A disfunción do ganglio basal contribúe á inactividade física na obesidade (2016)

Dispoñible en liña 29 decembro 2016

• Danielle M. Amiga^{1, 9},
• Kavya Devarakonda^{1, 9},
• Timothy J. O'Neal^{1, 9},
• Miguel Skirzewski⁵,
• Ioannis Papazoglou¹,
• Alanna R. Kaplan²,
• Jeih-San Liow⁴,
• Juen Guo¹,
• Sushil G. Rane¹,
• Marcelo Rubinstein^{6, 7, 8},
• Veronica A. Alvarez²,
• Kevin D. Hall¹,
• Alexxai V. Kravitz^{1, 3, 10,,}

 amosar máis

http://dx.doi.org/10.1016/j.cmet.2016.12.001

luces

• A obesidade está asociada coa inactividade física

• Os ratos obesos teñen menos unión D2R estriatal, o que pode explicar a súa inactividade

• Restaurar G_i a sinalización en iMSN rescata os niveis de actividade física dos ratos obesos

• A inactividade física é máis unha consecuencia que unha causa de ganancia de peso

Resumo

A obesidade está asociada coa inactividade física, o que agrava as consecuencias para a saúde do aumento de peso. Non obstante, os mecanismos que median esta asociación son descoñecidos. Hipótese que os déficits na sinalización de dopamina contribúen á inactividade física na obesidade. Para investigar isto, cuantificamos múltiples aspectos da sinalización de dopamina en ratos magros e obesos. Descubrimos que a unión do receptor de tipo D2 (D2R) no estriado, pero non o nivel de conexión ou receptor de dopamina de tipo D1, foi reducida en ratones obesos. A eliminación xenética de D2Rs a partir de neuronas espiñais medias espiñas foi suficiente para reducir a actividade motora en ratos magros, mentres que restaurando G_i a sinalización destas neuronas incrementou a actividade en ratones obesos. Sorprendentemente, aínda que os ratos con D2R baixos eran menos activos, non eran máis vulnerables á ganancia de peso inducida pola dieta que os ratos control. Concluimos que os déficits na sinalización D2R estriada contribúen á inactividade física na obesidade, pero a inactividade é máis unha consecuencia que unha causa de obesidade.

Resumo gráfico

Opcións da imaxe

Palabras clave

• obesidade;
• dopamina;
• actividade física;
• exercicio;
• D2;
• estriado;
• Obeso;
• perda de peso

introdución

A obesidade está asociada coa inactividade física (Brownson et al., 2005   Ekkekakis et al., 2016), que comporta os efectos negativos sobre a saúde da diabetes tipo II e das enfermidades cardiovasculares (de Rezende et al., 2014   Sharma et al., 2015). Non se coñecen os mecanismos que subxacen a esta asociación, un feito reflectido na falta de intervencións eficaces para alterar os niveis de actividade física nas poboacións con obesidade (Ekkekakis et al., 2016). Curiosamente, a obesidade asociouse con alteracións na sinalización da dopamina estriada (DA), o que levou a hipóteses da disfunción da recompensa na obesidade (Blum et al., 2011, Kenny, 2011   Volkow e Wise, 2005). Aínda que o estriatal DA está fortemente ligado á produción motora, poucos estudos investigaron como as alteracións dopaminérxicas inducidas pola dieta poden contribuír á inactividade física. Hipótese que a sinalización DA estriatal está deteriorada na obesidade e que isto contribúe á inactividade física. Comprender as causas biolóxicas da inactividade física pode levar a intervencións eficaces para aumentar a actividade e, así, mellorar a saúde en individuos con obesidade.

O estriatal DA está implicado de forma crítica no control do motor. Isto é evidente en trastornos motores como a enfermidade de Parkinson, que se caracteriza pola morte de neuronas dopaminérxicas no cerebro medio e como consecuencia a perda de DA estriadoHornykiewicz, 2010). As dúas poboacións de neuronas de proxección estriada moduladas por DA coñécense como neuronas de espiñas medias de vía directa e indirecta (dMSNs e iMSNs) (Alexander e Crutcher, 1990, DeLong, 1990   Gerfen et al., 1990). os dMSNs expresan o G_sreceptor D1 acoplado (D1R) e proxéctase á substancia negra e ao segmento interno do globus pallidus, mentres que os iMSNs expresan o G_i-conectou D2R e proxecto para o segmento externo do globus pallidus (GPe) (Gerfen et al., 1990, Le Moine e Bloch, 1995   Levey et al., 1993). A eliminación xenética de D2R de iMSNs, ou a estimulación optoxenética de iMSNs, é suficiente para reducir o movemento (Kravitz et al., 2010   Lemos et al., 2016). A partir da ligazón entre a disfunción D2R e a obesidade, hipotetizamos que os animais obesos modificaron a saída de iMSN, obtendo inactividade física.

Aquí, examinamos varios aspectos da sinalización de DA en ratos obesos magros e inducidos pola dieta. A unión de D2R reduciuse en ratones obesos, mentres que os niveis de unión de D1R e DA extracelular permaneceron sen cambios. Os ratos obesos tamén presentaban trastornos no disparo estriatal e tiñan un movemento reducido. A eliminación de D2R xeneticamente dos iMSNs reduciu a actividade nos ratos magros, mentres que a restauración de G_i a sinalización no iMSN aumentou a actividade en ratones obesos. Estes resultados establecen que a sinalización D2R en iMSNs pode modular a actividade física bidireccionalmente. Despois preguntamos se os ratos con baixa sinalización de D2R eran máis vulnerables ao aumento de peso nunha dieta rica en graxa, debido á baixa actividade. Para iso, examinamos o aumento de peso con respecto á variación natural na unión de D2R entre os ratos, así como en ratos con eliminación xenética de D2Rs estriais. Aínda que os ratos con niveis baixos de D2R tiñan niveis baixos de actividade física, gañaron peso á mesma taxa que os ratos con D2R intactos. Isto argumenta unha forte relación causal entre a actividade física e o aumento de peso. Concluímos que as deficiencias na sinalización de D2R contribúen á inactividade física na obesidade, pero que a inactividade non necesariamente leva á ganancia de peso.

Resultados

A obesidade inducida pola dieta asociouse con inactividade física

Os ratos machos C57BL6 / J (3-4 meses) foron alimentados con chow estándar (magro, n = 8) ou con dieta rica en graxas (obesos, n = 8) durante 18 semanas (Figura S1A). A partir da semana 2 e persistindo ata a semana 18, os ratos obesos tiñan un peso corporal e unha masa de graxa significativamente maiores que os ratos magros (p <0.0001; Figuras 1A e S1B). A masa fraca non foi modificada significativamente (Figura S1C). Medimos os niveis de actividade nun campo aberto cada 2 semanas durante 18 semanas (Ethovision; Noldus Information Technologies). Os ratos obesos tiñan unha actividade menor que os ratos delgados a partir da semana 4 e persistían ata a semana 18 (p <0.0001; Figuras 1B e 1C). Na semana 18, os ratos obesos pasaban menos tempo movéndose (p = 0.005), tiñan menos movementos (p = 0.0003) e tiñan velocidades máis lentas mentres se movían (p = 0.0002; Figura 1D) en relación aos ratos magros. A cría e aseo non se modificaron significativamente (Figura 1D). Os ratos obesos tamén corrían menos que os ratos delgados cando se lles daba acceso ás rodas corredoras da gaiola doméstica (p = 0.0005; Figura 1E). Probamos se os déficits de movemento se correlacionaron co aumento de peso no grupo obeso. Aínda que o aumento de peso foi correlacionado coa inxestión calórica da dieta rica en graxas (Figura 1F), non se correlacionou cos niveis de movemento nun campo aberto nin coa enerxía gastada durante o período de dieta rica en graxa (Figuras 1G e 1H). Curiosamente, estas mesmas correlacións mantivéronse cando examinamos a inxestión de alimentos na primeira semana do experimento (Figuras 1I – 1K), indicando que os niveis iniciais de ingesta de dieta rica en graxas (pero non gastos de movemento ou enerxía) eran predicibles para a posterior ganancia de peso.

Figura 1. 

A dieta crónica en graxa levou á inactividade física

(A) Os ratos alimentados con dieta rica en graxa pesaban máis que os ratos alimentados con chow estándar comezando na semana 2 e continuando a semana 18 (F_(18,252) = 62.43, p <0.0001).

(B e C) (B) Exemplos de rastreos de actividade de campo aberto que demostran que (C) os ratos obesos reduciron a actividade física en comparación cos ratos magros que comezan na semana 4 e continúan ata a semana 18 (F_(10,140) = 4.83, p <0.0001).

