אינדוקציה של DeltaFosB בקורטקס אורביטופרונטלי פוטנטציה של רגישות לבלוט למרות הורדת תפקוד לקוי של הקוקאין (2009)

הערות: מחקר מראה כי הסיבה DelatFosB לגרום שניהם רגישות ודה-סנסיטיזציה (סובלנות). 
 
פרמקול ביוכם. 2009 בספטמבר; 93 (3): 278-84. Epn 2008 דצמבר 16.
 
וינסטלי CA, גרין ת"א, Theobald DE, W Renthal, LaPlant ש, דיליאונה RJ, Chakravarty S, Nestler EJ.

מָקוֹר

המחלקה לפסיכיאטריה, המרכז הרפואי של אוניברסיטת טקסס, 5323 הארי היינס בולווארד, דאלאס, טקסס 75390-9070, ארצות הברית. [מוגן בדוא"ל]

תַקצִיר

ההשפעות של ממכר סמים משתנים עם שימוש חוזר: אנשים רבים הופכים לסובלניים לגבי ההשפעות המענגות שלהם, אך גם רגישים יותר להשלכות שליליות (למשל, חרדה, פרנויה ותאוות סמים). הבנת המנגנונים המונחים ביסוד סובלנות ורגישות אלה עשויה לספק תובנה חשובה לגבי הבסיס לתלות בסמים התמכרות. לאחרונה הראינו כי ניהול קוקאין כרוני מפחית את היכולת של הזרקה חריפה של קוקאין כדי להשפיע על אימפולסיביות בחולדות. עם זאת, בעלי חיים הופכים יותר אימפולסיבי במהלך הנסיגה מ קוקאין עצמי הממשל. הראינו גם כי ניהול כרוני של קוקאין מגביר את הביטוי של גורם שעתוק DeltaFosB בקורטקס אורביטופרונטלי (OFC). חיקוי זה מעלה את התרופות המושרה ב OFC DeltaFosB באמצעות העברה גנטית מתווכת גנטית מחקה אלה שינויים התנהגותיים: הביטוי DeltaFosB יתר ב OFC גורם סובלנות להשפעות של אתגר קוקאין חריפה אבל sensitizes חולדות כדי sequelae קוגניטיבית של נסיגה. כאן אנו מדווחים נתונים חדשים הוכיחו כי הגדלת DeltaFosB ב OFC גם sensitizes בעלי חיים על תכונות מגרה-תנועה של קוקאין. אניתוח של רקמות גרעין נלקחות מחולדות המביעות יתר על המידה את DeltaFosB ב- OFC ומטופלים באופן כרוני עם מלוחים או קוקאין אינם מספקים תמיכה להשערה כי הגדלת OFC DeltaFosB מחזקת את הרגישות באמצעות גרעין accumbens. נתונים אלה מצביעים על כך שניתן לייצר גם סובלנות וגם רגישות להשפעות רבות של קוקאין, אם כי לכאורה לתהליכים מנוגדים, באמצעות אותו מנגנון ביולוגי באותו אזור מוח, וכי שינויים הנגרמים על ידי סמים בביטוי גנים ב- OFC ממלאים תפקיד חשוב. בהיבטים מרובים של התמכרות.

1. מבוא

Tתופעות של סובלנות ורגישות נמצאות בלב התיאוריות העכשוויות על התמכרות לסמים. בהתייחסות לקריטריון האבחוני והסטטיסטי של האגודה האמריקאית לפסיכיאטריה DSM IV (1994) עבור הפרעת שימוש בסמים, אחד הסימפטומים המרכזיים הוא שהמשתמש בסמים הופך לסובלני להשפעות המענגות של התרופה ודורש תרופה נוספת להשיג את אותו הדבר "גבוה". עם זאת, סובלנות אינה מתפתחת במהירות שווה לכל ההשפעות של התרופה, מה שמוביל למינון יתר של קטלני כאשר משתמשים מגבירים את צריכת הסמים שלהם. משתמשי סמים כרוניים גם להיות רגיש, ולא סובלני, היבטים אחרים של החוויה סמים. למרות שהעושר המתקבל מתרופות סמים הולך ופוחת, הרצון לקחת תרופות עולה, ומכורים לסמים מרגישים לעתים קרובות את ההשפעות השליליות של התרופה (למשל, חרדה, פרנויה), כמו גם את הכוח של רמזים התרופה לסמים כדי להפעיל סמים - השתוקקות והתנהגות (רובינסון וברידג ', 1993). באמצעות הבנת המנגנונים הביולוגיים שמבוססים על רגישות וסובלנות לתרופה, יש לקוות שימצאו דרכים להפוך את תהליך ההתמכרות או לעכב אותו.

כתוצאה מכך נחקרה באופן אינטנסיבי תופעת הרגישות של התנועה, במיוחד במעכבי מעבדה (ראה (פירס וקליבס, 1997) לבדיקה). תרופות פסיכוסטימולנטיות כמו קוקאין ואמפטמין מגבירות פעילות של תנועה. לאחר ניהול חוזר ונשנה, תגובה זו הופכת לרגישה והחיה הופכת באופן משמעותי היפראקטיבי יותר לאחר אתגר סמים חריף. עכשיו זה מבוסס היטב כי תנועה רגישות CRזה תלוי בשינויים דופאמין ו glutamatergic איתות בתוך הגרעין accumbens (NAc) (ראה (קליבס וסטיוארט, 1991; קרלר ואחרים, 1994; זאב, 1998). שפע של חלבונים איתות איתות מולקולרית זוהו גם אשר עשויים לתרום לביטוי של תגובה זו המנוע רגיש. חלבון אחד כזה הוא גורם שעתוק ΔFosB אשר גדל ב הסטטיסטיקה NAC ו הגבי לאחר כרונית, אך לא חריפה, הממשל של תרופות ממכרות רבות (נסלר, 2008). אניncreasing רמות NAC של ΔFosB מגביר את הרגישות של תנועה ל קוקאין, מגדילה את העדפת המקום המותנה לתרופה, וגם מקלה על ניהול עצמי של קוקאין (קולבי ואח ', 2003; Kelz ואח ', 1999). זה היה אפוא נראה כי אינדוקציה של ΔFosB ב NAC מאפשר את הפיתוח של המדינה מכורים.

ידוע יותר ויותר שחשיפה חוזרת ונשנית לתרופות ממכרות משפיעה על תפקודים קוגניטיביים מסדר גבוה יותר, כגון קבלת החלטות ושליטה על הדחפים, וכי יש לכך השפעה מכרעת על הישנות לחיפוש תרופות (בכרה, 2005; גראבן והסטר, 2007; ינטש וטיילור, 1999). הגירעונות בבקרת הדחפים נצפו לאחרונה במכורים לקוקאין נמנעים, כמו גם משתמשים בסמים אחרים (למשל (הנסון ואח ', 2008; Lejuez ואח ', 2005; מולר ואחרים, 2005; Verdejo-Garcia ואח ', 2007). זה כבר שיערו כי אימפולסיביות זו נובעת hypoactivity בקורטקס אורביטופרונאלי (OFC) שנצפה באוכלוסיות כאלה (Kalivas ו Volkow, 2005; רוג'רס ואח ', 1999; Schoenbaum ואח ', 2006; Volkow ו Fowler, 2000). לאחרונה ראינו כי ניהול קוקאין חוזר מגביר את רמות ה- ΔFOSB בתוך ה- OFC, וכי חיקוי האינדוקציה על ידי הזרמת וירוס הקשור ל- Adeno (AAV), המיועד לביטוי יתר של ΔFosB לתוך ה- OFC (העברת גנים מתווכת ויראלית) מעגלים (וינסטנלי ואח ', 2007). רמות גבוהות של OFC ΔFosB עשויות לתרום באופן תיאורטי לשינויים המביאים לתרופות בבקרת הדחפים.

