Opijatni sistem u medijalnom prefrontalnom korteksu posreduje u prejedanju (2013)

Addict Biol. 2013 Jan 24. doi: 10.1111 / adb.12033.

Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P.

izvor

Laboratorija od Zasvojenost Poremećaji, katedre za farmakologiju i psihijatriju, Medicinski fakultet Univerziteta u Bostonu, Boston, MA, SAD.

sažetak

Poremećaj prejedanja je ovisnosti- kao poremećaj karakteriziran prekomjernim hrana potrošnja unutar diskretnih vremenskih perioda.

Ova studija je imala za cilj da shvati ulogu opioidnog sistema u medijalnom prefrontalnom korteksu (mPFC) u konzumatornim i motivacijskim aspektima prejedanja. U tu svrhu, obučavali smo muške pacove da dobiju ili slatku, vrlo ukusnu ishranu (pikantne pacove) ili hranu sa hranom (Chow pacovi) za 1 sat / dan.

Zatim evrednovati efekte antagonista opioidnog receptora, naltreksona, datog ili sistemski ili lokalno specifično u nucleus accumbens (NAcc) ili mPFC na fiksnom omjeru 1 (FR1) i rasporedu progresivnog odnosa ojačanja za hrana.

Konačno, procijenjena je ekspresija gena proopiomelanokortina (POMC), pro-dinorfina (PDyn) i pro-enkefalina (PEnk), koji kodiraju za opioidne peptide u NAcc i mPFC u obje grupe.

Ukusni pacovi brzo su povećali unos četiri puta. Naltrekson, ako se sistemski daje u NAcc, smanjuje odgovor FR1 za hrana i motivacija za jedenje pod progresivnim omjerom i za Chow i Palatable štakore; obrnuto, kada se daje u mPFC, efekti su bili vrlo selektivni za bingavanje koji jede štakore. Nadalje, otkrili smo dvostruko povećanje POMC-a i ∼50% smanjenje ekspresije gena PDyn u mPFC-u Palatable štakora, u odnosu na kontrolne štakore; međutim, nisu primijećene promjene u NAcc.

Naši podaci ukazuju na to da se neuroadaptacije opioidnog sistema u mPFC javljaju nakon povremenog pristupa vrlo ukusnim hranakoji mogu biti odgovorni za razvoj prejedanja.

Uvod

Poremećaj jedenja je okarakteriziran pretjeranom i nekontroliranom konzumiranjem hrane jako ukusne hrane u kratkom vremenu (Avena, Rada i Hoebel, 2008; Corwin, 2006; Cottone et al, 2012). Ispitanici koji dožive jedenje pića opisuju ga kao gubitak kontrole tokom prekomjernog konzumiranja hrane, što dovodi do nelagodne punoće i intenzivnog osjećaja gađenja i sramote (Stein et al, 2007). Poremećaj jedenja često se javlja u komorbiditetu sa nekoliko bolesti poput pretilosti, dijabetesa, kardiovaskularnih bolesti, kao i drugih psihijatrijskih poremećaja (Javaras et al, 2008; Wilfley et al, 2011).

Uloženi su značajni napori u pokušaju izolacije faktora koji doprinose razvoju prejedanja (Cottone et al, 2008b; Hagan i Moss, 1997). Široko prihvaćena hipoteza o etiologiji jedenja hrane zasniva se na kvalitativnoj izmjeni ukusnosti hrane. Zapravo, ograničenje na "sigurnu" hranu sa slabom ukusnom hranom, obično vođenu percepcijama kulturnih normi za mršavost ili zdravlje, može podstaći žudnju za ukusnijom ukusnom hranom i pospešuje prejedanje. Stoga, sistematsko izmjenjivanje u ukusu, rezultira u samopostojećem začaranom krugu konzumacije pića / restrikcija (Laessle et al, 1989; Polivy i Herman, 1985), postavljajući pitanje može li se poremećaj prehrane smatrati poremećajem poput ovisnosti (Corwin i Grigson, 2009; Pamuk, Sabino, Steardo et al, 2008b; Pamuk, Wang, Park et al, 2012; Epstein i Shaham, 2010).

Trenutno nema efikasnih farmakoterapija za poremećaje jedenja, iako su predloženi različiti eksperimentalni ciljevi (Pamuk, Sabino, Steardo et al, 2008b; Pamuk, Wang, Park et al, 2012). Opioidni sustav smatra se jednom od glavnih meta liječenja poremećaja prehrane još od 1970-a, uslijed ranih opažanja da su opioidni antagonisti poput naltreksona i naloksona bili u stanju smanjiti unos hrane (Holtzman, 1974). Kasniji dokazi pokazali su da je opioidni sustav uključen u dvosmjernu modulaciju ponašanja hranjenja, s obzirom na sposobnost morfija da poveća apetit kod štakora kojima je hrana uskraćena i kojima nije uskraćena (Sanger i McCarthy, 1980). Budući da su ta početna zapažanja istaknuta značajna uloga opioidnog sustava u posredovanju okusa hrane, a opsežni dokazi pokazali su da jezgra akumulacije (NAcc) predstavlja ključnu regiju koja posreduje u tim efektimaLe Merrer et al, 2009). Novija istraživanja pokazuju da je opioidna modulacija hedonske potrošnje hrane u NAcc dio složenije mreže koja uključuje nekoliko moždanih struktura uključujući predfronto-kortikalne regije (Mena, Sadeghian i Baldo, 2011).

Iako opsežna linija istraživanja naglašava primarnu ulogu opioidnog sustava u modulaciji okusa i hedonističkog hranjenja, specifično područje mozga u kojem opioidni sustav posreduje jedenje poput pića još uvijek nije poznato.

Stoga je cilj ove studije bio utvrditi je li opioidni antagonist naltrekson, koji se sistemski primjenjuje, bio u stanju suzbiti potrošnju i motivaciju za dobijanje vrlo ukusne hrane u modelu prehrane poput štakora. U tu svrhu koristili smo novorazvijeni operantni model gdje štakori samostalno primjenjuju vrlo ukusnu, slatku prehranu pod ograničenim pristupnim uvjetima (1 h / dan), oponašajući konzumirajuće i motivacijske značajke primijećene u poremećaju jedenja u prehrani (Pamuk, Wang, Park et al, 2012). Zatim smo utvrdili koje je područje mozga odgovorno za sistemske učinke naltreksona u suzbijanju potrošnje i motivaciji za dobivanje slatke, vrlo ugodne prehrane. U tu svrhu smo mikroinfuzirali mjesto posebno opioidnog antagonista u NAcc ljusku i mPFC. Konačno, procijenili smo ekspresiju gena preOpioMelanoCortin (POMC), Pro-Dynorphin (PDyn) i Pro-Enkephalin (PEnk), kodirajući za opioidne peptide u NAcc i mPFC nakon povijesti prehrane slične prejedanju.

