Dopamīna sistēmas disfunkcijas maiņa, reaģējot uz augstu tauku saturu (2013)

. Autora manuskripts; pieejams PMC 2014 Jun 1.

Publicēts galīgajā rediģētā formā kā:

PMCID: PMC3700634

NIHMSID: NIHMS435903

Anotācija

Mērķis

Lai pārbaudītu, vai augsta tauku satura diēta (HFD) samazina dopamīnerģisko toni smadzeņu atalgojuma reģionos, un novērtē, vai šīs izmaiņas pēc HFD noņemšanas tiek atgrieztas.

Dizains un metodes

Vīriešiem un mātītēm ieguva 60% HFD 12 nedēļām. Papildu grupa tika novērtēta 4 nedēļas pēc HFD noņemšanas. Šīs grupas salīdzināja ar kontrolētu barību, ar vecumu saskaņotām kontrolēm. Saharozi un saharīna izvēli mēra kopā ar dopamīna saistīto gēnu mRNS ekspresiju ar RT-qPCR. Dopamīnu un DOPAC mērīja, izmantojot augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju. DAT promotora DNS metilēšanu noteica ar metilētu DNS imunoprecipitāciju un RT-qPCR.

rezultāti

Pēc hroniskas HFD saharozes preferences tika samazinātas un pēc tam normalizētas pēc HFD noņemšanas. Tika novērota dopamīna gēnu ekspresijas samazināšanās, samazināts dopamīna saturs un izmaiņas DAT promotora metilēšanas procesā. Svarīgi, ka reakcija uz HFD un izmaiņu noturība ir atkarīga no dzimuma un smadzeņu reģiona.

secinājumi

Šie dati liecina par pazeminātu dopamīna tonusu pēc agrīnās dzīves hroniskas HFD ar sarežģītu atgrūšanas un noturības modeli, kas atšķiras atkarībā no dzimuma un smadzeņu reģiona. CNS izmaiņas, kas pēc HFD lietošanas pārtraukšanas neizmainījās, var veicināt svara zuduma saglabāšanu pēc diētas iejaukšanās.

atslēgvārdi: Dopamīns, diēta ar augstu tauku saturu, DAT, dzimumu atšķirības, aptaukošanās, izņemšana, DNS metilēšana

Ievads

Plaši pieejamu, kaloriju blīvu garšīgu ēdienu pārmērīgu patēriņu uzskata par galveno faktoru, kas veicina augsto aptaukošanās līmeni ASV (). Tā kā garšīgi ēdieni bieži tiek patērēti pēc tam, kad ir izpildītas enerģijas prasības, garšīgu ēdienu atalgojošās īpašības var ignorēt homeostatiskos sātīguma signālus. Daudziem neirotransmiteriem ir nozīme barošanas uzvedībā (piemēram, opioīdi, dopamīns, GABA, serotonīns), kā arī perifēro barības vielu signālu integrācija (piemēram, leptīns, insulīns, ghrelīns). Dopamīna signalizācija ir galvenais starpnieks gan pārtikas atlīdzības, gan atalgojuma meklējumos, jo dopamīns mezolimbiskajā / mezokortikālajā reģionā ir saistīts ar pārtikas, dzimuma un atkarības narkotiku atalgojošajām īpašībām (). Akūti, garšīgi ēdieni izraisa dopamīna pārrāvumu centrālajā atalgojuma sistēmā (,). Paaugstināta dopamīna izdalīšanās laika gaitā var izraisīt pielāgošanos, kas saistīta ar atalgojuma hipoefektivitāti.

Vairāki pierādījumi liecina par hipotēzi par mainītu dopamīna funkciju aptaukošanās gadījumā. Cilvēka attēlveidošanas pētījumi atklāja, ka aptaukošanās pacientu atalgojuma reģionos tika aktivizēta neskaidra aktivizēšanās, dzerot ļoti garšīgu šķīdumu (milkshake).). Atbildes reakcija uz neskaidru atalgojumu bija saistīta ar mazāku smadzeņu dopamīna receptoru D2 pieejamību. Faktiski mutācijas cilvēka dopamīna D2 receptoros ir saistītas ar aptaukošanos un atkarību (). Dopamīna saturu sinapses lielā mērā kontrolē dopamīna transportera (DAT) uzņemšana. Dopamīna transportieru līmenis ir negatīvi korelēts ar ķermeņa masas indeksu, un DAT ģenētiskie varianti ir saistīti arī ar aptaukošanos (,). Dzīvnieku aptaukošanās modeļi ir pierādījuši bazālā ekstracelulārā dopamīna samazināšanos un samazinātu dopamīna neirotransmisiju kodolkrūšu un ventrālā tegmentālā apgabalā (,,). Dopamīna izraisīto gēnu samazināšanās pēc hroniska augsta tauku satura (HF) diēta liecina par pazeminātu signalizāciju atalgojuma reģionos (, ,,). Šī dopamīna aktivitātes samazināšanās pēc hroniska augsta tauku satura diēta var samazināt jutīgumu pret dabiskiem ieguvumiem un veicināt nepārtrauktu pārmērīgu patēriņu un turpmāku svara pieaugumu.

Agrīna dzīve ir kritisks periods smadzeņu attīstībā, un agrīna uztura vide var ietekmēt smadzeņu ceļus, kas kontrolē pārtikas uzņemšanu un enerģijas metabolismu. Agrīna peles pakļaušana augsta tauku satura diētai tik mazā nedēļā, kā mainīts pieaugušo kaloriju patēriņš un ar dopamīnu saistīto signalizācijas molekulu ekspresija (). Turklāt agrīna postnatālā pārmērīga uztura izmantošana pelēm, ko veicināja mazs pakaišu skaits visā laktācijas periodā, liek pēcnācējiem pieaugt pieaugušo aptaukošanos, mainot hipotalāmu attīstību (). Lai gan ir skaidrs, ka agrīnās dzīves uzturs var ietekmēt smadzeņu attīstību un aptaukošanās risku, ir maz zināms par šo izmaiņu relatīvo noturību visā dzīves laikā. Turklāt iepriekšējie pētījumi veikti ar vīriešu dzimuma dzīvniekiem, bet sievietes šajā kontekstā ir reti pētītas. Šim nolūkam gan vīriešu, gan sieviešu dzimuma pelēm tika pētītas gēnu ekspresijas un dopamīna metabolisma izmaiņas pēc tam, kad agrīnā dzīvē tās tika aptaukotas, ilgstoši lietojot HF diētu no dzimšanas līdz 8 nedēļas vecumam. Dopamīna sistēma tika novērtēta arī 4 nedēļas pēc HF diētas noņemšanas, lai noskaidrotu, vai izmaiņas saglabājas vai mainījās.

