Streso sukeltas lokomotorinis jautrumas amfetaminui suaugusiems, bet ne paaugliams, susijęs su padidėjusia DeltaFosB ekspresija branduolių Accumbens (2016)

Abstraktus

Klinikiniai ir ikiklinikiniai duomenys rodo, kad paauglystė yra priklausomybės išsivystymo rizikos laikotarpis, tačiau pagrindiniai nerviniai mechanizmai nėra žinomi. Stresas paauglystėje daro didžiulę įtaką narkomanijai. Tačiau mažai žinoma apie mechanizmus, susijusius su streso, paauglystės ir priklausomybės sąveika. Tyrimai nurodo ΔFosB kaip galimą šio reiškinio taikinį. Šiame tyrime paauglės ir suaugusios žiurkės (atitinkamai po gimdymo dienos 28 ir 60) buvo suvaržytos 2 h vieną kartą per dieną 7 dienas. Praėjus trims dienoms po paskutinio streso poveikio, gyvūnams buvo užfiksuotas fiziologinis tirpalas arba amfetaminas (1.0 mg / kg ip) ir užfiksuotas amfetamino sukeltas judėjimas. Iškart po elgesio testų žiurkėms buvo atlikta dekapitalizacija, o branduolio branduoliai buvo išpjaustyti, kad būtų galima išmatuoti ΔFosB baltymų kiekį. Mes nustatėme, kad pakartotinis suvaržymo stresas padidino amfetamino sukeltą lokalizaciją tiek suaugusioms, tiek paauglėms žiurkėms. Be to, suaugusiems žiurkėms streso sukeltas lokomotorinis jautrinimas buvo susijęs su padidėjusia ΔFosB ekspresija akumuliatorių branduolyje. Mūsų duomenys rodo, kad ΔFosB gali dalyvauti kai kuriuose neuronų plastiškumo pokyčiuose, susijusiuose su streso sukeltu kryžminiu jautrinimu amfetaminu suaugusioms žiurkėms.

Raktiniai žodžiai: amfetaminas, sensibilizuojantis elgesys, stresas, ΔFosB, paauglystė

Įvadas

Piktnaudžiavimas narkotikais dažnai prasideda paauglystėje, o tai yra toksoprotezinis laikotarpis, kai asmenys elgiasi rizikingai, o tai gali sukelti nesaugų sprendimą, susijusį su neigiamais padariniais, pavyzdžiui, narkotikų vartojimu (Cavazos-Rehg ir kt. ). Žiurkėms paauglystė buvo apibrėžta kaip laikotarpis nuo pogimdyminės dienos (P) 28 iki P42 (ietis ir stabdis, ). Šiuo laikotarpiu žiurkėms būdingos paaugliams būdingos neuro-elgesio savybės (Teicher ir kt., ; Laviola ir kt. ; Ietis, ).

Keli klinikiniai tyrimai rodo, kad paauglystė yra labiau pažeidžiamas priklausomybės nuo narkotikų laikotarpis (Spear, ,; Izenwasser ir prancūzų, ). Šis didesnis pažeidžiamumas dėl priklausomybės gali būti paaiškinamas skirtingais paauglių ir suaugusiųjų narkotikų vartojimo rezultatais (Collins ir Izenwasser, ). Pavyzdžiui, amfetamino ir kokaino judėjimą stimuliuojančios savybės paaugliams yra mažesnės nei suaugusiesiems (Laviola et al. ; Tirelli ir kt., ). Be to, paaugliai, palyginti su suaugusiaisiais, vartoja daugiau kokaino, greičiau įsisavina kokainą ir patys suleidžia didesnes amfetamino dozes (Shahbazi et al. ; Wong ir kt. ). Nors įrodymai rodo, kad paauglystė yra priklausomybės išsivystymo rizikos laikotarpis, nerviniai mechanizmai nėra gerai žinomi.

Tyrimai parodė, kad paauglystė yra jautrus laikotarpis, kuris gali sustiprinti polinkį į streso sukeltus fizinius ir elgesio sutrikimus (Bremne ir Vermetten, ; Heim ir Nemeroff, ; Cymerblit-Sabba ir kt., ). Tyrimai su gyvūnų modeliais parodė, kad paaugliai yra ypač pažeidžiami neigiamų streso padarinių. Pavyzdžiui, paaugliai graužikai yra jautresni streso sukeltam svorio netekimui, sumažėjusiam maisto vartojimui ir nerimui panašiam elgesiui nei jų suaugusieji (Stone ir Quartermain, ; Doremus-Fitzwater ir kt., ; Cruzas ir kt., ). Cymerblit-Sabba ir kt. () parodė, kad P28 – 54 paauglės žiurkės buvo labiau pažeidžiamos streso, nei tada, kai žiurkės buvo patiriamos streso kitais gyvenimo laikotarpiais.

Gerai žinoma, kad stresiniai gyvenimo įvykiai paauglystėje yra svarbus priklausomybės nuo narkotikų veiksnys (Laviola et al. ; Tirelli ir kt., ; Cruzas ir kt., ). Žiurkėms pasikartojantys streso epizodai gali padidinti motorinį aktyvumą reaguojant į ūmų vaistą (Covingtonas ir Miczekas, ; Marinas ir Planeta, ; Cruzas ir kt., ); šis reiškinys vadinamas elgesio kryžminimu. (Covingtonas ir Miczekas, ; Miczek ir kt., ; Yap ir Miczek, Manoma, kad tai atspindi neuronų adaptaciją mezokortikolimbinėje sistemoje, susijusią su narkomanijos vystymusi (Robinson et al., ; Robinson ir Berridge, ; Vanderschuren ir Pierce, ). Suaugusioms žiurkėms yra gerai žinoma, kad stresiniai išgyvenimai suaugus sukelia elgesio jautrinimą piktnaudžiavimo vaistais (Miczek ir kt., ; Yap ir kt., ) ir kad sustiprėjęs lokomotorinis stimuliuojantis kokaino poveikis gali išlikti kelias savaites dėl neuroadaptacijų mezokortikolimbinio dopamino kelyje (Vanderschuren ir Kalivas, ; Hope ir kt. ).

