Hipokretino (oreksino) vaidmuo vyriškam seksualiniam elgesiui (2007)

J Neuroscience. 2007 Mar 14;27(11):2837-45.

Muschamp JW1, „Dominguez JM“, Sato SM, Shen RY, Hull EM.

Abstraktus

Hipokretino (oreksino; hcrt / orx) neuronų vaidmuo reguliuojant susijaudinimą yra gerai žinomas.

Neseniai hcrt / orx buvo susijęs su atlygiu už maistą ir narkotikų ieškančiu elgesiu. Mes pranešame, kad žiurkių patinams Fos imuninis reaktyvumas hcrt / orx neuronuose labai padidėja kopuliacijos metu, tuo tarpu kastracija sumažina hcrt / orx neuronų ląstelių skaičių ir baltymų kiekį per tam tikrą laiką, atsižvelgiant į kopuliatyvinės elgsenos sutrikimus po kastracijos.

Šis poveikis buvo pakeistas pakeitus estradioliu. Imunologinis androgeno (AR) ir estrogeno (ER alfa) receptorių nustatymas neparodė jokio hcrt / orx kolokalizacijos su AR ir keliais hcrt / orx neuronais, ekspresuojančiais ER alfa, o tai rodo, kad hormoninis hcrt / orx ekspresijos reguliavimas vyksta per neuronų, turinčių tuos receptorius, aferentus. Mes taip pat parodome, kad sisteminis oreksin-1 receptorių antagonisto SB 334867 [N- (2-metil-6-benzoksazolil) -N ”-1,5-naftiridin-4-ilkarbamido] vartojimas pablogina kopuliacinį elgesį. Vienas prceksualinio hcrt / orx poveikio lokusas gali būti ventralinė tegmentalinė sritis (VTA). Čia mes parodome, kad hcrt-1 / orx-A padidina nuo dozės priklausantį VTA dopamino (DA) neuronų šaudymo greitį ir populiacijos aktyvumą in vivo. Hcrt / orx aktyvinimas kopuliacijos metu ir savo ruožtu VTA DA neuronų sužadinimas hcrt / orx gali padėti stipriai padidinti branduolio branduolius DA, anksčiau pastebėtą vyrų seksualinio elgesio metu. Vėlesnis trigubas imunologinis žymėjimas priekinėje VTA parodė, kad Fos-ir tirozino hidroksilazės teigiamuose neuronuose, priskirtuose hcrt / orx skaiduloms, kopuliacijos metu padidėja.

Šie duomenys kartu patvirtina požiūrį, kad hcrt / orx peptidai gali veikti jautriai steroidams, kad būtų palengvintas natūralus atlygis, pavyzdžiui, seksas, energizuojant aktyvinant mezolimbinę DA sistemą.

Įvadas

Nuo pat atradimo 1990 (de Lecea ir kt., 1998; Sakurai ir kt., 1998), hipokretino (oreksino; hcrt / orx) sistema buvo vertinama daugiausia atsižvelgiant į susijaudinimą ir prarijusį elgesį (Sutcliffe ir de Lecea, 2002; Siegel, 2004). Pelėms, turinčioms sutrikusią hcrt / orx signalą, mutantai rodo nevienodą susijaudinimo modelį, pasireiškiantį dažnais perėjimais tarp miego ir budrumo (Mochizuki ir kt., 2004). Manoma, kad hcrt / orx peptidai palengvina nenutrūkstamą susijaudinimą dėl tvirtų smegenų kamieno aktyvių aminerginių ląstelių grupių (pvz., Lokuso ceruleus, raphe) projekcijų (Peyron ir kt., 1998; Nambu ir kt., 1999; Saper ir kt., 2005). Be savo projekcijų į vietas, kurios reguliuoja budrumą ir susijaudinimą, hcrt / orx neuronai taip pat išskiria mezolimbinio dopamino (DA) kelio, esančio ventralinėje pagrindinėje srityje (VTA), kilmę („Fadel and Deutch“, „2002“). Šis ryšys paskatino daugelį tyrimų grupių įvertinti hcrt / orx vaidmenį stiprinant atlygį (DiLeone ir kt., 2003; Harris ir kt., 2005; Harris ir Aston-Jones, 2006).

Tyrimai su gyvūnais, judančiais ad libitum parodyti, kad hcrt / orx neuronai padidina jų šaudymo greitį, kai yra įtampa, tiriamasis elgesys (Mileykovskiy ir kt., 2005) ir kad padidėjęs lokomotorinis išėjimas po intracerebroventrikulinės hcrt / orx infuzijos susilpnėja DA receptorių blokada (Nakamura ir kt., 2000). Kiti tyrimai parodė padidėjusį DA ląstelių aktyvumą in vitro autorius hcrt / orx (Korotkova ir kt., 2003), taip pat padidinto branduolio akumuliatorių (NAc) DA išsiskyrimas in vivo po hcrt / orx taikymo VTA (Narita ir kt., 2006). Neseniai elgesio tyrimais nustatyta, kad hcrt / orx sistemos aktyvinimas gali būti neatsiejama motyvacijos narkotikų prievartai priežastis (Boutrel ir kt., 2005; Harris ir kt., 2005; Borgland et al., 2006), taip pat už natūralų maistą, kurio armatūros stiprumą homeostatiškai lemia pagumburio struktūros (Hoebel, 1969; Rolls ir kt., 1980; Fulton ir kt., 2000; Thorpe ir kt., 2005).

Kaip ir išorinis hcrt / orx gali pagerinti maitinimąsi ir maisto paiešką (Kotzas, 2006), atliekant intrahipotalaminę hcrt / orx infuziją, palengvinamas patinų seksualinis elgesys su žiurkėmis (Gulia ir kt., 2003). Atsižvelgiant į klasikinius tyrimus, kuriuose maitinimasis ar vyrų elgesys buvo skatinamas elektriškai stimuliuojant tas vietas, esančias šoninėje pagumburio srityje (LHA), kuriose, kaip dabar žinoma, yra hcrt / orx neuronai (Vaughanas ir Fišeris, „1962“; Caggiula ir Hoebel, 1966; Swanson ir kt., 2005), mes ieškojome įrodymų dėl hcrt / orx neuronų aktyvacijos kopuliacijos metu ir dėl elgesio pablogėjimo dėl oreksino-1 receptorių (OX)1) blokada. Mes taip pat įvertinome neuroendokrininį hcrt / orx sistemos reguliavimą, išmatuodami kastracijos ir hormonų pakeitimo poveikį centriniam hcrt / orx turiniui ir dvigubu imuniniu žymėjimu hcrt / orx ir steroidinių hormonų receptoriams. Galiausiai mes įvertinome, kokiu mastu mesolimbinė DA sistema gali būti suaktyvinta hcrt / orx in vivo ir ar DA neuronai VTA, kurie gauna hcrt / orx įvadus, kopuliacijos metu turi padidėjusį Fos imuninį reaktyvumą (ir).

Medžiagos ir metodai

Fos imunohistochemija, elgesys ir ląstelių skaičius.

Suaugę (∼325 g), lytiškai patyrę patinai „Long – Evans“ žiurkės (Harlanas, Indianapolis, IN) buvo laikomi ir naudojami laikantis Nacionalinių sveikatos institutų. Laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo gairėsir visas procedūras patvirtino universitetų instituciniai gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetai. Savaitę prieš bandymą visiems gyvūnams buvo leista turėti keturias kasdienes 1 val. Seksualinės patirties sesijas su kiaušialąstėmis patele, kurią estradiolio benzoatas (10 μg, sc) ir progesteronas atvedė į rują po 48 val. (400 μg, sc; duota 4 val. Prieš tai). testavimas; Sigma, Sent Luisas, MO). Visų eksperimentų elgesio bandymai buvo atliekami 2 val. Įprastu gyvūnų nakties periodu jų namų narve, apšviestam iš vienos 40 W raudonos kaitinamosios lemputės. Kopuliacijos eksperimentams viena grupė (n = 6) vyrams leista savo narve su rujinga patele kopijuoti į vieną ejakuliaciją, po kurios patelė buvo pašalinta. Visi gyvūnai beveik iškart įsitaisė ir buvo pažeisti per <4 min. Vidutinis šios grupės ejakuliacijos latentiškumas buvo 632.6 ± 169.64 s (vidurkis ± SEM; n = 6). Kontrolinė grupė (n = 6) buvo naudojamas aktyvumo lygiui kontroliuoti. Šie gyvūnai buvo vizualiai stebimi, siekiant įsitikinti, kad jie buvo budrūs ir aktyvūs 15 minučių, o tai atitiko eksperimentinės grupės kopuliacijos bandymo laikotarpio trukmę. Narvelio dangteliai buvo atidaryti ir uždaryti šio 15 minučių laikotarpio pradžioje ir pabaigoje, tačiau kitaip gyvūnai liko nesutrikę. Šiuo laikotarpiu nenaudojami kontroliniai gyvūnai nebuvo naudojami. Gyvūnai buvo nuspręsta ramybės būsenoje, jei atrodė, kad jie ilsisi ant šono ar laikydami galvą žemyn (pritaikyta nuo Espana ir kt., 2003). Šešiasdešimt minučių nuo kopuliacijos sesijų ar kontrolinių stebėjimų pradžios gyvūnai buvo giliai anestezuojami natrio pentobarbitaliu (100 mg / kg) ir perfuzuojami 0.1 m PBS, pH 7.4 ir 4% paraformaldehido tirpalu PBS. Smegenys buvo apsaugotos nuo kryžminės apsaugos nuo 20% sacharozės – PBS, o visos kitos 40 μm kriostato sekcijos (30 vienam gyvūnui) iš hipotalaminių hcrt / orx ląstelių populiacijos buvo imuniniu būdu paženklintos prepro-hcrt / orx (1: 100; Millipore, Billerica, MA) ir Fos (1: 10,000; EMD Biosciences, San Diegas, CA) su atitinkamai 3 ′, 3′-diaminobenzidinu (DAB) ir nikeliu sustiprintu DAB, remiantis anksčiau aprašytomis imunohistocheminėmis procedūromis (Espana ir kt., 2003; Sato et al., 2005). Ląstelių skaičiavimas buvo atliktas dideliu padidinimu naudojant „Olympus“ (Tokijas, Japonija) mikroskopą ir fotoaparatą vienoje atkarpoje nuosekliame rostrocaudal lygyje (žr. Pav 1B,C) (2.45 mm priešais bregmą) (Swanson, 2004). Kiekviename pusrutulyje ląstelės, patenkančios į du 470 × 630 μm skaičiavimo laukus, buvo pažymėtos naudojant skaitmeninę vaizdo analizės programinę įrangą („Image-Pro Plus“; „Media Cybernetics“, „Silver Spring“, MD). Abiejuose pusrutuliuose šoniniai skaičiavimo laukai naudojo šakutes kaip savo medialinę ribą. Vidutiniais skaičiavimo laukais šakės buvo naudojamos kaip šoninė riba. Buvo užrašytas tik Fos, tik hcrt / orx ir dvigubai pažymėtų ląstelių, turinčių ir hcrt / orx, ir Fos-ir, skaičius.

