DeltaFosB ដោយប្រយោលធ្វើនិយ័តកម្មសកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយរបស់ Cck (2010)

Res ខួរក្បាល។ 2010 ឧសភា 6; 1329: 10 – 20 ។

បោះពុម្ភផ្សាយតាមអ៊ិនធរណេត 2010 ខែមីនា 11 ។ ឌី៖  10.1016 / j.brainres.2010.02.081

PMCID: PMC2876727

ចនអេហ្វ Enwright, III,1 Megan Wald ។,1 Madison Paddock ។,1 អេលីសាបិតហូហ្វម៉ាន។,1 រ៉ាជែលអរ។,2 ស្កតអេដវឺដ។,2 Sade Spencer ។,2 Eric J. Nestler,3 និង កូឡិនអេ។ ម៉ាកឃុន2, *

ព័ត៌មានអ្នកនិពន្ធ► ព័ត៌មានរក្សាសិទ្ធិនិងអាជ្ញាប័ណ្ណ►

អត្ថបទដែលបានកែសម្រួលចុងក្រោយរបស់អ្នកបោះផ្សាយមាននៅ ខួរក្បាល Res

សូមមើលអត្ថបទផ្សេងទៀតនៅក្នុង PMC ដកស្រង់ អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ភ។

ទៅ:

អរូបី

ការផ្លាស់ប្តូរជីវគីមីរចនាសម្ព័ន្ធនិងអាកប្បកិរិយាសំខាន់ៗមួយចំនួនដែលបង្កឡើងដោយការប៉ះពាល់រ៉ាំរ៉ៃទៅនឹងគ្រឿងញៀននៃការរំលោភបំពានហាក់ដូចជាត្រូវបានសម្របសម្រួលដោយកត្តាចម្លងដែលមានស្ថេរភាពខ្ពស់ΔFosB។ ការងារពីមុនបានបង្ហាញថា reFosB ការបញ្ចេញកំហឹងលើសត្វកណ្តុរសម្រាប់សប្តាហ៍ទី 2 នាំឱ្យមានការកើនឡើងនៃការបញ្ចេញមតិនៃហ្សែនជាច្រើននៅក្នុង striatum ដែលភាគច្រើនត្រូវបានគេបន្ទាបខ្លួនបន្ទាប់ពី 8 សប្តាហ៍នៃការបង្ហាញ XFosB ។ អ្វីដែលគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍នោះគឺថាហ្សែនមួយចំនួនធំក៏ត្រូវបានបង្កើតថ្មីនៅក្នុងសត្វកណ្តុរផងដែរដែលធ្វើអោយកត្តាចម្លង CREB កើតឡើង។ ទោះយ៉ាងណាការសិក្សានេះមិនច្បាស់ទេថាតើរយៈពេលខ្លីΔFosBគ្រប់គ្រងហ្សែនទាំងនេះតាមរយៈ CREB ដែរឬទេ។ នៅទីនេះយើងបានរកឃើញថា 2 សប្តាហ៍នៃΔFosB overexpression បង្កើនការបញ្ចេញមតិ CREB នៅក្នុង striatum ដែលឥទ្ធិពលដែលរលាយដោយសប្តាហ៍ 8។ ការចាប់ផ្តើមដំបូងត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការបង្កើនការផ្សារភ្ជាប់ CREB ទៅនឹងការផ្សព្វផ្សាយហ្សែនគោលដៅជាក់លាក់នៅក្នុងតំបន់ខួរក្បាលនេះ។ គួរឱ្យភ្ញាក់ផ្អើលហ្សែនមួយដែលត្រូវបានគេសង្ស័យថាជាគោលដៅរបស់ CREB ដោយផ្អែកលើរបាយការណ៍មុន។ cholecystokinin (Cck)មិនត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយ CREB នៅក្នុង striatum ទេ។ ដើម្បីស៊ើបអង្កេតបន្ថែមទៀតបទប្បញ្ញត្តិនៃ។ ខេក។ បន្ទាប់ពី oveFosB overexpression យើងបានបញ្ជាក់ថារយៈពេលខ្លី oveFosB overexpression កើនឡើងទាំងពីរ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយនិងការបង្ហាញហ្សែន។ វាក៏បង្កើនសកម្មភាពចងនៅទីតាំងចង CREB (CRE) ដែលមានដាក់ចូលក្នុងគេហទំព័រ។ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។ ទោះជាយ៉ាងណា, ខណៈពេលដែលតំបន់បណ្តាញ CRE គឺចាំបាច់សម្រាប់ការបញ្ចេញមតិមូលដ្ឋានធម្មតានៃ ខេក។វាមិនត្រូវបានទាមទារសម្រាប់ inFosB induction នៃ។ ខេក។។ រួមជាមួយគ្នាលទ្ធផលទាំងនេះបានបង្ហាញថាក្នុងអំឡុងពេល inFosB រយៈពេលខ្លីបង្កើនការបញ្ចេញមតិនិងសកម្មភាពរបស់ CREB នៅការផ្សព្វផ្សាយហ្សែនជាក់លាក់នេះមិនមែនជាយន្តការតែមួយដែលហ្សែនត្រូវបានបង្កើតឡើងក្រោមលក្ខខណ្ឌទាំងនេះទេ។

ពាក្យគន្លឹះ: nucleus accumbens, ប្រតិចារិក, ការញៀន។

ទៅ:

សេចក្តីផ្តើម

ការប៉ះពាល់រ៉ាំរ៉ៃទៅនឹងគ្រឿងញៀននៃការរំលោភបំពានបណ្តាលឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរជីវគីមីនិងរចនាសម្ព័ន្ធនៅក្នុងតំបន់ខួរក្បាលជាច្រើន។ ការផ្លាស់ប្តូរទាំងនេះត្រូវបានគេគិតថាពាក់ព័ន្ធនឹងការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងទម្រង់នៃការបញ្ចេញហ្សែននៅក្នុងប្រព័ន្ធ mesolimbic ។ ប្រព័ន្ធនេះត្រូវបានផ្សំឡើងដោយណឺរ៉ូនណឺត្រុងដែលគ្រោងចេញពីតំបន់ដែលមានខ្យល់ចេញចូល (VTA) នៅផ្នែកពាក់កណ្តាលទៅណឺរ៉ូនប្រសាទមធ្យមនៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែរញ៉ូបឹស (ណឺស៊ី) (ខួរក្បាល) ក៏ដូចជាតំបន់ខួរក្បាលផ្សេងទៀត។ ការផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាពនៃកត្តាប្រតិចារិកចំនួនពីរគឺការផ្សារភ្ជាប់ប្រូតេអ៊ីនប្រតិកម្មរបស់អេមអេហ្វអេមអេហ្វអេ (CREB) និងΔFosB (ប្រូតេអ៊ីនគ្រួសារហ្វាកូស) ត្រូវបានគេស្នើឱ្យសម្រុះសម្រួលការផ្លាស់ប្តូរជីវគីមីរចនាសម្ព័ន្ធនិងអាកប្បកិរិយាជាច្រើនដែលត្រូវបានគេមើលឃើញជាមួយនឹងការប៉ះពាល់រ៉ាំរ៉ៃទៅនឹងគ្រឿងញៀននៃការរំលោភបំពាន ( ពិនិត្យដោយ។ Nestler, 2005).

CREB គឺជាកត្តាចម្លងដែលត្រូវបានបង្ហាញជាឯកច្ឆន្ទដែលជាសមាជិកនៃគ្រួសារ CREB / ATF ។ អ្នកកែសំរួលដល់ផ្ទះ CREB ភ្ជាប់ទៅនឹងបំរែបំរួលនៃលំដាប់ CRE (ការយល់ព្រម៖ TGACGTCA) រកឃើញនៅក្នុងការផ្សព្វផ្សាយនៃហ្សែនជាច្រើន។ Phosphorylation នៃ CREB (ភាគច្រើននៅសេរ៉ូម 133 ទោះបីជាទីតាំងផ្សេងទៀតត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ) អាចត្រូវបានរំញោចដោយផ្ទាំងសិលាដែលមានសញ្ញាជាច្រើនរួមទាំងផ្នែកខាងក្រោមនៃការទទួល dopamine (ខូល et al ។ , 1995 ។) ។ នៅពេល phosphorylation នៅ serine 133, CREB ជ្រើសរើសប្រូតេអ៊ីនដែលមានសកម្មភាពភ្ជាប់ CREB (CBP) ឬប្រូតេអ៊ីនដែលទាក់ទងដែលនាំឱ្យមានការកើនឡើងនៃហ្សែនហ្សែន (ពិនិត្យឡើងវិញដោយ Johannessen et al ។ , 2004 ។). ការប៉ះពាល់រ៉ាំរ៉ៃទៅនឹងថ្នាំអាភៀនឬថ្នាំព្យាបាលរោគផ្លូវចិត្តនៃការរំលោភបំពានបង្កឱ្យមានការកើនឡើងជាលំដាប់នៅក្នុងសកម្មភាពរបស់ CREB នៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែរ។ (Barrot et al ។ , 2002 ។; Shaw-Lutchman et al ។ , 2002, 2003), ការសម្របខ្លួនបានគិតថានឹងកាត់បន្ថយលក្ខណៈសម្បត្តិដែលទទួលបានពីថ្នាំទាំងនេះនិងរួមចំណែកដល់ស្ថានភាពអារម្មណ៍អវិជ្ជមាននៃការដកគ្រឿងញៀនចេញ។ (Nestler, 2005).

Lអាដាប់ធ័រយូរអង្វែងទៅនឹងគ្រឿងញៀននៃការរំលោភបំពានត្រូវបានគេគិតថាត្រូវបានសម្របសម្រួលមួយផ្នែកដោយ osFosB ដែលជាវ៉ារ្យ៉ង់ពុះរបស់ FosB ដែលមានស្ថេរភាពខ្ពស់។ (Nestler et al ។ , 1999; McClung et al ។ , 2004; Nestler, 2008) ។ សមាជិកគ្រួសារហ្វុសបានបង្រួមបង្រួមជាមួយសមាជិកនៃក្រុមគ្រួសារមិថុនាដើម្បីបង្កើតប្រូតេអ៊ីនសកម្ម 1 (AP-1) ។ ភាពស្មុគស្មាញនៃការចម្លងអក្សរអេចស៊ីធីស៊ីអេចភ្ជាប់ទៅនឹងបំរែបំរួលនៃធាតុឆ្លើយតប AP-1 (ការព្រមព្រៀង៖ TGACTCA) ដើម្បីកំនត់ការចម្លង (ពិនិត្យឡើងវិញដោយ Chinenov និង Kerppola, 2001 ។) ។ ខណៈពេលដែលការប៉ះពាល់ទៅនឹងថ្នាំនៃការរំលោភបំពានស្រួចស្រាវនាំឱ្យមានអាយុកាលខ្លីនៃសមាជិកគ្រួសារ (ក៏ដូចជាសកម្មភាពរបស់ CREB កើនឡើង) ការប៉ះពាល់គ្រឿងញៀនម្តងហើយម្តងទៀតនាំឱ្យមានការប្រមូលផ្តុំនៃស្ថេរភាពខ្ពស់ΔFosB (Hope et al ។ , 1994; Perrotti et al ។ , 2008), ការបញ្ចេញមតិដែលនៅតែបន្តកើតមានសម្រាប់សប្តាហ៍។

សត្វកណ្តុរឆ្លងហ្សែនជម្រុញខ្លាំងពេក oveFosB ឬ CREB នៅក្នុងប្រដាប់ភេទមនុស្សពេញវ័យបង្ហាញនូវសារធាតុគីមីជីវសាស្ត្រនិងអាកប្បកិរិយាជាច្រើនដែលត្រូវបានគេឃើញនៅក្នុងសត្វដែលត្រូវបានប៉ះពាល់ម្តងហើយម្តងទៀតចំពោះជំងឺវិកលចរិកឬថ្នាំដទៃទៀតនៃការរំលោភបំពាន។ កការផ្លាស់ប្តូរការផ្លាស់ប្តូរហ្សែននៅក្នុងសត្វចម្លងរោគទាំងនេះបានកំណត់អត្តសញ្ញាណហ្សែនជាច្រើនដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការវះកាត់រយៈពេលខ្លី (2 សប្តាហ៍) នៃ oveFosB ការផ្លាស់ប្តូរទាក់ទងនឹងការថយចុះនៃរង្វាន់គ្រឿងញៀន។ ការផ្លាស់ប្តូរការបង្ហាញហ្សែននិងការឆ្លើយតបអាកប្បកិរិយាជាមួយរយៈពេលខ្លីΔFosBគឺប្រហាក់ប្រហែលនឹងសត្វដែលត្រូវបានគេមើលឃើញថាមាននៅក្នុងសត្វ CREB ដែលមានចំនួនច្រើនសម្រាប់រយៈពេល 2 ឬ 8 សប្តាហ៍McClung និង Nestler, 2003) ។ ផ្ទុយស្រឡះការបញ្ចេញកំហឹងរយៈពេលវែង (8 សប្តាហ៍) នៃΔFosBមានការថយចុះការបញ្ចេញមតិនៃហ្សែនដូចគ្នាទាំងនេះនិងនាំឱ្យមានការកើនឡើងរង្វាន់ថ្នាំ (Kelz et al ។ , 1999; McClung និង Nestler, 2003).