Ūmus ar pakartotinis streso sukeltas kryžminis sensibilizavimas buvo susijęs su mezokortikolimbinės sistemos plastiškumu (Miczek et al. ; Yap ir Miczek, ; Yap ir kt., ). Dėl smegenų molekulinio ir ląstelinio plastiškumo reikia keisti genų raišką (Nestler et al. ). Genų ekspresiją kontroliuoja daugybė DNR jungiančių baltymų, vadinamų transkripcijos veiksniais (Chen et al., , , ). Į šį reglamentą buvo įtraukti keli transkripcijos veiksniai, tokie kaip ΔFosB, Splice variantas fosb genas, kuris paprastai yra stabilus baltymas, kaupiantis nuolat veikiant vaistams ir patiriant stresą (McClung et al. ). Atrodo, kad ΔFosB yra labai svarbus ilgalaikio nervų sistemos, susijusios su priklausomybe, modifikacijomis (Damez-Werno ir kt., ; Pitchers ir kt. ). Iš tiesų buvo įrodyta, kad Δ-FosB tarpininkauja ilgai trunkančiame smegenų, kuriomis grindžiamas priklausomybės elgesys, adaptacijose (McClung ir kt., ). Nustatyta, kad Δ-FosB gali būti atsakingas už stuburo tankio padidėjimą ir dendritinių arborizaciją po lėtinio kokaino vartojimo (Kolb et al., ; Lee ir kt. ), Be to, atrodo, kad Δ-FosB yra vienas iš mechanizmų, atsakingų už jautrinamas reakcijas į psichostimuliatorius (McClung ir Nestler, ).

Paaugliams graužikams būdingi mezolimbinės funkcijos ir jautrumo psichostimuliaciniams vaistams ypatumai (Laviola et al. ; Tirelli ir kt., ). Pavyzdžiui, paauglių žiurkių mezolimbinėje sistemoje pastebimas per didelis dopamino receptorių ekspresija ir didesnis dopamino saugojimas sinapsėse (Tirelli et al. ). Ontogenetiniai mezolimbinės sistemos pokyčiai, dėl kurių padidėja sensibilizacija, gali sukelti skirtingą jautrumą narkomanijai. Nors suaugusiems gyvūnams būdingi molekuliniai mechanizmai, susiję su kryžminiu jautrumu tarp streso ir vaistų, paauglystėje patiriamo streso pasekmės sudėtingam vaisto poveikiui yra mažiau žinomos.

Dėl šio pasiūlymo įvertinome ΔFosB lygį suaugusių ir paauglių žiurkių akumuliatoriuose po lokomotorinio kryžminio jautrinimo tarp pakartotinio suvaržymo streso ir amfetamino.

Medžiagos ir metodai

Tematika

Patinų Wistar žiurkės, gautos iš San Paulo valstybinio universiteto UNESP gyvūnų veisimo įstaigos pogimdyminiu dieną (P) 21. 3 – 4 gyvūnų grupės buvo laikomos plastikiniuose narvuose 32 (plotis) × 40 (ilgis) × 16 (aukštis) cm kambaryje, palaikomame 23 ± 2 ° C. Žiurkės buvo laikomos 12: 12 h šviesos / tamsos cikle (lemputės dega ties 07: 00 am) ir joms buvo suteikta laisva prieiga prie maisto ir vandens. Kiekvienas gyvūnas buvo naudojamas tik per vieną eksperimentinę procedūrą. Visi eksperimentai buvo atlikti lengvosios fazės metu tarp 8: 00 am ir 5: 00 pm. Kiekvieną eksperimentinę grupę sudarė 9 – 10 žiurkės.

Eksperimento protokolą patvirtino UNESP Farmacijos mokslo mokyklos žmonių ar gyvūnų subjektų naudojimo etinis komitetas (CEP-12 / 2008), o eksperimentai buvo atlikti laikantis Brazilijos eksperimentinių gyvūnų koledžo etikos principų - ( COBEA), remiantis NIH laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo gairėmis.

Vaistas

d, l-amfetaminas (Sigma, Sent Luisas, MO, JAV), ištirpintas fiziologiniame tirpale (0.9% NaCl).

Pakartotinė streso procedūra

Gyvūnai buvo suskirstyti į dvi grupes: (1) be streso; arba (2) pakartotinis suvaržymo įtempis. Gyvūnai pakartotinio suvaržymo streso grupėje suaugusiems žiurkėms buvo sulaikomi plastikiniuose cilindruose [20.0 cm (ilgis) × 5.5 cm (vidinis skersmuo); 17.0 cm (ilgis) × 4.5 cm (vidinis skersmuo) paauglėms žiurkėms] 2 h kasdien 7 dienomis pradedant nuo 10: 00 am

Paauglių ar P28 suaugusių žiurkių P60 poveikis buvo pradėtas nuo streso. Kontrolinę (ne streso) grupę sudarė to paties amžiaus gyvūnai, nepalikti netrukdomi, išskyrus narvų valymą.

