Front Psychol. 2014; 5: 250.
Diterbitkan dalam talian 2014 Mar 31. doi: 10.3389 / fpsyg.2014.00250
PMCID: PMC3978285
Tobias Hoch,1 Monika Pischetsrieder,1,* and Andreas Hess2
Abstrak
Makanan ringan seperti kerepek kentang banyak menyumbang kepada pengambilan tenaga pada manusia. Berbeza dengan makanan asas, makanan ringan dikonsumsi tambahan untuk makanan lain dan mungkin mengakibatkan pengambilan tenaga non-homeostatik. Makanan ringan juga sering dikaitkan dengan hedonik hyperphagia, pengambilan makanan yang bebas dari kelaparan. Analisis corak aktiviti otak oleh MRI yang ditingkatkan mangan telah mendedahkan bahawa pengambilan kerepek kentang dalam ad libitum diberi tikus yang kuat mengaktifkan sistem ganjaran otak tikus, yang boleh membawa kepada hedonik hyperphagia. Tujuan kajian ini adalah untuk membangunkan ujian keutamaan dua pilihan untuk mengenal pasti penentu molekul makanan ringan yang mencetuskan pengambilan makanan tambahan dalam ad libitum tikus yang diberi makan. Berbagai jenis makanan ujian telah dibentangkan tiga kali sehari untuk min 10 setiap kali. Untuk mengurangkan pengaruh sifat organoleptik, setiap makanan ujian digunakan dalam campuran homogen dengan chow standard. Pengambilan makanan serta aktiviti locomotor yang berkaitan dengan pengambilan makanan dianalisis untuk menilai kesan yang dialami oleh makanan ujian dalam ujian keutamaan dua pilihan. Ringkasnya, lemak (F), karbohidrat (CH), dan campuran lemak dan karbohidrat (FCH) membawa kepada pengambilan makanan yang lebih tinggi berbanding chow standard. Terutama, makanan ujian cip kentang (PC) sangat digemari lebih tinggi berbanding standard chow (STD) dan juga lebih tinggi daripada macronutrien utama tunggal mereka iaitu F dan CH. Hanya FCH yang menganggap pengambilan sebanding dengan PC. Walaupun ketumpatan tenaga yang rendah, makanan ujian cip kentang bebas lemak (ffPC) juga lebih tinggi berbanding STD dan CH, tetapi tidak melebihi F, FCH, dan PC. Oleh itu, dapat disimpulkan bahawa gabungan lemak dan karbohidrat adalah penentu molekul utama kerepek kentang yang menimbulkan hyperphagia hedonik. Ujian keutamaan dua pilihan yang digunakan akan memudahkan kajian masa depan mengenai kesan merangsang dan menindas komponen makanan lain pada pengambilan makanan non-homeostatic.
PENGENALAN
Makanan ringan gurih seperti kerepek kentang dikira di antara tujuh penyumbang besar untuk pengambilan tenaga pada kanak-kanak dan remaja di Amerika Syarikat pada tahun 21 terakhir (Slining et al., 2013). Makanan ringan bukan sebahagian daripada makanan asas kita, tetapi sering dimakan tambahan kepada makanan lain. Selain itu, makanan ringan hanya menunjukkan kesan kenyang yang lemah dan kandungan kalori mereka tidak atau hanya sebahagiannya diberi pampasan oleh pengurangan makanan standard (Whybrow et al., 2007; Kapelot, 2011). Oleh itu, dapat disimpulkan bahawa penggunaan makanan ringan membawa peningkatan jumlah tenaga. Pengambilan makanan hedonik yang dipanggil bebas dari kelaparan, boleh mengatasi keseimbangan energi keseostatik dan oleh itu membawa kepada hiperpagia, iaitu pengambilan makanan yang tidak melebihi rasa kenyang (Berthoud, 2011).
Beberapa kajian mencadangkan bahawa jenis makanan tertentu boleh menyebabkan pengambilan tenaga bukan homostatik yang sama pada tikus seperti pada manusia yang menunjukkan kewujudan mekanisme pengawalan neural yang sangat phylogenetically dipelihara. Sebagai contoh, ia telah menunjukkan bahawa tikus yang mempunyai akses ke kafetaria mengambil dua kali lebih banyak tenaga seperti tikus dengan akses kepada chow standard sahaja. Di samping itu, corak makan berubah daripada pengambilan makanan berasaskan makanan kepada pengambilan makanan berasaskan makanan ringan (Martire et al., 2013). Dengan cara yang sama, ad libitum diberi tikus dengan akses tambahan kepada kerepek kentang menunjukkan pengambilan tenaga yang lebih tinggi daripada tikus dengan akses tambahan kepada standard chow sahaja (Hoch et al., 2013).
Beberapa kajian menyiasat mekanisme fisiologi pendasar yang berkaitan dengan pengambilan makanan enak yang tidak terangkum. Baru-baru ini, ia menunjukkan bahawa diet kafeteria memberi kesan kepada sistem ganjaran dalam otak tikus (Epstein dan Shaham, 2010) dan bahawa snek kentang makanan ringan memodulasi aktiviti kawasan otak yang bertindak balas terhadap isyarat terutamanya mengawal ganjaran dan ketagihan, pengambilan makanan, aktiviti locomotor, dan tidur (Hoch et al., 2013). Di peringkat molekul, pelbagai sistem terlibat dalam mekanisme pengawalseliaan pengambilan makanan non-homeostatic termasuk hormon, dopamin, melanocortin atau molekul isyarat yang lain (Berthoud, 2011; Pandit et al., 2011; Alsio et al., 2012). Sebagai contoh, pengambilan makanan hedonik beberapa makanan ringan seolah-olah dikawal oleh sistem opioid endogen, kerana nalttrexon antioxidant opioid melemahkan keutuhan tempat yang dikonduksi disebabkan oleh makanan snek pepejal yang berbeza dalam tikus makan libitum ad libitumJarosz et al., 2006). Sistem endokannabinoid usus boleh menjadi pengawal selia penting pengambilan lemak (DiPatrizio et al., 2011).
