Oksitocino receptorių tankio kitimas branduolyje Accumbens turi skirtingą poveikį afiliatyviam elgesiui monogaminėse ir poligaminėse liemenėse (2009)

J Neurosci. Autoriaus rankraštis; galima įsigyti „PMC Oct 27“, „2009“.

Paskelbta galutine redaguota forma:

PMCID: PMC2768419

NIHMSID: NIHMS93410

Leidėjo galutinę redaguotą šio straipsnio versiją galima nemokamai rasti adresu J Neuroscience

Žr. Kitus PMC straipsnius citata paskelbtas straipsnis.

Eiti į:

Abstraktus

Oksitocino receptoriai nucleus accumbens buvo susiję su aloparentinio elgesio reguliavimu ir porų ryšių formavimu socialiai monogamiškame prerijų pelėnyje. Oksitocino receptorių tankis nucleus accumbens teigiamai koreliuoja su jauniklių ir suaugusių prerijų pelėnų patelių aloparentavimu, o oksitocino receptorių antagonistas, infuzuojamas į branduolį, blokuoja šį elgesį. Be to, prerijų pelėnų oksitocino receptorių tankis yra didesnis nei nemonogaminių graužikų rūšių, o susikaupusių oksitocino receptorių blokavimas apsaugo nuo poravimosi sukelto partnerio pirmenybės formavimosi. Čia mes panaudojome su adeno susijusį viruso vektoriaus genų perdavimą, kad ištirtume funkcinį ryšį tarp susikaupusių oksitocino receptorių tankio ir socialinio elgesio prerijose ir pievų pelėnams. Suaugusios prerijų pelėnų patelės, kurios per daug ekspresuoja oksitocino receptorius nucleus accumbens, pasižymėjo pagreitėjusiu partnerio pirmenybės formavimusi po bendro gyvenimo su patinu, tačiau neparodė sustiprinto aloparentinio elgesio. Tačiau ne monogaminiams pieviniams pelėnams partnerio pasirinkimo nepalengvėjo, įvedant oksitocino receptorių į nucleus accumbens. Šie duomenys patvirtina oksitocino receptorių vaidmenį akubenuose reguliuojant prerijų pelėnų patelių partnerių pageidavimus ir rodo, kad oksitocino receptorių ekspresija akubenuose nėra pakankama, kad būtų skatinamas partnerio pasirinkimas ne monogaminėse rūšyse. Šie duomenys yra pirmieji, parodantys tiesioginį ryšį tarp oksitocino receptorių tankio branduolyje ir socialinio prisirišimo elgesio skirtumų. Taigi individualūs oksitocino receptorių ekspresijos pokyčiai striatumoje gali prisidėti prie natūralios socialinio elgesio įvairovės.

Raktiniai žodžiai: motina, virusas, pirmenybė, neuropeptidas, pažinimas, autoradiografija

ĮVADAS

Mikrotininiai graužikai pasižymi nepaprasta socialinio elgesio įvairove, pradedant nuo labai priklausomų ir socialiai monogamiškų iki gana asocialių ir nerūpestingų poravimosi strategijų (Gruderadams ir Getz, 1985 m). Socialiai monogamiškas prerijų pelėnas (Microtus ochrogaster) formuoja ilgalaikius socialinius arba porinius ryšius su priešingos lyties partneriu po bendro gyvenimo ir poravimosi, o nemonogaminiai pievų pelėnai (Microtus pennsylvanicus) paprastai ne. Suaugusios seksualiai naivios prerijų pelėnų patelės pasižymi dideliu spontaniško auklėjimo arba aloparentiško elgesio įvairove, maždaug pusė jų jauniklių atžvilgiu elgiasi kaip motina, o likusios ignoruoja arba puola jauniklius (Lonstein ir De Vries, 1999 m; Balesas ir Carteris, 2003 m; Olazabal ir Young, 2005). Taigi pelėnai suteikia puikią galimybę ištirti neurobiologinius mechanizmus, kuriais grindžiamas socialinis prisirišimas ir aloparentiška priežiūra, taip pat mechanizmus, lemiančius šio elgesio įvairovę tiek tarp rūšių, tiek tarp individų.

Nonapeptidinis oksitocinas (OT) buvo susijęs su prerijų pelėnų partnerių pasirinkimo formavimu ir aloparentiniu elgesiu. Oksitocino receptoriaus (OTR) antagonisto infuzija į nucleus accumbens (NAcc), bet ne į gretimą uodeginį putameną, blokuoja poravimosi sukeltą partnerio pirmenybės formavimąsi, laboratorinį porinių ryšių formavimosi pavyzdį.Young et al., 2001). Panašios OTR antagonisto infuzijos į NAcc taip pat blokuoja aloparentinį elgesį nekaltoms patelėms (Olazabal ir Young, 2006b). Taigi OTR aktyvinimas NAcc palengvina tiek partnerio pirmenybės formavimąsi, tiek aloparentinį elgesį prerijų pelėnų patelėse.

Manoma, kad OTR tankio kitimas NAcc prisideda prie rūšių skirtumų socialinėje organizacijoje ir aloparentiniame elgesyje. Prerijos pelėnai turi didelį OTR tankį NAcc, o nemonogaminiai pievų pelėnai, pelės ir žiurkės neturi (Insel ir Shapiro, 1992; Olazabal ir Young, 2006a). Prerijų pelėnai taip pat pasižymi didesniu alopėvių elgesiu nei pievų pelėnai, pelės ar žiurkės (Olazabal ir Young, 2006a). Lygiagrečiai su šiuo tarprūšiniu ryšiu tarp OTR tankio NAcc ir tėvų elgesio, OTR tankis NAcc teigiamai koreliuoja su aloparentiniu elgesiu tiek jaunų, tiek suaugusių prerijų pelėnų patelių (Olazabal ir Young, 2006b, a). Šiame tyrime naudojome su adeno susijusio virusinio vektoriaus (AAV) genų perdavimą, kad tiesiogiai patikrintume hipotezę, kad NAcc OTR tankio kitimas gali prisidėti prie socialinio prisirišimo ir aloparentinio elgesio skirtumų. Suaugusios prerijų pelėnų patelės buvo abipusiai infuzuojamos į NAcc su AAV, koduojančiu prerijų pelėnų OTR geną, todėl žymiai padidėjo OTR surišimas. Tada gyvūnai buvo išbandyti dėl aloparentinio elgesio ir partnerio pasirinkimo formavimo. Tada išbandėme hipotezę, kad OTR ekspresija NAcc buvo pakankama, kad palengvintų partnerio pirmenybės formavimąsi, užpilant pievų pelėnų pateles tuo pačiu vektoriumi. Prognozavome, kad, palyginti su kontrolinėmis grupėmis, OTR, per daug ekspresuojančios prerijų pelėnų patelės, parodys padidėjusį aloparentišką elgesį ir pagreitintų partnerių pasirinkimo formavimąsi. Be to, mes prognozavome, kad pievų pelėnų patelės, išreiškiančios OTR NAcc, sukurs partnerių pageidavimus vyrų partnerių atžvilgiu.