(D) Despois de 18 semanas cunha dieta rica en graxas, os ratos obesos diminuíron o tempo dedicado a moverse (t₍₁₄₎ = 3.32, p = 0.005), diminución da frecuencia de movemento (t₍₁₄₎ = 4.74, p = 0.0003) e diminución da velocidade mentres se move (t₍₁₄₎ = 4.69, p = 0.0002) en relación aos controis delgados. Os ratos obesos tamén mostraron unha tendencia á diminución da crianza (p = 0.07).

(E) Cando se daba acceso a unha roda de correr na gaiola doméstica, os ratos obesos tiñan menos voltas das rodas en relación aos ratos magros (t₍₁₄₎ = 4.55, p = 0.0005).

(F-H) A ganancia total de peso formou unha correlación significativa coa inxestión de enerxía (F) ao longo do experimento (r = 0.74, p = 0.04), pero non (G) o gasto enerxético (r = 0.52, p = 0.19) nin (H) velocidade en campo aberto (r = 0.19, p = 0.65).

(I-K) O aumento total de peso formou unha correlación significativa co consumo medio de enerxía (I) durante a primeira semana (r = 0.88, p = 0.004), pero non (J) o gasto enerxético (r = -0.19, p = 0.66) , nin (K) velocidade en campo aberto (r = 0.36, p = 0.38).

Análise estatística. (A e C) ANOVA de dúas medidas repetidas, seguida de proba t hoc post con taxa de descubrimento de Benjamini-Hochberg; (D e E) proba de t do estudante sen parella; (F – H) regresión lineal; ^*p <0.05, ^**p <0.01, ^***p <0.0001 fronte a magra. (I-K) regresión lineal; ^***p <0.001 fronte a ratos delgados.

Opcións da imaxe

A obesidade asociouse con reducións da unión á dopamina D2R

Para identificar mecanismos subxacentes á inactividade física, cuantificamos varios aspectos da sinalización de DA en ratos magros e obesos. De acordo cos informes previos en roedores, unión do receptor do tipo D2R (vía autoradiografía con ³A H-spiperona, en diante denominada unión D2R) foi máis baixa en ratos obesos en relación a ratos magros (p <0.0001; Figuras 2A e 2B), un descubrimento que foi significativo nas tres subdivisións estriais (dorsomedial: p = 0.004; dorsolateral: p <0.0001; ventral: p <0.001; Figuras S2A e S2B). Non obstante, a unión a D2R non se correlacionou coa graxa corporal no grupo magro ou obeso (p> 0.55 para ambos; Figura 2C), suxerindo que, aínda que a unión de D2R e o almacenamento de graxa son alteradas pola dieta crónica en graxa, é posible que estas variables non estean relacionadas causalmente entre si.

Figura 2. 

Dopamina con graxa dietética rica en graxa Vinculante D2R

(A) Imaxes de unión D2R estriatal medida como vía ³Autoradiografía de spiperona H.

(B) A unión D2R de Striatal reduciuse en obesos en relación aos ratos magros (t₍₂₅₎ = 5.02, p <0.0001).

(C) A unión ao estriatal D2R non se correlacionou coa porcentaxe de graxa corporal en ratos delgados (p = 0.95) ou obesos (p = 0.56).

(D – F) (D) Enlace estriatal D1R (t₍₂₄₎ = 1.31, p = 0.20), (E) contido total de dopamina (DA; t₍₁₃₎ = 0.85, p = 0.41) e (F) densidade de tirosina hidroxilase (TH) (t₍₁₄₎ = 0.48, p = 0.64) non foron diferentes entre os grupos de dieta.

Análise estatística. Media con ratos individuais; n = 8-19 ratos / grupo; Proba t do alumno (B e D – F) ou regresión lineal (C); ^*p <0.01.

Opcións da imaxe

Tentamos identificar o mecanismo que subxace a redución mediada pola obesidade na unión de D2R. Para iso buscamos diferenzas Drd2 ARNm (vía hibridación in situ) e atopouno inalterado nas tres subdivisións estriais (dorsomedial: p = 0.92; dorsolateral: p = 0.90; ventral: p = 0.34; Figura S2C). Realizamos western blot para cuantificar os niveis totais de proteína D2R e non observamos cambios nas bandas de 50 ou 70 kDa, que se pensa que representan diferentes estados de glicosilación do D2R (ambos p> 0.95, Figuras S2D e S2E) (Johnson e Kenny, 2010). Finalmente, avaliamos os marcadores da disfunción metabólica en ratos magros e obesos para ver se poden relacionarse coa diminución de D2Rs como se informou anteriormente (Dunn et al., 2012). Os ratos obesos tiñan maior colesterol en xaxún (p <0.0001), leptina (p <0.0001), glicosa (p = 0.0002), insulina (p = 0.001) e avaliación do modelo homeostático baseado na resistencia (HOMA-IR) (p <0.001) , pero non triglicéridos ou ácidos graxos libres (Figuras S1D – S1J). Non obstante, ningún destes factores correlacionouse coa unión de D2R en ratos obesos (datos non mostrados).

Vinculación de tipo D1R (mediante autoradiografía con ³H-SCH23390, en diante denominado unión D1R) non difería entre os ratos obesos e os ratos delgados (p = 0.20; Figura 2D). Tampouco houbo diferenzas no contido de DA estriado, medido mediante cromatografía líquida de alto rendemento (HPLC) de perforacións de tecido estriado (p = 0.41; Figura 2E), ou inmunoetiquetado de tirosina hidroxilase (p = 0.64; Figura 2F). Á luz de múltiples informes de diferenzas na DA basal nos ratos obesosCarlin et al., 2013, Davis et al., 2008, Vucetic et al., 2012   Wang et al., 2014), exploramos aínda máis este punto usando microdiálise sen fluxo (ratos novos, n = 6 por grupo). De novo non observamos diferenzas na DA extracelular (p = 0.99) nin en ningún dos seus dous metabolitos, o ácido 3,4-dihidroxifenilacético (DOPAC) (p = 0.85) e o ácido homovanílico (HVA) (p = 0.68, Figura S3), con este método, indicando que a obesidade non se asociou con reducións no ton DA extracelular nestes experimentos.

O disparo estriatal relacionado co movemento foi interrompido nos ratos obesos

Realizamos electrofisioloxía in vivo para examinar como a redución da unión estriatal D2R pode alterar a saída neuronal estriada e contribuír así á redución do movemento. Rexistramos a partir do estriado dorsomedial de ratos delgados e obesos (n = 3 ratos por grupo, histoloxía en Figura 3F). Aínda que os ratos obesos se movían menos en xeral, a velocidade dos movementos executados non difería entre estes grupos (p = 0.55; Figura 3A), o que nos permite comparar disparos relacionados co movemento entre ratos delgados e obesos. As taxas de espiga basal de varias unidades non diferían entre os ratos magros e os obesos (magros, 2.1 ± 0.4 Hz; obesos, 2.0 ± 0.7 Hz; p = 0.93). Non obstante, a prevalencia de unidades activadas por movemento (Figura 3B) foi marcadamente inferior en ratos obesos (p <0.0001; Figura 3C). Isto non dependía da nosa definición estatística de unidades "activadas polo movemento", xa que tamén observamos unha diminución do aumento dos movementos na resposta media de todas as unidades rexistradas en ratos obesos fronte a ratos delgados (interacción por ANOVA, p <0.0002; Figuras 3D e 3E). Concluímos que a taxa de picado total no estriado non difería, pero a organización de picos en torno ao movemento foi interrompida en ratos obesos.

Figura 3. 

O disparo relacionado co movemento no estriado foi interrompido nos ratos obesos

(A) os eventos de movemento tiveron unha velocidade similar en ratos magros e obesos.

(B) Exemplos de disparo de movemento activado e non sensible en neuronas estriaxias.

(C) A prevalencia das neuronas activadas polo movemento foi menor en ratos obesos (p = 0.002).

(D) Disparo medio relacionado co movemento de todas as neuronas gravadas.

(E) O disparo relacionado co movemento foi significativamente menor tras a exposición á dieta (dieta × interacción de movemento, F_(1,171) = 14.77, p <0.0002).

(F) Esquema (adaptado de Franklin e Paxinos, 1997) ilustrando a colocación da matriz de electrodos en ratos de gravación delgados e obesos (n = 3 cada un).

Análise estatística. (C) Proba exacta de Fisher. (D e E) ANOVA de medidas repetidas de dous sentidos.

Opcións da imaxe

Inhibición dos niveis de actividade restaurada de saída de iMSN en ratones obesos

Para comprobar se a redución da saída de iMSN pode aumentar o movemento en ratos obesos, usamos unha estratexia dependente de Cre-recombinasa (Cre) para expresar un G inhibitorio_ireceptor deseñador receptor receptor opioide kappa acoplado exclusivamente activado por fármacos de deseño (KOR-DREADD) en iMSNs de ratos obesos (Figura 4A). Aínda que o ratón Cre (A2A-Cre) do receptor de adenosina 2A foi validado previamente con inmunotensión para demostrar que a expresión de Cre é específica para os iMSNs estriados (Cui et al., 2013   Lemos et al., 2016), realizamos unha validación adicional desta liña con dobre hibridación in situ fluorescente. Case todas as neuronas (98.7% ± 0.6% de 1,301 neuronas contadas) expresaron ambas Cre Drd2 ARNm, mentres que moi poucos (1.3% ± 0.6%) expresaron calquera Cre or Drd2 mRNA, pero non ambos, confirmando que a liña A2A-Cre dirixe fielmente aos iMSN ( Figura S4).

