Brain Res. 2006 Dec 18; 1126 (1): 56-65. Epub 2006 Sep 15.
fonte
Departamento de Ciencias Psicolóxicas, Universidade Purdue, 703 Third Street, West Lafayette, EN 47907, EUA. [protexido por correo electrónico]
Abstracto
A neurobioloxía do comportamento sexual feminino centrouse en gran parte nos mecanismos de acción hormonal sobre as células nerviosas e como estes efectos se traducen na visualización de patróns motores copuladores. De igual importancia, aínda que menos estudada, hai algunhas das consecuencias do comportamento sexual, incluíndo as propiedades gratificantes das interaccións sexuais e como a experiencia sexual modifica a eficiencia copuladora. Esta revisión resume os efectos da experiencia sexual en procesos de recompensa e copulación de hámsteres mulleres sirias. NOs correlatos eural destas interaccións sexuais inclúen cambios celulares a longo prazo na transmisión de dopamina e vías de sinalización postsináptica relacionadas coa plasticidade neuronal (por exemplo, a formación da columna dendrítica). En conxunto, estes estudos suxiren que a experiencia sexual mellora as propiedades reforzantes do comportamento sexual, o que ten o resultado coincidente de aumentar a eficiencia copulatoria dun xeito que pode aumentar o éxito reprodutivo.
1. Introdución
"Por que os animais se mate?" É unha pregunta sinxela que está no centro da neurobioloxía do comportamento sexual feminino. Ningunha pregunta de comportamento ten unha resposta sinxela, xa que hai causas próximas e distales e consecuencias do comportamento que suscitan as súas propias preguntas e teñen as súas propias respostas neurobiolóxicas. Quizais a resposta máis común a esta pregunta sexa "Producir descendencia". Esta pode ser unha resposta no contexto dunha consecuencia distal do comportamento, pero aínda así, esta resposta é, sen dúbida, incorrecta [2]. Agmo [2] cita datos dos suecos indicando que só uns 0.1% de (presuntamente) copulacións heterosexuais producen nenos. Mesmo entre especies como as ratas, nas que unha elevada porcentaxe de apareamos pode producir descendencia, tal correlación non implica que o embarazo sexa un esperado consecuencia da copulación.
Unha resposta á pregunta de por que os animais se amosan son unha visión directa do comportamento sexual feminino como resposta "reflexiva" a unha fisioloxía reprodutiva fluctuante combinada con estímulos dun home reprodutivo competente. Tales investigacións sobre a neurobioloxía do comportamento sexual feminino baseáronse na observación de que unha secuencia de exposición á hormona ovárica formaba unha condición fisiolóxica necesaria para que as mulleres respondesen sexualmente a un macho.70]. Para os roedores, varios días de exposición ao estradiol son seguidos por un aumento transitorio de progesterona que coordina a ovulación e a capacidade de resposta sexual en femias con ciclismo natural.22]. A lóxica seguinte foi que a identificación de rexións cerebrais que conteñan receptores para o estradiol e a progesterona proporcionarían puntos focais para detallar as vías neuronais que regulan o comportamento sexual feminino.70]. Ademais, as accións destas hormonas esteroides nas células nerviosas ofrecerían información sobre os mecanismos celulares e moleculares que median a expresión da capacidade de resposta sexual feminina []71]. Non hai dúbida de que este enfoque programático para o estudo do comportamento sexual feminino tivo moito éxito, e os detalles desta neurobioloxía en termos de circuítos, neuroquímica e expresión xénica están ben establecidos [por exemplo, 6,71].
Aínda así, hai outro aspecto que regula a neurobioloxía do comportamento sexual que se ocupa das consecuencias inmediatas e a longo prazo das interaccións sexuais, é dicir, o control motivacional do comportamento sexual e os efectos experimentais sobre a plasticidade neural subxacente a este sistema. Esta neurobioloxía foi revisada para homes, principalmente ratos machos [2]. O obxectivo desta presentación é examinar tales cambios de plástico nas mulleres, centrándonos no noso traballo con hembras sirias. A partir deste traballo, é evidente que mentres as consecuencias distales do comportamento sexual poden ser cara á reprodución, a razón proximal é activar sistemas de motivación, que de feito conducen o comportamento.
