As imaxes de resonancia magnética melloradas con manganeso para mapear os patróns de actividade cerebral enteiros asociados coa inxestión de comidas preparadas en ratas alimentadas con ad libitum (2013)

PLoS One. 2013; 8 (2): e55354. doi: 10.1371 / journal.pone.0055354. Epub 2013 Feb 7.

Hoch T, Kreitz S, Gaffling S, Pischetsrieder M, Hess A.

fonte

Departamento de Química e Farmacia, Comida División de Química, Centro Emil Fischer, Universidade de Erlangen-Nuremberg, Erlangen, Alemania.

Abstracto

A hiperfagia non homeostática, que é un dos principais contribuíntes á hiperalimentación relacionada coa obesidade, é asociados coa composición molecular da dieta que inflúe, por exemplo, no contido enerxético. Así, específico alimento elementos como lanche alimento pode inducir alimento inxestión independente do estado de saciedade. Elucidar mecanismos de como lanche alimento pode inducir non homeostática alimento inxestión, foi probado se reforzado con manganeso magnético resonancia imaxe (MEMRI) era adecuado para mapeamento o enteiro cerebro actividade relacionados co estándar e lanche alimento inxestión en situación de comportamento normal. A aplicación da solución MnCl (2) por bombas osmóticas asegurou isto alimento inxestión o tratamento non afectou significativamente. Despois da normalización da puntuación z e un rexistro tridimensional non afín a unha rata cerebro atlas, valores de gris significativamente diferentes de 80 predefinidos cerebro graváronse as estruturas ad libitum alimentado ratos tras o inxestión de chips de pataca en comparación co chow estándar a nivel de grupo. Dez destas áreas xa foran conectadas alimento inxestión, en particular á hiperfagia (por exemplo, hipotálamo dorsomedial ou núcleo tálamo paraventricular anterior) ou ao sistema de saciedade (por exemplo, núcleo hipotalámico arqueado ou tracto solitario); As áreas de 27 estaban relacionadas con recompensa / vicio, incluíndo o núcleo e a cuncha do núcleo accumbens, o pallidum ventral e o estriado ventral (caudado e putamen). Once áreas asociados a durmir mostrou unha redución significativa de Mn (2 +) - acumulación e seis áreas relacionadas co locomotor actividade mostrou un aumento significativo do Mn (2 +) - acumulación despois do inxestión de patacas fritas. Estes últimos cambios foron asociados cun locomotor significativamente superior actividade. O MEMRI asistido por bomba osmótica resultou ser unha técnica prometedora para o funcionamento mapeamento of enteiro cerebro actividade patróns asociados a nutricional inxestión baixo comportamento normal.

Cita: Hoch T, Kreitz S, Gaffling S, Pischetsrieder M, Hess A (2013) Imaxe por resonancia magnética reforzada con manganeso para a cartografía de patróns de actividade cerebral completa asociados á inxestión de merenda en ratas Fed Lib Lib. PLoS ONE 8 (2): e55354. doi: 10.1371 / journal.pone.0055354

Editor: Julie A. Chowen, Hosptial Infantil Universitario Niño Jesús, CIBEROBN, España

Recibido: Agosto 16, 2012; Aceptada: Decembro 30, 2012; Publicado en: Febreiro 7, 2013

Copyright: © 2013 Hoch et al. Este é un artigo de acceso aberto distribuído baixo os termos da licenza de recoñecemento de Creative Commons, que permite o uso, distribución e reprodución sen restricións en calquera soporte, sempre que se acrediten o autor e orixe orixinais.

Financiamento: O estudo forma parte do proxecto Neurotrition, que é apoiado pola Iniciativa Fields Emerging da Universidade Friedrich-Alexander-Erlangen-Nuremberg. Os financiadores non tiñan ningún papel no deseño do estudo, na recollida e análise de datos, na decisión de publicar ou na preparación do manuscrito.

Intereses competidores: Os autores declararon que non existen intereses en competencia.

introdución

A hiperfagia, que está asociada coa hiperalimentación calórica, contribúe substancialmente ao desenvolvemento de complicacións relacionadas coa obesidade e a obesidade nas sociedades industriais. [1]. Mentres que a hiperfagia homeostática é causada por unha perturbación do sistema homeostático que regula a fame e a saciedade, a hiperfagia hedónica é bastante independente da saciedade [1]. Non obstante, os mecanismos que sobrepasan a regulación fisiolóxica da fame e da inxestión de alimentos non están completamente aclarados. Baixo certas condicións, a inxestión de alimentos pode activar o sistema de recompensa do cerebro dun xeito que compensa o control homeostático do apetito [2]. A hiperfagia hedónica resultante está influenciada por varios factores como o estado emocional do consumidor, as condicións de saúde mental ou a privación do sono [1]. Ademais, a composición de alimentos moleculares e a densidade de enerxía parecen ser factores importantes na inducción da hiperfagia hedónica. Está ben documentado que o "alimento agradable" pode inducir hiperfagia en humanos e animais [3], [4]. Os episodios de atracón en humanos, por exemplo, a miúdo inclúen alimentos ricos en graxas ou azucres, ou ambos [5].

A inxestión de alimentos no estado de fame provoca fuertemente un complexo sistema de recompensas no cerebro, incluíndo o núcleo accumbens e o pallidum ventral no estriado ventral, a área tegmental ventral no cerebro medio, o córtex prefrontal, o hipocampo ea amígdala [6]. Estes patróns de activación son moi probablemente asociados á liberación de dopamina, por exemplo no núcleo accumbens ou o estriado dorsal [7], [8], [9], procesos que tamén se activan na adicción ás drogas [10]. En condicións homeostáticas, con todo, os sinais de saciedade desencadean estruturas cerebrais como o tronco cerebral caudal, o hipotálamo, particularmente o núcleo arqueado ou o núcleo tractus solitarius, que limitan a inxestión de alimentos, por exemplo, diminuíndo o seu valor de recompensa [6], [11]. Observouse que certos tipos de alimentos, como unha dieta con alto contido de graxa ou unha cafetería, inducen a ingesta de alimentos e / ou enerxía aumentando a obesidade. As ratas alimentadas con ad libitum, por exemplo, que tiñan acceso restrinxido a unha dieta de cafetería, desenvolveron un comportamento de alimentación parecido ao atracón durante o período de acceso. [10]. Deste xeito, pódese supoñer que algúns compoñentes alimentarios poden anular a regulación de saciedade, o que resulta nunha inxestión de alimentos independente da fame.

Curiosamente, demostrouse que nos ratos, o aumento inicial da inxestión de calorías e alimentos inducidos pola graxa é compensado despois dun período de dúas semanas. [12]. Deste xeito, suxeriuse que a inxestión crónica dunha dieta rica en graxas diminúe o efecto gratificante dos alimentos, o que leva á desorganización do patrón de alimentación que eventualmente resulta en sobrepeso. [13].