MEDŽIAGOS IR METODAI

Gyvūnai

Prerijų ir pievų pelėnai buvo laikomi tos pačios lyties grupėse po 2-3 pelėnus narve nuo nujunkymo 21-23 dienų amžiaus. Laiptą sudarė vėdinamas 36 × 18 × 19 cm plexiglass narvas, pripildytas Bed-ocobbs Laboratory Animal Animal pakratų pagal 14:10 val. šviesos/tamsos ciklą 22°C temperatūroje su prieiga prie maisto (triušių LabDiet, Richmond, IN) ir vandens ad libitum. . Prerijų pelėnai buvo gauti iš mūsų laboratorinės veisimosi kolonijos, kuri iš pradžių buvo kilę iš laukuose sugautų pelėnų Ilinojaus valstijoje. Pieviniai pelėnai buvo kilę iš Floridos valstijos universiteto veisimosi kolonijos. Tiriamieji buvo 2–5 mėnesių nepažeistos lytiškai negyvos pelėnų patelės. Stimuliuojantys gyvūnai buvo seksualiai patyrę suaugę pelėnų patinai. Kiekvienas vyras buvo „partneris“ ir „svetimas“ partnerio pasirinkimo testo metu (žr. toliau). Vadų draugai buvo priskirti skirtingoms gydymo grupėms, kad būtų galima kontroliuoti kintamumą vadose ir narvuose. Visas procedūras patvirtino Emory universiteto institucinis gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas.

Su adenomi susiję virusiniai vektoriai

OTR kodavimo seka buvo sukurta sujungus pirmąjį prerijų pelėnų OTR genomo klono egzoną, koduojantį pirmuosius penkis transmembraninius domenus (Genbank prisijungimo numeris). AF079980) ir 3′ OTR galas, amplifikuotas iš prerijų pelėnų gimdos cDNR. Koduojanti seka buvo iš naujo įrėminta naudojant PGR, kad būtų pašalintos UTR ir būtų pateiktos naujos gretimos restrikcijos vietos, palengvinančios klonavimą į AAV vektoriaus plazmidę. Tada modifikuotas genas buvo klonuotas į AAV2 vektoriaus plazmidę tarp 0.6 kb citomegaloviruso (CMV) promotoriaus ir SV40 DNR fragmento, turinčio SV40 mažąjį t introną ir poliA signalą. AAV2-OTR buvo kryžmiškai supakuotas AAV9 triguba plazmidės transfekcija į AAV-293 ląsteles (Stratagene, La Jolla, CA), naudojant standartinį kalcio fosfato nusodinimo metodą. Nebuvo naudojamas virusas pagalbininkas. AAV2-eGFP plazmidė buvo lygiagrečiai supakuota AAV9 kaip neigiamas kontrolinis vektorius. Trumpai tariant, kiekviena AAV vektoriaus plazmidė, AAV2/9 rep/cap plazmidė, užtikrinanti AAV2 replikazės ir AAV9 kapsidės funkcijas, ir 3rd plazmidė, koduojanti adenoviruso pagalbininkų funkcijas, pHelper (Stratagene), buvo transfekuota į 293 ląsteles moliniu santykiu 1:1:1. Ląstelės buvo surinktos praėjus 48 valandoms po transfekcijos. Tada ląstelių granulės buvo pakartotinai suspenduotos DMEM, o tarpląstelinės viruso dalelės išsiskyrė trimis iš eilės užšaldymo-atšildymo raundais, po to centrifuguojant 13,000 10 aps./min 80 minučių ant stalo esančioje centrifugoje, kad būtų pašalintos dalelės. Vektoriaus atsargos buvo laikomos –7700 C temperatūroje ir titruojamos realaus laiko PGR, naudojant ABI Prism 10 sekos aptikimo sistemą iš Perkin-Elmer Applied Biosystems (Foster City, CA). Titrai buvo maždaug XNUMX12 DRP/ml. (DRP = Dnasei atsparios dalelės).

Virusinės vektoriaus infuzija

Stereotaksinės infuzijos buvo atliekamos taikant izoflurano anesteziją Kopf stereotax, turinčiu Ultra Micro Pump II (World Precision Instruments, Sarasota, FL) ir 26 dydžio Hamilton švirkštą. Patelės buvo sušvirkštos abipusiai į NAcc apvalkalą (prerijų pelėnai: AP +1.7 mm, ML 9 mm, DV -4.5 mm, pievų pelėnai: AP +1.6 mm, ML 9 mm, DV -4.3 mm) su 750 nl arba AAV, turintis pelėnų oksitocino receptorių (CMV-OTR, N=12), arba kontrolinį eGFP ekspresuojantį vektorių (CMV-GFP, N=16). Virusas buvo infuzuojamas 93.8 nl/min greičiu. Po infuzijos švirkštas buvo paliktas vietoje 5 minutes, kad būtų sumažinta vektoriaus sklaida adatos takeliu. Apgaulingai operuoti gyvūnai (N = 9) buvo anestezuoti, jų galvos oda buvo įpjauta ir susiūta. Po operacijos gyvūnai buvo laikomi grupėmis iki partnerio pasirinkimo elgesio testo. Preliminarūs tyrimai parodė, kad OTR ekspresija injekcijos vietoje buvo stabili po 10 dienų.

Alloparental elgesio testai

Praėjus mėnesiui po injekcijos, prerijų pelėnai buvo išbandyti dėl aloparentinio elgesio. Bandymai vyko nuo 0800 iki 1800 val. Bandomieji gyvūnai buvo patalpinti į didelį švarų narvą (45.5 × 24 × 20 cm) ir leista aklimatizuotis 15 minučių. Du jaunikliai (2-5 dienų amžiaus) buvo patalpinti viename narvo gale. Buvo užfiksuotas delsimas priartėti prie jauniklių, jauniklius užpuolusių gyvūnų skaičius ir laikas, praleistas šukuojant, skraidinant ir paimant jauniklius. Statistinės analizės tikslais gyvūnams, kurie per 900 minučių bandymą nepriartėjo prie jauniklių, buvo priskirtas 15 sekundžių delsa. Jei patelė užpuolė jauniklius, bandymai buvo nedelsiant nutraukti. Gyvūnai buvo priskirti aloparentiškų kategorijai, jei jie praleido daugiau nei 30 sekundžių laižydami jauniklius nepuldami. Remiantis eksperimento su prerijų pelėnais rezultatais, pievinių pelėnų elgesys nebuvo tirtas.