Metodes un procedūras

Dzīvnieki un eksperimentālais modelis

C57BL / 6J mātītes tika audzētas ar DBA / 2J vīriešiem (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME). Visi dambji tika baroti ar standarta kontroles diētu (#5755; 18.5% proteīns, 12% tauki, 69.5% ogļhidrāts) līdz dzemdībām, kad puse no aizsprostiem / ligzdām tika novietoti ar augstu tauku saturu (Test Diet, Richmond, IN #58G9; 18% olbaltumvielu, 60% tauku un 20.5% ogļhidrātu). Pēcnācēji tika atšķirtas 3 nedēļas vecumā un palikuši vai nu kontrolējamā diētā, vai ar augstu tauku saturu, līdz 12 nedēļas vecumam. Ķermeņa masas tika reģistrētas katru nedēļu, un tika izmantotas gan vīriešu (n = 5 – 10), gan sieviešu (n = 5 – 10) peles. Pensilvānijas Universitātes Institucionālā dzīvnieku aprūpes un lietošanas komiteja (IACUC) apstiprināja visas procedūras.

Saharoze un saharīna izvēle

Atsevišķos eksperimentos peles tika individuāli novietotas (n = 8 – 10 / grupa) standarta būros 3 dienām ar vienu pudeli 200 ml testa šķīduma (4% saharozes vai 1% saharīna šķīduma (w / v)) un citu. pudele ar krāna ūdeni 200 ml. Pieejama mājas čau ad libitum. Tika mērīta saharoze (ml), ūdens (ml) un pārtikas patēriņš (g), un pudeles tika ievietotas katru dienu. Priekšroka tika aprēķināta, izmantojot pēdējo 2 dienu mērījumu vidējo vērtību šādi: priekšroka% = [(saharozes patēriņš / saharoze + ūdens patēriņš) × 100].

Genomiskā DNS un kopējā RNS izolācija no smadzenēm

Dzīvnieki (n = 5 / grupa) tika pārnesti ar oglekļa dioksīda pārdozēšanu, kam sekoja kakla dislokācija; metode, ko iesaka American Veterinary Medical Association Eitanāzijas grupa. Pēc tam smadzenes tika ātri noņemtas un ievietotas RNAlater (Ambion, Austin, TX) 4 – 6 stundām pirms sadalīšanas. Smadzeņu šķelšanās, lai izolētu prefrontālo garozu, kodolskābi un ventrālo tegmentālo zonu, tika sagatavoti, kā aprakstīts iepriekš (,, ). Genomiskā DNS un kopējā RNS tika izolētas vienlaicīgi, izmantojot AllPrep DNS / RNA Mini Kit (Qiagen).

Gēnu ekspresijas analīze ar kvantitatīvu reālā laika PCR

Katra atsevišķa parauga kopējās RNS 500ng tika izmantota reversajā transkripcijā, izmantojot High Capacity Reverse Transcription Kit (ABI, Foster City, CA). Mērķa gēnu ekspresija tika noteikta ar kvantitatīvu RT-PCR, izmantojot gēnu specifiskās Taqman Probes ar Taqman gēna ekspresiju Master Mix (ABI) ABI7900HT Real-Time PCR Cycler. Gēnu zondes ir uzskaitītas papildu materiāls. Katra transkripta relatīvais daudzums tika noteikts, izmantojot delta CT vērtības, kā aprakstīts iepriekš (). Gēnu ekspresijas izmaiņas tika aprēķinātas, nemainot GAPDH standartu.

Ex vivo dopamīna un dopamīna metabolīti

Dopamīna un tā metabolītu satura noteikšanai smadzeņu mezolimbiskajās zonās (n = 8 – 12), kā aprakstīts iepriekš, tika izmantota augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija (HPLC).,). Smadzenes tika savāktas no dzīvniekiem un šķērso labās un kreisās puslodes. NAc un PFC tika atdalīti un ātri sasaldēti ar sausu ledu un uzglabāti –80 ° C. Audi tika sagatavoti analīzei, homogenizējot 0.1 N perhlorskābē, centrifugējot pie 15,000 apgr./min. 15 min 2-8 ° C un supernatants filtrēts. Paraugus analizēja, izmantojot bioanalītisko sistēmu HPLC (West Lafayette, IN, USA), izmantojot LC-4C elektrochemisko detektoru. Paraugi (12 ul) tika injicēti reversās fāzes mikrobora kolonnā ar plūsmas ātrumu 0.6 ml / min un elektrodetāciju, kas iestatīta uz + 0.6 V. Dopamīna un dopamīna metabolītu atdalīšana tika veikta ar kustīgu fāzi, kas sastāv no nātrija acetāta 90-mM, 35-mM citronskābe, 0.34-mM etilēndiamīna tetraetiķskābe, 1.2-mM nātrija oktilsulfāts un 15% metanols v / v pie 4.2 pH. Mērīja paraugu maksimālos augstumus un salīdzināja tos ar dopamīna un tā metabolīta 3,4-dihidroksifeniletiķskābes (DOPAC) standartiem.

Metilēts DNS imunoprecipitācijas (MeDIP) tests

MeDIP tests tika sagatavots, izmantojot MagMeDIP komplektu (Diagenode, Denville, NJ). Metilētu DNS imunizolēja, izmantojot 0.15ul magnētiskās lodītes, kas pārklāta ar anti-5methylcytidin antivielu (Diagenode) vai peles pirmsimūnu serumu. MeDIP frakcijas bagātināšana tika noteikta ar kvantitatīvu RT-PCR, izmantojot ChIP-qPCR Assay Master Mix (SuperArray) uz ABI7900HT Real-Time Cycler. Attiecībā uz visiem pārbaudītajiem gēniem primerus ieguva no SuperArray (ChIP-qPCR analīzes (-01) kb flīzes, SuperArray) genomisko reģionu amplifikācijai, kas aptver CpG vietas, kas atrodas aptuveni 300 – 500 bp pirms transkripcijas sākuma vietām. MeDIP rezultāti tika izteikti kā imunoprecipitētas DNS bagātināšana katrā vietā. Lai aprēķinātu diferenciālā noslogojuma izmaiņas (% bagātināšana), MeDIP DNS frakcijas CT vērtības tika normalizētas pēc Input DNA frakcijas CT vērtības.