Streso sukeltas kryžminis jautrumas amfetaminui

Elgesio tyrimas buvo atliktas prekybos vietose (Columbus Instruments, Columbus, OH, JAV) aktyvumo stebėjimo kamerose, susidedančiose iš plexiglas narvų 44 (plotis) x 44 (ilgis) × 16 (aukštis). Kamerose buvo 10 poros fotoelementų pluoštų, kurie buvo naudojami horizontaliajam lokomotoriniam aktyvumui matuoti. Iš eilės dviejų spindulių pertraukimas buvo užfiksuotas kaip vienas lokomotyvo mazgas.

Praėjus trims dienoms po paskutinio streso poveikio, paauglės ar suaugusios žiurkės buvo gabenamos iš gyvūnų patalpos į eksperimentinį kambarį, kur jos buvo atskirai dedamos į aktyvumo stebėjimo kamerą ir paliktos 20 min., Kad jos galėtų priprasti. Pasibaigus šiam laikotarpiui, kontrolinės ar stresinės grupės žiurkėms buvo sušvirkštos injekcijos amfetamino (1.0 mg / kg) arba fiziologinio tirpalo (NaCl 0.9%) injekcijomis ir buvo grąžintos į aktyvumo stebėjimo kamerą dar 40 min. (N = 9 – 10 gyvūnų grupėje). Lokomotorinis aktyvumas buvo užfiksuotas per šias 40 min. Po injekcijų.

Paauglių ir suaugusių žiurkių tyrimai buvo atlikti atitinkamai su P37 ir P69.

Smegenų kolekcija

Iškart atlikę elgesio analizę, gyvūnai buvo perkelti į gretimą kambarį, nukerpami ir jų smegenys buvo greitai pašalintos (apie 60 – 90) ir užšaldytos izopentane ant sauso ledo. Atlikus šią procedūrą, smegenys buvo laikomos –80 ° C temperatūroje iki akumuliatorių išpjaustymo.

ΔFosB ekspresijos Western blotting analizė

Užšaldytos smegenys buvo nuosekliai pjaustomos 50 μm spinduliu vainikinėje plokštumoje, kol suinteresuotos smegenų sritys kriostatuose (Leica CM 1850, Nussloch, Vokietija) buvo laikomos –20 ° C temperatūroje. Audinių štampai (bukas 14 matuoklio adata suaugusiesiems ir 16 matuoklis paaugliams) buvo gauti iš branduolio akumuliatorių (pav. (3 pav2A) 2A), naudojant koordinates: maždaug nuo + 2, 1 mm iki + 1, 1 mm, esant akumuliatoriams, palyginti su Bregma (Paxinos ir Watson, ). Audiniai buvo sonikuoti 1% natrio dodecilsulfatu (SDS). Mėginių baltymų koncentracijos buvo nustatytos Lowry metodu (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, JAV). Mėginio baltymų koncentracijos buvo išlygintos praskiedžiant 1% SDS. 30 μg baltymų mėginiai buvo tiriami SDS-poliakrilamido gelio elektroforeze 3 h, esant 200 V. Baltymai elektroforetiškai buvo pernešti į polivinilideno fluoro (PVDF) membraną, kad būtų galima atlikti imunoblotišką Hybond LFP pernešimo membraną („GE Healthcare“, Little Chanford, BU, UK). 0.3 A, 3.5 h. Tada PVDF membranos buvo užblokuotos 5% neriebiu sausu pienu ir 0.1% Tween 20 Tris buferiu (T-TBS, pH 7.5) 1 h kambario temperatūroje ir po to inkubuojamos per naktį 4 ° C šviežiame blokuojančiame buferyje (sausas 2% neriebalų). pieno ir 0.1% Tween 20 Tris buferyje [T-TBS, pH 7.5]), turinčiuose pirminius antikūnus. ΔFosB lygis buvo įvertintas naudojant FosB antikūnus (1: 1000; Cat # sc-48 „Santa Cruz“ biotechnologija, Santa Krusas, Kalifornija, JAV). Po inkubacijos su pirminiais antikūnais, blotai buvo plaunami ir inkubuojami 1 h su anti-triušio antriniais antikūnais, pažymėtais Cy5 fluoroforu (anti-triušis / 1: 3000; GE Healthcare, Little Chanford, BU, UK). Fluorescencija buvo įvertinta naudojant fluorescencinį skaitytuvą TyphoonTrio® („GE Healthcare“, Little Chanford, BU, UK) ir juostos buvo kiekybiškai įvertintos naudojant tinkamą programinę įrangą (Image QuantTM TL). Laikoma, kad fiziologinio tirpalo ne streso vidurkis buvo 100%, o kitų grupių duomenys buvo išreikšti šios kontrolinės grupės procentais.

1 pav  

Kryžminis sensibilizavimas tarp streso ir amfetamino suaugusioms ir paaugliškoms žiurkėms. *p <0.05, palyginti su CONTROL-SALINE ir STRESS-SALINE; #p <0.05, palyginti su CONTROL-AMFETAMINU.
2 pav  

() Žiurkės smegenų schema, pritaikyta iš Paxinos ir Watson stereotaksinio atlaso (), parodydama perforatorių buvimo vietą branduolio akumuliatoriuose (Nac). (B) Tipinės kontrolinio fiziologinio tirpalo (CONT-SAL) ir fiziologinio tirpalo blotinimo juostos ...

Antikūnas, naudojamas FosB aptikti, taip pat jungiasi su FFosB. Tačiau mes surinkome smegenis 40 min po amfetamino iššūkio. Šis laikotarpis nėra pakankamas norint gauti reikšmingą FosB baltymo vertimą. Atsižvelgiant į tai, kad FosB (42 kDa) yra sunkesnis už jo izoformą ΔFosB (35 ~ 37 kDa) (Kovács, ; Nestler ir kt., ). Mes matavome tik baltymus, kurių molekulinės masės 37 kDa.

