מָקוֹר
המחלקה לביולוגיה של התא, אוניברסיטת סינסינטי, סינסינטי, אוהיו, ארה"ב.
תַקצִיר
רקע:
חוסר יכולת לעכב התנהגויות ברגע שהן הופכות לבלתי הולמות הוא מרכיב של מספר מחלות פסיכיאטריות, וקליפת המוח הפריפרונטלית המדיאלית (mPFC) זוהתה כמגשרת פוטנציאלית של עיכוב התנהגותי. המחקר הנוכחי בדק אם mPFC מעורב בעיכוב של התנהגות מינית כאשר הוא קשור לתוצאות מרתיעות.
שיטות:
באמצעות חולדות זכריות, ההשפעות של נגעים של אזורים infralimbic ו prelimbic של mPFC על הביטוי של התנהגות מינית ויכולת לעכב ההזדווגות נבדקו באמצעות פרדיגמה של סלידה מותנה- copulation.
תוצאות:
פצעים קליפת המוח הקדם-פרונטליים המדיאליים לא שינו ביטוי להתנהגות מינית. לעומת זאת, נגעים של mPFC חסמו לחלוטין את רכישת ההתמכרות לסלידה מינית והחיות הלסביות המשיכו להזדווג, בניגוד לעיכוב ההתנהגותי החזק כלפי הזדווגות אצל בעלי חיים שלמים של mPFC, וכתוצאה מכך רק 22% מבעלי החיים הגבריים הנמשכים ממשיכים להזדווג. עם זאת, חולדות עם נגעים mPFC היו מסוגלים ליצור העדפה מקום מותנה לתגמול מיני מותנה סלידת מקום עבור ליתיום כלורי, מה שמרמז כי נגעים אלה לא לשנות למידה אסוציאטיבית או רגישות עבור ליתיום כלורי.
מסקנות:
המחקר הנוכחי מצביע על כך שבעלי חיים עם נגעי mPFC מסוגלים ליצור קשרים עם תוצאות התנגדות של התנהגותם, אך חסרים את היכולת לדכא חיפוש אחר תגמול מיני לנוכח השלכות מרתיעות. נתונים אלה עשויים לתרום להבנה טובה יותר של פתולוגיה נפוצה העומדת בבסיס הפרעות שליטה בדחפים, מכיוון שהתנהגות מינית כפייתית היא בעלת שכיחות גבוהה של תחלואה נלווית עם הפרעות פסיכיאטריות ומחלת פרקינסון.
מבוא
קליפת המוח הפריפרונטאלית המדיאלית (mPFC) מעורבת בפונקציות רבות יותר של מערכת העצבים היונקית, כולל הסדרת עוררות רגשית, התנהגויות דמויי חרדה, גמישות התנהגותית וקבלת החלטות (1-5). קבלת החלטות מבוססות תגמול היא נשלטת על ידי מעגל עצבי המורכב mPFC, האמיגדלה, ואת הסטריאטום (6) שבו mPFC פועל כבקרה "מלמעלה למטה" של תהליך זה (7,8). מאפיין מרכזי של קבלת החלטות מבוססות תגמול הוא היכולת לעקוב אחר יחסי "תגובת תגובה" לאורך זמן (9). בדרך זו, כאשר התוצאות הקשורות פעולה התנהגותית להיות שלילי, תדירות של פעולות אלה פוחתת. התוצאה היא הסתגלות התנהגותית חיובית, ואת התגובה הזו תלויה פונקציה שלמה mPFC (8, 10). חוסר היכולת לשנות פעולות התנהגותיות לאחר שהן מובילות לתוצאות שליליות הוא סימפטום נפוץ למגוון של הפרעות ממכר (11-15).
