קור נוירופרמקול. 2011 מרץ; 9 (1): 63-67.
עשו you 10.2174/157015911795017218
מאמר זה כבר שצוטטו על ידי מאמרים נוספים ב PMC.
תַקצִיר
מטרת המחקר הנוכחי הייתה לבחון האם תפקוד הגמול במוח פוחת במהלך הנסיגה מניקוטין וממתאמפטמין, והאם הפחתת הפונקציה של הפונקציה קשורה לדחיה במהלך הנסיגה מתרופות אלו. לשם כך, חולדות זכר Sprague-Dawley היו חדורים כרונית תת עורית עם 9 מ"ג / ק"ג ליום ניקוטין, או עם 6 מ"ג / ק"ג ליום מתאמפטמין באמצעות minipumps אוסמוטי. בגדילה פנימית של גירוי עצמי (ICSS), העירוי הכרוני של ניקוטין ומתיאמפטמין הוריד את הסף של ICSS ההיפותלמי לרוחב, ואילו היריבים שלהם, mecamylamine ו- haloperidol הגדילו את סף ה- ICSS בחולדות שטופלו בניקוטין ובמתאמפטמין, בהתאמה. במקום מותנה סלידה פרדיגמה, mecamylamine ו haloperidol מיוצר סלידה במקום ב עכברים ניקוטין ו- Methamphetamine חדורים, בהתאמה. מעניין, הגבהים ב ICSS גמול סף ואת מקום סלידה במהלך נסיגה ניקוטין mecamylamine זירז היו כמעט באותו גודל כמו אלה שנצפו במהלך ההליכה methamphetamine haloperidol- זירז. המחקר הנוכחי מצביע על כך ש - 1) פונקציית תגמול המוח ירדה במהלך הניקוטין והנסיגה של מתאמפטמין, ו- 2) ירידה בתפקוד הגמול עשויה לשקף את המצב הרגשי השלילי (שנאה) במהלך נסיגה מניקוטין וממתאמפטמין.
1. מבוא
עדויות קליניות מצביעות על כך שהסימנים הרגשיים של תסמונת ההתנזרות עשויים להיות רלוונטיים יותר לתשוקה לסמים ולהישנות לשימוש בסמים כפייתיים מאשר בסימני הנסיגה הסומטיים [1-3]. מסיבה זו, היבטים רגשיים של התלות בסמים נחקרו בהרחבה באמצעות סוגים שונים של פרדיגמות ניסיוניות. ביניהם, הטכניקה של גירוי עצמי תוך גולגולתי (ICSS) נמצא בשימוש נרחב למדידת תפקוד המוח. במחקרים בבעלי חיים, ניהול חריף של סמים של התעללות מקטין את סף תגמול ICSS [4, 5] ורגישות מוגברת זו לגירוי נחשבת למדד של אופוריה הנגרמת על ידי תרופות [6]. יתר על כן, יש להניח כי תגמול ICSS עשוי להיות מוחלש לאחר ניהול חוזרות ונשנות של סמים של התעללות, הנובע שינויים neuroadapted של מערכות תגמול המוח, משקפים דיספוריה במהלך הנסיגה מן התרופה [7, 8]. מחקרים רבים הוכיחו הגבהות בספי הגמול של ICSS במהלך נסיגה מסוגים שונים של שימוש בסמים, כולל אמפטמין [9], קוקאין [6], opiates [10], אתנול [11], וניקוטין [12], שכולן תומכות בהשערה הנ"ל. לפיכך, המחקר הנוכחי נועד להבהיר האם הגבהים בספי הגמול של ICSS קשורים למצב נסיגה רגשית שלילית, תוך התמקדות ספציפית בשני סוגים שונים של פסיכו-סולימולנטים, ניקוטין ומתאמפטמין.
2. חומרים ושיטות
2.1. חיות
שבעים ושניים עכברים של Sprague-Dawley (332-396 g) שהתקבלו מקליאה יפן בע"מ (טוקיו) שוכנו בנפרד בחדר בעלי חיים בטמפרטורה מוסדרת (22 ± 2 ºC) עם מחזור אור / כהה של 12 / 12 שעות (אור ב 8: 00 AM). כל עכברוש הוזן 15 גרם של מזון ליום (מים זמין באופן חופשי) לאורך כל הניסוי, למעט תקופה של 3 ימים לפני 7 ימים לאחר הניתוח. ניסוי זה בוצע על פי העקרונות של טיפול בבעלי חיים מעבדה של בית הספר לרפואה של אוניברסיטת Jikei.
