1989, Pfaus e Phillips, 1989). Así, Meth pode afectar a motivación do comportamento sexual a través da activación dos receptores DA.

En contraste co NAc, o número de células dobre etiquetadas no BLA e ACA permaneceu relativamente inalterado, independentemente da dose de Meth. A BLA é fundamental para a aprendizaxe asociativa discreta e está moi implicada no reforzo condicionado e premia a avaliación durante a resposta instrumental (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Vexa 2002). As ratas lesionadas BLA mostran unha diminución da presión da panca para estímulos condicionados asociados cos alimentos (Everitt et al., 1989) ou reforzo sexual (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). En contraste, esta manipulación non afecta á fase consumatoria da alimentación e do comportamento sexual.Cardinal et al., 2002). A BLA tamén desempeña un papel fundamental na memoria dos estímulos condicionados asociados aos estímulos da droga (Grace e Rosenkranz, 2002, Laviolette e Grace, 2006). As lesións ou inactivacións farmacolóxicas do BLA bloquean a adquisición (Whitelaw et al., 1996) e expresión (Grimm e See, 2000) Reintegro de cocaína condicionado, sen afectar o proceso de administración de drogas. Ademais, Amph infundir directamente no BLA resulta nunha reincorporación de drogas potenciadas en presenza dos sinais condicionados (Vexa et al., 2003). Polo tanto, é posible que a transmisión DA aumentada por psicoestimulantes no BLA resulte nunha potencia emocional potenciada e na procura (Ledford et al., 2003) de recompensa sexual, contribuíndo así á mellora do desexo sexual e ao desexo denunciado polos abusadores de Meth (Semple et al., 2002, Verde e Calcita, 2006).

No ACA, a activación neuronal das neuronas activadas polo sexo era independente da dosificación e específica para Meth, xa que non se observou con Amph. Aínda que Meth e Amph teñen propiedades estructurales e farmacolóxicas similares, Meth é un psicoestimulante máis potente que Amph con efectos máis duradeiros (NIDA, 2006). Estudos de Goodwin et al. mostrou que Meth xera un efluxo DA maior e inhibe a depuración do DA aplicado localmente de forma máis eficaz na NAc de rata que Amph. Estas características poden contribuír ás propiedades adictivas de Meth en comparación con Amph (Goodwin et al., 2009) e quizais as diferenzas de activación neuronal observadas entre as dúas drogas. Non obstante, non está claro se os distintos patróns de resultados débense a diferenzas de eficacia entre os medicamentos ou os problemas de potencia relacionados coas doses empregadas e se require máis investigación.

A co-activación por Meth e sexo non se observou noutras subregiones do mPFC (IL e PL). Na rata, o ACA foi estudado extensamente empregando tarefas apetitivas, apoiando un papel nas asociacións de estímulo-reforzo.Everitt et al., 1999, Vexa 2002, Cardinal et al., 2003). Hai amplas evidencias de que o mPFC está implicado no desexo de drogas e na recaída no comportamento de procura de drogas e drogadicción en humanos e ratos (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin e See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas e Volkow, 2005). EuDe acordo con isto, propúxose que a disfunción de mPFC causada por unha exposición repetida a drogas de abuso pode ser responsable da redución do control dos impulsos e do aumento do comportamento dirixido á droga como se observa en moitos adictos. (Jentsch e Taylor, 1999). Os datos recentes do noso laboratorio demostraron que as lesións de mPFC resultaron na procura continua de comportamentos sexuais cando isto estaba asociado cun estímulo aversivo (Davis et al., 2003). Aínda que este estudo non investigou o ACA, apoia a hipótese de que o mPFC (e o ACA especificamente) median os efectos de Meth nunha perda de control inhibitorio sobre o comportamento sexual segundo o informou Meth abusers (Salo et al., 2007).