ហ្សែនមួយដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណនៅក្នុងការសិក្សាទាំងនេះគឺ។ cholecystokinin ។ (ខេក។) ដែលជាសារធាតុ neuropeptide ផលិតនៅក្នុងតំបន់ខួរក្បាលមួយចំនួនរួមទាំង striatum (Hokfelt et al ។ , 1980 ។) ។ ស៊ីខេខេអេសអាចសំរួលសំរួលការបញ្ជូនសារធាតុឌីប៉ូមីនហ្សែន (វ៉ាកាការីណូ, 1992) ត្រូវបានចូលរួមនៅក្នុងការផ្តល់រង្វាន់និងការពង្រឹងគ្រឿងញៀន (Josselyn et al ។ , 1996; Josselyn et al ។ , 1997 ។; Hamilton, et al ។ , 2000 ។; Beinfeld et al ។ , 2002 ។; Rotzinger et al ។ , 2002 ។) និងត្រូវបានបង្កឡើងក្នុងដំណាក់កាលដ៏លំបាកដោយកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ (ឌីងនិងម៉ូខេធីធី, 1992 ។) ។ បន្ថែម។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានបង្ហាញថាឆ្លើយតបទៅទាំង CREB និង AP-1 ស្មុគស្មាញ (ហាន់និងឌិកសិន, 1990 ។; ដេវ៉ាល et al ។ , 2000 ។; Hansen, 2001) ។ ចាប់តាំងពីហ្សែនជាច្រើន (រួមទាំង។ ខេក។) ដែលបង្ហាញការកើនឡើងនូវការបញ្ចេញមតិបន្ទាប់ពីទាំង CREB និងរយៈពេលខ្លី expressionFosB ត្រូវបានស្គាល់ឬសង្ស័យថាហ្សែនគោលដៅរបស់ CREB (McClung និង Nestler, 2003) យើងចង់កំណត់ថាតើការបញ្ចេញមតិ termFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីនាំទៅរកបទប្បញ្ញត្តិនៃហ្សែនទាំងនេះ (ដោយផ្តោតលើ ខេក។) តាមរយៈបទប្បញ្ញត្តិរបស់ CREB ឬតាមរយៈយន្តការស្មុគស្មាញជាងនៃបទប្បញ្ញត្តិហ្សែន។

ទៅ:

លទ្ធផល

reFosB បង្កើនការលូតលាស់ជាបណ្តើរ ៗ កំរិត CREB ។

យើងបានប្រើការវែកញែកពីបស្ចិមប្រទេសដើម្បីស៊ើបអង្កេតថាតើΔFosBការហៀរសំបោរបង្កើនកម្រិតប្រូតេអ៊ីន CREB នៅក្នុងសត្វកណ្តុរ។ សម្រាប់ការសិក្សានេះយើងបានប្រើកណ្តុរហ្សែនហ្សែនហ្សែនហ្សែន (បន្ទាត់ 11A) ដែលផ្ទុកទាំង NSE-tTA transgene និង TetOp-ΔFosB transgene ។ អវត្ដមាននៃ doxycycline សត្វកណ្តុរទាំងនេះបង្ហាញពីការកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំងនៃការបញ្ចេញមតិΔFosBនៅក្នុងណឺរ៉ូនណឺរ៉ូនវិជ្ជមាននៅក្នុង striatum (Kelz et al ។ , 1999) ។ វិធីសាស្រ្តនៃការបំប៉ន reFosB នេះត្រូវបានគេចងក្រងជាឯកសារយ៉ាងទូលំទូលាយនិងអនុញ្ញាតឱ្យមានការពង្រីកតំបន់ជាក់លាក់ដែលប្រហាក់ប្រហែលនឹងΔFosB induction ដែលឃើញនៅក្នុងសត្វដែលប៉ះពាល់នឹងកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ (Hope et al ។ , 1994; Kelz et al ។ , 1999) ។ យើងបានរកឃើញថានៅក្នុងសត្វកណ្តុរ 11A ការបំប៉ោងΔFosB, កំរិតប្រូតេអ៊ីន CREB ត្រូវបានតំឡើងយ៉ាងខ្លាំងបន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិ 2 សប្តាហ៍ហើយកំរិតទាំងនេះបានត្រលប់ទៅជាមូលដ្ឋានវិញបន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិរយៈពេល 8 សប្តាហ៍ (រូបភាព 1A, n = 8) ។ ដើម្បីកំណត់ថាតើការផ្លាស់ប្តូរកម្រិត CREB ជាមួយនឹងរយៈពេលខ្លី oveFosB overexpression អាចត្រូវបានថតចម្លងនៅក្នុងប្រព័ន្ធមួយផ្សេងទៀតយើងបានធ្វើឱ្យប្រសើរឡើង ientFosB នៅក្នុងកោសិកា PC12 បណ្តោះអាសន្នហើយបានរកឃើញថាកម្រិត CREB កើនឡើងយ៉ាងខ្លាំង (p <0.05) បើប្រៀបធៀបនឹងការគ្រប់គ្រង (រូបភាព 1B, n = 4) ។ លទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញថាការបញ្ចេញមតិ termFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីបង្កើនកម្រិតប្រូតេអ៊ីន CREB ។

រូបភាព 1

រូបភាព 1

កម្រិត CREB កើនឡើងជាមួយនឹង reFosB overexpression ។ ការវិភាគបែបបស្ចិមប្រទេសនៃលីពី។ (ក) កណ្តុរ striata ពីកណ្តុរ 11A បិទ dox សម្រាប់ 2 ឬ 8 សប្តាហ៍រឺ។ (ខ) កោសិកា PC12 ហួសកំរិតΔFosB។ ទិន្នន័យនៅក្នុង។ A ត្រូវបានបង្ហាញជាការផ្លាស់ប្តូរភាគរយនៅក្នុងការបិទ dox បើប្រៀបធៀប។ ...

ទាំងΔFosBនិង CREB ចងភ្ជាប់ទៅនឹងការផ្សព្វផ្សាយនៃហ្សែនគោលដៅជាក់លាក់នៅក្នុងវិថីនេះបន្ទាប់ពីរយៈពេលខ្លី oveFosB ។

យើងបានប្រើជីភីអេស (ការការពារដោយសារធាតុក្រូតូទីន) នៃជាលិកា striatal ដើម្បីកំណត់ថាតើΔFosBឬ CREB ចងបានកើតឡើងនៅការផ្សព្វផ្សាយហ្សែនគោលដៅជាក់លាក់ហើយប្រសិនបើការភ្ជាប់នេះត្រូវបានកើនឡើងបន្ទាប់ពីរយៈពេលខ្លី reFosB ។ យើងវិភាគការចងនៅឯឯកសារ BDNF និង ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយចាប់តាំងពីហ្សែនទាំងពីរត្រូវបានតំរែតំរង់យ៉ាងខ្លាំងបន្ទាប់ពី reFosB overexpression រយៈពេលខ្លី, CREB overexpression ឬការព្យាបាលកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ (McClung និង Nestler, 2003) ។ យើងក៏បានវិភាគការចងនៅឯឯកសារ។ CDK5 អ្នកផ្សព្វផ្សាយព្រោះវាជាគោលដៅផ្ទាល់ដែលគេស្គាល់របស់ΔFosB (Chen et al ។ , 2000; Bibb et al ។ , 2001; Kumar et al ។ , 2005) ។ ទីបំផុតយើងបានវាស់វែងការផ្សារភ្ជាប់នៅឯឯកសារ។ prodynorphin ។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយចាប់តាំងពីការសិក្សាមុនបានរកឃើញថាវាអាចត្រូវបានចងភ្ជាប់ដោយទាំងΔFosBនិង CREB ក្រោមលក្ខខណ្ឌផ្សេងៗគ្នា (Andersson et al ។ , 2001; Zachariou et al ។ , 2006).

ការវិភាគអំពីជីភីអេសត្រូវបានអនុវត្តលើ striata ពីសត្វកណ្តុរ 11A ការបំប៉ោងការហួសហេតុΔFosBរយៈពេល 2 សប្តាហ៍ដោយប្រើអង្គបដិប្រាណដែលស្គាល់ CREB ឬΔFosB។ នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌធម្មតាយើងបានរកឃើញថា osFosB ភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ។ CDK5 និង prodynorphin ។ ផ្សព្វផ្សាយ, ខណៈពេលដែលមិនមានការរកឃើញចងនៅឯ BDNF or ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយ (តារាង 1) ។ លើសពីនេះទៅទៀត oveFosB overexpression បានបង្កើនការចងរបស់ΔFosBនៅ។ CDK5 ផ្សព្វផ្សាយ, ប៉ុន្តែមិននៅ prodynorphin ។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។ បន្ទាប់យើងវាស់វែងចង CREB នៅអ្នកផ្សព្វផ្សាយទាំងនេះហើយឃើញថា CREB ចងភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ។ CDK5, BDNF ។ និង prodynorphin ។ ផ្សព្វផ្សាយ, ប៉ុន្តែមិនទៅ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយនៅក្នុង striatum ធម្មតាហើយថា reFosB overexpression សម្រាប់សប្តាហ៍ 2 បង្កើនការចង CREB នៅ BDNF និង prodynorphin ។ ផ្សព្វផ្សាយ, ប៉ុន្តែមិនបាន CDK5 អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។ និយាយរួមលទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញថាΔFosBនិង CREB អាចភ្ជាប់ទៅនឹងការផ្សព្វផ្សាយហ្សែនមួយចំនួនដូចជា។ prodynorphin ។ និង CDK5ទោះយ៉ាងណាការចង CREB គឺជាក់លាក់ចំពោះអ្នកផ្សព្វផ្សាយផ្សេងទៀតដូចជា។ BDNF។ លើសពីនេះទៅទៀត oveFosB ការរឹតបន្តឹងនាំឱ្យមានការកើនឡើងនៃការចង atFosB នៅអ្នកផ្សព្វផ្សាយមួយចំនួនដូចដែលត្រូវបានរំពឹងទុកប៉ុន្តែក៏មានការចងភ្ជាប់ជាមួយ CREB ចំពោះអ្នកផ្សព្វផ្សាយជាក់លាក់ដែលស្របនឹង ductionFosB-mediated CREB ដែលត្រូវបានសង្កេតឃើញនៅពេលនេះ។

តារាង 1

តារាង 1

ការផ្សារភ្ជាប់ប្រូតេអ៊ីនដែលមានលក្ខណៈតឹងតែងទៅនឹងអ្នកផ្សព្វផ្សាយផ្សេងៗនៅក្នុងសត្វកណ្តុរធ្វើឱ្យធុញទ្រាន់ΔFosBរយៈពេលពីរសប្តាហ៍។

ការងារពីមុនបានបង្ហាញថាការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងហ្សែនហ្សែនដែលបង្កើតឡើងដោយ reFosB យូរអង្វែងត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការផ្លាស់ប្តូរក្រូម៉ូសូមជាពិសេសអាសេអ៊ីលនៃអ៊ីស្តូនអេជិ។ អិល។ នៅអ្នកផ្សព្វផ្សាយហ្សែនជាក់លាក់ (Kumar et al ។ , 2005) ។ ដើម្បីកំណត់ថាតើវាអាចមានការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងការបញ្ចេញហ្សែនលើរយៈពេលខ្លី oveFosB overexpression យើងបានវាស់វែងការផ្សារភ្ជាប់នៃអេស្ត្រូហ្សែនអេជអេសអេជអរអេស (ការផ្លាស់ប្តូរអ៊ីស្ត្រូនដែលទាក់ទងនឹងការផ្លាស់ប្តូរប្រតិចារិកសកម្ម) ឬការផ្លាស់ប្តូរអ៊ីដ្រូសែនអេឡិចត្រូនិច H3 (Lys3 ការកែប្រែអ៊ីស្ត្រូនដែលទាក់ទងនឹងការចម្លង អសកម្មក្រូទីន) ។ យើងបានរកឃើញថាការហួសកំរិតនៃΔFosBសម្រាប់រយៈពេល 9 សប្តាហ៍មិនបានបណ្តាលអោយមានការផ្លាស់ប្តូរនៃការផ្សារភ្ជាប់អេជអេជអាល់អេជអាល់កេសនៅឯការផ្សព្វផ្សាយហ្សែនណាមួយដែលបានសិក្សានោះទេ (តារាង 1) ។ យើងបានរកឃើញការថយចុះគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃការផ្សារភ្ជាប់នៃអ៊ីស្ត្រូហ្សែនអេជអេសអេចអេជអេសអេចអេសអេមអេសនៅអេសអេស។ prodynorphin ។ ផ្សព្វផ្សាយ, ប៉ុន្តែគ្មានការចងនៅ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយនិងគ្មានការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងការចងនៅ CDK5 និង BDNF អ្នកផ្សព្វផ្សាយបានលើកឡើងថានេះមិនមែនជាយន្តការទូទៅដែលΔFosBក្នុងរយៈពេលខ្លីធ្វើនិយតកម្មការបញ្ចេញហ្សែនទេ។ យើងមានការភ្ញាក់ផ្អើលនិងចាប់អារម្មណ៍ចំពោះការពិតដែលថាយើងមិនបានរកឃើញភាពខុសប្លែកគ្នានៅក្នុងការអះអាងរបស់ជី។ អាយ។ ភី។ ដែលអាចជាហេតុធ្វើឱ្យមានការកើនឡើង។ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិ mRNA នៅក្នុងសត្វកណ្តុរ 11A បន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិ NUMFosB សប្តាហ៍ទី 2 ហើយបានសំរេចចិត្តស៊ើបអង្កេតយន្ដការនេះតទៅទៀត។

រយៈពេលខ្លីΔFosBកើនឡើង។ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិនៅក្នុងប្រព័ន្ធជាច្រើន។

លក្ខណៈមីក្រូម៉ារ៉ាយរបស់សត្វកណ្តុរឆ្លងហ្សែន 11A មានឥទ្ធិពលខ្លាំងពេកΔFosBក្នុង striatum បានរកឃើញថា ខេក។ កម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិកើនឡើងបន្ទាប់ពីរយៈពេល ១០ សប្តាហ៍នៃការបញ្ចេញសម្ពាធខ្លាំងហើយបន្ទាប់មកថយចុះបន្តិចម្តង ៗ ជាមួយនឹងរយៈពេលវែងនៃការបញ្ចេញមតិΔFosB (រូបភាព 2A, n = 3) ។ យើងបានធ្វើឱ្យប្រសិទ្ធិភាពនេះមានប្រសិទ្ធិភាពសម្រាប់។ ខេក។ ដោយប្រើ PCR ពេលវេលាពិតប្រាកដនៅលើក្រុមសត្វដាច់ដោយឡែកមួយនៅសប្តាហ៍ទី 2 និង 8 ហើយបានរកឃើញលទ្ធផលនៅចំណុចពេលវេលាពីរគឺស្រដៀងគ្នាទៅនឹងការវិភាគមីក្រូវ៉េរ (ទិន្នន័យមិនត្រូវបានបង្ហាញ) ។

រូបភាព 2

រូបភាព 2

ការលើសកំរិតរយៈពេលខ្លីនៃΔFosBកើនឡើង។ ខេក។ ការបង្ហាញហ្សែន។ (A) ខេក។ ការបញ្ចេញមតិ mRNA នៅក្នុង striatum ដូចខាងក្រោម oveFosB overexpression នៅក្នុងសត្វកណ្តុរ 11A សម្រាប់ 1, 2, 4, ឬ 8 សប្តាហ៍។ ការវិភាគមីក្រូវ៉េរត្រូវបានអនុវត្តលើគំរូ striatal និង។ ខេក។ កម្រិត ...