Materijal i metode

teme

Muški štakori Wistar (n= 70), dana 41 – 47 po dolasku (Charles River, Wilmington, MA) bili su smešteni u standardnim plastičnim kavezima na vrhu žice u ciklusu 12: 12 h unazad (svetla u 10: 00 h), u a vlažnost- (60%) i temperaturni vivarijum (22 ° C). Po dolasku, štakori su imali pristup čorbi na bazi kukuruza (Harlan Teklad LM-485 dijeta 7012 (65% (kcal) ugljikohidrata, 13% masti, 21% proteina, 341 cal / 100 g); Harlan, Indianapolis, IN) i vode ad libitum u svakom trenutku. Postupci pridržavani Nacionalnih instituta za zdravstvo Vodič za njegu i upotrebu laboratorijskih životinja (NIH broj izdanja 85-23, revidirani 1996) i Principi brige za laboratorijske životinje (http://www.nap.edu/readingroom/bookslabrats), a odobrio ih je Odbor za institucionalnu njegu i upotrebu životinja sa univerziteta u Bostonu (IACUC). Eksperimentalni postupci nisu uključivali ograničenje / lišavanje hrane ili vode, osim ako nije drugačije određeno.

droga

Naltrekson, (5α) -17- (ciklopropilmetil) -4,5-epoksi-3,14-dihidromorffin-6-jedan hidrohlorid, kupljen je od Abcam (Cambridge, MA). Naltrekson je na dan ispitivanja sveže rastvoren u izotoničnom filtriranom fiziološkom rastvoru (0.9%). Naltrekson je davan supkutano (0, 0.03, 0.1 i 0.3 mg / kg, 1 ml / kg) 30 minut prije sesije i mjesto posebno u ljušturi NAcc i mPFC (0, 5 i 25 ug / strana, bilateralno) neposredno prije sjednica. Doze i vremena predobrade temeljili su se na literaturi (Bodnar et al, 1995; MacDonald, Billington i Levine, 2003; Williams i Broadbridge, 2009).

Proces jedenja u obliku opeklina

Ispitanici su obučeni za samostalno davanje hrane i vode u pojedinačnim operacionim komorama koje su detaljno opisane u (Blasio et al, 2012; Pamuk, Wang, Park et al, 2012). Za dodatne detalje pogledajte Dopunski materijali i metode.

trening

Operativni model jedenja u obliku pića izveden je kao što je prethodno opisano (Pamuk, Wang, Park et al, 2012). Štakori (n= 70) su hranili standardnu Harlan Teklad dijetu u svom kućnom kavezu. Nakon perioda aklimatizacije, hrana je zamijenjena dijetom koja se temelji na AIN-76A, u daljnjem tekstu: Chow A / I (dijeta 5TUM formulirana kao 4 – 5 g ekstrudirane pelete, 65.5% (kcal) ugljikohidrat, 10.4% masti , 24.1% proteina, 330 cal / 100 g; TestDiet, Richmond, IN). Štakori su obučeni za stjecanje operantne samouprave za hranu (45 mg precizne pelete od hrane (Chow A / I)) i vodu (100 µl) u fiksnom omjeru 1 rasporeda pojačanja (Cottone et al, 2009). Dispenzer je isporučio preciznu pelet s 45 mg koja je identična kućnoj kavezu ~ 5g ekstrudirana dijeta, kako bi se osiguralo da chow unos hrane za štakore potaknuo je samo homeostatske potrebe (Pamuk, Sabino, Roberto et al, 2009; Cottone et al, 2008a). Dnevne sesije su se odvijale prije početka mračnog ciklusa i trajale su 1 h.

testiranje

Nakon stabilnih početnih performansi u 1 h sesijama za samoupravu, pokrenut je postupak testiranja. Štakori, usklađeni sa telesnom težinom, dnevnim unosom hrane, efikasnošću hranjenja, kao i vodom i hranom koja reagira na samo-administraciju, dodeljeni su ili „chow„Kontrolna grupa, koja je u operacijskim kutijama dobila iste kuglice sa krumpirom od čokolade ponuđene u fazi treninga, ili„Palatable“, Koja je umjesto prehrane dobivena kompletnom hranom sa visokom saharozom (50% kcal) na bazi AIN-76A, upoređena u makronutrijentima i gustoći energije s dijetom muhe, (prehrana s čokoladom 5TUL: 66.7% [kcal ] ugljikohidrati, 12.7% masti, 20.6% proteina, metabolizirajuća energija 344 cal / 100g; formulirana kao 45 mg precizne pelete u hrani; TestDiet, Richmond, IN). Ovu dijetu s okusom čokolade svi štakori preferiraju (Pamuk, Sabino, Steardo et al, 2008a, b). Sesije su se provodile svakodnevno.

Progresivni odnos odnosa pojačanja za hranu

Nakon stabilizacije unosa u procesu jedenja, poput štakora (n= 53) su obučavani u progresivnom odnosu za pojačivače hrane (45 mg mg precizne pelete za chow grupe i 45 mg čokolade, visoko precizna peleta saharoze za Palatable grupa). Raspored progresivnog odnosa ojačanja za hranu izveden je kao što je prethodno opisano (Pamuk, Sabino, Roberto et al, 2009; Pamuk, Sabino, Steardo et al, 2008a; Sabino et al, 2011). Za dodatne detalje pogledajte Dopunski materijali i metode. Na kraju svake sesije, ispitanici su vraćeni u kućni kavez gdje je Chow A / I bio uvijek dostupan ad libitum; sesije su se sprovodile svakodnevno.

Intrakranijalne operacije i mikroinfuzijski postupak

Intrakranijalne operacije

Nakon stabilizacije unosa tokom operativnih sesija, štakori su implantirani intrakranijalnim kanelima. Stereotaksične operacije su izvođene kako je ranije opisano (Cottone et al, 2007; Iemolo et al, 2012; Sabino et al, 2007). Za dodatne detalje pogledajte Dopunski materijali i metode. Koordinate kanile korištene za NAcc ljusku i mPFC bile su A / P +1.06 mm, M / L ± 0.75 mm, D / V −6.0 mm i A / P +3.2 mm, M / L ± 0.65 mm, D / V −3.5 mm, respektivno. Interuralna šipka postavljena je na ravnu lubanju (leđna / trbušna: bregma = lambda); koordinate su se temeljile na atlasu Paxinos & Watson (Paxinos, 1986). Lutka sa stilom od nehrđajućeg čelika (Plastics One, Inc., Roanoke, VA, SAD) zadržala je prohodnost. Nakon operacije, štakorima je dozvoljeno da se oporave od hirurškog postupka tokom 1 sedmice prije nego što je pokrenuo eksperimentalni postupak.

