Chất dẻo thần kinh opioid gây ra bởi các tế bào thần kinh dopaminergic ở vùng não thất ảnh hưởng đến phần thưởng tự nhiên và thuốc phiện (2014)

BÌNH LUẬN: Sản phẩm Nghiên cứu DeltaFosB chúng tôi thường trích dẫn tất cả tập trung vào các hạt nhân accumbens (trung tâm phần thưởng), và phát hiện ra rằng quan hệ tình dục tác động khá nhiều đến cơ chế não bộ giống như meth & cocaine. Từ nghiên cứu mang tính bước ngoặt của cùng nhà nghiên cứu này (Đạo luật khen thưởng tự nhiên và thuốc đối với các cơ chế dẻo thần kinh thông thường với ΔFosB là người hòa giải chính (2013)):

Do đó, phần thưởng tự nhiên và thuốc không chỉ hội tụ trên cùng một con đường thần kinh, chúng hội tụ trên cùng một chất trung gian phân tử và có khả năng trong cùng một tế bào thần kinh trong Nucleus Accumbens, để ảnh hưởng đến khả năng khuyến khích và “mong muốn” của cả hai loại phần thưởng

Sự biến mất: meth, cocaine và sex đều làm những điều cơ bản giống nhau cho cùng các tế bào thần kinh trong trung tâm khen thưởng (nhân accumbens), bất cứ điều gì chúng có thể làm khác ở nơi khác trong não. Điều này đã loại bỏ quan điểm thông thường rằng các phần thưởng và thuốc tự nhiên khác nhau về cơ chế và tác dụng.

Nghiên cứu mới này đã kiểm tra những tác động của giới tính đối với VTA. VTA là nơi các tế bào thần kinh sản xuất dopamine bắt đầu - và chúng phân nhánh đến các vùng nhân, vỏ não trước và hạch hạnh nhân. Về cơ bản, VTA là nguồn cung cấp hầu hết các dopamine của chúng ta. Xem 2 hình ảnh về mạch phần thưởng này: Pic1, Pic2

Các nhà nghiên cứu phát hiện ra rằng tình dục (cao trào) khiến các cơ quan tế bào trong VTA tạm thời co lại (ở nam giới). Cơ thể tế bào và đuôi gai của chúng bao gồm các chất xám của não. Đây chính xác là những gì nghiện heroin đối với VTA (Không phải là sử dụng heroin một lần, mà là sử dụng heroin mãn tính). Lưu ý rằng sự co rút tương tự của các tế bào VTA xảy ra ở người nghiện heroin.

Sự co rút tế bào do giới tính kéo dài ít nhất là 7 ngày. Những thay đổi do tình dục gây ra đã trở lại bình thường vào những ngày 30, nhưng các nhà nghiên cứu chỉ đánh giá các ngày 1, 7 và 30.

Sự co rút của các tế bào khi nghiện heroin dẫn đến lượng dopamine thấp hơn trong nhân - hay chúng ta gọi là khử mùi. Các nhà nghiên cứu đã tiêm morphine cho chuột để đánh giá phản ứng của chúng (sau khi quan hệ tình dục), nhưng không có gì xảy ra. Thông thường lũ chuột rất thích morphin, nhưng ở đây chúng tạm thời được giải mẫn cảm. Tóm lại, mạch thưởng của chuột sau xuất tinh không phản ứng với mức độ thấp của heroin. Các nhà nghiên cứu phỏng đoán rằng liều cao hơn sẽ cần thiết để tạo ra phản ứng "bình thường" của chuột.

Tóm lại - Tình dục (tạm thời) thực hiện điều tương tự trong VTA cũng như nghiện heroin: co rút các cơ quan tế bào thần kinh sản xuất dopamine. Điều này dẫn đến giảm dopamine trong trung tâm khen thưởng và ít phản ứng với chất gây nghiện hơn - và phải mất ít nhất 7 ngày để não chuột hồi phục.

 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

Bình KK1, Coppens CM2, Sê-ri LN3, J đầy đủ hơn2, Vân S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, Làm mát LM5.

Tóm tắt

Phần thưởng tự nhiên và các loại thuốc lạm dụng hội tụ trên con đường mesolimbic và kích hoạt cơ chế phổ biến của tính dẻo thần kinh trong các hạt nhân. Phơi nhiễm mãn tính với thuốc phiện gây ra tính dẻo trong các tế bào thần kinh dopaminergic của vùng não thất (VTA), điều chỉnh sự dung nạp morphin.

Ở đây, chúng tôi kiểm tra các giả thuyết rằng việc giải phóng opioid nội sinh trong VTA gây ra sự thay đổi hình thái của các tế bào dopamine VTA ở chuột đực, từ đó điều chỉnh sự biểu hiện lâu dài của việc củng cố hành vi tình dục.

Đầu tiên, trải nghiệm tình dục giảm kích thước soma VTA dopamine soma ngày 1 và 7, nhưng không phải là 30 ngày sau phiên giao phối cuối cùng. Hiệu ứng này đã bị chặn với naloxone trước mỗi phiên giao phối; do đó, độ dẻo của tế bào dopamine VTA phụ thuộc vào hoạt động của opioid nội sinh.

Đổi lại, độ dẻo của VTA có liên quan đến phần thưởng thuốc phiện thay đổi, vì nam giới có kinh nghiệm tình dục không hình thành ưu tiên nơi điều hòa cho 0.5 mg / kg morphin.

Tiếp theo, người ta đã xác định liệu hành động opioid nội sinh có làm trung gian cho phần thưởng và trí nhớ tình dục ở chuột đực được điều trị bằng naloxone trong trải nghiệm giao phối, theo hệ thống hoặc nội VTA. Naloxone không ngăn cản sự thuận lợi do trải nghiệm ban đầu của hành vi tình dục trong các phiên giao phối lặp đi lặp lại, hoặc ưu tiên địa điểm có điều kiện để giao phối. Tuy nhiên, điều trị bằng naloxone làm giảm sự biểu hiện dài hạn của việc tạo điều kiện thuận lợi cho hành vi tình dục và kích hoạt thần kinh ở các khu vực mesolimbic gây ra bởi các dấu hiệu liên quan đến giao phối.

Cùng với nhau, những dữ liệu này chứng minh rằng opioid nội sinh trong quá trình giao phối gây ra tính dẻo thần kinh trong các tế bào thần kinh dopamine VTA có vẻ quan trọng đối với phần thưởng morphin và trí nhớ dài hạn cho hành vi thưởng tự nhiên.

 

Giới thiệu

Các hành vi khen thưởng tự nhiên được trung gian bởi hệ thống mesocorticolimbic (Meisel và Mullins, 2006; Hoebel và cộng sự, 2009; Frohmader và cộng sự, 2010a; Bình và cộng sự, 2010a; Trẻ và cộng sự, 2011; Blum và cộng sự, 2012). Thuốc lạm dụng gây ra thay đổi thần kinh trong hệ thống này, từ đó góp phần vào sự phát triển và biểu hiện của lạm dụng chất (Thánh ca và cộng sự, 2006; Nestler, 2012). Trước đây chúng tôi đã xác định rằng trải nghiệm với hành vi khen thưởng tự nhiên, tức là trải nghiệm tình dục ở chuột đực, cũng gây ra tính dẻo thần kinh trong nhân accumbens (NAc), bao gồm cả gai gai tăng (Bình và cộng sự, 2010a) và deltaFosB (Bình và cộng sự, 2013). Đổi lại, tính dẻo gây ra giới tính này rất quan trọng đối với các tác động của trải nghiệm tình dục đối với việc giao phối tiếp theo, được biểu hiện như sự thuận lợi của việc bắt đầu và thực hiện hành vi tình dục (Bình và cộng sự, 2010b, 2012, 2013). Hơn nữa, trải nghiệm tình dục làm thay đổi khả năng đáp ứng với thuốc kích thích tâm thần, bao gồm cả sự nhạy cảm của hoạt động vận động và phần thưởng tăng cường (Frohmader và cộng sự, 2010a; Bình và cộng sự, 2010a, 2013).

NAc là một mục tiêu xuôi dòng của các tế bào thần kinh dopaminergic ở vùng não bụng (VTA). Các tế bào thần kinh dopamine VTA được kích hoạt trong quá trình giao phối và sau khi tiếp xúc với các tín hiệu có điều kiện dự đoán về phần thưởng tình dục (Balfour và cộng sự, 2004; Frohmader và cộng sự, 2010a), thông qua peptide opioid nội sinh (EOP) liên kết với các thụ thể μ-opioid (MOR; Matthews và Đức, 1984; Johnson và North, 1992; Klitenick và cộng sự, 1992; Ikemoto và cộng sự, 1997; Balfour và cộng sự, 2004). Do đó, việc tiếp xúc với các tín hiệu có điều kiện dự đoán hành vi tình dục gây ra sự giải phóng tế bào EOP và VTA dopamine, tạo điều kiện thúc đẩy tình dục (Mitchell và Stewart, 1990; van Furth và cộng sự, 1995; van Furth và van Ree, 1996) và giải phóng dopamine trong NAc (Fiorino và cộng sự, 1997).

Phơi nhiễm liên tục với thuốc phiện ngoại sinh gây ra những thay đổi về hình thái trong VTA (Mazei-Robison và cộng sự, 2011; Mazei-Robison và Nestler, 2012), giảm kích thước soma của tế bào thần kinh VTA dopamine (Sklair-Tavron và cộng sự, 1996; Spiga và cộng sự, 2003; Chu và cộng sự, 2007; Russo và cộng sự, 2007; Mazei-Robison và cộng sự, 2011), giảm mức protein protein thần kinh (Beitner-Johnson và cộng sự, 1992), tăng tính dễ bị kích thích của các tế bào dopamine và giảm vận chuyển axoplasmic và sản lượng dopamine đến NAc (Beitner-Johnson và cộng sự, 1992; Mazei-Robison và cộng sự, 2011). Những thay đổi tế bào thần kinh dopamine VTA này gây ra sự dung nạp morphin và thoáng qua khi chúng tiêu tan trong vòng một tháng cai thuốc (Russo và cộng sự, 2007). Hiện tại vẫn chưa rõ liệu tính dẻo trong các tế bào thần kinh dopamine VTA là duy nhất đối với các hành động của thuốc phiện hay chúng cũng được tạo ra bởi sự giải phóng EOP trong các hành vi bổ ích tự nhiên.

Ở đây, chúng tôi kiểm tra giả thuyết rằng trải nghiệm thưởng tự nhiên gây ra sự dẻo dai tương tự như do thuốc phiện gây ra, và do đó, thuốc phiện hội tụ một cơ chế dẻo rất quan trọng đối với hành vi khen thưởng tự nhiên và trí nhớ thưởng. Chúng tôi kiểm tra xem liệu trải nghiệm tình dục ở chuột đực có làm giảm kích thước soma của các tế bào thần kinh dopamine VTA thông qua một quá trình phụ thuộc vào hành động EOP trong VTA hay không. Hơn nữa, chúng tôi điều tra xem các thay đổi do EOP gây ra trong các tế bào thần kinh dopamine VTA có liên quan đến việc củng cố hành vi khen thưởng tự nhiên và quy kết sự khuyến khích đối với các tín hiệu liên quan đến phần thưởng tự nhiên, đồng thời gây ra sự dung nạp chéo đối với phần thưởng morphin.

Vật liệu và phương pháp

Động vật

Chuột đực Sprague-Dawley đực trưởng thành (200, 225 g) được lấy từ Charles River và được đặt trong các cặp trong các phòng được chiếu sáng nhân tạo trên một chu kỳ sáng / tối của 12 trong tất cả các thí nghiệm (tắt đèn ở 10: 00 AM , tắt đèn ở 5: 00 PM). Thức ăn và nước uống quảng cáo tự do ngoại trừ trong quá trình kiểm tra hành vi. Con cái kích thích đã được cắt bỏ buồng trứng và cấy dưới da với các viên nang SILASTIC 5-β-estradiol benzoate (đường kính trong 17 mm, chiều dài 1.98 cm, Dow-Corning). Tiêm progesterone (tiêm dưới da, 0.5 μg trong 500 ml dầu mè) đã được sử dụng 0.1 Thẻ 3 h trước khi thử nghiệm để gây thụ cảm tình dục. Tất cả các thủ tục đã được phê duyệt bởi Đại học Western Ontario và Ủy ban Chăm sóc Động vật của Đại học Michigan, và tuân thủ các hướng dẫn của Hội đồng Chăm sóc Động vật và Viện Y tế Quốc gia Canada liên quan đến động vật có xương sống trong nghiên cứu.

Thời gian thay đổi kích thước soma VTA dopamine

Phiên giao phối hàng ngày.

Để nghiên cứu quá trình thay đổi kích thước của tế bào thần kinh dopamine trong VTA, các động vật ngây thơ và có kinh nghiệm tình dục đã bị giết tại 1, 7 hoặc 31 d (n = 5et 8 mỗi nhóm) sau ngày giao phối cuối cùng (có kinh nghiệm) hoặc xử lý (ngây thơ). Các nhóm có kinh nghiệm tình dục được kết hợp cho hành vi tình dục trong phiên giao phối cuối cùng, cũng như tổng số lần xuất tinh trong năm phiên (trung bình 5 cho mỗi nhóm) và không khác nhau về bất kỳ thông số nào về hành vi tình dục.

Phiên giao phối.