Walau bagaimanapun, penentu makanan molekul yang mencetuskan pengambilan makanan bukan homostatik tidak sepenuhnya dicirikan. Beberapa kajian menggunakan diet kafeteria sebagai makanan yang boleh dimakan, yang mengandungi pemilihan pelbagai artikel seperti kek, pasta, kerepek kentang, kue, keju, atau kacang (Prats et al., 1989; Martire et al., 2013). Dalam kajian lain, barangan makanan tunggal telah digunakan, seperti kerepek kentang (Hoch et al., 2013) atau Gelung Froot® bijirin (Jarosz et al., 2006). Pengambilan makanan yang berlebihan adalah sebahagian besarnya berkaitan dengan kandungan tenaga, lemak, atau gula makanan. Tambahan pula, sifat deria juga dicadangkan untuk mempunyai pengaruh: dalam tikus yang diberi makan dengan baik, pengambilan makanan agak disebabkan oleh kesenangan makanan atau sifat sensori makanan, sedangkan kandungan kalori nampaknya menjadi penyumbang utama pada tikus dengan keseimbangan tenaga negatifScheggi et al., 2013).
Oleh itu, tujuan kajian semasa adalah untuk mengaplikasikan ujian keutamaan makanan dua pilihan yang boleh digunakan untuk menentukan aktiviti satu komponen makanan ringan untuk mendorong pengambilan makanan. Ujian keutamaan dua pilihan sebelum ini digunakan, contohnya, untuk menguji keutamaan tikus untuk perisa makanan, pengaruh pentadbiran galanin pada pilihan makanan atau kesesuaian relatif dari emulsi sukrosa / minyak (Naim et al., 1986; Smith et al., 1996). Untuk tujuan kami, protokol keutamaan dua pilihan untuk makanan pepejal diubahsuai dengan cara bahawa sebahagian daripada chow standard powder powder (STD) digantikan sama ada oleh makanan ringan atau oleh komponen tunggal dalam kepekatan yang ada dalam makanan ringan. Oleh itu, makanan ujian yang berbeza boleh diuji terhadap rujukan STD dan terhadap satu sama lain. Sebagai contoh untuk keadaan snek, makanan ujian diberikan setiap kali untuk min 10 sahaja dan tikus sentiasa mempunyai akses libitum iklan ke pelet chow standard. Sistem ujian ini kemudiannya digunakan untuk menganalisis kesan-kesan makronutrien pada pengambilan keripik kentang.
BAHAN DAN KAEDAH
PENYATA ETHIC
Kajian ini dijalankan dengan ketat mengikut cadangan Panduan Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Makmal Institut Kesihatan Nasional. Protokol ini telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Eksperimen Haiwan di Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg (FAU).
HAIWAN
Ujian kelakuan dijalankan dengan jumlah tikus 18. Pada mulanya, ujian dilakukan dengan lapan tikus Wistar lelaki (dua sangkar dengan empat ekor haiwan, berat awal 210 ± 8 g, disimpan dalam siklus gelap / cahaya 12 / 12, yang dibeli dari Charles River, Sulzfeld, Jerman). Majoriti eksperimen telah diterbitkan semula dengan tikus Sprague Dawley lelaki 10 (dua sangkar dengan lima haiwan masing-masing, berat awal 181 ± 14 g, disimpan di 12 / 12 h gelap / kitaran cahaya, yang dibeli dari Charles River, Sulzfeld, Jerman). Tikus mempunyai akses kepada pelet STD (Altromin 1324, Lage, Jerman) dan ketuk ad libitum air sepanjang keseluruhan kajian.
MAKANAN UJIAN
Semua makanan ujian disediakan, dicampur, dan dihancurkan dalam pemproses makanan untuk memastikan keseragaman dan tekstur yang sama. PC makanan ujian terdiri daripada serbuk STD (Altromin 1321, Lage, Jerman) dalam campuran dengan kerepek kentang 50% ("PFIFF Chips Salz", tanpa garam, masin, tanpa tambahan rasa atau penambah rasa, dibeli dari pasar raya tempatan; 49 % karbohidrat, lemak 35, protein 6%, serat pemakanan 4, garam 1.8%). Makanan ujian ffPC mengandungi cip kentang 50% bebas lemak ("Lay's Light Original®", Dengan olestra substituen lemak (OLEAN®), tanpa rasa, masin, tanpa tambahan sebatian rasa atau penambah rasa, dibeli di sebuah pasar raya di Amerika Syarikat; Karbohidrat 61%, protein 7%, serat pemakanan 3.4, garam 1.7%, lemak 0% dalam STD tepung. Untuk menguji pengaruh gabungan lemak makronutrien dan karbohidrat pada citarasa kerepek kentang, model kerepek kentang (FCH) telah disediakan, yang terdiri daripada serbuk STD serbuk 50 dan komponen lemak dan karbohidrat kerepek kentang. Bahagian baki kentang (protein, serat, garam, dan komponen yang tidak dikenali) telah digantikan oleh karbohidrat dan bukannya STD untuk memadankan ketumpatan tenaga model dan PC sedekat mungkin. Oleh itu, FCH terdiri daripada 50% STD, lemak 17.5 (minyak bunga matahari, dibeli dari pasar raya tempatan) dan karbohidrat 32.5% (dextrin dari kanji jagung, maltodextrine, Fluka, Taufkirchen, Jerman). Di samping itu, bahagian lemak dan karbohidrat makanan ujian FCH diuji secara berasingan. Oleh itu, untuk menguji pengaruh kandungan lemak (F), lemak 17.5% dicampur dengan 82.5% STD. Kesan kandungan karbohidrat (CH) diuji dengan makanan yang terdiri daripada karbohidrat% 32.5 dan 67.5% STD. Ketumpatan tenaga makanan ujian yang berbeza dikira berdasarkan pelabelan pengeluar. Nilai yang dikira dan komposisi makanan ujian digambarkan dalam Rajah Rajah11.
