Pengeluaran menimbulkan corak FosB / ΔFosB yang berbeza dalam tikus Swiss yang dikelaskan sebagai mudah dan tahan terhadap pemekaan locomotor yang disebabkan etanol (2014)

Pharmacol Biochem Behav. 2014 Feb; 117: 70-8. doi: 10.1016 / j.pbb.2013.12.007. Epub 2013 Dec 16.

De Pauli RF1, Coelhoso CC2, Tesone-Coelho C2, Linardi A3, Mello LE2, Silveira DX1, Santos-Junior JG4.

Abstrak

Pendedahan dadah kronik dan penarikan dadah mendorong kepekaan neuron ekspresif yang boleh dianggap sebagai tindak balas fungsi dan patologi. Adalah mantap bahawa kepekaan neuron dalam sistem limbik memainkan peranan penting dalam kambuh serta ciri-ciri kompulsif ketagihan dadah. Walaupun peningkatan ekspresi FosB / DeltaFosB merupakan salah satu bentuk plastik neuron yang paling penting dalam penagihan dadah, tidak jelas sama ada ia mewakili kepekaan fungsional atau patologi. Ia penting bagi perbezaan individu dalam peralihan dari penggunaan rekreasi kepada penagihan dadah. Perbezaan ini telah dilaporkan dalam kajian yang melibatkan paradigma kepekaan locomotor yang disebabkan etanol. Dalam kajian ini, kita menyiasat apakah tikus yang sensitif dan tidak peka berbeza dari segi ungkapan FosB / DeltaFosB. Tikus-tikus Swiss lelaki dewasa setiap hari dirawat dengan etanol atau saline untuk 21days. Menurut aktiviti locomotor dalam fasa pengambilalihan, mereka dikelaskan sebagai peka (EtOH_High) atau tidak peka (EtOH_Low). Selepas 18h atau 5days, otak mereka diproses untuk imunohistokimia FosB / DeltaFosB. Pada hari pengeluaran 5th, kita dapat melihat ekspresi FosB / DeltaFosB yang meningkat dalam kumpulan EtOH_High (dalam korteks motosikal), dalam kumpulan EtOH_Low (di kawasan tegegal ventral), dan dalam kedua-dua kumpulan (di striatum). Perbezaan lebih konsisten dalam kumpulan EtOH_Low. Oleh itu, kebolehubahan tingkah laku yang diperhatikan dalam fasa pengambilalihan pemekaan locomotor yang disebabkan etanol diiringi oleh kepelbagaian neuronal perbezaan semasa tempoh pengeluaran. Tambahan lagi, corak FosB / DeltaFosB yang berbeza yang dikesan dalam tikus yang sensitif dan tidak peka nampaknya lebih berkaitan dengan tempoh pengeluaran dan bukannya pendedahan dadah kronik. Akhirnya, peningkatan dalam ekspresi FosB / DeltaFosB semasa tempoh pengeluaran boleh dianggap sebagai disebabkan oleh kedua-dua plastik fungsional dan patologi.

 

Info Terkini

  • Ekspresi DeltaFosB adalah bentuk plastik neuron yang penting dalam ketagihan dadah

  • Walau bagaimanapun, tidak jelas sama ada ia mewakili fleksibel fungsi atau patologi.

  • Di sini kami mendapati perbezaan dalam DeltaFosB di antara tikus yang sensitif dan tidak peka.

  • Perbezaan ini lebih berkaitan dengan tempoh pengeluaran dan bukan pendedahan dadah.

  • Kami mencadangkan bahawa perubahan ini mewakili kelainan fungsional dan patologi.

kata kunci

  • FosB;
  • DeltaFosB;
  • Pemekaan Locomotor;
  • Pengeluaran;
  • Kebolehubahan tingkah laku;
  • Tikus

1. Pengenalan

Cabaran penyelidikan neurobiologi semasa dalam ketagihan dadah adalah untuk memahami mekanisme kepekaan neuron yang menengahi peralihan dari penggunaan rekreasi kepada kehilangan kawalan tingkah laku terhadap pencarian dadah dan pengambilan dadah. Salah satu teori yang paling penting mengenai ketagihan dadah, yang dipanggil "sisi gelap ketagihan", menunjukkan bahawa terdapat perkembangan dari impulsif (yang berkaitan dengan tetulang positif) kepada pengunduran (yang berkaitan dengan penguat negatif). Kemajuan ini, dalam kitaran yang runtuh, terdiri daripada negeri-negeri berikut: keasyikan / pengharapan, mabuk penganiayaan, dan pengeluaran / negatif yang menjejaskan (Koob dan Le Moal, 2005, Koob dan Le Moal, 2008 and Koob dan Volkow, 2010). Dari senario ini, kajian kecanduan dadah telah memberi tumpuan kepada mekanisme neurobiologi yang berkaitan dengan keadaan emosi negatif yang muncul dari pantang larangan akut dan berlarutan. Mengikut teori "sisi gelap ketagihan", nampaknya berlaku perubahan plastisitas jangka panjang dan berterusan dalam litar saraf yang bertujuan untuk mengehadkan pahala. Walau bagaimanapun, perubahan plastisitas ini membawa kepada keadaan emosi negatif yang muncul apabila akses kepada ubat dihalang. Mekanisme ini memberikan pemacu motivasi yang kuat untuk penubuhan ketagihan, dan juga untuk penyelenggaraannya (Koob dan Le Moal, 2005 and Koob dan Le Moal, 2008).

Pemekaran Locomotor adalah model hewan yang berguna berdasarkan fakta bahawa peningkatan pada efek subyektif dari ubat-ubatan sepanjang pendedahan berulangnya mirip dengan peningkatan efek locomotor yang disebabkan oleh obat-obatanVanderschuren dan Kalivas, 2000 and Vanderschuren dan Pierce, 2010). Walaupun pemekaan lokomotor tidak meniru beberapa tingkah laku yang berkaitan dengan penagihan dadah, ciri-ciri morfologi dan neurokimia yang sementara itu selari dengan mereka yang membawa peralihan dari penggunaan rekreasi kepada penagihan dadah itu sendiri (Robinson dan Kolb, 1999, Vanderschuren dan Kalivas, 2000 and Vanderschuren dan Pierce, 2010). Secara tradisional, protokol pemekaran lokomotor terdiri daripada tiga fasa: pengambilalihan (pendedahan dadah berulang), tempoh pengeluaran dan cabaran (hubungan baru dengan ubat selepas tempoh pengeluaran). Malangnya, kebanyakan kajian menggunakan sensitisasi lokomotor hanya tertumpu pada fasa pemerolehan dan cabaran, yang bertindih pada tempoh pengeluaran.

