DeltaFosB i The Nucleus Accumbens er kritisk for at styrke virkningerne af seksuel belønning. (2010)

KOMMENTARER: Delta FosB er en markør for al afhængighed, både adfærdsmæssig og kemisk. Da dette molekyle stiger i belønningskredsløbet, gør vanedannende adfærd det også. Det er et af de molekyler, der er involveret i neuroplastiske ændringer. Dette eksperiment viser, at det øges med seksuel erfaring, på samme måde som det gør med stofmisbrug. I eksperimentet anvendte de genteknologi for at øge dens niveauer ud over "normal". Dette resulterede i forbedret lempelse af seksuel aktivitet. Vi tror, dette sker med pornoafhængighed.

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genes Brain Behav. 2010 okt; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Institut for Anatomi og Cellbiologi, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, Ontario, Canada.

ABSTRACT

Seksuel adfærd hos hanrotter er givende og forstærkende. Imidlertid er der lidt kendt om de specifikke cellulære og molekylære mekanismer, der formidler seksuel belønning eller de forstærkende virkninger af belønning ved efterfølgende udtryk for seksuel adfærd. Denne undersøgelse tester hypotesen om, at ΔFosB, den stabilt udtrykte trunkerede form af FosB, spiller en afgørende rolle i styrkelsen af seksuel adfærd og erfaringsinduceret lette seksuel motivation og ydeevne.

Seksuel erfaring viste sig at forårsage ΔFosB-akkumulering i flere limbiske hjerneområder, herunder nucleus accumbens (NAc), medial prefrontal cortex, ventral tegmental område og caudate putamen, men ikke den mediale preoptiske kerne.

Derefter blev induktionen af c-Fos, et nedstrøms (undertrykt) mål for ΔFosB, målt hos seksuelt erfarne og naive dyr. Antallet af parringsinducerede c-Fos-immunoreaktive celler blev signifikant reduceret hos seksuelt erfarne dyr sammenlignet med seksuelt naive kontroller.

Endelig blev ΔFosB niveauer og dets aktivitet i NAc manipuleret under anvendelse af viral-medieret genoverførsel for at studere sin potentielle rolle i formidling af seksuel oplevelse og erfaringsinduceret lette seksuel ydeevne. Dyr med ΔFosB overekspression viste forbedret tilrettelæggelse af seksuel præstation med seksuel oplevelse i forhold til kontroller. I modsætning hertil udtrykte udtrykket af ΔJunD, en dominerende negativ bindingspartner af ΔFosB, svækket seksuel oplevelsesinduceret lettelse af seksuel ydeevne og stunted langvarig vedligeholdelse af facilitation sammenlignet med grønne fluorescensprotein og ΔFosB-overudtrykkende grupper.

Sammen støtter disse fund en kritisk rolle for ΔFosB-udtryk i NAc for de forstærkende virkninger af seksuel adfærd og seksuel oplevelsesinduceret tilrettelæggelse af seksuel præstation.

INDLEDNING

Seksuel adfærd er meget givende og forstærkende for mandlige gnavere (Coolen et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Endvidere ændrer seksuel oplevelse efterfølgende seksuel adfærd og belønning (Tenk et al. 2009). Ved gentagen parring er seksualadfærd letter eller forstærket, hvilket fremgår af nedsatte latenser for at indlede parring og lette seksuel præstation (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Imidlertid er de underliggende cellulære og molekylære mekanismer for seksuel belønning og forstærkning dårligt forstået. Seksuel adfærd og betingede signaler, der forudsiger parring, har vist sig at give transient induktion af umiddelbar tidlig gen c-fos i mesolimbic-systemet af hanrotter (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Desuden blev det for nylig demonstreret, at seksuel oplevelse fremkalder langvarig neuroplasticitet i mesolimbic-systemet i hanrotter (Frohmader et al. 2009; Kander et al. 2010). Hertil kommer, at hos hanrotter har seksuel erfaring vist sig at inducere ΔFosB, a Fos familiemedlem i nucleus accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, en trunkeret splejsningsvariant af FosB, er et unikt medlem af Fos-familien på grund af dets større stabilitet (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) og spiller en rolle i forbedret motivation og belønning for misbrugsmisbrug og den langsigtede neurale plasticitet medierende afhængighed (Nestler et al. 2001). ΔFosB danner et heteromert transkriptionsfaktorkompleks (aktivatorprotein-1 (AP-1)) med Jun-proteiner, fortrinsvis JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Gennem inducerbar overekspression af ΔFosB, der primært er begrænset til striatumet ved anvendelse af bi-transgene mus, fremstilles en stofafhængig adfærdsmæssig fænotype trods mangel på tidligere lægemiddeleksponering (McClung et al. 2004). Denne adfærdsmæssige fænotype indbefatter et følsomt lokomotorisk respons på kokain (Kelz et al. 1999), øget præference for kokain (Kelz et al. 1999) og morfin (Zachariou et al. 2006) og øget selvstændig administration af kokain (Colby et al. 2003).

