PLoS One ". 2014 gegužės 1, 9 (5): e96337. doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.
Abstraktus
Paauglystė yra susijusi su dideliu impulsyvumu ir rizikavimu, todėl paaugliai labiau linkę vartoti narkotikus. Ankstyvas narkotikų vartojimas yra susijęs su padidėjusia narkotikų vartojimo sutrikimų rizika vėliau, tačiau neurobiologinis pagrindas neaiškus. Paauglystėje smegenys smarkiai vystosi, todėl manoma, kad šiuo metu sutrikimai gali prisidėti prie padidėjusio pažeidžiamumo. Perėjimas nuo kontroliuojamo prie kompulsyvaus narkotikų vartojimo ir priklausomybės apima ilgalaikius neuroninių tinklų pokyčius, įskaitant poslinkį nuo nucleus accumbens, tarpininkaujant ūminiam sustiprinamajam poveikiui, prie nugaros striatum ir įpročių formavimosi. Šiuo tyrimu buvo siekiama patikrinti padidėjusio dopamino išsiskyrimo hipotezę po farmakologinio poveikio žiurkėms paauglėms. Kalio sukeltas dopamino išsiskyrimas ir įsisavinimas buvo tiriamas naudojant chronoamperometrinius dopamino įrašus kartu su amfetamino poveikiu ankstyvoms ir vėlyvoms paauglių žiurkėms bei suaugusioms žiurkėms. Be to, buvo tiriamos savanoriško alkoholio vartojimo paauglystėje pasekmės šiam poveikiui. Duomenys rodo, kad su amžiumi sukeltas dopamino išsiskyrimas palaipsniui didėja, o tai patvirtina ankstesnius tyrimus, rodančius, kad atpalaiduojamo dopamino kiekis didėja su amžiumi. Priešingai, laipsniškas sukelto išsiskyrimo sumažėjimas su amžiumi buvo pastebėtas reaguojant į amfetaminą, o tai palaikė proporcingai didesnį dopamino kaupimąsi jaunesniems gyvūnams.. Dopamino priemonės po savanoriško alkoholio vartojimo lėmė mažesnes išsiskyrimo amplitudes, reaguojant į kalio chloridą, o tai rodo, kad alkoholis veikia išskiriamo dopamino telkinį ir tai gali turėti įtakos priklausomybės pažeidžiamumui ir kitoms psichikos diagnozėms, susijusioms su dopaminu nugaros juostoje.
Įvadas
Paauglystė yra susijusi su dideliu impulsyvumu ir rizikingu elgesiu, todėl paaugliai yra labiau linkę vartoti narkotikus [1]. Nikotinas, alkoholis ar kanapės greičiausiai bus tiriami prieš psichostimuliatorius ar opiatus [2], [3] o ankstyvas narkotikų vartojimas yra susijęs su padidėjusiais medžiagų vartojimo sutrikimais (SUD) vėlesniame gyvenime [4]-[6]. Neurobiologija, kuria grindžiama padidėjusi SUD rizika, yra neaiški, tačiau paauglystė yra intensyvaus smegenų vystymosi laikotarpis, o dėl piktnaudžiavimo narkotikais normalaus smegenų vystymosi sutrikimai gali prisidėti prie padidėjusio pažeidžiamumo po paauglių narkotikų vartojimo. [7].
Piktnaudžiavimo narkotikais paprastai veikia atlygio sistemą ir po jų suvartojimo smarkiai padidėja tarpląstelinis dopamino kiekis branduolyje. [8]. Tačiau perėjimas nuo pradinio narkotikų vartojimo prie kompulsinio vartojimo ir priklausomybės apima ilgalaikius daugelio neuroninių tinklų pokyčius. [9] Manoma, kad vienas iš jų yra susijęs su poslinkiu nuo nucleus accumbens, tarpininkaujančio ūminiu sustiprinamuoju poveikiu, prie nugaros striatum įdarbinimo ir įpročių formavimo [10]. Todėl dopaminerginis aktyvumas nugaros juostoje taip pat gali būti paauglių pažeidžiamumo veiksnys.
Gyvūnų modeliai yra labai svarbūs mūsų supratimui apie šiuos mechanizmus, o amžiaus langas, nustatytas kaip graužikų paauglystė, yra tarp 28 ir 50 metų po gimdymo dienos (PND). [11]. Ankstesni tyrimai parodė, kad paauglių žiurkėms yra mažesnis bazinis dopamino išsiskyrimo greitis, mažesnis lengvai išsiskiriančio dopamino kiekis, bet taip pat didesnis dopamino kaupimasis, palyginti su suaugusiųjų.s [12]. Taip pat buvo pasiūlyta, kad nepaisant sumažėjusio dopamino išsiskyrimo bazinėmis sąlygomis, paaugliai gali išsiskirti daugiau dopamino, jei juos stimuliuoja farmakologiniai iššūkiai. [13]. Todėl pirmasis šio tyrimo tikslas buvo patikrinti padidėjusio dopamino išsiskyrimo hipotezę po farmakologinio poveikio paaugliams. Dopamino išsiskyrimas ir įsisavinimas buvo tiriamas naudojant chronoamperometrinius dopamino įrašus kartu su amfetamino poveikiu ankstyvoms ir vėlyvoms paauglėms, taip pat suaugusioms, išaugintoms Wistar žiurkėms.
Antrasis šio tyrimo tikslas buvo ištirti savanoriško alkoholio vartojimo poveikį aplinkai paauglystėje. To priežastis buvo ta, kad ankstesni tyrimai rodo, kad paauglystės laikotarpiu aplinkos veiksniai, pvz., intraperitoniniu būdu vartojamas alkoholis, padidina bazinį tarpląstelinį dopamino kiekį. [14] tuo tarpu savanoriškas alkoholio vartojimas alkoholiui pirmenybę teikiančioms P žiurkėms padidina dopamino pasisavinimą, nepaveikdamas bazinio tarpląstelinio lygio [15]. Šių tyrimų neatitikimus galima paaiškinti daugeliu veiksnių, tokių kaip vartojimo būdas, dozė, žiurkės padermė ir tikslus laikotarpis, tačiau abiem atvejais paauglių alkoholio vartojimas turi įtakos dopamino dinamikai ir tai verta toliau tirti.
Medžiagos ir metodai
Etikos ataskaita
Visi eksperimentai su gyvūnais buvo atlikti pagal Upsalos gyvūnų etikos komiteto patvirtintą protokolą ir vadovaujantis Švedijos teisės aktų dėl eksperimentų su gyvūnais (Gyvūnų gerovės įstatymas SFS1998:56) ir Europos Bendrijų Tarybos direktyvos (86/609/EEB) gairėmis.
Gyvūnai
Nėščios Wistar žiurkės (RccHan: WI, Harlan Laboratories BV, Horst, Nyderlandai) atvyko į gyvūnų skyrių 16 nėštumo dieną. Gyvūnai buvo atvežti partijomis per kelias savaites, kad būtų galima pritaikyti chronoamperometrinių įrašų laiką. Užtvankos buvo laikomos pavieniui makroloniniuose narvuose (59 cm × 38 cm × 20 cm) su granulėmis (R36 tipas; Lantmännen, Kimstadas, Švedija) ir vandeniu iš čiaupo. ad libitum. Narvuose buvo medžio drožlių patalynė ir popieriaus lakštai (40 × 60 cm; Cellstoff, Papyrus), juos kartą per savaitę keitė gyvūnų priežiūros personalas. Gyvūnų patalpoje buvo palaikoma pastovi temperatūra (22 ± 1 ° C) ir drėgmė (50 ± 10 %) pagal įprastą 12 valandų šviesos / tamsos ciklą, kai apšvietimas buvo įjungtas 06:00 val. Visuose kambariuose buvo maskuojamas foninis triukšmas, kad būtų kuo mažiau netikėtų garsų, galinčių trikdyti gyvūnus.
