Změna dynamiky uvolňování dopaminu během dospívání a po dobrovolném příjmu alkoholu (2014)

PLoS One. 2014 Může 1; 9 (5): e96337. doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.

Palm S, Nylander I..

Abstraktní

Dospívání je spojeno s vysokou impulsivitou a podstupováním rizik, což zvyšuje náchylnost dospívajících k užívání drog. Včasné užívání drog je spojeno se zvýšeným rizikem poruch užívání návykových látek později v životě, ale neurobiologický základ není jasný. Mozek prochází během dospívání rozsáhlým vývojem a poruchy v této době jsou předpokládány, aby přispěly ke zvýšené zranitelnosti. Přechod z kontrolovaného na nutkavé užívání drog a závislost zahrnuje dlouhodobé změny v nervových sítích, včetně přechodu od nucleus accumbens, zprostředkování akutních posilujících účinků, k náboru dorzálního striata a formování návyků. Cílem této studie bylo otestovat hypotézu zvýšeného uvolňování dopaminu po farmakologické výzvě u dospívajících potkanů. Uvolňování a absorpce dopaminu vyvolané draslíkem bylo zkoumáno pomocí chronoamperometrických záznamů dopaminu v kombinaci s expozicí amfetaminu u časných a pozdních dospívajících potkanů ​​a dospělých potkanů. Kromě toho byly zkoumány důsledky dobrovolného příjmu alkoholu během dospívání na tyto účinky. Údaje ukazují postupné zvyšování evokovaného uvolňování dopaminu s věkem, což podporuje předchozí studie naznačující, že množství uvolnitelného dopaminu se s věkem zvyšuje. Naproti tomu v reakci na amfetamin bylo pozorováno postupné snižování evokovaného uvolňování s věkem, což podporuje poměrně větší zásobu dopaminu u mladších zvířat.. Měření dopaminu po dobrovolném příjmu alkoholu vedla k nižší amplitudě uvolňování v reakci na chlorid draselný, což naznačuje, že alkohol ovlivňuje uvolnitelný soubor dopaminu, což může mít důsledky pro zranitelnost vůči závislosti a další psychiatrické diagnózy zahrnující dopamin v dorzálním striatu.

Úvod

Dospívání je spojeno s vysokou impulzivitou a rizikovým chováním, což zvyšuje náchylnost dospívajících k užívání drog [1]. Nikotin, alkohol nebo konopí se pravděpodobně testují před psychostimulanty nebo opiáty [2], [3] a časné užívání drog je korelováno se zvýšenými poruchami užívání návykových látek (SUD) později v životě [4]-[6]. Neurobiologie, která je základem tohoto zvýšeného rizika SUD, je nejasná, ale adolescence je časem rozsáhlého vývoje mozku a předpokládá se, že narušení normálního vývoje mozku pomocí zneužívání drog přispívá ke zvýšené zranitelnosti po užívání drog u dospívajících [7].

Drogy zneužívání běžně působí na systém odměn a zvyšují extracelulární hladiny dopaminu v jádru accumbens akutně po příjmu [8]. Přechod z počátečního užívání drog na nutkavé užívání a závislost však zahrnuje dlouhodobé změny v mnoha neuronových sítích [9] a jeden z nich je předpokládán, že zahrnuje posun od nucleus accumbens, zprostředkování akutních zesilujících účinků, k náboru dorzálního striata a formování návyků [10]. Dopaminergní aktivita v dorzálním striatu by proto mohla být také faktorem zranitelnosti dospívajících jedinců.

Zvířecí modely mají velký význam pro naše pochopení těchto mechanismů a věkové okno identifikované jako adolescence u hlodavců je mezi postnatálním dnem (PND) 28 a 50 [11]. Předchozí studie ukázaly, že dospívající krysy mají sníženou bazální rychlost uvolňování dopaminu, sníženou zásobu snadno uvolnitelného dopaminu, ale také větší zásobní zásobu dopaminu ve srovnání s dospělýmis [12]. Rovněž bylo navrženo, že navzdory sníženému uvolňování dopaminu za bazálních podmínek mohou dospívající jedinci být schopni uvolnit více dopaminu, pokud jsou stimulováni farmakologickými výzvami [13]. Prvním cílem této studie proto bylo otestovat hypotézu zvýšeného uvolňování dopaminu po farmakologické výzvě u dospívajících zvířat. Uvolňování a absorpce dopaminu bylo zkoumáno pomocí chronoamperometrických dopaminových záznamů v kombinaci s expozicí amfetaminu u časných a pozdních adolescentů a dospělých dospělých outbredních krys Wistar.

Druhým cílem této studie bylo zjistit vliv vlivu prostředí na dobrovolný příjem alkoholu během dospívání. Důvodem bylo to, že předchozí studie ukazují, že faktory prostředí během adolescentního období, jako je intraperitoneálně podaný alkohol, zvyšují bazální extracelulární hladiny dopaminu [14] zatímco dobrovolný příjem alkoholu u potkanů ​​P preferujících alkohol zvyšuje absorpci dopaminu bez ovlivnění bazálních extracelulárních hladin [15]. Rozdíly mezi těmito studiemi lze vysvětlit řadou faktorů, jako je cesta podání, dávka, kmen krysy a přesné časové období, ale v obou případech ovlivňuje adolescentní příjem alkoholu dynamiku dopaminu, což se vyplatí dále prozkoumat.

Materiály a metody

Etické prohlášení

Všechny pokusy na zvířatech byly provedeny podle protokolu schváleného Etickou komisí pro zvířata v Uppsale a dodržovaly pokyny švédské legislativy o pokusech na zvířatech (zákon o dobrých životních podmínkách zvířat SFS1998: 56) a směrnice Rady Evropských společenství (86 / 609 / EHS).

Zvířata

Těhotné krysy Wistar (RccHan: WI, Harlan Laboratories BV, Horst, Nizozemsko) dorazily do zařízení pro zvířata v den gestace 16. Zvířata dorazila do šarží v průběhu několika týdnů, aby se přizpůsobily načasování chronoamperometrických záznamů. Přehrady byly jednotlivě umístěny v makrolonových klecích (59 cm × 38 cm × 20 cm) s potravou na pelety (typ R36; Lantmännen, Kimstad, Švédsko) a vodou z vodovodu podle libosti. Klece obsahovaly podestýlku a papírové archy (40 × 60 cm; Cellstoff, Papyrus) a personál péče o zvířata je jednou týdně měnil. Místnost pro zvířata byla udržována při konstantní teplotě (22 ± 1 ° C) a vlhkosti (50 ± 10%) v pravidelném cyklu 12 h světlo / tma s rozsvícenými světly v 06: 00 am. Všechny místnosti měly maskovací šum v pozadí, aby se minimalizovaly neočekávané zvuky, které by mohly zvířata rušit.