1 pav. 

Padidėjęs Fos imuninis reaktyvumas hcrt / orx neuronuose kopuliacijos metu. A, Hcrt / orx neuronas (dešinėje), rodantis Fos-ir. Mastelio juosta, 25 μm. B, Reprezentatyvusis mikrografas iš dešiniojo skaičiavimo lauko nekopuliuojančio kontrolinio vyro kairiajame pusrutulyje. Svarstyklių juosta A), 200 μm. C, Kopijuoto vyro mikrografas. Mastelio juosta, 200 μm. Rodyklės rodo hcrt / orx neuronus, rodančius Fos-ir; žvaigždutės rodo Fos-ir branduolius ne hcrt / orx ląstelėse; fx, fornix.

Kastracijos eksperimentai ir imunoblotai.

Suaugęs patinas (∼325 g eksperimento pradžioje) Long – Evans žiurkės buvo anestezuojamos (75 mg / kg ketamino HCl ir 10 mg / kg ksilazino HCl, ip) ir kastruotos. Gyvūnams buvo leista išgyventi 7, 14 ar 28 d po operacijos, kol jie buvo anestezuoti ir perfuzuoti, o jų smegenims buvo atliktas imuninis žymėjimas prepro-hcrt / orx, kaip aprašyta aukščiau (visos grupės, n = 5). Šie gyvūnai buvo lyginami su fiktyvios operacijos grupe, kuriai atlikta skreplio pjūvis identiškos anestezijos metu (n = 5). Šamai taip pat buvo nužudyti 28 d. Ląstelių skaičiavimas buvo atliktas, kaip aprašyta aukščiau, toje pačioje vainikinės plokštumoje mažesniu padidinimu.

Atskirame eksperimente 28 d kastruoja (n = 5) ir fiktyviai apdorotos kontrolinės medžiagos (n = 5) buvo giliai anestezuoti natrio pentobarbitaliu (100 mg / kg), o jų smegenys pašalintos ir greitai užšaldytos sausame lede atšaldytame 2-metilbutane. Užšalusį hipotalamį užblokavo du vainikiniai pjūviai, vienas per vidurinę preoptinę sritį (mPOA), tiesiai į priekinės komisijos skilimą, ir kitas per užpakalinį pagumburio branduolį, kuris tiesiog uodeginis, kad trečiasis skilvelis pasidalytų į pagumburio ir krūminės įdubos. Tada blokai buvo apipjaustyti dviem sagitaliniais pjūviais bet kurio smegenų koto viduriniame gale ir horizontaliu pjūviu trečiojo skilvelio hipotalaminio įdubimo nugariniame gale. Tada audinių blokai buvo homogenizuoti ultragarsu, baltymai buvo ekstrahuoti į modifikuotą radioimunoprecipitacinį buferį, pH 8.0, su proteazės inhibitoriais („Roche Complete Mini“ proteazių mišinys; „Roche Diagnostics“, Indianapolis, IN), o ekstraktai buvo padalyti į alikvijinę dalį po centrifugavimo. Nustačius bendrą kiekvieno tiriamojo ekstrakto baltymų koncentraciją, 40 μg baltymų iš kiekvieno gyvūno buvo įkelta į atskiras 15% SDS-PAGE gelio duobutes. Elektroforezinis atskyrimas, perkėlimas į polivinilideno difluorido membranas (Bio-Rad, Hercules, CA) ir imunologinis žymėjimas buvo atliktas pagal Laemmli metodą (Cleveland ir kt., 1977), naudojant 1: 1000 anksčiau pažymėtą anti-prepro-hcrt / orx antikūną, o vėliau 1: 2000 anti-β-aktinas (Sigma) ir 1: 5000 ožkos anti-triušio IgG („Santa Cruz“ biotechnologija, Santa Cruz, CA) ) 5% pieno miltelių tris buferiniame druskos tirpale. Baltymų juostos buvo vizualizuotos padidintu chemiliuminescencijos rinkiniu (ECL; GE Healthcare, Piscataway, NJ) ir Kodak (Rochester, NY) BioMax plėvelėmis. Filmai buvo eksponuojami 40 ir nuskaitomi skaitmeniniu būdu, o optinis tankis buvo matuojamas naudojant viešai prieinamą „ImageJ“ programinę įrangą. Kiekvienam gyvūnui buvo nustatytos optinio tankio vertės hcrt / orx kaip β-aktino įkrovos kontrolės procentinė dalis ir atlikta statistinė analizė.

Trečiajame eksperimente žiurkių patinams, kaip aprašyta aukščiau, buvo atliktos fiktyvios operacijos (n = 3) arba kastruotas ir kas antrą dieną švirkščiamas 28 d su dihidrotestosteronu (500 μg, sc; n = 4), estradiolio benzoatas (20 μg, sc; n = 3), arba naftos transporto priemonė (0.1 μl; n = 3). Abu hormonai buvo įsigyti iš „Sigma“. Hormonų dozės buvo pasirinktos atsižvelgiant į jų ankstesnių tyrimų gebėjimą palaikyti kopuliaciją kastratuose (Putnam ir kt., 2005). 28-tą dieną po operacijų gyvūnai buvo nužudyti, o jų pagumburiai buvo užblokuoti, kad būtų galima išmatuoti prepro-hcrt / orkso kiekį Vakarų imunoblotu, kaip aprašyta aukščiau.

Steroidinių hormonų receptorius ir hcrt / orx dvigubo etiketo imunohistochemija.

Nepažeistų, lytiškai naivusių suaugusių patinų (∼350 g) ilgųjų Evanso žiurkių smegenų pjūviai buvo imunologiškai paženklinti androgenų receptoriams (AR) (1: 750; n = 6; „Santa Cruz Biotechnology“ arba estrogeno receptorius (ERα) (1: 2500; n = 9; „Santa Cruz Biotechnology“), naudojant nikelio sustiprintą DAB. Vėliau AR pažymėtos sekcijos buvo dvigubai pažymėtos prepro-hcrt / orx (kaip aprašyta aukščiau), o ERα žymėtos sekcijos buvo dvigubai dažytos prepro-hcrt / orx (n = 5). Po montavimo skyriai, artimai sutapę su vienu iš keturių koronarinių LHA sluoksnių, esančiais DLK atlase Swanson (2004) buvo rankomis nupiešti po mikroskopu, naudojant kameros lucida priedą, ir dvigubos bei vienetinės žymimos ląstelės kiekviename skyriuje buvo pažymėtos. Piešiniai buvo nuskaitomi skaitmeniniu būdu ir sudėti atlasų lygiais, naudojant „Adobe“ (San Chosė, CA) iliustratorių, ir kiekviena ląstelių populiacija buvo pažymėta atlanto iliustracijose (Swanson, 2004). ERα-plius-hcrt / orx-paženklintų pjūvių atveju buvo suskaičiuoti dvigubo ir vieno-paženklinto hcrt / orx neuronų skaičiai.

Farmakologija ir kopuliacinis elgesys.

Suaugęs patinas (∼350 g eksperimento pradžioje) Long – Evans žiurkės (n = 9) per savaitę prieš elgesio testavimą buvo surengtos keturios 1 val. Seksualinės patirties sesijos su seksualiai imliomis moterimis. Gyvūnai, kuriems bent kartą nepavyko išsiveržti per pirmąsias 30 paskutinio bandymo minučių, nebuvo įtraukti į eksperimentą. Patirties seansai ir elgesio bandymai buvo atliekami esant 40 W raudonai kaitinamajai šviesai 2 valandas iki gyvūno naktinio laikotarpio. Kopuliacinio elgesio testai buvo atlikti patino namuose. Jie truko 30 min. Skirtingus vyrų kopuliacinio elgesio bruožus (ty tvirtinimus, intromijas ir ejakuliacijas) stebėtojas įvertino akluoju eksperimentiniu gydymu, naudodamas pasirinktinę kompiuterio programinę įrangą, kuri fiksavo kiekvieno elgesio įvykio dažnio ir delsos duomenis. Trisdešimt minučių prieš elgesio tyrimus gyvūnams buvo suleistas OX1 antagonistas N- (2-metil-6-benzoksazolil) -N ″-1,5-naftiridin-4-ilkarbamidas (SB 334867) (20 mg / kg, ip) arba DMSO nešiklis (0.5 ml / kg). Eksperimento metu buvo atliktas paprastas subalansuotas tiriamasis objektas taip, kad pirmosios dienos testo metu narkotikai buvo suleisti penki gyvūnai, o likusieji keturi - transporto priemonę. Po 48 valandų vaisto išplaukimo gyvūnams, kurie buvo gydomi narkotikais, buvo duota nešiklio ir atvirkščiai.