Vienoda baltymų koncentracija buvo patvirtinta nuėmus blotus ir pakartotinai juos tiriant monokloniniu beta-aktino antikūnu (įkrovimo kontrolė) (1: 500; Sigma-Aldrich), po to inkubuojant atitinkamą antrinį antikūną (Cy5 - anti-triušis / 1). : 3000) ir vizualizacija, kaip aprašyta aukščiau. ΔFosB baltymų juostos intensyvumas buvo padalytas iš to mėginio vidinės apkrovos kontrolės (beta-aktino) intensyvumo. Tada ΔFosB santykis su apkrovos kontrole buvo naudojamas palyginant ΔFosB gausą skirtinguose mėginiuose (4 pav.) (Figure2B2B).

Statistinė analizė

Visi duomenys išreikšti kaip vidurkis ± SEM. Atlikti lyčių dispersijos homogeniškumo testai atsižvelgiant į elgesio ir molekulinius duomenis. Levene neparodė statistiškai reikšmingų elgesio ar molekulinių duomenų skirtumų, rodančių dispersijos homogeniškumą. Taigi lokomotorinis aktyvumas, ΔFosB lygis po fiziologinio tirpalo ar amfetamino injekcijų buvo išanalizuotas naudojant 2 × 2 ANOVA [stresas (pakartotinis suvaržymas ar ne stresas) × gydymas vaistais (AMPH ar SAL)]. Kai reikšmingas (p <0.05) buvo pastebėtas pagrindinis poveikis, naudotas Newman-Keuls testas post-hoc palyginimai.

rezultatai

Streso sukeltas kryžminis jautrumas amfetaminui

Šiame eksperimente mes įvertinome, ar pakartotinis stresas gali padidinti lokomotorinę reakciją į amfetamino injekciją.

Mes nustatėme, kad suaugusių žiurkių amfetamino sukeltos judėjimo skirtumai yra laikomi tiek stresu (F(1,29) = 7.77; p <0.01) ir gydymas (F(1,29) = 57.28; p <0.001) veiksniai. Taip pat nustatyta veiksnių sąveika (F(1,29) = 4.08; p <0.05; Pav Figure1) .1). Tolesnė analizė (Newman-Keuls testas) atskleidė, kad amfetamino skyrimas padidino lokomotorinį aktyvumą tiek kontroliniams, tiek streso patyrusiems gyvūnams, palyginti su kontroliniais ir fiziologinio tirpalo sušvirkštais gyvūnais. Be to, žiurkėms, kurios ne kartą buvo patiriamos kaip santūrus stresas, nustatytas žymiai didesnis amfetamino sukeltas lokomotorinis aktyvumas, palyginti su amfetamino kontroline grupe (p <0.05, pav Figure11).

Paauglėms žiurkėms aptikome skirtumų abiejų stresų (F(1,25) = 11.58; p <0.01) ir gydymas (F(1,25) = 16.34; p <0.001) veiksniai. Tačiau sąveika tarp veiksnių nebuvo nustatyta (F(1,25) = 3.67; p = 0.067; Pav Figure1) .1). Tolesnė gydymo faktoriaus analizė (Newman-Keuls testas) parodė, kad amfetaminas padidina lokomotorinį aktyvumą streso patiriantiems, bet nekontroliuojamiems gyvūnams, palyginti su fiziologinio tirpalo injekcijomis. Be to, žiurkėms, pakartotinai veikiamoms suvaržymo stresu, buvo žymiai didesnis amfetamino sukeltas lokomotorinis aktyvumas, palyginti su amfetamino kontroline grupe. (p <0.01, pav Figure11).

Western blot analizė ΔFosB išraiška

Atlikome šį eksperimentą, norėdami įvertinti, ar elgesio kryžminis sensibilizavimas, kurį sukelia pakartotinis santūrus stresas ir amfetamino iššūkis, gali būti susijęs su ΔFosB raiškos pokyčiais žiurkių branduolio akumuliatoriuose skirtingais vystymosi laikotarpiais.

Suaugusioms žiurkėms stebėjome reikšmingus streso faktoriaus (F(1,18) = 6.46; p <0.05) ir streso bei gydymo veiksnių sąveiką (F(1,18) = 5.26; p <0.05). Tolesnė analizė (Newmano-Keulso testas) atskleidė, kad amfetaminas padidino stresą patyrusių gyvūnų ΔFosB lygį, palyginti su visomis kitomis grupėmis (p <0.05, pav Figure2C2C).

Paauglių žiurkių rezultatai nerodė jokių skirtumų tarp grupių (2 pav.) (Figure2C2C).

Diskusija

Įvertinome ΔFosB lygį suaugusių ir paauglių žiurkių akumuliatoriuose po lėtinio streso sukeltos lokomotorinės kryžminės sensibilizacijos amfetaminu. Svarbiausi eksperimentai buvo šie: a) suaugusiems ir paaugliams žiurkėms padidėjo lokomotorinis aktyvumas po to, kai buvo paveiktas amfetaminas ir kurį sukėlė pakartotinis stresas; b) pakartotinis stresas, skatinamas ΔFosB lygio padidėjimas tik suaugusių žiurkių branduolio akumuliatoriuose.

Mūsų duomenys parodė, kad tiek suaugusių, tiek paauglių žiurkių streso sukeltas kryžminis jautrumas amfetaminui. Šie duomenys sutinka su kitais tyrimais, kurie rodo, kad pakartotiniai streso išgyvenimai sukelia kryžminį jautrumą psichostimuliatoriams tiek suaugusiesiems (Díaz-Otañez et al., ; Kelz ir kt., ; Colby ir kt. ; Miczek ir kt., ; Yap ir Miczek, ) ir paaugliai graužikai (Laviola ir kt., ). Iš tiesų, mes jau įrodėme, kad paaugliai ir suaugę žiurkės, pakartotinai veikiami lėtinio susilaikymo, pastebimai padidino lokomotorinį aktyvumą po kontrolinės amfetamino dozės 3 dienų po paskutinio streso seanso, palyginti su jų atitinkamomis fiziologinio tirpalo kontrolėmis (Cruz et al. ). Nors daugelis tyrimų parodė suaugusių ir paauglių, patyrusių stresą su psichostimuliatoriais, kryžminį jautrinimą, pagrindiniai mechanizmai dar nėra žinomi.