REKA BENTUK EKSPERIMEN
Untuk ujian keutamaan dua pilihan, makanan ujian telah dibentangkan tiga kali sehari (di 9 am, 12: 30 pm, dan 4 pm), setiap kali min 10 (Rajah Rajah2A2A) dalam dua dispenser makanan tambahan (Rajah Rajah2B2B). Pengambilan makanan ujian ditentukan oleh perbezaan berat makanan dispenser sebelum dan selepas setiap tempoh akses. Pengambilan tenaga dikira dengan mendarabkan jumlah makanan yang ditelan dengan kandungan tenaga masing-masing. Pengambilan makanan relatif dan tenaga dikira dengan membahagikan jumlah makanan atau tenaga makanan uji tertentu dengan jumlah makanan ujian yang disediakan. Kedudukan dispenser makanan dan makanan diisi ke dispenser tertentu telah diubah untuk setiap ujian untuk mengelakkan pengaruh pilihan tempat. Di samping itu, aktiviti locomotor yang berkaitan dengan makan tikus diukur. Untuk itu, gambar diambil setiap 10 melalui webcam yang diletakkan di atas sangkar (Rajah Rajah2C2C). Gambar-gambar 60 yang dihasilkan setiap tempoh akses makanan tunggal dinilai oleh pertimbangan: satu penghitungan ditakrifkan sebagai "satu tikus mengambil makanan dari satu makanan dispenser". Jumlah makanan, tenaga dan bilangan yang digunakan dalam kuantitinya digunakan untuk mengira sumbangan relatif setiap makanan ujian kepada jumlah pengambilan makanan tambahan kepada pelet chow standard dalam setiap ujian tunggal. Setiap eksperimen dilakukan serentak dalam dua sangkar pada dua hari berturut-turut dengan tiga ujian setiap hari. Kombinasi makanan terpilih telah diulang sehingga enam hari. Eksperimen berikut dilakukan dengan dua kohort haiwan yang berlainan: PC vs CH, PC vs F, PC vs FCH, F vs CH, FCH vs CH, FCH vs F, ffPC vs PC, ffPC vs CH , ffPC vs F, dan ffPC vs FCH.
ANALISIS STATISTIK
Untuk analisis statistik, kami mengira peratusan makanan ujian, yang ditelan dalam satu sangkar semasa setiap ujian keutamaan min 10 tunggal, yang berkaitan dengan jumlah pengambilan dari kedua-dua bekas makanan ujian. Ujian keutamaan dilakukan sebagai ujian tunggal 6-50 (10 min setiap) dengan kumpulan haiwan bebas 2-4 (sangkar) yang terdiri daripada 4-5 individu masing-masing. Analisis langkah berulang satu arah (ANOVA) dengan pembolehubah "hari ujian" tidak mendedahkan sebarang pengaruh signifikan pembolehubah ini (p <0.05) untuk sebahagian besar syarat ujian (lihat Hasil dan Perbincangan untuk pengecualian). Untuk gabungan PC yang diuji berbanding FCH (p = 1.06 × 10-7) dan PC vs F (p = 4.13 × 10-5) ANOVA menunjukkan pengaruh ketara "hari ujian" berubah. Oleh itu, kami menganalisis data-data ini secara berasingan untuk setiap hari.
Petunjuk pengambilan makanan untuk kombinasi makanan ujian diberikan dikira oleh Pelajar yang berpasangan t-test menggunakan Analisis ToolPak, Microsoft Excel 2013. Nilai min ujian tunggal dikira untuk kumpulan bebas (sangkar) dan digunakan untuk ujian statistik (n = 2-4). Data dibentangkan dalam angka 3-5 dan dalam Jadual Tables11-4. A p-nilai <0.05 dianggap signifikan.
Analisis statistik mengenai pengambilan tenaga dan aktiviti locomotor yang berkaitan dengan makanan dilakukan dengan sewajarnya. Hubungan keseluruhan antara pengambilan makanan dan aktiviti locomotor yang berkaitan dengan makanan ditentukan oleh analisis regresi linier antara pengambilan makanan [g] dan aktiviti locomotor yang berkaitan dengan makan setiap ujian tunggal ke atas semua keadaan yang diuji.
KEPUTUSAN
Adalah mantap bahawa makanan ringan seperti kerepek kentang dapat memicu pengambilan makanan non-homeostatic. Tujuan kajian ini adalah untuk membangunkan sistem ujian bagi pengenalpastian komponen makanan ringan yang bertanggungjawab terhadap proses ini. Sistem ujian yang dibangunkan kemudiannya digunakan untuk menyiasat sumbangan macronutrien utama (karbohidrat dan lemak) kepada pengambilan makanan ringan.
Untuk membangunkan ujian saringan, potensi makanan ujian untuk mendorong pengambilan makanan dalam tikus makan libitum yang tidak dilepaskan digunakan sebagai bacaan. Aktiviti pemakanan direkodkan oleh dua parameter bebas. Pertama, jumlah makanan yang ditelan telah ditimbang. Di samping itu, aktiviti lokomotif yang berkaitan dengan makan direkodkan oleh kamera. Kedua-dua kaedah menunjukkan korelasi yang sangat tinggi antara semua keadaan yang diuji (r = 0.9204, R2 = 0.8471, p <0.001). Aktiviti memberi makan ditunjukkan sebagai pengambilan makanan relatif atau sebagai pengambilan tenaga relatif memberikan hasil yang serupa, yang hanya berbeza dengan ≤3 mata peratusan seperti yang ditunjukkan angka 3A, B.
Oleh kerana jumlah pengambilan makanan ujian mutlak bervariasi dari hari ke hari dan, sebagai contoh, bergantung kepada umur haiwan (data tidak ditunjukkan), ujian keutamaan dua pilihan telah digunakan (Rajah Rajah2B2B), yang mencatatkan pengambilan makanan berhubung dengan makanan rujukan. Walaupun eksperimen makan telah dilakukan semasa kitaran cahaya hari, iaitu fasa rehat tikus (Hoch et al., 2013), pengambilan makanan tambahan yang banyak diperhatikan, yang bergantung kepada komposisi makanan ujian. Kekurangan pilihan tempat atau tempat diperhatikan apabila STD serbuk disediakan di kedua-dua dispenser makanan yang mengakibatkan pengambilan makanan dan tenaga yang sama dari kedua-dua dispenser tanpa perbezaan yang signifikan (p = 0.3311, angka 3A, B; Jadual 1A, B). Selain itu, aktiviti lokomotif yang berkaitan dengan pemakanan yang sama pada kedua-dua dispenser makanan telah diperhatikan (p = 0.5089, Rajah Rajah3C3C; Jadual Table1C1C). Tiada varians yang ketara (p <0.05) pilihan relatif untuk salah satu daripada dua makanan ujian yang disajikan antara hari ujian dapat diperhatikan untuk mana-mana keadaan ujian, kecuali PC vs FC dan PC vs F. Pengecualian ini dijelaskan di bawah dengan lebih terperinci.