Elektrofiziologija.

Suaugę Sprague Dawley žiurkių patinai (∼350 g) buvo anestezuojami chloraliniu hidratu (400 mg / kg, ip indukcijai; 100 mg · kg).-1 · H-1 po to priežiūrai) ir pritvirtintas prie stereotaksinio instrumento. Kaukolė ir gabalas per smegenų kamieno sritį, kurioje yra VTA, buvo pašalinti. Kiekvienas gyvūnas pirmiausia gavo dirbtinio CSF ​​(aCSF) infuziją [0.5 μl / 5 min; iš lambda, anteroposterior, + 2.6 arba + 3.4 mm; vidutinis, ± 0.8 mm; dorsoventral, −7.0 mm; plokščia kaukolė pagal stereotaksinį atlasą (Paxinos ir Watson, 1998)] su 32 ga Hamiltono švirkštu (0.5 μl / 5 min.) vienoje VTA pusėje. Tada, po 10 minutės, ląstelių per takelį ėminių ėmimo procedūra buvo atlikta ipsilaterinėje VTA pusėje. Vėliau gyvūnams buvo sušvirkšta hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol, n = 4; 1.4 nmol, n = 5; arba 140 nmol, n = 6, ištirpintas aCSF; Amerikos peptidas, Sunnyvale, Kalifornija) į priešingos pusės VTA, prieš pakartojant ląstelių per takelį procedūrą toje pusėje. Injekcijas atsveria pusrutulis ir priekinė ar užpakalinė injekcijos vieta. Už tarpląstelinių vienetų įrašai buvo atlikti naudojant vienkartines stiklines mikropipetes (1.5 mm išorinis skersmuo prieš traukiant; World Precision Instruments, Sarasota, FL), užpildytas 2 m NaCl ir suskaidytas atgal. Elektrodo varža buvo nuo 2 iki 4 MΩ, esant 135 Hz. DA neuronai buvo identifikuoti pagal teigiamą ir neigiamą tarpląstelinio veikimo potencialą, kuris dažnai turi ryškų pradinį segmentą / somatodendritinį (IS / SD) lūžį, plačią veikimo potencialo trukmę, lėtą šaudymo greitį ir netaisyklingą vieno smaigalio ar sprogstamojo šaudymo modelį (Grace ir Bunney, 1983). Norėdami atlikti ląstelių per takelį eksperimentą, įrašymo elektrodas buvo sistemingai perduodamas per stereotaksiniu būdu apibrėžtą bloką VTA (2.8 – 3.4 mm priešais lambdą; 0.6 – 1.0 mm šonine link vidurinės linijos; 6.5 – 8.5 mm žemiau smegenų paviršiaus). šešis kartus. Kiekvienas identifikuotas DA neuronas buvo užregistruotas 2 – 5 min internete, naudojant diagramų duomenų kaupimo sistemą (AD instrumentai, Mountain View, CA). Vidutinis spontaniškai aktyvių DA neuronų, aptinkamų kiekvieno gyvūno elektrodų takuose, skaičius (ląstelės viename take), buvo VTA DA neuronų populiacijos aktyvumo indeksas. Vidutinis DA neuronų sudegimo greitis buvo nustatytas iš visų DA neuronų, paimtų iš visų kiekvienos grupės gyvūnų.

Norėdami patikrinti depolarizacijos inaktyvaciją 140 nmol hcrt / orx grupėje, apomorfino HCl (20 μg / kg, ip; n = 4; Sigma) buvo suleistas iškart po mėginių paėmimo po hcrt-1 / orx-A. Dešimt minučių po apomorfino injekcijos buvo imami šeši papildomi elektrodų takeliai VTA šone, anksčiau gavusiems hcrt-1 / orx-A.

Elgesys, triguba etiketo imunohistochemija ir ląstelių skaičius.

Suaugusiems (∼300 g) patinams „Long – Evans“ žiurkėms buvo skirtos keturios 1 h seksualinės patirties sesijos su imančia patele, kaip aprašyta aukščiau. Prieš anesteziją, perfuziją ir audinių paruošimą imuniniam ženklinimui (1 h) gyvūnams (n = 6) buvo leista kopijuoti į vieną ejakuliaciją. Kaip aukščiau, gyvūnai pritvirtinti ir suintriguoti iškart, o vidutinis šios grupės ejakuliacijos latentinis laikotarpis buvo 588.50 ± 85.03 s (vidurkis ± SEM). Eksperimentinė grupė buvo palyginta su lytiniu būdu patyrusiomis kontrolinėmis grupėmis, kurioms nebuvo suteikta prieiga prie estiškų moterų kopuliacijai (n = 6). Kaip minėta pirmiau, bandymai buvo atliekami 2 valandas įprastu gyvūno nakties periodu, degant raudonai kaitriai. Po to, kai gyvūnai buvo užmušti, fiksuoti ir pjaustomi šalti mikrotomai (kaip nurodyta aukščiau), imunohistochemijai buvo atrinkti keturi kiekvieno gyvūno pjūviai, atstovaujantys keturis Rostrocaudal VTA lygius. Tiriamųjų skaičiui (n), naudojamas ląstelių skaičiavimui kiekviename lygyje, žr Lentelė 4. Skyriai buvo žymimi FOS (1: 7500; Santa Cruz Biotechnology) su DAB, kaip aprašyta aukščiau. Tada sekcijos buvo pažymėtos prepro-hcrt / orx (1: 500) ir tirozino hidroksilazės (TH; 1: 2000; Millipore) su cianinu konjuguotais fluorescenciniais antriniais antikūnais (atitinkamai 1: 200; Cy3 ir Cy2; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Ląstelių skaičius buvo atliktas esant dideliam (40 ×) padidinimui a "Leica" (Nussloch, Vokietija) DM 4000B mikroskopas naudojant Stereo tyrėjas programinė įranga (MBF Bioscience, Williston, VT), eksperimentuotojo aklas iki gydymo sąlygų. Stereo tyrėjas programinė įranga buvo naudojama skaičiavimo laukui apibrėžti, į kurį buvo įtrauktos visos DA ląstelės kiekviename VTA lygyje. Viename židinio nuotolyje kiekviename iš keturių rostrocaudal VTA lygių buvo pažymėti penki ląstelių tipai: TH teigiami neuronai, TH teigiami neuronai, rodantys Fos ir, TH teigiami neuronai, rodantys tiesioginį (į somatinę plazmoslemmą) hcrt / orkso skaidulomis, TH teigiamais neuronais, rodančiais ir Fos-ir, ir hcrt / orx paskyrimus, ir, galiausiai, atskirais Fos teigiamais branduoliais, kurie nėra TH neuronuose.

Duomenų analizė.

Grupinių ląstelių skaičiaus Fos eksperimente ir Western blot'ų pirmojo eksperimento pirmojo eksperimento optinio tankio matavimai buvo lyginami nepriklausomais mėginiais t testas. Atitikti pavyzdžiai t bandymai buvo atlikti naudojant OX priemones1 antagonistinis elgesio eksperimentas. Ląstelių skaičius kastracijoje, trigubo žymėjimo eksperimentai ir vidutinis šaudymo greitis bei ląstelių kiekvienoje trasoje matavimai buvo atlikti ANOVA.

rezultatai

Kopuliacija padidina Fos imunoreaktyvumą hcrt / orx neuronuose

Hcrt / orx-ir ląstelių, parodžiusių Fos-ir, procentas reikšmingai skyrėsi tarp grupių, o kopuliavusiems gyvūnams padidėjo Fos-ir hcrt / orx ląstelėse (t(10) = 7.71; p <0.01) (Lentelė 1, Pav 1). Vidutinis dvigubai pažymėto hcrt / orx skaičius taip pat reikšmingai skyrėsi tarp grupių (t(10) = 6.03; p <0.001). Pažymėtina, kad kopijuojant gyvūnus nebuvo pastebėtas Fos teigiamų hcrt / orx neuronų skaičiaus skirtumas tarp medialinio ir šoninio skaičiavimo laukų (duomenys neskelbtini) (Harris ir Aston-Jones, 2006). Bendras Fos-ir branduolių (tik Fos ir dvigubai pažymėtų hcrt / orx neuronų) branduolių skaičius buvo žymiai didesnis gyvūnų kopuliacijos metu, nei nekontroliuojamų kontrolinių gyvūnų (t(10) = 16.97; p <0.001) (Lentelė 1).

Peržiūrėkite šią lentelę: 

1 lentelė. 

Padidėjęs Fos-ir kopuliacija žiurkių patinų hcrt / orx neuronuose

Kastracija sumažina hcrt / orx imuninį reaktyvumą ir baltymus pagumburyje

Palyginus su fiktyviai gydomomis kontrolinėmis medžiagomis, hcrt / orx-ir neuronų skaičius po kastracijos žymiai sumažino ląstelių skaičių 28 d (Pav 2A) (F(3,16) = 7.60; p <0.005). Tai reiškia, kad stebėtoje populiacijoje ląstelių skaičius sumažėjo 31.8%. Post hoc (Tukey) tyrimai neparodė reikšmingų skirtumų tarp fiktyviai gydomų žiurkių ar 7 ar 14 d kastratų. Vėliau atlikus hipotalaminio prepro-hcrt / orx imunoblot analizę, nustatyta, kad reikšmingas 28 d kastrato hcrt / orx juostų optinio tankio sumažėjimas palyginti su fiktyviomis kontrolinėmis medžiagomis (Pav 2B) (t(8) = 2.99; p <0.05.).

2 pav. 

