Membránové androgenní receptory mohou zprostředkovat posilování androgenu. (2010)

Psychoneuroendokrinologie. 2010 Aug; 35 (7): 1063-73. Epub 2010 Únor 6.
 

Zdroj

Department of Cell & Neurobiology, Keck School of Medicine, University of Southern California, Los Angeles, CA 90033, USA.

Abstraktní

Zneužívání anabolických a androgenních steroidů (AAS) je rozšířené. Navíc AAS posilují, jak dokládá samoadministrace u hlodavců. Nicméně receptory, které přenášejí zesilující účinky AAS, jsou nejasné. AAS se může vázat na klasické nukleární androgenní receptory (AR) nebo membránové receptory. Použili jsme dva přístupy k prozkoumání úlohy jaderných AR v samosprávě AAS. Nejprve jsme testovali androgenní samoadministraci u potkanů ​​s mutací testikulární feminizace (Tfm), která zasahuje do vazby androgenu. Pokud jsou jaderné AR nezbytné pro samo-podávání AAS, Tfm samci by neměli samy podávat androgeny. Tfm samci a divoký typ (WT) vrhači samci podávali nediferencovaný androgen dihydrotestosteron (DHT) nebo vozidlo intracerebroventrikulárně (ICV) s pevným poměrem (FR) rozvrhu až do FR5. Jak Tfm, tak WT potkani získali při DHT samo-podávání (66.4 +/- 9.6 reakce / 4 h pro Tfm a 79.2 +/- 11.5 pro WT odpovědi / 4 h) přednost pro aktivní nose-poke Požadavek FR se zvýšil. Hodnoty preferencí byly signifikantně nižší u potkanů ​​sama podávajících vehikulum (42.3 +/- 5.3 odpovědi / 4 h pro Tfm a 19.1 +/- 4.0 odpovědi / 4 h pro WT). Testovali jsme také samo-podávání DHT konjugovaného s bovinním sérovým albuminem (BSA) u C3 a C17, který je omezen na účinky na povrchu buněk. Křečkům bylo umožněno samo-podávat konjugáty DHT, BSA a DHT-BSA pro 15 dny u FR1. Křečci vykazovali významnou přednost pro konjugáty DHT (18.0 +/- 4.1 odpovědi / 4 h) nebo DHT-BSA (10.0 +/- 3.7 odpovědi / 4 h a 21.0 +/- 7.2 reakce / 4 h), ale ne pro BSA (2.5 + -2.4 odpovědí / 4 h). Společně tyto údaje ukazují, že jaderné AR nejsou nutné pro samo-podávání androgenu. Samostatné podávání androgenu může být dále zprostředkováno plazmatickými membránovými receptory.

Copyright 2010 Elsevier Ltd. Všechna práva vyhrazena.

Klíčová slova: Anabolické a androgenní steroidy, samoadministrace, membránový androgenní receptor, nukleární androgenní receptor, mutace testikulární feminizace

Anabolicko-androgenní steroidy (AAS) jsou drogy zneužívání. Tyto deriváty testosteronu (T) se používají pro atletické a estetické účely (Yesalis a kol., 1993). Vedlejší účinky se pohybují od hypogonadismu a gynekomastie po srdeční a jaterní dysfunkci (Leshner, 2000). Kromě toho se shromažďují důkazy, že zneužívání AAS způsobuje změny nálady (Papež a Katz, 1994), agrese (Choi a Pope, 1994, Kouri a kol., 1995) a může způsobit závislost (Brower a kol., 1991, Brower, 2002). Navzdory rostoucím obavám nebyly základní mechanismy zneužívání AAS dobře pochopeny.

U lidí se tvrdí, že zahájení užívání AAS je z velké části motivováno anabolickými účinky, ale někteří abustici nakonec vyvíjejí závislost (Brower, 2002). Důkazy z výzkumu na zvířatech podporují tuto hypotézu. AAS indukují kondici podmíněného místa (CPP) u myší (Arnedo a kol., 2000) a potkanů ​​(Packard a kol., 1997, Packard a kol., 1998, Frye a kol., 2002). Kromě toho křečci dobrovolně konzumují AAS prostřednictvím orální (Dřevo, 2002), intravenózní (Wood a kol., 2004) a intracerebroventrikulární (ICV) samo-podávání (DiMeo a Wood, 2004, Triemstra a dřevo, 2004, Wood a kol., 2004, DiMeo a Wood, 2006b).

Zatímco ICV samo-podávání navrhuje centrální místa působení, specifické hormony a receptory zprostředkování AAS zesílení jsou nejasné. Současné důkazy naznačují, že posilující účinky T jsou zprostředkovány androgeny spíše než prostřednictvím estrogenů po aromatizaci. Samci křečci samy podávají dihydrotestosteron (DHT; DiMeo a Wood, 2006b) a jiných aromatizovatelných androgenů (Ballard a dřevo, 2005). Kromě toho je samo-podávání T blokováno anti-androgenním flutamidem (Peters a dřevo, 2004). Otázka se nyní stává: jaký je androgenní signál transdukovaný v mozku?

Androgenní receptor (AR) je klasický nukleární steroidní receptor, který funguje jako transkripční faktor. ARs jsou řídké ve strukturách spojených s užíváním drog, jako je nucleus accumbens (Acb) a ventrální tegmentální oblast (VTA; Simerly a kol., 1990, Wood a Newman, 1999). Existují také důkazy o tom, že gonadální steroidy působí prostřednictvím receptorů buněčných povrchů (Mermelstein a kol., 1996, Zhu a kol., 2003, Thomas a kol., 2006, Vasudevan a Pfaff, 2007).

V současné studii jsme použili dva přístupy k určení úlohy klasického jaderného AR v podpoře androgenu. Abychom minimalizovali možnou aktivaci estrogenových receptorů (ER), testovali jsme samoadministraci DHT. V prvním pokusu byly testovány samice podávání DHT krysami s mutací testikulární feminizace (Tfm). Tfm je substituce s jednou bází, která vede k defektním AR s omezenou vazbou ligandu (Yarbrough a kol., 1990). Samci krys Tfm vykazují vnější ženský fenotyp v důsledku nedostatečné androgenní stimulace během vývoje (Zuloaga a kol., 2008b). Pokud jsou pro zesilování AAS vyžadovány funkční nukleární AR, nesmí Tfm krysy sama podávat DHT. Namísto toho krysy Tfm získaly DHT samosprávu. Ve druhém experimentu jsme testovali ICV samoadministraci membránově nepropustných forem DHT u křečků. Pokud je DHT konjugován s bovinním sérovým albuminem (BSA), jeho účinky jsou omezeny na receptory na povrchu buněk. Pokud jsou nukleární AR vyžadovány pro zpevnění androgeny, křečci by neměli samy podávat DHT konjugovaný s BSA. Naopak křečci vykazovali jasnou přednost pro DHT konjugovaný s BSA. Společně tyto studie ukazují, že jaderné AR nejsou nutné pro samo-podávání androgenu. Namísto toho může být vyztužení androgenem zprostředkováno membránovými AR.