2.2. תרופות
(-) - ניקוטין מימן טרטרט (סיגמא, סנט לואיס, MO, ארה"ב), mecamylamine hydrochloride (סיגמא), (-) methamphetamine hydrochloride (Dainiponn Seiyaku, יפן), ו haloperidol hydrochloride (סיגמא) היו מומסים מלוחים מוזרק נפח של 1.0 מ"ל / ק"ג.
2.3. גירוי עצמי תוך גולגולתי
2.3.1. מכשיר
תא אופציונלי סטנדרטי של 29.5 (W) x 23.5 (L) x 28.7 (H) ס"מ (ENV-008; מד Associates, Inc, St. Albans, VT, ארה"ב) מצויד בידית אחת ואור רמז מעל הידית על הקיר הקדמי ואור בית על הקיר האחורי שימש. סדינים היו עשויים פרספקס שקוף.
2.3.2. כִּירוּרגִיָה
חולדות היו מורדמות עם נתרן pentobarbital (50mg / ק"ג, IP) והוכנו עם אלקטרודה דו קוטבית נירוסטה (Neuroscience, יפן) בהיפותלמוס לרוחב (קואורדינטות 3.8M אחורי לגרגמה, 1.4mm לרוחב לקו האמצע, 8.4mm הגחון לדורה) לפי אל האטלס של Paxinos ו Watson [13]. כדי לאזן כל אסימטריה מוחית אפשרית, חצי מהחולדות קיבלו שתלים בצד הימני של המוח, והשני בצד שמאל.
2.3.3. תהליך
באימוני ההדרכה של ה- ICSS הופעל אור בית ואור רמז והגירויים החשמליים ניתנו בכל פעם מיד לאחר שהלחץ לחץ על הידית. הגירויים כללו 1.5 MSC פולסים קטודליים מלבניים, שנמסרו על ידי XNXX הרץ עבור MSN 100 עם זרם קבוע של 150 μA. כל מפגש אימון נמשך 120 דקות. הכשרה ICSS ניתנה לפחות עבור 15 ימים והמשיך עד מספר העיתונות מנוף היה יותר מ 6 לדקה עבור 30 ימים רצופים.
כדי למדוד את הבסיס של התגובה ICSS, הבדיקה הבסיסית בוצעה עבור 15 דקות לפני כל מבחן סף ICSS. הליך הבדיקה הבסיסית היה זהה לזה של אימון ה- ICSS. מבחן סף ICSS היה מורכב XNXX פחי זמן של 11 דקות מופרדים על ידי 3 זמן דקות החוצה. במשך הזמן, כבונו מנורת בית ומנורת קיו. בכל פנס בדיקה, האורות האלה הופעלו והחולדות קיבלו את הגירוי החשמלי לאחר כל לחיצה על הידית. מעבר הפחים, זרם גירוי חשמלי ירד על ידי μN 1 מ μA 10 ל μN 120 בסדר יורד.
בסיס יציב של התגובה ICSS הוקמה עבור כל חולדות לפני ההשתלה של minipumps. ביום 1, minipump אוסמוטי (Alzet 2001, Alza Corporation, CA, ארה"ב) עם קצב הזרימה של 1.03 μl / h מלא ניקוטין או מתאמפטמין במלח הושתל תת עורית בחולדות שהורדו עם diethylether. ריכוז הניקוטין והמתאמפטמין הותאם להבדלים במשקל הגוף, אך היה בערך 116 ו- 77.3 mg / ml, וכתוצאה מכך עירוי תת-עורתי מתמשך בשיעור של 9 mg / kg ליום ניקוטין ובשיעור 6 mg / kg ליום של מתאמפטמין על פי השיטה של מחקר קודם [14]. מבחן סף ICSS נערך ביום 2, 4, ו 6 לאחר השתלת minipumps.
ביום 7 לאחר השתלת minipump, חולדות קיבלו Mecamylamine (0.0, 0.1, 0.5, 1.0 mg / kg, sc) ב methamphetamine ו- saline- infused קבוצות, 0.0 דקות לפני תחילת הבדיקה סף ICSS הפגישה, תוך שימוש בתוך נושאים מרובע הלטינית עיצוב. החיות נדרשו לחזור לרמות הסף של ה- ICSS בתחילת הפגישה, לפחות לפני הפסקות של אנטגוניסט או רכב.