התנהגות מינית גברית רודנט היא התנהגות טבעית המבוססת על גמול, שבה יחסי תגובת תגובה מתבצעים כדי להשיג את המטרה של הזדווגות (16). עם זאת, עכברים זכרים נמנעים מזיווג כאשר ההתנהגות המינית היא זיווג עם לגירוי מרתיע ליתיום כלורי (LiCl, 17, 18). פעילות mPFC נמצאה בקורלציה עם התנהגות מינית גברית במכרסמים (19-25) ובני אדם (26). עם זאת, התפקיד המדויק של mPFC בהתנהגות מינית עדיין לא ברור. מטרת המחקר הנוכחי הייתה לאפיין את ההשפעות של נגעי mPFC על הבעת ההתנהגות המינית, ועל רכישת עיכוב התנהגותי כלפי התנהגות מינית אצל עכברושים, תוך שימוש במודל של רתיעה מותנית. הנגעים כללו את גרעיני ה- infralimbic (IL) וה- Prelimbic (PL) של ה- mPFC, מאחר שתת-אזורים אלה הוכחו כמתייחסים לאזורים במוח המעורבים בהסדרת ההתנהגות המינית (20). תוצאות ממחקר זה מראות כי פונקציית mPFC שלמה אינה נדרשת לביטוי נורמלי של התנהגות מינית. במקום זאת, התוצאות תומכות בהשערה כי mPFC מסדיר את ביצוע העיכוב ההתנהגותי כלפי התנהגות מינית לאחר שהתנהגות זו קשורה לתוצאות מרתיעות.
חומרים ושיטות
בעלי חיים
(250-260 גרם) עכברי Sprague Dawley המתקבלים ממעבדות Harlan (אינדיאנפוליס) שוכנו בנפרד בחדר מוארך באור מלאכותי על מחזור אור / כהה הפוך (12: 12 שעה, האורות כבויים ב- 10 AM) בטמפרטורה של 72 ° F. מזון ומים היו זמינים בכל עת. Ovariectomized, אסטרוגן (כמוסות X סיליקון עם 5% 17-beta-estradiol benzoate) ו progesterone (הזרקת SC 500 מיקרוגרם ב 0.1 מ"ל של שמן שומשום) נקבה נקבעה חולדות Sprague Dawley (210-225 גרם) שימשו בכל בדיקות ההזדווגות, אשר החל ארבע שעות לאחר הופעת התקופה האפל והתנהגות נערכה בכלוב מלבני Plexiglas הבדיקה (60 × 45 × 50 ס"מ) תחת תאורה אדומה עמום. כל הליכים אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים ושימוש הוועדה של אוניברסיטת סינסינטי, אוניברסיטת המערב אונטריו טיפול בבעלי חיים, ו תואמות את NIH ו CCAC הנחיות הכוללות בעלי חוליות במחקר.
ניתוח לזיה
בעלי חיים היו מורדמים עם מינון 1-ml / kg (87 מ"ג / ק 'קטמין ו 13 מ"ג / ק"ג Xylazine). בעלי חיים הושמו במנגנון stereotaxic (Kopf מכשירים, Tujunga, CA ארה"ב), חתך נעשה לחשוף את הגולגולת, וכן חורים שנקדחו מעל אתרי ההזרקה באמצעות drillel מקדחה (Dremmel, ארה"ב). חומצה איבונית (0.25μl, 2% ב PBS) היה חדורים בילטרלית באמצעות שתי זריקות בקואורדינטות dorsoventral שונים, בכל תקופה 1.5 דקות באמצעות מזרק המילטון 5μl בקואורדינטות הבאות ביחס Bregma (עם הגולגולת מאוזן אופקית): עבור PL ו IL נגעים: AP = 2.9, ML = 0.6, DV = -5.0 ו- 2.5. נגעים של Sham בוצעו באמצעות אותן שיטות, אך באמצעות הזרקת הרכב (PBS). כל בעלי החיים הורשו להתאושש עבור 7-10 ימים לפני בדיקות התנהגותיות.
עיצוב
ביטוי של התנהגות מינית
נגעים PL ו- IL בוצעו בבעלי חיים שהיו תמימים מינית לפני הניתוח. לאחר ההתאוששות, בעלי החיים הורשו להזדווג פעם בשבוע עד להצגת שפיכה אחת, למשך ארבעה שבועות רצופים לאחר הניתוח. ההבדלים בפרמטרים המיניים (כלומר, חביון על הר, אינטרומיסיה, שפיכה, ומספרים של הרמות ואינטרומיציות) נבדקו תוך שימוש ב- ANOVA חד-כיווני עם ניתוח נגעים כגורם. השוואות פוסט הוק בוצעו באמצעות מבחני ה- Fishers PLSD, כולם עם רמות מובהקות של 5%.