השלמנו לאחרונה סדרה של מחקרים לבדיקת ההשערה, ולקבוע את ההשפעות של ניהול אקוטיות וכרוני של קוקאין על שני מדדים של אימפולסיביות בחולדות: רמת מוקדמת (אימפולסיבית) להגיב על הבחירה חמש זמן התגובה סדרתי זמן ( 5CSRT) ואת הבחירה של מיידית מיידית על תגמול מתעכב גדול יותר במשימה עיכוב- discounting (וינסטנלי ואח ', 2007). ראינו כי קוקאין חריף הגביר אימפולסיבית להגיב על 5CSRT עדיין ירידה אימפולסיבית הבחירה של פרס מיידי קטן בפרמיגמה עיכוב הנחה, מחקה את ההשפעות של אמפטמין. דפוס התנהגות זה - גידול בפעולה אימפולסיבית אך ירידה בבחירה האימפולסיבית - פורש כגידול במניע תמריץ לתגמול (Uslaner ורובינסון, 2006). עם זאת, לאחר ניהול חוזרות ונשנות של קוקאין, חולדות לא הראו עוד שינויים בולטים כאלה באימפולסיביות, כאילו הם הפכו לסובלניים להשפעות הקוגניטיביות של התרופה. זה בניגוד מוחלט לתגובה תנועה רגיש קוקאין שנצפה לאחר הממשל הכרוני דנו לעיל. יתר על כן, ביטוי יתר של ΔFosB ב OFC חיקה את ההשפעות של טיפול קוקאין כרוני: ההשפעות של קוקאין חריף על הביצועים של שני 5CSRT ו עיכוב הנחות המשימות היה מועט בחיות אלה, כאילו הם כבר פיתחו סובלנות לתרופות 'אפק.

עם זאת, בעוד הגדלת ΔFosB ב OFC מנע קוקאין חריף מ הגדלת אימפולסיביות, זה מניפולציה אותו למעשה הגדילה אימפולסיביות במהלך נסיגה מממשל ניהול עצמי של קוקאין,וינסטנלי ואח ', 2008). הביצועים הקוגניטיביים של בעלי חיים אלה היו מושפעים פחות כאשר קוקאין היה על הלוח, אך הם היו פגיעים יותר הגירעונות שליטה דחף במהלך הנסיגה. אותו מניפולציה, הגדלת ΔFosB ב OFC, ולכן יכול להגדיל סובלנות או רגישות להיבטים של ההשפעות של קוקאין. כאן אנו מדווחים נתונים נוספים הרומן מראה כי בעלי חיים אשר הראו תגובה קהה לאתגר קוקאין חריפה בבדיקות אימפולסיביות בעקבות ביטוי יתר של ΔFOS ב OFC היו רגישים גם לממריץ את הפעולה של קוקאין. לכן, סובלנות רגישות להיבטים שונים של ההשפעות של קוקאין נצפו באותם נושאים. בהינתן תפקידו המובהק של ה- NAc בתיווך רגישות של תנועה, והעדר נתונים המשפיעים על ה- OFC בתקנה מוטורית, הנחנו כי הגדלת ΔFOSB ב- OFC עשויה לשפר את התגובה המוטורית לקוקאין באמצעות שינוי הפונקציה באזור זה. לכן ערכנו ניסוי נפרד באמצעות PCR בזמן אמת כדי לחקור האם הגדלת ΔFosB ב OFC משנה את ביטוי הגן ב NAC באופן המעיד על שיפור רגישות התנועה.

עבור ל:

2. שיטות

כל הניסויים בוצעו בהתאם קפדנית עם המדריך NIH לטיפול ושימוש של חיות מעבדה אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת שימוש ב UT דרום מערב.

2.1. נושאים

זכר חולדות Long Evans (משקל ראשוני: 275-300 g; Charles River, Kingston, RI) שוכנו בזוגות תחת מחזור אור הפוך (אורות מ- 21.00-09.00) בחדר מושבה הנשלט על ידי אקלים. בעלי חיים בניסוי ההתנהגותי (n= 84) היו מזון מוגבל 85% של המשקל שלהם ללא תשלום האכלה ומתוחזק על 14 גרם של חולדה chow ליום. מים היו זמינים מודעה. בדיקות התנהגותיות התרחשו בין 09.00 לבין 19.00 חמישה ימים בשבוע. בעלי חיים המשמשים ליצירת רקמת המוח עבור ניסויים qPCR היה גישה חופשית הן מזון ומים (n= 16). לבעלי חיים אלה היתה גישה חופשית הן למזון והן למים.

2.2. כִּירוּרגִיָה

חולדות קיבלו Inra-OFC זריקות של AAV-GFP, AAV-ΔFosB, או AAV-ΔJunD באמצעות טכניקות stereotaxic סטנדרטי כמתואר (וינסטנלי ואח ', 2007). חולדות הורמו עם קטמין (Ketaset, 100 מ"ג / ק"ג הזרקת שריר (im) ו xylazine (10 מ"ג / ק"ג, הן תרופות של הנרי שייין, מלוויל, ניו יורק). AAVs היו חדורים לתוך OFC באמצעות מד 31 מד הזרקת נירוסטה (חלקים קטנים, פלורידה, ארה"ב) מחובר למשאבה microinfusion המילטון ידי צינורות פוליאתילן (Instech סולומון, פנסילבניה, ארה"ב). ווקטורים ויראליים היו חדורים בשיעור של μL 0.1 / min על פי הקואורדינטות הבאות נלקח אטלס stereotaxic (Paxinos ו ווטסון, 1998) 1, 4.0, X-0.8, 3.4, 0.4, 2 μL: 3.7 AP, 2.0, L ± 3.6, DV-0.6, 3 μl (ראה (Hommel ואח ', 2003) לפרטים על הכנת AAV). AP (anteroposterior) תיאום נלקח מ Bregma, L (לרוחב) לתאם מן קו האמצע ואת DV (dorsoventral) לתאם מן הדורה. בעלי חיים הורשו שבוע להתאושש מניתוח לפני כל בדיקה התנהגותית (ניסוי 1) או ניהול סמים (ניסוי 2) החלה.

2.3. עיצוב נסיוני

נתוני הרגישות של התנועה הובאו מחיות שעברו סדרה של בדיקות התנהגותיות למדידת ההשלכות הקוגניטיביות של חשיפה כרונית לסמים, ונתונים אלה פורסמו בעבר (וינסטנלי ואח ', 2007). בקצרה, חולדות הוכשרו לבצע את 5CSRT או את משימת ההשהיה. לאחר מכן הם חולקו לשלוש קבוצות בהתאמה לביצועים הבסיסיים. וירוס Adeno הקשורים (AAV2) over-expressing ΔFosB (Zachariou ואח ', 2006) היה חדור באופן סלקטיבי לתוך OFC של קבוצה אחת באמצעות טכניקות סטנדרטיות stereotaxic כירורגי (ראה להלן) ובכך מחקה את אינדוקציה של חלבון זה על ידי ניהול קוקאין כרונית. קבוצה שנייה קיבלה Inra-OFC חליטות של AAV-ΔJunD. AAV-GFP (חלבון פלואורסצנטי ירוק) שימש עבור קבוצת הביקורת. לאחר שנקבע בסיס יציב לאחר הניתוח, ההשפעות של קוקאין חריף (0, 5, 10, 20 מ"ג / ק"ג IP) נקבעו במשימה. על מנת להעריך האם טיפול כרוני בקוקאין משנה את ההשפעות הקוגניטיביות של חשיפת קוקאין חריפה, בעלי החיים תואמו אז הן בתוך והן בין קבוצות הניתוח שלהם לשתי קבוצות שוות. קבוצה אחת טופלה כרונית עם מלח, והשנייה עם קוקאין (2 × 15 מ"ג / ק"ג) עבור 21 ימים. שבועיים לאחר הפסקת הטיפול בסמים כרוניים, חזרו על האתגרים הקוקאין החריפים. כעבור שבוע הוערכה תגובת המנוע לקוקאין.