Postupak mikroinfuzije

Za mikroinfuziju naltreksona, lutka je uklonjena iz vodeće kanile i zamenjena je mlaznicom od nehrđajućeg čelika koja štrči 1.0 mm za školjku NAcc i 1.5 mm za mPFC izvan vrha kanile vodiča; injektor je povezan preko PE 20 cijevi na Hamilton mikrosjeme pokretane mikroinfuzijskom pumpom (Kd Scientifics / Biological Instruments, Holliston, MA, SAD). Mikroinfuzije su davale 0.5 µl zapremine tokom 2 min; brizgaljke su ostavljene na mjestu dodatnih minut da bi se smanjio povratni protok. Tretmani su dani u potpuno latino četvrtastim dizajnom, uz 1 – 3 koji su vršili ispitivanja bez dana liječenja, u kojima se unos hrane vratio na početne nivoe. Štakorima su se dodijelili 3 dana prilagođavanja svakodnevnim lažnim ubrizgavanjima, prije početka liječenja lijekovima. Postavljanje kanile (Sl. 4) potvrđeno je na kraju svih ispitivanja mikroinfuziranjem India Ink (0.5 µl tokom 2 minuta). Rezovi 40 um sakupljeni su upotrebom kriostata i položaji su verifikovani pod mikroskopom. Od štakora 68 korištenih za studije mikroinfuzije, 3 je isključen iz proceduralnih razloga, koji uključuju gubitak ili okluziju kanile ili nemogućnost održavanja stabilnih performansi. U 14-u preostalih 65 štakora položaj kanile je bio izvan ciljanog mjesta.

Slika 4

Crtanje kriške mozga koronalnih štakora. Točkice predstavljaju mjesta ubrizgavanja u (A) NAcc ljuske i (B) mPFC uključen u analizu podataka.

Kvantitativni PCR u realnom vremenu

Jedna grupa chow i Palatable štakori (n= 15) je korišten za kvantifikaciju mRNA POMC, PDyn i PEnk peptida. Životinje su žrtvovane 24 h nakon posljednjeg dnevnog sesije jedenja. Udubljenja medijalnog prefrontalnog korteksa uključuju i prelimbičku i infralimbičku regiju. Udarci jezgre jezgre uključuju i školjke i jezgrene regije. Postupci su izvedeni kao što je ranije opisano (Sabino et al, 2009). Za detalje pogledajte Dopunski materijali i metode.

Statistička analiza

Učinci naltreksona na unos hrane, unos vode i prekid analize analizirani su korištenjem dvosmjernog mješovitog dizajna ANOVA, s poviješću prehrane kao faktorom među subjektima i liječenjem kao unutar-subjekt faktorom, nakon čega su uslijedile ponovljene mjere jednosmjerne ANOVA-e. Učinci historije prehrane na nivoe mRNA analizirani su korištenjem nesparenih Student-ovih t-testi. Varijable koje nisu uspjele test normalnosti analizirane su kao rangirane (Akritas, 1990). Korišteni statistički paketi bili su Instat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA) i Systat 11.0 (SPSS, Chicago, IL).

Rezultati

Učinci sistemske primjene opioidnog antagonista naltreksona na jedenje poput operativnog pića

Sistemska primjena naltreksona ovisna o dozi FR1 koja je ovisila o hrani za oboje chow i Palatable grupe (Slika 1A; Liječenje: F(3,54) = 25.00, p<0.001; Dijeta u povijesti liječenja X F(3,54) = 0.64, ns) Jednosmjerna ANOVA potvrdila je učinak liječenja u obje vrste chow (Tretman: F(3,27) = 7.62, p<0.0008) i Palatable štakori (tretman: F(3,27) = 16.78 p<0.0001). Post hoc analiza otkrila je da, iako je doza od 0.03 mg / kg bila neučinkovita, i doze od 0.1 i 0.3 mg / kg značajno su smanjile samo-davanje hrane u dvije grupe u odnosu na stanje vozila. Štaviše, tretman je utjecao na unos vode (Tabela 1; Liječenje: F(3,54) = 8.46, p<0.0001; Dijeta u povijesti liječenja X F(3,54) = 0.76, ns). Jednosmjerni ANOVA potvrdili su učinak liječenja u oba chow (Tretman: F(3,27) = 4.97, p<0.007) i Palatable (Tretman: F(3,27) = 3.76, p<0.022) pacovi. Post hoc analiza otkrila je značajno smanjenje unosa vode nakon primjene doza od 0.1 i 0.3 mg / kg chow štakori i doza 0.3 mg / kg u Palatable štakori, u odnosu na stanje vozila.

Slika 1

Učinci sistemskog liječenja naltreksonom (0, 0.03, 0.1, 0.3 mg / kg, potkožno) na (A) samouprava hranom (n= 20) i (B) tačka prekida na rasporedu progresivnog odnosa ojačanja (n= 19) u mužjaka štakora Wistar. Ploče predstavljaju M± SEM. ...

Učinci davanja naltreksona na unos vode

Učinci sistemske primjene opioidnog antagonista naltreksona na progresivni odnos odnosa pojačanja za hranu

Naltrekson, koji se sistemski daje, zavisi od doze u oba slučaja chow i Palatable štakori (Slika 1B; Liječenje: F(3,51) = 41.31, p<0.0001; Dijeta u povijesti liječenja X F(3,51) = 1.96, ns). Nakon značajnog glavnog efekta liječenja (chow grupa; Liječenje: F(3,27) = 5.99, p<0.003; Palatable grupa; Liječenje: F(3,24) = 6.87, p<0.002), post hoc analiza otkrila je da je doza od 0.3 mg / kg značajno smanjila graničnu vrijednost u obje skupine.

Uticaj mikroinfuzije naltreksona u školjku NAcc na jedenje nalik operantu

Mikroinfuzija naltreksona u dozu NAcc ovisila je ovisno o hrani u obje skupine chow i Palatable grupa (Slika 2A; Liječenje: F(2,32) = 10.76, p<0.0001; Dijeta u povijesti liječenja X F(2,32) = 4.36, p<0.02). Jednosmjerne ANOVA otkrile su učinak liječenja lijekovima u obje chow (Tretman: F(2,18) = 5.72, p<0.01) i Palatable štakori (tretman: F(2,18) = 5.344, p<0.02). Nadalje, post hoc analiza otkrila je značajno smanjenje samo-primjene hrane nakon tretmana s najvišom dozom (25 µg) u oba chow i Palatable grupe. Liječenje vodom nije utjecalo na potrošnju vode (Tabela 1; Liječenje: F(2,32) = 2.48, ns; Istorija dijeta X Lečenje: F(2,32) = 0.65, ns).

Slika 2

Učinak mikroinfuzije sa naltreksonom (0, 5, 25 µg / strana) u ljusci NAcc na (A) samouprava hranom (n= 18) i (B) tačka prekida na rasporedu progresivnog odnosa ojačanja (n= 17) u mužjaka štakora Wistar. Panel predstavlja M± SEM. Simboli ...

