MGA KOMENTARYO: Bagaman ang parehong diin, ang mga droga ng pang-aabuso at ilang mga likas na gantimpala ang nagpalitaw ng isang akumulasyon ng DeltaFosB, ang stress ay nagpapatibay ng iba't ibang mga cell sa ibaba ng agos at sa ibang pagkakataon iba't ibang mga receptor at mga gene. Sa ibang salita, ang mga addiction at paglaban sa stress ay umaasa sa mga iba't ibang mekanismo sa panimula
J Neurosci. 2010 Oktubre 27; 30 (43): 14585-92.
Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ.
pinagmulan
Fishberg Department of Neuroscience, Mount Sinai School of Medicine, New York, New York 10029, USA.
abstract
Ang mga mekanismo ng molekula na napapabilang sa stress-at ang mga pagsasaayos ng neuronal na droga ay hindi pa ganap na nauunawaan. Ang isang molekula na sinasangkot sa naturang mga adaptasyon ay ΔFosB, isang transaksyon na nakukuha sa accent na rodent nucleus (NAc), isang pangunahing rehiyon ng gantimpala ng utak, bilang tugon sa alinman sa talamak na stress o paulit-ulit na pagkakalantad sa mga droga ng pang-aabuso. Tsiya sa upstream transcriptional mekanismo sa pagkontrol ng ΔFosB induction sa pamamagitan ng mga environmental stimuli ay mananatiling mahirap hulihin. Dito, tinutukoy namin ang kadahilanan ng transcribe na nakadepende sa aktibidad, ang serum na sagot na kadahilanan (SRF), bilang isang nobelang upstream mediator ng stress-, ngunit hindi cocaine-, sapilitan ΔFosB. Ang SRF ay downregulated sa NAc ng parehong mga nalulumbay pasyente ng tao at sa mice chronically nakalantad sa social pagkatalo stress. Ang downregulation ng SRF ay wala sa mga nababanat na hayop. Sa pamamagitan ng paggamit ng indukible mutagenesis, ipinakikita natin na ang pagtatalaga sa pamamagitan ng pagkapagod ng stress na ΔFosB, na nangyayari nang nakararami sa nababanat na mga daga, ay nakasalalay sa pagpapahayag ng SRF sa rehiyong ito ng utak. Higit pa rito, ang genetic deletion ng NAC na partikular sa pagtanggal ng SRF ay nagtataguyod ng iba't-ibang uri ng prodepressant-at proanxiety-like phenotypes at nagbibigay ng mga hayop na mas sensitibo sa mga deleterious effect ng talamak na stress. Sa kaibahan, ipinakita namin na ang SRF ay hindi gumaganap ng papel sa akumulasyon ng FosB sa NAc bilang tugon sa malalang pagkalantad sa cocaine. Bukod dito, ang NAc-specific knock-out ng SRF ay walang epekto sa cocaine-sapilitan na pag-uugali, na nagpapahiwatig na ang talamak na social pagkatalo stress at paulit-ulit na cocaine exposure ay kumokontrol ΔFosB akumulasyon at asal sensitivity sa pamamagitan ng mga independiyenteng mekanismo.
pagpapakilala
Ang nucleus accumbens (NAc), isang pangunahing rehiyon ng gantimpala ng utak, ay mahalaga para sa pagsasama ng mga sensory at cognitive input na nagdudulot ng mga motibo na may kaugnayang pag-uugali bilang tugon sa environmental stimuli (Nestler at Carlezon, 2006, Sesack at Grace, 2010). Ang NAc ay nasangkot din sa mga abnormalidad sa asal na nauugnay sa pagkagumon sa droga at depresyon. Alinsunod dito, ang pag-target sa NAc na may malalim na utak pagpapasigla ay ipinapakita upang alleviate ang depression- at pagkagumon-tulad ng pag-uugali sa parehong mga tao at rodents (Schlaepfer et al., 2008; Vassoler et al., 2008; Heinze et al., 2009; Kuhn et al., 2009).
Ang paulit-ulit na pagkakalantad sa mga droga ng pang-aabuso o pagkapagod ay nagpapahiwatig ng binagong mga pattern ng pagpapahayag ng gene sa NAc, potensyal na pinagbabatayan ang pagkakasunod-sunod ng pagkalulong at depresyon (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Maze et al., 2010; ., 2010). Sa kagila-gilalas, ang transkripsiyon na kadahilanan ΔFosB, isang produkto ng splice ng fosB gene, ay natipon sa NAc bilang tugon sa paulit-ulit na gamot o pagkakalantad ng stress (Nestler, 2008; Perrotti et al., 2008; Vialou et al., 2010). Ang ΔFosB ay iminungkahi bilang isang potensyal na molecular switch na naggabay sa paglipat mula sa paggamit ng recreational drug sa chronically addicted state (Nestler et al., 1999; McClung et al., 2004; Renthal et al., 2009), bilang pagtatag ng NAc kapaki-pakinabang na mga tugon sa maraming mga gamot ng pang-aabuso. Higit pang mga kamakailan lamang, ang papel na ginagampanan ng ΔFosB induction sa NAc sumusunod na talamak na social na pagkatalo ng stress (Nikulina et al., 2008; Vialou et al., 2010) ay naipaliwanag: ΔFosB ay nagtataguyod ng mga aktibong mga sagot sa pag-coping sa stressful stimuli at nagpapataas ng katatagan. Kahit na ang ΔFosB induction ay nangyayari sa isang paraan na nakabatay sa stimulus, ang mga mekanismo na may pananagutan para sa drug- at stress na sapilitan ΔFosB na akumulasyon sa NAc ay hindi nananatiling hindi kilala.
Ang kadahilanan ng tugon ng suwero (SRF) ay isang salik na salik na kinakailangan para sa pag-aktibo ng aktibidad na nakasalalay sa aktibidad ng maraming agarang mga maagang genes, kabilang ang c-fos, fosb, Egr1, at Arc (Knöll at Nordheim, 2009). Ang mga kamakailang pag-aaral ay nagpakita ng mga epekto ng SRF sa mga katangian ng morphological at cytoarchitectural ng mga neuron, kabilang ang regulasyon ng aktibidad na synaptic at pagbuo ng circuitry sa utak ng may sapat na gulang (Knöll at Nordheim, 2009). Ang mga natuklasan na ito ay nagtulak sa amin upang siyasatin kung ang SRF ay functionally kinokontrol ng talamak na pagkakalantad sa mga gamot ng pang-aabuso o stress, pati na rin ang potensyal na epekto ng naturang regulasyon sa uctionFosB induction sa ilalim ng mga kondisyong ito.
Dito, inilalarawan namin ang isang mekanismo ng nobela kung saan ang pagbawas ng SRF sa NAc ay nagtataguyod ng prodepressant at pagkabalisa phenotypes, na sa huli ay nagdaragdag ng kahinaan ng isang hayop sa masamang epekto ng talamak na stress. Ang mga epektong ito ay namamagitan, sa bahagi, ng pagkawala ng induction na ΔFosB sa NAc ng mga hayop na may diin. Ang napagmasdan na pagbaba sa ekspresyon ng SRF at BFosB sa postmortem NAc tissue na nakuha mula sa mga nalulumbay na pasyente ay sumusuporta sa kaugnayan ng aming mga natuklasan sa depression ng tao. Kapansin-pansin, ang mekanismong ito na pagkontrol sa akumulasyon ng ΔFosB ay lilitaw na tukoy sa stress: ang talamak na pagkakalantad ng cocaine ay walang epekto sa ekspresyon ng SRF, ang pagtanggal ng SRF mula sa NAc ay walang epekto sa akumulasyong ΔFosB kasunod ng talamak na pagkakalantad ng cocaine, at ang naturang pagtanggal ng SRF ay walang epekto sa cocaine- sapilitan na pag-uugali. Ang nobelang pakikipag-ugnay sa pagitan ng SRF at ΔFosB, sa konteksto ng stress, ay maaaring kumatawan sa isang mahalagang mekanismo ng homeostatic na kumokontrol sa pagkasensitibo ng isang indibidwal sa talamak na pagkapagod.
Mga Materyal at Mga Paraan
hayop
Ang walong-linggong gulang na C57BL / 6J male mice (Jackson Laboratory) ay ginamit sa lahat ng mga pamamaraang pang-asal at biochemical. Ang lahat ng mga hayop ay nakatuon sa pasilidad ng hayop nang hindi bababa sa 1 linggo bago ang pang-eksperimentong manipulasyon at pinanatili sa 23-25 ° C sa 12 h light / dark cycle (mga ilaw mula sa 7: 00 AM hanggang 7: 00 PM) na may ad libitum access sa pagkain at tubig. Ang mga eksperimento ay isinasagawa alinsunod sa mga alituntunin ng Society for Neuroscience at ang institutional na pag-aalaga ng hayop at paggamit ng komite sa Mount Sinai School of Medicine.
Para sa mga eksperimento ng cocaine [Western blotting at quantitative chromatin immunoprecipitation (Chip)], 8- hanggang 10-linggo-gulang na lalaking C57BL / 6J ang ginamit. Nakatanggap ang mga hayop ng pitong pang-araw-araw na intraperitoneal injection ng alinman sa asin o cocaine (20 mg / kg cocaine-HCl; Sigma). Ang mga daga ay ginamit 24 pagkatapos ng huling paggamot. Para sa mga eksperimento sa pag-uugali, ang mga daga ay binubuo ng mga posturgery at ginagamot sa 10 mg / kg (locomotor sensitization) o 7.5 mg / kg (kagustuhan sa kinalalagyan) cocaine-HCl intraperitoneally, tulad ng inilarawan sa ibaba.