Metody a materiály

Předměty

Krysy

Dospělí samci krys Tfm a divoký typ (WT) vrstevníci byli získáni z kolonie na Michiganské státní univerzitě. Jejich genotyp byl ověřen pomocí PCR, podobně jako dříve popsané metody (Fernandez a kol., 2003). Stručně řečeno, ušní klipy byly tráveny přes noc při 55 ° C v lyzačním pufru obsahujícím proteinázu K, poté byly inaktivovány při teplotě 95 ° 30 minut. AR byl amplifikován pomocí přímého primeru 5'-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 'a reverzního primeru 5'-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3', čímž byl získán produkt 135bp. Zesílené vzorky byly potom štěpeny restrikčním enzymem Sau96I (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) přes noc při teplotě 37 ° C a prováděny na agarosovém gelu 3%. Pouze WT AR je řezán tímto restrikčním enzymem, přičemž dvě pásma pod 100bp, zatímco Tfm AR zůstává nevyřízena. Tfm zvířata byla také ověřena fenotypem, přítomností bradavek, femininní genitální vzdáleností a břišních varlat. Tfm potkany byly dříve použity k prokázání negenomických androgenních účinků v hipokampu (MacLusky a kol., 2006). Na počátku pokusu byly krysy WT mezi 75 a 140 denní a krysy Tfm byly mezi 75 a 138 denním dnem.

Křečci

Dospělí samci sýrští křečci (130 - 150 g) byli získáni od společnosti Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Zvířata byla umístěna jednotlivě na cyklu s obráceným světlem (14L: 10D) s jídlem a vodou podle libosti. Všechny experimentální postupy byly schváleny institucionálními výbory pro péči o zvířata a užívání příslušných institucí a prováděny v souladu s Průvodce pro péči a používání laboratorních zvířat (NationalResearchCouncil, 1996).

Chirurgie

Všechna zvířata byla implantována do kanálku z nerezové oceli 22g (Plastic One, Roanoke, VA) do boční komory [potkan: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 -5.0Paxinos a Watson, 1998); křečka: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ~ -5.0 (Morin a Wood, 2001), mm z bregma], pod Na+ pentobarbitalová anestézie (potkan: 50 mg / kg, křeček: 100mg / kg), jak bylo popsáno výše (Wood a kol., 2004). Všechny operační postupy byly prováděny za aseptických podmínek podle Principy péče o laboratorní zvířata (NIH, 1985). Zvířata byla ponechána zotavit nejméně jeden týden po operaci před testováním.

Drogy

DHT, DHT-karboxymethyl-oxim (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT hemisukcinát (Hemis) a DHT-Hemis-BSA byly získány od Steraloids (Newport, RI). V DHT-CMO-BSA je DHT konjugován s BSA v poloze C3 s CMO jako linkerem. Podobně je DHT spojen s BSA v poloze C17 přes Hemis za vzniku DHT-Hemis-BSA. Jak DHT-CMO-BSA (Gatson a kol., 2006) a DHT-Hemis-BSA (Braun a Thomas, 2003) byly dříve použity k vyšetření možných účinků androgenů na plazmatickou membránu. DHT byl rozpuštěn ve vodném roztoku 13% β-cyklodextrinu (βCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) při 1 μg / μl. Jak bylo stanoveno z naší předchozí studie u křečků, tato dávka produkuje robustní operant, který reagoval při samostatné administraci ICV (DiMeo a Wood, 2006b). Deriváty DHT byly rozpuštěny ve stejném vehikulu v molární ekvivalentní koncentraci DHT (DHT-CMO: 1.25 ug / ul, DHT-CMO-BSA: 8.7 ug / ul, DHT-Hemis: 1.34 ug / : 8.83μg / μl). BSA (Sigma-Aldrich) byl rozpuštěn ve stejném vehikulu při 7.45 μg / μl, aby se dosáhlo molární ekvivalentní koncentrace BSA jako v DHT-CMO-BSA a DHT-Hemis-BSA. Léčiva obsahující BSA byly připraveny denně bezprostředně před použitím, aby se zabránilo degradaci a všechny roztoky byly filtrovány přes filtr 0.22 μm. Předchozí studie ukázaly, že jen malá část steroidu se oddělí od BSA (Stevis a kol., 1999) a toto množství není dostatečné k vyvolání významných androgenních účinků (Lieberherr a Grosse, 1994, Gatson a kol., 2006). Podobně naše předchozí studie prokázala, že DHT je podáván samostatně v dávce 1.0 μg / μl, ale ne 0.1 μg / μl (DiMeo a Wood, 2006b). Proto je nepravděpodobné, že by se volná DHT (> 10%) disociovala z BSA v dostatečném množství na podporu vlastního podávání.

Zařízení

Zvířatům bylo umožněno samo-podávat roztok léku nebo vehikula 4 hrs / den, 5 dnů / týden v operantní komoře (Med Associates, St. Albans, VT) uzavřené v komoře pro oslabení zvuku s nucenou ventilací. Každá komora byla vybavena dvířky pro osvětlení domů, 2, a počítačem řízené injekční stříkačové čerpadlo připojené k otočnému tělesu na rovnovážném rameni. Roztoky ze skleněné injekční stříkačky 100 μl byly do zvířete přiváděny pomocí tubusu Tygon připojeného k otočnému čepu. Trubice, která spojuje otočnou a ICV kanylu, byla chráněna kovovou pružinou. Léčivý roztok nebo vehikulum bylo dodáno prostřednictvím vnitřní kanyly 28-ga vložené do vodící kanyly bezprostředně před testováním. Každá infuze dodala 1 μl roztoku při 0.2 μl / s. Otvory s nosem byly umístěny 6 cm od podlahy pod osvětlením domu. Jeden z otvoru pro nose-hole byl označen jako aktivní dutinový otvor. Odpověď na tomto otvoru byla zaznamenána jako aktivní nosová hmota (R: aktivovaná) a spočítána na požadavek odezvy (FR1 na 5) pro spuštění infuze. Jakmile byla infuze spuštěna, světlo domu zhaslo a aktivní otvor se rozsvítil během infúze 5u, aby se napomohlo rozlišování aktivního otvoru pro nos. Během této časové prodlevy 5 byla zaznamenána špička v aktivním otvoru, ale nepočítala se k dalšímu posílení (NR: aktivní - nezpevněná). Odpověď na jiném otvoru v nosu byla zaznamenána jako neaktivní nosová hmota (I), ale nevedla k žádné infuzi. Umístění aktivního otvoru pro přední nebo zadní část komory bylo vyváženo tak, aby bylo možné nastavit boční předvolby. Data byla zaznamenána softwarem WMPC (Med Associate) na PC se systémem Windows.