Uticaj mikroinfuzije naltreksona u školjku NAcc na raspored progresivnih odnosa ojačanja za hranu

Kada je naltrekson bio specifično mikroinfuziran u NAcc, došlo je do značajnog ukupnog smanjenja tačke prekida u oba chow i Palatable grupa je uočena (Slika 2B; Liječenje: F(2,30) = 16.72, p<0.0001; Dijeta u povijesti liječenja X F(2,30) = 5.22, p<0.01). Ovaj rezultat je potvrđen jednim načinom na koji su ANOVA nastupale pojedinačno u svakoj od dvije grupe (chow grupa; Liječenje: F(2,16) = 6.11, p<0.01; Palatable grupa; Liječenje: F(2,14) = 10.62, p<0.001). Post-hoc analiza otkrila je značajno smanjenje granične tačke u obje grupe kada su mikroinfuzirane doze od 5 i 25 µg. Smanjenje tačke prekida je bilo usporedivo u veličini između chow i Palatable pacova (50.8% i 53.2%, u odnosu na uvjete vozila).

Učinci mikroinfuzije naltreksona u mPFC na jedenje poput operativnog natapanja

Naltrexone mjesto specifično mikroinfuzirano u mPFC različito pogođenu hranu koja reagira na chow i Palatable štakori, što je otkriveno značajnom interakcijom (Slika 3A; Liječenje: F(2,30) = 4.77, p<0.02; Dijeta u povijesti liječenja X F(2,30) = 5.08, p<0.01). Zapravo, iako naltrekson nije uticao na reakciju na udisanje chow štakori (tretman: F(2,12) = 0.68, ns), to ovisi o dozi ovisnosti o prejedanju, kao u hrani Palatable štakori (tretman: F(2,18) = 9.25, p<0.002), sa post hoc analizom koja pokazuje značajno smanjenje nakon doze od 25 µg, u odnosu na stanje vozila. Stoga je naltrekson, mikroinfuzijom u mPFC, selektivno utjecao na prejedanje Palatable štakori, bez utjecaja na hranjenje kod kontrolnih štakora. Osim toga, naltrekson nije imao uticaja na unos vode (Tabela 1; Liječenje: F(2,30) = 1.89, ns; Istorija dijeta X Lečenje: F(2,30) = 0.69, ns).

Slika 3

Učinak mikroinfuzije sa naltreksonom (0, 5, 25 µg / strana) u mPFC na (A) uprava hrane (n= 17) i (B) tačka prekida na progresivnom omjeru pojačanja (n= 17) u mužjaka štakora Wistar. Panel predstavlja M± SEM. Simboli označavaju: ...

Učinci mikroinfuzije naltreksona u mPFC na progresivni omjer ojačanja za hranu

Dvostruka ANOVA nastupila je na prelomu od chow i Palatable štakori nakon mikroinfuzije naltreksona u mPFC otkrili su glavni efekat liječenja lijekom (Slika 3B; Liječenje: F(2,30) = 9.057, p<0.001; Dijeta u anamnezi X Liječenje: F (2,30) = 1.84, ns). Međutim, iako je jednosmjerna ANOVA analiza otkrila učinak liječenja lijekovima chow grupa (Tretman: F(2,18) = 4.43, p<0.027), nakon post-hoc analize, ni doza od 5 µg ni 25 µg nisu se značajno razlikovale od stanja vozila. Vjerovatno je značajan učinak liječenja na koji ukazuje ANOVA potaknut trendom ka povećanju tačke prekida nakon doze od 5 µg, u usporedbi sa stanjem vozila. S druge strane, u Palatable grupe može se uočiti značajan glavni efekat liječenja lijekom (liječenje: F(2,12) = 5.31, p<0.02), a najveća doza mikroinfuzija u mPFC značajno je smanjila tačku prekida u odnosu na stanje vozila.

Kvantitativni PCR u realnom vremenu

Kvantitativni PCR u stvarnom vremenu pokazao je da, 24 h nakon posljednje sesije samo-primjene hrane, nema značajnih razlika u ekspresiji POMC, PDyn i PEnk između chow i Palatable štakori su primijećeni u NAcc (Brojke 5A, 5B i 5C). Međutim, razina mRNA POMC-a bila je značajno veća u PFC-u od Palatable pacova u odnosu na chow pacova (117.9% porast; Slika 5D). Pored toga, nivoi ekspresije PDyn u PFC od Palatable štakori su bili znatno niži u odnosu na chow štakori (49.3% smanjenje; Slika 5E). Nije uočena razlika između dvije skupine u razinama PEnk mRNA u PFC (Slika 5F).

Slika 5

POMC, PDyn i PEnk mRNA ekspresija u NAcc (A, B i C) i u mPFC (D, E i F) mužjaka štakora Wistar. Područja mozga su sakupljena 24 h nakon posljednjeg dnevnog sesija u obliku grickanja. Podaci predstavljaju M± SEM izražen u procentima chow grupa; ...

rasprava

U ovom istraživanju pokazujemo da je opioidni antagonist naltrekson, koji se sistemski daje, nespecifično smanjio potrošnju i motivaciju za dobijanje hrane, kao i smanjio unos vode kod obe štakora, koje su samostalno davale redovnu prehranu odojka i pacova koji piju vrlo ukusna dijeta. Važno je da su se zadržavali učinci i na ulju i na ukusnu hranu kada se naltrekson mikroinfugirao u ljuske NAcc, opioidni antagonist selektivno je smanjio potrošnju i motivaciju za dobijanje vrlo ukusne hrane, ali ne i redovitu pljeskavicu, kada je mikroinfuziran u mPFC. Nadalje, potvrđujući selektivnost efekata ponašanja primijećenih nakon mikroinfuzije naltreksona u mPFC, mRNA ekspresija POMC-a i PDyn-a disregulirana je u mPFC-u, ali ne i u NAcc-u, binga-jesti štakora u odnosu na kontrolne štakore. Nije primijećen efekt u ekspresiji gena PEnk u bilo kojem području.

Zbog toga se sistemski davani naltrekson smanjuje potrošnju hrane i od jedne i do druge Palatable i chow pacovi. Sistemski tretman lijekovima također je smanjio motivaciju za rad, kako bi se dobila i kravica i ukusna prehrana u progresivnom rasporedu ojačanja, potvrđena paradigma ponašanja koja se koristi za procjenu motivacijske snage za stjecanje pojačala (Pamuk, Sabino, Roberto et al, 2009; Pamuk, Sabino, Steardo et al, 2008a). Nakon supkutane primjene naltreksona s najvećom dozom, veličina maksimalnih efekata na smanjenje reakcije FR1 i prijelomnu tačku progresivnog odnosa ojačanja bila je slična u dvije skupine (FR1: 58.2% i 54.0%; progresivni omjer: 40.5 % i 43.3%, u odnosu na stanje vozila u chow i Palatable pacova, respektivno). Stoga su učinci sistemskog naltreksona na unos hrane vjerovatno uključivali suzbijanje i homeostatskog i hedonskog ponašanja hranjenja (Le Merrer, Becker, Befort et al, 2009). Zanimljivo je da efekti potkožnog davanja naltreksona nisu bili selektivni za hranu, jer je liječenjem droga takođe smanjen unos vode i u kontrolnim i kod prejednih jela štakora. Sve u svemu, ova početna zapažanja sugerisala su opšti supresivni uticaj na ponašanje kod gutanja, nakon sistemske primene sa opioidnim antagonistom (Frenk i Rogers, 1979).