En conclusión, estes estudos xuntos forman un primeiro paso crítico para unha mellor comprensión de como as drogas de abuso actúan sobre vías neuronais que normalmente median as recompensas naturais. Ademais, estes descubrimentos ilustran que, a diferenza da crenza actual de que as drogas de abuso non activan as mesmas células do sistema mesolímbico como recompensa natural, Meth e, en menor medida, Amph, activan as mesmas células que o comportamento sexual. Á súa vez, estas poboacións neurais coactivadas poden influír na busca de recompensa natural despois da exposición á droga. Finalmente, os resultados deste estudo poden contribuír significativamente á nosa comprensión das bases da adicción en xeral. As comparacións das semellanzas e diferenzas, así como as alteracións na activación neural do sistema mesolímbico provocadas polo comportamento sexual fronte ás drogas de abuso poden levar a unha mellor comprensión do abuso de substancias e as alteracións asociadas na recompensa natural.

Grazas

Esta investigación foi apoiada por subvencións dos Institutos Nacionais de Sanidade R01 DA014591 e Institutos de Investigación Sanitaria de Canadá RN 014705 a LMC.

ABREVIACIÓNS

  • ABC
  • complexo de avidina-biotina-peroxidasa de rábano
  • ACA
  • área cingulada anterior
  • Amph
  • d-anfetamina
  • BLA
  • amígdala basolateral
  • BNSTpl
  • núcleo da cama posterolateral da estria terminalis
  • BNSTpm
  • núcleo do leito posteromedial da estria terminalis
  • BT
  • tiramida biotinilada
  • CeA
  • amiga cental
  • CPP
  • preferencia de lugar condicionado
  • E
  • ejaculação
  • EL
  • latencia de ejaculação
  • IF
  • área infralímbica
  • IL
  • latencia de intromisión
  • IM
  • intromisión
  • M
  • montar
  • MAP Kinase
  • proteína quinase activada polo mitógeno
  • MEApd
  • amygdala medial posterodorsal
  • Meth
  • metanfetamina
  • ML
  • montar a latencia
  • mPFC
  • córtex prefrontal medial
  • MPN
  • núcleo preóptico medial
  • NAc
  • núcleo Accumbens
  • PB
  • buffer de fosfato
  • PBS
  • solución salina tamponada con fosfato
  • PEI
  • Intervalo post ejaculatorio
  • PERK
  • MAP kinase fosforilada
  • PL
  • área prelimbic
  • VTA
  • área tegmental ventral

Notas ao pé

Exención de responsabilidade do editor: Este é un ficheiro PDF dun manuscrito non editado que foi aceptado para publicación. Como servizo aos nosos clientes, estamos a proporcionar esta versión temprana do manuscrito. O manuscrito experimentará a copia, composición e revisión da proba resultante antes de que se publique na súa forma definitiva. Ten en conta que durante o proceso de produción pódense descubrir erros que poden afectar o contido e pertencen os restricións xurídicas que se aplican á revista.

