Amfetaminas keičia elgseną ir mezokortikolimbinį dopamino receptorių ekspresiją monogaminėje moteriškoje prerijų vole (2011)

Brain Res. Autoriaus rankraštis; galima PMC 25 m. liepos 2011 d.

Paskelbta galutine redaguota forma:

PMCID: PMC3143067

NIHMSID: NIHMS312646

Galutinę leidėjo redaguotą šio straipsnio versiją galite rasti tinklalapyje Smegenų raiška

Žr. Kitus PMC straipsnius citata paskelbtas straipsnis.

Eiti į:

Abstraktus

Neseniai įkūrėme socialiai monogamišką prerijų pelėną (Microtus ochrogaster) kaip gyvūnų modelį, kurio pagalba galima ištirti mezokortikolimbinio dopamino (DA) dalyvavimą amfetamino (AMPH) sukeltame socialinio elgesio sutrikime. Kadangi didžioji mūsų darbo dalis iki šiol buvo skirta patinams, o apie lyčių skirtumus dažniausiai pranešama elgsenos ir neurobiologinėse reakcijose į AMPH, dabartinis tyrimas buvo skirtas tirti prerijų pelėnų patelių elgesio ir neurobiologinį AMPH gydymo poveikį. Naudojome sąlyginės vietos pirmenybės (CPP) paradigmą, kad nustatytų AMPH poveikio elgsenai dozės ir atsako kreivę prerijų pelėnų patelėse, ir nustatėme, kad kondicionavimas nuo mažo iki vidutinio (0.2 ir 1.0 mg/kg), bet ne labai žemo ( 0.1 mg/kg), AMPH dozės sukėlė CPP. Mes taip pat nustatėme, kad elgsenai svarbios AMPH dozės (1.0, 1.0 mg/kg) poveikis padidino DA koncentraciją branduolyje accumbens (NAcc) ir caudate putamen, bet ne medialinėje prefrontalinėje žievėje ar ventralinėje tegmentinėje srityje (VTA). Galiausiai, pakartotinis AMPH poveikis (3 mg/kg vieną kartą per dieną 1 dienas iš eilės; injekcijos paradigma, kuri neseniai įrodyta, kad keičia DA receptorių ekspresiją ir pablogina socialinius ryšius prerijų pelėnų patinuose) padidino D2, bet ne D2, receptorių mRNR. NAcc, ir sumažėjęs D2 receptorių mRNR ir DXNUMX tipo receptorių prisijungimas VTA. Kartu šie duomenys rodo, kad AMPH keičia mezokortikolimbinę DA neurotransmisiją regionui ir receptoriui būdingu būdu, o tai savo ruožtu gali turėti didelių pasekmių socialiniam prerijų pelėnų elgesiui.

Raktiniai žodžiai: Psichostimuliatorius, Nucleus accumbens, Ventralinė tegmentinė sritis, Autoreceptorius, Porų sujungimas, Kondicionuotos vietos pasirinkimas

1. Įvadas

Manoma, kad piktnaudžiavimas narkotikais stipriai kontroliuoja elgesį, iš dalies dėl jų poveikio mezokortikolimbinei dopamino (DA) sistemai.Kelley ir Berridge, 2002; Nesse ir Berridge, 1997; „Nestler“, „2004“, 2005; Panksepp ir kt., 2002), nervų grandinė, kurią sudaro DA gaminančios ląstelės, kilusios iš ventralinės tegmentinės srities (VTA) ir išsikišusios į įvairius priekinės smegenų regionus, įskaitant medialinę prefrontalinę žievę (PFC) ir nucleus accumbens (NAcc). Ši labai konservuota nervų grandinė, kuri vaidina svarbų vaidmenį kuriant adaptyvų, į tikslą nukreiptą elgesį (Zahm, 2000) – įskaitant elgesį, būdingą visiems gyvūnams (pvz., šėrimąNarayanan ir kt., 2010 m; Palmiter, 2007)) ir tie, kurie yra specifiniai rūšiai (pvz., porų ryšys monogaminėse rūšyse (Aragona ir Wang, 2009; Curtis ir kt., 2006; Young et al., 2010)) – smarkiai pakinta dėl piktnaudžiavimo narkotikais. Pavyzdžiui, ūmus ir (arba) pakartotinis piktnaudžiavimo psichostimuliuojančiais vaistais, tokiais kaip kokainas ar amfetaminas (AMPH), poveikis keičia DA išsiskyrimą, DA receptorių ekspresiją ir jautrumą bei neuronų morfologiją mezokortikolimbinėse smegenų srityse.Henry ir kt., 1989; Henry ir White, 1995; Hu ir kt., 2002; „Nestler“, „2005“; Pierce ir Kalivas, 1997; Robinson ir kt., 2001, 1988; Robinson ir Kolb, 1997; Baltas ir Kalivas, 1998). Manoma, kad šios neuroadaptacijos gali sukelti vaistų sukeltus gyvūnų elgesio pokyčius (Robinson ir Becker, 1986), įskaitant socialinį elgesį (žr.Young et al., 2011)).

Neseniai atliktas mūsų laboratorijos darbas nustatė, kad prerijų pelėnas yra gyvūnų modelis, skirtas tirti mezokortikolimbinio DA poveikį piktnaudžiavimo narkotikais poveikiu socialiniam elgesiui.Liu ir kt., 2010). Prerijų pelėnai yra socialiai monogamiški graužikai, kurie po ilgesnio bendro gyvenimo ir (arba) poravimosi teikia pirmenybę pažįstamam partneriui (ty partnerio pirmenybė).Insel ir kt., 1995; Williams ir kt., 1992; Winslow ir kt., 1993), o mezokortikolimbinė DA – ypač DA neurotransmisija NAcc – yra būtina šiam procesui (Aragona ir kt., 2003, 2006; Aragona ir Wang, 2009; Curtis ir kt., 2006; Gingrich ir kt., 2000; Liu ir Wang, 2003; Wang et al., 1999; Young et al., 2010). Įdomu tai, kad AMPH poveikis labai pakeičia mezokortikolimbinį DA aktyvumą ir neurotransmisiją prerijų pelėnų patinuose. Pavyzdžiui, viena AMPH injekcija žymiai padidino tarpląstelinį DA lygį NAcc (Curtis ir Wang, 2007). Be to, trijų dienų AMPH ekspozicija, kuri paskatino sąlyginės vietos pasirinkimo (CPP) susidarymą, kai buvo suporuotas su aplinkos kontekstu, pakeitė DA receptorių ekspresiją NAcc specifiniu receptorių būdu (Liu ir kt., 2010). Svarbu tai, kad tas pats gydymas vaistais slopino poravimosi sukeltų partnerių pageidavimų formavimąsi, o tai rodo, kad AMPH sukelti mezokortikolimbinės DA neurotransmisijos pokyčiai gali būti šios rūšies AMPH sukelto porų ryšio pažeidimo pagrindas.Liu ir kt., 2010).

Nors aukščiau aprašyti tyrimai parodė, kad prerijų pelėnas yra puikus modelis, leidžiantis ištirti AMPH sukeltą socialinio ryšio sutrikimą ir jo pagrindinius nervinius mechanizmus, jie buvo atlikti tik vyrams. Todėl labai mažai žinome apie AMPH elgesį ir neurobiologinį poveikį prerijų pelėnų patelėms. Yra įrodymų, kad prerinių pelėnų patelės yra jautresnės AMPH nei patinai (Aragona ir kt., 2007), o tyrimai su kitomis rūšimis dažniausiai praneša apie lyties skirtumus, susijusius su AMPH ir kitų psichostimuliuojančių vaistų elgesio ir neurobiologiniu poveikiu.Becker ir Hu, 2008; Fattore ir kt., 2008; Lynchas, 2006 m). Pavyzdžiui, žiurkių patelėms būdingas didesnis lokomotorinis aktyvumas ir greitesnis elgsenos jautrinimas, reaguodamos į AMPH („Camp and Robinson“, 1988 m), greičiau įsigykite kokaino ir metamfetamino (Hu ir kt., 2004; Lynchas, 2006 m; Lynch ir Carroll, 1999; Roth ir Carroll, 2004 m) ir parodyti didesnę motyvaciją įsigyti psichostimuliatorių (Roberts ir kt., 1989; Roth ir Carroll, 2004 m) nei vyrai. Be to, buvo pastebėti lyčių skirtumai tarp neurobiologinio atsako į psichostimuliatorius, įskaitant AMPH sukelto DA išsiskyrimo skirtumus.Becker, 1990; Becker ir Ramirez, 1981), DA metabolizmas („Camp and Robinson“, 1988 m) ir greita ankstyva genų ekspresija (Castner ir Becker, 1996 m). Todėl labai svarbu ištirti AMPH neurobiologinį poveikį prerijų pelėnų patelėms, norint visiškai sukurti prerijų pelėnų modelį tyrimams, nagrinėjantiems ryšį tarp piktnaudžiavimo narkotikais, socialinio elgesio ir mezokortikolimbinio DA.