På samme måde som narkotikabelønningen er ΔFosB opreguleret af naturligt givende adfærd og formidler udtryk for disse adfærd. Overekspression af ΔFosB i NAc ved hjælp af gnavermodeller øger frivilligt hjulløb (Werme et al. 2002), instrumental reagerer på mad (Olausson et al. 2006), saccharoseindtag (Wallace et al. 2008), og letter mand (Wallace et al. 2008) og kvindelig (Bradley et al. 2005) seksuel adfærd. Således kan ΔFosB være involveret i formidling af virkningerne af naturlige givende oplevelser. Than aktuelle undersøgelse udvider på tidligere undersøgelser ved specifikt at undersøge ΔFosBs rolle i NAc i de langsigtede resultater af seksuel erfaring med efterfølgende parringsadfærd og neural aktivering i mesolimbic systemet.

For det første blev der etableret hvilke hjerneområder, der er impliceret i belønningskredsløbet og seksuel adfærd, udtrykke sex-oplevelsesinduceret ΔFosB.
Dernæst er effekten af sex-oplevelsesinduceret ΔFosB på parringsinduceret ekspression af c-Fos, et downstream-mål undertrykt af ΔFosB (Renthal et al. 2008) blev undersøgt.
Endelig blev effekten af at manipulere ΔFosB-aktivitet i NAc'en (gen over-ekspression og ekspression af en dominerende negativbindende partner) på seksuel adfærd og erfaringsinduceret lette seksuel motivation og ydeevne bestemt ved anvendelse af virusvektorudgivelsesteknologi.

METODER

Dyr

Voksne mandlige Sprague Dawley-rotter (200-225 gram) blev opnået fra Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Dyr blev anbragt i plexiglasburer med et tunnelrør i samme kønpar gennem hele forsøg. Kolonistuen var temperaturreguleret og opretholdt i en mørk mørkcyklus 12 / 12 hr med mad og vand til rådighed ad libitum undtagen under adfærdstestning. Stimuløse kvinder (210-220 gram) til parring sessioner modtog et subkutant implantat indeholdende 5% østradiolbenzoat og 95% cholesterol efter bilateral ovariektomi under dybere anæstesi (0.35g ketamin / 0.052g Xylazin). Seksuel modtagelighed blev induceret ved administration af 500μg progesteron i 0.1 mL sesamolie ca. 4 timer før testning. Alle procedurer blev godkendt af dyrepleje- og brugskomiteerne ved University of Western Ontario og er i overensstemmelse med CCAC's retningslinjer for hvirveldyr i forskning.