Ang Srffl / fl mice ay binuo gaya ng dati na inilarawan (Ramanan et al., 2005). Nakakamit ang NAc-specific knock-out ng Srf sa pamamagitan ng stereotaxic injection at kasunod na viral overexpression ng Cre recombinase (Cre) na fused sa green fluorescent protein (GFP) gamit ang adeno-associated virus (AAV) vectors. Ginamit ang isang pagtanggal-ng-sarili na Cre. Ang AAV-GFP ay injected sa halip ng AAV-Cre-GFP sa Srffl / fl mice bilang isang kontrol. Sa madaling sabi, ang mga mice ay anesthetized gamit ang isang halo ng ketamine (10 mg / kg) at xylazine (10 mg / kg), na may mga sumusunod na stereotaxic coordinate na ginagamit para sa viral delivery: + 1.6 (anterior / posterior), + 1.5 (lateral) 4.4 (dorsal / ventral) sa isang anggulo ng 10 ° mula sa midline (kamag-anak sa bregma). Isang kabuuan ng 0.5 μl ng pinadalisay na virus ay inihatid bilaterally sa isang 5 min panahon (0.1 μl / min), na sinusundan ng 5 min ng pahinga. Ang mga daga ay sinubukan 2 linggo pagkatapos ng pagtitistis, kapag ang viral expression ay pinakamalaki, at ang mga viral injection site ay nakumpirma para sa lahat ng mga hayop na gumagamit ng karaniwang mga histological na pamamaraan. Ang kahusayan ng viral-mediated Cre expression ay napatunayan ng immunohistochemistry at ng reverse-transcriptase PCR for Srf na isinasagawa sa microdissected NAc punches mula sa mga hayop na ibinigay ng AAV-Cre-GFP at AAV-GFP sa NAc. Ang mga virus ng AAV-GFP at AAV-Cre-GFP ay binuo gaya ng dati nang inilarawan (Maze et al., 2010).
Mga pamamaraan ng pag-uugali
Pagkatalo ng pagkatalo ng panlipunan.
Ang C57BL / 6J mice ay napapailalim sa talamak na pagkatalo ng sosyal na pagkatalo para sa 10 magkakasunod na mga araw tulad ng inilarawan dati (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Sa madaling sabi, ang bawat mouse ay napakita sa isang hindi pamilyar at agresibo lalaki CD1 retired breeder mouse para sa 5 min bawat araw. Kasunod ng direktang pakikipag-ugnayan sa CD1 aggressor, ang mga hayop ay inilagay sa isang katabi ng kompartimento ng parehong hawla para sa susunod na 24 h sa pandama ngunit hindi pisikal na kontak. Kinokontrol ang mga hayop sa mga katumbas na mga cage ngunit may mga miyembro ng parehong strain. Ang mga pagsusulit sa social interaction ay ginanap sa 24 h kasunod ng huling araw ng pagkatalo.
Ang pag-iwas sa lipunan sa isang hindi pamilyar na CD1 male mouse ay sinuri ayon sa nai-publish na mga protokol (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Ang pang-eksperimentong mouse ay unang ipinakilala sa isang bukas na patlang na naglalaman ng isang walang laman na wire mesh cage para sa 2.5 min. Sa panahon ng isang pangalawang sesyon, isang hindi pamilyar na CD1 male mouse ang ipinakilala sa wired cage. Ang oras na ginugol sa zone ng pakikipag-ugnayan (isang 8-cm-malawak na koridor na pumapalibot sa hawla) ay sinusukat. Ang paghihiwalay ng natalo na mga daga sa madaling kapitan at nababanat na mga subpopulasyon ay isinagawa tulad ng inilarawan dati (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Dahil ang karamihan ng mga daga ng kontrol ay gumugol ng mas maraming oras sa pakikipag-ugnay sa isang target sa lipunan kaysa sa isang walang laman na enclosure ng target, isang ratio ng pakikipag-ugnayan na 100 (pantay na oras na ginugol sa zone ng pakikipag-ugnayan sa pagkakaroon laban sa kawalan ng isang target na panlipunan) ay itinakda bilang isang cutoff. Ang mga daga na may markang <100 ay may label na madaling kapitan, at ang mga may markang ≥100 ay nilagyan ng tatag bilang nababanat. Ang malawak na pag-aaral ng pag-uugali, biochemical, at electrophysiological ay sumusuporta sa bisa ng mga natatanging madaling kapitan at nababanat na mga subpopulasyong ito (Krishnan et al., 2007; Wilkinson et al., 2009; Vialou et al., 2010).
Upang suriin ang kahinaan ng Srffl / fl mice sa stress ng panlipunang pagkatalo, ang mga daga, na iniksiyon na bilateral sa AAV-GFP o AAV-Cre-GFP, ay nasailalim sa tatlong pagkakasunod sa pagkatalo sa parehong araw at sinubukan para sa interaksyong panlipunan 24 h mamaya. Ang submaximal na pamamaraan ng pagkatalo ay na-validate dati upang ibunyag ang mga posibleng phenotypes kasunod ng genetic manipulations (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010).
Natutunan ang kawalan ng kakayahan.
Ang overflicts ng Acr-GFP o AAV-Cre-GFP ay napapailalim sa natutunan na paraan ng kawalan ng kakayahan tulad ng inilarawan sa dati (Berton et al., 2007). Sa madaling sabi, ang mga mice ay napakita sa mga pasulput-sulpot, hindi maiiwasan na mga shocks ng paa para sa 1 h higit sa mga araw ng consecutives 2 (0.45 MA, tagal ng 5). Sa araw ng pagsubok, ang mga daga ay muling ipinasok sa kahon para sa 15 magkakasunod na mga pagsubok sa pagtakas. Sa panahon ng bawat pagsubok, ang isang tuloy-tuloy na shock ay naihatid at ang mga mice ay binigyan ng pagkakataong makatakas sa pamamagitan ng pagpasok ng katabi, hindi napipirming kompartamento. Kasunod ng isang matagumpay na pagtakas, ang pinto ay awtomatikong isinara at naitala ang latency ng pagtakas. Nang ang mga mice ay hindi makatakas sa loob ng 25, ang pagsubok ay tinapos at naitala bilang kabiguan. Ipinakita ng mga naunang pag-aaral na ang viral expression sa NAc at iba pang mga rehiyon ay walang epekto sa pag-uugali ng baseline escape sa kawalan ng stress (Newton et al., 2002; Berton et al., 2007).
Pagiging sensitibo sa Locomotor.
Dalawang linggo kasunod ng intra-NAc injection ng alinman sa AAV-GFP o AAV-Cre-GFP, ang mga daga ng Srffl / fl ay isinailalim sa lokomotor sensitization. Ang mga daga ay naiwan sa arena ng locomotor nang 30 minuto bawat araw sa loob ng 4 d. Kasunod sa habituation, ang mga hayop ay na-injected intraperitoneally na may 10 mg / kg cocaine-HCl at inilagay sa mga locomotor box. Ang mga aktibidad ng lokomotor ng mga hayop ay naitala gamit ang isang photobeam system (San Diego Instruments) bilang ambatory beam break na 30 minuto bawat araw. Ang pagkasensitibo ng lokomotor ay naitala sa loob ng 6 d.
Ginustong lugar ng lugar.
Ang pamamaraan ng pagkondisyon ng lugar ay isinasagawa tulad ng naunang inilarawan (Maze et al., 2010), na may mga sumusunod na pagbabago. Sa madaling sabi, 18 d pagkatapos ng intra-NAc infusions ng AAV-GFP o AAV-Cre-GFP sa Srffl / fl mouse, ang mga hayop ay inilagay sa mga chambers ng pagkondisyon, na binubuo ng tatlong magkakaibang konteksto na mga kapaligiran. Ang mga daga na nagpapakita ng makabuluhang kagustuhan para sa alinman sa dalawang mga silid sa pagkondisyon ay hindi kasama sa pag-aaral (<10% ng lahat ng mga hayop). Ang mga pangkat ng pag-condition ay karagdagang balanse upang ayusin ang anumang bias ng kamara na maaaring mayroon pa rin. Sa mga sumunod na araw, ang mga hayop ay na-injected ng asin at nakakulong sa isang silid ng hapon sa loob ng 30 minuto at pagkatapos ay na-injected ng cocaine (7.5 mg / kg, ip) at nakakulong ng 30 minuto sa kabilang silid kinabukasan, na katumbas ng dalawang pag-ikot ng pagsasanay sa samahan bawat paggamot (dalawang asin at dalawang pares ng cocaine). Sa araw ng pagsubok, ang mga daga ay inilagay pabalik sa patakaran ng pamahalaan nang walang paggamot sa loob ng 20 minuto at sinubukan upang suriin ang kagustuhan sa panig. Ang mga tugon ng locomotor sa cocaine ay sinuri sa pamamagitan ng mga beam break sa mga silid na nakapares sa cocaine upang matiyak ang pagiging epektibo ng paggamot sa gamot. Para sa lahat ng mga grupo, ang baseball locomotion bilang tugon sa asin ay sinuri upang matiyak na ang lokomotion ay hindi apektado ng paggamot sa viral.
Iba pang mga pagsubok sa pag-uugali.