2.4. תגובה של תנועה לקוקאין

פעילות לוקומוטורית הוערכה בכלובים בודדים (25 ס"מ × 45 ס"מ × 21 ס"מ) באמצעות מערכת פעילות photobeam (PAS: San Diego Instruments, San Diego, CA). הפעילות בכל כלוב נמדדה על ידי xNUMX photobeams חוצה את רוחב הכלוב, 7 ס"מ זה מזה ו 6 ס"מ מהרצפה כלוב. הנתונים נאספו על פני 3 דקות דקות באמצעות תוכנת PAS (גרסה 5, סן דייגו מכשירים, סן דייגו, קליפורניה). לאחר 2 דקות, בעלי חיים הוזרקו עם קוקאין (30 מ"ג / ק"ג IP) ופעילות לוקומוטור פיקוח על 15 עוד דקה.

2.5. כימות של mRNA

חולדות קיבלו Inra-OFC זריקות של AAV-GFP או AAV-ΔFosB, ואחריו 21 פעמיים ביום זריקות של מלוחים או קוקאין, בדיוק כפי שתואר עבור ניסויים התנהגותיים. בעלי חיים היו בשימוש 24 שעה לאחר המלוחים האחרון או הזרקת קוקאין. חולדות נהרגו מעריפת ראש. המוח הוצאו במהירות הבדיקות 1 12 עבה מ"מ 80 מד החוזרים של NAC הושגו מיד קפואים המאוחסנים ב -XNUMX ° C עד בידוד RNA. אגרופים של OFC הוסרו גם לניתוח על ידי microarray DNA אשר אישר בהצלחה העברת גנים מתווך ויראלי באזור זה (ראה (וינסטנלי ואח ', 2007) לקבלת תוצאות מפורטות יותר). RNA הופק מן דגימות NAC באמצעות RNA Stat- 60 מגיב (Teltest, יוסטון, טקסס) על פי הוראות היצרן. זיהום DNA הוסר עם טיפול DNase (DNA חינם, קטלוג # 1906, Ambion, אוסטין TX). RNA מטוהרים היה transcript לאחור לתוך cDNA (סינתזה Strand Strand הראשון, קטלוג # 12371-019, Invitrogen). תמלילי גנים של עניין היו לכמת באמצעות qPCR בזמן אמת (SYBR גרין, Applied Biosystems, פוסטר סיטי, קליפורניה) על Stratagene (La Jolla, CA) Mx5000p 96 היטב thermocycler. פריימרים כל היו מותאמים אישית מסונתז על ידי אופרון (Huntsville, AL, ראה לוח 1 עבור sequences) ו תוקף עבור ליניאריות וספציפיות לפני ניסויים. כל הנתונים PCR מנורמל לרמות של glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), אשר לא השתנה על ידי טיפול קוקאין, על פי הנוסחה הבאה: ΔCt =Ct(גן של עניין) - Ct (GAPDH). רמות ביטוי מותאמות הן AAV-ΔFosB ו AAV-GFP חולדות שקיבלו קוקאין, חולדות AAV-ΔFosB שקיבלו מלוחים כרוניים, חושבו אז ביחס שולטת (AAV-GFP הקבוצה נתון מלוחים כרוניים) כדלקמן: ΔΔCt 49 ΔCt - ΔCt (קבוצת שליטה). בהתאם להמלצות המומלצות בתחום (ליבק ושמיטגן, 2001), רמות הביטוי ביחס לבקרות חושבו לאחר מכן באמצעות הביטוי הבא: 2-DegCt.

לוח 1  

לוח 1

רצף של primers המשמש לכמת רמות של cDNA באמצעות PCR בזמן אמת.

2.6. תרופות

קוקאין HCl (סיגמא, סנט לואיס, MO) היה מומס ב מלוח 0.9% בנפח של 1 מ"ל / ק"ג ומנוהל באמצעות הזרקת ה- IP. מינונים חושבו כמלח.

2.7. ניתוח נתונים

כל הנתונים נותחו באמצעות תוכנת SPSS (SPSS, שיקגו, IL). נתוני לוקומוטור היו נתונים ל- ANOVA רב-שכבתי עם ניתוח (שתי רמות: GFP לעומת ΔFosB או ΔJunD) וטיפול כרוני (שתי רמות, מלוחים כרוניים וקוקאין כרוניים), בין הגורמים הנבדקים, ובין הזמן כגורם הנבדקים. נתונים של ניסויים PCR בזמן אמת נותחו על ידי ANOVA חד משתני עם ניתוח (שתי רמות: GFP לעומת ΔFosB) וטיפול כרוני (שתי רמות, מלוחים כרוניים וקוקאין כרונית) כגורמים קבועים. ההשפעות העיקריות היו במעקב על ידי דגימות עצמאיות t- במידת הצורך.

עבור ל:

3. תוצאות

ניסוי 1

מינהל קוקאין כרוני מייצר רגישות להשפעות hyperlocomotor של קוקאין חריף אשר חיקוי על ידי ΔFOSB

כצפוי, חיסונים לוגמוטוריים חזקים נצפו בחיות בקרה לאחר חשיפה כרונית של קוקאין, כאשר בעלי חיים שטופלו כרונית עם קוקאין, הראו היפראקטיביות מוגברת בתגובה לאתגר הקוקאין החריף (איור 1A, טיפול כרוני: F1,34 = 4.325, p<0.045). בעלי חיים מבטאים יתר על המידה את ΔJunD, מוטציה שלילית דומיננטית של JunD הפועלת כ אנטגוניסט ΔFosB (Zachariou ואח ', 2006), ב OFC היו נבדלים חיות שליטה (איור 1C, GFP לעומת ΔJunD, קבוצה: F1, 56 = 1.509, NS). עם זאת, בעלי חיים מעל הביטוי ΔFosB ב OFC אשר קיבלו זריקות מלוחים חוזרות ונשנות הופיעו "מראש רגיש": הם הראו תגובת מנוע מוגברת קוקאין חריף אשר היה נבדל התגובה רגיש של עמיתיהם שטופלו קוקאין כרונית (איור 1B, GFP לעומת ניתוח ΔFosB × טיפול כרוני: F1, 56 = 3.926, p<0.052; ΔFosB בלבד: טיפול כרוני: F1,22 = 0.664, NS). Δ חיות FosB היו היפראקטיביות מעט בתוך דקות 15 הראשון של להיות ממוקם בתיבות לוקומוטור (GFP לעומת ΔFosB, ניתוח: F1,56 = 4.229, p <0.04), אך רמות הפעילות התנועתית היו דומות לביקורות ב- 15 דקות לפני מתן קוקאין (ניתוח: F1, 56 = 0.138, NS).

