Šaltinis
Kecko medicinos mokyklos Ląstelių ir neurobiologijos katedra, Pietų Kalifornijos universitetas, Los Andželas, CA 90033, JAV.
Abstraktus
Anaboliniai androgeniniai steroidai (AAS) yra plačiai paplitę. Be to, AAS sustiprina, kaip rodo graužikų savivalda. Tačiau neaiški yra receptoriai, kurie perduoda stiprinantį AAS poveikį. AAS gali prisijungti prie klasikinių branduolinių androgenų receptorių (AR) arba membraninių receptorių. Mes panaudojome du metodus, norėdami ištirti branduolinių AR vaidmenį AAS savivaldoje. Pirmiausia išbandėme androgeno vartojimą žiurkėms su sėklidės feminizacijos mutacija (Tfm), kuri trukdo prisijungti prie androgenų. Jei branduoliniai AR yra būtini AAS savarankiškam administravimui, Tfm vyrai neturėtų savarankiškai administruoti androgenų. Tfm vyrai ir laukinio tipo (WT) pakratų draugai, savarankiškai paskyrę kvapnųjį androgeną dihidrotestosteroną (DHT) arba nešiklį intracerebroventrikuliniu būdu (ICV) fiksuoto santykio (FR) grafiku, iki FR5. Tiek Tfm, tiek WT žiurkėms pasireiškė pirmenybė aktyviam nosies kištukui, kai DHT buvo vartojamas savarankiškai (66.4 +/- 9.6 atsakymai / 4 h Tfm ir 79.2 +/- 11.5 už WT atsakus / 4 h), o nosies kišenės padidėjo, kai Padidėjo FR reikalavimas. Pirmenybių balai buvo žymiai mažesni žiurkėms, kurios savarankiškai vartojo tirpiklį (42.3 +/- 5.3 atsakymai / 4 h Tfm ir 19.1 +/- 4.0 atsakai / 4 h WT). Mes taip pat išbandėme DHT, konjuguoto su galvijų serumo albuminu (BSA), skyrimą C3 ir C17, o tai apsiriboja veiksmais ląstelės paviršiuje. Žiurkėnams buvo leista savarankiškai vartoti DHT, BSA ir DHT-BSA konjugatus 15 dienas FR1. Žiurkėnai parodė didelę DHT (18.0 +/- 4.1 reakcijos / 4 h) arba DHT-BSA konjugatų (10.0 +/- 3.7 atsakymai / 4 h ir 21.0 +/- 7.2 atsakymai / 4 h), bet ne BSA (2.5 +) pasirinkimą. -2.4 atsakymai / 4 h). Visi šie duomenys rodo, kad branduoliniai AR nėra reikalingi savarankiškam androgenų administravimui. Be to, savarankiškas androgenų vartojimas gali būti tarpinamas plazmos membranos receptoriais.
Autorinės teisės priklauso „2010 Elsevier Ltd.“. Visos teisės saugomos.
Anaboliniai-androgeniniai steroidai (AAS) yra piktnaudžiavimo narkotikai. Šie testosterono (T) dariniai yra naudojami atletiniams ir estetiniams tikslams (Yesalis ir kt., 1993). Šalutinis poveikis yra nuo hipogonadizmo ir ginekomastijos iki širdies ir kepenų funkcijos sutrikimo (Leshner, 2000). Be to, kaupiama įrodymų, kad piktnaudžiavimas AAS sukelia nuotaikos pokyčius (Popiežius ir Katzas, 1994), agresija (Choi ir popiežius, 1994, Kouri ir kt., 1995) ir gali sukelti priklausomybę („Brower“ ir kt., 1991, Naršyklė, 2002). Nepaisant didėjančio susirūpinimo, pagrindiniai AAS piktnaudžiavimo mechanizmai nebuvo gerai suprantami.
Žmonėms teigiama, kad pradėti naudoti AAS daugiausia skatina anaboliniai reiškiniai, tačiau kai kuriems piktnaudžiavimo atvejams galiausiai atsiranda priklausomybė (Naršyklė, 2002). Tyrimų su gyvūnais įrodymai patvirtina šią hipotezę. AAS pelėms sukelia sąlygotos vietos pasirinkimą (CPP) (Arnedo ir kt., 2000) ir žiurkėms (Packard ir kt., 1997, Packard ir kt., 1998, Frye ir kt., 2002). Be to, žiurkėnai savanoriškai vartoja AAS per burną (Mediena, 2002), į veną (Wood et al., 2004) ir intracerebroventrikulinį (ICV) savarankišką vartojimą („DiMeo and Wood“, „2004“, „Triemstra and Wood“, 2004, Wood et al., 2004, „DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“).
Nors ICV savaiminis administravimas rodo pagrindines veikimo vietas, konkretūs hormonai ir receptoriai, kurie veikia AAS stiprinimą, yra neaiškūs. Dabartiniai įrodymai rodo, kad stiprinantį T poveikį daro androgenai, o ne estrogenai po aromatinimo. Žiurkėnai vyrai savarankiškai administruoja dihidrotestosteroną (DHT; „DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“) ir kiti aromatinti androgenai (Balardas ir mediena, 2005). Be to, T savarankišką vartojimą blokuoja antiandrogeninis flutamidas (Petersas ir medis, 2004). Dabar kyla klausimas: kaip androgeninis signalas perduodamas smegenyse?
Androgenų receptoriai (AR) yra klasikinis branduolinių steroidų receptorius, veikiantis kaip transkripcijos faktorius. AR yra nedaug struktūrose, susijusiose su piktnaudžiavimu narkotikais, tokiose kaip branduolio akumuliatoriai (Acb) ir ventralinė pagrindinė sritis (VTA; Simerly ir kt., 1990, Wood ir Newman, „1999“). Taip pat yra duomenų apie lytinių liaukų steroidus, veikiančius per ląstelės paviršiaus receptorius (Mermelstein ir kt., 1996, Zhu ir kt., 2003, Thomas et al., 2006, Vasudevanas ir Pfaffas, 2007).
Dabartiniame tyrime mes panaudojome du metodus, kad nustatytume klasikinio branduolinio AR vaidmenį stiprinant androgenus. Norėdami sumažinti galimą estrogeno receptorių (ER) aktyvaciją, išbandėme DHT savarankišką vartojimą. Pirmajame eksperimente buvo tiriamos žiurkės, turinčios sėklidės feminizacijos mutaciją (Tfm), kad ICV galėtų įnešti DHT. Tfm yra vienos bazės pakaitalas, dėl kurio atsiranda trūkumų turintys AR, turintys ribotą ligando jungimąsi (Yarbrough ir kt., 1990). Tfm žiurkių patinų patinai turi išorinį patelių fenotipą dėl nepakankamos androgeninės stimuliacijos vystymosi metu (Zuloaga ir kt., 2008b). Jei norint sustiprinti AAS reikia funkcinių branduolinių AR, Tfm žiurkėms negalima savarankiškai skirti DHT. Vietoj to, Tfm žiurkės galėjo įgyti DHT savarankišką vartojimą. Antrame eksperimente mes išbandėme ICV savarankišką membranų nepralaidų DHT formų žiurkėnuose įvedimą. Kai DHT yra konjuguotas su galvijų serumo albuminu (BSA), jo veiksmai apsiriboja ląstelių paviršiaus receptoriais. Jei androgenų sutvirtinimui reikalingi branduoliniai AR, žiurkėnai neturėtų savarankiškai administruoti DSA, konjuguoto su BSA. Priešingai, žiurkėnai aiškiai nurodė, kad DHT yra konjuguotas su BSA. Šie tyrimai kartu rodo, kad branduoliniai AR nėra reikalingi savarankiškam androgenų administravimui. Vietoj to, androgenų stiprinimas gali būti vykdomas membranos AR.