Seksuelt adfærd

Parringssessioner opstod i den tidlige mørke fase (mellem 2-6 timer efter starten af den mørke periode) under dim rød belysning. Før forsøgsudbrud blev dyr tilfældigt opdelt i grupper. Under parringssessioner fik hanrotter til at kopulere til ejakulation eller 1 time, og parametre for seksuel adfærd blev registreret, herunder: monteringslatens (ML; tid fra indføring af kvinden til den første mount), intromission latens (IL; tid fra introduktion af kvinden indtil den første bjerge med vaginal penetration), ejakulationslatens (EL, tid fra den første intromission til ejakulation), efter ejakulationsinterval (PEI; tid fra ejakulation til første efterfølgende intromission), antal hængsler (M; bækkenfremspring uden vaginal penetration), antal intromisser (IM; montering inklusive vaginal penetration) og copuleringseffektivitet (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Antal mounts og intromisser blev ikke medtaget i analysen for dyr, der ikke udviser ejakulation. Mount og intromission latencies er parametre, der tyder på seksuel motivation, mens ejaculationslatens, antallet af monteringer og copuleringseffektivitet afspejler seksuel ydeevne (Hull 2002).

Eksperiment 1: Ekspression af ΔFosB

Seksuelt naive mandlige rotter fik lov til at mate i rene testburer (60 × 45 × 50 cm) til 5 sammenhængende, daglige parringssessioner eller forblev seksuelt naiv. Supplerende tabel 1 skitserer adfærdsparadigmet for eksperimentelle grupper: naivt sex (NNS; n = 5), naivt sex (NS; n = 5), oplevet intet sex (ENS; n = 5) og erfaren sex (ES; n = 4). NS og ES dyr blev ofret 1 time efter ejakulation på den sidste dag for parring for at undersøge parring induceret c-Fos ekspression. NNS dyr blev ofret samtidig med ENS dyr 24 timer efter sidste parringssession for at undersøge sex-erfaringsinduceret ΔFosB. Seksuelt erfarne grupper blev matchet til seksuel adfærd før efterfølgende testning. Der blev ikke påvist signifikante forskelle mellem grupper for eventuelle adfærdsmæssige foranstaltninger inden for den passende parringssession, og sex erfaringsinduceret lettelse af seksuel adfærd blev vist af begge erfarne grupper (Supplerende tabel 2). Kontrol omfatter seksuelt naive mænd, der håndteres samtidigt med parringsdyr, der sikrer udsættelse for kvindelige lugt og vokaliseringer uden direkte kvindelig kontakt.

Til ofre blev dyrene bedøvet dybt bedøvet under anvendelse af natriumpentobarbital (270mg / kg; ip) og perfunderet intrakardielt med 50 ml 0.9% saltopløsning efterfulgt af 500 ml 4% paraformaldehyd i 0.1 M phosphatbuffer (PB). Hjerner blev fjernet og efterfikseret for 1 h ved stuetemperatur i det samme fikseringsmiddel, dernæst nedsænket i 20% saccharose og 0.01% natriumazid i 0.1 M PB og opbevaret ved 4 ° C. Koronale sektioner (35 μm) blev skåret med et frysende mikrotom (H400R, Micron, Tyskland), opsamlet i fire parallelle serier i kryoprotektantopløsning (30% saccharose og 30% ethylenglycol i 0.1 M PB) og opbevaret ved -20 ° C. Frie flydende sektioner blev vasket grundigt med 0.1 M phosphatpufret saltopløsning (PBS; pH 7.3-7.4) imellem inkubationer. Sektioner blev udsat for 1% H₂O₂ for 10 min ved stuetemperatur for at ødelægge endogene peroxidaser, derefter blokeret i PBS + inkubationsopløsning, som er PBS indeholdende 0.1% bovint serumalbumin (katalogpost 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) og 0.4% Triton X -100 (katalogpost BP151-500; Sigma-Aldrich) til 1 h. Sektioner blev derefter inkuberet natten over ved 4 ° C i et polyclonalt antistof med pan FosB-kanin (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Pan-FosB-antistoffet blev hævet mod en intern region delt af FosB og ΔFosB. ΔFosB-IR-cellerne var specifikt FosB-positive, fordi efter det stimulerende tidspunkt (24 timer) nedbrydes alle detekterbare stimulusinducerede FosB'er (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Desuden blev dyr i parning på den sidste dag (NS, ES) aflivet 1 h efter parring, således forud for FosB-ekspression. Western blot-analyse bekræftede påvisningen af ΔFosB ved ca. 37 kD. Efter inkubation af primær antistof blev inkuberet sektioner for 1h i biotinkonjugeret gede-anti-kanin-IgG (1: 500 i PBS +, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) og derefter 1 h i avidin-biotin-hoseradishperoxidase (ABC-elite ; 1: 1K i PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Efter disse inkubationssektioner blev behandlet på en af følgende måder:

1. Enkelt peroxidasemærkning

Afsnit af NNS- og ENS-dyr blev brugt til en hjerneanalyse af seksuel oplevelsesinduceret ΔFosB-akkumulering. Efter ABC-inkubation blev peroxidasekomplekset visualiseret efter behandling i 10 minutter til en kromogenopløsning indeholdende 0.02% 3,3'-diaminobenzidin-tetrahydrochlorid (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) forbedret med 0.02% nikkelsulfat i 0.1 M PB med hydrogenperoxid (0.015%). Sektioner blev vasket grundigt i 0.1 M PB for at afslutte reaktionen og monteret på kodede Superfrost plus glasskinner (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) med 0.3% gelatine i ddH₂0. Efter dehydrering blev alle dias dækket med DPX (dibutylphthalat xylen).

2. Dobbelt immunofluorescens

Afsnit fra alle fire forsøgsgrupper indeholdende NAc og mPFC blev anvendt til analyse af ΔFosB og c-Fos. Efter ABC-inkubation blev sektioner inkuberet for 10 min med biotinyleret tyramid (BT; 1: 250 i PBS + 0.003% H₂O₂ Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) og for 30 min med Alexa 488-konjugeret strepavidin (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Sektioner blev derefter inkuberet natten over med et kaninpolyklonalt antistof, der specifikt genkendte c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) efterfulgt af en 30 min inkubation med gede-anti-kanin Cy3-konjugeret sekundært antistof (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). Efter farvning blev sektionerne vasket grundigt i 0.1 M PB, monteret på kodede glasskinner med 0.3% gelatine i ddH₂0 og dækslet med et vandigt monteringsmedium (Gelvatol) indeholdende anti-fading agent 1,4-diazabicyclo (2,2) octan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistokemiske kontroller indeholdt udeladelse af enten eller begge primære antistoffer, hvilket resulterede i manglende mærkning i den passende bølgelængde.

Dataanalyse

Brain analyse af ΔFosB

To eksperimenter blind for behandling udførte hjernens bred scanning på kodede dias. ΔFosB-immunoreaktive (-IR) celler i hele hjernen blev semikvantitativt analyseret under anvendelse af en skala for at repræsentere antallet af ΔFosB-positive celler som skitseret i Tabel 1. Derudover blev der baseret på semi-kvantitative fund tællinger af ΔFosB-IR-celler talt ved anvendelse af standardområder for analyse i hjerneområder impliceret i belønning og seksuel adfærd ved anvendelse af et kamera lucida-tegningsrør fastgjort til et Leica DMRD-mikroskop (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Tyskland): NAc (kerne (C) og skal (S); 400 × 600μm) analyseret ved tre rostral-kaudale niveauer (Balfour et al. 2004); ventral tegmentalt område (VTA; 1000 × 800μm) analyseret ved tre rostral-caudale niveauer (Balfour et al. 2004) og VTA hale (Perrotti et al. 2005); prefrontal cortex (anterior cinglulate area (ACA); prelimbic cortex (PL); infralimbic cortex (IL); 600 × 800μm hver); caudate putamen (CP; 800 × 800μm); og medial preoptisk nucleus (MPN; 400 × 600 μm) (Supplerende figurer 1-3). To sektioner blev talt pr. Subregion og i gennemsnit pr. Dyr til beregning af gruppens middelværdi. Seksuelt naive og erfarne gruppeværdier af ΔFosB-IR-celler blev sammenlignet for hver subregion ved anvendelse af uparrede t-test.