פלוס מנוסה ניסויים פלוס
בעלי חיים עם נגעים או טיפול דמה נבדקו על מבוך מוגבה פלוס (EPM). בדיקה זו בוצעה חמישה שבועות לאחר הניתוח ושבוע לאחר הפגישה האחרונה ההזדווגות. EPM היה עשוי פרספקס ברור והכיל ארבע זרועות באורך שווה המשתרע בזירה במרכז שיצרו את הצורה של סימן פלוס. שתי זרועות המבוך היו פתוחות לסביבה החיצונית ושתי זרועות המבוך האחרות היו מוקפות בשורה אפלה (40cm גבוהה) שנמשכה לאורך כל זרועה. הגבולות בין האזור התיכון לבין הזרועות הוגדרו על ידי פסים לבנים על הזרועות שנמצאו 12cm מאמצע המבוך. בדיקות EPM נערכו תחת תאורה עמומה, 1-4 שעות לאחר תחילת התקופה האפל. ההבדלים בין בעלי חיים דמה ו lesioned נקבעו באמצעות מבחני סטודנט עם רמת מובהקות של 5%.
מצב משפחתי
חולדות זכריות היו כפופות לשלוש פגישות זיווג כדי לזכות בחוויה מינית לפני ניתוח הנגע או דמה. בעלי חיים שהציגו שפיכה במהלך לפחות שניים מתוך שלושה מבחני ההזדווגות לפני הניתוח נכללו במחקר זה וחולקו באקראי על פני ארבע קבוצות ניסיוניות: Sham-LiCl, Lesion-LiCl, Sham-Saline ו- Lesion-Saline. ניתוחי Lesion או Shame בוצעו 3 ימים לאחר האימון האחרון. בעלי חיים הורשו להתאושש במשך שבוע לאחר הניתוחים לפני תחילת המיזוג. במהלך ההתאמות, מחצית הזכרים והזיזים קיבלו את LiCl מיד לאחר ההזדווגות (Sham-LiCl ו- Lesion-LiCl), בעוד שהמחצית השנייה של הזכרים והזיזים שימשה כבקרה וקיבלה מלוחים מיד לאחר ההזדווגות (Sham-Saline ו לסון- Saline). ביום מותקן 1, בעלי חיים הורשו להזדווג לשפיכה אחת הוזרקו תוך דקה אחת לאחר שפיכה עם מינון 20ML / kg של 0.15M LiCl או מלוחים ולאחר מכן הניח בחזרה לתוך כלובי הבית שלהם. בבוקר על יום ההתניה 2, כל הזכרים היו שקולים, בעלי חיים מותנים מלוחים קיבלו מנה 20ML / kg של 0.15M LiCl, בעוד LiCl מותנה בעלי חיים הוזרקו עם כמות שווה של מלוחים. פרדיגמה זו חזרה על עצמה במשך עשרים ימים רצופים בסך הכל עשר פגישות מיזוג מלאות. במהלך כל משפט נרשמו פרמטרים של התנהגות מינית. הבדלים באחוזים של בעלי חיים שהראו גבהות והפרעות, או שפיכה נותחו עבור כל ניסוי באמצעות ניתוח מרובע כימי עם רמת מובהקות של 5%. מאחר שלא נמצאו הבדלים בין קבוצות ה- SAM-Saline ו- Lesion-Saline בכל פרמטר, שתי הקבוצות הללו היו משולבות לניתוח סטטיסטי (n = 9) והושוו עם ה- Lesion-LiCl או קבוצת Sham-LiCl.