Adalah mantap bahawa pendedahan berulang kepada ubat penyalahgunaan (Perrotti et al., 2008) dan tekanan kronik (Perrotti et al., 2004) meningkatkan ungkapan faktor transkripsi fosB / deltafosB dalam sistem kortikolimbi. Pengumpulan FosB / DeltaFosB di rantau ini telah dihipotesiskan untuk memainkan peranan utama dalam ketahanan terhadap stres (Berton et al., 2007 and Vialou et al., 2010) dan dalam kesan ganjaran kokain (Harris et al., 2007 and Muschamp et al., 2012), etanol (Kaste et al., 2009 and Li et al., 2010), dan opioid (Zachariou et al., 2006 and Solecki et al., 2008). Oleh itu, adalah mungkin bahawa FosB / DeltaFosB memodulasi beberapa peristiwa plastik neuron yang berkaitan dengan pemekaan locomotor yang disebabkan etanol, serta, penarikan yang mengakibatkan fasa pemerolehan pemekaan locomotor.

Adalah diperhatikan bahawa terdapat perbezaan individu yang diperhatikan semasa peralihan dari penggunaan rekreasi kepada penagihan dadah (Flagel et al., 2009, George dan Koob, 2010 and Swendsen dan Le Moal, 2011). Sebagai contoh, tikus DBA / 2 J lebih cenderung untuk bertindak balas daripada C57BL / 6 J terhadap pemekaan lokomotor yang disebabkan oleh etanol (Phillips et al., 1997 and Melon dan Boehm, 2011a). Dalam tikus Switzerland, kebolehubahan tingkah laku mengenai kepekaan locomotor yang disebabkan oleh ethanol mula-mula dijelaskan oleh Masur dan dos Santos (1988). Sejak itu, kajian lain telah menunjukkan ciri-ciri neurokimia penting yang berkaitan dengan kebolehubahan tingkah laku dalam pemerolehan pemekaan locomotor yang disebabkan etanol (Souza-Formigoni et al., 1999, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012, Quadros et al., 2002a and Quadros et al., 2002b). Walau bagaimanapun, kajian ini tidak menangani kesan kebolehubahan tingkah laku semasa tempoh pengeluaran selepas fasa pemerolehan pemekaan locomotor. Dalam satu kajian baru-baru ini, makmal kami menyifatkan perbezaan ketara antara tikus Swiss yang sensitif dan tidak peka terhadap ekspresi reseptor jenis cannabinoid 1 (CB1R) sepanjang pengeluaran. Dalam kajian itu, kepekaan (tetapi bukan tikus yang tidak sensitif) telah meningkatkan ekspresi CB1R dalam korteks prefrontal, kawasan tegegal ventral, amygdala, striatum, dan hippocampus (Coelhoso et al., 2013).

Memandangkan kebolehubahan tingkah laku yang mantap pada tikus Swiss yang lebih besar mengenai pemekaan lokomotor yang disebabkan oleh etanol, dan bahawa kebolehubahan ini disertai dengan ciri-ciri neurokimia yang berbeza semasa penarikan berikutnya, kajian ini meneliti ekspresi FosB / DeltaFosB pada tikus yang peka dan tidak peka pada awalnya. (18 h) dan selepas 5 hari penarikan.

2. Bahan dan kaedah

2.1. Subjek

Tikus Swiss Webster yang mempunyai jantan (EPM-1 Colony, São Paulo, SP, Brazil), yang berasal dari garis Albino Swiss Webster dari Pusat Pengembangan Model Haiwan dalam Biologi dan Perubatan di Universidade Federal de São Paulo, digunakan . Tikus berusia 12 minggu (30-40 g) pada awal ujian. Kumpulan 10 tikus ditempatkan di kandang (40 × 34 × 17 cm) dengan tempat tidur cip kayu. Suhu (20–22 ° C) dan kelembapan (50%) koloni haiwan terkawal dikekalkan pada siklus cahaya / gelap (12/12 jam), dengan lampu menyala pada pukul 07:00, dengan pelet chow tetikus dan iklan air paip libitum, kecuali semasa ujian. Tikus dijaga dalam keadaan perumahan ini sekurang-kurangnya 7 hari sebelum permulaan rawatan ubat dan ujian tingkah laku. Prosedur penjagaan haiwan dan eksperimen dilakukan di bawah protokol yang diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Universiti (nombor protokol: 2043/09), menurut Arahan EU 2010/63 / EU untuk eksperimen haiwan (http://ec.europa.eu/environmental/chemicals/lab_animals/legislation_en.htm).

2.2. Pemekaan Locomotor

Protokol pemekaan locomotor didasarkan pada kajian sebelumnya dari makmal kami sendiri (Coelhoso et al., 2013). Pada awal protokol, semua haiwan disuntik secara intraperitoneally (ip) dengan garam dan segera diuji dalam kotak aktiviti automatik (Insight, Brazil) selama 15 minit untuk mewujudkan pergerakan dasar. Dua hari kemudian, haiwan disuntik setiap hari dengan etanol (2 g / kg, 15% b / v dalam NaCl 0.9%, kumpulan ip - EtOH, N = 40) atau masin (isipadu serupa, ip, - Kumpulan kawalan, N = 12), selama 21 hari. Tepat selepas suntikan ke-1, ke-7, ke-14, dan ke-21, haiwan diletakkan di dalam sangkar aktiviti selama 15 minit. Pergerakan mendatar dalam setiap situasi diukur oleh sistem analisis tingkah laku (Pan Lab, Spain). Seperti yang diharapkan ( Masur dan dos Santos, 1988 and Coelhoso et al., 2013), kebolehubahan tingkah laku dalam aktiviti locomotor pada hari 21st pemerolehan membolehkan kita untuk mengedarkan haiwan kumpulan EtOH dalam subkumpulan 2: EtOH_High (diambil dari 30% daripada pengedaran atas) dan EtOH_Low (diambil dari% 30 yang lebih rendah daripada pengedaran). Oleh itu, hanya 60% haiwan dimasukkan ke dalam analisis. Strategi ini adalah sama dengan yang digunakan dalam kajian-kajian yang menyiasat kepelbagaian individu dalam paradigma kepekaan etanol ( Masur dan dos Santos, 1988, Souza-Formigoni et al., 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012 and Coelhoso et al., 2013).