האיור 1  

האיור 1

רגישות ל - קוקאין. קוקאין חריף מיוצר עליות גדולות יותר בפעילות המוטורית בחיות בקרה שטופלו כרונית עם קוקאין לעומת מלוחים (פאנל A). אצל בעלי חיים מעל הביטוי ΔFosB (פאנל B), אלה שניתנו מלוחים חוזרים (יותר …)

בהתחשב בכך, כאשר נתון קוקאין במהלך 5CSRT, אותם בעלי חיים הראו יכולת משופרת יחסית כדי למנוע מן ביצוע תגובות מוטוריות מוקדמות, היפראקטיביות זו מופיעה ספציפית תנועה אמבולטורית כלומר סוג של תנועה אשר נרשם בדרך כלל במחקרים רגישות לוטוס. למרות שפעילות מוגברת בתגובה לתרופות ממריצות יכולה לשקף פרופיל חרדה, ביטוי יתר של intra-OFC של ΔFOSB אינו מגביר את החרדה כפי שהיא נמדדת באמצעות המבחן המוגבה בתוספת פלוס או שדה פתוח (הנתונים אינם מוצגים). בעלי החיים היו רגילים היטב להזרקות IP, והזרקות מלוחים לא שינו את הביצועים הקוגניטיביים שלהם (וינסטנלי ואח ', 2007), ולכן אפקט זה המנוע לא ניתן לייחס תגובה כללית להזרקת ה- IP. לסיכום, ממצאים אלה מראים כי אינדוקציה של ΔFosB ב OFC הוא מספיק (אך לא הכרחי) עבור תנועה רגיש להגיב קוקאין, למרות ΔFosB באותו אזור גורם סובלנות ההשפעות של קוקאין על המוטיבציה אימפולסיביות (וינסטנלי ואח ', 2007).

ניסוי 2

מינהל קוקאין כרוני מודול ביטוי גנים ב- NAc

אם מולקולה מסוימת ב NAC היה תורם לתגובה מראש רגיש לראות את AAV-ΔFosB מלוחים מטופלים הקבוצה, אז היינו מצפים לראות תגובה ביוכימית דומה בבעלי חיים אלה בהשוואה לבעלי חיים הן AAV-GFP ו AAV-Δ קבוצות FosB מטופלים כרונית עם קוקאין. יתר על כן, בעלי חיים בקבוצה AAV-GFP שטופלו עם מלוחים לא צריך להראות את התגובה הזו כמו אלה בעלי חיים אינם רגישים קוקאין. דפוס זה של התוצאות יבוא לידי ביטוי באינטראקציה משמעותית בין התרופה לניתוח, הנתמכת על ידי דגימות עצמאיות משמעותיות t-test השוואת האמצעים של AAV-GFP ו- AAV-ΔFosB מלוחים קבוצות טיפול, בתוספת AAV-ΔFosB ו AAV-GFP קוקאין קבוצות טיפול. ההשפעות העיקריות של טיפול תרופתי או ניתוח יאשרו כי קוקאין כרוני או ביטוי יתר של ΔFOSB ב OFC יכול לווסת את מולקולת המטרה ב NAC, אבל תצפית זו אינה מספיקה כדי להסביר את התגובה תנועה מגובשת שנצפתה בקבוצת AAV-ΔFosB מלוחים שטופלו . רקמות מחיה אחת שקיבלו intra-OFC חליטות של AAV-GFP וזריקות קוקאין חוזרות לא ניתן לנתח בשל תשואה נמוכה במיוחד של רנ"א. בניסוי זה, התמקדנו במספר גנים אשר היו מעורבים ב רגישות התנועה ל קוקאין (ראה דיון).

3.1. ΔFosB / FosB

רמות של MOSNA FOSB ב NAC לא השתנו על ידי טיפול תרופתי כרוני (איור 2A, post F1,14 = 1.179, ns) או ביטוי של ΔFOSB ב OFC (ניתוח: F1, 14 = 0.235, ns). עם זאת, רמות של ΔFOSB היו גבוהות משמעותית בקרב בעלי חיים שטופלו כרונית עם קוקאין בהתאם לדוחות קודמים (חן ואח ', 1997); איור 2B, post F1,14 = 7.140, p<0.022). מעניין שכמות ה- mRNA ΔFosB ב- NAc של בעלי חיים שטופלו במלח הייתה נמוכה יותר באלה בהם גורם שעתוק זה התבטא יתר על המידה ב- OFC (תרופה: F1,14 = 9.362, p<0.011). עם זאת, היעדר אינטראקציה עם ניתוח × תרופה מצביע על כך שטיפול כרוני בקוקאין השפיע באותה מידה גם על קבוצות AAV-GFP וגם על AAV-ΔFosB, והעלה באופן יחסי את רמות ה- ΔFosB במידה דומה (ניתוח × תרופה: F1, 14 = 0.302, ns).

האיור 2  

האיור 2

שינויים mRNA בתוך NAC של בעלי חיים over-expressing או GFP או ΔFosB ב OFC, ומטופל כרוני עם מלוחים או קוקאין. הנתונים מצביעים על שינויים קווים לינאריים בביטוי כשיעור מערכי הבקרה. הנתונים המוצגים הם (יותר …)

3.2. Arc / CREB / PSD95

לא נמצאה עדות לעלייה בחלבון הקשור ל- cytoskeleton (xtumx h) לאחר החשיפה האחרונה לסמים, ולא הגדילה את ΔFOSB ברמות שינוי OFC של mRNA arc ב- NAc (איור 2C, post F1.14 = 1.416, ns; ניתוח you F1,14 = 1.304, ns). באופן דומה, לא נצפו שינויים ב CREB (CAMP תגובה רכיב חלבון מחייב) ביטוי (איור 2D, post F1,14 = 0.004, ns; ניתוח you F1,14 = 0.053, ns). עם זאת, ניהול כרוני של קוקאין גדל משמעותית רמות mRNA עבור PSD95 (חלבון צפיפות postsynaptic של 95 kD) (איור 2E, post F1,14 = 11.275, p <0.006), אך עלייה זו הייתה דומה הן בקבוצות AAV-GFP והן AAV-ΔFosB (ניתוח: F1, 14 = 0.680, ns; העיסוי F1,14 = 0.094, ns).

3.3. ד2/ GABAB/ GluR1 / GluR2

רמות של mRNA עבור דופמין D2 הקולטנים גדלו בעקבות ניהול קוקאין כרוני (איור 2F, post F1,14 = 7.994, p<0.016), אך עלייה זו לא הושפעה מביטוי יתר של ΔFosB ב- OFC (ניתוח: F1, 14 = 0.524, ns; העיסוי F1,14 = 0.291, ns). רמות mRNA של GABAB קולטן הראה פרופיל דומה, עם רמות הגדלת כמות קטנה אך משמעותית לאחר החשיפה חוזרת לקוקאין ללא קשר למניפולציה ויראלית (איור 2G, post F1,14 = 5.644, p <0.037; כִּירוּרגִיָה: F1, 14 = 0.000, ns; העיסוי F1,14 = 0.463, ns). עם זאת, רמות ה- GLAR1 וה- GluR2 של AMPA לא הושפעו ממניפולציה כלשהי, אם כי הייתה מגמה קלה לעלייה ב- GluR2 בעקבות טיפול קוקאין כרוני (איור 2H, GluR1: תרופה: F1,14 = 0.285, ns; ניתוח you F1, 14 = 0.323, ns; העיסוי F1,14 = 0.224, ns; איור 2I, GluR2: תרופה: F1,14 = 3.399, p <0.092; כִּירוּרגִיָה: F1, 14 = 0.981, ns; העיסוי F1,14 = 0.449, ns).

לסיכום, למרות טיפול קוקאין כרונית שינתה את רמות ה- mRNA למספר גנים שנבדקו ב- NAc, לא ראינו עלייה מקבילה בביטוי של גנים אלו במעכבי מלוחים שטופלו על-ידי מלחים, אשר ביטאו יתר על המידה את ה- FOSB ב- OFC. ממצאים אלה מצביעים על כך שהגנים המסוימים הללו אינם מעורבים בתגובת התנועה המוגברת שנצפתה בקבוצה זו.