Mes pastebėjome, kad streso sukeltas sensibilizavimas amfetaminui buvo susijęs su padidėjusia ΔFosB lygio ekspresija suaugusiųjų branduolio branduoliuose, bet ne paauglių žiurkių. Mūsų atradimas išplečia ankstesnius literatūros duomenis, rodančius, kad ΔFosB ekspresija pagerėja reaguojant į psichostimuliatorius po pakartotinio streso suaugusioms žiurkėms (Perrotti et al. ). Mūsų rezultatai gali reikšti, kad padidėjęs ΔFosB lygis gali padidinti suaugusių žiurkių jautrumą amfetaminui. Iš tiesų buvo įrodyta, kad per didelis ΔFosB ekspresija akumuliaciniame branduolyje padidina jautrumą teigiamam kokaino poveikiui (Perrotti ir kt. ; Vialou ir kt. ). Tačiau mūsų išvados reiškia tik asociaciją. Norint įvertinti ΔFosB priežastį dėl streso sukeltos lokomotorinės kryžminės sensibilizacijos amfetaminui, reikia atlikti funkcinius tyrimus.

Įrodymai rodo, kad ΔFosB yra svarbus transkripcijos veiksnys, galintis paveikti priklausomybės procesą ir tarpininkauti jautrinamai reaguojant į narkotikų ar streso poveikį („Nestler“, ). Tyrimais nustatyta, kad ilgai trunkantis ΔFosB indukcija branduolių akumuliatoriuose atsiranda reaguojant į lėtinį psichostimuliatoriaus ar įvairių formų stresą (Hope et al. ; Nestler ir kt., ; Perrotti ir kt. ; „Nestler“ ). ΔFosB svarba kuriant kompulsinį vaistų vartojimą gali būti susijusi su jo gebėjimu padidinti baltymų, dalyvaujančių atlygio ir motyvavimo sistemoje, raišką (apžvalgą žr. McClung ir kt., ). Pavyzdžiui, atrodo, kad ΔFosB padidina glutamaterginių receptorių ekspresiją akumuliatoriuose, o tai buvo koreliuojama su psichostimuliatorių naudingo poveikio padidėjimu (Vialou et al., ; Ohnishi ir kt., ).

Mūsų paauglystės duomenys patvirtina kai kuriuos tyrimus, kurie parodė, kad santūrus stresas ar amfetamino vartojimas sukėlė elgesio sensibilizaciją amfetaminui, nedarant įtakos ΔFosB raiškai branduolio akumuliatoriuose (Conversi et al. ). Tokiu pat būdu Conversi ir kt. () pastebėjo, kad nors amfetaminas sukėlė lokomotorinį sensibilizavimą pelėms C57BL / 6J ir DBA / 2J, ΔFosB padidėjo C57BL / 6J branduolių akumuliatoriuose, bet ne DBA / 2J jautrių pelių. Visi šie tyrimai rodo, kad ΔFosB kaupimasis branduolių akumuliatoriuose nėra būtinas norint nustatyti lokomotorinę sensibilizaciją. Taigi šio baltymo ekspresijos padidėjimas, kaip nustatyta kai kuriuose tyrimuose, gali būti tik koreliacinis pastebėjimas.

Mažesnis dopamino lygis sinapsėse ir sumažėjęs dopaminerginis tonusas, kuris pastebimas paaugliams graužikams, galbūt pateisina ΔFosB pokyčius branduolių akumuliatoriuose po ilgo streso poveikio paaugliškoms žiurkėms, nes įrodyta, kad dopaminerginių receptorių aktyvinimas yra svarbus padaugėjus ΔFosB kaupimosi branduolio branduolyje, pakartotinai vartojant psichostimuliatorių (Laviola ir kt., ; Tirelli ir kt., ).

Apibendrinant, pakartotinis suvaržymo stresas padidino amfetamino sukeltą lokalizaciją tiek suaugusioms, tiek paauglėms žiurkėms. Be to, stresas ir amfetaminas gali pakeisti ΔFosB transkripciją priklausomai nuo amžiaus.

Autoriaus įnašai

Eksperimentus planavo PECO, PCB, RML, FCC ir CSP, atliko PECO, PCB, RML, FCC, MTM, o rankraštį parašė FCC, PECO, PCB, RML ir CSP.

Interesų konflikto pareiškimas

Autoriai teigia, kad tyrimas buvo atliktas nesant jokių komercinių ar finansinių santykių, kurie galėtų būti laikomi galimu interesų konfliktu.

Padėka

Autoriai vertina puikią techninę pagalbą, kurią teikia „Elisabete ZP Lepera“, Francisco Rocateli ir „Rosana FP Silva“. Šį darbą rėmė San Paulo „Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Santado“ (FAPESP-2007 / 08087-7).

