CRF-CRF1 System Receptor di Central and Basolateral Nuclei of Amygdala Differential Mediates Makan Berlebihan Makanan Palatable (2013)

. 2013 Nov; 38 (12): 2456-2466.

Diterbitkan dalam talian 2013 Jul 10. Dipersiapkan dalam talian 2013 Jun 10. doi:  10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Abstrak

Makanan dan diet yang sangat enak adalah faktor penyumbang utama kepada perkembangan makanan kompulsif dalam obesiti dan gangguan makan. Kami sebelum ini menunjukkan bahawa akses sekejap-sekejap kepada hasil makanan yang enak dalam faktor pembebasan kortikotropin-1 (CRF1) reseptor tingkah laku antagonis yang boleh diterbalikkan, termasuk pengambilan makanan yang terlalu banyak, hypophagia chow biasa, dan kelakuan seperti kecemasan. Walau bagaimanapun, kawasan otak yang menengahi kesan-kesan ini masih belum diketahui. Tikus Wistar lelaki sama ada makan secara berterusan untuk 7 hari / minggu (Chow / Chow kumpulan), atau diberi makan secara serentak 5 hari / minggu, diikuti dengan sukrosa, diet 2 sehari / minggu yang lazat (Chow / Palatable kumpulan). Berikutan peralihan diet kronik, kesan microinfusing CRF1 reseptor antagonis R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / sebelah) dalam nukleus pusat amygdala (CeA), nukleus basolateral amygdala (BLA), atau nukleus bed of stria terminalis (BNST) daripada diet yang lazat, hipofagia chow, dan kelakuan seperti kecemasan. Tambahan pula, imunostaining CRF dinilai di dalam otak tikus pemakanan diet. Intra-CeA R121919 menyekat kedua-dua pengambilan makanan yang terlalu banyak dan kelakuan seperti kecemasan Chow / Palatable tikus, tanpa menjejaskan hypophagia chow. Sebaliknya, intra-BlA R121919 mengurangkan hypophagia chow dalam Chow / Palatable tikus, tanpa menjejaskan pengambilan makanan yang terlalu banyak atau kelakuan seperti kecemasan. Rawatan Intra-BNST tidak mempunyai kesan. Rawatan tidak mengubah tingkah laku Chow / Chow tikus. Immunohistochemistry mendedahkan peningkatan jumlah sel CRF-positif di CeA-tetapi tidak dalam BlA atau BNST-of Chow / Palatable tikus, semasa kedua-dua pengeluaran dan memperbaharui akses ke diet yang enak, berbanding dengan kawalan. Keputusan ini memberikan bukti fungsi CRF-CRF1 sistem reseptor di CeA dan BlA mempunyai peranan yang berbeza dalam mengantarkan tingkah laku maladaptif akibat daripada berbasikal diet yang sesuai.

Kata kunci: faktor kelahiran kortikotropin, BNST, ketagihan, kebimbangan, hypophagia, tikus

PENGENALAN

Makanan yang sangat enak (contohnya, makanan kaya dengan gula dan / atau lemak) dipercayai merupakan faktor penyumbang utama dalam kemunculan makan kompulsif dalam beberapa bentuk obesiti dan gangguan makan (; ). Banyak analogi wujud antara ketagihan dadah dan pengambilan makanan yang sangat enak, termasuk kehilangan kawalan ke atas ubat / makanan, ketidakupayaan untuk menamatkan penggunaan / makan berlebihan walaupun akibat negatif, kesusahan, dan kegemparan ketika cuba menghindari dadah / makanan (; ). Gejala-gejala biasa ini telah dicadangkan untuk timbul daripada disfungsi litar otak, yang bertindih dalam penagihan dadah dan makan kompulsif.

Jenis kelahiran kortikotropin jenis 1 (CRF1) antagonis reseptor telah dicadangkan sebagai sasaran terapeutik baru untuk gangguan ketagihan kerana keupayaan mereka untuk mengurangkan kesan motivasi pengeluaran (). CRF adalah mediator kritikal terhadap endokrin, simpatik, dan tindak balas tindak balas terhadap stres (; ). CRF dalam nukleus paraventricular hypothalamus mengawal respon hipotalamus-pituitari-adrenal (HPA) terhadap stres, sedangkan kesan tingkah laku CRF adalah HPA yang bebas dan dimediasi oleh kawasan otak extrahypothalamic (). CRF-CRF extrahypothalamic1 Sistem reseptor direkrut bergantung kepada semua ubat penyalahgunaan yang diketahui melalui kitaran mabuk / penarikan, dan hiperaktivasi ini dianggap sebagai elemen yang sama, mempromosikan pengambilan dadah yang berlebihan melalui mekanisme negatif yang diperkuat (iaitu, pengambilan ubat kompulsif yang dihasilkan oleh penghapusan pengeluaran- keadaan emosi negatif disebabkan; ; ; ).

Walaupun persamaan antara ubat-ubatan penyalahgunaan dan makanan telah dikaji secara meluas berkenaan dengan sifat penguat positif mereka (iaitu, pengambilan makanan berlebihan yang dihasilkan dengan mendapatkan kesan yang menyenangkan; ; ; ; ; ), hipotesis bahawa pengambilan makanan yang berlebihan boleh berlaku sebagai bentuk 'ubat-ubatan sendiri' untuk melegakan keadaan emosi negatif yang berkaitan dengan penarikan diri dari makanan yang sangat sedap adalah kurang dipelajari (; ; ).

Sebelum ini kami telah menunjukkan bahawa pengeluaran dari akses kronik, sekejap-sekejap kepada makanan yang sangat enak menyebabkan pengambilan sistem CRF extrahypothalamic dan kemunculan CRF1 tingkah laku maladaptive yang bergantung kepada reseptor, termasuk pengambilan makanan berlebihan apabila akses yang diperbaharui kepada diet yang sangat enak, hypophagia dari diet chow yang boleh diterima, dan kelakuan seperti kecemasan semasa pantang ().

Walau bagaimanapun, bukti fungsi langsung mengenai kawasan otak yang bertanggungjawab terhadap CRF1 Penyesuaian tingkah laku yang bergantung kepada reseptor yang disebabkan oleh berbasikal diet yang enak hilang. Oleh itu, kajian ini bertujuan untuk menentukan sama ada antagonisme spesifik tapak CRF1 reseptor di dalam nukleus pusat amygdala (CeA), nukleus basolateral amygdala (BlA) atau nukleus katil stria terminalis (BNST) dapat menghalang pengambilan makanan yang sangat enak, hipofagia yang disebabkan oleh reguler chow, dan kelakuan seperti kecemasan. Di samping itu, kajian ini bertujuan untuk menentukan sama ada ekspresi CRF di CeA, BlA, dan BNST meningkat pada tikus pemakanan yang dikitarkan berbanding dengan kawalan, menggunakan imunohistokimia. Walaupun sebelum ini kami telah menunjukkan bahawa pengeluaran dari makanan enak dikaitkan dengan ekspresi CRF yang lebih tinggi di CeA, bagaimana BlA dan BNST yang terjejas oleh berbasikal diet kini tidak diketahui.