Sammendrag af ΔFosB-ekspression hos seksuelt naive og erfarne dyr

Analyse af ΔFosB og c-Fos

Billeder blev indfanget ved hjælp af et afkølet CCD-kamera (Microfire, Optronics), der er knyttet til et Leica-mikroskop (DM5000B, Leica Microsystems, Wetzlar, Tyskland) og Neurolucida-software (MicroBrightfield Inc) med faste kameraindstillinger for alle emner (ved brug af 10x-mål). Antal celler, der udtrykker c-Fos-IR eller FosB-IR i standardområder for analyse i NAc-kerne og skal (400 × 600μm hver; Supplerende figur 1) og ACA af mPFC (600 × 800μm; Supplerende figur 3) blev manuelt talt af en observatør blindet til forsøgsgrupperne i 2 sektioner pr. dyr ved anvendelse af Neurolucida software (MBF Bioscience, Williston, VT) og i gennemsnit pr. dyr. Gruppedata for c-Fos eller ΔFosB-celler blev sammenlignet ved anvendelse af tovejs-ANOVA (Faktorer: seksuel oplevelse og sexaktivitet) og Fisher LSD til post-hoc-sammenligninger med et signifikansniveau på 0.05.

Eksperiment 2: ΔFosB ekspressionsmanipulation

Viral vektor-medieret genoverførsel

Seksuelt naive Sprague Dawley-hanrotter blev randomiseret inddelt i grupper forud for stereotaxisk kirurgi. Alle dyr modtog bilaterale mikroinjektioner af rekombinante adenoassocierede virale (rAAV) vektorer kodende for GFP (kontrol; n = 12), vildtype ΔFosB (n = 11) eller en dominant-negativ bindingspartner af ΔFosB betegnet ΔJunD (n = 9) ind i NAc. ΔJunD reducerer ΔFosB-medieret transkription ved konkurrencedygtig heterodimerisering med ΔFosB før binding af AP-1-regionen inden for genpromotorer (Winstanley et al. 2007). Virustiter blev bestemt ved qPCR og evalueret in vivo før studiestart. Titer var 1-2 × 10¹¹ smitsomme partikler pr. ml. rAAV-vektorer blev injiceret i et volumen 1.5 μL / side over 7 minutter (koordinater: AP + 1.5, ML +/- 1.2 fra Bregma; DV-7.6 fra kranietoverflade ifølge Paxinos og Watson, 1998) ved anvendelse af en Hamilton sprøjte (5μL Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA). Vektorerne producerer ingen toksicitet større end kontrolinfusioner alene (Winstanley et al., 2007; For detaljer om AAV-præparation, se Hommel et al., 2003). Adfærdsmæssige forsøg startede 3 uger efter vektorinjektioner, der muliggjorde optimal og stabil virusinfektion (Wallace et al. 2008). Transgenekspression i murine arter topper ved 10 dage og forbliver forhøjet i mindst 6 måneder (Winstanley et al. 2007). Ved forsøgets afslutning blev animalerne perficeret transcardielt, og NAc sektioner blev immunforarbejdet for GFP (1: 20K; kanin anti-GFP antistof; Molecular Probes) ved anvendelse af en ABC-peroxidase-DAB reaktion (som beskrevet ovenfor) til histologisk Kontroller indsprøjtningssteder ved hjælp af GFP som markør (Supplerende figur 4). ΔFosB og ΔJunD-vektorer indeholder også et segment, der udtrykker GFP, adskilt af et indre ribosomal entry site, hvilket muliggør verifikation af injektionsstedet ved GFP-visualisering i alle dyr. Kun dyr med injektionssteder og spredning af virus begrænset til NAc blev medtaget i statistiske analyser. Spredning af virus var generelt begrænset til en del af NAc'en og spredte ikke rostral-caudalt gennem kernen. Desuden forekom spredning af virus stort set begrænset til enten skal eller kerne. Variationen af injektionssteder og spredning i NAc'en påvirker imidlertid ikke virkningen på adfærd. Endelig påvirker GFP-injektionerne ikke seksuel adfærd eller erfaringsfremkaldt tilrettelæggelse af seksuel adfærd sammenlignet med ikke-kirurgiske dyr fra tidligere undersøgelser (Balfour et al. 2004).