Přehled experimentální osnovy je uveden v Obrázek 1. Vrhy, které se narodily ve stejný den (postnatální den (PND) 0), byly křížově pěstovány tak, aby zahrnovaly samce 6 a samice 4 s cílem kontrolovat mateřský stres při přepravě, chování matek a genetiku. Štěňata byla odstavena na PND 22 a chována 3 v kleci až do PND 28 (± 1 den) nebo PND 42 (± 1 den), když byly prováděny chronoamperometrické záznamy. V této studii byly dále použity pouze samci štěňat. Skupině třiceti samců potkanů ​​byl poskytnut dobrovolný binge-like přístup k 20% ethanol v paradigmatu s volbou dvou lahví od PND28 k PND65. Zvířata dostala 24 hodinový přístup k ethanolu po tři po sobě jdoucí dny v týdnu, tj. Od úterý do čtvrtka po dobu šesti týdnů, celkem 18 relací. Pro měření příjmu ethanolu byly láhve zváženy před a po každé relaci a byly vypočteny gramy čistého ethanolu na kilogram tělesné hmotnosti. Polohy lahví byly mezi relacemi změněny, aby se zabránilo preferenci pozice. Zvířata pijící ethanolem byla individuálně chována od PND 28 do PND 70. Zvířata s nejvyšším kumulativním příjmem ethanolu (g / kg) byla vybrána a potom byly provedeny elektrochemické záznamy při PND 70 (± 2 dní). Ve stejném období byly také umístěny kontroly na pitnou vodu odpovídající věku podle věku.

thumbnail

Obrázek 1. Experimentální osnova.

E = pití alkoholu, PND = postnatální den, W = pití vody.

dva: 10.1371 / journal.pone.0096337.g001

Chronoamperometrické záznamy dopaminu In vivo

Materiály.

Inaktin, Nafion 5% roztok, dopamin hydrochlorid, kyselina L-askorbová, chlorid draselný, chlorid sodný, fosforečnan sodný, chlorid vápenatý a d-amfetamin sulfát byly získány od Sigma-Aldrich, LLC (St Louis, MO, USA). Lepivý vosk Kerr byl získán od DAB LAB AB (Upplands Väsby, Švédsko). Mikroelektrody z uhlíkových vláken (SF1A; 30 um vnější průměr × 150 um délka) byly zakoupeny od Quanteon, LLC (Nicholasville, KY, USA), stříbrný drát referenční elektrody (200 um, teflonová izolace) byl zakoupen od AM Systems Inc. ( Carlborg, WA, USA) a skleněné kapiláry (vnitřní průměr 0.58 mm) pro mikropipety byly zakoupeny od World Precision Instruments Ltd (Stevenage, Velká Británie).

Ordinace.

Dopaminové záznamy byly prováděny v PND 28 (± 1 den), PND 42 (± 1 den) nebo PND 70 (± 2 dní). Chirurgie byla provedena bezprostředně před elektrochemickými záznamy. K udržování tělesné teploty byla použita topná podložka cirkulující vodou (Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, New York). Zvířata byla anestetizována Inactin 125 mg / kg intraperitoneálně (ip) a umístěna do stereotaxického rámce (Stoelting Co., Wood Dale, IL, USA). Díra v lebce byla vyvrtána přesahující záznamové místo pro elektrodu a další otvor byl vyvrtán vzdáleně od záznamového místa pro umístění referenční elektrody Ag / AgCl.

Vysokorychlostní chronoamperometrické záznamy uvolňování a vychytávání dopaminu.

Vysokorychlostní chronoamperometrická měření (vzorkovací frekvence 1 Hz, celkem 200 ms) byla provedena pomocí záznamového systému FAST16-mkII (Fast Analytical Sensing Technology, Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, USA) podle dříve popsaného postupu. [16]. Mikroelektrody z uhlíkových vláken (SF1A) byly potaženy třemi vrstvami Nafionu 5 min zahříváním při 200 ° C před prvním potahováním a po každém potahování [17]. Elektrody byly poté kalibrovány in vitro ve fyziologickém roztoku pufrovaném fosfátem 0.05 M pro stanovení selektivity, limitu detekce (LOD) a sklonu před použitím in vivo [16]. Mikroelektrody vykazovaly lineární odezvy na sériové přidání dopaminu (2 – 6 µM) s průměrným korelačním koeficientem (R2) 0.999 ± 0.0003. Průměrná selektivita pro všechny elektrody použité v této studii byla 14482 ± 3005 uM pro dopamin nad kyselinou askorbovou. Průměrná LOD byla 0.026 ± 0.004 uM dopamin a průměrný sklon byl -1.00 ± 0.03 nA / uM dopamin. Průměrný poměr redukce / oxidace měřený během referenčních maximálních odezev dopaminu byl 0.67 ± 0.02, což svědčí o detekci převážně dopaminu [17]. Stříbrný drát byl pokoven a použit jako in vivo Referenční elektroda Ag / AgCl [18].

Experimentální protokol in vivo.

Mikropipeta (10 – 15 µm vnitřní průměr) byla naplněna izotonickým roztokem chloridu draselného (120 mM KCl, 29 mM NaCl, 2.5 mM CaCl2· 2H2O) (pH 7.2 – 7.4) pomocí jehly pro plnění pipetou (28G, World Precision Instruments, Aston, UK). Mikropipeta byla připevněna přibližně 150 – 200 um od špičky uhlíkových vláken pomocí lepivého vosku. Elektroda byla stereotakticky umístěna do dorzálního striata, AP: + 1.0 mm, L: + 3.0 mm od bregma, řezná tyč byla upravena podle věku a hmotnosti [19], [20]. Elektroda byla zpočátku umístěna hřbetní (-3.0 mm) na místo záznamu pomocí mikromanipulátoru (Narishige International Ltd, Londýn, Velká Británie), aby ji snížila, a nechala se dosáhnout stabilní základní linie asi 45-60 min před tím, než byla snížena na hloubka −4.0 mm od bregma. Elektroda pak byla ponechána další 5 – 10 min se stabilizovat v místě záznamu před stanovením účinku jediné injekce chloridu draselného na uvolňování dopaminu. Roztok draslíku byl lokálně aplikován pomocí tlakové ejekce řízené PicoSpritzerem III (Parker Hannifin Corporation, Pine Brook, NJ, USA) a tlak (10 – 20 psi) a čas (0.5 – 1.0 s) byly upraveny tak, aby dodávaly 100 nl roztok draslíku měřený chirurgickým mikroskopem opatřeným okulárovým retikulem [21].