Dabartinis tyrimas buvo skirtas ištirti AMPH poveikio elgsenai ir neurobiologiniam poveikiui prerijų pelėnų patelėse. Mes naudojome CPP paradigmą, anksčiau sukurtą prerijų pelėnų patinams (Liu ir kt., 2010) ištirti įvairių AMPH dozių moterų elgsenos svarbą. Kadangi moterys yra linkusios rodyti didesnį jautrumą AMPH nei vyrai (Aragona ir kt., 2007; Becker ir kt., 2001; „Camp and Robinson“, 1988 m), iškėlėme hipotezę, kad prerijų pelėnų patelės sudarys CPP vartodamos mažesnes AMPH dozes, nei nurodyta patinams. Taip pat ištyrėme AMPH ekspozicijos poveikį DA koncentracijai ir DA receptorių genų ekspresijai bei surišimui įvairiuose mezokortikolimbiniuose smegenų regionuose. Iškėlėme hipotezę, kad AMPH ekspozicija pakeis DA koncentraciją ir DA receptorių ekspresiją specifiniu receptorių ir regiono būdu. Dabartinio tyrimo rezultatai suteiks naudingos įžvalgos būsimam darbui, kuriame nagrinėjamas AMPH poveikis šios rūšies patelių socialiniam elgesiui.

2. Rezultatai

2.1. 1 eksperimentas: AMPH kondicionavimo sukeltas CPP

1 eksperimentu buvo nustatyta AMPH sukelto CPP dozės ir atsako kreivė prerijų pelėnų patelėse. Norėdami galiausiai palyginti patelių ir patinų dozės ir atsako kreivę, panaudojome kondicionavimo paradigmą, identišką neseniai sukurtai prerijų pelėnų patinams (Liu ir kt., 2010). Tiriamieji buvo atsitiktinai suskirstyti į vieną iš keturių eksperimentinių grupių, kurios buvo atskirtos pagal AMPH koncentraciją [0.0 (n=20), 0.1 (n=8), 0.2 (n=12) arba 1.0 mg/kg (n=13)] jie gavo per AMPH kondicionavimo seansus (išsamiau žr. Eksperimentines procedūras). Visiems tiriamiesiems kitą dieną po paskutinės kondicionavimo sesijos buvo patikrintas, ar nėra CPP be vaistų. CPP buvo apibrėžiamas pagal reikšmingą laiką, praleistą su narkotikais sujungtame narve po bandymo, palyginti su prieš bandymą.

Tiriamieji, gydyti vien fiziologiniu tirpalu [0.0 mg/kg; t(19)= 1.65; p<0.12] arba fiziologinį tirpalą, kuriame yra mažiausia [0.1 mg/kg; t(7)= 1.89; p<0.90] AMPH koncentracija praleido statistiškai vienodą laiko tarpą vaistų suporuotoje kameroje prieš ir po kondicionavimo, todėl nesudarė CPP (1A). Vietoje to tiriamieji, gydyti 0.2 [t(11)= 2.77; p<0.02] arba 1.0 mg/kg [t(12)= 2.53; p<0.03] AMPH parodė tvirtą CPP, nes po bandymo jie praleido žymiai daugiau laiko vaistų poroje kameroje nei prieš bandymą (1A). Lokomotorinio aktyvumo skirtumų grupėse arba tarp grupių nepastebėta nei prieš gydymą, nei po gydymo.1B).

Pav 1 

Amfetamino (AMPH) sukeltas sąlyginis vietos pasirinkimas (CPP) ir lokomotorinis aktyvumas prerijų pelėnų patelėse. Patelės, gavusios 0.0 (tik fiziologinį tirpalą) arba 0.1 mg/kg AMPH per 3 kondicionavimo dienas, nesusidarė CPP, nes praleido vienodą laiką ...

2.2. 2 eksperimentas: gydymas AMPH pakeitė mezokortikolimbinę DA koncentraciją

2 eksperimentu buvo tiriamas vieno gydymo AMPH poveikis DA koncentracijai tam tikrose smegenų srityse, įskaitant PFC, NAcc, caudate putamen (CP) ir VTA.2A). Tiriamieji atsitiktine tvarka buvo suskirstyti į vieną iš dviejų eksperimentinių grupių, kurioms buvo sušvirkšta viena 0.9% fiziologinio tirpalo ip injekcija.n=6) arba 1.0 mg/kg AMPH, ištirpinto fiziologiniame tirpale (n=6). Ši dozė buvo pasirinkta, nes jos pakako CPP sukelti prerijų pelėnų patelėms (1 eksperimentas) ir patinams.Aragona ir kt., 2007; Liu ir kt., 2010), nurodant jo elgsenos svarbą abiem lytims. Visi tiriamieji buvo paaukoti praėjus 30 minučių po injekcijos, o DA koncentracija jų smegenų audinyje buvo išmatuota naudojant didelio efektyvumo skysčių chromatografiją su elektrocheminiu aptikimu (HPLC-ECD).

Pav 2 

Vienos AMPH injekcijos (1 mg / kg) poveikis DA koncentracijai mezokortikolimbiniuose smegenų regionuose. Medialinės prefrontalinės žievės (PFC), nucleus accumbens (NAcc), uodeginio putameno (CP) ir ventralinio audinio perforavimo vietų schema. ...

Vienas gydymas AMPH pakeitė DA koncentraciją regionui būdingu būdu mezokortikolimbinėje DA sistemoje (2B). Tiriamiesiems, gydytiems AMPH, NAcc buvo žymiai didesnė DA koncentracija [t(10) = 2.06; p<0.03] ir CP [t(10)= 2.07, p<0.03] nei kontrolinės grupės, kurioms buvo sušvirkštas fiziologinis tirpalas. Tačiau PFC nebuvo nustatyta jokių grupių skirtumų [t(10)= 0.03; p<0.49] arba VTA [t(10)= 1.41; p<0.09].

2.3. 3 ir 4 eksperimentai: pakartotinis AMPH poveikis keičia DA receptoriaus mRNR ekspresiją ir surišimą

3 ir 4 eksperimentuose buvo tiriamas pakartotinio gydymo AMPH poveikis atitinkamai D1 receptorių ir D2 receptorių mRNR ekspresijai bei D1 ir D2 tipo receptorių surišimui. Ankstesni eksperimentai su prerijų pelėnų patinais parodė, kad pakartotinis AMPH poveikis (1.0 mg/kg kartą per dieną 3 dienas iš eilės) reikšmingai keičia DA receptorių ekspresiją NAcc praėjus 24 valandoms po paskutinės injekcijos ir kad šis pokytis gali būti AMPH sukelto pažeidimo pagrindas. socialinis ryšys (Liu ir kt., 2010). Todėl mes panaudojome šią narkotikų injekcijos paradigmą, norėdami ištirti pakartotinio AMPH poveikio neurobiologinį poveikį moterims. Tiriamieji buvo atsitiktinai suskirstyti į vieną iš dviejų grupių, kurioms buvo sušvirkšta ip fiziologinio tirpalo (kontrolė, n=6) arba fiziologinį tirpalą, kuriame yra 1.0 mg/kg AMPH (n=8), vieną kartą per dieną tris dienas iš eilės. Visi tiriamieji buvo paaukoti praėjus 24 valandoms po paskutinės injekcijos. D1 receptorių mRNR ir D1 tipo receptorių surišimo tankiai buvo matuojami NAcc ir CP, o D2 receptorių mRNR ir D2 tipo receptorių surišimas buvo matuojamas NAcc, CP ir VTA. D1R mRNR ir D1 tipo receptorių surišimas VTA nebuvo išmatuotas, nes šiame smegenų regione jų nėra (Weiner ir kt., 1991 m).