U ovom istraživanju željeli smo utvrditi da li opioidni receptori u ljusci NAcc posreduju u konzumirajućim i motivacijskim aspektima jedenja poput natašte. Zapravo, predloženo je da opioidni sistem u ovom području bude uključen u modulaciju korisnih svojstava hrane (Carlezon, Devine and Wise, 1995). Ovdje pokazujemo da naltrekson mikroinfuziran u školjku NAcc smanjuje ne samo jedenje vrlo ukusne prehrane, već i unos redovite hrane. Sličan ishod je dobijen kada smo testirali učinke mikroinfuzije naltreksona u ljušturi NAcc na prelom progresivnog rasporeda odnosa ojačanja za hranu. Zapravo, liječenje drogama neselektivno je smanjilo motivaciju za dobijanjem hrane i kod jedenja i kod kontrolnih štakora. Ovi nalazi sugeriraju da opioidni receptori unutar NAcc ljuske djeluju na opću modulaciju načina hranjenja i pojačavaju efikasnost hrane, neovisno o vrsti ili poticajnoj prehrani. U prilog ovoj hipotezi, Kelley i njegovi kolege pokazali su da blokada µ-opioidnih receptora unutar NAcc smanjuje unos i standardne prehrane sa hranom i saharoze (Kelley, Bless i Swanson, 1996). Suprotno onome što smo opazili nakon sistemske primjene naltreksona, mikroccrfuzija lijeka sa školjkom NAcc nije utjecala na unos vode, što sugerira da su opioidni receptori u ovoj regiji mozga posebno uključeni u modulaciju ponašanja kod hranjenja, umjesto općenitije u ingeracijskom ponašanju ili da su potrebne veće doze za suzbijanje unosa vode.

Istraživali smo i da li je opioidni sistem unutar mPFC-a važan u posredovanju u prejedanju jako ukusne hrane. U našem istraživanju, mPFC mikroinfuzija opioidnog antagonista selektivno je i ovisno o dozi smanjivala i potrošnju i motivaciju za postizanje vrlo ukusne prehrane kod pacova koji su jeli pacove, a da nije utjecalo na unos redovitog prasa u kontrolnim štakorama. Ni jedna grupa nije utjecala na unos vode ni u jednoj skupini, što sugerira da su učinci selektivni za ponašanje kod hranjenja. Fronto-kortikalna područja mozga uključena su u modulaciju ponašanja hranjenja (Moran i Westerterp-Plantenga, 2012). Nedavno izvješće je također pokazalo da µ-opioidni receptori unutar mPFC-a igraju važnu ulogu u pokretanju prejedanja (Mena, Sadeghian i Baldo, 2011).

Važno je razgovarati o alternativnom tumačenju da učinci naltreksona mogu biti rezultat njegove brze difuzije kroz mozak i periferu, za razliku od ostalih kvartarnih derivata opijatnih antagonista (Vaccarino, Bloom i Koob, 1985; Vaccarino et al, 1985) koje imaju malu brzinu difuzije (Schroeder et al, 1991). Suprotno ovoj interpretaciji, postoje dokazi da se u ovoj studiji naltrekson mikroinfugirao u dva različita područja mozga (NAcc i PFC) u chow štakori su imali različita dejstva. Štaviše, vremenska analiza reakcije na hranu otkrila je da naltrekson ubrizgan u mPFC smanjuje reakciju hrane na Palatable štakori nakon samo 6 minuta nakon mikroinfuzije (M± SEM: 84.3 ± 7.5 u odnosu na 75.3 ± 6.6, vozilo u odnosu na 25 µg / strana, respektivno p<0.05). Zbog kratkog vremenskog razdoblja, malo je vjerovatno da će alternativno tumačenje da opaženi efekat može proizaći ili iz blokade opioidnih receptora širom CNS-a ili iz periferne blokade. Dalje, u prilog valjanosti podataka dobijenih u ovoj studiji, literatura opširno izvještava o efektima naltreksona koji se mikroinfuzira u određenim dijelovima mozga (Bodnar et al, 2005). Unatoč tome, hipoteza da učinak naltreksona može ovisiti i o neznatnoj difuziji u područjima mozga koja je u blizini Naccsove ljuske ili PFC-a ne može se isključiti.

Alternativno tumačenje nedostatka efekata na unos hrane nakon mikroinfuzije naltreksona u prefrontalni korteks chow pacova je da je uočeni efekt posljedica istodobne blokade mu i kappa opioidnih receptora. Iako je dokazano da dva sistema pokazuju suprotne modulacijske efekte u više procesa, uključujući nagrađivanje, pokazalo se da moduliraju homeostatičko hranjenje (poput unosa hrane u chow životinje iz ove studije) na sličan način. Pokazalo se da aktiviranje opioidnih receptora mu i kap povećava unos hrane, dok je pokazano da njihova blokada pokazuje anorektičke efekte (Cooper, Jackson i Kirkham, 1985; Gosnell, Levine i Morley, 1986) Stoga, naša otkrića sugeriraju različitu ulogu u modulaciji ponašanja kod prehrane koju djeluje opioidni sustav u NAcc i mPFC; dok se čini da su NAcc opioidni receptori uključeni u opću modulaciju hranjenja, nezavisno od vrste hrane koja je unesena (Kelley, Bless i Swanson, 1996), čini se da se mPFC opioidni sistem samo regrutuje nakon ograničenog pristupa slatkoj, ukusnoj prehrani, kada štakori gube inhibicijsku kontrolu nad hranom. Ova hipoteza je u skladu s višom kognitivnom funkcijom i složenom kontrolom ocjene nagrade koju vrši mPFC.

Hipoteza o općenitijoj ulozi NAcc opioidnih receptora koja nije specifična za hranu u posredovanju ponašanja hranjenja i selektivnom regrutovanju mPFC-a bila je podržana analizom gena ekspresije POMC, PDyn i PEnk. Nije primijećena značajna razlika u ekspresiji triju gena u NAcc, kada se upoređuju napitci koji su jeli i kontrolirali štakore. Suprotno tome, u mPFC-u, pacovi koji su jeli binge pokazali su više nego dvostruko povećanje nivoa mRNA POMC-a, praćeno ~ 50% smanjenjem nivoa mRNA PDyn-a u usporedbi s kontrolnim pacovima-chow.