Figura 4. 

Inhibición mediada por DREADD de iMSNs que restauraron a actividade física nos ratos obesos

(A) Fotografía da expresión KOR-DREADD e esquemática (adaptada de.) Franklin e Paxinos, 1997) ilustrando os sitios de inxección viral de todos os KOR-DREADD nos ratos A2A-Cre; a opacidade indica o número de ratos que expresan virus nun determinado lugar.

(B) Os ratos obesos movéronse máis cando se inxectaron con SalB en comparación con DMSO (t₍₇₎ = 3.056, p = 0.02).

(C-G) Despois da administración de SalB, os ratos obesos mostraron cambios non significativos na (C) frecuencia de movementos, (D) a duración do movemento medio e (E) velocidade de movemento, en relación ao administrado DMSO. (F) A administración de Sal-B aumentou a frecuencia de crianza (t₍₇₎ = 3.116, p = 0.02), pero (G) non alterou significativamente a frecuencia de aseo.

(H) Os ratos magros movéronse máis cando se inxectaron con SalB en comparación con DMSO (t₍₉₎ = 3.3, p = 0.01).

(I) SalB non afectou o movemento en ratos de tipo salvaxe que non expresaron o KOR-DREADD (p = 0.77).

Análise estatística. (B – I) Probas de estudantes emparelladas; media con ratos individuais; n = 6-10 ratos / grupo.

Opcións da imaxe

As inxeccións do agonista de KOR-DREADD salvinorina-B (SalB) aumentaron a distancia percorrida por ratos obesos que expresaban o KOR-DREADD (p = 0.02; Figura 4B). SalB tamén aumentou a frecuencia de cría (p = 0.02; Figura 4F) e causou unha tendencia a un aumento da frecuencia (t₍₇₎ = 1.64, p = 0.12), pero non a duración ou a velocidade do movemento (Figuras 4C – 4E). As inxeccións de SalB tamén aumentaron o movemento en ratos delgados (p = 0.01; Figura 4H), pero non en ratos de tipo salvaxe que non expresaron o KOR-DREADD (p = 0.73; Figura 4Eu). Concluímos que a redución da produción de iMSNs é suficiente para aumentar os niveis de movemento de animais delgados e obesos.

Os niveis de D2R baixos non predisponen aos animais para o aumento de peso futuro

Finalmente, examinamos se as diferenzas preexistentes na sinalización de D2R poden predispor os ratos individuais á obesidade inducida pola dieta. Para abordar esta pregunta, realizamos tomografía por emisión de micro-positrones (micro-PET) con ¹⁸F-fallypride para determinar a dispoñibilidade inicial de D2R antes da exposición á dieta rica en graxas (Figura 5A). Observamos un alto nivel de varianza no potencial de unión de D2R entre ratos, como outros mostraron (Constantinescu et al., 2011). As diferenzas individuais na dispoñibilidade de D2R correlacionáronse positivamente co movemento en campo aberto (p = 0.045; Figura 5B), consistente co papel das D2R no movemento. Despois da exploración de micro-PET, os animais mantiveron unha dieta rica en graxas durante 18 semanas, para probar se os ratos con D2R baixos serían máis vulnerables ao aumento de peso inducido pola dieta. Sorprendentemente, atopamos unha tendencia cara a positivo relación entre a dispoñibilidade inicial de D2R e o aumento de peso neste experimento (p = 0.10; Figura 5C). Aínda que esta correlación non foi significativa, argumenta en contra da hipótese de que a baixa dispoñibilidade de D2R ou a baixa inactividade física fai que os animais sexan máis vulnerables ao aumento de peso. Isto tamén foi consistente cos nosos descubrimentos de que nin a actividade de campo aberto basal nin a actividade de campo aberto en todo o experimento se correlacionaron co aumento de peso (Figuras 1F – 1K).

Figura 5. 

A vinculación basal D2R non predijo a ganancia de peso no futuro

(A) Exemplo de curvas de dispoñibilidade micro-PET D2R no estriado e no cerebelo usando ¹⁸F-fallypride.

(B e C) (B) Potencial de unión correlacionado co movemento basal de campo aberto (r = 0.56, p = 0.045) e (C) tendencia cara a unha relación positiva co aumento de peso inducido pola dieta rica en graxas (r = 0.50, p = 0.10, n = 12-14 ratos).

(D) Autoradiografía representativa de D2R en ratos con D2Rs intactos (arriba) e iMSN-Drd2-KO rato (inferior).

(E e F) (E) iMSN-Drd2Os ratos KO diminuíron a actividade física nun campo aberto (t₍₈₎ = 2.99, p = 0.02) e (F) nas rodas corredoras da gaiola doméstica (p = 0.01, n = 5-19 ratos / grupo).

(G) iMSN-Drd2-Oco ratos e Drd2-Os controles dos compañeiros de litro con flocos gañaron cantidades similares de peso na dieta rica en graxas (F_(5,70) = 1.417, p = 0.23; n = 6-10 ratos / grupo).

(H – J) (H) Non houbo diferenzas significativas no consumo normal de enerxía (p = 0.60), (I) gasto enerxético (p = 0.47) ou (J) RER (p = 0.17) entre iMSN-D2R-KO controis de ratos e camaradas.

Análise estatística. (B e C) regresión lineal; (E, F e H – J) a proba de t de estudante non pareada; (G) ANOVA de medidas repetidas de dúas vías, ^*p <0.05.

Opcións da imaxe

Para explorar aínda máis a relación entre diferenzas preexistentes nos niveis de actividade e ganancia de peso, aproveitamos un modelo xenético de rato con supresión dirixida do Drd2 xene de iMSN (iMSN-Drd2-KO) pero conservou a expresión noutros tipos de células ( Dobbs et al., 2016   Lemos et al., 2016). Como se informou anteriormente, iMSN-Drd2-Os ratos MO movéronse menos que os controis dos compañeiros de camada nun campo aberto (p = 0.02; Figura 5E) e nas rodas corredoras da gaiola doméstica (p = 0.01; Figura 5F). Consistente cos experimentos anteriores, iMSN-Drd2Os ratos -KO non gañaron máis peso que os controis dos compañeiros de camada cando se colocaron nunha dieta rica en graxas (p = 0.23; Figura 5G). Para examinar a súa utilización de enerxía máis de preto, realizamos experimentos de calorimetria indirecta para comparar iMSN-Drd2-Ratos KO para controis de camarada. Non detectamos diferenzas significativas na inxestión de enerxía (p = 0.60), o gasto enerxético (p = 0.47) ou a relación de intercambio respiratorio (RER) (relación de CO₂ produción a O₂ consumo [VCO₂/ VO₂], p = 0.17) entre os ratos iMSN-Drd2-KO e os seus controis de camada, indicando que as reducións no movemento dos ratos IMSN-Drd2-KO non se traduciron en cambios na utilización de enerxía (Figuras 5HNA "5J). Finalmente, explorámos ata que punto as reducións máis pequenas do D2R estriatal (como as observadas nos nosos ratos obesos) poden regular o movemento e o aumento de peso. Para iso, empregamos unha liña de rato que orixina unha diminución de 30% - 40% de estriación Drd2 ARNm (iMSN-Drd2-Het) ( Lemos et al., 2016). Estes ratos tamén presentaron un movemento reducido, demostrando que un derrubamento parcial do D2R é suficiente para producir déficits motores (p = 0.04; Figura S5A). Semellante aos ratos iMSN-Drd2-KO, os ratos iMSN-Drd2-het non eran máis susceptibles ao aumento de peso inducido pola dieta rica en graxas (p = 0.89; Figura S5B). Concluímos que as alteracións en D2Rs estriais son suficientes para alterar o movemento, pero non o equilibrio calórico ou o peso corporal nos ratos.