Metodai ir medžiagos
Tematika
Žiurkės
Suaugę Tfm žiurkių patinai ir laukinio tipo (WT) vados buvo gauti iš kolonijos Mičigano valstijos universitete. Jų genotipas buvo patikrintas PGR, panašiai kaip anksčiau aprašyti metodai (Fernandez ir kt., 2003). Trumpai tariant, ausų spaustukai per naktį suardomi 55 ° C temperatūros lizės buferyje, kuriame yra proteinazės K, po to 95 minutes kaitinami inaktyvinant 30 °. AR buvo amplifikuotas naudojant priekinį gruntą 5′-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 ′ ir atvirkštinį gruntą 5′-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3 ′, gaunant produktą 135bp. Po to amplifikuoti mėginiai buvo suardyti Sau96I restrikcijos fermentu (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) per naktį 37 ° C temperatūroje ir paleisti 3% agarozės geliu. Šiuo restrikcijos fermentu nupjaunamas tik WT AR, paliekant dvi juostas žemiau 100bp, tuo tarpu Tfm AR lieka nepjaustytas. Tfm gyvūnai taip pat buvo patikrinti pagal fenotipą, atsižvelgiant į spenelius, moterišką anogenitalinį atstumą ir pilvo sėklides. Tfm žiurkės anksčiau buvo naudojamos įrodyti negenominį androgenų poveikį hipokampui (MacLusky ir kt., 2006). Eksperimento pradžioje WT žiurkės buvo nuo 75 iki 140 dienos amžiaus, o Tfm žiurkės buvo nuo 75 iki 138 dienos.
Žiurkėnai
Suaugę vyrai iš Sirijos žiurkėnų (130 - 150 g) buvo gauti iš Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Gyvūnai buvo laikomi atskirai atvirkštinio šviesos cikle (14L: 10D), turint maisto ir vandens ad libitum. Visas eksperimentines procedūras patvirtino atitinkamų institucijų gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetai ir vykdė vadovaudamiesi Laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo vadovas („NationalResearchCouncil“, 1996).
Chirurgija
Visi gyvūnai buvo implantuoti 22g nerūdijančio plieno kreipiamosiomis kaniulėmis (Plastic One, Roanoke, VA) į šoninį skilvelį [žiurkė: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ∼ -5.0 (Paxinos ir Watson, 1998); žiurkėnas: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 („Morin and Wood“, „2001“), mm nuo bregmos], po Na+ pentobarbitalinė anestezija (žiurkė: 50 mg / kg, žiurkėnas: 100mg / kg), kaip aprašyta anksčiau (Wood et al., 2004). Visos chirurginės procedūros buvo atliktos aseptinėmis sąlygomis pagal Laboratorinių gyvūnų priežiūros principai (NIH, 1985). Gyvūnams buvo leista atsigauti mažiausiai savaitę po operacijos prieš tyrimą.
Narkotikai
DHT, DHT-karboksimetil-oksimas (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisukcinatas (Hemis) ir DHT-Hemis-BSA buvo gauti iš Steraloids (Newport, RI). DHT-CMO-BSA metu DHT konjuguojamas su BSA C3 padėtyje, o CMO yra jungiklis. Panašiai DHT yra sujungtas su BSA C17 padėtyje per Hemisą, kad susidarytų DHT-Hemis-BSA. Abu DHT-CMO-BSA (Gatson ir kt., 2006) ir DHT-Hemis-BSA (Braunas ir Tomas, 2003) anksčiau buvo naudojami tiriant galimą androgenų poveikį plazmos membranai. DHT buvo ištirpintas vandeniniame 13% β-ciklodekstrino tirpale (βCD, Sigma-Aldrich, Sent Luisas, MO), esant 1μg / μl. Kaip nustatyta mūsų ankstesniame žiurkėnų tyrime, ši dozė sukelia tvirtą operatyvųjį atsaką ICV savaiminio vartojimo metu („DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“). DHT dariniai buvo ištirpinti tame pačiame nešiklyje, esant DHT molinei ekvivalento koncentracijai (DHT-CMO: 1.25 μg / μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg / μl, DHT-Hemis: 1.34 μg / μl, DHT-Hemis-BSA). : 8.83μg / μl). BSA (Sigma-Aldrich) buvo ištirpinta tame pačiame tirpiklyje, esant 7.45 μg / μl, kad būtų pasiekta BSA molinė ekvivalento koncentracija, kaip DHT-CMO-BSA ir DHT-Hemis-BSA. BSA turintys vaistai buvo ruošiami kiekvieną dieną prieš pat vartojimą, kad būtų išvengta skilimo, o visi tirpalai buvo filtruojami per 0.22 μm filtrą. Ankstesni tyrimai parodė, kad tik nedidelė dalis steroidų išsiskiria iš BSA (Stevis ir kt., 1999), o šio kiekio nepakanka, kad būtų sukeltas reikšmingas androgeninis poveikis („Lieberherr“ ir „Grosse“, „1994“, Gatson ir kt., 2006). Panašiai, mūsų ankstesnis tyrimas parodė, kad DHT savaime vartojamas 1.0 μg / μl, bet ne 0.1 μg / μl („DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“). Taigi mažai tikėtina, kad laisvas DHT (> 10%) atsiriboja nuo BSA pakankamu kiekiu, kad palaikytų savęs administravimą.
Aparatūra
Gyvūnams buvo leista savarankiškai leisti vaistus ar nešiklio tirpalą 4 val. Per parą, 5 dienas / savaitę per operacijų kamerą (Med Associates, St. Albans, VT), uždarytą garso slopinimo kameroje su priverstine ventiliacija. Kiekvienoje kameroje buvo įmontuotos namų lemputės, „2“ nosies kištuko skylės ir kompiuteriu valdomas švirkšto siurblys, sujungtas su skysčio pasukimu ant pusiausvyros rankos. Tirpalai iš 100 μl stiklo švirkšto gyvūnui buvo pristatyti per Tygon vamzdelius, sujungtus su šarnyru. Vamzdeliai, jungiantys pasukamąją ir ICV kaniulę, buvo apsaugoti metaline spyruokle. Vaistinis tirpalas ar transporto priemonė buvo pristatyti per vidinę 28-ga kaniulę, įdėtą į kreipiamąją kaniulę prieš pat bandymą. Kiekviena infuzija davė 1 μl tirpalo greičiu 0.2 μl / s. Skylės nosies kištukui buvo išdėstytos 6 cm atstumu nuo grindų po namo apšvietimu. Viena iš nosies kištuko skylių buvo paskirta kaip aktyvioji nosies kištuko skylė. Reakcija į šią skylę buvo užregistruota kaip aktyvus nosies kištukas (R: aktyvuota sustiprinta) ir skaičiuojama atsižvelgiant į reakcijos poreikį (nuo FR1 iki 5) infuzijai sukelti. Suleidus infuziją, namų lemputė užgesta, o aktyvioji skylė apšviesta 5 s infuzijos metu, kad būtų lengviau atskirti aktyvią nosies kištuko skylę. Buvo užfiksuotas nosies kišimas į aktyviąją skylę per šį 5 laiko tarpą, tačiau į tolesnį armavimą nebuvo atsižvelgiama (NR: aktyvus-nesutvirtintas). Reakcija į kitą nosies kištuko skylę buvo užregistruota kaip neaktyvus nosies kištukas (I), tačiau jokios infuzijos nebuvo padaryta. Aktyvios nosies kišenės skylės vieta kameros priekyje arba gale buvo subalansuota, kad būtų galima kontroliuoti šoninius pageidavimus. Duomenys buvo įrašyti naudojant WMPC programinę įrangą („Med Associate“) „Windows“ kompiuteryje.