Setelah klasifikasi menentukan kumpulan eksperimen, kami melakukan 2 eksperimen bebas mengikut kriteria temporal tempoh penarikan: (i) haiwan diserahkan ke fasa pemerolehan dan dikorbankan setelah 18 jam penarikan dan (ii) haiwan diserahkan ke fasa pemerolehan dan dikorbankan selepas 5 hari pengeluaran. Oleh itu, kajian ini merangkumi 3 kumpulan eksperimen (Control, EtOH_High, dan EtOH_Low) yang dibahagikan kepada 2 subkumpulan (18 jam dan 5 hari penarikan diri) (N = 6 setiap subkumpulan). Pemilihan kedua tanda temporal ini dalam tempoh penarikan disebabkan oleh aspek kinetik ekspresi FosB dan DeltaFosB setelah 18 jam penarikan diri (seperti yang dijelaskan dalam bahagian perbincangan), dan setelah 5 hari penarikan, berdasarkan kajian sebelumnya dari Makmal kami yang menyiasat beberapa ciri neurokimia mengenai tempoh penarikan dalam paradigma pemekaan lokomotor ( Fallopa et al., 2012 and Escosteguy-Neto et al., 2012). Akhirnya, untuk melakukan korelasi antara pemekaan lokomotor dan ekspresi FosB / DeltaFosB, kami mengira skor pemekaan lokomotor untuk setiap haiwan, dengan formula: skor = (Locomotion pada hari ke-21 - Locomotion pada hari ke-1) * 100 / Locomotion di Hari ke-1.

2.3. Imunohistokimia

Selepas tempoh penarikan masing-masing, haiwan dibius dengan koktel yang mengandungi ketamin (75 mg / kg, ip) dan xylazine (25 mg / kg, ip). Setelah hilangnya refleks kornea, mereka disempurnakan secara transkardial dengan 100 ml larutan buffer fosfat 0.1 M [fosfat buffered saline (PBS)], diikuti oleh 100 ml paraformaldehid 4% (PFA). Otak dikeluarkan segera setelah perfusi, disimpan dalam PFA selama 24 jam dan kemudian disimpan dalam larutan sukrosa / PBS 30% selama 48 jam. Bahagian koronal bersiri (30 μm) dipotong menggunakan mikrotom pembekuan dan disimpan di dalam larutan anti-pembekuan untuk digunakan dalam prosedur imunohistokimia dengan pewarnaan terapung bebas.

Untuk imunohistokimia, teknik konvensional avidin – biotin – immunoperoxidase dilakukan. Bahagian otak dari semua kumpulan eksperimen dimasukkan dalam jangka masa yang sama, diproses dengan hidrogen peroksidase (3%) selama 15 minit dan kemudian dicuci dengan PBS selama 30 minit. Kemudian, semua bahagian terdedah selama 30 minit dalam PBS-BSA .5% untuk mengelakkan reaksi tidak spesifik. Selepas itu, bahagian diinkubasi semalaman dengan kelinci antibodi utama anti-FosB / DeltaFosB (1: 3,000; Sigma Aldrich, St Louis, MO, USA. No.cat. AV32519) dalam larutan PBS-T (30 ml PBS, 300 μl Triton X-100). Selepas itu, bahagian diinkubasi selama 2 jam dalam antibodi sekunder IgG anti-arnab kambing biotinilasi (1: 600; Vector, Burlingame, CA, USA) pada suhu bilik. Bahagian kemudian dirawat dengan kompleks avidin-biotin (kit Vectastain ABC Standard; Vector, Burlingame, CA, USA) selama 90 minit dan diserahkan kepada reaksi diaminobenzidin yang diperkuatkan nikel. Di antara beberapa langkah, bahagian dibilas dalam PBS dan digerakkan pada pemutar. Bahagian dipasang pada slaid bersalut gelatin, dikeringkan, dikeringkan dan ditutupi penutup.

Kawasan ensefalic berikut dianalisis: korteks prefrontal [korteks cingulate anterior (Cg1), korteks prelimbic (PrL) dan korteks infralimbik (IL)], korteks motor [utama (M1) dan sekunder (M2)], stearin dorsomedial [ DmS) dan striatum dorsolateral (DlS)], striatum ventral [nucleus accumbens core (Acbco) dan shell (Acbsh), ventral pallidum (VP)], hippocampus [layer pyramidal of Cornus Ammong 1 and 3 (CA1 and CA3) lapisan granular dyrate gyrus (DG)], amygdala [nucleus basolateral (BLA), dan nukleus pusat (CeA)], nucleus nucleus hypothalamus (VMH) dan kawasan tegegal ventral (VTAA) dan bahagian belakang (VTAP) Lihat Rajah 1). Mikroskop Nikon Eclipse E200 yang disambungkan ke komputer digunakan untuk menangkap gambar dari setiap bahagian pada pembesaran × 20. Gambar disimpan sebagai arkib .tiff untuk analisis posterior imunoreaktiviti FosB / DeltaFosB. Sel-sel imunoreaktif dihitung menggunakan perisian ImageJ (NIH Image, Bethesda, MD, USA). Kawasan otak digambarkan pada setiap gambar menurut The Stereotaxic Mouse Brain Atlas (Franklin dan Paxinos, 1997). Oleh kerana fotomikrograf yang diambil oleh mikroskop mewakili 2.5 × 103 mikron2 dalam pembesaran 20 ×, pengukuran sel berlabel FosB / DeltaFosB dinyatakan sebagai purata sel imunostain per 2.5 × 103 mikron2. Nilai yang diperoleh dalam kumpulan EtOH dinormalisasi ke nilai Kontrol, dan dinyatakan sebagai%. (Kawalan = 100%).

  •  
  • Rajah 1.  

    Perwakilan skematik kawasan otak diambil sampel. Lukisan skematik tikus otak bahagian coronal menunjukkan kawasan sampel (disesuaikan dari Franklin dan Paxinos, 1997). M1 = korteks motor utama; M2 = korteks motor sekunder, CG1 = korteks cingulate anterior, PrL = korteks prelimbik, IL = korteks infralimbik, Acbco = inti accumbens inti, Acbsh = cangkang inti nukleus, VP = pallidum ventral DmS = striatum dorsomedial, DlS = striatateral dorsolateral, CA1 Cornus Ammonis 1, CA3 = Cornus Ammonis 3; DG = lapisan granular dentate gyrus, BlA = nukleus basolateral amigdala, CeA = nukleus pusat amigdala, VmH = inti hipotalamus ventromedial, VTAA = bahagian anterior kawasan tegmental ventral, VTAP = bahagian posterior kawasan tegmental ventral.