ICV samospráva

Krysy

Samostatné podávání DHT u potkanů ​​Tfm a WT sledovalo vzestupný časový rozvrh (FR) od FR1 po FR5. Potkani byli původně trénováni na FR1, kde byla zesílena každá odpověď na aktivní nos. Poté byl počet odpovědí potřebných k získání infuze zvýšen jednou za každý den 5. U přípravku FR5 bylo pro infuzi požadováno pět odpovědí na aktivní nosní dírku. Celkově byly krysy testovány na FR1 pro 10 dny a FR2 na FR5 (5 dny každý), celkem za 30 dny. Krysy z každého genotypu byly náhodně přiděleny do skupiny buď DHT nebo vehikulum (Veh) a umožněny samy podávat DHT nebo vehikulum βCD. Třicet šest potkanů ​​(nWT = 19, nTfm = 17).

Křečci

Křečci byli testováni podle rozvrhu FR1 pro 15 dny. V předchozích studiích je 15 dny samo-administrace ICV T dostačující k získání preferencí pro aktivní nose-poke. Křečci byli náhodně přiřazeni k DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11) ) nebo skupiny BSA (n = 8).

Analýza dat

Krysy

Denní preferenční skóre pro aktivní nosní dírku byly stanoveny odečtením neaktivních nose-pokesů od součtu aktivně zesílených a aktivních nevyztužených nose-pokes (R + NR-I). Průměrné preferenční skóre bylo vypočteno pro každé zvíře od posledních 5 dnů FR1 a během FR2 až po FR5. Navíc byl porovnán průměrný počet posílení na relaci pro každé zvíře u každého FR.

Data byla analyzována metodou ANOVA 3 s genotypem (WT nebo Tfm), lékem (DHT nebo vehikulem) a programem FR (1-5) jako faktory mezi subjekty. Program FR byl považován za faktor mezi jednotlivými faktory, protože některé zvířata nedokončily celý testovací den 30 kvůli zanesení vodící kanyly ICV. V těchto případech byly do analýz zahrnuty pouze údaje z dokončených plánů. Počet zvířat zahrnutých v každém stavu je uveden v Tabulka 1. Trojcestná ANOVA byla sledována příslušnými ANOVA s nižší úrovní pro jednoduché efekty. Test Newman-Keuls pro post-hoc párové srovnání byl použit v případě potřeby.

Tabulka 1

Tabulka 1

Tělesná hmotnost (průměr ± SEM vg) a počet použitých krys (n) na začátku každého FR a konec FR5u. * Výrazně odlišný od FR1 (p <0.05). # Výrazně se liší od WT (p <0.05).

Křečci

Jednotlivé prostředky R, NR a I byly použity pro analýzu dat. Preferenční skóre pro každé zvíře bylo stanoveno odečtením průměrné neaktivní nosní dírky (I) od průměrné aktivní nosní dírky (R + NR-I). Průměrné preferenční skóre bylo analyzováno pomocí jednoho vzorku t-test proti 0 (tj. žádná předvolba) pro každou skupinu. Navíc byl počet získaných posílení zprůměrován pro každé zvíře. Průměrná výztuž získaná pro každou skupinu léčiv byla porovnána s kontrolou BSA s nezávislými vzorky 2 t-test. Zvíře, které nedokončily minimální relace 5, byly vyloučeny z analýzy (1 z každé skupiny DHT-Hemis a DHT-Hemis-BSA).

Všechny statistické analýzy byly provedeny pomocí SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). Pro všechny analýzy, p <0.05 bylo považováno za statisticky významné. Data jsou uvedena jako průměr ± SEM na 4h relaci.

výsledky

Krysy WT a Tfm samy spravují DHT

Operátor reaguje

Obr. 1 ilustruje průměrnou preferenci aktivního bodnutí nosem (R + RN - I) v každé FR pro skupiny DHT a Veh. Krysy, které samy podávají DHT, vykazovaly větší preferenci aktivního nosu (73.1 ± 7.6 resp. 4 h) ve srovnání s kontrolami vehikula (29.8 ± 3.5 resp. 4 h; F1,145 = 31.77, p <0.001). Došlo také k hlavnímu účinku plánu FR (F4,145 = 4.25, p Interakce genotyp-lék (F. <0.01)1,145 = 5.27, p = 0.02) a interakce s lékem-FR plánem (F4,145 = 2.60, p = 0.02). Nebyl zjištěn žádný hlavní efekt genotypu a jiné interakce nebyly významné.

Obrázek 1

Obrázek 1

Střední přednost (aktivní - neaktivní nose-pokes) pro krysy, které samy podávají DHT (horní část) a vozidlo (dole). Prostředky ± SEM pro každý FR jsou zobrazeny společně s celkovým průměrem ± SEM (vpravo). * Výrazně odlišný od FR1 (p < (více …)

Post-hoc testy ukázaly, že krysy, které samy podávají DHT, vykazovaly významně větší přednost před plánem FR (F4,73 = 4.18, p <0.01), což zvyšuje preference z FR1 (33.4 ± 4.4 resp / 4 h) na FR4 (110.8 ± 26.7 resp / 4 h) a FR5 (106.4 ± 18.9 resp / 4 h). V této skupině nebyl pozorován žádný účinek genotypu (schéma genotypu-FR: F4,73 = 0.13, ns; genotyp: F1,73 = 0.86, ns).

Naproti tomu krysy, které samy podávají Veh, nevykazovaly žádnou změnu přednost před plánem FR (F4,72 = 0.31, ns) a žádný genotyp-FR plán interakci (F4,72 = 0.12, ns). Na rozdíl od DHT, potkani Tfm vykazovali větší preference než WT v této skupině (42.3 ± 5.3 a 19.1 ± 4.0 resps / 4h, respektive F4,72 = 11.81, p <0.01).

Infuze

Průměrný počet infuzí DHT a Veh obdržených u každého FR je zobrazen v Obr. 2. Celkově potkani dostali více infuzí, když jim bylo umožněno samo-podávat DHT (26.9 ± 2.2 μg / 4h) vs. vehikulum (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Došlo také k hlavnímu účinku plánu FR (F1,145 = 3.32, p = 0.01) a genotypová interakce (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Všechna ostatní interakce a hlavní účinky nebyly významné.

Obrázek 2

Obrázek 2

Střední infuze byly podávány krysám, které samy podávaly DHT (horní část) a vozidlo (dno). Prostředky ± SEM pro každý FR jsou zobrazeny společně s celkovým průměrem ± SEM (vpravo). * Výrazně se liší od DHT FR1 (p <0.05). # Významně (více …)

Průměrný denní příjem DHT ve všech schématech FR byl podobný u potkanů ​​Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) a WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h). V obou skupinách zůstal příjem léků konstantní vzhledem k tomu, že FR se zvýšil (F4,73 = 0.54, ns). Během léčby přípravkem FR1, Tfm a WT samci podávali DHT u 24.5 ± 2.3 μg / 4h a 37.3 ± 6.7 μg / 4h. Podle časového rozvrhu FR5 samoadministrace DHT zprostředkovala 18.3 ± 4.5 μg / 4h pro Tfm a 23.9 ± 5.9 μg / 4h u potkanů ​​WT. Tato skupina nevykazovala žádné rozdíly založené na rozvržení genotypu nebo genotypu (FR1,73 = 1.17, ns; F4,73 = 0.34, ns, respektive).