Nuorodos

  • „Bremne JD“, „Vermetten E.“ (2001). Stresas ir raida: elgesio ir biologinės pasekmės. Dev. Psichopatolis. 13, 473 – 489. 10.1017 / s0954579401003042 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Cavazos-Rehg PA, Krauss MJ, Spitznagel EL, Schootman M., Cottler LB, Bierut LJ (2011). Seksualinių partnerių ir asociacijų su narkotikų vartojimo pradžia ir intensyvumu skaičius. AIDS elgesys. 15, 869 – 874. 10.1007 / s10461-010-9669-0 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Chen J., Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y., Nestler EJ (1997). TED antigenai: stabilūs ΔFosB variantai, indukuojami smegenyse lėtinio gydymo būdu. J. Neurosci. 17, 4933 – 4941. [PubMed]
  • Chen J., Nye HE, Kelz MB, Hiroi N., Nakabeppu Y., Hope BT ir kt. . (1995). Delta FosB ir į FosB panašių baltymų reguliavimas atliekant elektrokonvulsinius traukulius ir gydymą kokainu. Mol. „Pharmacol“. 48, 880 – 889. [PubMed]
  • Chen J., Zhang Y., Kelz MB, Steffen C., Ang ES, Zeng L. ir kt. . (2000). Nuo ciklino priklausomos kinazės 5 indukcija hipokampyje lėtiniais elektrokonvulsiniais priepuoliais: [Delta] FosB vaidmuo. J. Neurosci. 20, 8965 – 8971. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K., Steffen C., Nestler EJ, „Self DW“ (2003). Strijaus ląstelių tipui būdingas per didelis osFosB ekspresas sustiprina kokaino paskatą. J. Neurosci. 23, 2488 – 2493. [PubMed]
  • „Collins SL“, „Izenwasser S.“ (2002). Kokainas skirtingai keičia elgesį ir neurochemiją, palyginti su suaugusiomis žiurkėmis. Dev. „Brain Res. 138, 27 – 34. 10.1016 / s0165-3806 (02) 00471-6 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Conversi D., Bonito-Oliva A., Orsini C., Colelli V., Cabib S. (2008). DeltaFosB kaupimasis ventro-medialiniame caudate yra indukcijos, o ne elgesio sensibilizacijos išraiškos pakartotinio amfetamino ir streso pagrindu. Euras. J. Neurosci. 27, 191 – 201. 10.1111 / j.1460-9568.2007.06003.x [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Conversi D., Orsini C., Colelli V., Cruciani F., Cabib S. (2011). Ryšys tarp pelių strosijos kaupimosi FosB / ΔFosB ir ilgalaikio psichomotorinio sensibilizacijos amfetaminui pelėse priklauso nuo genetinio fono. Elgesys. „Brain Res. 217, 155 – 164. 10.1016 / j.bbr.2010.10.016 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Covington HE, III, Miczek KA (2001). Pakartotinis socialinis pralaimėjimo stresas, kokainas ar morfinas. Poveikis sensibilizuojančiam elgesiui ir į veną leidžiamas kokaino savaiminis vartojimas „riša“. Psichofarmakologija (Berl) 158, 388 – 398. 10.1007 / s002130100858 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Cruz FC“, Leão RM, „Marin MT“, „Planeta CS“ (2010). Streso sukeltas amfetamino sąlygotos vietos atstatymas ir tirozino hidroksilazės pokyčiai žiurkių branduolio branduolyje. „Pharmacol“. Biochem. Elgesys. 96, 160 – 165. 10.1016 / j.pbb.2010.05.001 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Cruz FC“, „Marin MT“, „Leão RM“, „Planeta CS“ (2012). Streso sukeltas kryžminis sensibilizavimas amfetaminui yra susijęs su dopaminerginės sistemos pokyčiais. J. Neural Transm. (Viena) 119, 415 – 424. 10.1007 / s00702-011-0720-8 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Cruz FC“, „Quadros IM“, Hogenelstas K., „Planeta CS“, „Miczek KA“ (2011). Socialinis žiurkių nugalėjimo stresas: padidėjęs kokaino vartojimas ir „greitasis kamuolys“ padidina savivalę, bet ne heroiną. Psichofarmakologija (Berl) 215, 165 – 175. 10.1007 / s00213-010-2139-6 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Cymerblit-Sabba A., Zubedat S., Aga-Mizrachi S., Biady G., Nakhash B., Ganel SR ir kt. . (2015). Streso poveikio vystymosi trajektorijos žemėlapis: brendimas kaip rizikos langas. Psichoneuroendokrinologija 52, 168 – 175. 10.1016 / j.psyneuen.2014.11.012 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Damez-Werno D., LaPlant Q., Sun H., Scobie KN, Dietz DM, Walker IM ir kt. . (2012). Vaistų patirtis epigenetiniu būdu skatina Fosb geno indukciją žiurkės branduolio akumuliatoriuose. J. Neurosci. 32, 10267 – 10272. 10.1523 / jneurosci.1290-12.2012 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Díaz-Otañez CS“, „Capriles NR“, „Cancela LM“ (1997). D1 ir D2 dopamino ir opiatų receptoriai dalyvauja suvaržant streso sukeltą sensibilizaciją amfetamino psichostimuliuojančiam poveikiui. „Pharmacol“. Bochemas. Elgesys. 58, 9 – 14. 10.1016 / s0091-3057 (96) 00344-9 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Doremus-Fitzwater TL“, „Varlinskaya EI“, „Spear LP“ (2009). Paauglių ir suaugusių žiurkių socialinis ir nesocialinis nerimas po pakartotinio nusiraminimo. Fiziolis. Elgesys. 97, 484 – 494. 10.1016 / j.physbeh.2009.03.025 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Heim C., Nemeroff CB (2001). Vaikystės traumų vaidmuo nuotaikos ir nerimo sutrikimų neurobiologijoje: ikiklinikiniai ir klinikiniai tyrimai. Biol. Psichiatrija 49, 1023 – 1039. 