Sinubukan ang mga Srffl / fl mice sa open-field, light / dark, at forced-swim tests batay sa nai-publish na mga protocol (Vialou et al., 2010). Ang aktibidad ng mga daga sa open-field ay naitala para sa 5 min gamit ang isang sistema ng pagsubaybay ng video (Ethovision) sa ilalim ng mga kondisyon ng red light. Para sa liwanag / madilim na pagsubok, ang mga daga ay pinapayagan na malayang tuklasin ang isang dalawang-chambered na kahon na binubuo ng isang malaking iluminado arena na konektado sa isang mas maliit na sarado na arena. Ang mga daga ay sinubok para sa isang panahon ng 5 min upang suriin ang dami ng oras na ginugol sa alinmang enclosure. Sa open-field at light / dark tests, ang oras na ginugol sa center at light arena, ayon sa pagkakabanggit, ay sinusuri bilang isang kabaligtarang index ng mga sagot na may kaugnayan sa pagkabalisa. Ang 1 d sapilitang paglangoy ay isinagawa para sa isang panahon ng 5 min. Ang nadagdagang oras ng kawalang-kilos sa panahon ng pagsubok na sapilitang paglangoy ay binigyang-kahulugan bilang isang pag-uugali na tulad ng prodepressant. Ang 1 d sapilitang paglangoy ay malawak na ginagamit sa mga daga at na-validate bilang isang sukatan ng predictive validity, sa mga therapies na antidepressant na bawasan ang mga oras ng immobility.
Immunohistochemistry
Ang Srffl / fl mice ay anesthetized at perfused sa intracardially 4% paraformaldehyde / PBS. Ang mga talino ay inalis at cryoprotected sa 30% sucrose / PBS. Ang mga coronal section (30 μm) ay pinutol sa isang freezing microtome at naproseso para sa mga pagsusuri ng immunohistochemical. Ang pagpapatunay ng Srffl / fl knock-out ay isinagawa gamit ang isang polyclonal antibody na nakadirekta laban sa SRF (1 / 2000; Santa Cruz Biotechnology). Ang pagpapahayag ng kredito ay nakumpirma sa pamamagitan ng GFP (chicken polyclonal, 1 / 8000, Aves Labs) na expression sa dissected brains, habang nililikha ang Cre sa GFP. Para sa pagsukat ng ΔFosB induction pagkatapos ng stress ng social defeat sa Srffl / fl knock-out mice, nakita ang ΔFosB gamit ang isang kuneho polyclonal antibody na itinaas laban sa N-terminal na rehiyon ng protina (1 / 1000; Santa Cruz Biotechnology). Ang mga imahe ay kinuha sa isang confocal mikroskopyo (20 × parangal; Zeiss). Ang bilang ng mga selulang GFP-immunopositive na binibilang bilang negatibo at positibo para sa ΔFosB immunoreactivity ay quantified sa maraming mga larawan para sa bawat hayop, na may mga halaga ng kasunod na kinakalkula para sa bawat hayop. Ang bawat hayop ay itinuturing na isang indibidwal na pagmamasid para sa statistical analysis.
Human postmortem NAc tissue
Ang tisyu ng utak ng postmortem ng tao ay nakuha mula sa Dallas Brain Collection, kung saan nakolekta ang tisyu mula sa Dallas Medical Examiner's Office at University of Texas (UT) Tissue Transplant Program ng Southwestern kasunod ng pahintulot mula sa susunod na kamag-anak. Ang tisyu ay pinag-aralan mula sa kapwa lalaki at babae na tumutugma sa edad, agwat ng postmortem, numero ng integridad ng RNA (RIN), at pH. Ang mga tiyak na kadahilanan ng agonal, kabilang ang pagkawala ng malay, hypoxia, pyrexia, mga seizure, dehydration, hypoglycemia, maraming pagkabigo ng organ, at paglunok ng mga neurotoxic na sangkap sa oras ng pagkamatay ay nakakaimpluwensya sa integridad ng RNA sa mga tisyu ng postmortem na utak (Tomita et al., 2004). Gumamit kami ng agonal factor scale (AFS) upang makilala ang mga sample ng tisyu sa bawat walong kundisyon na ito. Ang kawalan ng isang kadahilanan ng agonal ay itinalaga ng iskor na 0 at ang pagkakaroon nito ay naiskor bilang 1 upang magbigay ng isang kabuuang marka ng AFS sa pagitan ng 0 at 8. Ang tisyu na may mga markang agonal na 0 o 1 ay sumasalamin ng mahusay na mga sample ng kalidad; ang kaso ng demograpiko ay ibinibigay sa Talahanayan 1. Ang natitirang kalidad ng tisyu ay nakumpirma ng mataas na mga halaga ng RIN. Ang mga kaso ay isinailalim sa isang pamantayan ng pagkakawatak bago mabilis na pagyeyelo sa −40 ° C isopentane at pag-iimbak sa -80 ° C; ang karagdagang dissection ng NAc ay ginaganap sa frozen na tisyu. Sinuri at inaprubahan ng board ng pagsusuri ng institusyong UT ng Timog Kanluran ang koleksyon ng tisyu na ito para magamit ng pananaliksik. Ang isang direktang pakikipanayam ng impormante ay ginanap para sa bawat kaso ng pagkalumbay sa ibang araw, kung saan naitala ang impormasyon tungkol sa karamdaman ng kaso; isang diagnosis ng pinagkasunduan ng pangunahing depression ay ginawa gamit ang pamantayan ng DSM-IV ng dalawang psychiatrist sa pananaliksik. Wala sa mga kaso na kasama sa pag-aaral na ito ang may positibong mga screen ng toksikolohiya sa dugo para sa mga gamot ng pang-aabuso, alkohol, o mga iniresetang gamot maliban sa mga antidepressant. Sa kabila ng paggamot na antidepressant, lahat ng mga paksa ay nalulumbay sa klinika sa oras ng pagkamatay. Ang mga sample ng tisyu ay naipamahagi sa isang blinded fashion para sa pagtatasa.
Table 1.
Demographic data para sa human postmortem study
bahid ng mga kanluranin
Human at mouse NAc specimens ay naproseso tulad ng inilarawan dati (Maze et al., 2010). Ang frozen tissue ay na-sonicated sa 5 mM HEPES lysis buffer na naglalaman ng 1% SDS na may protease (Roche) at phosphatase inhibitors (Sigma). Ang mga konsentrasyon ng protina ay natukoy ng Dc protein assay (Bio-Rad). Ang pantay na halaga ng mga sample ng protina ay napapailalim sa SDS-PAGE at Western blotting. Ang mga bloke sa Western ay sinasaliksik gamit ang isang antibody sa SRF (1 / 2000; Santa Cruz Biotechnology) o GAPDH (1 / 1500; Abcam) at pagkatapos ay ini-scan at tinantiya gamit ang Odyssey imaging system (Licor).
RNA isolation at quantitative PCR
Ang RNA isolation, quantitative PCR (qPCR), at pagtatasa ng datos ay ginanap tulad ng naunang inilarawan (Maze et al., 2010; Vialou et al., 2010). Sa madaling sabi, ang RNA ay nakahiwalay sa TriZol reagent (Invitrogen) at karagdagang purified sa RNAeasy micro kit mula sa Qiagen. Ang lahat ng mga sampol ng RNA ay tinutukoy na magkaroon ng mga halaga 260 / 280 at 260 / 230 ≥1.8. Ang reverse transcription ay isinagawa gamit ang iScript (Bio-Rad). Ang qPCR na gumagamit ng SYBR green (Quanta) ay ginanap sa isang Applied Biosystems 7900HT RT PCR system na may sumusunod na mga parameter ng cycle: 2 min sa 95 ° C; 40 cycles ng 95 ° C para sa 15 s, 59 ° C para sa 30 s, 72 ° C para sa 33 s; at gradong pagpainit sa 95 ° C upang makabuo ng mga curve ng paghihiwalay para sa pagkumpirma ng mga solong produkto ng PCR. Ang data ay nasuri sa pamamagitan ng paghahambing sa mga halaga ng kondisyon ng paggamot (control vs susceptible o resilient mice, o kontrol ng tao kumpara sa mga pasyente na may depresyon) gamit ang paraan ng ΔΔC (t) (Tsankova et al., 2006). ΔFosB qPCR primers: foward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT at reverse, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG.
Chip
Ang Chip ay isinagawa tulad ng naunang inilarawan (Maze et al., 2010) sa binagong bilateral NAc punches mula sa kontrol, madaling kapitan at nababanat na mga daga (apat na 14-gauge punches / mouse) 1 pagkatapos ng huling karanasan ng pagkatalo at mula sa saline at cocaine- ginamot na mga hayop 24 pagkatapos ng huling paggamot. Ang tissue ay naka-cross-linked sa 1% formaldehyde. Pagkaraan ay tuluyang naantalang sa pamamagitan ng glycine application, at ang tissue ay hugasan at itinago sa -80 ° C hanggang sa paggamit. Ang sheared chromatin ay incubated magdamag na may anti-SRF antibody (Santa Cruz Biotechnology) na dati ay nakatali sa magnetic beads (Dynabeads M-280; Invitrogen). Pagkatapos ng reverse cross-linking at pagdalisay ng DNA, ang pagbubuklod ng SRF sa fosb promoter ay tinutukoy ng qPCR gamit ang mga primers na sumasaklaw sa isang rehiyon ng fosb promoter na naglalaman ng dalawang serum na tugon sa mga elementong may-bisang mga site. Ang mga pulldown ng SRF ay malaki ang pagtaas kumpara sa walang kontrol na antibody. Mouse fosb gene promoter primers: forward, CCCTCTGACGTAATTGCTAGG at reverse, ACCTCCCAAACTCTCCCTTC.