2.4. Analisis statistik

Pada mulanya, Shapiro-Wilk digunakan untuk mengesahkan normal taburan semua pemboleh ubah. Hasil tingkah laku dianalisis oleh ANOVA sehala untuk pengukuran berulang yang mempertimbangkan faktor 5 kepekaan lokomotor: basal, hari 1, hari 7, hari 14, dan hari 21. Hasil histologi dianalisis oleh ANOVA dua hala, dengan mempertimbangkan sebagai faktor: tempoh penarikan (18 h dan 5 hari) dan kumpulan eksperimen (Control, EtOH_High dan EtOH_Low). Pemboleh ubah bukan parametrik diseragamkan menjadi skor Z untuk mengurangkan penyebaran data, dan kemudian diterapkan dalam ANOVA dua arah, seperti yang dijelaskan sebelumnya. Newman Keuls post-hoc digunakan apabila perlu. Akhirnya, kami menyiasat kemungkinan hubungan antara sel positif FosB / DeltaFosB dan skor pemekaan lokomotor. Korelasi ini dihitung hanya untuk inti di mana terdapat perbezaan statistik antara kumpulan eksperimen. Kerana perbezaan ini dibatasi pada pengeluaran selama 5 hari (Lihat bahagian hasil), nilai FosB / DeltaFosB yang dipertimbangkan dalam korelasi ini merujuk pada jangka waktu penarikan ini. Kerana perbezaan ini dibatasi pada pengeluaran selama 5 hari (Lihat bahagian hasil), nilai FosB / DeltaFosB yang dipertimbangkan dalam korelasi ini merujuk pada waktu pengeluaran ini. Tahap kepentingan ditetapkan pada 5% (p <0.05).

3. Keputusan

3.1. Pemekaan Locomotor

ANOVA untuk langkah berulang mengesan perbezaan ketara dalam faktor kumpulan [F(2,32) = 68.33, p <0.001], dalam tempoh protokol [F(4,128) = 9.13, p <0.001], dan interaksi antara mereka [F(8,128) = 13.34, p <0.001]. Tidak ada perbezaan dalam pergerakan asas, dan kedua-dua kumpulan EtOH mengalami peningkatan pergerakan yang sama pada hari pertama pemerolehan, jika dibandingkan dengan kumpulan Kawalan (p <0.01). Walau bagaimanapun, EtOH_High (tetapi tidak EtOH_Low) menunjukkan peningkatan aktiviti lokomotor secara progresif sepanjang fasa pemerolehan (p <0.01, berkaitan dengan kumpulan Control dan EtOH_Low, pada hari terakhir pemerolehan; p <0.01 berkaitan dengan aktiviti lokomotornya pada hari pertama pemerolehan) ( Rajah 2). Data ini menyokong hasil dari kajian asal ( Masur dan dos Santos, 1988) dan dari laporan kami yang terdahulu ( Coelhoso et al., 2013) mengenai perilaku tingkah laku dalam tikus Swiss yang diserahkan kepada pemekaan locomotor yang disebabkan etanol.

  • Ethanol menggalakkan peningkatan pergerakan secara beransur-ansur dan mantap sepanjang kronik ...
  • Rajah 2.  

    Etanol mendorong peningkatan pergerakan secara beransur-ansur dan kuat sepanjang rawatan kronik di EtOH_High, tetapi tidak dalam kumpulan EtOH_Low. Data dinyatakan sebagai min ± SEM N = 12 untuk kumpulan Control, EtOH_High dan EtOH_Low. ⁎⁎P <0.01 berhubung dengan Kumpulan kawalan, pada tempoh yang sama. ##P <0.01 berkaitan dengan kumpulan EtOH_Low, pada tempoh yang sama. ‡‡P <0.01 berkaitan dengan aktiviti lokomotor basal, dalam kumpulan yang sama. ¥¥P <0.01 berhubung dengan aktiviti lokomotor pada 1st hari pengambilalihan, dalam kumpulan yang sama.

3.2. Ungkapan FosB / DeltaFosB

Photomicrographic illustrative of immunoreactivity FosB / DeltaFosB digambarkan dalam Rajah 3 dan nilai yang dinormalisasikan ditunjukkan dalam Rajah 4, Rajah 5, Rajah 6 and Rajah 7. ANOVA dua hala mengesan perbezaan ketara dalam M1, M2, DmS, DlS, Acbco, Acbsh, VP dan VTA (untuk nilai immunoreaktiviti FosB / DeltaFosB yang tidak dinormalisasi dan analisis statistik semua struktur, lihat Jadual Suppl1 and Jadual 1, masing-masing). Dalam struktur di mana perbezaan statistik dapat diperhatikan, terdapat empat corak ekspresi FosB / DeltaFosB yang berbeza. Pada yang pertama, yang diperhatikan di M1 dan M2, terdapat peningkatan ekspresi FosB / DeltaFosB pada hari kelima penarikan etanol hanya pada kumpulan EtOH_High (berbanding dengan nilai EtOH_High pada 18 jam penarikan, juga, pada Pengendalian dan EtOH_kumpulan rendah pada pengeluaran 5 hari) (lihat Rajah 4). Pada corak kedua, yang diperhatikan dalam VTAA, ekspresi FosB / DeltaFosB meningkat pada pengeluaran etanol 5 hari hanya pada kumpulan EtOH_Low (berbanding dengan nilai EtOH_Low pada 18 jam penarikan, begitu juga, kepada kumpulan Kawalan pada penarikan 5 hari ) (lihat Rajah 5). Pada corak ketiga, yang diperhatikan dalam ekspresi DmS, Acbco, dan Acbsh, ekspresi FosB / DeltaFosB meningkat pada 5 hari penarikan etanol pada kedua-dua kumpulan EtOH_High dan EtOH_Low (berbanding dengan nilai masing-masing pada penarikan 18 jam), namun, hanya kumpulan EtOH_Low berbeza dengan kumpulan kawalan (lihat Rajah 6). Akhirnya, pada corak keempat, yang diperhatikan dalam DlS dan VP, ekspresi FosB / DeltaFosB meningkat pada pengeluaran etanol selama 5 hari pada kedua-dua kumpulan EtOH_High dan EtOH_Low (berbanding dengan nilai masing-masing pada pengeluaran 18 jam), walaupun kenaikan ini secara statistik lebih ekspresif di EtOH_Low daripada kumpulan EtOH_High, dan hanya kumpulan EtOH_Low berbeza dari kumpulan Control (lihat Rajah 7).

  • Photomicrography illustrative of immunoreactivity FosB / DeltaFosB at × 20 ...
  • Rajah 3.  

    Fotomikografi ilustratif FosB / DeltaFosB imunoreaktiviti pada × 20 pembesaran. DmS = striatum dorsomedial; DlS = striatum dorsolateral; Acbco = inti accumbens inti; Acbsh = nukleus accumbens shell; VP = pallidum ventral; VTAa = bahagian anterior kawasan tegmental ventral.

  •  
  • Rajah 4.  

    Ungkapan FosB / DeltaFosB pada 18 jam dan 5 hari tempoh penarikan diri dalam kumpulan EtOH_High dan EtOH_Low di M1 dan M2. Data dinyatakan sebagai rerata ± SEM dan mewakili data yang dinormalisasi sesuai dengan nilai kumpulan Kontrol (garis putus-putus - dianggap sebagai 100%). Batang kelabu = 18 jam pengambilan etanol; Batang hitam = pengeluaran etanol selama 5 hari. ** P <0.01 berhubung dengan kumpulan Kawalan masing-masing; ## P <0.01, berkaitan dengan nilai masing-masing pada pengeluaran 18 jam. ‡ ‡ P <0.01, berkaitan dengan kumpulan EtOH_Low dalam tempoh yang sama. M1 = korteks motor primer, M2 = korteks motor sekunder.