ICV savarankiškas administravimas
Žiurkės
Savarankiškai DHT skiriant Tfm ir WT žiurkėms, didėjantis fiksuoto santykio (FR) grafikas nuo FR1 iki FR5. Iš pradžių žiurkės buvo mokomos FR1, kur buvo sustiprintas kiekvienas atsakas į aktyvų nosies kištuką. Po to atsakymų, reikalingų infuzijai gauti, skaičius padidėjo po vieną kas 5 dienas. FR5 metu infuzijai reikėjo penkių reakcijų į aktyvią nosies kištuko skylę. Apskritai, žiurkės buvo tiriamos FR1 10 dienomis ir FR2 iki FR5 (kiekviena 5 dienas), iš viso 30 dienas. Kiekvieno genotipo žiurkės buvo atsitiktinai paskirstytos į DHT arba nešiklio (Veh) grupes ir jiems buvo leista savarankiškai skirti DHT arba βCD nešiklį. Trisdešimt šešios žiurkės (nWT = 19, nTfm = 17) buvo naudojami šiame eksperimente.
Žiurkėnai
Žiurkėnai buvo tiriami pagal FR1 tvarkaraštį 15 dienoms. Ankstesniuose tyrimuose 15 dienų ICV T savaiminio vartojimo pakanka, kad būtų galima pasirinkti aktyvią nosies kišenę. Žiurkėnai buvo atsitiktinai priskirti DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8). ) arba BSA (n = 9) grupės.
Duomenų analizė
Žiurkės
Dienos aktyviojo nosies kišenės pirmenybių balai buvo nustatyti atimant neaktyvius nosies kištukus iš aktyviųjų armuotų ir aktyviųjų armuotų nosies kištukų (R + NR-I) sumos. Vidutinis pirmenybės balas buvo apskaičiuotas kiekvienam gyvūnui nuo paskutinių 5 dienų FR1 ir per FR2 iki FR5. Be to, buvo palygintas vidutinis kiekvieno gyvūno sutvirtinimų per sesiją skaičius kiekviename FR.
Duomenys buvo analizuojami naudojant 3-way ANOVA, naudojant genotipą (WT arba Tfm), vaistą (DHT arba nešiklį) ir FR grafiką (1 ∼ 5), kaip tarp tiriamųjų. FR grafikas buvo traktuojamas kaip tarpinis faktorius, nes kai kuriems gyvūnams nepavyko atlikti visų 30 dienų bandymų dienų dėl ICV kreipiamojo kaniulio užsikimšimo. Tais atvejais į analizę buvo įtraukti tik duomenys iš užpildytų tvarkaraščių. Gyvūnų, įtrauktų į kiekvieną būklę, skaičius parodytas Lentelė 1. Po trijų krypčių ANOVA buvo taikomi atitinkami žemesnės eilės ANOVA, siekiant paprastų efektų. Kai reikia, buvo naudojamas Newmano-Keulso testas, skirtas post-hoc porų palyginimams.
Lentelė 1
Žiurkėnai
Duomenims analizuoti buvo naudojamos atskiros R, NR ir I priemonės. Pirmenybė kiekvienam gyvūnui buvo nustatyta atimant vidutinį neaktyvų nosies kištuką (I) iš vidutinio aktyvaus nosies kišenės (R + NR-I). Vidutinis pirmenybės balas buvo išanalizuotas naudojant vieną imtį t- kiekvienos grupės testas prieš 0 (ty, neturintis pirmenybės). Be to, kiekvienam gyvūnui buvo apskaičiuotas gautų sutvirtinimų skaičius. Vidutinis kiekvienos vaistų grupės sutvirtinimas buvo lyginamas su BSA kontrolinės grupės tiriamųjų sustiprinimu su 2 nepriklausomais mėginiais t-testas. Gyvūnai, kuriems nepavyko atlikti mažiausiai 5 seansų, nebuvo įtraukti į analizę (po 1 iš DHT-Hemis ir DHT-Hemis-BSA grupių).
Visos statistinės analizės buvo atliktos naudojant SPSS 12 (SPSS Inc., Čikaga, IL). Atliekant analizę, p <0.05 buvo laikoma statistiškai reikšminga. Duomenys pateikiami kaip vidutinis ± SEM per 4 valandas.
rezultatai
WT ir Tfm žiurkės savarankiškai administruoja DHT
Operantas reaguoja
Fig. 1 iliustruoja vidutinį aktyvaus nosies (R + RN - I) pirmenybę kiekvienai FR DHT ir Veh grupėms. Žiurkės, kurios pačios vartojo DHT, pirmenybę teikė aktyviam nosies kištukui (73.1 ± 7.6 resp / 4h), palyginti su kontrolinės priemonės (29.8 ± 3.5 resp / 4h; F1,145 = 31.77, p <0.001). Taip pat buvo pagrindinis FR grafiko poveikis (F4,145 = 4.25, p <0.01), genotipo ir vaisto sąveika (F1,145 = 5.27, p = 0.02) ir vaistų-FR tvarkaraščio sąveika (F4,145 = 2.60, p = 0.02). Pagrindinio genotipo poveikio nebuvo, o kita sąveika nebuvo reikšminga.
1 pav
Post-hoc tyrimai atskleidė, kad žiurkėms, savarankiškai vartojančioms DHT, buvo žymiai didesnė pirmenybė nei FR grafikui (F4,73 = 4.18, p <0.01), didėjantis pirmenybė nuo FR1 (33.4 ± 4.4 resp / 4h) iki FR4 (110.8 ± 26.7 resp / 4h) ir FR5 (106.4 ± 18.9 resp / 4h). Genotipo poveikis šioje grupėje nebuvo pastebėtas (genotipo-FR schema: F4,73 = 0.13, ns; genotipas: F1,73 = 0.86, ns).
Priešingai, žiurkėms, savarankiškai vartojančioms VE, nepradėjo keistis pirmenybė, palyginti su FR grafiku (F4,72 = 0.31, ns) ir jokio genotipo-FR grafiko sąveikos (F4,72 = 0.12, ns). Kitaip nei DHT, Tfm žiurkėms šioje grupėje buvo suteikta didesnė pirmenybė nei WT (atitinkamai 42.3 ± 5.3 ir 19.1 ± 4.0 resps / 4h; F);4,72 = 11.81, p <0.01).
Užpilai
Vidutinis kiekvienoje FR gautų DHT ir veheli užpilų skaičius parodytas Pav 2. Apskritai, žiurkėms buvo suteikta daugiau infuzijų, kai leista savarankiškai vartoti DHT (26.9 ± 2.2 μg / 4h), palyginti su nešikliu (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Taip pat buvo pagrindinis FR grafiko poveikis (F1,145 = 3.32, p = 0.01) ir genotipo bei vaisto sąveika (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Visa kita sąveika ir pagrindinis poveikis nebuvo reikšmingi.
2 pav
Vidutinis dienos DHT suvartojimas per visus FR grafikus buvo panašus Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) ir WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h) žiurkėms. Abiejose grupėse narkotikų vartojimas išliko pastovus, kai padidėjo FR grafikas (F4,73 = 0.54, ns). Vykstant FR1, Tfm ir WT patinams, savarankiškai vartojamiems DHT esant atitinkamai 24.5 ± 2.3 μg / 4h ir 37.3 ± 6.7 μg / 4h. Pagal FR5 tvarkaraštį DHT savaiminis vartojimas vidutiniškai sudarė 18.3 ± 4.5 μg / 4h Tfm ir 23.9 ± 5.9 μg / 4h WT žiurkėms. Šioje grupėje nebuvo genotipo ar FR genotipo grafiko skirtumų (F1,73 = 1.17, ns; F4,73 = Atitinkamai 0.34, ns).