עבור ל:

4. דִיוּן

כאן אנו מראים כי over- ביטוי של ΔFosB ב OFC רגיש חולדות לפעולה ממריץ את הפעילות של קוקאין, מחקה את הפעולות של ממשל קוקאין כרונית. הראינו בעבר כי הביצועים של אותם בעלי חיים על הפרמטרים 5CSRT ועיכוב ההנחה מושפע פחות על ידי קוקאין חריף, וכי דומה אפקט סובלנות דומה נצפתה לאחר החשיפה חוזרת קוקאין. לפיכך, רגישות וסובלנות לפעולות שונות של קוקאין ניתנות לצפייה באותם בעלי חיים, כאשר שתי ההתאמות מתווכות באמצעות אותה מולקולה, Δ FOSB, הפועל באותו אזור מוח. העובדה כי שתי תופעות יכול להיות מושפע בו זמנית על ידי חיקוי אחת הפעולות של קוקאין ב לוקוס frontocortical אחד מדגיש את החשיבות של אזורים קליפתיים של sequelae של צריכת סמים כרונית. יתר על כן, נתונים אלה מצביעים על כך שסובלנות ורגישות משקפים שני היבטים מנוגדים לכאורה, אך קרובים זה לזה, של התגובה לתרופות ממכרות.

בהתחשב בכך ביטוי מוגבר ΔFosB ב NAC הוא מעורב אנושות בהתפתחות של רגישות התנועה, אחת ההשערה מתקבל על הדעת היה כי ביטוי יתר ΔFosB ב OFC מראש sensitizes בעלי חיים קוקאין על ידי הגדלת רמות ΔFosB ב NAC. עם זאת, התוצאה ההופכית נמצאה: רמות של ΔFosB ב NAC היו נמוכים משמעותית בעלי חיים over-express ΔFosB ב OFC. ההשלכות ההתנהגותיות של ירידה זו ב- NAC ΔFosB קשה לפרש, שכן מעכבים את פעולות ΔFBB באמצעות ביטוי יתר של ΔJunD באזור זה מקטין רבות של ההשפעות של קוקאין בעכברים (פיקמן ואח ', 2003). קיימות קבלות מקבילות בין תצפיות אלה לבין אלה שנעשו בהתייחסות למערכת הדופמין. לדוגמה, דלדול דופמין חלקי ב NAC יכול להוביל hyperactivity כפי יכול ליישם ישירות של אגוניסטים דופמין באזור זה (Bachtell ואח ', 2005; Costall ואח ', 1984; פרקינסון ואח ', 2002; וינסטנלי ואח ', 2005b). כמו כן, העובדה כי הגדלת רמות קליפת המוח של ΔFOSB עשויה להקטין את הביטוי הקורטיקורטרי דומה לממצא מבוסס היטב, כי עלייה בתמסורת הדופאמינרגית הפריפרונטאלית מלווה לעיתים קרובות בירידה הדדית ברמות דופאמין סטראטאליות (Deutch et al., 1990; מיטשל וגראטון, 1992). כיצד מנגנון משוב כזה עשוי לפעול עבור מולקולות איתות תוך תאיות אינו ברור עדיין, אך עשוי לשקף שינויים בפעילות הכללית של רשתות עצביות מסוימות שנגרמו על ידי שינוי בתעתיק גנים. לדוגמה, הגדלת ΔFosB ב OFC מוביל upregulation של פעילות מעכבות מקומי, כפי שמעידים על ידי עלייה ברמות של GABAA קולטן, קולטן mGluR5 וחומר P, כפי שזוהו על ידי ניתוח microarray (וינסטנלי ואח ', 2007). שינוי זה בפעילות ה- OFC עלול להשפיע על הפעילות באזורים אחרים במוח, אשר עשויים להוביל לשינוי מקומי בביטוי של ΔFOSB. בין אם רמות ΔFosB משקפות שינויים יחסיים בפעילות דופאמין היא בעיה המצדיקה חקירה נוספת.

כל בעלי החיים הראו עלייה משמעותית ברמות ה- mRNA ΔFosB ב- NAC לאחר טיפול קוקאין כרוני, בהתאם לדוחות קודמים של רמות חלבון מוגברות (חן ואח ', 1997; הופעה ואחרות, 1992; Nye et al., 1995). עם זאת, דו"ח שנערך לאחרונה כי רמות של mRNA ΔFosB כבר לא העלה באופן משמעותי 24 h לאחר טיפול אמפטמין כרונית, אם כי עליות משמעותיות נצפו 3 ש לאחר הזרקת הסופי (Alibhai ואח ', 2007). פער זה נובע מהבדל בתרופה הפסיכוסטימולנטית (קוקאין לעומת אמפטמין), אך בהתחשב בחצי החיים הקצרים של קוקאין, סביר להניח שהשפעתה על ביטוי גנים תנורמל במהירות רבה יותר מאלה של אמפטמין, ולא להיפך. סיבה סבירה יותר לתוצאות שונות אלה היא כי בעלי חיים במחקר הנוכחי הוזרקו עם מינון מתון של תרופה פעמיים ביום במשך 21 ימים לעומת הזרקת מנה אחת גבוהה עבור 7 ימים (Alibhai ואח ', 2007). משטר הטיפול המורחב יותר יכול היה לגרום לשינויים בולטים יותר שנצפו כאן.

למרות השינויים בביטוי גנים שנצפו בתוך קוקאין כרונית לאחר NAAC הם הסכמה כללית עם הממצאים שדווחו בעבר, את גודל ההשפעות הוא קטן יותר במחקר הנוכחי. סיבה אחת אפשרית לכך היא שבעלי חיים הוקרבו רק 24 שעה לאחר הזרקת הקוקאין האחרונה, בעוד שרוב המחקרים השתמשו ברקמות שהתקבלו שבועיים מאז החשיפה האחרונה לסמים. מחקרים המחקרים את זמן הקורס של רגישות התנועה מצביעים על כך ששינויים בולטים יותר בהתנהגות ובביטוי הגן / חלבון נצפים בנקודת זמן מאוחרת יותר. למרות שאנו מדווחים על עלייה קלה ב- mRNA עבור דופמין D2 קולטן ב NAC, הקונצנזוס הכללי הוא כי רמות ביטוי של D2 או ד1 קולטן אינם משתנים לצמיתות בעקבות התפתחות של רגישות התנועה, אם כי הן מגדילה וירידה ב D2 מספר הקולטן דווחו זמן קצר לאחר תום המשטר הרגיש (ראו (פירס וקליבס, 1997) לדיון). התצפית שלנו כי GluR1 ו GluR2 mRNA היו ללא שינוי לאחר טיפול קוקאין כרונית בנקודת זמן מוקדמת זו היא גם בהתאם לדוח הקודם (פיצג'רלד ואח ', 1996), למרות עלייה של GluR1 mRNA זוהה בנקודות זמן מאוחר יותר לאחר הפסקת הטיפול psychostimulant כרונית (צ'רצ'יל ואח ', 1999).

עם זאת, עשינו עלייה קטנה ב mRNA PSD95 ב NAC של בעלי חיים שטופלו כרונית עם קוקאין. PSD95 הוא מולקולה פיגומים, והוא אחד החלבונים העיקריים בתוך הצפיפות postsynaptic של סינפסות מעוררות. זה מעגן מספר קולטני גלוטמט וחלבונים איתות הקשורים בסינפסה, ועל עלייה הביטוי PSD95 נחשב לשקף פעילות סינפטי מוגבר והגברת הכניסה וייצוב של קולטני גלוטמט בסינפסות (ואן Zundert ואח ', 2004). תפקיד PSD95 בפיתוח של רגישות התנועה כבר הציע בעבר (יאו ואח ', 2004).