Kastracija sumažina žiurkių patinų pagumburio hcrt / orx-ir. A, Reprezentatyvūs hcrt / orx žymėtų neuronų mikrografai viename pusrutulyje rodo, kad ląstelių skaičius žymiai sumažėjo 28 d po kastracijos. Pradinės vertės yra vidutinis abiejų pusrutulių ląstelių skaičius ± SEM; **p <0.005. Mastelio juosta, 200 μm; fx, fornix. B, Vakarų imunoblotai rodo reikšmingą pagumburio prepro-hcrt / orx sumažėjimą 28 d kastratuose. Kiekviena juosta žymi vieno gyvūno signalą bet kurioje grupėje. Reikšmės yra vidutinis ± SEM optinio tankio (od) vienetai hcrt / orx, β-aktino atžvilgiu; *p <0.05. C, Imunoblotai, skirti prepro-hcrt / orx 28 d kastratuose, rodo E2 išlaikyti pogumburio hcrt / orx kiekį lygų šamų kiekiui, palyginti su aliejumi apdorotu kontroliniu tirpalu. Grupės su ta pačia mažąja raide reikšmingai nesiskiria (p <0.05).

Estradiolis atkuria pagumburio hcrt / orx baltymų lygį

Atlikus 28 d po kastracijos ar fiktyvios operacijos, prepro-hcrt / orx lygis gyvuliais, gydytais gyvūnais, buvo žymiai mažesnis nei šamoto ir estradiolio (E2) apdorotos grupės (F(3,9) = 8.47; p <0.005) (Pav 2C). Į vieną pusę ANOVA su post-hoc (Tukey) tyrimais nustatyta, kad prepro-hcrt / orx lygiai išmatuoti fiktyviuose ir E lygiuose2-apdoroti gyvūnai nesiskyrė vienas nuo kito ir kad E2 grupė nesiskyrė nuo DHT gydytų gyvūnų.

ERα yra kartu su hcrt / orx ir yra ekspresuojamas kartu su anatomiškai skirtinga hcrt / orx neuronų populiacija

Branduolinė AR buvo ventraliai pašalinta iš pagrindinės hcrt / orx neuronų populiacijos, vidutiniškai plinta iš lankinio branduolio į regos traktą. Jokiu atveju tame pačiame neurone nebuvo rasta branduolinių AR ir hcrt / orx (duomenys neskelbtini). Nors ERα rodė panašų pasiskirstymo modelį pogumburio ventraliniame plote, ERα žymėjimas buvo platesnis ventromedialiniame branduolyje. Nugaroje ERα žymėjimas buvo rastas siaurėjančiose ląstelių juostose, kurios medialiai tęsėsi nuo vidinės kapsulės po zona incerta iki dorsomedialinio hipotalamo (DMH). ERc etiketė retai buvo nustatyta hcrt / orx neuronuose (<1% tirtų gyventojų). Kai buvo pastebėta, kad ERα kolokalizuojasi su hcrt / orx, jis paprastai buvo neuronuose, esančiuose DMH arba tiesiog nukreiptas į DMH (Pav 3). Taigi, nors labai nedaug hcrt / orx neuronų pagumburyje ekspresuoja ERα, didelė dalis (∼65%) tų, esančių DMH ar šalia jo (Pav 3).

3 pav. 

ERα yra kartu su hcrt / orx. ERα branduolius vaizduoja uždari apskritimai, hcrt / orx neuronus vaizduoja atviri apskritimai, o dvigubai pažymėtą ERα ir hcrt / orx ląsteles žymi žvaigždės. Skaičiai nurodyti milimetrais nuo bruknių. AHN, priekinis pagumburio branduolys; fx, fornix; ot, optinis traktas; PVM, paraventrikulinis branduolys; VMH, ventromedialinė pagumburio liga; 3v, trečias skilvelis.

Hcrt / orx receptorių blokada pablogina kopuliaciją

Palyginti su transporto priemone, išankstinis apdorojimas su OX1 antagonistas SB 334867 padidino vidutinį latencijos trukdymą ir sumažino vidutinį ejakuliacijos dažnį (Lentelė 2). Suporuoti pavyzdžiai t bandymai atskleidė reikšmingą „SB 334867“ įtaką įsibrovimo delsoms (t(8) = 3.31; p <0.05) ir ejakuliacijos dažnis (t(8) = 2.40; p <0.05). Taip pat pasirodė, kad gydymas vaistais sukelia nereikšmingą vidutinių latentų padidėjimą ir ejakuliaciją bei sumažina vidutinį intromisijų skaičiųLentelė 2).

Peržiūrėkite šią lentelę: 

2 lentelė. 

OX1 antagonistas SB 334867 blogina vyrų elgesį kopuliacijos srityje

Hcrt-1 / orx-A padidina VTA DA neuronų išsiskyrimo greitį ir populiacijos aktyvumą bei sukelia depolarizacijos inaktyvaciją

Mažiausia hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol) dozė padidino vidutinį VTA DA neuronų sudeginimo greitį, palyginti su kontroline medžiagaPav 4B,C) (palyginimas poromis); F(1,18) = 13.83, p <0.01; po mišraus 2 × 3 ANOVA, F(1,10) = 13.67, p <0.005), tačiau jokia kita hcrt-1 / orx-A dozė tokio poveikio neturėjo. Ši dozė yra atsakinga už reikšmingą pagrindinį hcrt / orx poveikį šaudymo greičiui, nustatytam 2 × 3 ANOVA. A post-hoc (Tukey) testas neparodė reikšmingo skirtumo tarp aCSF gydytų kontrolinių grupių dozių. 1.4 nmol hcrt-1 / orx-A dozė reikšmingai padidino VTA DA neuronų populiacijos aktyvumą (spontaniškai aktyvių neuronų skaičius, aptiktas kiekviename elektrodo takelyje) (Pav 4D) (palyginimas poromis, F(1,24) = 6.42, p <0.05; po reikšmingos sąveikos 2 × 3 mišrioje ANOVA, F(2,10) = 16.71, p <.001). Didžiausia išbandyta hcrt-1 / orx-A dozė (140 nmol) žymiai sumažino DA neuronų (ląstelių viename takelyje) populiacijos aktyvumą (Pav 4D) (vienpusis pakartojimas matuojant ANOVA naudojant 140 nmol dozę, F(2,6) = 12.20; p <0.01). Šį sumažėjimą panaikino sisteminė apomorfino injekcija (Tukey's post-hoc bandymas).

4 pav. 

Hcrt / orx reguliuoja VTA DA neuronų aktyvumą in vivo. A, Tipiško VTA DA neurono bangos forma, turinti būdingą platų veikimo potencialą ir IS / SD pertrauką. B, Viršuje, to paties su transporto priemone gydyto neurono, kuriame būdingas įprastas trūkimo aktyvumas, sudeginimo greitis ir modelis; apačioje, greitai šaunantis neuronas, stebimas po vietinės 0.014 nmol infuzijos su hcrt 1 / orx A (n = 4). C, D, Vietinio infuzijos būdu gauto hcrt-1 / orx-A dozės ryšys su VTA DA neuronų sudeginimo greičiu ir populiacijos aktyvumu. Hcrt-1 / orx-A (1.4 nmol; n = 5) padidina gyventojų aktyvumą. Sumažėjęs hcrt 140 / orx A populiacijos aktyvumas po 1 nmol (n = 4) buvo atšauktas sisteminio apomorfino (20 μg / kg). Skaičius kiekvienoje juostoje rodo užregistruotų neuronų skaičių. Parodytos priemonės ± SEM. *p <0.05; **p <0.01.

TH-teigiami VTA neuronai su hcrt / orx paskyrimais rodo, kad Fos-ir padidėja po kopuliacijos

Dviejų krypčių ANOVA vidutinis Fos-ir branduolių skaičius ne-TH teigiamuose neuronuose parodė reikšmingą gydymo poveikį (F(1,38) = 38.88; p <0.001) ir anatominis lygis (F(7,38) = 12.59; p <0.001), taip pat reikšminga šių dviejų veiksnių sąveika (F(7,38) = 7.45; p <0.001), o tai rodo, kad Fos, sukeltas kopuliacijos metu, pirmiausia pasirodo priekinio skaičiavimo lygiuose. Tai patvirtino vėlesni vienpusiai ANOVA ir post-hoc (Tukey) testai, kurie atskleidžia du anteriormost lygius („rostral“ ir „vidurinis 1“), kad yra žymiai didesnis Fos teigiamų branduolių skaičius (F(3,24) = 9.48; p <0.001). Tas pats nebuvo pasakyta apie nekopuliuojančius kontrolinius mėginius, kurių bazinis Fos-ir nesiskyrė pagal lygį (Lentelė 3). TH-paženklintų neuronų procentas, vartojant hcrt / orx, eksperimento metu nesiskyrė; tačiau ši priemonė rodė ryškų rostrocaudal gradientą, kai labiausiai rostral lygio atžvilgiu abiejų grupių neuronų procentas buvo žymiai didesnis (Lentelė 4) (F(3,38) = 133.57; p <0.001). Ši išvada atitinka didesnį hcrt / orx skaidulų tankį, kurį pastebėjome priekinėje VTA. TH pažymėtų neuronų, rodančių Fos-ir (bet neturinčių hcrt / orx aplikacijų), procentas skyrėsi nei pagal gydymą, nei pagal rostrocaudalinį lygį. TH neuronų, rodančių Fos ir hcrt / orx aplikacijas, procentas parodė reikšmingą gydymo poveikį (F(1,38) = 8.62; p <0.01), lygis (F(3,38) = 4.53; p <0.01) ir jų sąveika (F(3,38) = 4.53; p <0.01). Eksperimentinės grupės vienpusis ANOVA rodo, kad kopuliacijos sukeltas Fos-ir TH neuronuose su hcrt / orx aplikacijomis labiausiai pasireiškia ląstelėse, esančiose rostraliniame VTA (F(3,24) = 4.85; p <0.05).