Statistika

Gēnu ekspresijas analīzi veica, izmantojot Student T-testu, salīdzinot vecuma saskaņotās kontroles ar HF un HF + reģenerācijas grupām. Alfa līmenis tika pielāgots vairākiem apsekotajiem smadzeņu reģioniem. Vienā smadzeņu reģionā izmantotā gēna nozīme bija p = .05; diviem reģioniem, p = 0.025, 3 smadzeņu reģioniem p = .016. Saharozes izvēle, saharīna izvēle, HPLC un MEDIP, ķermeņa svars un kortikosterona tests tika analizēti, izmantojot vienvirziena ANOVA, lai salīdzinātu kontroles, HF un HF + reģenerācijas grupas. Lai salīdzinātu pāru atšķirības starp grupām, izmantoja Post-hoc Bonferonni vairāku salīdzinājumu testus. Šo testu nozīmīgums tika noteikts alfa līmenī p = .05.

rezultāti

Pelēm līdz 60 nedēļu vecumam bija pastāvīga piekļuve kontroles diētai (kontrolei) vai 12% diētai ar augstu tauku saturu (HFD). 12 nedēļu vecumā pusi no HF barotajiem dzīvniekiem uz 4 nedēļām novietoja uz mājas chow (HF + atveseļošanās). Gan vīriešiem, gan sievietēm HFD dzīvnieki (apļi) bija smagāki par kontrolgrupām, sākot no 9 nedēļu vecuma (p <05), un visā atveseļošanās periodā palika smagāki par kontrolgrupām (Papildu attēls 1).

Saharozes un saharīna preferenču testi tika veikti, lai novērtētu dzīvnieku atbildes reakciju uz dabiskiem un nonnutritīviem atalgojuma stimuliem. Saharozes izvēle, bet ne saharīna izvēle tika mainīta pēc HF diētas iedarbības un pēc HFD atgūšanas vīriešiem un sievietēm atgriezās normālā līmenī. Vienvirziena ANOVA atklāja saharozes preferenci vīriešiem (1A) un tendence samazināties sievietēm (1B) pēc HFD iedarbības (F (2,16) = 4.82, p <05; F (2,16) = 5.41, p <06). Pēc HFD noņemšanas šī uzvedība normalizējās, un saharozes izvēle vairs neatšķīrās no kontroles. Nevienam no vīriešiem saharīna izvēle netika mainīta (1C) vai sievietēm (1D) HFD iedarbības rezultātā.

Skaitlis 1 

Saharozes izvēle, bet ne saharīna izvēle tiek mainīta pēc augsta tauku satura diētas (HFD) iedarbības un atgriežas kontroles līmeņos pēc HFD atgūšanas vīriešiem un sievietēm

Tā kā dopamīns ir galvenais atlīdzības uzvedības regulators, ar dopamīnu saistītā gēna ekspresija tika pārbaudīta atsevišķas vīriešu un sieviešu kohortas shēmā pēc 12 nedēļām HFD un papildu grupā pēc 4 nedēļu atjaunošanās no HFD. Tabula 1 apkopo gēnu ekspresijas modeļus un statistisko analīzi VTA, PFC un NAc. VTA tika mērīti trīs gēni, kas ir svarīgi, lai regulētu dopamīna līmeni sinaptiskā terminālā: katecholamīna metil-transferāze (COMT), kas iesaistīta katecholamīna neirotransmiteru inaktivācijā; dopamīna transporteris (DAT), membrānas pārklājošais sūknis, kas attīra dopamīnu no sinapses, un tirozīna hidroksilāze (TH), kas ir ātruma ierobežojošais enzīms dopamīna sintēzei. Katras grupas saliktās maiņas vērtības tika noteiktas, izmantojot vecāku saskaņoto vadību (piemēram, abi kontroles laika punkti ir iestatīti uz 1, un skaidrības labad grafikā attēlota tikai HFD kontrole). Studentu t-tests (n = 5 / grupa) atklājās vīriešu VTA, ka HFD iedarbība būtiski samazināja COMT, DAT un TH mRNS (2A) un atgriezās vai pārsniedza kontroles līmeņus pēc atgūšanas perioda pēc uztura (HF + reģenerācija).

Skaitlis 2 

Hronisks augsta tauku diēta (HFD) un atveseļošanās pēc HFD maina dopamīna gēnu ekspresiju vīriešiem un sievietēm.
Tabula 1 

Gēnu izteiksmes kopsavilkums un statistika vīriešiem

PFC un NAC pētīja gēnus, kas ir svarīgi dopamīna signalizācijai un dopamīna apgrozījumam (n = 5 / grupa): COMT; proteīna fosfatāzes 1 regulējošā apakšvienība 1B (DARPP-32), lejupplūsmas signālu proteīns, ko regulē receptoru stimulācija; dopamīna receptoru D1 (DRD1), postinaptisku G-proteīnu saistītu receptoru, kas stimulē adenililciklāzi; un dopamīna receptoru D2 (DRD2), postinaptisku G-proteīnu saistītu receptoru, kas inhibē adenililciklāzi. Vīriešu PFC (2B), DARPP-32 palielinājās, bet DRD1 un DRD2 samazinājās pēc HFD iedarbības, un šīs izmaiņas saglabājās pēc HFD noņemšanas (lai gan DARPP-32 mRNS palielināšanās nebija statistiski ticama). Vīriešu NAC (2C), COMT, DRD1 un DRD2 samazināja HFD iedarbība, un pēc HFD noņemšanas tie palika zemāki par kontroles līmeni. DFPP-32 līmenis palielinājās ar HFD, bet ievērojami samazinājās no kontrolēm pēc 4 nedēļas pēc HFD.

Tām pašām smadzeņu zonām un gēniem tika pārbaudītas peles (n = 5 / grupa). Kā parādīts Tabula 2, reaģējot uz HFD, novēroja būtiskas atšķirības gēnu ekspresijas modelī, kā arī uztura atjaunošanai. Līdzīgi kā vīriešiem, pēc HFD iedarbības ievērojami samazinājās COMT un THR mRNS līmenis.2D). Tomēr atšķirībā no vīriešiem šīs izmaiņas saglabājās pēc HFD atcelšanas. Turklāt tiešā pretstatā vīriešiem novērotajam modelim HFD ekspozīcija palielināja DAT mRNS ekspresiju VTA sievietēm, un pēc HFD izvadīšanas līmenis bija pat zemāks par vecuma atbilstības kontroli. PFC gadījumā hroniskā HFD ietekmēja tikai DARPP-32, būtiski palielinoties mRNS līmenim pēc 12 nedēļas HFD, un atgriešanās pie kontroles līmeņiem pēc HFD noņemšanas. Gan COMT, gan D1R mRNS pēc 4 nedēļas tika ievērojami samazināts no HFD. Sievietēm NAC, COMT, DRD1 un DRD2 tika samazinātas pēc HFD iedarbības (2F). Pēc diētas noņemšanas DRD1 un DRD2 atguva kontroles līmeņus, savukārt pēc 4wk atgūšanas COMT palika ievērojami samazināts.