2. Efectos da experiencia en patróns de comportamento sexual feminino
Dúas especies que ofrecen un bo contraste sobre como a ecoloxía social contribúe aos patróns de comportamento sexual son as ratas de Noruega e os hamsters sirios. Ambas especies viven en sistemas de toca. Dentro desas madrigueras, as ratas teñen estruturas sociais complexas que consisten en múltiples xeracións de machos e femias.3], mentres que os hamsters adultos (tanto homes como mulleres) viven por separado en madrigueras individuais [26].
O sistema social das ratas faise a múltiples machos e femias simultaneamente51]. A pesar deste esquema caótico, as ratas son capaces de controlar o patrón das interaccións sexuais cos machos individuais, incluíndo a decisión de cal macho contribuirá a unha ejaculação durante este proceso de apareamiento múltiple.51]. Deste xeito, as ratas femininas son participantes activos no apareamiento e proporcionan un medio eficaz para controlar o patrón de interaccións sexuais, incluíndo a selección de parellas.
O compoñente de solicitude do comportamento sexual feminino nas ratas proporciona a evidencia máis clara do xeito en que as mulleres poden controlar as interaccións sexuais con homes. Cando as ratas macho se achegan a unha femia estraña, a femia responderá cun patrón locomotor de pernas ríxidas no que saltará no seu lugar (é dicir, saltando) ou se propulsa (é dicir, tirando) lonxe do macho [20,49]. Estas solicitudes, combinadas co funcionamento do macho, evitan que o macho se monte a femia ata que se deteña e permita un contacto copulador. [49]. É interesante que as femias permitan que os machos volvan montarse máis cedo despois dun monte sen intromisión que se a muller recibiu unha intromisión [20,50]. Esta regulación do comportamento copulador do macho por ratos femininos denomínase "estimulación" e ten claras implicacións para a progestación e a fertilidade.20,21]. Presúmese que o comportamento de apareamiento de ritmos en ratas femininas está baixo o control do núcleo accumbens dopamina [4,28,29,32,33,58,84]. Na superficie, o complexo patrón de ritmo por ratas femininas suxire un comportamento que podería ser modificado pola experiencia. Os datos dispoñibles limitados, con todo, indican o contrario [19] ea conclusión predominante [20] é que "... o ritmo é un compoñente estable e innato da resposta sexual na rata feminina" (páx. 482).
Dada a súa existencia solitaria, os hámsters femininos teñen un patrón de apareamiento moi diferente, cuxa información foi derivada de estudos de laboratorio (por exemplo, 46), en lugar de observacións naturalistas. Os hámsters femininos (así como os machos) introducen oclusións no túnel principal que leva ao sistema de toca [26]. Un hamster feminino recluta activamente machos á madriguera abrindo esa oclusión e establece un rastro vaginal aromático que leva á entrada de madriguera en anticipación do inicio do seu estro comportamental46]. Tanto é sabido se hai selección de pares por hámsteres femininas para os homes ou como tal selección de pares pode ser realizada en estado salvaxe. Unha vez que o macho é secuestrado na madriguera, o macho e a femia residen xuntos ata que a femia alcanza o estado estero e iníciase o apareamiento.46]. Despois de aparear o macho é desalojado da madriguera da femia [46].
A inmobilidade da postura sexual do hamster feminino contrasta co intercambio abertamente activo cos machos durante o comportamento sexual en ratas femininas. Os hámsters femininos asumen rápidamente unha postura ríxida que acompaña a lordose, unha postura que se pode manter para arriba de 95% dunha proba de 10 min.15]. Mentres a femia mantén esta posición, o macho montarase e / ou montará con intromisión ao parecer ao seu propio ritmo. A conclusión aparentemente obvia obtida a partir destas observacións foi que os hámsters femininos, a diferenza das ratas femininas, non acompañan as interaccións sexuais do macho.
A pesar da aparición de inmobilidade, os hámsters femininos son de feito participantes bastante activos nas interaccións de apareamiento cos machos [46]. Nobre [62] primeiro observou que os hámsters femininos fan movementos perineales activos en resposta á estimulación táctil perivaginal dun hamster masculino, coa femia movendo o seu perineo na dirección da estimulación. A femia move a vaxina na dirección do punto de contacto dos machos para facilitar a inserción intravaginal polo macho62]. De feito, a aplicación dun anestésico tópico ao perineo do hamster feminino reduce drasticamente a capacidade do hamster masculino para lograr a inserción do pene.63].