מקום מועדף
בעלי חיים תמימים מבחינה מינית עברו ניתוח נגעים כמתואר לעיל והורשו להתאושש במשך שבוע לפני בדיקות התנהגותיות. כל בדיקות ההתנהגות החלו 4 שעות לאחר תחילת התקופה האפל. מנגנון ההעדפה המועדף על המקום היה מחולק לשלושה תאים עם חדר מרכזי נייטרלי. בצד אחד של החדר היו קירות לבנים ורצפת רשת, ואילו הצד השני היה שחור עם מוטות נירוסטה כמו ריצוף, החדר המרכזי היה אפור עם ריצוף פרספקס (Med Associates, סנט אלבנס, VT). ראשית, בדיקה מראש בוצע כדי לקבוע העדפה טבעית לכל אדם לפני תחילת ההתניה, כל בעלי החיים הוכנסו לחדר המרכזי עם גישה חופשית לכל החדרים במשך חמש עשרה דקות ואת משך הזמן הכולל בילה כל חדר נרשמה. ביום המחרת, כלומר מיזוג יום 1, זכרים הזדווגות לשפיכה אחת בכלוב הבית שלהם שבו הם הונחו מיד לחדר הראשון לא המועדף במשך שלושים דקות ללא גישה לתאים אחרים או הוכנסו לחדר המועדף הראשון שלהם עבור שלושים דקות ללא התנהגות מינית מוקדמת. ביום ההתניה השני, הזכרים קיבלו טיפול הפוך. פרדיגמת מיזוג זו חזרה על עצמה שוב. למחרת, נערך מבחן פוסט-פרופורציונלי שהיה זהה מבחינה פרוצדורלית למבחן הטרום. שני ערכים נפרדים שימשו כדי לקבוע אם חיות mMFC lesioned יצרו העדפה מקום מותנה למין. הניקוד הראשון היה ההבדל ההפרש, שהוגדר כהפרש בין הזמן המושקע בחדר המועדף בתחילה ואת הזמן המושקע בחדר לא מועדף בתחילה. ניקוד ההעדפה הוגדר כזמן המושקע בחדר שאינו מועדף בהתחלה חלקי הזמן המושקע בחדר שאינו מועדף תחילה בתוספת הזמן המושקע בחדר המועדף. ההעדפות וציוני ההפרש הושוו עבור כל בעל חיים בין בדיקה מוקדמת לבחינת פוסט באמצעות מבחני סטודנט משויכים עם רמות מובהקות של 5%. מחקרים קודמים הוכיחו כי ההזדווגות גורמת להעדפות מיקום מותנות חזקות באמצעות פרדיגמה זו, וכי טיפולי בקרה אינם גורמים לשינוי בהעדפות (27-29).
מקום מותנה היפוך
בעלי חיים תמימים מבחינה מינית עברו ניתוח נגע או ניתוח דמה כמתואר לעיל והורשו להתאושש במשך שבוע לפני הבדיקה ההתנהגותית. כל בדיקות ההתנהגות החלו 4 שעות לאחר תחילת תקופת האור. באמצעות מנגנון CPP שתואר לעיל, LiCl או זריקות מלוחים היו לזווג עם המועדף בתחילה או לא המועדף קאמרית בהתאמה במהלך שני ניסויים מיזוג בצורה מאוזנת מאוזנת. נערכו מבחנים קדם-אקדמיים והנתונים ניתחו כמתואר לעיל באמצעות מבחני סטודנט משויכים עם רמות מובהקות של 5%.
אימות הנגע
עבור אימות חיות הנגע היו perfused transcardially עם parformaldehyde 4% ומוח היו מחולקים (coronally). הסעיפים היו ו immunoprocessed עבור Neuon סמן נוירון באמצעות antiserum העיקרי בפתרון הדגירה הכרה NeuN (antocum monoclonal anti-NeuN, 1: 10,000, כימיקון) ושיטות immunoperoxidase תקן (19). המיקום והגודל של נגעים ibotenic נקבע על ידי ניתוח השטח בסעיפים mPFC סמוכים נטול מכתים נוירון Neuon. נגעים של mPFC בדרך כלל מורחבת מרחק מ AP + 4.85 ל + 1.70 ביחס bregma (איור 1A-C). נגעים נחשבו להשלים אם 100% של IL ו 80% של PL הושמד, ורק בעלי חיים עם נגעים מלאים נכללו בניתוחים סטטיסטיים (ניסוי התנהגות המין, lesion n = 11, sham n = 12, EPM הניסוי, lesion n = 5, sham nx = 4, מותק, ניוון x = 4, sham-LiCl n = 9, lesion-saline n = 5, lesion-LiCl n = 12; ניסוי מקום מועדף, lesion n = 5 ; מותנה מקום הניסוי סלידה, sham n = 12, lesion n = 9).
תוצאות
התנהגות מינית
פגיעות PL / IL לא השפיעו על פרמטרים מיניים שנבדקו אצל גברים שהיו תמימים מינית לפני הניתוח (איור 1D-F). לפי ההסכם, לא נמצאו השפעות של נגעים מסוג PL / IL על ההתנהגות המינית אצל גברים מנוסים מבחינה מינית, הכלולים בניסוי הסלידה המיני המותנה, במהלך הניסוי הראשון, ולכן לפני ההתאמה של LiCl עם התנהגות מינית (לוח 1). לפיכך, נגעים PL / IL לא השפיעו על התנהגות מינית עצמאית של ניסיון מיני.