Co fin de facer fronte á hiperfagia hedónica como principal factor de obesidade nas sociedades industriais e as súas implicacións para o sistema sanitario, é importante comprender os procesos cerebrais que son provocados por certos tipos de alimentos asociados a episodios hedónicos. A aplicación de técnicas de imaxe cerebral non invasiva como a resonancia magnética funcional (MRI) para analizar a influencia da inxestión de alimentos na actividade cerebral está limitada no seu enfoque clásico impulsado polo estímulo pola sincronización necesaria da inxestión de alimentos e da resonancia magnética. Para controlar os efectos a longo prazo na actividade cerebral, empregouse unha resonancia magnética reforzada con manganeso (MEMRI). O axente de contraste manganeso acumúlase nas estruturas cerebrais activadas e reflicte unha medida integral da actividade neuronal [14], [15], [16]. O MEMRI permite a separación da análise da actividade cerebral coa medición de resonancia magnética. Para este propósito, MnCl2 é inxectado antes da medición por resonancia magnética. Ións de manganeso (Mn2+) teñen un radio iónico similar e a mesma carga que os ións calcio (Ca.)2+). Por iso, Mn2+ transpórtase a través de canles de calcio con tensión pechadas en células excitables. En contraste con Ca2+, con todo, Mn2+ acumúlase nas células proporcionalmente á súa actividade e pode rexistrarse posteriormente por resonancia magnética debido ao seu carácter paramagnético. Así, a actividade cerebral asociada a eventos que tiveron lugar ata varios días antes da medición por resonancia magnética pode ser rexistrada. Polo tanto, a principal vantaxe desta técnica é a posibilidade de separar o estímulo (alimentación) e a medición de resonancia magnética. Ademais, Mn2+ pode ser trasladado por transporte axonal a outras áreas do cerebro. A principal desvantaxe de Mn2+non obstante, é a súa citotoxicidade, que pode influír considerablemente no comportamento natural e limita a aplicación nos estudos de comportamento. Mostrouse que a inxección subcutánea de MnCl2 en concentracións suficientes para a análise de resonancia magnética resultou unha diminución persistente no rendemento do motor e na inxestión de alimentos, así como na perda de peso [17]. Recentemente, con todo, introducíronse bombas osmóticas nos estudos de MEMRI. MnCl2 é administrado por bombas osmóticas, que liberan lentamente e continuamente a solución nun período de ata sete días evitando efectos adversos sobre a actividade motora, pero proporcionando unha acumulación de manganeso suficiente para a análise de resonancia magnética [17].

O presente estudo probou a usabilidade da análise de MEMRI con bomba osmótica para analizar toda a actividade cerebral asociada á captación de alimentos. O método aplicouse para desvelar os patróns específicos de activación cerebral da inxestión de chips de pataca en ratas alimentadas de forma gratuíta.

Materiais e Métodos

1. Declaración ética

Este estudo levouse a cabo en estrita conformidade coas recomendacións da Guía para o coidado e uso de animais de laboratorio dos Institutos Nacionais de Saúde. O protocolo foi aprobado polo Comité de Ética dos Experimentos en animais da Universidade de Erlangen-Nuremberg (Regierung Mittelfranken, número de permiso: 54-2532.1-28 / 12). Todos os experimentos de cirurxía e resonancia magnética foron realizados baixo anestesia de isoflurano, e fixéronse todos os esforzos para minimizar o sufrimento.

2. Deseño experimental e análise do comportamento

As ratas Wistar masculinas (peso inicial 257 ± 21 g, mantidas nun ciclo escuro / escuro de 12 / 12 h, compradas en Charles River, Sulzfeld, Alemania) foron divididas aleatoriamente en dous grupos (catro gaiolas por grupo, catro animais por gaiola). Cada grupo recibiu un dos distintos alimentos adicionais ás súas pastillas estándar (Altromin 1326, Altromin, Lage, Alemaña). O grupo de comida de lanche (n = 16, peso corporal inicial 258 ± 28 g) recibiu patacas fritas (patacas fritas sen sabor comerciais sen sabor sen compostos de sabor agregados ou potenciadores do sabor, especialmente sen glutamato monosódico, esmagado por un procesador de alimentos) e o grupo chow estándar (peso corporal inicial 256 ± 21 g) recibiu un chow estándar en po (Altromin 1321, n = 16), respectivamente. Ofrecéronse bólas estándar de chow ad libitum durante todo o curso do estudo, ofrecéndose ad libitum o alimento de proba (chips de pataca triturada ou chow estándar en po), durante a fase de adestramento e na fase de manganeso ademais de garrafas estándar. figura 1 para deseño experimental. Para o adestramento, os alimentos de proba presentáronse en dous dispensadores de alimentos que contiñan alimentos de proba idénticos no lado dereito e esquerdo da gaiola durante un período de sete días (fase de adestramento), seguido de sete días intermedios (fase intermedia) sen alimentos de proba. Posteriormente, as bombas osmóticas enchéronse con cloruro de manganeso (MnCl2véxase máis abaixo para máis detalles) foron implantados. Durante o período da inxección por goteo (sete días, grupo chow estándar: 163 ± 5 h, grupo de comida de merenda 166 ± 4 h) e acumulación de MnCl2 no cerebro das ratas (fase de manganeso) os animais tiñan acceso ad libitum ao alimento de proba familiar desde a fase de adestramento. Dado que o estándar de chow pellets e a auga da billa estaban dispoñibles ad libitum durante todas as fases do estudo, os animais non se fixeron en xaxún en calquera momento do estudo. As estruturas activas do cerebro foron exploradas por MEMRI despois deste período de MnCl2 Administración. Durante as diferentes fases, a cantidade de alimento inxerido medíase por pesagem diferencial dos dispensadores de alimentos dúas veces ao día. O consumo de enerxía determinouse multiplicando os valores calóricos dos alimentos de proba coas cantidades inxeridas. A inxestión de alimentos correlacionouse positivamente co peso corporal inicial das ratas. Non obstante, a correlación era similar para os dous tipos de alimentos de proba e a distribución do peso corporal inicial non difería significativamente entre os dous grupos.

miniaturas
Descarga:

Figura 1. Deseño de estudo.

Visión xeral do deseño do estudo para controlar a influencia da composición dos alimentos nos patróns de actividade do cerebro enteiro mediante imaxes de resonancia magnética reforzada por manganeso.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.g001

Ademais, a actividade locomotora asociada aos alimentos de proba foi cuantificada pola avaliación de imaxes gravadas por webcams por enriba das gaiolas (unha imaxe por dez segundos) mediante "reconto" definido. Un "reconto" definíase como "unha rata mostra a actividade locomotora preto dos dispensadores de alimentos nunha imaxe". A proba t de estudante foi utilizada para avaliar diferenzas significativas na actividade locomotora das ratas nos diferentes grupos durante 24 h ao día con caixas dunha hora durante sete días como media de catro gaiolas (animais 16) por grupo.