10.1016 / s0006-3223 (01) 01157-x [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Hope BT“, „Nye HE“, „Kelz MB“, „Self DW“, „Iadarola MJ“, „Nakabeppu Y.“ ir kt. . (1994). Ilgalaikio AP-1 komplekso, sudaryto iš pakitusių į fosą panašių baltymų, indukcija smegenyse lėtiniu kokainu ir kitomis lėtinėmis procedūromis. „Neuron 13“, „1235 – 1244“. 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Hope BT, Simmons DE, Mitchell TB, Kreuter JD, Mattson BJ (2006). Kokaino sukeltas lokomotorinis aktyvumas ir Fos ekspresija branduolių akumuliatoriuose yra jautrinami 6 mėnesius po pakartotinio kokaino vartojimo ne namo narve. Euras. J. Neurosci. 24, 867 – 875. 10.1111 / j.1460-9568.2006.04969.x [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Izenwasser S., prancūzų D. (2002). Kokaino toleravimas ir jautrinimas lokomotorinius aktyvinimus sukelia medţiagas. „Pharmacol“. Biochem. Elgesys. 73, 877 – 882. 10.1016 / s0091-3057 (02) 00942-5 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Kelz MB, Chen J., Carlezon WA, Jr, Whisler K., Gilden L., Beckmann AM ir kt. . (1999). Transkripcijos faktoriaus ΔFosB ekspresija smegenyse kontroliuoja jautrumą kokainui. Gamta 401, 272 – 276. 10.1038 / 45790 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Kolbas B., Gorny G., Li Y., Samaha AN, Robinsonas TE (2003). Amfetaminas ar kokainas riboja vėlesnės patirties galimybes skatinti neokortekso ir branduolio akumuliatorių struktūrinį plastiškumą. Proc. Natl. Acad. Mokslas. JAV 100, 10523 – 10528. „10.1073“ / „pnas.1834271100“ [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Kovács KJ (1998). „c-Fos“ kaip transkripcijos veiksnys: įtemptas (pakartotinis) vaizdas iš funkcinio žemėlapio. Neurochem. Vid. 33, 287 – 297. 10.1016 / s0197-0186 (98) 00023-0 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Laviola G., Adriani W., Morley-Fletcher S., Terranova ML (2002). Savitas paauglių pelių atsakas į ūminį ir lėtinį stresą ir amfetaminą: lyčių skirtumų įrodymai. Elgesys. „Brain Res. 130, 117 – 125. 10.1016 / S0166-4328 (01) 00420-X [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Laviola G., Adriani W., Terranova ML, Gerra G. (1999). Psichobiologiniai pažeidžiamumo psichostimuliatoriams rizikos veiksniai paaugliams ir gyvūnų modeliai. Neurosci. Biobehavas. 23, 993 – 1010 red. 10.1016 / s0149-7634 (99) 00032-9 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Laviola G., Macrì S., Morley-Fletcher S., Adriani W. (2003). Rizikingas paauglių pelių elgesys: psichobiologiniai veiksniai ir ankstyva epigenetinė įtaka. Neurosci. Biobehavas. 27, 19 – 31 red. 10.1016 / S0149-7634 (03) 00006-X [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Lee KW, Kim Y., Kim AM, Helmin K., Nairn AC, Greengard P. (2006). Kokaino sukeltas dendritinis stuburo susidarymas D1 ir D2 dopamino receptorių turinčiuose vidutinio smaigalio neuronuose, esančiuose branduolių akumuliatoriuose. Proc. Natl. Acad. Mokslas. JAV 103, 3399 – 3404. „10.1073“ / „pnas.0511244103“ [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Marin MT“, „Planeta CS“ (2004). Motinos atskyrimas turi įtakos kokaino sukeltam lokomitacijai ir reakcijai į naujovę paaugliams, bet ne suaugusioms žiurkėms. „Brain Res. 1013, 83 – 90. 10.1016 / j.brainres.2004.04.003 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „McClung CA“, „Nestler EJ“ (2003). Genų ekspresijos ir kokaino atlygio reguliavimas CREB ir ΔFosB. Nat. Neurosci. 6, 1208 – 1215. 10.1038 / nn1143 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „McClung CA“, „Ulery PG“, „Perrotti LI“, Zachariou V., Bertonas O., „Nestler EJ“ (2004). ΔFosB: molekulinis jungiklis ilgalaikiam prisitaikymui smegenyse. „Brain Res. Mol. „Brain Res. 132, 146 – 154. 10.1016 / j.molbrainres.2004.05.014 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Miczek KA, Yap JJ, Covington HE, III (2008). Socialinis stresas, terapija ir piktnaudžiavimas narkotikais: ikiklinikiniai padidėjusio ir sumažėjusio vartojimo modeliai. „Pharmacol“. Tem. 120, 102 – 128. 10.1016 / j.pharmthera.2008.07.006 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Nestler EJ“ (2008). Transkripciniai priklausomybės mechanizmai: ΔFosB vaidmuo. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Mokslas. 363, 3245 – 3255. 10.1098 / rstb.2008.0067 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Nestler EJ“ (2015). ΔFosB: transkripcinis streso ir antidepresantų reakcijų reguliatorius. Euras. J. Pharmacol. 753, 66 – 72. 10.1016 / j.ejphar.2014.10.034 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Nestler EJ“, Barrot M., „Self DW“ (2001). „DeltaFosB“: nuolatinis molekulinis jungiklis priklausomybei gydyti. Proc. Natl. Acad. Mokslas. JAV 98, 11042 – 11046. „10.1073“ / „pnas.191352698“ [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Nestler“ EJ, Kelzo MB, Chen J. (1999). „DeltaFosB“: ilgalaikio nervų ir elgesio plastiškumo tarpininkas. „Brain Res. 835, 10 – 17. 10.1016 / s0006-8993 (98) 01191-3 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Ohnishi YN, Ohnishi YH, Hokama M., Nomaru H., Yamazaki K., Tominaga Y. ir kt. . (2011). „FosB“ yra būtinas norint pagerinti atsparumą stresui ir slopina lokomotorinį sensibilizavimą ΔFosB. Biol. Psichiatrija 70, 487 – 495. 10.1016 / j.biopsych.2011.04.021 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Paxinos G., Watson C. (2006). Žiurkės priekinės smegenys stereotaksinėse koordinatėse. 5th Edn. San Diegas, Kalifornija: akademinė spauda.