Tabula 2 

Gēnu ekspresijas kopsavilkums un statistika sievietēm

Ņemot vērā gēnu ekspresijas nemainīgu samazināšanos dopamīna regulējošiem gēniem VTA, dopamīna un dopamīna metabolīti tika kvantitatīvi noteikti reģionos, kuros saņemti projekcijas no VTA, PFC un NAC. Skaitlis 3 vīriešiem parādās dopamīns (DA) un dopamīna metabolīts (DOPAC) no PFC un NAC.3A, 3C) un sievietēm (3B, 3D). Vīriešiem HFD iedarbība samazināja dopamīna līmeni PFC (\ t3A) un NAC (3C) (F (2,13) ​​= 3.95; F (2,18) = 3.536, p <05), kas atjaunojās pēc HFD noņemšanas tikai NAC. Dopamīna apgrozījums (DOPAC: DA attiecība) pieauga vīriešu PFC (F (2,12) = 3.85, p <05) un NAC (F (2,17) = 4.69, p <05). Turpretī HFD ietekme uz DA un DOPAC sievietēm bija kvalitatīvi atšķirīga nekā vīriešiem. PFC HFD neietekmēja DA vai DOPAC līmeni. NAc DA līmenis samazinājās ar HFD barotiem dzīvniekiem un palika pazemināts pat pēc HFD noņemšanas (3D, F (2,23) = 4.79, p <05). DOPAC līmenis sieviešu NAc nemainījās, kā rezultātā palielinājās DA apgrozījums (DOPAC: DA attiecība) (F (2,23) = 7.00, p <01).

Skaitlis 3 

Dopamīna līmeņa samazināšanās PFC un NAC pēc HFD no dzimšanas un jauktas atveseļošanās pēc HFD noņemšanas

Ņemot vērā, ka DAT transkripciju var regulēt ar diferenciālu DNS metilēšanu un novērojot ievērojamu dzimumu atšķirību DAT ekspresijā VTA, tika pētīta DNS metilēšana DAT promotora reģionā. In Attēls 4A, 4C DAT gēnu ekspresija VTA tiek parādīta vēlreiz skaidrības labad (ņemta no 2A un 2D). DAT promotora metilēšana ievērojami palielinājās vīriešiem (4B) pēc HFD un atgriezās pie kontroles līmeņa HFD + vīriešiem (F (2,11) = 23.64, p <01). Sievietēm DAT promotera metilācija virzījās uz HFD dzīvnieku samazināšanos (D) un ievērojami samazinājās HFD + mātītēm (5.D attēls, F (2,12) = 5.70, p <05).

Skaitlis 4 

DAT promotora DNS metilēšanas statusa izmaiņas paralēlās izmaiņas gēnu ekspresijā VTA

Lai novērtētu, vai HFD atdalīšana atveseļošanās periodā bija stresa faktors, sākotnējais kortikosterona līmenis plazmā (ug / dl) tika ņemts kontrolē, HFD iedarbībā (12 nedēļas), HFD + 1wk atgūšanas un HFD + 4wk atgūšanas grupās (n = 5 / grupa, Papildu attēls 2). Vienvirziena ANOVA neatklāja būtiskas atšķirības starp grupām vīriešu dzimuma dzīvniekiem (F (3,16) = 3.21, ns).

diskusija

Lai noteiktu diētas izraisītu aptaukošanos pelēm, tika izmantots hronisks augstas tauku satura diētas (HFD) patēriņš, kas sākās agrā dzīvē. Pelēm parādījās samazināta saharozes priekšrocība un pierādījumi par samazinātu dopamīnerģisko toni smadzeņu atalgojuma reģionos. Pēc 4 nedēļas no HFD, gan vīriešiem, gan sievietēm normalizējās saharozes izvēle, tomēr saglabājās dažas dopamīna gēna ekspresijas izmaiņas. Šie eksperimenti sniedz svarīgus jaunus datus, kas raksturo hroniskas HFD ietekmi uz smadzeņu atlīdzības sistēmu, uzsverot spēju atjaunoties un galvenās dzimuma atšķirības starp vīriešiem un sievietēm.

HFD barotajiem dzīvniekiem tika novērota saharozes preferences samazināšanās, kas pēc atveseļošanās perioda mainījās. Šie atklājumi paplašina mūsu iepriekšējo ziņojumu par HFD uzņemšanu, samazinot saharozes izvēli (), pierādot, ka tas var notikt ar īsāku HFD iedarbības ilgumu (12 nedēļas salīdzinājumā ar 22 nedēļām), un svarīgākais ir tas, ka reakcija atgūstas bez HFD. Sieviešu pelēm bija tādi paši reakcijas modeļi kā vīriešiem. Šie konstatējumi saskan ar citiem literatūras dokumentiem, kas ir parādījuši, ka, iekļaujot pāris barotu grupu, hronisks HFD, nevis aptaukošanās per se, mazina reakciju par saharozi operanta uzdevumā (). Līdzīgi, pašreizējā pētījumā pēc 4 nedēļas no HFD atgūšanās saharozes priekšrocība, kamēr ķermeņa masa saglabājās ievērojami paaugstināta, apstiprinot secinājumu, ka saharozes preferenču samazināšanos izraisīja HFD iedarbība, nevis pievienotā ķermeņa masas palielināšanās. Īpaši interesanti bija tas, ka saharīna izvēle nav mainījusies. Tas var liecināt, ka hroniska HFD atšķirīgi ietekmē reakciju uz kaloriju un bez kalorijām. Ir pierādīts, ka pēcreģistrācijas efekti ietekmē priekšroku neatkarīgi no garšas, jo ir pierādīts, ka saharozes lietošana izraisa dopamīna izdalīšanos “saldo aklu” garšas receptoru knockout pelēm (), atlīdzība un pastiprināšana ir nepieciešama uzturvērtībai () un drosofilā ir definēti no garšas neatkarīgiem vielmaiņas \ t). Saharīns ir ievērojami saldāks nekā saharoze, tāpēc tika mēģināts noteikt salduma līdzvērtību (parasti 4 – 10x augstāka saharozes koncentrācija ()) tomēr vispārējais priekšroka saharīnam bija zemāks nekā saharozei šajos dzīvniekos. Tāpēc alternatīvs izskaidrojums var būt, ka HFD atšķirīgi ietekmēja saharozes izvēli, jo tas bija salīdzinoši izdevīgāks nekā saharīns (augsta vai zema vērtības atlīdzība), lai gan dzīvnieki vēl arvien izrādīja spēcīgu priekšroku saharīnam (~ 75 – 80% prečs saharīnam salīdzinājumā ar saharīnu) līdz ~ 85 – 90% priekšroka saharozei).