Eksperimento plano apžvalgą galite rasti 1 pav. Vados, gimusios tą pačią dieną (pogimdyminė diena (PND) 0), buvo kryžmiškai globojamos, įtraukiant 6 patinus ir 4 pateles, kad būtų galima kontroliuoti motinos įtampą gabenant, motinos elgesį ir genetiką. Jaunikliai buvo nujunkyti 22 PND ir buvo laikomi 3 narve iki PND 28 (± 1 diena) arba PND 42 (± 1 diena), kai buvo atlikti chronoamperometriniai įrašai. Šiame tyrime toliau buvo naudojami tik patinai. Trisdešimties žiurkių patinų grupei buvo suteikta savanoriška prieiga prie 20% etanolio pagal dviejų butelių laisvo pasirinkimo paradigmą nuo PND28 iki PND65. Gyvūnams buvo suteikta galimybė 24 valandas gerti etanolį tris dienas iš eilės per savaitę, ty nuo antradienio iki ketvirtadienio šešias savaites, iš viso 18 seansų. Siekiant išmatuoti etanolio suvartojimą, buteliai buvo pasverti prieš ir po kiekvieno seanso ir apskaičiuoti gramai gryno etanolio kilogramui kūno svorio. Butelių pozicijos buvo keičiamos tarp seansų, kad būtų išvengta pozicijos pasirinkimo. Etanolį geriantys gyvūnai buvo laikomi atskirai nuo 28 PND iki 70 PND. Buvo atrinkti gyvūnai, kurių bendras suvartojamas etanolis buvo didžiausias (g/kg), ir elektrocheminiai įrašai buvo atlikti esant 70 PND (± 2 dienos). Amžius atitinkančios vandens gėrimo kontrolės priemonės taip pat buvo laikomos atskirai per tą patį laikotarpį.
1 pav. Eksperimento planas.
E = etanolio gėrimas, PND = diena po gimdymo, W = vandens gėrimas.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g001
Chronoamperometriniai dopamino įrašai In in vivo
Medžiagos.
Inaktinas, 5% Nafion tirpalas, dopamino hidrochloridas, L-askorbo rūgštis, kalio chloridas, natrio chloridas, natrio fosfatas, kalcio chloridas ir d-amfetamino sulfatas buvo gauti iš Sigma-Aldrich, LLC (St Louis, MO, JAV). Lipnus Kerr vaškas buvo gautas iš DAB LAB AB (Upplands Väsby, Švedija). Anglies pluošto mikroelektrodai (SF1A; 30 µm išorinis skersmuo × 150 µm ilgis) buvo įsigyti iš Quanteon, LLC (Nicholasville, KY, JAV), etaloninio elektrodo sidabrinė viela (200 µm, izoliuota teflonu) buvo nupirkta iš AM Systems Inc. Carlborg, WA, JAV) ir stikliniai kapiliarai (vidinis skersmuo 0.58 mm) mikropipetėms buvo įsigyti iš World Precision Instruments Ltd (Stevenage, JK).
Chirurgija.
Dopamino įrašai buvo atlikti esant PND 28 (± 1 diena), PND 42 (± 1 diena) arba PND 70 (± 2 dienos). Chirurgija buvo atlikta prieš pat elektrocheminius įrašus. Kūno temperatūrai palaikyti buvo naudojamas vandens cirkuliacinis šildymo padas (Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, Niujorkas). Gyvūnai buvo anestezuoti 125 mg/kg inaktinu intraperitoniniu būdu (ip) ir patalpinti į stereotaksinį rėmą (Stoelting Co., Wood Dale, IL, JAV). Kaukolėje buvo išgręžta skylė virš elektrodo įrašymo vietos, o kita skylė buvo išgręžta toliau nuo įrašymo vietos, kad būtų galima įdėti Ag / AgCl etaloninį elektrodą.
Didelės spartos chronoamperometriniai dopamino išsiskyrimo ir įsisavinimo įrašai.
Didelės spartos chronoamperometriniai matavimai (1 Hz atrankos dažnis, bendras 200 ms) buvo atlikti naudojant FAST16-mkII įrašymo sistemą (Fast Analytical Sensing Technology, Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, JAV) pagal anksčiau aprašytą procedūrą. [16]. Anglies pluošto mikroelektrodai (SF1A) buvo padengti trimis Nafion sluoksniais, 5 minutes kaitinant 200 °C temperatūroje prieš pirmą dengimą ir po kiekvieno dengimo. [17]. Tada elektrodai buvo kalibruojami in vitro 0.05 M fosfato buferiniame fiziologiniame tirpale, siekiant nustatyti selektyvumą, aptikimo ribą (LOD) ir nuolydį prieš naudojimą in vivo [16]. Mikroelektrodai parodė linijinį atsaką į nuoseklų dopamino (2–6 µM) pridėjimą, o vidutinis koreliacijos koeficientas (R2) buvo 0.999±0.0003. Vidutinis visų šiame tyrime naudotų elektrodų selektyvumas buvo 14482±3005 µM dopamino atžvilgiu, palyginti su askorbo rūgštimi. Vidutinis LOD buvo 0.026±0.004 µM dopamino, o vidutinis nuolydis –1.00±0.03 nA/µM dopamino. Vidutinis redukcijos/oksidacijos santykis, išmatuotas per kontrolinį didžiausią dopamino atsaką, buvo 0.67±0.02, o tai rodo, kad buvo aptiktas daugiausia dopamino. [17]. Sidabrinė viela buvo padengta ir naudojama kaip in vivo Ag/AgCl etaloninis elektrodas [18].
In vivo eksperimentinis protokolas.
Mikropipetė (vidinis skersmuo 10–15 µm) buvo užpildyta izotoniniu kalio chlorido tirpalu (120 mM KCl, 29 mM NaCl, 2.5 mM CaCl).2· 2H2O) (pH 7.2–7.4) naudojant pipetės užpildymo adatą (28G, World Precision Instruments, Aston, JK). Mikropipetė buvo pritvirtinta maždaug 150–200 µm atstumu nuo anglies pluošto antgalio, naudojant lipnų vašką. Elektrodas stereotaksiškai įdėtas į nugaros striatumą, AP: +1.0 mm, L: +3.0 mm nuo bregmos, smilkinio strypas sureguliuotas pagal amžių ir svorį [19], [20]. Iš pradžių elektrodas buvo uždėtas nugaroje (–3.0 mm) į įrašymo vietą, naudojant mikromanipuliatorių (Narishige International Ltd, Londonas, JK), ir leista pasiekti stabilią bazinę liniją maždaug 45–60 min., prieš nuleidžiant iki gylis –4.0 mm nuo bregmos. Tada elektrodui buvo leista dar 5–10 minučių stabilizuotis įrašymo vietoje, kol buvo nustatytas vienos kalio chlorido injekcijos poveikis dopamino išsiskyrimui. Kalio tirpalas buvo naudojamas lokaliai naudojant slėgio išmetimą, valdomą PicoSpritzer III (Parker Hannifin Corporation, Pine Brook, NJ, JAV), o slėgis (10–20 psi) ir laikas (0.5–1.0 s) buvo sureguliuoti taip, kad būtų tiekiamas 100 nl. kalio tirpalas, matuojamas chirurginiu mikroskopu su okuliaro tinkleliu [21].