Partnerio pirmenybės tikrinimas („Prairie Vole“)

Praėjus vienam mėnesiui po aloparentinio elgesio testo ir du mėnesius po AAV infuzijos, patelėms buvo duodama 4 μg estradiolio benzoato (EB; Fisher, Pittsburgh, PA), ištirpinto 0.1 ml sezamo aliejaus IP kasdien 3 dienas prieš poravimąsi, kad paskatintų lytinį gyvenimą. imlumas. Praėjus 16 valandų po paskutinės EB injekcijos, gyvūnai buvo patalpinti į švarų narvą (28 × 17 × 12 cm) kartu su seksualiai patyrusiu suaugusiu patinu 6 valandoms ir grąžinti į grupinį laikymą. Poravimosi elgesys buvo užfiksuotas pradinio 6 valandų bendro gyvenimo metu. Buvo įvertintas uždelsimas iki pirmos įžangos ir poravimosi per pirmąją valandą skaičius. Statistinės analizės tikslais gyvūnams, kurie nesiporavo per 3600 valandos laikotarpį, buvo priskirtas 1 sekundžių latentinis laikotarpis. Kitą rytą (14 val. po bendro gyvenimo) gyvūnai buvo išbandyti dėl partnerio pasirinkimo. Atliekant partnerio pirmenybės testą, eksperimentinė patelė dedama į neutralią centrinę trijų kamerų aparato kamerą, kurioje partneris patinas yra pririštas vienoje šoninėje kameroje, o naujas „svetimas“ patinas kitoje (Williams ir kt., 1992). Eksperimentinis gyvūnas gali laisvai judėti kamerose, o laikas, praleistas arti kiekvieno patino, registruojamas naudojant automatinę spindulio pertraukimo sistemą (Curtis ir Wang, 2005b, a; Lim ir kt., 2007).

Po dienos patelės buvo iš naujo suporuotos su tuo pačiu partneriu papildomai 12 valandų bendro gyvenimo. Tada patelės buvo dar kartą išbandytos dėl partnerio pasirinkimo (bendras kontakto laikas 18 valandų). Ši dviejų etapų paradigma buvo naudojama siekiant maksimaliai aptikti partnerio pirmenybės testo palengvinimą, nes slenksčio laikas, reikalingas partnerio pasirinkimui suformuoti, skiriasi. Buvo manoma, kad gyvūnai pirmenybę teikia partneriui, jei jie praleido du kartus daugiau laiko arti partnerio nei su nepažįstamuoju.

Partnerio pirmenybės tikrinimas (pievų pelėnas)

Paprastai pieviniai pelėnai iš mūsų kolonijos nesudaro porinio ryšio po 24 valandų buvimo poroje. Todėl šiam eksperimentui partnerio pasirinkimo testai buvo atlikti po 24 valandų bendro gyvenimo ir papildomų 48 valandų (iš viso 72 val.). Visi kiti gydymo ir tyrimo metodai yra tokie patys kaip pirmiau.

Audinių surinkimas ir apdorojimas

Po elgsenos eksperimentų gyvūnai buvo nupjauti po gilios anestezijos izofluoranu. Tada smegenys buvo surinktos ir užšaldytos ant sauso ledo miltelių. Smegenys buvo perpjautos per NAcc 6 serijomis 20 μm, ant kriostato, ant Fisher Frost-plus stiklelių. Skaidrės buvo laikomos –80 C temperatūroje, kol buvo panaudotos autoradiografijoje.

OTR autoradiografija

OTR receptorių autoradiografija buvo naudojama norint įvertinti OTR prisijungimą prie AAV sušvirkštų gyvūnų. Autoradiografija buvo atlikta, kaip aprašyta anksčiau, su nedideliais pakeitimais (Insel ir kt., 1991; Wang ir Young, 1997 m). Pjūviai buvo išimti iš -80 C saugyklos, leista vėdinti, panardinti į 0.1% paraformaldehidą fosfatiniu buferiniu tirpalu (pH 7.4) ir du kartus perplauti 50 mM Tris buferiu (pH 7.4), kad būtų pašalintas endogeninis OT. Tada audinys buvo inkubuojamas 50 pM 125I-OVTA (NEX 254050UC PerkinElmer, Waltham, MA) vieną valandą. Nesurištas radioligandas buvo pašalintas keturis kartus plaunant 50 mM Tris ir 2% MgCl2 (pH 7.4), o po to panardinamas į dH20 ir džiovinama oru po vėsaus oro srove. Išdžiūvus, stikleliai buvo eksponuojami BioMax MR plėvele (Kodak, Rochester, NY) 72 valandas. Du CMV-OTR ir vienas CMV-GFP gyvūnas buvo neįtraukti į elgesio analizę dėl praleistų injekcijų.

GFP imunohistochemija

Gyvūnų pogrupis (N = 5), kuriems buvo sušvirkštas CMV-GFP, buvo perfuzuojamas per širdį 50 ml PBS, po to 50 ml 4% paraformaldehido 0.1, 2.5 M fosfatiniame buferyje, kuriame yra 4, 30% akroleino (Polysciences, Warrington, PA). Iš karto po perfuzijos smegenys buvo pašalintos ir laikomos 25 ° C temperatūroje 20% sacharozės tirpale iki pjūvio. Smegenys buvo supjaustytos į XNUMX μm vainikines dalis su užšaldančiu mikrotomu ir laikomos laisvai plūduriuojančios krioprotektiniame tirpale -XNUMX ° C temperatūroje iki imunohistocheminio apdorojimo.

GFP buvo apdorota 1:6 serija per kiekvienos smegenų rostrokaudalinę ašį. Trumpai tariant, sekcijos buvo pašalintos iš krioprotektanto tirpalo, plačiai nuplaunamos kalio fosfatu buferiniu fiziologiniu tirpalu (pH 7.4, 15), o po to 1 minučių reagavo 0.1% natrio borohidridu, kad pašalintų aldehidų perteklių. Tada sekcijos buvo inkubuojamos pirminiame antikūnų tirpale, nukreiptame prieš GFP, kalio fosfatu buferiniame fiziologiniame tirpale (KPBS), turinčiame 1, 48% Triton-X, 4 valandą kambario temperatūroje, po to 6455 valandas 1 ° C temperatūroje. Ląstelės, turinčios GFP, buvo identifikuotos naudojant polikloninį triušio anti-GFP antikūną (kat. Nr. A100,000, Invitrogen, Carlsbad, CA), kurio koncentracija buvo 1:1 600. Po pirminio antikūnų inkubavimo audinys buvo perplaunamas KPBS, 1 valandą inkubuojamas biotiniluotame ožkos anti-triušio IgG (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA), kurio koncentracija buvo 6100:1, ir skalaujama KPBS, po to 200 val. valandinis inkubavimas avidino-biotino peroksidazės komplekse (ABC Elite Kit PK-7.2 Vector, Burlingame, CA), esant 3,3:0.08 koncentracijai. Po skalavimo KPBS ir Tris buferiu (pH 20, XNUMX), GFP buvo vizualizuotas kaip rudas reakcijos produktas, naudojant XNUMX, XNUMX′-diaminobenzidiną, kuriame yra XNUMX, XNUMX% vandenilio peroksido Tris buferyje. Reakcijos produktas buvo sustabdytas maždaug po XNUMX minučių skalaujant Tris buferiu. Pjūviai buvo sumontuoti iš fiziologinio tirpalo ant stiklelių su želatina, išdžiovinti ore, dehidratuoti rūšiuotų alkoholių serijoje, išvalyti Histoclear (National Diagnostics, Atlanta, GA) ir uždengti naudojant Krystalon (EMD Chemicals, Gibbstown, NJ).