Pokazalo se da su geni POMC i PDyn eksprimirani u oba ova područja mozga (Leriche, Cote-Velez i Mendez, 2007; Taqi et al, 2011; Ziolkowska et al, 2006). (Međutim, dokazi pokazuju da opioidni peptidi koji se oslobađaju u mPFC-u mogu također poticati iz ćelijskih tijela koja strše iz različitih regija mozga (tj. Ventralno tegmentalno područje (Garzon i Pickel, 2004)), što povećava mogućnost da učinci primijećeni u ovom istraživanju nakon mikroinfuzije naltreksona unutar mPFC-a mogu biti nevezani za varijacije u POMC i Pdyn ekspresiji u istoj regiji mozga. POMC je prekursor endorfina koji preferencijalno vezuju µ (ali i δ) opioidne receptore (Mansour et al, 1995), dok je PDyn prekursor dinnorfina koji preferirano vežu κ-opioidne receptore (Dan et al, 1998). Opsežni dokazi sugeriraju suprotnu ulogu μ- i κ-opioidnih receptora u modulaciji različitih procesa u mozgu, uključujući analgeziju, toleranciju, procese pamćenja i nagradu (Pan, 1998; Woolley et al, 2007). Posebno i u skladu s ovom hipotezom, dokazano je da opsežno dokazano da µ-opioidni receptori posreduju u korisnim svojstvima hrane i nekih droga (Zhang i Kelley, 2000); s druge strane, dokazano je da κ-opioidni receptori posreduju protivnim i disforičnim efektima i predloženi su kao deo „sistema za nagradu“ (Koob i Le Moal, 2001). Još je važnije, u kontekstu ove studije, pokazalo se da farmakološka aktivacija ili − ili κ-opioidnih receptora u prefrontalnom korteksu djeluje protivno nagradno: mikroinfuzije selektivnog µ-opioidnog receptora induciraju prednost mjesta, dok mikroinfuzije agonista κ-opioidnog receptora stvara averziju mesta (Bals-Kubik et al, 1993).

Važna točka diskusije je da li promjene u ekspresiji mRNA koje su primijećene u ovom istraživanju ovise o razlikama u kumulativnom unosu kalorija ili tjelesnoj težini između chow i Palatable pacovi. Iako unos hrane i tjelesna težina nisu zabilježeni u skupini životinja koje se koriste za kvantitativni PCR u stvarnom vremenu, mi smo prethodno pokazali da postupak konzumiranja hrane poput napitaka ne utječe na kumulativni unos hrane niti na tjelesnu težinu. Zapravo, bingevi koji jedu štakore pokazuju prekomjeran unos tokom 1h pristupa vrlo ukusnoj prehrani, ali nadoknađuju tokom preostalih sati 23-a dana podbacivanjem redovne prehrane s gužvom (Pamuk, Wang, Park et al, 2012). Stoga ovaj apberantni oblik unosa ne rezultira različitim kumulativnim unosom kalorija ili tjelesnom težinom između prejedanja i kontrolnih štakora (Pamuk, Wang, Park et al, 2012).

Iako su predložene sličnosti između obrasca prejedanja / restrikcije u poremećaju jedenja i naduvavanja / povlačenja zlouporabe droga (Epstein i Shaham, 2010), da li bi životinjski model korišten u ovom istraživanju mogao biti koristan i za ovu studiju, negativna simptomatologija povezana sa povlačenjem iz hrane koja se jako unosi nije poznato. Pojačana ekspresija POMC-a (sistem „nagrađivanja“) i smanjena ekspresija Pdyna („anti-nagrađivanje“ sistema) koji je ovdje primijećen nakon povlačenja 24h iz ukusne prehrane ukazuju na to da životinje vjerovatno ne doživljavaju negativno emocionalno stanje. Međutim, za rješavanje ovog važnog aspekta dijetalnog biciklizma bit će potrebne dodatne studije koje procjenjuju emocionalnost i potencijalnu uključenost sustava stresa (npr. Faktor koji oslobađa kortikotropin). Stoga bi se razlike u ekspresiji gena POMC i Pdyn primijećene u mPFC-u zaista mogle tumačiti kao opće potenciranje korisnih svojstava hrane koja se može okusiti, a što može biti posljedica ili potaknuti jedenje kod ovih subjekata.

Sve u svemu, rezultati ove studije podržavaju hipotezu da je opioidni sistem u predfronto-kortikalnim regijama mozga uključen u kontrolu ponašanja hranjenja i proširio ga na specifičan kontekst neprilagođenog prekomjernog unosa jako ukusne hrane koja je uočena kod jedenja (Mena, Sadeghian i Baldo, 2011). Fronto-kortikalne regije mozga igraju glavnu ulogu u procjeni nagrade i odlučivanju (Clark et al, 2008); opsežna literatura pokazuje da ispitanici oboljeli od ovisnosti i poremećaja prehrane pokazuju disfunkcije u mPFC-u, koje su povezane s promijenjenom ocjenom nagrade (Boeka i Lokken, 2011). Naša bihevioralna, farmakološka i molekularna promatranja stoga podržavaju hipotezu da je opioidni sustav ključni posrednik hedonskog hranjenja (Nathan i Bullmore, 2009) i sugeriraju da će neuroadaptacije opioidnog sustava u mPFC-u možda biti odgovorne za hiper-procjenu visoko ukusne hrane, što dovodi do gubitka kontrole nad jedenjem.

Dopunski materijal

Supp Material

Kliknite ovdje za pregled.^{(35K, doc)}

priznanja

Zahvaljujemo Stephenu St. Cyru, Aditi R. Narayan, Vamseeu Neerukondi, Noahu Kelleyu, Jin Won Parku, Anoopu Ravilli i Sishir Yeetyju na tehničkoj pomoći, kao i Tamari Zerić na uredničkoj pomoći. Ova je publikacija omogućena brojevima grantova DA023680, DA030425, MH091945, MH093650A1 i AA016731 Nacionalnog instituta za zloupotrebu droga (NIDA), Nacionalnog instituta za mentalno zdravlje (NIMH) i Nacionalnog instituta za zloupotrebu alkohola i alkoholizma (NIAAA) , profesora za razvoj karijere Peter Paul (PC) i dodiplomskog programa istraživačkih mogućnosti (UROP) Univerziteta u Bostonu. Za njegov sadržaj odgovorni su isključivo autori i ne mora nužno predstavljati službena stajališta Nacionalnih zdravstvenih zavoda.