  • Ungkapan FosB / DeltaFosB pada 18h dan 5days dari tempoh pengeluaran dalam EtOH_High ...
  • Rajah 5.  

    Ekspresi FosB / DeltaFosB pada 18 jam dan 5 hari tempoh penarikan diri dalam kumpulan EtOH_High dan EtOH_Low di VTA. Data dinyatakan sebagai rerata ± SEM dan mewakili data yang dinormalisasi sesuai dengan nilai kumpulan Kontrol (garis putus-putus - dianggap sebagai 100%). Batang kelabu = 18 jam pengambilan etanol; Batang hitam = pengeluaran etanol selama 5 hari. ** P <0.01 berhubung dengan kumpulan Kawalan masing-masing; ## P <0.01, berkaitan dengan nilai masing-masing pada pengeluaran 18 jam. VTA = kawasan tegmental ventral.

  • Ungkapan FosB / DeltaFosB pada 18h dan 5days dari tempoh pengeluaran dalam EtOH_High ...
  • Rajah 6.  

    Ekspresi FosB / DeltaFosB pada 18 jam dan 5 hari tempoh pengeluaran di EtOH_High dan EtOH_kumpulan Rendah di Acbco, Acbsh dan DmS Data dinyatakan sebagai rerata ± SEM dan mewakili data yang dinormalisasi sesuai dengan nilai kumpulan Kontrol (garis putus-putus - dianggap sebagai 100%). Batang kelabu = 18 jam pengambilan etanol; Batang hitam = pengeluaran etanol selama 5 hari. * P <0.05 ** P <0.01, berkaitan dengan kumpulan Kawalan masing-masing; ## P <0.01, berkaitan dengan nilai masing-masing pada pengeluaran 18 jam. Acbco = inti accumbens nukleus, Acbsh = cangkang inti nukleus, DmS = striatum dorsomedial.

  • Ungkapan FosB / DeltaFosB pada 18h dan 5days dari tempoh pengeluaran dalam EtOH_High ...
  • Rajah 7.  

    Ekspresi FosB / DeltaFosB pada 18 jam dan 5 hari tempoh pengeluaran di EtOH_High dan EtOH_Low kumpulan dalam VP dan DlS. Data dinyatakan sebagai rerata ± SEM dan mewakili data yang dinormalisasi sesuai dengan nilai kumpulan Kontrol (garis putus-putus - dianggap sebagai 100%). Batang kelabu = 18 jam pengambilan etanol; Batang hitam = pengeluaran etanol selama 5 hari. ** P <0.01 berhubung dengan kumpulan Kawalannya masing-masing; # P <0.05 ## P <0.01, berkaitan dengan nilai masing-masing pada pengeluaran 18 jam. ‡ ‡ P <0.01, berkaitan dengan kumpulan EtOH_Low dalam tempoh yang sama. VP = pallidum ventral, DlS = striatateral dorsolateral.

  • Jadual 1. 

    Parameter statistik yang diperolehi dalam ANOVA dua hala berkenaan dengan analisis ungkapan FosB / DeltaFosB.

  • NucleusFaktor masaFaktor rawatanTempoh * Rawatan
    M1F(1,30) = 5.61, P = 0.025F(2,30) = 3.21, P = 0.055F(2,30) = 2.61, P = 0.089
    M2F(1,30) = 4.72, P = 0.038F(2,30) = 1.53, P = 0.233F(2,30) = 3.45, P = 0.045
    CG1F(1,30) = 11.08 P = 0.002F(2,30) = 0.95, P = 0.398F(2,30) = 3.31, P = 0.050
    PrLF(1,30) = 8.53, P = 0.007F(2,30) = 1.72, P = 0.197F(2,30) = 2.74, P = 0.081
    ILF(1,30) = 3.77, P = 0.062F(2,30) = 1.91, P = 0.167F(2,30) = 0.98, P = 0.389
    AcbcoF(1,30) = 22.23 P <0.001F(2,30) = 2.63, P = 0.089F(2,30) = 5.68, P = 0.008
    AcbshF(1,30) = 50.44 P <0.001F(2,30) = 4.27, P = 0.023F(2,30) = 13.18, P <0.000
    VPF(1,30) = 38.01 P <0.001F(2,30) = 5.07, P = 0.013F(2,30) = 10.93, P <0.000
    DmSF(1,30) = 28.89 P <0.001F(2,30) = 3.75, P = 0.035F(2,30) = 7.71, P = 0.002
    DlSF(1,30) = 13.58 P = 0.001F(2,30) = 5.41, P = 0.011F(2,30) = 4.72, P = 0.017
    CA1F(1,30) = 4.81, P = 0.036F(2,30) = 7.37, P = 0.002F(2,30) = 1.62, P = 0.215
    CA3F(1,30) = 14.92 P = 0.001F(2,30) = 2.46, P = 0.102F(2,30) = 3.81, P = 0.034
    DGF(1,30) = 0.59, P = 0.447F(2,30) = 1.49, P = 0.241F(2,30) = 0.24, P = 0.785
    BlAF(1,30) = 6.47, P = 0.016F(2,30) = 0.12, P = 0.884F(2,30) = 1.71, P = 0.199
    CeAF(1,30) = 2.55, P = 0.121F(2,30) = 0.22, P = 0.801F(2,30) = 0.71, P = 0.501
    VmHF(1,30) = 6.51, P = 0.016F(2,30) = 0.71, P = 0.503F(2,30) = 1.75, P = 0.192
    VTAAF(1,30) = 9.64, P = 0.004F(2,30) = 3.76, P = 0.035F(2,30) = 2.65, P = 0.087
    VTAPF(1,30) = 6.05, P = 0.021F(2,30) = 1.79, P = 0.184F(2,30) = 1.64, P = 0.211
  • M1 = korteks motor utama; M2 = korteks motor sekunder, CG1 = korteks cingulate anterior, PrL = korteks prelimbik, IL = korteks infralimbik, Acbco = inti accumbens nukleus, Acbsh = cangkang inti nukleus, VP = pallidum ventral DmS = striatum dorsomedial, DlS = striatateral dorsolateral, CA1 Cornus Ammonis 1, CA3 = Cornus Ammonis 3; DG = lapisan granul dentate gyrus, BlA = nukleus basolateral amigdala, CeA = nukleus pusat amigdala, VmH = inti hipotalamus ventromedial, VTAA = bahagian anterior kawasan tegmental ventral; VTAP = bahagian posterior kawasan tegmental tengah.