Naproti tomu u obou potkanů ​​Tfm a WT počet infuzí vozidel výrazně poklesl s tím, jak se požadavek FR zvýšil (F4,72 = 4.73, p <0.01). Poněkud překvapivě si krysy Tfm samy podaly přibližně dvakrát tolik vehikula (20.7 ± 2.4 μl / 4 h) než krysy WT (10.7 ± 1.4 μl / 4 h, F1,72 = 7.77, p <0.01). U potkanů ​​Tfm při FR1 počet infúzí vehikula (39.9 ± 13.2 μl / 4 h) překročil počet infúzí DHT (24.5 ± 2.3 μl / 4 h). Na konci experimentu však samopodání vehikula pokleslo na 10.3 ± 2.4 μl / 4 h. Podobně si krysy WT samy podávaly 18.6 ± 4.1 μl / 4 h vehikula při FR1, které poklesly na 6.6 ± 1.8 μl / 4 h ve FR5.

Průměrná tělesná hmotnost na začátku každého rozvrhu FR a počet zvířat v každém stavu je uveden v tabulce Tabulka 1. Krysy WT byly významně těžší než krysy Tfm (F1,174 = 144.62, p <0.001) a všechny skupiny v průběhu času přibraly na váze (F.5,174 = 5.59, p <0.001). Nebyl žádný účinek stavu léčiva (DHT vs Veh) na tělesnou hmotnost (F1, 174 = 0.31, ns) nebo jakákoli interakce. Příjem DHT upravený podle tělesné hmotnosti byl podobný u obou genotypů jak u FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg), tak u FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg).

Syrští křečci samy podávají DHT konjugovaný s BSA

Operátor reaguje

Škrtící samci podávaní DHT a DHT konjugovaných s BSA, ale nikoli pouze s BSA. Obr. 3a ukazuje průměrnou preferenci (aktivní - neaktivní čichání v nose) pro DHT, BSA, DHT-CMO-BSA a DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. V souladu s našimi předchozími studiemi vyvinuli křečci preferenci aktivního bodnutí nosem během vlastního podávání DHT (t7 = 4.34, p <0.01), ale nevykazovaly žádné preference při samopodávání BSA (t8 = 1.03, ns). Podobně křečci prokázali, že upřednostňují aktivitu nosu s oběma DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) a DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Pokud je DHT připojen k linkerům samotným, křečci samy podávaní DHT-CMO (t8 = 3.91, p <0.01), ale nevykazovaly významnou preferenci při samopodání DHT-Hemis (t10 = 1.87, p = 0.09). U DHT-Hemis byly odpovědi na aktivní nos (40.5 ± 10.3 resp / 4h) podobné jako u DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), ale tyto samce také vykazovaly zvýšené reakce na neaktivní nos (28.7 ± 6.6 resp / 4h) ve srovnání s hodnotami pro DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).

Obrázek 3

Obrázek 3

3a: střední preference (aktivní - neaktivní nose-pokes) u křečků, kteří samy podávají BSA (n = 9), DHT (n = 8), DHT-CMO-BSA DHB, n = 10), DHT-CMO (DC, n = 8) a DHT hemis (DH, n = 8). * Výrazně se liší od (více …)

Infuze

Počet infuzí přijatých pro každou skupinu je zobrazen v Obr. 3b. Křečci dostávali významně více DHT než infuze BSA (t15 = 3.04, p = 0.01). Podobně, křečci dostali více infuzí, když jim bylo umožněno samo-podávat DHT-Hemis-BSA (t15 = 2.72, p = 0.02) nebo DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) ve srovnání s BSA. Počet infuzí získaných pro skupiny DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) a DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) byly podobné těm, které samy podávají DHT, DHT-Hemis-BSA a DHT- SOT. Nicméně, křečci nedostali významně více DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) nebo DHT-Hemis (t18 = 1.91, p = 0.07) ve srovnání s BSA.

Předávkovat

Jedenáct křečků 55 zemřelo před dokončením všech testů 15. Úmrtí způsobené předávkováním androgenem během samo-podávání testosteronu byly dříve popsány (Peters a dřevo, 2005). V této studii 2 u mužů s 8 (25%) zemřelo během samo-podávání DHT, podobně jako u 24% hlášeného pro předávkování testosteronem (Peters a dřevo, 2005). Samostatné podávání DHT-CMO a DHT-Hemis bylo spojeno s nejvyššími ztrátami (každý 3 8 v každé skupině, 38%), zatímco u křečků samců podaných BSA (1 9, 11%) nebo DHT -Hemis-BSA (0 z 8). Stejně jako u předávkování testosteronem, žádný z křečků v současné studii neudělal při samo-podávání. Místo toho křečci zemřeli o několik hodin později ve svých klecích, s těžkou lokomotorickou a respirační depresí.

Předávkování testosteronem úzce souvisí s příjmem testosteronu, zejména s maximálním příjmem na jednu relaci (Peters a dřevo, 2005). Obr. 4 porovnává počet preferencí, počet přijatých posílení a špičkový příjem u křečků, kteří dokončili všechny testovací relace 15, a těch, kteří ne. Obě skupiny vykazovaly významnou preferenci pro aktivitu nosu (p <0.05). Preference však byla významně větší u křečků, kteří uhynuli při samopodání (25.7 ± 5.2 resp / 4 h) ve srovnání s těmi, kteří přežili (9.5 ± 2.0 resp / 4 h, t53 = 3.42, p <0.01). Křečci, kteří nedokázali absolvovat 15 sezení, dostali více než dvakrát tolik infuzí na sezení (31.2 ± 5.0 inf / 4 h) než ti, kteří absolvovali všechna sezení (14.8 ± 1.1 inf / 4 h, t53 = 5.05, p <0.001). Navíc u křečků, kteří během studie uhynuli, byl maximální příjem na sezení významně vyšší (77.0 ± 9.8 inf / 4 h) než u mužů, kteří přežili (36.1 ± 2.9 inf / 4 h, t53 = 5.41, p <0.001).