Kalio sukeltas išsiskyrimas buvo naudojamas kartu su amfetamino ar fiziologinio tirpalo injekcijomis po oda. Buvo sukurtos trys panašios amplitudės etaloninės smailės, 10 minučių atstumu. Praėjus penkioms minutėms po paskutinio etaloninio piko, žiurkėms buvo duodama arba 2 mg/kg amfetamino, arba lygiavertis kiekis fiziologinio tirpalo (1 ml/kg), o po dar 5 min. vėl buvo išleidžiama kas 10 min. , 5, 15, 25 ir 35 min po sisteminės injekcijos, žr Pav. 2A už reprezentacinį pėdsaką. Amfetamino dozė buvo parinkta atsižvelgiant į elgsenos poveikį judėjimo ir savarankiško vartojimo tyrimuose [22]-[24].
2 pav. Reprezentatyvūs pėdsakai.
A) reprezentatyvus oksidacijos srovės pėdsakas žiurkėms po gimdymo 28 dieną, gavusiai amfetaminą, ir B) to paties gyvūno antrojo etaloninio piko vaizdas iš arti, parodantis, kaip buvo apskaičiuota amplitudė ir T80. Amp = amplitudė, Bazė = bazinė linija, Ref = nuoroda.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g002
Elektrodų išdėstymo ir išimčių patikrinimas.
Po eksperimento elektrodai buvo nupjauti ir palikti vietoje, o smegenys buvo užšaldytos. Vieta buvo patikrinta perpjovus sušaldytas smegenis. Iš 12 gyvūnų, esančių PND28, 1 buvo neįtrauktas dėl netinkamo patalpinimo, o 2 – dėl įrašymo klaidų. Iš 12 gyvūnų, kurių PND 42, 1 gyvūnas buvo neįtrauktas dėl netinkamo patalpinimo. Iš 16 gyvūnų, kurių PND 70, 3 buvo neįtraukti dėl įrašymo klaidų. Iš 16 etanolį geriančių gyvūnų, kurių PND 70, 2 buvo neįtraukti dėl įrašymo klaidų. Įrašymo klaidos apima pipetės užsikimšimą ir elektros sutrikimus, pvz., elektros energijos tiekimo sutrikimus ir bendrojo įrašymo įrenginio maitinimo tiekimo sutrikimus.
Duomenų analizė.
Maksimali sukeltų smailių amplitudė ir laikas, per kurį smailė sumažėja iki 80 % amplitudės (T80), buvo apskaičiuoti naudojant FAST Analysis programinės įrangos 4.4 versiją (Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, JAV), žr. Pav. 2B už reprezentacinį pėdsaką. Buvo apskaičiuotas trijų etaloninių smailių vidurkis ir apskaičiuotas šių smailių procentas smailėms po injekcijos. Statistinei analizei buvo naudojama pakartotinių matavimų dispersijos analizė (ANOVA), siekiant palyginti chronoamperometrinius duomenis per tam tikrą laiką tarp amžiaus ar geriamųjų grupių ir gydymo (fiziologinio tirpalo arba amfetamino), po to buvo atliktas Fišerio mažiausiai reikšmingo skirtumo (LSD) post-hoc testas. Etanolio suvartojimo duomenims, kurie nebuvo įprastai paskirstyti, buvo naudojama Friedman ANOVA. Statistinė analizė buvo atlikta naudojant Statistica 10 (StatSoft Inc., Talsa, OK, JAV). Skirtumai buvo laikomi statistiškai reikšmingais, kai p<0.05.
rezultatai
Poveikis, priklausantis nuo amžiaus
Atskaitinių amplitudių skirtumai tarp amžiaus grupių parodyti 3 pav. Pakartotinė ANOVA, lygindama amžių ir laiką, parodė pagrindinį amžiaus poveikį [F(2,22) = 5.81; p = 0.009], bet nėra laiko įtakos [F(2,44) = 1.43; p = 0.25] arba bet koks sąveikos efektas tarp laiko ir amžiaus [F(4,44) = 1.70; p = 0.17].
3 pav. Etaloninės smailės amplitudės įvairiais amžiais.
Trijų etaloninių smailių amplitudės (µM) (vidurkis ± SEM) prieš gydymą amfetaminu arba fiziologiniu tirpalu trijose amžiaus grupėse; postnatalinė diena (PND) 28, 42 ir 70. **p<0.01.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g003
Nėra amžiaus įtakos [F(2,24) = 1.02; p = 0.38], laikas [F(2,48) = 0.94; p = 0.40] arba laikas ir amžius [F(4,48) = 0.22; p = 0.93] buvo rasta pamatinėms T80 reikšmėms. Vidutinių (SEM) etaloninių T80 reikšmių vidutinė ± standartinė paklaida buvo 17.3±1.3 PND 28, 19.5±0.9 PND 42 ir 20.5±1.0 PND70.
Amfetamino atsako amplitudės skirtumai tarp amžiaus grupių parodyti 4A – C pav. Gydymas amfetaminu lėmė pagrindinius amžiaus padarinius [F(2,26) = 3.95; p = 0.03], gydymas [F(1,26) = 10.77; p = 0.003] ir laikas [F(6,156) = 3.32; p = 0.004], o sąveikos poveikis tarp laiko ir amžiaus [F(12,156) = 2.23; p = 0.01], laikas ir gydymas [F(6,156) = 4.20; p<0.001], tačiau amžiaus ir gydymo sąveikos nėra [F(2,26) = 2.37; p = 0.11] arba laikas, amžius ir gydymas [F(12,156) = 0.77; p = 0.68].
4 pav. Amplitudės ir T80 atsakai laikui bėgant skirtinguose amžiuose.
Reakcija laikui bėgant po fiziologinio tirpalo arba amfetamino injekcijos po oda, procentais nuo pamatinių verčių (vidurkis ± SEM), amplitudės A) dieną po gimdymo (PND) 28, B) PND 42 ir C) PND 70 ir T80 vertės, kai D) PND 28, E) PND 42 ir F) PND 70. *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, palyginti su fiziologinio tirpalo kontroliniais preparatais, #p<0.05, palyginti su lygiaverčiu laiko tašku, kai PND 42, °p<0.05, °°p<0.01, °°°p<0.001, palyginti su lygiaverčiu laiko tašku, kai PND 70, §p <0.05, §§p <0.01, §§§p<0.001, palyginti su lygiaverčiu laiko tašku esant 28 PND.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g004
T80 atsakas į amfetaminą parodytas 4D – E pav. Pagrindinio amžiaus poveikio nebuvo [F(2,25) = 1.87; p = 0.17], tačiau gydymo poveikis buvo [F(1,25) = 26.52; p<0.001], laikas [F(6,150) = 7.70; p<0.001] ir laiko bei gydymo sąveikos efektas [F(6,150) = 12.29; p<0.001]. Sąveikos tarp amžiaus ir gydymo nebuvo [F(2,25) = 1.29; p = 0.29], laikas ir amžius [F(12,150) = 0.66; p = 0.78] ir laiko, amžiaus ir gydymo sąveikos tendencija [F(12,150) = 1.60; p = 0.098].