Mga pagtatasa ng istatistika
Ginamit ang mga one-way ANOVA upang ihambing ang mga paraan sa pagitan ng pagkontrol, madaling kapitan, at nababanat na mga daga sa mga pagsusuri sa biochemical at pag-uugali. Ginamit ang two-way ANOVAs upang ihambing ang ΔFosB induction sa pamamagitan ng pagkatalo ng panlipunan sa mga lokal na knock-out na daga ng Srf, pati na rin upang ihambing ang epekto ng pag-knockout ni Srf sa natutunang kawalan ng kakayahan at mga locomotor sensitization protocol. Ginamit ang mga pagsubok sa mag-aaral upang ihambing ang mga paraan sa epekto ng pag-knockout ng Srf sa uctionFosB na induction, at sa pagitan ng mga pangkat sa human postmortem tissue at pag-aaral ng ChIP ng mouse. Ang mga pagkakaiba sa pagitan ng mga pang-eksperimentong kondisyon ay itinuturing na makabuluhan sa istatistika kapag p p 0.05.
Mga resulta
SRF at ΔFosB na expression sa pantao depression at sosyalan talo mice
Upang galugarin ang isang potensyal na papel para sa SRF sa pagpapaunlad ng mala-depressive na pag-uugali, sinuri muna namin ang expression ng protina ng SRF sa NAc ng postmortem depressed na mga pasyente ng tao. Ang mga nalulumbay na paksa ay ipinakitang makabuluhang nabawasan ang mga antas ng SRF sa NAc kumpara sa kanilang mga kontrol na tumutugma sa edad (t (19) = 1.9; p <0.05) (Larawan 1A). Dahil sa papel na ginagampanan ng SRF sa pagkontrol sa aktibidad na nakasalalay sa aktibidad kaagad na maagang pagpapahayag ng gene (Ramanan et al., 2005), naisip namin na ang SRF ay maaaring kasangkot sa pagkontrol ng expressionFosB expression sa rehiyon ng utak na ito. Bilang suporta sa teorya na ito, napansin namin na ang mga antas ng Δfosb mRNA ay makabuluhang nabawasan din sa NAc ng mga nalulumbay na tao (t (16) = 1.8; p <0.05) (Larawan 1B). Ito ay naaayon sa kamakailang mga natuklasan ng nabawasan na mga antas ng ΔFosB na protina sa ilalim ng mga kondisyong ito rin (Vialou et al., 2010).
Sa Figure 1.
Ang talamak na stress na sapilitan stress na sapilitan ng SRF ay nauugnay sa nabawasan na criptionFosB transcription sa NAc. Ang A, B, Postmortem na mga pasyente na nalulumbay sa tao ay nagpapakita ng pinababang antas ng SRF protein (n = 10 / group; A) at Δfosb mRNA expression sa NAc (n = 8 / group; B). C, Mice na sumailalim sa talamak (10 d) panlipunang pagkatalo ng stress ay pinagsama sa madaling kapitan at nababanat na subpopulasyon. D, Ang talamak na stress sa pagkatalo sa lipunan ay binabawasan ang mga antas ng protina ng SRF sa NAc ng madaling kapitan ng mga daga, ngunit hindi nababanat na mga daga, kumpara sa mga kontrol na 24 oras matapos ang pagsubok sa pakikipag-ugnay sa panlipunan na ipinakita sa C. E, ang mga antas ng ΔfosB mRNA sa NAc ay hindi nabago sa madaling kapitan ng mga daga, ngunit malaki pinagsama-sama sa mga nababanat na hayop (n = 7-15 / pangkat). Nagpapakita ang F, SRF protein na tumaas na nagbubuklod sa tagapagtaguyod ng fosb gene pagkatapos ng talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan lamang sa nababanat, at hindi madaling kapitan, mga daga (n = 5 / grupo). Ang ipinakitang data ay ipinahiwatig bilang mean ± SEM (kinakatawan bilang mga error bar). Kon., Pagkontrol; Dep., Nalulumbay; Sus., Madaling kapitan; Res., Matatag. * p <0.05 kumpara sa kontrol; *** p <0.001 kumpara sa kontrol; #p <0.05 kumpara sa madaling kapitan; ## p <0.01 kumpara sa madaling kapitan; ### p <0.001 kumpara sa madaling kapitan.
Upang mapalawak ang mga natuklasan na ito, ginamit namin ang talamak na panlipunan na pagkatalo ng stress protocol sa mga daga. Dalawang kilalang grupo ng natalo na mga daga, madaling kapitan at nababanat, ay maliwanag (Krishnan et al., 2007) batay sa isang sukatan ng pag-iwas sa lipunan, kung saan ang mga madaling kapitan na hayop ay nagpakita ng makabuluhang nabawasan ang pakikipag-ugnay sa lipunan kumpara sa parehong pagkontrol at mga nababanat na hayop (F (2,23, 157.2) = 0.001; p <0.001; t mga pagsubok na may pagwawasto ng Bonferroni, madaling kapitan vs kontrol, p <0.05; nababanat vs kontrol, p <0.01; nababanat vs madaling kapitan, p <1) (Larawan 2,32C). Dalawang araw pagkatapos ng huling yugto ng pagkatalo, ang madaling kapitan, nababanat, at hindi natalo na mga daga ng kontrol ay pinag-aralan para sa ekspresyon ng SRF sa NAc. Katulad ng mga natuklasan sa pagkalumbay ng tao, ang mga antas ng protina ng SRF ay makabuluhang nabawasan sa NAc ng madaling kapitan ng mga daga kumpara sa mga kontrol, samantalang ang mga antas ng SRF ay hindi naapektuhan sa NAc ng mga nababanat na daga (F (4.7) = 0.05; p <0.05; t mga pagsubok na may Pagwawasto ng Bonferroni, madaling kapitan vs kontrol, p <0.05; nababanat kumpara sa madaling kapitan, p <1) (Larawan XNUMXD).
Susunod, sinuri namin ang expressionfosb mRNA expression sa NAc ng tatlong pangkat ng mga hayop at naobserbahan ang isang makabuluhang pagtaas ng increasefosb expression sa mga nababanat na hayop lamang, na may kalakaran ngunit walang makabuluhang pagtaas na sinusunod sa mga madaling kapitan ng daga (t (14) = 2.1; p <0.05 ) (Larawan 1E). Upang higit na siyasatin ang mga posibleng pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga antas ng SRF at transkripsyon ng Δfosb, ginamit namin ang ChIP upang suriin kung ang SRF na nagbubuklod sa tagapagtaguyod ng fosb gen ay nabago matapos ang talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan sa magkakahiwalay na cohorts ng madaling kapitan at nababanat na mga daga. Ang mga nababanat na hayop ay nagpapakita ng makabuluhang pinahusay na SRF na nagbubuklod sa tagapagtaguyod ng fosb sa NAc kumpara sa mga kontrol (t (8) = 2.1; p <0.05) pati na rin kumpara sa madaling kapitan ng mga daga (t (8) = 2.0; p <0.05). Walang pagkakaiba ang naobserbahan sa pagitan ng mga kontrol at madaling kapitan ng mga daga, marahil ay sumasalamin sa kakulangan ng induction ng SRF sa mga madaling kapitan na daga (Larawan 1F).
Upang kumpirmahin ang papel ng SRF sa regulasyon ng ΔFosB kasunod ng talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan, ginamit ang Srffl / fl mice upang suriin ang epekto ng isang selective na pagtanggal ng SRF mula sa NAc sa stress induction ng ΔFosB. Ang mga daga ng srffl / fl ay stereotaxically na na-injected intra-NAc na may mga AAV vector na nagpapahayag ng GFP o Cre-GFP. Ang isang NAc-tuktok na knock-out ng SRF na sapilitan ng AAV-Cre-GFP ay nakumpirma na immunohistochemically (Larawan 2A). Sa katunayan, walang pag-overlap sa pagitan ng paglamlam ng SRF at ekspresyon ng Cre, na nagpapakita ng pagiging epektibo ng pag-knock-out. Sa microdissected NAc punches, nakita namin ang isang makabuluhang pagbaba ng 50% sa mga antas ng protina ng SRF (t (11) = 4.3; p <0.001). Ang lakas ay malamang na sumasalamin sa katotohanan na ang isang maliit na bahagi ng tisyu sa mga naturang microdissection ay hindi nahawahan ng viral.
Sa Figure 2.
Pinagitna ng SRF ang ΔFosB induction ng talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan. A, Pag-iniksyon ng AAV-Cre-GFP sa NAc ng Srffl / fl mice ay nagreresulta sa pag-knock-out ng SRF protein sa mga nagpapalabas ng neuron na neuron. Ang pag-iniksyon ng AAV-GFP ay walang maliwanag na epekto. B, Ang nasabing pumipili na pag-knock-out ng SRF mula sa NAc ay ganap na hinaharangan ang induction ng ΔFosB sa NAc kasunod ng talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan (n = 4 / grupo). Ang ipinakitang data ay ipinahiwatig bilang mean ± SEM (kinakatawan bilang mga error bar). * p <0.05 kumpara sa AAV-GFP control; ** p <0.01 kumpara sa pagkatalo ng AAV-GFP.