Seksuelt adfærd

Tre uger efter viral vektorudlevering blev dyrene parret til en ejakulation (eller for 1 time) til 4 sammenhængende, daglige parringssessioner for at opnå seksuel oplevelse (oplevelsessessioner) og blev efterfølgende testet for langsigtet ekspression af erfaring induceret lettelse af seksuel adfærd 1 og 2 uger (test sessioner 1 og 2) efter den endelige oplevelses session. Seksuelle adfærdsparametre blev registreret under alle parringssessioner som beskrevet ovenfor. Statistiske forskelle for alle parametre under hver parringssession blev sammenlignet inden for og mellem grupper ved hjælp af tovejs gentagne foranstaltninger ANOVA'er (Faktorer: behandling og parringssession) eller envejs ANOVA'er (ejaculationslatens, antal mounts og intromissions; Faktor: behandling eller parring session) efterfulgt af Fisher LSD eller Newman-Keuls tests for post-hoc sammenligninger på et signifikansniveau af 0.05. Specifikt blev de faciliterende virkninger af seksuel oplevelse på parringsparametre sammenlignet mellem oplevelsessession 1 (naiv) og oplevede sessioner 2, 3 eller 4 hver, såvel som mellem eksperimentelle grupper inden for hver oplevelsessession. For at analysere effekter af behandling (vektor) ved langvarig tilrettelæggelse af seksuel adfærd blev parringsparametre sammenlignet mellem erfaringssession 4 og testsession 1 og 2 inden for hver behandlingsgruppe og sammenlignet mellem eksperimentelle grupper inden for hver testsession.

RESULTATER

Seksuel erfaring medfører ΔFosB akkumulering

I første omgang blev en halvkvantitativ undersøgelse af ΔFosB-akkumulering gennem hjernen hos seksuelt erfarne mænd sammenlignet med seksuelt naive kontroller udført. Et resumé af de samlede resultater findes i Tabel 1. ΔFosB-IR-analyse blev fremmet ved at bestemme antallet af FFB-IR-celler i adskillige limb-associerede hjerneområder ved anvendelse af standardområder for analyse. Figur 1 demonstrerer repræsentative billeder af DAB-Ni farvning af NAc af seksuelt naive og erfarne dyr. Signifikant ΔFosB opregulering blev fundet i mPFC subregioner (Figur 2A), NAc kerne og skal (2B), caudate putamen (2B) og VTA (2C). I NAc eksisterede der betydelige forskelle på alle rostral-caudale niveauer i NAc-kernen og -skallen og dataene vist i Figur 2 er gennemsnittet over alle rostro-kaudale niveauer. Derimod var der ingen signifikant stigning i ΔFosB-IR i den hypotalamiske mediale preoptiske kerne (NNS: Avg 1.8 +/- 0.26; ENS: Avg 6.0 +/- 1.86).

Repræsentative billeder, der viser ΔFosB-IR-celler (sort) i NA'en af naiv, ingen sex (A) og oplever ingen sex (B) grupper. aco: anterior commissure Målestang angiver 100 μm.

Antal ΔFosB-IR celler i: A. infralimbic (IL), prelimbic (PL) og anterior cingulate cortex (ACA) subregioner af den mediale præfrontale cortex; B. Nucleus accumbens kerne og skal, og caudate putamen (CP); C. Rostral, midt, kaudal og hale ...