Savanoriškas paauglių alkoholio vartojimas
14 žiurkių, naudotų chronoamperometriniuose įrašuose, etanolio suvartojimo duomenys pateikti Lentelė 1. Friedmano ANOVA neparodė reikšmingų suvartojimo skirtumų laikui bėgant, nors buvo tendencija [χ2 = 9.80; p = 0.08] skirtumus, nulemtus antrosios savaitės suvartojimo (PND 35–37), kuris buvo šiek tiek didesnis nei kitomis savaitėmis. Friedmano ANOVA pirmenybė parodė padidėjimą laikui bėgant [χ2 = 19.7; p = 0.001], daugiausia dėl padidėjimo per pirmąsias tris savaites, žr Lentelė 1.
1 lentelė. Vidutinis, minimalus ir maksimalus alkoholio suvartojimas (g/kg/24 val.) ir pirmenybė (%) per šešias alkoholio vartojimo savaites ir vidutinis, minimalus ir didžiausias suminis suvartojamas kiekis (g) po 18 seansų.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.t001
Etaloninių amplitudių skirtumai tarp etanolio ir vandens geriamųjų grupių parodyti 5 pav. Pakartotinis ANOVA matavimas, lyginant geriamojo grupę ir laiką, parodė pagrindinį gėrimo grupės poveikį [F(1,17) = 16.22; p<0.001], bet nėra laiko įtakos [F(2,34) = 1.76; p = 0.19] arba bet koks sąveikos efektas tarp laiko ir gėrimo grupės [F(4,44) = 1.32; p = 0.28].
5 pav. Etaloninės didžiausios amplitudės vandenį arba etanolį geriantiems gyvūnams.
Trijų etaloninių smailių amplitudės (µM) (vidurkis ± SEM) prieš gydymą amfetaminu arba fiziologiniu tirpalu vandens ir etanolio gėrimų grupėse. **p<0.01, ***p<0.001.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g005
Jokio gėrimo grupės poveikio [F(1,18) = 0.04; p = 0.85], laikas [F(2,36) = 1.96; p = 0.16] arba laikas ir gėrimo grupė [F(2,36) = 0.22; p = 0.81] buvo rasta pamatinėms T80 reikšmėms. Vidutinės ± SEM etaloninės T80 vertės buvo 20.5±1.0 vandenį geriančioms žiurkėms ir 19.1±1.3 etanolį geriančioms žiurkėms.
Reakcija į amfetaminą etanolį ir vandenį geriančiose grupėse parodyta 6 pav. Dėl amplitudės, kaip parodyta Pav. 6A, buvo gydymo poveikio tendencija [F(1,19) = 3.01; p = 0.099] ir buvo pagrindinis laiko poveikis [F(6,114) = 2.30; p = 0.04], bet jokio gėrimo grupės poveikio [F(1,19) = 0.39; p = 0.54] arba bet koks sąveikos poveikis tarp gydymo ir gėrimo grupės [F(1,19) = 0.83; p = 0.37] arba laikas ir gydymas [F(6,114) = 1.13; p = 0.35], laikas ir gėrimo grupė [F(6,114) = 0.44; p = 0.85] arba laikas, gydymo ir gėrimo grupė [F(6,114) = 0.27; p = 0.95].
6 pav. Vandenį arba etanolį geriančių gyvūnų amplitudės ir T80 atsakai laikui bėgant.
Reakcija laikui bėgant po poodinių (sc) fiziologinio tirpalo arba amfetamino injekcijų, procentais nuo etaloninių verčių (vidurkis ± SEM), A) amplitudėms ir B) T80 vertėms vandens (W) arba etanolio (E) gėrimų grupėse . *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, lyginant su fiziologinio tirpalo kontroline grupe.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g006
T80 vertėms, Pav. 6B, buvo pagrindinis gydymo poveikis [F(1,19) = 17.35; p<0.001] ir laikas [F(6,114) = 2.42; p = 0.03], o sąveikos efektas tarp laiko ir gydymo [F(6,114) = 10.28; p<0.001]. Nebuvo jokio gėrimo grupės poveikio [F(1,19) = 0.33; p = 0.57] arba bet koks sąveikos efektas tarp gydymo ir gėrimo grupės [F(1,19) = 0.76; p = 0.40], laikas ir gėrimo grupė [F(6,114) = 1.66; p = 0.14] arba laikas, gydymo ir gėrimo grupė [F(6,114) = 1.75; p = 0.12].
Diskusija
Nuo amžiaus priklausomas poveikis dopamino išsiskyrimui ir įsisavinimui buvo tiriamas bazinėmis sąlygomis ir reaguojant į amfetaminą ankstyvoms ir vėlyvoms paauglėms, taip pat suaugusioms žiurkėms. Taip pat buvo ištirtas alkoholio vartojimo poveikis paauglystėje ir, mūsų žiniomis, yra pirmasis tyrimas, tiriantis savanoriškai geriančių paauglių žiurkių išsiskyrimą ir įsisavinimą naudojant chronoamperometrinį metodą.
Poveikis, priklausantis nuo amžiaus
Nuo amžiaus priklausomi etaloninių amplitudių skirtumai sutampa su ankstesniu tyrimu, naudojant voltamperometriją kartu su elektrine stimuliacija, kuris parodė, kad suaugusios žiurkės stimuliuojant išsiskyrė daugiau dopamino nei jaunos žiurkės. [12]. Stamfordo (1989) naudotas paauglystės laikotarpis buvo maždaug 30 PND, tačiau nuo tada tyrimai parodė, kad maždaug 40–45 PND yra bazinio tarpląstelinio dopamino lygio smailės. [25]-[27] ir dopamino receptorius D2 Tankis [28], o tirozino hidroksilazės lygis yra mažesnis nei ankstyvoje paauglystėje, ir pilnametystėje [29]. Todėl į dabartinį tyrimą buvo įtraukti du paauglystės laiko taškai, PND 28 ir PND 42, atitinkantys ankstyvą ir vėlyvą paauglystę. [11]. Vėlyvųjų paauglių gyvūnų amplitudės buvo tarpinės ir amplitudės ankstyvoje paauglystėje ir pilnametystėje, o tai rodo, kad vystymasis nuo paauglystės iki pilnametystės buvo susijęs su laipsnišku dopamino išsiskyrimo pajėgumo didėjimu, reaguojant į kalio chloridą nugaros juostoje. Tai atitinka pranešimus apie padidėjusį tarpląstelinį dopamino kiekį branduolyje suaugus, palyginti su paauglystėje. [30], [31]. Kaip minėta anksčiau, kai kurie tyrimai taip pat rodo, kad didžiausias lygis yra 45 PND [25]-[27] ir juos galima suderinti su dabartiniu tyrimu, kai pranešama apie padidėjusį šaudymo dažnį maždaug tame pačiame PND [32], [33]. Šiame tyrime bazinis tarpląstelinis lygis nebuvo matuojamas ir gali būti, kad padidėjus šaudymo greičiui padidėja bazinis lygis be kalio sukelto išsiskyrimo piko. Be to, vienas iš tyrimų, rodančių, kad kalio sukeltas ekstraląstelinis lygis nucleus accumbens pasiekia didžiausią maždaug 42 PND. [25] prieštarauja dorsalinio striatumo duomenims iš Stamfordo (1989) ir dabartinio tyrimo, kurie rodo regioninius skirtumus.