Pakartotinė AMPH ekspozicija pakeitė DA receptoriaus mRNR ekspresiją receptoriaus ir regiono specifiniu būdu. Tiriamiesiems, kurie buvo gydomi pakartotinai AMPH, buvo žymiai didesnis D1 receptorių mRNR žymėjimo lygis NAcc [t(12)= 2.85; p < 0.01], bet ne CP [t(12)= 1.96; p < 0.07], nei su fiziologiniu tirpalu švirkščiamų kontrolinių (Fig. 3A ir B). D2 receptorių mRNR žymėjimo grupių skirtumų nebuvo nustatyta nei NAcc [t(12)= 1.56; p < 0.14] arba CP [t(12)= 1.79; p <0.10] (Fig. 3C ir D). Tačiau pakartotinis gydymas AMPH reikšmingai sumažino D2 receptorių mRNR lygį VTA.t(12)= 3.11; p <0.01] (Fig. 3E ir F).

Pav 3 

Pakartotinio AMPH vartojimo (1 mg/kg per dieną 3 dienas iš eilės) poveikis dopamino receptorių mRNR ženklinimui prerijų pelėnų patelėse. Pakartotinis gydymas AMPH padidino D1 receptorių (D1R) mRNR ženklinimą branduolyje accumbens (NAcc), bet ne ...

Pakartotinis AMPH poveikis neturėjo jokio poveikio į D1 panašiems receptoriams (Fig. 4A ir B) arba D2 tipo receptorius (Fig. 4C ir D) surišimo lygiai NAcc [panašus į D1: t(12)= 0.40; p < 0.35, panašus į D2: t(12)= 0.77; p<0.23] arba CP [panašus į D1: t(12)= 0.63; p<0.27, panašus į D2: t(12)= 0.91; p<0.19]. Tačiau AMPH gydytiems tiriamiesiems VTA buvo žymiai mažesnis D2 tipo receptorių prisijungimo lygis nei kontrolinių asmenų, kuriems buvo švirkščiamas fiziologinis tirpalas.t(12)= 1.91; p<0.04] (Fig. 4E ir F).

Pav 4 

Pakartotinio AMPH vartojimo (1 mg/kg per dieną 3 dienas iš eilės) poveikis dopamino receptorių surišimo lygiui prerijų pelėnų patelėse. Pakartotinis gydymas AMPH nepakeitė D1 tipo (A ir B) ar D2 tipo receptorių prisijungimo lygio (C ir D) ...

3. Diskusija

Šiame tyrime buvo tiriamas AMPH poveikio elgesiui ir neurobiologiniam poveikiui prerijų pelėnų patelėms. Apskritai, mūsų duomenys rodo, kad AMPH turi nuo dozės priklausomą poveikį elgesiui, padidina DA koncentraciją NAcc ir CP ir keičia DA receptoriaus geno ekspresiją ir jungimąsi specifiniu receptorių ir regiono būdu. Šie duomenys galiausiai gali suteikti naudingos įžvalgos būsimiems tyrimams, tirintiems AMPH poveikį šios rūšies patelių socialiniam elgesiui.

CPP atspindi pirmenybę aplinkos kontekstui, kuris buvo suporuotas su pirminiu stiprintuvu (Bardo ir Bevins, 2000) – šiuo atveju AMPH – ir dažnai naudojamas kaip elgsenai svarbus, nors ir netiesioginis, atlygio nuo narkotikų matas. Mūsų rezultatai rodo, kad prerijų pelėnų patelės sudaro CPP po gydymo mažomis ar vidutinėmis AMPH dozėmis. Palyginus su mūsų naujausiais rezultatais prerijų pelėnų patinuose, kurie buvo pasiekti naudojant tą pačią CPP paradigmą (Liu ir kt., 2010), šie duomenys kartu rodo prerijų pelėnų patelių CPP dozės ir atsako kreivės poslinkį į kairę. Tiksliau, 0.2 mg/kg ar didesnės AMPH dozės sukėlė CPP patelėms, o 1.0 mg/kg ar didesnės AMPH dozės buvo reikalingos CPP sukelti vyrams.Liu ir kt., 2010). Šis patelių dozės ir atsako kreivės poslinkis į kairę atitinka ankstesnį tyrimą su prerijų pelėnais, kuriuose buvo naudojama kitokia kondicionavimo paradigma (Aragona ir kt., 2007), ir rodo, kad patelės yra jautresnės AMPH elgesio poveikiui ir galbūt labiau pažeidžiamos maloniam AMPH poveikiui nei patinai – šis atradimas nuolat buvo įrodytas kitose rūšyse.„Camp and Robinson“, 1988 m; Hu ir kt., 2004; Lynchas, 2006 m; Lynch ir Carroll, 1999; Roberts ir kt., 1989; Roth ir Carroll, 2004 m) ir tai gali turėti svarbių pasekmių AMPH poveikiui prerijų pelėnų patelių socialiniam elgesiui.

Šiame tyrime taip pat nustatėme, kad AMPH vartojimas – elgsenai svarbia doze (1.0 mg/kg) prerijų pelėnų patelėms – padidino DA koncentraciją NAcc ir CP, bet ne PFC ar VTA. Šie rezultatai rodo regionui būdingą AMPH sukeltą DA koncentracijos padidėjimą. Ankstesni tyrimai su daugeliu rūšių parodė tarpląstelinio DA išsiskyrimo indukciją NAcc ir CP netrukus po AMPH injekcijos.Cho ir kt., 1999; Clausingas ir Bowyeris, 1999 m; Curtis ir Wang, 2007; Di Chiara ir kt., 1993; Drevets ir kt., 2001), padidėjusi DA koncentracija šiuose regionuose šiame tyrime gali būti dėl AMPH sukelto DA išsiskyrimo padidėjimo. Tačiau, kadangi DA koncentracijai įtakos turi ir DA sintezė ir metabolizmas, šią spėlionę reikia išbandyti tolesniuose eksperimentuose. Be to, pastebėta pastebima tendencija mažėti DA koncentracija VTA po AMPH poveikio prerijų pelėnų patelėms. Nors šis poveikis nebuvo reikšmingas (p < 0.09, XNUMX), reikia atlikti tolesnius eksperimentus, kad būtų galima atmesti arba atmesti AMPH poveikį DA koncentracijai šiame smegenų regione.

Norėdami geriau suprasti AMPH poveikio neurobiologines pasekmes prerijų pelėnų patelėms, ištyrėme pakartotinio gydymo AMPH poveikį DA receptorių mRNR ekspresijai ir surišimui įvairiuose smegenų regionuose. Mes naudojome AMPH dozės ir injekcijos paradigmą, kuri neseniai buvo įrodyta, kad keičia DA receptorių ekspresiją ir pablogina socialinį elgesį prerijų pelėnų patinuose.Liu ir kt., 2010). Mūsų duomenys rodo, kad pakartotinis AMPH poveikis žymiai padidino D1 receptorių mRNR lygį NAcc. Panašus, bet nereikšmingas (p < 0.07, 1), poveikis buvo pastebėtas CP, o tai rodo, kad AMPH taip pat gali turėti įtakos D1R mRNR ekspresijai šiame regione. Nepaisant šių genų ekspresijos pokyčių, AMPH ekspozicija nepakeitė D1 tipo receptorių prisijungimo lygio NAcc ar CP. Yra dviejų tipų D1 tipo receptoriai – D5 receptoriai ir D1 receptoriai – abu galėjo būti pažymėti D5 tipo ligandu, naudojamu mūsų receptorių surišimo eksperimente. Tačiau, kadangi DXNUMX receptorių NAcc ir CP praktiškai nėra (Missale ir kt., 1998; Tiberi ir kt., 1991 m), mūsų duomenys rodo, kad D1 receptorių baltymų lygis nepasikeitė. Panašiai ankstesni pranešimai apie kitas graužikų rūšis parodė, kad pakartotinis AMPH ar kitų psichostimuliatorių poveikis patikimai nekeičia D1 receptorių afiniteto ar tankio šiuose smegenų regionuose (žr.Pierce ir Kalivas, 1997; Baltas ir Kalivas, 1998)), nepaisant padidėjusio NAcc neuronų atsako į D1 receptorių agonistus iki vieno mėnesio po gydymo vaistais (Henry ir kt., 1989; Henry ir White, 1991, 1995). Taip pat nepranešame apie D2 receptorių mRNR ar į D2 receptorius panašių receptorių surišimo lygius NAcc arba CP prerinių pelėnų patelių po AMPH gydymo, o tai atitinka žiurkėms ir pelėms (žr.Richtand ir kt., 1997 m; Sora ir kt., 1992) ir teiginys, kad NAcc D1 receptoriai vaidina didesnį vaidmenį reaguojant į pakartotinį AMPH poveikį (Berke ir Hyman, 2000).