Susunod naming ginampanan ang dami ng immunohistochemistry para sa ΔFosB sa NAc ng natalo na Srffl / fl mice na iniksyon ng intra-NAc sa alinman sa AAV-Cre-GFP o AAV-GFP. Kasunod ng talamak na pagkabigo ng pagkatalo sa lipunan, ang ekspresyon ng ΔFosB ay makabuluhang sapilitan sa NAc ng mga hayop na na-injected ng AAV-GFP (pakikipag-ugnay sa paggamot sa virus ×, F (1,12) = 6.4; t pagsusulit na may pagwawasto ng Bonferroni, kontrol kumpara sa pagkatalo, p <0.05; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01). Gayunpaman, ang induction na ito ay hindi sinusunod sa mga daga ng Srffl / fl na tumatanggap ng AAV-Cre-GFP (Larawan 2B), na ipinapakita na ang uctionFosB induction sa NAc ng talamak na stress ay nangangailangan ng SRF.
Ang SRF knock-out sa NAc ay nagtataguyod ng prodepression- at proanxiety-like phenotypes
Dahil ang ΔFosB induction ng talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan ay dati nang ipinakita upang mamagitan ng katatagan (Vialou et al., 2010), naisip namin na ang pagbawas ng SRF, at ang nagresultang pagkawala ng induction na ΔFosB, sa mga madaling kapitan ng mga hayop ay maaaring kumatawan sa isang negatibong pagbagay na sa huli ay nagawa mga hayop na mas mahina sa masamang epekto ng stress. Upang masubukan ang teorya na ito, sinimulan namin ang isang lokal na pagtanggal ng tukoy na NAc ng Srf gene sa mga nasa edad na Srffl / fl mice tulad ng inilarawan sa itaas, at ang mga nagresultang daga at ang kanilang mga kontrol ay nasubukan sa isang baterya ng mga paradahan ng pag-uugali upang masuri ang baseline depression- at pagkabalisa- kagaya ng ugali. Ang lokal na pagtanggal ng NAc ng SRF ay nagsulong ng isang katulad na epekto ng prodepression na sinusukat sa pamamagitan ng sapilitang-paglangoy na pagsubok (t (30) = 2.5; p <0.05), pati na rin isang nakakaisip na epekto na sinusukat sa bukas na larangan (t (38) = 1.9; p <0.05) at ilaw / madilim na mga pagsubok (t (8) = 1.9; p <0.05). Samakatuwid, ang mga daga ng Srffl / fl na tumatanggap ng AAV-Cre-GFP sa NAc ay nagpakita ng pagbawas ng latency sa kawalang-kilos sa sapilitang paglangoy na pagsubok, mas kaunting oras sa gitna ng isang bukas na bukid, at mas kaunting oras sa ilaw na kompartimento ng isang ilaw / madilim na kahon kumpara sa mga hayop na na-injected ng AAV-GFP (Larawan 3A – C). Gayunpaman, ang pagtanggal ng intra-NAc ng SRF ay hindi nagbago ng mga antas ng batayan ng paggalaw, na nagpapahiwatig na ang naobserbahang mga epekto sa pag-uugali sa mga hayop na kumakatok sa SRF ay hindi dahil sa mga abnormalidad sa pangkalahatang aktibidad ng lokomotor (Larawan 3D). Ang data na ito ay kagiliw-giliw sa ilaw ng mga nakaraang ulat na nagmumungkahi na, kahit na ang ΔFosB sa NAc ay kinokontrol ang mala-depressive na pag-uugali, hindi ito mukhang kasangkot sa mga tugon na nauugnay sa pagkabalisa (Vialou et al., 2010). Ang aming kasalukuyang mga natuklasan na ang pagkawala ng SRF ay nagpapahiwatig ng mga tugon na hindi nakakabahala na iminumungkahi na ginagawa ito sa pamamagitan ng mga target bukod sa ΔFosB.
Sa Figure 3.
Ang SRF knock-out mula sa NAc ay nagtataguyod ng mga phenotypes na tulad ng prodepression- at proanxiety. Ang A – C, Selective knock-out ng SRF mula sa NAc, na nakamit sa pamamagitan ng AAV-Cre-GFP injection sa NAc ng Srffl / fl mice, binabawasan ang latency sa immobility sa sapilitang paglangoy na pagsubok (n = 14-18 / pangkat; A) at binabawasan ang oras na ginugol sa gitna at oras na ginugol sa light compartment sa open-field (B) at light / dark (C) na mga pagsubok, ayon sa pagkakabanggit (n = 5-15 / group). D, Walang pagkakaiba sa aktibidad ng basal locomotor na napansin sa bukas na larangan ng mga daga na nakatanggap ng intra-NAc injection ng AAV-GFP o AAV-Cre-GFP. E, F, Tumaas na pagkamaramdamin sa natutunang kawalan ng kakayahan (n = 7-8 / grupo; E) at stress ng pagkatalo sa lipunan (n = 5-6 / grupo; F), tulad ng sinusukat, ayon sa pagkakabanggit, ng latency upang makatakas at oras ng pakikipag-ugnay sa lipunan . Ang ipinakitang data ay ipinahiwatig bilang mean ± SEM (kinakatawan bilang mga error bar). * p <0.05 kumpara sa GFP o kumpara sa target na wala; ** p <0.01 kumpara sa GFP; *** p <0.001 kumpara sa GFP.
Susunod naming pinag-aralan kung ang pagtanggal ng SRF sa NAc ay nagdaragdag din ng kahinaan ng isang hayop sa mga nakapipinsalang epekto ng paulit-ulit na pagkapagod. Ang mga daga ng srffl / fl, na na-injected sa alinman sa AAV-Cre-GFP o AAV-GFP sa NAc, ay napagmasdan sa dalawang mga modelo ng pagkalumbay, natutunan ang kawalan ng kakayahan at talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan. Sa natutunang kawalan ng kakayahan, ang mga hayop na Srffl / fl na tumatanggap ng AAV-Cre-GFP ay nagpakita ng mas mataas na latency upang makatakas sa isang pagkabigla sa paa kasunod ng naunang pagkakalantad sa hindi maiiwasang stress ng paa ng paa (paggamot × pagsubok ng pakikipag-ugnay, F (14,180) = 10.2; t pagsusulit na may pagwawasto ng Bonferroni, p <0.001; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01), na nagpapahiwatig ng mas mataas na pagkamaramdamin sa mga depisit sa pag-uugali na sapilitan ng stress (Larawan 3E). Katulad nito, ang pagtanggal ng lokal na SRF mula sa NAc ay nadagdagan din ang pag-ayaw sa panlipunan (t (10) = 1.8; p <0.05) kumpara sa mga hayop ng kontrol na na-injected ng AAV-GFP kasunod ng talamak na stress sa pagkatalo ng lipunan (Larawan 3F), isang mala-epekto na epekto ng prodepression.
Kakulangan ng paglahok ng SRF sa pagtuturo ng ΔFosB at pag-uugali sa kokaina
Dahil sa ang ΔFosB ay dinadala sa NAc bilang tugon sa mga gamot ng pang-aabuso tulad ng cocaine, interes na suriin ang isang potensyal na papel para sa SRF sa aksyon ng cocaine. Hindi tulad ng talamak na stress sa pagkatalo sa lipunan, ang paulit-ulit na pagkakalantad sa cocaine ay hindi nagbago ng ekspresyon ng protina ng SRF sa NAc (t (14) = 0.8; p> 0.05) (Larawan 4A) at walang epekto sa SRF na nagbubuklod sa tagapagtaguyod ng fosB gene sa rehiyon ng utak na ito (t (4) = 0.7; p> 0.05) (Larawan 4B). Ipinapahiwatig nito na, salungat sa stress, induction ng ΔFosB pagkatapos ng talamak na cocaine ay hindi namamagitan sa pamamagitan ng SRF. Diretso naming sinubukan ito sa pamamagitan ng pagsusuri kung ang akumulasyon ng ΔFosB pagkatapos mabago ang talamak na cocaine sa mga hayop ng Srffl / fl na tumatanggap ng AAV-Cre-GFP kumpara sa AAV-GFP sa NAc. Nalaman namin na ang pagtanggal ng SRF ay walang epekto sa akumulasyon ng aineFosB na ipinasok ng cocaine sa rehiyon ng utak na ito (Larawan 4C).
Sa Figure 4.
Ang pagkawala ng SRF ay walang epekto sa cocaine induction ng ΔFosB o cocaine-regulated na pag-uugali. Ang A, B, Naulit na cocaine exposure (7 d, 20 mg / kg cocaine-HCl) ay walang epekto sa ekspresyon ng protina ng SRF sa NAc (A) o sa SRF na umiiral sa fosB gene promoter sa rehiyon ng utak na ito (B) 24 h pagkatapos exposure sa gamot (n = 5 / grupo). C, ΔFosB akumulasyon, nasusukat immunocytochemically, mga sumusunod na malubhang cocaine exposure ay hindi naapektuhan ng NAc-specific knock-out ng SRF. D, E, ang lokal na pagtanggal ng SRF mula sa NAc ay walang epekto sa aktibidad ng lokomotor kasunod ng inisin ng asin (d 1) sa aktibidad ng locomotor at sensitization (n = 8 / group) (d 1-7; D) o sa cocaine conditioned place preference (n = 8 / group; E). Ang data na ipinapakita ay ipinahayag bilang ibig sabihin ng ± SEM (kinakatawan bilang mga error bar).