Untuk mengesahkan bahawa perubahan dalam ekspresi FosB / DeltaFosB disebabkan oleh pengeluaran, dan bukan untuk pendedahan etanol, kami melakukan hubungan antara skor pemekaan locomotor dan sel-sel immunolabelled FosB / DeltaFosB pada hari pengeluaran 5th dalam nuklei yang disebutkan di atas (M1, M2, Acbco, Acbsh, DmS, DlS, VP, VTAA). Seperti yang dijangkakan, tiada korelasi yang ketara untuk mana-mana nuklei (M1 - r2 = 0.027862, p = 0.987156; M2 - r2 = 0.048538, p = 0.196646; Acbco - r2 = 0.001920, p = 0.799669; Acbsh - r2 = 0.006743, p = 0.633991; DmS - r2 = 0.015880, p = 0.463960; DlS - r2 = 0.023991, p = 0.914182; VP - r2 = 0.002210, p = 0.785443; VTAA - r2 = 0.001482, p = 0.823630).

4. Perbincangan

Keputusan yang dilihat dalam kajian ini menunjukkan bahawa peningkatan ungkapan FosB / DeltaFosB yang diamati dalam paradigma pemekaan locomotor yang disebabkan etanol mungkin berkaitan dengan pengeluaran dan bukannya pendedahan dadah kronik. Walau bagaimanapun, kepelbagaian tingkah laku dalam pemekaan lokomotor pembangunan disertai oleh corak FosB / DeltaFosB yang berbeza semasa pengeluaran. Peranan korteks motor, kawasan tegegal ventral dan striatum dalam pemerolehan dan ekspresi paradigma kepekaan lokomotor adalah mantap (Vanderschuren dan Pierce, 2010). Tambahan pula, deregulasi laluan mesolimbi adalah salah satu ciri neurobiologi pusat tempoh pengeluaran, bersama dengan kemunculan amygdala yang dilanjutkan (Koob dan Le Moal, 2005 and Koob dan Le Moal, 2008). Walau bagaimanapun, hanya beberapa kajian yang menjelajah tempoh pengeluaran paradigma kepekaan locomotor. Hasil kami menemui perubahan yang menarik dalam ekspresi FosB / DeltaFosB dalam korteks motor, kawasan tegegal ventral, dan striatum dalam tempoh ini.

FosB cDNA mengekodkan ungkapan 33, 35, dan 37 kDa protein. Pendedahan rangsangan akut menyebabkan induksi protein 33- dan 35- kDa Fos yang kuat 37- dan diskrit. Akibatnya, di bawah pengaktifan akut, ungkapan FosB yang dominan berkaitan dengan 33 kDa (McClung et al., 2004 and Nestler, 2008). Terdapat satu lagi perbezaan yang luar biasa antara protein ini: hanya 35-37 kDa protein yang merupakan isoform yang sangat stabil. Kerana kestabilan yang tinggi ini, bentuk FosB terpotong ini, juga disebut DeltaFosB, terkumpul di otak dan sangat dinyatakan sebagai tindak balas terhadap rangsangan kronik, seperti rawatan ubat psikotropik, kejang elektrokonvulsif kronik, dan tekanan (Kelz dan Nestler, 2000, Nestler et al., 2001 and McClung et al., 2004). Akibatnya, DeltaFosB telah dilihat sebagai suis molekul yang mampan untuk memeterai bentuk kepekaan neural dan tingkah laku yang tahan lama. Menariknya, kajian yang mengagumkan menggunakan garis-garis tetikus yang menyatakan secara berbeza FosB dan DeltaFosB menunjukkan bahawa FosB adalah penting untuk meningkatkan toleransi tekanan dan juga meneutralkan korelasi antara pemekaan locomotor dan penganalisis lokomotor yang disebabkan oleh psikostimulan yang disebabkan oleh DeltaFosB di striatum (Ohnishi et al., 2011). Oleh itu, kedua-dua protein dapat memainkan peranan penting dalam protokol eksperimen yang digunakan dalam kajian ini. Perlu diperhatikan bahawa antibodi FosB yang digunakan mengenali FosB dan DeltaFosB. Oleh kerana FosB menurun ke tahap awal dalam 6 jam setelah rangsangan akut (Nestler et al., 2001) dan DeltaFosB terkumpul setelah pendedahan rangsangan berulang, kami memutuskan untuk mengorbankan haiwan 18 jam setelah fasa pemerolehan, untuk mengelakkan kemungkinan berlakunya bias perlakuan etanol terhadap ekspresi FosB. Walaupun begitu, tepatnya secara teknikal, kami akan merujuk dalam kajian ini sebagai ungkapan FosB / DeltaFosB. Penting untuk diperhatikan bahawa strategi ini telah digunakan dalam kajian orang lain, termasuk yang menggunakan antibodi primer yang sama yang dijelaskan di sini (Conversi et al., 2008, Li et al., 2010, Flak et al., 2012 and García-Pérez et al., 2012). Akibatnya, selain daripada batasan percubaan ini, kami akan membincangkan hasil kami memandangkan peranan DeltaFosB dalam kepekaan neuron.

Adalah mantap bahawa pendedahan dadah kronik meningkatkan ekspresi FosB / DeltaFosB di beberapa kawasan otak (Nestler et al., 2001 and Perrotti et al., 2008). Anehnya, dalam kajian ini, tikus yang tidak peka etanol atau etanol tidak peka dengan tikus yang diberi rawatan garam kronik mengenai ekspresi FosB / DeltaFosB 18 jam selepas fasa pemerolehan. Tambahan pula, tidak ada hubungan yang signifikan antara ekspresi FosB / DeltaFosB dan skor pemekaan lokomotor. Perbezaan ini dapat dijelaskan, sekurang-kurangnya sebahagiannya, oleh perbezaan yang terdapat dalam protokol eksperimen. Sebagai contoh, dengan mempertimbangkan pendedahan etanol, dalam dua kajian paradigma pilihan bebas dua botol digunakan dalam 15 sesi minum berselang (Li et al., 2010atau diet cair lengkap yang berkhasiat yang diberikan secara automatik selama 17 hari (di mana haiwan menggunakan etanol pada dos antara 8 hingga 12 g / kg / hari) (Perrotti et al., 2008). Dalam kajian lain, walaupun penulis merujuk kepada rawatan kronik, protokol tersebut hanya terdapat dalam pendedahan etanol 4 (Ryabinin dan Wang, 1998). Jadi, protokol yang digunakan di tempat lain sama sekali berbeza dengan yang digunakan di sini, yang terdiri daripada rawatan selama 21 hari di mana suntikan etanol harian diberikan oleh seorang eksperimen. Walaupun terdapat perbezaan ini, terdapat beberapa kajian yang melibatkan suntikan intraperitoneal yang melaporkan peningkatan ekspresi FosB / DeltaFosB setelah protokol pemekaan lokomotor yang disebabkan oleh psikostimulan (Brenhouse dan Stellar, 2006, Conversi et al., 2008 and Vialou et al., 2012) dan opioid (Kaplan et al., 2011). Walau bagaimanapun, protokol pemekaan locomotor dalam kajian-kajian itu melibatkan kurang daripada pendedahan dadah 21, dan dalam sesetengahnya, ubat-ubatan telah diberikan dengan cara yang terputus-putus. Sebaliknya, protokol kami menggunakan rawatan yang sama seperti yang dijelaskan dalam kajian terdahulu yang melibatkan suntikan etanol harian 21 (Masur dan dos Santos, 1988, Souza-Formigoni et al., 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011 and Abrahão et al., 2012). Terdapat bukti bahawa walaupun pentadbiran kokain kronik mempromosikan pengumpulan ungkapan DeltaFosB dalam nukleus accumbens, ia juga mempromosikan toleransi kepada induksi mRNA DeltaFosB di kedua stratum ventral dan dorsalLarson et al., 2010). Oleh itu, kami membuat hipotesis bahawa kekurangan perbezaan dalam kumpulan percubaan kami dalam fasa pengambilalihan mungkin disebabkan oleh toleransi mengenai induksi FosB / DeltaFosB, kerana dalam protokol ini terdapat fasa pengambilalihan yang lebih besar berbanding tempoh yang digunakan untuk psikostimulan dan opioid dalam kajian lain.