Percubaan pertama, apabila PC diuji terhadap STD, mengakibatkan pengambilan PC yang hampir eksklusif (angka 3A, B; Jadual 1A, B). Seterusnya, sumbangan dua macronutrien utama PC, iaitu karbohidrat dan lemak, pada pengambilan makanan telah dikaji. Untuk tujuan ini, kandungan karbohidrat (ujian makanan CH) atau lemak (makanan ujian F) seperti yang diterangkan di atas ditambah kepada STD. Kedua-dua makanan ujian CH dan F disebabkan secara signifikan (CH: p <0.05, F: p <0.001, Rajah Rajah4A4A; Jadual Table22) pengambilan lebih tinggi daripada STD, di mana F menang terhadap CH (p <0.001, Rajah Rajah4A4A; Jadual Table22), tetapi CH atau F tidak dapat mendorong pengambilan makanan yang serupa dengan PC (angka 3A, B; Jadual 1A, B). Hasilnya menunjukkan bahawa aktiviti kerepek kentang untuk mendorong pengambilan makanan pada tikus yang tidak dilepaskan tidak dapat dijelaskan oleh kandungan lemak atau kandungan karbohidrat keripik kentang sahaja.
Walau bagaimanapun, apabila gabungan lemak-dan karbohidrat-pecahan kerepek kentang telah ditambah kepada standard chow, pengambilan makanan ujian ini FCH adalah sama (angka 3A, B; Jadual 1A, B) dan aktiviti locomotor berkaitan makan hanya sedikit lebih rendah berbanding PC (Rajah Rajah3C3C; Jadual Table1C1C). Sama seperti PC, FCH juga hampir secara eksklusif dicerna apabila disampaikan dalam ujian keutamaan terhadap F atau CH (Rajah Rajah4A; 4A; Jadual Table22).
Setakat ini, keputusan sekarang menunjukkan bahawa kesan kerepek kentang untuk meningkatkan pengambilan makanan pada tikus yang tidak dilucutkan disebabkan oleh kandungan kalorinya, yang pada dasarnya dimediasi oleh kandungan lemak dan karbohidrat. Untuk ujian lanjut tentang hipotesis ini, aktiviti pemakanan ffPC dibandingkan dengan makanan ujian lain (STD, PC, FCH, F, dan CH). Seperti yang dijangkakan, ffPC menunjukkan aktiviti yang lebih rendah berbanding PC, FCH dan F (Rajah Rajah4B; 4B; Jadual Table22). Walau bagaimanapun, ia menyebabkan pengambilan yang lebih tinggi berbanding STD (p <0.05) dan CH (p <0.001), walaupun kandungan kalori kedua makanan percubaan ini lebih tinggi (angka Rajah 11 and 4B4B). Oleh itu, dapat disimpulkan bahawa penentu lain mencetuskan pengambilan PC di samping kepadatan tenaga.
Langkah-langkah berulang kali ANOVA dilakukan untuk menilai pengaruh hari uji tertentu pada hasilnya. Hanya dua eksperimen yang menunjukkan pengaruh penting hari ujian, iaitu ujian keutamaan PC vs FCH (p = 1.06 × 10-7) dan PC vs F (p = 4.13 × 10-5) (Rajah Rajah5; 5; Jadual Tables33 and 44). Dalam tempoh tiga hari ujian pertama, pengambilan FCH oleh tikus, yang tidak sesuai dengan FCH, tetapi mempunyai hubungan dengan PC dalam ujian sebelumnya PC vs STD, PC vs F dan PC vs CH, jauh lebih rendah daripada penggunaan PC (p <0.05). Pada hari ujian 4–6, pengambilan PC yang lebih tinggi berbanding FCH tidak dapat dilihat (p > 0.05, Rajah Rajah5A5A; Jadual Table33). Perubahan disebabkan oleh peningkatan yang jelas pengambilan FCH yang disertai oleh pengurangan pengambilan PC sepanjang masa, sementara jumlah pengambilan makanan kedua-dua makanan ujian berkisar antara 70 dan 94 g / hari semasa ujian.
Sebaliknya, tiada trend yang jelas kelihatan apabila pengambilan makanan PC vs F dibandingkan pada hari ujian yang berbeza (Rajah Rajah5B; 5B; Jadual Table44).
PERBINCANGAN
Sebelum ini, makanan snek seperti kerepek kentang dapat memodulasi litar otak dalam tikus yang berkaitan dengan ganjaran, pengambilan makanan, kenyang, dan aktiviti lokomotor berbanding dengan chow standardHoch et al., 2013). Modulasi pola aktiviti ini mungkin bertanggungjawab terhadap pengambilan makanan ringan yang bukan homestatik.
Dalam kajian yang berkaitan dengan pengambilan makanan bukan homostatik atau ketagihan makanan, pelbagai makanan enak digunakan seperti penyelesaian gula, pemendekan, kek, kerepek kentang, kue, atau keju (Prats et al., 1989; Avena et al., 2009; Martire et al., 2013). Biasanya, makanan yang kaya dengan gula, lemak atau kedua-duanya dipilih. Walau bagaimanapun, boleh diandaikan bahawa pelbagai jenis makanan dan komponen makanan yang berbeza mencetuskan proses fisiologi yang berbeza yang berkaitan dengan pengambilan makanan. Oleh itu, adalah penting untuk menentukan penentu molekul tepat bagi item makanan yang bertanggungjawab terhadap pengambilan yang berlebihan dan untuk mengenal pasti laluan fisiologi yang dipicu oleh komponen makanan yang berlainan.
Oleh itu, tujuan kajian ini untuk membangunkan ujian keutamaan dua-pilihan untuk menyaring komponen makanan ringan untuk keupayaan mereka untuk mencetuskan pengambilan makanan tanpa penghidap. Sistem ujian kemudiannya digunakan untuk menyiasat bagaimana makronutrien utama (karbohidrat dan lemak) kerepek kentang menyumbang untuk mencetuskan pengambilan hedonik makanan makanan ringan tertentu ini.
Aktiviti pemakanan teraruh direkodkan oleh dua bacaan bebas. Di satu pihak, jumlah makanan atau tenaga yang ditelan (angka 3A, B, 4A, B and 5A, B; Jadual 1A, B, , 22-4) dan, sebaliknya, aktiviti locomotor yang berkaitan dengan pemakanan telah didaftarkan (contohnya dalam Rajah Rajah3C; 3C; Jadual Table1C1C). Parameter pembaca pengambilan makanan dan aktiviti locomotor yang berkaitan dengan makanan menunjukkan korelasi yang sangat tinggi (r = 0.9204, R2 = 0.8471, p <0.001). Oleh itu, boleh dikecualikan bahawa, misalnya, tumpahan akhirnya hasil ujian berat sebelah.