Pasisavinimo matas, T80, neatskleidė jokių skirtumų tarp dabartinio tyrimo amžiaus, o Stamfordas (1989) nustatė, kad suaugusių žiurkių pasisavinimo greitis buvo didesnis. Tai gali lemti metodologiniai įsisavinimo matavimo skirtumai; T80 apima ir linijinę, ir kreivinę kreivės dalis, o Stamfordas naudojo linijinę kreivės dalį [34]. Šiame tyrime pasiektos koncentracijos yra tik dešimtadalis ankstesnio tyrimo koncentracijų ir Vdaugiausia todėl neturėtų būti pasiektas. Naudojant tiesinę smailės kreivės dalį, kad būtų galima apskaičiuoti įsisavinimo greitį tokiomis sąlygomis, gaunami tik nuo amplitudės priklausantys įsisavinimo rodikliai [35]. T80 pasirinktas todėl, kad atsižvelgiama į kreivinę kreivės dalį, kur dopamino koncentracija mažesnė ir jautresnė dopamino pasisavinimo blokatoriams. [35], [36]. Natūralu, kad T80 taip pat priklauso nuo amplitudės, tačiau, kaip matyti iš šio tyrimo, amplitudės skirtumai automatiškai nesukelia T80 skirtumų, o tai rodo, kad pasisavinimo ir išsiskyrimo santykis yra perkeltas į jaunesnių gyvūnų įsisavinimą. Dabartines išvadas patvirtina tyrimas, kurio metu buvo naudojama kiekybinė mikrodializė ir nenustatyta jokių skirtumų tarp ekstrahavimo frakcijos, netiesioginio įsisavinimo greičio matuoklio, žiurkių branduolyje esant 35, 45 ir 60 PND. [26].
Didesnis kalio išsiskyrimas suaugus gali būti dėl didesnio išskiriamo dopamino kiekio [12] gali būti susiję su daugybe veiksnių, pvz., nuo amžiaus priklausomi dopamino sintezės skirtumai tirozino hidroksilazei. [29], [37], vezikulinės monoamino transporterio-2 (VMAT-2) turinčios pūslelės [38], ir VMAT-2 kinetika [39], taip pat D2 receptorių genėjimas [28] ir funkcija [40]. Šie veiksniai taip pat galėtų padėti paaiškinti padidėjusias amplitudes, pastebėtas po amfetamino ankstyvų paauglių gyvūnams. Vėlgi, dabartiniai duomenys atitinka duomenis, rodančius didesnį dopamino išsiskyrimo jaunikliams padidėjimą, palyginti su suaugusiais gyvūnais, reaguojant į nomifensiną. [12] tai rodo, kad ankstyvos paauglystės žiurkės turi proporcingai didesnį rezervuarą, kuris gali išsiskirti stimuliuojant psichoaktyviomis medžiagomis. Tai dar labiau patvirtina duomenys, rodantys didesnį stimuliuojamo tarpląstelinio dopamino padidėjimą po amfetamino paauglių gyvūnams. [22]. Tačiau yra mikrodializės tyrimų, rodančių mažesnį tarpląstelinį dopamino kiekį po amfetamino paaugliams, palyginti su suaugusiaisiais. [30], [37], kurie dar kartą pabrėžia, kad stimuliuojamo išsiskyrimo padidėjimo galimybė nebūtinai reiškia tarpląstelinio lygio padidėjimą ir kad įvairūs metodai gali pridėti papildomos informacijos.
Po amfetamino nuo amžiaus priklausomo poveikio T80 nenustatyta, o tai rodo, kad amfetaminas daro panašų poveikį dopamino įsisavinimui bet kokio amžiaus. Tai dar kartą patvirtina Stamfordo (1989 m.) rezultatai, kurie nerodo jokių skirtumų tarp amžiaus grupių įsisavinimo blokados po nomifensino laipsnio. Taip pat yra tyrimų, rodančių, kad su amžiumi susiję dopamino pernešėjo struktūros ir funkcijos skirtumai yra susiję su kokaino surišimo vieta transporteryje, bet ne su amfetamino surišimo vieta. [22] tai gali reikšti, kad nuo amžiaus priklausomas amfetamino poveikis įsisavinimui neegzistuoja. Tačiau buvo tendencija, kad laikas, amžius ir gydymas sąveikauja, o tai rodo, kad laikui bėgant jie skirtingai reaguoja į amfetaminą, priklausomai nuo amžiaus. Tolesni tyrimai, tiriantys įsisavinimą naudojant egzogeninį dopaminą, taip pat galėtų padėti atskirti nuo amplitudės priklausomą įsisavinimą nuo transporterio funkcijos. [41]-[43]. Taip pat būtų svarbūs tyrimai su pabudusiomis žiurkėmis, nes dabartinis tyrimas buvo atliktas su anestezuotais gyvūnais. Naudota anestezija buvo barbitūratas tiobutabarbitalis (Inactin), teigiamas allosterinis gama-aminosviesto rūgšties (GABA) A receptorių moduliatorius, kuris sukelia ilgalaikę ir stabilią žiurkių anesteziją. [44]. GABA gali turėti skirtingą poveikį, priklausomai nuo amžiaus ir alkoholio vartojimo istorijos [45] todėl anestezija gali sąveikauti su amžiumi ar gydymu ir sukelti painiavą. Tačiau įrodyta, kad pentobarbitalis, kitas barbitūratas, mažai veikia dopamino kiekį juostoje. [46]. Be to, dabartiniame tyrime išsiskyrimas buvo sukeltas naudojant kalio chloridą ir nebuvo priklausomas nuo spontaniškų įvykių, kurie turėtų sumažinti GABAerginio tono svarbą išleidžiant. Kalbant apie dopamino įsisavinimą, yra pranešimų, kad barbitūratai gali konkrečiai paveikti dopamino įsisavinimą [47], tačiau neaišku, ar tai taip pat gali būti susiję su amžiumi ar gydymu.
Savanoriškas paauglių alkoholio vartojimas
Savanoriškas paauglių alkoholio vartojimas šešias savaites lėmė mažesnes atskaitos amplitudes, palyginti su vandens gėrimo kontrole. Amplitudės buvo panašios į ankstyvųjų paauglių žiurkių amplitudės. Kadangi poveikis buvo matomas amplitudėmis, o ne pasisavinimo laiku, galima manyti, kad alkoholis veikia veiksnius, kontroliuojančius atpalaiduojamo dopamino telkinį, o ne dopamino transporterį, ir yra duomenų, patvirtinančių nepakitusią alkoholio pasisavinimą paauglystėje. [14]. Taip pat yra mikrodializės duomenų, rodančių padidėjusį tarpląstelinį dopamino kiekį paaugliams po intraperitoninių alkoholio injekcijų. [14], [27], [48], ir tai šiek tiek prieštarauja dabartiniams sumažėjusio atpalaiduojamo dopamino išvadoms. Kaip minėta anksčiau, padidėjęs šaudymo dažnis gali būti būdas suderinti mikrodializės duomenis su dabartiniais duomenimis, tačiau tai patvirtinančių tyrimų nėra. Be to, yra tyrimų, rodančių, kad alkoholio poveikio būdas, ty savanoriškas ar priverstinis, gali turėti skirtingą poveikį neurobiologijai. [49].