En conxunto, as ratas e os hamsters femininos difiren na forma en que buscan regular a cópula. A diferenza entre ratas e hamsters femininas reside na capacidade destes animais de regular o montaxe polo macho. As ratas femininas poden determinar se un macho realmente montará ou non. Os hámsters femininos non controlan a frecuencia dos machos por parte do macho, pero poden influenciar se o macho entrará con éxito nun determinado intento de montaxe. Polo tanto, o ritmo nos ratos pódese observar fácilmente, mentres que é moi difícil cuantificar os movementos perineales nos hámsters femininos durante a procreación. Como solución, tomamos un enfoque indirecto para medir o papel do hamster feminino na regulación da intromisión polo macho. Argumentamos que se o macho determina o número de monturas que recibe un hamster feminino, pero os montes que culminan en intromisión están limitados polo comportamento da femia, entón a porcentaxe de monturas que inclúen a intromisión (na literatura denominada "taxa de acerto") é realmente unha medida moi dependente do comportamento da femia.
Para probar esta proposición, analizamos os hámsters femininos que eran sexualmente inxenuos ou as femias que recibiron previamente interaccións sexuais por minuto 6 con machos 10 []8]. Despois, deixamos que cada muller se amosen cun hamster masculino inxenuo sexual e rexistre o comportamento copulatorio. Os varóns naive emparellados con femias con experiencia sexual tiveron unha taxa de éxito máis elevada (maior porcentaxe de montaxes con intromisión) que os machos inxenuos probados con femias inxenuas (Fig 1). Ademais, observouse a mesma diferenza na taxa de éxito se as femias foron probadas 1 ou 6 semanas despois da última proba de experiencia sexual, o que suxire unha resposta estable.
Un experimento adicional implicou a dopamina nos efectos da experiencia sexual feminina no desempeño copulador do macho8]. A neurotoxina de dopamina, 6-hidroxidopamina, foi inxectada no cerebro basal, incluído o núcleo accumbens, de hámsters femininos antes de recibir a experiencia sexual. Os machos naive probados con estas femias non mostraron a taxa de éxito elevada característica do apareamiento con femias experimentadas (figura 2). O impacto da neurotoxina de dopamina nas interaccións sexuais foi específico do incremento da taxa de éxito asociado á experiencia sexual, xa que non houbo efecto desas lesións no comportamento de parellas inexperientes entre homes e mulleres.
3. A experiencia sexual ten consecuencias gratificantes para as mulleres
As interaccións sexuais repetidas cos machos tamén producen consecuencias de comportamento a longo prazo para a femia no contexto da recompensa. Preferencia de lugar acondicionado [14] foi un achegamento útil para descubrir compoñentes reforzantes do comportamento sexual. Neste paradigma, as interaccións sexuais repetidas cun macho están asociadas a un compartimento dunha cámara de varios compartimentos. En ocasións coincidentes, a femia colócase soa nun compartimento similar pero distinto. Antes e despois destes ensaios de acondicionamento, ofrécelle á muller a oportunidade de explorar o aparello (en ausencia dun macho) para determinar a cantidade relativa de tempo que pasa a femia no compartimento asociado á copulación. A copulación co macho é operacionalmente definida como reforzante se a femia pasa significativamente máis tempo no compartimento asociado ao apareamento despois dos ensaios de comportamento sexual que antes do condicionamento.
O claro (aínda que talvez sorprendente) resultado destes estudos en ratas femininas [por exemplo, 65,69] e hamsters [56] é que as interaccións sexuais se están reforzando. Os requisitos de estímulo para que este acondicionamento ocorrese non eran tan obvios. Para as ratas nin os hamsters é a simple visualización de lordose durante as probas de apareamiento suficientes para afectar a preferencia de lugar condicionado. Como se observou, as ratas femininas teñen unha taxa preferida de contactos sexuais co macho de montaxe que ten consecuencias neuroendocrinas relacionadas coa progestación e fertilidade. Para permitir que ratas femininas ritmo no seu intervalo preferido é necesario para a adquisición dunha preferencia de lugar condicionado, xa que as interaccións sexuais nas que a femia non anda non producen condicionamentos [25,27,34,67,68]. O patrón temporal aquí é importante, aínda que non necesariamente o control da estimulación, xa que regular o ritmo eliminando e introducindo un macho ao intervalo preferido da femia tamén conducirá a un acondicionamento preferente34].