Uvolňování vyvolané draslíkem bylo použito v kombinaci se subkutánními injekcemi amfetaminu nebo fyziologického roztoku. Byly vytvořeny tři referenční píky podobné amplitudě, 10 min. Pět minut po posledním referenčním vrcholu byly potkanům podány buď 2 mg / kg amfetaminu nebo ekvivalentní množství fyziologického roztoku (1 ml / kg) a po dalším uvolnění 5 min bylo opět vyvoláno každých 10 min, čímž byly produkovány píky v 5, 15, 25 , 35, 45, 55 a 65 min. Po systémové injekci, viz Obrázek 2A pro reprezentativní stopu. Dávka amfetaminu byla vybrána na základě behaviorálních účinků ve studiích lokomoce a samopodávání [22]-[24].

thumbnail

Obrázek 2. Reprezentativní stopy.

A) Reprezentativní stopa oxidačního proudu pro potkana v postnatálním dni 28 přijímajícího amfetamin a B) detail druhého referenčního píku pro stejné zvíře ukazující, jak byla vypočtena amplituda a T80. Amp = amplituda, Base = základní linie, Ref = reference.

dva: 10.1371 / journal.pone.0096337.g002

Ověření umístění a vyloučení elektrod.

Elektrody byly po ukončení experimentu odříznuty a ponechány na místě a mozky byly zmrazeny. Umístění bylo ověřeno dělením zmrazených mozků. Ze zvířat 12 v PND28 byl 1 vyloučen kvůli nesprávnému umístění a 2 kvůli chybám záznamu. U zvířat 12 v PND 42 bylo zvíře 1 vyloučeno z důvodu nesprávného umístění. U zvířat 16 v PND 70 byly 3 vyloučeny z důvodu chyb záznamu. U zvířat konzumujících ethanol 16 v PND 70 byla 2 vyloučena z důvodu chyb záznamu. Chyby záznamu zahrnují ucpání pipety a elektrické poruchy, jako jsou výpadky napájení a poruchy obecného napájení záznamové jednotky.

Analýza dat.

Maximální amplituda evokovaných píků a čas, kdy pík klesne na 80% své amplitudy (T80), byly vypočteny pomocí softwaru FAST Analysis verze 4.4 (Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, USA), viz Obrázek 2B pro reprezentativní stopu. Tři referenční píky byly zprůměrovány a procento těchto píku bylo vypočteno pro píky po injekci. Pro statistickou analýzu byla použita analýza rozptylu opakovaných měření (ANOVA) k porovnání chronoamperometrických údajů v čase mezi věkovými nebo pitnými skupinami a léčbou (fyziologickým roztokem nebo amfetaminem), po níž následoval Fisherův nejméně významný rozdíl (LSD) post-hoc test. Pro údaje o příjmu ethanolu, které nebyly normálně distribuovány, byla použita Friedman ANOVA. Statistické analýzy byly prováděny pomocí Statistica 10 (StatSoft Inc., Tulsa, OK, USA). Rozdíly byly považovány za statisticky významné při p <0.05.

výsledky

Účinky závislé na věku

Rozdíly v referenčních amplitudách mezi věkovými skupinami jsou uvedeny v Obrázek 3. Opakované měření ANOVA porovnávající věk a čas ukázalo hlavní účinek věku [F (2,22) = 5.81; p = 0.009], ale žádný účinek času [F (2,44) = 1.43; p = 0.25] nebo jakýkoli interakční účinek mezi časem a věkem [F (4,44) = 1.70; p = 0.17].

thumbnail

Obrázek 3. Referenční amplitudy píku v různých věcích.

Amplitudy (uM) (průměr ± SEM) tří referenčních vrcholů před léčbou buď amfetaminem nebo fyziologickým roztokem ve třech věkových skupinách; postnatální den (PND) 28, 42 a 70. ** p <0.01.

dva: 10.1371 / journal.pone.0096337.g003

Žádné účinky věku [F (2,24) = 1.02; p = 0.38], čas [F (2,48) = 0.94; p = 0.40] nebo čas a věk [F (4,48) = 0.22; p = 0.93] byly nalezeny pro referenční hodnoty T80. Střední ± standardní chyba průměrných (SEM) referenčních hodnot T80 byla 17.3 ± 1.3 pro PND 28, 19.5 ± 0.9 pro PND 42 a 20.5 ± 1.0 pro PND70.

Rozdíly mezi věkovými skupinami v amplitudové odezvě na amfetamin jsou uvedeny v Obrázek 4A-C. Léčba amfetaminem vedla k hlavním účinkům věku [F (2,26) = 3.95; p = 0.03], léčba [F (1,26) = 10.77; p = 0.003] a čas [F (6,156 3.32) = 0.004; p = 12,156] a interakční efekty mezi časem a věkem [F (2.23 0.01) = 6,156; p = 4.20], čas a léčba [F (0.001 2,26) = 2.37; p <0.11], ale žádná interakce mezi věkem a léčbou [F (12,156) = 0.77; p = 0.68] nebo čas, věk a léčba [F (XNUMX XNUMX) = XNUMX; p = XNUMX].

thumbnail

Obrázek 4. Amplitudy a odezvy T80 v čase v různých věcích.

Odpovědi v průběhu času po subkutánních (sc) injekcích solného roztoku nebo amfetaminu, jako procento referenčních hodnot (průměr ± SEM), pro amplitudy v A) postnatální den (PND) 28, B) PND 42 a C) PND 70 a pro hodnoty T80 při D) PND 28, E) PND 42 a F) PND 70. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 ve srovnání s fyziologickými kontrolami, #p <0.05 ve srovnání s ekvivalentním časovým bodem při PND 42, ° p <0.05, °° p <0.01, °°° p <0.001 ve srovnání s ekvivalentním časovým bodem při PND 70, §p <0.05, §§p <0.01, §§§p <0.001 ve srovnání s ekvivalentním časovým bodem při PND 28.

dva: 10.1371 / journal.pone.0096337.g004

Reakce T80 na amfetamin je uvedena v Obrázek 4D – E. Nebyl zaznamenán žádný hlavní vliv věku [F (2,25) = 1.87; p = 0.17], ale došlo k účinkům léčby [F (1,25) = 26.52; p <0.001], čas [F (6,150) = 7.70; p <0.001] a interakční účinek času a léčby [F (6,150 12.29) = 0.001; p <2,25]. Mezi věkem a léčbou nedošlo k žádné interakci [F (1.29) = 0.29; p = 12,150], čas a věk [Ž (0.66) = 0.78; p = 12,150] a trend směrem k interakci mezi časem, věkem a léčbou [F (1.60 0.098) = XNUMX; p = XNUMX].