References

  1. Agmo A. comportamento sexual masculino de ratos. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Propiedades de reforzo da exaculación na rata masculina: papel dos opioides e da dopamina. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velázquez G. Recompensa e reforzo producidos pola auga potable: papel dos opioides e subtipos de receptores de dopamina. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. O comportamento sexual e as indicacións ambientais asociadas ao sexo activan o sistema mesolímbico nas ratas macho. Neuropsicofarmacoloxía. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Aumento da expresión de c-fos na área preoptica medial despois de aparearse en ratas macho: papel das entradas aferentes da amigdala media e do campo tegmental central do cerebro medio. Neurociencia. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Un papel para o córtex prefrontal na recuperación de cocaína inducida polo estrés e a cocaína en ratas. Psicofarmacoloxía (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Cardeal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emoción e motivación: o papel da amígdala, o estriado ventral e a cortiza prefrontal. Recensións de neurociencia e bio-comportamento. 2002; 26: 321-352. [PubMed]
  8. Cardinal RN, JA Parkinson, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Papel do córtex cingulado anterior no control do comportamento por estímulos condicionados de Pavlovian nas ratas. Neurociencia do comportamento. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Activación do disparo de células accumbens por estímulos asociados á entrega de cocaína durante a autoadministración. Sinapsis. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. O núcleo accumbens dispara as células durante os comportamentos dirixidos a obxectivos para a cocaína fronte ao reforzo "natural". Fisioloxía e Comportamento. 2002; 76: 379-387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. A activación selectiva das neuronas accumbens por estímulos asociados á cocaína durante unha programación múltiple de auga / cocaína. Brain Research. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Evidencia de que os circuítos neuronais separados no núcleo accumbens codifican a cocaína contra a recompensa "natural" (auga e comida). J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Microcircuito funcional nos vexetais subxacentes á dependencia de drogas: percepcións da sinalización en tempo real durante o comportamento. Opinión actual en Neurobioloxía. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. A codificación selectiva da cocaína contra as recompensas naturais do núcleo das neuronas accumbens non está relacionada coa exposición crónica ás drogas. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, DJ Woodward. As respostas neuronais na cortiza prefrontal e no núcleo accumbens durante a autoadministración da heroína en ratas que se moven libremente. Res. Cerebral. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, MS Bowers, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Cocaína, pero non autoconsumo natural nin infusión pasiva de cocaína produce LTP persistente no VTA. Neurona. 2008; 59: 288-297. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Actividade Cdk5 mellorada e translocación p35 no estriado ventral de ratas tratadas con metanfetamina aguda e crónica. Neuropsicofarmacoloxía. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, PD de Mozley, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, CP O'Brien. Activación límbica durante o desexo de cocaína inducido por sinal. Am J Psychiatry. 1999; 156: 11-18. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. A anfetamina aumenta a fosforilación da quinasa regulada por sinais extracelular e dos factores de transcrición no estriado de ratos a través de receptores metabotrópicos de glutamato do grupo I. Neuropsicofarmacoloxía. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII regula a fosforilación ERK1 / 2 inducida por anfetamina en neuronas estriaxias. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Sociedade para a neuroendocrinoloxía do comportamento. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: hormonas e comportamento; 2003. As lesións do córtex prefrontal medial non interrompen o comportamento sexual en ratas macho; p. 45.
  22. Di Chiara G, Imperio A. As drogas consumidas polos seres humanos aumentan preferentemente as concentracións de dopamina sináptica no sistema mesolímbico de ratas que se moven libremente. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274 – 5278. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, ME Balfour, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. A procreación activa os receptores NMDA na área preoptica media das ratas macho. Neurociencia do comportamento. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Preditores da toma de riscos sexuais entre novos usuarios de drogas. Xornal de investigación sexual. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmacoterapia da Metanfetamina: unha actualización. Abuso de sustancias. 2008; 29: 31-49. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Motivación sexual: análise neural e comportamental dos mecanismos que subxacen as respostas apetitivas e copuladoras de ratas macho. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interaccións entre a amígdala eo estriado ventral en asociacións estímulo-recompensa: estudos que usan un programa de reforzo sexual de segunda orde. Neurociencia. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Estudos de comportamento instrumental con reforzo sexual en ratas macho (Rattus norvegicus): I. Control por estímulos visuais breves vinculados cunha femia receptiva. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, JA Parkinson, MC Olmstead, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Procesos asociativos en adicción e recompensas no papel dos subsistemas estriaxicos de amígdala-ventral. Anais da Academia de Ciencias de Nova York. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Estudos de comportamento instrumental con reforzo sexual en ratas macho (Rattus norvegicus): II. Efectos das lesións da zona preoptica, castración e testosterona. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, ver RE. O neurocircuíto da adicción: unha visión xeral. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Expresión de ARNm c-fos evocada por anfetaminas no caudado-putamen: os efectos dos antagonistas dos receptores DA e NMDA varían en función do fenotipo neuronal e do contexto ambiental. Journal of Neurochemistry. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Os cambios dinámicos no núcleo accumbens o derrame de dopamina durante o efecto Coolidge en ratas macho. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitación do comportamento sexual e aumento do efecto de dopamina no núcleo Accumbens de machos despois da sensibilización comportamental inducida por D-anfetamina. J Neurosci. 1999a; 19: 456 – 463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitación do comportamento sexual en ratas macho tras a sensibilización do comportamento inducida por d-anfetamina. Psicofarmacoloxía. 1999b; 142: 200 – 208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamina e metanfetamina afectan aos transportistas de dopamina en Vitro e en Vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulación das respostas condicionadas das neuronas da amígdala basolateral. Fisioloxía e Comportamento. 2002; 77: 489-493. [PubMed]
  38. Grant S, Londres ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Activación de circuítos de memoria durante o desexo de cocaína. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040 – 12045. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  39. AI verde, Halkitis PN. Metanfetamina de cristal e socialidade sexual nunha subcultura gay urbana: unha afinidade electiva. Cultura, saúde e sexualidade. 2006; 8: 317-333. [PubMed]
  40. Grimm JW, ver RE. Disociación de núcleos límbicos relevantes primarios e secundarios nun modelo animal de recaída. Neuropsicofarmacoloxía. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Interaccións hormonas-neurotransmisoras no control do comportamento sexual. Investigación sobre o comportamento do cerebro. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Casco EM, Meisel RL, Sachs BD. Comportamento sexual masculino. En: Pfaff DW, et al., Editores. Hormonas Brain and Behavior. San Diego, CA: Elsevier Science (EUA); 2002. pp. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamina e serotonina: influencias no comportamento sexual masculino. Fisioloxía e Comportamento. 2004; 83: 291-307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Efectos da administración única e repetida de metanfetamina ou morfina na expresión do xene neuroglicano C no cerebro da rata. The International Journal of Neuropsychopharmacology. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Preferencias de lugar acondicionado (CPP) a "merenda" de altas calorías en cepas de rato xeneticamente propensas contra resistentes á obesidade inducida pola dieta: resistencia ao bloqueo de naltrexona. Farmacoloxía Bioquímica e Comportamento. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Os efectos dos antagonismos opiáceos nas preferencias dos lugares condicionados para a comida de merenda. Farmacoloxía Bioquímica e Comportamento. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsividade resultante da disfunción frontostriatal no abuso de drogas: implicacións para o control do comportamento por estímulos relacionados coa recompensa. Psicofarmacoloxía (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. A base neuronal da adicción: unha patoloxía de motivación e elección. Am J Psychiatry. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Memoria e adicción: circuítos neuronais e mecanismos moleculares compartidos. Neurona. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Funcións opostas do núcleo accumbens e da zona hipotálama lateral anterior no control do comportamento sexual na rata masculina. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Os cannabinoides potencian a plasticidade na aprendizaxe emocional nas neuronas do córtex prefrontal medial a través de insumos basais da amígdala. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, Ver RE. Reintegración potenciada do comportamento que busca a cocaína tras a infusión de D-anfetamina no amígdala basolateral. Neuropsicofarmacoloxía. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. As exposicións repetidas intensifícanse no canto de diminuír os efectos gratificantes da anfetamina, a morfina e a cocaína. Psicofarmacoloxía (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Comportamento sexual en ratas macho tras unha radiofrecuencia ou lesións que esgotan a dopamina no núcleo accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. A serotonina hipotalámica lateral inhibe a dopamina do núcleo Accumbens: implicacións para a saciedade sexual. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Efectos dun antagonista de D1 e de experiencia sexual sobre a inmunorreactividade semellante á cópula inducida por Fos no núcleo preoptico medial. Brain Research. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martínez I, Paredes RG. Só os aparellos de ritmo propio son gratificantes nas ratas de ambos sexos. Horm Behav. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, Vexa RE. A inactivación selectiva do córtex prefrontal dorsomedial ea amígdala basolateral atenúa o restablecemento condicionado polo comportamento extinguido de procura de cocaína nos ratos. Psicofarmacoloxía (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Facilitación de comportamentos sexuais no rato macho en presenza de estímulos previamente vinculados con inxeccións sistémicas de morfina. Farmacoloxía Bioquímica e Comportamento. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Reglamentos da recompensa de metanfetamina mediante kinase regulada por sinal xenúmina / 1 / ets-like. Serie de informes de investigación: abuso e adición de metanfetamina 2 NIH Número de publicación 1-2006. [PubMed]