Statistinė analizė

Duomenys pateikiami kaip vidurkis ± standartinė vidurkio paklaida (SEM). Buvo atlikta dvipusė RM ANOVA, naudojant laiką, praleistą su kiekvienu stimuliuojančiu gyvūnu kaip priklausomą kintamąjį, o tiriamųjų vidinis veiksnys buvo partneris arba nepažįstamasis, o gydymo grupė kaip tarp tiriamojo veiksnys. Holm-Sidak testas buvo naudojamas post hoc porų palyginimui, kai buvo aptiktas reikšmingas sąveikos poveikis. Vienas iš būdų ANOVA buvo atliktas tiriant prerijų pelėnų elgseną alopentaliniu ir poravimosi būdu. Tas elgesys, kuris neatitiko normalumo kriterijų, buvo analizuojamas naudojant Kruskal-Wallis One Way Variance on Rans analizę. Fišerio tikslus testas buvo naudojamas siekiant nustatyti grupių skirtumus tarp gyvūnų, turinčių aloparentišką elgesį. Pievinių pelėnų poravimosi elgsena buvo analizuojama naudojant t-testą ir Mann-Whitney rango sumos testą, kai normalumo testas nepavyko.

REZULTATAI

Aloparentiškas elgesys Prairie Voles

CMV-OTR sušvirkštų prerijų pelėnų patelių, pasižyminčių aloparentišku elgesiu (3/9), dalis nesiskyrė nuo kontrolinių (4/15) ar fiktyvių pelėnų (3/10) (p > 0.5; Pav. 1A). Dvi CMV-OTR, keturios CMV-GFP kontrolinės patelės ir dvi fiktyvios patelės, kurios buvo priskirtos ne aloparentinei kategorijai, užpuolė jauniklius. Vėlavimas artėti prie jauniklių (Pav. 1B) ir laikas, praleistas laižant / viliojant, grupėse taip pat reikšmingai nesiskyrė (H= 0.31, P > 0.8 delsoje, H= 0.40, P > 0.8 priežiūros). Lyginant tik gyvūnus, kurie atitiko alopentališkumo kriterijus, CMV-OTR patelių delsa priartėti prie jauniklių (140.2±65.2 sekundės) nesiskyrė nuo CMV-GFP (62.5±39.3 sekundės) arba fiktyvaus (169.4±51.7 sekundės). ) patelės (F(2,7)= 1.27, p > 0.3). Taip pat nesiskyrė laikas, kurį aloparentinės CMV-OTR patelės praleido laižydamos jauniklius, palyginti su aloparentinėmis CMV-GFP arba fiktyviomis patelėmis (F(2,7)= 1.94, p > 0.2; Pav. 1C). Bendras laikas, kurį kiekviena grupė praleido laižydama / viliodama, skraidindama ir nešiodama jauniklius, taip pat nesiskyrė tarp aloparentinio CMV-OTR (695.2 ± 77.1 sekundės) CMV-GFP (387.5 ± 132.7 sekundės) ir fiktyvaus (503.8 ± 82.8 sekundės). ) gyvūnai (F(2,7)= 1.98, p > 0.2).

1 pav  

Aloparentinis elgesys fiktyvių, CMV-GFP ir CMV-OTR prerijų pelėnų patelėse. A) Gydymas neturėjo įtakos moterų, kurioms pasireiškė aloparentiškas elgesys, proporcijai kiekvienoje gydymo grupėje. Tamsios juostos rodo gyvūnų procentą ...

Poravimosi elgesys prerijų pelėnuose

Ankstesnis patelių chirurginis gydymas poravimosi elgsenai reikšmingos įtakos neturėjo. Patinų, suporuotų su CMV-OTR patelėmis, latentinis laikotarpis iki pirmosios introdukcijos reikšmingai nesiskyrė, palyginti su patinais, susiporavusiais su CMV-GFP, arba fiktyvių patelių (H= 5.043, p = 08; Pav. 2A). Nors CMV-OTR grupė buvo linkusi poruotis anksčiau nei kitos grupės, jos poravosi ne dažniau. Porų, turinčių CMV-OTR patelių, porų, turinčių CMV-GFP, arba fiktyvių patelių porų porų skaičius pirmą valandą nesiskyrė (F(2,31) = 0.46, p > 0.6; Pav. 2B).

2 pav  

Poravimosi ir partnerio pasirinkimo elgesys fiktyvių, CMV-GFP ir CMV-OTR prerijų pelėnų patelėse. Pirmojo įvedimo vėlavimas (A) ir poravimosi ciklų skaičius (B) grupėse reikšmingai nesiskyrė. C) Po 6 valandų bendro gyvenimo laikotarpio, ...

Partnerio pirmenybės elgesys mieste Prairie Voles

Po 6 valandų bendro gyvenimo laikotarpio nė viena grupė nerodė reikšmingo partnerio pasirinkimo (Pav. 2C). Nebuvo jokio pagrindinio gydymo efekto (F(2,31) = 0.56, p > 0.5) arba laiko, praleisto su partneriu, palyginti su nepažįstamuoju (F(1,31) = 0.46, p > 0.5). Po papildomų 12 valandų bendro gyvenimo nebuvo jokio pagrindinio gydymo efekto (F(2,29) =,78, p = 0.5) arba laiko, praleisto su partneriu, palyginti su nepažįstamuoju (F(1,29) = 3.71). , p = 0.06). Tačiau buvo reikšmingas sąveikos efektas (F(2,29)=5.56, p = 0.009). Post-hoc testas atskleidė, kad CMV-OTR moterys žymiai daugiau laiko praleido šalia partnerio nei nepažįstamojo (p < 0.001; 2D pav). Tačiau po šio laikotarpio CMV-GFP ir fiktyvios patelės neparodė partnerio pirmenybės (p > 0.05; 2D pav). Be to, 80 % pelėnų, kuriems buvo sušvirkšta CMV-OTR, atitiko partnerio pirmenybės kriterijus, ty praleido su partneriu dvigubai daugiau laiko nei su nepažįstamuoju, palyginti su tik 31 % CMV-GFP sušvirkštų ir 44 % apgaulingų gyvūnų (2E,F pav).

OTR ir GFP išraiška Prairie Voles NAcc

Buvo atlikta autoradiografija, siekiant nustatyti AAV injekcijos vietą ir patikrinti, ar CMV-OTR vektorius padidino OTR surišimą, palyginti su kontrolinėmis grupėmis. Kaip buvo pranešta anksčiau, kontrolinių CMV-GFP prerijų pelėnų NAcc individualiai skyrėsi OTR surišimas.3A, B pav). CMV-OTR sušvirkštų prerijų pelėnų NAcc buvo aptiktas ryškus OTR surišimo padidėjimas (Pav. 3C). Be to, CMV-GFP gyvūnų smegenų skyriuose buvo atlikta GFP imunohistochemija, siekiant nustatyti ekspresijos mastą NAcc neuronuose. Buvo aptiktas aiškus ląstelių, turinčių neuronų charakteristikas, žymėjimas, patvirtinantis, kad CMV AAV vektoriai paskatino ekspresiją neuronuose (3E,F pav).