Os hámsters femininos non teñen un requisito temporal para aparearse [42], aínda que tamén mostran un lugar de preferencia condicionado ao apareamento [56]. Un xeito en que se probou a importancia dos contactos sexuais por parte do macho para o acondicionamento das preferencias de lugar en hámsters femininos era comparar a eficacia das interaccións sexuais normais coas interaccións sexuais nas que se impediu a intromisión intravaginal polo macho ocluíndo a vaxina da femia [39]. Aquí, o condicionamento da preferencia de lugar era evidente, independentemente de se a muller recibía ou non unha estimulación vaxinal durante os ensaios de condicionamento do comportamento sexual. Este resultado experimental parece violar a observación de que unha oclusión vaxinal similar evita a elevación de accumbens dopamina durante as interaccións sexuais cun macho40]. Con todo, as femias eran sexualmente inxenuas nese estudo de microdiálisis. Parece que a multitude de propiedades sensoriais acumuladas durante a experiencia sexual, por exemplo durante os xuízos condicionantes dun paradigma de preferencia de lugar.39], amplía os estímulos sensoriais que contribúen á recompensa sexual a partir do papel restrinxido da estimulación vaxinal en femias inxenuas sexualmente []40].
Non houbo pouca investigación de sistemas de neurotransmisores que median o acondicionamento das preferencias de lugar ás interaccións sexuais. Nun estudo, antagonizando a neurotransmisión de opiáceos mediante o tratamento de ratas femininas con naloxona antes das interaccións sexuais, eliminou o acondicionamento de preferencias de lugar [68]. Por outra banda, varios estudos que utilizan antagonistas dos receptores de dopamina produciron resultados mixtos. Pretratando hámsters femininos con antagonistas dos receptores D2 de dopamina57] impediu a adquisición dun lugar condicionado preferido por interaccións sexuais (Fig 3). Un estudo similar en ratas non produciu efecto30].
4. Neurotransmisor e plasticidade celular tras a experiencia sexual en mulleres
Hai unha rica tradición de investigación sobre mecanismos de sinalización de dopamina, xa que se relacionan con compoñentes de comportamentos motivados e abuso de drogas [por exemplo, 60]. Aproveitando desa literatura, exploramos a posibilidade de que a experiencia sexual puidese afectar a neurotransmisión de dopamina no camiño mesolímbico e que a plasticidade dese sistema era a base das consecuencias comportamentais da experiencia sexual, por exemplo, cambios na eficiencia copulatoria e recompensa. Dentro do sistema de dopamina mesolímbica, hai probas de activación durante as interaccións sexuais femininas, así como efectos a longo prazo sobre a plasticidade estrutural e neuroquímica. Os primeiros experimentos de microdiálisis demostraron que os niveis de dopamina extracelular no núcleo accumbens das femias eleváronse durante o apareamento [55,58]. Para as ratas femininas, a liberación de dopamina foi particularmente sensible ás interaccións de acasalamento cos machos [4,33,58], e para hámsters femininos (polo menos inxenuo sexual), as elevacións de dopamina dependían da estimulación vaxinal recibida durante o apareamiento.40]. EuNo experimento de seguimento tomamos un enfoque lixeiramente diferente, esta vez medindo a dopamina extracelular no núcleo accumbens durante o apareamento en hámsters sexuais inxenuos ou en mulleres que tiveron experiencia sexual antes da proba de microdiálisis [38]. A experiencia sexual produciu un aumento esaxerado na dopamina extracelular que persistiu ao longo da interacción sexual cun macho, en comparación cos niveis de dopamina en femias inxenuas sexualmente (figura 4). Quizais o aumento da resposta de dopamina en mulleres con experiencia sexual reflicte a variedade enriquecida de estímulos asociados ao apareamiento aos cales os hámsters son sensibles a esa experiencia.
A elevación da liberación de dopamina en hámsteres experimentados é unha reminiscencia dos efectos da exposición repetida de animais a drogas de abuso.75]. Nesta literatura, o aumento do nivel de dopamina en resposta a unha dose fixa de fármaco denomínase "sensibilización".75]. A sensibilización de fármacos está acompañada dunha variedade de respostas celulares pensadas para aumentar a eficacia sináptica e o fluxo de información a través da vía mesolímbica [74].