Conversa

A obesidade está asociada á inactividade física, que a miúdo crese que contribúe ao aumento de peso. Ademais, hipótese dun aumento da adiposidade para contribuír a baixos niveis de actividade en persoas con obesidade (Ekkekakis e Lind, 2006   Westerterp, 1999), aínda que esta idea é difícil de probar directamente. Curiosamente, as persoas que perden peso a través da dieta (de Boer et al., 1986, de Groot et al., 1989, Martin et al., 2007   Redman et al., 2009) ou cirurxía bariátrica (Berglind et al., 2015, Berglind et al., 2016, Bond et al., 2010   Ramirez-Marrero et al., 2014) non aumenten os seus niveis de actividade, argumentando o peso da adiposidade causante da súa inactividade. Aquí investigamos a hipótese de que a obesidade inducida pola dieta causa inactividade física por déficits na transmisión DA estriatal. De acordo co traballo anterior, atopamos que a dieta crónica en alta graxa diminuíu a vinculación D2R estriada (Hajnal et al., 2008, Huang et al., 2006, Narayanaswami et al., 2013, van de Giessen et al., 2012   van de Giessen et al., 2013). Tamén observamos un déficit de disparo relacionado con motor de neuronas estriais en ratones obesos. Inhibindo iMSNs cunha G_iA actividade rescatada de DREADD combinada en ratones obesos demostrou que os ratos con exceso de adiposidade poden moverse normalmente cando se restablece a saída de ganglios basais. Non obstante, sorprendentemente, nin as medidas D2R basais nin a actividade física se correlacionaron co aumento de peso, un punto que observamos en múltiples experimentos. Isto contrasta cun estudo en ratas, que pode reflectir especies ou diferenzas experimentais (Michaelides et al., 2012). Concluímos que as reducións de D2Rs e a posterior inactividade física son consecuencias da obesidade, pero non están necesariamente ligadas a un aumento adicional de peso en ratos.

Un enlace entre a sinalización D2R alterada e a obesidade foi identificado por primeira vez en humanos e inicialmente foi replicado por outros (de Weijer et al., 2011, Kessler et al., 2014, Volkow et al., 2008   Wang et al., 2001). Non obstante, un traballo máis recente puxo en cuestión este achado (Caravaggio et al., 2015, Cosgrove et al., 2015, Dunn et al., 2012, Guo et al., 2014, Karlsson et al., 2015, Karlsson et al., 2016, Steele et al., 2010   Tuominen et al., 2015). Aínda que se necesita investigación adicional para comprender as discrepancias observadas entre os estudos clínicos, poden reflectir complexidades inherentes aos estudos clínicos e a imaxe PET. Por exemplo, o raclopride, o radio-ligando usado en moitos estudos, pode ser desprazado por DA endóxena e, polo tanto, a unión pode ser influenciada por diferenzas no ton basal de DA (Horstmann et al., 2015). Ademais, a relación entre os niveis de D2R e a obesidade pode ser non lineal, de xeito que os cambios nos D2R poden producirse de forma diferente en pacientes con diferentes niveis de obesidade (Horstmann et al., 2015). Finalmente, factores como a duración do sono (Wiers et al., 2016) e inxestión de cafeínaVolkow et al., 2015) tamén pode afectar a unión a D2R e non se informan nin se controlan na maioría dos estudos clínicos. Estas fontes de varianza pódense mitigar nos estudos en animais, que pintan un cadro consistente das reducións do ARNm de D2R (Mathes et al., 2010   Zhang et al., 2015), proteína (Adams et al., 2015   Johnson e Kenny, 2010), e unión ao receptor (Hajnal et al., 2008, Huang et al., 2006, Narayanaswami et al., 2013, van de Giessen et al., 2012   van de Giessen et al., 2013) en roedores obesos. O noso traballo amplía este corpo de literatura ao informar de que outros aspectos da sinalización de DA permanecen sen cambios nos ratos obesos, incluso nos que se reducen os D2Rs. Ademais, dada a nosa redución observada na unión de D2R ³H-spiperona, pero non hai cambio na proteína D2R total ou Drd2 ARNm, cremos que as alteracións do D2R poden implicar cambios post-translacionais como a interiorización do receptor. Aínda que os nosos datos suxiren que a unión reducida de D2R é suficiente para diminuír a actividade física na obesidade, a actividade física está influenciada por moitos factores, incluída a xenética e o ambiente. ( Bauman et al., 2012). Cremos que é pouco probable que os D2R sexan o único cambio neurolóxico asociado á inactividade física na obesidade. Por exemplo, os cambios nas hormonas circulantes como a grelina, a leptina ea insulina actúan sobre as neuronas dopaminérxicas e poden influír na actividade (Murray et al., 2014). Finalmente, aínda que non observamos cambios nos D1Rs, non podemos descartar cambios no disparo neuronal das neuronas das vías directas que tamén poden influír na actividade física.

Non está claro se a variación na dispoñibilidade de D2R predispón aos individuos a gañar peso. Os seres humanos co Drd2 O alelo Taq1A reduciu a dispoñibilidade de D2R e aumenta o risco de obesidade ( Blum et al., 1996, Carpenter et al., 2013, Noble et al., 1991, Stice et al., 2008   Thompson et al., 1997). Ademais, os ratos cunha deleción global de D2Rs gañaron máis peso nunha dieta rica en graxas, que foi atribuída á inactividade física (Beeler et al., 2015). En contraste, a variación individual (natural ou inducida xeneticamente) no D2R estriatal correlacionouse cos niveis de actividade no noso estudo, pero ningunha correlación coa ganancia de peso. Unha distinción importante no noso estudo foi que o noso modelo xenético eliminou D2Rs exclusivamente de iMSNs. Ademais, as medidas coidadosas do consumo de alimentos e do gasto enerxético revelaron que a manipulación de D2Rs nesas neuronas non alterou o equilibrio enerxético. Polo tanto, os estudos que demostran conexións entre a función global D2R e o equilibrio enerxético poden estar observando os efectos de D2Rs noutros tipos de células. Os nosos experimentos apoian a conclusión de que a inactividade física é unha consecuencia da obesidade, pero por si só non é suficiente para causar cambios no peso.

A pesar da crecente evidencia de que a actividade física está asociada a melloras na saúde cardiovascular e á diminución do risco de outras enfermidades crónicas, a actividade física permanece baixa en individuos con obesidade (Ekkekakis et al., 2016). A falta de intervencións eficaces para aumentar os niveis de actividade física reflíctese na falta de comprensión dos mecanismos celulares e moleculares que subxacen á inactividade física en individuos con obesidade. Aquí ligamos a inactividade física cos cambios na función dos ganglios basais, proporcionando unha explicación biolóxica para a falta de actividade física en individuos con obesidade.

Procedementos experimentais

Temas e dietas

En todos os estudos, os ratos aloxáronse individualmente en condicións estándar (ciclo de luz / escuridade de 12 horas, 21-22 ° C), con acceso ad libitum á comida e á auga. Os ratos recibiron unha dieta estándar de chow (5001 dieta de roedores; 3.00 kcal / g cun 29% de enerxía derivada de proteínas, un 13% de graxas e un 56% de hidratos de carbono; LabDiet) ou unha dieta rica en graxas (D12492; 5.24 kcal / g con 20% de enerxía derivada de proteínas, 60% de graxas e 20% de hidratos de carbono; Dietas de investigación). Todos os procedementos realizáronse de acordo coas directrices do Comité de Coidado e Uso dos Animais do Instituto Nacional de Diabetes e Enfermidades Dixestivas e Renais.

Transmisión condicional transxénica iMSN-Drd2-Os ratos KO foron xerados cruzando ratos que expresaban Cre impulsado por elementos reguladores do xene do receptor 2A de adenosina (Adora2a) (B6.FVB (Cg) -Tg (Adora2a-Cre) KG139Gsat / Mmucd; GENSAT; 036158-UCD) con ratos que levan condicional Drd2 alelos nulos B6.129S4 (FVB) -Drd2^{tm1.1Mrub / J}, JAX020631 (Bello et al., 2011).

Cálculos de composición corporal e gastos de enerxía

A composición corporal medíase cada dúas semanas usando ¹Espectroscopia de H-NMR (EchoMRI-100H; Sistemas médicos de eco). O gasto enerxético determinouse mediante un cálculo do balance enerxético (Guo et al., 2009   Ravussin et al., 2013):

Energyexpenditure = Metabolizableenergyintake− (Δfatmass + Δfat-freemass).

Activa MathJax

Actividade de campo aberto

Realizáronse probas en campo aberto en gaiolas PhenoTyper (30 × 30 cm; Noldus IT) e empregouse o software de análise de vídeo EthoVision (versión 11; Noldus IT) para rastrexar os ratos durante as probas.

Funcionamento da roda de gaiolas

A marcha das rodas mediuse colocando rodas sen fíos de perfil baixo (Med Associates) nas gaiolas dos ratos durante 72 horas cada 3 semanas (experimentos de obesidade inducidos pola dieta) ou continuamente (iMSN-Drd2-KO experimentos).

Medidas de sangue

O sangue da vea ocular de animais sacrificados utilizouse para o análise de metabolitos e hormonas séricos despois dun rápido de 4.