BAHAN DAN KAEDAH

Mata pelajaran

Tikus Wistar lelaki (n= 140, tikus 33 untuk eksperimen CeA, tikus 46 untuk eksperimen BlA, tikus 39 untuk eksperimen BNST, dan tikus 22 untuk eksperimen imunohistokimia; Jadual Tambahan 1), dengan berat 180-230 g dan 41-47 pada hari ketibaan (Charles River, Wilmington, MA, Amerika Syarikat), adalah satu-satunya yang ditempatkan di atas wayar, sangkar plastik (27 × 48 × 20 cm) kitaran (lampu pada waktu 12), dalam kelembapan yang diluluskan AAALAC- (1100%) dan vivarium yang dikawal suhu (60 ° C). Tikus telah iklan libitum akses kepada chow berasaskan jagung (Harlan Teklad LM-485 Diet 7012; karbohidrat kcal 65%, lemak 13%, protein 21%, tenaga metabolizable 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, . Prosedur yang digunakan dalam kajian ini mematuhi Institut Panduan Kesihatan Nasional untuk Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Makmal (nombor penerbitan NIH 85-23, 1996 yang disemak semula) dan Prinsip-prinsip Penjagaan Haiwan Makmal, dan telah diluluskan oleh Institusi Kampus Perubatan Universiti Boston Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan.

Dadah

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropyl-pyrazolo [2,3-a] pyrimidin-7-amine, NBI 30775) telah disintesis seperti yang dijelaskan dalam ). R121919 adalah CRF yang kuat, tidak peptida, tinggi afiniti1 antagonis reseptor (Ki= 2-5 nM), yang menunjukkan aktiviti 1000-lipat lemah pada CRF2 reseptor, protein CRF-mengikat, atau jenis reseptor 70 lain (). R121919 telah dilarutkan menggunakan campuran 18: 1: 1 asin: etanol: cremophor.

Ujian Kelakuan

Akses libitum libatum akses alternatif diet

Akses kepada iklan libitum Perbezaan diet yang lazat telah dilakukan seperti yang dinyatakan sebelum ini (, , ; ). Secara ringkas, selepas penyesuaian, tikus dibahagikan kepada dua kumpulan yang dipadankan untuk pengambilan makanan, berat badan, dan kecekapan suapan pada hari-hari sebelumnya 3-4. Satu kumpulan kemudian disediakan iklan libitum akses kepada diet chow (Chow) untuk hari 7 seminggu (Chow / Chow, kumpulan kawalan kajian ini) manakala kumpulan kedua disediakan dengan akses percuma untuk chow untuk 5 hari seminggu, diikuti oleh 2 hari iklan libitum untuk diet yang sangat enak, coklat, berperisa, tinggi sukrosa (Palatable; Chow / Palatable kumpulan). Semua ujian tingkah laku dilakukan pada tikus yang menjalani diet selama sekurang-kurangnya 7 minggu. Diet 'chow' adalah makanan berasaskan jagung yang diuraikan di atas dari Harlan, sedangkan diet yang enak adalah diet lengkap, berperisa coklat, sukrosa tinggi (50% kkal), diet berasaskan AIN-76A yang setanding dengan makronutrien perkadaran dan ketumpatan tenaga kepada diet chow (formula berperisa coklat 5TUL: karbohidrat 66.7% kcal, lemak 12.7%, protein 20.6%, tenaga yang dapat dimetabolisme 344 kcal / 100 g (Diet Uji, Richmond, IN, AS) dirumuskan sebagai ketepatan 45 mg pelet makanan untuk meningkatkan keutamaannya). Untuk jangka masa pendek, 5 hari pertama (chow only) dan 2 hari terakhir (chow atau sedap mengikut kumpulan eksperimen) setiap minggu disebut dalam semua eksperimen sebagai C and P fasa. Diet yang enak disediakan di GPF20 'J'-feeders (Ancare, Bellmore, NY, USA). Diet tidak pernah disediakan secara serentak.

Eksperimen pengambilan makanan

Tikus telah disediakan dengan makanan pra-ditimbang di kandang rumah mereka pada permulaan kitaran gelap. Rawatan diberikan pada tikus yang diet berkitar selama sekurang-kurangnya 7 minggu setelah memperbaharui akses ke diet yang enak (C→P fasa), atau kepada diet chow (P→C fasa). R121919 telah dibina secara mikro secara automatik di dalam CeA, BlA, atau BNST (0, 0.5, dan 1.5 μg / sampingan, 0.5 μl / sampingan, 30-min masa pra-rawatan) menggunakan reka bentuk persegi persegi dalam rawak.

Ujian kotak cahaya gelap

Tikus telah diuji untuk min 10 dalam kotak segi empat tepat gelap (50 × 100 × 35 cm) di mana petak cahaya aversive (50 × 70 × 35 cm) diterangi oleh cahaya lux 60. Bahagian gelap (50 × 30 × 35 cm) mempunyai penutup legam dan ~0 cahaya yang terang. Dua petak itu dihubungkan dengan pintu terbuka, yang membolehkan subjek bergerak bebas antara kedua-dua. Ujian berlaku berikutan sekurang-kurangnya 7 weeks of diet alternation, 5-9 h selepas suis dari diet sedap ke diet chow (P→C fasa); titik masa ini memastikan berlakunya kebiasaan seperti kebimbangan yang disebabkan oleh penarikan diri dari makanan yang enak Chow / Palatable tikus (, ). Tikus disimpan di anteroom yang gelap dan gelap sekurang-kurangnya 2 h sebelum ujian. Bunyi putih hadir sepanjang habituation dan ujian. Pada hari ujian, tikus telah dibiakkan secara mikro secara bilateral dengan R121919 dalam CeA, BlA, atau BNST (0, 0.5, dan 1.5 μg / sampingan, 0.5 μl / sampingan) 30 min sebelum dimasukkan ke dalam petak gelap menghadap pintu dan tingkah lakunya adalah rakaman video untuk pemarkahan kemudian. Rawatan diberikan menggunakan reka bentuk antara subjek. Masa yang dibelanjakan dalam petak terbuka diukur sebagai indeks kelakuan seperti kecemasan. Alat itu dibersihkan dengan air dan dikeringkan selepas setiap subjek.

Pembedahan Intrakranial, Prosedur Mikro Penghidratan, dan Penempatan Cannula

Pembedahan intrakranial

Tikus telah stereotaxically ditanam dengan dua hala, cannulas intrakranial seperti yang dinyatakan sebelum ini (; ; ). Secara ringkas, keluli tahan karat, kanula panduan (24 gauge, Plastics One, Roanoke, VA, USA) diturunkan dua hala 2.0 mm di atas CeA, BlA, atau BNST. Empat skru perhiasan keluli tahan karat diikat pada tengkorak tikus di sekitar kanula. Resin gigi restoratif yang diisi gigi (Henry Schein, Melville, NY, USA) dan semen akrilik digunakan, membentuk alas yang menahan kuat kanula. Koordinat kanula dari bregma yang digunakan untuk CeA adalah: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (dari tengkorak) dengan batang gigi seri yang terletak 5.0 mm di atas garis interaural, menurut atlas ). Koordinat cannula yang digunakan untuk BlA adalah: AP -2.64, ML ± 4.8, DV -6.5 (dari tengkorak) dengan tengkorak rata, mengikut ). Koordinat cannula yang digunakan untuk BNST ialah: AP-0.6, ML ± 3.5, DV -4.8 (dari tengkorak) dengan tengkorak rata dan sudut kecondongan 14 °. A stylet dummy stainless steel (Plastics One) mengekalkan patensi kanula. Selepas pembedahan, tikus dibenarkan tempoh pemulihan 7-hari, di mana mereka ditangani setiap hari.