Kajian menggunakan tikus knockout dan transgenik menunjukkan bahawa tikus-tikus mutan FosB telah meningkatkan tindak balas tingkah laku terhadap kokain, seperti kesan locomotor stimulan dan keutamaan tempat yang dikondisi. Tambahan pula, ungkapan kedua-dua DeltaFosB asas dan cocaine-inducible tidak hadir dalam tikus mutan ini (Hiroi et al., 1997). Sebaliknya, tikus transgenik dengan overexpression yang terdorong DeltaFosB menunjukkan kepekaan meningkat kepada kesan ganjaran kokain dan morfin (Muschamp et al., 2012). Hasil ini memberikan keterangan langsung tentang korelasi yang rapat antara DeltaFosB dan proses ganjaran. Selain pendedahan ubat berulang, tekanan kronik juga meningkatkan ekspresi DeltaFosB dalam litar kortikolimbik (Perrotti et al., 2004). Menariknya, tikus transgenik yang menggambarkan DeltaFosB kurang sensitif terhadap kesan pro-depresif dari agonis kappa-opioid, yang dikenali untuk mempengaruhi kesan dysphoria dan tekanan seperti tikus (Muschamp et al., 2012). Jadi, selain proses ganjaran, DeltaFosB juga memainkan peranan penting dalam aspek emosi fenomena tersebut. Dalam senario ini, penarikan juga boleh mencetuskan ekspresi FosB / DeltaFosB, kerana tekanan adalah komponen utama penarikan ubat. Perspektif ini sesuai dengan hasil kami, kerana tidak ada korelasi antara ekspresi FosB / DeltaFosB dan skor pemekaan, dan selanjutnya peningkatan ekspresi FosB / DeltaFosB hanya diperhatikan pada hari kelima penarikan.

Menariknya, dalam sesetengah struktur, kenaikan FosB / DeltaFosB dilihat dalam kumpulan EtOH_High dan EtOH_Low, walaupun lebih ekspresif dalam kumpulan terdahulu, menunjukkan bahawa peningkatan ini boleh mempunyai akibat fungsional yang berlainan, mengikut keamatan mereka. Hipotesis ini boleh dijelaskan oleh beberapa fungsi fos yang berbeza iaitu FosB / DeltaFosB. Sebagai contoh, tikus secara kronik yang terdedah kepada kokain telah meningkatkan ekspresi DeltaFosB dalam nukleus accumbens semasa tempoh penarikan, kesan positif berkorelasi dengan keutamaan kokain, tetapi secara negatif dengan keutamaan baru. Selain itu, tekanan semasa pengeluaran meningkatkan tindak balas tingkah laku kepada psikostimulus dengan meningkatkan ungkapan DeltaFosB dalam neuron kortikolimbi (Nikulina et al., 2012). Oleh itu, DeltaFosB dapat meramalkan disyskulasi pemprosesan hedonik yang berlaku semasa pengeluaran berpanjangan (Marttila et al., 2007). Sebaliknya, kedua-dua daya tahan terhadap tekanan dan tindak balas antidepresan berkaitan dengan ekspresi DeltaFosB yang lebih tinggi di striatum (Vialou et al., 2010). Oleh itu, kami membuat spekulasi bahawa peningkatan FosB / DeltaFosB pada striatum di EtOH_High dapat meningkatkan kesan ganjaran etanol, memberikan kepekaan yang lebih tinggi kepada pendedahan dadah yang seterusnya. Di sisi lain, peningkatan yang lebih tinggi dalam FosB / DeltaFosB yang dilihat dalam kumpulan EtOH_Low dapat menurunkan sensitiviti terhadap kedua-dua kesan dysphoria dan tekanan, meminimumkan kesan penguat negatif terhadap pendedahan dadah berikutnya dan, sebagai akibatnya, menerangkan rintangan yang lebih tinggi dalam kumpulan. Menariknya, paradoks ini mempunyai asas neurokimia. Sebagai contoh, tikus transgenik yang mengungkap FosB dalam tulang belakang sederhana GABAergik neuron nukleus accumbens telah meningkatkan tahap kedua-dua reseptor mu- dan kappa- opioid (Sim-Selley et al., 2011), dan mereka yang reseptor bertambah dan menghalang nada mesolimbi (Manzanares et al., 1991 and Devine et al., 1993). Tambahan pula, ungkapan jenis sel juga boleh mengubah secara drastik kesan-kesan fungsian daripada peningkatan FosB / DeltaFosB. Dalam kajian yang elegan menggunakan tikus yang menggambarkan DeltaFosB dalam D1- atau D2- menyatakan neuron dalam nukleus accumbens mendedahkan bahawa DeltaFosB dalam neuron D1- (tetapi tidak dalam D2-) meningkatkan tindak balas tindak balas terhadap kokain (Grueter et al., 2013).