3. Preparación e implantación das bombas osmóticas

As bombas mini osmóticas (Alzet®, modelo 2001, Durect Corporation, Cupertino, CA, EUA) utilizáronse para a aplicación do axente de contraste (200 µL dunha solución de MnCl 1 M)2, para bioloxía molecular, BioReagent, Sigma Aldrich, Schnelldorf, Alemaña) segundo [17]. Para o uso en resonancia magnética, o moderador de fluxo de aceiro inoxidable foi substituído por unha tubería micro médica PEEK ™ (Scientific Commodities, Lake Havasu City, AZ, EUA). As bombas osmóticas enchidas foron incubadas en solución salina isotónica para 12 h antes da implantación. Durante os sete días inxección por goteo, MnCl2 liberouse cun caudal de 1 µL h-1.

Na tarde do primeiro día da fase de manganeso (ver figura 1), implantáronse bombas osmóticas. Para este propósito, os animais foron anestesiados por un tempo máximo de minutos 15 con isoflurano (inicialmente o mantemento 5% e 1.5%, Baxter Deutschland, Unterschleißheim, Alemania) no aire médico e as bombas cheas foron implantadas no tecido dorsal subcutáneo. Posteriormente, o pequeno corte foi pechado por pegamento de tecidos (Histoacryl®, B. Braun Petzold, Melsungen, Alemania).

4. Medición de resonancia magnética

Tras sete días da fase de manganeso, rexistráronse resonancias magnéticas. Os animais anestesiaron con isoflurano (inicialmente 5% no aire médico) 163 ± 5 h (grupo chow estándar) e 166 ± 4 h (grupo de comidas) despois da implantación das bombas osmóticas. A anestesia durou un máximo de minutos 50 para cada animal. Tras a inducción da anestesia, os animais colocáronse nun berce dentro do tomógrafo de resonancia magnética (Bruker BioSpec 47 / 40, 200 mT / m, bobina cerebral de superficie cadrada). A temperatura corporal dos animais mantívose constante a 37 ° C por auga quente que circulaba no berce. A fixación da cabeza da rata e a anestesia continua de isoflurano foron aseguradas por unha "máscara de boca nasal" directamente por baixo da bobina de superficie. As funcións vitais dos animais foron controladas durante a medición a través dun sensor de respiración fixado baixo o peito da rata. Para manter a taxa de respiración constante en aproximadamente 60 min-1, a concentración de isoflurano foi axustada nun rango entre 1% e 2%.

A medición realizouse utilizando unha secuencia de transformada de Fourier de equilibrio (MDEFT) impulsada modificada: tempo de repetición 4 s, tempo de eco 5.2 ms, tempo de inversión 1000 ms, con catro segmentos e unha matriz de adquisición de 256 × 128 × 32, matriz de reconstrución despois de cero enchendo 256 × 256 × 64 cunha resolución de 109 × 109 × 440 µm, campo de visión 27.90 × 27.90 × 28.16 mm e dúas medias resultando nun tempo de medición de 17 min repetido dúas veces.

5. Procesamento de datos

5.1 Rexistro de imaxes e preprocesamento.

Para investigar as diferenzas na función anatómica do cerebro, todos os conxuntos de datos tiveron que ser transferidos a un sistema de coordenadas común. O obxectivo era igualar a anatomía sen eliminar as diferenzas relevantes. Isto logrouse utilizando un esquema de rexistro non paramétrico e non ríxido, que calculou un campo de deformación para un volume de modelo T, indicando un vector de tradución para cada voxel de tal xeito que a semellanza do volume de modelo deformado co volume de referencia R era máximo.

O método de rexistro optimizou unha enerxía funcional que consiste nun termo de datos que mide a semellanza dos dous conxuntos de datos baixo a transformación actual (aquí a información mutua) e un prazo de regularización que restrinxe a deformación permitida. No noso caso, a suavidade da deformación foi asegurada pola regularización da curvatura do campo de deformación, como se introduciu en [18]. O rexistro realizouse utilizando unha implementación personalizada dos compoñentes de rexistro non ríxidos empregados [19].

Primeiro, todos os conxuntos de datos pertencentes a un grupo non se rexistraron de xeito ríxido nun volume de referencia escollido aleatoriamente dese grupo, e calculáronse o volume medio do grupo e un volume de variación. Posteriormente, todos os volumes promedio en grupo foron posteriormente rexistrados non rixidamente a un dos volumes e o campo de deformación respectivo aplicado ao volume de varianza de grupo. Finalmente, calculouse un volume medio e un volume de variación global. Pola análise morfométrica baseada en voxel (VBM), significativamente (estatísticas t) podíanse determinar diferentes áreas cerebrais activadas entre os dous grupos de alimentos. Usar estatísticas voxelwise sobre os conxuntos de datos rexistrados tamén permitiu cancelar os contrastes de tecidos básicos nas imaxes, que eran iguais en ambos grupos.

5.2 Procesamento de valor gris para a análise de estruturas específicas.

A análise de valor de gris baseada nestes conxuntos de datos previamente rexistrados realizouse en MagnAN (BioCom GbR, Uttenreuth, Alemania). Un rexistro baseado na superficie axustou cada conxunto de datos de valor gris MEMRI ao atlas do cerebro dixital derivado [20]. A continuación, para compensar diferenzas de forma individual menores, as diapositivas do atlas foron axustadas de porción fina por cada conxunto de datos guiado polos contornos do cerebro e do sistema ventricular. O atlas dixital consistía en estruturas cerebrais distintas preseleccionadas de 166. A área tegmental ventral (VTA) é unha das máis pequenas estruturas avaliadas, pero ten un alto impacto nos resultados obtidos. Ten un volume de 0.7914 mm3 por hemisferio, é dicir, os voxels 152. En cada dimensión espacial, o VTA mostrouse con máis de voxels 4. Polo tanto, poderían evitarse efectos de volume parcial, que poderían causar grandes problemas de confusión na nosa análise. Os valores medios de gris destas rexións determináronse nos conxuntos de datos individuais. Para a normalización dos valores de gris de cada individuo, calculáronse as puntuacións z dividindo a diferenza entre o valor gris de cada estrutura cerebral e o valor medio gris de todas as estruturas do atlas mediante a desviación estándar dos valores gris de todas as estruturas do atlas. A proba t de estudante foi usada para avaliar diferenzas significativas das estruturas cerebrais entre os dous grupos diferentes. O enfoque de análise combinada permitiu a obtención das distintas áreas significativas (VBM), así como a actividade para subir e baixar a regulación dentro das correspondentes rexións do atlas (baseadas na rexión).

