KOMENTAR: Menjelaskan perbezaan di antara induksi deltafosb induksi dan induksi deltafosb yang menekankan nukleus accumbens
Biol Psikiatri. 2012 Jan 1; 71 (1): 44-50. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.08.011. Epub 2011 Sep 29.
Muschamp JW, Nemeth CL, Robison AJ, Nestler EJ, Carlezon WA Jr.
Source
Jabatan Psikiatri, Sekolah Perubatan Harvard, Hospital McLean, 115 Mill Street, Belmont, MA 02478, Amerika Syarikat.
Abstrak
Latar Belakang
Ekspresi tinggi faktor transkripsi ΔFosB mengiringi pendedahan berulang kepada ubat penyalahgunaan, terutama di kawasan otak yang berkaitan dengan ganjaran dan motivasi (misalnya, nukleus accumbens [NAc]). Kesan berterusan dari ΔFosB pada gen sasaran dapat memainkan peranan penting dalam pengembangan dan pernyataan penyesuaian tingkah laku yang mencirikan ketagihan. Kajian ini mengkaji bagaimana ΔFosB mempengaruhi daya tindak balas sistem ganjaran otak untuk memberi ganjaran dan ubat aversive.
Kaedah
Kami menggunakan paradigma rangsangan diri intrakranial (ICSS) untuk menilai kesan kokain dalam tikus transgenik dengan overexpression yang terdakwa dari ΔFosB di kawasan-kawasan yang striatal (termasuk NAc dan striatum dorsal). Tikus yang diimplan dengan elektrod stimulasi hipotesis sisi dilatih menggunakan prosedur 'frekuensi laju' untuk ICSS untuk menentukan frekuensi di mana rangsangan menjadi ganjaran (ambang).
Hasil
Analisis kesan dosis kesan kokain menunjukkan bahawa tikus yang lebih tinggi menunjukkan ΔFosB menunjukkan peningkatan kepekaan terhadap kesan (pemberhentian rendah) kesan dadah, berbanding dengan kawalan sampah. Menariknya, tikus yang melampaui ekspresi ΔFosB juga kurang sensitif terhadap kesan pro-depresif (ambang-peningkatan) U50488, seorang agonis kappa-opioid yang dikenali untuk mempengaruhi kesan dysphoria dan tekanan seperti tikus.
kesimpulan
Data-data ini mencadangkan bahawa induksi ΔFosB di kawasan-kawasan striatal mempunyai dua kesan tingkah laku yang penting-peningkatan sensitiviti kepada ganjaran dadah dan kepekaan yang dikurangkan kepada keengganan-menghasilkan fenotip kompleks yang menunjukkan tanda-tanda kerentanan terhadap ketagihan serta daya tahan terhadap stres.
Kata kunci: faktor transkripsi, nukleus accumbens, ganjaran stimulasi otak, ketagihan, ketahanan, tekanan, model, tetikus
PENGENALAN
Pendedahan kepada dadah penyalahgunaan mendorong ekspresi fos faktor transkripsi keluarga di neuron nukleus accumbens (NAc; 1), struktur yang terlibat dalam pencarian dadah dan tingkah laku motivasi lain2-5). Walaupun kebanyakan protein Fos-keluarga dinyatakan secara transiently selepas pendedahan dadah dan kesan ini dilemahkan dengan dos kronik, ΔFosB, varian sambatan fosB gen, tahan terhadap degradasi dan berkumpul dengan pendedahan dadah berulang (6, 7). Terdapat bukti yang ketara bahawa ketinggian berterusan dalam ekspresi ΔFosB dalam dynorphin / substance P-positif neuron berduri sederhana NAc adalah neuroadaptation yang membawa kepada peningkatan kepekaan terhadap ubat-ubatan penyalahgunaan dan kelemahan untuk membangunkan ciri-ciri kelakuan kecanduan (8, 9). Sesungguhnya kokain menetapkan pilihan tempat yang dikondisi pada dos yang lebih rendah dalam tikus transgenik dengan overexpression spesifik sel khusus yang boleh diguna pakai dalam ΔFosB di neuron ini daripada dalam tikus kawalan10). Tambahan pula, tikus ΔFosB-overexpressing memperoleh pengambilan diri kokain secara intravena pada dos yang lebih rendah dan membelanjakan usaha yang lebih besar (iaitu menunjukkan 'titik putus' yang lebih tinggi) untuk pengambilan kokain dalam jadual nisbah progresif tetulang (11). Bersama-sama, data-data ini menunjukkan bahawa ΔFosB yang tinggi di NAc meningkatkan kepekaan terhadap kesan ganjaran kokain.
Beberapa bentuk tekanan kronik, termasuk tekanan kekangan fizikal yang berulang atau tekanan kekalahan sosial, juga mendorong ΔFosB di NAc dan beberapa kawasan otak lain (12-14). Induksi sedemikian dilihat secara kasar sama ada dalam dynorphin / substance P- dan enkephalin-mengekspresikan neuron berduri sederhana. Oleh kerana paras ΔFosB yang lebih tinggi dalam NAc juga meningkatkan kepekaan terhadap ganjaran semula jadi (15-17), data-data ini mungkin mencerminkan tindak balas pampasan yang berpotensi mengimbangi beberapa kesan (stress) yang berisiko stres kronik. Kemungkinan ini disokong oleh eksperimen di mana tikus liar liar yang dikenakan tekanan kekalahan sosial kronik menunjukkan korelasi negatif yang kuat antara paras Ø FoB dalam NAc dan tahap yang menunjukkan tikus tindak balas tindak balas terhadap tekanan. Data-data ini dilengkapi dengan eksperimen di mana garis tikus ΔFosB-overexpressing yang sama yang menunjukkan respons yang tinggi terhadap kokain juga menunjukkan kurang kerentanan terhadap tekanan kekalahan sosial kronik (14). Oleh itu, ekspresi ΔFosB yang dipertingkatkan dalam NAc nampaknya menimbulkan ketahanan terhadap tekanan ('daya tahan').