3 pav  

OTR ir GFP ekspresijos analizė CMV-OTR ir CMV-GFP prerijų pelėnų patelėse. OTR tankis buvo nustatytas naudojant receptorių autoradiografiją. A, B) CMV-GFP patelių NAcc OTR surišimo tankis labai skyrėsi. Tai yra priešingai ...

Pievų pelėnų poravimosi elgsena

Reikšmingų poravimosi elgesio skirtumų tarp pievų pelėnų gydymo grupių nepastebėta. Patinų, suporuotų su CMV-OTR (1245.1±1465.9 sekundės) patelių latentinis laikotarpis iki pirmosios įvedimo nesiskyrė nei patinų, susiporuotų su kontroline CMV-GFP (566.6±989.8 sek.) patelėmis (T=128.0, p > 0.2). Porų, turinčių CMV-OTR (6.8±5.1) patelių, porų, turinčių CMV-GFP (9.5±4.4) patelių, skaičius taip pat nesiskyrė (t= 1.42, p > 0.1).

Partnerio pirmenybė Meadow Voles

Po 24 valandų bendro gyvenimo laikotarpio nė viena grupė nerodė reikšmingo partnerio pasirinkimo (Pav. 4A). Nebuvo jokio pagrindinio gydymo poveikio (F(1,20) = 0.19, p > 0.6) arba laiko, praleisto su partneriu, palyginti su nepažįstamu asmeniu (F(1,20) = 0.09, p > 0.7). Po papildomų 48 valandų bendro gyvenimo vėl nebuvo jokio reikšmingo pagrindinio gydymo efekto (F(1,19)=,65, p > 0.4) ar laiko, praleisto su viena moterimi (F(1,19) = 0.62, p> .4; Pav. 4B).

4 pav  

Pievinių pelėnų patelių partnerio elgesys po 24 valandų bendro gyvenimo (A) ir po 72 valandų bendro gyvenimo (B). CMV-OTR ir CMV-GFP sušvirkštos moterys neparodė partnerio pirmenybės. Jie praleido vienodai daug laiko su partneriu ...

OTR išraiška pievų pelėnų NAcc

CMV-GFP sušvirkšti pievų pelėnai mažai arba visai nesirišo OTR NAcc (5A pav). Priešingai, CMV-OTR sušvirkšti pievų pelėnai turėjo reikšmingą OTR surišimą NAcc, panašiai kaip prerijų pelėnai (Pav. 5B).

5 pav  

Receptorių autoradiografija, iliustruojanti OTR surišimo tankį CMV-OTR (A) ir CMV-GFP (B) pievų pelėnų NAcc. Atkreipkite dėmesį, kad CMV-GFP pievų pelėnų patelės NAcc mažai arba visai nesirišo OTR. Tačiau OTR surišimas NAcc buvo labai padidėjęs ...

DISKUSIJA

OTR tankio skirtumai NAcc buvo susiję su rūšių skirtumais poravimosi strategijoje (socialinė monogamija ir poligamija) ir aloparentiniu elgesiu, o tai rodo, kad OTR receptorių ekspresijos skirtumai gali būti socialinės organizacijos ir elgesio skirtumų pagrindas.Insel ir kt., 1991; Youngas ir Wangas, 2004 m; Olazabal ir Young, 2006b). Socialiai monogamiški prerijų pelėnai turi didesnį OTR tankį NAcc nei nemonogaminiai pievų ir kalnų pelėnai, o farmakologinė šių receptorių blokada neleidžia poravimosi sukeltam partnerio pirmenybės formavimuisi (Young et al., 2001; Olazabal ir Young, 2006b). Prerijų pelėnų NAcc OTR tankis taip pat labai skiriasi.3A, B pav). OTR tankis šiame regione teigiamai koreliuoja su suaugusių seksualiai naivių prerijų pelėnų patelių individualiais aloparentinio elgesio skirtumais (Jauni, 1999; Olazabal 2006) ir OTR antagonisto įvedimas į NAcc pašalina šį elgesį (Olazabal ir Young, 2006a). Todėl šiame tyrime siekėme tiesiogiai patikrinti ryšį tarp receptorių tankio NAcc ir affiliatyvaus elgesio pelėnams, naudojant AAV genų perdavimą.

Mūsų rezultatai rodo, kad, kaip ir buvo prognozuota, prerijų pelėnų patelės, kurių OTR lygis yra padidėjęs NAcc, pagreitina partnerio pirmenybės formavimąsi, palyginti su patelėmis, kurių OTR tankis mažesnis (CMV-GFP arba netikros). CPriešingai nei mes prognozavome, aloparentinis elgesys tarp grupių nesiskyrė, o tai rodo skirtingus mechanizmus, kuriais kaupiamasis OTR reguliuoja partnerio pirmenybės formavimąsi ir aloparentinį elgesį. Mūsų rezultatai patvirtina hipotezę, kad individualūs OTR raiškos skirtumai prisideda prie skirtingų rūšių skirtumų kai kuriuose affiliatyvaus elgesio aspektuose. Tačiau didėjančios OTR ekspresijos NAcc nepakako, kad pievų pelėnams susidarytų partnerio pirmenybė, net po 72 valandų bendro gyvenimo, o tai rodo, kad vien rūšių skirtumų kaupiamajame OTR nepakanka paaiškinti gebėjimo formuoti partnerį rūšių skirtumus. pirmenybės. Svarbu pažymėti, kad nė vienas iš tiriamų parametrų neturėjo poravimosi elgesio skirtumų grupėse. Todėl eksperimentinių prerijų pelėnų sustiprėjęs partnerio pasirinkimas negali būti siejamas su padidėjusiu seksualiniu aktyvumu pradiniu bendro gyvenimo laikotarpiu.

Suaugusios prerijų pelėnų patelės pasižymi dideliu individualiu skirtumu, rodydami aloparentinę priežiūrą. Maždaug 50 % seksualiai naivių patelių spontaniškai susigrąžins, laižys / jaunikis ir laikys pelės žymeklį virš joms pristatytų jauniklių (Lonstein ir De Vries, 1999 m; Balesas ir Carteris, 2003 m; Olazabal ir Young, 2005). Taip pat labai skiriasi OTR tankis NAcc tarp prerinių pelėnų (Jauni, 1999). Patelės, turinčios didesnį OTR tankį NAcc, labiau linkusios rodyti aloparentinį atsaką nei gyvūnai, kurių OTR šioje srityje mažesnis. Taigi buvo stebėtina, kad padidėjęs OTR tankis prerijų pelėnų NAcc nepadidino aloparentinio elgesio. Tai, kad šie gyvūnai pasižymėjo pagreitėjusiu partnerio pirmenybės formavimu, rodo, kad OTR, gautas iš virusinio vektoriaus transgeno, buvo funkciškai susietas su signalo perdavimo keliais NAcc.