Resultados e discusión

1. Efecto da dieta dos Snack Food (patacas fritas) en consumo de calorías e actividade locomotora

O presente estudo investigou patróns específicos de actividade cerebral relacionados coa inxestión de merendas (chip de pataca) en comparación co chow estándar. A actividade cerebral relacionada coa inxestión do alimento de proba determinado foi rexistrada por MEMRI, o que permitiu integrar a actividade cerebral durante o período de sete días de inxestión de alimentos (figura 1).

Ademais, rexistráronse a ingesta de alimentos e a actividade locomotora dependentes do alimento de proba. Durante a fase de adestramento, as ratas alimentadas con chow estándar mostraron unha actividade continuamente inferior á de ratos alimentados con papas fritas, especialmente no período escuro do ciclo de luz / luz 12 / 12. A inxestión de chip de pataca induciu unha maior actividade con diferenzas significativas en 10 fóra dos puntos de tempo 24 na fase de adestramento (Imaxe 2A).

miniaturas
Descarga:

Figura 2. Actividade locomotora relacionada coa alimentación durante o acceso a merendas (patacas fritas) ou chow estándar.

Actividade locomotora relacionada coa alimentación das ratas durante o acceso a merendas (papas fritas) ou chow estándar na fase de adestramento (A) e na fase de manganeso durante o MnCl2 aplicación (B). Os datos preséntanse como a media de 16 animais de máis de 7 d por grupo. *** p <0.001, ** p <0.01, p * <0.05.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.g002

2. Aplicación de MEMRI asistida por bomba osmótica para a análise dos patróns de actividade cerebral total asociados á dieta

Para a análise dos patróns activos do cerebro, aplicouse un MEMRI con bomba osmótica. Considerando que é unha dose única de MnCl2 levou a unha acumulación máxima 24 h despois da inxección, a acumulación de manganeso no cerebro a través de bombas osmóticas alcanzou unha meseta despois de tres días [17]. A concentración acumulada obtida de Mn2+ era suficiente para o mapeamento funcional resultando nunha relación sinal-ruído semellante obtida por unha inxección de dose única de MnCl2, pero a actividade motora non foi afectada nestas condicións [17]. Diferenzas en xeral Mn2+ distribución debido á diferente permeabilidade das estruturas cerebrais a Mn2+ debe ser o mesmo en ambos grupos. As diferenzas de puntuación Z entre os grupos empregáronse para avaliar a actividade cerebral relacionada coa proba en lugar dos valores de puntuación z absolutos. En consecuencia, as áreas cerebrais que estiveran activas durante o período de sete días da fase de manganeso pódense rexistrar mediante unha única medición de resonancia magnética (figura 1). No noso caso, a bomba osmótica asistida por MEMRI fixo unha visión ampla da proba da actividade cerebral inducida por alimentos.

O presente estudo rexistrou unha actividade motora total algo reducida durante a fase de manganeso en comparación coa fase de adestramento (Imaxe 2B). Isto pode deberse á implantación e á tensión asociada, á citotoxicidade do manganeso ou aos efectos de habituación sobre o alimento de proba. Non obstante, as ratas alimentadas con patacas fritas presentaron unha actividade claramente superior en comparación co control, cunha actividade significativamente maior en catro puntos de tempo. Este comportamento foi similar á fase de adestramento. Se non, a cantidade de alimento inxerido non se alterou significativamente durante a fase de manganeso en comparación coa fase de adestramento en relación tanto coa luz 12 h como o ciclo escuro de 12 h. Detectouse un pouco o consumo de merenda durante o ciclo escuro de 12 h en comparación co chow estándar tanto na fase de adestramento como no de manganeso. (Imaxe 3A). Isto levou a un maior consumo de enerxía a través de patacas fritas en comparación co chow estándar. A diferenza non foi significativa durante o período de luz 12 h, pero moi significativa durante o período escuro de 12 h, tanto durante a fase de adestramento como na fase de manganeso. (Imaxe 3B). Así, concluíu que MnCl2 A administración por bombas osmóticas é un método adecuado para mapear patróns de actividade no cerebro específicos para diferentes alimentos inxeridos.

miniaturas
Descarga:

Figura 3. A inxestión de alimentos e enerxía a través de merendas (patacas fritas) e chow estándar.

A inxestión de alimentos (A) e enerxía (B) a través de merendas (SF, patacas fritas) e chow estándar (STD) en ratas alimentadas ad libitum na fase de adestramento (TP) antes e na fase de manganeso (MnP) durante MnCl.2 infiltración da bomba nun período de 7 d. A inxestión de alimentos por hora determinouse por pesaxe diferencial, a inxestión de enerxía multiplicando a cantidade de alimento inxerido co contido de enerxía por separado durante o ciclo de luz de 12 h e o de escuro de 12 h. Amósase a media ± DE de 16 animais en cada grupo. *** p <0.001, ** p <0.01, p * <0.05, ns non significativo.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.g003

Despois da normalización da puntuación z, os datos da imaxe foron analizados por un lado mediante un enfoque VBM, o que resultou, puramente baseado en datos, en áreas cerebrais activadas de xeito significativo. (figura 4). Por outra banda, a análise adicional baseada na rexión mediante un atlas dixital permitiu determinar as regulacións de arriba e de abaixo de cada estrutura de atlas etiquetada.

miniaturas
Descarga:

Figura 4. Acumulación de manganeso significativamente diferente no cerebro en relación ao alimento estándar ou ao merenda (patacas fritas).

En (A) a superposición dunha porción do conxunto de datos da transformada de Fourier de equilibrio (MDEFT) de equilibrio impulsado por mediados reconstruída coa correspondente porción do atlas (Bregma −5.28 mm) do atlas de Paxinos móstrase cunha das menores rexións analizadas (VTA) marcadas en amarelo. As partes (B), (C) e (D) mostran a acumulación de manganeso significativamente diferente no cerebro das ratas alimentadas ad libitum con acceso adicional ao chow estándar (STD) ou snacks (SF, patacas fritas) rexistrados por MEMRI. As áreas cerebrais con actividade significativamente maior debido á inxestión de merendas en comparación coa inxestión de chow estándar están marcadas en vermello, as áreas do cerebro que mostraron unha actividade significativamente maior despois do consumo de chow estándar comparáronse co consumo de merenda. . Os datos foron procesados ​​por análise estatística voxelwise. Os resultados móstranse en vista axial (B), horizontal (C) e sagital (D).