Kopumā hroniskajai HFD pēc dzemdes pelēm tika samazināta dopamīnerģiskā gēna ekspresija VTA, NAc un PFC. Šie rezultāti atbilst citiem pētījumiem, kuros novērots ar dopamīnu saistīto gēnu samazināšanās, reaģējot uz HFD (\ t,,). Cilvēka attēlveidošanas pētījumos novērota dopamīna D2 receptoru ekspresijas un funkcijas samazināšanās (\ t, ) un grauzēju aptaukošanās modeļi (\ t, ). Samazināta dopamīna signalizācija samazina jutīgumu pret dabiskiem ieguvumiem un tādējādi var veicināt garšīgu pārtikas produktu pārmērīgu patēriņu un turpmāku svara pieaugumu (,). Ir zināms, ka dopamīna homeostāze, kas tiek pārtraukta, samazinoties DAT virsmas ekspresijai, palielina augstu tauku satura diētu (). Izņēmums šim modelim tika novērots, lietojot DARPP-32, dopamīna un ciklisku AMP regulētu fosfoproteīnu, kas palielinājās pēc HFD NAc un PFC. DARPP-32 ir izšķiroša loma, integrējot dažādas dopamīna kontrolētas bioķīmiskās un uzvedības reakcijas. Iespējams, ka DARPP-32 regulēšana bija kompensējoša, reaģējot uz hronisku D1R regulēšanu. Līdzīgā modelī (12 wk HFD pelēm) ir pierādīts, ka D1R leju regulēšana tika saskaņota ar DARPP-32 fosforilācijas pieaugumu NAc ().

Daži pētījumi ir pārbaudījuši spēju atgūt šīs izmaiņas pēc HFD atcelšanas. Tomēr divos nesenos ziņojumos gēna ekspresijas izmaiņas un atlīdzības sistēmas defekti saglabājās pēc īsa atteikuma perioda (14 – 18d) (, ). Turpretī pētījumi ar aptaukošanās pacientiem pirms un pēc kuņģa apvedceļa operācijas ir parādījuši dopamīnerģisko izmaiņu maiņu pēc ilgāka svara zuduma perioda (). Vīriešiem atveseļošanās modelis mainījās atkarībā no smadzeņu reģiona. VTA tika novērots novērots COMT, DAT un TH samazinājums ar HFD noņemšanu. Turpretī visas gāzu ekspresijas izmaiņas, kas novērotas NAc un PFC, normalizējās. Pašreizējā pētījumā hroniska HFD izraisīja nozīmīgu ķermeņa masas pieaugumu, un pēc 4 nedēļām pēc diētas, dzīvnieki joprojām bija ievērojami smagāki par kontrolēm. Tādēļ turpmākās aptaukošanās (piemēram, paaugstināta leptīna, paaugstinātas adipokīnu) metaboliskās un hormonālās izmaiņas, iespējams, joprojām bija 4 nedēļas pēc diētas. Tāpēc gēnu ekspresijas izmaiņas, kas normalizējās (piemēram, VTA), var būt galvenokārt izraisījušas HFD, bet tās, kuras tika saglabātas (NAc un PFC), var būt ciešāk saistītas ar aptaukošanos. Svara zuduma uzturēšana ar diētu ir raksturīga zema (ar 67% () uz 80% () pacientiem, kuri atgūst zaudēto svaru). Šī gēnu ekspresijas izmaiņu atalgojuma reģionos būtiska nozīme varētu būt daļējai šīs kopīgās parādības izskaidrošanai. Svarīgi arī atzīmēt, ka novērotās uzvedības un gēnu ekspresijas izmaiņas, visticamāk, nav saistītas ar barības maiņu, jo HFD vai pēc 1wk vai 4wk reģenerācijas nebija būtiskas izmaiņas bazālajā plazmas kortikosterona līmenī.

Tika atklātas interesantas dzimumu atšķirības gan atbildes reakcijā uz hronisku HFD, gan reaģējot uz uztura noņemšanu. Mātītes bija līdzīgas vīriešiem, parādot vispārēju dopamīna saistīto gēnu samazināšanos, kas varētu paredzēt DA aktivitātes samazināšanos, jo īpaši VTA un NAc. Viena no ievērojamām dzimumu atšķirībām bija DAT mRNS ekspresijas palielināšanās sievietes VTA pēc HFD. Šī gēnu ekspresijas atšķirība, kas saistīta ar līdzīgu TH gēna ekspresijas samazināšanos abos dzimumos, liecina par būtiskām atšķirībām dopamīna neirotransmisijā NAc ietvaros gan HFD iedarbības beigās, gan pēc atgūšanas perioda. Lielāka izpratne par šo atšķirību funkcionālo nozīmi ir svarīgs turpmāko pētījumu mērķis.

Turklāt, kamēr vīriešu un sieviešu VTA samazinājās COMT un TH, šie samazinājumi sievietēm saglabājās pēc 4 nedēļas pēc HFD. Vēl ir jānoskaidro, vai šīs atšķirības izmainītos ar ilgāku laiku no diētas, tomēr tā atbalsta secinājumu, ka sievietes ir vismaz lēnāk atveseļoties, ja tās vispār atgūstas. Turklāt D1R un D2R gēnu ekspresijas izmaiņas NAc un PFC bija diezgan atšķirīgas vīriešiem un sievietēm. Vīriešiem bija vērojams vispārējs gēnu ekspresijas samazinājums abos reģionos, kas lielā mērā saglabājās pēc diētas noņemšanas. Sievietēm D1R un D2R samazinājās NAc un pēc tam atguva, bet HFD ietekme uz dopamīna receptoriem PFC nebija. Pašreizējos pētījumos sievietes dzīvnieki tika upurēti, neņemot vērā estrus. Lai gan ir zināms, ka daži no novērotajiem gala rādītājiem svārstās visā skriešanas ciklā, sievietes šajā pētījumā neparādīja lielākas atšķirības starp gala rādītājiem, īpaši, salīdzinot ar uztura manipulāciju ietekmi.