Prosedur pembiakan mikro

Ubat adalah mikroinfak di otak tikus seperti yang dijelaskan sebelumnya (; ). Untuk microinfusion intrakranial, stylet dummy dikeluarkan dari kannula panduan, dan digantikan dengan penyuntik keluli tahan karat 31-tolok yang memproyeksikan 2 mm di luar hujung kannula panduan; penyuntik disambungkan melalui tiub PE 20 ke Hamilton microsyringe (Hamilton, Reno, Nevada) didorong oleh pam mikroinfusi berbilang jarum (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, USA). Mikroinfusions dilakukan dalam jumlah 0.5 μl yang dihantar melebihi min 2; penyuntik dibiarkan untuk minit tambahan 1 untuk meminimumkan aliran balik.

Penempatan Cannula

Penempatan Cannula telah diverifikasi pada kesimpulan semua ujian (lihat Rajah 1). Subjek adalah anestetik (isoflurane, 2-3% dalam oksigen) dan transcardially perfused dengan 4% paraformaldehyde (pFA) dalam air (pH 7.4) dan microinfused dengan Cresyl violet (0.5 μl / side). Otak kemudiannya dipasang semalaman dalam 4% PFA dan diimbangi dalam 30% sucrose di PFA. Bahagian korona 40 μm dikumpulkan menggunakan cryostat (Thermo Scientific HM-525) dan penempatan telah disahkan di bawah mikroskop. Empat puluh mata pelajaran (14 untuk CeA, 16 untuk BlA, dan 10 untuk BNST) dikecualikan daripada analisis kerana penempatan kannula yang salah. Data daripada peletakan yang salah dianalisis untuk membantu menafsirkan spesifik tapak kesan.

Rajah 1 

Melukis potongan otak tikus koronal. Titik mewakili tempat suntikan di nukleus tengah amigdala (CeA) (a), nukleus basolateral amigdala (BlA) (b) dan nukleus dasar stria terminalis (BNST) (c) yang termasuk dalam analisis data. ...

CRF Immunohistochemistry

Prosedur tingkah laku, perfusi, dan imunohistokimia

Tikus (n= 22) adalah pemakanan yang dikitarkan untuk minggu 7, anestetik, dan pernafasan 2-4 h selepas dihidupkan sama ada dari diet sedap ke diet chow (P→C fasa) atau dari diet chow ke diet yang enak (C→P fasa). Tikus telah dibius secara anestetik dan kemudian dibakar dengan saline + 2% (w / v) natrium nitrite (pH = 7.4) terlebih dahulu, dan dengan 4% paraformaldehyde buffered di Borax (pH = 9.5) seterusnya. Tikus kemudian dipenggal dan otak segera dikumpulkan, diletakkan di ~ 20 ml 4% PFA, dan disimpan dalam sukrosa% 30 dalam larutan 4% PFA pada 4 ° C sehingga tepu.

Untuk visualisasi CRF, otak dipotong menjadi bahagian koronal 40 μm menggunakan cryostat dan kemudian disimpan dalam cryoprotectant pada suhu −20 ° C. Setiap bahagian keenam (jarak 240 μm) dari keseluruhan CeA, BlA, dan BNST dipilih secara rawak sistematik dan diproses untuk imunoktokimia. Bahagian terapung bebas dicuci dalam garam penyangga kalium fosfat (KPBS). Selepas pencucian awal, bahagian mendapat pengeraman dalam larutan KPBS hidrogen peroksida 0.3% selama 30 minit untuk menyekat peroksidase endogen. Bahagian kemudian dicuci lagi dan dimasukkan ke dalam larutan penyekat (3% serum kambing normal, 0.25% Triton X100, dan 0.1% albumin serum sapi) selama 2 jam. Bahagian kemudian dipindahkan ke antibodi primer (pengenceran 1: 100, anti-CRF (sc-10718), Bioteknologi Santa Cruz) dalam larutan penyekat dan diinkubasi selama 72 jam pada suhu 4 ° C. Setelah mencuci tambahan, bahagian diinkubasi menjadi antibodi sekunder (pengenceran 1: 1000, makmal Vektor anti-arnab biotinilasi (BA-1000), Burlingame, California) dalam larutan penyekat selama 2 jam pada suhu bilik. Bahagian dibasuh dan kemudian diinkubasi dalam larutan avidin-biotin lobak peroksidase ABC (Vector Laboratories) dalam larutan penyekat selama 1 jam. Bahagian kemudian diinkubasi menggunakan kit substrat diaminobenzidin (Laboratorium Vektor) mengikut arahan pengeluar dan setelah reaksi selesai bahagian dibilas dalam KPBS, dipasang ke slaid dan dibiarkan kering semalaman. Pada keesokan harinya, slaid dinyahhidrasi menggunakan kepekatan alkohol yang digredkan dan ditutup dengan penutup DPX (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, USA).

Kuantifikasi sel CRF + badan

Pengiraan sel-sel sel CRF + dilakukan mengikut pendekatan stereologi yang tidak berat sebelah. Siri kerangka dianalisis untuk setiap kumpulan pewarnaan. Bahagian-bahagian telah dianalisis dengan menggunakan mikroskop BX-51 Olympus (Center Valley, PA, Amerika Syarikat) dilengkapi dengan kamera video hidup Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Kanada), peringkat bermotor tiga axis MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, Amerika Syarikat), dan stesen kerja komputer peribadi. Semua kiraan sel dibuat pada slaid berkod oleh penyiasat yang buta terhadap keadaan rawatan. Setiap rantau digariskan secara hampir pada imej digital setiap rawak yang dipilih menggunakan modul aliran kerja pengkritik optik perisian Stereo Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, Amerika Syarikat). Semua kontur telah dibesarkan dengan pembesaran rendah menggunakan objektif Olympus PlanApo N 2X dengan aperture berangka 0.08 dan dikira menggunakan objektif Olympus UPlanFL N 40X dengan aperture berangka 0.75. Bingkai grid dan bingkai pengiraan telah ditetapkan kepada 275 × 160 μm. Zon pengawal 2 μm dan ketinggian penukar 20 μm telah digunakan. Bahagian beku asalnya dipotong pada ketebalan nominal 40 μm. Mengimunkan dan menaikkan hasil ketebalan bahagian yang diubah, yang diukur di setiap tapak pengiraan. Ketebalan bahagian purata dikira oleh perisian dan digunakan untuk menganggarkan jumlah keseluruhan rantau sampel dan jumlah sel CRF +.