Upang masundan ang kamangha-manghang paghahanap na ito, sinisiyasat namin kung ang isang pumipili na SRF na pag-knock-out mula sa NAc ay nagbabago ng mga tugon sa pag-uugali sa cocaine. Alinsunod sa kakulangan ng SRF ng regulasyon ng cocFosB induction ng cocaine, ang partikular na NAc-knock-out ng SRF ay walang epekto sa aktibidad ng lokomotor na sapilitan ng talamak na cocaine o lokomotor sensitization na nakita pagkatapos ng paulit-ulit na pagkakalantad sa cocaine (paggamot × pakikipag-ugnayan sa oras, F (4,80) = 0.3; p> 0.05) (Larawan 4D). Gayundin, ang pag-knock-out na tukoy sa NAF na SRF ay walang epekto sa kagustuhan sa lugar na kundisyon ng cocaine (t (14) = 0.1; p> 0.05) (Larawan 4E), na nagbibigay ng isang hindi direktang sukat ng gantimpala ng cocaine.
Pagtalakay
Ang pag-aaral na ito ay nakilala ang SRF bilang isang nobelang upstream mediator ng ΔFosB sa NAc matapos ang talamak na pagkatalo ng sosyal na pagkatalo, at nagpapahiwatig ng SRF sa pag-unlad ng mga pag-uugali tulad ng depressive at pagkabalisa. Nagbibigay kami ng direktang katibayan na ang matagal na stress ng social pagkatalo ay nagbabawas ng mga antas ng SRF sa NAc ng madaling kapitan, ngunit hindi nababanat, mga hayop, at na ang downregulation na ito ay humahadlang sa induksiyon ng ΔFosB sa rehiyon ng utak na ito, na aming ipinapakita ay kinakailangan para sa epektibong pagkaya sa matagal na stress, ie, resilience (Vialou et al., 2010). Ang isang katulad na pagbawas sa pagpapahayag ng SRF ay natagpuan sa NAc ng mga nalulumbay na tao, kung saan ang ΔFosB mRNA at protina na expression ay nabawasan rin. Sa kabaligtaran, ang mga antas ng ΔFosB ay hindi nabawasan sa NAc ng mga madaling kapitan ng mice, sa kabila ng isang downregulation ng SRF, na nagpapahiwatig ng iba pang mga transcriptional na mekanismo, bilang hindi pa alam, sa pagkontrol sa ΔFosB expression. Isang sanhi ng papel na ginagampanan para sa SRF sa pamamagitan ng paggalaw ng ΔFosB induction sa NAc matapos ang talamak na stress ay itinatag sa pamamagitan ng paggamit ng inducible genetic na pagtanggal ng SRF mula sa rehiyon ng utak. Ang pag-uugali ng pag-uugali ng mga daga na may ganitong kanser sa NA na tukoy sa SRF ay higit na nagpapahiwatig ng SRF na naglalaro ng mahalagang papel sa pagbuo ng parehong baseline at stress-sapilitan depression- at tulad ng pag-uugali ng pagkabalisa. Sa kaakit-akit na kaibahan, ang pagtanggal ng SRF ay walang epekto sa ΔFosB induction bilang tugon sa talamak na cocaine administration o sa mga epekto sa pag-uugali ng cocaine. Ang mga natuklasan na ito ay sumusuporta sa isang nobelang tungkulin na partikular na pampasigla para sa SRF sa regulasyon ng pagtuon sa ΔFosB at ng mga tugon sa pag-uugali sa magkakaibang mga perturbasyon sa kapaligiran.
Ang transmitted na SRF-mediated ay dating naipakita upang tumugon sa synaptic aktibidad, higit sa lahat na na-trigger ng nadagdagan kaltsyum pag-agos, pati na rin sa pinahusay na neurotrophic aktibidad, lalo na sa kaso ng neurotrophic kadahilanan na nagmula sa utak (BDNF) (Bading et al, 1993; Xia et al., 1996; Johnson et al., 1997; Chang et al., 2004; Kalita et al., 2006, Knöll at Nordheim, 2009). Itinataas nito ang kagiliw-giliw na tanong kung bakit ang downtime ng SRF sa NAc ng madaling kapitan, ngunit hindi nababanat, ang mga daga pagkatapos ng matagal na stress ng social na pagkatalo. Ang ganitong kaugalian regulasyon ay malamang na hindi mediated sa pamamagitan ng dopamine o BDNF signaling, dahil nadagdagan mice display nadagdagan ang mga antas ng protina BDNF at nadagdagan sa ibaba ng agos BDNF pagbibigay ng senyas sa NAc pati na rin ang pinahusay na pagputok pagpapaputok ng ventral tegmental area (VTA) dopamine neurons, kung saan innervate ang NAc, ang mga nababanat na hayop ay nagpapakita ng normal na mga antas ng BDNF signaling at VTA firing rates (Krishnan et al., 2007). Ang isang alternatibong posibilidad ay ang pagpapahayag ng SRF ay pinigilan sa NAc bilang tugon sa binagong glutamatergic innervation ng rehiyon ng utak na ito, na ipinakita namin ay naiiba sa iba't ibang paraan sa madaling kapitan kumpara sa nababanat na mga daga (Vialou et al., 2010). Kailangan ang karagdagang trabaho upang direktang pag-aralan ito at iba pang posibleng mga mekanismo.
Kamakailang mga pag-aaral gamit genome-wide at iba pang mga pamamaraan magmungkahi na ~5-10% ng SRF target gene sa mga neuron ay agarang maagang gene (Philippar et al, 2004;.. Ramanan et al, 2005; Etkin et al, 2006;. Umbok at Nordheim, 2009). Ito ay pare-pareho sa aming data na nagpapakita ng isang kritikal na papel para sa SRF sa induction ng ΔFosB, isang pinutol na produkto ng fosb agarang maagang gene, sa pamamagitan ng matagal na stress. Kapansin-pansin, maraming mga target na gene ng SRF na kinilala sa iba't ibang mga pag-aaral na ito ay kumakatawan din sa mga kilalang target ng ΔFosB sa NAc (Kumar et al., 2005; Renthal et al., 2008, 2009; Maze et al., 2010). Kabilang sa mga karaniwang regulated genes na ito ay ilang na kilala upang makontrol ang neuronal cytoskeleton (halimbawa, Cdk5, Arc, at Actb). Gayunpaman, ito ay pare-pareho sa mga ulat na ang impluwensya ng SRF ay kumilos dinamika at neuronal motility sa ilang neuronal na mga uri ng cell (Alberti et al., 2005; Ramanan et al., 2005; Knöll et al., 2006), samantalang ang ΔFosB ay kilala sa makakaapekto sa dendritic spine outgrowth ng NAc neurons (Maze et al., 2010). Ang mga karaniwang karaniwang pagganap na endpoint ay maaaring sumalamin sa mga pinagsamang epekto ng SRF, kasama ang induction ng ΔFosB, kumikilos sa isang serye ng mga karaniwang gene na target upang maka-impluwensya ng neuronal morpolohiya at, sa huli, kumplikadong pag-uugali.
Ipinakita rin ang SRF upang i-play ang mga kritikal na tungkulin sa regulasyon ng synaptic plasticity at neuronal na aktibidad na nakasalalay sa gene expression at pag-uugali. Halimbawa, pagkawala ng SRF-nakasalalay induction ng agarang maagang gene bilang tugon sa alinman sa kusang-loob na paggalugad ng isang nobelang kapaligiran o neuronal activation sa pamamagitan electroconvulsive Pagkahilo ay nauugnay sa kapansanan pang-matagalang synaptic potentiation sa hippocampus ng SRF mutants (Ramanan et al. , 2005; Etkin et al., 2006). Bukod dito, ang pag-ubos ng SRF sa hippocampus ay ipinapakita upang maging sanhi ng mga depisit sa pang-matagalang synaptic depression, agarang maagang gene expression na sapilitan sa pamamagitan ng isang nobelang konteksto, at kapansanan sa habituation sa panahon ng paggalugad ng isang nobelang kapaligiran (Etkin et al, 2006). Ang mga datos na ito ay nagtataguyod ng kahalagahan ng SRF sa kakayahan ng isang hayop na umangkop nang naaangkop sa mga pagkagambala sa kapaligiran, tulad ng nabanggit na kaso ng pag-aaral na mag-ugnay sa isang bagong kapaligiran, o, sa kaso ng pag-angkop sa mga negatibong nakapagpapasiglang pampasigla, upang maiwasan ang paglaganap ng stress -nagpahiwatig na mga depisit sa pag-uugali, tulad ng sa kasalukuyang pag-aaral. Sa gayon, napagmasdan namin na ang mga hayop na nagpapakita ng mga kakulangan sa ekspresyon ng SRF, alinman bilang tugon sa stress ng pagkatalo sa lipunan sa mga madaling kapitan o sa pamamagitan ng direktang pagkatumba ng SRF, ay nagpapakita ng mas mataas na pagkabagot na tulad ng pag-uugali. Dahil sa nalulumbay na mga paksa ng tao ay naroroon din sa pagbawas ng mga antas ng SRF sa NAc, maiisip na ang SRF ay may pangunahing papel sa pagkontrol sa kakayahan ng isang indibidwal na positibong umangkop sa mga negatibong stimulus sa kapaligiran, sa bahagi sa pamamagitan ng regulasyon ng expressionFosB expression sa NAc.