Obrázek 4

Obrázek 4

Průměrné skóre preferencí (vlevo), přijaté infuze (uprostřed) a maximální příjem na sezení (vpravo) u křečků, kteří absolvovali všech 15 sezení (C15, n = 44) a těch, kteří neudělali (<15, n = 11). Skupinové průměry ± SEM jsou zobrazeny jako nitkový kříž. (více …)

Diskuse

Androgenní samo-podávání může být zprostředkováno membránou asociovanými, ale ne nukleárními androgenními receptory

Současná studie ukazuje, že klasické jaderné AR nejsou pro androgenní samo-administraci nezbytné. Jak potkaní Tfm, tak i WT vyvinuli přednost při aktivním podávání DHT. Navíc byli schopni reagovat na vzestupnou schématu FR zvýšením aktivních nose-pokes, čímž se udržuje stabilní úroveň příjmu léku bez ohledu na plán FR. Naproti tomu krysy, které přijímají vozidlo, nedokázaly reagovat na změny v plánu FR. Jejich aktivní nose-pokes se významně nezvyšovaly v reakci na změny v rozvrhu FR a dostávalo méně infuze, protože požadavek na odpověď se zvýšil. Vzhledem k tomu, že ligand vázající se na "klasický" nukleární androgen receptor je ohrožen v Tfm mutantech, podporuje to naše hypotéza, že posilování androgenu je zprostředkováno prostřednictvím alternativních cest.

Neočekávaně vysoká odezva pro vozidlo u potkanů ​​Tfm pravděpodobně není způsobena samotným vozidlem. Pozorovali jsme podobné jevy v oddělené skupině potkanů ​​Tfm, kteří nedostávali žádné infuze (údaje nejsou uvedeny). Namísto toho může být spojeno s feminizovanými behaviorálními znaky u mužů Tfm. Zvýšené nose-pokes potkanů ​​Tfm může být analogické k vyšším poklesům průzkumné hlavy pozorované u samic potkanů ​​(Brown a Nemes, 2008). Alternativně jsou známy krysy a myši Tfm, které vykazují zvýšené chování podobné úzkosti (Zuloaga a kol., 2006, Zuloaga a kol., 2008a). Možná sedativní / anxiolytické účinky DHT (Agren a kol., 1999, Arnedo a kol., 2000, Frye a Seliga, 2001, Berbos a kol., 2002, Peters a dřevo, 2005) otupěl chování podobné úzkosti, když Tfm potkanům podával DHT.

Kromě toho samo-podávání konjugátů DHT-BSA u samců křečků poskytuje důkaz, že androgeny mohou působit na neuronální plazmatickou membránu, aby měly posilující účinek. Křečci vykazovali významnou výhodu pro oba konjugáty DHT-BSA. Samostatně podávané dávky jsou v souladu s našimi předchozími studiemi o T, DHT a běžně užívaných steroidech (Ballard a dřevo, 2005, DiMeo a Wood, 2006b). Naproti tomu křečci neprokázali žádnou výhodu pouze pro BSA. Údaje o mortalitě a příjmu drogy dokazují, že DHT a jeho deriváty mohou být smrtelné, rozšiřující naše předchozí údaje o předávkování T (Peters a dřevo, 2005).

Současná studie odhaluje typ specifického druhu operandu, který reaguje. Křečci neupřednostňovali aktivní nos, zatímco samoadministující vozidlo, jak bylo dříve prokázáno (Johnson a Wood, 2001, Dřevo, 2002, DiMeo a Wood, 2004, Triemstra a dřevo, 2004, Wood a kol., 2004, Ballard a dřevo, 2005, DiMeo a Wood, 2006b). U potkanů ​​se však jasně upřednostňovala aktivní nose-poke bez ohledu na přijatý lék. Pozorovali jsme podobný trend v naší předchozí studii o IV samo-podávání T u potkanů, ačkoli to nebylo statisticky významné (Wood a kol., 2004). Na základě takového druhu specifického behaviorálního rozdílu v samoadministraci je nutno věnovat pozornost při porovnávání údajů o chování u potkanů ​​a křečků.

Existuje několik upozornění, které je třeba vzít v úvahu při interpretaci současné studie. Za prvé, jaderné AR se značně narušenou vazbou ligandu jsou stále přítomny u potkanů ​​Tfm (Yarbrough a kol., 1990), na rozdíl od myší Tfm (He et al., 1991). Je možné, že tyto mutované jaderné AR jsou dostatečné pro zprostředkování účinků androgenů v nadfyziologických dávkách. Za druhé, konjugáty DHT-BSA mohou degradovat in vivo, což vede k volnému DHT. Přestože se to nezdá být významným problémem in vitro (Lieberherr a Grosse, 1994, Gatson a kol., 2006), stupeň a časový průběh degradace DHT-BSA in vivo v mozku je v současnosti neznámý. Konečně, konjugáty DHT-BSA nemusejí výrazně proniknout do mozkové tkáně. DHT-BSA je významně větší než DHT, takže účinky DHT-BSA pozorované v současné studii pravděpodobně budou zprostředkovány v místech blízkých komorám.

Navzdory těmto dvěma odlišným přístupům byly dosaženy konzistentní výsledky, které silně odsuzují nutnost jaderného AR při posilování androgenu. Navíc samo-podávání konjugátů BSA naznačuje, že androgeny mohou působit na plazmatickou membránu při podpoře androgenu. Podle našich znalostí poskytuje současná studie první in vivo důkazy pro behaviorálně významné účinky androgenů na plazmatické membráně.

Androgeny vykazují rychlé jaderné efekty nezávislé na AR za odměnu

Několik dalších studií o androgenní odměně ukázalo výsledky konzistentní s negenomickými nebo plazmatickými membránovými účinky. CPP se rozvíjí v rámci 30 min systému systémové injekce T (Alexander a kol., 1994), časový průběh konzistentní s akutními negenomickými účinky T. CPP může být také indukován intra-Acb infuzemi T nebo jeho metabolitu (Packard a kol., 1997, Frye a kol., 2002), i když Acb má málo genomických AR. Navíc VTA exprimuje Fos jako odpověď na infuzi ICV T (Dimeo a dřevo, 2006a), a to i přesto, že zde neexistuje významný klasický výraz AR. Současná studie neposkytuje informace o místě působení v mozku. Nicméně naznačuje, že relativní nedostatek samotného jaderného AR není dostatečným důvodem k vyloučení struktur, jako je Acb a VTA, z potenciálních míst, která mohou zprostředkovat androgenní účinky.

Rychlé plazmatické membránové účinky steroidů v dorzálním a ventrálním striatu nejsou omezeny na androgeny. Je známo, že progestiny indukují CPP, případně prostřednictvím receptorů kyseliny gama-aminomáselné (GABA) v Acb (Frye, 2007). Estrogeny také vykazují rychlý efekt zprostředkovaný membránovým receptorem v dorzálním striatu (Mermelstein a kol., 1996, Becker a Rudick, 1999). Receptor spojený s membránou byl již izolován pro progestiny (Zhu a kol., 2003) a důkazy se hromadí pro receptory buněčného povrchu pro estrogeny (viz Vasudevan a Pfaff, 2007) a androgeny (přezkoumané v Thomas a kol., 2006). Zatímco estrogeny také posilují (DiMeo a Wood, 2006b), zesilující účinky T se zdají být převážně androgenní. Křečci samy podávají aromatizovatelné androgeny, jako drostanolon a DHT (Ballard a dřevo, 2005, DiMeo a Wood, 2006b). Navíc anti-androgenní flutamid může blokovat T samo-podávání (Peters a dřevo, 2004). Zatímco se zdá, že to může být v rozporu s úlohou AR membrány uvedenou v této studii, bylo zaznamenáno, že flutamid blokuje také aktivaci AR membrány (Braun a Thomas, 2003, Braun a Thomas, 2004).