Terdapat bukti yang terkumpul bahawa sistem reseptor otak kappa-opioid (KOR) memainkan peranan penting dalam aspek motivasi tekanan. Pentadbiran agonis KOR menghasilkan dysphoria pada manusia (18, 19) dan pelbagai kesan seperti depresif dalam tikus (20-24). Yang penting, agonis KOR boleh meniru beberapa aspek tekanan (25-28). Satu mekanisme yang mungkin berlaku adalah melalui interaksi antara faktor pembebasan keptik kortikotropin (CRF) dan dynorphin, ligan endogen untuk KOR (29): kesan rangsangan tekanan timbul disebabkan oleh rangsangan reseptor yang disokong reseptor CRF pelepasan dynorphin dan rangsangan berikutnya KORs (30, 31). Untuk menyokong mekanisme ini, antagonis KOR menyekat kesan tekanan (20, 25, 32-35). Secara kolektif, penemuan ini mencadangkan bahawa kajian-kajian agonis KOR dapat memberi gambaran yang mendalam tentang mekanisme otak tekanan respons terhadap tikus.
Kajian-kajian sekarang telah direka untuk menilai dengan lebih teliti bagaimana ekspresi ΔFosB yang tinggi mempengaruhi sensitiviti untuk memberi ganjaran dan rangsangan aversive dengan menggunakan ujian tingkah laku tunggal yang sangat sensitif terhadap kedua-dua: paradigma rangsangan diri intrakranial (ICSS). Dalam ujian ini, tikus sendiri mentadbir merangsang rangsangan elektrik melalui elektrod yang ditanamkan di hipothalamus lateral. Dadah penyalahgunaan mengurangkan jumlah rangsangan yang mengekalkan tindak balas ("ambang"), sedangkan rawatan yang menghasilkan anhedonia atau dysphoria pada orang (contohnya pengambilan dadah, agen antipsikotik, agen anti-manik, reseptor kappa-opioid [KOR] agonis, tekanan) Meningkatkan ambang ICSS, menunjukkan bahawa jumlah rangsangan yang sebelum ini dapat menanggapi respons tidak lagi berkesan sebagai hasil rawatan (untuk semakan, lihat 36). Oleh itu, ICSS sensitif terhadap manipulasi yang meningkatkan ganjaran, mengurangkan ganjaran, atau meningkatkan keengganan. Penggunaan satu ujian tingkah laku tunggal untuk menilai sensitiviti untuk memberi ganjaran dan rangsangan aversive sangat berfaedah dalam tikus transgenik kerana ia membolehkan satu set ujian dan parameter ujian standard, mengurangkan variabiliti antara ujian dalam keperluan tindak balas dan sejarah rawatan yang dapat merumitkan tafsiran data. Kami mendapati bahawa tikus dengan ekspresi tinggi ΔFosB dalam dynorphin / substance P-mengekspresikan neuron berduri sederhana NAc dan striatum punggung telah meningkatkan kepekaan terhadap kesan ganjaran kokain yang diiringi oleh kepekaan yang menurun terhadap kesan tekanan seperti (aversive) dari agonis KOR U50488, menghasilkan fenotip yang menunjukkan kehebatan ketinggalan kepada ketagihan tetapi meningkatkan daya tahan terhadap stres.
BAHAN DAN KAEDAH
haiwan
Sejumlah tikus jantan yang dicetuskan oleh 23, yang menyatakan ΔFosB (garisan 11A) dihasilkan dengan menggunakan sistem ekspresi gen yang dikawal oleh tetracycline (37). Tikus jantan yang membawa NSE-tTA dan TetOP-ΔFosB transgenes dinaikkan ke atas air yang mengandungi doxycycline (DOX, 100 μg / ml, Sigma, St Louis MO). Eksperimen bermula lapan minggu selepas mengeluarkan tikus 13 dari DOX untuk membenarkan peningkatan 7-lipat yang stabil dalam ekspresi transgene ΔFosB-mediated TetOp dalam neuron positif dynorphin striatum (ΔFosB-ON; lihat 10, 37, 38). Sebelas tikus kekal di DOX untuk tempoh eksperimen dan membentuk kumpulan kawalan (Kawalan). Tikus-tikus itu adalah littermates yang telah backcrossed ke latar belakang C57BL / 6 untuk sekurang-kurangnya generasi 12, dan ditempatkan secara berasingan dengan iklan libitum akses kepada makanan dan air pada kitaran 12 h cahaya (7: 00 AM hingga 7: 00 PM). Di samping itu, tikus 9 yang membawa transgene NSE-tTA hanya digunakan sebagai kumpulan kawalan kedua; mereka dibesarkan di DOX, kemudian dibuang dari DOX untuk ~ 8 minggu sebelum percubaan lanjut (OFF-DOX). Prosedur dijalankan mengikut Institut Kesihatan Kebangsaan 1996 (NIH) Panduan untuk Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Makmal dan dengan kelulusan Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Institinstiti di Hospital McLean.
Imunohistokimia
Overexpression transgene telah disahkan oleh immunuohistochemistry untuk FosB (Rajah 1). Tikus Bitransgenic telah dikorbankan dan diperap dengan traspardial dengan garam buffer fosfat 0.1 M dan paraformaldehyde 4%. Otak kemudian dibuang, disokong, dan dikekalkan seperti yang dijelaskan sebelum ini (14, 38). Tisu dihiris pada satah coronal ke bahagian 30 mm, dan bahagian-bahagian ditindan menggunakan antibodi FosB (SC-48, Santa Cruz Bioteknologi, Santa Cruz, CA). Pewarnaan Diaminobenzidine digunakan untuk membayangkan sel positif FosB. Imej diperoleh dengan menggunakan mikroskop kontras Zeiss Imager 1 dan secara digital ditangkap menggunakan perisian Axiovison (Carl Zeiss USA, Peabody, MA).
Mikrograf perwakilan dari tikus bitransgenic menunjukkan overexpression daripada ΔFosB. Pelabelan nuklear untuk FosB adalah lebih rendah dalam tikus kawalan yang dikekalkan pada doxycycline (panel kiri) daripada yang tidak diberi doxycycline (kanan). ac = commisure anterior; NAc ...