ដើម្បីស៊ើបអង្កេតបន្ថែមទៀតអំពីសមត្ថភាពរបស់ΔFosBក្នុងការគ្រប់គ្រង។ ខេក។ កន្សោម, យើងបានប្រើកោសិកា PC12 ឆ្លងឆ្លងជាមួយក ខេក។-luciferase អ្នករាយការណ៍ plasmid និងទាំងការបញ្ចេញមតិ asmFosB plasmid ឬចំនួន pCDNA ស្មើ។ ទាំងពីរ (n = 5-9) ទាំងពីរនិងបី (n = 11-13) ថ្ងៃΔFosB overexpression បណ្តាលឱ្យមានការកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៅក្នុង ខេក។-luciferase ការបញ្ចេញមតិ។ លើសពីនេះទៀតរយៈពេល ៣ ថ្ងៃនៃការបំប៉ន resultedFosB ធ្វើអោយមានលទ្ធផលកាន់តែច្រើន។ ខេក។-luciferase induction បើប្រៀបធៀបទៅនឹងរយៈពេល ២ ថ្ងៃនៃការលើសសម្ពាធឈាម (រូបភាព 2B) ។ ភាពលើសលប់នៃΔFosBមិនបានជំរុញឱ្យមានការបញ្ចេញមតិនៃការស្ថាបនា luciferase ដែលមិនមានការផ្សព្វផ្សាយ (ទិន្នន័យមិនបានបង្ហាញ) ។ នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃការព្យាបាលគ្មានការថយចុះទេ។ ខេក។សកម្មភាព -luciferase ជាក់ស្តែង។ លទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញថាការបញ្ចេញមតិ termFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីបង្កើនសកម្មភាពរបស់។ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយហើយទុកឱ្យគ្មានចំលើយនូវយន្តការដែល oveFosB ប្រើរយៈពេលយូរបង្ក្រាប។ ខេក។ កន្សោម។

reFosB overexpression បង្កើនការចងនៅទីតាំងចង CREB ដែលមានដាក់ក្នុង។ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ

ការវិភាគរបស់យើងបានរកឃើញថា។ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិត្រូវបានកើនឡើងបន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិ termFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីទោះយ៉ាងណាការអះអាងរបស់ ChIP របស់យើងបានរកឃើញថាមិនមាន CREB និងΔFosBភ្ជាប់ទៅនឹង ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។ ដើម្បីកំណត់ថាតើមានការផ្លាស់ប្តូរណាមួយនៅក្នុងការចងប្រូតេអ៊ីននៅឯឯកសារ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយខាងក្រោម oveFosB overexpression យើងបានប្រើការផ្លាស់ប្តូរចលនាអេឡិចត្រូម៉ាញ៉េទិច (EMSA) ជាមួយនឹងការស៊ើបអង្កេតដែលមានផ្ទុកនូវទីតាំងស្រដៀងនឹង CRE ដែលមាននៅក្នុង ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។ ការប្រើចំរាញ់នុយក្លេអ៊ែរពី striata នៃសត្វកណ្តុរ 11A ដែលធ្វើឱ្យមានអារម្មណ៍តានតឹងΔFosBរយៈពេល 2 សប្តាហ៍យើងបានរកឃើញថាមានការកើនឡើងនៃការផ្សារភ្ជាប់ទៅនឹងទីតាំង CRE ដែលដាក់ក្នុង ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ (រូបភាពទី 3 A, C ។, n = 4) ។ អ្វីដែលគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍នោះគឺសត្វកណ្តុរ 11A ធ្វើឱ្យមានអារម្មណ៍តានតឹង forFosB រយៈពេល 8 សប្តាហ៍ដែលបង្ហាញពីការធ្លាក់ចុះ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិក៏បានបង្ហាញការកើនឡើងនៃការចងនៅគេហទំព័រនេះ (រូបភាពទី 3B, គ។, n = 4) ។ ជាការប្រៀបធៀបយើងបានពិនិត្យមើលការផ្សារភ្ជាប់ទៅនឹងគេហទំព័រ CRE ដែលមានការមូលមតិគ្នានៅក្នុងសត្វកណ្តុរដែលធ្វើឱ្យហួសហេតុ pressFosB រយៈពេល 2 សប្តាហ៍ហើយបានរកឃើញការចង CRE ដែលរឹងមាំនៅក្នុងការដកស្រង់ striatal ប៉ុន្តែមិនមានការកើនឡើងនៃការផ្សារភ្ជាប់បន្ទាប់ពី inFosB (រូបភាព 3F, n = 4) ។ ដូច្នេះទោះបីជាមានការកើនឡើងនៃ REFosB នៅក្នុងកម្រិត CREB សរុបដែលត្រូវបានគេមើលឃើញនៅពេលនេះក៏ដោយលទ្ធផលទាំងនេះគឺស្របជាមួយនឹងការអះអាងរបស់ជីភីអាយដែលបានរកឃើញថាការកើនឡើងនៃការចង CREB ចំពោះអ្នកផ្សព្វផ្សាយដែលធ្វើតាម reFosB គឺជាក់លាក់ចំពោះហ្សែនជាក់លាក់ហើយមិនមែនជាបាតុភូតសកលទេ។ ។ ដើម្បីកំណត់ថាតើ CREB ត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយនៅក្នុងការវិភាគ EMSA របស់យើងយើងបានធ្វើការប្រៀបធៀបយ៉ាងរហ័សជាមួយនឹងអង់ទីករជាក់លាក់ CREB ។ ដោយមានការព្រមព្រៀងជាមួយជីភីអេសរបស់យើងយើងមិនបានរកឃើញថាមានការចងភ្ជាប់ជាមួយ CREB ទៅនឹងក ខេក។ ការស៊ើបអង្កេតដែលមានវែបសាយថ៍ CRE ដាក់ក្នុង EMSA បានអះអាងថាខណៈដែល CREB ពិតជាបានភ្ជាប់និងផ្លាស់ប្តូរទីតាំង CRE ដែលមានការយល់ស្រប (រូបភាពទី 3D, អ៊ី។, n = 4) ។ សកម្មភាពចង DNA នៅ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយក៏មិនត្រូវបានប៉ះពាល់ដោយអង្គបដិប្រាណទៅΔFosB (ទិន្នន័យមិនត្រូវបានបង្ហាញ) ក្រោមលក្ខខណ្ឌដែលបានបង្ហាញនៅក្នុងការសិក្សាមុន ៗ ជាច្រើនដើម្បីរារាំង bFosB ភ្ជាប់ទៅនឹងគេហទំព័រអេអូអេសអេសអេចអរអេសអេសអេស (សង្ឃឹមនិងអេ។ ស៊ី។ អេស។ អេស។ ស៊ី។ អេស។ Chen et al ។ , 1995, Hiroi et al ។ , 1998) ។ យើងក៏បានអនុវត្តការអះអាងរបស់ជីភីអេទៅលើប្រភេទសត្វរបស់ស៊ីអាធី 11A បន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិ XFosB សប្តាហ៍ទី 8 ហើយនៅតែរកឃើញថាគ្មានការចង CREB ឬΔFosBនៅ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយ (ទិន្នន័យមិនបានបង្ហាញ) ។ ដូច្នេះកន្សោមΔFosBពិតជានាំទៅរកការកើនឡើងនៃការចងប្រូតេអ៊ីននៅ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយបន្ទាប់ពីទាំងការបញ្ចេញមតិ 2 និង 8 សប្តាហ៍; ទោះយ៉ាងណាអត្តសញ្ញាណនៃកត្តាទាំងនេះនៅមិនទាន់ដឹងនៅឡើយទេ។

រូបភាព 3

រូបភាព 3

ប្រូតេអ៊ីនភ្ជាប់នៅឯខ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។ (A, B) ការផ្លាស់ប្តូរការចល័តនៃអេឡិចត្រូតដោយប្រើឧបករណ៍អេឡិចត្រូនិក។ ខេក។ តំបន់ដែលមានរាងដូច CRE ដែលមានជាលិការ striatal ពីសត្វដែលមានសម្ពាធខ្លាំងΔFosBសម្រាប់ 2 សប្តាហ៍ (A) ឬ 8 សប្តាហ៍ (ខ) ។ នៅក្នុង (ក) ការប្រកួតប្រជែងជាមួយគូប្រជែងដែលមិនមានស្លាកលេខលើស។ ...

តំបន់បណ្តាញ CRE ដែលដាក់បញ្ចូលក្នុងគេហទំព័រ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយមិនទទួលខុសត្រូវចំពោះការបង្កើនសកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយទេ។

ចាប់តាំងពីយើងបានរកឃើញការកើនឡើងនៃការចងប្រូតេអ៊ីនដោយប្រើបំណែកនៃ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយដែលមានវែបសាយត៍ CRE ដែលដាក់តាម oveFosB overexpression យើងចង់កំណត់ថាតើគេហទំព័រនេះចាំបាច់សម្រាប់បង្កើន ខេក។ ការបញ្ចេញមតិខាងក្រោម oveFosB overexpression ។ ដើម្បីសាកល្បងលទ្ធភាពនេះយើងផ្ទេរកោសិកា PC12 ទៅជាមួយ។ ខេក។-luciferase plasmid មានផ្ទុកទីតាំងដូច CRE ដដែលរបស់វាឬមួយដែលផ្ទុកការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងវែបសាយដែលអាចលុបបំបាត់រាល់ការទាក់ទងជាមួយ CREB ។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ការផ្លាស់ប្តូរទីតាំងដូច CRE មានការថយចុះ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយចំនួន 32% (រូបភាព 4A, n = 9) ប៉ុន្តែមិនប៉ះពាល់ដល់ឯកសារ។ ខេក។ សកម្មភាពរបស់អ្នកផ្សព្វផ្សាយដោយ oveFosB overexpression (រូបភាព 4B, n = 11-13) ។ នេះបង្ហាញថាទោះបីជា ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយតំរូវអោយមានកន្លែងដែលមានលក្ខណៈដូច CRE ដដែលសំរាប់សកម្មភាពពេញទំហឹងសកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយកើនឡើងដែលបង្កើតឡើងដោយ oveFosB overexpression មិនត្រូវការលំដាប់ដូច CRE ទេ។

រូបភាព 4

រូបភាព 4

នេះ ខេក។ដូចតំបន់បណ្តាញ CRE មិនចាំបាច់សម្រាប់។ ខេក។ បង្កើតដោយΔFosB។ (A) ខេក។សកម្មភាព -luciferase ត្រូវបានវាស់ 2 ថ្ងៃបន្ទាប់ពីការប្តូរជាធម្មតា។ ខេក។-luciferase ឬគេហទំព័រមួយដែលតំបន់ដែលស្រដៀងនឹង CRE ត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរ។ * ទំ <0.05 (B) ខេក។-luciferase ។ ...

cFos ភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ

ការសិក្សាមុន ៗ បានរកឃើញថា។ cFos ។ mRNA កើនឡើងជាមួយនឹងការបញ្ចេញមតិ termFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីបន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិΔFosBរយៈពេលយូរសមត្ថភាពនៃការព្យាបាលដោយកូកាអ៊ីនក្នុងការជំរុញឱ្យមាន cFos នៅក្នុង striatum ត្រូវបានកាត់បន្ថយ (McClung និង Nestler, 2003; Renthal et al ។ , 2008 ។) ។ ដូច្ន្រះវាអាចមានលទ្ធភាពដ្រលផ្រសាយជួយរួមចំណែកដល់ការកើនឡើង។ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិបន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិΔFosBក្នុងរយៈពេលខ្លី។ យើងបានអនុវត្តការប៉ាន់ស្មានរបស់ជីភីជាមួយនឹងអង្គបដិប្រាណជាក់លាក់សំរាប់ស៊ីអេសអេសនិងវាស់ស៊ីអេសអេសនៅខ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយដោយនិងគ្មានការបញ្ចេញមតិΔFosBក្នុងរយៈពេលខ្លី។ ខណៈពេលដែលយើងបានរកឃើញថា cFos ពិតជាភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយការចងភ្ជាប់នេះមិនបានកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់ទេ followingFosB overexpression (រូបភាព 5, n = 5) ។ នេះបង្ហាញថាចាប់តាំងពី cFos ភ្ជាប់ឯកសារ។ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយ, វាអាចរួមចំណែកដល់បទប្បញ្ញត្តិទូទៅនៃ ខេក។ កន្សោមប៉ុន្តែវាទំនងជាមិនពាក់ព័ន្ធនឹងបទបញ្ជារបស់ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយដោយΔFosB។

រូបភាព 5

រូបភាព 5

cFos ភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។ ការអះអាងអំពីភាពស៊ាំទៅនឹងថ្នាំ Chromatin ត្រូវបានអនុវត្តជាមួយនឹងអង្គបដិប្រាណជាក់លាក់សម្រាប់ CFos ដោយប្រើជាលិកា striatal ពីសត្វកណ្តុរ reFosB លើសទាំងនៅលើ dox ឬបន្ទាប់ពី 2 សប្តាហ៍នៃការដកយកចេញ dox ។ ការវិភាគពេលវេលា PCR ពិតប្រាកដ។ ...

ទៅ:

សន្ទនា

ការសិក្សានេះបញ្ជាក់និងពង្រីកលើការរកឃើញពីមុនដែលបង្ហាញថាΔFosBធ្វើនិយតកម្មការបង្ហាញហ្សែននៅក្នុងវិថីនេះហើយយើងឃើញថាវាធ្វើដូច្នេះតាមរយៈយន្តការជាច្រើនបន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិរយៈពេលខ្លី។ យើងបង្ហាញថាបន្ទាប់ពី 2 សប្តាហ៍នៃការបញ្ចេញសម្ពាធខ្លាំងΔFosBភ្ជាប់ដោយផ្ទាល់ទៅនឹងអ្នកផ្សព្វផ្សាយនៅក្នុងហ្សែនជាក់លាក់ដែលនាំឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរការបញ្ចេញមតិ (ឧ។ CDK5) ។ លើសពីនេះទៀតវាបង្កើនកម្រិតប្រូតេអ៊ីន CREB ដែលជាឥទ្ធិពលមួយដែលត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងកោសិកាដែលមានកោសិកាក៏ដូចជានៅក្នុង striatum ដែលនាំឱ្យមានការកើនឡើងនៃការចង CREB នៅឯការផ្សព្វផ្សាយហ្សែនដទៃទៀត (ឧ។ dynorphin និង BDNF) ។ នៅក្នុងការសិក្សាមុនយើងបានរកឃើញថាការប្រើអុកស៊ីដ reFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីនាំឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរហ្សែនដូចគ្នាជាច្រើនដែលត្រូវបានរកឃើញនៅពេលដែល CREB ហួសកំរិតហើយនាំឱ្យមានការឆ្លើយតបអាកប្បកិរិយាស្រដៀងគ្នាក្នុងវិធានការនៃការនិយមកូកាអ៊ីន (McClung និង Nestler, 2003) ។ ដូច្នេះការរកឃើញបច្ចុប្បន្នដែលΔFosBនាំទៅរកការបង្កើត CREB ក៏ដូចជាការផ្សារភ្ជាប់ CREB ទៅនឹងអ្នកផ្សព្វផ្សាយហ្សែនជាក់លាក់ជួយពន្យល់ពីមូលហេតុដែលការផ្លាស់ប្តូរហ្សែនហ្សែនជាច្រើនត្រូវបានចែករំលែកដោយកត្តាចម្លងទាំងពីរនេះ។