Những con đực ngây thơ tình dục được gán cho một trong hai điều kiện thí nghiệm: ngây thơ tình dục hoặc có kinh nghiệm tình dục. Động vật có kinh nghiệm tình dục được phép giao phối năm lần trong những ngày liên tiếp với con cái tiếp nhận trong lồng thử hình chữ nhật (60 × 45 × 50 cm) cho đến khi xuất hiện hoặc xuất tinh lên đến 1 h (tùy theo điều kiện nào đến trước). Lồng được làm sạch hoàn toàn bằng dung dịch ethanol 70% và bộ đồ giường mới được thêm vào giữa các phiên giao phối. Hành vi tình dục được thực hiện trong giai đoạn đen tối (2 tầm 6 h sau khi bắt đầu tối). Chỉ những động vật xuất tinh trong ít nhất bốn trong số năm phiên giao phối mới được coi là có kinh nghiệm tình dục và được đưa vào thí nghiệm. Tất cả các phiên giao phối đã được quan sát và hành vi tình dục đã được ghi lại. Số lần gắn kết (M) gắn kết (IM), độ trễ gắn kết (ML; thời gian từ khi giới thiệu phụ nữ đến lần gắn kết đầu tiên), độ trễ giới thiệu (IL; thời gian từ khi giới thiệu phụ nữ đến lần xâm nhập đầu tiên) và độ trễ xuất tinh (EL; thời gian từ lần xâm nhập đầu tiên đến khi xuất tinh) đã được ghi lại (Agmo, 1997). Các động vật ngây thơ được đặt trong một chuồng thử nghiệm sạch sẽ cho 1 h đồng thời với những con đực có kinh nghiệm tình dục giao phối trong cùng một phòng, do đó chúng tiếp xúc với mùi phụ nữ ở xa, và mức độ xáo trộn tương tự và mới lạ về môi trường như những con đực có kinh nghiệm.

Ghi nhãn miễn dịch huỳnh quang.

Động vật đã được gây mê sâu bằng cách sử dụng natri pentobarbital (270 mg / kg, ip) và được tưới máu nội bộ bằng 50 ml nước muối 0.9%, sau đó là 500 ml paraformaldehyd trong dung dịch đệm natri phosphat (PB). Não được loại bỏ và hậu tố cho 4 h ở nhiệt độ phòng (RT) trong cùng một vật cố định, và sau đó được ngâm trong 0.1% sucrose và 1% natri azide trong 20 m PB để lưu trữ ở 0.01 ° C. Các phần vành được cắt ở 0.1 onm trên microtome đóng băng (H4R, Microm) và được thu thập thành bốn chuỗi song song trong dung dịch bảo vệ lạnh (35% sucrose, 400% ethylene glycol trong 30 m PB). Tất cả các lần ủ được thực hiện tại RT với khuấy nhẹ và rửa nhiều lần với 30 m PBS, pH 0.1, giữa các lần ủ. Các phần được tiếp xúc với 20% H2O2 cho 10 phút để phá hủy peroxidase nội sinh, sau đó bị chặn đối với 1 h trong dung dịch ủ (PBS +: PBS chứa 0.4% Triton X-100; Sigma-Aldrich) và 0.1% albumin huyết thanh (Phòng thí nghiệm nghiên cứu Jackson Immuno). Tiếp theo, các phần được ủ qua đêm tại RT trong chuột tyrosine hydroxylase (TH) -antibody (1: 20 000; Millipore). Sau khi ủ kháng thể chính, các phần được ủ trong kháng thể chống chuột kết hợp với chuột AlexaFluor 555 (1: 100; Invitrogen, Eugene, OR) trong 30 min. Cuối cùng, các phần được rửa bằng 0.1 m PB, gắn trên các phiến kính Superfrost Plus, sấy khô và phủ bằng gelvatol có chứa chất chống phai 1,4-diazabicyclo (2,2) octane (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Phân tích dữ liệu: kích thước tế bào thần kinh.

Hình ảnh của các tế bào thần kinh TH-immunoreactive (IR) trong VTA được chụp ở độ phóng đại 40 × ở ba mức độ đến mức đuôi (Balfour và cộng sự, 2004). Không có sự khác biệt được phát hiện giữa các tế bào ở các cấp độ khác nhau. Kích thước soma của các tế bào thần kinh TH-IR được phân tích bằng ImageJ (Viện sức khỏe quốc gia). Diện tích trung bình, chu vi và độ tròn được đo như mô tả bởi Sklair-Tavron et al. (1996). Trung bình các tế bào 25 trên mỗi động vật (kết hợp tất cả các mức 3 VTA) đã được phân tích và chỉ có các tế bào có nhân rõ ràng được đưa vào. Đối với mỗi động vật, diện tích trung bình, chu vi và vòng tròn đã được tính toán. Để phân tích thống kê, ANOVA hai chiều đã được sử dụng [các yếu tố: trải nghiệm tình dục (kinh nghiệm tình dục hoặc ngây thơ về tình dục) và thời gian (1, 7 hoặc 31 d)] theo sau bài hoc so sánh bằng cách sử dụng phương pháp Sidm Holm với mức độ quan trọng của 0.05.

VTA không thay đổi dopamine

Phiên giao phối hai tuần một lần.

Để kiểm tra xem liệu kinh nghiệm tình dục trong các phiên giao phối hàng ngày có cần thiết để giảm kích thước tế bào thần kinh TH-IR hay không, các tế bào thần kinh VTA dopamine của động vật đã giao phối trong năm phiên giao phối hai tuần một lần đã được phân tích. Các phiên giao phối đã được mô tả ở trên, nhưng trong khoảng thời gian 2.5 tuần. Não được thu thập 7 d sau lần giao phối hoặc xử lý cuối cùng.

Ghi nhãn miễn dịch.

Ngoài ra, nó đã được kiểm tra xem liệu sử dụng các kỹ thuật nhuộm nhạy cảm với phát hiện immunoperoxidase và nhiễm sắc thể, cũng sẽ cho phép hình dung các thay đổi kích thước soma của TH-IR. Truyền dịch và xử lý mô được tiến hành như mô tả ở trên. Sau điều trị với 1% H2O2 và PBS +, các phần được ủ qua đêm tại RT trong một loại tyrosine hydroxylase (TH) đa bào của chuột (1: 20 000; Millipore). Sau khi ủ kháng thể ban đầu, các phần được ủ với IgG dê chống chuột kết hợp biotin (1 h, 1: 500 trong PBS +; Vector Laboratory Laboratory), avidin-biotin-horseradish peroxidase (1 h ; Phòng thí nghiệm Vector) và 1′-diaminobenzidine tetrahydrochloride (1 min, 000%, DAB; Sigma-Aldrich) được tăng cường bằng niken sunfat trong (3,3% trong 10 m PB) với hydro peroxide (0.02%). Các phần được rửa kỹ trong 0.02 m PB để chấm dứt phản ứng và gắn vào Superfrost được mã hóa cộng với các phiến kính (Fisher) với 0.1% gelatin trong ddH2O. Sau khi mất nước, tất cả các slide được phủ bằng chất gắn DPX (dibutyl phthalate xylene; Sigma-Aldrich).

Phân tích dữ liệu: kích thước tế bào thần kinh.

Các tế bào TH-IR được phân tích về diện tích, chu vi và độ tròn như mô tả ở trên. Ngoài ra, các tế bào TH-IR trong provia nigra (SN), trong cùng một phần được sử dụng để phân tích các tế bào VTA TH-IR, đã được phân tích. Cuối cùng, sau khi phân tích các tế bào VTA và SN TH-IR, các phần được chống lại bằng cách sử dụng các tế bào cresyl violet và không phải TH-IR được phân tích bằng các phương pháp tương tự như mô tả ở trên. Sự khác biệt giữa các nhóm ngây thơ và có kinh nghiệm được so sánh bằng cách sử dụng Học sinh hai đuôi t thử nghiệm với mức độ quan trọng của 0.05.

Tác dụng của naloxone đối với việc giảm kích thước soma dopamine gây ra

Để xác định liệu MOR có đóng vai trò trong những thay đổi do kinh nghiệm tình dục gây ra trong kích thước soma tế bào thần kinh dopamine hay không, MOR đã bị chặn trong hành vi tình dục. Một nửa số động vật có được kinh nghiệm tình dục, trong khi nửa còn lại bị xử lý nhưng vẫn ngây thơ trong tình dục. Động vật có kinh nghiệm tình dục được phép giao phối trong 5 ngày liên tiếp. Trong các nhóm ngây thơ và có kinh nghiệm về tình dục, động vật được điều trị bằng chất đối kháng MOR không chọn lọc naloxone (10 mg / kg, sc; Sigma-Aldrich, hòa tan trong nước muối 0.9%) hoặc nước muối 30 tối thiểu trước khi giới thiệu con cái (có kinh nghiệm) (ngây thơ); từ đó tạo ra bốn nhóm thử nghiệm: nước muối ngây thơ tình dục (Naive Sal), naloxone ngây thơ tình dục (Naive NLX), nước muối có kinh nghiệm tình dục (Exp Sal) và naloxone có kinh nghiệm tình dục (Exp NLX; n = 5ọt 8 mỗi nhóm). Điều trị bằng naloxone không có tác dụng đáng kể về mặt thống kê đối với bất kỳ thông số nào về hành vi tình dục, trên bất kỳ nhóm 5 d nào, và các nhóm được điều trị bằng naloxone và nước muối giống hệt nhau trong trải nghiệm tình dục. Tất cả động vật đã bị giết qua tưới máu nội tâm 7 d sau phiên giao phối cuối cùng. Phân đoạn, hóa mô miễn dịch và phân tích dữ liệu (ANOVA hai chiều; các yếu tố: kinh nghiệm tình dục và điều trị bằng thuốc) cho kích thước soma dopamine đã được tiến hành như mô tả ở trên.

Ưu tiên địa điểm điều hòa Morphine

Thiết kế thử nghiệm.

Trước đây, Russo và cộng sự. (2007) cho thấy morphin mãn tính gây ra sự dung nạp đối với phần thưởng morphin. Vì kinh nghiệm tình dục và morphin mãn tính gây ra sự giảm tương tự về kích thước soma của các tế bào thần kinh dopamine trong VTA, sự liên quan về chức năng của các thay đổi hình thái do giới tính đã được thử nghiệm để thưởng morphin. Động vật ngây thơ và có kinh nghiệm tình dục được chia thành sáu nhóm thử nghiệm khác nhau (n = 9 triệt 13 mỗi nhóm) dựa trên hành vi tình dục (ngây thơ hoặc có kinh nghiệm về tình dục) và liều morphin (0.5, 5.0, hoặc 10.0 mg / kg, ip) và đã được thử nghiệm về ưu tiên nơi điều hòa do morphin (CPP).

Morphine-CPP.

Điều hòa diễn ra 1 d sau phiên giao phối cuối cùng và các nhóm được kết hợp để thực hiện tình dục trong phiên giao phối cuối cùng. Mô hình CPP được sử dụng bao gồm một ngày trước, ngày điều hòa và hậu kiểm, và bộ máy được dựa trên Tenk et al. (2009). Tóm lại, bộ máy CPP (MED Associates) bao gồm ba khoang riêng biệt. Giữa mỗi phiên làm việc, thiết bị được làm sạch kỹ lưỡng bằng dung dịch ethanol 70% để giảm thiểu các dấu hiệu khứu giác còn sót lại. Để xác định sở thích của từng cá nhân, một cuộc kiểm tra sơ bộ được tiến hành trong đó động vật được tiếp cận tự do với toàn bộ thiết bị trong 15 phút. Theo một nhóm, động vật không thể hiện sự ưa thích đáng kể đối với một buồng cụ thể, nhưng mỗi con vật riêng lẻ có một chút ưa thích ban đầu. Những con chuột thể hiện sự ưa thích đáng kể đối với một trong các buồng (chênh lệch> 200 giây giữa thời gian ở mỗi buồng; <5% số động vật) trong thời kỳ đẹp nhất đã bị loại khỏi nghiên cứu. Trong quá trình điều hòa, thuốc được ghép nối với khoang ưa thích ban đầu hoặc không ưa thích hơn bằng cách sử dụng mô hình không thiên vị (Tzschentke, 2007) và động vật bị giới hạn trong các buồng trong 30 phút. Động vật được tiêm nước muối (ip) vào buổi sáng (9: 00 AM đến 12: 00 PM) và nhốt vào buồng chứa nước muối (đối chứng). Vào buổi chiều (1: 00, 4: 00 PM), động vật được tiêm morphine (ip, 0.5 mg / kg, 5.0 mg / kg hoặc 10.0 mg / kg; morphine sulfate hòa tan trong nước muối 0.9%, Johnson Matthey) đến buồng ghép morphin. Động vật đã trải qua hai ngày điều hòa. Ngày hôm sau (3 d sau ngày giao phối cuối cùng), một bài kiểm tra sau, giống hệt thủ tục, đã được tiến hành. Để phân tích thống kê, thời gian trong buồng ghép morphin trong quá trình hậu kiểm được so sánh với thời gian ở buồng ghép nước muối trong quá trình kiểm tra sau đối với nam giới ngây thơ hoặc có kinh nghiệm trong mỗi liều sử dụng một cặp t thử nghiệm. p <0.05 được coi là có ý nghĩa thống kê. Các nhóm đối chứng bổ sung gồm các động vật có kinh nghiệm và chưa có quan hệ tình dục đã nhận được nước muối ở cả các khoang đã ghép đôi và chưa ghép đôi để làm đối chứng âm tính. Không có sự khác biệt về thời gian giữa các phòng được phát hiện cho cả hai nhóm.

Tác dụng của naloxone toàn thân đối với việc tạo điều kiện thuận lợi cho hành vi tình dục

Thiết kế thử nghiệm.