Autoradiografía do receptor de dopamina

As hemiseccións dereita crioseccionáronse ao nivel da estriada (-0.22, 0.14, 0.62 e 1.18 mm do bregma, cubrindo toda a extensión do estriado) en seccións de 12 mm. Desconxeláronse as diapositivas e preincubáronse en tampón de ensaio (20 mM HEPES, 154 mM NaCl e 0.1% de albumina sérica bovina [BSA]; pH 7.4) durante 20 minutos a 37 ° C. A unión a D1R avaliouse incubando láminas nun tampón de ensaio que contiña 1.5 nM marcado con tritio SCH-23390 (Perkin-Elmer) e 100 nM de cetanserina durante 60 minutos a 37 ° C. A unión a D2R avaliouse incubando láminas con 600 pM de spiperona marcada con tritio (Perkin-Elmer) e 100 nM de ketanserina durante 100 minutos a 37 ° C. Despois da incubación co radioligando adecuado, as láminas laváronse dúas veces durante 10 minutos a 4 ° C en tampón de lavado (10 mM Tris-HCl, 154 mM NaCl) e despois mergulláronse en auga (0 ° C) e deixáronse secar durante a noite. As láminas foron expostas a placas de imaxe de fósforo durante 7 (unión a D1R) ou 11 días (unión a D2R) e desenvolvéronse usando un fosfoimagen (ciclón; Perkin-Elmer). Para a análise, describíronse e analizáronse as áreas de interese mediante o software de análise de imaxe Optiquant (Perkin-Elmer).

Western Blotting

Os Western blot foron incubados con anticorpos anti-D2DR de rato (1: 500; Santa Cruz; sc-5303) ou anticorpo anti-GAPDH de rato (1: 1,000; Santa Cruz; sc-32233) e despois con IgG anti-rato de cabra HRP (1: 1,000; Santa Cruz; sc-2005). O sinal de quimioluminiscencia xerouse utilizando reactivos de detección de transferencia de transferencia quimioluminiscente ao oeste (Bio-Rad) e visualizouse con Chemidoc Imaging System (Bio-Rad).

Hibridación in situ

Utilizouse un kit de ensaio fluorescente multiplex RNAscope para a hibridación in situ (Advanced Cell Diagnostics). En breve, as seccións fixadas en formalina deshidratáronse en etanol seguidas da exposición á proteasa. As seccións hibridáronse despois con sondas de oligonucleótidos de ARNscope contra Drd2. Tras a hibridación da sonda, as diapositivas foron incubadas cun amplificador de sinal segundo os protocolos de RNAscope. As diapositivas laváronse entón con tampón de lavado RNAscope. Finalmente, montáronse diapositivas con contraseña DAPI.

Cromatografía líquida de alto rendemento con detección electroquímica

As hemiseccións esquerda foron procesadas para a detección de DA utilizando cromatografía líquida de alto rendemento en fase inversa con detección electroquímica (HPLC-EC), como se describiu anteriormente (Kilpatrick et al., 1986).

Inmunohistoquímica de tirosina hidroxilase

As seccións montadas sobre diapositivas fixáronse en formalina tamponada neutra ao 10%, aclaráronse en TBS 0.1 M (pH 7.5) e incubáronse nunha solución de anticorpo primario que contiña 3% de soro normal de burro, 0.3% Triton X-100 e anticorpo anti-tirosina hidroxilase de coello (1: 1,000; Millipore; MAB152) durante a noite a 23 ° C. Ao día seguinte, seccións de tecido laváronse en TBS e incubáronse nunha solución de anticorpos secundarios que contiñan 3% de soro de burro normal, 0.3% de Triton X-100 e cabra anti-coello conxugada con Alexa Fluor 555 (Millipore; AQ132F). Para cada rato, analizáronse dúas seccións estriais, agás catro ratos (dous HFD, dous Chow) onde só se analizou unha sección debido á mala calidade do tecido ou da imaxe.

Micro-PET

Os ratos foron inxectados ¹⁸F-fallypride cunha actividade específica de 2.5 ± 0.34 mCi / nmol nun volume de 130 μL a través da vea de cola mentres estaba baixo anestesia con isoflurano. A exploración micro-PET realizouse durante 2 horas, durante as cales se adquiriron 25 cadros para a súa análise. As curvas tempo-actividade para ¹⁸F-fallypride nas rexións de interese (ROIs) extraéronse usando o software AFNI (ROI)https://afni.nimh.nih.gov/afni) e os parámetros cinéticos foron axustados a un modelo de catro compartimentos usando un guión MATLAB personalizado (co cerebelo usado como tecido de referencia) para determinar o potencial de unión a D2R (Lammertsma e Hume, 1996).

In Vivo Electrofisioloxía

As gravacións fixéronse a partir dun conxunto de electrodos que contiña 32 microfíos de volframio revestidos de teflón (35 mm de diámetro) implantados unilateralmente no estriado dorsomedial (anterior / posterior [A / P]: +0.8; medial / lateral [M / L]: +1.5 ; dorsal / ventral [D / V]: −2.6 mm por bregma), e procesado con software comercial (Clasificador sen conexión e Neuroexplorador; Plexón).

Inxección de vector viral estereotóxica

Os ratos foron anestesiados brevemente por exposición a isoflurano. Unha vez anestesiado profundamente, fíxose unha única incisión ao longo da liña media, expúxose o cranio e realizouse unha craniotomía bilateral (A / P: +0.5; M / L: ± 1.5 mm por bregma). O vector viral que contén o inhibidor KOR-DREADD (Syn-DIO-hKORD-IRES-mCit-WPRE; 0.5 μL) inxectouse bilateralmente no estriado dorsomedial (D / V, −2.8 mm desde a parte superior do cranio) e deixouse expresar por 9 semanas antes da experimentación.

Microdiálise de fluxo sen líquido e análise de dopamina

As medicións de DA extracelular basal, DOPAC e HVA no estriado dorsal de ratos realizáronse mediante enfoque de microdiálise sen fluxo neto. As sondas unilaterais de 2 mm (corte de membrana de 18 kDa) implantáronse estereotaxicamente 1 semana despois da implantación da cánula con perfusión continua de fluído cefalorraquídeo artificial (aCSF) a 1 μL / min durante 4 horas antes da recollida da mostra (ver Procedementos Experimentais Suplementarios). O experimento de fluxo sen rede para medir os niveis de DA extracelular realizouse perfundindo aleatoriamente seis concentracións diferentes de DA (0, 2.5, 5, 10, 20 e 40 nM) en aCSF a través da sonda de diálise. Cada concentración de DA perfundiuse durante 30 min e despois mostras de 2 × 10-min recollidas en 2.5 μL de 100 mM de HCl máis 1 mM de EDTA para evitar a degradación da catecolamina e conxeladas a -80 ° C. Para análises neuroquímicas utilizouse un sistema HPLC isocrático unido á detección amperométrica (HPLC-EC; BASi LC-4C). Só se incluíron na análise os ratos con colocación adecuada da sonda (Figura S3E).

Estatística

A análise estatística realizouse usando GraphPad Prism (versión 6.07; software GraphPad). A non ser que se indique, empregáronse probas de estudante de dúas colas. En caso contrario, utilizáronse probas de t emparelladas de dúas colas, ANOVA de medidas repetidas de sentido único ou ANOVA de medidas repetidas de dúas vías cando correspondeu e como se indicou. Ás ANOVA seguíronlles probas t para comparacións post hoc. Os resultados consideráronse significativos nun alfa de p <0.05, ou con alfa determinado pola corrección de taxa de descubrimento falso (FDR) de Bejamini-Hochberg, no seu caso.

Contribucións do autor

DMF, KD, TJO, MS, AK, IPSGRVAA, MR, KDH e AVK, deseñaron os experimentos. DMF, KD, TJO, MS e AVK, realizaron e analizaron experimentos de comportamento. IP realizou experimentos de western blot. DMF e AVK realizaron e analizaron datos electrofisiolóxicos in vivo. DMF, J.-SL, JG e AVK realizaron e analizaron experimentos de micro-PET. DMF, KD, TJO e AVK escribiron o manuscrito. Todos os autores discutiron os resultados e comentaron o manuscrito.

Grazas

Este traballo contou co apoio do programa de investigación intramural do NIH, o Instituto Nacional de Diabetes e enfermidades dixestivas e renales (NIDDK). Queremos agradecer ao NIDDK Mouse Metabolism Core por avaliar metabolitos séricos e hormonas, Andres Buonanno coa súa axuda no deseño de experimentos de microdiálise de dopamina, e a doutora Judith Walters, doutora Kristin Dupre, e a doutora Claire Delaville por asistencia con HPLC. análise de contido de tecido de dopamina Queremos agradecer tamén ao doutor Scott Young o uso do seu equipo de laboratorio e a asistencia a estudos vinculantes. Grazas tamén aos membros do laboratorio AVK, Marc Reitman, e Nick Ryba pola súa contribución sobre deseño experimental e lectura coidada do manuscrito.