Lai papildinātu gēnu ekspresijas rezultātus, dopamīns tika mērīts VTA primārajos projekcijas reģionos, proti, PFC un NAc. Dopamīna līmenis bija paralēlām izmaiņām, kas novērotas THMRNS VTA. Gan vīriešu, gan sieviešu NAc atbildes reakcijā uz HFD diētu DA samazinājās; atbildes reakcija, kas atgūta vīriešiem, bet ne sievietēm. PFC gadījumā HFD samazinājās arī dopamīna līmenis, tomēr PFC uzturs netika atjaunots. Turklāt sievietēm bija zemāks dopamīna līmenis prefrontālajā garozā nekā vīriešiem. Seksu atšķirības DAT izteiksmē un funkcijā ir labi zināmas literatūrā, un sievietēm, kas demonstrē palielinātu DAT izpausmi () un funkcija (), un šīs atšķirības var veicināt atšķirīgu dopamīna sākotnējo līmeni vīriešiem un sievietēm. DOPAC: DA attiecība ir arī informatīva. Šīs attiecības palielinājums varēja atspoguļot kompensējošu reakciju, ko izraisīja DA samazinājums. Šo dopamīna metabolisma izmaiņu ilgtermiņa funkcionālo nozīmi apgaismotu, mērot izmaiņas dopamīna izdalīšanā, izmantojot in vivo mikrodialīze.

Turklāt šie dati identificē DNS metilēšanas dinamiku DAT gēna promotorā, īpaši tēviņos. Nesen mēs esam pierādījuši, ka DAT izteiksmi var dinamiski regulēt ar diferenciālu DNS metilēšanu, reaģējot uz HFD () un ka palielināta DAT promotora metilēšana korelē ar gēnu ekspresijas samazināšanos. Šeit mēs identificējam šīs reakcijas plastiskumu, jo paaugstināta DNS metilēšana (un samazināta mRNS ekspresija), kas novērota vīriešiem, pēc HFD izņemšanas mainās. Epigenetiskais gēnu regulējums, piemēram, mainoties DNS metilēšanai, rada ceļu, kurā organismi var viegli pielāgoties vides problēmām. Epigenetiskās zīmes var saglabāt visā dzīves laikā () un kultivētās embriju cilmes šūnās, reaģējot uz mainīgajiem vides apstākļiem, tika novēroti gan atgriezeniski, gan pastāvīgi diferencētas DNS metilēšanas modeļi.). Šie dati ir pirmie pierādījumi in vivo dinamisks metilēšanas modelis, kas mainās ar vides problēmu. Jāatzīmē, ka tas pats modelis netika novērots sievietēm. Lai gan sākotnējā reakcija uz HFD bija prognozēta (samazināta DNS metilēšana, kas veicināja gēnu ekspresijas palielināšanos), šis modelis netika saglabāts visā atveseļošanās periodā. Tas liek domāt, ka četru nedēļu laikā pēc HFD DNS metilēšana un gēnu ekspresija var atdalīties, vai arī tas var likt domāt, ka DAT mRNS sievietēm tiek regulētas ar citiem līdzekļiem.

Vīriešiem, saharozes izvēle, ar DA saistītā gēnu ekspresija VTA un dopamīns NAc seko konsekventam parauga nomākumam, reaģējot uz hronisko HFD, kas atgūstas pēc diētas noņemšanas. Interesanti, ka, lai gan uzvedības reakcijas uz saharozi sievietēm ir līdzīgas, gan gēnu ekspresijas modelis, gan NAc dopamīna līmenis liecina par to, ka HFD noņemšanas laikā trūkst atveseļošanās. Ar atalgojumu saistīto rīcību skaidri ietekmē papildu neirotransmiteru sistēmas, piemēram, opioīdi un, iespējams, sievietes, uzvedības reakcija uz saharozi ir vairāk saistīta ar opioīdu izmaiņām. Kopumā pašreizējie dati liecina, ka dzimumu atšķirības gan sākotnējā reakcijā uz HFD, gan pēc atveseļošanās pēc HFD noņemšanas attiecībā uz dopamīnu saistīto gēnu ekspresiju ir svarīgs turpmāko pētījumu virziens, kas vērsts uz to, kā hronisks patēriņš. HFD ietekmē smadzeņu atlīdzības sistēmu. Jo īpaši šie dati identificē nozīmīgu plastiskumu dopamīnerģiskajā reakcijā uz HFD, kas liecina, ka, lai gan hroniska HFD patēriņa un / vai aptaukošanās nelabvēlīgā ietekme ir nozīmīga, atgūšanas potenciāls pastāv.

Kas jau ir zināms par šo tēmu

  • Pacientiem ar aptaukošanos pazeminās dopamīna receptoru ekspresija un funkcija
  • Hroniska augsta tauku satura diēta izraisa ar dopamīnu saistīto gēnu izmaiņas un atalgojuma uzvedību
  • Dopamīna neirotransmisija tiek mainīta aptaukošanās grauzējiem.

Ko šis manuskripts papildina priekšmetā

  • Dzimumu atšķirību noteikšana CNS reakcijā uz augstu tauku saturu.
  • Dopamīnerģisko izmaiņu plastiskuma novērtēšana pēc augsta tauku satura diēta.
  • Dinamisko DNS metilēšanas izmaiņu noteikšana, reaģējot uz augstu tauku saturu

Pateicības

Šo darbu atbalstīja šādas stipendijas: MH087978 (TMR), MH86599 (IL) un T32 GM008076 (JLC).

Zemsvītras piezīmes

 

Interešu konflikta paziņojums

Autoriem nav konfliktu, lai atklātu.