Ir Tfm, ir WT žiurkėms, priešingai, nešiklių infuzijų skaičius žymiai sumažėjo, kai padidėjo FR reikalavimas (F4,72 = 4.73, p <0.01). Nenuostabu, kad Tfm žiurkės pačios duodavo maždaug dvigubai daugiau nešiklio (20.7 ± 2.4 μl / 4h) nei WT žiurkės (10.7 ± 1.4 μl / 4h, F1,72 = 7.77, p <0.01). Tfm žiurkėms esant FR1, transporto priemonės infuzijų skaičius (39.9 ± 13.2 μl / 4h) viršijo DHT infuzijų skaičių (24.5 ± 2.3 μl / 4h). Tačiau eksperimento pabaigoje transporto priemonės savęs vartojimas sumažėjo iki 10.3 ± 2.4 μl / 4h. Panašiai WT žiurkės savarankiškai vartojo 18.6 ± 4.1 μl / 4h nešiklį FR1, kuris sumažėjo iki 6.6 ± 1.8 μl / 4h esant FR5.
Vidutinis kūno svoris kiekvieno FR grafiko pradžioje ir gyvūnų skaičius kiekvienoje būklėje yra nurodyti Lentelė 1. WT žiurkės buvo žymiai sunkesnės nei Tfm žiurkės (F1,174 = 144.62, p <0.001), o visos grupės laikui bėgant priaugo svorio (F5,174 = 5.59, p <0.001). Vaistų būklės (DHT ir Veh) poveikis kūno svoriui nebuvo (F1, 174 = 0.31, ns) arba bet kokia sąveika. DHT vartojimas, pakoreguotas pagal kūno svorį, buvo panašus abiejų genotipų abiejuose FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg) ir FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg).
Sirijos žiurkėnai savarankiškai administruoja DSA, konjuguotą su BSA
Operantas reaguoja
Žiurkėnai, savarankiškai administruojami DHT ir DHT, konjuguoti su BSA, bet ne tik su BSA. 3a rodo vidutinį DHT, BSA, DHT-CMO-BSA ir DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis pirmenybę (aktyvus - neaktyvus nosies kišimas). Remiantis mūsų ankstesniais tyrimais, žiurkėnai DHT savarankiškai vartodami pasirinko aktyvų nosies kišimą (t7 = 4.34, p <0.01), tačiau nenustatė pirmenybės, kai patys vartojo BSA (t8 = 1.03, ns). Be to, žiurkėnai labiau linkę į aktyvią nosies kišenę su DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) ir DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Kai tik DHT yra prijungtas prie jungčių, žiurkėnai savarankiškai administruoja DHT-CMO (t8 = 3.91, p <0.01), tačiau neparodė reikšmingos pirmenybės, kai savarankiškai vartojo DHT-Hemis (t10 = 1.87, p = 0.09). DHT-Hemis reakcijos į aktyvų nosies kištuką (40.5 ± 10.3 arba / 4h) buvo panašios į DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 arba / 4h), tačiau šie vyrai taip pat parodė padidėjusį atsaką už neaktyvią nosį. stulpas (28.7 ± 6.6 arba / 4h), palyginti su DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 arba / 4h).
3 pav
Užpilai
Kiekvienai grupei gautų infuzijų skaičius rodomas 3b. Žiurkėnai gavo žymiai daugiau DHT nei BSA infuzijų (t15 = 3.04, p = 0.01). Panašiai žiurkėnai gavo daugiau infuzijų, kai jiems buvo leista savarankiškai administruoti DHT-Hemis-BSA (t15 = 2.72, p = 0.02) arba DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02), palyginti su BSA. DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) ir DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) grupių infuzijų skaičius buvo panašus į tuos, kurie savarankiškai vartoja DHT, DHT-Hemis-BSA ir DHT- BRO. Nepaisant to, žiurkėnai negavo žymiai daugiau DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) arba DHT-Hemis (t18 = 1.91, p = 0.07), palyginti su BSA.
Perdozavimas
Vienuolika 55 žiurkėnų mirė prieš baigdami visus 15 bandymo seansus. Anksčiau buvo aprašytos mirtys dėl androgenų perdozavimo, kai savarankiškai vartojamas testosteronas (Petersas ir medis, 2005). Šiame tyrime 2 vyrų 8 (25%) mirė DHT savaiminio vartojimo metu, panašiai kaip 24%, apie kurį buvo pranešta dėl testosterono perdozavimo (Petersas ir medis, 2005). Savarankiškas DHT-CMO ir DHT-Hemis vartojimas buvo susijęs su didžiausiais nuostoliais (kiekvienas 3 8 vienai grupei, 38%), tuo tarpu žiurkėnų, savarankiškai administruojančių BSA, mirtys buvo nedaug (1 9, 11%) arba DHT. -Hemis-BSA (0 iš 8). Kaip ir perdozavus testosterono, nė vienas iš šio tyrimo žiurkėnų mirė savaiminio vartojimo metu. Vietoj to, žiurkėnai po kelių valandų mirė savo namų narvuose, smarkiai pažeisdami lokomotorius ir kvėpavimo takus.
Testosterono perdozavimas yra glaudžiai susijęs su testosterono vartojimu, ypač maksimaliu suvartojimu per sesiją (Petersas ir medis, 2005). Pav 4 lyginami žiurkėnų, kurie baigė visas 15 bandymo sesijas, pirmenybių balai, gautų sutvirtinimų skaičius ir didžiausias suvartojimas. Abi grupės rodė reikšmingą pirmenybę aktyviam nosies kištukui (p <0.05). Tačiau pirmenybė buvo žymiai didesnė žiurkėnams, kurie mirė vartodami patys (25.7 ± 5.2 resp / 4h), palyginti su išgyvenusiais (9.5 ± 2.0 resp / 4h, t53 = 3.42, p <0.01). Žiurkėnai, kurie neužbaigė 15 seansų, per seansą gavo daugiau nei dvigubai daugiau infuzijų (31.2 ± 5.0 inf / 4h) nei tie, kurie baigė visus seansus (14.8 ± 1.1 inf / 4h, t53 = 5.05, p <0.001). Be to, žiurkėnams, kurie mirė tyrimo metu, didžiausias suvartojimas per seansą buvo žymiai didesnis (77.0 ± 9.8 inf / 4h) nei išgyvenusiems vyrams (36.1 ± 2.9 inf / 4h, t53 = 5.41, p <0.001).
4 pav
Diskusija
Androgenų savaiminis vartojimas gali būti susijęs su membranomis, bet ne branduolinių androgenų receptoriais
Dabartinis tyrimas rodo, kad klasikiniai branduoliniai AR nėra būtini savarankiškam androgenų administravimui. Tiek Tfm, tiek WT žiurkėms pasireiškė pirmenybė aktyviam nosies kišimui DHT savaiminio vartojimo metu. Be to, jie sugebėjo reaguoti į kylančią FR tvarką didindami aktyvius nosies kišenes ir taip išlaikydami pastovų vaisto vartojimą nepaisant FR grafiko. Priešingai, žiurkės, gavusios nešiklį, neatsakė į PK tvarkaraščio pokyčius. Jų aktyvūs nosies kišenės reikšmingai nepadidėjo, reaguojant į FR grafiko pokyčius, ir padidėjus reakcijos poreikiui, jie gavo mažiau infuzijų. Kadangi ligamentų prisijungimas prie „klasikinio“ branduolio androgenų receptorių yra sutrikdytas Tfm mutantuose, tai patvirtina mūsų hipotezę, kad androgenų sustiprinimas vyksta per alternatyvius kelius.