Información adicional

Documento S1. Cifras e procedementos experimentais suplementarios S1 – S5.

Axuda con arquivos PDF

Opcións

Documento S2. Artigo máis información complementaria.

Axuda con arquivos PDF

Opcións

References

1.      

• Adams et al., 2015
• WK Adams, JL Sussman, S. Kaur, AM D'souza, TJ Kieffer, CA Winstanley
• A inxestión calorífica a longo prazo dunha dieta rica en graxas en ratas reduce o control de impulsos e a sinalización do receptor estriatal D2 ventral: dous marcadores da vulnerabilidade da adicción
• EUR. J. Neurosci., 42 (2015), pp. 3095 – 3104
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (5)

2.      

• Alexander e Crutcher, 1990
• GE Alexander, MD Crutcher
• Arquitectura funcional de circuítos de ganglios basais: substratos neurais de procesamento paralelo
• Tendencias Neurosci., 13 (1990), pp. 266 – 271
• Artigo

|

 PDF (809 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (2478)

3.      

• Bauman et al., 2012
• AE Bauman, RS Reis, JF Sallis, JC Wells, RJ Loos, BW Martin, Grupo de traballo da serie de actividade física Lancet
• Correlacións da actividade física: por que hai algunhas persoas físicamente activas e outras non?
• Lancet, 380 (2012), pp. 258-271
• Artigo

|

 PDF (253 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (578)

4.      

• Beeler et al., 2015
• JA Beeler, RP Faust, S. Turkson, H. Ye, X. Zhuang
• O receptor D2 de baixa dopamina aumenta a vulnerabilidade á obesidade mediante unha actividade física reducida e non aumentou a motivación do apetito
• Biol. Psiquiatría, 79 (2015), pp. 887 – 897
•  

5.      

• Bello et al., 2011
• EP Bello, Y. Mateo, DM Gelman, D. Noaín, JH Shin, MJ Low, VA Alvarez, DM Lovinger, M. Rubinstein
• Supersensibilidade á cocaína e maior motivación da recompensa en ratos que carecen de autoreceptores de dopamina D2
• Nat. Neurosci., 14 (2011), pp. 1033-1038
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (121)

6.      

• Berglind et al., 2015
• D. Berglind, M. Willmer, U. Eriksson, A. Thorell, M. Sundbom, J. Uddén, M. Raoof, J. Hedberg, P. Tynelius, E. Näslund, F. Rasmussen
• Valoración lonxitudinal da actividade física en mulleres sometidas a un bypass gástrico de Roux-en-Y
• Obes. Cirurxía., 25 (2015), pp. 119 – 125
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (7)

7.      

• Berglind et al., 2016
• D. Berglind, M. Willmer, P. Tynelius, A. Ghaderi, E. Naslund, F. Rasmussen
• Medidas de acelerómetro versus niveis de actividade física e comportamento sedentario autoinformados en mulleres antes e 9 meses despois da derivación gástrica roux-en-Y
• Obes. Cirurxía., 26 (2016), pp. 1463 – 1470
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

8.      

• Blum et al., 1996
• K. Blum, ER Braverman, RC Wood, J. Gill, C. Li, TJ Chen, M. Taub, AR Montgomery, PJ Sheridan, JG Cull
• Aumento da prevalencia do alelo Taq I A1 do xene receptor da dopamina (DRD2) na obesidade con trastorno de uso de sustancias comóbidas: un informe preliminar
• Farmacoxenética, 6 (1996), pp. 297 – 305
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (101)

9.      

• Blum et al., 2011
• K. Blum, Y. Liu, R. Shriner, MS Gold
• A activación dopaminérxica do circuíto de recompensas regula o comportamento da ansia de alimentos e drogas
• Curr. Pharm. Páx., 17 (2011), pp. 1158 – 1167
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (41)

10.   

• Bond et al., 2010
• DS Bond, JM Jakicic, JL Unick, S. Vithiananthan, D. Pohl, GD Roye, BA Ryder, HC Sax, RR Wing
• Cambios previos á actividade física postoperatoria en pacientes con cirurxía bariátrica: autoinformación e medidas obxectivas
• Obesidade (Spring Spring), 18 (2010), pp 2395 – 2397
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (65)

11.   

• Brownson et al., 2005
• RC Brownson, TK Boehmer, DA Luke
• Disminución das taxas de actividade física nos Estados Unidos: ¿Cales son os contribuíntes?
• Annu Saúde Pública, 26 (2005), pp. 421 – 443
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (438)

12.   

• Caravaggio et al., 2015
• F. Caravaggio, S. Raitsin, P. Gerretsen, S. Nakajima, A. Wilson, A. Graff-Guerrero
• A unión ventral do estriato dun agonista do receptor da dopamina D2 / 3 pero non antagonista prevé un índice de masa corporal normal
• Biol. Psiquiatría, 77 (2015), pp. 196 – 202
• Artigo

|

 PDF (424 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (12)

13.   

• Carlin et al., 2013
• J. Carlin, TE Hill-Smith, I. Lucki, TM Reyes
• A reversión da disfunción do sistema de dopamina en resposta a unha dieta rica en graxas
• Obesidade (Spring Spring), 21 (2013), pp 2513 – 2521
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (12)

14.   

• Carpenter et al., 2013
• CL Carpintero, AM Wong, Z. Li, EP Noble, D. Heber
• Asociación de xenes do receptor da dopamina D2 e do receptor da leptina con obesidade clínicamente grave
• Obesidade (Spring Spring), 21 (2013), pp. E467 – E473
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (18)

15.   

• Constantinescu et al., 2011
• CC Constantinescu, RA Coleman, ML Pan, J. Mukherjee
• Imaxe microPET estriatal e extrastriatal dos receptores de dopamina D2 / D3 no cerebro da rata con [¹⁸F] fallypride e [fallypride and]¹⁸F] desmethoxyfallypride
• Synapse, 65 (2011), pp. 778-787
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (18)

16.   

• Cosgrove et al., 2015
• KP Cosgrove, MG Veldhuizen, CM Sandiego, ED Morris, DM Pequeno
• Relacións opostas do IMC con potencial de unión do receptor D2 / 3 BOLD e dopamina no estriado dorsal
• Synapse, 69 (2015), pp. 195-202
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (13)

17.   

• Cui et al., 2013
• G. Cui, SB Jun, X. Jin, MD Pham, SS Vogel, DM Lovinger, RM Costa
• Activación simultánea de vías directas e indirectas estriadas durante a iniciación da acción
• Natureza, 494 (2013), pp. 238 – 242
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (237)

18.   

• Davis et al., 2008
• JF Davis, AL Tracy, JD Schurdak, MH Tschöp, JW Lipton, DJ Clegg, SC Benoit
• A exposición a niveis elevados de graxa na dieta atenúa a recompensa por psicostimulantes e o volume de negocio de dopamina mesolímbica na rata
• Behav. Neurosci., 122 (2008), pp. 1257 – 1263
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (149)

19.   

• de Boer et al., 1986
• JO de Boer, AJ van Es, LC Roovers, JM van Raaij, JG Hautvast
• Adaptación do metabolismo enerxético das mulleres con sobrepeso á inxestión de baixo consumo, estudada con calorímetros de corpo enteiro
• Am. J. Clin. Nutr., 44 (1986), pp. 585-595
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (57)

20.   

• de Groot et al., 1989
• LC de Groot, AJ van Es, JM van Raaij, JE Vogt, JG Hautvast
• Adaptación do metabolismo enerxético das mulleres con exceso de peso para a inxestión de enerxía alternativa e continua
• Am. J. Clin. Nutr., 50 (1989), pp. 1314-1323
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (18)

1.      

• de Rezende et al., 2014
• LF de Rezende, JP Rey-López, VK Matsudo, O. do Carmo Luiz
• Comportamento sedentario e resultados de saúde entre os maiores: unha revisión sistemática
• BMC Public Health, 14 (2014), p. 333
•  

2.      

• de Weijer et al., 2011
• BA de Weijer, E. van de Giessen, TA van Amelsvoort, E. Boot, B. Braak, IM Janssen, A. van de Laar, E. Fliers, MJ Serlie, J. Booij
• A dispoñibilidade dos receptores de dopamina D2 / 3 en estratosis máis baixos en obesos comparada cos suxeitos non obesos
• EJNMMI Res., 1 (2011), p. 37
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (41)

3.      

• DeLong, 1990
• MR DeLong
• Modelos de primados de trastornos do movemento do orixe dos ganglios basais
• Tendencias Neurosci., 13 (1990), pp. 281 – 285
• Artigo

|

 PDF (711 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (2315)

4.      

• Dobbs et al., 2016
• LK Dobbs, AR Kaplan, JC Lemos, A. Matsui, M. Rubinstein, VA Alvarez
• A regulación da dopamina da inhibición lateral entre as neuronas estriaxeas permite accións estimulantes da cocaína
• Neuron, 90 (2016), pp. 1100-1113
• Artigo

|

 PDF (3707 K)

|

Ver rexistro en Scopus

5.      