Jumlah mutlak makanan yang dimakan bervariasi dari hari ke hari merentasi individu yang berlainan dan juga bergantung pada pelbagai parameter lanjut seperti umur haiwan. Di samping itu, ia telah menunjukkan bahawa sensitiviti ganjaran makanan yang enak bergantung kepada peringkat perkembangan tikus (Friemel et al., 2010). Oleh itu, ujian pilihan keutamaan dua pilihan telah digunakan (Rajah Rajah2B2B), yang mencatatkan pengambilan makanan relatif dua makanan ujian pada sesi makan tertentu. Di bawah syarat-syarat ini, kesan latihan boleh berlaku kerana penyampaian makanan ujian yang tidak diketahui berbanding makanan rujukan yang diketahui. Oleh itu, setiap ujian keutamaan dilakukan sekurang-kurangnya pada dua hari yang berbeza, iaitu enam kali. Selain itu, kedudukan dispenser makanan yang mengandungi makanan ujian diubah selepas setiap ujian tunggal untuk mengelakkan pembangunan pilihan tempat. Kekurangan pilihan tempat atau tempat diperhatikan dengan menguji STD vs STD oleh enam ulangan berturut-turut dalam satu set ujian pada dua hari berturut-turut. Di sini, tiada perbezaan yang ketara antara kedua-dua makanan ujian identik berkenaan pengambilan makanan / tenaga (p = 0.3311, angka 3A, B; Jadual 1A, B) atau memakan aktiviti lokomotif berkaitanp = 0.5089, Rajah Rajah3C; 3C; Jadual Table1C1C) telah dinyatakan. Akhirnya, untuk meminimumkan pengaruh parameter deria, seperti konsistensi dan rasa, makanan ujian telah ditawarkan selepas homogenisasi dalam campuran dengan serbuk STD. Di bawah keadaan ujian yang digunakan, oleh itu, dapat disimpulkan bahawa hanya perbezaan dalam komposisi makanan uji bertanggung jawab terhadap perbedaan dalam pengambilan makanan. Ringkasnya, ujian keutamaan dua pilihan yang ditetapkan telah memberikan hasil yang boleh dipercayai, dan boleh digunakan untuk menyaring komponen makanan yang berkaitan dengan pengambilan makanan bukan homestatik.
Ujian tingkah laku yang dibangunkan kemudiannya digunakan untuk menyiasat pengaruh lemak komponen utama dan karbohidrat pada pengambilan makanan hedonik yang berasaskan cip kentang dalam tikus makan libitum ad libitum. Eksperimen pertama mengesahkan bahawa PC menyebabkan makanan yang lebih tinggi dan pengambilan tenaga daripada STD memang (angka 3A, B; Jadual 1A, B). Seperti yang dijangkakan, pengambilan makanan yang lebih tinggi berbanding STD juga diperhatikan apabila komponen cip kentang terpencil lemak dan karbohidrat ditawarkan dalam kepekatan yang serupa seperti yang terdapat dalam kerepek kentang (Rajah Rajah4A; 4A; Jadual Table22). Perlu diingat bahawa komponen lemak lebih aktif daripada komponen karbohidrat. Oleh itu, dapat disimpulkan bahawa lemak nampaknya merupakan salah satu penyumbang kepada kesenangan makanan uji. Dilaporkan bahawa keutamaan tikus untuk lemak telah dipelajari dan menyebabkan keutamaan untuk makanan berlemak: tikus yang memberi makan diet tinggi lemak menunjukkan pengambilan emulsi minyak yang lebih tinggi berbanding dengan tikus yang menerima diet tinggi karbohidrat (Reed dan Friedman, 1990). Di samping pengaruh ini terhadap keutamaan makanan, lemak adalah penyumbang kuat kepada pengambilan makanan yang dipertingkatkan dengan meningkatkan saiz makanan (Warwick dan Synowski, 1999).
Walau bagaimanapun, kesan pengambilan lemak kelihatan agak kompleks. Lemak (minyak jagung) dalam rongga mulut tikus mungkin menyebabkan pengaktifan sistem dopaminergik melalui reseptor D1 dopamin, yang nampaknya menjadi pengantara kesan penguatnya (Imaizumi et al., 2000). Mungkin, pengangkut asid lemak CD36 terlibat dalam pengesanan lemak diet dalam rongga mulut tikus atau tikus. Pengesanan awal lemak ini mungkin memberi keutamaan yang lebih pantas untuk makanan berlemak (Laugerette et al., 2005).
Selain itu, kesan selepas pengawasan adalah bertanggungjawab untuk peningkatan pengambilan lemak. Ini ditunjukkan dalam paradigma infusi intragastrik yang dikawal sendiri bahawa tikus mengambil jumlah yang lebih tinggi daripada diet tinggi lemak berbanding diet tinggi karbohidrat melalui infusi intragastrik (Warwick et al., 2003). Kesan selepas pengambilan lemak seperti ini mungkin ditengahi oleh sensor asid lemak seperti CD36, GPR40, dan GPR120 dalam usus kecil yang membawa kepada rangsangan selera mulut selera makan (Sclafani dan Ackroff, 2012; Sclafani et al., 2013).
Walau bagaimanapun, dalam kajian ini, komponen lemak, tidak juga komponen karbohidrat sahaja dapat mendorong pengambilan makanan yang serupa dengan PC. Hanya gabungan kedua-dua komponen (FCH) yang membawa kepada pengambilan makanan / tenaga setanding dengan PC yang mencadangkan kesan sinergistik lemak dan karbohidrat (angka 3A, B; Jadual 1A, B). Oleh itu, FCH mendorong pengambilan makanan yang lebih tinggi daripada F, CH, atau STD (Rajah Rajah4A; 4A; Jadual Table22). Kajian terdahulu dengan dua kumpulan tikus yang berbeza menunjukkan bahawa kumpulan yang mempunyai akses kepada makanan campuran yang terdiri daripada lemak dan karbohidrat menelan kuantiti makanan yang lebih besar berbanding sekumpulan tikus yang disediakan dengan makanan semata-mata dengan kandungan lemak tinggiRamirez dan Friedman, 1990). Keputusan ini adalah selaras dengan keputusan semasa ujian pilihan dua pilihan kami mengenai makanan ringan. Ujian keutamaan dengan makanan ujian cair telah menunjukkan bahawa tikus lebih suka emulsi dengan lemak dan gula di atas komponen tunggal serta lebih standard chow (Lucas dan Sclafani, 1990).