Analisis Statistik

Pelajar t-tests digunakan untuk menganalisis faktor dengan dua tingkatan. ANOVA telah dilakukan untuk menganalisis faktor dengan lebih daripada dua tahap. Berikutan kesan omnibus yang ketara ANOVA (p<0.05), Fisher's LSD post hoc ujian perbandingan digunakan. Ujian Dunnett digunakan untuk menentukan sama ada R121919 menormalkan pengambilan Chow / Palatable tikus ke kenderaan yang dirawat Chow / Chowtahap makanan. Pakej perisian / grafik yang digunakan ialah Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Chicago, IL, USA), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, Amerika Syarikat), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, Statistik 18.0 (SPSS, Chicago, IL, Amerika Syarikat).

KEPUTUSAN

Kesan Pengeluaran Mikro R121919 ke CeA

Pengambilan makanan yang enak yang berlebihan

Untuk menentukan sama ada CRF1 reseptor di CeA memeterai pengambilan makanan yang enak dalam diet tikus pemakanan yang berlebihan, laman web mikroinfused kami khusus CRF selektif1 reseptor antagonis R121919 ke kawasan otak ini dan mengukur pengambilan makanan pada permulaan P fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2a, pengambilan makanan yang dimakan oleh makanan yang dimasak kenderaan Chow / Palatable tikus dua kali ganda lebih tinggi daripada kawalan daging babi Chow / Chow tikus. Antagonisme CeA CRF1 reseptor sepenuhnya menyekat makanan berlebihan ini makanan enak di dalam Chow / Palatable tikus, tanpa menjejaskan pengambilan makanan dalam tikus kawalan (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Palatable, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc perbandingan menunjukkan bahawa dos tertinggi R121919 (1.5 μg / sampingan) mengurangkan pengambilan makanan enak berbanding dengan kenderaan Chow / Palatable tikus. Pengambilan Chow / Palatable tikus berikutan pengambilan mikro dari dos μg / side 1.5 tidak jauh berbeza daripada pengambilan dirawat kenderaan Chow / Chow tikus. Mengesahkan kekhususan kesan CRF1 reseptor di CeA, tiada kesan diperhatikan dalam pengambilan makanan subjek dengan cannulae yang tidak dijumpai (Chow / Palatable, F (2, 2) = 4.32, NS).

Rajah 2 

Kesan pengambilan mikro terhadap faktor pembebasan kortikotropin selektif-1 (CRF1) reseptor antagonis R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / sampingan) dalam nukleus pusat amygdala (CeA) mengenai makanan yang terlalu banyak makanan yang lazat, hypophagia biasa ...

Hypophagia dari diet chow biasa

Untuk menentukan sama ada CRF1 reseptor di CeA memediasi hypophagia diet chow di tikus pemakanan diet, kami menghidupkan R121919 ke kawasan otak ini dan mengukur pengambilan makanan pada permulaan C fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2b, pengambilan kenderaan yang dirawat Chow / Palatable tikus adalah ~ 1 / 3 pengambilan kenderaan yang dirawat Chow / Chow tikus (hypophagia). Rawatan R121919 tidak menjejaskan hypophagia daripada chow tetap di Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 12) = 0.14, NS). Mengesahkan keputusan yang diperolehi dalam P fasa, R121919 microinfusion di CeA tidak mempengaruhi pengambilan chow dalam kawalan Chow / Chow tikus (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.01, NS).

Tindak balas seperti kecemasan yang disebabkan oleh pengeluaran akut

Untuk menentukan sama ada CeA CRF1 reseptor mengetengahkan keadaan emosi negatif yang disebabkan oleh pengeluaran makanan yang enak dalam tikus-gelekan yang bersepah, kami mengendalikan laman web khusus R121919 ke kawasan otak ini dan mengukur kebiasaan seperti kebimbangan menggunakan ujian kotak cahaya gelap 5 h ke dalam C fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2c, tikus yang dikeluarkan secara akut dari akses kronik, sekejap-sekejap ke diet yang sangat enak memperlihatkan penurunan yang ketara dalam masa yang digunakan dalam petak cahaya kotak gelap. Pengurangan mikro dari 1.5 μg / sampingan R121919 di CeA, dos yang berkesan mengurangkan makanan berlebihan makanan enak, menyekat kebiasaan seperti kecemasan dengan meningkatkan masa yang dihabiskan di kawasan cahaya di dalam kotak Chow / Palatable tikus, tanpa menjejaskan tingkah laku dalam Chow / Chow tikus (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Mengesahkan kekhususan kesan untuk CRF1 reseptor di CeA, tiada kesan diperhatikan dalam pengambilan makanan subjek dengan cannulae yang tidak dijangka (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Kesan pengambilan mikro R121919 ke dalam BlA

Pengambilan makanan yang enak yang berlebihan

Untuk menentukan sama ada CRA CRA1 reseptor memeterai makan berlebihan makanan yang enak di dalam tikus pemakanan diet, kami membuat laman web mikroinfus khusus R121919 ke kawasan otak ini dan mengukur pengambilan makanan pada permulaan P fasa. Tidak seperti apa yang diperhatikan selepas pentadbiran R1219191 ke CeA, seperti yang ditunjukkan di dalam Rajah 3a microinfusion bilateral CRF selektif1 antagonis reseptor ke dalam BlA tidak menjejaskan pengambilan makanan yang enak dalam Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 26) = 1.56, NS). Begitu juga, penggunaan chow tetap di Chow / Chow tikus tidak terjejas oleh microinfusion R121919 (Chow / Chow, F (2, 18) = 0.52, NS).

Rajah 3 

Kesan pengambilan mikro terhadap faktor pembebasan kortikotropin selektif-1 (CRF1) reseptor antagonis R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / sebelah) dalam nukleus basilateral amygdala (BLA) pada makanan berlebihan makanan enak, hypophagia biasa ...

Hypophagia dari diet chow biasa

Untuk menentukan sama ada CRF1 reseptor di BlA memeterai hypophagia chow pada tikus berkaki, kami menghidupkan R121919 ke dalam kawasan otak ini dan mengukur pengambilan makanan pada permulaan C fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3b, peningkatan ketara dalam pengambilan chow biasa telah diperhatikan berikutan pengambilan mikro CRF1 antagonis reseptor di BlA of Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Sesungguhnya, dos tertinggi (1.5 μg) R121919 mikroinfused di BlA selama C fasa meningkat dengan ketara penggunaan diet chow biasa dengan persentase 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) apabila dibandingkan dengan kenderaan yang dirawat Chow / Chow tikus. R121919 dilemahkan, tetapi tidak sepenuhnya menyekat, hypophagia yang disebabkan oleh pengeluaran pada dos tertinggi yang disuntik. Mengesahkan data yang diperolehi dalam P fasa, microinfusion R121919 tidak menjejaskan pengambilan chow tetap dalam Chow / Chow tikus (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.25, NS). Mengesahkan kekhususan kesan CRF1 reseptor di BlA, tiada kesan diperhatikan dalam pengambilan makanan subjek dengan cannulae yang tidak dijumpai (Chow / Palatable, F (2, 8) = 0.50, NS).