Gydant amfetaminu, reikšmingų skirtumų tarp alkoholį ir vandenį geriančių grupių amplitudėse ar T80 nebuvo. Tačiau buvo tendencija turėti įtakos amplitudėms dėl alkoholio geriančiųjų grupės padidėjimo. Alkoholį geriančių žmonių grupėje atsakas į amfetaminą taip pat skiriasi, o tai gali būti dėl alkoholio vartojimo skirtumo, nors šis pokytis nėra susijęs su atsaku (duomenys nerodomi). Tai taip pat rodo šio tyrimo apribojimą, ty nebuvo matuojamas alkoholio kiekis kraujyje. Tyrimas buvo pagrįstas netrukdoma prieiga 24 valandas, o norint išmatuoti alkoholio kiekį kraujyje, prieiga turėjo būti apribota, o dėl kraujo mėginių ėmimo patiriamo streso galėjo sutrikti gyvūnų suvartojimo įpročiai. Taigi koreliacijos tarp atsako ir individualaus alkoholio kiekio kraujyje negalima atmesti. Tačiau šiame tyrime pateikti suvartojimo duomenys yra panašūs į kitus tyrimus, rodančius neurobiologinį alkoholio poveikį, naudojant panašaus amžiaus Wistar žiurkes ar vartojimo paradigmas.[50]-[52]. Tai rodo, kad ne tik asmenys, linkę vartoti daug alkoholio, bet ir kuklūs geriantys iš bendros populiacijos, rizikuoja neurobiologijos pokyčiais po savanoriško paauglių alkoholio vartojimo.
Jokie pasisavinimo laiko skirtumai po amfetamino rodo, kad paauglių alkoholis nedaro įtakos dopamino transporterio funkcijai, reaguodamas į amfetaminą, bet taip pat būtų naudingas tyrimas naudojant egzogeninį dopaminą. [41]-[43].
Be to, buvo pateikti du įdomūs pastebėjimai. Pirma, etaloninės amplitudės po alkoholio vartojimo yra panašios į tas, kurios stebimos gyvūnams alkoholio vartojimo laikotarpio pradžioje, ty PND 28. Antra, amplitudės padidėjimas po amfetamino alkoholį geriantiems gyvūnams yra panašus į vėlyvą. Paauglių žiurkės, ty PND 42. Ar šie radiniai yra susiję su pakitusiu atpalaiduojamo baseino ir dopamino saugojimo baseino vystymusi neuronuose, dar reikia išsiaiškinti. Į dabartinį tyrimą nebuvo įtraukta suaugusių alkoholį geriančių žiurkių grupė, todėl negalima daryti išvadų apie amžiams būdingo poveikio galimybę. Tačiau su amžiumi susijusių poveikių požymių galima rasti neatitikimų tarp paauglių alkoholio paveiktų žiurkių tyrimų, kurie rodo nepakitusią dopamino pasisavinimą. [14] ir suaugusių alkoholio paveiktų žiurkių ir beždžionių tyrimai, kurie rodo padidėjusį pasisavinimą, bet jokio poveikio sukeltam dopamino pertekėjimui [53], [54]. Todėl būsimiems tyrimams būtų labai įdomu ištirti alkoholio poveikį ir jo poveikio mechanizmus įvairiuose amžiuose. Tolesni veiksniai, tokie kaip tirozino hidroksilazė, dopamino receptorių tankis ir funkcija bei vezikulinis monoamino transporteris, galėtų padėti išsiaiškinti galimą alkoholio poveikį išleidžiamam dopamino telkiniui ir saugojimo fondui. Mūsų žiniomis, šie veiksniai nebuvo ištirti po paauglių alkoholio.
Išvada
Duomenys rodo, kad su amžiumi palaipsniui didėja sukeltas dopamino perteklius, o tai patvirtina ankstesnius tyrimus, rodančius, kad išleidžiamo dopamino kiekis didėja su amžiumi. Priešingai, laipsniškas sukelto perpildymo sumažėjimas su amžiumi buvo pastebėtas reaguojant į amfetaminą, palaikant proporcingai didesnį dopamino atsargų kiekį jaunesniems gyvūnams, todėl jie gali būti jautresni dopaminą atpalaiduojantiems vaistams. Paauglių alkoholio suvartojimas lėmė mažesnį perpildymą nei vandens gėrimo kontrolinės grupės, o tai rodo, kad alkoholis veikia išskiriamą dopamino rezervą, o tai gali turėti įtakos priklausomybės pažeidžiamumui ir kitoms psichikos diagnozėms, susijusioms su dopamino sistema nugaros striatumoje.
Padėka
Autoriai nori padėkoti Maritai Berg už techninę pagalbą ir dr. Martin Lundblad už metodines diskusijas.
Autoriaus įnašai
Sugalvojo ir suprojektavo eksperimentus: SP IN. Atliko eksperimentus: SP. Išanalizavo duomenis: SP IN. Parašė referatą: SP.
Nuorodos
Nuorodos
- 1. Arnett J (1992) Neatsargus elgesys paauglystėje – vystymosi perspektyva. Vystymosi apžvalga 12: 339–373.
doi: 10.1016/0273-2297(92)90013-r - 2. Yamaguchi
K, Kandel DB (1984) Narkotikų vartojimo modeliai nuo paauglystės iki jaunystės
pilnametystė: II. Progresavimo sekos. Am J Visuomenės sveikata 74: 668–672.
doi: 10.2105/ajph.74.7.668 - 3. Degenhardtas
L, Chiu WT, Conway K, Dierker L, Glantz M ir kt. (2009) Ar
„vartų“ reikalas? Asociacijos tarp narkotikų vartojimo inicijavimo tvarkos
ir priklausomybės nuo narkotikų raida Nacionaliniame gretutinių ligų tyrime
Replikacija. Psychol Med 39: 157–167.
doi: 10.1017 / s0033291708003425 - 4. Anthony JC, Petronis KR (1995) Ankstyvas narkotikų vartojimas ir vėlesnių narkotikų problemų rizika. Priklauso nuo narkotikų alkoholio 40: 9–15.
doi: 10.1016/0376-8716(95)01194-3 - 5. Dotacijos
BF, Dawson DA (1997) Amžius alkoholio vartojimo pradžioje ir jo ryšys
su DSM-IV piktnaudžiavimu alkoholiu ir priklausomybe: rezultatai iš Nacionalinio
Išilginis alkoholio epidemiologinis tyrimas. J Subst Abuse 9: 103–110.
doi: 10.1016/s0899-3289(97)90009-2 - 6. DeWit
DJ, Adlaf EM, Offord DR, Ogborne AC (2000) Amžius pirmą kartą vartojant alkoholį: a
alkoholio sutrikimų vystymosi rizikos veiksnys. Esu J Psichiatrija
157: 745-750.
doi: 10.1176 / appi.ajp.157.5.745 - 7. Ekipažai
F, He J, Hodge C (2007) Paauglių žievės vystymasis: kritinis
pažeidžiamumo priklausomybei laikotarpis. Pharmacol Biochem Behav 86:
189 199.