Daripada penemuan ini, dapat dihipotesiskan bahawa kombinasi makronutrien, lemak dan karbohidrat, mencetuskan kesan tambahan berbanding pentadbiran hanya satu komponen. Sebagai contoh, satu kajian menunjukkan bahawa dalam tikus, pentadbiran baclofen agonist reseptor GABA-B merangsang makan makanan manis, ditekan makan pesta gemuk, tetapi tidak berpengaruh pada makanan sukrosa (Berner et al., 2009). Penemuan ini dengan jelas menunjukkan kehadiran mekanisme tertentu yang berkaitan dengan pengambilan macronutrien yang berlebihan atau kombinasi mereka. Selain itu, kajian dengan tikus oleh la Fleur et al. (2010) mendapati bahawa campuran lemak dan gula, tetapi bukan komponen tunggal, menyebabkan obesiti yang disebabkan oleh hyperphagia. Selain itu, campuran lemak dan gula diubah ekspresi neuropeptida hipotalamik dengan cara yang berbeza berbanding lemak atau gula sahaja (la Fleur et al., 2010).
Oleh kerana makanan ujian diuji terhadap satu sama lain dalam kombinasi yang berbeza, keadaan boleh berlaku bahawa haiwan sudah biasa dengan makanan ujian dari ujian keutamaan sebelumnya, tetapi naif untuk makanan ujian yang baru diperkenalkan. Oleh itu, kebaruan atau kebiasaan makanan ujian boleh mempengaruhi pengambilan makanan. Oleh itu, ujian keutamaan dilakukan sekurang-kurangnya enam kali, supaya haiwan itu sudah biasa dengan kedua-dua makanan ujian yang sudah selepas ujian pertama. Analisis ANOVA seterusnya mendedahkan bahawa "hari ujian" berubah tidak mempunyai pengaruh yang ketara kecuali untuk ujian keutamaan PC vs FCH dan PC vs F. Menariknya, trend yang jelas diperhatikan dalam kombinasi PC vs FCH: tikus, yang biasa dengan PC dari ujian keutamaan sebelumnya semasa kajian ini (PC vs STD, F atau CH), PC yang lebih digemari melalui FCH dalam tiga hari ujian pertama (p <0.05). Pada hari-hari ujian berikut, pilihan untuk PC berkurang (Rajah Rajah5A; 5A; Jadual Table33). Oleh itu, dapat disimpulkan bahawa FCH dan PC mempunyai keupayaan yang sama untuk mendorong pengambilan makanan dalam tikus makan libitum, tetapi PC lebih disukai apabila tikus-tikus adalah naif kepada FCH tetapi tidak kepada PC. Sebaliknya, tiada tren yang jelas diperhatikan apabila PC diuji terhadap F. Sebaliknya, keutamaan PC yang tinggi dan berterusan terhadap F diperhatikan pada lima daripada enam hari ujian. Oleh itu, keberkesanan makanan ujian tertentu tidak kelihatan mempengaruhi keutamaan makan pada umumnya, tetapi hanya apabila PC diuji terhadap FCH.
Tambahan pula kesan-kesan baru, susunan persembahan makanan dapat mempengaruhi tingkah laku makan. Sebagai contoh, keletihan atau penyesuaian makanan boleh berlaku. Oleh itu, beberapa ujian keutamaan, yang telah dilakukan pada permulaan kajian, telah diulang pada akhir keseluruhan urutan (misalnya, PC vs F, PC vs CH). Ulang-ulangan yang disediakan hasilnya sangat mirip dengan ujian awal. Walau bagaimanapun, ia tidak boleh sepenuhnya dikecualikan bahawa keletihan makanan atau kesan penyesuaian berlaku berlaku di bawah syarat-syarat yang digunakan.
Keupayaan makanan ujian STD, CH, F, dan FCH untuk mendorong pengambilan makanan mungkin berpengaruh terhadap ketumpatan tenaga masing-masing, kerana makanan ujian yang mendorong pengambilan makanan yang lebih tinggi seringkali mempunyai kandungan kalori yang lebih tinggiRajah Rajah11). Walau bagaimanapun, eksperimen dengan ffPC menunjukkan bahawa kandungan tenaga nampaknya bukanlah satu-satunya pencetus pengambilan makanan pada haiwan yang tidak dilepaskan. Pembentangan ffPC membawa pengambilan makanan tambahan yang jauh lebih rendah berbanding dengan PC biasa (p <0.001, Rajah Rajah4B; 4B; Jadual Table22). Keputusan ini menunjukkan bahawa pengambilan lemak selera kurang berkaitan dengan sifat lemak tekstur, seperti rasa mulut, tetapi kandungan kalorik atau pengekstraksian asam lemak bebas dalam saluran pencernaan atau sistem gustatoryPittmann, 2010). Berbeza dengan penemuan ini, telah dilaporkan sebelum ini bahawa tiada keutamaan boleh dilihat pada tikus yang tidak dilucutkan untuk kek lemak tinggi berbanding kek tanpa lemak. Hanya tikus yang dilucutkan makanan yang sangat digemari kek lemak tinggi (Sclafani et al., 1993). Terutama, ffPC sangat disukai berbanding STD dan CH walaupun ketumpatan tenaga yang lebih rendah daripada ffPC (Rajah Rajah4B; 4B; Jadual Table22). Oleh itu, komponen atau sifat lain dari ffPC di luar kandungan tenaga seolah-olah mempunyai pengaruh tambahan terhadap aktiviti makanan ringan untuk mendorong pengambilan makanan. Sebagai contoh, garam atau serat boleh menjejaskan pengambilan makanan (Beauchamp dan Bertino, 1985; Vitaglione et al., 2009). Ujian keutamaan dua pilihan yang telah digunakan dalam kajian ini sekarang boleh menyediakan sistem pemeriksaan yang berguna untuk menyiasat lagi komponen (kecil) kerepek kentang yang menyumbang kepada pengambilan bukan homostatik mereka. Kesimpulan bahawa kandungan tenaga bukanlah satu-satunya parameter yang mendorong pengambilan makanan disokong oleh kajian terdahulu di mana penambahan sakarin kepada emulsi lemak mempunyai kesan peningkatan yang sama terhadap pengambilan makanan sebagai penambahan sukrosa (Lucas dan Sclafani, 1990).