פלוס מבוך
על פי דיווחים קודמים (27-29), חולדות זכרים עם נגעים mPFC זכרים הציגו יותר ערכים בזרועות הפתוחות של EPM לעומת פקדים (איור 1G), דבר המצביע על כך שתפקוד mPFC הוא קריטי למצבים הדורשים הערכת סיכונים.
דחייה מינית מותנית
ההשפעות של מיזוג LiCl על התנהגות מינית
מיזוג של LiCl הביא לירידה משמעותית באחוזים של גברים מזויפים שהראו גבהות, intromissions, או שפיכה לעומת פקקים מלוחים דמה (איור 2A-B). עם זאת, נגעים mPFC חסמו לחלוטין את העיכוב הנגרם על ידי מיזוג LiCl. אנליזה מרובעת של צ'י חשפה הבדלים משמעותיים בין קבוצות שזוהו באחוזים של בעלי חיים,איור 2A), intromissions (לא מוצג, נתונים זהים איור 2A), או שפיכה (איור 2B). באופן ספציפי, אחוז הזכרים שהראו גבהות, intromissions או שפיכה היו נמוכים יותר באופן מובהק בקבוצת SHAM-LiCl בהשוואה לבעלי חיים בשליטה מלוחים (Sham ו- Lesion), דבר המצביע על השפעה משבשת של מיזוג LiCl על הזדווגות אצל בעלי חיים. לעומת זאת, ללא השפעה של מיזוג LiCl נצפתה בזכרים Liion-LiCl (דמויות 2A-B). לכן, הפונקציה mPFC הוא קריטי לרכישת עיכוב מותנה של התנהגות מינית. עם זאת, ייתכן כי נגעים PL / IL להפחית את הלמידה האסוציאטיבית הקשורה לתגמול מיני, ולכן נבדקו השפעות מחקר שונות של נגעים PL / IL ברכישת העדפת מקום מותנה לתגמול מיני.
מקום מועדף והיפוך
חולדות עם נגעי mPFC הראו למידה אסוציאטיבית נורמלית של רמזים קונטקסטואליים עם זיקה מינית, כפי שצוין על ידי ציון הבדל מוגבר וציון העדפה במהלך הבדיקה לאחר הבדיקה (איור 3A-B). יתר על כן, נגעים לא השפיעו על למידה אסוציאטיבית של רמזים קונטקסטואליים עם חולשה ב- LiCl, המופיעה על ידי ירידה משמעותית בהבדלים וציוני ההעדפות במהלך הבדיקה לאחר הבדיקה (איור 3C-D).
דיון
במחקר זה, אנו מדווחים כי נגעים של אזורי IL ו- PL של mPFC אינם משפיעים על הבעת ההתנהגות המינית, ולא על רכישת העדפת מקום מותנית לתגמול מיני. במקום זאת, נגעים מונעים את הרכישה של סלידה מינית מותנית. תוצאות אלה מספקות ראיות פונקציונליות להשערה כי היכולת לבצע שינויים התנהגותיים מסתגלים מוסדרת על ידי תת אזורי IL ו- PL של ה- mPFC.
נתונים קודמים מהמעבדה שלנו הראו כי נוירונים mPFC מופעלים במהלך ההתנהגות המינית אצל חולדות זכרים (20). עם זאת, חולדות lespioned mPFC במחקר זה אינם נבדלים חולדות שליטה דמה בכל הפרמטרים ניתח של התנהגות מינית. על פי דיווחים קודמים (30, 32) נגעים mPFC עשה לייצר תופעות חרדה כפי שהוערך על ידי ביצועים במבוך מוגבה פלוס, המציין כי פרוטוקול lesioning שלנו היה יעיל. לכן, התוצאות הנוכחיות מציעות הפעלה של חלוקות IL ו- PL בתוך mPFC במהלך ההתנהגות המינית אינה הכרחית לביטוי נורמלי של התנהגות מינית. לעומת זאת, מחקר קודם של Agmo ושל עמיתים לעבודה הראה כי נגעים של אזור הסינגול הקדמי (ACA) הגדילו את זמן ההחזרה של הרמה והאירומיזציה והפחיתו את אחוז הזכרים שהצטברו (25). לכן, ייתכן כי ACA משחק תפקיד בביצוע של התנהגות מינית, ואילו אזורי IL ו- PL מתווכים עיכוב של התנהגות פעם קשורה לתוצאות מרתיעה.