ICSS
Tikus (25-28 g) dibiak dengan suntikan intraperitoneal (IP) daripada campuran ketamine-xylazine (80-10 mg / kg; Sigma) dan ditanam dengan elektrod yang merangsang monopolar diarahkan secara stereotactically ke bundle forebrain medial (MFB; dari bregma, AP: -1.9, ML: -0.8, DV: -4.8 di bawah dura, menurut atlas Paxinos dan Franklin, 2nd ed., 2001). Selepas satu minggu pemulihan, tikus dilatih untuk bertindak balas untuk rangsangan otak semasa sesi seharian sehari (39). Arus perangsang diselaraskan ke nilai paling rendah yang akan menyokong tindak balas yang stabil (60 ± 6 / minit min) untuk 3 hari berturut-turut. Nilai ini dianggap sebagai "arus minimum" dan pendekatan ini telah digunakan sebelum ini untuk mengenal pasti perbezaan mutasi yang disebabkan oleh kepekaan basal terhadap kesan merangsang rangsangan (40). Selepas arus minimum diukur untuk setiap tetikus, ia tetap berterusan. Tikus kemudiannya dibenarkan untuk bertindak balas terhadap salah satu frekuensi stimulasi 15 yang dibentangkan dalam urutan menurun (log 0.0510 langkah unit) selama lima belas ujian 50 sec. Ujian didahului oleh perdana kedua 5 di mana rangsangan bukan kontingen diberikan, diikuti dengan masa 5 sec yang tidak dapat dipertimbangkan. Setiap set ujian 15 (atau "lulus") telah dibentangkan, dan bertindak balas semasa setiap percubaan 50 sec yang direkodkan. Sepanjang latihan kursus 3-4, julat frekuensi yang digunakan telah diselaraskan supaya tikus bertindak balas melalui frekuensi 6-7 tertinggi yang stabil melalui pas 6 (90 min latihan). Kekerapan yang paling rendah yang menyokong tindak balas (ambang ICSS, atau 'theta-sifar') dikira menggunakan garis ketiadaan terendah dalam analisis terbaik (36, 41). Apabila haiwan diperhatikan mempunyai ambang ambang ICSS yang stabil (± 10% lebih dari 5 hari berturut-turut), kesan rawatan ubat pada ambang ICSS diukur.
Ujian dadah
Cocaine HCl dan (±) -trans-U50488 methanesulfanoate (Sigma) dibubarkan dalam salur 0.9% dan disuntik IP dalam jumlah 10 ml / kg. Tikus bertindak balas melalui pas 3 sejurus sebelum rawatan dan ambang dadah dari lintasan kedua dan ketiga purata untuk memperoleh parameter paras (paras ambang dan maksimum tindak balas). Setiap tetikus kemudian menerima suntikan dadah atau kenderaan dan diuji untuk min 15 serta-merta mengikuti suntikan. Tikus Bitransgenic diberi dos kokain (0.625-10 mg / kg) atau U50488 (0.03-5.5 mg / kg) dalam urutan menaik. Tikus OFF-DOX hanya menerima kokain sahaja. Setiap rawatan dadah mengikuti ujian dengan kenderaan pada hari sebelumnya untuk memastikan bahawa tetikus telah pulih dari rawatan sebelum dan untuk mengurangkan kesan dadah yang terkondisi. Selang dua minggu diberikan antara kokain dan U50488 eksperimen. Seperti di atas, haiwan yang tidak menunjukkan respon asas yang stabil dikecualikan. Perbezaan kumpulan dianalisis menggunakan t-test (ukuran semasa minimum), ANOVA (kesan rawatan ubat pada ambang dan kadar maksimum); kesan yang ketara dianalisis dengan menggunakan post hoc ujian (ujian Dunnett). Dalam setiap kes, perbandingan dibuat berdasarkan hipotesis nol yang bermaksud dalam keadaan yang dirawat oleh dadah tidak akan berbeza dari min dalam keadaan yang dirawat kenderaan. Kerana kokain diketahui menurunkan ambang ganjaran di ICSS (42), perbandingan kepada kenderaan dibuat berdasarkan hipotesis bahawa kokain akan menurunkan ambang ganjaran. Sebaliknya, kerana kappa agonis telah ditunjukkan untuk meningkatkan nilai ganjaran dalam ICSS (23), perbandingan telah dibuat kepada kenderaan berdasarkan hipotesis tersebut U50488 juga akan meningkatkan nilai ganjaran. Peletakan elektrod telah disahkan oleh histologi (Rajah 2).
Mikrograph perwakilan menggambarkan penempatan elektrod merangsang ICSS (anak panah). LHA = kawasan hypothalamic lateral; fx = fornix. Bar skala = 250 μm.
KEPUTUSAN
Overexpression ΔFosB dan langkah-langkah semasa minimum
Semua tikus dengan cepat memperolehi perilaku ICSS dan bertindak balas pada kadar yang tinggi untuk rangsangan MFB. Tiada perbezaan kumpulan dalam ambang minimum antara tikus yang menggambarkan ΔFosB di striatum dan NAc (ΔFosB-ON) dan yang dikekalkan di DOX (Kawalan; t(22)= 0.26, tidak penting [ns]) (Rajah 3) Ini menunjukkan bahawa manipulasi genetik itu sendiri tidak mempunyai kesan ke atas kepekaan terhadap kesan ganjaran stimulus hipotalamus di bawah keadaan asas.
Penindasan overexpression ΔFosB tidak memberi kesan kepada arus minimum yang diperlukan untuk menyokong ICSS. Scatterplot menunjukkan purata arus minimum (bar) yang diperlukan untuk menyokong perilaku ICSS yang teguh (respons 60 ± 6 / min) dalam tikus individu (bulatan yang dipenuhi) ...