Dobrovolný příjem alkoholu u dospívajících

Údaje o příjmu etanolu u krys 14, které byly použity v chronoamperometrických záznamech, jsou uvedeny v tabulce Tabulka 1. Friedman ANOVA nevykazoval žádné významné rozdíly v příjmu v průběhu času, ačkoli tam byl trend [χ2 = 9.80; p = 0.08] směrem k rozdílům způsobeným příjmem během druhého týdne (PND 35 – 37), který byl mírně vyšší než v následujících týdnech. Friedman ANOVA preferencí vykázal v průběhu času nárůst [χ2 = 19.7; p = 0.001], hlavně v důsledku zvýšení během prvních tří týdnů, viz Tabulka 1.

thumbnail

Tabulka 1. Střední, minimální a maximální příjem alkoholu (g / kg / 24 h) a preference (%) po dobu šesti týdnů přístupu k alkoholu a střední, minimální a maximální kumulativní příjem (g) po relacích 18.

dva: 10.1371 / journal.pone.0096337.t001

Rozdíly v referenčních amplitudách mezi skupinami konzumujícími ethanol a vodu jsou uvedeny v Obrázek 5. Opakovaná měření ANOVA srovnávající pitnou skupinu a čas ukázaly hlavní účinek pitné skupiny [F (1,17) = 16.22; p <0.001], ale žádný vliv času [F (2,34) = 1.76; p = 0.19] nebo jakýkoli interakční účinek mezi časem a pitnou skupinou [F (4,44) = 1.32; p = 0.28].

thumbnail

Obrázek 5. Referenční amplitudy píku u zvířat konzumujících vodu nebo ethanol.

Amplitudy (uM) (průměr ± SEM) tří referenčních vrcholů před ošetřením buď amfetaminem nebo fyziologickým roztokem ve skupinách pijících vodu a ethanol. ** p <0.01, *** p <0.001.

dva: 10.1371 / journal.pone.0096337.g005

Žádné účinky pití skupiny [F (1,18) = 0.04; p = 0.85], čas [F (2,36) = 1.96; p = 0.16] nebo skupina času a pití [F (2,36) = 0.22; p = 0.81] byly nalezeny pro referenční hodnoty T80. Průměrné hodnoty ± SEM referenční hodnoty T80 byly 20.5 ± 1.0 pro krysy pitné vody a 19.1 ± 1.3 pro krysy pitné etanol.

Reakce na amfetamin ve skupinách konzumujících ethanol a vodu je ukázána v Obrázek 6. Pro amplitudy, jak je uvedeno v Obrázek 6A, došlo k trendu účinku léčby [F (1,19) = 3.01; p = 0.099] a došlo k hlavnímu účinku času [F (6,114) = 2.30; p = 0.04], ale žádný účinek skupiny pití [F (1,19) = 0.39; p = 0.54] nebo jakýkoli interakční účinek mezi léčenou a pitnou skupinou [F (1,19) = 0.83; p = 0.37] nebo čas a ošetření [F (6,114) = 1.13; p = 0.35], čas a skupina pití [F (6,114) = 0.44; p = 0.85] nebo čas, skupina pro léčbu a pití [F (6,114) = 0.27; p = 0.95].

thumbnail

Obrázek 6. Amplitudy a odpovědi T80 v čase u zvířat konzumujících vodu nebo ethanol.

Odpovědi v průběhu času po subkutánních (sc) injekcích solného roztoku nebo amfetaminu, jako procento referenčních hodnot (průměr ± SEM), pro A) amplitudy a B) hodnoty T80 ve skupinách pijících vodu (W) - nebo ethanol (E) . * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 ve srovnání s fyziologickými kontrolami.

dva: 10.1371 / journal.pone.0096337.g006

Pro hodnoty T80 Obrázek 6B, došlo k hlavnímu účinku léčby [F (1,19) = 17.35; p <0.001] a čas [F (6,114 2.42) = 0.03; p = 6,114] a účinek interakce mezi časem a léčbou [F (10.28 0.001) = 1,19; p <0.33]. Nebyl žádný účinek skupiny na pití [F (0.57) = 1,19; p = 0.76], nebo jakýkoli interakční účinek mezi léčenou a pitnou skupinou [F (0.40) = 6,114; p = 1.66], skupina času a pití [F (0.14 6,114) = 1.75; p = 0.12] nebo skupina času, léčby a pití [F (XNUMX XNUMX) = XNUMX; p = XNUMX].

Diskuse

Účinky na uvolňování a vychytávání dopaminu závislé na věku byly zkoumány za bazálních podmínek a v reakci na amfetamin u časných a pozdních dospívajících i dospělých krys. Rovněž byl zkoumán vliv pití alkoholu během dospívání a je podle našich znalostí první studií zkoumající uvolňování a vychytávání u dobrovolných potkanů ​​s pitím adolescentů chronoamperometrickou technikou.

Účinky závislé na věku

Rozdíly v referenčních amplitudách závislé na věku jsou v souladu s předchozí studií využívající voltametrii v kombinaci s elektrickou stimulací, která ukázala, že dospělé krysy uvolňovaly při stimulaci více dopaminu než mladé krysy [12]. Časový bod adolescence používaný Stamfordem (1989) byl přibližně PND 30, ale od té doby studie ukázaly, že kolem PND 40 – 45 existují vrcholy bazálních extracelulárních hladin dopaminu [25]-[27] a dopaminový receptor D2 hustota [28], zatímco hladiny tyrosinhydroxylázy jsou nižší než časná adolescence i dospělost [29]. Současná studie proto zahrnovala dva časové body během dospívání, PND 28 a PND 42, což odpovídá časné a pozdní adolescenci [11]. Amplituda u pozdních adolescentních zvířat byla střední k amplitudám v časné adolescenci a dospělosti, což naznačuje, že vývoj od adolescence do dospělosti zahrnoval postupné zvyšování uvolňovací kapacity dopaminu v reakci na chlorid draselný v dorzálním striatu. To je v souladu se zprávami o zvýšených extracelulárních hladinách dopaminu v nucleus accumbens v dospělosti ve srovnání s dospívání [30], [31]. Jak již bylo zmíněno, některé studie také ukazují maximální hladiny na PND 45 [25]-[27] a mohou být sladěny se současnou studií prostřednictvím zpráv o zvýšených rychlostech střelby kolem stejného PND [32], [33]. Současná studie neměřila bazální extracelulární hladiny a je možné, že zvýšená rychlost vypalování má za následek zvýšení bazálních hladin bez jakéhokoli vrcholu uvolňování indukovaného draslíkem. Kromě toho jedna ze studií prokazujících draslíkem indukované extracelulární hladiny v jádru připadá na vrchol kolem PND 42 [25] kontrastuje s údaji z dorzálního striata, od Stamforda (1989) a současné studie, které ukazují regionální rozdíly.