Seksuel erfaring svækker parring-induceret c-Fos

Effekten af seksuel oplevelse på ΔFosB niveauer i NAc blev bekræftet under anvendelse af fluorescensfarvningsteknikker. Derudover blev effekter af seksuel oplevelse på ekspression af c-Fos analyseret. Figur 3 demonstrerer repræsentative billeder af ΔFosB- (grøn) og c-Fos (rød) -IR-celler i alle eksperimentelle grupper (A, NNS; B, NS; C; ENS; D, ES). Seksuel oplevelse øgede signifikant ΔFosB-ekspression i NAc-kerne (Figur 4A: F_1,15 = 12.0; p = 0.003) og skal (Figur 4C: F_1,15 = 9.3; p = 0.008). I modsætning hertil havde parring 1 time før perfusion ikke en effekt på ΔFosB-ekspression (Figur 4A, C) og ingen interaktion mellem seksuel erfaring og parring umiddelbart før perfusion blev påvist. Der var en samlet effekt af parring før perfusion på c-Fos-ekspression i både NAc-kernen (Figur 4B: F_1,15 = 27.4; p <0.001) og skal (Figur 4D: F_1,15 = 39.4; p <0.001). Desuden blev en samlet effekt af seksuel oplevelse påvist i NAc-kernen (Figur 4B: F_1,15 = 6.1; p = 0.026) og skal (Figur 4D: F_1,15 = 1.7; p = 0.211) og en interaktion mellem seksuel oplevelse og parring forud for perfusion blev detekteret i NAc-kernen (F_1,15 = 6.5; p = 0.022), med en tendens i skallen (F_1,15 = 1.7; p = 0.211; F_1,15 = 3.4; p = 0.084). Post-hoc analyser demonstrerede parring-induceret c-Fos ekspression i kerne og skal af sexuelt naive mænd (Figur 4B, D). Hos seksuelt erfarne mænd blev c-Fos imidlertid ikke signifikant øget i NAc-kerne (Figur 4B) og signifikant svækket i skallen (Figur 4D). Således forårsagede seksuel oplevelse en reduktion af parringsinduceret c-Fos-ekspression. P-værdier for specifikke parvise sammenligninger er i figurens legender.

Repræsentative billeder, der viser ΔFosB (grøn) og c-Fos (rød) i NAc for hver forsøgsgruppe. Skalestang angiver 100 μm.

Kønserfaringsinduceret ΔFosB og parringsinduceret c-Fos. Antallet af ΔFosB (Core, A, Shell, C, ACA, E) eller c-Fos (Core, B, Shell, D, ACA, F) immunoreaktive celler for hver gruppe: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) eller ES (n = 4). Data er udtrykt ...

Effekten af seksuel oplevelse på parringsinducerede c-Fos-niveauer var ikke begrænset til NAc. En lignende dæmpning af c-Fos-ekspression blev observeret i ACA hos seksuelt erfarne dyr sammenlignet med seksuelt naive kontroller. Seksuel erfaring havde en signifikant virkning på ΔFosB-ekspression i ACA (Figur 4E: F_1,15 = 154.2; p <0.001). Parring før perfusion havde ingen effekt på ΔFosB-ekspression (Figur 4C) men signifikant øget c-Fos (Figur 4F: F_1,15 = 203.4; p <0.001) i ACA. Desuden blev parringsinduceret c-Fos-ekspression i ACA signifikant reduceret af seksuel erfaring (Figur 4F: F_1,15 = 15.8; p = 0.001). En tovejs interaktion mellem seksuel oplevelse og parring forud for perfusion blev detekteret for c-Fos-ekspression (Figur 4F: F_1,15 = 15.1; p <0.001). P-værdier til specifikke parvise sammenligninger er i figurens forklaringer. Endelig var der ingen signifikant reduktion i parringsinduceret c-Fos-ekspression i den mediale præoptiske kerne (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), et område hvor parringserfaring ikke forårsagede en signifikant stigning i ΔFosB-ekspression, hvilket indikerer, at parringsinduceret c-Fos-ekspression ikke blev påvirket i alle hjerneområder.