Overexpression ΔFosB dan kesan kokain
Cocaine mengurangkan ambang ambang ICSS dalam semua kumpulan tikus, menyebabkan pergeseran ke kiri pada fungsi frekuensi laju ICSS (Rajah 4A, B). ΔFosB-ON tikus lebih sensitif terhadap kesan ganjaran kokain: langkah 2 berulang-ulang ANOVA pada ambang ambang ICSS mendedahkan kesan utama dos kokain (F(5,65)= 11.20, P<0.01), dan rawatan DOX (F(1,13)= 6.23, P<0.05), tetapi tiada dos × interaksi DOX (F(5,65)= 0.87, ns). Perbezaan pra-dirancang (ujian Dunnett) dengan rawatan kenderaan salin dalam setiap kumpulan mendedahkan bahawa tikus ΔFosB-ON (n= 8) menunjukkan pengurangan ketara dalam ambang ICSS pada dos ≥1.25 mg / kg, sedangkan dos 10 mg / kg diperlukan untuk menghasilkan kesan yang ketara dalam tikus Kawalan (ON-DOX)Rajah 4C). Langkah 2 yang diulang berulang ANOVA pada kadar tindak balas maksimum menunjukkan kesan utama yang signifikan terhadap dos kokain (F(5,65)= 3.89, P<0.05). Kontras yang telah dirancang sebelumnya dengan rawatan kenderaan garam dalam setiap kumpulan menunjukkan bahawa kokain menghasilkan kesan peningkatan kadar pada dos ≥5 mg / kg pada tikus ΔFosB-ON, tanpa kesan pada dos apa pun pada tikus Control (Rajah 4D). Tiada kesan utama rawatan DOX (F(1,13)= 1.56, ns), dan tidak ada interaksi × DOX dos (F(5,65)= 0.43, ns). Rawatan DOX sahaja tidak memberi kesan terhadap tindak balas dos kokain yang diuji (10 mg / kg) kerana Kumpulan Kawalan dan OFF-DOX tidak menunjukkan perbezaan dalam ambang ganjaranRajah 4C, inset; t(14)= 0.27, ns), atau kadar maksimum balasan (Rajah 4D, inset; t(14)= 0.34, ns).
Penindasan overexpression ΔFosB meningkatkan kepekaan terhadap kesan ganjaran kokain. (A, B) Fungsi frekuensi kadar untuk tikus perwakilan individu dalam setiap kumpulan menunjukkan pergeseran ke kiri dalam kedua-dua kumpulan yang lebih besar dalam ΔFosB-ON ...
Overexpression ΔFosB dan U50488 kesan
Agonis KOR U50488 peningkatan nilai ambang ICSS dalam tikus kawalan, menyebabkan pergeseran ke arah yang betul dalam fungsi frekuensi kadar kumpulan ini, sedangkan tikus ΔFosB-ON tidak sensitif terhadap ubat (Rajah 5A, B). ANOVA langkah-langkah berulang 2 di ambang min ICSS menunjukkan kesan utama dos ubat (F(6,60)= 3.45, P<0.01), rawatan DOX (F(1,10)= 18.73, P<0.01), dan dos yang signifikan × interaksi DOX (F(6,60)= 2.95, P Post hoc Ujian (ujian Dunnett) menunjukkan bahawa, berbanding dengan kenderaan saline, U50488 (5.5 mg / kg) menghasilkan ketinggian ambang ICSS yang ketara dalam tikus Kawalan (n= 4) tetapi tidak mempunyai kesan pada tikus ΔFosB-ON (Rajah 5C). Di samping itu, terdapat perbezaan yang signifikan antara kumpulan pada dos ini. ANOVA langkah-langkah berulang 2 pada kadar tindak balas maksimum tidak menunjukkan kesan utama dos (F(6,60)= 1.95, ns) atau rawatan DOX (F(1,10)= 4.66, ns [P= 0.06]), dan tidak ada interaksi DOx × dos (F(6,60)= 1.31, ns) (Rajah 5D). Data ini menunjukkan bahawa U50488 tidak memberi kesan yang signifikan terhadap tindak balas di bawah syarat-syarat yang diuji.
Teropong ΔFosB overexpression blok anhedonic effects of U50488. (A, B) Fungsi frekuensi kadar untuk tikus perwakilan individu dalam setiap kumpulan menunjukkan ke kanan ...
PERBINCANGAN
Kami menunjukkan bahawa tikus dengan penindasan yang terdesak dari ΔFosB di NAc dan kawasan-kawasan striatal yang lain lebih sensitif terhadap kesan ganjaran kokain dan kurang sensitif terhadap kesan prodepressive dari agonis KOR U50488 berbanding tikus normal.
Data-data ini konsisten dengan kesusasteraan sedia ada mengenai peranan ΔFosB dalam ganjaran dan tekanan dadah, dan memanjangkannya dalam beberapa cara penting. Kerja sebelumnya dengan kesan overexpression ΔFosB terhadap ganjaran dadah yang digunakan tempat penyaman atau paradigma diri pentadbiran ubat (10, 11). Data dari eksperimen ICSS melengkapkan karya ini dengan menyediakan indeks 'real-time' pengaruh ubat pada kepekaan litar ganjaran otak. Kajian pada tikus jenis liar menunjukkan bahawa manipulasi farmakologi dapat meningkat (contohnya, kokain) atau penurunan (misalnya, U50488) kesan yang memberi kesan rangsangan MFB (24); Oleh itu, ICSS menyediakan kaedah untuk mengukur keadaan hedonik sementara haiwan berada di bawah pengaruh rawatan dadah. Oleh kerana ubat-ubatan yang dikenali sebagai ganjaran atau aversive pada manusia menghasilkan bertentangan (ambang yang lebih rendah dan lebih tinggi, masing-masing) keluaran dalam ICSS tikus, paradigma boleh lebih disisihkan memisahkan negeri-negeri ini daripada ubat-ubatan sendiri yang boleh mengurus dadah, di mana kadar pentadbiran diri yang rendah dapat menunjukkan sama ada kenyang atau kemunculan kesan aversive (36). Selain itu, ICSS menghindari potensi mengelirukan bahawa rawatan dadah mungkin melibatkan perkembangan dan ekspresi respon yang dipelajari dalam paradigma pengkondisian klasik yang sering digunakan untuk mengkaji ganjaran dadah (iaitu, penyaman tempat).