  61. Beneficios SM, Clifton PG. Revalorización do reforzador e preferencia de lugar condicionada. Fisioloxía e Comportamento. 1997; 61: 1-5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Camiños do desexo sexual. Xornal de Medicina Sexual. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. A psicofarmacoloxía do comportamento sexual. En: Bloom FE, Kupfer DJ, editores. Psicofarmacoloxía: a cuarta xeración do progreso. Nova York: Raven; 1995. pp. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implicacións da indución do xene inmediato no cerebro seguindo a estimulación sexual dos roedores femininos e masculinos. Boletín Brain Research. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condicionado e comportamento sexual: unha revisión. Horm Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Efectos diferenciais dos antagonistas dos receptores de dopamina sobre o comportamento sexual de ratas macho. Psicofarmacoloxía. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. O sistema de dopamina mesolímbica: o camiño común final para o efecto reforzante das drogas de abuso? Recensións de neurociencia e bio-comportamento. 2006; 30: 215-238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. A experiencia sexual induce a plasticidade funcional e estrutural no sistema mesolímbico. Psiquiatría biolóxica. 2009 En prensa.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, RA sabio. Flutuacións de dopamina no núcleo accumbens durante o mantemento, extinción e reintegración da auto-administración de D-anfetamina intravenosa. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Drogas e efectos sexuais: papel do tipo de droga e xénero. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. O comportamento sexual aumenta a expresión de c-fos no cerebro do ratón macho. Res. Cerebral. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Actividade Accumbens durante unha programación múltiple de reforzo de auga e sacarosa en ratas. Sinapsis. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, GP Galloway, Waters C, CD de Moore, Buonocore MH. Control atento e niveis de metabolito cerebral nos abusadores de metanfetamina. Psiquiatría biolóxica. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. A metanfetamina e o éxtase cristalinos difieren en relación ao sexo inseguro entre os mozos homosexuais. Xornal canadense de saúde pública. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Vexa RE. Sustratos neuronais de recaída condicionada para o comportamento en busca de drogas. Farmacoloxía Bioquímica e Comportamento. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Vexa RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drug Addiction, Relapse e Amygdala. Anais da Academia de Ciencias de Nova York. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivacións asociadas ao uso de metanfetamina en homes VIH que teñen relacións sexuais con homes. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. O modelo de restablecemento da recaída de drogas: historia, metodoloxía e descubrimentos principais. Psicofarmacoloxía (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilización para os efectos gratificantes condicionados da cocaína: características farmacolóxicas e temporais. J Pharmacol Exp. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilización aos efectos gratificantes condicionados da morfina: farmacoloxía e características temporais. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, JA Kelly, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Predictores de comportamentos de risco sexual por VIH nunha mostra comunitaria de homes e mulleres que usan drogas por inxección. SIDA e comportamento. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Comportamento no uso de metanfetaminas e riscos sexuais en estudantes do ensino secundario de Estados Unidos: resultados dunha investigación sobre o comportamento do risco nacional. Ciencia da prevención. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Efectos dos receptores de dopamina e NMDA na expresión de Fos inducida por cocaína no estriado das ratas Fischer. Brain Research. 2008; 1243: 1-9. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, editor. Mapas do cerebro: estrutura do cerebro da rata. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, jarra KK, Coolen LM. Recompensa sexual en ratas macho: efectos da experiencia sexual na preferencia do lugar condicionado asociada a ejaculações e intromisións. Horm Behav. 2008 [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Páxinas C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Participación da cascada de cinasa regulada por sinais extracelular para propiedades gratificantes de cocaína. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Páxinas C, Herve D, JA Girault, Caboche J. As drogas adictivas e non adictivas inducen patróns distintos e específicos de activación de ERK no cerebro do rato. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, PJ Lombroso, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault. A regulación dunha cascada de proteína fosfatase permite que os sinais converxentes de dopamina e glutamato activen ERK no estriado. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491 – 496. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Alteracións na transmisión dopaminérxica e glutamateróxica na inducción e expresión da sensibilización comportamental: unha revisión crítica de estudos preclínicos. Psicofarmacoloxía (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Activación neuronal tras o comportamento sexual no cerebro masculino e feminino da rata. Investigación sobre o comportamento do cerebro. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. As lesións excitotóxicas da amígdala basolateral deterioran a adquisición de comportamentos que buscan a cocaína baixo un programa de reforzo de segunda orde. Psicofarmacoloxía. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. RA sabio. Neurobioloxía da adicción. Opinión actual en Neurobioloxía. 1996; 6: 243-251. [PubMed]