Vlastnosti membránových androgenních receptorů

Historicky byly účinky steroidů, včetně androgenů, považovány za transduced procesy zprostředkované jadernými receptory. Avšak zprávy o rychlých androgenových účincích, pravděpodobně zprostředkované receptory asociovanými s membránou, jsou dostupné již několik desetiletí. Například v mediální preoptické oblasti mohou androgeny v průběhu několika sekund změnit neuronovou palbu (Yamada, 1979) na minuty (Pfaff a Pfaffmann, 1969). Orsini a kolegové (Orsini, 1985, Orsini a kol., 1985) prokázaly rychlou modifikaci frekvence neuronálního spalování androgeny v laterálním hypotalamu (LHA). Tento účinek androgenů v LHA může mít zvláštní význam pro tuto studii, neboť je známo, že LHA je zapojen do obvodů odměňování (Olds a Milner, 1954) a LHA orexin / hypocretin je regulován gonadálními steroidy (Muschamp a kol., 2007).

Typy buněk s možnými membránovými AR zahrnují gliální (Gatson a kol., 2006), gonadální (Braun a Thomas, 2003, Braun a Thomas, 2004) a imunitní buňky (Benten a kol., 1999, Guo a kol., 2002), myocyty (Estrada a kol., 2003) a osteoblasty (Lieberherr a Grosse, 1994). I když molekulární identita ještě nebyla stanovena, kandidáti na membránu AR zahrnují membránové receptory se známými vazebnými místy steroidů, jako je GABA-A Lambert a kol., 2003) a NR2 podjednotek receptorů N-methyl-D-asparagové kyseliny (Malayev a kol., 2002). Alternativně Thomas a kolegové (2004) sdělila důkaz nových receptů spojených s G-proteinem jako membrány AR. Kromě toho nelze v současné studii vyloučit účinky androgenů nesouvisejících se specifickým receptorem.

Nejnovější in vitro studie naznačují, že existuje více membránových AR nebo více vazebných míst na jediném receptoru, jak bylo navrženo pro membránový progesteronový receptor (Ramirez a kol., 1996). U mnoha buněčných typů se zdá, že membrána AR je membránový receptor spojený s Gq / o (Lieberherr a Grosse, 1994, Benten a kol., 1999, Zhu a kol., 1999, Guo a kol., 2002, Estrada a kol., 2003). Avšak vazebné charakteristiky steroidů a citlivost na předpokládanou membránou AR se výrazně liší v závislosti na typu buňky. Například anti-androgeny mohou blokovat účinky DHT na buňky vaječníků croaker (Braun a Thomas, 2003, Braun a Thomas, 2004), zatímco oni nejsou účinní v jiných typech buněk (Lieberherr a Grosse, 1994, Benten a kol., 2004, Gatson a kol., 2006) nebo dokonce mohou vykazovat účinky podobné agonistům v hipokampálních buňkách (Pike, 2001, Nguyen a kol., 2007) a několik rakovinných buněčných linií (Peterziel a kol., 1999, Zhu a kol., 1999, Evangelou a kol., 2000, Papakonstanti a kol., 2003). Dále byly pro různé orgány v rybách zaznamenány různé vazebné vlastnosti T (Braun a Thomas, 2004).

Naše zkušenosti s běžně užívaným AAS naznačují, že hlavní modifikace v kruhu A (u C2 a / nebo C3) a u C17 mají tendenci zasahovat do sebe-podávání (Ballard a dřevo, 2005). Například, stanozolol, který má hlavní modifikaci u C2u a C3u, stejně jako methylskupiny připojené k přípravku C17, není podáván sám. V současné studii se křečci samy podávali jak BSA konjugované na C3 (DHT-CMO-BSA), tak C17 (DHT-Hemis-BSA). Další výzkum je nutný k objasnění vlastností androgenů, které se podávají samy.

Klinický význam

AAS, zejména T, jsou zdaleka nejběžnějšími činiteli zvyšujícími výkonnost používanými sportovci, což představuje téměř polovinu pozitivních dopingových testů (Světová antidopingová agentura, 2006). Vzhledem k tak širokému použití má zneužívání AAS rozsáhlé zdravotní důsledky. Srdeční a jaterní nežádoucí účinky abusu AAS jsou dobře zavedené (Leshner, 2000). Tyto a anabolické účinky AAS jsou považovány za zprostředkované prostřednictvím jaderného AR. Avšak možné jaderné efekty androgenů nezávislých na AR naznačují, že vliv AAS může přesahovat struktury s expresí AR.

Co se týče podobnosti s jinými léky zneužívání, AAS produkují různé účinky a mají různé mechanismy působení stimulantů. Na rozdíl od stimulantů (Graybiel a kol., 1990), AAS indukuje aktivaci c-Fos pouze ve VTA a ne v Acb (Dimeo a dřevo, 2006a). Navíc AAS zeslabuje stimulačně indukované uvolňování Acb DA (Birgner a kol., 2006) a akutně inhibují uvolňování DA (Triemstra a kol., 2008). Behaviorálně, AAS neindukují lokomotorickou aktivaci charakteristiku stimulantů (Peters a dřevo, 2005).

Namísto toho se reakce na chování na akutní AAS podobají reakcím opiátů nebo benzodiazepinů, které mohou mít přídavné účinky společně. Akutní expozice AAS snižuje autonomní funkce, včetně dýchání a tělesné teploty (Peters a dřevo, 2005). AAS-indukovaná autonomní deprese připomíná příznaky předávkování opioidy a je blokována opioidním antagonistou naltrexonem (Peters a dřevo, 2005). Navíc nandrolon, běžně užívaný AAS, potencuje hypotermální účinky morfinu a zhoršuje abstinenční příznaky precipitované naloxonem (Celerier a kol., 2003). Navíc je dobře známo, že akutní AAS jsou sedativní / anxiolytické (Agren a kol., 1999, Arnedo a kol., 2000, Frye a Seliga, 2001, Berbos a kol., 2002, Peters a dřevo, 2005), které mohou být zprostředkovány přímými účinky na receptory GABA-A (Masonis a McCarthy, 1995, Masonis a McCarthy, 1996). Zvýšená spotřeba ethanolu u potkanů ​​chronicky léčených AAS může být také odrazem změněné funkce GABAergie (Johansson a kol., 2000).