למרות נגעים mPFC דווחו כדי לשבש צורות שונות של איחוד זיכרון (33, 34), ההשפעות של נגעים mPFC על עיכוב התנהגותי המדווח כאן לא ניתן לייחס גירעונות למידה. במערך נפרד של ניסויים נבדקו הזכרים הנבדקים mPFC על היכולת לקבוע העדפת מקום מותנה להתנהגות מינית. הלמידה האסוציאטיבית הקשורה לתגמולים נותרה שלמה אצל בעלי החיים של mPFC lesioned, כיוון שזכרים אלה היו מסוגלים ליצור העדפת מקום מותנית לתא מזווג מיני. ממצא זה עולה בקנה אחד עם מחקרים קודמים לבחון את התפקיד של PL או להשלים mPFC לרכישת psychostimulant המושרה CPP (35, 36), יתר על כן, למידה אסוציאטיבית לגירוי מרתיע LiCl לא הושפע נגעים mPFC, עולה בקנה אחד עם דוחות קודמים כי נגעים PFC לא מנע את הרכישה של דחייה טעם מותנה (34). באופן קולקטיבי נתונים אלה מצביעים על כך שהפעילות שנצפתה בעבר של חלוקות PL / IL בתוך mPFC (20) אינם הכרחיים לרכישת הלמידה האסוציאטיבית הקשורה לתגמול, אולם הם נחוצים לניצול נכון של מידע זה ככל שהוא נוגע לביצוע בקרה התנהגותית. תפיסה זו עולה בקנה אחד עם הטענה הקיימת כי פונקציה שלמה של ה- IL נחוצה כדי לסקור ולפעול על סמך תשומות מעכבות ומעוררות, המספקות מידע על מצבים של דחיית שכר (37). יתר על כן, בעלי חיים עם PL (35) או IL (8, 37, 38) lesions להציג את ההכחדה הנורמלית למידה למרות חוסר היכולת לנצל את המידע הזה כדי להפוך את המטרה מכוונת החלטות.
לסיכום, המחקר הנוכחי מצביע על כך שחיות עם נגעי mPFC עשויות, ככל הנראה, ליצור את האסוציאציות עם תוצאות מרתיעות של התנהגותן, אך חסרות היכולת לדכא את החיפוש אחר תגמול מיני מול תוצאות מרתיעות. אצל בני אדם עוררות מינית היא חוויה מורכבת, שבה העיבוד של מידע קוגניטיבי-רגשי משמש כדי לקבוע אם התכונות ההדוניות של גירוי מסוים מספקות כדי לשמש תמריץ מיני (39). הנתונים הנוכחיים מצביעים על כך שתפקוד לקוי של mPFC עשוי לתרום לקיום סיכון מיני או לחיפוש כפייתי של התנהגות מינית. יתר על כן, תפקוד לקוי של mPFC נקשר למספר הפרעות פסיכיאטריות (13, 40), דבר המצביע על כך שתפקוד לקוי של ה- mPFC עשוי להיות פתולוגיה בסיסית המשותפת להפרעות אחרות, וכי התנהגות מינית כפייתית עשויה להיות קשורה להפרעות אחרות. ואכן, בבני אדם, היפרסקסואליות או התנהגות מינית כפייתית מדווחים על שכיחות גבוהה של תחלואה נלווית עם מצבים פסיכיאטריים (כולל שימוש בסמים, חרדה והפרעות מצב רוח)41), וכ- XXNXX% בשכיחות מחלת פרקינסון יחד עם קנייה כפייתית, הימורים ואכילה (42-44).
הערות שוליים
כתב ויתור על המו"ל: זהו קובץ PDF של כתב יד בלתי ערוך, שהתקבל לפרסום. כשירות ללקוחותינו אנו מספקים גרסה מוקדמת זו של כתב היד. כתב היד יעבור העתקה, סדור וסקירה של ההוכחה המתקבלת לפני שיפורסם בצורתו הסופית. לידיעתך, במהלך תהליך הייצור ניתן למצוא שגיאות שעלולות להשפיע על התוכן, וכל כתבי ויתור משפטיים החלים על כתב העת.
;