Peržiūrėkite šią lentelę: 

3 lentelė. 

Fos-ir branduolių skaičius VTA ne TH-teigiamose ląstelėse keturiais rostrocaudal lygiais

Peržiūrėkite šią lentelę: 

4 lentelė. 

TH neuronų, parodančių hcrt / orx, Fos arba abu, procentas

Diskusija

Padidėjęs Fos-ir hcrt / orx neuronų LHA po kopuliacijos rodo, kad šių ląstelių aktyvacija lydi vyrų reprodukcinį elgesį (Morganas ir Curranas, 1991). Šie duomenys atitinka ankstesnius 2-deoksigliukozės tyrimus, rodančius padidėjusį LHA metabolinį aktyvumą po to, kai buvo paveikti žalingi moteriški kvapai (Orsini ir kt., 1985). Šis poveikis gali atspindėti padidėjusį hcrt / orx perdavimą hcrt / orx neuronų galinėse vietose, tokiose kaip mPOA, kuriose įrodyta, kad hcrt / orx palengvina vyrų kopuliaciją (Gulia ir kt., 2003). Su lytimi susijusi Fos indukcija hcrt / orx neuronuose atitinka nuostatą, kad hcrt / orx neuronai yra jautrūs natūraliems stiprintuvams. Neseniai atliktas tyrimas parodė, kad žiurkių hcrt / orx neuronuose padidėjo Fos-ir kiekis, dėl kurio buvo galima tikėtis atlygio už maistą, ir kad šis Fos-ir padidėjimas koreliuoja su gyvūnų pageidavimų balu sąlygotų vietų pasirinkimo paradigmoje (Harris ir kt., 2005). Hcrt / orx neuronų aktyvacija gali būti su atlygiu susijęs reiškinys, nes aukščiau aprašytas tyrimas parodė, kad gyvūnams, kuriems veikiami naujojo objekto dirgikliai, Fos-ir hcrt / orx ląstelėse staigiai padidėja. Šie autoriai taip pat nurodo procentus hcrt / orx neuronų, išreiškiančių bazinį (15%), naujovių sukeltą (18%) ir kondicionuojamą maistą (50%) Fos-ir, kurie yra suderinami su tais, apie kuriuos čia pranešame (12% bazinis vs 40 % kopuliacijos sukelta). Šie stebėjimai rodo, kad hcrt / orx neuronus suaktyvina natūrali nauda, ​​tokia kaip maistas ir seksas.

Čia aprašytas estrogeninis hcrt / orx reguliavimas suteikia papildomų įrodymų galimai hipokretinerginei vyrų seksualinio elgesio kontrolei. Pažymėtina, kad čia nurodytas hcrt / orx praradimo laikas yra suderinamas su klasikiniais elgesio duomenimis, rodančiais, kad vyrų seksualinis elgesys po kastracijos mažėja savaites, be to, kad tai yra E2 o ne DHT, kurio reikia norint atkurti elgesį (Hull ir kt., 2006). Be tolesnio eksperimento, mes galime tik spėlioti apie mechanizmus, kuriais grindžiamas nuolatinis hcrt / orx buvimas, nesant E2. Paprasčiausias paaiškinimas gali būti toks, kad vėlavimo laikas iki sumažėjusio hcrt / orx lygio atspindi latentiškumą iki lengvai išmatuojamo sverto išsekimo vezikulinėse siųstuvo vietose. Kaip aptarta toliau, ER nebuvimas hcrt / orx neuronuose rodo hcrt / orx ekspresijos reguliavimą neuronų, turinčių tuos receptorius, įvestimis. Nes neuropeptido sintezė (Enyeart ir kt., 1987), judrumas (Shakiryanova ir kt., 2005) ir išleidimas yra nuo veiklos priklausomi reiškiniai (Fulop ir kt., 2005) bet koks postcastration sumažėja hcrt / orx neuronų jaudrumas (Smith et al., 2002) gali neigiamai paveikti šiuos procesus, sulėtindama peptido atpalaidavimo kinetiką, kad kurį laiką sumažėjęs sintezės lygis gali būti nepastebimas. Kad ir koks būtų mechanizmas, panašu, kad steroido veikimas yra pirmasis sudėtingos kaskados elementas, atsakingas už bazinio peptido lygio palaikymą.

Lygiai taip pat atrodo, kad hcrt / orx neuronai reguliuoja maisto vartojimą reaguodami į humorinius veiksnius, susijusius su energijos balansu (Olszewski ir kt., 2003; Burdakov et al., 2006), hcrt / orx neuronai taip pat atrodo jautrūs hormoninei aplinkai ir panašiai gali palengvinti reprodukcinį elgesį. Čia pateikti duomenys rodo, kad bazinę hcrt / orx išraišką palaiko E2. Gimdos lyties nesugadintiems gyvūnams, išreiškiantiems visą hcrt / orx komplektą, šis siųstuvas greičiausiai palengvins perdirbimą struktūrose, svarbiose vyrų lytiniam elgesiui ir atlygiui. Hcrt / orx neuronai turi esminius abipusius ryšius su tokiomis sritimis kaip mPOA, stria terminalis lovos branduolys (BNST) ir VTA (Peyron ir kt., 1998; Sakurai ir kt., 2005), kurie yra žinomi kaip svarbūs vyriškam seksualiniam elgesiui išreikšti (apžvalgą žr Hull ir kt., 2006). Tikimasi, kad hcrt / orx sumažėjimas po kastracijos sumažins svarbų šių struktūrų sužadinimo šaltinį ir taip pablogins elgesį.

Papildomo tyrimo laukia būdas, kuriuo ER aktyvinimas palaiko bazinę hcrt / orx išraišką; tačiau tai greičiausiai lems aferitas iš ERα išreiškiančių smegenų sričių, kurios išsikiša į LHA (Simerly ir kt., 1990; Yoshida ir kt., 2006), ypač toms struktūroms, kurios turi kai kurias sužadinimo projekcijas (pvz., BNST ir mPOA (Georges ir Aston-Jones, 2002; Henny ir Jones, „2006“)]. Mes nepranešame, kad AR yra kolokalizuotas su hcrt / orx, ir, nors keli hcrt / orx neuronai buvo ERα imunopozityvūs, šių ląstelių nėra pakankamai daug, kad būtų galima paaiškinti pastebimą kastracijos poveikį, taip pat nėra registre su tomis, kurios, kaip pastebima, sumažina jų hcrt / orx kiekis po kastracijos (Fig. 2A, 3). Mes taip pat pranešame, kad ERα-ir branduoliai bei hcrt / orx neuronai dažnai yra greta vienas kito, padidindami galimybę lokaliai reguliuoti hcrt / orx neuronų ir genų ekspresijos aktyvumą kaimyninėse ERα turinčiose ląstelėse. Šio tipo sužadinamosios vietinės grandinės aktyvumo svarba aprašyta hcrt / orx sistemoje (Li ir kt., 2002). Tačiau kol būtini anatominiai eksperimentai neparodys ERα turinčių ląstelių sužadinamų sinapsių ant hcrt / orx neuronų, negalima manyti, kad nuo hormonų priklausoma, nuo afektų priklausoma hcrt / orx išraiška. Hcrt išraiška svyruoja kasdien (Taheri ir kt., 2000), nėštumo metu (Kanenishi ir kt., 2004) ir reaguojant į įvairias mitybos manipuliacijas (Cai ir kt., 1999; Griffond ir kt., 1999). Molekuliniai mechanizmai, reguliuojantys hcrt Ekspresija nebuvo apibūdinta, todėl šiuo metu yra sunku atsekti kelią nuo branduolio iki membranos, o įvardinti kandidatines signalines molekules, kurios gali paveikti hcrt / orx raišką.

Nuomonę, kad hcrt / orx signalizacija yra naudojama stiprinant elgesį, pavyzdžiui, seksą, taip pat patvirtina duomenys, rodantys seksualinio elgesio sutrikimus po gydymo OX.1 antagonistas SB 334867 (Lentelė 2). Panašiomis dozėmis, kaip blokuoti streso sukeltą kokaino savaiminio vartojimo atkūrimą (Boutrel ir kt., 2005), SB 334867 žymiai padidino įsiskverbimo latenciją ir sumažino ejakuliacijų skaičių, kas rodo, kad hcrt / orx perdavimo blokada gali turėti įtakos estroos moterų stimuliuojančioms savybėms.

DA yra svarbus neuromediatorius, teikiantis atlygį, skatinantį motyvaciją ir adaptyvų elgesį (Berridge ir Robinson, 1998; Ikemoto ir Panksepp, 1999; Išminčius, 2004). Mes pastebėjome stiprų hcrt / orx sužadinamąjį poveikį nuo dozės, priklausomą nuo VTA DA neuronų aktyvumo. Šis atradimas patvirtina hcrt / orx vaidmenį sutvirtinant ir rodo, kad mezolimbinė DA sistema yra lokalizacija už mPOA ribų, kurioje hcrt / orx projekcijos gali padėti sustiprinti vyrų seksualinį elgesį. Mažiausia ištirta doze (0.014 nmol), hcrt / orx padidino šaudymo greitį nepaveikdamas populiacijos aktyvumo (ląstelės / takelis) (Pav 4C). Vartojant tarpinę dozę (1.4 nmol), DA neuronų populiacijos aktyvumas padidėjo, tai rodo, kad anksčiau buvo suaktyvinti ramybės būsenoje esantys hiperpolarizuoti neuronai (Pav 4D). Vartojant didžiausią dozę (140 nmol), sumažėjo VTA DA neuronų populiacijos aktyvumas. Įdomu tai, kad hcrt / orx sukeltas VTA DA neuronų populiacijos aktyvumo sumažėjimas buvo panaikintas, ūmiai paskyrus DA agonisto apomorfino (Pav 4D). Normaliems gyvūnams apomorfinas hiperpoliarizuoja DA neuronus, aktyvuodamas autoreceptorius ir mažindamas jų šaudymo greitį bei populiacijos aktyvumą. Tačiau po lėtinio antipsichozinio gydymo ar pakartotinio gydymo piktnaudžiavimo vaistais apomorfinas gali panaikinti narkotikų sukeltą gyventojų aktyvumo sumažėjimą (Grace ir kt., 1997; Shen ir Choong, 2006). Manoma, kad apomorfinas panaikina depolarizacijos inaktyvaciją, pakartotinai suaktyvinęs ląsteles repolarizuodamas pakankamai, kad galėtų tęsti šaudymą. Šie duomenys kartu rodo, kad hcrt / orx daro nuo dozės priklausomą sužadinimo poveikį VTA DA neuronams, kaip ir ankstesniuose in vitro darbas (Korotkova ir kt., 2003).