Kesimpulannya, kajian ini menubuhkan alat tingkah laku tingkah laku yang telah dioptimumkan untuk menyiasat keupayaan makanan ujian yang berbeza untuk mendorong pengambilan makanan dalam tikus makan libitum ad libitum. Ujian ini digunakan untuk meneliti bagaimana makronutrien utama kerepek kentang, iaitu lemak dan karbohidrat, menyumbang untuk mencetuskan pengambilan makanan hedonik. Telah ditunjukkan bahawa lemak mempunyai impak yang tinggi terhadap pengambilan makanan tambahan, tetapi gabungan kedua-dua makronutrien telah dikenalpasti sebagai penyumbang utama kepada kelancaran keripik kentang. Ketumpatan tenaga bukanlah satu-satunya faktor yang bertanggungjawab terhadap pengambilan makanan yang meningkat, memandangkan ffPC memicu pengambilan makanan yang lebih tinggi daripada makanan ujian lain dengan kandungan tenaga yang lebih tinggi. Ujian keutamaan dua pilihan yang digunakan dalam kajian ini akan digunakan dalam penyelidikan masa depan untuk menguraikan pengaruh komponen kecil kerepek kentang supaya penentu molekul pengambilan mereka dapat difahami dengan lebih terperinci. Di samping itu, ia perlu disiasat jika campuran lemak dan karbohidrat dapat mendorong perubahan yang sama dalam corak aktiviti otak sebagai makanan ringan.
SUMBANGAN AWAM
Mencipta dan merancang eksperimen: Tobias Hoch, Monika Pischetsrieder, Andreas Hess. Menjalankan eksperimen dan dianalisis data: Tobias Hoch. Diterjemahkan data: Tobias Hoch, Monika Pischetsrieder, Andreas Hess. Alat reagen / bahan / analisis yang disumbangkan: Monika Pischetsrieder, Andreas Hess. Tulis kertas: Tobias Hoch, Monika Pischetsrieder, Andreas Hess. Akhirnya diluluskan versi yang akan diterbitkan: Tobias Hoch, Monika Pischetsrieder, Andreas Hess. Setuju untuk bertanggungjawab untuk semua aspek kerja untuk memastikan soalan yang berkaitan dengan ketepatan atau integriti mana-mana bahagian kerja disiasat dan diselesaikan dengan sewajarnya: Tobias Hoch, Monika Pischetsrieder, Andreas Hess.
Penyata Percanggahan Kepentingan
Penulis mengisytiharkan bahawa penyelidikan itu dijalankan tanpa adanya sebarang hubungan komersial atau kewangan yang boleh ditafsirkan sebagai potensi konflik kepentingan.
Penghargaan
Kajian ini adalah sebahagian daripada Projek Neurotrisi, yang disokong oleh FAU Emerging Fields Initiative. Kami mengucapkan terima kasih kepada Dr. Miriam Schneider, Institut Kesihatan Mental Pusat, Mannheim, Jerman kerana nasihatnya dalam menubuhkan reka bentuk eksperimen, dan Christine Meissner untuk membuktikan naskahnya. Selain itu, kami sangat berterima kasih kepada pengadil, yang membantu menyusun analisis statistik.
RUJUKAN
- Alsio J., Olszewski PK, Levine AS, Schioth HB (2012). Mekanisme umpan balik: penyesuaian perilaku dan molekul seperti ketagihan dalam makan berlebihan. Depan. Neuroendocrinol. 33:127–139 10.1016/j.yfrne.2012.01.002 [PubMed] [Cross Ref]
- Avena NM, Rada P., Hoebel BG (2009). Gula dan pesta gemuk mempunyai perbezaan yang ketara dalam tingkah laku seperti ketagihan. J. Nutr. 139 623-628 10.3945 / jn.108.097584 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Beauchamp GK, Bertino M. (1985). Tikus (Rattus norvegicus) tidak suka makanan pepejal masin. J. Comp. Psychol. 99 240–24710.1037/0735-7036.99.2.240 [PubMed] [Cross Ref]
- Berner LA, Bocarsly ME, Hoebel BG, Avena NM (2009). Baclofen menindas pesta makan lemak tulen tetapi bukan diet gula kaya atau manis. Behav. Pharmacol. 20 631–634 10.1097/FBP.0b013e328331ba47 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Berthoud HR (2011). Pemacu metabolik dan hedonik dalam kawalan saraf selera: siapa bos? Curr. Pendapat. Neurobiol. 21 888-896 10.1016 / j.conb.2011.09.004 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Chapelot D. (2011). Peranan snek dalam keseimbangan tenaga: pendekatan biobehavioral. J. Nutr. 141 158-162 10.3945 / jn.109.114330 [PubMed] [Cross Ref]
- DiPatrizio NV, Astarita G., Schwartz G., Li X., Piomelli D. (2011). Isyarat endokannabinoid dalam usus mengawal pengambilan lemak diet. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 108 12904-12908 10.1073 / pnas.1104675108 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Epstein DH, Shaham Y. (2010). Tikus makan cheesecake dan persoalan ketagihan makanan. Nat. Neurosci. 13 529-531 10.1038 / nn0510-529 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Friemel CM, Spanagel R., Schneider M. (2010). Kepekaan ganjaran untuk ganjaran ganjaran makanan yang lazat semasa perkembangan pubertal dalam tikus. Depan. Behav. Neurosci. 4: 39 10.3389 / fnbeh.2010.00039 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Hoch T., Kreitz S., Gaffling S., Pischetsrieder M., Hess A. (2013). Pencitraan resonans magnetik yang dipertingkatkan untuk pemetaan pola aktiviti otak keseluruhan yang dikaitkan dengan pengambilan makanan ringan di tikus ad libitum yang diberi makan. PLOS SATU 8: e55354 10.1371 / journal.pone.0055354 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Imaizumi M., Takeda M., Fushiki T. (2000). Kesan pengambilan minyak dalam ujian keutuhan tempat yang dikondisi pada tikus. Brain Res. 870 150–15610.1016/S0006-8993(00)02416-1 [PubMed] [Cross Ref]