2.3.4. היסטולוגיה
חולדות הוקרבו על ידי הרדמה עמוקה על ידי נתרן pentobarbital. המוח הוסר מאוחסנים פתרון פורמלין 10%. המוח היה פרוס בעובי של 100 מיקרומטר ואת קצה האלקטרודה נבדקה מיקרוסקופית.
2.4. מצב מקום היפוך
2.4.1. אפטארוס
מקום ההתניה נערך על פי שיטת סוזוקי et al. [15, 16]. המנגנון כלל תיבת מעבורת (30 × 60 × 30 ס"מ: w × l × h) אשר חולק לשני תאים בגודל שווה. תא אחד היה לבן עם רצפת מרקם והשני היה שחור עם רצפת חלקה.
2.4.2. תהליך
ביום 1, חולדות הוכנו עם minipumps אוסמוטי המכיל ניקוטין, מתאמפטמין, או מלוחים באותם תנאים כמו אלה שתוארו למחקר ICSS.
בבוקר (9: 00) ביום 7 של עירוי ניקוטין או מתאמפטמין, חולדות זרקו תת עורית עם אנטגוניסט של התרופה הבדיקה (mecamylamine או haloperidol), או מלוחים (1.0 מ"ל / ק"ג), ומיד מרותק לתא אחד של את מנגנון הבדיקה של 60 דקות. בערבו (21: 00) באותו יום, חולדות טופלו אז עם מלוחים או אנטגוניסט (mecamylamine או haloperidol), בהתאמה, ו מוגבל לתא השני עבור 60 דקות. זיווגים של הזרקת (אנטגוניסט או מלוחים) ואת התא (לבן או שחור) היו מאוזנת בכל הנושאים. חולדות הבקרה בקבוצות הניקוטין, המתאמפטמין והמלוחים, הוזרקו מלוחים במקום ממאמיילמין או הלופרידול במושב ההתניה. לאחר הזריקות מלוחים, החולדות היו סגורות בתא אחד בבוקר ובתא השני בערב.
בבוקר, ביום 8, בוצעו מבחני התניה כדלקמן: המחיצה שהפרידה בין שני התאים הועלתה ל 12 ס"מ מעל הרצפה, ופלטפורמה ניטרלית הוכנסה לאורך התפר המפריד בין התאים. הזמן המושקע בכל תא במהלך הפעלה של 900 נמדד באופן אוטומטי על ידי חיישן קרן אינפרא אדום (kn-80, Natsyme Seisakusho, Tokyo, Japan).
2.5. הערכת סימני נסיגה סומטיים
בניסוי ICSS, כל עכברוש הוכנס לתא תצפית פלסטי גלילי מיד לאחר סיום הפגישה של סף גמול ICSS לאחר ניהול של mecamylamine או haloperidol, וסימני נסיגה סומטיים נצפו עבור 10 דקות. במהלך הערכה של סימני נסיגה סומטיים, התדירות של סימפטומים הינזרות נרשמה באמצעות סולם התנזרות אופיום שונה ניקוטין או התנזרות מתאמפטמין [1]. הניסויים היו עיוורים לטיפול בכל חולדה. בניסוי CPP, סימני נסיגה סומטיים נצפו באותו אופן כמו בניסוי ICSS, למעט העובדה כי התצפית על סימני התנזרות סומטיים נערכה במנגנון CPP.
2.6. ניתוח נתונים
עבור מדד תגובת ICSS, מספר חיזוק לכל min בכל סל שימש כאמצעי. ביום הבדיקה, מספר התגבורות בכל זרם חשמלי הוסב לאחוז של הבסיס שהושג באותו יום. כדי לקבוע את סף ה- ICSS, עקומת ה- S הייתה מותאמת באופן אינדיבידואלי בהתאם למודל הסיגמואיד-גומפרץ. באמצעות מודל זה, הזרם החשמלי שגורם 50% מההגבה הבסיסית נקבע כסף ה- ICSS. כל הנתונים נותחו תוך שימוש בניתוח דו - כיווני משולב של נבדקים (ANOVA), ולאחר מכן על ידי שיטת Tukey's Rangeized Method לאחר בדיקת ההשפעה המשמעותית של תנאי הטיפול ב- ANOVA.