• Dunn et al., 2012
• JP Dunn, RM Kessler, ID Feurer, ND Volkow, BW Patterson, MS Ansari, R. Li, P. Marks-Shulman, NN Abumrad
• Relación entre o potencial de unión do receptor 2 de tipo dopamina con hormonas neuroendocrinas en ayuno e sensibilidade á insulina na obesidade humana
• Coidados de diabetes, 35 (2012), pp. 1105 – 1111
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (48)

6.      

• Ekkekakis e Lind, 2006
• P. Ekkekakis, E. Lind
• O exercicio non se sente o mesmo cando ten sobrepeso: o impacto da intensidade auto-seleccionada e imposta no efecto e esforzo
• Int. J. Obes., 30 (2006), pp. 652-660
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (170)

7.      

• Ekkekakis et al., 2016
• P. Ekkekakis, S. Vazou, WR Bixby, E. Georgiadis
• O misterioso caso da directriz de saúde pública (case) completamente ignorada: esixe un programa de investigación sobre as causas da extrema evitación da actividade física na obesidade
• Obes. Rev., 17 (2016), pp. 313 – 329
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

8.      

• Franklin e Paxinos, 1997
• KBJ Franklin, G. Paxinos
• O cerebro do rato en coordenadas estereotáxicas
• Prensa académica (1997)
•  

9.      

• Gerfen et al., 1990
• CR Gerfen, TM Engber, LC Mahan, Z. Susel, TN Chase, FJ Monsma Jr., DR Sibley
• Expresión xénica regulada polo receptor de dopamina D1 e D2 de neuronas estriatonigrais e estriatopalidais
• Science, 250 (1990), pp. 1429-1432
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (1918)

10.   

• Guo et al., 2009
• J. Guo, W. Jou, O. Gavrilova, KD Hall
• Obesidade persistente inducida por dieta nos ratos machos C57BL / 6 resultantes de dietas obegigénicas temporais
• PLoS One, 4 (2009), p. e5370
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (47)

11.   

• Guo et al., 2014
• J. Guo, WK Simmons, P. Herscovitch, A. Martin, KD Hall
• Patróns de correlación do receptor tipo dopamina estriatal como D2 coa obesidade humana e un comportamento alimentario oportunista
• Mol. Psiquiatría, 19 (2014), pp. 1078-1084
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (37)

12.   

• Hajnal et al., 2008
• A. Hajnal, WM Margas, M. Covasa
• Función alterada do receptor de dopamina D2 e unión en ratas obesas de OLETF
• Res. Cerebral. Bull., 75 (2008), pp. 70 – 76
• Artigo

|

 PDF (311 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (24)

13.   

• Hornykiewicz, 2010
• O. Hornykiewicz
• Unha breve historia de levodopa
• J. Neurol., 257 (Suppl 2) (2010), pp. S249 – S252
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (40)

14.   

• Horstmann et al., 2015
• A. Horstmann, WK Fenske, MK Hankir
• Argumento para unha relación non lineal entre a gravidade da obesidade humana eo ton dopaminérgico
• Obes. Rev., 16 (2015), pp. 821 – 830
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (12)

15.   

• Huang et al., 2006
• XF Huang, K. Zavitsanou, X. Huang, Y. Yu, H. Wang, F. Chen, AJ Lawrence, C. Deng
• Densidades de unión do transportista de dopamina e do receptor D2 en ratos propensos ou resistentes á obesidade inducida por unha dieta rica en graxas
• Behav. Brain Res., 175 (2006), pp. 415 – 419
• Artigo

|

 PDF (254 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (73)

16.   

• Johnson e Kenny, 2010
• PM Johnson, PJ Kenny
• Os receptores Dopamine D2 na disfunción de recompensa como adicción e comidas compulsivas en ratas obesas
• Nat. Neurosci., 13 (2010), pp. 635-641
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (549)

17.   

• Karlsson et al., 2015
• HK Karlsson, L. Tuominen, JJ Tuulari, J. Hirvonen, R. Parkkola, S. Helin, P. Salminen, P. Nuutila, L. Nummenmaa
• A obesidade está asociada a unha diminución na dispoñibilidade do receptor de dopamina D de opodoide, pero sen alteración no cerebro
• J. Neurosci., 35 (2015), pp. 3959–3965
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (29)

18.   

• Karlsson et al., 2016
• HK Karlsson, JJ Tuulari, L. Tuominen, J. Hirvonen, H. Honka, R. Parkkola, S. Helin, P. Salminen, P. Nuutila, L. Nummenmaa
• A perda de peso despois da cirurxía bariátrica normaliza os receptores opioides cerebrais na obesidade mórbida
• Mol. Psiquiatría, 21 (2016), pp. 1057-1062
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (3)

19.   

• Kenny, 2011
• PJ Kenny
• Mecanismos de recompensa na obesidade: novas ideas e orientacións futuras
• Neuron, 69 (2011), pp. 664-679
• Artigo

|

 PDF (798 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (220)

20.   

• Kessler et al., 2014
• RM Kessler, DH Zald, MS Ansari, R. Li, RL Cowan
• Cambios nos niveis de liberación de dopamina e receptores de dopamina D2 / 3 co desenvolvemento dunha obesidade lixeira
• Synapse, 68 (2014), pp. 317-320
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (18)

1.      

• Kilpatrick et al., 1986
• IC Kilpatrick, MW Jones, OT Phillipson
• Método de análise semiautomático para catecolaminas, indoleaminas e algúns metabolitos prominentes en rexións microdissecidas do sistema nervioso: unha técnica de HPLC isocrática empregando detección coulométrica e preparación mínima de mostras
• J. Neurochem., 46 (1986), pp. 1865–1876
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (167)

2.      

• Kravitz et al., 2010
• AV Kravitz, BS Freeze, PR Parker, K. Kay, MT Thwin, K. Deisseroth, AC Kreitzer
• Regulación dos comportamentos motores parkinsonianos mediante o control optogenético dos circuítos dos ganglios basais
• Natureza, 466 (2010), pp. 622 – 626
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (591)

3.      

• Lammertsma e Hume, 1996
• AA Lammertsma, SP Hume
• Modelo de tecido de referencia simplificado para estudos de receptores de PET
• Neuroimaxe, 4 (1996), pp. 153 – 158
• Artigo

|

 PDF (79 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (1170)

4.      

• Le Moine e Bloch, 1995
• C. Le Moine, B. Bloch
• Expresión xenética dos receptores de dopamina D1 e D2 no estriado de rato: as sondas sensibles do ARNc mostran unha segregación prominente de ARNm D1 e D2 en distintas poboacións neuronais do estriado dorsal e ventral
• J. Comp. Neurol., 355 (1995), pp. 418-426
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (382)

5.      

• Lemos et al., 2016
• JC Lemos, DM Amigo, AR Kaplan, JH Shin, M. Rubinstein, AV Kravitz, VA Alvarez
• A transmisión de GABA mellorada conduce á bradicinesia tras a perda de sinalización do receptor D2 de dopamina
• Neuron, 90 (2016), pp. 824-838
• Artigo

|

 PDF (3728 K)

|

Ver rexistro en Scopus

6.      

• Levey et al., 1993
• AI Levey, SM Hersch, DB Rye, RK Sunahara, HB Niznik, CA Kitt, DL Price, R. Maggio, MR Brann, BJ Ciliax
• Localización de receptores de dopamina D1 e D2 no cerebro con anticorpos específicos de subtipo
• Proc. Natl. Acad. Sci. Estados Unidos, 90 (1993), pp. 8861 – 8865
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (410)

7.      

• Martin et al., 2007
• CK Martin, LK Heilbronn, L. de Jonge, JP DeLany, J. Volaufova, SD Anton, LM Redman, SR Smith, E. Ravussin
• Efecto da restricción calórica na taxa metabólica de repouso e na actividade física espontánea
• Obesidade (Spring Spring), 15 (2007), pp 2964 – 2973
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (99)

8.      

• Mathes et al., 2010
• WF Mathes, DL Nehrenberg, R. Gordon, K. Hua, T. Garland Jr., D. Pomp
• Disregulación dopaminérxica en ratos criados selectivamente para exercicios excesivos ou obesidade
• Behav. Brain Res., 210 (2010), pp. 155 – 163
• Artigo

|

 PDF (510 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (48)

9.      

• Michaelides et al., 2012
• M. Michaelides, PK Thanos, R. Kim, J. Cho, M. Ananth, GJ Wang, ND Volkow
• A imaxe PET prevé o futuro peso corporal e a preferencia de cocaína
• Neuroimaxe, 59 (2012), pp. 1508 – 1513
• Artigo

|

 PDF (765 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (24)

10.   