Įdomi šio tyrimo išvada yra ta, kad pakartotinis gydymas AMPH žymiai sumažino D2 receptorių geno ekspresijos lygį ir D2 tipo receptorių surišimą prerijų pelėnų patelių VTA. D2 receptoriai VTA yra A10 DA neuronų somatodendritiniuose regionuose (DA projekciniai neuronai, kurie kilę iš VTA ir projektuojasi į mezokortikolimbines sritis) (Aghajanian ir Bunney, 1977 m; Mercuri ir kt., 1997 m; Oades ir Halliday, 1987; White and Wang, 1984b). Šie receptoriai veikia kaip autoreceptoriai, o jų aktyvinimas sukelia ląstelės membranos hiperpoliarizaciją ir slopina ląstelių uždegimą (Mercuri ir kt., 1997 m) (žr.Mercuri ir kt., 1992 m)), sumažinant DA kiekį, išleidžiamą į tikslinius regionus, tokius kaip NAcc (Usiello ir kt., 2000). Atitinkamai, D2 receptorių blokada arba geno ištrynimas sukelia A10 ląstelių slopinimo trūkumą ir vėlesnį DA pertekėjimą į NAcc, reaguojant į įvairius dirgiklius (Mercuri ir kt., 1997 m; Rouge-Pont ir kt., 2002). Todėl šiame tyrime pastebėtas D2 receptorių sumažėjimas VTA gali rodyti AMPH sukeltą somatodendritinių autoreceptorių reguliavimą prerijų pelėnų patelėse. Kadangi autoreceptorių tankis yra atvirkščiai susijęs su A10 DA neuronų aktyvumo greičiu (White and Wang, 1984a), dėl šio poveikio gali padidėti DA išsiskyrimas ir neurotransmisija NAcc. Panašiai ankstesni tyrimai parodė, kad po pakartotinio psichostimuliatoriaus poveikio somatodendritiniai autoreceptoriai A10 DA neuronuose yra jautrūs, todėl padidėjo spontaninis A10 DA ląstelių aktyvumas ir bazinis šaudymo greitis.Henry ir kt., 1989), kuris gali išlikti kelias dienas po gydymo vaistais pabaigos (Ackerman ir White, 1990 m). Tačiau svarbu pažymėti, kad tiek D2, tiek D3 receptoriai yra ekspresuojami VTA ir yra lokalizuoti presinaptiškai ant dopaminerginių neuronų.Diaz ir kt., 1995 m; Mercuri ir kt., 1997 m), nurodant, kad dabartinis D2 tipo receptorių surišimo sumažėjimas gali būti siejamas su bet kurio arba abiejų receptorių potipių pokyčiais. Žinios apie specifinį receptorių potipį, paveiktą AMPH poveikio, yra svarbios mūsų duomenų interpretavimui, nes D2, bet ne D3, receptoriai yra būtini DA neuronų autoreceptoriniam slopinimui.Mercuri ir kt., 1997 m; Rouge-Pont ir kt., 2002). Vis dėlto, kadangi D3 receptorių ekspresija VTA yra labai maža, palyginti su D2 receptoriais (Bouthenet ir kt., 1991 m), o spiperonas turi didesnį afinitetą D2 nei D3 receptorių (Missale ir kt., 1998), tikėtina, kad dabartinis poveikis D2 tipo receptorių surišimui rodo specifinį D2, o ne D3 receptorių lygio sumažėjimą.

Nors neurobiologinis pakartotinio AMPH poveikio patelėms poveikis turi tam tikrų panašumų su anksčiau nustatytais prerijų pelėnų patinais.Liu ir kt., 2010), akivaizdūs du svarbūs skirtumai. Pirma, nors AMPH patyrė padidėjusį D1 receptorių mRNR abiejų lyčių NAcc, funkcinės didėjančios genų transkripcijos pasekmės išliko tik vyrams (ty patelės neparodė jokių D1 tipo receptorių surišimo lygio pokyčių, o AMPH padidino NAcc D1 receptorių baltymų kiekį vyrai). Šie skirtumai gali atsirasti dėl skirtingų kiekybinių metodų, skirtų šioms funkcinėms pasekmėms nustatyti (ty moterims buvo naudojamas surišimas su receptoriais, o vyrams – Western blot), arba gali reikšti specifinį pakartotinio gydymo AMPH poveikį D1 receptoriams NAcc. prerijų pelėnų. Antra, gydymas AMPH neturėjo įtakos D2 receptorių mRNR ekspresijai VTA prerijų pelėnų patinuose.Liu ir kt., 2010), tačiau žymiai sumažino jo, taip pat D2 receptorių surišimo lygius moterims, ir tai rodo, kad AMPH neurobiologinis poveikis priklauso nuo lyties. Šią idėją patvirtina kitų rūšių atradimai, rodantys genų ekspresijos lyties skirtumus po gydymo AMPH (Castner ir Becker, 1996 m).

AMPH sukelti mezokortikolimbinės DA sistemos pokyčiai gali turėti svarbių pasekmių socialiniam elgesiui prerijų pelėnams. Kaip minėta pirmiau, suaugę prerijų pelėnų patinai ir patelės po poravimosi sudaro ilgalaikius porinius ryšius (Carter et al., 1995; Williams ir kt., 1992; Winslow ir kt., 1993) ir NAcc DA reguliuoja šį abiejų lyčių elgesį specifiniu receptorių būdu: D2 tipo receptorių aktyvacija palengvina, o D1 tipo receptorių aktyvacija slopina partnerio pasirinkimo formavimąsi (Aragona ir kt., 2003, 2006; Aragona ir Wang, 2009; Gingrich ir kt., 2000; Liu ir Wang, 2003; Wang et al., 1999). Taigi AMPH sukelti pokyčiai mezokortikolimbiniuose smegenų regionuose, įskaitant tuos, kurie aprašyti čia, gali turėti didelių pasekmių porų susiejimo elgesiui prerijų pelėnuose. Pavyzdžiui, manoma, kad vyrams AMPH sukeltas D1 tipo receptorių padidėjimas NAcc yra AMPH sukelto partnerio pirmenybės formavimosi pažeidimo pagrindas.Liu ir kt., 2010), nes NAcc D1 receptorių aktyvacija slopina poravimosi sukeltus partnerio pageidavimus (Aragona ir kt., 2006). Be to, farmakologinė D1 receptorių blokada gydymo AMPH metu, priklausomai nuo dozės, pašalino AMPH sukeltą partnerio pirmenybės formavimosi sutrikimą, o tai dar labiau rodo, kad AMPH gali pabloginti porų ryšį per D1 receptorių sukeltą mechanizmą.Liu ir kt., 2010). Vietoj to, patelėms dėl autoreceptorių slopinimo trūkumo, kaip rodo dabartiniai radiniai (ty sumažėjusi D2 receptorių ekspresija VTA), poravimosi sukeltas DA išsiskyrimas NAcc greičiausiai padidėtų AMPH gydytiems pelėnams. Kadangi stiprus DA koncentracijos padidėjimas suaktyvina mažo afiniteto D1 receptorius (Richfield ir kt., 1989), ši neuroadaptacija gali turėti svarbių elgesio pasekmių moterų socialiniams ryšiams.

Apibendrinant, dabartinis tyrimas rodo, kad elgsenai svarbi AMPH dozė keičia DA koncentraciją ir receptorių ekspresiją prerijų pelėnų patelių mezokortikolimbinėje DA sistemoje, kuri yra pagrindinė grandinė, susijusi su šios rūšies monogamišku socialiniu elgesiu. Šie rezultatai sudaro pagrindą būsimiems prerijų pelėnų patelių tyrimams, siekiant ištirti AMPH poveikį porų sujungimui ir susijusiems neurocheminiams mechanizmams.