ציוני התנוחות מייצגים את הזמן המושקע במקום התרופה, פחות זמן השהייה במקום המשויך לרכב, והם מתבטאים כממוצע "SEM נתוני ההתנהגות הוערכו סטטיסטית באמצעות ANOVA דו-כיוונית חוזרת, אשר שימשה לקביעת את ההשפעות של הטיפול על התנגשות מקום הנגרמת על ידי היריב. כאשר ANOVA הצביע על נוכחות של השפעה משמעותית, ניתוח נוסף נערך עם טווח של Tukey טווח מתמטי.
3. תוצאות
3.1. סף ICSS
במהלך ניהול כרוני, ניקוטין (F (2, 35) = 5.28, P<0.01) ומתאמפטמין (F (2, 35) = 7.62, P<0.01) הפחית משמעותית את ספי התגמול של ICSS. השוואות אמצעים אינדיבידואליות גילו השפעות משמעותיות ביום 4 ויום 5 לחליטת ניקוטין (P<0.05), וביום 2, יום 4 ויום 5 לחליטת מתאמפטמין (P
כפי שמוצג באיור (11), בחולדות נטולות ניקוטין כרוניות ומחממות מתאמפטמין, mecamylamine (F (1, 47) = 9.59, P<0.01) והלופרידול (F (1, 47) = 10.64, P<0.01) הניב גבהים משמעותיים בספי התגמול של ICSS, בהתאמה. השוואות אמצעים בודדים גילו השפעות משמעותיות ב- 1.0 מ"ג / ק"ג מקמילאמין (P<0.05) וב- 0.25 ו- 0.5 מ"ג לק"ג הלופרידול (P<0.05). לא הייתה השפעה משמעותית של המינון גם בחולדות המושרות על ידי ניקוטין (F (3, 47) = 1.87, P> 0.05) או בחולדות המושרות על ידי מתאמפטמין (F (3, 47) = 2.24, P> 0.05), או טיפול × אינטראקציה במינון בחולדות המושרות על ידי ניקוטין (F (3, 47) = 1.56, P> 0.05) או בחולדות המושרות על ידי מתאמפטמין (F(3, 47) = 1.77, P> 0.05).
3.2. מקום מותנה היפוך (רו"ח)
כפי שמוצג באיור (22), חולדות מלוחים לא הראו העדפה של תא או. Mecamylamine ו haloperidol לא לייצר או העדפה מקום משמעותי או מקום סלידה של עכברים מלוחים infused. מצד שני, mecamtlamine (F (1, 47) = 8.62, P<0.01) והלופרידול (F (1, 47) = 11.28, P<0.01) ייצר רתיעה ממקומות אצל חולדות כרוניות מניקוטין ומתמתפמין, בהתאמה. הסתייגות משמעותית מהמקום נצפתה ב 1.0 מ"ג / ק"ג מקמילאמין (P<0.01) וב- 0.25 ו- 0.5 מ"ג / ק"ג הלופרידול (P <0.05 ו- P <0.01). לא הייתה השפעה משמעותית של המינון גם בחולדות המושרות על ידי ניקוטין (F (3, 47) = 1.98, P> 0.05) או בחולדות המושרות על ידי מתאמפטמין (F (3, 47) = 2.56, P> 0.05), או טיפול × אינטראקציה במינון בחולדות המושרות על ידי ניקוטין (F (3, 47) = 1.74, P> 0.05) או בחולדות המושרות על ידי מתאמפטמין (F (3, 47) = 2.28, P> 0.05).
3.3. סימנים סומטיים
המספר הכולל של סימנים סומטיים לא היה שונה בין חולדות הניקוטין והמלוחים במהלך הטיפול במיקיאמימין או בניסוי ICSS (F (1, 47) = 2.02, P> 0.05) או בניסוי רו"ח (F (1, 47) = 1.87, P> 0.05). יתר על כן, הם לא היו שונים בין חולדות שטופלו במתאמפטמין והן במלח במהלך מתן הלופרידול בניסוי ICSS (F (1, 47) = 1.53, P> 0.05) או בניסוי רו"ח (F (1, 47) = 2.33, P> 0.05).
3.4. ניתוח היסטולוגית
התוצאות של ניתוח היסטולוגית עולה כי עצות האלקטרודה היו ממוקמים באזור ההיפותלמוס לרוחב, בטווח הקדמי / אחורי המשתרע מ - 3.84 מ"מ ל - 4.20 מ"מ מן הגרגמה. לא נראה שיש הבדלים בין מיקומי האלקטרודה של שליטה חיות הניסוי (איור 3). 33).