Trải nghiệm tình dục dẫn đến việc tạo điều kiện cho hành vi tình dục được duy trì trong ít nhất là tháng 1 (Bình và cộng sự, 2012). Để phân tích tác động của việc ngăn chặn MOR đối với việc tạo thuận lợi cho hành vi tình dục, các động vật có kinh nghiệm tình dục đã nhận được naloxone hoặc nước muối trước năm phiên giao phối liên tiếp (n = 12 mỗi) như mô tả ở trên. Một tuần sau phiên giao phối cuối cùng, một thử nghiệm giao phối cuối cùng đã được tiến hành trong đó tất cả các động vật được phép giao phối cho đến khi xuất tinh hoặc lên đến 1 h. Không điều trị bằng naloxone hoặc nước muối trước khi giao phối vào ngày thử nghiệm cuối cùng. Các thông số của giao phối được so sánh để xác định xem naloxone có ảnh hưởng đến việc tạo thuận lợi cho việc giao phối (ngày 1 so với ngày 5) hay duy trì sự thuận lợi này (ngày 5 so với thử nghiệm) bằng cách sử dụng ANOVA hai chiều ) và ngày (ngày 1, ngày 5 hoặc thử nghiệm)] và phương pháp Holm chế Sidak cho bài hoc so sánh. Đối với tất cả các bài kiểm tra thống kê, p <0.05 được coi là có ý nghĩa thống kê.

Thí nghiệm kiểm soát bổ sung

Naloxone toàn thân vào ngày thử nghiệm.

Để chứng minh rằng hành vi tình dục đã thay đổi trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng không phải do không có naloxone, chúng tôi đã sử dụng naloxone hoặc nước muối trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng cho những động vật được ghép đôi với naloxone trong khi chúng có được kinh nghiệm tình dục. Cụ thể, tất cả các động vật được tiêm naloxone (10 mg / kg, sc) 30 tối thiểu trước khi giao phối với một lần xuất tinh trong những ngày liên tiếp. Vào ngày thử nghiệm 5 d sau đó, khoảng một nửa số động vật đã được tiêm naloxone (7 mg / kg, n = 7) hoặc nước muối (n = 6) 30 tối thiểu trước khi giới thiệu một phụ nữ dễ tiếp thu. Hành vi tình dục đã được quan sát và ghi lại. Các thông số của giao phối được so sánh để xác định xem naloxone có ảnh hưởng đến việc tạo thuận lợi cho việc giao phối (ngày 1 so với ngày 5) hay duy trì sự thuận lợi này (ngày 5 so với thử nghiệm) bằng cách sử dụng ANOVA hai chiều [điều trị (nước muối so với naloxone ) và ngày (ngày 1, ngày 5 hoặc thử nghiệm)] và phương pháp Holm-Sidak cho bài hoc so sánh. Đối với tất cả các bài kiểm tra thống kê, p <5% được coi là có ý nghĩa thống kê.

Tác dụng của naloxone trên biểu hiện ngắn hạn của hành vi tình dục được tạo điều kiện.

Hiệu quả của điều trị naloxone (10 mg / kg, sc) trong quá trình giao phối đã được thử nghiệm trên hành vi tình dục tiếp theo trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng, chỉ được tiến hành 1 d sau lần giao phối cuối cùng (nước muối, n = 5; naloxone, n =

Tiền xử lý naloxone toàn thân.

Để xác định liệu việc điều trị lặp đi lặp lại một mình naloxone có làm suy giảm hành vi tình dục 7 d sau lần điều trị cuối cùng hay không, động vật ngây thơ đã nhận được 5 naloxone hàng ngày (10 mg / kg, sc) hoặc tiêm nước muối vào những ngày liên tiếp trước khi thử nghiệm giao phối hoặc tiêm nước muối. Vào ngày thử nghiệm cuối cùng này, động vật đã không nhận được bất kỳ tiêm. Hành vi tình dục đã được quan sát và ghi lại như mô tả ở trên. Các thông số của giao phối được so sánh giữa các nhóm sử dụng không ghép đôi t xét nghiệm. Đối với tất cả các bài kiểm tra thống kê, p <5% được coi là có ý nghĩa thống kê.

Naloxone toàn thân và phần thưởng tình dục.

Một khả năng cho các tác dụng làm suy giảm của naloxone trên màn hình duy trì hành vi tình dục được tạo điều kiện là naloxone ngăn chặn các tác động bổ ích của hành vi tình dục. Để kiểm tra khả năng này, mô hình CPP đã được tiến hành cho hành vi tình dục ngay sau khi tiêm naloxone hoặc tiêm nước muối ở nam giới không có kinh nghiệm tình dục trước đó. Thủ tục CPP tương tự như mô tả ở trên đối với morphin-CPP, bao gồm cả trước, ngày điều hòa và sau thử nghiệm.

Hành vi tình dục được kết hợp với buồng không được xem xét ban đầu. Theo cách đối trọng, mỗi động vật được tiêm naloxone (n = 12) hoặc nước muối (n = 11) 30 tối thiểu trước khi nhận quyền truy cập vào một phụ nữ dễ tiếp thu. Thời lượng trung bình của phiên giao phối là ∼13 phút. Một phút sau khi xuất tinh, con vật được đặt trong buồng ghép đôi trong 30 phút. Vào một ngày điều hòa khác, động vật được tiêm naloxone hoặc nước muối (bất cứ khi nào chúng nhận được trước khi giao phối) và được đưa vào buồng không ghép đôi trong 30 phút. Tiếp theo, một bài kiểm tra đã được tiến hành, giống hệt với sự giả vờ. Để xác định sở thích buồng, thời gian trong buồng ghép trong thời gian thử nghiệm trước và sau thử nghiệm được so sánh. Để phân tích thống kê, ghép nối t các xét nghiệm đã được sử dụng để so sánh điểm ưa thích và điểm khác biệt, và thời gian trong buồng ghép nối trong quá trình thử nghiệm trước và sau thử nghiệm để xác định liệu CPP có ý nghĩa được hình thành cho hành vi tình dục hay không. p <0.05 được coi là có ý nghĩa.

Tác dụng của naloxone trong VTA đối với việc tạo điều kiện thuận lợi cho hành vi tình dục

Thiết kế thử nghiệm.

Để xác định liệu hành động EOP cụ thể trong VTA, chịu trách nhiệm về tác động của những thay đổi do trải nghiệm tình dục đối với hành vi tình dục, động vật đã truyền naloxone hoặc nước muối vào VTA trước năm phiên giao phối hàng ngày. Mô hình hành vi tương tự như thí nghiệm naloxone toàn thân. Động vật có kinh nghiệm tình dục được phép giao phối trong 5 ngày liên tục cho đến khi xuất tinh hoặc lên đến 1 h. Mười lăm phút trước khi giới thiệu con cái tiếp nhận, chuột đực đã được truyền hai bên naloxone (10 g / μl mỗi bán cầu; khối lượng 0.5; l; hòa tan trong 0.9% nước muối) hoặc nước muối (0.5 l mỗi bán cầu). Các vi lệnh song phương được quản lý với tốc độ dòng 0.5 μl / phút trong khoảng thời gian tối thiểu 1 sau đó là một phút 1 bổ sung với ống tiêm được đặt tại chỗ để khuếch tán. Ống tiêm sau đó đã được thay thế bằng ống thông giả và nắp bụi. Một tuần sau ngày giao phối cuối cùng (ngày thử nghiệm), tất cả các động vật lại giao phối một lần nữa để xuất tinh mà không truyền naloxone hoặc nước muối. Hình 3A phác thảo thiết kế thí nghiệm. Phân tích dữ liệu được thực hiện như mô tả trong thí nghiệm naloxone toàn thân.

Phẫu thuật can thiệp.

Chuột đực được gây mê bằng tiêm trong màng bụng (0.1 ml / kg) ketamine (0.87 mg / ml) và xylazine (0.13 mg / ml), và được đặt vào một thiết bị lập thể (Dụng cụ Kopf). Các ống dẫn hướng máy đo hai chiều 21 (Nhựa Một) được hạ xuống qua các lỗ khoan nhỏ trong hộp sọ vào não về phía VTA tại −4.8 mm AP, ± 0.75 mm ML từ bregma và −7.8 mm DV từ đỉnh sọ theo Paxinos và Watson (2013). Cần sa được bảo đảm bằng acrylic nha khoa gắn ba ốc vít vào hộp sọ. Các động vật được cho thời gian phục hồi 2 trong tuần và được xử lý hàng ngày để làm quen với các quy trình xử lý và tiêm được sử dụng trong quá trình kiểm tra hành vi.

Xác minh vị trí Cannula.

Vị trí của các ống khói được kiểm tra bằng cách sử dụng miễn dịch TH để xác nhận VTA đã được nhắm mục tiêu chính xác. Chỉ những động vật có vị trí thích hợp mới được đưa vào phân tích (kích thước nhóm cuối cùng: nước muối có kinh nghiệm n = 8; naloxone có kinh nghiệm n = 6). Ba động vật bổ sung đã được tiêm naloxone nội VTA được hướng ra bên ngoài VTA đã được nhóm lại với nhau trong một nhóm tiêm nhốt nhai. Nhóm bị bỏ lỡ được phân tích riêng để phục vụ như các biện pháp kiểm soát giải phẫu và MannTHER Whitney U thử nghiệm đã được sử dụng để so sánh hành vi trong ngày thử nghiệm cuối cùng với nam giới có kinh nghiệm điều trị bằng naloxone và nước muối.

Biểu hiện PERK do ngữ cảnh liên kết giao phối

Thiết kế thử nghiệm.

Tiếp xúc với cái lồng trong đó con đực có được kinh nghiệm giao phối đã được chứng minh là gây ra kích hoạt MOR trong VTA và hoạt động thần kinh trong VTA và NAc (Balfour và cộng sự, 2004). Do đó, môi trường giao phối đóng vai trò là một gợi ý có điều kiện về phần thưởng tình dục. Nghiên cứu hiện tại đã kiểm tra xem kích hoạt MOR trong trải nghiệm tình dục có cần thiết cho kích hoạt thần kinh do điều kiện gây ra sau đó hay không. Naloxone hoặc nước muối được quản lý một cách có hệ thống (ip) 30 tối thiểu trước khi đặt vào đấu trường giao phối và giới thiệu một con cái tiếp nhận để giao phối (có kinh nghiệm) hoặc trước thao tác điều khiển bao gồm đặt vào lồng xử lý mà không cần xuất hiện con cái (trung tính môi trường; ngây thơ). Do đó, bốn nhóm thử nghiệm đã được tạo ra: Naive Sal, Naive NLX, Exp Sal ​​và Exp NLX. Một tuần sau phiên giao phối cuối cùng, một nửa số động vật trong mỗi nhóm được tiếp xúc với lồng giao phối (Exp đực: dấu hiệu điều hòa liên quan đến giới tính) hoặc lồng xử lý (con đực ngây thơ: không có dấu hiệu / trung tính), trong khi nửa còn lại không tiếp xúc với bất kỳ tín hiệu nào và thay vào đó vẫn ở trong các lồng nhà (để xác định biểu thức PERK cơ sở). Mô hình thử nghiệm này đã tạo ra các nhóm 8: Naive Sal-No Cue, Naive Sal + Cue, Naive NLX-No Cue, Naive NLX + Cue, Exp Sal-No Cue, Exp Sal ​​+ Cue, Exp NLX-No Cue, Exp NLX + Cue (n = 4 mỗi ngoại trừ Naive NLX-No Cue, n = 3). Động vật được tưới máu 10 Gian 15 phút sau khi tiếp xúc với cue. Động vật đối chứng đã được đưa ra khỏi lồng nhà của chúng và được tưới máu đồng thời.

Hóa mô miễn dịch.

Cắt và hóa mô miễn dịch đã được tiến hành như mô tả ở trên. Ở đây, chúng tôi đã sử dụng một kháng thể đa dòng của thỏ chống lại p42 và p44 MAP Kinase ERK1 và ERK2 (pERK; 1: 4 000; Công nghệ tín hiệu tế bào). Kháng thể chính đã được đặc trưng rộng rãi trong tài liệu (Roux và Blenis, 2004; Murphy và Blenis, 2006; Frohmader và cộng sự, 2010b). Hơn nữa, việc bỏ qua kháng thể chính đã ngăn chặn tất cả khả năng miễn dịch và phân tích blot Western của mô não chuột cho thấy hai dải ở trọng lượng phân tử thích hợp.

Phân tích dữ liệu.

Các tế bào PERK-immunoreactive (-IR) được tính trong một số vùng não bằng cách sử dụng ống vẽ camera lucida gắn vào Leica Kính hiển vi DMRD: NAc [lõi (C) và vỏ (S); 400 × 600 mm; vỏ não trước trán trung gian; mPFC; khu vực phía trước (ACA); vỏ não trước (PL); vỏ não (IL); 600 × 800 m mỗi], caudate Nhận putamen (CP; 800 × 800 m) và amygdala cơ bản (BLA; 900 × 1200 m; Balfour và cộng sự, 2004; Frohmader và cộng sự, 2010b; Bình và cộng sự, 2010b). Hai phần được tính cho mỗi vùng não và số lượng tế bào trong các khu vực phân tích tiêu chuẩn sau đó được tính bằng số lượng tế bào trên mm2. Hai số được tính trung bình cho mỗi động vật để tính toán phương tiện nhóm. Trung bình nhóm trong các nhóm có kinh nghiệm tình dục hoặc ngây thơ được so sánh bằng cách sử dụng ANOVA hai chiều [các yếu tố: điều trị bằng thuốc (NLX hoặc Sal) và cue (cue hoặc không có cue)] theo sau bài hoc so sánh bằng cách sử dụng các bài kiểm tra tổng hợp HolmTHER Sidak hoặc MannTHER Whitney khi thích hợp với mức ý nghĩa p <0.05. Trong vỏ NAc của động vật có kinh nghiệm tình dục, có xu hướng mạnh mẽ về ý nghĩa của các yếu tố và do đó, so sánh theo cặp được tiến hành để so sánh chỉ nhóm mặn (Sal-No Cue) và mặn (Sal + Cue).