4. Eksperimentinės procedūros

4.1. Gyvūnai

Nelaisvėje auginamos prerijų pelėnų patelės (Microtus ochrogaster), kilę iš pietų Ilinojaus populiacijų, buvo nujunkyti 21 dienos amžiaus, o po to laikomi tos pačios lyties brolių ir seserų porose plastikiniuose narvuose (29 × 18 × 13 cm), kuriuose buvo kedro drožlių patalynė. Jie buvo palaikomi 14:10 šviesos: tamsos ciklu (šviesa įjungiama 0700 val.) ad libitum prieiga prie maisto ir vandens. Temperatūra buvo palaikoma 21±1 °C. Visi šiame tyrime naudojami gyvūnai buvo nuo 90 iki 120 dienų amžiaus. Eksperimentai buvo atlikti pagal Floridos valstijos universiteto Institucinio gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto gaires.

4.2. Sąlyginės vietos pirmenybės paradigma

CPP aparatas buvo identiškas anksčiau aprašytam ir susideda iš dviejų plastikinių narvelių, kurie buvo vizualiai skirtingi (balti ir juodi) ir sujungti vienas su kitu tuščiaviduriu vamzdeliu (Aragona ir kt., 2007; Liu ir kt., 2010). Mes naudojome kondicionavimo paradigmą, neseniai sukurtą prerijų pelėnų patinams (Liu ir kt., 2010). Trumpai tariant, visiems tiriamiesiems 30 dieną buvo atliktas 1 minučių išankstinis testas ir kiekybiškai įvertintas laikas, praleistas kiekviename narve. Narvas, kuriame asmuo praleido mažiau laiko per išankstinį tyrimą, buvo pavadintas suporuotu narvu su vaistais, o kitas – kaip su fiziologiniu tirpalu suporuotu narvu. Kondicionavimas vyko per dvi 40 minučių sesijas kiekvieną dieną kitas tris dienas (2–4 dienas). Rytinių seansų metu (0900 val.) tiriamieji gavo intraperitonines (ip) 0.0, 0.1, 0.2 arba 1.0 mg/kg d-AMPH sulfato (Sigma, Sent Luisas, MO, JAV), ištirpinto fiziologiniame tirpale, injekcijas prieš pat dedant. į narkotikų suporuotą narvą. Per popietinius seansus (1500 val.) tiriamieji gavo ip injekciją fiziologinio tirpalo prieš pat patalpinimą į suporuotą narvą. Šis dviejų bandymų per dieną treniruočių grafikas buvo taikomas žiurkėms (Campbell ir Spear, 1999 m; Zhou ir kt., 2010) ir buvo naudojamas mūsų ankstesniame tyrime su prerijų pelėnų patinais (Liu ir kt., 2010). Be to, ši paradigma buvo pasirinkta, nes mūsų bandomieji duomenys nerodė jokių elgesio skirtumų tarp tiriamųjų, gydomų subalansuotomis ir fiksuotomis injekcijų / kondicionavimo paradigmomis (neskelbti duomenys), ir todėl, kad standartizuoti injekcijų ir audinių surinkimo grafikai buvo svarbūs matuojant DA žymeklio išraišką vėlesniuose eksperimentuose. taip pat tiesioginiam palyginimui su prerinių pelėnų patinų duomenimis (Liu ir kt., 2010). 5 dieną visi tiriamieji buvo patikrinti, ar nėra CPP per 30 minučių po bandymo. Kartų, kai gyvūnai kirto narvus, buvo užregistruotas prieš ir po bandymo ir naudojamas kaip lokomotorinio aktyvumo indeksas.

4.3. Audinių paruošimas

Tiriamieji buvo greitai nukirsti 30 minučių po injekcijos 2 eksperimente ir 24 valandas po paskutinės injekcijos 3 ir 4 eksperimentuose. Jų smegenys buvo greitai pašalintos ir nedelsiant užšaldytos ant sauso ledo, prieš laikant –80 °C temperatūroje. 2 eksperimento smegenys buvo perpjautos vainikiniu būdu 300 μm, o sekcijos buvo atšildytos ant Superfrost/plus stiklelių. Paxinos ir Watson žiurkių smegenų atlasas (Paxinos ir Watson, 1998) buvo naudojamas įvairiems smegenų regionams, įskaitant PFC (8–10 plokštės), NAcc (9–11 plokštės), CP (10–12 plokštės) ir VTA (40–43 plokštelės), identifikuoti, iš kurių dvišaliai įspaudžiami audiniai. buvo paimtas 1 mm skersmens (2A) ir iki apdorojimo laikomi –80 °C temperatūroje. Nors CP nėra mezokortikolimbinė smegenų sritis, ji buvo įtraukta į mūsų analizę, nes ji, kaip ir NAcc ir PFC, gauna DAerginę įvestį iš VTA (Oades ir Halliday, 1987), tačiau neatrodo, kad jis dalyvauja DAerginiame prerijų pelėnų partnerio pirmenybės formavimo reguliavime (Aragona ir kt., 2003, 2006; Liu ir Wang, 2003). Atliekant 3 ir 4 eksperimentus, smegenys buvo koroniškai supjaustytos į 10 rinkinių po 14 μm pjūvius, kurie atitirpinant buvo pritvirtinti ant Superfrost/plus stiklelių.

4.4. DA ekstrahavimas ir HPLC-ECD analizė

DA ekstrahavimas buvo atliktas taip, kaip aprašyta anksčiau (Aragona ir kt., 2002), išskyrus tai, kad audinių mėginiai buvo apdoroti ultragarsu 50 μl 0.1, 0.02 M perchlorato rūgšties su XNUMX, XNUMX% EDTA. DA koncentracija buvo įvertinta naudojant didelio efektyvumo skysčių chromatografiją su elektrocheminiu aptikimu (HPLC-ECD), kaip aprašyta anksčiau (Curtis ir kt., 2003) su toliau nurodytomis išimtimis. Mobiliąją fazę sudarė 75 mM natrio divandenilio fosfato monohidrato, 1.7 mM 1-oktansulfonrūgšties natrio druskos, 0.01 % trietilamino, 25 µm EDTA ir 7 % acetonitrilo, o pH buvo sureguliuotas iki 3.0 naudojant 85 % fosforo rūgštį. Srauto greitis buvo 0.5 ml/min. Standartinė kreivė ir smailės plotas buvo apskaičiuoti taip, kaip aprašyta anksčiau (Aragona ir kt., 2003). Aptikimo riba buvo ~10 pg vienam mėginiui.

4.5. D1 ir D2 receptorių mRNR hibridizacija in situ

Buvo apdoroti alternatyvūs smegenų sekcijų rinkiniai iš 3 eksperimento vietoje DA receptoriaus mRNR hibridizacijos žymėjimas. D1 ir D2 receptorių mRNR žymėjimui buvo naudojami antisensiniai ir sensoriniai ribozondai (dosniai aprūpinti dr. O. Civelli iš Kalifornijos universiteto Irvine, Kalifornijoje) ir paruošti, kaip aprašyta anksčiau (Liu ir kt., 2010). Zondai buvo paženklinti atskirai 37 ° C temperatūroje 1 valandą transkripcijai optimizuotame buferyje, sudarytame iš 0.5 μg/μl atitinkamo DNR šablono, [35S]-CTP, 4 mM ATP, UTP ir GTP, 0.2 M ditiotreitolio (DTT), Rnazino (40 U/μl) ir RNR polimerazės (20 U/μl). Tada DNR šablonas buvo virškinamas 1 U / μl DNaseI. Zondai buvo išgryninti naudojant chromatografines kolonėles (Bio-Rad, Hercules, CA), o po to skiedžiami hibridizacijos buferiu, kurį sudaro 50% dejonizuoto formamido, 10% dekstrano sulfato, 3 × SSC, 10 mM natrio fosfato buferio (PB, pH 7.4), 1 × Denhardto tirpalas, 0.2 mg/ml mielių tRNR ir 10 mM DTT, kad gautųsi 5 × 106 cpm/ml.

Smegenų sekcijos buvo fiksuotos 4% paraformaldehido tirpale 0.1 M fosfatu buferiniame fiziologiniame tirpale (PBS) 4 °C temperatūroje 20 min., skalaujamos PBS 10 min ir apdorojamos 0.25% acto rūgšties anhidridu trietanolamine (pH 8.0) 15 min. nespecifinis surišimas. Tada stikleliai buvo plaunami 2 × fiziologiniame natrio citrate (SSC), dehidratuojami didėjant etanolio (ETOH) koncentracijai (70, 95 ir 100%) ir džiovinami ore.