Anehnya, mengenai korteks motor, terdapat peningkatan ekspresi FosB / DeltaFosB hanya dalam kumpulan EtOH_High, dan ia dibatasi pada hari ke-5 penarikan. Kekurangan kenaikan pada penarikan 18 jam dapat dijelaskan oleh kemungkinan mekanisme toleransi dalam ekspresi FosB / DeltaFosB di wilayah ini setelah pendedahan etanol kronik. Selanjutnya, hasil kajian kami menunjukkan bahawa terdapat perubahan neurokimia aktif pada korteks motor semasa tempoh penarikan, walaupun pada hakikatnya haiwan tersebut tidak dimanipulasi dalam tempoh ini. Ini menarik, kerana keplastikan ini dapat memainkan peranan, sekurang-kurangnya sebahagiannya, dalam menjaga pemekaan lokomotor. Walaupun hiperlokomosi yang berterusan setelah beberapa hari penarikan diri tidak dikaji di sini, terdapat beberapa kajian, termasuk kajian sebelumnya dari Makmal kami, yang menunjukkan bahawa tikus yang peka (tetapi tidak sensitif) telah meningkatkan pergerakan ketika dicabar dengan etanol setelah tempoh penarikan yang diberikan (Masur dan dos Santos, 1988, Souza-Formigoni et al., 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012, Fallopa et al., 2012 and Coelhoso et al., 2013).

Akhirnya, perlu diperhatikan bahawa hanya kumpulan EtOH_Low yang menunjukkan ungkapan FosB / DeltaFosB yang meningkat di bahagian anterior (tetapi tidak posterior) kawasan tegegalal ventral. Bahagian ini mempunyai unjuran yang berbeza dan profil neurokimia, dan penyertaan mereka dalam proses ganjaran bergantung kepada beberapa faktor (Ikemoto, 2007). Contohnya, pentadbiran etanol kendiri tikus berkaitan dengan posterior, tetapi tidak dengan bahagian ventral dari kawasan tegmental ventral (Rodd-Henricks et al., 2000 and Rodd et al., 2004). Tambahan pula, sistem endokannabinoid, serta GABA-A, dopaminergik D1-D3, dan reseptor serotoninergik 5HT3, memainkan peranan penting dalam etanol mencari tingkah laku (Linsenbardt dan Boehm, 2009, Rodd et al., 2010, Melon dan Boehm, 2011b and Hauser et al., 2011). Walau bagaimanapun, GABA-B di bahagian anterior kawasan tegar ventral adalah penting dari segi ganjaran (Moore dan Boehm, 2009) dan kesan locomotor perangsang (Boehm et al., 2002) etanol. Tambahan pula, reseptor nikotinik cholinergik di bahagian anterior terlibat dalam peningkatan tahap dopamin akumulasi yang disebabkan oleh etanol (Ericson et al., 2008). Oleh itu, tidak kira profil yang berbeza dari bahagian-bahagian ini, mungkin perubahan yang dilihat dalam kumpulan EtOH_Low di bahagian anterior mungkin berkaitan dengan proses ganjaran. Kokain kronik tetapi tidak morfin kronik atau pendedahan stres kronik meningkatkan DeltaFosB di kawasan tegegal ventral, khususnya dalam populasi sel asid gamma-aminobutyric (GABA)Perrotti et al., 2005). Fakta ini boleh menerangkan tahap normal FosB / DeltaFosB sepanjang pengeluaran yang ditemui di kawasan tegar ventral tikus EtOH_High, tanpa menghiraukan pengalaman tekanan tinggi dalam tempoh ini. Tambahan pula, data ini menyokong, sekurang-kurangnya sebahagiannya, hipotesis bahawa peningkatan ekspresi FosB / DeltaFosB sepanjang pengeluaran dalam EtOH_Low boleh disifatkan sebagai tindak balas penyesuaian.

Perbezaan individu yang diperhatikan semasa peralihan dari penggunaan rekreasi kepada penagihan dadah adalah luar biasa (Flagel et al., 2009, George dan Koob, 2010 and Swendsen dan Le Moal, 2011). Akibatnya, adalah penting untuk mengkaji ciri-ciri neurobiologi yang berkaitan dengan kepelbagaian individu. Pemekaan kelakuan adalah model haiwan yang biasa digunakan untuk menyiasat ciri neurobiologi ketagihan dadah. Asas model ini adalah bahawa kesan subjektif ubat meningkat sepanjang pendedahan berulang. Apabila diperoleh, kepekaan lokomotor adalah berpanjangan dan berada dalam hubungan sementara langsung dengan perubahan morfologi dan neurokimia dalam laluan mesolimbi dan beberapa nukleus encephalic yang berkaitan dengan emosi dan tingkah laku motor (Robinson dan Kolb, 1999 and Vanderschuren dan Pierce, 2010). Satu kajian perintis yang dijalankan oleh Masur dan dos Santos (1988) menunjukkan bahawa terdapat variasi perilaku yang besar dalam tikus Swiss yang peduli mengenai sensitisasi locomotor yang disebabkan etanol. Sejak itu, kajian-kajian lain telah menunjukkan hubungan yang penting antara ciri-ciri neurokimia dan kepelbagaian perilaku, terutamanya yang berkaitan dengan dopaminergik (Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012 and Souza-Formigoni et al., 1999) dan sistem glutamatergik (Quadros et al., 2002a and Quadros et al., 2002b). Tambahan pula, kajian sebelumnya dari makmal kami menggunakan paradigma pemekaan locomotor yang disebabkan etanol menunjukkan bahawa tikus yang sensitif (tetapi tidak tidak sensitif) membentangkan peningkatan yang luar biasa pada jenis reseptor cannabinoid 1 (CB1R) semasa tempoh pengeluaran (Coelhoso et al., 2013). Di sini kami mengenal pasti corak FosB / DeltaFosB yang berbeza semasa pengeluaran antara kumpulan EtOH_High dan EtOH_Low.

Untuk meringkaskan, kebolehubahan tingkah laku yang diperhatikan dalam fasa pengambilalihan etanol yang disebabkan pemekaan locomotor disertai dengan kepekaan neuron yang berbeza semasa tempoh pengeluaran. Menariknya, keputusan kami menunjukkan bahawa corak FosB / DeltaFosB yang berbeza yang dikesan dalam tikus yang sensitif dan tidak peka lebih berkaitan dengan tempoh pengeluaran dan bukannya pendedahan dadah kronik, mungkin disebabkan oleh toleransi transkripsi FosB / DeltaFosB yang disebabkan oleh dadah.

Berikut adalah data tambahan yang berkaitan dengan artikel ini.

Penghargaan

RFP dan CCC menerima persahabatan induk dari CAPES dan FAPESP, masing-masing. CTC, LEM, DXS dan JGSJ diberikan oleh FAPESP and CNPq.

Rujukan

  •  
  • Penulis yang sepadan di: Rua Cesário Mota Jr, 61, 12 andar, São Paulo, SP 01221-020, Brazil. Tel./fax: + 55 11 33312008.
  • 1
  • Penulis-penulis ini turut mengambil bahagian dalam kajian ini.

Hakcipta © 2013 Elsevier Inc.