מגביר את הביטוי Arc יש גם מקושרים לעלייה בפעילות הסינפטי. עם זאת, בעוד עלייה הביטוי Arc ב NAC נצפתה 50 דקות לאחר הזרקה עם amphetamine (קליבור ואח ', 2002), הנתונים שלנו מצביעים על כך כי ניהול כרוני של קוקאין לא upregulate Arc ב NAC יותר לצמיתות, אם כי עליות ארק נצפו 24 h לאחר מינון כרוני עם תרופות נוגדות דיכאון (Larsen ואח ', 2007) ו אמפטמין (Ujike ואח ', 2002). עלייה בזרחון CREB נצפתה גם ב NAC לאחר קוקאין חריף הממשל amphetamine (Kano et al., 1995; Konradi ואח ', 1994; עצמי ואח ', 1998), אבל זה אולי לא מפתיע כי אין עלייה ב mRNA CREB נצפתה לאחר ניהול קוקאין כרונית. איתות דרך מסלול CREB נחשב להיות חשוב יותר בשלבים הראשונים של נטילת סמים, עם גורמים שעתוק כגון ΔFOSB מגיע לשלוט כמו התמכרות מתקדמת (McClung ו Nestler, 2003). למרות CREB כבר מעורבים ההשפעות מתגמלת של קוקאין (קרלזון ואח ', 1998), לא היו דיווחים כי ביטוי CREB גדל משפיע על רגישות התנועה, למרות מגביר ויראלי מתווך אנטגוניסט שלילי דומיננטי של CREB, חלבון מדכא מוקדם CAMP inducible או ICER, מגביר hyperactivity הנגרמת על ידי הזרקה חריפה של אמפטמין (גרין ואח ', 2006).

לסיכום, למרות שרוב השינויים שבוצעו על ידי התרופה שראינו תואמים את התחזיות מהספרות, לא מצאנו שינויים בביטוי גנים בתוך ה- NAc, דבר שעשוי להסביר את התגובה הלוקטורית הרגישה לקוקאין שנצפתה אצל בעלי חיים תמימים התרופה עם intra-OFC AAV-ΔFosB. זה מעלה את האפשרות כי הגדלת ΔFosB ב OFC לא יכול להשפיע על הרגישות המוטורית באמצעות NAC, אם כי גנים רבים אחרים, לא נלמד כאן, יכול להיות מעורב. ראיות ניכרות מעידות על כך שהאפנון של קליפת המוח הפריפרונטלית המדיאלית (mPFC) יכול לשנות את הפעילות הסטריאטלית ובכך לתרום לרגישות התנהגותית לפסיכו-סולימולנטים (סטקטי, 2003; סטקטי וולש, 2005), אם כי פחות ידוע על תפקידה של אזורים פרה-פרונטאליים יותר הגחון כמו OFC. NAc מקבל כמה תחזיות מ OFC (ברנדס ואח ', 1992). עם זאת, מחקר חדש ומפורט יותר זיהו מעט מאוד OFC-NAc תחזיות: תיוג דלילה של החלק לרוחב ביותר של פגז NAC נצפתה בעקבות זריקות של עוקב anterogade לתוך אזורים לרוחב ו ventrolateral של OFC, ואת OFC הגחון ביותר אזור שולח תחזיות מינימלי לליבה NAC (שילמן ואחרים, 2008). הפוטמן העטורן המרכזי מקבל העצבנות הרבה יותר צפופה. לאור הראיות האנטומיות הללו, רוב רקמת ה- NAC שנבדקה בתגובות ה- PCR שלנו לא היה מחובר ישירות ל- OFC, ובכך הפחית את הסיכויים שכל שינוי בביטוי גנטי יזוהה בהצלחה.

ה- OFC מתכנן במידה רבה לאזורים שבהם הם קשורים באופן הדוק ל- NAc, כגון ה- mPFC, האמיגדלה הבזולטרלית (BLA), פוטאמן caudate וגרעין תת-ממדי (STN). אם השינויים ב- OFC יכולים באופן בלתי-ישיר לשנות את תפקוד ה- NAC באמצעות השפעתו בתחומים אלה, היא שאלה פתוחה. זה הוכח כי הפעילות של BLA משתנה לאחר נגעים OFC, וכי זה תורם באופן משמעותי את הגירעונות הלמידה היפוך שנגרם על ידי נזק OFC (Stalnaker et al., 2007), אבל כל ההשפעות בתוך אזורים כגון NAC טרם דווחו. זה עשוי להיות יותר פרודוקטיבי כדי למקד את תשומת הלב על תחומים אחרים מחובר חזק יותר OFC, אשר מעורבים גם בשליטה מוטורית. STN הוא יעד מבטיח במיוחד, שכן לא רק לעשות נגעים של STN ו OFC לייצר השפעות דומות על אימפולסיביות ו Pavlovian למידה (באונז ורובינס, 1997; Chudasama ואח ', 2003; Uslaner ורובינסון, 2006; וינסטנלי ואח ', 2005a), אבל sensitization המושרה על ידי psychostimulant- קשורה עם עלייה ביטוי C-Fos באזור זה (Uslaner ואח ', 2003). ניסויים עתידיים שנועדו לבחון כיצד שינויים המושרים על ידי סמים בביטוי גנים בתוך OFC משפיעים על תפקודם של אזורים במורד הזרם כמו ה- STN. OFC גם שולחת היטל קטין לאזור tegmental הגחון (Geisler ואח ', 2007), אזור ידוע להיות מעורב אנושות בהתפתחות של רגישות התנועה. זה אפשרי כי ביטוי יתר של ΔFosB ב OFC עשוי ולכן להשפיע על רגישות התנועה באמצעות מסלול זה.

האופי המדויק של הקשר בין שינויים המניעים תרופה בתפקוד הקוגניטיבי לבין רגישות התנועה הוא עדיין לא ברור, ועד כה התמקדנו ב- OFC. בהתחשב בממצאים אלו, יתכן כי שינויים בביטוי גנים הקשורים להתפתחות רגישות של תנועה במוח אחרים עשויים להיות בעלי השפעה כלשהי על התגובה הקוגניטיבית לקוקאין. ניסויים אשר לחקור את יחסי הגומלין בין אזורים קליפת המוח ו subcortical לאחר ניהול של תרופות ממכר עשוי לשפוך אור חדש על איך המדינה מכור נוצר ומתוחזק, ואת תפקידים אינטראקטיביים שיחק על ידי רגישות וסובלנות בתהליך זה.

עבור ל:

הפניות

  • Alibhai IN, גרין ת"א, פוטשקין JA, Nestler EJ. תקנה של ביטוי fosB ו DeltafosB mRNA: ב vivo ובמבחנה במבחנה. המוח מוח. 2007;1143: 22-33. [PMC מאמר חינם] [PubMed]
  • האגודה הפסיכיאטרית האמריקנית. מדריך אבחון וסטטיסטי IV ". וושינגטון: האגודה הפסיכיאטרית האמריקנית; 1994.
  • Bachtell RK, ויסלר K, Karanian D, DW עצמי. השפעות של גרעיני פנים תוך פגז של אטום של דופמין אגוניסטים ואנטיגוניסטים על קוקאין לקיחת קוקאין המבקשים התנהגויות עכברוש. Psychopharmacology (ברל) 2005;183: 41-53. [PubMed]
  • באונז C, רובינס TW. נגעים דו-צדדיים של הגרעין התת-אלמי גורמים לגירעונות מרובים במשימה קשבית אצל חולדות. Eur J Neurosci. 1997;9: 2086-99. [PubMed]
  • בכרה א. קבלת החלטות, שליטה דחופה ואובדן כוח רצון להתנגד לסמים: פרספקטיבה נוירו-קוגניטיבית. Nat Neurosci. 2005;8: 1458-63. [PubMed]
  • Berndse HW, גאליס דה גראף Y, Groenewegen HJ. ארגון טופוגרפי ויחסים עם תאים סטריאטורליים הגחון של תחזיות קורטיקוסטריאליות פרה-פרונטאליות בעכברוש. נירול. 1992;316: 314-47. [PubMed]
  • Carlezon WA, Jr, et al. תקנה של גמול קוקאין על ידי CREB. מדע. 1998;282: 2272-5. [PubMed]
  • חן J, קלץ MB, תקווה BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. אנטיגנים כרוניים הקשורים Fos: גרסאות יציב של deltaFosB המושרה במוח על ידי טיפולים כרוניים. J Neurosci. 1997;17: 4933-41. [PubMed]
  • Chudasama Y, et al. היבטים שונים של ביצועים על 5 הבחירה זמן תגובה סידורי הזמן הבאים נגעים של cingulate הקדמי הגבי, קורטקס infralimbic ו אורביטופרונטאל בעכבר: השפעות דיפרנציאליות על סלקטיביות, אימפולסיביות וכפייתיות. התנהגות המוח מוח. 2003;146: 105-19. [PubMed]
  • צ'רצ'יל L, סוונסון CJ, Urbina M, Kalivas PW. הקוקאין חוזרת משנה גלוטמט קולטן רמות המצע בגרעין accumbens ואת אזור tegmental הגחון של חולדות המפתחות רגישות התנהגותית. ניורוצ'ם. 1999;72: 2397-403. [PubMed]
  • קולבי קר, ויסלר ק', סטפן סי, נסלר אי-ג'יי, עצמי ד"ו. סוג תא ספציפי של Overexion של DeltaFosB משפר תמריץ לקוקאין. J Neurosci. 2003;23: 2488-93. [PubMed]
  • קוסטל ב, Domeney AM, Naylor RJ. היפראקטיביות לוקומוטורית הנגרמת על ידי עירוי דופמין לתוך הגרעין של מוח עכברים: ספציפיות של פעולה. Psychopharmacology (ברל) 1984;82: 174-180. [PubMed]
  • דויטש איי, קלארק WA, רוט רה. הפרעה דופאמין קליפת המוח הקדם-קליפתית משפר את היעילות של נוירונים דופאמין mesolimbic ללחץ. המוח מוח. 1990;521: 311-5. [PubMed]
  • Fitzgerald LW, Ortiz J, Hamedani AG, Nestler EJ. סמים של התעללות ולחץ להגביר את הביטוי של GluR1 ו NMDAR1 גלוטמט יחידות משנה קולטן באזור tegmental הגחון חולדה: עיבודים משותפים בין סוכני רגיש לחצות. J Neurosci. 1996;16: 274-82. [PubMed]
  • Garavan H, Hester R. תפקידה של שליטה קוגניטיבית בתלות בקוקאין. Neuropsychol Rev 2007;17: 337-45. [PubMed]
  • גייזלר S, Derst C, Veh RW, Zahm DS. Glutamatergic afferents של אזור tegmental הגחון בעכברוש. J Neurosci. 2007;27: 5730-43. [PMC מאמר חינם] [PubMed]
  • גרין ת"א, ואחרים. אינדוקציה של ביטוי ICER בגרעין Accumbens על ידי מתח או אמפטמין מגביר תגובות התנהגותיות לגירויים רגשיים. J Neurosci. 2006;26: 8235-42. [PubMed]
  • הנסון KL, לוצ'יאנה M, Sullwold K. Reward הקשורות קבלת ההחלטות גירעונות אימפולסיביות מוגברת בקרב MDMA ומשתמשים בסמים אחרים. אלכוהול התרופה תלוי. 2008
  • Hommel JD, סירס רם, Georgescu D, סימונס DL, DiLeone RJ. גן מקומי מציאה במוח באמצעות התערבות נגיפי RNA ויראלי. נת. 2003;9: 1539-44. [PubMed]
  • תקווה ב, קוסופסקי ב, היימן SE, Nestler EJ. תקנה של ביטוי מוקדם של הגן מוקדם AP-1 מחייב בגרעין עכברוש accumbens על ידי קוקאין כרונית. Proc Natl Acad Sci ארה"ב א. 1992;89: 5764-8. [PMC מאמר חינם] [PubMed]
  • Jentsch JD, טיילור JR. אימפולסיביות הנובעת מליקוי בתפקוד פרונטוסטריאטלי בשימוש בסמים: השלכות על השליטה בהתנהגות על ידי תמריצים הקשורים לגמול. פסיכופרמקולוגיה. 1999;146: 373-90. [PubMed]
  • Kalivas PW, Stewart J. Dopamine ההולכה ביזום וביטוי של סמים ו-מתח המושרה רגישות של הפעילות המוטורית. מוח מוח עצם 1991;16: 223-44. [PubMed]
  • Kalivas PW, Volkow ND. הבסיס העצבי של התמכרות: פתולוגיה של מוטיבציה ובחירה. Am J פסיכיאטריה. 2005;162: 1403-13. [PubMed]
  • Kano T, סוזוקי Y, Shibuya M, Kiuchi K, Hagiwara מ קוקאין- Induced CREB זרחון ו- C-Fos הביטוי מודחקים עכברים מודל פרקינסון. NeuroReport. 1995;6: 2197-200. [PubMed]
  • קרלר R, Calder LD, Bedingfield JB. קוקאין רגישות התנהגותית וחומצות אמינו מעוררות. Psychopharmacology (ברל) 1994;115: 305-10. [PubMed]
  • Kelz MB, et al. ביטוי של גורם שעתוק deltaFosB במוח שולט רגישות קוקאין. טבע. 1999;401: 272-6. [PubMed]
  • Klebaur JE, et al. היכולת של amphetamine לעורר arc (Arg 3.1) ביטוי mRNA ב caudate, גרעין accumbens ו neocortex מווסתת על ידי הקשר סביבתי. המוח מוח. 2002;930: 30-6. [PubMed]
  • Konradi C, קול RL, Heckers S, היימן SE. אמפטמין מווסת ביטוי גנים בסטריאטום חולדה באמצעות גורם שעתוק CREB. J Neurosci. 1994;14: 5623-34. [PubMed]
  • Larsen MH, Rosenbrock H, Sams-Dodd F, Mikkelsen JD. ביטוי של גורם נוירוטרופי שנגרם על ידי המוח, פעילות מווסתת של חלבון cytoskeleton mRNA, ושיפור של נוירוגנזה בהיפוקמפוס בוגרים אצל חולדות לאחר טיפול תת-כרוני וכרוני עם הטסופנסין המשולש מחדש של מונואמין. אור J פרמקול. 2007;555: 115-21. [PubMed]
  • Lejuez CW, Bornovalova MA, בנות SB, קרטין JJ. הבדלים באימפולסיביות ובהתנהגות של סיכון מיני בין סדק פנימי לעיר / קוקאין ומשתמשים בהרואין. אלכוהול התרופה תלוי. 2005;77: 169-75. [PubMed]