4. דיון
ממצאי המחקר הנוכחי מראים כי ניהול כרוני של ניקוטין ו methamphetamine ירידה סף ICSS לתגמל, בעוד antagonists שלהם, mecamylamine ו haloperidol להגדיל את סף ICSS ולגרום CPA בחולדות שטופלו ניקוטין מתאמפטמין, בהתאמה. לגבי שינויים במעגל תגמול המוח במהלך הנסיגה, נטען כי, ככל שהתלות מתפתחת, נוירואדפטציות מתרחשות בתוך אותם מעגלים במוח המווסתים את ההשפעות המחזקות או המתגמלות של סמים של התעללות בעקבות ניהול חריף, המוביל לביטוי שלילי שלילי סימני נסיגה על התנזרות סמים [7, 8]. עולה בקנה אחד עם הרעיון הזה, המחקר הנוכחי הצביע על כך ניקוטין, כמו גם מתאמפטמין הראו ירידה ב סף תגמול ICSS במהלך הממשל חריפה, ומגביר במהלך הנסיגה אנטגוניסט- precipitated. סמים אחרים של התעללות כגון קוקאין [6], opiates [10], ואתנול [11] דווחו גם על דפוס דומה של השפעות על סף שכר ICSS. שאלה אם שינויים כאלה במעגל תגמול המוח מספיקים כדי להסביר את ההשלכות השליליות השליליות של הנסיגה כבר תחת חקירה. פרדיגמה של CPA היא מדד התנהגותי רגיש ושימושי לאיתור סלידה מהנסיגה, כפי שדווח במחקרים קודמים של ניקוטין [15, 16] ו opiates [17, 10]. במחקר הנוכחי, mecamylamine ו haloperidol גרמו CPA במינונים מראה הגבהים ב סף תגמול ICSS, מה שמרמז כי העליות ב סף שכר ICSS עשוי לתווך סלידה במהלך הנסיגה מניקוטין ו מתאמפטמין. מצד שני, mecamylamine ו haloperidol לא הצליחו לגרום סימנים נסיגה סומטיים. סימנים סימטטיים של נסיגה מפסיכו-סולימולנטים ידועים כחלשים מאלה של אופיאטים, ברביטורטים ואלכוהול. יתר על כן, קשה יותר להבחין בסימני נסיגה סומטיים שהוזזו על ידי אנטגוניסטים לניקוטין מאלה שנוצרו על ידי נסיגה ספונטנית [12]. מעניין לציין כי במחקר הנוכחי, הגבהים בספי הגמול של ה- ICSS וסלידת המקום במהלך נסיגת הניקוטין היו כמעט באותו גודל כמו אלה שנצפו במהלך נסיגה מתאמפטאמין, דבר שעלול להצביע על כך שירידה בתפקוד הגמול במוח, המביאה לדחיית נסיגה, עשויה שלא להיות שונה באופן משמעותי בעוצמה בין ניקוטין לבין מתאמפטמין, ללא קשר להשפעות חריפות של תרופות אלה על מערכת גמול. במילים אחרות, הוא שיער כי neuroadaptations במעגל תגמול המוח לפתח כמעט את אותן רמות בין ניקוטין מתאמפטמין, למרות שהם לעורר את מערכת התגמול במידה אחרת עם מתאמפטמין חריפה להיות חזקה יותר ניקוטין חריפה. עם זאת, מחקרים נוספים נדרשים כדי להבהיר את השאלה באמצעות שימוש במגוון רחב יותר של מינונים או סוגים אחרים של פרדיגמות ניסיוניות.
לסיכום, המחקר הנוכחי מצביע על כך שהתפקוד הגמולוגי של המוח 1 ירד במהלך נסיגת הניקוטין והמתאמפטמין, ו- 2) ירידה בתפקוד הגמול עשויה לשקף את המצב הרגשי השלילי (נטייה) במהלך נסיגה מניקוטין וממתאמפטמין.
תודות
מחקר זה נתמך בחלקו על ידי מענקים של משרד החינוך, התרבות, הספורט, המדע והטכנולוגיה של יפן (מס '16591166), ואת קרן מחקר עישון.
ביבליוגרפיה
;