Data ambang ICSS kami dengan jelas menunjukkan bahawa induksi ΔFosB meningkatkan kesan ganjaran kokain, kerana ubat menghasilkan pengurangan ketara dalam ambang ICSS pada dosis yang lebih rendah daripada kawalan terkawal di mana overexpression tidak diinduksi. Hakikat bahawa tikus ΔFosB-ON juga menunjukkan kenaikan kadar tindak balas maksimum pada dos kokain yang tinggi menimbulkan kemungkinan bahawa kesan overexpression ΔFosB pada ambang ICSS adalah artifak aktiviti lokomotif tinggi atau keupayaan tindak balas (43). Ini tidak mungkin kerana beberapa sebab. Pertama, kaedah analisis kami untuk mengukur theta-0 menggunakan garis sekurang-kurangnya paling sesuai untuk menganggarkan frekuensi di mana rangsangan menjadi ganjaran. Kerana algoritma regresi menghalang nilai yang melampau, ia amat sensitif terhadap perubahan yang disebabkan oleh rawatan dalam keupayaan tindak balas; Sebaliknya, perubahan dalam keupayaan tindak balas sahaja boleh menyebabkan pergeseran artifak dalam ambang ketika menggunakan M-50, ukuran yang sama dengan ED-50 dalam farmakologi (lihat 36, 41, 44, 45). Kedua, kenaikan kadar tindak balas maksimum di atas nilai-nilai asas adalah jelas hanya pada dos kokain tertinggi, dua kali lipat lebih tinggi daripada yang di mana ambang ICSS daripada ΔFosB-ON haiwan jauh lebih rendah daripada kawalan. Akhir sekali, jika kesan ΔFosB pada ambang ICSS adalah disebabkan oleh kesan pengaktifan bukan spesifik mutasi, tikus juga dijangka menunjukkan kepekaan yang lebih tinggi terhadap kesan rangsangan MFB itu sendiri, ditunjukkan sebagai arus minimum min yang lebih rendah untuk menyokong kadar jawapan 60 ± 6 / min, atau dengan peningkatan kadar tindak balas maksimum baseline berikut rawatan dengan kenderaan. Kami mendapati tiada bukti sama ada kesan ini. Bersama-sama, penemuan ini mencadangkan bahawa penekanan overexpression ΔFosB menyebabkan sensitiviti yang tinggi untuk kedua-dua hadiah (pada dos yang rendah) dan stimulan (pada dos yang tinggi sahaja) kesan kokain. Corak kesan yang sama telah dilaporkan sebelum ini pada tikus dengan mutasi yang menghasilkan tanda-tanda seperti mania40).
Menariknya, overexpression ΔFosB menghapuskan ambang-menaikkan, kesan pro-depresif U50488. Thenasmuch sebagai rawatan agonis KOR dapat menyerupai kesan tertentu dari stres (25-28), penemuan ini merupakan tanda daya tahan; sememangnya, overexpression Ø FosB telah dikaitkan dengan daya tahan terhadap kesan-kesan seperti tekanan kemelesetan sosial kronik terhadap keutamaan sukrosa dan interaksi sosial (14, 46).
Tekanan meningkatkan ekspresi dynorphin (47, 48), dan antagonis KOR menghasilkan kesan seperti antidepresan dan anti-tekanan seperti20, 32, 47, 49). Selain itu, komponen pengaktifan paksi hypothalamic-pituitari-adrenal yang menggabungkan stres diintegrasikan oleh dynorphin, sebagai penghindaran yang terkondisi terhadap isyarat yang berkaitan dengan tekanan berenang atau faktor pembebasan kortikotropin disekat oleh antagonis KOR atau knockout gen dynorphin (30). Tikus yang digunakan dalam eksperimen ini menunjukkan overexpression ΔFosB selektif dalam neuron dynorphin striatum. Ini seterusnya mengurangkan ungkapan dynorphin dalam neuron ini (38), kesan yang boleh dijangka dapat mengurangkan fungsi garis dasar sistem otak KOR. Selain itu, kerana pengaktifan KOR mengatasi pembebasan dopamin (DA; 22, 50), pemancar diketahui memainkan peranan penting dalam menyokong ICSS (51-53), kesan ini juga boleh menjelaskan sebahagiannya kenapa ΔFosB overexpressing tikus memperlihatkan peningkatan kepekaan terhadap ganjaran kokain. Fakta bahawa tikus-tikus ini telah melemahkan nada dynorphin bersama-sama dengan ketidakpentingaan terhadap kesan-kesan seperti prodepressive dari agonis KOR eksogen menimbulkan kemungkinan bahawa mutasi menghasilkan satu set lebih luas neuroadaptatons yang dapat mengimbangi sistem 'anti-ganjaran' di otak (54).
Tidak kira sama ada disebabkan oleh pendedahan kronik terhadap dadah penyalahgunaan atau oleh tekanan, induksi ΔFosB dan dynorphin dapat dilihat sebagai neuroadaptations yang bertentangan. ΔFosB nampak positif mempengaruhi kepekaan terhadap pelbagai ganjaran farmakologi dan semulajadi (10, 11, 15). Walau bagaimanapun, sistem dynorphin-KOR nampaknya mendorong keadaan-keadaan seperti tekanan yang melibatkan unsur-unsur anhedonia, dysphoria, dan keengganan manusia dan makmal makmal (19, 21, 35, 55).
Di bawah keadaan nonpathological, penyesuaian ini boleh mengimbangi satu sama lain, mengakibatkan tindak balas seperti homeostatik yang mengimbangi pengaruh luaran pada nada hedonik. Memandangkan bukti bahawa kegembiraan neuron sederhana yang berkilat NAc bervariasi dengan keadaan mood (14, 56, 57), ΔFosB mungkin memberi kesan perlindungan terhadap stressors yang menggalakkan tekanan dysphoria dengan mengurangkan keceriaan sel-sel ini melalui ekspresi GluR2 (10), yang menyokong pembentukan reseptor AMPA yang mengandungi GluR2 yang tidak dapat dipulihkan (disemak semula dalam 58).
Sebaliknya, agonis dynorphin atau KOR boleh merendahkan tahap DA yang menonjol yang menemani pendedahan kepada dadah penyalahgunaan (59). Ketagihan dan kemurungan pada manusia sering dikompromi dan dicetuskan oleh tekanan hidup (60-62). Sebaliknya, fenotip daripada ΔFosB overexpressing tikus adalah salah satu peningkatan dalam mencari dadah tetapi ketahanan terhadap kesan tekanan depresi. Mekanisme yang mendasari pemisahan ini tidak jelas, tetapi mungkin disebabkan corak overexpression ΔFosB yang dipaparkan oleh tikus ini. Peningkatan ΔFosB striatal dan penurunan seterusnya dalam dynorphin hanya dua daripada pelbagai penyesuaian neuro yang mengiringi pendedahan dadah dan tekanan (63, 64). Oleh itu, mereka tidak mungkin menghasilkan sepenuhnya perubahan yang menyebabkan simptom komorbid ketagihan dan kemurungan. Ia juga penting untuk menekankan bahawa kajian ini menangani kesan-kesan ΔFosB sahaja, dan dalam keadaan biasa pendedahan kepada dadah penyalahgunaan dan tekanan menyebabkan lebih banyak peningkatan sementara dalam ekspresi protein Fos keluarga lain yang tidak dikaji di sini, termasuk FosB panjang penuh (9).