Míra vychytávání, T80, neodhalila žádné rozdíly mezi věky v současné studii, zatímco Stamford (1989) zjistil, že míra vychytávání byla vyšší u dospělých potkanů. To může být způsobeno metodickými rozdíly v míře vychytávání; T80 zahrnuje jak lineární, tak křivočarou část křivky, zatímco Stamford použil lineární část křivky [34]. Koncentrace dosažené v této studii jsou pouze desetinou koncentrací v předchozí studii a Vmax by proto nemělo být dosaženo. Použití lineární části křivky píku pro výpočet rychlosti absorpce za těchto podmínek povede pouze k absorpčním rychlostem závislým na amplitudách. [35]. T80 byl vybrán, protože také bere v úvahu křivočarou část křivky, kde koncentrace dopaminu jsou nižší a jsou citlivější na blokátory absorpce dopaminu [35], [36]. Samozřejmě, že T80 je také závislý na amplitudě, ale jak je vidět v této studii, rozdíly v amplitudě automaticky nevedou k rozdílům v T80, což naznačuje, že poměr vychytávání k uvolnění je posunut směrem k vychytávání u mladších zvířat. Podporující současná zjištění je studie, která použila kvantitativní mikrodialýzu a nezjistila žádné rozdíly v extrakční frakci, nepřímé míře absorpce, v jádrech accumbens potkanů ​​na PND 35, 45 a 60 [26].

Vyšší uvolňování vyvolané draslíkem v dospělosti může být způsobeno větší uvolnitelnou zásobou dopaminu [12] a může být zahrnuto mnoho faktorů, jako jsou věkově závislé rozdíly v syntéze dopaminu tyrosinhydroxylázou [29], [37], vezikuly obsahující vezikulární monoaminový transportér-2 (VMAT-2) [38]a kinetika VMAT-2 [39]a také prořezávání receptorů D2 [28] a funkce [40]. Tyto faktory mohou také pomoci vysvětlit zvýšené amplitudy pozorované po amfetaminu u časně dospívajících zvířat. Současná data jsou opět v souladu s údaji vykazujícími větší nárůst uvolňování dopaminu u mladých ve srovnání s dospělými zvířaty v reakci na nomifensin. [12] což naznačuje, že časně dospívající potkany mají proporcionálně větší zásobu, která se může uvolnit po stimulaci psychoaktivními látkami. Toto je dále podpořeno údaji, které ukazují větší nárůst stimulovaného extracelulárního dopaminu po amfetaminu u dospívajících zvířat [22]. Existují však studie mikrodialýzy, které ukazují nižší extracelulární hladiny dopaminu po amfetaminu u dospívajících ve srovnání s dospělými [30], [37], což opět zdůrazňuje, že možnost zvýšení stimulovaného uvolňování nemusí nutně znamenat zvýšení extracelulárních hladin a že různé techniky mohou přidat doplňující informace.

Nebyly nalezeny žádné účinky závislé na věku na T80 po amfetaminu, což naznačuje, že amfetamin má podobné účinky na absorpci dopaminu ve všech věkových skupinách. To opět potvrzují výsledky Stamford (1989), které nevykazují žádné rozdíly ve stupni blokády vychytávání po nomifensinu mezi věkovými skupinami. Existují také studie, které naznačují, že rozdíly ve struktuře a funkci transportu dopaminu související s věkem souvisejí s místem vázajícím kokain na transportéru, nikoli však s místem vázajícím amfetamin. [22] což by mohlo naznačovat, že na věku závislé účinky amfetaminu na absorpci neexistují. Byl však zaznamenán trend interakce mezi časem, věkem a léčbou, což naznačuje, že v průběhu času reagovaly na amfetamin různě v závislosti na věku. Další studie zkoumající vychytávání exogenním dopaminem by také mohly pomoci oddělit vychytávání závislé na amplitudě od funkce transportéru [41]-[43]. Důležité by byly rovněž studie na probuzených potkanech, protože současná studie byla prováděna na anestetizovaných zvířatech. Použitou anestézií byl barbiturát thiobutabarbital (inaktin), pozitivní alosterický modulátor receptorů kyseliny gama-aminomáselné (GABA) A, který u potkanů ​​způsobuje prodlouženou a stabilní anestezii [44]. GABA může mít různé účinky v závislosti na věku a historii pití alkoholu [45] a proto by anestézie mohla interagovat s věkem nebo léčbou a vyvolat matoucí účinky. Ukázalo se však, že pentobarbital, další barbiturát, má malý účinek na hladinu dopaminu ve striatu. [46]. Navíc v této studii bylo uvolňování indukováno pomocí chloridu draselného a nespoléhalo se na spontánní jevy, což by mělo snižovat význam GABAergického tónu při uvolňování. Pokud jde o absorpci dopaminu, existují zprávy, že barbituráty mohou specificky ovlivnit absorpci dopaminu [47], není však jasné, zda může docházet také k interakci s věkem nebo léčbou.

Dobrovolný příjem alkoholu u dospívajících

Dobrovolný příjem alkoholu u dospívajících po dobu šesti týdnů měl za následek nižší referenční amplitudy ve srovnání s kontrolami s pitím vody. Amplitudy byly podobné amplitudám pozorovaným u časných dospívajících potkanů. Protože účinky byly pozorovány v amplitudách a ne v čase absorpce, je možné si představit, že alkohol ovlivňuje faktory regulující uvolnitelný soubor dopaminu spíše než dopaminový transportér a existují údaje podporující neovlivněný příjem po adolescentním alkoholu [14]. Existují také údaje o mikrodialýze, které ukazují zvýšenou extracelulární hladinu dopaminu po expozici dospívajícím intraperitoneálním injekcím alkoholu [14], [27], [48], a to je poněkud v rozporu se současnými nálezy sníženého uvolnitelného dopaminu. Jak již bylo zmíněno, zvýšená rychlost střelby může být způsobem, jak sladit údaje o mikrodialýze se současnými údaji, ale neexistují žádné studie, které by to podpořily. Kromě toho existují studie, které ukazují, že způsob expozice alkoholu, tj. Dobrovolný nebo nucený, může mít na neurobiologii odlišné účinky [49].