 

Atsauces

1. Swinburn B, Sacks G, Ravussin E. Paaugstināta pārtikas energoapgāde ir vairāk nekā pietiekama, lai izskaidrotu ASV aptaukošanās epidēmiju. Am J Clin Nutr. 2009: 90: 1453 – 1456. [PubMed]
2. Fibiger HC, Phillips AG. Mezokortikolimbiskās dopamīna sistēmas un atlīdzība. Ann NY Acad Sci. 1988: 537: 206 – 215. [PubMed]
3. Hernandez Luis, Hoebel Bartley G. Pārtikas atalgojums un kokains palielina ekstracelulāro dopamīnu kodolā Accumbens, ko mēra ar mikrodialīzi. Dzīvības zinātnes. 1988, 42 (18): 1705 – 1712. [PubMed]
4. Sahr Allison E, Sindelar Dana K, Alexander-Chacko Jesline T, Eastwood Brian J, Mitch Charles H, Statnick Michael A. Mezolimbisko dopamīna neironu aktivizēšanu romāna un ikdienas ierobežotas piekļuves laikā garšīgam ēdienam bloķē opioīdu antagonists LY255582. American Journal of Physiology - Regulatīvā, integratīvā un salīdzinošā fizioloģija. 2008. gada 1. augusts; 295 (2): R463 – R471. [PubMed]
5. Stice E, Spoor S, Bohon C, Small DM. Saistība starp aptaukošanos un neskaidru striatālu reakciju uz pārtiku tiek regulēta ar TaqIA A1 alēli. Zinātne. 2008: 322: 449 – 452. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
6. Noble EP, Blum K, Ritchie T, Montgomery A, Sheridan PJ. Delēlija asociācija2 dopamīna receptoru gēns ar receptoru saistošām pazīmēm alkoholismā. Arch Gen Psychiatr. 1991: 48: 648 – 654. [PubMed]
7. Chen PS, Yang YK, Yeh TL, Lee IH, Yao WJ, Chiu NT, et al. Korelācija starp ķermeņa masas indeksu un striatāla dopamīna transporteru pieejamību veseliem brīvprātīgajiem - SPECT pētījums. Neuroimage. 2008, 40 (1): 275 – 279. [PubMed]
8. Nepieciešams AC, Ahmadi KR, Spector TD, Goldstein DB. Aptaukošanās ir saistīta ar ģenētiskiem variantiem, kas maina dopamīna pieejamību. Cilvēka ģenētikas Annals. 2006 maijs, 70 (Pt 3): 293 – 303. [PubMed]
9. Geiger BM, Frank LE, Caldera-siu AD, Stiles L, Pothos EN. Centrālā dopamīna trūkums vairākos aptaukošanās modeļos. Apetīte. 2007, 49 (1): 293.
10. Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, Pothos EN. Mesolimbiskā dopamīna neirotransmisijas trūkumi žurku uztura aptaukošanās gadījumā. Neirozinātne. 2009 Apr 10; 159 (4): 1193 – 119. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
11. Cone JJ, Robbins HA, Roitman JD, Roitman MF. Augsta tauku satura uztura lietošana ietekmē fāzisko dopamīna izdalīšanos un atkārtotu uzņemšanu kodolā. Apetīte. 2010 Jun; 54 (3): 640.
12. Vucetic Zivjena, Carlin Jesselea, Totoki Kathy, Reyes Teresa M. Dopamīna sistēmas epigenetiskā disregulācija uztura izraisītā aptaukošanās gadījumā. Neiroķīmijas žurnāls. 2012 Jan 5; [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
13. Alsiö J, Olszewski PK, Norbäck AH, Gunnarsson ZEA, Levine AS, Pickering C, Schiöth HB. Dopamīna D1 receptoru gēnu ekspresijas pazemināšanās kodolā Accumbens Ilgstoša ekspozīcija ar garšīgu pārtiku un atšķiras atkarībā no uztura izraisīta aptaukošanās fenotipu žurkām. Neirozinātne. 2010 Dec 15; 171 (3): 779 – 787. [PubMed]
14. Johnson Paul M, Kenny Paul J. Dopamīns D2 Receptori atkarības līdzīgās atlīdzības disfunkcijās un kompulsīvās ēdināšanas aptaukošanās žurkas. Nature Neuroscience. 2010 maijs, 13 (5): 635 – 641. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
15. Huang Xu-Feng, Yu Yinghua, Zavitsanou Katerina, Han Mei, Storlien Len. Dopamīna D2 un D4 receptoru un tirozīna hidroksilāzes mRNS diferenciāla ekspresija pelēm, kas ir pakļautas vai rezistenti pret hronisku, augstu tauku diētu izraisītu aptaukošanos. Molecular Brain Research. 2005 Apr 27; 135 (1 – 2): 150 – 161. [PubMed]
16. Teegarden SL, Scott AN, Bale TL. Agrīna dzīves pakāpe ar augstu tauku diētu veicina ilgtermiņa izmaiņas uztura preferencēs un centrālajā atalgojuma signalizācijā. Neirozinātne. 2009 septembris 15, 162 (4): 924 – 932. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
17. Bouret SG. Agrīnās hormonālās un uztura pieredzes nozīme barošanas uzvedības veidošanā un hipotalāmajā attīstībā. Uztura žurnāls. 2010 Jan 1; [PubMed]
18. Vucetic Z, Kimmel J, Totoki K, Hollenbeck E, Reyes TM. Mātes augstā tauku diēta pazemina metilēšanu un dopamīna un opioīdu saistīto gēnu izpausmi. Endokrinoloģija. 2010 Oct; 151 (10): 0000 – 0000. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
19. Reyes Teresa M, Walker John R, DeCino Casey, Hogenesch John B, Sawchenko Paul E. Kategoriski atšķirīgs akūtas stressors Izvairīties no atšķirīgiem transkripcijas profiliem hipotalāma paraventrikulārajā kodolā. Neiroloģijas žurnāls: Neiroloģijas biedrības Oficiālais Vēstnesis. 2003 Jul 2; 23 (13): 5607 – 5616. [PubMed]
20. Cleck Jessica N, Ecke Laurel E, Blendy Julie A. Endokrīnās un gēnu ekspresijas izmaiņas pēc piespiedu peldēšanas stresa iedarbības, izmantojot kokainu atturību pelēs. Psihofarmakoloģija. 2008 novembris, 201 (1): 15 – 28. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
21. Pfaffl MW. Jauns matemātiskais modelis relatīvā kvantitatīvai noteikšanai reālā laikā rt-pcr. Nucleic Acids Res. 2001: 20: e45. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