ការបង្កើត CREB ដោយΔFosBគឺគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ព្រោះវាត្រូវបានបង្ហាញថាគ្រឿងញៀននៃការរំលោភបំពាននាំឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរកម្រិតសេរ៉ាម - 133-phosphorylated CREB ។Mattson et al ។ , 2005) និងបង្កើនការធ្វើប្រតិចារិក CRE - សំរបសំរួល (Barrot et al ។ , 2002 ។; Shaw-Lutchman et al ។ , 2002, 2003) ដោយមិនមានការផ្លាស់ប្តូរកម្រិតទូទៅនៃ CREB ។ វាអាចទៅរួចដែលថាការផ្លាស់ប្តូរកំរិត CREB អាចបណ្តោះអាសន្នដូច្នេះហើយងាយនឹងខកខានក្នុងការសិក្សាផ្សេងទៀត។ នៅក្នុងដៃរបស់យើងយើងបានឃើញការកើនឡើងនៃកូកាអ៊ីននៅក្នុង CREB mRNA នៅក្នុងការពិសោធន៍ជាពិសេសទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយឥទ្ធិពលនេះមានភាពប្រែប្រួលខ្ពស់ (ការសង្កេតដែលមិនបានផ្សព្វផ្សាយ) ។ ដោយសារទាំងកណ្តុរឆ្លងហ្សែន 11A និងកោសិកា PC-12 បង្ហាញពី CREB អាំងតង់ស៊ីតេបន្ទាប់ពី osFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីវាបង្ហាញថា CREB ពិតជាត្រូវបានបង្កឡើងដោយΔFosB (ឬគោលដៅΔFosB) ដោយផ្តល់នូវយន្តការមួយទៀតដើម្បីពន្យល់ពីការផ្លាស់ប្តូរដែលបង្កឡើងដោយគ្រឿងញៀននៅក្នុងហ្សែន។ ការបញ្ចេញមតិ

គួរឱ្យភ្ញាក់ផ្អើលយើងបានរកឃើញថាមិនមាន CREB និង osFosB មិនបានភ្ជាប់ជាមួយ។ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយទោះបីជា ខេក។ ការបញ្ចេញមតិត្រូវបានតំឡើងយ៉ាងច្បាស់បន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមតិΔFosBក្នុងរយៈពេលខ្លី។ Cck គឺជាសារធាតុ neuropeptide មានច្រើនក្រៃលែងដែលត្រូវបានបង្ហាញទាំងនៅក្នុង VTA និង NAc (Hokfelt et al ។ , 1980 ។) ហើយទំនងជាពាក់ព័ន្ធនឹងការឆ្លើយតបអាកប្បកិរិយាចំពោះគ្រឿងញៀននៃការរំលោភបំពាន (Josselyn et al ។ , 1996; Josselyn et al ។ , 1997 ។; Hamilton, et al ។ , 2000 ។; Beinfeld et al ។ , 2002 ។; Rotzinger et al ។ , 2002 ។) ។ នៅក្នុងការអះអាងនៃវប្បធម៌កោសិកា។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈយ៉ាងទូលំទូលាយហើយត្រូវបានបង្ហាញថាឆ្លើយតបទៅនឹងសមាជិកគ្រួសារ CREB និង AP-1 (ពិនិត្យឡើងវិញដោយ Hansen, 2001). Haun និង Dixon (1990) បានបង្ហាញថាស្មុគស្មាញអេ - អេស។ ស៊ី។ អេច។ អរអាចភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ ខេក។ តំបន់បណ្តាញដូច CRE ។ នៅក្នុង vitroហើយវាត្រូវបានបង្ហាញនៅពេលក្រោយដោយប្រើកោសិកា neuroblastoma SK-N-MC, ការផ្លាស់ប្តូរនៃតំបន់បណ្តាញដូច CRE បានកាត់បន្ថយការឆ្លើយតបរបស់អ្នកផ្សព្វផ្សាយទៅ cFos / cJun ដែលលើសទម្ងន់។Rourke et al ។ , 1999 ។) ។ ជាការពិតយើងក៏ឃើញថាមានការកើនឡើងដែរ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយ (រូបភាព 2) និងចងនៅឬជុំវិញធាតុដូច CRE (រូបភាព 3) លើការយកចិត្តទុកដាក់ខ្ពស់នៃΔFosBសមាជិកគ្រួសារ AP-1 ផ្សេងទៀតប៉ុន្តែយើងរកឃើញថាគ្មានការភ្ជាប់ដោយផ្ទាល់នៃΔFosBទៅ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ នៅ​ក្នុង Vivo or នៅក្នុង vitroសូម្បីតែនៅលើ overexpression របស់ខ្លួន។

ការងារជាច្រើនបានបង្ហាញពីតួនាទីរបស់ CREB នៅក្នុងបទប្បញ្ញត្តិ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយ។ នេះ។ ខេក។ តំបន់ដែលមានរាងដូច CRE ត្រូវបានអភិរក្សពាសពេញឆ្អឹងកង (Hansen, 2001) និងនៅក្នុងការអះអាងអំពីវប្បធម៌កោសិកាខ្លះទាំង CREB និង AP-1 ដែលភ្ជាប់នឹងគេហទំព័រនេះហើយចាំបាច់សម្រាប់ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយ (ហាន់និងឌិកសិន, 1990 ។; ដេវ៉ាល et al ។ , 2000 ។; Hansen, 2001) ។ លើសពីនេះទៀតសកម្មជនដែលគេស្គាល់ជាច្រើន។ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិ (រាប់បញ្ចូលទាំង BFGF, PACAP, peptones និង depolarization) ត្រូវបានបង្ហាញដើម្បីធ្វើសកម្មភាពតាមរយៈ CREB (ហាន់សេន et al ។ , 1999 ។; Deavall, et al, 2000 ។; Bernard, et al ។ , 2001 ។; ហ្គីវី, et al ។ , 2002 ។; ហាន់សេន et al ។ , 2004 ។) ។ របស់យើង។ ខេក។-luciferase ទិន្នន័យហ្សែនរបស់អ្នកយកព័ត៌មានគាំទ្រតួនាទីដ៏សំខាន់សម្រាប់គេហទំព័រដែលស្រដៀងនឹង CRE ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយ, ចាប់តាំងពីការផ្លាស់ប្តូរនៃគេហទំព័រនេះកាត់បន្ថយមូលដ្ឋាន។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយនិង។ ខេក។កន្សោម -luciferase ដែលបង្កើតឡើងដោយ VP16-CREB ដែលជាទម្រង់សកម្មរបស់ CREB ដែលមានលក្ខណៈសកម្មត្រូវបានបាត់បង់នៅពេលដែលគេហទំព័រនេះត្រូវបានបំប្លែង (ការសង្កេតមិនបានផ្សព្វផ្សាយ) ។ ដូច្នេះយើងមានការភ្ញាក់ផ្អើលនៅពេលដែលដឹងថា CREB ហាក់ដូចជាមិនភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយផលិតផលចំរុះចំរុះទាំងនៅមូលដ្ឋានឬលើរយៈពេលខ្លីនៅពេលដែលកម្រិត CREB កើនឡើង។ នេះអះអាងថាកម្រិតនៃ CREB ។ ក្នុងមួយ SE មិនមែនជាកត្តាតែមួយគត់ក្នុងការកំណត់ចំនួនទឹកប្រាក់នៃការភ្ជាប់នៅគេហទំព័រនេះទេហើយនេះត្រូវបានគាំទ្រដោយការងាររបស់អ្នកដទៃ (ឆា - ម៉ូលស្តាដ et al ។ , 2004 ។) ។ ចាប់តាំងពីអ្នកផ្សព្វផ្សាយផ្សេងទៀតបានកំណត់អត្តសញ្ញាណហ្សែនគោលដៅរបស់ CREB ដូចជា។ BDNF និង prodynorphin ។, បានចង CREB, យើងមានទំនុកចិត្តក្នុងការរកឃើញថា CREB មិនត្រូវបានចងភ្ជាប់ជាមួយ។ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយនៅក្នុងការដកស្រង់នុយក្លេអ៊ែរ striatal ។ លើសពីនេះទៀត induction នៃ ខេក។-luciferase សកម្មភាពដោយΔFosBមិនពឹងផ្អែកលើគេហទំព័រដែលមានលក្ខណៈដូច CRE ដដែលនោះទេដោយលើកឡើងថាΔFosBមិនកំនត់ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិដោយកំណត់ការភ្ជាប់ដោយផ្ទាល់របស់ CREB ទៅនឹងឯកសារ។ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។

អសមត្ថភាពរបស់យើងក្នុងការរកឃើញ CREB ធ្វើអន្តរកម្មជាមួយ។ ខេក។ ផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានគាំទ្រដោយ។ Renthal et al ។ (2009)ដែលបានប្រើវិធីសាស្រ្តឈីប - ឈីបដើម្បីពិនិត្យមើលការផ្លាស់ប្តូរជាសកលនៃផូស្វ័រស៊ីអេសប៊ី (ភីស៊ីអេសប៊ី) និងអេហ្វ - បូចងក្នុង striatum បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់កូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ។ នៅក្នុងការពិសោធន៍ទាំងនេះស្មុគស្មាញឌីអិនអេ - ប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានគេធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវអង្គបដិប្រាណΔFosBឬ pCREB និងឌីអិនអេដែលបានច្របាច់បញ្ចូលបន្ទាប់ពីដាក់ស្លាកត្រូវបានផ្សំទៅជាមីក្រូវ៉េសផ្សព្វផ្សាយ។ ខណៈពេលដែលហ្សែនគោលដៅរបស់ CREB ជាច្រើនត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណជាមួយនឹងវិធីសាស្រ្តនេះ (ឧ។ BDNF, prodynorphin ។), ខេក។ មិនត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ។ លើសពីនេះទៀតវាត្រូវបានបង្ហាញថាការផ្សារភ្ជាប់របស់ CREB ទៅនឹងតំបន់ CRE ឯកភាពខុសគ្នាយ៉ាងខ្លាំងរវាងខ្សែកោសិកាដែលមានវប្បធម៌ (ឆា - ម៉ូលស្តាដ et al ។ , 2004 ។) ។ រាល់ការសិក្សាមុន ៗ ដែលបានរកឃើញអន្តរកម្មរបស់ CREB ជាមួយ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានអនុវត្តតាមវប្បធម៌កោសិកា (មិនមែនខួរក្បាលដែលយកគំរូអេមអេអេអេអេអេនិងជីភីត្រូវបានគេយកមកប្រើនោះទេ) ហើយបានប្រើជែលវេនដើម្បីធ្វើការស៊ើបអង្កេតអន្តរកម្មប្រូតេអ៊ីន - ឌីអិនអេ។ ខណៈពេលដែល EMSA អាចវាយតំលៃសក្តានុពលនៃកត្តាដែលត្រូវភ្ជាប់ទៅនឹងលំដាប់ឌីអិនអេ។ នៅ​ក្នុង Vivo។ លើសពីនេះទៀត, ភាគច្រើននៃទិន្នន័យបង្ហាញទាំង induction នៃ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយឬ CREB ភ្ជាប់ទៅនឹងឯកសារ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានទទួលពីកោសិកាដែលត្រូវបានរំញោចដោយកត្តាដូចជា peptones (Bernard et al ។ , 2001 ។), ការធ្វើឱ្យខូចទ្រង់ទ្រាយ (ហាន់សេន et al ។ , 2004 ។) ឬសកម្មជនផ្សេងៗគ្នានៃរទេះភ្លើងដែលមានសញ្ញាប្រាប់ចូលរួមមាន cAMP និង ERK (Hansen et al ។ , 1999) ។ នៅក្នុងការពិសោធន៍របស់យើងមានតែ“ ការជម្រុញចិត្ត” ដែលត្រូវបានប្រើគឺការពង្រីកសក្តានុពលរបស់អ័រហ្វូសដែលវាគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីជំរុញឱ្យមាន ខេក។ ការបញ្ចេញមតិ រួមជាមួយគ្នានេះបង្ហាញថាសមត្ថភាពរបស់ CREB ក្នុងការភ្ជាប់ (និងមានសក្តានុពលគ្រប់គ្រង) ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយពឹងផ្អែកយ៉ាងខ្លាំងទៅលើប្រភេទកោសិកានិងការធ្វើឱ្យសកម្មនៃមាគ៌ាដែលមានសញ្ញាជាក់លាក់។ លើសពីនេះទៀតនេះ ខេក។ ធាតុផ្សព្វផ្សាយដូច CRE (យ៉ាងហោចណាស់នៅក្នុងកោសិកា PC12 ដែលផលិតនិងនៅក្នុង striatum កណ្តុរ) មិនមែនជាគោលដៅផ្ទាល់របស់ CREB ឬΔFosBទេ។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍បទប្បញ្ញត្តិនៃ។ FosB ការបញ្ចេញមតិដោយ CREB ក៏ជាក់លាក់ចំពោះប្រភេទកោសិកានិងប្រភេទនៃការរំញោច។ ការសិក្សាដោយអាន់ឌ្រូសសុន។ et al។ បានរកឃើញថាការចាក់ថ្នាំ CREB antigense oligonucleotides ចូលទៅក្នុងកណ្តុរ striatum រារាំងផ្នែកខ្លះនៃការបញ្ចូល FosB រដ្ឋបាលកូកាអ៊ីន (Andersson et al ។ , 2001) ។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយពួកគេក៏បានរកឃើញថាសមត្ថភាពរបស់ L-Dopa ដើម្បីនាំឱ្យមាន។ FosB ការបញ្ចេញមតិនៅក្នុង 6-OHDA-lesioned striatum មិនត្រូវបានជះឥទ្ធិពលដោយវត្តមានរបស់ CREB antigense oligonucleotides ទេ។