MGA PAGHAHANDA NG MEKANISMO: PAGKABUHAY TUNGKOL SA PAGKUHA
Ang isang nakakagulat na paghahanap ng kasalukuyang pag-aaral ay na, bagaman kinakailangan ang SRF para sa akumulasyon ng ΔFosB sa NAc bilang tugon sa talamak na stress, hindi kinakailangan para sa induksiyon ng FosB sa loob ng parehong rehiyon ng utak bilang tugon sa malalang cocaine. Gayundin, hindi kinakailangan ang SRF para sa normal na mga tugon sa asal sa gamot. Ang mga datos na ito ay nagpapakita na, sa kabila ng katunayan na ang ΔFosB ay sapilitan sa NAc bilang tugon sa maraming uri ng stimuli (Nestler et al., 1999; Nestler, 2008), mayroong lumilitaw na natatanging molecular pathways na humahantong sa ΔFosB induction. Ang isang posibleng paliwanag para sa mga natuklasan na ito ay ang bahagyang iba't ibang mga uri ng cell na nagpapakita ng akumulasyon ng FosB bilang tugon sa stress kumpara sa cocaine. Panmatagalang pagkapagod induces ΔFosB humigit-kumulang pantay sa loob ng dalawang pangunahing subpopulations ng NAC medium tinikan neurons, mga pagpapahayag ng nakararami D1 kumpara D2 dopamine receptor, samantalang ang talamak kokaina induces ΔFosB nakararami sa loob ng D1 + neurons (Kelz et al, 1999;.. Perrotti et al, 2004) . Kaya, posible na ang mga pathway na umaasa sa SRF ay maaaring mahalaga para sa ΔFosB induction sa D2 + neurons. Gayunpaman, hindi nito ipapaliwanag ang kumpletong pagkawala ng induksiyon ng ΔFosB sa mga kuto ng SRF ng kuto pagkatapos ng talamak na stress, dahil ang induksiyon ay nangyayari sa parehong neuronal subtypes. Ang isang alternatibong paliwanag ay ang talamak na stress at talamak na cocaine na pumipinsala sa mga natatanging intracellular signaling cascades, sa pamamagitan ng kanilang mga natatanging mga mode ng pagkilos sa NAc neurons, na may talamak na stress marahil ay nagtatrabaho sa pamamagitan ng binagong glutamatergic transmission, tulad ng nabanggit na mas maaga, at talamak na cocaine na nagtatrabaho lalo na sa pamamagitan ng D1 receptor signaling (Nestler, 2008). Still isa pang posibilidad ay na ΔFosB induction pamamagitan ng talamak stress kumpara sa talamak cocaine ay nakasalalay sa natatanging transcriptional mekanismo na differentially kontrolado ng natatanging neural input innervating ang NAC mula sa iba't ibang glutamatergic rehiyon projection, halimbawa, ang ilang mga rehiyon ng prefrontal cortex, hippocampus, at amygdala. Karamihan sa karagdagang trabaho ay kinakailangan upang galugarin ang mga ito at alternatibong posibilidad.
Sama-sama, natuklasan ng aming mga natuklasan ang isang nobelang transcriptional na mekanismo kung saan ang ΔFosB ay sapilitan sa NAc upang mamagitan sa mga tugon ng proresilience sa stressful stimuli. Nagbibigay din ang pag-aaral na ito ng mahahalagang bagong pananaw sa papel na ginagampanan ng SRF sa antas ng NAc sa regulasyon ng depression - at tulad ng pag-uugali ng pagkabalisa. Ang pagkakaroon ng isang mas mahusay na pag-unawa sa papel na ginagampanan ng SRF sa pagsasaayos ng mga naturang pag-uugali ay makakatulong sa pagkilala ng mga target na nobela ng gen na kasangkot sa katatagan sa mga karamdaman na nauugnay sa stress, at maaaring mapadali ang pag-unlad sa hinaharap ng mas mabisang antidepressant therapies.
Ang gawaing ito ay sinusuportahan ng mga pamigay mula sa National Institute of Mental Health at National Institute sa Pag-abuso sa Gamot at sa pamamagitan ng isang alyansang pananaliksik sa AstraZeneca. Pinasasalamatan namin si David D. Ginty sa pagbibigay ng Srffl / fl mice.
Ang sulat ay dapat na direksiyon kay Eric J. Nestler, Department of Neuroscience ng Fishberg, School of Medicine ng Mount Sinai, One Gustave L. Levy Place, Box 1065, New York, NY 10029-6574. [protektado ng email]
Copyright © 2010 ang mga may-akda 0270-6474 / 10 / 3014585-08 $ 15.00 / 0
Mga sanggunian
1. ↵
1. Alberti S,
2. Krause SM,
3. Kretz O,
4. Philippar U,
5. Lemberger T,
6. Casanova E,
7. Wiebel FF,
8. Schwarz H,
9. Frotscher M,
10. Schütz G,
11. Nordheim A
(2005) Neuronal migration sa murine rostral migratory stream ay nangangailangan ng serum response factor. Proc Natl Acad Sci USA 102: 6148-6153.
Abstract / FREE Full Text
2. ↵
1. Bading H,
2. Ginty DD,
3. Greenberg ME
(1993) Ang regulasyon ng gene expression sa hippocampal neurons sa pamamagitan ng mga natatanging kaltsyum signaling pathways. Science 260: 181-186.
Abstract / FREE Full Text
3. ↵
1. Berton O,
2. McClung CA,
3. Dileone RJ,
4. Krishnan V,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Graham D,
8. Tsankova NM,
9. Bolanos CA,
10. Rios M,
11. Monteggia LM,
12. Sariling DW,
13. Nestler EJ
(2006b) Mahalagang papel na ginagampanan ng BDNF sa mesoprya dopamine pathway sa social na pagkatalo ng stress. Science 311: 864-868.
Abstract / FREE Full Text
4. ↵
1. Berton O,
2. Covington HE 3rd.,
3. Si Ebner K,
4. Tsankova NM,
5. Carle TL,
6. Ulery P,
7. Bhonsle A,
8. Barrot M,
9. Krishnan V,
10. Singewald GM,
11. Singewald N,
12. Birnbaum S,
13. Neve RL,
14. Nestler EJ
(2007) Pagtatalaga ng ΔFosB sa periaqueductal gray sa pamamagitan ng stress nagtataguyod ng mga aktibong mga sagot sa pagkaya. Neuron 55: 289-300.
CrossRefMedline
5. ↵
1. Chang SH,
2. Poser S,
3. Xia Z
(2004) Isang nobelang tungkulin para sa serum na tugon kadahilanan sa neuronal kaligtasan ng buhay. J Neurosci 24: 2277-2285.
Abstract / FREE Full Text
6. ↵
1. Etkin A,
2. Alarcón JM,
3. Weisberg SP,
4. Touzani K,
5. Huang YY,
6. Nordheim A,
7. Kandel ER
(2006) Isang tungkulin sa pag-aaral para sa SRF: ang pagtanggal sa forebrain ng mga may sapat na gulang ay nagkakalat ng LTD at ang pagbuo ng agarang memorya ng isang kontekstong nobela. Neuron 50: 127-143.
CrossRefMedline
7. ↵
1. Heinze HJ,
2. Heldmann M,
3. Voges J,
4. Hinrichs H,
5. Marco-Pallares J,
6. Hopf JM,
7. Müller UJ,
8. Galazky I,
9. Sturm V,
10. Bogerts B,
11. Münte TF
(2009) Pag-counteracting sensitization sa insentibo sa malubhang pag-asa sa alkohol na gumagamit ng malalim na utak pagpapasigla ng nucleus accumbens: klinikal at pangunahing aspeto sa agham. Front Hum Neurosci 3: 22.
Medline
8. ↵
1. Johnson CM,
2. Hill CS,
3. Chawla S,
4. Treisman R,
5. Pamagat H
(1997) Kinokontrol ng kaltsyum ang expression ng gene sa pamamagitan ng tatlong magkakaibang pathway na maaaring gumana nang nakapag-iisa sa Ras / mitogen-activate protina kinase (ERKs) signaling cascade. J Neurosci 17: 6189-6202.
Abstract / FREE Full Text
9. ↵
1. Kalita K,
2. Kharebava G,
3. Zheng JJ,
4. Hetman M
(2006) Ang papel na ginagampanan ng megakaryoblastic acute leukemia-1 sa ERK1 / 2 na nakadepende sa pagbibigay-sigla ng serum na sagot na kadahilanan na hinihimok ng pagsasalin sa pamamagitan ng BDNF o nadagdagan ang synaptic na aktibidad. J Neurosci 26: 10020-10032.
Abstract / FREE Full Text
10. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Sariling DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Pagpapahayag ng factor sa pagkakasalin ΔFosB sa mga kontrol ng utak ang pagiging sensitibo sa kokaina. Kalikasan 401: 272-276.
CrossRefMedline
11. ↵
1. Knöll B,
2. Nordheim A
(2009) Functional versatility ng transcription factors sa nervous system: ang SRF paradigm. Trends Neurosci 32: 432-442.
CrossRefMedline
12. ↵
1. Knöll B,
2. Kretz O,
3. Fiedler C,
4. Alberti S,
5. Schütz G,
6. Frotscher M,
7. Nordheim A
(2006) Serum na tugon kadahilanan kumokontrol neuronal circuit pagpupulong sa hippocampus. Nat Neurosci 9: 195-204.
CrossRefMedline
13. ↵
1. Krishnan V,
2. Han MH,
3. Graham DL,
4. Berton O,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Laplant Q,
8. Graham A,
9. Lutter M,
10. Lagace DC,
11. Ghose S,
12. Reister R,
13. Tannous P,
14. Green TA,
15. Neve RL,
16. Chakravarty S,
17. Kumar A,
18. Eisch AJ,
19. Sariling DW,
20. Lee FS,
21. et al.
(2007) Mga pagsasaayos ng molecular na napapailalim sa pagkamaramdamin at paglaban sa panlipunang pagkatalo sa mga rehiyon ng gantimpala sa utak. Cell 131: 391-404.