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.g004

Detectáronse significativamente diferentes z-zonas nas zonas cerebrais de 80 cando se compararon alimentos estándar e chow (chips de pataca) (Táboas 1, 2, 3, 4). En xeral, as dúas diferentes estratexias de análise de datos levaron a resultados comparables. Para as estruturas seleccionadas se mostra a activación diferencial de MEMRI das estruturas cerebrais máis relevantes despois da inxestión de papas fritas en comparación co chow estándar.figura 5).

miniaturas
Descarga:

Figura 5. As diferenzas de activación relacionadas cos alimentos de lanche (papas fritas) contra o chow estándar en estruturas cerebrais representativas.

Estatísticas das diferenzas de activación debido á inxestión de petiscos (patacas fritas) fronte ao chow estándar en estruturas cerebrais representativas para o circuíto motor (putamen caudado: CPu), o sistema límbico (córtex cingulado: CgCx), o sistema de recompensa (rexión de cunchas) do núcleo accumbens: AcbSh, rexión central do núcleo accumbens: AcbC) e ritmo sono / vixilia (núcleos tegmentais: Teg) representados na columna esquerda en función do atlas de referencia. A columna do medio mostra diferenzas significativas da análise VBM superposta nas correspondentes etiquetas de anatomía e resonancia magnética estándar T2 de resonancia magnética e atlas. A columna da dereita mostra o cambio fraccionado dos bocadillos a chow v estándar (valores de gris MEMRI) *** p <0.001, ** p <0.01.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.g005

miniaturas
Descarga:

Táboa 1. Acumulación de manganeso en estruturas cerebrais relacionadas coa inxestión de alimentos.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.t001

miniaturas
Descarga:

Táboa 2. Acumulación de manganeso en estruturas cerebrais relacionadas coa recompensa e a adicción.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.t002

miniaturas
Descarga:

Táboa 3. Acumulación de manganeso en estruturas cerebrais relacionadas co sono.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.t003

miniaturas
Descarga:

Táboa 4. Acumulación de manganeso en estruturas cerebrais relacionadas coa actividade locomotora.

doi: 10.1371 / journal.pone.0055354.t004

A calidade de rexistro final alcanzada móstrase en Imaxe 4A figura 5.

3. Influencia da inxestión de comida de merenda nos circuítos de recompensa e saciedade

No presente estudo, a inxestión de chips de pataca levou a unha variedade de diferentes cambios de actividade específicos de estrutura, que se resumen en Táboas 1, 2, 3, 4. Atopouse unha actividade significativamente maior para o núcleo e a casca do núcleo accumbens (lado dereito e esquerdo (R + L)), o globo pallido ventral (R + L) e o hipotálamo dorsomedial (R) e o núcleo tálamo paraventricular anterior. Ao mesmo tempo, o núcleo arqueado (L) eo núcleo tractus solitarius (R) foron desactivados en ratas que inxeriron as papas fritas en comparación con animais alimentados con chow estándar. Os mecanismos centrais que regulan a inxestión de alimentos e o apetito foron resumidos recentemente por Harrold et al. e Kenny [4], [21]: a regulación homeostática da inxestión de alimentos débese principalmente a sinais que reflicten un déficit enerxético [21]. En contraste, a inxestión de alimentos hedónicos parece estar impulsada pola activación de mecanismos de recompensa que compensan a baixa regulación homeostática da inxestión de alimentos [21].

O núcleo tractus solitarius é o responsable de procesar sinais periféricos que reflicten a inxestión de alimentos en curso, como a distensión gástrica ou os niveis de glicosa portal-vea resultando na desactivación das áreas cerebrais, como o núcleo accumbens, que leva eventualmente a baixa regulación do consumo de enerxía [4], [22]. A inactivación do núcleo tractus solitarius por "alimento agradable" pode estar mediada por unha diminución da sensibilidade desta área cerebral cara ás hormonas intestinais relacionadas coa saciedade [4]. Similar ao núcleo tractus solitarius, o núcleo hipotalámico arqueado é activado por sinais periféricos que reflicten o estado nutricional. Está conectado a outras rexións do cerebro, como o núcleo paraventral e o núcleo hipotalámico dorsomedial, que controlan a inxestión de alimentos [21], [23], [24]. Así, pódese supoñer que os cambios na actividade do núcleo tractus solitarius, o núcleo arqueado, o hipotálamo dorsomedial e o núcleo anterior tálamo paraventrical, que se observaron neste estudo, reflicten unha desactivación dos circuítos de saciedade central, que ao final resulta nun A inxestión calórica excede a necesidade enerxética.

Ademais, observouse unha forte activación do núcleo accumbens relacionada coa inxestión de chips de pataca. O núcleo accumbens é unha estrutura clave do sistema de recompensa, que se activa, por exemplo, por recompensas de medicamentos [9]. No contexto da inxestión de alimentos, a activación do núcleo accumbens resulta nun sinal gratificante que induce a inxestión de alimentos hedónicos. Ademais, rexistrouse unha activación significativamente maior ao consumo de patacas fritas en áreas previamente atribuídas aos sistemas de recompensa xeral ou á adicción: a cortiza prelímbica (R + L) [25], [26], o subículo dorsal (R + L) [27], os núcleos da cama de stria terminalis (L) [28], tálamo mediodorsal (R + L) [26], [29], o córtex cingulado (R + L) [26], caudado / putamen (estrato ventral) (R + L) [26] eo córtex insular (R + L) [30]. O tálamo mediodorsal e o córtex insular tamén se asociaron á olfacción ou á integración dunha olfativa con outra entrada sensorial [31]. O caudado e o insula tamén están asociados ao desexo de drogas e aos alimentos [32]. Outras estruturas cerebrais, que se asociaron con recompensa e adicción, mostraron unha actividade significativamente menor despois da inxestión de merendas en comparación co chow estándar: o raphe [33], o núcleo interpeduncular [34], a área tegmental ventral (R + L) [35], [36]eo subvic ventral (R + L) [37].

Estes resultados indican que o consumo de patacas fritas está relacionado coa activación de circuítos de recompensa hedónica e, paralelamente, á inactivación de circuítos de saciedade homeostática. Os dous circuítos tamén están ligados, principalmente polo núcleo paraventricular do tálamo, que actúa como interface entre o equilibrio enerxético e a recompensa. [38]. Deste xeito, o patrón de activación observado pode provocar un maior consumo de enerxía cando se dispoña de lanches, como as patacas fritas.

Hai que seguir estudos para revelar os compoñentes moleculares das papas fritas, o papel da densidade de enerxía, así como os mecanismos periféricos e centrais que levan á desregulación do control homeostático da absorción de enerxía.

4. Influencia da inxestión de merenda en outras estruturas cerebrais relacionadas coa inxestión de alimentos

Ademais, despois do consumo de merendas (patacas fritas), observouse unha activación máis forte desas estruturas cerebrais que se asociaron previamente coa inxestión de alimentos, o comportamento do apetito e o control dos alimentos, como o córtex infralímbico (R + L) [36], [39], o hipotálamo lateral (R) [36], eo septo (R + L) [40].