Kelių eksperimentų metu buvo nagrinėjama mažėjančių kelių nuo LHA ​​iki VTA svarba (Bielajew ir Shizgal, 1986; „Shizgal“, „1989“; Jūs et al., 2001). Šie duomenys rodo, kad NAc DA padidėjimas hipotalaminei sąlygoto motyvuoto elgesio, pavyzdžiui, kopuliacijos, metu (Pfaus ir kt., 1990; Wenkstern ir kt., 1993) arba šėrimas (Hernandez ir Hoebel, 1988; Rada ir kt., 2005) gali remtis šiomis mažėjančiomis projekcijomis. Tai, kad tokiose projekcijose yra hcrt / orx, patvirtina eksperimentai, kuriuose pastebima, kad NAc DA ištekėjimas padidėja po hcrt / orx injekcijos VTA viduje (Narita ir kt., 2006). Pogumburyje serotoninas [5-hidroksitriptaminas (5-HT)] gali stipriai hiperpolarizuoti LHA hcrt / orx neuronus (Li ir kt., 2002). Selektyvūs serotonino reabsorbcijos inhibitoriai arba pats 5-HT, atvirkščiai dializuojamas į LHA, esant pagrindinei hcrt / orx ekspresuojančių ląstelių populiacijai, sumažina bazinį ir moters sukeltą NAc DA išsiskyrimą ir pablogina kopuliaciją (Lorrain ir kt., 1997, 1999). Atsižvelgiant į aukščiau pateiktus duomenis, rodančius hcrt / orx neuronų aktyvaciją kopuliacijos metu ir VTA DA neuronų aktyvavimą hcrt / orx būdu, mes teigiame, kad mažėjančios hcrt / orx projekcijos į VTA gali būti tarpininkaujant su lytimi susijusiam NAc DA išsiskyrimui. Be to, šių projekcijų slopinimas naudojant vidinę LHA 5-HT gali paaiškinti slopinantį 5-HT poveikį NAc DA išsiskyrimui ir seksualiniam elgesiui.

Anatominis hcrt / orx-DA sąveikos substratas yra akivaizdus paaiškėjus, kad TH-teigiami VTA neuronai yra inervuoti hcrt / orx sistemos ir rodo padidėjusį Fos-ir, veikiant tokius apdovanojimus skatinančius stimulus kaip kopuliacija (Pav 5, Lentelė 4). Šis poveikis parodė ir elgesio svarbą, ir erdvinį specifiškumą, nes Fos indukcija hcrt / orx naudojamuose TH neuronuose buvo nustatyta tik priekinėje kopuliuojančių gyvūnų VTA. Turbūt nenuostabu, kad toks suaktyvinimo būdas pasireiškia šioje VTA dalyje, nes DA ląstelės guli tiesiog kaukolės link pagrindinės hcrt / orx neuronų populiacijos, kurių mažėjančios skaidulos kerta šią sritį, prieš pradėdamos vykdyti tolimesnius galvos smegenų kamščius (Peyron ir kt., 1998).

5 pav. 

Kopuliacija indukuoja Fos-IR hcrt / orx naudojamuose VTA DA neuronuose. A, Mikrografai, rodantys TH, hcrt / orx ir Fos ženklinimą VTA. Rodyklės žymi Fos-teigiamus TH neuronus su hcrt / orx paskyrimais; Žvaigždutės žymi dvigubai pažymėtus neuronus be paskyrimų. Mastelio juosta, 45 μm. B, Fos teigiamų TH neuronų detalės su rodyklėmis, nurodančiomis hcrt / orx butonų vietas pasirinkime. C, Vainikinės pjūviai, rodantys Rostrocaudal VTA lygį, naudojamą skaičiuojant (tamsiai nuspalvinti). Skaičiai kiekvieno skyriaus viršuje, kairėje, yra nurodyti milimetrais nuo bregmos. Skaičiai viršutiniame dešiniajame kampe yra vidutiniai ± SEM ląstelių tankio įvertinimai tame lygyje. Langelyje nurodomas mikrografų plotas A.

Šie duomenys rodo naują būdą, kuriuo lytiniai liaukos steroidai gali paveikti pagumburio įvestį į DA sistemas, susijusias su motyvuotu elgesiu (Pav 6). Jie taip pat įtraukia seksualinį elgesį į vis didėjantį elgesio, kurį reguliuoja hcrt / orx, sąrašą, įskaitant susijaudinimą, užkalbėjimą ir narkotikų paiešką.

6 pav. 

Modelis hcrt / orx reguliavimui lytinių liaukų steroidais ir VTA DA reguliavimu hcrt / orx. Estradiolis, sintetinamas iš lytinių liaukų testosterono aromatazės pagalba, veikia ERα turinčius neuronus BNST, mPOA ir LHA. Šios struktūros išsivysto į hipotalaminius hcrt / orx neuronus. Šių struktūrų sužadinamosios projekcijos gali įtakoti hcrt / orx neuronų ir genų ekspresijos aktyvumą steroidams jautriu būdu. Hcrt / orx projekcija į VTA sustiprina smegenų vidurinės smegenų dalies neuronų aktyvumą vyriškos lyties elgesio metu. Šį poveikį gali sustabdyti vidinės LHA 5-HT infuzijos, kurios slopina hcrt / orx aktyvumą, pablogina seksualinį elgesį ir NAc DA išsiskyrimą.

Išnašos

  • Gavo balandžio 21, 2006.
  • Revizija gauta 23, 2007 sausio mėn.
  • Priimta vasario 8, 2007.

  • Šį darbą rėmė Jungtinių Valstijų visuomenės sveikatos tarnybos stipendijos MH073314 (JWM), MH40826 ir MH01714 (EMH) ir AA12435 (R.-YS). Dėkojame dr. Samir Haj-Dahmane už naudingus patarimus ir dr. Zuoxin Wang už mikroskopijos įrangos aprūpinimą.

  • Korespondencija turėtų būti adresuojama Johnui Muschampui iš Floridos valstijos universiteto Psichologijos katedros, Talahasis, FL 32306-1270. [apsaugotas el. paštu]

Nuorodos

  1. ↵
    1. Berridge KC
    2. Robinson TE

    (1998) Koks yra dopamino vaidmuo atlyginant: hedoninis poveikis, mokymas už atlygį ar skatinamasis dėmesys? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  2. ↵
    1. Bielajew C,
    2. Shizgal P

    (1986) Įrodymai, darantys įtaką mažėjančioms skaiduloms, kad būtų galima stimuliuoti medialinį priekinio smegenų pluoštą. J Neuroscience 6: 919-929.

  3. ↵
    1. Borgland SL,
    2. „Taha SA“,
    3. Sarti F,
    4. Laukai HL,
    5. Bonci A

    (2006) Oreksinas A, esantis VTA, yra kritinis, norint sukelti sinapsinį plastiškumą ir įjautrinti elgesį su kokainu. Neuronas 49: 589-601.

  4. ↵
    1. B Bordrel
    2. Kenny PJ,
    3. „Specio SE“,
    4. Martin-Fardon R
    5. Markou A,
    6. Koob GF,
    7. de Lecea L

    (2005) Hipokretino vaidmuo tarpininkaujant streso sukeltam kokaino elgesio atstatymui. Proc Natl Acad Sci USA 102: 19168-19173.

  5. ↵
    1. Burdakovas D,
    2. „Jensen LT“,
    3. Alexopoulos H,
    4. Williams RH,
    5. „Fearon IM“,
    6. O'Kelly aš,
    7. Gerasimenko O,
    8. Fugger L,
    9. Verhratsky A

    (2006) Tandem porų K + kanalai tarpininkauja oreksinų neuronų slopinimui gliukozės pagalba. Neuronas 50: 711-722.

  6. ↵
    1. Caggiula AR,
    2. Hoebel BG

    (1966) užpakalinėje pogumburio „kopuliacijos ir apdovanojimo vieta“. Mokslas 153: 1284-1285.

  7. ↵
    1. Cai XJ,
    2. „Widdowson PS“,
    3. Harrold J,
    4. Wilson S,
    5. Buckingham RE,
    6. Arch JR,
    7. „Tadayyon M“,
    8. „Clapham JC“,
    9. Laukinis J,
    10. Williams G

    (1999) Pagumburio oreksino išraiška: moduliacija pagal gliukozės kiekį kraujyje ir maitinimas. Diabetas 48: 2132-2137.

  8. ↵
    1. Cleveland DW,
    2. „Fischer SG“,
    3. „Kirschner MW“,
    4. „Laemmli“ JK

    (1977) Peptidų žemėlapių nustatymas ribota proteolize natrio dodecilsulfate ir analizė gelinio elektroforezės būdu. J Biol Chem 252: 1102-1106.