doi: 10.1016/j.pbb.2006.12.001 - 8. Di
Chiara G, Imperato A (1988) Narkotikai, kuriais dažniausiai piktnaudžiauja žmonės
padidinti sinapsinio dopamino koncentraciją mezolimbinėje sistemoje
laisvai judančios žiurkės. Proc Natl Acad Sci USA 85: 5274–5278.
doi: 10.1073 / pnas.85.14.5274 - 9. Koob GF, Volkow ND (2010) Priklausomybės neurocircuitry. Neuropsychopharmacology 35: 217–238.
doi: 10.1038 / npp.2009.110 - 10. Everitt
BJ, Robbins TW (2013) Nuo pilvo iki nugaros striatum:
Keičiamas požiūris į jų vaidmenį priklausomybėje nuo narkotikų. Neurosci Biobehav Rev. - 11. Spear LP (2000) Paauglių smegenys ir su amžiumi susijusios elgesio apraiškos. Neurosci Biobehav Rev 24: 417–463.
doi: 10.1016/s0149-7634(00)00014-2 - 12. Stamford
JA (1989) Žiurkių nigrostrialinio dopamino vystymasis ir senėjimas
sistema ištirta naudojant greitąją ciklinę voltamperometriją. J Neurochem 52: 1582–1589.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.1989.tb09212.x - 13. marco
EM, Adriani W, Ruocco LA, Canese R, Sadile AG ir kt. (2011 m.)
Neuro-elgesio prisitaikymas prie metilfenidato: ankstyvos problemos
paauglių ekspozicija. Neurosci Biobehav Rev 35: 1722–1739.
doi: 10.1016 / j.neubiorev.2011.02.011 - 14. Badanichas
KA, Maldonado AM, Kirstein CL (2007) Lėtinis etanolio poveikis per
paauglystėje padaugėja bazinio dopamino nucleus accumbens septi
pilnametystės metu. Alcohol Clin Exp Res 31: 895–900.
doi: 10.1111 / j.1530-0277.2007.00370.x - 15. Sahr
AE, Thielen RJ, Lumeng L, Li TK, McBride WJ (2004) Ilgalaikis
mezolimbinės dopamino sistemos pokyčiai po paauglystės
Alkoholį mėgstančios žiurkės geria etanolį. Alcohol Clin Exp Res 28:
702 711.
doi: 10.1097/01.alc.0000125344.79677.1c - 16. Littrell
OM, Pomerleau F, Huettl P, Surgener S, McGinty JF ir kt. (2012)
Padidėjęs dopamino transporterio aktyvumas vidutinio amžiaus heterozigotiniame Gdnf
pelėms. Neurobiol Aging 33: 427 e421–414. - 17. Gerhardt
GA, Hoffman AF (2001) Įrašymo laikmenos sudėties poveikis
Nafion dengtų anglies pluošto mikroelektrodų atsakai, išmatuoti naudojant
didelės spartos chronoamperometrija. J Neurosci Methods 109: 13-21.
doi: 10.1016/s0165-0270(01)00396-x - 18. Lundbladas
M, af Bjerken S, Cenci MA, Pomerleau F, Gerhardt GA ir kt. (2009 m.)
Lėtinis protarpinis gydymas L-DOPA sukelia dopamino pokyčius
paleisti. J Neurochem 108: 998–1008.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05848.x - 19. Paxinos G, Watson C (2007) Žiurkės smegenys stereotaksinėse koordinatėse. Niujorkas: Academic Press.
- 20. Sherwood
NM, Timiras PS (1970) Stereotaksinis besivystančių žiurkių smegenų atlasas.
Berkeley, Kalifornijos universiteto leidykla. 209 p. (p. 214–203 iliustr.) p. - 21. Beate
MN, Gerhardt GA (1992) Regioninis senėjimo poveikis dopaminerginiam poveikiui
funkcija Fischer-344 žiurkėje. Neurobiol Aging 13: 325–332.
doi: 10.1016/0197-4580(92)90046-z - 22. Vaikštynė
QD, Morris SE, Arrant AE, Nagel JM, Parylak S ir kt. (2010) Dopaminas
įsisavinimo inhibitoriai, bet ne dopamino atpalaidatoriai, skatina didesnį jo padidėjimą
žiurkių paauglių motorinis elgesys ir ekstraląstelinis dopaminas nei žiurkių
suaugusių žiurkių patinų. J Pharmacol Exp Ther 335: 124–132.
doi: 10.1124 / jpet.110.167320 - 23. kabliukai
MS, Jones GH, Neill DB, Justice JB Jr (1992) Individualūs skirtumai
amfetamino jautrinimas: nuo dozės priklausomas poveikis. Pharmacol Biochem
Behav 41: 203–210.
doi: 10.1016/0091-3057(92)90083-r - 24. Dellu
F, Piazza PV, Mayo W, Le Moal M, Simon H (1996) Naujovės ieškojimas
žiurkės – biologinės elgsenos ypatybės ir galimas ryšys su
Sensacijų ieškantis žmogaus bruožas. Neuropsichobiologija 34: 136–145.
doi: 10.1159 / 000119305 - 25. Nakano
M, Mizuno T (1996) Su amžiumi susiję medžiagų apykaitos pokyčiai
neurotransmiteriai žiurkės striatumoje: mikrodializės tyrimas. Mech senėjimas
Dev 86: 95–104.
doi: 10.1016/0047-6374(95)01680-5 - 26. Badanichas
KA, Adler KJ, Kirstein CL (2006) Paaugliai skiriasi nuo suaugusiųjų
Kokaino sąlygotos vietos pirmenybė ir kokaino sukeltas dopaminas
nucleus accumbens septi. Eur J Pharmacol 550: 95–106.
doi: 10.1016 / j.ejphar.2006.08.034 - 27. Philpot
RM, Wecker L, Kirstein CL (2009) Pakartotinis etanolio poveikis per
paauglystėje keičiasi dopaminerginės išeigos vystymosi trajektorija
iš nucleus accumbens septi. Int J Dev Neurosci 27: 805-815.
doi: 10.1016/j.ijdevneu.2009.08.009 - 28. Teicher
MH, Andersen SL, Hostetter JC Jr (1995) Dopamino receptorių įrodymai
genėjimas tarp paauglystės ir pilnametystės striatum, bet ne branduolyje
accumbens. Brain Res Dev Brain Res 89: 167–172.
doi: 10.1016/0165-3806(95)00109-q - 29. Mathews
IZ, Waters P, McCormick CM (2009) Sumažėjusio jautrumo pokyčiai
ūminis amfetaminas ir tirozino hidroksilazės amžiaus skirtumai
žiurkių patinų ir patelių imunoreaktyvumas smegenyse paauglystėje.
Dev Psychobiol 51: 417-428.
doi: 10.1002/dev.20381 - 30. Laviola
G, Pascucci T, Pieretti S (2001) Striatalinis dopamino jautrinimas
D-amfetaminas paauglystėje, bet ne suaugusioms žiurkėms. Pharmacol Biochem
Behav 68: 115–124.
doi: 10.1016/s0091-3057(00)00430-5 - 31. Gazzara
RA, Andersen SL (1994) Apomorfino sukeltų pakitimų ontogenija
neostriatalinis dopamino išsiskyrimas: poveikis kalio sukeltam išsiskyrimui.