Při léčbě amfetaminem nebyly žádné významné rozdíly mezi skupinami konzumujícími alkohol a vodu v amplitudách nebo T80. Trend směřující k vlivu na amplitudy však byl způsoben nárůstem skupiny konzumující alkohol. Existuje také větší variabilita v reakci na amfetamin ve skupině konzumující alkohol, což by mohlo být způsobeno změnou v příjmu alkoholu, i když tato odchylka nesouvisí s odpovědí (data nejsou uvedena). To také poukazuje na omezení v této studii, a to, že hladiny alkoholu v krvi nebyly měřeny. Studie byla založena na nerušeném přístupu k 24 ha změřeným hladinám alkoholu v krvi by musel být přístup omezen a stres spojený s odběrem krve by riskoval narušení příjmu zvířat. Nelze tedy vyloučit korelaci mezi odpovědí a jednotlivými hladinami alkoholu v krvi. Údaje o příjmu uvedené v této studii jsou však podobné jiným studiím, které ukazují neurobiologické účinky alkoholu, používaly krysy Wistar v podobném věku nebo paradigmy příjmu[50]-[52]. To naznačuje, že nejen jedinci náchylní k vysokému příjmu, ale také skromní pijáci z průřezu obecné populace, riskují změny v neurobiologii po dobrovolném příjmu alkoholu u dospívajících.

Žádné rozdíly v době absorpce po amfetaminu nenaznačují, že adolescentní alkohol nemá žádný účinek na funkci transportu dopaminu v reakci na amfetamin, ale měl by také prospěch z výzkumu aplikací exogenního dopaminu. [41]-[43].

Dále byla učiněna dvě zajímavá pozorování. Zaprvé, referenční amplitudy po požití alkoholu jsou podobné amplitudám pozorovaným u zvířat na začátku periody příjmu alkoholu, tj. PND 28. Za druhé, velikost nárůstu amplitud po amfetaminu u zvířat konzumujících alkohol je podobná pozdním dospívajícím potkanům, tj. PND 42. Zda se tato zjištění vztahují ke změněnému vývoji uvolnitelné zásoby a zásobní zásoby dopaminu v neuronech, je ještě třeba objasnit. Současná studie nezahrnovala skupinu dospělých potkanů ​​konzumujících alkohol, takže nelze vyvodit závěry o možnosti účinků specifických pro věk. Indikace věkově specifických účinků však lze nalézt v rozporech mezi studiemi dospívajících potkanů ​​vystavených alkoholu, které vykazují neovlivněný příjem dopaminu [14] a studie dospělých potkanů ​​a opic vystavených alkoholu, které vykazují zvýšené vychytávání, ale nemají žádný vliv na vyvolaný přetečení dopaminu [53], [54]. Pro budoucí studie by proto bylo velmi zajímavé zkoumat expozici alkoholu a mechanismy, které vedou k jeho účinku v různých věkových skupinách. Další zkoumání faktorů, jako je tyrosinhydroxyláza, hustota a funkce receptoru dopaminu a vezikulární monoaminový transportér, by mohly pomoci objasnit možné účinky alkoholu závislé na věku na uvolnitelnou zásobu a zásobní zásobu dopaminu. Podle našich znalostí nebyly tyto faktory po adolescentním alkoholu zkoumány.

závěr

Údaje ukazují postupné zvyšování evokovaného přetečení dopaminu s věkem, což podporuje předchozí studie naznačující, že se množství uvolnitelného dopaminu zvyšuje s věkem. Na rozdíl od toho byl pozorován postupný pokles evokovaného přetečení s věkem v reakci na amfetamin, podporující úměrně větší zásobu dopaminu u mladších zvířat, díky čemuž jsou potenciálně citlivější na drogy uvolňující dopamin. Adolescentní příjem alkoholu měl za následek přetečení nižší než u kontrol s pitím vody. To naznačuje, že alkohol ovlivňuje uvolnitelný soubor dopaminu, což může mít důsledky pro zranitelnost vůči závislosti a jiným psychiatrickým diagnózám zahrnujícím dopaminový systém v dorzálním striatu.

Poděkování

Autoři děkují paní Maritě Bergové za technickou pomoc a Dr. Martinovi Lundbladovi za metodické diskuse.

Autorské příspěvky

Koncipované a navržené experimenty: SP IN. Provedené experimenty: SP. Analyzovaná data: SP IN. Napsal článek: SP.

Reference

Reference

  1. 1. Arnett J (1992) Reckless Behavior in Adolescence - a Developmental Perspective. Vývojová revize 12: 339–373.
    doi: 10.1016/0273-2297(92)90013-r  

  2. 2. Yamaguchi
    K, Kandel DB (1984) Vzory užívání drog od dospívání po mladé
    dospělost: II. Sekvence progrese. Am J Veřejné zdraví 74: 668 – 672.
    doi: 10.2105 / ajph.74.7.668  

  3. 3. Degenhardt
    L, Chiu WT, Conway K, Dierker L, Glantz M, et al. (2009) Má
    'brána' záleží? Asociace mezi řádem zahájení užívání drog
    a vývoj drogové závislosti v Národní studii komorbidity
    Replikace. Psychol Med 39: 157 – 167.
    doi: 10.1017 / s0033291708003425  

  4. 4. Anthony JC, Petronis KR (1995) Užívání drog s časným nástupem a riziko pozdějších problémů s drogami. Závislost na alkoholu 40: 9 – 15.
    doi: 10.1016/0376-8716(95)01194-3  

  5. 5. Grant
    BF, Dawson DA (1997) Věk při nástupu alkoholu a jeho souvislost
    s DSM-IV zneužívání alkoholu a závislost: výsledky od National
    Podélný epidemiologický průzkum alkoholu. J Zneužití látky 9: 103 – 110.
    doi: 10.1016/s0899-3289(97)90009-2  

  6. 6. DeWit
    DJ, Adlaf EM, Offord DR, Ogborne AC (2000) Věk při prvním požívání alkoholu: a
    rizikový faktor pro vývoj poruch alkoholu. Am J Psychiatry
    157: 745-750.
    doi: 10.1176 / appi.ajp.157.5.745  

  7. 7. Posádky
    F, He J, Hodge C (2007) Dospívající kortikální vývoj: kritický
    období zranitelnosti pro závislost. Pharmacol Biochem Behav 86:
    189-199.
    doi: 10.1016 / j.pbb.2006.12.001  

  8. 8. Di
    Chiara G, Imperato A (1988) Drogy zneužívané lidmi přednostně
    zvýšit koncentrace synaptického dopaminu v mezolimbickém systému
    volně se pohybující krysy. Proc Natl Acad Sci USA 85: 5274 – 5278.
    doi: 10.1073 / pnas.85.14.5274  

  9. 9. Koob GF, Volkow ND (2010) Neurocircuitry of addiction. Neuropsychofarmakologie 35: 217 – 238.
    dva: 10.1038 / npp.2009.110  

  10. 10. Everitt
    BJ, Robbins TW (2013) Od ventrálního k dorzálnímu striatu:
    Převzetí názorů na jejich role v drogové závislosti. Neurosci Biobehav Rev.
  11. 11. Spear LP (2000) Dospívající mozek a projevy chování související s věkem. Neurosci Biobehav Rev 24: 417 – 463.
    doi: 10.1016/s0149-7634(00)00014-2  