CrossRefMedline
14. ↵
1. Kuhn J,
2. Bauer R,
3. Pohl S,
4. Lenartz D,
5. Huff W,
6. Kim EH,
7. Klosterkoetter J,
8. Sturm V
(2009) Mga obserbasyon sa nag-iisang pagtigil sa paninigarilyo pagkatapos ng malalim na utak na pagpapasigla ng mga accumbens ng nucleus. Eur Addict Res 15: 196-201.
CrossRefMedline
15. ↵
1. Kumar A,
2. Choi KH,
3. Renthal W,
4. Tsankova NM,
5. Ang Theobald DE,
6. Truong HT,
7. Russo SJ,
8. Laplant Q,
9. Sasaki TS,
10. Whistler KN,
11. Neve RL,
12. Sariling DW,
13. Nestler EJ
(2005) Chromatin remodeling ay isang mahalagang mekanismo na nakasalalay sa cocaine-sapilitan plasticity sa striatum. Neuron 48: 303-314.
CrossRefMedline
16. ↵
1. Maze I,
2. Covington HE 3rd.,
3. Dietz DM,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Mekaniko M,
8. Mouzon E,
9. Neve RL,
10. Haggarty SJ,
11. Ren Y,
12. Sampath SC,
13. Hurd YL,
14. Greengard P,
15. Tarakhovsky A,
16. Schaefer A,
17. Nestler EJ
(2010) Mahalagang papel ng histone methyltransferase G9a sa cocaine-induced plasticity. Science 327: 213-216.
Abstract / FREE Full Text
17. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) DeltaFosB: isang molecular switch para sa pang-matagalang pagbagay sa utak. Brain Res Mol Brain Res 132: 146-154.
Medline
18. ↵
1. Nestler EJ
(2008) Transcriptional mekanismo ng pagkagumon: papel na ginagampanan ng deltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 363: 3245-3255.
Abstract / FREE Full Text
19. ↵
1. Nestler EJ,
2. Carlezon WA Jr.
(2006) Ang mesolimbic dopamine reward circuit sa depression. Biological Psychiatry 59: 1151-1159.
CrossRefMedline
20. ↵
1. Nestler EJ,
2. Kelz MB,
3. Chen J
(1999) ΔFosB: isang molekular tagapamagitan ng pang-matagalang neural at pang-asal na plasticity. Brain Res 835: 10-17.
CrossRefMedline
21. ↵
1. Newton SS,
2. Thome J,
3. Wallace TL,
4. Shirayama Y,
5. Schlesinger L,
6. Sakai N,
7. Chen J,
8. Neve R,
9. Nestler EJ,
10. Duman RS
(2002) Ang pagsugpo ng proteksiyon ng semento ng semento ng elemento o dynorphin sa nucleus accumbens ay gumagawa ng isang antidepressant-tulad ng epekto. J Neurosci 22: 10883-10890.
Abstract / FREE Full Text
22. ↵
1. Nikulina EM,
2. Arrillaga-Romany Ako,
3. Miczek KA,
4. Hammer RP Jr.
(2008) Pangmatagalang pagbabago sa mesocorticolimbic structures pagkatapos ng paulit-ulit na pagkatalo ng social pagkatalo sa mga daga: oras na kurso ng mu-opioid receptor mRNA at FosB / DeltaFosB immunoreactivity. Eur J Neurosci 27: 2272-2284.
CrossRefMedline
23. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Pagtatalaga ng ΔFosB sa mga kaayusan ng utak na kaugnay ng gantimpala pagkatapos ng matagal na stress. J Neurosci 24: 10594-10602.
Abstract / FREE Full Text
24. ↵
1. Perrotti LI,
2. Weaver RR,
3. Robison B,
4. Renthal W,
5. Maze I,
6. Yazdani S,
7. Elmore RG,
8. Knapp DJ,
9. Selley DE,
10. Martin BR,
11. Sim-Selley L,
12. Bachtell RK,
13. Sariling DW,
14. Nestler EJ
(2008) Mga natatanging pattern ng DeltaFosB induction sa utak sa pamamagitan ng mga droga ng pang-aabuso. Synapse 62: 358-369.
CrossRefMedline
25. ↵
1. Philippar U,
2. Schratt G,
3. Dieterich C,
4. Müller JM,
5. Galgóczy P,
6. Engel FB,
7. Keating MT,
8. Gertler F,
9. Schüle R,
10. Vingron M,
11. Nordheim A
(2004) Ang target na SRF gene Fhl2 antagonizes RhoA / MAL-umaasa activation ng SRF. Mol Cell 16: 867-880.
CrossRefMedline
26. ↵
1. Ramanan N,
2. Shen Y,
3. Sarsfield S,
4. Lemberger T,
5. Schütz G,
6. Linden DJ,
7. Ginty DD
(2005) SRF mediates aktibidad-sapilitan gene expression at synaptic plasticity ngunit hindi neuronal posibilidad na mabuhay. Nat Neurosci 8: 759-767.
CrossRefMedline
27. ↵
1. Renthal W,
2. Carle TL,
3. Maze I,
4. Covington HE 3rd.,
5. Truong HT,
6. Alibhai I,
7. Kumar A,
8. Montgomery RL,
9. Olson EN,
10. Nestler EJ
(2008) Delta FosB mediates epigenetic desensitization ng c-fos gene pagkatapos ng talamak na amphetamine exposure. J Neurosci 28: 7344-7349.
Abstract / FREE Full Text
28. ↵
1. Renthal W,
2. Kumar A,
3. Xiao G,
4. Wilkinson M,
5. Covington HE 3rd.,
6. Maze I,
7. Sikder D,
8. Robison AJ,
9. LaPlant Q,
10. Dietz DM,
11. Russo SJ,
12. Vialou V,
13. Chakravarty S,
14. Kodadek TJ,
15. Stack A,
16. Kabbaj M,
17. Nestler EJ
(2009) Ang pagsusuri ng chromatin sa pamamagitan ng cocaine sa buong genome ay nagpapakita ng isang papel para sa sirtuins. Neuron 62: 335-348.
CrossRefMedline
29. ↵
1. Schlaepfer TE,
2. Cohen MX,
3. Frick C,
4. Kosel M,
5. Brodesser D,
6. Axmacher N,
7. Joe AY,
8. Kreft M,
9. Lenartz D,
10. Sturm V
(2008) Deep utak pagpapasigla sa gantimpala circuitry alleviates anhedonia sa matigas ang ulo pangunahing depression. Neuropsychopharmacology 33: 368-377.
CrossRefMedline
30. ↵
1. Sesack SR,
2. Grace AA
(2010) Cortico-basal ganglia reward network: microcircuitry. Neuropsychopharmacology 35: 27-47.
CrossRefMedline
31. ↵
1. Tomita H,
2. Vawter MP,
3. Walsh DM,
4. Evans SJ,
5. Choudary PV,
6. Li J,
7. Overman KM,
8. Atz ME,
9. Myers RM,
10. Jones EG,
11. Watson SJ,
12. Akil H,
13. Bunney WE Jr.
(2004) Epekto ng agonal at postmortem na mga kadahilanan sa profile ng gene expression: kontrol sa kalidad sa microarray pinag-aaralan o postmortem utak ng tao. Biol Psychiatry 55: 346-352.
CrossRefMedline
32. ↵
1. Tsankova NM,
2. Berton O,
3. Renthal W,
4. Kumar A,
5. Neve RL,
6. Nestler EJ
(2006) Ipinagpatuloy ang hippocampal chromatin regulation sa isang modelo ng mouse ng depression at antidepressant action. Nat Neurosci 9: 519-525.
CrossRefMedline
33. ↵
1. Vassoler FM,
2. Schmidt HD,
3. Gerard ME,
4. Sikat na KR,
5. Ciraulo DA,
6. Kornetsky C,
7. Knapp CM,
8. Pierce RC
(2008) Deep utak pagpapasigla ng nucleus accumbens shell attenuates cocaine paghahanda-sapilitan reinstatement ng gamot na naghahanap sa daga. J Neurosci 28: 8735-8739.
Abstract / FREE Full Text
34. ↵
1. Vialou V,
2. Robison AJ,
3. Laplant QC,
4. Covington HE 3rd.,
5. Dietz DM,
6. Ohnishi YN,
7. Mouzon E,
8. Rush AJ 3rd.,
9. Watts EL,
10. Wallace DL,
11. Iñiguez SD,
12. Ohnishi YH,
13. Steiner MA,
14. Warren BL,
15. Krishnan V,
16. Bolaños CA,
17. Neve RL,
18. Ghose S,
19. Berton O,
20. Tamminga CA,
21. Nestler EJ
(2010) ΔFosB sa mga circuits ng gantimpala sa utak ay namamagitan sa katatagan sa stress at antidepressant na mga tugon. Nat Neurosci 13: 745-752.
CrossRefMedline
35. ↵
1. Wilkinson MB,
2. Xiao G,
3. Kumar A,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Sikder D,
7. Kodadek TJ,
8. Nestler EJ
(2009) Imipramine paggamot at kabanatan eksibit katulad chromatin regulasyon sa isang susi rehiyon gantimpala ng utak. J Neurosci 29: 7820-7832.
Abstract / FREE Full Text
36. ↵
1. Xia Z,
2. Dudek H,
3. Miranti CK,
4. Greenberg ME
(1996) Ang pag-agos ng kaltsyum sa pamamagitan ng receptor ng NMDA ay nagpapahiwatig ng agarang transisyon ng maagang gene ng mekanismo ng MAP kinase / ERK. J Neurosci 16: 5425-5436.
Abstract / FREE Full Text