Fusnote

Doprinos autora

AB, PC i VS bili su odgovorni za koncept i dizajn studije. AB, PC i VS izvodili su bihevioralne i molekularne eksperimente. AB i PC obavili su analizu podataka. PC, VS i LS pomogli su u tumačenju nalaza. AB i PC su napravili rukopis. PC, VS i LS pružili su kritičku reviziju rukopisa za važne intelektualne sadržaje. Svi su autori kritički pregledali sadržaj i odobrili konačnu verziju za objavu.

reference

Akritas MG. Metoda rangiranja u nekim dvofaktornim dizajnom. Časopis Američkog statističkog udruženja. 1990; 85 (409): 73 – 78.
Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Dokaz o ovisnosti o šećeru: bihevioralni i neurohemijski efekti isprekidanog, prekomjernog unosa šećera. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32 (1): 20 – 39. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Bals-Kubik R, Ableitner A, Herz A, Shippenberg TS. Neuroanatomska mjesta koja posreduju motivacijskim učincima opioida prikazana preslikavanjem preferencijalnih mjesta uvjetovanih mjesta kod štakora. J Pharmacol Exp Ther. 1993; 264 (1): 489 – 495. [PubMed]
Blasio A, Narayan AR, Kaminski BJ, Steardo L, Sabino V, Cotton P. Izmijenjeni zadatak prilagođavanja kašnjenja za procjenu impulzivnog izbora između izokaloričnih pojačivača kod muških štakora koji nisu uskraćeni: efekti 5-HT (2) A / C i 5 Agonisti receptora -HT (1) A. Psihoparmakologija (Berl) 2012; 219 (2): 377 – 386. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Bodnar RJ, Glass MJ, Ragnauth A, Cooper ML. Opći, mu i kappa opioidni antagonisti u jezgru obuhvaćaju izmjenu unosa hrane pod uskraćivanjem, glukoprivićima i ukusnim uvjetima. Brain Res. 1995; 700 (1 – 2): 205 – 212. [PubMed]
Bodnar RJ, Lamonte N, Izrael Y, Kandov Y, Ackerman TF, Khaimova E. Recipročne opioidno-opioidne interakcije između ventralnog tegmentalnog područja i nukleusa obuhvaćaju oblasti u posredovanju hranjenja izazvanih agonistom. Peptidi. 2005; 26 (4): 621 – 629. [PubMed]
Boeka AG, Lokken KL. Uključenost prefrontalnih sistema u jelo. Jedite tegobe. 2011; 16 (2): e121 – e126. [PubMed]
Carlezon WA, Jr, Devine DP, Wise RA. Akcije oblikovanja navike nomifensina u jezgri jezgre. Psihoparmakologija (Berl) 1995; 122 (2): 194 – 197. [PubMed]
Clark L, Bechara A, Damasio H, Aitken MR, Sahakian BJ, Robbins TW. Diferencijalni učinci otočnih i ventromedijalnih prefrontalnih lezija korteksa na rizično donošenje odluka. Mozak. 2008; 131 (Pt 5): 1311 – 1322. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Cooper SJ, Jackson A, Kirkham TC. Endorfini i unos hrane: agonisti oppaidnih receptora kappe i hiperfagija. Pharmacol Biochem Behav. 1985; 23 (5): 889 – 901. [PubMed]
Corwin RL. Bingeing štakori: model povremenog pretjeranog ponašanja? Apetit. 2006; 46 (1): 11 – 15. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Corwin RL, Grigson PS. Pregled simpozija – Ovisnost o hrani: činjenica ili izmišljotina? J Nutr. 2009; 139 (3): 617–619. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Pamuk P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Hranjiva mikrostruktura u prehrani uzrokovanoj pretilošću, osjetljivih na štakor: središnji učinci urokorortina 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2): 487 – 504. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Pamuk P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, Fekete EM, Steardo L, Rice KC, Grigoriadis DE, Conti B, Koob GF, Zorrilla EP. Regrutovanje CRF sistema posreduje u prisilnoj prehrani. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106 (47): 20016 – 20020. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Pamuk P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Isprekidan pristup poželjnoj hrani smanjuje pojačanu efikasnost muhe u štakora. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008a; 295 (4): R1066 – R1076. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Pamuk P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Antitipijski negativni kontrast ovisan o opioidima i jedenje poput natašte kod štakora sa ograničenim pristupom jako poželjnoj hrani. Neuropsychopharmacology. 2008b; 33 (3): 524 – 535. [PubMed]
Pamuk P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, Iyer MR, Steardo L, Rice KC, Hayashi T, Sabino V. Antagonizam receptora Sigma-1 blokira obavezno jedenje. Neuropsychopharmacology. 2012 [PMC besplatan članak] [PubMed]
Day R, Lazure C, Basak A, Boudreault A, Limperis P, Dong W, Lindberg I. Prodinorfin obrada proprotein konvertazom 2. Rascjep u jednim osnovnim ostacima i pojačana obrada u prisustvu karboksipeptidazne aktivnosti. J Biol Chem. 1998; 273 (2): 829 – 836. [PubMed]
Epstein DH, Shaham Y. Pacovi s jedenjem sira i pitanje ovisnosti o hrani. Nat Neurosci. 2010; 13 (5): 529 – 531. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Frenk H, Rogers GH. Supresijski učinci naloksona na unos hrane i vode u štakora. Behav Neural Biol. 1979; 26 (1): 23 – 40. [PubMed]
Garzon M, Pickel VM. Ultrastrukturna lokalizacija Leu5-enkefalinske imunoreaktivnosti u mezokortikalnim neuronima i njihovim ulaznim terminalima u tegmentalnom području ventralnog ventrala. Sinapsija. 2004; 52 (1): 38 – 52. [PubMed]
Gosnell BA, Levine AS, Morley JE. Stimuliranje unosa hrane od strane selektivnih agonista mu, kappa i delta opioidnih receptora. Life Sci. 1986; 38 (12): 1081 – 1088. [PubMed]
Hagan MM, Moss DE. Postojanost uzimanja prejedanja nakon povijesnih ograničenja s povremenim preporukama o ukusnoj hrani štakora: implikacije na bulimiju nervozu. Int J Jedite nesklad. 1997; 22 (4): 411 – 420. [PubMed]
Holtzman SG. Bihevioralni efekti odvojenog i kombiniranog davanja naloksona i d-amfetamina. J Pharmacol Exp Ther. 1974; 189 (1): 51 – 60. [PubMed]
Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, Sabino V, Cottone P. Izvlačenje iz hroničnog, povremenog pristupa vrlo ukusnoj hrani izaziva depresivno ponašanje u kompulzivnom jedenju štakora. Behav Pharmacol. 2012; 23 (5 – 6): 593 – 602. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Javaras KN, Pope HG, Lalonde JK, Roberts JL, Nillni YI, Laird NM, Bulik CM, Crow SJ, McElroy SL, Walsh BT, Tsuang MT, Rosenthal NR, Hudson JI. Pojava poremećaja jedenja sa psihijatrijskim i medicinskim poremećajima. J Clin Psihijatrija. 2008; 69 (2): 266 – 273. [PubMed]