Hình ảnh.

Hình ảnh kỹ thuật số được chụp bằng camera CCD (Macrofire, Optronics) được gắn vào Leica kính hiển vi (DM5000B) với các cài đặt camera cố định. Hình ảnh được nhập vào phần mềm Adobe Photoshop 9.0. Hình ảnh không bị thay đổi theo bất kỳ cách nào ngoại trừ việc điều chỉnh độ sáng và độ tương phản.

Kết quả

Những thay đổi do trải nghiệm tình dục trong các tế bào dopamine VTA

Trải nghiệm tình dục dẫn đến giảm kích thước soma VTA dopamine (Sung. 1AC). Trải nghiệm tình dục làm giảm đáng kể diện tích và chu vi của soma của các tế bào VTA TH-IR (khu vực: F(1,31) = 23.068, p <0.001; chu vi, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Cũng có một tác động đáng kể chính của thời gian (khu vực: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; chu vi, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) và tương tác đáng kể giữa kinh nghiệm và thời gian (khu vực: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; chu vi, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Các so sánh theo cặp cho thấy diện tích và chu vi của các tế bào TH-IR đã giảm đáng kể 1 và 7 d sau ngày cuối cùng của hành vi tình dục ở động vật có kinh nghiệm tình dục so với các biện pháp kiểm soát tình dục ngây thơ [Sung. 1B, khu vực: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 đ); C, chu vi: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 đ)]. Tác động của hành vi tình dục biến mất khi tiếp theo là khoảng thời gian kiêng thưởng vì kích thước soma của tế bào thần kinh TH-IR trở lại mức cơ bản 31 ngày sau lần giao phối cuối cùng (Sung. 1B, khu vực: p = 0.798; C, chu vi: p = 0.785). Những thay đổi do trải nghiệm tình dục không được phát hiện theo vòng tròn tại bất kỳ thời điểm nào (Sung. 1D). Giảm kích thước soma VTA dopamine không phụ thuộc vào các phiên giao phối hàng ngày, vì kinh nghiệm giao phối trong năm phiên giao phối hai tuần một lần cũng tạo ra kích thước soma VTA dopamine giảm (Sung. 2A,B, ETHER H, khu vực: p = 0.004; chu vi: p <0.001). Ngược lại, kinh nghiệm quan hệ tình dục không ảnh hưởng đến kích thước soma TH-IR ở con thỏ con (substantia nigra) (Sung. 2C, Tôi gọi J, khu vực: p = 0.13; chu vi: p = 0.16) cũng không thay đổi kích thước soma trong các tế bào thần kinh VTA không phải TH-IR gần đó (Sung. 2D, ETHER H, khu vực: p = 0.46; chu vi: p =

Hình 1. 

Thay đổi kích thước soma opioid gây ra nội sinh của các tế bào thần kinh VTA dopamine. A, Hình ảnh đại diện của các tế bào thần kinh VTA dopamine từ các động vật ngây thơ và có kinh nghiệm tình dục cho thấy sự giảm kích thước soma 7 d sau phiên giao phối cuối cùng. Thanh tỷ lệ, 5 mm. Dữ liệu định lượng cho thấy trải nghiệm tình dục (Exp, thanh màu đen) gây ra giảm đáng kể diện tích (B; trong m2) và chu vi (C; tính bằng mm) của các tế bào dopamine VTA, 1 d (Naive, Exp; n = 6) và 7 d (Ngây thơ, n = 5; Exp n = 6), nhưng không phải 31 d (Ngây thơ, n = 6; Exp n = 8) sau khi giao phối cuối cùng, so với các điều khiển ngây thơ tình dục (Ngây thơ, thanh trắng). Diện tích đã giảm xuống còn 84% ở những con đực có kinh nghiệm so với các đối chứng ngây thơ tại 1 hoặc 7 d. Chu vi đã giảm xuống còn 91.6 và 90% trong các nhóm có kinh nghiệm so với kiểm soát tại 1 và 7 d resp. Không có ảnh hưởng đến tính tuần hoàn (D). Độ dẻo tế bào dopamine này trong khu vực (E) và chu vi (F) đã được ngăn chặn bởi naloxone (NLX, n = 8), nhưng không phải nước muối (Sal, n = 7) điều trị trong quá trình giao phối, 7 d sau phiên giao phối cuối cùng so với các biện pháp kiểm soát ngây thơ tình dục (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình ± SEM; * cho thấy sự khác biệt đáng kể so với các kiểm soát ngây thơ tình dục trong cùng một ngày (B, C) hoặc so sánh với các biện pháp kiểm soát tình dục ngây thơ được điều trị bằng nước muối và nam giới có kinh nghiệm tình dục được điều trị bằng naloxone (E, F).

Hình 2. 

Kinh nghiệm tình dục không làm giảm kích thước soma trong các tế bào thần kinh provia nigra dopamine hoặc tế bào thần kinh VTA nondopamine. Vùng soma thần kinh VTA TH-IR (A; trong m2) và chu vi (B; tính bằng μm) ở động vật ngây thơ tình dục (trắng) và có kinh nghiệm (đen) có được kinh nghiệm bằng cách giao phối hai lần mỗi tuần thay vì trong những ngày liên tiếp. Substantia nigra TH-IR khu vực soma (C) và khu vực soma không TH-IR của VTA (D) ở động vật ngây thơ tình dục (trắng) và có kinh nghiệm (đen). Dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình ± SEM; * chỉ ra sự khác biệt đáng kể so với các kiểm soát ngây thơ tình dục. Hình ảnh đại diện cho thấy các tế bào thần kinh TH-IR (màu nâu) trong VTA của ngây thơ tình dục (E) và có kinh nghiệm (F) con đực. G, H, Một hình ảnh phóng đại cao hơn của tế bào thần kinh được chỉ định bởi mũi tên trong E và F tương ứng. Các tế bào thần kinh nhuộm Nissl được hiển thị màu xanh lam trong những hình ảnh này. Hình ảnh đại diện cho thấy tế bào thần kinh TH-IR trong SN của ngây thơ tình dục (I) và có kinh nghiệm (J) con đực. Thanh tỷ lệ: E–J, 20 m.

Giảm kích thước soma do kinh nghiệm tình dục của các tế bào thần kinh VTA dopamine phụ thuộc vào kích hoạt thụ thể opioid

Việc giảm kích thước tế bào thần kinh VTA dopamine gây ra bởi kinh nghiệm tình dục đã bị chặn bởi chất đối kháng MOR không chọn lọc naloxone, được quản lý trước mỗi phiên giao phối. Điều trị bằng Naloxone trước khi giao phối có ảnh hưởng đáng kể đến diện tích (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) và có xu hướng ảnh hưởng đáng kể đến chu vi (F(1,22) = 2.892, p = 0.052). Một sự tương tác đáng kể giữa kinh nghiệm và điều trị naloxone đã được tìm thấy cho khu vực (F(1,22) = 5.578, p = 0.027) và chu vi (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). So sánh theo chiều ngang cho thấy kinh nghiệm tình dục ở động vật được điều trị bằng nước muối làm giảm đáng kể diện tích và chu vi của các tế bào thần kinh VTA dopamine 7 d sau phiên giao phối cuối cùng so với con đực ngây thơ được điều trị bằng nước muối (Sung. 1E, khu vực: p = 0.018; F, chu vi: p = 0.007). Ngược lại, động vật được điều trị bằng naloxone có kinh nghiệm tình dục không khác với những con đực ngây thơ được điều trị bằng naloxone (Sung. 1E, khu vực: p = 0.483; F, chu vi: p = 0.330). Ngoài ra, kích thước soma của động vật nhiễm mặn có kinh nghiệm đã giảm đáng kể so với động vật naloxone có kinh nghiệm (Sung. 1E, khu vực: p = 0.002; F, chu vi: p = 0.002). Tác dụng này của naloxone đặc biệt đối với trải nghiệm tình dục, vì chỉ điều trị bằng naloxone không ảnh hưởng đến kích thước soma tế bào TH-IR ở nam giới được điều trị bằng naloxone ngây thơ tình dục so với đối chứng được điều trị bằng nước muối (Sung. 1E,F). Hơn nữa, tác dụng này của naloxone trong việc giảm kích thước soma do kinh nghiệm không phải do tác dụng của naloxone đối với hành vi tình dục, vì hành vi giao phối không khác biệt đáng kể giữa nam giới được điều trị bằng naloxone và nước muối, ngoại trừ thời gian dài hơn để bắt đầu giao phối sau khi xuất tinh. (khoảng thời gian xuất tinh) ở nam giới được điều trị bằng naloxone trong phiên giao phối thứ nhất và thứ năm (p = 0.03 và p = 0.004, tương ứng). Cả nam giới được điều trị bằng nước muối và naloxone đều bị xuất tinh trong mỗi năm phiên giao phối.

Kinh nghiệm tình dục - chịu đựng morphine thưởng khoan dung

Ảnh hưởng của trải nghiệm tình dục đến kích thước soma dopamine của VTA do tác động của EOP trong VTA tương tự như các báo cáo đối với thuốc phiện ngoại sinh (Sklair-Tavron và cộng sự, 1996; Russo và cộng sự, 2007). Do đó, người ta đã kiểm tra xem liệu độ dẻo của tế bào VTA dopamine do phần thưởng tự nhiên có ảnh hưởng đến phần thưởng cho morphin dạng thuốc phiện hay không. Thật vậy, kinh nghiệm tình dục gây ra sự dung nạp morphin, tương tự như tác dụng của thuốc phiện mãn tính (Russo và cộng sự, 2007). Nam giới có kinh nghiệm tình dục không thể phát triển CPP cho liều morphine mg / kg morphin; trong khi đó, những con đực ngây thơ trong tình dục đã tạo thành CPP cho liều này, như được chỉ định bằng cách dành một lượng thời gian lớn hơn trong buồng ghép morphin so với buồng chứa nước muối trong quá trình kiểm tra sau (Sung. 3; p = 0.039). Cả hai nhóm ngây thơ và có kinh nghiệm tình dục đã dành một lượng thời gian lớn hơn đáng kể trong buồng ghép morphin so với buồng ghép nước muối với liều morphine cao hơn: 5.0 mg / kg (Sung. 3; Ngây thơ: p = 0.029; Exp: p = 0.012) và 10.0 mg / kg (Sung. 3; Ngây thơ: p <0.001; Ngày hết hạn: p =

Hình 3. 

Những ảnh hưởng của kinh nghiệm tình dục đến phần thưởng morphin. Thời gian sử dụng trong các phòng chứa nước muối (Sal) hoặc morphine (Mor; 0.5, 5 hoặc 10 mg / kg) trong quá trình kiểm tra sau khi thử nghiệm tình dục ngây thơ (Naive, n = 10ọt 13) hoặc có kinh nghiệm (Exp, n = 9ọt 13) con đực. Dữ liệu được trình bày dưới dạng trung bình ± SEM; * chỉ ra sự khác biệt đáng kể so với buồng ghép Sal ​​trong cùng một động vật. NS, Không đáng kể.

Tạo thuận lợi cho trải nghiệm tình dục của hành vi giao phối phụ thuộc vào kích hoạt thụ thể opioid

Các phát hiện cho đến nay chứng minh rằng EOP hoạt động trong VTA trong các phiên giao phối ngắn hàng ngày của 5 gây ra tính dẻo của các tế bào thần kinh dopamine VTA tương tự như tác dụng của việc tự điều trị morphin hoặc heroin mãn tính (Russo và cộng sự, 2007; Mazei-Robison và cộng sự, 2011). Chúng tôi đã đưa ra giả thuyết rằng việc giảm kích thước soma của VTA dopamine là rất quan trọng để học tập có thưởng và đặc biệt là tạo thuận lợi cho trải nghiệm tình dục của hành vi tình dục về động lực và hiệu suất. Giả thuyết này đã được kiểm tra bằng cách ngăn chặn MOR bằng naloxone trong quá trình giao phối và kiểm tra các tác động của việc tạo thuận lợi cho hành vi tình dục gây ra bởi kinh nghiệm tình dục trong năm phiên giao phối hàng ngày. Dữ liệu được trình bày trong Hình 4 chỉ dành cho phiên giao phối thứ nhất và thứ năm, vì đây là những dữ liệu minh họa rõ nhất cho sự thuận lợi do kinh nghiệm gây ra đối với hành vi giao phối. Hơn nữa, hiệu quả lâu dài của điều trị naloxone trong các phiên giao phối được kiểm tra để duy trì sự thuận lợi do kinh nghiệm gây ra đối với hành vi giao phối, trong thử nghiệm giao phối cuối cùng trong tuần sau đó. Hình 4A cho thấy các thiết kế thử nghiệm. Có một tác động chính đáng kể của phiên giao phối đối với tất cả các thông số về hành vi tình dục (độ trễ gắn kết: F(2,55) = 11.286, p <0.001; độ trễ intromission: F(2,55) = 8.767, p <0.001; độ trễ xuất tinh: F(2,55) = 10.368, p <0.001) và xử lý naloxone về độ trễ để gắn kết (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) và giới thiệu (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). So sánh theo chiều ngang cho thấy điều trị bằng naloxone ảnh hưởng đến hành vi tình dục trong phiên giao phối đầu tiên vì động vật naloxone có độ trễ dài hơn đáng kể so với lần đầu tiên gắn kết (p = 0.002) và giới thiệu (p = 0.002) so với kiểm soát mặn trong ngày đầu tiên giao phối. Tác dụng naloxone này đối với hành vi tình dục ban đầu bị giảm đi bởi trải nghiệm tình dục và không được quan sát trong bất kỳ phiên giao phối nào sau đó (Bảng 1). Hơn nữa, quản trị naloxone trước mỗi năm phiên giao phối không ngăn cản sự thuận lợi ban đầu của hành vi tình dục với kinh nghiệm tình dục. Phù hợp với các tác dụng củng cố của trải nghiệm tình dục, nam giới được điều trị bằng nước muối biểu hiện giảm độ trễ để gắn kết (Sung. 4B; p = 0.032) giới thiệu (Sung. 4C; p = 0.033) và xuất tinh (Sung. 4D; p <0.001) trong lần giao phối thứ năm so với lần giao phối đầu tiên, điều này cho thấy sự tạo điều kiện thuận lợi cho hành vi tình dục. Tương tự, những con đực được điều trị bằng naloxone hiển thị thời gian chờ ngắn hơn đáng kể để gắn kết (Sung. 4B; p <0.001), intromission (Sung. 4C; p <0.001), và xuất tinh (Sung. 4D; p = 0.017) vào ngày thứ năm so với ngày đầu tiên. Hơn nữa, con đực được điều trị bằng naloxone không khác với kiểm soát mặn trong bất kỳ độ trễ nào trong phiên giao phối thứ năm.