Tindak balas seperti kecemasan yang disebabkan oleh pengeluaran akut

Untuk menentukan sama ada CRA CRA1 reseptor menengahkan keadaan emosi negatif yang disebabkan oleh mengeluarkan makanan yang enak di tikus-tikus yang bersepah, kita merancang laman web secara mikro khusus R121919 ke dalam kawasan otak ini dan mengukur kebiasaan seperti kebimbangan 5 h ke dalam C fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3c, makanan yang menarik-ditarik balik Chow / Palatable tikus menghabiskan lebih sedikit masa di petak cahaya berbanding dengan Chow / Chow tikus (DIET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, yang disuntikkan mikro ke dalam BlA, tidak mempengaruhi masa yang dihabiskan di kawasan cahaya dengan ketara (DOSE: F (1, 39) = 0.01, NS).

Kesan Pengeluaran Mikro R121919 ke dalam BNST

Pengambilan makanan yang enak yang berlebihan

Untuk menentukan sama ada CRF BNST1 reseptor mengetengahkan makan makanan yang enak di dalam tikus pemakanan yang berlebihan, R121919 adalah tapak khusus mikroinfused ke kawasan otak ini dan pengambilan makanan diukur pada permulaan P fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4b, microinfusion bilateral CRF selektif1 antagonis reseptor ke dalam BNST tidak menjejaskan pengambilan makanan yang enak dalam Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 18) = 0.33, NS). Begitu juga, penggunaan chow tetap di Chow / Chow tikus tidak terjejas oleh microinfusion R121919 (Chow / Chow, F (2, 20) = 1.03, NS).

Rajah 4 

Kesan pengambilan mikro terhadap faktor pembebasan kortikotropin selektif-1 (CRF1) reseptor antagonis R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / side) di dalam katil nukleus stria terminalis (BNST) pada makanan berlebihan makanan enak, hypophagia ...

Hypophagia dari diet chow biasa

Untuk menentukan sama ada CRF BNST1 reseptor memeterai hypophagia diet chow di tikus berkaki, kami menghidupkan R121919 ke kawasan otak ini dan mengukur pengambilan makanan pada permulaan C fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4a, R121919 microinfusion tidak menjejaskan pengambilan chow biasa dalam Chow / Chow tikus (Chow / Chow, F (2, 14) = 0.03, NS). Begitu juga, rawatan R121919 tidak menjejaskan hypophagia chow biasa di Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 20) = 0.27, NS).

Tindak balas seperti kecemasan yang disebabkan oleh pengeluaran akut

Untuk menentukan sama ada CRF BNST1 reseptor menengahkan keadaan emosi negatif yang diinduksi dengan mengeluarkan makanan yang enak di tikus-tikus yang bersepah, kami secara mikroinfused khusus R121919 ke kawasan otak ini dan mengukur kebiasaan seperti kebimbangan 5 h selepas suis dari P→C fasa. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4c, makanan yang menarik-ditarik balik Chow / Palatable tikus menghabiskan masa kurang dalam petak cahaya berbanding dengan kawalan Chow / Chow tikus (DIET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, disuntikkan secara mikro dua kali ganda pada dos 1.5 μg / sisi ke dalam BNST tidak mempengaruhi masa yang dihabiskan di kawasan cahaya secara signifikan (DOSE: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF Immunohistochemistry

Rajah 5 menggambarkan mikrograph perwakilan sel CRF + di CeA, BlA, dan BNST di Chow / Chow and Chow / Palatable tikus, berikutan iklan libitum prosedur penggantian diet yang enak. Analisis imunoreaktiviti CRF CeA mendedahkan bahawa perbezaan ketara antara Chow / Palatable and Chow / Chow tikus semasa kedua-dua C dan juga P fasa (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Tidak ada perbezaan yang signifikan secara statistik antara kumpulan yang diperhatikan di BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) atau BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Rajah 5 

Mikrograf perwakilan faktor imunoreaktiviti kelahiran kortikotropin (CRF) di dalam nukleus pusat amygdala (CeA) (a-d), nukleus basolateral amygdala (BlA) (e-h), dan nukleus katil stria terminalis (BNST ) (i-l) ...

PERBINCANGAN

Kajian ini direka bentuk untuk mengenal pasti secara langsung laman web otak yang bertanggungjawab untuk pengambilan CRF yang berintegrasi yang berlebihan makanan yang sangat enak pada tikus di bawah rejim suntikan diet. Penemuan kami membuktikan peranan utama CeA dalam mengantarkan makanan berlebihan makanan yang sangat enak. Di samping itu, kami menunjukkan bahawa sistem CRF di BlA, berbeza dari CeA, mempunyai peranan dalam proses penurunan nilai yang berlaku apabila turun naik dalam ganjaran ganjaran makanan.

Sebelum ini kami telah menunjukkan bahawa kitaran berulang yang berulang dan penarikan akut dari diet manis, sangat halus menyebabkan makanan berlebihan makanan yang enak serta hipofagia yang bergantung kepada pengeluaran yang kerap dalam diet chow biasa dan kelakuan seperti kecemasan; , ). Makan yang berlebihan diperhatikan di sini adalah hipotesis yang didorong oleh keadaan emosi negatif yang disebabkan oleh episod berulang pengeluaran akut dari makanan yang sangat enak melalui CRF-CRF extrahypothalamic1 mekanisme yang dimediasi oleh sistem reseptor, yang menyerupai proses seperti 'penyalaan' yang mendasari gangguan ketagihan (; ; ; ).

Hasil kajian ini menunjukkan bahawa CRF1 reseptor CeA dan BlA yang berbeza memantapkan penyesuaian makan dan kelakuan seperti kecemasan tikus pemakanan diet kronik. Pentadbiran CRF selektif1 antagonis reseptor dalam CeA menyekat kedua-dua kebiasaan makan dan kebimbangan yang berlebihan dalam Chow / Palatable tikus, tanpa menjejaskan hypophagia diet yang tidak diterima secara tetap. Menariknya, pentadbiran R121919 ke dalam BlA, melemahkan hypophagia daripada diet chow yang kurang bersesuaian (iaitu, peningkatan pengambilan chow secara tetap) dalam Chow / Palatable tikus, tanpa menjejaskan kelakuan berlebihan atau kelakuan seperti kecemasan. Apabila microinfused dalam BNST, R121919 tidak menjejaskan mana-mana pembolehubah yang diukur dalam Chow / Palatable tikus (makan berlebihan diet yang sangat enak, pengambilan diet chow biasa dan tingkah laku seperti kebimbangan yang disebabkan oleh pengeluaran akut). Kesan farmakologi diperhatikan adalah terpilih untuk Chow / Palatable tikus kerana R121919, microinfused dalam CeA, BlA, atau BNST of Chow / Chow tikus kawalan, tidak memberi kesan. Oleh itu, CRF-CRF1 Sistem penerima reseptor CeA dan BlA kelihatan berbeza dengan menengahi hasil tingkah laku akibat daripada berbasikal diet yang kronik. Sebaliknya, CRF-CRF1 sistem reseptor BNST nampaknya tidak terlibat dalam penyesuaian tingkah laku yang disebabkan oleh perubahan diet yang enak.