• Murray et al., 2014
• S. Murray, A. Tulloch, MS Gold, NM Avena
• Mecanismos hormonais e neuronais de recompensa de alimentos, comportamento alimentario e obesidade
• Nat. Rev. Endocrinol., 10 (2014), pp. 540 – 552
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (36)

11.   

• Narayanaswami et al., 2013
• V. Narayanaswami, AC Thompson, LA Cassis, MT Bardo, LP Dwoskin
• Obesidade inducida pola dieta: función transportadora de dopamina, impulsividade e motivación
• Int. J. Obes., 37 (2013), pp. 1095-1103
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (26)

12.   

• Noble et al., 1991
• EP Nobre, K. Blum, T. Ritchie, A. Montgomery, PJ Sheridan
• Asociación alélica do xene receptor da dopamina D2 con características de unión ao receptor no alcoholismo
• Arco. Gen Psychiatry, 48 (1991), pp. 648-654
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (470)

13.   

• Ramirez-Marrero et al., 2014
• FA Ramirez-Marrero, J. Miles, MJ Joyner, TB Curry
• Actividade física auto-reportada e obxectiva na cirurxía de derivación postgastrica, adultos obesos e fraco: asociación coa composición corporal e aptitude cardiorrespiratoria
• J. Phys. Actuar. Saúde, 11 (2014), pp. 145-151
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (3)

14.   

• Ravussin et al., 2013
• Y. Ravussin, R. Gutman, CA LeDuc, RL Leibel
• Estimación do gasto enerxético en ratos utilizando unha técnica de balance enerxético
• Int. J. Obes., 37 (2013), pp. 399-403
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (15)

15.   

• Redman et al., 2009
• LM Redman, LK Heilbronn, CK Martin, L. de Jonge, DA Williamson, JP Delany, E. Ravussin, Pennington Equipo CALERIE
• Compensacións metabólicas e de comportamento en resposta á restricción calórica: implicacións no mantemento da perda de peso
• PLoS One, 4 (2009), p. e4377
•  

16.   

• Sharma et al., 2015
• S. Sharma, A. Merghani, L. Mont
• Exercicio e corazón: o bo, o malo eo feo
• EUR. Corazón J., 36 (2015), pp. 1445 – 1453
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (21)

17.   

• Steele et al., 2010
• KE Steele, GP Prokopowicz, MA Schweitzer, TH Magunsuon, AO Lidor, H. Kuwabawa, A. Kumar, J. Brasic, DF Wong
• Alteracións dos receptores centrais de dopamina antes e despois da cirurxía de derivación gástrica
• Obes. Cirurxía., 20 (2010), pp. 369 – 374
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (85)

18.   

• Stice et al., 2008
• E. Stice, S. Spoor, C. Bohon, DM Pequeno
• A relación entre obesidade e resposta estriatal ao alimento é moderada polo alelo TaqIA A1
• Science, 322 (2008), pp. 449-452
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (412)

19.   

• Thompson et al., 1997
• J. Thompson, N. Thomas, A. Singleton, M. Piggott, S. Lloyd, EK Perry, CM Morris, RH Perry, IN Ferrier, JA Court
• Xene do receptor de dopamina D2 (DRD2) Polimorfismo de Taq1 A: unión reducida do receptor D2 de dopamina no estriado humano asociado co alelo A1
• Farmacoxenética, 7 (1997), pp. 479 – 484
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (398)

20.   

• Tuominen et al., 2015
• L. Tuominen, J. Tuulari, H. Karlsson, J. Hirvonen, S. Helin, P. Salminen, R. Parkkola, J. Hietala, P. Nuutila, L. Nummenmaa
• Interacción aberrante de dopamina-opiáceos mesolímbica na obesidade
• Neuroimaxe, 122 (2015), pp. 80 – 86
• Artigo

|

 PDF (623 K)

|

Ver rexistro en Scopus

1.      

• van de Giessen et al., 2012
• E. van de Giessen, SE a Fleur, K. de Bruin, W. van den Brink, J. Booij
• As dietas de alta cantidade de graxa e de libre elección afectan a dispoñibilidade dos receptores estriatales de dopamina D2 / 3, inxestión calórica e adiposidade
• Obesidade (Spring Spring), 20 (2012), pp 1738 – 1740
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (19)

2.      

• van de Giessen et al., 2013
• E. van de Giessen, SE a Fleur, L. Eggels, K. de Bruin, W. van den Brink, J. Booij
• A proporción elevada de graxa / carbohidratos, pero non a ingesta total de enerxía, induce a dispoñibilidade dun receptor de dopamina D2 / 3 en estratosis inferiores na obesidade inducida pola dieta
• Int. J. Obes., 37 (2013), pp. 754-757
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (16)

3.      

• Volkow e Wise, 2005
• ND Volkow, RA Wise
• Como pode a drogodependencia axudarnos a entender a obesidade?
• Nat. Neurosci., 8 (2005), pp. 555-560
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (584)

4.      

• Volkow et al., 2008
• ND Volkow, GJ Wang, F. Telang, JS Fowler, PK Thanos, J. Logan, D. Alexoff, YS Ding, C. Wong, Y. Ma, K. Pradhan
• Os receptores D2 dos estriatales de dopamina baixos están asociados co metabolismo prefrontal en suxeitos obesos: posibles factores que contribúen
• Neuroimaxe, 42 (2008), pp. 1537 – 1543
• Artigo

|

 PDF (721 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (240)

5.      

• Volkow et al., 2015
• ND Volkow, GJ Wang, J. Logan, D. Alexoff, JS Fowler, PK Thanos, C. Wong, V. Casado, S. Ferre, D. Tomasi
• A cafeína aumenta a dispoñibilidade do receptor de dopamina D2 / D3 no cerebro humano
• Trad. Psiquiatría, 5 (2015), p. e549
• CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (4)

6.      

• Vucetic et al., 2012
• Z. Vucetic, JL Carlin, K. Totoki, TM Reyes
• Disregulación epigenética do sistema de dopamina na obesidade inducida pola dieta
• J. Neurochem., 120 (2012), pp. 891–898
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (53)

7.      

• Wang et al., 2001
• GJ Wang, ND Volkow, J. Logan, NR Pappas, CT Wong, W. Zhu, N. Netusil, JS Fowler
• Dopamina cerebral e obesidade
• Lancet, 357 (2001), pp. 354-357
• Artigo

|

 PDF (274 K)

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (955)

8.      

• Wang et al., 2014
• GJ Wang, D. Tomasi, A. Convit, J. Logan, CT Wong, E. Shumay, JS Fowler, ND Volkow
• O IMC modula os cambios dopaminérgicos dependentes da caloría dos acumbens a partir da inxestión de glicosa
• PLoS One, 9 (2014), p. e101585
• CrossRef

9.      

• Westerterp, 1999
• KR Westerterp
• Obesidade e actividade física
• Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord., 23 (Suppl 1) (1999), páxinas 59 – 64
• Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (60)

10.   

• Wiers et al., 2016
• CE Wiers, E. Shumay, E. Cabrera, E. Shokri-Kojori, TE Gladwin, E. Skarda, SI Cunningham, SW Kim, TC Wong, D. Tomasi, et al.
• A redución da duración do sono media a diminución da dispoñibilidade dos receptores estriatales D2 / D3 en consumidores de cocaína
• Trad. Psiquiatría, 6 (2016), p. e752
• CrossRef

11.   

• Zhang et al., 2015
• C. Zhang, NL Wei, Y. Wang, X. Wang, JG Zhang, K. Zhang
• A estimulación cerebral profunda do núcleo accumbens induce efectos anti-obesidade en ratas obesas con alteración da neurotransmisión de dopamina
• Neurosci. Lett., 589 (2015), pp. 1 – 6
• Artigo

|

 PDF (668 K)

|

CrossRef

|

Ver rexistro en Scopus

 | 

Citando artigos (2)

Autor correspondente

9

Co-primeiro autor

10

Contacto de plomo

Publicado por Elsevier Inc

Nota para os usuarios:
As probas corrixidas son artigos en prensa que conteñen as correccións dos autores. Aínda hai que engadir os detalles finais da cita, por exemplo, o volume e / ou número do número, o ano de publicación e os números de páxina e o texto pode cambiar antes da publicación final.

Aínda que as probas corrixidas aínda non teñen todos os detalles bibliográficos dispoñibles, xa se poden citar usando o ano de publicación en liña e o DOI, do seguinte xeito: autor (es), título do artigo, Publicación (ano), DOI. Consulte o estilo de referencia da revista para ver o aspecto exacto destes elementos, a abreviatura dos nomes das revistas e o uso da puntuación.

Cando o artigo final sexa asignado aos volumes / números da publicación, eliminarase a versión do artigo en prensa e aparecerá a versión final nos volumes / números publicados asociados á publicación. A data en que se publicou o artigo por primeira vez en liña levarase a cabo.