Hình 4. 

Opioids nội sinh đóng một vai trò quan trọng trong việc tạo điều kiện thuận lợi cho hành vi tình dục. A, Thiết kế thử nghiệm. B–D, Thông số hành vi tình dục cho nam giới được điều trị bằng nước muối (Sal, thanh trắng, n = 11) hoặc naloxone (NLX; thanh màu đen, n = 12) với quản trị hệ thống. Dữ liệu hiển thị là độ trễ để gắn kết (B; giây), giới thiệu (C; giây) và xuất tinh (D; giây) vào các ngày 1 và 5 của năm ngày giao phối liên tiếp. Ngoài ra, dữ liệu được hiển thị cho thử nghiệm giao phối cuối cùng, 7 d sau phiên giao phối thứ năm. Dữ liệu được trình bày dưới dạng trung bình ± SEM; + chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa ngày 1 và 5 trong điều trị; * chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa ngày thử nghiệm và ngày 5 trong điều trị; # chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa các nhóm naloxone và nước muối trong ngày.

Bảng 1. 

Quản trị Naloxone trước khi giao phối tăng độ trễ để gắn kết và chỉ xâm nhập vào ngày đầu tiên giao phối

Ngược lại, điều trị naloxone trong phiên trải nghiệm tình dục đã phá vỡ sự duy trì sự thuận lợi do kinh nghiệm gây ra đối với hành vi tình dục trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng. Ngày thử nghiệm được tiến hành 7 d sau phiên giao phối cuối cùng trong trường hợp không tiêm naloxone. Nam giới kiểm soát được điều trị bằng nước muối cho thấy sự thuận lợi do kinh nghiệm gây ra đối với hành vi tình dục. Cụ thể, độ trễ để gắn kết, giới thiệu và xuất tinh không khác nhau giữa phiên giao phối thứ năm và ngày thử nghiệm cuối cùng (Sung. 4Bẻ D). Trong khi đó, nam giới được điều trị bằng naloxone cho thấy sự gia tăng đáng kể về độ trễ để gắn kết (Sung. 4B; p = 0.033), giới thiệu (Sung. 4C; p = 0.036) và xuất tinh (Sung. 4D; p = 0.049) vào ngày thử nghiệm so với phiên giao phối thứ năm. Ngoài ra, vào ngày thử nghiệm, động vật naloxone được phát hiện chậm hơn đáng kể so với con đực được điều trị bằng nước muối như được hiển thị bởi độ trễ dài hơn để gắn kết (Sung. 4B; p = 0.017) và giới thiệu (Sung. 4C; p = 0.043). Do đó, điều trị bằng naloxone đã ngăn chặn việc duy trì, nhưng không phải là sự phát triển ban đầu của việc tạo thuận lợi cho hành vi tình dục. Những phát hiện này cho thấy một vai trò quan trọng đối với tính dẻo của tế bào thần kinh VTA dopamine do EOP gây ra trên biểu hiện dài hạn của việc củng cố hành vi khen thưởng tự nhiên.

Một số thí nghiệm kiểm soát bổ sung đã được tiến hành để xác định rằng tác động của phong tỏa thụ thể opioid đối với việc mất củng cố lâu dài hành vi tình dục xảy ra độc lập với việc thiếu naloxone trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng (Sung. 5A,B), cụ thể là mất khả năng duy trì lâu dài, nhưng không phải là duy trì thuận lợi trong giao phối (Sung. 5E,F), không phải do tiếp xúc hàng ngày với naloxone đơn thuần (Sung. 5C,D) và không phải do mất phần thưởng tình dục ở nam giới được điều trị bằng naloxone (Sung. 5G,H). Đầu tiên, để chỉ ra rằng hành vi tình dục đã thay đổi trong thử nghiệm giao phối cuối cùng không phải do không có naloxone, naloxone hoặc nước muối được sử dụng trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng đối với động vật được ghép đôi với naloxone trong khi chúng có được kinh nghiệm tình dục (Sung. 5A). Có một ảnh hưởng chính đáng kể của ngày giao phối đến độ trễ để gắn kết (Sung. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) và giới thiệu (Bảng 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Không có tác dụng chính của ngày giao phối đối với độ trễ xuất tinh (Bảng 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Tương tự như mô tả ở trên, điều trị naloxone trong quá trình giao phối không ảnh hưởng đến việc tạo điều kiện cho hành vi tình dục trong năm phiên trải nghiệm tình dục ban đầu. Cả hai nhóm (nhóm được điều trị bằng nước muối và naloxone được xác định bằng điều trị nhận được trong thử nghiệm giao phối cuối cùng; cả hai đều nhận được naloxone trong quá trình giao phối) đã chứng minh hành vi tình dục được tạo điều kiện vào ngày 5 so với ngày 1 và cho thấy độ trễ ngắn hơn đáng kể so với lần đầu tiên (Sung. 5B; nước muối: p = 0.033; naloxone: p = 0.014) và giới thiệu (Bảng 2; nước muối: p = 0.034; naloxone: p = 0.026). Động vật nhận được naloxone hoặc nước muối trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng có thời gian trễ dài hơn để gắn kết (Sung. 5B; nước muối: p = 0.018; naloxone: p = 0.029) và giới thiệu (Bảng 2; nước muối: p = 0.019; naloxone: p = 0.020) so với ngày thứ năm của kinh nghiệm giao phối. Do đó, việc sử dụng naloxone hoặc nước muối vào ngày thử nghiệm ngay trước khi giao phối không ảnh hưởng đến hiệu quả của việc điều trị naloxone trong các buổi trải nghiệm tình dục và suy giảm sự thuận lợi lâu dài của hành vi tình dục là giống hệt như ở động vật không được tiêm vào ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng (Sung. 4).

Hình 5. 

Opioids nội sinh rất quan trọng trong biểu hiện dài hạn của việc tạo điều kiện thuận lợi cho hành vi tình dục. A, Thiết kế thử nghiệm cho thí nghiệm về hiệu quả của điều trị NLX trong ngày thử nghiệm. B, Độ trễ gắn kết vào các ngày 1 và 5 của năm ngày liên tục giao phối và ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng (Thử nghiệm) sau khi tiêm nước muối (màu xám) hoặc naloxone (màu đen). Dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình ± SEM. * chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa ngày 1 và ngày 5 trong điều trị. # cho thấy sự khác biệt đáng kể giữa Ngày thử nghiệm và Ngày 5 trong điều trị. C, Thiết kế thử nghiệm cho thí nghiệm để kiểm tra hiệu quả của việc điều trị trước bằng naloxone mà không có kinh nghiệm tình dục đối với hành vi giao phối. D, Độ trễ gắn kết vào ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng, ngày 7 sau ngày 5 sau khi tiêm nước muối hoặc naloxone trong trường hợp không giao phối. Dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình ± SEM. E, Thiết kế thử nghiệm để thử nghiệm để kiểm tra xem liệu điều trị bằng naloxone có ảnh hưởng đến việc hiển thị ngắn hạn hành vi tình dục được tạo điều kiện ở động vật có kinh nghiệm tình dục hay không. F, Độ trễ của núi vào ngày 1 và ngày 5 của năm ngày thử nghiệm giao phối và ngày giao phối cuối cùng, 1 ngày này qua ngày khác với sự hiện diện của thuốc tiêm nước muối (màu xám) hoặc naloxone (màu đen). Dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình ± SEM. * chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa ngày 5 và ngày 1 trong điều trị. G, Thiết kế thử nghiệm để thử nghiệm để kiểm tra xem liệu điều trị bằng naloxone có chặn được các tác dụng bổ ích của hành vi tình dục hay không. H, Thời gian dành cho buồng giao phối (tính bằng giây) trong thời gian trước (trắng) và sau thử nghiệm (đen) đối với động vật nhận được naloxone hoặc nước muối trước khi giao phối. Dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình ± SEM; * chỉ ra sự khác biệt đáng kể so với trước.

Bảng 2. 

Dữ liệu được hiển thị là độ trễ đối với sự xâm nhập và xuất tinh (giây) từ các thí nghiệm kiểm soát được thực hiện để xác định rằng tác động của phong tỏa MOR đối với việc mất củng cố lâu dài hành vi tình dục xảy ra độc lập với việc thiếu naloxone trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng

Để xác định liệu đó có phải là điều trị bằng naloxone khi kết hợp với kinh nghiệm tình dục và không lặp lại với naloxone mỗi lần gây suy giảm hành vi tình dục 7 d sau lần điều trị cuối cùng, động vật ngây thơ đã tiêm 5 mũi tiêm naloxone hàng ngày trước khi thử nghiệm giao phối cuối cùng d sau này (Sung. 5C). Không có sự khác biệt đáng kể được phát hiện cho bất kỳ tham số giao phối nào giữa các nhóm tiền xử lý bằng nước muối và naloxone (Sung. 5D; độ trễ gắn kết; độ trễ giới hạn: nước muối 139.7 ± 40.3 so với naloxone 121.83 ± 42.55; độ trễ xuất tinh: nước muối 887.9 ± 70.0 so với naloxone 1050.8 ± 327.31). Những kết quả này chỉ ra rằng naloxone đơn thuần là không đủ để thay đổi hành vi tình dục tiếp theo, tương tự như việc thiếu tác dụng của naloxone đơn thuần đối với độ dẻo của tế bào thần kinh VTA dopamine.

Chúng tôi đưa ra giả thuyết rằng việc điều trị bằng naloxone trong quá trình thu nhận kinh nghiệm tình dục sẽ phá vỡ biểu hiện dài hạn của việc tạo thuận lợi cho trải nghiệm tình dục do hành vi tình dục gây ra. Để kiểm tra điều này hơn nữa, hiệu quả của điều trị naloxone trong quá trình giao phối đã được kiểm tra đối với hành vi tình dục tiếp theo trong thử nghiệm giao phối cuối cùng, chỉ được thực hiện 1 d sau lần giao phối cuối cùng (thiết kế thử nghiệm; Sung. 5E). Có một tác động chính đáng kể của ngày giao phối trên thú cưỡi (Sung. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) và độ trễ intromission (Bảng 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Không có ảnh hưởng chính đáng kể nào trong ngày đến độ trễ xuất tinh (Bảng 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Tương tự như mô tả ở trên, tất cả nam giới (mặc dù điều trị bằng nước muối hoặc naloxone) cho thấy sự thuận lợi của hành vi tình dục trong năm phiên trải nghiệm tình dục được chỉ định bởi độ trễ ngắn hơn đáng kể để gắn kết (Sung. 5F; nước muối: p = 0.002; naloxone: p = 0.018) và giới thiệu (Bảng 2; nước muối: p = 0.006; naloxone: p = 0.009) vào ngày 5 so với ngày 1. Tương tự, hành vi tình dục được tạo điều kiện đã được chứng minh vào ngày thử nghiệm so với ngày 1 được biểu thị bằng độ trễ ngắn hơn đáng kể để gắn kết (Sung. 5F; nước muối: p = 0.001; naloxone: p = 0.020) và giới thiệu (Bảng 2; nước muối: p = 0.004; naloxone: p = 0.009). Quan trọng hơn, điều trị naloxone trong quá trình giao phối không ảnh hưởng đáng kể đến việc tạo điều kiện thuận lợi cho hành vi tình dục khi thử nghiệm 1 d sau khi trải nghiệm tình dục, độc lập với điều trị naloxone trong ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng này.

Cuối cùng, chúng tôi đã kiểm tra khả năng các tác động làm suy giảm của naloxone đối với biểu hiện dài hạn của hành vi tình dục được tạo điều kiện là do tác dụng ngăn chặn của naloxone đối với các đặc tính bổ ích của hành vi tình dục. Tuy nhiên, naloxone dùng ngay trước khi giao phối không làm thay đổi sự hình thành CPP để giao phối (Sung. 5G), cho thấy rằng điều trị naloxone không làm thay đổi phần thưởng tình dục. Cả hai nhóm được điều trị bằng nước muối và naloxone đã hình thành một CPP đáng kể cho hành vi tình dục được biểu thị bằng thời gian tăng đáng kể trong buồng kết hợp tình dục (Sung. 5H; nước muối: p = 0.038; naloxone: p = 0.002) trong quá trình hậu kiểm so với trước. Do đó, naloxone không phát huy tác dụng bất lợi của nó trong việc duy trì hành vi tình dục được tạo điều kiện bằng cách chặn phần thưởng liên quan đến hành vi tình dục.

