PASTABOS: ankstyvas eksperimentas, rodantis, kad dopaminas veikia DeltaFosb lygį.
Eur J Neurosci. 1996 Feb; 8 (2): 365-81.
Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hope BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS.
Šaltinis
Otavos universiteto Farmakologijos katedra, Otava, Ontarijas, Kanada K1H 8M5.
Abstraktus
Naudojant antikūną, kuris atpažįsta visų žinomų betarpiškų ankstyvųjų genų fos šeimos produktus, buvo įrodyta, kad sunaikinus nigrostriatalio kelią 6-hidroksidopamino (6-OHDA) vidurinio priekinių smegenų pluošto pažeidimais, užsitęsia (> 3 mėnesių) padidėjęs Fos tipo imunoreaktyvumas striatume. Taikydami retrogradinio trakto sekimo metodus, mes jau anksčiau įrodėme, kad šis Fos tipo imunoreaktyvumo padidėjimas vyrauja striato neuronuose, kurie projektuojasi į globus pallidus. Šiame tyrime Western blotai buvo atlikti su branduolių ekstraktais iš nepažeisto ir denervuoto 6-OHDA pažeistų žiurkių striatumo, siekiant nustatyti Fos imunoreaktyvių baltymų pobūdį. Praėjus maždaug 6 savaitėms po 6-OHDA pažeidimo, denervuotame striatume sustiprėjo dviejų su Fos susijusių antigenų, kurių molekulinė masė buvo 43 ir 45 kDa, ekspresija. Lėtinis haloperidolio vartojimas taip pat selektyviai padidino šių su Fos susijusių antigenų ekspresiją, o tai rodo, kad jų indukcija po dopaminerginio denervacijos vyksta dėl sumažėjusio D2 tipo dopamino receptorių aktyvacijos.
Western blot imuninis dažymas naudojant antikūną, kuris atpažįsta FosB N-galą, parodė, kad 43 ir 45 kDa Fos susijusių antigenų, sukeltų dopaminerginiu denervavimu ir chronišku haloperidoliu, gali būti susiję su sutrumpinta FosB forma, žinoma kaip deltaFosB. Laikantis šio pasiūlymo, retrogradiniai atsekamieji eksperimentai patvirtino, kad deltaFosB panašus imunoreaktyvumas sergantį striatumą daugiausia buvo randamas striatopallidiniuose neuronuose.
Gelio perkėlimo eksperimentai parodė, kad padidėjęs AP-1 surišimo aktyvumas denervuotoje striatoje turi FosB panašų baltymą (-us), o tai rodo, kad padidėjęs deltaFosB kiekis gali sukelti tam tikrą ilgalaikio dopamino išeikvojimo AP-1 reguliuojamų genų poveikį striatopallidiniuose neuronuose. Priešingai, lėtinis D1 tipo receptorių agonisto CY 208243 vartojimas su 6-OHDA pažeistomis žiurkėmis žymiai sustiprino deltaFosB panašų imunoreaktyvumą striatų neuronuose, kurie išsikiša į materia nigra. Western blot imuninis dažymas atskleidė, kad deltaFosB ir, mažesniu mastu, FosB yra padidėjęs lėtiniu D1 tipo agonistu. Tiek kiekybinė atvirkštinės transkriptazės-polimerazės grandinės reakcija, tiek ribonukleazės apsaugos tyrimas parodė, kad deltafosB mRNR koncentracija žymiai padidėjo lėtine D1 tipo agonistų įvedimu.
Galiausiai mes ištyrėme lėtinio D1 tipo ir D2 tipo dopamino receptorių agonistų vartojimo poveikį striato deltaFosB ekspresijai 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridino (MPTP) pirminiame Parkinsono ligos modelyje. . Beždžionėms, kurios buvo pagamintos iš Parkinsonijos MPTP, šiek tiek padidėjo į deltaFosB panašių baltymų (baltymų), o diskinezijos išsivystymas, kurį sukelia lėtinis į D1 panašus agonistas, buvo labai padidėjęs į DeltaFosB panašių (-ų) baltymų (-ų). Priešingai, vartojant ilgai veikiantį D2 tipo agonistinį kabergoliną, kuris palengvino parkinsonizmo simptomus, nesukeldamas diskinezijos, deltaFosB lygis sumažėjo beveik normaliai. Kartu šie rezultatai rodo, kad lėtiniai dopaminerginio neurotransmisijos pokyčiai sukelia nuolatinį deltaFosB panašaus baltymo (-ų) padidėjimą graužikų ir primatų striatume.
;