Manome, kad individualūs OTR aktyvacijos pokyčiai NAcc vystymosi metu gali atlikti svarbesnį vaidmenį sukuriant aloparentinio elgesio skirtumus tarp rūšių. Teigiama koreliacija tarp OTR tankio NAcc ir aloparentinio elgesio buvo įrodyta jauniesiems prerijų pelėnams ir suaugusiems (Olazabal ir Young, 2006b, a). Atrodo, kad prerinių pelėnų aloparentinis elgesys yra ypač jautrus vystymosi metu vykstantiems sutrikimams. Pavyzdžiui, perinatalinis OT poveikis keičia prerijų pelėnų patelių aloparentinį elgesį (Bales ir kt., 2007). Todėl asmenims, kurių OTR tankis yra didesnis vystymosi metu, gali padidėti OTR signalizacija NAcc, todėl gali atsirasti ilgalaikių neurocheminių pokyčių, kurie padidina tikimybę parodyti aloparentinį elgesį, kai jie tampa suaugusiais. Jei ši hipotezė yra teisinga, mes prognozuojame, kad didėjanti OTR ekspresija NAcc naujagimiui padidins aloparentinio elgesio dažnį.

Kitas paaiškinimas, kodėl nepavyko sustiprinti OTR ekspresijos NAcc, siekiant padidinti aloparentinį elgesį, yra tas, kad gali prireikti OTR ekspresijos skirtumų keliuose smegenų regionuose, kad būtų sukurta laukiama elgesio įvairovė. Pavyzdžiui, OTR ekspresija šoninėje pertvaroje yra neigiamai koreliuojama su aloparentiniu elgesiu (Olazabal ir Young, 2006a). Galiausiai taip pat įmanoma, kad hormonų ekspozicijos ar socialinės patirties kitimas turi įtakos OTR tankiui NAcc, be to, keičia aloparentinį elgesį. Pavyzdžiui, tėvo buvimas arba nebuvimas vystymosi metu arba perinatalinis manipuliavimas steroidiniais hormonais gali turėti įtakos prerijų pelėnų patelių aloparentiniam reagavimui (Roberts ir kt., 1996; Roberts ir kt., 1998; Lonstein ir De Vries, 2000 m).

Prerijų pelėnų patinuose vazopresinas vaidina lemiamą vaidmenį rodant tėvo elgesį, taip pat formuojant partnerio pirmenybę, lygiagrečiai su oksitocino vaidmeniu patelėms (Winslow ir kt., 1993; Wang et al., 1994). Konkrečios vietos farmakologiniai tyrimai rodo, kad V1aR ventraliniame blyškiame kūne, kuris yra pagrindinė NAcc išeiga, yra labai svarbus porų ryšiams susidaryti.Lim ir Young, 2004). Padidėjęs V1aR pilvo blyškiame raumenyje, naudojant virusinio vektoriaus sukeltą genų perdavimą, pagreitina prerijų pelėnų patinų partnerių pasirinkimo formavimąsi (Pitkow ir kt., 2001), išvada, kuri yra lygiagreti dabartiniam tyrimui. Nors pernelyg didelio V1aR ekspresijos pievų pelėnų patinų ventraliniame blyškiame kūne nepakako, kad paskatintų tėvišką elgesį, tai paskatino partnerio pirmenybę (Lim ir kt., 2004); Priešingai, šiame tyrime per didelis OTR ekspresija NaCC neskatino pievų pelėnų patelių partnerių pasirinkimo formavimosi.

Yra keletas galimų paaiškinimų, kodėl pievų pelėnų patelės su padidėjusiu OTR NAcc nesugeba suformuoti partnerio pageidavimų. Pirma, rūšių skirtumai tarp OT išsiskyrimo NAcc poravimosi metu gali skirtis tarp prerijų pelėnų ir pievų pelėnų. Nors OTR lokalizacija įvairiose rūšyse skiriasi, tiek prerijų pelėnai, tiek pievų pelėnai turi OT imunoreaktyvių skaidulų NAcc (Ross ir Young, neskelbti duomenys). In vivo mikrodializės eksperimentai parodė, kad poravimasis skatina OT išsiskyrimą prerinių pelėnų patelių NAcc, tačiau lygiagrečiai tyrimai su pieviniais pelėnais nebuvo atlikti (CD Cole and Young, neskelbti duomenys). Gali būti, kad OT infuzija į CMV-OTR gydytus gyvūnus palengvintų pievų pelėnų partnerio pirmenybės formavimąsi. Tačiau reikia pažymėti, kad žiurkėms ir avims makšties kaklelio stimuliacija padidina centrinį OT išsiskyrimą (Kendrick ir kt., 1986 m; Sansone ir kt., 2002 m). Todėl tikėtina, kad pieviniai pelėnai jau patiria susikaupusių OT padidėjimą poruojantis. Kitas paaiškinimas, kodėl NAcc OTR raiška nesugeba paskatinti pievų pelėnų patelių partnerio pirmenybės formavimosi, yra tas, kad OTR raiškos rūšių skirtumai kituose smegenų regionuose taip pat būtini porų sujungimui. Pavyzdžiui, OTR tankis taip pat yra didesnis prefrontalinėje žievėje ir šoninėje migdolinėje prerijų pelėnuose, palyginti su nemonogaminėmis pelėnų rūšimis (Insel ir kt., 1991; Young et al., 1996; Smeltzer ir kt., 2006 m). Todėl gali prireikti padidinti OTR ekspresiją keliose vietose, norint paskatinti pievų pelėnų poravimosi sukeltus partnerių pageidavimus. Galiausiai gali būti, kad daug neurocheminių skirtumų tarp rūšių yra atsakingi už rūšių elgesio skirtumus (pvz., dopaminas, kortikotropiną atpalaiduojantis faktorius)Gingrich ir kt., 2000; Liu ir Wang, 2003; Smeltzer ir kt., 2006 m; Lim ir kt., 2007).

Yra keletas svarbių mūsų eksperimentinio požiūrio įspėjimų, dėl kurių verta diskutuoti. Pirma, CMV-OTR greičiausiai padidino OTR ekspresiją visų tipų ląstelėse injekcijos srityje, įskaitant neuronų populiacijas, kurios paprastai nereaguoja į OT. Tačiau gali būti, kad transgeninis OTR sukėlė didesnį signalą neuronuose, kurie paprastai išreiškia endogeninį OTR, dėl padidėjusio jautrumo OT, išsiskiriančiam ant tų neuronų, arba dėl atitinkamų pasroviui signalizuojančių molekulių. Antra, transgeno ekspresijos sritis, kurią sukelia viruso vektoriaus infuzija, nebuvo tolygiai išreikšta visame NAcc rostraline-kaudaliniame arba viduriniame šoniniame plote. CMV-OTR patelėms OTR ekspresija buvo nuolat padidėjusi NAcc apvalkale ir gretimuose šerdies regionuose. Tačiau reikia pažymėti, kad NAcc apvalkalas buvo labiausiai susijęs su partnerių pirmenybės formavimo reguliavimu, o OTR tankis tame pačiame regione labiau koreliuoja su aloparentiniu elgesiu nei pagrindinis regionas.