Kiekviena stiklelė gavo 100 μl hibridizacijos tirpalo, kuriame buvo atitinkamas 35S pažymėtas zondas buvo uždengtas dangteliu ir inkubuojamas 55 ° C temperatūroje drėgnoje kameroje per naktį. Po inkubacijos dangteliai buvo nuimti 2 × SSC, stikleliai du kartus plaunami 2 × SSC 5 minutes, o po to 37 valandą plaunami 1 ° C temperatūroje RNazės buferyje (8 mM Tris-HCl, 0.8 mM EDTA ir 0.4 M NaCl, pH 8.0), kuriame yra 25 mg/ml RNazėsA. Tada stikleliai buvo plaunami mažėjančiomis SSC koncentracijomis (2 × SSC, 1 × SSC ir 0.5, 5 × SSC) po 0.1 minutes ir inkubuojami 65, 60 × SSC 1 ° C temperatūroje 2 minučių. Galiausiai stikleliai buvo pašildyti iki kambario temperatūros, dehidratuoti didėjant ETOH koncentracijai ir išdžiovinti ore. Siekiant sukurti optimalias autoradiogramas, skyriai buvo pritvirtinti prie BioMax MR plėvelės (Kodak, Rochester, NY) skirtingiems laikotarpiams, priklausomai nuo zondo ir dominančio regiono. NAcc ir CP atveju D14R ir D60R mRNR pažymėtos sekcijos buvo dedamos atitinkamai 1 ir 2 valandų, o sekcijos, pažymėtos D15 ir D6.5 tipo receptorių surišimui, atitinkamai 2 ir 60, 2 val. VTA skyriai, pažymėti D40R mRNR, buvo pritvirtinti XNUMX valandų, o tie, kurie pažymėti kaip DXNUMX surišimui, buvo pritvirtinti XNUMX valandų. Kiekvienam zondui taip pat buvo išbandyta jutimo RNR kontrolė ir, kaip tikėtasi, ženklinimo nebuvo.

4.6. DA receptorių autoradiografija

4 eksperimento metu buvo apdoroti alternatyvūs smegenų sekcijų rinkiniai D1 ir D2 tipo receptorių autoradiografijai. Į D1 panašus ligandas [125I] SCH23982 ir į D2 panašus ligandas [125I] 2′-jodospiperonas buvo gautas iš PerkinElmer (Waltham, MA). DA receptorių autoradiografija buvo atlikta, kaip aprašyta anksčiau (Aragona ir kt., 2006).

4.7. Duomenų analizė

1 eksperimento atveju CPP buvo apibrėžtas pagal reikšmingą laiką, praleistą su narkotikais sujungtame narve po bandymo, palyginti su prieš bandymą, matuojant suporuotu t- testas. Lokomotorinis aktyvumas buvo analizuojamas naudojant dvipusius kartotinius matavimus ANOVA, lyginant judėjimą prieš ir po bandymo (subjekto kintamojo viduje) ir judėjimą pagal gydymą (tarp tiriamųjų kintamųjų). 2 eksperimento metu kiekvieno mėginio DA koncentracija buvo normalizuota naudojant bendrą to mėginio baltymų koncentraciją, kad būtų galima kontroliuoti surinktų audinių kiekį. Tada normalizuota DA koncentracijos vertė (pg / μg audinio) buvo konvertuota į fiziologinio tirpalo kontrolės vidutinės DA koncentracijos procentus. Kiekviename smegenų regione procentinė DA koncentracija tarp grupių buvo lyginama su a t- testas. Atliekant 3 ir 4 eksperimentus, autoradiogramose buvo analizuojamas optinis mRNR žymėjimo arba receptorių surišimo tankis NAcc, CP ir VTA naudojant kompiuterizuotą vaizdo programą (NIH IMAGE 1.60) (PFC nebuvo įtraukta į analizę, nes ši sritis nerodė jokio atsako AMPH gydymui 2 eksperimente). NAcc, CP ir VTA vaizdo analizės rostralinis / uodeginis dydis buvo toks pat, kaip aprašyta 2 eksperimente. Neuroanatominis skirtumas tarp NAcc ir CP buvo atliktas naudojant Paxinos ir Watson žiurkės smegenų atlasą (Paxinos ir Watson, 1998), nurodant ženklinimo formą ir priekinės komisūros vietą. Kiekvienos smegenų srities sekcijos buvo anatomiškai suderintos tarp tiriamųjų, o kiekvieno subjekto individualūs rodikliai buvo gauti išmatuojant optinį tankį dvišaliu būdu trijose kiekvienos smegenų srities, vienam gyvūnui, skyriuose. Fono tankis buvo atimtas iš kiekvienos sekcijos matavimo. Galutinis optinis tankis buvo paverstas procentais nuo fiziologinio tirpalo kontrolinio vidurkio. Kiekvienam DA receptoriui buvo išanalizuoti grupių mRNR arba surišimo lygių skirtumai smegenų srityje, naudojant a t-testas. Nustatytas reikšmės lygis p

Padėka

Dėkojame Kevinui Youngui ir Adamui Smithui už kritišką rankraščio skaitymą. Šį darbą palaikė Nacionaliniai sveikatos institutai, skyrę DAF31-25570 KAY, MHF31-79600 – KLG ir DAR01-19627, DAK02-23048 ir MHR01-58616 – ZXW.

Išnašos

Santrumpos: AMPH, amfetaminas; ANOVA, dispersinė analizė; CP, caudate putamen; CPP, sąlyginės vietos pirmenybė; DTT, ditiotreitolis; DA, dopaminas; ETOH, etanolis; HPLC, didelio efektyvumo skysčių chromatografija; ip, intraperitoninis; PCF, medialinė prefrontalinė žievė; NAcc, nucleus accumbens; PBS, fosfatiniu buferiniu tirpalu; SSC, druskos natrio citratas; PB, natrio fosfato buferis; VTA, ventralinė tegmentinė sritis