  9. ↵
    1. de Lecea L,
    2. Kilduff TS,
    3. Peyron C,
    4. „Gao X“,
    5. Foye PE,
    6. Danielson PE,
    7. „Fukuhara C“,
    8. Battenberg EL,
    9. Gautvik VT,
    10. „Bartlett FS II“,
    11. Frankel WN,
    12. van den Pol AN,
    13. Bloom FE,
    14. „Gautvik KM“,
    15. „Sutcliffe“ JG

    (1998) Hipokretinai: hipotalamui specifiniai peptidai, turintys neuroekscitacinį aktyvumą. Proc Natl Acad Sci USA 95: 322-327.

  10. ↵
    1. DiLeone RJ,
    2. Georgescu D,
    3. Nestler EJ

    (2003) Šoniniai pagumburio neuropeptidai, gaunantys atlygį ir priklausomybę nuo narkotikų. Life Sci 73: 759-768.

  11. ↵
    1. Enyeart JJ,
    2. Sheu SS,
    3. Hinkle PM

    (1987) Įtampai jautrių Ca2 + kanalų dihidropiridinų moduliatoriai specialiai reguliuoja prolaktino gamybą GH4C1 hipofizės naviko ląstelėse. J Biol Chem 262: 3154-3159.

  12. ↵
    1. „Espana RA“,
    2. Valentino RJ,
    3. Berridge CW

    (2003) Fos imunoreaktyvumas sintetinant hipokretiną ir hipokretiną-1 receptorius ekspresuojančius neuronus: kasdienio ir naktinio savaiminio pabudimo, streso ir hipokretino-1 vartojimo poveikis. Neurologijos 121: 201-217.

  13. ↵
    1. Fadelis J,
    2. Deutch AY

    (2002) Anatominiai oreksino ir dopamino sąveikos substratai: šoninės pagumburio projekcijos į ventralinę taktinę sritį. Neurologijos 111: 379-387.

  14. ↵
    1. Fulop T,
    2. Radabaugh S,
    3. Smithas C

    (2005) Nuo veiklos priklausomas diferencinis siųstuvo išleidimas pelių antinksčių chromaffino ląstelėse. J Neuroscience 25: 7324-7332.

  15. ↵
    1. Fulton S,
    2. Woodside B,
    3. Shizgal P

    (2000) Smegenų atlygio schemos moduliavimas leptinu. Mokslas 287: 125-128.

  16. ↵
    1. Georges F,
    2. Aston-Jones G

    (2002) Ventralinio raktikaulio srities ląstelių aktyvinimas stria terminalis lovos branduoliu: nauja sužadinamųjų aminorūgščių įvestis į smegenų vidurinės smegenų dopamino neuronus. J Neuroscience 22: 5173-5187.

  17. ↵
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS

    (1983) Nigralinių dopaminerginių neuronų intraceliulinė ir ekstraląstelinė elektrofiziologija. 1. Identifikavimas ir apibūdinimas. Neurologijos 10: 301-315.

  18. ↵
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS,
    3. Moore H,
    4. Toddas CL

    (1997) Dopamino ląstelių depoliarizacijos blokas kaip antipsichozinių vaistų terapinio veikimo modelis. Tendencijos Neurosci 20: 31-37.

  19. ↵
    1. Griffond B,
    2. Risoldas PY,
    3. Jacquemard C,
    4. Colard C,
    5. Fellmann D

    (1999) Insulino sukelta hipoglikemija padidina preprohipokretino (oreksino) mRNR žiurkės šoniniame hipotalaminiame plote. Neurosci Lett 262: 77-80.

  20. ↵
    1. „Gulia KK“,
    2. Mallick HN,
    3. Kumaro V. M.

    (2003) Orexin A (hypocretin-1) naudojimas medialinėje priešoptinėje srityje sustiprina žiurkių patinų seksualinį elgesį. Neurologijos 116: 921-923.

  21. ↵
    1. Harris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2006) Susijaudinimas ir atlygis: dichotomija atliekant oreksino funkciją. Tendencijos Neurosci 29: 571-577.

  22. ↵
    1. Harris GC,
    2. „Wimmer M“,
    3. Aston-Jones G

    (2005) Šoninių pagumburio oreksino neuronų vaidmuo ieškant atlygio. Gamta 437: 556-559.

  23. ↵
    1. Henny P,
    2. Jones BE

    (2006) Oreksino / hipokretino neuronų inervacija GABAerginiais, glutamaterginiais ar cholinerginiais priekinių smegenų terminalais - tai įrodo presinapsinio vezikulinio transporterio ir postsinapsinių pastolių baltymų imuninis dažymas. J Comp Neurol 499: 645-661.

  24. ↵
    1. Hernandez L,
    2. Hoebel BG

    (1988), maistas ir kokainas padidina tarpląstelinį dopamino kiekį branduolio akumuliatoriuose, matuojant mikrodialize. Life Sci 42: 1705-1712.

  25. ↵
    1. Hoebel BG

    (1969) Maitinimas ir savęs stimuliavimas. Ann NY Acad Sci 157: 758-778.

  26. ↵
    1. Hull EM,
    2. Medienos RI,
    3. „McKenna KE“

    (2006) Knobilio ir Neillo reprodukcijos fiziologijoje, vyrų seksualinio elgesio neurobiologija, ed. Neill JD (Elsevier, Niujorkas), Ed 3, p. 1729–1824.

  27. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. Panksepp J

    (1999) Branduolio, susikaupusio dopamino, vaidmuo motyvuotame elgesyje: vieningas aiškinimas, ypač susijęs su atlygio siekimu. Brain Res Brain Res Rev 31: 6-41.

  28. ↵
    1. Kanenishi K,
    2. „Ueno M“,
    3. „Momose S“,
    4. Kuwabara H,
    5. Tanaka H,
    6. Sato C,
    7. Kobayashi T,
    8. Hino O,
    9. „Sakamoto H“,
    10. Hata T

    (2004) Preprooreksino mRNR ekspresija žiurkių smegenyse padidėja nėštumo metu. Neurosci Lett 368: 73-77.

  29. ↵
    1. Korotkova TM,
    2. Sergeeva O.,
    3. Eriksson KS,
    4. Haas HL,
    5. Rudas RE

    (2003) Ventralinės pagrindinės srities dopaminerginių ir nondopaminerginių neuronų sužadinimas oreksinais / hipokretinais. J Neuroscience 23: 7-11.

  30. ↵
    1. „Kotz CM“

    (2006) Maitinimo ir savaiminio fizinio aktyvumo integracija: oreksino vaidmuo. Physiol Behav 88: 294-301.

  31. ↵
    1. Li Y,
    2. „Gao XB“,
    3. Sakurai T,
    4. van den Pol AN

    (2002) Hipokretinas / oreksinas sužadina hipokretino neuronus per vietinį gliutamato neuroną-A potencialų mechanizmą, kuris leidžia organizuoti pagumburio susijaudinimo sistemą. Neuronas 36: 1169-1181.

  32. ↵
    1. Lorrain DS
    2. Matuszewich L,
    3. Friedman RD,
    4. Hull EM

    (1997) tarpląstelinis serotoninas šoninėje pagumburio srityje padidėja pooperacinio laikotarpio metu ir pablogina žiurkių patinų kopuliaciją. J Neuroscience 17: 9361-9366.

  33. ↵
    1. Lorrain DS
    2. Riolo BĮ,
    3. Matuszewich L,
    4. Hull EM

    (1999) Šoninis pagumburio serotoninas slopina branduolio akumuliatorius dopaminą: tai turi įtakos seksualiniam sotumui. J Neuroscience 19: 7648-7652.

  34. ↵
    1. Mileykovskiy BY,
    2. Kiyashchenko LI,
    3. Siegel JM

    (2005) Elgesys koreliuoja nustatytų hipokretino / oreksino neuronų aktyvumą. Neuronas 46: 787-798.

  35. ↵
    1. Mochizuki T,
    2. „Crocker A“,
    3. „McCormack S“,
    4. Yanagisawa M,
    5. Sakurai T,
    6. „Scammell TE“

    (2004) Pelių, išstumtų iš oreksino, elgesio būsenos nestabilumas. J Neuroscience 24: 6291-6300.

  36. ↵
    1. Morgan JI,
    2. Curran T

    (1991) Stimulinės transkripcijos jungimasis nervų sistemoje: indukuojamų proto onkogenų fos ir jun dalyvavimas. Annu Rev Neurosci 14: 421-451.

  37. ↵
    1. Nakamura T,
    2. Uramura K,
    3. Nambu T,
    4. Yada T,
    5. Eiti K,
    6. Yanagisawa M,
    7. Sakurai T

    (2000) Oreksino sukeltą hiperlokomociją ir stereotipus tarpininkauja dopaminerginė sistema. Smegenų raiška 873: 181-187.

  38. ↵
    1. Nambu T,
    2. Sakurai T,
    3. Mizukami K,
    4. Hosoya Y,
    5. Yanagisawa M,
    6. Eiti K

    (1999) Oreksino neuronų pasiskirstymas suaugusių žiurkių smegenyse. Smegenų raiška 827: 243-260.

  39. ↵
    1. „Narita M“,
    2. Nagumo Y,
    3. Hashimoto S,
    4. Khotib J,
    5. Miyatake M,
    6. Sakurai T,
    7. Yanagisawa M,
    8. Nakamachi T,
    9. Shioda S,
    10. „Suzuki T“

    (2006) Tiesioginis oreksinerginių sistemų dalyvavimas aktyvinant mezolimbinio dopamino kelią ir su juo susijusį elgesį, kurį sukelia morfinas. J Neuroscience 26: 398-405.

  40. ↵
    1. Olszewski PK,
    2. Li D,
    3. Malonės MK,
    4. Billington CJ,
    5. „Kotz CM“,
    6. Levine AS

    (2003) Grelino, veikiančio šoninę pogumburį, oreksigeninis poveikis. Peptidai 24: 597-602.