ចាប់តាំងពី CREB និងΔFosBហាក់ដូចជាគ្រប់គ្រងដោយប្រយោល។ ខេក។ ការផ្សព្វផ្សាយនិងការផ្លាស់ប្តូររចនាសម្ព័នទីតានីញ៉ូមត្រូវបានគេកត់ត្រាជាការឆ្លើយតបទៅនឹងភាពរំញោចផ្សេងៗដែលជំរុញឱ្យΔFosB (Tsankova et al ។ , 2004 ។; Kumar et al ។ , 2005; Renthal et al ។ , 2008 ។) យើងបានវែកញែកថា BFosB អាចផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយដោយប្រយោលដោយការផ្លាស់ប្តូររចនាសម្ព័ន្ធ chromatin ។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយនៅក្នុងសត្វកណ្តុរហួសកំរិតΔFosBសម្រាប់សប្តាហ៍ទី 2 មិនមានការផ្លាស់ប្តូរអាសេអ៊ីនអេជអេសអេចអេសអេសនៅឯ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ (តារាង 1) ។ នេះត្រូវបានគាំទ្រដោយទិន្នន័យរបស់ឈីបឈីប។ Renthal et al ។ (2009)ដែលបានរាយការណ៍ថាគ្មានការផ្លាស់ប្តូរអាសេទិកអេជអេសអេចអេសអេសអេសអេមអេសអេមអេសអេមអេសអេមអេសអេស។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយនៅក្នុងសត្វកណ្តុរប្រឈមនឹងកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ។ ចាប់តាំងពី ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយគឺសកម្មនៅក្នុង striatum, គ្មានការចង histone H3 ដែលមានការគៀបសង្កត់ត្រូវបានគេរំពឹងថានឹងត្រូវបានគេសង្កេតឃើញ។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍យើងក៏មិនមានការផ្លាស់ប្តូរដែរដោយសារតែ toFosB overexpression ក្នុងការផ្សារភ្ជាប់អេជអេជអេសអេជអេសអេសនៅ BDNF ផ្សព្វផ្សាយ (ដែលបានបង្ហាញការកើនឡើង CREB ចង) ឬនៅ។ CDK5 និង prodynorphin ។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយ (ដែលបង្ហាញពីការកើនឡើង bFosB) ។ ចាប់តាំងពីមានការកែប្រែអ៊ីស្តូនជាច្រើនបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយ (ពិនិត្យឡើងវិញដោយ។ រ៉េនដូនិងចាង, 2009 ។) ទំនងជាមានការកែប្រែក្រូម៉ូសូមផ្សេងទៀតដែលទាក់ទងនឹងការបង្កើតហ្សែនទាំងនេះ។ ការផ្លាស់ប្តូរក្រូម៉ូសូមទោលណាមួយទោះបីជាច្រើនតែព្យាករណ៍ពីកម្រិតនៃសកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយក៏ដោយក៏មិនអាចផ្លាស់ប្តូរបានដែរអំឡុងពេលដំណើរការហ្សែនជាក់លាក់មួយ។ នៅក្នុងការងារនាពេលអនាគតវាគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ក្នុងការមើលការផ្លាស់ប្តូរសក្តានុពលផ្សេងទៀតនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធ chromatin នៅជុំវិញ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយខាងក្រោម oveFosB overexpression ។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍គឺកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ (ទំនងជា។ តាមរយៈ ductionFosB induction) ត្រូវបានបង្ហាញដើម្បីបង្ហាញនូវការបង្ហាញ sirtuin 1 និង 2, ថ្នាក់ទី ៣ នៃអ៊ីស្ត្រូស្តេនដែលលេចចេញជាការផ្លាស់ប្តូរសរីរវិទ្យាប្រសាទការបង្ហាញសញ្ញា ERK និងការឆ្លើយតបអាកប្បកិរិយាចំពោះកូកាអ៊ីន (Renthal et al ។ , 2009 ។) ។ ការដាក់បញ្ចូលអ៊ីស្ត្រូហ្សែលអ៊ីស្ត្រូសែននឹងមានសមត្ថភាពក្នុងការគ្រប់គ្រងដំណាលគ្នានៃការបញ្ចេញហ្សែនមួយចំនួនធំ។ តាមរយៈ ការផ្លាស់ប្តូរជាសកលនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធ chromatin ។

បេក្ខជនដែលអាចធ្វើទៅបានចូលរួមនៅក្នុង។ ខេក។ បទបញ្ញត្តិដូចខាងក្រោម oveFosB overexpression គឺ cFos សមាជិកគ្រួសារ AP -1 ។ ការបង្ហាញរបស់ cFos ត្រូវបានកំណត់ដោយច្បាប់របស់ CREB (Sheng et al ។ , 1990 ។; Impey et al ។ , 2004 ។) និង cFos overexpression (ស្របជាមួយនឹងការលើសកំរិតនៃដៃគូភ្ជាប់របស់វា) កើនឡើង ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយ (Rourke et al ។ , 1999 ។) ។ ដូច្នេះការបង្កើនកំរិត CREB ដោយសារតែរយៈពេលខ្លី oveFosB ការហៀរសំបោរអាចបង្កើនកំរិតកូអរអេសហើយជាលទ្ធផលបង្កើនការផ្សារភ្ជាប់ទៅនឹង ខេក។ តំបន់បណ្តាញដូច CRE ។ cfos mRNA ត្រូវបានបង្កឡើងដោយសត្វកណ្តុរបន្ទាប់ពីពីរសប្តាហ៍នៃΔFosB overexpression (McClung និង Nestler, 2003) និងការថយចុះនៃសត្វកណ្តុរដែលត្រូវបានប៉ះពាល់នឹងកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃឬយូរអង្វែង oveFosB ។Renthal et al ។ , 2008 ។) ។ នៅទីនេះយើងរកឃើញថាកូហ្វ័រភ្ជាប់ដោយផ្ទាល់ទៅឯកសារ។ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយនៅក្នុងជាលិកា striatal ទោះយ៉ាងណា oveFosB overexpression មិនបង្កើនការផ្សារភ្ជាប់ទេ។ នេះបង្ហាញថាខណៈពេលដែល cFos អាចពាក់ព័ន្ធនឹងការធ្វើនិយ័តកម្ម។ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិជាទូទៅការផ្លាស់ប្តូរការចងក្រងស៊ីអរម៉ូនតែម្នាក់ឯងមិនទំនងជាយន្តការដែលΔFosBធ្វើនិយ័តកម្មឡើយ។ ខេក។ ការបញ្ចេញមតិ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយវាអាចទៅរួចដែលថា osFosB អាចបណ្តាលឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរក្រោយការបកប្រែនៅក្នុង cFos (ឧទាហរណ៍ការផ្លាស់ប្តូរ phosphorylation) ឬនាំឱ្យមានការបញ្ចេញមតិនៃដៃគូចង (ដូចជាស៊ីជុន) ឬប្រូតេអ៊ីនសហសកម្មភាព។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយចាប់តាំងពីតំបន់ដែលមានលក្ខណៈដូច CRE ដដែល (ដែលពីមុនត្រូវបានបង្ហាញថាជាគេហទំព័រដែលចងភ្ជាប់សម្រាប់ស្មុគស្មាញអេចអេសអេចអេសអេចសូមមើល។ ហាន់និងឌិកសិន, 1990 ។) មិនត្រូវបានទាមទារសម្រាប់ការកើនឡើងទេ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយដែលត្រូវបានគេមើលឃើញជាមួយនឹង oveFosB overexpression (ដូចដែលត្រូវបានវាយតម្លៃនៅក្នុងការពិសោធន៍ហ្សែនរបស់អ្នកយកព័ត៌មាន) វាមានហេតុផលថាកត្តាសកម្មភាពសំដែងផ្សេងទៀតត្រូវបានកំណត់ដោយΔFosB។

នេះ ខេក។ ការបែងចែកផ្នែកផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានប្រើនៅក្នុងការពិសោធន៍ហ្សែនរបស់អ្នករាយការណ៍ព័ត៌មាន luciferase របស់យើងមានបណ្តាញភ្ជាប់ Sp1 ដែលបានបម្រុងទុកនិងប្រអប់អេឡិចត្រូនិច (ពិនិត្យឡើងវិញដោយហាន់សេន, 2002) ។ ជាពិសេសលំដាប់ប្រអប់អេឡិចត្រូនិចត្រូវបានបង្ហាញដើម្បីភ្ជាប់កត្តាចម្លងជាច្រើន (ពិនិត្យឡើងវិញដោយ។ Forrest និង McNamara, 2004 ។) ។ ការប្រើប្រាស់កោសិកា PC12 យើងបានឃើញការផ្លាស់ប្តូរប្រអប់អេឡិចត្រូនិចមានការថយចុះ។ ខេក។ សកម្មភាពផ្សព្វផ្សាយប៉ុន្តែមិនផ្លាស់ប្តូរការឆ្លើយតបរបស់អ្នកផ្សព្វផ្សាយទៅΔFosB (ទិន្នន័យមិនបានបង្ហាញ) ។ គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ក ខេក។-luciferase អ្នកយកព័ត៌មានមានផ្ទុកនូវការផ្លាស់ប្តូរទាំងនៅក្នុងគេហទំព័រ CRE និង E-box មិនមានសកម្មភាពមូលដ្ឋានដែលអាចរកឃើញនិងមិនឆ្លើយតបនឹង oveFosB overexpression (ការសង្កេតដែលមិនបានផ្សព្វផ្សាយ) ។ អ្នកសំរបសំរួលសក្តានុពលមួយផ្សេងទៀតនៃសកម្មភាពΔFosBលើ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយគឺជាប្រភេទអេហ្វអេហ្វអេហ្វដែលទម្រង់ខ្លះត្រូវបានគេដឹងថាត្រូវបានបង្កឡើងដោយ striatum ដោយការប៉ះពាល់ផ្លូវចិត្តរ៉ាំរ៉ៃ (បៃតងនិង al ។ , 2008) ។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយយើងមិនបានរកឃើញភ័ស្តុតាងណាមួយសម្រាប់ inFosB induction នៃ ATFs ទាំងនេះ (ទិន្នន័យមិនត្រូវបានបង្ហាញទេ) ហើយ ATFs នឹងមិនត្រូវបានគេរំពឹងថានឹងភ្ជាប់ទៅនឹងគេហទំព័រដែលស្រដៀងនឹង CRE ដែលត្រូវបានបំប្លែងនៅលើ ខេក។ អ្នក​ផ្សព្វផ្សាយ។

ភាពមិនច្បាស់មួយនៃការសិក្សានេះគឺថាយើងកំពុងប្រើប្រព័ន្ធបំលែងហ្សែនហ្សែនហ្សិនដើម្បីបំប៉ោងអុកស៊ីហ៊្សែនហើយដូច្នេះមនុស្សម្នាក់ត្រូវតែមានការអភិរក្សក្នុងការគូរចំណុចស្របគ្នារវាងគំរូនេះនិងការគ្រប់គ្រងកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយកណ្តុរឆ្លងហ្សែន 11A មានលទ្ធភាពឱកាសតែមួយគត់ដើម្បីមើលពីផលប៉ះពាល់ជាក់លាក់នៃΔFosBនៅក្នុង striatum ចាប់តាំងពីការរលាកសាច់ដុំមានកំណត់នៅតំបន់ខួរក្បាលនេះ (Chen et al ។ , 1998) ខណៈពេលដែលការគ្រប់គ្រងកូកាអ៊ីនបង្កឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងតំបន់ខួរក្បាលផ្សេងៗជាច្រើនដែលបន្ទាប់មកអាចប៉ះពាល់ដោយប្រយោលដល់ striatum ។ លើសពីនេះទៅទៀតការសិក្សាជាច្រើនបានកត់ត្រាអំពីឥរិយាបថនិងម៉ូលេគុលភីណូអ៊ីប៉ូតេអ៊ីនស្រដៀងគ្នានៅក្នុងសត្វកណ្តុរ 11A បើប្រៀបធៀបទៅនឹងសត្វដែលមិនមែនជាចម្លងរោគត្រូវបានព្យាបាលដោយកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃ (Kelz et al ។ , 1999; McClung និង Nestler, 2003; Renthal et al ។ , 2009 ។) ។ លើសពីនេះទៀត, Bibb et al ។ (2001) បានរាយការណ៍ពីកម្រិតប្រហាក់ប្រហែលនៃជំងឺស្ទះ។ Cdk5 ។ mRNA និងការបញ្ចូលប្រូតេអ៊ីនក្នុងសំពាធ 11A ដូចគ្នានៅពេលប្រៀបធៀបទៅនឹងកាកសំណល់កូកាអ៊ីនអ្នកផ្ទុកសំរាមមិនឆ្លងក៏ដូចជាការផ្លាស់ប្តូរស្រដៀងគ្នានៅក្នុងគោលដៅ CDK5, p35 និង DARPP-32 ។

សរុបសេចក្ដីមកយើងឃើញថាការបញ្ចេញមតិ termFosB ក្នុងរយៈពេលខ្លីនាំឱ្យមានការបង្កើតហ្សែននៅក្នុងវិថី striatum តាមរយៈយន្តការជាច្រើន។ ទាំងនេះរួមបញ្ចូលការចងផ្សព្វផ្សាយដោយផ្ទាល់ការបញ្ចូលប្រូតេអ៊ីននិងសកម្មភាពរបស់ CREB ការផ្លាស់ប្តូរក្រូម៉ូសូមបន្ថែមលើផ្លូវដែលមិនទាន់ត្រូវបានកំណត់។

ទៅ:

នីតិវិធីពិសោធន៍

សត្វ

សត្វពាហនៈហ្សែន 11A ជាបុរស (NSE-tTA x TetOP-osFosB) ត្រូវបានប្រើនៅក្នុងការសិក្សានេះហើយត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈនៅក្នុង Kelz et al ។ , 1999។ ដើម្បីធ្វើឱ្យប្រសើរឡើង pressFosB សត្វកណ្តុរត្រូវបានគេយកចេញពី doxycycline រវាងអាយុ 3 និង 6 សប្តាហ៍ខណៈពេលដែលសត្វកណ្តុរត្រួតពិនិត្យត្រូវបានរក្សាទុកនៅលើ doxycycline ។ សត្វកណ្តុរទាំងអស់ត្រូវបានដាក់និងរក្សាទុកជាក្រុមតាមវដ្ដ 12: វដ្តពន្លឺ / ងងឹត 12, ភ្លើងនៅម៉ោង 7 ព្រឹកនិងបិទនៅម៉ោង 7 ល្ងាចដោយមាន lib លទ្ធភាពទទួលបានអាហារនិងទឹក។ រាល់ការពិសោធន៍របស់សត្វកណ្តុរគឺអនុលោមតាមពិធីសារដែលត្រូវបានអនុម័តដោយគណៈកម្មាធិការថែរក្សានិងប្រើប្រាស់សត្វនៃសាកលវិទ្យាល័យវេជ្ជសាស្ត្រនៃសាកលវិទ្យាល័យ Texas នៅភាគនិរតីនៃទីក្រុងដាឡាស។

អ្នករាយការណ៍និងការបញ្ចេញមតិប្លាស្មា។

សត្វព្រៃ (WT) ខេក។ អ្នករាយការណ៍អ្នកផ្សព្វផ្សាយ -ucucucrase ត្រូវបានរៀបចំដោយបញ្ចូលបំណែក PCR ដែលមានចំនួនប្រហែល 200 ប៊ីបក្នុងវ៉ិចទ័រ pGL3-luc (Promega) ។ បំណែកនេះត្រូវបានគេទទួលបានពីឌីអិនអេហ្សែនហ្សែន (បឋម: 5 'TATCCTCATTCACTGGGACGC 3' ចរន្តទឹកនិង 5 'TACCTTTGGATGGGGAAATCG 3' ផ្នែកខាងក្រោម) និងដំបូងបញ្ចូលទៅក្នុងវ៉ិចទ័រ pGEM-T ងាយស្រួល (Promega, #A1360) ។ បំណែកផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានក្លូនចូលទៅក្នុងគេហទំព័រអង់ស៊ីមរឹតត្បិតរបស់ Kpn1 / Xho1 នៃ pGL3-luc ។

ដើម្បីបង្កើតការផ្លាស់ប្តូរចំណុច CRE នៅក្នុងឯកសារ ខេក។ អ្នកផ្សព្វផ្សាយដែលជាថ្នាំលាបហ្សែនហ្សែនហ្សែនដឹកនាំដោយតំបន់ដែលស្រដៀងនឹង CRE ដែលត្រូវបានគេរាយការណ៍ពីមុនមក (ន័យបឋមៈ 5'CGTGTCCTGCTGGACTGAGCTCGCACTGGGGTAAACA 3 ', ថ្នាំប្រឆាំងនឹងភាពឆេវឆាវៈឧបករណ៍ជំនួយការផ្លាស់ប្តូររបស់ហ្សែនហ្សែនហ្សែន ៣) ត្រូវបានប្រើ ។ នេះបម្លែងគេហទំព័រដូច CRE ដែលបានរាយការណ៍ (ACTGCGTCAGC) ទៅ ACTGAGCTCC ។ អ្នករាយការណ៍ប្លាស្មាទាំងអស់ត្រូវបានបញ្ជាក់ដោយលំដាប់ DNA ។ expressionFosB កន្សោមផ្លាស្មាមមានលំដាប់ lengthFosB ពេញលេញដែលបានបញ្ចូលទៅក្នុងបណ្តាញក្លូនជាច្រើននៃ pCDNA 5 ហើយត្រូវបានពិពណ៌នាពីមុន (Ulery និង Nestler, 2007 ។).