NUORODOS

  1. Ackerman JM, White FJ. A10 somatodendritinio dopamino autoreceptorių jautrumas nutraukus pakartotinį gydymą kokainu. Neurosci. Lett. 1990;117:181–187. [PubMed]
  2. Aghajanian GK, Bunney BS. Dopamino „autoreceptoriai“: farmakologinis apibūdinimas mikrojontoforetiniais vienos ląstelės registravimo tyrimais. Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 1977;297:1–7. [PubMed]
  3. Aragona BJ, Wang Z. Socialinio pasirinkimo dopamino reguliavimas monogaminėje graužikų rūšyje. Priekyje. Behav. Neurosci. 2009;3:1–11.
  4. Aragona BJ, Curtis JT, Davidson AJ, Wang Z, Stephan FK. Žiurkių cirkadinio laiko ir vietos mokymosi elgesio ir neurocheminis tyrimas. J. Biol. Ritmai. 2002;17:330–344. [PubMed]
  5. Aragona BJ, Liu Y, Curtis JT, Stephan FK, Wang Z. Nucleus accumbens dopamine kritinis vaidmuo formuojant partnerio pirmenybę prerijų pelėnų patinuose. J. Neurosci. 2003;23:3483–3490. [PubMed]
  6. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Curtis JT, Detwiler JM, Insel TR, Wang Z. Nucleus accumbens dopamine skirtingai tarpininkauja monogaminių porų ryšių susidarymui ir palaikymui. Nat. Neurosci. 2006;9:133–139. [PubMed]
  7. Aragona BJ, Detwiler JM, Wang Z. Amfetamino atlygis monogamiškame prerijų pelėna. Neurosci. Lett. 2007;418:190–194. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  8. Bardo MT, Bevins RA. Sąlyginės vietos pirmenybė: ką tai prisideda prie mūsų ikiklinikinio atlygio už vaistus supratimo? Psychopharmacology (Berl.) 2000;153:31–43. [PubMed]
  9. Beckeris JB. Tiesioginis 17 beta-estradiolio poveikis striatumui: dopamino išsiskyrimo lyties skirtumai. Sinapsė. 1990;5:157–164. [PubMed]
  10. Becker JB, Hu M. Lyčių skirtumai piktnaudžiaujant narkotikais. Priekyje. Neuroendokrinolis. 2008;29:36–47. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  11. Beckeris JB, Ramirezas VD. Amfetamino lyties skirtumai paskatino katecholaminų išsiskyrimą iš žiurkės striatalinio audinio in vitro. Brain Res. 1981;204:361–372. [PubMed]
  12. Becker JB, Molenda H, Hummer DL. Elgesio atsako į kokainą ir amfetaminą lyčių skirtumai. Poveikis mechanizmams, tarpininkaujantiems lyčių skirtumams piktnaudžiaujant narkotikais. Ann. NY Akad. Sci. 2001;937:172–187. [PubMed]
  13. Berke JD, Hyman SE. Priklausomybė, dopaminas ir molekuliniai atminties mechanizmai. Neuronas. 2000: 25: 515 – 532. [PubMed]
  14. Bouthenet ML, Souil E, Martres MP, Sokoloff P, Giros B, Schwartz JC. Dopamino D3 receptoriaus mRNR lokalizavimas žiurkės smegenyse naudojant in situ hibridizacijos histochemiją: palyginimas su dopamino D2 receptoriaus mRNR. Brain Res. 1991;564:203–219. [PubMed]
  15. Stovykla DM, Robinson TE. Jautrumas jautrumui. I. Lyčių skirtumai dėl ilgalaikio gydymo D-amfetaminu poveikio judėjimui, stereotipiniam elgesiui ir smegenų monoaminams. Behav. Brain Res. 1988;30:55–68. [PubMed]
  16. Campbell J, Spear LP. Ankstyvo gydymo poveikis suaugusių žiurkių amfetamino sukeltai lokomotorinei aktyvacijai ir sąlyginiam vietos pasirinkimui. Psychopharmacology (Berl.) 1999;143:183–189. [PubMed]
  17. Carteris CS, DeVries AC, Getz LL. Fiziologiniai žinduolių monogamijos substratai: prerijų pelėnų modelis. Neurosci. Biobehav. Rev. 1995;19:303–314. [PubMed]
  18. Castner SA, Becker JB. Lyčių skirtumai tarp amfetamino poveikio tiesioginei ankstyvai genų ekspresijai žiurkės nugaros striatumoje. Brain Res. 1996;712:245–257. [PubMed]
  19. Cho AK, Melega WP, Kuczenski R, Segal DS, Schmitz DA. Caudate-putamen dopamino ir stereotipinio atsako profiliai po intraveninio ir poodinio amfetamino. Sinapsė. 1999;31:125–133. [PubMed]
  20. Clausing P, Bowyer JF. Smegenų temperatūros ir uodegos / putameno mikrodializės amfetamino ir dopamino koncentracijos laiko eiga žiurkėms po kelių D-amfetamino dozių. Ann. NY Akad. Sci. 1999;890:495–504. [PubMed]
  21. Curtis JT, Wang Z. Amfetamino poveikis mikrotinų graužikams. Neurologijos. 2007;148:857–866. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  22. Curtis JT, Stowe JR, Wang Z. Diferencialinis sąveikos poveikis striatalo dopamino sistemai socialinėse ir ne socialinėse gumbose. Neurologija. 2003: 118: 1165 – 1173. [PubMed]
  23. Curtis JT, Liu Y, Aragona BJ, Wang Z. Dopaminas ir monogamija. Brain Res. 2006; 1126:76–90. [PubMed]
  24. Di Chiara G, Tanda G, Frau R, Carboni E. Dėl pirmenybinio dopamino išsiskyrimo amfetamino nucleus accumbens: papildomi įrodymai, gauti naudojant vertikaliai implantuotus koncentrinius dializės zondus. Psychopharmacology (Berl.) 1993;112:398–402. [PubMed]
  25. Diaz J, Levesque D, Lammers CH, Griffon N, Martres MP, Schwartz JC, Sokoloff P. Fenotipinis neuronų, ekspresuojančių dopamino D3 receptorių žiurkės smegenyse, apibūdinimas. Neurologijos. 1995;65:731–745. [PubMed]
  26. Drevets WC, Gautier C, Price JC, Kupfer DJ, Kinahan PE, Grace AA, Price JL, Mathis CA. Amfetamino sukeltas dopamino išsiskyrimas žmogaus ventraliniame striatum koreliuoja su euforija. Biol. Psichiatrija. 2001;49:81–96. [PubMed]
  27. Fattore L, Altea S, Fratta W. Priklausomybės nuo narkotikų lyties skirtumai: gyvūnų ir žmonių tyrimų apžvalga. Moterų sveikata (Londonas. Angl.) 2008; 4:51–65. [PubMed]
  28. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Dopamino D2 receptoriai branduolio accumbens yra svarbūs socialiniam pririšimui moterims (Microtus ochrogaster) Elgesys. Neurosci. 2000;114:173–183. [PubMed]
  29. Henry DJ, White FJ. Pakartotinis kokaino vartojimas sukelia nuolatinį D1 dopamino receptorių jautrumo padidėjimą žiurkės branduolyje. J. Pharmacol. Exp. Ten. 1991;258:882–890. [PubMed]
  30. Henry DJ, White FJ. Elgesio jautrinimas kokainui yra lygiagretus su sustiprintu nucleus accumbens neuronų slopinimu. J. Neurosci. 1995;15:6287–6299. [PubMed]
  31. Henry DJ, Greene MA, White FJ. Elektrofiziologinis kokaino poveikis mezoaccumbens dopamino sistemoje: pakartotinis vartojimas. J. Pharmacol. Exp. Ten. 1989;251:833–839. [PubMed]
  32. Hu XT, Koeltzow TE, Cooper DC, Robertson GS, White FJ, Vezina P. Pakartotinis ventralinės tegmentinės srities amfetamino vartojimas pakeičia dopamino D1 receptorių signalizaciją branduolyje. Sinapsė. 2002;45:159–170. [PubMed]
  33. Hu M, Crombag HS, Robinson TE, Becker JB. Biologinis lyčių skirtumų, susijusių su polinkiu savarankiškai vartoti kokainą, pagrindas. Neuropsichofarmakologija. 2004;29:81–85. [PubMed]
  34. Insel TR, Preston S, Winslow JT. Poravimasis su monogamišku patinu: elgesio pasekmės. Physiol. Behav. 1995;57:615–627. [PubMed]
  35. Kelley AE, Berridge KC. Natūralaus atlygio neuromokslas: priklausomybę sukeliančių vaistų svarba. J. Neurosci. 2002;22:3306–3311. [PubMed]
  36. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oksitocinas ir dopaminas sąveikauja, kad reguliuotų porų ryšių formavimąsi moterų prerijų voluose. Neurologija. 2003: 121: 537 – 544. [PubMed]
  37. Liu Y, Aragona BJ, Young KA, Dietz DM, Kabbaj M, Mazei-Robison M, Nestler EJ, Wang Z. Nucleus accumbens dopamine mediates amfetamino induced impairment of social bonding in a monogamous graužikų rūšis. Proc.Natl. Acad.Sci.USA 2010;107:1217–1222. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  38. Lynchas WJ. Lyčių skirtumai, susiję su pažeidžiamumu savarankiškai vartojant vaistus. Exp. Clin. Psichofarmakolas. 2006;14:34–41. [PubMed]