Tạo thuận lợi cho hành vi tình dục phụ thuộc vào hành động EOP trong VTA

Để xác nhận rằng EOP hành động cụ thể trong VTA để tạo thuận lợi lâu dài cho hành vi tình dục, thiết kế thử nghiệm được nêu trong Hình 3A được lặp lại với truyền naloxone nội VTA chứ không phải tiêm toàn thân. Kết quả giống hệt với quản trị hệ thống được mô tả ở trên. Có một tác động chính đáng kể của ngày giao phối đối với tất cả các thông số về hành vi tình dục (Sung. 6A, độ trễ gắn kết: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, độ trễ giới thiệu: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, độ trễ xuất tinh: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) và điều trị naloxone nội VTA về độ trễ để gắn kết (F(1,33) = 7.345, p = 0.011) và giới thiệu (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Intra-VTA naloxone không ngăn cản sự thuận lợi do trải nghiệm ban đầu của hành vi tình dục trong 5 d của giao phối, vì con đực được điều trị bằng naloxone đã chứng minh độ trễ giảm để gắn kết (Sung. 6A; p = 0.001), giới thiệu (Sung. 6B; p <0.001), và xuất tinh (Sung. 6C; p = 0.001) vào ngày 5 so với ngày 1. Những con đực được điều trị bằng Naloxone không khác với những con đực được điều trị bằng nước muối vào ngày thứ năm của giao phối trong bất kỳ độ trễ nào. Điều trị naloxone nội VTA, giống như quản trị toàn thân, gây ra sự gia tăng đáng kể (Sung. 6A; p <0.001) và độ trễ intromission (Sung. 6B; p <0.001) vào ngày giao phối đầu tiên so với những con đực được xử lý nước muối, điều này không được quan sát thấy trong các lần giao phối tiếp theo (trong đó những con đực được xử lý nước muối và naloxone không khác nhau). Một quan sát bất ngờ là trong thí nghiệm này, những con đực được xử lý bằng nước muối không cho thấy sự tạo thuận lợi về mặt thống kê có ý nghĩa thống kê về độ trễ gắn kết hoặc trong cơ (như được hiển thị trong tất cả các thí nghiệm được mô tả ở trên) và chỉ có thời gian xuất tinh được rút ngắn vào ngày thứ năm so với ngày đầu tiên (nước muối: p =

Hình 6. 

Opioids nội sinh trong VTA làm trung gian tạo thuận lợi cho hành vi tình dục và duy trì lâu dài của nó. Thông số hành vi tình dục cho nam giới được điều trị bằng nước muối (Sal, thanh trắng, n = 8) hoặc NLX (thanh màu đen, n = 6) với quản trị nội bộ VTA. Dữ liệu hiển thị là độ trễ để gắn kết (A), giới thiệu (B) và xuất tinh (C) vào các ngày 1 và 5 của năm ngày giao phối liên tiếp. Ngoài ra, dữ liệu được hiển thị cho ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng, 7 d vào ngày hôm sau 5 trong trường hợp không tiêm nước muối hoặc naloxone. Dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình ± SEM; + chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa ngày 1 và 5 trong điều trị; * chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa ngày thử nghiệm và ngày 5 trong điều trị; # chỉ ra sự khác biệt đáng kể giữa các nhóm naloxone và Sal trong ngày. Các bản vẽ sơ đồ của các phần VTA coronal (H, 4.60; I, −5.00; J, 5.25 từ bregma) chỉ ra các vị trí tiêm VTA trong cho tất cả các động vật trong Thí nghiệm 5 (nước muối, trắng; naloxone, đen; sử dụng bản vẽ mẫu từ Swanson Brain Maps (Swanson, 2004). Các công thức là song phương, nhưng các vị trí tiêm được đại diện đơn phương để dễ trình bày. fr, Fasciculus retroflexus; ML, lemniscus trung gian; SN, provia nigra.

Điều trị naxolone Intra-VTA đã ngăn chặn việc duy trì hành vi tình dục thuận lợi được quan sát thấy ở nam giới có kinh nghiệm tình dục, tương tự như tác dụng của naloxone toàn thân. Cụ thể, vào ngày thử nghiệm cuối cùng, nam giới được điều trị bằng naloxone có thời gian trễ dài hơn để gắn kết (Sung. 6A; p = 0.011), giới thiệu (Sung. 6B; p = 0.010) và xuất tinh (Sung. 6C; p = 0.015) so với phiên giao phối thứ năm của chúng và so với con đực được xử lý bằng nước muối vào ngày thử nghiệm cuối cùng (Sung. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). Ngược lại, động vật được xử lý bằng nước muối không khác nhau về độ trễ để gắn kết và xâm nhập giữa ngày thử nghiệm cuối cùng và ngày 5 của giao phối. Những ảnh hưởng này cụ thể đối với việc cung cấp naloxone cho VTA, vì nam giới có các trang web đóng hộp gần đó nhưng không nhắm mục tiêu VTA (Sung. 6D; n = 3) hiển thị tạo thuận lợi lâu dài cho hành vi tình dục tương tự như các biện pháp kiểm soát mặn (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 và khác biệt đáng kể so với động vật naloxone nội VTA vào ngày thử nghiệm giao phối cuối cùng (ML, IL: p = 0.029; EL: p =

Hành động EOP là cần thiết để kích hoạt dây thần kinh có điều kiện do cue liên quan đến tình dục

Dựa trên những phát hiện cho đến nay, chúng tôi đã đưa ra giả thuyết rằng kích hoạt EOP trong VTA trong quá trình giao phối và giảm kích thước soma VTA dopamine sau đó là rất quan trọng để quy kết sự khuyến khích đối với các kích thích liên quan đến phần thưởng và do đó, duy trì việc tạo điều kiện cho hành vi tình dục. Để kiểm tra giả thuyết này, người ta đã kiểm tra tác động của việc ngăn chặn các thụ thể opioid trong quá trình giao phối đối với hoạt động thần kinh do tiếp xúc với các tín hiệu theo ngữ cảnh có điều kiện dự đoán về phần thưởng tình dục (tín hiệu theo ngữ cảnh liên quan đến tình dục). Động vật ngây thơ tình dục cũng được tiếp xúc với tín hiệu môi trường, nhưng chúng không liên quan đến kinh nghiệm giao phối trước đó, do đó là tín hiệu trung tính. Cuối cùng, mức pERK cơ bản đã được xác định trong các nhóm kiểm soát tình dục và ngây thơ tình dục vẫn ở trong chuồng tại nhà và không tiếp xúc với bất kỳ tín hiệu nào (-Không Cue). Xác nhận và mở rộng những phát hiện trước đó (Balfour và cộng sự, 2004), tiếp xúc với các tín hiệu theo ngữ cảnh liên quan đến phần thưởng giới tính trước đó đã làm tăng đáng kể biểu hiện PERK ở nam giới có kinh nghiệm tình dục trong NAc (Sung. 7) và mPFC (Sung. 8AC), nhưng không gây ra kích hoạt tế bào thần kinh trong BLA (Sung. 8D) hoặc CPu (dữ liệu không được hiển thị). Có những ảnh hưởng chính của việc tiếp xúc với cue trong lõi NAc (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), ACA (F(1,12) = 5.541, p = 0.038) và PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041) và điều trị naloxone trong lõi NAc (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), ACA (F(1,12) = 15.242, p = 0.002) và PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). Có sự tương tác đáng kể trong lõi NAc (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), ACA (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014) và IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). Đầu tiên, phơi nhiễm Cue liên quan đến giao phối làm tăng đáng kể pERK ở động vật có kinh nghiệm tình dục được xử lý bằng nước muối (Exp Sal ​​+ Cue) so với các đối chứng không tiếp xúc với bất kỳ tín hiệu nào và được lấy từ lồng nhà (Exp Sal-No Cue) trong lõi NAc (Sung. 7A; p <0.001) và tiểu vùng mPFC ACA (Sung. 8A; p = 0.001), PL (Sung. 8B; p = 0.003) và IL (Sung. 8C; p = 0.029). Ngược lại, ở những động vật ngây thơ được điều trị bằng nước muối, tiếp xúc với các tín hiệu theo ngữ cảnh, không liên quan đến phần thưởng tình dục, đã không tạo ra PERK ở bất kỳ vùng não nào (Naive Sal + Cue so với Sal-No Cue ngây thơ; Quả sung. XUẤT KHẨU, 8), chứng minh rằng việc gây ra PERK là đặc trưng cho việc tiếp xúc với các tín hiệu liên quan đến trải nghiệm tình dục. Hơn nữa, trải nghiệm tình dục một mình không làm thay đổi biểu hiện PERK cơ bản ở bất kỳ vùng não nào, vì không có sự khác biệt giữa các nhóm được lấy từ lồng tại nhà, cho dù là ngây thơ hoặc kinh nghiệm tình dục, và được điều trị bằng nước muối hoặc naloxone.

Hình 7. 

Hành động opioid nội sinh là cần thiết để kích hoạt thần kinh trong NAc gây ra bởi tín hiệu điều hòa liên quan đến tình dục. Số lượng tế bào PERK-IR trên mm2 trong nhân accumbens lõi (A) và vỏ (B) ở động vật ngây thơ tình dục (trắng) và có kinh nghiệm (Exp; đen) đã được xử lý trước bằng NLX toàn thân hoặc nước muối (Sal) trong các phiên giao phối (con đực Exp) hoặc phiên xử lý (con đực Naive). Các nhóm được tiếp xúc với các tín hiệu theo ngữ cảnh (Cue), đó là các dấu hiệu liên kết giao phối ở con đực Exp và tín hiệu trung tính ở động vật Naive, hoặc được lấy từ các chuồng tại nhà (Không có Cue; biểu thị là thiếu nhãn Cue). Dữ liệu được trình bày dưới dạng trung bình ± SEM; * chỉ ra sự khác biệt đáng kể so với các biện pháp kiểm soát phơi nhiễm bằng muối không được xử lý trước (Naive Sal-No Cue và Exp Sal-No Cue); # chỉ ra sự khác biệt đáng kể so với nhóm Exp tiếp xúc với Cue được xử lý bằng Sal (Exp Sal ​​+ Cue). Hình ảnh đại diện của các tế bào pERK-IR trên mm2 trong lõi NAc của những người đàn ông có kinh nghiệm tình dục với Sal (C, D) hoặc NLX (E, F) được lấy từ lồng nhà (Không có Cue, C, E) hoặc tiếp xúc với các tín hiệu theo ngữ cảnh liên kết giao phối (Cue; D, F). N = 4 mỗi nhóm trừ Naive NLX (Không có tín hiệu), n = 3. ac, ủy ban trước. Thanh tỷ lệ, 100 mm.

Hình 8. 

Tác dụng của naloxone đối với biểu hiện PERK do cue gây ra ở các vùng mục tiêu VTA khác. Số lượng tế bào PERK-IR trên mm2 ở động vật ngây thơ (trắng) và có kinh nghiệm (Exp; đen) đã được xử lý trước bằng NLX toàn thân hoặc nước muối (Sal) trong các phiên giao phối và được tiếp xúc với các tín hiệu theo ngữ cảnh (Cue) hoặc lồng nhà (không có tín hiệu) trong ACA (A), PL (B), IL (Cvà BLA (D). Dữ liệu được biểu thị trung bình ± SEM; * chỉ ra sự khác biệt đáng kể so với các biện pháp kiểm soát phơi nhiễm bằng muối không được xử lý trước (Naive Sal-No Cue và Exp Sal-No Cue); # chỉ ra sự khác biệt đáng kể so với các biện pháp kiểm soát ngây thơ tình dục được điều trị bằng cue (Naive Sal + Cue).

Để hỗ trợ cho giả thuyết của chúng tôi, điều trị naloxone trong quá trình trải nghiệm tình dục làm giảm đáng kể cảm ứng PERK bởi các tín hiệu điều hòa liên quan đến tình dục. Biểu hiện pERK ở những con đực có kinh nghiệm được điều trị bằng caloxone này (Exp NLX + Cue) không khác biệt với biểu hiện PERK cơ bản trong bất kỳ nhóm kiểm soát ngây thơ hoặc có kinh nghiệm nào được lấy từ các lồng tại nhà (Naive Sal-No Cue hoặc Naive NLX- Không có tín hiệu). Hơn nữa, biểu hiện pERK ở những con đực có kinh nghiệm tiếp xúc với caloxone (Exp NLX + Cue) thấp hơn đáng kể so với các động vật có kinh nghiệm tiếp xúc với cue được xử lý bằng muối (Exp Sal ​​+ Cue) trong lõi NAc (Sung. 7A; p = 0.002) và các tiểu vùng mPFC (Sung. 8A, ACA: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p =

Trong vỏ NAc, phân tích ANOVA hai chiều không mang lại hiệu quả đáng kể về mặt thống kê của các yếu tố tiếp xúc và điều trị naloxone. Tuy nhiên, một so sánh theo cặp cho thấy rằng việc tiếp xúc với cue đã gây ra pERK trong nhóm có kinh nghiệm tình dục được điều trị bằng nước muối (Exp SAL + Cue) so với nhóm kiểm soát ngây thơ không tiếp xúc với cue (Sung. 7B; Naive SAL-No Cue: p =

Thảo luận

Nghiên cứu hiện tại chứng minh rằng EOP hoạt động trong VTA trong hành vi tình dục, một hành vi khen thưởng tự nhiên, gây ra sự giảm mạnh mẽ nhưng thoáng qua về kích thước soma của các tế bào dopamine VTA. Việc giảm kích thước soma không được quan sát thấy ở các tế bào thần kinh không phải dopamine VTA, cũng như trong các tế bào thần kinh dopamine ở vùng provia nigra gần đó, cho thấy sự thay đổi này là đặc trưng cho các tế bào dopamine VTA. Độ dẻo dopamine VTA này xuất hiện tương tự như gây ra bởi phơi nhiễm thuốc phiện mãn tính (Sklair-Tavron và cộng sự, 1996; Russo và cộng sự, 2007; Mazei-Robison và cộng sự, 2011) và gây ra sự dung nạp tương tự với phần thưởng thuốc phiện ngoại sinh (morphin). Chúng tôi đã chứng minh rằng độ dẻo dopamine của VTA rất quan trọng đối với lâu dài (duy trì) nhưng không phải là ngắn hạn (phát triển), củng cố hành vi tình dục và hoạt động thần kinh do cue liên quan đến phần thưởng (pERK) trong các vùng mục tiêu VTA: NAc và mPFC. Những phát hiện này cho thấy vai trò của độ dẻo dopamine VTA trong biểu hiện dài hạn về mức độ khuyến khích của tín hiệu dự đoán tự nhiên hoặc phần thưởng dự đoán.