Penemuan tingkah laku dan farmakologi kami disokong oleh pemerhatian bahawa immunoreactivity CRF dalam CeA of Chow / Palatable tikus meningkat dengan ketara berbanding dengan Chow / Chow tikus kawalan, semasa pengeluaran dari dan mengikuti akses semula ke diet yang sangat enak (). Menariknya, tiada perbezaan yang signifikan dalam imunoreaktiviti CRF di antara kumpulan yang diperhatikan dalam BlA atau BNST. Peningkatan immunoreaktiviti CRF diperhatikan di CeA of Chow / Palatable tikus adalah konsisten dengan penemuan kami sebelum ini bahawa pengeluaran akut dari diet yang enak dikaitkan dengan peningkatan pembebasan CRF di CeA (). Walau bagaimanapun, terutamanya kepada apa yang ditunjukkan sebelum ini, memperbaharui akses ke diet yang enak tidak menyebabkan penyataan CRF di CeA untuk mengawal tahap. Perbezaan antara hasil yang diperolehi di sini dan pemerhatian sebelumnya mungkin berkaitan dengan titik waktu pengumpulan otak yang berbeza, dan resolusi anatomi berbeza teknik yang digunakan untuk mengukur ekspresi CRF. Walau bagaimanapun, peningkatan ekspresi CRF di CeA semasa pengeluaran dan selepas akses yang diperbaharui ke diet yang enak adalah konsisten dengan kesan terpilih dari sekatan kelakuan seperti kecemasan (semasa pengeluaran) dan makan berlebihan (akses semula) dalam Chow / Palatable tikus. Oleh itu, ketidakkonsistenan antara kedua-dua kajian boleh ditafsirkan secara kolektif seperti berikut: semasa pengeluaran makanan yang rapi, ekspresi CRF meningkat di CeA daripada tikus berdimulasikan diet berbanding dengan kawalan dan ia bertanggungjawab untuk munculnya kesan negatif. Ekspresi CRF CeA masih diubah sehingga jam pertama akses yang sangat enak, mendorong makan berlebihan. Berikutan penggunaan makanan yang terlalu banyak, CRF kembali ke tahap kawalan ().

Hasil tingkah laku, farmakologi dan molekul menunjukkan sokongan hipotesis CRF-CRF1 sistem reseptor di CeA mempunyai peranan penting dalam pengantaraan keadaan afektif negatif dan pengambilan makanan yang enak dalam diet tikus pemakanan yang berlebihan, sama seperti apa yang telah ditunjukkan secara mendalam untuk ketergantungan alkohol dan dadah (). Malah, tikus yang bergantung kepada etanol menunjukkan peningkatan pengeluaran CRF di CeA semasa pengeluaran dan pentadbiran seorang antagonis reseptor CRF ke CeA dapat menghalang pentadbiran diri etanol yang meningkat semasa pengeluaran (; ). Secara analog, haiwan-haiwan yang bergantung pada opiate menunjukkan ekspresi CRF yang meningkat di CeA semasa pengeluaran () dan blokade reseptor CRF di CeA, tetapi bukan BNST, mengurangkan tanda-tanda penarikan diri (; ). Peranan utama CRF-CRF1 Sistem di CeA juga telah ditunjukkan dalam pergantungan nikotin. Sesungguhnya pengeluaran nikotin mecamylamine-precipitated dikaitkan dengan hiperaktivasi CRF-CRF1 sistem reseptor di CeA (), dan intra-CeA, tetapi tidak intra-BlA, mikroinfusi CRF1 antagonis reseptor mengurangkan ketinggian pengeluaran nikotin yang bergantung pada ambang ganjaran otak (). Dalam tikus yang bergantung kepada cannabinoid, pengeluaran yang diendapkan dikaitkan dengan ketinggian yang ditandakan dalam kepekatan CRF extracellular di CeA (). Secara keseluruhannya, bukti ini menyokong hipotesis CRF-CRF1 Sistem reseptor di CeA adalah pengantara utama kesan negatif yang disebabkan oleh pengeluaran akut, bersama dengan pengambilan dadah dan alkohol yang berlebihan semasa ketergantungan. Hasil kami memperluaskan pengetahuan ini kepada makanan berlebihan makanan yang sangat enak, menunjukkan bahawa penyesuaian analog yang serupa berlaku.

Keputusan kajian ini menunjukkan bahawa hypophagia yang bergantung kepada penarikan makanan yang enak dari diet chow kurang selera disemai oleh mikroinfusi dalam BlA CRF selektif1 reseptor antagonis, sedangkan pengambilan yang berlebihan dan kelakuan seperti kecemasan tidak terjejas oleh rawatan dadah intra-BlA. Penglibatan perbezaan CRA CRF-CRF1 sistem reseptor dalam hasil diet berbasikal menunjukkan bahawa hypophagia chow boleh mewakili proses tingkah laku bebas daripada tingkah laku seperti kecemasan. Sebaliknya, penemuan ini selaras dengan hipotesis bahawa BlA mengantarkan aspek sensori dan insentif peristiwa-peristiwa motivasi yang penting. Sesungguhnya terdapat banyak bukti bahawa BlA sangat kritikal dalam mengantarkan proses penurunan nilai dan respon aversive terhadap pengurangan ganjaran (iaitu, kesan Crespi, kontras negatif berturut-turut, penurunan nilai ganjaran, dan sebagainya; ; ; ), dan oleh kerana itu, hypophagia yang terhasil daripada suis dari diet yang sangat enak ke diet chow yang kurang bersesuaian mungkin mewakili proses penurunan nilai hedonik, bukannya mekanisme dependent homeostasis (iaitu, bebas dari pengambilan tenaga sebelumnya atau berat badan ; , ). Sekatan CRF1 reseptor dalam BlA, oleh itu, hipotesis untuk mengurangkan hipofagia chow (iaitu, untuk meningkatkan pengambilan chow) dengan mengurangkan proses penurunan nilai yang terjadi apabila beralih dari makanan yang sangat enak ke dalam chow yang kurang bersesuaian. Berkaitan dengan konteks ini juga tidak konsisten yang jelas antara hasil molekul dan tingkah laku / farmakologi yang diperolehi dalam BlA. Walaupun CRF1 antagonis reseptor dapat mengurangkan magnitud hipofagia chow apabila disuntik dalam BlA, tiada perbezaan ketara dalam imunoreaktiviti CRF yang diperhatikan di kawasan ini apabila membandingkan tikus kawalan dan diet. Kesimpulan yang jelas ini boleh dijelaskan memandangkan proses penurunan nilai yang bergantung kepada BLA ganjaran alternatif berlaku secara fisiologi dan mempunyai kepentingan evolusi penting dalam pemilihan makanan yang menghasilkan nilai pahala / tenaga tertinggi). Justeru, adalah dapat dipertikaikan bahawa pengantaraan proses-proses dalam BlA tidak memerlukan neuroadaptations dalam sistem CRF (serupa dengan yang diperhatikan di CeA). Sebagai menyokong hipotesis ini, sementara makan yang berlebihan memerlukan berbasikal diet kronik untuk berkembang, hipofagia daripada chow alternatif yang kurang dipilih berlaku selepas suis pertama dari diet yang sangat enak kembali ke chow biasa (). Di samping itu, adalah penting untuk menekankan bahawa, berdasarkan keputusan yang diperolehi dengan menyuntikkan antagonis reseptor CRF1 ke BlA dan CeA, CRF1 hipofagia yang bergantung kepada reseptor yang diperhatikan di sini nampaknya merupakan proses tingkah laku yang berbeza daripada anhedonia yang dilihat dalam pengeluaran dadah. Walau bagaimanapun, penarikan akut dari akses sekejap-sekejap kepada makanan yang enak telah ditunjukkan untuk mendorong tindak balas seperti hipohedonik seperti peningkatan immobilitas dalam ujian berenang paksa dan mengurangkan tindak balas dalam jadual nisbah progresif tetulang (; ).