Tai pirmasis tyrimas, įtikinamai įrodantis, kad OTR raiškos pokyčiai smegenyse gali prisidėti prie socialinio elgesio pokyčių. OT buvo plačiai susijęs su kelių elgesio reguliavimu, įskaitant socialinės informacijos apdorojimą ir atmintį, partnerio pasirinkimą, motinos auklėjimą ir prieraišumą.Dantzer ir kt., 1987 m; Kendrickas, 2000 m; Ferguson ir kt., 2001; Kavaliers ir kt., 2003 m). Dabar yra aiškių įrodymų, kad OT moduliuoja ir žmogaus socialinį pažinimą, įskaitant tarpusavio pasitikėjimą, žvilgsnį į akis, veido atmintį ir emocijų suvokimą.Kosfeld ir kt., 2005 m; Domes ir kt., 2007; Guastella ir kt., 2008; Savaskan ir kt., 2008 m). OT administravimas padidina socialinio pažinimo išsaugojimą atliekant balso intonavimo užduotį autistams.Hollander ir kt., 2007), o keli genetiniai tyrimai parodė nedidelį ryšį tarp nekoduojančių OTR geno polimorfizmų ir autizmo spektro sutrikimo.Wu ir kt., 2005; Jacob ir kt., 2007; Lerer ir kt., 2007 m; Yrigollen ir kt., 2008 m). Informacija apie OTR pasiskirstymą yra ribota, ir nieko nežinoma apie individualius OTR tankio pokyčius žmogaus smegenyse. Mūsų rezultatai rodo, kad OTR tankio kitimas tam tikruose smegenų regionuose gali prisidėti prie individualių žmonių socialinės pažinimo funkcijos skirtumų.

Padėka

Autoriai nori padėkoti Lorrai Mathews už puikų darbą valdant mūsų pelėnų koloniją. Šis tyrimas buvo paremtas NIH dotacijomis MH064692 LJY, RR00165 Yerkes nacionaliniam primatų tyrimų centrui ir NSF STC IBN-9876754.