OO punto de entrada no mecanismo a través do cal a experiencia de comportamento pode alterar a plasticidade neuronal está ao nivel das sinapses. Unha aproximación indirecta a esta pregunta foi tomada medindo os cambios dendríticos na neurona estriatal (incluído o núcleo accumbens) en resposta á administración de fármacos ou tras unha experiencia de comportamento. A repetida administración dunha variedade de sustancias abusadas con diferentes perfís farmacolóxicos incrementará a lonxitude dendrítica e / ou a densidade da columna vertebral nas ramas dendríticas terminais das neuronas espiñas medianas [13,23,44,45,64,76,77,78]. Existen moito máis poucos exemplos para a experiencia de comportamento que produce efectos comparables nas dendritas, aínda que a inducción do apetito ao sal [79], comportamento sexual masculino [24] e comportamento sexual feminino59] alterará a morfoloxía dendrítica en neuronas espiñas medias do núcleo accumbens.
A experiencia sexual en hámsters femininos tivo un impacto diferencial na densidade da columna dendrítica [59] dependendo da rexión examinada (Fig 5). Neste experimento, os hámsters femininos recibiron o noso paradigma básico das semanas 6 de experiencia sexual ou permaneceron sexualmente inxenuo [38]. No 7th En semana, todas as mulleres recibiron un réxime de cebado de estradiol e progesterona e sacrificáronse sobre 4 h despois da inxección de progesterona. Os cerebros foron procesados para a tinción de Golgi e as franxas 240 μm analizadas. As espinas foron contadas a partir de ramas dendríticas terminais de neuronas piramidais no córtex prefrontal medial, neuronas espiñas medias do núcleo accumbens (casca e núcleo combinadas) ou neuronas espiñas medias do caudado dorsal. Dentro das neuronas espiñas medias do núcleo accumbens, a densidade da columna dendrítica (normalizada a 10 μm de lonxitude dendrítica) foi maior en femias con experiencia sexual que en sexo inxenuo. O contrario atopouse nas dendritas apicales das neuronas da capa V do córtex prefrontal. Non houbo diferenzas de grupo na densidade da columna vertebral nas neuronas espiñas medias caudadas. Interpretamos estas diferenzas na densidade da columna como reflectindo a plasticidade na neurotransmisión excitadora de neuronas que responden dopaminérgicamente37].
Se tomamos a plasticidade en espiñas dendríticas como marcador celular distal de experiencia sexual, podemos hipotetizar unha cascada de eventos celulares que son provocados por interaccións sexuais repetidas. Noutras palabras, o foco debería estar en dúas das clases de respostas ilustradas polo tratamento con drogas de abuso.36], é dicir, unha resposta esaxerada ao comportamento sexual e as respostas celulares alteradas en ausencia de comportamento sexual. Os eventos de sinalización propostos aparecen en Fig 6. Esta proposta non é novedosa nin radical, xa que a plasticidade dendrítica derivada de estímulos tan diversos como as hormonas esteroides.54], drogas de abuso [61], ou potenciación a longo prazo [1] todos inclúen os eventos ilustrados. É porque estas vías están tan ben representadas en variados exemplos de plasticidade neural que parece probable que como os ocos son cubertos o mesmo será certo para os efectos do comportamento sexual no núcleo accumbens.
O enfoque de descubrimento, utilizando microarrays de xenes [7], xunto con enfoques experimentais comezaron a validar a actividade ou expresión de proteínas alteradas en varios puntos destas vías resultantes da experiencia sexual. Os factores de transcrición representan un conxunto de eventos moleculares que poden afectar á estrutura dendrítica que leva á plasticidade a longo prazo [5,17,52]. Tanto a tinción de c-Fos como a de FosB examináronse en resposta á experiencia sexual e aparearse en hámsteres sirias femininas. Despois das interaccións sexuais cun macho, a tinción de c-Fos foi elevada no núcleo do núcleo accumbens, unha resposta que se amplificou en femias con experiencia sexual.Fig 7) [9]. A tinción con FosB non foi afectada de forma perceptible por unha interacción sexual, aínda que os niveis de tinción eran máis altos no núcleo do núcleo accumbens en hámsteres femininos con experiencia sexual en comparación con femias inxenuas (Fig 8). Nin c-Fos nin FosB foron afectados por comportamento sexual ou experiencia sexual nin na casca do núcleo accumbens nin no estriado dorsal nestas femias. Nos nosos experimentos, os cambios en c-Fos e FosB ocorren en paralelo, tanto a nivel rexional como en función da experiencia, aínda que noutros estudos non sempre se modifican estas proteínas.y [por exemplo, 12].