Netikėtai didelis Tfm žiurkių atsakas į nešiklį greičiausiai nebus dėl pačios nešiklio. Panašius reiškinius stebėjome atskiroje Tfm žiurkių grupėje, kurioms nebuvo daroma jokia infuzija (duomenys nepateikti). Vietoj to, tai gali būti susiję su feminizuotais Tfm vyrų elgesio bruožais. Padidėjęs Tfm žiurkių nosies kiškis gali būti panašus į didesnį tiriamųjų galvų kritimą žiurkių patelėms (Brownas ir Nemesas, 2008). Kaip alternatyva, žinoma, kad Tfm žiurkėms ir pelėms būdingas padidėjęs į nerimą panašus elgesys (Zuloaga ir kt., 2006, Zuloaga ir kt., 2008a). Ko gero, raminamasis / anksiolitinis DHT (Agren ir kt., 1999, Arnedo ir kt., 2000, Frye ir Seliga, 2001, Berbos ir kt., 2002, Petersas ir medis, 2005) užtemdė į nerimą panašų elgesį, kai „Tfm“ žiurkės savarankiškai vartojo DHT.
Be to, žiurkėnų patinų savaiminis DHT-BSA konjugatų įvedimas įrodo, kad androgenai gali veikti neuronų plazmos membraną, kad turėtų stiprinamąjį poveikį. Žiurkėnai turėjo didelę pirmenybę abiem DHT-BSA konjugatams. Savarankiškai sušvirkštos dozės atitinka ankstesnius mūsų tyrimus su T, DHT ir dažniausiai piktnaudžiaujamais steroidais (Balardas ir mediena, 2005, „DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“). Priešingai, žiurkėnai neturėjo pirmenybės tik BSA. Duomenys apie mirtingumą ir narkotikų vartojimą rodo, kad DHT ir jo dariniai gali būti mirtini, pratęsdami ankstesnius mūsų duomenis apie T perdozavimą (Petersas ir medis, 2005).
Dabartinis tyrimas atskleidžia konkrečiai rūšiai būdingą operandų reagavimą. Kaip anksčiau buvo įrodyta, žiurkėnai nepatiko aktyviam kištukui į nosį, o savarankiškai administruojanti priemonė (Johnson ir Wood, 2001, Mediena, 2002, „DiMeo and Wood“, „2004“, „Triemstra and Wood“, 2004, Wood et al., 2004, Balardas ir mediena, 2005, „DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“). Vis dėlto žiurkėms buvo akivaizdu, kad aktyvus nosies kišimas, neatsižvelgiant į gautą vaistą. Panašią tendenciją stebėjome ir ankstesniame tyrime, kuriame buvo tiriamas žiurkių T savaiminis švirkštimasis, nors tai nebuvo statistiškai reikšminga (Wood et al., 2004). Atsižvelgiant į tokį savitą elgesį su rūšimis, atsižvelgiant į savarankišką vartojimą, reikia atsargiai lyginti žiurkių ir žiurkėnų elgesio duomenis.
Aiškinant dabartinį tyrimą reikia atsižvelgti į keletą įspėjimų. Pirma, Tfm žiurkėse vis dar yra branduolinių AR, kurių žymiai sutrikusi ligandų jungtis (Yarbrough ir kt., 1990), skirtingai nuo Tfm pelių (Jis ir kt., 1991). Gali būti, kad šių mutavusių branduolinių AR yra pakankamas tarpininkauti androgenų poveikiui esant superfiziologinėms dozėms. Antra, DHT-BSA konjugatai gali suskaidyti in vivo, gaunant nemokamą DHT. Nors neatrodo, kad tai yra reikšminga problema in vitro („Lieberherr“ ir „Grosse“, „1994“, Gatson ir kt., 2006), DHT-BSA skilimo laipsnį ir laiką in vivo smegenyse šiuo metu nežinoma. Galiausiai DHT-BSA konjugatai gali smarkiai neprasiskverbti į smegenų audinį. DHT-BSA yra žymiai didesnis nei DHT, todėl šiame tyrime pastebėtas DHT-BSA poveikis gali būti susijęs su vietomis šalia skilvelių.
Nepaisant šių įspėjimų, šie du skirtingi metodai davė nuoseklius rezultatus, kurie tvirtai prieštarauja branduolinio AR būtinybei sustiprinti androgenus. Be to, savaiminis BSA konjugatų įvedimas leidžia manyti, kad androgenai gali veikti plazmos membranoje, stiprindami androgenus. Mūsų žiniomis, šis tyrimas pateikia pirmąjį in vivo įrodymai apie androgenų elgesį su plazmos membrana.
Androgenai daro greitą nuo branduolinio AR nepriklausomą poveikį atlygiui
Keli kiti androgenų atlygio tyrimai parodė rezultatus, atitinkančius negenominį ar plazminės membranos poveikį. CPP vystosi per 30 min. Sisteminės T injekcijos (Alexander ir kt., 1994), atsižvelgiant į ūminį negenominį T. CPP poveikį, trukmė taip pat gali būti sukelta T arba jo metabolito infuzijomis į Acb Actabil (Packard ir kt., 1997, Frye ir kt., 2002), nors Acb turi nedaug genominių AR. Be to, VTA išreiškia Fos, reaguodama į ICV T-infuziją („Dimeo“ ir „Wood“, „2006a“), nepaisant to, kad ten nėra reikšmingos klasikinės AR išraiškos. Dabartinis tyrimas nepateikia informacijos apie veikimo vietą smegenyse. Nepaisant to, tai rodo, kad vien santykinis branduolinio AR trūkumas nėra pakankama priežastis pašalinti tokias struktūras kaip Acb ir VTA iš galimų vietų, kurios gali tarpininkauti androgeniniam poveikiui.
Greitas steroidų poveikis plazmos membranai, esančiam nugaros ir vidurinės striatumose, neapsiriboja androgenais. Yra žinoma, kad progestinai sukelia CPP, galbūt per gama-aminosviesto rūgšties (GABA) receptorius Acb (Frye, 2007). Estrogenai taip pat daro greitą, membranos receptorių sukeltą poveikį nugaros juosmeniui (Mermelstein ir kt., 1996, Beckeris ir Rudickas, „1999“). Su membranomis susijęs progestinų receptorius jau buvo išskirtas (Zhu ir kt., 2003), ir kaupiama įrodymų apie estrogenų ląstelių paviršiaus receptorius (peržiūra Vasudevanas ir Pfaffas, 2007androgenai (apžvelgti 2006 m.) Thomas et al., 2006). Nors estrogenai taip pat stiprina („DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“), stiprinamasis T poveikis atrodo daugiausia androgeninis. Žiurkėnai patys administruoja aromatinius androgenus, tokius kaip drostanolonas ir DHT (Balardas ir mediena, 2005, „DiMeo“ ir „Wood“, „2006b“). Be to, antiandrogeninis flutamidas gali blokuoti T savarankišką vartojimą (Petersas ir medis, 2004). Nors tai gali prieštarauti membranos AR vaidmeniui, apie kurį pranešta šiame tyrime, pranešta, kad flutamidas taip pat blokuoja membranos AR aktyvaciją (Braunas ir Tomas, 2003, Braunas ir Tomas, 2004).
Membraninių androgenų receptorių savybės
Istoriškai buvo manoma, kad steroidų, įskaitant androgenus, poveikis pasireiškia per branduolinių receptorių tarpininkaujamus procesus. Tačiau kelis dešimtmečius buvo gauta pranešimų apie greitą androgenų poveikį, kurį, matyt, sąlygoja su membrana susiję receptoriai. Pvz., Medialinėje preoptinėje srityje androgenai per kelias sekundes gali pakeisti neuronų sudegimą („Yamada“, „1979“) iki minučių („Pfaff“ ir „Pfaffmann“, „1969“). Be to, Orsini ir kolegos (Orsini, 1985, Orsini ir kt., 1985) parodė, kad šoniniame pagumburyje (LHA) androgenai greitai keičia neuronų sudeginimo dažnį. Šis androgenų poveikis LHA gali būti ypač svarbus šiam tyrimui, nes žinoma, kad LHA dalyvauja atlygio grandinėje (Senas ir Milneris, 1954) ir LHA oreksiną / hipokretiną reguliuoja lytinių liaukų steroidai (Muschamp ir kt., 2007).