NUORODOS

  1. Bales KL, Carter CS. Lyčių skirtumai ir oksitocino poveikis vystymuisi prerijų pelėnų agresijai ir socialiniam elgesiui (Microtus ochrogaster) Horm Behav. 2003;44:178–184. [PubMed]
  2. Bales KL, van Westerhuyzen JA, Lewis-Reese AD, Grotte ND, Lanter JA, Carter CS. Oksitocinas turi nuo dozės priklausomą poveikį prerijų pelėnų patelių porų sujungimui ir aloparentinei priežiūrai. Horm Behav. 2007;52:274–279. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  3. Curtis JT, Wang Z. Ventralinės tegmentinės srities dalyvavimas porų sujungime prerijų pelėnų patinuose. Fizinis elgesys. 2005a;86:338–346. [PubMed]
  4. Curtis JT, Wang Z. Gliukokortikoidų receptorių dalyvavimas porų surišime prerijų pelėnų patelėse: ūminės blokados poveikis ir sąveika su centrinėmis dopamino atlygio sistemomis. Neurologijos. 2005b;134:369–376. [PubMed]
  5. Dantzer R., Bluthe RM, Koob GF, Le Moal M. Žiurkių patinų socialinės atminties moduliavimas neurohipofiziniais peptidais. Psichofarmakologija (Berlis), 1987;91:363–368. [PubMed]
  6. Domes G, Heinrichs M, Michel A, Berger C, Herpertz SC. Oksitocinas pagerina žmonių „minčių skaitymą“. Biol Psichiatrija. 2007;61:731–733. [PubMed]
  7. Ferguson JN, Aldag JM, Insel TR, Young LJ. Oksitocinas medialinėje amygdaloje yra būtinas socialiniam pelių atpažinimui. J Neurosci. 2001;21:8278–8285. [PubMed]
  8. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Dopamino D2 receptoriai branduolio accumbens yra svarbūs socialiniam pririšimui moterims (Microtus ochrogaster) Behav Neurosci. 2000: 114: 173 – 183. [PubMed]
  9. Gruderadams S, Getz LL. Poravimosi sistemos ir tėvo elgesio palyginimas Microtus ochrogaster ir Microtus pennsylvanicus. Žurnalas „Mammalogy“. 1985;66:165–167.
  10. Guastella AJ, Mitchell PB, Dadds MR. Oksitocinas padidina žvilgsnį į žmogaus veidų akių sritį. Biol Psichiatrija. 2008;63:3–5. [PubMed]
  11. Hollander E, Bartz J, Chaplin W, Phillips A, Sumner J, Soorya L, Anagnostou E, Wasserman S. Oksitocinas padidina socialinio pažinimo išlaikymą sergant autizmu. Biol Psichiatrija. 2007;61:498–503. [PubMed]
  12. Insel TR, Shapiro LE. Oksitocino receptorių pasiskirstymas atspindi socialinę organizaciją monogaminėse ir daugiakalbėse gyslose. Proc Natl Acad Sci US A. 1992, 89: 5981 – 5985. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  13. Insel TR, Gelhard R, Shapiro LE. Lyginamasis neurohipofizinių peptidų priekinių smegenų receptorių pasiskirstymas monogaminėse ir poligaminėse pelėse. Neurologijos. 1991;43:623–630. [PubMed]
  14. Jacob S, Brune CW, Carter CS, Leventhal BL, Lord C, Cook EH., Jr. Oksitocino receptorių geno (OXTR) asociacija Kaukazo vaikams ir paaugliams, sergantiems autizmu. Neurosci Lett. 2007;417:6–9. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  15. Kavaliers M, Colwell DD, Choleris E, Agmo A, Muglia LJ, Ogawa S, Pfaff DW. Sumažėjęs oksitocino pašalintų pelių patelių parazitinių patinų kvapų diskriminavimas ir pasibjaurėjimas. Genų smegenų elgesys. 2003;2:220–230. [PubMed]
  16. Kendrickas KM. Oksitocinas, motinystė ir ryšys. Exp Physiol. 2000;85(Spec Nr.):111S–124S. [PubMed]
  17. Kendrickas KM, Keverne EB, Baldwin BA, Sharman DF. Acetilcholinesterazės, monoaminų ir oksitocino kiekis smegenų skystyje gimdymo, gimdymo, makšties kaklelio stimuliacijos, ėriukų atskyrimo ir žindymo metu. Neuroendokrinologija. 1986;44:149–156. [PubMed]
  18. Kosfeld M, Heinrichs M, Zak PJ, Fischbacher U, Fehr E. Oksitocinas didina pasitikėjimą žmonėmis. Gamta. 2005;435:673–676. [PubMed]
  19. Lerer E, Levi S, Salomon S, Darvasi A, Yirmiya N, Ebstein RP. Oksitocino receptorių (OXTR) geno ir autizmo ryšys: ryšys su Vineland adaptyvaus elgesio skalėmis ir pažinimu. Mol psichiatrija. 2007 [PubMed]
  20. Lim MM, Young LJ. Vasopresino priklausomos neuroninės grandinės, esančios porinių ryšių formavime monogaminėje prerijų vole. Neurologija. 2004: 125: 35 – 45. [PubMed]
  21. Limas MM, Wang Z, Olazabal DE, Ren X, Terwilliger EF, Young LJ. Padidėjęs partnerio pasirinkimas nepatenkintoms rūšims, manipuliuojant vieno geno ekspresija. Gamta. 2004;429:754–757. [PubMed]
  22. Limas MM, Liu Y, Ryabinin AE, Bai Y, Wang Z, Young LJ. CRF receptoriai nucleus accumbens moduliuoja partnerio pirmenybę prerijų pelėnams. Horm Behav. 2007;51:508–515. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  23. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oksitocinas ir dopaminas sąveikauja, kad reguliuotų porų ryšių formavimąsi moterų prerijų voluose. Neurologija. 2003: 121: 537 – 544. [PubMed]
  24. Lonstein JS, De Vries GJ. Suaugusių mergelių prerijų pelėnų tėvų elgesio lyties skirtumai: nepriklausomybė nuo lytinių liaukų hormonų ir vazopresino. J Neuroendokrinolis. 1999;11:441–449. [PubMed]
  25. Lonstein JS, De Vries GJ. Lytinių liaukų hormonų įtaka suaugusių prerijų pelėnų tėvų elgesio raidai (Microtus ochrogaster) Behav Brain Res. 2000;114:79–87. [PubMed]
  26. Olazabal DE, Young LJ. „Spontaniško“ motinos elgesio kintamumas yra susijęs su nerimą primenančiu elgesiu ir priklausomybe nuo naivių jaunų ir suaugusių prerijų pelėnų patelių (Microtus ochrogaster) Dev Psychobiol. 2005;47:166–178. [PubMed]
  27. Olazabal DE, Young LJ. Rūšys ir individualūs nepilnamečių patelių aloparentinės priežiūros skirtumai yra susiję su oksitocino receptorių tankiu juostoje ir šoninėje pertvaroje. Horm Behav. 2006a;49:681–687. [PubMed]
  28. Olazabal DE, Young LJ. Oksitocino receptoriai nucleus accumbens palengvina suaugusių prerijų pelėnų patelių „spontanišką“ motinos elgesį. Neurologijos. 2006b;141:559–568. [PubMed]
  29. Paxinos G, Watson C. Žiurkės smegenys stereotaksinėmis koordinatėmis. ketvirtasis leidimas Academic Press; San Diegas, Kalifornija: 1998 m.
  30. Pitkow LJ, Sharer CA, Ren X, Insel TR, Terwilliger EF, Young LJ. Prisijungimo ir porinio ryšio formavimosi palengvinimas, perkeliant vazopresino receptorių geną į monogaminio pelėno ventralinę priekinę smegenis. J Neurosci. 2001;21:7392–7396. [PubMed]
  31. Roberts RL, Zullo A, Gustafson EA, Carter CS. Perinatalinis gydymas steroidais keičia prerijų pelėnų aloparentinį ir giminingą elgesį. Horm Behav. 1996;30:576–582. [PubMed]
  32. Roberts RL, Williams JR, Wang AK, Carteris CS. Kooperatyvinis prerijų pelėnų veisimas ir monogamija: tėvo ir geografinių skirtumų įtaka. Anim Behav. 1998;55:1131–1140. [PubMed]
  33. Sansone GR, Gerdes CA, Steinman JL, Winslow JT, Ottenweller JE, Komisaruk BR, Insel TR. Makšties kaklelio stimuliacija išskiria oksitociną žiurkių nugaros smegenyse. Neuroendokrinologija. 2002;75:306–315. [PubMed]
  34. Savaskan E, Ehrhardt R, Schulz A, Walter M, Schachinger H. Po mokymosi intranazalinis oksitocinas moduliuoja žmogaus atmintį veido tapatybei. Psichoneuroendokrinologija. 2008;33:368–374. [PubMed]
  35. Smeltzer MD, Curtis JT, Aragona BJ, Wang Z. Dopamino, oksitocino ir vazopresino receptorių jungimasis monogaminių ir pasileidusių pelėnų medialinėje prefrontalinėje žievėje. Neurosci Lett. 2006;394:146–151. [PubMed]
  36. Wang Z, Young LJ. Oksitocino ir vazopresino receptorių jungimosi ontogenezė prerijų ir kalnų pelėnų šoninėje pertvaroje. Brain Res Dev Brain Res. 1997;104:191–195. [PubMed]
  37. Wang Z, Ferris CF, De Vries GJ. Pertvaros vazopresino inervacijos vaidmuo prerinių pelėnų tėvo elgesyje (Microtus ochrogaster) Proc Natl Acad Sci US A. 1994;91:400–404. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  38. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Partnerių preferencijų plėtra moterų prerijų grupėse (Microtus ochrogaster): socialinės ir seksualinės patirties vaidmuo. Horm Behav. 1992;26:339–349. [PubMed]
  39. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. Centrinio vazopresino vaidmuo susiejant poras monogaminiuose prerijų pelėnams. Gamta. 1993;365:545–548. [PubMed]
  40. Wu S, Jia M, Ruan Y, Liu J, Guo Y, Shuang M, Gong X, Zhang Y, Yang X, Zhang D. Teigiamas oksitocino receptorių geno (OXTR) ryšys su autizmu Kinijos Han populiacijoje. Biol Psichiatrija. 2005;58:74–77. [PubMed]
  41. Jaunasis LJ. Frank A. Beach apdovanojimas. Oksitocino ir vazopresino receptoriai ir tipiškas socialinis elgesys. Horm Behav. 1999;36:212–221. [PubMed]
  42. Young LJ, Wang Z. Porų susiejimo neurobiologija. Nat Neurosci. 2004;7:1048–1054. [PubMed]
  43. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Ląsteliniai socialinio prisirišimo mechanizmai. Horm Behav. 2001;40:133–138. [PubMed]
  44. Young LJ, Huot B, Nilsen R, Wang Z, Insel TR. Centrinio oksitocino receptoriaus genų ekspresijos rūšių skirtumai: lyginamoji promotoriaus sekų analizė. J Neuroendokrinolis. 1996;8:777–783. [PubMed]
  45. Yrigollen CM, Han SS, Kochetkova A, Babitz T, Chang JT, Volkmar FR, Leckman JF, Grigorenko EL. Genai, kontroliuojantys affiliatyvų elgesį kaip kandidatai į autizmą. Biol Psichiatrija. 2008;63:911–916. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]