Naše závěry o předávkování vyvolávají další obavy z hlediska zdraví. V současné době je zařazení AAS jako kontrolních látek založeno na jejich anabolických vlastnostech (Zákon o regulovaných látkách, 1991). Současná studie však ukazuje, že anabolická účinnost AAS nemusí nutně odpovídat jejich posilujícím vlastnostem a rizikům předávkování. Kromě DHT-BSA konjugátů DHT-CMO, použitých v této studii, není kontrolovanou látkou, ačkoli její zesilující vlastnosti a mortalita z předávkování se zdá být docela podobná DHT a T (Peters a dřevo, 2005). Vzorek předávkování se podobá té, která byla předtím hlášena u T (Peters a dřevo, 2005), kde vysoký příjem vedl k úmrtnosti 24 na 48 hod. později. Ve světle těchto zjištění mohou kritéria použitá pro plánování steroidu jako regulované látky vyžadovat revize, aby se zohlednila jeho odpovědnost za škodu a toxicitu, kromě jeho anabolické účinnosti.

Výsledky současné studie naznačují, že jaderný AR, jediný dosud izolovaný AR, není pro posilování androgenu nezbytný. Namísto toho výsledky naznačují, že na plazmatickou membránu dochází k transdukci výztuže androgenu. Proto je zapotřebí dalšího dotazování na totožnost předpokládané membránové AR, jejich funkční charakteristiky a anatomické rozložení, aby bylo objasněno základní mechanismus abusu AAS a jeho klinické důsledky.

Poznámky pod čarou

Zřeknutí se odpovědnosti vydavatele: Jedná se o soubor PDF s neupraveným rukopisem, který byl přijat k publikaci. Jako službu pro naše zákazníky poskytujeme tuto ranní verzi rukopisu. Rukopis podstoupí kopírování, sázení a přezkoumání výsledného důkazu před jeho zveřejněním ve své konečné podobě. Vezměte prosím na vědomí, že během výrobního procesu mohou být objeveny chyby, které by mohly ovlivnit obsah, a veškeré právní odmítnutí týkající se časopisu.