Neurochem Res 19: 339-345.
doi: 10.1007/bf00971583 - 32. McCutcheon JE, Marinelli M (2009) Amžius svarbu. Eur J Neurosci 29: 997–1014.
doi: 10.1111 / j.1460-9568.2009.06648.x - 33. Wong
WC, Ford KA, Pagels NE, McCutcheon JE, Marinelli M (2013) Paaugliai
yra labiau pažeidžiami priklausomybės nuo kokaino: elgesio ir
elektrofiziologiniai įrodymai. J Neurosci 33: 4913–4922.
doi: 10.1523/jneurosci.1371-12.2013 - 34. Stamford
JA, Kruk ZL, Millar J, Wightman RM (1984) Striatalinis dopamino įsisavinimas
žiurkė: in vivo analizė naudojant greitą ciklinę voltamperometriją. Neurosci Lett 51:
133 138.
doi: 10.1016/0304-3940(84)90274-x - 35. Wightman
RM, Zimmerman JB (1990) Dopamino ekstraląstelinės koncentracijos kontrolė
žiurkės striatum impulsų srautu ir įsisavinimu. Brain Res Brain Res Rev 15:
135 144.
doi: 10.1016/0165-0173(90)90015-g - 36. Zahniseris
NR, Dickinson SD, Gerhardt GA (1998) Didelės spartos chronoamperometrinis
elektrocheminiai dopamino klirenso matavimai. Metodai Enzymol 296:
708 719.
doi: 10.1016/s0076-6879(98)96050-5 - 37. Matthews
M, Bondi C, Torres G, Moghaddam B (2013) Sumažintas presinapsinis dopamino kiekis
aktyvumas paauglių nugaros juostoje. Neuropsichofarmakologija 38:
1344 1351.
doi: 10.1038 / npp.2013.32 - 38. Truong
JG, Wilkins DG, Baudys J, Crouch DJ, Johnson-Davis KL ir kt. (2005 m.)
Nuo amžiaus priklausomi metamfetamino sukelti vezikulinio monoamino pokyčiai
transporterio-2 funkcija: poveikis neurotoksiškumui. J Pharmacol Exp
Ther 314: 1087–1092.
doi: 10.1124 / jpet.105.085951 - 39. Volz
TJ, Farnsworth SJ, Rowley SD, Hanson GR, Fleckenstein AE (2009)
Nuo amžiaus priklausomi dopamino transporterio ir vezikuliniai skirtumai
monoamino transporterio-2 funkcija ir jų reikšmė
metamfetamino neurotoksiškumas. Sinapsė 63: 147–151.
doi: 10.1002 / syn.20580 - 40. Benoit-Marand
M, O'Donnell P (2008) D2 dopamino moduliavimas kortikoakubenams
sinapsinės reakcijos kinta paauglystėje. Eur J Neurosci 27:
1364 1372.
doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06107.x - 41. Cass
WA, Gerhardt GA (1995) Dopamino įsisavinimo žiurkėse įvertinimas in vivo
medialinė prefrontalinė žievė: palyginimas su nugaros striatum ir branduoliu
accumbens. J Neurochem 65: 201–207.
doi: 10.1046 / j.1471-4159.1995.65010201.x - 42. Cass
WA, Zahniser NR, Flach KA, Gerhardt GA (1993) Egzogeninio klirensas
dopaminas žiurkės nugaros juostoje ir nucleus accumbens: vaidmuo
lokaliai taikomų absorbcijos inhibitorių metabolizmas ir poveikis. J Neurochem
61: 2269-2278.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.1993.tb07469.x - 43. Malūnininkas
EM, Pomerleau F, Huettl P, Russell VA, Gerhardt GA ir kt. (2012) The
spontaniškai hipertenzija ir Wistar Kyoto žiurkių ADHD modeliai
subregioniniai dopamino išsiskyrimo ir įsisavinimo skirtumai juostoje
ir nucleus accumbens. Neurofarmakologija 63: 1327–1334.
doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.08.020 - 44. Fish RE (2008) Anestezija ir analgezija laboratoriniuose gyvūnuose. San Diegas: Academic Press.
- 45. Sidabrinis
MM (2014) GABA indėlis į reakciją į alkoholį per
paauglystė: ikiklinikinių ir klinikinių tyrimų įžvalgos. Pharmacol
Ther. - 46. Semba
K, Adachi N, Arai T (2005) Serotonerginės veiklos palengvinimas ir
žiurkių amnezija, kurią sukelia intraveniniai anestetikai. Anesteziologija 102:
616 623.
doi: 10.1097 / 00000542-200503000-00021 - 47. Keita
H, Lecharny JB, Henzel D, Desmonts JM, Mantz J (1996) Ar slopina
dopamino įsisavinimas, susijęs su hipnotizuojančiu iv anestetikų poveikiu? Br
J Anaesth 77: 254–256.
doi: 10.1093/bja/77.2.254 - 48. Pascual
M, Boix J, Felipo V, Guerri C (2009) Pakartotinis alkoholio vartojimas
paauglystėje sukelia pokyčius mezolimbinėje dopaminerginėje ir
glutamatergines sistemas ir skatina suaugusių žiurkių alkoholio vartojimą. J
Neurochem 108: 920-931.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05835.x - 49. Spanagel R (2003) Alkoholio priklausomybės tyrimas: nuo gyvūnų modelių iki klinikų. Best Pract Res Clin Gastroenterol 17: 507–518.
doi: 10.1016/s1521-6918(03)00031-3 - 50. Adermarkas
L, Jonsson S, Ericson M, Soderpalm B (2011) Protarpinis etanolis
vartojimas slopina endokanabinoidų signalus dorsolaterinėje dalyje
žiurkės striatum. Neurofarmakologija 61: 1160–1165.
doi: 10.1016 / j.neuropharm.2011.01.014 - 51. García-Burgos
D, González F, Manrique T, Gallo M (2009) Etanolio vartojimo modeliai
įsigyjamos iki paauglystės, paauglės ir suaugusios Wistar žiurkės,
priežiūra ir į atkrytį panašios sąlygos. Alkoholizmas: Klinikinis ir
Eksperimentiniai tyrimai 33: 722–728.
doi: 10.1111 / j.1530-0277.2008.00889.x - 52. Steenslandas
P, Fredriksson I, Holst S, Feltmann K, Franck J ir kt. (2012) The
monoamino stabilizatorius (-)-OSU6162 sumažina savanorišką etanolio vartojimą ir
etanolio sukeltas dopamino išsiskyrimas nucleus accumbens. Biol Psichiatrija
72: 823-831.
doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.06.018 - 53. Budyginas
EA, John CE, Mateo Y, Daunais JB, Friedman DP ir kt. (2003) Lėtinis
etanolio poveikis keičia presinapsinę dopamino funkciją striatum
beždžionės: preliminarus tyrimas. Synapse 50: 266–268.
doi: 10.1002 / syn.10269 - 54. Budyginas
EA, Oleson EB, Mathews TA, Lack AK, Diaz MR ir kt. (2007) Effects of
lėtinis alkoholio poveikis dopamino įsisavinimui žiurkės nucleus accumbens ir
caudate putamen. Psychopharmacology (Berl), 193: 495–501.
doi: 10.1007/s00213-007-0812-1
;