  41. ↵
    1. Orsini JC,
    2. Jourdan F,
    3. „Cooper HM“,
    4. Monmauras P

    (1985) Moteriško kvapo įtaka žiurkės patino šoniniam pagumburiui. Pusiau kokybinė dezoksigliukozės analizė. Physiol Behav 35: 509-516.

  42. ↵
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (1998) Žiurkės smegenys stereotaksinėmis koordinatėmis (Academic, Niujorkas), Ed 4.

  43. ↵
    1. Peyron C,
    2. Tighe DK,
    3. van den Pol AN,
    4. de Lecea L,
    5. „Heller HC“,
    6. „Sutcliffe JG“,
    7. „Kilduff“ TS

    (1998) Neuronai, turintys hipokretino (oreksino), išsiskleidžia į daugelį neuronų sistemų. J Neuroscience 18: 9996-10015.

  44. ↵
    1. Pfaus JG,
    2. Damsma G,
    3. Nomikos GG,
    4. Wenkstern GD,
    5. Blaha CD,
    6. Phillips AG
    7. Fibiger HC

    (1990) Seksualinis elgesys padidina centrinio dopamino transmisiją patinų žiurkėms. Smegenų raiška 530: 345-348.

  45. ↵
    1. „Putnam SK“,
    2. Sato S,
    3. Riolo BĮ,
    4. Hull EM

    (2005) Testosterono metabolitų poveikis kumuliacijai, medialinis preoptinis dopaminas ir NOS imunoreaktyvumas kastruotų žiurkių patinams. Horm Behav 47: 513-522.

  46. ↵
    1. Rada P,
    2. Avena NM
    3. Hoebel BG

    (2005) Kasdien tirpstant cukrui, pakartotinai išsiskiria dopaminas į akumuliatorių lukštą. Neurologijos 134: 737-744.

  47. ↵
    1. Rolls ET,
    2. Burton MJ,
    3. Mora F

    (1980) Neurofiziologinė smegenų stimuliacijos beždžionėms analizė. Smegenų raiška 194: 339-357.

  48. ↵
    1. Sakurai T,
    2. Amemiya A,
    3. Ishii M,
    4. Matsuzaki I,
    5. „Chemelli RM“,
    6. Tanaka H,
    7. „Williams SC“,
    8. Richardson JA,
    9. Kozlowskio GP,
    10. Wilson S,
    11. Arch JR,
    12. Buckingham RE,
    13. Haynes AC,
    14. Carr SA,
    15. „Annan RS“,
    16. „McNulty DE“,
    17. Liu WS,
    18. Terrett JA,
    19. „Elshourbagy NA“,
    20. Bergsma DJ,
    21. et al.

    (1998) Oreksinai ir oreksinų receptoriai: hipotalaminių neuropeptidų ir su G baltymais sujungtų receptorių šeima, reguliuojanti šėrimo elgseną. Ląstelė 92: 573-585.

  49. ↵
    1. Sakurai T,
    2. „Nagata R“,
    3. Yamanaka A,
    4. Kawamura H,
    5. Tsujino N,
    6. Muraki Y,
    7. Kageyama H,
    8. Kunita S,
    9. Takahashi S,
    10. Eiti K,
    11. Koyama Y,
    12. Shioda S,
    13. Yanagisawa M

    (2005) Pelių oreksino / hipokretino neuronų įvestis, nustatyta genetiškai užkoduoto sekiklio. Neuronas 46: 297-308.

  50. ↵
    1. „Saper CB“,
    2. „Scammell TE“,
    3. Lu J

    (2005) Hipotalaminis miego ir cirkadinio ritmo reguliavimas. Gamta 437: 1257-1263.

  51. ↵
    1. Sato S,
    2. Braham CS,
    3. „Putnam SK“,
    4. Hull EM

    (2005) Neuronų azoto oksido sintazės ir lytinių liaukų steroidų sąveika žiurkių patinų MPOA: lokalizacija ir testosterono sukeltas kopuliacijos bei nNOS imunoreaktyvumo atstatymas. Smegenų raiška 1043: 205-213.

  52. ↵
    1. Shakiryanova D,
    2. Tully A,
    3. „Hewes RS“,
    4. Deitcher DL,
    5. Levitan ES

    (2005) Sinapsinių neuropeptidinių pūslelių išsilaisvinimas nuo aktyvumo. Nat Neurosci 8: 173-178.

  53. ↵
    1. Shen RY,
    2. Choongo KC

    (2006) Po gydymo metilfenidatu skirtingos adaptacijos žiurkės vidurinės dumblino dopamino neuronuose ir etanolio paveiktose žiurkėse. Biol psichiatrija 59: 635-642.

  54. ↵
    1. Shizgal P

    (1989) Intrakranijinės savęs stimuliacijos ląstelių analizės link: susidūrimo tyrimų indėlis. Neurosci Biobehav Rev 13: 81-90.

  55. ↵
    1. Siegel JM

    (2004) Hipokretinas (oreksinas): vaidmuo normaliame elgesyje ir neuropatologijoje. Annu Rev Psychol 55: 125-148.

  56. ↵
    1. Vienodai RB,
    2. Chang C,
    3. Muramatsu M,
    4. Swanson LW

    (1990) Androgenų ir estrogeno receptorių mRNR turinčių ląstelių pasiskirstymas žiurkės smegenyse: in situ hibridizacijos tyrimas. J Comp Neurol 294: 76-95.

  57. ↵
    1. Smith MD,
    2. Jones LS,
    3. Wilsonas MA

    (2002) Lytiniai hipokampo gabaliukų jaudrumo skirtumai: testosterono vaidmuo. Neurologijos 109: 517-530.

  58. ↵
    1. „Sutcliffe JG“,
    2. de Lecea L

    (2002) Hipokretinai: susijaudinimo slenksčio nustatymas. Nat Rev Neurosci 3: 339-349.

  59. ↵
    1. Swanson LW

    (2004) III smegenų žemėlapiai: žiurkės smegenų struktūra (Elsevier, Niujorkas), Ed 3.

  60. ↵
    1. „Swanson LW“,
    2. Sanchez-Watts G,
    3. „Watts AG“

    (2005) Melaniną sukoncentruojančio hormono ir hipokretino / oreksino mRNR raiškos palyginimas naujoje šoninės hipotalaminės zonos dalinimo schemoje. Neurosci Lett 387: 80-84.

  61. ↵
    1. Taheri S,
    2. Saulėlydis D,
    3. Dakin C,
    4. „Moyes S“,
    5. Plomba L,
    6. Gardiner J,
    7. Rossi M,
    8. Ghatei M,
    9. Žydi S

    (2000) Dienos oreksino A imunoreaktyvumo ir preprooreksino mRNR kitimas žiurkių centrinėje nervų sistemoje. Neurosci Lett 279: 109-112.

  62. ↵
    1. Thorpe AJ,
    2. Cleary JP,
    3. „Levine AS“,
    4. „Kotz CM“

    (2005) Centralizuotai vartojamas oreksinas A padidina žiurkių saldžiųjų granulių motyvaciją. Psichofarmakologija (Berl) 182: 75-83.

  63. ↵
    1. Vaughanas E,
    2. Fišerio AE

    (1962) Vyrų seksualinis elgesys, sukeltas intrakranijinės elektrinės stimuliacijos. Mokslas 137: 758-760.

  64. ↵
    1. Wenkstern D
    2. Pfaus JG,
    3. Fibiger HC

    (1993) Dopamino transmisija padidina patinų žiurkių branduolį, kai jie pirmą kartą patenka į lytiniu būdu imlias patinas. Smegenų raiška 618: 41-46.

  65. ↵
    1. Išminčius RA

    (2004) Dopaminas, mokymasis ir motyvacija. Nat Rev Neurosci 5: 483-494.

  66. ↵
    1. Yoshida K,
    2. „McCormack S“,
    3. „Espana RA“,
    4. „Crocker A“,
    5. „Scammell TE“

    (2006) Poveikis žiurkės smegenų oreksinų neuronams. J Comp Neurol 494: 845-861.

  67. ↵
    1. Jūs ZB,
    2. Chen YQ,
    3. Išminčius RA

    (2001) Dopamino ir glutamato atpalaidavimas žiurkės branduolyje ir ventriniame pagrindiniame plote po šoninės pagumburio savęs stimuliacijos. Neurologijos 107: 629-639.

Straipsniai, kuriuose minimas šis straipsnis

  • Atsparus pirminio SUNCT sindromo gydymui, naudojant klomifeno citratą (vaistinį giliųjų smegenų pagumburio moduliatorių). Cephalalgia, 1 spalio 2014, 34 (12): 1021-1024
  • Hipokretinas (oreksinas) palengvina atlygį, nes susilpnina jo kotiruotojo dinorfino antiretrovirusinį poveikį vidurinės smegenų dalies srityje PNAS, 22, balandžio 2014, 111 (16): E1648-E1655
  • Oreksinas / hipokretinas moduliuoja vidinio segmentinio dopamino neuronų reakciją į prieš frontalinę aktyvaciją: dieninė įtaka Neuroscience, 17 lapkritis 2010, 30 (46): 15585-15599
  • Orexin A / Hypocretin-1 selektyviai skatina pozityviųjų stipriklių motyvaciją „Neuroscience“ žurnalas, 9, rugsėjo 2009, 29 (36): 11215-11225
  • Oreksino stimuliuojamos MAP kinazės kaskados suaktyvinamos keliais G baltymų signalizacijos keliais žmogaus H295R antinksčių žievės ląstelėse: įvairus vaidmuo Oreksinui A ir B Endokrinologijos žurnalas, 1, rugpjūčio 2009, 202 (2): 249-261