  39. Lynchas WJ, Carroll ME. Lyčių skirtumai įsigyjant į veną savarankiškai vartojamą kokainą ir heroiną žiurkėms. Psychopharmacology (Berl.) 1999;144:77–82. [PubMed]
  40. Mercuri NB, Calabresi P, Bernardi G. Elektrofiziologinis dopamino ir dopaminerginių vaistų poveikis substantia nigra pars compacta ir ventralinės tegmentinės srities neuronams. Gyvenimas Sci. 1992;51:711–718. [PubMed]
  41. Mercuri NB, Saiardi A, Bonci A, Picetti R, Calabresi P, Bernardi G, Borrelli E. Autoreceptorių funkcijos praradimas dopaminerginiuose neuronuose iš dopamino D2 receptorių trūkumo pelių. Neurologijos. 1997;79:323–327. [PubMed]
  42. Missale C, Nash SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Dopamino receptoriai: nuo struktūros iki funkcijos. Physiol. Rev. 1998;78:189–225. [PubMed]
  43. Narayanan NS, Guarnieri DJ, DiLeone RJ. Metaboliniai hormonai, dopamino grandinės ir maitinimas. Priekyje. Neuroendokrinolis. 2010;31:104–112. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  44. Nesse RM, Berridge KC. Psichoaktyvių narkotikų vartojimas evoliucinėje perspektyvoje. Mokslas. 1997;278:63–66. [PubMed]
  45. Nestler EJ. Narkomanijos molekuliniai mechanizmai. Neurofarmakologija. 2004; 47 (Suppl 1): 24 – 32. [PubMed]
  46. Nestler EJ. Ar yra bendras molekulinis priklausomybės kelias? Nat. Neurosci. 2005;8:1445–1449. [PubMed]
  47. Oades RD, Halliday GM. Ventralinė tegmentinė (A10) sistema: neurobiologija. 1. Anatomija ir jungiamumas. Brain Res. 1987;434:117–165. [PubMed]
  48. Palmiter RD. Ar dopaminas yra fiziologiškai svarbus maitinimo elgesio tarpininkas? Tendencijos Neurosci. 2007: 30: 375 – 381. [PubMed]
  49. Panksepp J, Knutson B, Burgdorf J. Smegenų emocinių sistemų vaidmuo priklausomybėse: neuroevoliucinė perspektyva ir naujas „savipranešimo“ gyvūnų modelis. Priklausomybė. 2002;97:459–469. [PubMed]
  50. Paxinos G, Watson C. Žiurkės smegenys stereotaksinėse koordinatėse. Akademinė spauda; San Diegas, Kalifornija: 1998 m.
  51. Pierce RC, Kalivas PW. Elgesio jautrumo amfetaminams panašiems psichostimuliatoriams išraiškos schema. Brain Res. Brain Res. Rev. 1997;25:192–216. [PubMed]
  52. Richfield EK, Penney JB, Young AB. Dopamino D1 ir D2 receptorių anatominės ir afininės būsenos palyginimas žiurkės centrinėje nervų sistemoje. Neurologija. 1989: 30: 767 – 777. [PubMed]
  53. Richtand NM, Kelsoe JR, Kuczenski R, Segal DS. Dopamino D1 ir D2 receptorių mRNR lygių, susijusių su amfetaminu gydytų žiurkių elgesio sensibilizavimu, kiekybinis įvertinimas. Neurochem. Tarpt. 1997;31:131–137. [PubMed]
  54. Roberts DC, Bennett SA, Vickers GJ. Rujos ciklas turi įtakos žiurkių savarankiškam kokaino skyrimui pagal laipsniško santykio grafiką. Psychopharmacology (Berl.) 1989;98:408–411. [PubMed]
  55. Robinson TE, Becker JB. Nuolatiniai smegenų ir elgesio pokyčiai, kuriuos sukelia lėtinis amfetamino vartojimas: amfetamino psichozės gyvūnų modelių peržiūra ir įvertinimas. Brain Res. 1986: 396: 157 – 198. [PubMed]
  56. Robinson TE, Kolb B. Nuolatinės struktūrinės modifikacijos nucleus accumbens ir prefrontal žievės neuronuose, atsiradusios dėl ankstesnės amfetamino patirties. J. Neurosci. 1997;17:8491–8497. [PubMed]
  57. Robinson TE, Jurson PA, Bennett JA, Bentgen KM. Nuolatinis dopamino neurotransmisijos jautrinimas ventralinėje stiatumoje (branduolių accumbens), gautas iš ankstesnės (+) - amfetamino patirties: mikrodializės tyrimas su laisvai judančiomis žiurkėmis. Brain Res. 1988: 462: 211 – 222. [PubMed]
  58. Robinson TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Kokaino savęs administravimas keičia dendritų ir dendritinių stuburų morfologiją branduolyje accumbens ir neocortex. Sinapsija. 2001: 39: 257 – 266. [PubMed]
  59. Roth ME, Carroll ME. Lyčių skirtumai žiurkėms įsigyjant metamfetamino IV savaiminio vartojimo ir vėlesnio gydymo pagal progresyvaus santykio grafiką. Psychopharmacology (Berl.) 2004;172:443–449. [PubMed]
  60. Rouge-Pont F, Usiello A, Benoit-Marand M, Gonon F, Piazza PV, Borrelli E. Morfino ir kokaino sukelti ekstraląstelinio dopamino pokyčiai: esminė D2 receptorių kontrolė. J. Neurosci. 2002;22:3293–3301. [PubMed]
  61. Sora I, Fujiwara Y, Tomita H, Ishizu H, Akiyama K, Otsuki S, Yamamura HI. Gydymo haloperidoliu arba metamfetaminu poveikio trūkumas dviejų dopamino D2 receptorių izoformų mRNR lygiams žiurkės smegenyse. Jpn. J. Psychiatry Neurol. 1992;46:967–973. [PubMed]
  62. Tiberi M, Jarvie KR, Silvia C, Falardeau P, Gingrich JA, Godinot N, Bertrand L, Yang-Feng TL, Fremeau RT, Jr., Caron MG. Geno, koduojančio antrąjį D1 dopamino receptorių potipį, klonavimas, molekulinis apibūdinimas ir chromosomų priskyrimas: diferencinės ekspresijos modelis žiurkės smegenyse, palyginti su D1A receptoriumi. Proc. Natl. Akad. Sci. JAV 1991;88:7491–7495. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  63. Usiello A, Baik JH, Rouge-Pont F, Picetti R, Dierich A, LeMeur M, Piazza PV, Borrelli E. Skirtingos dviejų dopamino D2 receptorių izoformų funkcijos. Gamta. 2000;408:199–203. [PubMed]
  64. Wang Z, Yu G, Cascio C, Liu Y, Gingrich B, Insel TR. Dopamino D2 receptorių tarpusavio reguliavimas partnerių preferencijoms moteriškų prerijų voluose (Microtus ochrogaster): porų sujungimo mechanizmas? Behav. Neurosci. 1999;113:602–611. [PubMed]
  65. Weiner DM, Levey AI, Sunahara RK, Niznik HB, O'Dowd BF, Seeman P, Brann MR. D1 ir D2 dopamino receptorių mRNR žiurkės smegenyse. Proc. Natl. Akad. Sci. JAV 1991;88:1859–1863. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  66. White FJ, Kalivas PW. Neuroadaptacijos, susijusios su priklausomybe nuo amfetamino ir kokaino. Priklauso nuo narkotikų alkoholio. 1998;51:141–153. [PubMed]
  67. White FJ, Wang RY. A10 dopamino neuronai: autoreceptorių vaidmuo nustatant degimo greitį ir jautrumą dopamino agonistams. Gyvenimas Sci. 1984a;34:1161–1170. [PubMed]
  68. White FJ, Wang RY. Farmakologinis dopamino autoreceptorių apibūdinimas žiurkių ventralinėje tegmentinėje srityje: mikroiontoforetiniai tyrimai. J. Pharmacol. Exp. Ten. 1984b;231:275–280. [PubMed]
  69. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Partnerių preferencijų plėtra moterų prerijų grupėse (Microtus ochrogaster): socialinės ir seksualinės patirties vaidmuo. Horm. Behav. 1992;26:339–349. [PubMed]
  70. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. centrinio vazopresino vaidmuo susiejant poras monogaminiuose prerijų pelėnams. Gamta. 1993;365:545–548. [PubMed]
  71. Young KA, Gobrogge KL, Liu Y, Wang Z. The neurobiology of pair bonding: insights from a socially monogamous rodent. Priekyje. Neuroendokrinolis. 2010 m. doi: 10.1016/j.yfrne.2010.07.006. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  72. Jaunasis KA, Gobrogge KL, Wang ZX. Mezokortikolimbinio dopamino vaidmuo reguliuojant piktnaudžiavimo narkotikų ir socialinio elgesio sąveiką. Neurosci. Biobehav. Rev. 2011;35:498–515. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  73. Zahmas DS. Integruojanti neuroanatominė kai kurių subkortikinių adaptyvaus atsako substratų perspektyva, pabrėžiant branduolį. Neurosci. Biobehav. Rev. 2000;24:85–105. [PubMed]
  74. Zhou JY, Mo ZX, Zhou SW. Rinkofilino poveikis centrinio neurotransmiterio lygiui amfetamino sukeltose kondicionuotose žiurkių smegenyse. Fitoterapija. 2010;81(7):844–848. [PubMed]