As estruturas cerebrais dos núcleos de raphe e do núcleo parabrachial lateral (R), que tamén foron conectados á inxestión de alimentos, mostraron unha actividade significativamente reducida despois do consumo de patacas fritas en comparación co chow estándar [41]. O núcleo parabrachial lateral asociouse coa regulación calórica, a recompensa ingestiva, o procesamento cognitivo na alimentación [42], pero tamén coa inxestión de sodio e auga [43]. Así, a reducida actividade desta estrutura pode estar asociada co maior contido de sal das papas fritas en comparación co chow estándar. Os resultados indican que, debido á súa composición molecular, que resulta, por exemplo, nunha maior densidade de enerxía, as patacas fritas poden activar as estruturas do cerebro asociadas coa recompensa e o control da inxestión de alimentos de forma diferente que o estándar. Este efecto pode eventualmente modular a calidade e cantidade de alimentos ou máis ben a inxestión de enerxía.

5. Influencia da inxestión de merenda (patacas) en estruturas cerebrais relacionadas coa actividade locomotora e o sono

Ademais, seis estruturas cerebrais conectadas ao movemento e á actividade mostraron Mn significativamente maior2+ acumulación cando as ratas tiveron acceso a patacas fritas en comparación co chow estándar: o córtex motor primario (R + L), o córtex motor secundario (R + L) así como o putamen caudado (R + L) [44]. A actividade significativamente elevada das áreas motrices nos animais alimentados con papas fritas está de acordo cos estudos de comportamento, que mostran maior actividade locomotora neste grupo (Figura 2A e B). O aumento da actividade locomotora foi ligado antes coa inxestión de alimentos. Así, demostrouse, por exemplo, que a grelina induciu a inxestión de alimentos gratificantes así como a actividade locomotora en roedores, o que probablemente está relacionado coa estimulación do comportamento que busca o alimento. [45], [46].

Finalmente, a inxestión de patacas fritas estaba relacionada cunha desactivación significativa das estruturas cerebrais relacionadas co sono, é dicir, o núcleo reticular lateral (R) [47], o núcleo reticular parvicelular (R + L) [47], o núcleo paragigantocelular lateral (R + L) [48], o núcleo xigantocelular (R + L) [49], [50], o núcleo reticular pontino oral (R + L) [51] e os núcleos tegmentais (R + L) [52]. A influencia da composición dos alimentos no comportamento do sono non se entende completamente. Demostrouse que un consumo a longo prazo (seis semanas) dunha dieta rica en graxas provocou un aumento da frecuencia e da duración dos episodios de durmir. Este efecto, con todo, estivo máis ben relacionado co desenvolvemento da obesidade que co propio consumo de enerxía [53]. Por outra banda, varios estudos revelaron que unha aplicación a longo prazo dunha dieta rica en graxas induce un aumento na inxestión de alimentos durante o período de repouso diurno nos ratos. [12], [54]. O consumo de alimentos diurnos máis altos probablemente estea relacionado cos cambios no comportamento do sono e, consecuentemente, á modulación da actividade cerebral relacionada coa durmir. Nestas condicións de alimentación a curto prazo, con todo, a comida sen meros non provocou un aumento significativo do peso corporal nin un cambio no patrón de alimentación circadiano. Por iso, especulamos que a desactivación das estruturas cerebrais relacionadas co soño está ligada ao aumento da actividade locomotora e á procura de alimentos, que poden suprimir o sono.

Conclusións

En resumo, o MEMRI ea posterior análise de estruturas cerebrais activadas por ambos os enfoques baseados en VBM e na rexión de interese mostraron unha activación específica similar resp. desactivación de numerosas estruturas cerebrais dependentes do alimento inxerido. A inxestión de merendas (patacas fritas) en comparación con chow estándar por ratos alimentados por ad libitum induciu diferenzas significativas nos patróns de activación nas estruturas cerebrais que antes foran asociadas coa inxestión de alimentos, a recompensa / adicción, así como a actividade e movemento. Os aumentos nas estruturas de actividade locomotora cerebral estaban de acordo co comportamento animal: os perfís de actividade ao longo de varios días mostraron que un maior nivel de actividade locomotora dos animais asociouse coa inxestión de patacas fritas. A actividade reducida rexistrouse nas estruturas cerebrais que son importantes para a regulación do ritmo de sono-vigilia, especialmente do sono REM.

Os cambios observados nos patróns de actividade cerebral relacionados coa inxestión de alimentos son probablemente causados ​​pola composición molecular dos alimentos de lanche, resultando, por exemplo, nunha maior densidade de enerxía. Ademais, a subministración de calorías por parte dos alimentos lanche pode inducir a modulación dos patróns de actividade cerebral. Hai que seguir estudos adicionais para revelar os desencadenantes dos cambios observados introducindo un grupo de merendas con inxestión de calorías controladas polo control ou probando os efectos dos compoñentes dos alimentos dos merenda definidos nos patróns de actividade cerebral.

Contribucións do autor

Concibida e deseñada os experimentos: TH MP AH. Realizou os experimentos: TH AH. Analizou os datos: TH SK SG AH. Reactivos / materiais / ferramentas de análise aportados: MP AH. Escribiu o artigo: TH SK SG MP AH.