  12. 12. Stamford
    JA (1989) Vývoj a stárnutí nigrostriatálního dopaminu u potkanů
    systém studoval s rychlou cyklickou voltametrií. J Neurochem 52: 1582 – 1589.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.1989.tb09212.x  

  13. 13. Marco
    EM, Adriani W, Ruocco LA, Canese R, Sadile AG, et al. (2011)
    Neurobehaviorální adaptace na methylfenidát: problém časného
    expozice dospívajících. Neurosci Biobehav Rev 35: 1722 – 1739.
    doi: 10.1016 / j.neubiorev.2011.02.011  

  14. 14. Badanich
    KA, Maldonado AM, Kirstein CL (2007) Chronická expozice ethanolu během
    dospívání zvyšuje bazální dopamin v jádru accumbens septi
    během dospělosti. Alcohol Clin Exp Res 31: 895 – 900.
    doi: 10.1111 / j.1530-0277.2007.00370.x  

  15. 15. Sahr
    AE, Thielen RJ, Lumeng L, Li TK, McBride WJ (2004), dlouhotrvající
    změny mezolimbického dopaminového systému po periadolescentu
    pití ethanolu u potkanů ​​preferujících alkohol. Alcohol Clin Exp Res 28:
    702-711.
    doi: 10.1097 / 01.alc.0000125344.79677.1c  

  16. 16. Littrell
    OM, Pomerleau F, Huettl P, Surgener S, McGinty JF, et al .. (2012)
    Zvýšená aktivita dopaminového transportéru u heterozygotů Gdnf ve středním věku
    myši. Neurobiol Aging 33: 427 e421 – 414.
  17. 17. Gerhardt
    GA, Hoffman AF (2001) Účinky složení záznamového média na
    reakce mikroelektrod uhlíkových vláken potažených Nafiony měřené pomocí
    vysokorychlostní chronoamperometrie. J Neurosciho metody 109: 13 – 21.
    doi: 10.1016/s0165-0270(01)00396-x  

  18. 18. Lundblad
    M, af Bjerken S, Cenci MA, Pomerleau F, Gerhardt GA, et al. (2009)
    Chronická intermitentní léčba L-DOPA indukuje změny v dopaminu
    uvolnění. J Neurochem 108: 998 – 1008.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05848.x  

  19. 19. Paxinos G, Watson C (2007) Mozek krysy ve stereotaxických souřadnicích. New York: Academic Press.
  20. 20. Sherwood
    NM, Timiras PS (1970) Stereotaxický atlas vyvíjejícího se mozku krysy.
    Berkeley ,: University of California Press. 209 str. (str. 214 – 203 illus.) str.
  21. 21. Friedemann
    MN, Gerhardt GA (1992) Regionální účinky stárnutí na dopaminergikum
    funkce u krysy Fischer-344. Neurobiol Aging 13: 325 – 332.
    doi: 10.1016/0197-4580(92)90046-z  

  22. 22. Chodec
    QD, Morris SE, Arrant AE, Nagel JM, Parylak S, et al. (2010) dopamin
    inhibitory vychytávání, ale nikoliv uvolňování dopaminu, vyvolávají větší zvýšení
    motorické chování a extracelulární dopamin u dospívajících potkanů ​​než u
    dospělé samce potkanů. J Pharmacol Exp Ther 335: 124 – 132.
    doi: 10.1124 / jpet.110.167320  

  23. 23. háčky
    MS, Jones GH, Neill DB, Justice JB Jr (1992) Jednotlivé rozdíly v
    senzibilizace amfetaminem: účinky závislé na dávce. Pharmacol Biochem
    Behav 41: 203 – 210.
    doi: 10.1016/0091-3057(92)90083-r  

  24. 24. Dellu
    F, Piazza PV, Mayo W, Le Moal M, Simon H (1996) Hledáme novinky
    krysy - biobehaviorální vlastnosti a možný vztah k
    rys hledající senzaci u člověka. Neuropsychobiologie 34: 136 – 145.
    doi: 10.1159 / 000119305  

  25. 25. Nakano
    M, Mizuno T (1996) Věkem související změny metabolismu
    neurotransmitery ve striatu potkana: studie mikrodialýzy. Mech Aging
    Dev 86: 95 – 104.
    doi: 10.1016/0047-6374(95)01680-5  

  26. 26. Badanich
    KA, Adler KJ, Kirstein CL (2006) Adolescenti se liší od dospělých v
    kokainové kondicionované místo a kokainem indukovaný dopamin v EU
    nucleus accumbens septi. Eur J Pharmacol 550: 95 – 106.
    doi: 10.1016 / j.ejphar.2006.08.034  

  27. 27. Philpot
    RM, Wecker L, Kirstein CL (2009) Opakovaná expozice ethanolu během
    dospívání mění vývojovou trajektorii dopaminergní produkce
    z jádra accumbens septi. Int J Dev Neurosci 27: 805 – 815.
    doi: 10.1016 / j.ijdevneu.2009.08.009  

  28. 28. Teicher
    MH, Andersen SL, Hostetter JC Jr (1995) Důkaz pro dopaminový receptor
    prořezávání mezi dospíváním a dospělostí ve striatu, ale ne v jádru
    accumbens. Brain Res Dev Brain Res 89: 167 – 172.
    doi: 10.1016/0165-3806(95)00109-q  

  29. 29. Mathews
    IZ, Waters P, McCormick CM (2009) Změny hyporeaktivity na
    akutní amfetamin a věkové rozdíly v tyrosinhydroxyláze
    imunoreaktivita v mozku během dospívání u samců a samic potkanů.
    Dev Psychobiol 51: 417 – 428.
    doi: 10.1002 / dev.20381  

  30. 30. Laviola
    G, Pascucci T, Pieretti S (2001) Striatální senzibilizace dopaminem na
    D-amfetamin v periadolescentu, ale ne u dospělých potkanů. Pharmacol Biochem
    Behav 68: 115 – 124.
    doi: 10.1016/s0091-3057(00)00430-5  

  31. 31. Gazzara
    RA, Andersen SL (1994) ontogeneze změn vyvolaných apomorfinem
    uvolňování neostriatálního dopaminu: účinky na uvolňování vyvolané draslíkem.
    Neurochem Res 19: 339 – 345.
    doi: 10.1007 / bf00971583  

  32. 32. McCutcheon JE, Marinelli M (2009) Věk záleží. Eur J Neurosci 29: 997 – 1014.
    doi: 10.1111 / j.1460-9568.2009.06648.x  

  33. 33. Wong
    WC, Ford KA, Pagels NE, McCutcheon JE, Marinelli M (2013) Adolescenti
    jsou zranitelnější vůči závislosti na kokainu: chování a chování
    elektrofyziologický důkaz. J Neurosci 33: 4913 – 4922.
    doi: 10.1523 / jneurosci.1371-12.2013  