វប្បធម៌កោសិកានិងការឆ្លង DNA ។

កោសិកា Rat pheochromocytoma (PC12) ត្រូវបានរក្សានៅក្នុងអេហ្វប៊ែលអេហ្វអេហ្វរបស់ ១២ ដែលបានកែប្រែដោយឌុលបេកបំពេញបន្ថែមសេរ៉ូមសេះ ១០ ភាគរយ, សេរ៉ូមបូបូស៊ីនទារក ៥ ភាគរយនិងប៉េនីស៊ីលីន / streptomycin ១ ភាគរយនៅ ៣៧ អង្សាសេនិង ៥% CO ។2។ កោសិកាត្រូវបានចម្លងដោយអេឡិចត្រូតដោយប្រើអេឡិចត្រូត BTX 360 (350V, 0 ohms និង 850 μF) ក្នុងផូស្វាត ៨០០ μLឌុលបេកឃិនបានធ្វើឱ្យប្រៃប្រៃនៅក្នុងអំបិល ៤ មីល្លីម៉ែត្រដែលមានចន្លោះប្រហោង ១០ អ៉ីក្រាមនិង ៥ អ៊ិញនៃការបញ្ចេញមតិ។ ប្លាស្មាប្លាស្មាស៊ីដត្រូវបានប្រើដើម្បីធ្វើឱ្យបរិមាណឌីអិនអេសរុបមានលក្ខណៈធម្មតា។ បន្ទាប់ពីការបញ្ចូលកោសិកាត្រូវបានដាំដុះនៅលើចានដែលមានស្រទាប់កូឡាជែន 800 មមសម្រាប់រយៈពេលដែលបានបញ្ជាក់។

ការអះអាងរបស់ Luciferase ។

ពីរឬបីថ្ងៃបន្ទាប់ពីការប្តូរកោសិកាត្រូវបានទឹកនាំទៅ ៣ ដងនៅក្នុងផូស្វូហ្វ័រខាំហ្វាលលីនដែលមានជាតិប្រៃ (ដោយប្រើគ្លីលីលីលីលីនខេន ២៥ មីលីម៉ែត្រ ១៥ ម៉ែតអិម។4, 4 mM EGTA, 1% Triton X-100, pH 7.8, 1 mM DTT) ប្រមូលនិងសំអាតតាមរយៈការដាក់ចំកណ្តាល។ 30 μLនៃ lysate ត្រូវបានផ្សំជាមួយ 140 lL luciferase buffer buffer (25 m glycylglycine, 15 mM MgSO4, 4 mM EGTA, 1 mM DTT, 1 mM ATP, ផូស្វាតប៉ូតាស្យូម 1 ម៉ែល, 1 mM coenzyme A, pH 7.8) ។ សកម្មភាពរបស់ Luminescence ត្រូវបានវាស់ដោយប្រើឧបករណ៍អានពន្លឺ fluorescent microx ប្រភេទ FLx-800 បន្ទាប់ពីចាក់ថ្នាំ 40 μL 1 mM luciferin ដោយស្វ័យប្រវត្តិក្នុងមួយអណ្តូង។ សកម្មភាពរបស់ Luciferase ត្រូវបានធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតាទៅមាតិកាប្រូតេអ៊ីនសរុបដែលត្រូវបានកំណត់ដោយការអះអាងប្រូតេអ៊ីន BioRad ។

ការផ្លាស់ប្តូរការចល័តនៃអេឡិចត្រូត។

ការដកស្រង់នុយក្លេអ៊ែរចេញពីចំណិតទ្វេភាគីនៃ striatum ពីសត្វកណ្តុរហ្សែន 11A ដែលមានហ្សែនហ្សែនហ្សែន (ដែលរក្សានៅលើឬបិទ doxycycline សម្រាប់ 2 ឬ 8 សប្តាហ៍) (McClung និង Nestler, 2003) ត្រូវបានរៀបចំឡើង។ Huang និង Walters (1996). 32ការស៊ើបអង្កេត oligonucleotide ដែលមានស្លាកពីរជាន់ត្រូវបានរៀបចំដោយប្រើប្រូតូកូលជែលអាសេនប្រូតូកូលប្រូតូកូល (#E3300) ហើយការស៊ើបអង្កេតត្រូវបានបន្សុតដោយប្រើជួរឈរបង្កើនបន្ថយរហ័ស។ លំដាប់ការស៊ើបអង្កេត CRE និង AP-1 គឺមកពី Promega (#E328A និង E320B រៀងៗខ្លួន) និង ខេក។ លំដាប់ CRE គឺ (ន័យ Cck-CRE៖ CTAGCGAGCTCTGGACTGCGTCAGCACTGGGTGCA; ភាពច្របូកច្របល់ Cck-CRE៖ CCCAGTGCTGACGCAGTCCAGAGCTCGCTAGCTTT) ។

ប្រតិកម្មនៃការចងនិងអេឡិចត្រុសត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើការកែប្រែនីតិវិធីនៃប្រព័ន្ធប្រូហ្គេជែលអេសអេសអេសអេស (#E3300) ។ 50,000 CPM នៃការស៊ើបអង្កេតដែលមានស្លាកត្រូវបានផ្សំជាមួយការដកស្រង់នុយក្លេអ៊ែរ 10 μg។ ឌីអិនអេដែលជាដៃគូប្រកួតប្រជែងត្រជាក់ត្រូវបានបន្ថែមមុនការណែនាំនៃកាំរស្មីវិទ្យុសកម្ម។ សម្រាប់ការពិសោធន៏ជំនួស, អង់ទីករ XREX μgនៃ CREB (អេកូជីវវិទ្យាវិទ្យាសាស្ត្រ # 2-06) ត្រូវបានប្រើ។ ប្រតិកម្មត្រូវបានប្រើដោយអេឡិចត្រុងនៅលើជែលប៉ូលីគ្រីមូស 083% ស្ងួតហួតហែងនិងលាតត្រដាងខ្សែភាពយន្ត (ប្រើអេក្រង់កាន់តែខ្លាំងសម្រាប់រយៈពេល 4 ម៉ោងដល់ 1 ថ្ងៃ) ។

ភាពស៊ាំ។

ចំពោះកោសិកា PC12 ចាន ៣៥ មីល្លីម៉ែត្រនៃកោសិកាឆ្លងត្រូវបានទឹកនាំទៅក្នុងទឹកត្រជាក់ផូស្វាតឌីលីកឃ្យូសនិងលីលីតត្រូវបានគេរៀបចំដាក់ក្នុងទឹកកក RIPA Lysis buffer ត្រជាក់ (៥០ ម៉ែល Tris pH ៧.៤, ៥ ម។ ម។ អិល។ អេ។ អិម ៥ អេដឌីអេហ្វឌី) ឌីស៊ីអ៊ីស៊ី ១ ភាគរយ។ % Triton X-35, 50% sodium dodecyl sulfate) មានផ្ទុកនូវសារធាតុទប់ការពារជាតិប្រូសេស្តេរ៉ូន។ បន្ទាប់ពីការ sonic, ឈូសឆាយ, និងការវាយតំលៃប្រូតេអ៊ីន Bradford, lysates ត្រូវបានគេបដិសេធយ៉ាងពេញលេញនិង 7.4 μgនៃគំរូគ្នាត្រូវបាន electrophoresed នៅលើជែលប៉ូលី polySryideide អេសអេស 5% ។ ប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានផ្ទេរទៅក្នុងភ្នាសរំអិល PVDF ត្រូវបានរារាំងក្នុងរយៈពេល ១ ម៉ោងក្នុងទឹកដោះគោស្ងួតគ្មានជាតិខ្លាញ់ ៣ ភាគរយនៅក្នុងទឹកប្រៃដែលមានជាតិប្រៃដែលមានផ្ទុក ០.១% ថិន -២០ (ទឹកដោះគោ TBS-T) និងត្រូវបានគេសាកល្បងពេញមួយយប់នៅសីតុណ្ហភាព ៤ អង្សាសេជាមួយនឹងអង្គបដិប្រាណបឋម (CREB- ជីវវិទ្យាផ្នែកខាងលើ # ០៦-០៨៣ ប្រើក្នុងកម្រិត ១ ៈ ១០០០; GAPDH-Sigma # G5 ប្រើក្នុងកម្រិត ១ ៈ ៨០ ០០០) ពនលាយក្នុងទឹកដោះគោ TBS-T ។ បន្ទាប់ពីការលាងចានជាច្រើននៅក្នុង TBS-T, ស្នាមប្រេះត្រូវបានគេស៊ើបអង្កេតអស់រយៈពេលមួយម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ដោយប្រើអង្គបដិប្រាណអនុវិទ្យាល័យ phosphatase-conjugated (Sigma) ដែលរលាយក្នុងទឹកដោះគោ TBS-T ។ បន្ទាប់ពីការលាងសមាតជាច្រើននៅក្នុងទឹកប្រៃដែលមានជាតិប្រៃការប្រតិកម្មពណ៌ត្រូវបានអនុវត្តតាមការណែនាំរបស់ជីអូរ៉ាដ (# ១៧០-៦៤៣២) ។ Membranes ត្រូវបានស្ងួតហួតហែងពេញមួយយប់ដោយស្កេនលើម៉ាស៊ីនស្កេនរាបស្មើនិងដង់ស៊ីតេដែលបានអនុវត្តដោយប្រើ ImageJ (សូមមើលខាងក្រោម) ។

ចំពោះការដកស្រង់ striatal, ការអះអាង blot លោកខាងលិចត្រូវបានអនុវត្តដូចដែលបានចេញផ្សាយពីមុន (Hope et al ។ , 1994) ។ ជាលិកាត្រូវបានយកចេញពីសត្វកណ្តុរដែលកាត់ក្បាលដាក់លើទឹកកកនិងដាក់នៅលើម៉ាទ្រីសខួរក្បាលដែលមានកម្រាស់ 1 ម។ ការដាល់ស្នាមម្រាមដៃត្រូវបានគេយកទៅហើយកកនៅ -80 អង្សាសេរហូតដល់ប្រើ។ ជាលិកាត្រូវបានគេបង្កើតនៅលើទឹកកកនៅក្នុងសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលមានមូលដ្ឋានលើម្សៅដែលមានទាំង phosphatase និង protease inhibitors (Roche, Sigma) ។ បន្ទាប់ពីការ sonic, គំរូត្រូវបាន denatured នៅក្នុងទឹករំពុះនិង centrifuged នៅ 15,000xg សម្រាប់ 15 នាទី; វណ្ណយុត្តិត្រូវបានប្រមូលនិងដំណើរការជាបន្តបន្ទាប់។ បរិមាណកំហាប់ប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានគេយកមកប្រើតាមការប៉ាន់ស្មានរបស់ Bradford ។ គំរូត្រូវបានដំណើរការដោយជែលអាសេឡាមីល / ប៊ីសាកាគ្រីឡៃឌី 10% ដែលផ្ទេរទៅភ្នាស PVDF ត្រូវបានរារាំងនៅក្នុងទឹកដោះគោ 5% ហើយបញ្ចូលជាមួយអង្គបដិប្រាណបឋម (Anti-CREB, Upstate, Lake Placid, NY) ។ ស្នាមប្រេះត្រូវបានគេមើលឃើញជាបន្តបន្ទាប់ដោយប្រើប្រព័ន្ធគីមីវិទ្យា (ផ្លេយ) ។ គំរូទាំងអស់ត្រូវបានធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតាទៅ GAPDH (Fitzgerald, Concord, MA) ។ ខ្សែកោងស្តង់ដារត្រូវបានដំណើរការដើម្បីធានាថាយើងស្ថិតនៅក្នុងជួរលីនេអ៊ែរនៃការបញ្ជូន។

ការវិភាគដង់ស៊ីតេ។

សម្រាប់វ៉ាក់សាំងប្លាស្ទិក PC12, ការវិភាគដង់ស៊ីតេត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើ ImageJ ជាមួយនឹងការក្រិតតាមខ្នាត។ សញ្ញាផ្ទៃខាងក្រោយជាមធ្យមត្រូវបានដកចេញពីការវាស់វែងនីមួយៗហើយសមាមាត្រនៃសញ្ញា CREB ទៅ GAPDH ត្រូវបានគណនាសម្រាប់គំរូនីមួយៗ។ ចំពោះប្រព័ន្ធឌីជីថល immunoblots និងការវិភាគ EMSA Scion Image 1.62c ត្រូវបានប្រើជាមួយការដកផ្ទៃខាងក្រោយ។

ការធ្វើ immunoprecipitation ក្រូម៉ូសូម (ChIP)