Perlu diperhatikan bahawa, walaupun Chow / Palatable tikus telah dikitar semula diet kronik, perubahan tingkah laku dan neurokimia yang ditunjukkan di sini berlaku semasa akut, bukan kronik, penarikan diri dari diet yang enak. Menekankan aspek ini amat relevan seperti dalam penyelidikan ketagihan yang mendalam dalam akibat tingkah laku, farmakologi, dan neurokimia yang akut vs pantang berlarutan telah diperhatikan (; ). Kajian masa depan akan menjadi sangat berharga untuk menentukan bagaimana penangguhan berpanjangan boleh mempengaruhi hasil daripada berbasikal diet.

Titik perbincangan yang relevan adalah sama ada tingkah laku pengambilan makanan yang berlebihan yang kita amati dalam konteks model haiwan ini boleh dianggap 'kompulsif'. Dalam penyelidikan kecanduan praklinikal, istilah 'kompulsif' telah digunakan secara meluas untuk menggambarkan pengambilan ubat yang berlebihan semasa penarikan, yang didorong oleh keadaan afektif negatif dan lega setelah memperbaharui akses ke ubat (; ). Penerimaan istilah 'kompulsif' ini didasarkan pada kerangka konsep bahawa gangguan kompulsif ditandai dengan kegelisahan dan tekanan sebelum melakukan tingkah laku kompulsif, dan pelepasan dari tekanan dengan melakukan tingkah laku kompulsif (; ). Dalam konteks model haiwan yang digunakan di sini, tingkah laku makan yang berlebihan dapat ditafsirkan sebagai bentuk tingkah laku 'kompulsif' memandangkan bukti yang diterbitkan sebelumnya bahawa tikus dengan akses berselang-seli ke makanan yang sedap menunjukkan keadaan emosi negatif semasa pengeluaran makanan yang enak, yang dicirikan oleh tingkah laku seperti kegelisahan dan kemurungan, yang lega apabila memperbaharui akses (, ; ).

Secara ringkas, hasil kajian ini memberikan bukti fungsi kritikal bahawa CRF-CRF1 Sistem penerima reseptor CeA dan BlA mempunyai peranan berbeza dalam mengantarkan tingkah laku maladaptif yang disebabkan oleh akses sekejap-sekejap kepada makanan yang enak. Di CeA, CRF-CRF1 sistem reseptor adalah perantara utama makan berlebihan makanan yang sedap dan kesan negatif yang bergantung pada penarikan, sedangkan di BlA ia menjadi perantara tanggapan penolakan subjek yang disebabkan oleh pengurangan ganjaran.

PEMBIAYAAN DAN PENDEDAHAN

Penulis mengisytiharkan tiada konflik kepentingan.

Penghargaan

Kami mengucapkan terima kasih kepada Duncan Momaney, Aditi R Narayan, Jina Kwak untuk bantuan teknikal, dan Tamara Zeric untuk bantuan teknikal dan editorial. Kami juga mengucapkan terima kasih kepada Elena F Crawford atas cadangan bermanfaat yang berkaitan dengan imunohistokimia CRF. Penerbitan ini dimungkinkan oleh nombor geran DA023680, DA030425, MH091945, MH093650, dan AA016731, dari Institut Penyalahgunaan Dadah Nasional (NIDA), Institut Kesihatan Mental Nasional (NIMH), dan Institut Nasional Penyalahgunaan Alkohol dan alkohol NIAAA), oleh Profesor Pembangunan Kerjaya Peter PC (PC) dan oleh Program Peluang Penyelidikan Sarjana Universiti Boston (UROP). Penyelidikan ini juga disokong oleh Program Penyelidikan Intramural NIH dari Institut Nasional Penyalahgunaan Dadah, dan Institut Penyalahgunaan Alkohol dan Alkohol Nasional, NIH, DHHS. Kandungannya adalah tanggungjawab penulis semata-mata dan tidak semestinya mewakili pandangan rasmi Institut Kesihatan Nasional.

Nota kaki

 

Maklumat Tambahan mengiringi kertas di laman web Neuropsychopharmacology (http://www.nature.com/npp)

 

 