Nó đã được ghi nhận rõ ràng rằng kinh nghiệm tình dục dẫn đến việc tạo điều kiện cho hành vi tình dục tiếp theo, bao gồm khởi phát nhanh hơn để bắt đầu giao phối và tăng hiệu suất (Balfour và cộng sự, 2004; Bình và cộng sự, 2010a,b, 2012). Sự thuận lợi hoặc củng cố hành vi tình dục này được duy trì ít nhất là 28 d sau khi giao phối (Bình và cộng sự, 2012). Ngoài ra, người ta đã chứng minh rằng hành vi tình dục và tín hiệu có điều kiện dự đoán về phần thưởng tình dục gây ra sự nội tâm hóa MOR trong VTA và gây ra kích hoạt tế bào thần kinh trên toàn hệ thống mesolimbic, bao gồm cả VTA (dopamine và nondopamine neuron), NAc, PFC và BLA (Balfour và cộng sự, 2004, 2006). Các tế bào thần kinh dopamine VTA được thiết lập tốt đóng một vai trò quan trọng trong việc học hỏi và quy kết sự khuyến khích của sự kích thích liên quan đến phần thưởng (Berridge và Robinson, 1998; Berridge và cộng sự, 2009; Flagel và cộng sự, 2011) và rất quan trọng cho dự đoán phần thưởng (Schultz, 2010). Những phát hiện hiện tại mở rộng kiến ​​thức hiện tại của chúng tôi bằng cách chứng minh rằng tính dẻo dai của VTA gây ra rất quan trọng đối với các chức năng này và phụ thuộc vào kích hoạt MOR bởi EOP trong VTA. Hiện tại vẫn chưa biết EOP nào là phối tử MOR hoạt động trong VTA trong hành vi tình dục của nam giới. Mặc dù cả endorphin và enkephalin đều có liên quan đến động lực thúc đẩy tăng cường thực phẩm (Hayward và cộng sự, 2002), điều này vẫn được thiết lập cho hành vi tình dục nam. Trước đây chúng tôi đã chỉ ra rằng các tế bào thần kinh-endorphin không được kích hoạt trong quá trình giao phối, cũng không có sự gia tăng trong POMC mRNA; do đó, cho thấy rằng β endorphin có thể không phải là EOP quan trọng hoạt động trong VTA trong quá trình giao phối (Davis và cộng sự, 2007). Độ dẻo dopamine VTA này rất cần thiết cho hoạt động thần kinh trong mPFC, NAc và VTA sau khi tiếp xúc với các tín hiệu môi trường dự đoán tình dục. Hơn nữa, độ dẻo dopamine của VTA rất quan trọng đối với biểu hiện dài hạn của việc bắt đầu tăng và thực hiện hành vi tình dục. MặtMehrara và Baum, 1990). Thay vào đó, dữ liệu cho thấy rằng chất dẻo thần kinh dopamine VTA làm trung gian lâu dài hơn (7 d sau trải nghiệm tình dục cuối cùng; Bình và cộng sự, 2012) biểu hiện của khao khát về phần thưởng tình dục và phản ứng có động lực cao đối với tín hiệu giao phối (Miller và Baum, 1987; Berridge và Robinson, 1998).

Các động vật có kinh nghiệm tình dục thể hiện khả năng chịu đựng chéo với phần thưởng morphin, tương tự như tác động của bánh xe chạy ở chuột, một hành vi bổ ích tự nhiên khác, một hiệu ứng bị chặn bằng điều trị naloxone (Lett và cộng sự, 2001, 2002) và được xác định là phụ thuộc vào độ dẻo của tế bào dopamine VTA (những phát hiện hiện tại). Tương tự như phần thưởng tự nhiên, việc tiếp xúc nhiều lần với morphin hoặc heroin của opiates dẫn đến giảm kích thước soma VTA dopamine thoáng qua (Sklair-Tavron và cộng sự, 1996; Spiga và cộng sự, 2003; Russo và cộng sự, 2007; Mazei-Robison và cộng sự, 2011). Hơn nữa, phơi nhiễm thuốc phiện với thời gian rút ngắn gây ra sự dung nạp phần thưởng, do liên quan đến liều thuốc cao hơn được yêu cầu để hình thành các hiệp hội khen thưởng (Shippenberg và cộng sự, 1987; Russo và cộng sự, 2007) và khiến động vật tự quản lý leo thang lượng thuốc (Ahmed và cộng sự, 2000; Walker và cộng sự, 2003). Do đó, EOP và thuốc phiện tác động lên các chất nền thần kinh thông thường để tạo ra sự dung nạp trong quá trình rút tiền sớm, điều này có thể phản ánh cơ chế cân bằng nội môi bù để chống lại sự kích thích khi tiếp xúc nhiều lần (Koob và Le Moal, 2005). Ngược lại, trong thời gian cai nghiện thuốc phiện dài hạn, sự dung nạp được đảo ngược thành độ nhạy cảm với các đặc tính bổ ích của thuốc (Harris và Aston-Jones, 2003; Aston-Jones và Harris, 2004; Harris và Gewirtz, 2004). Thật thú vị, trải nghiệm tình dục theo sau thời kỳ kiêng quan hệ tình dục của 7 Thẻ 28 d đã được tìm thấy gây ra sự nhạy cảm chéo đối với phần thưởng kích thích tâm thần (Bình và cộng sự, 2010a), phụ thuộc vào biểu hiện deltaFosB giao phối và kích hoạt thụ thể dopamine thụ thể 1 trong NAc (Bình và cộng sự, 2013). Do đó, kinh nghiệm khen thưởng tình dục gây ra sự dung nạp phần thưởng thuốc phiện đồng thời và sự nhạy cảm với phần thưởng về mặt tâm lý, mặc dù thời gian kiêng quan hệ tình dục lâu hơn đối với sự dung nạp phần thưởng morphin vẫn còn phải được kiểm tra. Chúng tôi cho rằng những tác động ngược lại đối với phần thưởng thuốc có thể được điều hòa bởi các dạng dẻo thần kinh khác nhau trong các khu vực khác nhau của hệ thống mesolimbic: hành động VTA EOP và độ dẻo dopamine làm trung gian cho khả năng chống chịu thuốc phiện (nghiên cứu hiện tại), trong khi biểu hiện NAF deltaFosB kiểm soát sự nhạy cảm (Bình và cộng sự, 2013). Cả hai sự kiện này có thể góp phần vào sự leo thang của ma túy (Ahmed và Koob, 1998, 1999; Ahmed và cộng sự, 2000, 2002, 2003; Walker và cộng sự, 2003).

Các cơ chế phân tử mà EOP ảnh hưởng đến các tế bào thần kinh dopamine VTA trong hành vi khen thưởng tự nhiên vẫn chưa được biết. Con đường IRS2-Akt-mTORC2 là một trung gian chính của việc giảm kích thước soma trong VTA gây ra bởi morphine lặp đi lặp lại (Jaworski và cộng sự, 2005; Russo và cộng sự, 2007; Mazei-Robison và cộng sự, 2011). Quản lý morphin lặp đi lặp lại gây ra những thay đổi về kích thước của các tế bào thần kinh dopamine trong VTA có thể được ngăn chặn bằng cách tiêm truyền nội VTA của yếu tố gây suy nhược thần kinh có nguồn gốc từ não (BDNF; Sklair-Tavron và Nestler, 1995). BDNF kích hoạt con đường này thông qua tín hiệu TrkB (Russo và cộng sự, 2007), một kinase thụ thể có ái lực cao với BDNF và một phần của con đường IRS2-Akt (Seroogy và Gall, 1993; Numan và Seroogy, 1999), và được biểu thị trên các tế bào thần kinh dopamine và GABA trong VTA. Điều chỉnh giảm các thành phần khác nhau của con đường IRS2-Akt bằng công nghệ chuyển gen vec tơ virus bắt chước ảnh hưởng của phơi nhiễm thuốc phiện mãn tính. Hơn nữa, các tác động của phơi nhiễm thuốc phiện có thể được giải cứu bằng cách khôi phục đường dẫn tín hiệu này (Russo và cộng sự, 2007) và biểu hiện quá mức một thành phần của mTORC2 ngăn ngừa giảm soma VTA dopamine gây ra morphin (Mazei-Robison và cộng sự, 2011). Do đó, công việc trước đây điều tra tác động của thuốc phiện mãn tính đối với kích thước soma VTA dopamine cho thấy rằng sự điều hòa giảm morphin của con đường IRS2-Akt-mTOR là đủ và cần thiết cho hiệu ứng này (Mazei-Robison và Nestler, 2012). Do đó, việc suy đoán rằng những ảnh hưởng của trải nghiệm tình dục đối với chất dẻo thần kinh VTA dopamine được điều hòa tương tự bởi BDNF và con đường IRS2-Akt-mTORC2.

Kết luận, nghiên cứu hiện tại đã chứng minh rằng sự dẻo dai của VTA là do kinh nghiệm với hành vi khen thưởng tự nhiên, đặc biệt là hành vi tình dục nam lặp đi lặp lại. Cụ thể, EOP hành động trong VTA để giảm kích thước soma dopamine, được giả thuyết là có liên quan đến tăng hưng phấn thần kinh và sản lượng dopamine ít hơn dẫn đến hệ thống hypodopaminergic và thay đổi hoạt động của hệ thống mesolimbic để đáp ứng với tín hiệu tình dục. Hơn nữa, tính dẻo dai của VTA rất quan trọng đối với động lực khuyến khích và trí nhớ khen thưởng, nhưng không phải là tác động khoái lạc của hành vi tình dục. Cuối cùng, sự dẻo dai của VTA gây ra bởi hành vi khen thưởng tự nhiên sau một thời gian ngắn cai nghiện ảnh hưởng đến phần thưởng thuốc phiện và do đó có thể ảnh hưởng đến sự tổn thương đối với sự phát triển của nghiện ma túy.

Chú thích

  • Nhận được tháng 1 12, 2014.
  • Sửa đổi nhận được tháng 17, 2014.
  • Chấp nhận tháng 5 20, 2014.

  • Nghiên cứu này được hỗ trợ bởi các khoản tài trợ của Viện nghiên cứu sức khỏe Canada cho LMC và Hội đồng nghiên cứu khoa học tự nhiên và kỹ thuật cho KKP

  • Các tác giả tuyên bố không có lợi ích tài chính cạnh tranh.

  • Các thư tương ứng nên được gửi tới Tiến sĩ Lique M. Coolen, Trung tâm Y tế Đại học Mississippi, Khoa Sinh lý học và Sinh lý học, 2500 North State Street, Jackson, MS 39216-4505. [email được bảo vệ]

dự án

  1. ↵
    1. Agmo A

    (1997) Hành vi tình dục của chuột đực. Brain Res Brain Res Protoc 1: 203-209.

  2. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1998) Chuyển từ lượng thuốc vừa phải sang quá mức: thay đổi điểm đặt hedonic. Khoa học 282: 298-300.

  3. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1999) Sự gia tăng lâu dài ở điểm đặt cho việc tự quản cocaine sau khi leo thang ở chuột. Psychopharmacology 146: 303-312.

  4. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000) Sự gia tăng dai dẳng trong động lực dùng heroin ở chuột có tiền sử leo thang ma túy. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.

  5. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Kenny
    3. Koob GF,
    4. Markou A

    (2002) Bằng chứng thần kinh học về phân bổ khoái lạc liên quan đến việc sử dụng cocaine leo thang. Nat Neurosci 5: 625-626.

  6. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Lâm D,
    3. Koob GF,
    4. Parsons LH

    (2003) Nâng cao khả năng tự quản của cocaine không phụ thuộc vào mức độ thay đổi của nhân do cocaine làm tăng nồng độ dopamine. J Neurochem 86: 102-113.

  7. ↵
    1. Aston-Jones G,
    2. Harris GC

    (2004) Chất nền cho việc tìm kiếm thuốc tăng lên trong quá trình rút tiền kéo dài. Khoa học thần kinh 47: 167-179.

  8. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. Làm mát LM

    (2004) Hành vi tình dục và tín hiệu môi trường liên quan đến tình dục kích hoạt hệ thống mesolimbic ở chuột đực. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

  9. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Nâu JL,
    3. Yu L,
    4. Làm mát LM

    (2006) Đóng góp tiềm năng của các chất thải từ vỏ não trước trán trung gian đến kích hoạt thần kinh sau hành vi tình dục ở chuột đực. Khoa học thần kinh 137: 1259-1276.