  • לייק KJ, שמיטגן TD. שיטות. Vol. 25. סן דייגו, קליפורניה: 2001. ניתוח של נתונים ביטוי גנטי יחסית באמצעות PCR כמותי בזמן אמת ואת 2 (-Delta דלתא C (T) שיטה; עמ '402-8.
  • McClung CA, Nestler EJ. תקנה של ביטוי גנים קוקאין פרס על ידי CREB ו deltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-15. [PubMed]
  • מיטשל JB, Gratton א דלדול חלק דופמין חלקית של הקורטקס הפריפרונטלי מוביל משופרת שחרור דופמין mesolimbic שנוצר על ידי חשיפה חוזרת ונשנית לגירויים חיזוק טבעי. J Neurosci. 1992;12: 3609-18. [PubMed]
  • מולר FG, et al. צמצום קורפוס קדמי קדמיום שלמות חומר לבן קשור להגברת אימפולסיביות מופחתת מופחתת של נושאים תלויי קוקאין: דיפוזיה tensor הדמיה. Neuropsychopharmacology. 2005;30: 610-7. [PubMed]
  • נסלר EJ. מנגנונים תעתיק של התמכרות: תפקיד deltaFosB. פילוס טרנס R סוק לונדון, B Biol Sci. 2008;363: 3245-55. [PMC מאמר חינם] [PubMed]
  • Nye HE, הופ BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. מחקרים פרמקולוגיים של הרגולציה של אינדוקציה כרונית הקשורה ל- FOS על ידי קוקאין בסטריאטום ובגרעין אקומבנס. Ther Exp Pharmacol ג'יי. 1995;275: 1671-80. [PubMed]
  • פרקינסון JA, et al. גרעין אקומבנס דלדול דופמין פוגע הן ברכישה וביצוע של התנהגות התנהגות פבלובית מתוחכמת: השלכות על תפקוד דופמין mesoaccumbens. התנהגות המוח מוח. 2002;137: 149-63. [PubMed]
  • Paxinos G, ווטסון C. המוח חולדה בקואורדינטות stereotaxic. סידני: עיתונות אקדמית; 1998.
  • Peakman MC, et al. ביטוי מוחי ספציפי למוח של מוטציה שלילית דומיננטית של c-Jun בעכברים מהונדסים מקטין את הרגישות לקוקאין. המוח מוח. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • פירס RC, Kalivas PW. מודל מעגלים של הביטוי של רגישות התנהגותית לפסיכו-סמים דמויי אמפטמינים. מוח מוח עצם 1997;25: 192-216. [PubMed]
  • רובינסון TE, ברידג 'KC. הבסיס העצבי של השתוקקות לסמים: תיאוריה של תמריץ-רגישות של התמכרות. מוח מוח עצם 1993;18: 247-91. [PubMed]
  • רוג'רס RD, et al. גרעונות ניתנים לחלוקה בקוגניציה של קבלת החלטות על מתעללים אמפתמינים כרוניים, מתעללים באופיאטים, חולים עם נזק מוקדי לקליפת המוח הפריפרונטאלית, ומתנדבים נורמטיביים של טריפטופן - ראיות למנגנונים מונומינרגיים. Neuropsychopharmacology. 1999;20: 322-39. [PubMed]
  • שילמן EA, Uylings HB, גאליס דה גראף Y, יואל D, Groenewegen HJ. הקורטקס המסלולית בחולדות יוצר טופוגרפית לחלקים מרכזיים של תסביך הקאטה-פוטאמן. Neurosci לט. 2008;432: 40-5. [PubMed]
  • Schoenbaum G, Roesch MR, סטלנקר ת"א. קליפת המוח אורביטופרונלית, קבלת החלטות והתמכרות לסמים. מגמות Neurosci. 2006;29: 116-24. [PMC מאמר חינם] [PubMed]
  • עצמי DW, et al. מעורבות של cinase חלבון תלוי cAMP בגרעין accumbens ב קוקאין עצמי הממשל ואת הישנות של התנהגות מחפשים קוקאין. J Neurosci. 1998;18: 1848-59. [PubMed]
  • Stalnaker ת"א, Franz TM, סינג T, Schoenbaum G. Basolateral lesygala lesions לבטל פגמים היפוך תלוי Orbitofrontal. Neuron. 2007;54: 51-8. [PubMed]
  • סטקטי. מערכות נוירוטרנסמיטר של הפרפורמטר המדיאלי c006Frtex: תפקיד פוטנציאלי ברגישות לפסיכו-סולימולנטים. מוח מוח עצם 2003;41: 203-28. [PubMed]
  • Steketee JD, וולש TJ. זריקות חוזרות של סולפירייד לקליפת המוח הפריפרונטאלית המדיאלית גורמות לרגישות לקוקאין בחולדות. Psychopharmacology (ברל) 2005;179: 753-60. [PubMed]
  • Ujike H, Takaki M, Kodama M, Kuroda ס ביטוי ג 'ין הקשורים synaptogenesis, neuritogenesis, ו- MAP קינאז רגישות התנהגותית כדי psychostimulants. אן ניו יורק אכד Sci. 2002;965: 55-67. [PubMed]
  • Uslaner JM, Crombag HS, פרגוסון SM, רובינסון TE. קוקאין, המושרה פעילות פסיכומוטורית קשורה ליכולתה לעורר c-fos mRNA ביטוי בגרעין תת - תלמי: השפעות של מינון וטיפול חוזר. Eur J Neurosci. 2003;17: 2180-6. [PubMed]
  • Uslaner JM, רובינסון TE. גידולי גרעין תת-דלקתיים מגבירים פעולה אימפולסיבית ומפחיתים בחירה אימפולסיבית - גישור על ידי מוטיבציה תמריץ משופרת? Eur J Neurosci. 2006;24: 2345-54. [PubMed]
  • ואן Zundert B, Yoshii, קונסטנטין- Paton מ 'קולטמנטליזציה קולטן וסחר בסינפסות גלוטמט: הצעה התפתחותית. מגמות Neurosci. 2004;27: 428-37. [PubMed]
  • Verdejo-Garcia AJ, Perales JC, פרז-גרסיה מ 'אימפולסיביות קוגניטיבית קוקאין והרואין polysubstance מתעללים. מכור התנהגות. 2007;32: 950-66. [PubMed]
  • Volkow ND, פאולר JS. התמכרות, מחלה של כפייה ודחף: מעורבות של קליפת המוח האורביטופרונטלית. Cereb קורטקס. 2000;10: 318-25. [PubMed]
  • וינסטלי CA, et al. אימפולסיביות מוגברת במהלך הנסיגה מ קוקאין עצמי הממשל: תפקיד DeltaFosB בקורטקס אורביטופרונטלי. Cereb קורטקס. 2008 ביוני 6; פרסום אלקטרוני לפני ההדפסה.
  • וינסטלי CA, Baunez C, Theobald DE, רובינס TW. הנגעים לגרעין התת-דתי מורידים את הבחירה האימפולסיבית אך פוגעים באוטושפינג בחולדות: חשיבות הגרעינים הבסיסיים בהתניה פבלובית ובבקרת הדחפים. Eur J Neurosci. 2005a;21: 3107-16. [PubMed]
  • וינסטלי CA, Theobald DE, דאלי ג 'ו, רובינס TW. אינטראקציות בין סרוטונין ודופאמין בשליטה על אימפולסיביות בחולדות: השלכות טיפוליות על הפרעות של אימפולסים. Neuropsychopharmacology. 2005b;30: 669-82. [PubMed]
  • וינסטלי CA, et al. אינדוקציה של DeltaFosB בקורטקס אורביטופרונאלי מתווכת על סובלנות לתפקוד קוגניטיבי המלווה בקוקאין. J Neurosci. 2007;27: 10497-507. [PubMed]
  • וולף. תפקידם של חומצות אמינו מעוררות ברגישות התנהגותית לממריצים פסיכו-מוטוריים. פרוג נוירוביול. 1998;54: 679-720. [PubMed]
  • יאו WD, et al. זיהוי של PSD-95 כווסת של דופמין בתיווך פלסטיות סינפטית התנהגותית. Neuron. 2004;41: 625-38. [PubMed]
  • זכריו V, et al. תפקיד חיוני DeltaFosB בגרעין accumbens בפעולה מורפיום. Nat Neurosci. 2006;9: 205-11. [PubMed]