Ringkasnya, kami menggunakan ICSS dalam tikus transgenik yang menekankan ΔFosB untuk menunjukkan bahawa manipulasi genetik ini meningkatkan kesan ganjaran kokain. Kami juga mendapati bahawa ini memberi tentangan kepada kesan prodepressive pengaktifan KOR oleh U50588. Kerana sistem dynorphin-KOR adalah pengantara utama kesan-kesan tekanan yang afektif, data ini konsisten dengan hipotesis bahawa ΔFosB meningkatkan kepekaan ganjaran sementara serentak mengurangkan respons terhadap tekanan. Dengan itu, meningkatkan ekspresi ΔFosB mungkin dalam beberapa keadaan menggalakkan daya tahan.
PENGHARGAAN
Kajian ini disokong oleh Institut Kebangsaan Penyalahgunaan Dadah dan Institut Kesihatan Mental Nasional (DA026250 kepada JWM, MH51399 dan DA008227 kepada EJN, dan MH063266 kepada WAC).
Nota kaki
Penafian Penerbit: Ini adalah fail PDF bagi manuskrip yang tidak diedit yang telah diterima untuk penerbitan. Sebagai perkhidmatan kepada pelanggan kami, kami menyediakan versi awal manuskrip ini. Manuskrip akan menjalani penyalinan, menaip, dan mengkaji semula bukti yang dihasilkan sebelum ia diterbitkan dalam bentuk yang boleh dihukum akhir. Harap maklum bahawa semasa kesalahan proses produksi dapat ditemukan yang dapat mempengaruhi konten, dan semua penafian hukum yang berlaku untuk pertain jurnal.
PENDEDAHAN / KONFLIK KEPENTINGAN
Sepanjang tahun 3 yang lalu, Dr. Carlezon telah menerima pampasan dari HUYA Biosciences dan Myneurolab.com. Beliau memegang beberapa paten dan aplikasi paten yang tidak berkaitan dengan kerja yang diterangkan dalam laporan ini. Tiada pegangan kewangan peribadi yang boleh dianggap sebagai konflik kepentingan. Dr. Nestler adalah seorang perunding untuk Laboratorium Penyelidikan PsychoGenics dan Merck. Dr. Muschamp, Dr. Robison, dan Cik Nemeth tidak melaporkan sebarang intipati kewangan biomedikal atau potensi konflik kepentingan.
RUJUKAN
1. Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Peraturan ekspresi gen awal segera dan AP-1 mengikat dalam nukleus tikus akrab dengan kokain kronik. Proc Natl Acad Sci US A. 1992; 89: 5764-5768. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
2. Mogenson GJ, Jones DL, Yim CY. Dari motivasi ke tindakan: antara muka fungsi antara sistem limbik dan sistem motor. Prog Neurobiol. 1980; 14: 69-97. [PubMed]
3. Carlezon WA, Jr, Thomas MJ. Substrat ganjaran biologi dan keengganan: nukleus mengakui hipotesis aktiviti. Neuropharmacology. 2009; 56 Suppl 1: 122-132. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
4. Pennartz CM, Groenewegen HJ, Lopes da Silva FH. Nukleus dikenali sebagai kompleks konstruktiviti neuron yang berbeza secara berasingan: penggabungan data tingkah laku, elektrofisiologi dan anatomi. ProgNeurobiol. 1994; 42: 719-761. [PubMed]
5. Pierce RC, Vanderschuren LJ. Menendang tabiat: asas saraf mengenai tingkah laku ingredi dalam ketagihan kokain. Neurosci Biobehav Rev. 2010; 35: 212-219. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
6. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, et al. Induksi kompleks AP-1 yang berpanjangan terdiri daripada protein seperti Fos yang diubah dalam otak oleh kokain kronik dan rawatan kronik yang lain. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
7. Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, et al. Peraturan protein delta FosB dan FosB dengan penyitaan electroconvulsive dan rawatan kokain. Mol Pharmacol. 1995; 48: 880-889. [PubMed]
8. McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. ΔFosB: suis molekular untuk penyesuaian jangka panjang di dalam otak. Penyelidikan Otak Molekul. 2004; 132: 146-154. [PubMed]
9. Nestler EJ. Mekanisme penagihan ketagihan: peranan ΔFosB. Transaksi filosofis Royal Society B: Sains Biologi. 2008; 363: 3245-3255. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
10. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, et al. Ekspresi faktor transkripsi deltaFosB di otak mengawal kepekaan terhadap kokain. Alam. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
11. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Overprestasi jenis spesifik sel Striatal terhadap DeltaFosB meningkatkan insentif untuk kokain. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
12. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, et al. Induksi deltaFosB dalam struktur otak berkaitan ganjaran selepas tekanan kronik. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
13. Nikulina EM, Arrillaga-Romany I, Miczek KA, Hammer RP., Jr. Perubahan lama dalam struktur mesokortikolimbi selepas tekanan kekalahan sosial yang berulang pada tikus: kursus masa reseptor mu-opioid mRNA dan immunoreactivity FosB / DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272-2284. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
14. Vialou V, Robison AJ, QC LaPlant, Covington HE, Dietz DM, Ohnishi YN, et al. ΔFosB dalam rangkaian ganjaran otak mengantara daya tahan terhadap tekanan dan tindak balas antidepresan. Alam Neurosains. 2010; 13: 745-752. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
15. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, et al. Pengaruh FosB di Nucleus Accumbens pada Perilaku Terkait Semulajadi. Jurnal Neuroscience. 2008; 28: 10272-10277. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
16. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Overexpression Delta FosB dalam accumbens nukleus meningkatkan ganjaran seksual di hamster Syria wanita. Gen Brain Behav. 2009; 8: 442-449. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
17. Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, et al. DeltaFosB dalam nukleus accumbens adalah penting untuk mengukuhkan kesan ganjaran seksual. Gen Brain Behav. 2010; 9: 831-840. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
18. Pfeiffer A, Brantl V, Herz A, Emrich HM. Psychotomimesis yang dimediasi oleh reseptor kappa opiate. Sains. 1986; 233: 774-776. [PubMed]
19. Wadenberg ML. Kajian semula sifat spiradoline: agonis reseptor kappa-opioid yang kuat dan terpilih. CNS Drug Rev. 2003; 9: 187-198. [PubMed]
20. Mague SD. Kesan antidepresan-Seperti kappa-Reseptor Reseptor Oksioid dalam Ujian Berenang Paksa dalam Tikus. Jurnal Farmakologi dan Terapi Eksperimen. 2003; 305: 323-330. [PubMed]
21. Todtenkopf MS, Marcus JF, Portoghese PS, Carlezon WA., Jr. Kesan ligan reseptor kappa-opioid pada rangsangan diri intrakranial dalam tikus. Psychopharmacology (Berl) 2004; 172: 463-470. [PubMed]
22. Carlezon WA, Jr, Beguin C, DiNieri JA, Baumann MH, Richards MR, Todtenkopf MS, et al. Kesan-kesan seperti depresi dari reseptor kappa-opioid agonis salvinorin A terhadap tingkah laku dan neurokimia dalam tikus. J Pharmacol Exp Ther. 2006; 316: 440-447. [PubMed]
23. Tomasiewicz H, Todtenkopf M, Chartoff E, Cohen B, Carlezonjr W. The Kappa-Opioid Agonist U69,593 Blocks Enhancement Cocaine-Induced Reward Stimulation Brain. Psikiatri Biologi. 2008; 64: 982-988. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
24. Dinieri JA, Nemeth CL, Parsegian A, Carle T, Gurevich VV, Gurevich E, et al. Sensitiviti yang berubah-ubah untuk memberi ganjaran dan ubat aversive pada tikus dengan gangguan yang dapat dirangsang oleh unsur-unsur fungsi tindak balas unsur-unsur tindak balas CAMP di dalam nukleus accumbens. J Neurosci. 2009; 29: 1855-1859. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
25. McLaughlin JP, Marton-Popovici M, Chavkin C. Kappa opioid reseptor antagonisme dan prodynorphin gene block block stress-induced response behavior. J Neurosci. 2003; 23: 5674-5683. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
26. McLaughlin JP, Land BB, Li S, Pintar JE, Chavkin C. Pengaktifan semula reseptor kappa opioid oleh U50,488 meniru tekanan berenang yang dipaksa untuk menenangkan kekejangan tempat kokain. Neuropsychopharmacology. 2006; 31: 787-794. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
27. McLaughlin JP, Li S, Valdez J, Chavkin TA, Chavkin C. Maklum balas tingkah laku yang ditekankan oleh tekanan sosial yang ditakrifkan oleh mediasi oleh sistem kappa opioid endogen. Neuropsychopharmacology. 2006; 31: 1241-1248. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
28. Carey AN, Lyons AM, Shay CF, Dunton O, McLaughlin JP. Pengaktifan kappa opioid endogenus mengantarkan defisit yang disebabkan oleh tekanan dalam pembelajaran dan ingatan. J Neurosci. 2009; 29: 4293-4300. [PubMed]
29. Chavkin C, James IF, Goldstein A. Dynorphin adalah ligan endogen khusus dari reseptor kappa opioid. Sains. 1982; 215: 413-415. [PubMed]
30. Tanah BB, Bruchas MR, Lemos JC, Xu M, Melief EJ, Chavkin C. Komponen tekanan dysphoric dikodkan dengan pengaktifan sistem kappa-opioid dynorphin. J Neurosci. 2008; 28: 407-414. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
31. Bruchas MR, Schindler AG, Shankar H, Messinger DI, Miyatake M, Land BB, et al. Penghapusan p38α MAPK selektif dalam neuron serotonergik menghasilkan tekanan-daya tahan dalam model kemurungan dan ketagihan. Neuron. (Dalam akhbar) [Artikel percuma PMC] [PubMed]
32. Pliakas AM, Carlson RR, Neve RL, Konradi C, Nestler EJ, Carlezon WA., Jr. Tanggapan yang berubah-ubah terhadap kokain dan peningkatan imobilitas dalam ujian berenang terpaksa yang dikaitkan dengan peningkatan tekanan tindak balas unsur-unsur tindak balas CAMP di dalam nukleus accumbens. J Neurosci. 2001; 21: 7397-7403. [PubMed]
33. Beardsley PM, Howard JL, Shelton KL, Carroll FI. Kesan-kesan pembezaan antagonis reseptor novel kappa opioid, JDTic, mengenai pemulihan pengambilan kokain yang diinduksi oleh tekanan kaki kaki vs buah kokain dan kesan seperti antidepresannya pada tikus. Psychopharmacology (Berl) 2005; 183: 118-126. [PubMed]
34. Knoll AT, Meloni EG, Thomas JB, Carroll FI, Carlezon WA. Kesan Anxiolytic-Like of Antagonists Reseptor κ-Opioid dalam Model Takut Tidak Tahu dan Belajar Tikus. Jurnal Farmakologi dan Terapi Eksperimen. 2007; 323: 838-845. [PubMed]
35. Knoll AT, Carlezon WA., Jr Dynorphin, tekanan, dan kemurungan. Brain Res. 2010; 1314: 56-73. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
36. Carlezon WA, Chartoff EH. Intracranial self-stimulation (ICSS) dalam tikus untuk mengkaji neurobiologi motivasi. Protokol Alam. 2007; 2: 2987-2995. [PubMed]
37. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, et al. Haiwan transgenik dengan ekspresi gen yang disasarkan dan dijangka di dalam otak. Mol Pharmacol. 1998; 54: 495-503. [PubMed]
38. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, et al. Peranan penting untuk ΔFosB dalam nukleus akrab dalam tindakan morfin. Alam Neurosains. 2006; 9: 205-211. [PubMed]