Ląstelių tipai, kuriuose yra galimi membranos AR, apima glialį (Gatson ir kt., 2006), lytinių liaukų (Braunas ir Tomas, 2003, Braunas ir Tomas, 2004) ir imuninės ląstelės (Benten ir kt., 1999, Guo ir kt., 2002), miocitai (Estrada ir kt., 2003) ir osteoblastai („Lieberherr“ ir „Grosse“, „1994“). Nors molekulinis tapatumas dar nėra nustatytas, kandidatai į membranos AR apima membraninius receptorius su žinomomis steroidų surišimo vietomis, tokiomis kaip GABA-A (apžvelgta Lambert ir kt., 2003) ir N-metil-D-asparto rūgšties receptorių NR2 subvienetai (Malajevas ir kt., 2002). Kaip alternatyva, Tomas ir jo kolegos (2004) pranešė apie naujo G-baltymo sujungto receptoriaus, kaip membraninio AR, įrodymus. Be to, atliekant šį tyrimą negalima atmesti androgenų, nesusijusių su specifiniu receptoriumi, poveikio.
naujas in vitro tyrimai rodo, kad yra keli membraniniai AR arba daugiau nei viena jungimosi vieta prie vieno receptoriaus, kaip siūloma membranos progesterono receptoriui (Ramirez ir kt., 1996). Daugelio tipų ląstelėse AR membranos receptoriai atrodo sujungti su Gq / o („Lieberherr“ ir „Grosse“, „1994“, Benten ir kt., 1999, Zhu ir kt., 1999, Guo ir kt., 2002, Estrada ir kt., 2003). Tačiau tariamos membranos AR steroidų surišimo savybės ir jautrumas antiandrogenams labai skiriasi, priklausomai nuo ląstelės tipo. Pvz., Antiandrogenai gali blokuoti DHT poveikį krekerių kiaušidžių ląstelėms (Braunas ir Tomas, 2003, Braunas ir Tomas, 2004), nors jie nėra veiksmingi kitų tipų ląstelėse („Lieberherr“ ir „Grosse“, „1994“, Benten ir kt., 2004, Gatson ir kt., 2006) ar net gali sukelti į agonistą panašų poveikį hipokampo ląstelėms (Lydeka, 2001, Nguyen ir kt., 2007) ir keletas vėžio ląstelių linijų (Peterziel ir kt., 1999, Zhu ir kt., 1999, Evangelou ir kt., 2000, Papakonstanti ir kt., 2003). Be to, pranešta apie skirtingas T jungimosi savybes skirtingiems žuvų organams (Braunas ir Tomas, 2004).
Mūsų patirtis, susijusi su dažniausiai piktnaudžiaujama AAS, rodo, kad pagrindinės modifikacijos (-os) A žiede (C2 ir (arba) C3) ir C17 paprastai trukdo savarankiškai vartoti (Balardas ir mediena, 2005). Pavyzdžiui, stanozololis, kuris turi didelę modifikaciją C2 ir C3, taip pat metilo grupė, prisijungusi prie C17, nėra savaiminio vartojimo. Dabartiniame tyrime žiurkėnai savarankiškai vartojo ir BSA, konjuguotus C3 (DHT-CMO-BSA), ir C17 (DHT-Hemis-BSA). Norint išsiaiškinti savarankiškai vartojamų androgenų savybes, reikia papildomų tyrimų.
Klinikinė reikšmė
AAS, ypač T, yra dažniausiai sportininkų naudojamos veiksmingumą gerinančios medžiagos, kurios sudaro beveik pusę teigiamų dopingo testų (Pasaulinė antidopingo agentūra, 2006). Dėl tokio plataus vartojimo AAS piktnaudžiavimas daro platų poveikį sveikatai. AAS piktnaudžiavimo širdies ir kepenų poveikis yra gerai žinomas (Leshner, 2000). Manoma, kad šie ir anaboliniai AAS padariniai gali būti per branduolinį AR. Tačiau galimas androgenų poveikis, nepriklausomas nuo branduolinio AR, rodo, kad AAS įtaka gali būti didesnė už struktūras, turinčias branduolinę AR išraišką.
Kalbant apie kitus piktnaudžiavimo narkotikus, AAS sukelia skirtingą poveikį ir veikia skirtingai nei stimuliatoriai. Skirtingai nuo stimuliatorių (Graybiel ir kt., 1990), AAS sukelia c-Fos aktyvaciją tik VTA, o ne Acb („Dimeo“ ir „Wood“, „2006a“). Be to, AAS susilpnina stimuliatorių sukeltą Acb DA išsiskyrimą (Birgner ir kt., 2006) ir smarkiai slopina DA išsiskyrimą (Triemstra ir kt., 2008). Elgesio požiūriu AAS nesukelia lokomotorinio aktyvavimo, būdingo stimuliatoriams (Petersas ir medis, 2005).
Vietoj to, elgesio reakcija į ūmią AAS yra panaši į opioidų ar benzodiazepinų reakciją, kuri kartu gali sukelti papildomą poveikį. Ūmus AAS poveikis slopina autonomines funkcijas, įskaitant kvėpavimą ir kūno temperatūrą (Petersas ir medis, 2005). AAS sukelta autonominė depresija primena opioidų perdozavimo simptomus ir ją blokuoja opioidų antagonistas naltreksonas (Petersas ir medis, 2005). Be to, nandrolonas, dažniausiai naudojamas AAS, sustiprina hipoterminį morfino poveikį ir sustiprina naloksono sukeltus morfino abstinencijos simptomus (Celerier ir kt., 2003). Be to, gerai žinoma, kad ūmus AAS yra raminamasis / anksiolitinis (Agren ir kt., 1999, Arnedo ir kt., 2000, Frye ir Seliga, 2001, Berbos ir kt., 2002, Petersas ir medis, 2005), kurį galbūt įtakoja jų tiesioginis poveikis GABA-A receptoriams (Masonis ir McCarthy, 1995, Masonis ir McCarthy, 1996). Padidėjęs etanolio vartojimas žiurkėms, lėtiniu būdu gydomiems AAS, taip pat gali atspindėti pakitusią GABAerginę funkciją (Johansson ir kt., 2000).
Mūsų išvados dėl perdozavimo kelia papildomą sveikatos susirūpinimą. Šiuo metu AAS klasifikuojama kaip kontrolinės medžiagos remiantis jų anabolinėmis savybėmis (Kontroliuojamų medžiagų įstatymas, 1991). Tačiau šis tyrimas rodo, kad AAS anabolinis veiksmingumas nebūtinai atitinka jų stiprinamąsias savybes ir perdozavimo riziką. Be DHT-BSA konjugatų, šiame tyrime naudojamas DHT-CMO nėra kontroliuojama medžiaga, nors jos sutvirtinančios savybės ir mirtingumas nuo perdozavimo atrodo gana panašios į DHT ir T (Petersas ir medis, 2005). Perdozavimo pobūdis taip pat panašus į anksčiau nurodytą T (Petersas ir medis, 2005), kur dėl didelio suvartojimo vėliau mirė nuo 24 iki 48. Atsižvelgiant į šias išvadas, atsižvelgiant į steroido, kaip kontroliuojamos medžiagos, planavimo kriterijus, be jo anabolinio stiprumo, gali tekti patikslinti ir atsižvelgti į atsakomybę už piktnaudžiavimą ir toksiškumą.