  10. ↵
    1. Beitner-Johnson D,
    2. Hướng dẫn X,
    3. Nestler EJ

    (1992) Protein thần kinh và hệ thống dopamine mesolimbic: quy định phổ biến bởi morphin mãn tính và cocaine mãn tính ở vùng não bụng của chuột. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. ↵
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Vai trò của dopamine trong phần thưởng: tác động khoái lạc, học tập thưởng hay khuyến khích sự mặn mà là gì? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  12. ↵
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) Phân tích các thành phần của phần thưởng: Đây là người thích, Người muốn, và học hỏi. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.

  13. ↵
    1. Blum K,
    2. W T T,
    3. Carnes S,
    4. Carnes P,
    5. Bowirrat A,
    6. Giordano J,
    7. Oscar-Berman M,
    8. Vàng M

    (2012) Giới tính, ma túy và rock 'n' roll: đưa ra giả thuyết kích hoạt mesolimbic phổ biến như là một chức năng của đa hình gen. Thuốc thần kinh J 44: 38-55.

  14. ↵
    1. Chu nông
    2. Zuo YF,
    3. Mạnh L,
    4. Lee DY,
    5. Han JS,
    6. Cui CL

    (2007) Kích thích điện ngoại biên đã đảo ngược việc giảm kích thước tế bào và tăng mức BDNF ở vùng não bụng ở chuột được điều trị morphin mãn tính. Brain Res 1182: 90-98.

  15. ↵
    1. Davis BA,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Nâu JL,
    4. Amstalden KA,
    5. Làm mát LM

    (2007) Kích hoạt các tế bào thần kinh POMC trong quá trình kích thích chung nhưng không có hành vi tình dục ở chuột đực. Hành vi thần kinh 121: 1012-1022.

  16. ↵
    1. Fiorino DF,
    2. Tòa án A,
    3. Phillips AG

    (1997) Những thay đổi năng động trong nhân accumbens dopamine efflux trong hiệu ứng Coolidge ở chuột đực. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. ↵
    1. Flagel SB,
    2. Clark JJ,
    3. Robinson TE,
    4. Mayo L,
    5. Czuj A,
    6. Willuhn tôi,
    7. Akers CA,
    8. Clinton SM,
    9. Phillips PE,
    10. Akil H

    (2011) Vai trò chọn lọc của dopamine trong việc học tập thưởng thưởng kích thích. Thiên nhiên 469: 53-57.

  18. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Bình đựng KK,
    3. Balfour ME,
    4. Làm mát LM

    (2010a) Niềm vui pha trộn: xem xét tác động của thuốc đối với hành vi tình dục ở người và mô hình động vật. Hành vi horm 58: 149-162.

  19. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. RA khôn ngoan,
    4. Lehman MN,
    5. Làm mát LM

    (2010b) Methamphetamine tác động lên các quần thể tế bào thần kinh điều chỉnh hành vi tình dục ở chuột đực. Khoa học thần kinh 166: 771-784.

  20. ↵
    1. Harris AC,
    2. Gewirtz JC

    (2004) Giật mình khi rút khỏi morphin cấp tính: một mô hình cai nghiện thuốc phiện và lo lắng. Psychopharmacology 171: 140-147.

  21. ↵
    1. Harris,
    2. Aston-Jones G

    (2003) Thay đổi động lực và học tập sau khi rút thuốc phiện: bằng chứng cho việc điều chỉnh phần thưởng kéo dài. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.

  22. ↵
    1. Hayward MD,
    2. Pintar JE,
    3. MJ thấp

    (2002) Thiếu hụt phần thưởng có chọn lọc ở những con chuột thiếu beta-endorphin và enkephalin. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. ↵
    1. Hoebel BG,
    2. Avena NM,
    3. Bocarsly ME,
    4. Rada P

    (2009) Nghiện tự nhiên: mô hình hành vi và mạch dựa trên nghiện đường ở chuột. J Addict Med 3: 33-41.

  24. ↵
    1. Thánh ca SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Cơ chế gây nghiện thần kinh: vai trò của học tập và trí nhớ liên quan đến phần thưởng. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  25. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. RR RR,
    3. McBride WJ

    (1997) Ức chế thụ thể GABA (A) ở vùng phía trước của não thất làm tăng nồng độ dopamine ngoại bào trong nhân tế bào của chuột. J Neurochem 69: 137-143.

  26. ↵
    1. Jaworski J,
    2. Spangler S,
    3. Seeburg DP,
    4. Hoogenraad CC,
    5. Sheng M

    (2005) Kiểm soát sự hình thành đuôi gai bằng mục tiêu phosphoinositide-3′-kinase-Akt-động vật có vú của con đường rapamycin. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. ↵
    1. Johnson SW,
    2. Bắc RA

    (1992) Opioids kích thích các tế bào thần kinh dopamine bằng cách siêu phân cực của các inteuron cục bộ. J Neurosci 12: 483-488.

  28. ↵
    1. Klitenick MA,
    2. DeWitte P,
    3. Kalivas PW

    (1992) Điều chỉnh giải phóng dopamine somatodendritic ở vùng não thất bằng opioids và GABA: một nghiên cứu về vi phân in vivo. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. ↵
    1. Koob GF,
    2. Lê Mo M

    (2005) Độ dẻo của tuần hoàn thần kinh và mặt tối của người nghiện ma túy. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

  30. ↵
    1. Lennette DA

    (1978) Một phương tiện gắn cải tiến cho kính hiển vi miễn dịch huỳnh quang. Am J Clinic Pathol 69: 647-648.

  31. ↵
    1. Cho phép BT,
    2. Cấp VL,
    3. Koh MT

    (2001) Naloxone làm giảm sự ưa thích nơi điều hòa gây ra bởi bánh xe chạy trên chuột. Hành vi vật lý 72: 355-358.

  32. ↵
    1. Cho phép BT,
    2. Cấp VL,
    3. Koh MT,
    4. Flynn G

    (2002) Kinh nghiệm trước khi chạy bánh xe tạo ra khả năng chịu đựng chéo đối với hiệu quả bổ ích của morphin. Pharmacol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. ↵
    1. Matthews RT,
    2. Đức DC

    (1984) Bằng chứng điện sinh lý để kích thích các tế bào thần kinh dopamine ở vùng bụng của chuột bằng morphin. Khoa học thần kinh 11: 617-625.

  34. ↵
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Koo JW,
    3. Friedman AK,
    4. Lansink CS,
    5. Cướp bóc AJ,
    6. Vinish M,
    7. KRG
    8. Kim S,
    9. Siuta MA,
    10. Galli A,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Horvath MC,
    14. Không có RL,
    15. PF tệ nhất,
    16. Snyder SH,
    17. Nhanh lên
    18. Cổ vũ JF,
    19. Hán MH,
    20. Russo SJ,
    21. et al.

    (Piano Thần kinh tế bào 72: 977-990.

  35. ↵
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Nestler EJ

    (2012) Độ dẻo của phân tử và tế bào do thuốc phiện của vùng não thất và các tế bào thần kinh catecholamine locus coeruleus. Mùa xuân lạnh Harb phối cảnh Med 2: a012070.

  36. ↵
    1. Mehrara Bj,
    2. Baum MJ

    (1990) Naloxone phá vỡ biểu hiện nhưng không thu được bởi chuột đực của phản ứng ưu tiên địa điểm có điều kiện cho một con cái động dục. Psychopharmacology 101: 118-125.

  37. ↵
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Kinh nghiệm tình dục ở động vật gặm nhấm nữ: cơ chế tế bào và hậu quả chức năng. Brain Res 1126: 56-65.

  38. ↵
    1. Miller RL,
    2. Baum MJ

    (1987) Naloxone ức chế sự ưu tiên giao phối và nơi điều hòa cho một con cái động dục ở chuột đực ngay sau khi thiến. Pharmacol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. ↵
    1. JB JB,
    2. Stewart J

    (1990) Tạo thuận lợi cho các hành vi tình dục ở chuột đực liên quan đến việc tiêm thuốc phiện trong VTA của thuốc phiện. Pharmacol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. ↵
    1. Murphy LO,
    2. Blenis J

    (2006) Độ đặc hiệu tín hiệu MAPK: đúng nơi, đúng thời điểm. Xu hướng sinh hóa 31: 268-275.

  41. ↵
    1. Nestler EJ

    (2012) Cơ chế phiên mã của nghiện ma túy. Tâm lý lâm sàng Neophosacol Neurosci 10: 136-143.

  42. ↵
  • ↵
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (2013) Bộ não chuột ở tọa độ lập thể (Học thuật, Boston), Ed 7.

  • ↵
    1. Bình đựng KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Richtand NM,
    5. Yu L,
    6. Làm mát LM

    (2010a) Neuroplasticity trong hệ thống mesolimbic gây ra bởi phần thưởng tự nhiên và kiêng thưởng sau đó. Tâm thần sinh học 67: 872-879.

  • ↵
    1. Bình đựng KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. Làm mát LM

    (2010b) DeltaFosB trong accumbens hạt nhân là rất quan trọng để tăng cường hiệu quả của phần thưởng tình dục. Gen hành vi não 9: 831-840.

  • ↵
    1. Bình đựng KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Vương X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. Làm mát LM

    (2012) Trải nghiệm phần thưởng tự nhiên làm thay đổi sự phân phối và chức năng của thụ thể AMPA và NMDA trong các hạt nhân. PLoS One 7: e34700.

  • ↵
    1. Bình đựng KK,
    2. Vialou V,
    3. Nestler EJ,
    4. Laviolette SR,
    5. Lehman MN,
    6. Làm mát LM

    (2013) Phần thưởng tự nhiên và thuốc hoạt động trên các cơ chế dẻo thần kinh phổ biến với DeltaFosB như một trung gian hòa giải chính. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • ↵
    1. PP Roux,
    2. Blenis J

    (2004) kinase protein hoạt hóa ERK và p38 MAPK: một họ protein kinase với chức năng sinh học đa dạng. Microbiol Mol Biol Rev 68: 320-344.

  • ↵
    1. Russo SJ,
    2. Bolanos CA,
    3. Theobald DE,
    4. DeCarolis NA,
    5. Cho thuê W
    6. Kumar A,
    7. Win Winley CA,
    8. NE cho thuê
    9. Wiley MD,
    10. Tự DW,
    11. Russell DS,
    12. Không có RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Nestler EJ

    (2007) Con đường IRS2-Akt trong các tế bào thần kinh dopamine midbrain điều chỉnh các phản ứng hành vi và tế bào đối với thuốc phiện. Nat Neurosci 10: 93-99.

  • ↵
    1. Schultz W

    (2010) Nhiều chức năng của tế bào thần kinh dopamine. Đại diện sinh học F1000 2: 2.

  • ↵
    1. KB Seroogy,
    2. Gall CM

    (1993) Biểu hiện của các tế bào thần kinh bởi các tế bào thần kinh dopaminergic midbrain. Neurol Exp 124: 119-128.

  • ↵
    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Kubik R,
    3. Ba A

    (1987) Tính chất động lực của opioid: bằng chứng cho thấy sự kích hoạt các thụ thể delta làm trung gian cho các quá trình củng cố. Brain Res 436: 234-239.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Nestler EJ

    (1995) Tác dụng đối nghịch của morphin và các tế bào thần kinh, NT-3, NT-4 và BDNF, trên các tế bào thần kinh coeruleus trong ống nghiệm. Brain Res 702: 117-125.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Shi WX,
    3. Ngõ SB,
    4. Harris CTNH,
    5. Bunney BS,
    6. Nestler EJ

    (1996) morphin mãn tính gây ra những thay đổi có thể nhìn thấy trong hình thái của các tế bào thần kinh dopamine mesolimbic. Proc Natl Acad Sci Hoa Kỳ 93: 11202-11207.

  • ↵
    1. Spiga S,
    2. Bác sĩ đa khoa
    3. MC Puddu,
    4. Foddai M,
    5. Diana M

    (2003) Bất thường do rút morphin trong VTA: kính hiển vi quét laser đồng tiêu. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • ↵
    1. Swanson LW

    (2004) Bản đồ não: cấu trúc của não chuột (Học thuật, San Diego), Ed 3.

  • ↵
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Trương Q,
    4. Bình đựng KK,
    5. Làm mát LM

    (2009) Phần thưởng tình dục ở chuột đực: ảnh hưởng của trải nghiệm tình dục đến sở thích ở nơi có điều kiện liên quan đến xuất tinh và xâm nhập. Hành vi horm 55: 93-97.

  • ↵
    1. Tzschentke TM

    (2007) Đo lường phần thưởng với mô hình ưu tiên địa điểm có điều kiện (CPP): cập nhật của thập kỷ trước. Nghiện Biol 12: 227-462.

  • ↵
    1. van Furth WR,
    2. van Ree JM

    (1996) Động lực tình dục: sự tham gia của opioid nội sinh ở vùng não thất. Brain Res 729: 20-28.

  • ↵
    1. van Furth WR,
    2. Wolterink G,
    3. van Ree JM

    (1995) Điều chỉnh hành vi tình dục nam tính: có sự tham gia của opioids não và dopamine. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

  • ↵
    1. Walker JR,
    2. Chen SA,
    3. Moffitt H,
    4. Inturrisi CE,
    5. Koob GF

    (2003) Phơi nhiễm opioid mãn tính tạo ra sự tự quản heroin ở chuột. Pharmacol Biochem Behav 75: 349-354.

  • ↵
    1. KA trẻ,
    2. Yêu tinh KL,
    3. Lưu Y,
    4. Vương Z

    (2011) Sinh học thần kinh của liên kết cặp: hiểu biết sâu sắc về một loài gặm nhấm xã hội đơn thuần. Mặt trận Neuroendocrinol 32: 53-69.

    •