39. Gilliss BCM, Pieper J, Carlezon W. Cocaine dan SKF-82958 merangsang ganjaran stimulasi otak di tikus Swiss-Webster. Psychopharmacology. 2002; 163: 238-248. [PubMed]
40. Roybal K, Theobold D, Graham A, DiNieri JA, Russo SJ, Krishnan V, et al. Tingkah laku seperti Mania disebabkan oleh gangguan JAM. Proc Natl Acad Sci US A. 2007; 104: 6406-6411. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
41. Miliaressis E, Rompre PP, Durivage A. Psikofisik kaedah untuk pemetaan substrat tingkah laku menggunakan elektrod yang boleh dipindahkan. Bruce Res Bull. 1982; 8: 693-701. [PubMed]
42. Bijak RA. Ubat-ubatan yang menelan dan ganjaran stimulasi otak. Annu Rev Neurosci. 1996; 19: 319-340. [PubMed]
43. Liebman JM. Membezakan antara ganjaran dan prestasi: kajian kritikal terhadap metodologi rangsangan diri intrakranial. Neurosci Biobehav Rev. 1983; 7: 45-72. [PubMed]
44. Miliaressis E, Rompre PP, Laviolette P, Philippe L, Coulombe D. Paradigma perubahan lengkung dalam rangsangan diri. Physiol Behav. 1986; 37: 85-91. [PubMed]
45. Rompre PP, Bijaksana RA. Interaksi opioid-neuroleptik dalam rangsangan diri otak. Brain Res. 1989; 477: 144-151. [PubMed]
46. Vialou V, Maze I, Renthal W, QC LaPlant, Watts EL, Mouzon E, et al. Faktor tindak balas serum menggalakkan ketahanan terhadap stres sosial kronik melalui induksi DeltaFosB. J Neurosci. 2010; 30: 14585-14592. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
47. Shirayama Y, Ishida H, Iwata M, Hazama GI, Kawahara R, Duman RS. Tekanan meningkatkan immunoreactivity dynorphin di kawasan otak limbik dan antagonisme dynorphin menghasilkan kesan seperti antidepresan. J Neurochem. 2004; 90: 1258-1268. [PubMed]
48. Chartoff EH, Papadopoulou M, MacDonald ML, Parsegian A, Potter D, Konradi C, et al. Desipramine mengurangkan ekspresi dynorphin tekanan dan fosforilasi CREB dalam tisu NAc. Mol Pharmacol. 2009; 75: 704-712. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
49. Newton SS, Thome J, Wallace TL, Shirayama Y, Schlesinger L, Sakai N, et al. Perencatan protein yang mengikat elemen tindak balas CAMP atau dynorphin dalam nukleus accumbens menghasilkan kesan seperti antidepresan. J Neurosci. 2002; 22: 10883-10890. [PubMed]
50. Spanagel R, Herz A, Shippenberg TS. Melawan sistem opioid endogenik aktif memodulasi laluan dopaminergik mesolimbi. Proc Natl Acad Sci US A. 1992; 89: 2046-2050. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
51. Hernandez G, Shizgal P. Perubahan dinamik dalam nada dopamine semasa rangsangan diri kawasan tegegalal pada tikus. Penyelidikan Otak Kelakuan. 2009; 198: 91-97. [PubMed]
52. Anda ZB, Chen YQ, Bijaksana RA. Pembebasan dopamine dan glutamat di kawasan akusatif dan daerah tegegal tikus tikus berikutan rangsangan diri hypothalamic lateral. Neurosains. 2001; 107: 629-639. [PubMed]
53. Hernandez G, Haines E, Rajabi H, Stewart J, Arvanitogiannis A, Shizgal P. Ganjaran yang boleh ditakdirkan dan tidak dapat diramal menghasilkan perubahan yang sama dalam nada dopamin. Neurosains Tingkah Laku. 2007; 121: 887-895. [PubMed]
54. Koob GF, Ketagihan M. Le Addiction dan Sistem Antirewain Otak. Annu Rev Psychol. 2008; 59: 29-53. [PubMed]
55. Walsh SL, Strain EC, Abreu ME, Bigelow GE. Enadoline, opioid agonist kappa opioid: perbandingan dengan butorphanol dan hydromorphone pada manusia. Psychopharmacology (Berl) 2001; 157: 151-162. [PubMed]
56. Dong Y, Hijau T, Saal D, Marie H, Neve R, Nestler EJ, et al. CREB memodulasi kegembiraan nukleus accumbens neurons. Nat neurosci. 2006; 9: 475-477. [PubMed]
57. Roitman MF, Wheeler RA, Tiesinga PH, Roitman JD, Carelli RM. Hedonic dan nukleus mengakui tindak balas neural kepada ganjaran semula jadi dikawal oleh penyesuaian aversive. Belajar Mem. 2010; 17: 539-546. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
58. Derkach VA, Oh MC, Guire ES, Soderling TR. Mekanisme pengawalseliaan reseptor AMPA dalam plastisitas sinaptik. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 101-113. [PubMed]
59. Shippenberg TS, Zapata A, Chefer VI. Dynorphin dan patofisiologi penagihan dadah. Pharmacol Ther. 2007; 116: 306-321. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
60. Jacobsen LK, Southwick SM, Kosten TR. Gangguan penggunaan bahan pada pesakit dengan gangguan tekanan posttraumatic: semakan kesusasteraan. Am J Psikiatri. 2001; 158: 1184-1190. [PubMed]
61. Swendsen J, Conway KP, Degenhardt L, Glantz M, Jin R, Merikangas KR, et al. Gangguan mental sebagai faktor risiko untuk penggunaan bahan, penyalahgunaan dan pergantungan: hasil dari susulan 10 tahun Penyelidikan Kecederaan Kebangsaan. Ketagihan. 2010; 105: 1117-1128. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
62. Liu RT, Aloi LB. Penekan tekanan dalam kemurungan: Semakan sistematik terhadap kesusasteraan dan cadangan empirikal untuk kajian masa depan. Clin Psychol Rev. 2010; 30: 582-593. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
63. Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ. Mekanisme kecemasan ketagihan: peranan pembelajaran dan memori berkaitan ganjaran. Annu Rev Neurosci. 2006; 29: 565-598. [PubMed]
64. McEwen BS, Gianaros PJ. Penderitaan otak dan tekanan yang disebabkan oleh allostasis. Annu Rev Med. 2011; 62: 431-445. [PubMed]
;