ការអះអាងរបស់ជីភីត្រូវបានអនុវត្តតាមវិធីសាស្រ្ត។ Tsankova et al ។ (2004) និង គូម៉ា et al ។ (2005)។ សរុបសេចក្ដីដោយគំរូទ្វេភាគីពីសត្វកណ្តុរចំនួន ១១ អាដែលរក្សាទុកនៅលើនិងបិទ doxycycline ត្រូវបានភ្ជាប់គ្នាជាមួយនឹងអ៊ីដ្រូសែនផ្លូវការ ១ ភាគរយហើយតំណភ្ជាប់ត្រូវបានគេរំលាយជាមួយគ្លីកូលីន (កំហាប់ចុងក្រោយ ០,១២៥ ម៉ែត) ។ គំរូទាំងនេះបានមកពីចំណិតខួរក្បាលទាំងមូលដែលត្រូវបានគេយកទៅកម្រិតនៃស្នូលដែលចាប់យកជាមួយ Cortex ។ Chromatin ត្រូវបានគេកាត់ចោលនូវបំណែកប្រហែលពី ០.២ ទៅ ១ គបតាមរយៈការឆ្លងមេរោគ sonic ដែលបានបោសសំអាតជាមួយអងា្កំប្រូតេអ៊ីន G (Thermo វិទ្យាសាស្ត្រលេខ ២២៨៥២) និងសំណាកបញ្ចូលបានកកនៅ -៨០ អង្សាសេ។ ចន្លោះពី ៦០ ទៅ ១០០ ofg នៃក្រូម៉ូសូមត្រូវបានប្រើសម្រាប់របបទឹកភ្លៀងនីមួយៗ។ 11-1 μgនៃអង្គបដិប្រាណបឋមនីមួយៗត្រូវបានប្រើ (CREB: ជីវបច្ចេកវិទ្យាជីវវិទ្យាលេខ ០៦-៨៦៣, ΔFosB: Santa Cruz ជីវបច្ចេកវិទ្យា # SC-៤៨x, អេទីលអេឡិចត្រូលីកអេជ ៣៖ ជីវបច្ចេកវិទ្យាខ្ពស់ # ០៥-៥៩៩, មេតាណុលអេជ ៣ (LYS៩)៖ បច្ចេកវិទ្យាបញ្ជូនសញ្ញាកោសិកា, cFos: ជីវវិទ្យាសាន់តា Cruz # SC-0.125x) ។ ស្មុគ្រស្មាញ Antibody-chromatin ត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងជាមួយនឹងប្រូតេអ៊ីន Protein G បូកអងា្កំយោងទៅតាមការណែនាំរបស់អ្នកផលិត (Thermo វិទ្យាសាស្ត្រលេខ ២២៨៥២) ។ បន្ទាប់ពីការភ្ជាប់បញ្ច្រាសនៃការបញ្ចូលនិងសំណាកដែលបានបញ្ចូលគ្នាគំរូនីមួយៗត្រូវបានគេដាក់បញ្ចូលទៅក្នុងបរិមាណ PCR (qPCR) ។ ការប្រើប្រាស់អង្គបដិប្រាណទាំងអស់សម្រាប់ជីភីអេត្រូវបានគេធ្វើឱ្យមានសុពលភាពយ៉ាងទូលំទូលាយ (Tsankova et al ។ , 2004 ។; Kumar et al ។ , 2005; Renthal et al ។ , 2009 ។).

កម្រិតនៃការភ្ជាប់ប្រូតេអ៊ីននៅឯការជំរុញចំណាប់អារម្មណ៍ហ្សែននីមួយៗត្រូវបានកំណត់ដោយការវាស់បរិមាណឌីអិនអេដែលជាប់ទាក់ទងដោយ qPCR (អនុវត្តជីវសាស្រ្ត (អេប៊ីអាយ) Prism 7700, ទីក្រុងហ្វ័រឌ័រ, CA) ។ ការបញ្ចូលឬឌីអិនអេសរុប (nonimmunoprecipitated) និងឌីអិនអេ immunoprecipitated ត្រូវបានពង្រីកជាបីផ្នែកនៅចំពោះមុខ SYBR បៃតង (ជីវសាស្រ្តអនុវត្ត, CA) ។ តម្លៃ Ct ពីគំរូនីមួយៗត្រូវបានទទួលដោយប្រើកម្មវិធីតំរុយ 1.1 ។ បរិមាណដែលទាក់ទងនៃគំរូឌីអិនអេត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើវិធីសាស្ត្រΔΔCt (Tsankova et al ។ , 2004 ។) ។ ថ្នាំដែលត្រូវបានប្រើ: ភ្នាក់ងារផ្សព្វផ្សាយ BDNF 4: CTTCTGTGTGCGTGAATTTGCT; អ្នកផ្សព្វផ្សាយ AGTCCACGAGAGGGCTCCA CDK5៖ GCTGAAGCTGTCAGGAGGTC; អ្នកផ្សព្វផ្សាយស៊ីធីជីជីស៊ីស៊ីស៊ីជីជីស៊ីធីធីស៊ីធីធីតាធីធីធីធីធីធីជីជីជីស៊ីស៊ីស៊ីស៊ីធីស៊ីធីធីធីធី; អ្នកផ្សព្វផ្សាយ TTAAATAGCTCCTCCCGGTTCG Prodynorphin: GGCTTCCTTGTGCTTCAGAC; GCGCTGTTTGTCACTTTCAA ។

វិភាគស្ថិតិ

ទិន្នន័យទាំងអស់ត្រូវបានបង្ហាញជា±កំហុសស្តង់ដារនៃមធ្យម។ ភាពខុសគ្នានៃស្ថិតិត្រូវបានកំណត់ដោយការធ្វើតេស្ត T-tailed ពីររបស់សិស្ស (p <0.05) ។ នៅពេលការប្រៀបធៀបច្រើនត្រូវបានបង្កើតឡើងតម្លៃ p ត្រូវបានកែតម្រូវដោយប្រើការកែសំរួល Bonferroni ។

ទៅ:

ការទទួលស្គាល់

យើងសូមថ្លែងអំណរគុណដល់លោកវីលលលហេលឡានិងអារីវីនគូម៉ាសម្រាប់ការពិភាក្សាដែលមានប្រយោជន៍។ យើងក៏សូមអរគុណ NIDA ដែលបានផ្តល់ថវិកាដល់ការពិសោធទាំងនេះ។

ទៅ:

លេខយោង

ការបដិសេធរបស់អ្នកបោះពុម្ពផ្សាយ៖ នេះគឺជាឯកសារ PDF នៃសំណៅដែលមិនបានសរសេរដែលត្រូវបានទទួលយកសម្រាប់ការបោះពុម្ភផ្សាយ។ ក្នុងនាមជាសេវាដល់អតិថិជនរបស់យើងយើងកំពុងផ្តល់នូវកំណែដើមនៃសាត្រាស្លឹករឹតនេះ។ សាត្រាស្លឹករឹតនឹងឆ្លងកាត់ការថតចម្លងការសរសេរនិងការពិនិត្យឡើងវិញនូវភ័ស្តុតាងដែលបង្ហាញលទ្ធផលមុនពេលវាត្រូវបានគេបោះពុម្ភផ្សាយនៅក្នុងទំរង់របស់វា។ សូមកត់សម្គាល់ថាក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការផលិតកម្មកំហុសអាចត្រូវបានរកឃើញដែលអាចប៉ះពាល់ដល់មាតិកាហើយការបដិសេធតាមផ្លូវច្បាប់ទាំងអស់ដែលអនុវត្តចំពោះទិនានុប្បវត្តិទាក់ទង។

ល័ក្ខខ័ណ្ឌនៃចំណាត់ថ្នាក់៖

ផ្នែក៖ #1 ជីវវិទ្យាកោសិកានិងម៉ូលេគុលនៃប្រព័ន្ធសរសៃប្រសាទ។

ទៅ:

ឯកសារយោង

  1. Andersson M, Konradi C, Cenci MA ។ ប្រូតេអ៊ីនដែលទាក់ទងនឹងការឆ្លើយតបរបស់ cAMP គឺត្រូវបានទាមទារសម្រាប់ការបង្ហាញហ្សែនដែលពឹងផ្អែកលើដូប៉ាមីនក្នុងដំណាក់កាលដដែលប៉ុន្តែមិនមែនជាឌីស្កូមដែលត្រូវបានគេបដិសេធនោះទេ។ ជែ Neurosci ។ 2001; 21: 9930 – 43 ។ [PubMed]
  2. Barrot M, Olivier JD, Perrotti LI, DiLeone RJ, Berton O, Eisch AJ, Impey S, Storm DR, Neve RL, Yin JC, Zachariou V, Nestler EJ ។ សកម្មភាពរបស់ CREB នៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែរសឺរសែលត្រួតពិនិត្យការគ្រប់គ្រងការឆ្លើយតបនៃអាកប្បកិរិយាចំពោះការរំញោចអារម្មណ៍។ Proc Natl Acad Sci US A. 2002; 99: 11435 – 40 ។ [អត្ថបទឥតគិតថ្លៃ PMC] [PubMed]
  3. ពិធីករ Beinfeld, Connolly KJ, Pierce RC ។ ការព្យាបាលកូកាអ៊ីនបង្កើនសារធាតុ cholecystokinin (ស៊ីស៊ីខេ) បន្ថែមទៀតនៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែរជួយរំងាប់កណ្តុរដែលកំពុងរើដោយសេរីជាឥទ្ធិពលមួយដែលត្រូវបានពង្រឹងនៅក្នុងកណ្តុរដែលមានអាកប្បកិរិយាចាប់អារម្មណ៍នឹងកូកាអ៊ីន។ ជេ Neurochem ។ 2002; 81: 1021 – 7 ។ [PubMed]
  4. Bernard C, Sutter A, Vinson C, Ratineau C, Chayvialle J, Cordier-Bussat M. Peptones ជំរុញការចម្លងហ្សែន cholecystokinin ក្នុងពោះវៀនតាមរយៈកត្តាឆ្លើយតបធាតុផ្សំដែលទាក់ទងនឹងធាតុផ្សំ។ ជំងឺ endocrinology ។ 2001; 142: 721 – 9 ។ [PubMed]
  5. Bibl JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. ផលប៉ះពាល់នៃការប៉ះពាល់ទៅនឹងកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយប្រូតេអ៊ីន Neuron Cdk5 ។ ធម្មជាតិ។ 2001 410: 376-80 ។ [PubMed]
  6. Cha-Molstad H, Keller DM, Yochum GS, Impey S, Goodman RH ។ ការចងភ្ជាប់ប្រភេទជាក់លាក់នៃកោសិកានៃកត្តាប្តូរឈ្មោះ CREB ទៅនឹងធាតុឆ្លើយតបរបស់ cAMP ។ Proc Natl Acad Sci US A. 2004; 101: 13572 – 7 ។ [អត្ថបទឥតគិតថ្លៃ PMC] [PubMed]
  7. Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ ។ បទប្បញ្ញត្តិនៃប្រូតេអ៊ីនដូចដែនដីសណ្តរ FosB និង FosB ដោយការឆក់និងការព្យាបាលដោយកូកាអ៊ីន។ ម៉ុលឱសថសាឡុល។ 1995; 48: 880 – 9 ។ [PubMed]
  8. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ ។ សត្វចម្លងរោគដោយការបញ្ចេញហ្សែនដែលមានគោលដៅនៅក្នុងខួរក្បាល។ ម៉ុលឱសថសាឡុល។ 1998; 54: 495 – 503 ។ [PubMed]
  9. Chen J, Zhang Y, Kelz MB, Steffen C, Ang ES, Zeng L, Nestler EJ ។ ការអូសទាញគីណាស៊ីស៊ីនស៊ីធីស៊ីអ៊ិចស៊ីអេសអេសស៊ីអិលនៅក្នុងហ៊ីបភីដាប់ដោយការឆក់អគ្គិសនីរ៉ាំរ៉ៃៈតួនាទីΔFosB។ ជែ Neurosci ។ 5; 2000: 20 – 8965 ។ [PubMed]
  10. ឈិនណូវអ៊ី, ឃឺពប៉ូឡាធីខេ។ ការជួបគ្នាយ៉ាងជិតស្និទ្ធនៃប្រភេទជាច្រើន: អន្តរកម្មហ្វូ - មិថុនាដែលសម្របសម្រួលភាពជាក់លាក់នៃបទបញ្ញត្តិចម្លង។ អូកូហ្គេន។ 2001; 20: 2438 – 52 ។ [PubMed]
  11. ខូលអិល, ខុនរ៉ាឌីឌីស៊ី, ឌូក្លាស J, ហឺម៉ានអេស។ ការសម្របខ្លួនណឺរ៉ូនទៅនឹងថ្នាំអំហ្វេតាមីននិងដូប៉ាមីន៖ យន្តការម៉ូលេគុលនៃបទប្បញ្ញត្តិហ្សែន prodynorphin ក្នុងសត្វកណ្តុរ។ ណឺរ៉ូន។ 1995; 14: 813 – 23 ។ [PubMed]
  12. Deavall DG, Raychowdhury R, ​​Dockray GJ, Dimaline R. ការគ្រប់គ្រងការចម្លងហ្សែន CCK ដោយ PACAP នៅក្នុងកោសិកា STC-1 ។ Am J Physiol ក្រពះពោះវៀនធំ Physiol ។ 2000; 279: G605 – 12 ។ [PubMed]
  13. Ding XZ, Mocchetti I. បទប្បញ្ញត្តិ Dopaminergic នៃមាតិកា cholecystokinin mRNA នៅក្នុងសត្វកណ្តុរ។ Res Bra ខួរក្បាលម៉ុល Res Res ។ 1992; 12: 77 – 83 ។ [PubMed]
  14. Forrest S, McNamara C. Id ក្រុមគ្រួសារនៃកត្តាចម្លងនិងការបង្កើតដំបៅសរសៃឈាម។ Arterioscler Thromb Vasc Biol ។ 2004; 24: 2014 – 20 ។ [PubMed]
  15. Gevrey JC, Cordier-Bussat M, Némoz-Gaillard E, Chayvialle JA, Abello J. សហតម្រូវការរបស់អេមភីស៊ីអេមប៊ីស៊ី - និងគីណូអ៊ីតដែលពឹងផ្អែកលើកាល់ស្យូមសម្រាប់ការបំលែងប្រតិកម្មនៃហ្សែន cholecystokinin ដោយអ៊ីដ្រូសែនប្រូតេអ៊ីន។ ជប៊ីប៊ីលចែម។ 2002; 277: 22407 – 13 ។ [PubMed]
  16. Green TA, Alibhai IN, Unterberg S, Neve RL, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ ។ ការចង្អុលបង្ហាញពីកត្តាចម្លងសកម្ម (ATFs) ATF2, ATF3, និង ATF4 នៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែររំaccកនិងបទបញ្ជានៃឥរិយាបថអារម្មណ៍។ ជែ Neurosci ។ 2008; 28: 2025 – 32 ។ [PubMed]
  17. Hamilton ME, Redondo JL, Freeman AS ។ ការហៀរចេញនូវសារធាតុដូប៉ាមីននិង cholecystokinin នៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែរធ្វើឱ្យមានការឆ្លើយតបចំពោះរដ្ឋបាលគ្រឿងញៀនស្រួចស្រាវ។ និយាយឡើងវិញ។ 2000; 38: 238 – 42 ។ [PubMed]
  18. ទូរទស្សន៍ហាន់សេន, រេហ្វហ្វុលជេអេហ្វ, នីលែនអេហ្វស៊ី។ មីណូហ្សែនប្រូតេអ៊ីន kinase និងប្រូតេអ៊ីន kinase ដែលបានធ្វើឱ្យសកម្មគឺជាមធ្យោបាយបញ្ជូនសញ្ញាមួយដែលជំរុញការចម្លងសារជាតិ cholecystokinin តាមរយៈការធ្វើឱ្យសកម្មនៃប្រូតេអ៊ីនដែលមានប្រតិកម្មទៅនឹងអ៊ីដ្រូសែន adonosine 3 ′, 5′-monophosphate ។ ម៉ុនអេតូកូនីណូល។ ឆ្នាំ ១៩៩៩, ១៣: ៤៦៦-៧៥ ។ [PubMed]
  19. ទូរទស្សន៍ហាន់សេននីនីលស៊ីអេស។ បទប្បញ្ញត្តិនៃការចម្លងហ្សែន cholecystokinin ណឺរ៉ូន។ ស្កែនជីក្លានអ្នកផ្គត់ផ្គង់អ្នកវិនិយោគវិនិយោគ។ 2001; 234: 61 – 7 ។ [PubMed]
  20. ទូរទស្សន៍ហាន់សិន។ ការចម្លងហ្សែន Cholecystokinin: ធាតុផ្សព្វផ្សាយកត្តាចម្លងនិងផ្លូវបញ្ជូនសញ្ញា។ ថ្នាំ Peptides ។ 2001; 22: 1201 – 11 ។ [PubMed]
  21. ទូរទស្សន៍ហាន់សេន, រេហ្វហ្វែនជេអេហ្វ, នីលែនអេហ្វស៊ី។ KCl និង forskolin ធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវការគ្រប់គ្រងហ្សែន cholecystokinin តាមរយៈការសំរបសំរួលសកម្មភាពរបស់ CREB និងសហការី CBP ។ ជេ Neurochem ។ 2004; 89: 15 – 23 ។ [PubMed]
  22. Haun RS, Dixon JE ។ ការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនៃការចម្លងដែលចាំបាច់សម្រាប់ការបញ្ចេញមតិនៃហ្សែន cholecystokinin មានផ្ទុកលំដាប់ដូចគ្នាទៅនឹងធាតុ -296 នៃហ្សែន c-fos របស់មនុស្ស។ ជប៊ីប៊ីលចែម។ 1990; 265: 15455 – 63 ។ [PubMed]
  23. ហ៊ីរ៉ូហ៊ី N, ម៉ារ៉េកជីជេ, ប្រោនជីអរ, យូអេ, សៅឌូអេហ្វ, វ៉ាដាយ៉ាវ៉ាអេ, ឌូមែនអេស, ហ្គ្រីនប៊ែក ME, Nestler EJ ។ តួនាទីសំខាន់នៃហ្សែន fosB ក្នុងម៉ូលេគុលកោសិកានិងសកម្មភាពអាកប្បកិរិយានៃការឆក់អគ្គិសនីរ៉ាំរ៉ៃ។ J Neurosci 1998 ។ 1998; 18: 6952 – 62 ។ [PubMed]
  24. ហុកហ្វូលអិម, រីហ្វើដជេអេហ្វអេហ្វស្គីប៊លអិលអាយវេដខ, ហ្គេតស្តានអិម, ម៉ាឃិកខេ។ ភស្តុតាងសម្រាប់ការរួមរស់ជាមួយដូប៉ាមីននិងស៊ីខេខេក្នុងណឺរ៉ូនណុស។ ធម្មជាតិ។ 1980; 285: 476 – 8 ។ [PubMed]
  25. សង្ឃឹម BT, Kelz MB, Duman RS, Nestler EJ ។ លទ្ធផលនៃការព្យាបាលដោយប្រើអេឡិចត្រូលីតរ៉ាំរ៉ៃបណ្តាលឱ្យមានការបង្ហាញពីស្មុគស្មាញ AP-1 ដែលមានអាយុកាលយូរអង្វែងនៅក្នុងខួរក្បាលដែលមានសមាសធាតុនិងលក្ខណៈប្រែប្រួល។ ជែ Neurosci ។ 1994; 14: 4318 – 28 ។ [PubMed]
  26. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, DW ខ្លួនឯង, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ ។ ការបញ្ជូលនៃសមាសធាតុ AP-1 យូរអង្វែងដែលមានសមាសធាតុប្រូតេអ៊ីន Fos ដែលផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងខួរក្បាលដោយកូកាអ៊ីនរ៉ាំរ៉ៃនិងការព្យាបាលរ៉ាំរ៉ៃផ្សេងៗទៀត។ Neuron ។ 1994 13: 1235-44 ។ [PubMed]
  27. Huang KX, Walters JR ។ បទប្បញ្ញត្តិ Dopaminergic នៃសកម្មភាពចម្លងអេអេសអេចស៊ីអេចអេសអេសអេអេសអេអេសអេសអេសអេសអេសអេសអេសអេសអេសនៅក្នុងសកម្មភាពរបស់សត្វកណ្តុរ។ សសៃប្រសាទ។ 1; 1996: 75 – 757 ។ [PubMed]
  28. Impey S, McCorkle SR, Cha-Molstad H, Dwyer JM, Yochum GS, Boss JM, McWeeney S, Dunn JJ, Mandel G, Goodman RH ។ កំណត់បទប្បញ្ញត្តិរបស់ CREB៖ ការវិភាគហ្សែនទូទៅនៃតំបន់បទបញ្ញត្តិកត្តាចម្លង។ ក្រឡា។ 2004; 119: 1041 – 54 ។ [PubMed]
  29. Johannessen M, សមាជិកសភា Delghandi, Moens U. តើអ្វីទៅបើក CREB? សញ្ញាកោសិកា។ 2004; 16: 1211 – 27 ។ [PubMed]
  30. Josselyn SA, Vaccarino FJ ។ ការប្រឆាំងនឹងផលប៉ះពាល់នៃវីរុសប្រឆាំងវីរុសស៊ីស៊ីខេ (អេ) និងស៊ីខេខេ (ខ) លើការអភិវឌ្ឍសកម្មភាពដែលមានលក្ខខណ្ឌនៅក្នុងកណ្តុរ។ ប៊ីវ Pharmacol ។ 1996; 7: 505 – 512 ។ [PubMed]
  31. Josselyn SA, De Cristofaro A, Vaccarino FJ ។ ភស្តុតាងសម្រាប់ការចូលរួមរបស់អ្នកទទួលស៊ីស៊ីស៊ី (ក) ក្នុងការទទួលបានសកម្មភាពដែលផលិតដោយកូកាអ៊ីននៅក្នុងកណ្តុរ។ Res ខួរក្បាល។ 1997; 763: 93 – 102 ។ [PubMed]
  32. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr. , Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR , Nestler EJ ។ ការបញ្ចោញកត្តាចម្លងគឺ deltaFosB នៅក្នុងខួរក្បាលគ្រប់គ្រងភាពប្រែប្រួលទៅនឹងកូកាអ៊ីន។ ធម្មជាតិ។ 1999; 401: 272 – 6 ។ [PubMed]
  33. Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ ។ ការកែលំអរក្រូមីទីនគឺជាយន្តការសំខាន់មួយដែលមានមូលដ្ឋានលើផ្លាស្ទិចដែលបណ្តាលមកពីកូកាអ៊ីននៅក្នុង striatum ។ ណឺរ៉ូន។ 2005; 48: 303 – 14 ។ [PubMed]
  34. Mattson BJ, Bossert JM, Simmons DE, Nozaki N, Nagarkar D, Kreuter JD, Hope BT ។ phosphorylation CREB ដែលបង្កឡើងដោយកូកាអ៊ីននៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែរចោទប្រកាន់ពីកណ្តុរកូកាអ៊ីនដែលត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងដោយការធ្វើឱ្យសកម្មនៃ kinase ដែលទាក់ទងនឹងសញ្ញាខាងក្រៅប៉ុន្តែមិនមែនប្រូតេអ៊ីន kinase A. J Neurochem ទេ។ 2005; 95: 1481 – 94 ។ [PubMed]
  35. McClung CA, Nestler EJ ។ បទបញ្ញត្តិនៃការបញ្ចេញហ្សែននិងរង្វាន់កូកាអ៊ីនដោយ CREB និង DeltaFosB ។ Nat Neurosci ។ 2003 6: 1208-15 ។ [PubMed]
  36. McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ ។ DeltaFosB: ការផ្លាស់ប្តូរម៉ូលេគុលសម្រាប់ការសម្របសម្រួលរយៈពេលយូរនៅក្នុងខួរក្បាល។ ខួរក្បាល Res Mol Brain Res ។ 2004 132: 146-54 ។ [PubMed]
  37. Nestler EJ, Kelz MB, Chen JS ។ ΔFosBៈអ្នកសំរបសំរួលម៉ូលេគុលនៃភាពប្លាស្ទិចខាងផ្នែកចិត្តសាស្ត្រនិងអាកប្បកិរិយាយូរអង្វែង។ Res ខួរក្បាល។ 1999; 835: 10 – 17 ។ [PubMed]
  38. Nestler EJ ។ តើមានផ្លូវម៉ូលេគុលទូទៅសម្រាប់ការញៀនដែរឬទេ? Nat Neurosci ។ 2005 8: 1445-9 ។ [PubMed]
  39. Nestler EJ ។ យន្ដការចម្លងនៃការញៀន: តួនាទីរបស់ DeltaFosB ។ ភីសស Trans R Soc Lond B Biol Sci ។ 2008; 363: 3245 – 55 ។ [អត្ថបទឥតគិតថ្លៃ PMC] [PubMed]
  40. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, ម៉ាទីន BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ ។ លំនាំខុសគ្នានៃការចាប់ផ្តើមរបស់ DeltaFosB នៅក្នុងខួរក្បាលដោយការប្រើគ្រឿងញៀន។ Synapse ។ 2008 62: 358-69 ។ [អត្ថបទឥតគិតថ្លៃ PMC] [PubMed]
  41. Rando OJ, ឆាងហ៊ី។ ទស្សនៈទូទៅនៃរចនាសម្ពន្ធ័ chromatin ។ អានយូ Rev Biochem ។ 2009; 78: 245 – 71 ។ [អត្ថបទឥតគិតថ្លៃ PMC] [PubMed]
  42. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd ។ , Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ ។ Delta FosB សំរបសំរួលការពន្យាកំណើតហ្សែន c-fos តាមរយៈការបង្ហាញអំហ្វេតាមីនរ៉ាំរ៉ៃ។ ជែ Neurosci ។ 2008; 28: 7344 – 9 ។ [អត្ថបទឥតគិតថ្លៃ PMC] [PubMed]
  43. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ ។ ការវិភាគហ្សែននៅទូទាំង Genomic ដោយកូកាអ៊ីនបង្ហាញពីតួនាទីរបស់ sirtuins ។ Neuron ។ 2009 62: 335-48 ។ [អត្ថបទឥតគិតថ្លៃ PMC] [PubMed]
  44. Rotzinger S, Bush DE, Vaccarino FJ ។ ម៉ូឌុល cholecystokinin នៃមុខងារ dopamine mesolimbic: បទប្បញ្ញត្តិនៃឥរិយាបថជម្រុញ។ Pharmacol Toxicol ។ 2002; 91: 404 – 13 ។ [PubMed]
  45. Rourke IJ, ទូរទស្សន៍ Hansen, Nerlov C, Rehfeld JF, Nielsen FC ។ សហករណ៍អវិជ្ជមានរវាងអ៊ី - ប្រអប់អេជភីអេលនិងជេអេ / អេ។ អេ។ ភី។ ភី។ ឆ្លើយតបនៅក្នុងការផ្សព្វផ្សាយហ្សែន cholecystokinin ។ FEBS Lett ។ 1999; 448: 15 – 8 ។ [PubMed]
  46. Shaw-Lutchman TZ, Barrot M, Wallace T, Gilden L, Zachariou V, Impey S, Duman RS, Storm D, Nestler EJ ។ ការគូសផែនទីតាមតំបន់និងកោសិកានៃការចម្លងតាមប្រព័ន្ធ CRE ក្នុងកំឡុងពេលដកម៉ូលេគុលដែលមិនមានទឹកភ្លៀង។ ជែ Neurosci ។ 2002; 22: 3663 – 3672 ។ [PubMed]
  47. Shaw-Lutchman TZ, Impey S, Storm D, Nestler EJ ។ បទបញ្ញត្តិនៃការចម្លងអន្តរកម្ម CRE នៅក្នុងខួរក្បាលកណ្តុរដោយថ្នាំអំហ្វេតាមីន។ និយាយឡើងវិញ។ 2003; 48: 10 – 7 ។ [PubMed]
  48. Sheng M, McFadden G, Greenberg ME ។ depolarization Membrane និងកាល់ស្យូមជំរុញឱ្យមានការចម្លង C-fos តាមរយៈផូស្វ័រនៃកត្តាចម្លង CREB ។ ណឺរ៉ូន។ 1990; 4: 571 – 82 ។ [PubMed]
  49. Tsankova NM, Kumar A, Nestler EJ ។ ការកែប្រែអ៊ីស្តូននៅតំបន់ជំរុញហ្សែននៅក្នុងសត្វកណ្តុរបន្ទាប់ពីការប្រកាច់អេឡិចត្រូនិចស្រួចស្រាវនិងរ៉ាំរ៉ៃ។ ជែ Neurosci ។ 2004; 24: 5603 – 10 ។ [PubMed]
  50. Ulery PG, Nestler EJ ។ បទប្បញ្ញត្តិនៃសកម្មភាពប្រតិចារិក DeltaFosB ដោយផូស្វ័រ Ser27 ។ Eur J Neurosci ។ 2007; 25: 224 – 30 ។ [PubMed]
  51. វ៉ាតាការីណូអេជអេជ។ នុយក្លេអ៊ែររំumbកអន្តរកម្ម dopamine-CCK ក្នុងរង្វាន់ចិត្តសាស្ត្រនិងអាកប្បកិរិយាពាក់ព័ន្ធ។ Neurosci Biobehav Rev. 1992; 18: 207 – 14 ។ [PubMed]
  52. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, សមាជិកសភា Cassidy, Kelz MB, Shaw-Lutchmann T, Berton O, Sim-Selley LJ, DiLeone RJ, Kumar A, Nestler EJ ។ ΔFosBៈតួនាទីដ៏សំខាន់សម្រាប់ΔFosBនៅក្នុងនុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុងសកម្មភាពម៉ូលហ្វីន។ ធម្មជាតិណឺរ៉ូស។ 2006; 9: 205 – 11 ។ [PubMed]