Reference

  • Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Behaviorální anxiolytické účinky nízké dávky anabolického androgenního steroidního ošetření u potkanů. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
  • Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosteron odměňuje afektivní vlastnosti u samců potkanů: důsledky pro biologický základ sexuální motivace. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
  • Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. Odměňování vlastností testosteronu u intaktních samců myší: pilotní studie. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
  • Ballard CL, Wood RI. Intracerebroventrikulární samoadministrace běžně užívaných anabolických a androgenních steroidů u samčích křečků (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolon, oxymetholon a stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
  • Becker JB, Rudick CN. Rychlé účinky estrogenu nebo progesteronu na amfetaminem indukované zvýšení striatálního dopaminu jsou zesíleny podáním estrogenu: studie mikrodialýzy. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
  • Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Rychlé účinky androgenů v makrofágách. Steroidy. 2004;69: 585-590. [PubMed]
  • Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Testosteron signalizuje prostřednictvím internalizovatelných povrchových receptorů u makrofágů bez androgen receptoru. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Akutní behaviorální účinky anabolických steroidů: úzkost, stereotypní a lokomotorická aktivita. Horm Behav. 2002;41: 457.
  • Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Změna extracelulárních hladin DOPAC a HVA v jádře krys jádra accumbens v reakci na subchronické podávání nandrolonu a následnou provokaci amfetaminem. Neurosci Lett 2006
  • Braun AM, Thomas P. Androgens inhibují syntézu estradiol-17beta v ovariích chřipky atlantického (Micropogonias undulatus) pomocí nongenomického mechanismu, který byl zahájen na buněčném povrchu. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
  • Braun AM, Thomas P. Biochemická charakterizace membránového androgenního receptoru ve vaječníku Atlantic croaker (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
  • Brower KJ. Anabolické steroidní abusy a závislost. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
  • Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Symptomy a korelace anabolicko-androgenní steroidní závislosti. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
  • Brown GR, Nemes C. Průzkumné chování potkanů ​​v děrovém přístroji: je poničení hlavy platnou mírou neofilie? Behav procesy. 2008;78: 442-448. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Celerier E, Yazdi MT, Castan A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Účinky nandrolonu na akutní morfinové odpovědi, toleranci a závislost u myší. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
  • Choi PY, Pope HG., Jr Násilí vůči ženám a nedovolené užívání androgen-anabolických steroidů. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
  • Hlava 21, kapitola 13 - Prevence a kontrola zneužívání drog Zákon o regulovaných látkách. 1991
  • DiMeo AN, Wood RI. Cirkulující androgeny zvyšují citlivost na samo-podávání testosteronu u samců křečků. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
  • Dimeo AN, Wood RI. ICV testosteron indukuje Fos v mozku mužského syrského křečka. Psychoneuroendokrinologie. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
  • DiMeo AN, Wood RI. Samostatné podávání estrogenu a dihydrotestosteronu u samců křečků. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
  • Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovič E. Testosteron stimuluje intracelulární uvolňování vápníku a mitogenem aktivované proteinové kinázy prostřednictvím receptoru sdruženého s G proteinem v buňkách kosterního svalstva. Endokrinologie. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
  • Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Lettera M. Down-regulace beta-receptorů transformačního růstového faktoru androgenem u buněk rakoviny vaječníků. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
  • Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Molekulární metoda pro klasifikaci genotypů získaných v plemenné kolonii z testikulárních feminizovaných (Tfm) potkanů. Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
  • Frye CA. Progestiny ovlivňují motivaci, odměnu, kondicionování, stres a / nebo reakci na zneužívání drog. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
  • Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Jádro accumbens jako místo působení pro odměňování vlastností testosteronu a jeho metabolitů redukujících 5alpha. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
  • Frye CA, Seliga AM. Testosteron zvyšuje analgetiku, anxiolýzu a kognitivní výkon samců potkanů. Kognitivní, afektivní a behaviorální neurovědy. 2001;1: 371-381.
  • Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihydrotestosteron diferenciálně moduluje mitogen-aktivovanou proteinkinázu a dráhy fosfoinositid 3-kinázy / Akt prostřednictvím jaderného a nového membránového androgenního receptoru v buňkách C6. Endokrinologie. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
  • Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamin a kokain indukují specifickou aktivaci c-fos genu v striosom-matricové komoře a limbické subdivize striatu. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomická signalizace vápníku testosteronu. Genotropní účinky u makrofágů bez androgenních receptorů. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
  • On WW, Kumar MV, Tindall DJ. Mutace posunutí rámce v androgenním receptorovém genu způsobuje úplnou androgenovou necitlivost u testikulárně feminizované myši. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anabolické androgenní steroidy ovlivňují příjem alkoholu, obranné chování a opioidní peptidy mozku u potkanů. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
  • Johnson LR, dřevo RI. Orální samo-podávání testosteronu u samců křečků. Neuroendokrinologie. 2001;73: 285-292. [PubMed]
  • Kouri EM, Lukas SE, papež HG, Jr, Oliva PS. Zvýšená agresivní odpověď u mužských dobrovolníků po podání postupně rostoucích dávek testosteron-cypionátu. Alkohol drog závisí. 1995;40: 73-79. [PubMed]
  • Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Neurosteroidní modulace receptorů GABAA. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
  • Leshner AI. (NIDA Research Report Series).Zneužívání anabolických steroidů. 2000: 1-8.
  • Lieberherr M, Grosse B. Androgens zvyšují intracelulární koncentraci vápníku a tvorbu inositolu 1,4,5-trisfosfátu a diacylglycerolu pomocí G-proteinu citlivého na pertusový toxin. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
  • MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordán CL, Leranth C. Androgenové účinky na hippokampální čísla CA1 páteře synapse jsou uchovávány u samců potkanů ​​Tfm s defektními androgenními receptory. Endokrinologie. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
  • Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Inhibice odpovědi NMDA pomocí pregnenolon-sulfátu odhaluje subtyp selektivní modulaci receptorů NMDA pomocí sulfátových steroidů. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Masonis AE, McCarthy MP. Přímé účinky anabolických / androgenních steroidů, stanozololu a 17 alfa-methyltestosteronu, na vazbu benzodiazepinu na. gama-aminomáselné kyseliny (a). Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
  • Masonis AE, McCarthy MP. Účinky androgenního / anabolického steroidu stanozololu na funkci GABAA receptoru: GABA-stimulovaný influx 36Cl a vazba [35S] TBPS. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
  • Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiol snižuje proud vápníku v neostriálních neuronech krys přes membránový receptor. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
  • Morin LP, Wood RI. Stereotaxický atlas mozku zlatého křečka. Academic Press; San Diego: 2001.
  • Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Role hypokretinu (orexinu) v mužském sexuálním chování. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
  • Rada NR, redaktor. NationalResearchCouncil. Průvodce pro péči a používání laboratorních zvířat. Národní rada pro výzkum; Washington, DC: 1996.
  • Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamid a cyproteronacetát mají agonistické účinky: indukci neuroprotekce závislé na receptoru androgenu. Endokrinologie. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
  • NIH. Princip péče o laboratorní zvířata. Národní zdravotní ústav; Bethesda, Maryland: 1985.
  • Olds J, Milner PM. Pozitivní výztuž vzniklá elektrickou stimulací septální oblasti a dalších oblastí mozku krys. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
  • Orsini JC. Přímé účinky androgenů na laterální hypothalamickou neuronovou aktivitu u samců potkanů: II. Studie vylučování tlaku. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
  • Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Přímé účinky androgenů na postranní hypothalamickou neuronovou aktivitu samců potkanů: I. Mikroiontoforetická studie. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
  • Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Odměňování afektivních vlastností intra-nucleus accumbens injekcí testosteronu. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
  • Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Exprese kondicionovaného místa testosteronu je blokována periferní nebo intraakumenní injekcí alfa-flupenthixolu. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
  • Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Rychlá, nongenomická, signální dráha reguluje aktinovou reorganizaci indukovanou aktivací membránových testosteronových receptorů. Mol Endocrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. Mozková krysa: v sterotaxických souřadnicích. 4th. Academic Press; New York: 1998.
  • Peters KD, dřevo RI. Anabolicko-androgenní steroidní závislost zahrnuje androgenní a opioidní receptory. Sborník z 34th výročního zasedání společnosti pro neurovědy; San Diego, CA. 2004.
  • Peters KD, dřevo RI. Androgenní závislost u křečků: předávkování, tolerance a potenciální opioidní mechanismy. Neurovědy. 2005;130: 971-981. [PubMed]
  • Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Rychlá signalizace androgenním receptorem v buňkách rakoviny prostaty. Onkogene. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
  • Pfaff DW, Pfaffmann C. Olfactory a hormonální vlivy na bazálním předním mozku samčích krys. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
  • Pike CJ. Testosteron zeslabuje beta-amyloidní toxicitu u kultivovaných hipokampálních neuronů. Výzkum mozku. 2001;919: 160-165. [PubMed]
  • Papež HG, Jr, Katz DL. Psychiatrické a lékařské účinky užívání anabolicko-androgenních steroidů. Kontrolovaná studie sportovců 160. Arch Gen Psychiatrie. 1994;51: 375-382. [PubMed]
  • Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membránové receptory pro estrogen, progesteron a testosteron v mozku krys: fantasy nebo realita. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
  • Jen RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Distribuce buněk obsahující androgen a estrogen mRNA v mozku krys: studie in situ hybridizace. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
  • Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Diferenciální účinky konjugátů estradiolu a estradiolu-BSA. Endokrinologie. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
  • Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, estrogenní a androgenní G-proteinové receptory v gonádách ryb. Steroidy. 2006;71: 310-316. [PubMed]
  • Triemstra JL, Sato SM, dřevo RI. Testosteron a nucleus accumbens dopamina u mužského syrského křečka. Psychoneuroendokrinologie. 2008;33: 386-394. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Triemstra JL, Wood RI. Samostudium testosteronu u samic křečků. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
  • Vasudevan N, Pfaff DW. Membránová aktivita estrogenů v neuroendokrinologii: objevující se principy. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
  • Dřevo RI. Orální samo-podávání testosteronu u samců křečků: odezva na dávku, dobrovolné cvičení a individuální rozdíly. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
  • Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Zesilování testosteronu: intravenózní a intracerebroventrikulární samoadministrace u potkanů ​​samců a křečků. Psychofarmakologie (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
  • Wood RI, Newman SW. Androgenní receptorová imunoreaktivita u mužského a ženského mozku syrského křečka. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
  • WorldAnti-DopingAgency. Nepříznivé analytické nálezy hlášené akreditovanými laboratořemi. Světová antidopingová agentura; Montreal, Kanada: 2006.
  • Yamada Y. Účinky testosteronu na jednotkovou aktivitu krysího hypotalamu a septum. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
  • Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, Francouzský FS, Wilson EM. Jednoduchá báze mutace v androgenním receptorovém genu způsobuje androgenní necitlivost v testikulární feminizované kryse. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
  • Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Anabolické a androgenní užívání steroidů ve Spojených státech. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
  • Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgen stimuluje mitogenem aktivovanou proteinkinázu v lidských rakovinových buňkách prsu. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
  • Zhu Y, Rice CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Klonování, exprese a charakterizace receptoru membránového progestinu a důkaz, že jde o prostředek při meiotickém zrání rybích oocytů. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Zuloaga DG, Morris JA, Jordánsko CL, Breedlove SM. Myši s mutací testikulární feminizace prokázaly úlohu androgenových receptorů při regulaci chování souvisejících s úzkostí a os hypotalamus-hypofýza-nadledvina. Horm Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
  • Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. Úloha androgenních receptorů v maskulinizaci mozku a chování: co jsme se naučili z mutace feminizace testikul. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Zuloaga DZ, Jordánsko CL, Breedlove SM. Potkani s mutací testikulární feminizace (TFM) vykazují zvýšené indexy úzkosti. Sborník z 36th výročního zasedání společnosti pro neurovědy; Atlanta, GA. 2006. Program # 152.118.