References

  1. Sharma AM, Padwal R (2010) A obesidade é un signo: comer en exceso é un síntoma: un marco etiolóxico para a avaliación e o control da obesidade. Obes Rev 11: 362-370. doi: 10.1111 / j.1467-789X.2009.00689.x. Atopar este artigo en liña
  2. Zheng H, Berthoud HR (2007) Comer por pracer ou calorías. Curr Opin Pharmacol 7: 607-612. doi: 10.1016 / j.coph.2007.10.011. Atopar este artigo en liña
  3. McCrory MA, Fuss PJ, Saltzman E, Roberts SB (2000) Determinantes dietéticos da ingesta de enerxía e regulación do peso en adultos sans. J Nutr 130: 276S-279S. Atopar este artigo en liña
  4. Kenny PJ (2011) Mecanismos celulares e moleculares comúns na obesidade e na adicción ás drogas. Nat Rev Neurosci 12: 638 – 651. doi: 10.1038 / nrn3105. Atopar este artigo en liña
  5. Avena NM, Rada P, Hoebel BG (2009) O azucre e as graxas graves teñen notables diferenzas no comportamento adictivo. J Nutr 139: 623 – 628. doi: 10.3945 / jn.108.097584. Atopar este artigo en liña
  6. Lenard NR, Berthoud HR (2008) Regulación central e periférica da inxestión de alimentos e actividade física: vías e xenes. Obesidade (Prata de Prata) 16 Suppl. 3: S11 – 22. doi: 10.1038 / oby.2008.511. Atopar este artigo en liña
  7. Wise RA (1996) Neurobioloxía da adicción. Curr Opin Neurobiol 6: 243 – 251. doi: 10.1016/S0959-4388(96)80079-1. Atopar este artigo en liña
  8. DM pequeno, Jones-Gotman M, Dagher A (2003) A liberación de dopamina inducida pola alimentación no estriado dorsal se correlaciona coas valoracións de agradabilidade das comidas en voluntarios humanos sans. Neuroimagem 19: 1709-1715. doi: 10.1016/S1053-8119(03)00253-2. Atopar este artigo en liña
  9. Hernández L, Hoebel BG (1988) A recompensa de alimentos ea cocaína aumentan a dopamina extracelular no núcleo accumbens medido por microdialisis. Life Sci 42: 1705 – 1712. doi: 10.1016/0024-3205(88)90036-7. Atopar este artigo en liña
  10. Johnson PM, Kenny PJ (2010) receptores D2 de dopamina en disfunción de recompensa de tipo adicción e comer compulsivo en ratas obesas. Nat Neurosci 13: 635 – 641. Atopar este artigo en liña
  11. Morton GJ, Cummings DE, Baskin DG, Barsh GS, Schwartz MW (2006) Control do sistema nervioso central da inxestión de alimentos e peso corporal. Natureza 443: 289 – 295. doi: 10.1038 / nature05026. Atopar este artigo en liña
  12. Stucchi P, Gil-Ortega M, Merino B, Guzmán-Ruiz R, Cano V, et al. (2012) A alimentación circadiana da actividade metabólica no tecido adiposo e non a hiperfagia provoca sobrepeso nos ratos: ¿hai un papel da vía pentose-fosfato? Endocrinoloxía 153: 690 – 699. doi: 10.1210 / es.2011-1023. Atopar este artigo en liña
  13. Morales L, Del Olmo N, Valladolid-Acebes I, Fole A, Cano V, et al. (2012) O cambio do patrón circadiano de alimentación con dietas ricas en graxa é coincidente cos déficits de recompensa nos ratos obesos. PLoS One 7: e36139. doi: 10.1371 / journal.pone.0036139. Atopar este artigo en liña
  14. Koretsky AP, Silva AC (2004) Imaxe por resonancia magnética reforzada por manganeso (MEMRI). NMR Biomed 17: 527 – 531. doi: 10.1002 / nbm.940. Atopar este artigo en liña
  15. Silva AC (2012) Usando resonancia magnética mellorada para manganeso para entender BOLD. Neuroimagem 62: 1009-1013. doi: 10.1016 / j.neuroimage.2012.01.008. Atopar este artigo en liña
  16. Silva AC, Lee JH, Aoki I, Koretsky AP (2004) Resonancia magnética reforzada por manganeso (MEMRI): consideracións metodolóxicas e prácticas. NMR Biomed 17: 532 – 543. doi: 10.1002 / nbm.945. Atopar este artigo en liña
  17. Eschenko O, Canals S, Simanova I, Beyerlein M, Murayama Y, et al. (2010) Mapeo da actividade cerebral funcional en ratas con comportamento libre durante a execución voluntaria usando resonancia magnética de manganeso: implicación para estudos lonxitudinais. Neuroimage 49: 2544 – 2555. doi: 10.1016 / j.neuroimage.2009.10.079. Atopar este artigo en liña
  18. Fischer B, Modersitzki J (2003) Rexistro de imaxes baseado na curvatura. J Math Imaging Vis 18: 81 – 85. Atopar este artigo en liña
  19. Daum V (2012) Rexistro non ríxido restrinxido ao modelo na medicina. Erlangen: Universidade de Friedrich-Alexander.
  20. Paxinos G, Watson C (2007) O cerebro de rata en coordenadas estereotóxicas. San Diego, CA: Academic Press.
  21. Harrold JA, Dovey TM, Blundell JE, Halford JC (2012) CNS regulación do apetito. Neurofarmacoloxía 63: 3 – 17. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.01.007. Atopar este artigo en liña
  22. Appleyard SM, Bailey TW, Doyle MW, Jin YH, Smart JL, et al. (2005) As neuronas da proopiomelanocortina no núcleo tractus solitarius están activadas por aferentes viscerais: regulación pola colecistoquinina e os opioides. J Neurosci 25: 3578 – 3585. doi: 10.1523 / 4177-JNEUROSCI.04.2005. Atopar este artigo en liña
  23. Bellinger LL, Bernardis LL (2002) O núcleo hipotalámico dorsomedial e o seu papel na conduta inxestiva e na regulación do peso corporal: leccións aprendidas de estudos de lesións. Physiol Behav 76: 431 – 442. Atopar este artigo en liña
  24. As inxeccións de muscimol de Stratford TR, Wirtshafter D (2013) inducen a alimentación en ratas. Res cerebro 1490: 128 – 133. doi: 10.1016 / j.brainres.2012.10.043. Atopar este artigo en liña
  25. Tzschentke TM, Schmidt WJ (1999) Heterogeneidad funcional da corteza prefrontal media da rata: efectos de discretas lesións específicas da subárea sobre preferencia de lugar e sensibilización do comportamento inducida por fármaco. Eur J Neurosci 11: 4099 – 4109. doi: 10.1046 / j.1460-9568.1999.00834.x. Atopar este artigo en liña
  26. Haber SN, Knutson B (2010) O circuíto de recompensas: enlace da anatomía primada e a imaxe humana. Neuropsicofarmacoloxía 35: 4 – 26. doi: 10.1038 / npp.2009.129. Atopar este artigo en liña
  27. Martin-Fardon R, Ciccocioppo R, Aujla H, Weiss F (2008) O subículo dorsal media a adquisición da reincorporación condicionada á procura de cocaína. Neuropsicofarmacoloxía 33: 1827 – 1834. doi: 10.1038 / sj.npp.1301589. Atopar este artigo en liña
  28. Epping-Jordan MP, Markou A, Koob GF (1998) O antagonista do receptor da dopamina D-1 SCH 23390 inxectado no núcleo do leito dorsolateral da estria terminalis diminuíu o reforzo da cocaína na rata. Res cerebro 784: 105 – 115. doi: 10.1016/S0006-8993(97)01190-6. Atopar este artigo en liña