  • Perrotti LI, Hadeishi Y., Ulery PG, Barrot M., Monteggia L., Duman RS ir kt. . (2004). ΔFosB indukcija su atlygiu susijusiose smegenų struktūrose po lėtinio streso. J. Neurosci. 24, 10594 – 10602. 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Kankorėžiai KK, Vialou V., Nestler EJ, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM (2013). Apdovanojimai už gamtą ir vaistus veikia bendruosius nervų plastiškumo mechanizmus, o pagrindinis tarpininkas yra ΔFosB. J. Neurosci. 33, 3434 – 3442. 10.1523 / JNEUROSCI.4881-12.2013 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Robinson TE“, „Angus AL“, „Becker JB“ (1985). Jautrumas stresui: ilgalaikis ankstesnio streso poveikis amfetamino sukeltai sukimosi elgsenai. Gyvenimo mokslas. 37, 1039 – 1042. 10.1016 / 0024-3205 (85) 90594-6 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Robinsonas TE, Berridge KC (2008). Stimuliuojanti priklausomybės teorija: kelios aktualijos. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Mokslas. 363, 3137 – 3146. 10.1098 / rstb.2008.0093 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Shahbazi M., Moffett AM, Williams BF, Frantz KJ (2008). Amfetamino savaiminis vartojimas žiurkėms nuo amžiaus ir lyties. Psichofarmakologija (Berl) 196, 71 – 81. 10.1007 / s00213-007-0933-6 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Spear LP (2000a). Modeliuojamas paauglių vystymasis ir alkoholio vartojimas gyvūnams. Alkoholis. Res. Sveikata. 24, 115 – 123. [PubMed]
  • Spear LP (2000b). Paauglio smegenys ir su amžiumi susijusios elgesio apraiškos. Neurosci. Biobehavas. 24, 417 – 463 red. 10.1016 / s0149-7634 (00) 00014-2 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Spear LP, Brake SC (1983). Periodolescencija: žiurkių elgesys ir psichofarmakologinis atsakas. Dev. Psichobiolis. 16, 83 – 109. 10.1002 / dev.420160203 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Akmuo EA, „Quartermain D.“ (1997). Didesnis streso poveikis nesubrendusiems, palyginti su subrendusiomis pelių patinėlėmis. Fiziolis. Elgesys. 63, 143 – 145. 10.1016 / s0031-9384 (97) 00366-1 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Teicher MH, Andersen SL, Hostetter JC, Jr (1995). Duomenų apie dopamino receptorių genėjimą tarp paauglystės ir pilnametystės striatumoje, bet ne branduolių kaupime. „Brain Res. Dev. „Brain Res. 89, 167 – 172. 10.1016 / 0165-3806 (95) 00109-q [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Tirelli E., Laviola G., Adriani W. (2003). Laboratorinių graužikų elgesio sensibilizacijos ontogenezė ir sąlygotos vietos pirmenybė, kurią sukelia psichostimuliatoriai. Neurosci. Biobehavas. 27, 163 – 178 red. 10.1016 / s0149-7634 (03) 00018-6 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Vanderschuren LJ“, „Kalivas PW“ (2000). Dopaminerginio ir glutamaterginio perdavimo pokyčiai sukeliant ir išreiškiant elgesio sensibilizaciją: kritinė ikiklinikinių tyrimų apžvalga. Psichofarmakologija (Berl) 151, 99 – 120. 10.1007 / s002130000493 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Vanderschuren LJ“, „Pierce RC“ (2010). Sensibilizacijos procesai priklausomybėje nuo narkotikų. Curr. Viršuje. Elgesys. Neurosci. 3, 179 – 195. 10.1007 / 7854_2009_21 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Vialou V., Maze I., Renthal W., LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E. ir kt. . (2010). Serumo reakcijos faktorius skatina atsparumą lėtiniam socialiniam stresui, sukeldamas ΔFosB. J. Neurosci. 30, 14585 – 14592. 10.1523 / JNEUROSCI.2496-10.2010 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Wong WC“, „Ford KA“, „Pagels NE“, „McCutcheon JE“, Marinelli M. (2013). Paaugliai yra labiau pažeidžiami priklausomybės nuo kokaino: elgesio ir elektrofiziologiniai įrodymai. J. Neurosci. 33, 4913 – 4922. 10.1523 / JNEUROSCI.1371-12.2013 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Yap JJ, Chartoff EH, Holly EN, Potter DN, Carlezon WA, Jr., Miczek KA (2015). Socialinis pralaimėjimo sukeliamas sensibilizavimas dėl streso ir padidėjęs kokaino vartojimas: ERK signalizacijos vaidmuo žiurkės ventralinėje pagrindinėje srityje. Psichofarmakologija (Berl) 232, 1555 – 1569. 10.1007 / s00213-014-3796-7 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Yap JJ, Miczek KA (2008). Streso ir graužikų priklausomybės nuo narkotikų modeliai: VTA-akumuliatorių-PFC-amigdalos grandinės vaidmuo. Narkotikų discovas. Šiandien Dis. 5, 259 – 270 modeliai. 10.1016 / j.ddmod.2009.03.010 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]