As proteínas Fos pódense activar a través de varias vías de sinalización, incluíndo a kinase MAP [18]. A ERK é unha quinasa descendente nesta vía e analizamos a regulación do ERK despois do comportamento sexual (Fig 9). En transferencias Western, os niveis totais de ERK 2 non se viron afectados polo comportamento sexual nin pola experiencia sexual. En contraste, PERK 2 foi elevado no núcleo accumbens tras o comportamento sexual, pero só en mulleres con experiencia sexual previa.
A entrada na ruta quinasa MAP pode provir de varias fontes, incluída a activación do receptor do glutamato.1], Receptores acoplados á proteína G (por exemplo, receptores de dopamina)83], vías de inositol trifosfato [66], e a través dos receptores dos factores de crecemento [16]. Os efectos da experiencia sexual sobre estas vías foron implicados a través de análises de microarrays [7], pero realmente non foron examinados directamente. Un mecanismo que de feito está regulado pola experiencia sexual é o acoplamento de receptores da dopamina á adenilato ciclase [1]10]. Os homoxenatos do núcleo accumbens tomáronse de hámsters femininos con experiencia sexual ou inexperientes. Estes homoxenatos foron estimulados coa acumulación de dopamina e cAMP medida (Fig 10). A dopamina estimulou a acumulación de cAMP en todos os grupos de tratamento, cunha maior estimulación nos homoxenatos das femias con experiencia sexual. TSe se determinou que estas accións de dopamina eran mediadas polo receptor D1. Aínda que un compoñente da plasticidade tras a experiencia sexual é presináptico (é dicir, aumento do eflux de dopamina durante as interaccións sexuais), é tan claro que hai modificacións postsinápticas que non son simplemente reflexos dos aumentos niveis de dopamina sináptica.
5. Resumo e conclusión
Unha hipótese da función de dopamina mesolímbica é que esta vía é sensible ás propiedades condicionadas asociadas a comportamentos que ocorren naturalmente de xeito que optimice as consecuencias funcionais deses comportamentos [80]. Deste marco podemos concibir un patrón de comportamento no que a estimulación vaxinal recibida por mulleres durante a cópula estimula a neurotransmisión de dopamina. Aínda que inicialmente esta resposta non está condicionada [55], coas mulleres con experiencia aprenden a producir sutís movementos perineales que aumentan a probabilidade de recibir estimulación vaxinal do macho de montaxe [8]. Pola súa banda, hai unha maior activación da dopamina, que se alimenta para manter a resposta comportamental. Porque a recepción de estimulación vaxinal a través de intromisións do macho de montaxe (antes da ejaculação polo macho) é necesaria para a inducción do estado progestacional que acompaña a fertilización (e polo tanto un embarazo exitoso) [42], esta regulación de comportamento tería os efectos indirectos do aumento da eficiencia copulatoria que levaría ao éxito reprodutivo. A resposta á pregunta de "Por que as mulleres se xuntan?" É recibir unha estimulación que teña consecuencias gratificantes en forma de actividade de dopamina cerebro. Estes compoñentes "agradables" do comportamento sexual teñen consecuencias imprevistas (desde o punto de vista feminino), aínda que altamente adaptativas, do embarazo exitoso e do nacemento da descendencia.
Grazas
Queremos agradecer a algunhas persoas que contribuíron de xeito importante a esta investigación, incluíndo a Dra. Katherine Bradley, Alma Haas, Margaret Joppa, o doutor Jess Kohlert, Richard Rowe e o Dr. Val Watts. Un agradecemento especial a Paul Mermelstein polos seus consellos e interese sostido no noso traballo. Esta revisión baséase nunha conversa feita no 2006 Workshop on Steroid Hormones and Brain Function, Breckenridge, Co. Agradecemos a National Science Foundation (IBN-9412543 e IBN-9723876) e os National Institutes of Health (DA13680) para os seus apoio desta investigación.
References
;