22. Mayorga AJ, Dalvi A, Lappuse ME, Zimov-Levinson S, Hen R, Lucki I. Antidepresantu līdzīga uzvedība 5-hidroksitriptamīna (1A) un 5-hidroksitriptamīna (1B) receptoru mutantu pelēm. J Pharmacol Exp Ther. 2001: 298: 1101 – 110. [PubMed]
23. Vucetic Z, Kimmel J, Reyes TM. Hronisks augstvērtīgs uzturs izraisa μ-opioīdu receptoru pēcdzemdību epigenetisko regulēšanu smadzenēs. Neiropsihofarmakoloģija. 2011 doi: 10.1038 / npp.2011.4. iepriekšēja tiešsaistes publikācija 16 February 2011. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
24. Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschöp MH, Lipton JW, Clegg DJ, et al. Paaugstināts uztura tauku līmenis mazina psihostimulējošo atalgojumu un mesolimbisko dopamīna apgrozījumu žurkām. Behav Neurosci. 2008; 122 (6) [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
25. de Araujo Ivan E, Oliveira-Maia Albino J, Sotnikova Tatyana D, Gainetdinov Raul R, Caron Marc G, Nicolelis Miguel AL, Simon Sidney A. Pārtikas atlīdzība garšas receptora signālu neesamības gadījumā. Neirons. 2008 Mar 27; 57 (6): 930 – 941. [PubMed]
26. Beelers Jeffs, McCutcheon James E, Cao Zhen FH, Murakami Mari, Aleksandrs Erin, Roitman Mitchell F, Zhuang Xiaoxi. Garšas atdalīšana no uztura nespēj uzturēt pārtikas stiprināšanas īpašības. Eiropas Neiroloģijas žurnāls. 2012 Aug; 36 (4): 2533 – 2546. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
27. Dus Monica, Min SooHong, Keene Alex C, Lee Ga Young, Suh Greg SB. Garša neatkarīga cukura satura noteikšana Drosophilā. Amerikas Savienoto Valstu Zinātņu akadēmijas darbi. 2011 Jul 12; 108: 11644 – 11649. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
28. Wang Gene-Jack, Volkow Nora D, Logan Jean, Pappas Naoml R, Wong Christopher T, Zhu Wel, Netusll Noelwah, Fowler Joanna S. Smadzeņu dopamīns un aptaukošanās. Lancet. 2001, 357 (9253): 354 – 357. [PubMed]
29. Huang XF, Zavitsanou K, Huang X, Yu Y, Wang H, Chen F, et al. Dopamīna transporteris un D2 receptoru saistīšanās blīvums pelēm, kuras ir pakļautas vai izturīgas pret hronisku augstu tauku diētu izraisītu aptaukošanos. Behav Brain Res. 2006, 175 (2): 415 – 419. [PubMed]
30. Fortuna Jeffrey L. Aptaukošanās epidēmija un pārtikas atkarība: klīniskās līdzības ar narkotiku atkarību. Psihoaktīvo zāļu žurnāls. 2012 Mar; 44 (1): 56 – 63. [PubMed]
31. Koob George F, Moal Michel Le. Atkarība un smadzeņu pretvīrusu sistēma. Psiholoģijas ikgadējais pārskats. 2008: 59: 29 – 53. [PubMed]
32. Speed ​​Nicole, Saunders Christine, Davis Adeola R, Anthony Owens W, Matthies Heinrich JG, Saadat Sanaz, Kennedy Jack P, et al. Striatal Akt Signaling traucē dopamīna homeostāzi un palielina barošanu. PLoS ONE. 2011 septembris 28, 6 (9) doi: 10.1371 / journal.pone.0025169. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
33. Sharma S, Fulton S. Diēta izraisīta aptaukošanās veicina depresīvo uzvedību, kas saistīta ar neironu adaptāciju smadzeņu atlīdzības shēmā. Starptautiskais aptaukošanās žurnāls 2005. 2012 Apr 17; [PubMed]
34. Steele Kimberley E, Prokopowicz Gregory P, Schweitzer Michael A, Magunsuon Thomas H, Lidor Anne O, Kuwabawa Hiroto, Kumar Anil, Brasic James, Wong Dean F. Centrālās dopamīna receptoru izmaiņas pirms un pēc kuņģa apvedceļa operācijas. Aptaukošanās ķirurģija. 2009 Okt 29; 20 (3): 369 – 374. [PubMed]
35. Phelan Suzanne, Wing Rena R, Loria Catherine M, Kim Yongin, Lewis Cora E. Svara zuduma uzturēšanas izplatība un prognozētāji Biracial kohortā: koronāro artēriju riska attīstības rezultāti jauniem pieaugušajiem. American Journal of Preventive Medicine. 2010 decembris, 39 (6): 546 – 554. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
36. Lauks AE, Wing RR, Manson JE, Spiegelman DL, Willett WC. Liela svara zuduma saistība ar ilgstošu svara maiņu starp jauniešiem un viduslaiku ASV sievietēm. Starptautiskais aptaukošanās un saistīto metabolisko traucējumu žurnāls: Starptautiskās aptaukošanās izpētes asociācijas žurnāls. 2001 Aug; 25 (8): 1113 – 1121. [PubMed]
37. Morissette M, Di Paolo T. Sekss un estētiskā cikla variācijas žurku striatāla dopamīna uzņemšanai. Neuroendokrinoloģija. 1993 Jul; 58 (1): 16 – 22. [PubMed]
38. Bhatt Sandeep D, Dluzen Dean E. Dopamīna transportiera funkcijas atšķirības starp vīriešu un sieviešu CD-1 pelēm. Smadzeņu izpēte. 2005 Feb 28; 1035 (2): 188 – 195. doi: 10.1016 / j.brainres.2004.12.013. [PubMed] [Cross Ref]
39. Ollikainen Miina, Smith Katherine R, Joo Eric Ji-Hoon, Hong Kiat Ng, Andronikos Roberta, Novakovičs Boriss uc Jaundzimušo dvīņu audu DNS metilācijas analīze atklāj gan ģenētiskās, gan intrauterīnās sastāvdaļas cilvēka neonatālās epigenomas variācijai. Cilvēka molekulārā ģenētika. 2010 Nov 1; 19 (21): 4176 – 4188. [PubMed]
40. Tompkins Joshua D, Hall Christine, Chen Vincent Chang-yi, Li Arthur Xuejun, Wu Xiwei, Hsu David, et al. Epigenetiskā stabilitāte, pielāgošanās spēja un atgriezeniskums cilvēka embriju cilmes šūnās. Amerikas Savienoto Valstu Zinātņu akadēmijas darbi. 2012 Jul 31; 109 (31): 12544 – 12549. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]