Dabartinio tyrimo rezultatai rodo, kad branduolinis AR, vienintelis iki šiol izoliuotas AR, nėra būtinas androgenų sustiprinimui. Rezultatai rodo, kad androgenų sustiprinimas vyksta per plazmos membraną. Taigi norint išsiaiškinti pagrindinį piktnaudžiavimo AAS mechanizmu ir jo klinikiniais padariniais, reikia atlikti papildomus tariamo membranos AR tapatybės, jų funkcinių ypatybių ir anatominio pasiskirstymo tyrimus.
Išnašos
Leidėjo atsisakymas: Tai PDF failas iš neregistruoto rankraščio, kuris buvo priimtas paskelbti. Kaip paslauga mūsų klientams teikiame šią ankstyvą rankraščio versiją. Rankraštis bus kopijuojamas, užrašomas ir peržiūrimas gautas įrodymas, kol jis bus paskelbtas galutinėje cituotojoje formoje. Atkreipkite dėmesį, kad gamybos proceso metu gali būti aptiktos klaidos, kurios gali turėti įtakos turiniui, ir visi su žurnalu susiję teisiniai atsakymai.
Nuorodos
- Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Mažų anabolinių androgeninių steroidų gydymo žiurkėmis elgesio anksiolitinis poveikis. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Aleksandras GM, Packard MG, Hines M. Testosteronas pasižymi teigiamomis afektinėmis žiurkių patinų savybėmis: jos turi įtakos seksualinės motyvacijos biologiniam pagrindui. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- „Arnedo MT“, „Salvadoras A“, „Martinez-Sanchis S“, „Gonzalez-Bono E.“ Neįveiktų pelių patinų testosterono išskirtinės savybės: bandomasis tyrimas. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- „Ballard CL“, „Wood RI“. Intracerebroventrikulinis savarankiškai vartojamų anabolinių ir androgeninių steroidų patinimas žiurkėnams (Mesocricetus auratus): nandrolonas, drostanolonas, oksimetilolonas ir stanozololis. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Beckeris JB, Rudickas CN. Greitas estrogeno ar progesterono poveikis amfetamino sukeltam strijato dopamino padidėjimui sustiprinamas estrogeno pradžia: mikrodializės tyrimas. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Greitas androgenų poveikis makrofagams. Steroidai. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Testosterono signalizacija per vidinius paviršiaus receptorius makrofaguose, kuriuose nėra androgenų. Mol Biol ląstelė. 1999;10: 3113-3123. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Ūmus anabolinių steroidų elgesys: nerimas, stereotipai ir lokomotorinė veikla. Horm Behav. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Pakeistas tarpląstelinis DOPAC ir HVA lygis žiurkės branduolio akumuliatoriaus apvalkale reaguojant į subchroninį nandrolono vartojimą ir po to sekantį amfetamino iššūkį. Neurosci Lett 2006
- Braun AM, Thomas P. Androgenai slopina estradiolio-17beta sintezę Atlanto kregždžių (Micropogonias undulatus) kiaušidėse negenominiu mechanizmu, inicijuotu ląstelės paviršiuje. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Braunas AM, Thomas P. Membraninio androgenų receptoriaus biocheminis apibūdinimas atlanto kregždės (Micropogonias undulatus) kiaušidėse Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Naršyklė KJ. Anabolinių steroidų vartojimas ir priklausomybė. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
- Naršyklė KJ, „Blow FC“, „Young JP“, „Hill EM“. Anabolinės ir androgeninės steroidų priklausomybės simptomai ir koreliacijos. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Brown GR, Nemes C. Tiriamas žiurkių elgesys skylių lentos aparate: ar galvos panardinimas yra tinkamas neofilijos matas? Behav procesai. 2008;78: 442-448. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Nandrolono poveikis ūmioms morfino reakcijoms, tolerancijai ir priklausomybei nuo pelių. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Choi PY, popiežius HG., Jr Smurtas prieš moteris ir neteisėtas androgeninių-anabolinių steroidų vartojimas. Ann Clin psichiatrija. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- 21 antraštinės dalies 13 skyrius - Piktnaudžiavimo narkotikais prevencija ir kontrolė Kontroliuojamų medžiagų įstatymas. 1991
- „DiMeo AN“, medienos RI. Cirkuliaciniai androgenai padidina jautrumą testosterono patekimui į žiurkėnų patinus. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Dimeo AN, Wood RI. ICV testosteronas sukelia Fos Sirijos žiurkėno smegenų srityje. Psichoneuroendocrinologija. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- „DiMeo AN“, medienos RI. Savarankiškas estrogeno ir dihidrotestosterono vartojimas žiurkėnų patinams. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosteronas stimuliuoja tarpląstelinį kalcio išsiskyrimą ir mitogenų suaktyvintas baltymų kinazes per G baltymų sujungtus receptorius skeleto raumenų ląstelėse. Endokrinologija. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Augimo faktoriaus beta receptorių transformacijos, susijusios su androgenu kiaušidžių vėžio ląstelėse, žemutinis reguliavimas. Vėžio rez. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Molekulinis metodas klasifikuoti genotipus, gautus veisimo kolonijoje iš sėklidžių feminizuotų (Tfm) žiurkių. „Horm Metab Res“. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. Progestinai daro įtaką motyvacijai, atlygiui, kondicionavimui, stresui ir (arba) atsakui į piktnaudžiavimo narkotikus. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Branduolys kaupiasi kaip vieta, skirta apdovanoti testosterono ir jo 5alfa redukuotų metabolitų savybes. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Frye CA, Seligos AM. Testosteronas padidina žiurkių patinų analgeziją, anksiolizę ir pažintinius rezultatus. Pažintinis, afektinis ir elgesio neuromokslas. 2001;1: 371-381.
- Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihidrotestosteronas diferencijuotai moduliuoja mitogenų suaktyvintą baltymo kinazės ir fosfoinositido 3-kinazės / Akt kelius per branduolį ir naujus membranos androgenų receptorius C6 ląstelėse. Endokrinologija. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetaminas ir kokainas sukelia specifinį narkotikų c-fos geno aktyvavimą striosomos-matricos skyriuose ir striatumo limbiniuose padaliniuose. Proc Natl Acad Sci JAV A. 1990;87: 6912-6916. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Negenominis testosterono kalcio signalizavimas. Genotropiniai veiksmai makrofaguose, kuriuose nėra androgenų receptorių. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- Jis WW, „Kumar MV“, „Tindall DJ“. Kadro poslinkio mutacija androgeno receptoriaus gene sukelia visišką androgenų nejautrumą sėklidėse feminizuotoje pelėje. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anaboliniai androgeniniai steroidai turi įtakos žiurkių alkoholio vartojimui, gynybiniam elgesiui ir smegenų opioidiniams peptidams. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- „Johnson LR“, „Wood RI“. Peroralinis testosterono vartojimas žiurkėnams. Neuroendokrinologija. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- „Kouri EM“, „Lukas SE“, popiežius HG, Jr, „Oliva PS“. Pavartojus laipsniškai didinamas testosterono cypionato dozes, padidėja agresyvus vyrų savanorių atsakas. Priklauso nuo alkoholio. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Lambertas JJ, Belelli D., Pedenas DR, Vardy AW, Peters JA. GABAA receptorių neurosteroidų moduliacija. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Leshner AI. (NIDA tyrimų ataskaitų serija).Anabolinių steroidų prievarta. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Androgenai padidina tarpląstelinio kalcio koncentraciją ir inozitolio 1,4,5-trifosfato bei diacilglicerolio susidarymą per kokliušo jautrų G baltymą. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Androgenų poveikis hipokampinės CA1 stuburo sinapsių skaičiui išlieka Tfm žiurkių patinėliams, turintiems defektų turinčius androgeno receptorius. Endokrinologija. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Malajevas A, Gibbsas TT, Farbas DH. Nenaudodamas NMDA atsaką nuo rasedenolono sulfato, paaiškėja, kad sulfatiniai steroidai selektyviai moduliuoja potipio NMDA receptorius. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- „Masonis AE“, MP McCarthy. Tiesioginis anabolinių / androgeninių steroidų stanozololio ir alfa-metiltestosterono 17 poveikis benzodiazepino prisijungimui prie. gama-aminosviesto rūgšties (a) receptorių. Neuroscience latvis. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- „Masonis AE“, MP McCarthy. Androgeninio / anabolinio steroido stanozololio poveikis GABAA receptorių funkcijai: GABA stimuliuojamas 36Cl antplūdis ir [35S] TBPS jungimasis. J Pharmacol Exp Ten. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiolis sumažina kalcio sroves žiurkių neostriataliniuose neuronuose per membranos receptorius. J Neuroscience. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- „Morin LP“, „Wood RI“. Stereotaksinis „Auksinių žiurkėnų smegenų“ atlasas. Akademinė spauda; San Diegas: 2001.