Bahan Tambahan

Maklumat Tambahan

Rujukan

  • Ahmed SH, Koob GF. Peralihan kepada penagihan dadah: model tetulang negatif berdasarkan pengurangan alostatik dalam fungsi ganjaran. Psychopharmacology (Berl) 2005; 180: 473-490. [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Model haiwan gula dan pesta gemuk: hubungan dengan ketagihan makanan dan peningkatan berat badan. Kaedah Mol Biol. 2012; 829: 351-365. [PubMed]
  • Bakshi VP, Kalin NH. Corticotropin-melepaskan hormon dan model haiwan kegelisahan: interaksi gen-alam sekitar. Biol Psikiatri. 2000; 48: 1175-1198. [PubMed]
  • Bale TL. Kepekaan terhadap tekanan: disregulasi laluan CRF dan perkembangan penyakit. Horm Behav. 2005; 48: 1-10. [PubMed]
  • Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. 2013aRimonabant merangsang kebimbangan pada tikus yang ditarik dari makanan yang enak: peranan pusat amygdala Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.153 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Sistem Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. Sistem 2013bOpioid di korteks prefrontal tengah menginisiasi makan seperti Addict Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Kerangka konsep untuk etiologi alkoholisme: hipotesis 'kindling' / tekanan. Psikofarmakologi (Berl) 2005; 178: 367–380. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M, et al. Sekatan reseptor CRF1 di nukleus utama amygdala mengatasi dysphoria yang berkaitan dengan pengeluaran nikotin dalam tikus. Pharmacol Biochem Behav. 2012; 101: 62-68. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, et al. Reka bentuk 2,5-dimetil-3- (6-dimetil-4-methylpyridin-3-yl) -7-dipropylaminopyrazolo [1,5-a] py rimidine (NBI 30775 / R121919) antagonis reseptor faktor kortikotropin yang melepaskan aktif. J Med Chem. 2004; 47: 4787-4798. [PubMed]
  • Corwin RL. Tikus mengejek: satu model tingkah laku berlebihan sekejap. Selera makan. 2006; 46: 11-15. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Corwin RL, Grigson PS. Gambaran keseluruhan Simposium-penagihan makanan: fakta atau fiksyen. J Nutr. 2009; 139: 617-619. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Memakan mikrostruktur dalam obesiti yang disebabkan oleh diet yang mudah terdedah berbanding tikus tahan: kesan pusat urocortin 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487-504. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, et al. Pengambilan sistem CRF mengiringi sisi gelap makan kompulsif. Proc Natl Acad Sci USA. 2009a; 106: 20016-20020. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, EP Zorrilla. Akses sekejap-sekejap ke makanan pilihan mengurangkan keberkesanan menguatkan chow pada tikus. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008; 295: R1066-R1076. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, EP Zorrilla. Penyesuaian, penyesuaian yang berkaitan dengan kecemasan dan metabolik pada tikus betina dengan akses bergantian kepada makanan pilihan. Psychoneuroendocrinology. 2009b; 34: 38-49. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, et al. Antagonisme reseptor sigma-1 menghalang makan seperti kompulsif. Neuropsychopharmacology. 2012; 37: 2593-2604. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF mengurus mediasi ansikogen dan anti-ganjaran, tetapi bukan kesan anorektik PACAP Neuropsychopharmacology: 10.1038 / npp.2013.113 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Faktor pembebasan kortikotropin di dalam nukleus utama amygdala mengantarkan etanol diri yang dikendalikan secara etanol dalam ditarik, tikus yang bergantung kepada etanol. J Neurosci. 2006; 26: 11324-11332. [PubMed]
  • George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, EP Zorrilla, Parsons LH, et al. Pengaktifan CRF-CRF1 sistem memantapkan peningkatan yang disebabkan oleh peningkatan dalam nikotin diri pentadbiran dalam tikus yang bergantung kepada nikotin. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 17198-17203. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H, et al. In vitro pencirian R121919: antagonis penerima reseptor non-peptida kanserotropin novel 1 (CRF1) untuk rawatan potensi kemurungan dan gangguan yang berkaitan dengan keresahan. Masyarakat untuk Neurosains. 2000; Abstrak 807: 4-9.
  • Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. Peranan makanan yang enak dan kelaparan sebagai faktor pencetus dalam model haiwan yang disebabkan tekanan makan pekat. Int J Eat Disord. 2003; 34: 183-197. [PubMed]
  • Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Luka neurotoksik basolateral, tetapi tidak tengah, amygdala mengganggu pengekalan pesanan kedua Pavlovian dan kesan penurunan nilai reinforcer. J Neurosci. 1996; 16: 5256-5265. [PubMed]
  • Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Penarikan akut, pantang berpanjangan dan negatif memberi kesan kepada alkohol: adakah mereka dikaitkan. Addict Biol. 2010; 15: 169-184. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Heilig M, Koob GF. Peranan penting untuk faktor kortikotropin yang melepaskan dalam ketergantungan alkohol. Trend Neurosci. 2007; 30: 399-406. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Penindasan faktor kelahiran kortikotropin dalam amygdala mengatasi kesan-kesan avensif pengeluaran morfin. Behav Pharmacol. 1995; 6: 74-80. [PubMed]
  • Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, et al. Pengeluaran dari akses kronik, sekejap-sekejap ke makanan yang sangat enak mendorong tingkah laku seperti depresi pada tikus makan kompulsif. Behav Pharmacol. 2012; 23: 593-602. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Peranan sistem tekanan otak dalam ketagihan. Neuron. 2008; 59: 11-34. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Substrat neurobiologi untuk kegagalan pengertian dalam ketagihan. Neuropharmacology. 2009; 56 (Suppl 1: 18-31. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Peranan CRF dan peptida yang berkaitan dengan CRF di sisi gelap ketagihan. Brain Res. 2010; 1314: 3-14. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Koob GF, Heinrichs SC. Peranan faktor pembebasan kortikotropin dan urokortin dalam tindak balas tingkah laku kepada tekanan. Brain Res. 1999; 848: 141-152. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Kepuasan saraf neurokurikulum dan 'sampingan gelap' penagihan dadah. Nat neurosci. 2005; 8: 1442-1444. [PubMed]
  • Koob GF, Kajian Le Moal M. Mekanisme neurobiologi untuk proses motivasi lawan dalam ketagihan. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3113-3123. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Koob GF, Volkow ND. Neurocircuitry ketagihan. Neuropsychopharmacology. 2010; 35: 217-238. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. Peranan faktor pembebasan kortikotropin dalam ketagihan dadah: berpotensi untuk campur tangan farmakologi. Dadah CNS. 2011; 25: 271-287. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Morfine dan pengaruh kokain pada biosintesis CRF di dalam nukleus pusat amygdala. Neuropeptida. 2003; 37: 105-110. [PubMed]
  • McNally GP, Akil H. Peranan hormon yang melepaskan kortikotropin di amygdala dan nukleus bed of stria terminalis dalam perilaku, modulasi rasa sakit, dan akibat endokrin penipuan opiate. Neurosains. 2002; 112: 605-617. [PubMed]
  • Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M, Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF, et al. Meningkatkan kadar imunoreaktiviti seperti ekstraselular kortikotropin yang melepaskan dalam amygdala tikus berjaga semasa tekanan pengekangan dan pengeluaran etanol yang diukur oleh mikrodialisis. J Neurosci. 1995; 15: 5439-5447. [PubMed]
  • Murray E, Bijaksana S, Rhodes S. 2011Apakah otak yang berbeza boleh lakukan dengan ganjaran In Gottfried JA (eds) .Neurobiology of Sensation and Reward, Bab 4 CRC Press: Boca Raton, FL, USA [PubMed]
  • Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. Sisi gelap ketagihan makanan. Physiol Behav. 2011; 104: 149-156. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. 2007The Brain Rat dalam Koordinat Stereotaxic6th edn.Academic Press
  • Pellegrino A. Atlas Stereotoksik Otak Tikus. Plenum: New York; 1979.
  • Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Pengaktifan faktor pembebasan kortikotropin dalam sistem limbik semasa pengeluaran cannabinoid. Sains. 1997; 276: 2050-2054. [PubMed]
  • Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Methoxymetopon, agonis mu opioid yang sangat kuat, biphasically mempengaruhi pengambilan etanol dalam tikus-alkohol yang suka alkohol Sardinia. Psychopharmacology (Berl) 2007; 192: 537-546. [PubMed]
  • Salinas JA, MB Ibu Bapa, McGaugh JL. Luka-luka asid Ibotenic kompleks kompleks amygdala basolateral atau nukleus sentral secara berbeza mempengaruhi tindak balas pengurangan ganjaran. Brain Res. 1996; 742: 283-293. [PubMed]
  • Shalev U, Erb S, Shaham Y. Peranan CRF dan neuropeptida lain dalam pengembalian semula tekanan akibat pengambilan dadah. Brain Res. 2010; 1314: 15-28. [Artikel percuma PMC] [PubMed]
  • Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Pencirian peptida hipotalamik ovin 41-residu yang merangsang rembesan kortikotropin dan beta-endorphin. Sains. 1981; 213: 1394-1397. [PubMed]
  • Volkow ND, O'Brien CP. Isu untuk DSM-V: sekiranya kegemukan dimasukkan sebagai gangguan otak. Am J Psikiatri. 2007; 164: 708-710. [PubMed]
  • Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA-mediated inhibiting amygdala basolateral blok penghapusan ganjaran di kera. J Neurosci. 2005; 25: 4577-4586. [PubMed]
  • Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Akibat epidemiologi dan ekonomi wabak global obesiti dan diabetes. Nat Med. 2006; 12: 62-66. [PubMed]