Kelley AE, Bless EP, Swanson CJ. Ispitivanje učinaka antagonista opijata infuziranih u jezgru akumulatora na hranjenju i pijenju saharoze u štakora. J Pharmacol Exp Ther. 1996; 278 (3): 1499 – 1507. [PubMed]
Koob GF, Le Moal M. Ovisnost o drogama, poremećaj regulacije nagrade i alostaza. Neuropsychopharmacology. 2001; 24 (2): 97 – 129. [PubMed]
Laessle RG, Tuschl RJ, Kotthaus BC, Pirke KM. Bihevioralni i biološki korelati ograničavanja prehrane u normalnom životu. Apetit. 1989; 12 (2): 83 – 94. [PubMed]
Le Merrer J, Becker JA, Befort K, Kieffer BL. Nagrada opioidnog sistema u mozgu. Physiol Rev. 2009; 89 (4): 1379 – 1412. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Leriche M, Cote-Velez A, Mendez M. Prisustvo pro-opiomelanokortinske mRNA u medialnom prefrontalnom korteksu štakora, nukleusnim jezgrama štampe i ventralnom tegmentalnom području: ispitivanja RT-PCR i tehnika hibridizacije in situ. Neuropeptidi. 2007; 41 (6): 421 – 431. [PubMed]
MacDonald AF, Billington CJ, Levine AS. Učinci opioidnog antagonista naltreksona na hranjenje inducirano od strane DAMGO u ventralnom tegmentalnom području i na području ljuske jezgre u štakoru. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 285 (5): R999 – R1004. [PubMed]
Mansour A, Fox CA, Akil H, Watson SJ. Ekspresija mRNA opioidnog receptora u CNS štakora: anatomske i funkcionalne implikacije. Trendovi Neurosci. 1995; 18 (1): 22 – 29. [PubMed]
Mena JD, Sadeghian K, Baldo BA. Indukcija hiperfagije i unosa ugljenih hidrata stimulacijom mu-opioidnog receptora u opisanim područjima prednje kore. J Neurosci. 2011; 31 (9): 3249 – 3260. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Moran TH, Westerterp-Plantenga M. Potencijalna uloga i nedostatak područja mozga prednjeg kortikalnog mozga koji se odnose na izvršnu kontrolu unosa hrane. Int J Obes (Lond) 2012; 36 (5): 625 – 626. [PubMed]
Nathan PJ, Bullmore ET. Od hedonike ukusa do motivacijske pokreta: centralnih mu-opioidnih receptora i ponašanja kod jedenja. Int J Neuropsychopharmacol. 2009; 12 (7): 995 – 1008. [PubMed]
Pan ZZ. mu-Suprotne akcije kappa-opioidnog receptora. Trendovi Pharmacol Sci. 1998; 19 (3): 94 – 98. [PubMed]
Paxinos G, Watson C. Mozak štakora u stereotaksičnim koordinatama. Drugo izd. Orlando: Akademska štampa; 1986.
Polivy J, Herman CP. Dijeta i prejedanje. Analiza uzroka. Am Psychol. 1985; 40 (2): 193 – 201. [PubMed]
Sabino V, Pamuk P, Blasio A, Iyer MR, Steardo L, Rice KC, Conti B, Koob GF, Zorrilla EP. Aktivacija sigma receptora indukuje piće poput bingaja kod sardinskih pacova koji preferiraju alkohol. Neuropsychopharmacology. 2011; 36 (6): 1207 – 1218. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Sabino V, Pamuk P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Metoksimemetopon, vrlo moćan mu opioidni agonist, bifazno utječe na unos etanola u šardareda koji preferiraju alkohol. Psihoparmakologija (Berl) 2007; 192 (4): 537 – 546. [PubMed]
Sabino V, Pamuk P, Zhao Y, Iyer MR, Steardo L, Jr, Steardo L, Rice KC, Conti B, Koob GF, Zorrilla EP. Antagonist sigma-receptora BD-1063 smanjuje unos etanola i pojačanje u životinjskim modelima pretjeranog pijenja. Neuropsychopharmacology. 2009; 34 (6): 1482 – 1493. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Sanger DJ, McCarthy PS. Diferencijalni učinci morfija na unos hrane i vode u štakore lišene hrane i slobodno hranjenja. Psihoparmakologija (Berl) 1980; 72 (1): 103 – 106. [PubMed]
Schroeder RL, Weinger MB, Vakassian L, Koob GF. Metilnaloksonij difundira iz mozga štakora sporije od naloksona nakon direktne intracerebralne injekcije. Neurosci Lett. 1991; 121 (1 – 2): 173 – 177. [PubMed]
Stein RI, Kenardy J, Wiseman CV, Dounchis JZ, Arnow BA, Wilfley DE. Šta pokreće pijanstvo kod poremećaja prejedanja?: Prospektivno ispitivanje prekursora i posljedica. Int J Jedi Disord. 2007; 40 (3): 195–203. [PubMed]
Taqi MM, Bazov I, Watanabe H, Nyberg F, Yakovleva T, Bakalkin G. Promotor prodinorfina SNP povezan s ovisnošću o alkoholu formira nekanonsko mjesto vezanja AP-1 koje može utjecati na ekspresiju gena u ljudskom mozgu. Brain Res. 2011; 1385: 18 – 25. [PubMed]
Vaccarino FJ, Bloom FE, Koob GF. Blokada nukleusnih receptora opijata smanjuje intravensku nagradu za heroin kod pacova. Psihoparmakologija (Berl) 1985; 86 (1 – 2): 37 – 42. [PubMed]
Vaccarino FJ, Pettit HO, Bloom FE, Koob GF. Učinci intracerebroventrikularne primjene metil naloksonijevog klorida na heroin davanje pacova. Pharmacol Biochem Behav. 1985; 23 (3): 495 – 498. [PubMed]
Wilfley D, Berkowitz R, Goebel-Fabbri A, Hirst K, Ievers-Landis C, Lipman TH, Marcus M, Ng D, Pham T, Saletsky R, Schanuel J, Van Buren D. Binge, jedenje, raspoloženje i kvaliteta života u mladih sa dijabetesom tipa 2: osnovni podaci iz današnje studije. Njega dijabetesa. 2011; 34 (4): 858 – 860. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Williams KL, Broadbridge CL Potencija naltreksona za smanjenje samo-davanja etanola kod štakora je veća za potkožno ubrizgavanje u odnosu na intraperitonealnu injekciju. Alkohol. 2009; 43 (2): 119 – 126. [PMC besplatan članak] [PubMed]
Woolley JD, Lee BS, Kim B, Fields HL. Suprotni efekti intra-nukleusnih agonista mu i kappa opioidnih agonista na senzorno specifičnu sitost. Neuroznanost. 2007; 146 (4): 1445 – 1452. [PubMed]
Zhang M, Kelley AE. Poboljšan unos hrane visoke masnoće nakon striatalne mu-opioidne stimulacije: mapiranje mikroinjekcije i fos ekspresija. Neuroscience. 2000; 99 (2): 267 – 277. [\ TPubMed]
Ziolkowska B, Stefanski R, Mierzejewski P, Zapart G, Kostowski W, Przewlocki R. Nepredvidivi efekti ne doprinose efektima samokakveracije kokaina na ekspresiju gena prodinnorfina i proenkefalina u prednjem mozgu štakora. Brain Res. 2006; 1069 (1): 1 – 9. [PubMed]