  29. Kawagoe T, Tamura R, Uwano T, Asahi T, Nishijo H, et al. (2007) Correlacións neuronais da asociación estímulo-recompensa no tálamo mediodorsal de rata. Neurorreport 18: 683 – 688. doi: 10.1097/WNR.0b013e3280bef9a6. Atopar este artigo en liña
  30. Naqvi NH, Bechara A (2009) A illa oculta da adicción: a insula. Neurosci Tendencias 32: 56 – 67. doi: 10.1016 / j.tins.2008.09.009. Atopar este artigo en liña
  31. Tham WW, Stevenson RJ, Miller LA (2009) O papel funcional do núcleo talámico dorsal medio na olfacción. Brain Res Rev 62: 109 – 126. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2009.09.007. Atopar este artigo en liña
  32. Pelchat ML, Johnson A, Chan R, Valdez J, Ragland JD (2004) Imaxes do desexo: activación ansiada por alimentos durante a resonancia magnética. Neuroimage 23: 1486 – 1493. doi: 10.1016 / j.neuroimage.2004.08.023. Atopar este artigo en liña
  33. Kranz GS, Kasper S, Lanzenberger R (2010) Recompensa e o sistema serotonérxico. Neurociencia 166: 1023 – 1035. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2010.01.036. Atopar este artigo en liña
  34. Glick SD, Ramirez RL, Livi JM, Maisonneuve IM (2006) 18-Metoxicoronaridina actúan na habenula media e / ou no núcleo interpeduncular para diminuír a autoadministración de morfina en ratas. Eurol Pharmacol 537: 94 – 98. doi: 10.1016 / j.ejphar.2006.03.045. Atopar este artigo en liña
  35. Nestler EJ (2005) Existe unha vía molecular común para a adicción? Neurosci Nat 8: 1445 – 1449. doi: 10.1038 / nn1578. Atopar este artigo en liña
  36. Berthoud HR (2002) Varios sistemas neuronais que controlan a inxestión de alimentos e o peso corporal. Neurosci Biobehav Rev 26: 393 – 428. doi: 10.1016/S0149-7634(02)00014-3. Atopar este artigo en liña
  37. Sun W, Rebec GV (2003) A inactivación por lidocaína do subículo ventral atenúa o comportamento que busca cocaína nas ratas. J Neurosci 23: 10258 – 10264. Atopar este artigo en liña
  38. Kelley AE, Baldo BA, Pratt WE (2005) Un eixe hipotalámico-talámico-estriatal proposto para a integración do equilibrio enerxético, a excitación e a recompensa alimentaria. J Comp Neurol 493: 72 – 85. doi: 10.1002 / cne.20769. Atopar este artigo en liña
  39. Valdes JL, Maldonado P, Recabarren M, Fuentes R, Torrealba F (2006) A área cortical infralímica manda a excitación comportamental e vexetativa durante o comportamento apetitivo na rata. Eur J Neurosci 23: 1352 – 1364. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2006.04659.x. Atopar este artigo en liña
  40. Scopinho AA, Resstel LB, Correa FM (2008) alfa (1) -Adrenoceptores da zona septal lateral modulan o comportamento da inxestión de alimentos nas ratas. Br J Pharmacol 155: 752 – 756. Atopar este artigo en liña
  41. Mansur SS, Terenzi MG, Marino Neto J, Faria MS, Paschoalini MA (2011) antagonista do receptor Alpha1 no núcleo mediano do feno evocaron hiperfagia en ratas de alimento libre. Apetito 57: 498 – 503. doi: 10.1016 / j.appet.2011.06.017. Atopar este artigo en liña
  42. Denbleyker M, Nicklous DM, Wagner PJ, Ward HG, Simansky KJ (2009) A activación de receptores mu-opioides no núcleo parabraquial lateral aumenta a expresión de c-Fos nas áreas do antebrazo asociadas á regulación calórica, a recompensa e a cognición. Neurociencia 162: 224 – 233. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.04.071. Atopar este artigo en liña
  43. Roncari CF, David RB, de Paula PM, Colombari DS, de Luca LA, et al. (2011) Importancia dos receptores AT centrais para a inxestión de sodio inducida pola activación GABAérxica do núcleo parabraquial lateral. Neurociencia 196: 147 – 152. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2011.08.042. Atopar este artigo en liña
  44. Santis S, Kastellakis A, Kotzamani D, Pitarokoili K, Kokona D, et al. (2009) A somatostatina aumenta a actividade locomotora de rata activando os receptores de sst (2) e sst (4) no estriato e mediante unha intervención glutamaterxica. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 379: 181 – 189. Atopar este artigo en liña
  45. Jerlhag E (2008) A administración sistémica de grelina induce a preferencia do lugar condicionada e estimula a dopamina acumulada. Addict Biol 13: 358 – 363. doi: 10.1111 / j.1369-1600.2008.00125.x. Atopar este artigo en liña
  46. Egecioglu E, Jerlhag E, Salome N, Skibicka KP, Haage D, et al. (2010) Ghrelin aumenta a inxestión de alimentos gratificantes en roedores. Addict Biol 15: 304 – 311. doi: 10.1111 / j.1369-1600.2010.00216.x. Atopar este artigo en liña
  47. Trepel M (2003) Neuroanatomie. Struktur und Funktion Munich: Urban & Fischer Verlag.
  48. Sirieix C, Gervasoni D, Luppi PH, Leger L (2012) Papel do núcleo paragigantocelular lateral na rede do sono paradoxal (REM): estudo electrofisiolóxico e anatómico na rata. PLoS One 7: e28724. doi: 10.1371 / journal.pone.0028724. Atopar este artigo en liña
  49. Chase MH (2008) Confirmación do consenso de que a inhibición ginexérxica postsináptica é responsable da atonia do sono REM. Sleep 31: 1487 – 1491. Atopar este artigo en liña
  50. Verret L, Leger L, Fort P, Luppi PH (2005) Neuronas colinérxicas e non colinérxicas que expresan Fos despois da paradóxica privación e recuperación do sono. Eur J Neurosci 21: 2488 – 2504. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2005.04060.x. Atopar este artigo en liña
  51. Harris CD (2005) Neurofisioloxía do sono e o espertar. Respir Care Clin N Am 11: 567 – 586. Atopar este artigo en liña
  52. Jones BE (1991) O sono paradóxico e os seus substratos químicos / estruturais no cerebro. Neurociencia 40: 637 – 656. doi: 10.1016/0306-4522(91)90002-6. Atopar este artigo en liña
  53. Jenkins JB, Omori T, Guan Z, Vgontzas AN, Bixler EO, ​​et al. (2006) O sono aumenta en ratos coa obesidade inducida por alimentos ricos en graxa. Physiol Behav 87: 255 – 262. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.10.010. Atopar este artigo en liña
  54. Kohsaka A, Laposky AD, Ramsey KM, Estrada C, Joshu C, et al. (2007) A dieta rica en graxa perturba os ritmos circadianos conductuais e moleculares nos ratos. Metab de móbil 6: 414 – 421. doi: 10.1016 / j.cmet.2007.09.006. Atopar este artigo en liña