- „Muschamp JW“, „Dominguez JM“, „Sato SM“, „Shen RY“, „Hull EM“. Hipokretino (oreksino) vaidmuo vyrų seksualiniame elgesyje. J Neuroscience. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- Tarybos NR redakcija. „NationalResearchCouncil“. Laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo vadovas. Nacionalinė tyrimų taryba; Vašingtone, DC: 1996.
- „Nguyen TV“, „Yao M“, „Pike CJ“. Flutamidas ir citproterono acetatas daro agonistinį poveikį: sukelia nuo androgenų receptorių priklausomą neuroprotekciją. Endokrinologija. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. Laboratorinių gyvūnų priežiūros principas. Nacionalinis sveikatos institutas; Bethesda, Merilandas: 1985.
- Olds J, Milner PM. Teigiamas armavimas, gaunamas elektrinės stimuliacijos būdu tarp sienos ir kitų žiurkių smegenų regionų. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Orsini JC. Tiesioginis androgenų poveikis žiurkių patinų šoniniam pagumburio neuronų aktyvumui: II. Slėgio išstūmimo tyrimas. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- „Orsini JC“, „Barone FC“, „Armstrong DL“, „Wayner MJ“. Tiesioginis androgenų poveikis žiurkių patinų šoniniam pagumburio neuronų aktyvumui: I. Mikroionoforetinis tyrimas. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Apmokėtinos testosterono injekcijų branduolio viduje branduolių emocinės savybės. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- „Packard MG“, „Schroeder JP“, Aleksandras GM. Testosterono sąlygojamos vietos pasireiškimą blokuoja alfa-flupentiksolio injekcija periferiniu būdu arba į vidinius akumuliatorius. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Greitas, negenominis, signalinis kelias reguliuoja aktiino pertvarkymą, kurį sukelia aktyvuoti membraniniai testosterono receptoriai. Mol endokrinolis. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. Žiurkės smegenys: sterotaksinėmis koordinatėmis. 4th. Akademinė spauda; Niujorkas: 1998.
- Peters KD, Wood RI. Anaboliniai-androgeniniai priklausomybės nuo steroidų apima androgenų ir opioidų receptorius. Neuromokslų draugijos 34-ojo metinio susirinkimo medžiaga; San Diegas, Kalifornija 2004.
- Peters KD, Wood RI. Žiurkėnų priklausomybė nuo androgenų: perdozavimas, tolerancija ir galimi opioiderginiai mechanizmai. Neurologija. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Greitas signalo perdavimas androgenų receptoriais prostatos vėžio ląstelėse. Onkogenas. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. Uoslės ir hormonų poveikis žiurkės patino baziniam priekiniam smegeniui. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Lydekos CJ. Testosteronas sumažina beta amiloido toksiškumą kultivuojamuose hipokampo neuronuose. Smegenų tyrimai. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- Popiežius HG, Jr, Katz DL. Anabolinių-androgeninių steroidų vartojimo psichinis ir medicininis poveikis. Kontroliuojamas 160 sportininkų tyrimas. Arka Gen Psichiatrija. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membraniniai estrogeno, progesterono ir testosterono receptoriai žiurkių smegenyse: fantazija ar tikrovė. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Vienodai RB, „Chang C“, „Muramatsu M“, „Swanson LW“. Androgenų ir estrogenų mRNR turinčių ląstelių pasiskirstymas žiurkės smegenyse: hibridizacijos in situ tyrimas. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, „Deecher DC“, „Suhadolnik L“, „Mallis LM“, „Frail DE“. Diferencinis estradiolio ir estradiolio-BSA konjugatų poveikis. Endokrinologija. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Thomas P, „Dressing G“, „Pang Y“, „Berg H“, „Tubbs C“, „Benninghoff A“, „Doughty K.“ Progestinas, estrogeno ir androgeno G baltymų jungiami receptoriai žuvų lytinėse liaukose. Steroidai. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- „Triemstra JL“, „Sato SM“, „Wood RI“. Sirijos žiurkėno patino testosteronas ir branduolys kaupia dopaminą. Psichoneuroendocrinologija. 2008;33: 386-394. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. Testosterono savarankiškas vartojimas žiurkėnams. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Vasudevan N, Pfaff DW. Membranos sukeliami estrogenų veiksmai neuroendokrinologijoje: atsirandantys principai. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Medienos RI. Geriamojo žiurkėno testosterono savaiminis vartojimas: atsakas į dozę, savanoriškas mankšta ir individualūs skirtumai. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- „Wood RI“, „Johnson LR“, „Chu L“, „Schad C“, „Self DW“. Testosterono stiprinimas: intraveninis ir intracerebroventrikulinis savaiminis vartojimas žiurkių patinams ir žiurkėnams. Psichofarmakologija (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Medienos RI, Newman SW. Androgenų receptorių imunoreaktyvumas Sirijos žiurkėnų patinų ir moterų smegenyse. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- Pasaulio kovos su dopingu agentūra. Neigiamos analizės išvados, kurias pateikė akredituotos laboratorijos. Pasaulio antidopingo agentūra; Monrealis, Kanada: 2006.
- Yamada Y. Testosterono poveikis vienetiniam aktyvumui žiurkių pagumburyje ir pertvaroje. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, French FS, Wilson EM. Vienos bazės androgeno receptoriaus mutacija sukelia androgenų nejautrumą sėklidėje feminizuotoje žiurkėje. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- „Yesalis“ CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Anabolinių-androgeninių steroidų vartojimas JAV. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- „Zhu X“, „Li H“, „Liu JP“, „Funder JW“. Androgenas stimuliuoja mitogenų suaktyvintą baltymo kinazę žmogaus krūties vėžio ląstelėse. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Zhu Y, Rice CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Membraninio progestino receptoriaus klonavimas, ekspresija ir apibūdinimas bei įrodymas, kad jis yra tarpininkas mejoziniame žuvų oocitų brendime. Proc Natl Acad Sci JAV A. 2003;100: 2231-2236. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- „Zuloaga“ generalinis direktoratas, „Morris JA“, „Jordan CL“, „Breedlove SM“. Pelės, turinčios sėklidės feminizacijos mutaciją, demonstruoja androgenų receptorių vaidmenį reguliuojant su nerimu susijusį elgesį ir pagumburio, hipofizės ir antinksčių ašį. Horm Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- „Zuloaga“ generalinis direktoratas, „Puts DA“, Jordanija CL, „Breedlove SM“. Androgenų receptorių vaidmuo smegenų maskulinizacijoje ir elgesyje: ko išmokome iš sėklidžių feminizacijos mutacijos. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
- „Zuloaga DZ“, „Jordan CL“, „Breedlove SM“. Žiurkėms su sėklidės feminizacijos mutacija (TFM) pasireiškia padidėję nerimo rodikliai. Neuromokslų draugijos 36-ojo metinio susirinkimo medžiaga; Atlanta, GA. 2006. Programa # 152.118.
;