  34. 34. Stamford
    JA, Kruk ZL, Millar J, Wightman RM (1984) Příjem striatálního dopaminu v
    krysa: in vivo analýza rychlou cyklickou voltametrií. Neurosci Lett 51:
    133-138.
    doi: 10.1016/0304-3940(84)90274-x  

  35. 35. Wightmane
    RM, Zimmerman JB (1990) Kontrola extracelulární koncentrace dopaminu
    v striatu potkana impulsním tokem a absorpcí. Brain Res Brain Res Rev 15:
    135-144.
    doi: 10.1016/0165-0173(90)90015-g  

  36. 36. Zahniser
    NR, Dickinson SD, Gerhardt GA (1998) Vysokorychlostní chronoamperometr
    elektrochemická měření clearance dopaminu. Metody Enzymol 296:
    708-719.
    doi: 10.1016/s0076-6879(98)96050-5  

  37. 37. Matthews
    M, Bondi C, Torres G, Moghaddam B (2013) Snížený presynaptický dopamin
    aktivita v dorzálním striatu adolescenta. Neuropsychofarmakologie 38:
    1344-1351.
    dva: 10.1038 / npp.2013.32  

  38. 38. Truong
    JG, Wilkins DG, Baudys J, Crouch DJ, Johnson-Davis KL, et al. (2005)
    Změny vezikulárního monoaminu závislé na věku vyvolaly metamfetamin
    funkce transportéru-2: důsledky pro neurotoxicitu. J Pharmacol Exp
    Ther 314: 1087 – 1092.
    doi: 10.1124 / jpet.105.085951  

  39. 39. Volz
    TJ, Farnsworth SJ, Rowley SD, Hanson GR, Fleckenstein AE (2009)
    Rozdíly v dopaminovém transportéru a vezikulárně závislé na věku
    monoaminový transportér-2 a jeho důsledky pro
    neurotoxicita metamfetaminu. Synapse 63: 147 – 151.
    doi: 10.1002 / syn.20580  

  40. 40. Benoit-Marand
    M, O'Donnell P (2008) D2 dopaminová modulace kortikoakcumbenů
    změny synaptické odezvy během dospívání. Eur J Neurosci 27:
    1364-1372.
    doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06107.x  

  41. 41. Cass
    WA, Gerhardt GA (1995) Hodnocení in vivo absorpce dopaminu u potkanů
    mediální prefrontální kůra: srovnání s dorzálním striatem a jádrem
    accumbens. J Neurochem 65: 201 – 207.
    doi: 10.1046 / j.1471-4159.1995.65010201.x  

  42. 42. Cass
    WA, Zahniser NR, Flach KA, Gerhardt GA (1993) Clearance exogenních
    dopamin v krysím hřbetním striatu a nucleus accumbens: role
    metabolismus a účinky lokálně aplikovaných inhibitorů absorpce. J Neurochem
    61: 2269-2278.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.1993.tb07469.x  

  43. 43. Mlynář
    EM, Pomerleau F, Huettl P, Russell VA, Gerhardt GA, et al. (2012) The
    spontánně hypertenzní a Wistar Kyoto potkaní modely ADHD vykazují
    subregionální rozdíly v uvolňování dopaminu a absorpci ve striatu
    a nucleus accumbens. Neurofarmakologie 63: 1327 – 1334.
    doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.08.020  

  44. 44. Anestezie a analgezie ryb RE (2008) u laboratorních zvířat. San Diego: Academic Press.
  45. 45. Silveri
    MM (2014) Příspěvky GABA k odezvě na alkohol během roku 2006
    dospívání: Pohledy z preklinických a klinických studií. Pharmacol
    Ther.
  46. 46. Semba
    K, Adachi N, Arai T (2005) Usnadnění serotonergní aktivity a
    amnézie u potkanů ​​způsobená intravenózními anestetiky. Anesteziologie 102:
    616-623.
    doi: 10.1097 / 00000542-200503000-00021  

  47. 47. Keita
    H, Lecharny JB, Henzel D, Desmonts JM, Mantz J (1996) je inhibice
    příjem dopaminu relevantní pro hypnotický účinek iv anestetik? Br
    J Anaesth 77: 254 – 256.
    doi: 10.1093 / bja / 77.2.254  

  48. 48. Paschal
    M, Boix J, Felipo V, Guerri C (2009) Opakované podávání alkoholu
    během dospívání způsobuje změny mezolimbického dopaminergika a
    glutamatergické systémy a podporuje příjem alkoholu u dospělých krys. J
    Neurochem 108: 920 – 931.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05835.x  

  49. 49. Spanagel R (2003) Výzkum závislosti na alkoholu: od zvířecích modelů po kliniky. Best Pract Res Res Gastroenterol 17: 507 – 518.
    doi: 10.1016/s1521-6918(03)00031-3  

  50. 50. Adermark
    L, Jonsson S, Ericson M, Soderpalm B (2011) Intermitentní ethanol
    spotřeba potlačuje endokanabinoidovou signalizaci v dorsolateralu
    striatum krysy. Neurofarmakologie 61: 1160 – 1165.
    doi: 10.1016 / j.neuropharm.2011.01.014  

  51. 51. García-Burgos
    D, González F, Manrique T, Gallo M (2009)
    dospívající, dospívající a dospělé krysy Wistar v akvizici,
    podmínky údržby a relapsu. Alkoholismus: Klinický a
    Experimentální výzkum 33: 722 – 728.
    doi: 10.1111 / j.1530-0277.2008.00889.x  

  52. 52. Steensland
    P, Fredriksson I., Holst S., Feltmann K., Franck J., a kol. (2012) The
    monoaminový stabilizátor (-) - OSU6162 utlumuje dobrovolný příjem ethanolu a
    etanolem indukovaný výstup dopaminu v nucleus accumbens. Biol Psychiatry
    72: 823-831.
    dva: 10.1016 / j.biopsych.2012.06.018  

  53. 53. Budygin
    EA, John CE, Mateo Y, Daunais JB, Friedman DP, et al. (2003) Chronický
    Expozice ethanolu mění presynaptickou funkci dopaminu ve striatu
    opice: předběžná studie. Synapse 50: 266 – 268.
    doi: 10.1002 / syn.10269  

  54. 54. Budygin
    EA, Oleson EB, Mathews TA, Lack AK, Diaz MR, et al. (2007) Účinky
    - chronická expozice alkoholu při absorpci dopaminu v jádrech krys a potkana
    caudate putamen. Psychofarmakologie (Berl) 193: 495 – 501.
    doi: 10.1007/s00213-007-0812-1