- Jarosz PA, Sekhon P., Coscina DV (2006). Kesan antagonisme opioid pada pilihan tempat yang dikondisi untuk makanan ringan. Pharmacol. Biochem. Behav. 83 257-264 10.1016 / j.pbb.2006.02.004 [PubMed] [Cross Ref]
- la Fleur SE, Van Rozen AJ, Luijendijk MC, Groeneweg F., Adan RA (2010). Pemakanan gula tinggi lemak tinggi pilihan mendorong perubahan arcuate neuropeptide ekspresi yang menyokong hiperaktif. Int. J. Obes. (Lond.) 34 537-546 10.1038 / ijo.2009.257 [PubMed] [Cross Ref]
- Laugerette F., Passilly-Degrace P., Patris B., Niot I., Febbraio M., Montmayeur JP, et al. (2005). Penglibatan CD36 dalam pengesanan orosensori lipid pemakanan, keinginan lemak spontan, dan pencernaan pencernaan. J. Clin. Melabur. 115 3177-3184 10.1172 / JCI25299 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Lucas F., Sclafani A. (1990). Hyperphagia dalam tikus yang dihasilkan oleh campuran lemak dan gula. Physiol. Behav. 47 51–5510.1016/0031-9384(90)90041-2 [PubMed] [Cross Ref]
- Martire SI, Holmes N., Westbrook RF, Morris MJ (2013). Corak makan yang berubah-ubah dalam tikus terdedah kepada diet kafeteria yang enak: peningkatan makanan ringan dan implikasinya untuk perkembangan obesiti. PLOS SATU 8: e60407 10.1371 / journal.pone.0060407 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Naim M., Brand JG, Christensen CM, Kare M. R, Van Buren S. (1986). Keutamaan tikus untuk perisa makanan dan tekstur dalam diet separuh dibersihkan nutrisi. Physiol. Behav. 37 15–2110.1016/0031-9384(86)90377-X [PubMed] [Cross Ref]
- Pandit R., De Jong JW, Vanderschuren LJ, Adan RA (2011). Neurobiologi berlebihan dan obesiti: peranan melanocortin dan seterusnya. Eur. J. Pharmacol. 660 28-42 10.1016 / j.ejphar.2011.01.034 [PubMed] [Cross Ref]
- Pittmann DW (2010). "Peranan sistem gustatory dalam pengesanan asid lemak dalam tikus," dalam Pengesanan Lemak: Rasa, Tekstur, dan Kesan Penyedutan Selepas eds Montmayeur JP, Le Coutre J., editor. (Boca Raton, FL: Press CRC)
- Prats E., Monfar M., Castella J., Iglesias R., Alemany M. (1989). Pengambilan tenaga tikus memberi makan kafeteria. Physiol. Behav. 45 263–27210.1016/0031-9384(89)90128-5 [PubMed] [Cross Ref]
- Ramirez I., Friedman MI (1990). Hiperfagia diet dalam tikus: peranan lemak, karbohidrat, dan kandungan tenaga. Physiol. Behav. 47 1157–116310.1016/0031-9384(90)90367-D [PubMed] [Cross Ref]
- Reed DR, Friedman MI (1990). Komposisi diet mengubah penerimaan lemak oleh tikus. Selera 14 219–23010.1016/0195-6663(90)90089-Q [PubMed] [Cross Ref]
- Scheggi S., Secci ME, Marchese G., De Montis MG, Gambarana C. (2013). Pengaruh kesesuaian pada motivasi untuk beroperasi untuk makanan kalori dan bukan kalori pada tikus yang tidak dilepaskan oleh makanan dan tikus. Neurosains 236 320-331 10.1016 / j.neuroscience.2013.01.027 [PubMed] [Cross Ref]
- Sclafani A., Ackroff K. (2012). Peranan pemakanan nutrien sensing dalam merangsang selera makan dan pilihan makanan penyaman. Am. J. Physiol. Regul. Integriti. Comp. Physiol. 302 R1119-R1133 10.1152 / ajpregu.00038.2012 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Sclafani A., Weiss K., Cardieri C., Ackroff K. (1993). Maklum balas makan tikus ke kek bukan lemak dan tinggi lemak. Obes. Res. 1 173–17810.1002/j.1550-8528.1993.tb00608.x [PubMed] [Cross Ref]
- Sclafani A., Zukerman S., Ackroff K. (2013). Sensor asid lemak GPR40 dan GPR120 adalah kritikal untuk pengambilan pasca oral tetapi bukan pengantaraan lisan pada tikus. Am. J. Physiol. Regul. Integriti. Comp. Physiol. 305 R1490-R1497 10.1152 / ajpregu.00440.2013 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Sliding MM, Mathias KC, Popkin BM (2013). Trend sumber makanan dan minuman di kalangan kanak-kanak dan remaja AS: 1989-2010. J. Acad. Nutr. Diet. 113 1683-1694 10.1016 / j.jand.2013.06.001 [Artikel percuma PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Smith BK, York DA, Bray GA (1996). Kesan keutamaan pemakanan dan pentadbiran galanin dalam nukleus paraventricular atau amygdaloid pada pemilihan diri diet. Brain Res. Bull. 39 149–15410.1016/0361-9230(95)02086-1 [PubMed] [Cross Ref]
- Vitaglione P., Lumaga RB, Stanzione A., Scalfi L., Fogliano V. (2009). Roti Beta-Glucan yang diperkaya mengurangkan pengambilan tenaga dan mengubah konsentrasi plasma ghrelin dan peptida YY dalam jangka pendek. Selera 53 338-344 10.1016 / j.appet.2009.07.013 [PubMed] [Cross Ref]
- Warwick ZS, Synowski SJ (1999). Kesan kekurangan makanan dan komposisi diet penyelenggaraan keutamaan lemak dan penerimaan pada tikus. Physiol. Behav. 68 235–23910.1016/S0031-9384(99)00192-4 [PubMed] [Cross Ref]
- Warwick ZS, Synowski SJ, Rice KD, Smart AB (2003). Kesan bebas dari kesesuaian diet dan kandungan lemak pada saiz pertarungan dan pengambilan harian pada tikus. Physiol. Behav. 80 253-25810.1016 / j.physbeh.2003.07.007 [PubMed] [Cross Ref]
- Whybrow S., Mayer C., Kirk TR, Mazlan N., Stubbs RJ (2007). Kesan penggunaan makanan ringan mandatori dua minggu terhadap pengambilan tenaga dan keseimbangan tenaga. Obesiti (Silver Spring) 15 673-685 10.1038 / oby.2007.567 [PubMed] [Cross Ref]
;