ΔFosB i NAc medierer forstærkning af seksuel adfærd

For at undersøge en potentiel molekylær mekanisme til styrkelse af seksuel adfærd som demonstreret af erfaringsinduceret tilrettelæggelse af seksuel adfærd blev virkninger af lokal manipulation af ΔFosB niveauer og dens transkriptionsaktivitet bestemt. Seksuel oplevelse i løbet af de fire på hinanden følgende oplevelsessessioner havde en signifikant virkning på monteringsforsinkelsen (Figur 5A: F_1,23 = 13.8; p = 0.001), intromission latens (Figur 5B: F_1,23 = 18.1; p <0.001) og ejakulationslatens (Figur 5C: GFP, F_11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP-kontroldyr viste den forventede oplevelsesinducerede tilrettelæggelse af seksuel adfærd og viste signifikant lavere latenser til første montering, første intromission og ejakulation under oplevelsessession 4 sammenlignet med oplevelsesession 1 (Figur 5A-C; se figurlegenden for p-værdier). Denne erfaringsinducerede tilrettelæggelse af seksuel adfærd blev også observeret i ΔFosB-gruppen til montering og intromission latenser, men der var ikke en signifikant forskel påvist i ejakulationslatensiteten (Figur 5A-C). I modsætning hertil viste ΔJunD dyr en stunted facilitation; selvom latenser for monteringer, intromissioner og ejakulationer faldt med gentagne parringssessioner, nåede ingen af disse parametre statistisk signifikans, når de sammenlignede mellem oplevelsessessionerne 1 og 4 (Figur 5A-C). Mellem gruppens sammenligninger for hver oplevelsesession viser, at ΔJunD havde signifikant længere ventetider til montering, intromit og ejakulering i løbet af oplevelsessessionerne sammenlignet med ΔFosB og GFP (Figur 5A-C). Derudover havde både seksuel erfaring og behandling betydelige virkninger på kopuleringseffektiviteten (Figur 5F: seksuel oplevelse, F_1,12 = 22.5; p <0.001; behandling, F_1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB hanner havde øget copuleringseffektivitet under oplevelses session 4 i forhold til oplevelses session 1 (Figur 5F). Desuden havde ΔFosB dyr signifikant færre monteringer forud for ejakulation under oplevelses session dag 4 sammenlignet med oplevelses session 1 (Figur 5D: F_10,43 = 4.1; p = 0.004), og at ΔJunD hanner havde signifikant flere hængsler forud for ejakulation, således signifikant nedsat copuleringseffektivitet end nogen af de andre to grupper (Figur 5D og F). Således viste GFP og ΔFosB dyr erfaringsinduceret lettelse af initiering af seksuel adfærd og seksuel præstation, mens ΔJunD dyr ikke gjorde det.

Seksuel opførsel af GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) og ΔJunD (n = 9) dyr: monteringslatens (A), intromissionslatens (B), ejakulationslatens (C), antal monteringer (D) antal intromissioner (E) og copuleringseffektivitet (F). Data er udtrykt ...

For at teste hypotesen om, at ΔFosB-ekspression er kritisk for langsigtet ekspression af erfaringsinduceret tilrettelæggelse af seksuel adfærd blev dyrene testet 1 uge (test session 1) og 2 uger (test session 2) efter den sidste oplevelses session. Faktisk blev faciliteret seksuel adfærd opretholdt i både GFP- og ΔFosB-grupper, da ingen af adfærdsparametrene varierede mellem test sessioner 1 eller 2 og den endelige oplevelses session 4, inden for GFP og ΔFosB grupper (Figur 5A-C; bortset fra ejaculationslatensitet og copuleringseffektivitet i testsession 1 for ΔFosB dyr). Signifikante forskelle mellem ΔJunD dyr og GFP eller ΔFosB grupper blev påvist i begge test sessioner for alle seksuelle opførsel parametre (Figur 5A-F). Der blev ikke fundet nogen forskel mellem eller inden for grupper, når man sammenlignede antallet af intromisser, PEI eller procentdele af dyr, der ejakulerede (100% af mænd i alle grupper ejakulerede i løbet af de sidste fire parringssessioner).

DISKUSSION

Den nuværende undersøgelse viste, at seksuel oplevelse forårsager akkumulering af ΔFosB i flere limbic-associerede hjerneområder, herunder NAc-kernen og skalet, mPFC, VTA og caudate putamen. Hertil kommer, at seksuel erfaring svækkede parringsinduceret ekspression af c-Fos i NAc og ACA. Endelig blev ΔFosB i NAc vist sig at være kritisk til formidling af parring under samkøring af seksuel oplevelse og den langsigtede ekspression af erfaringsinduceret lettelse af seksuel adfærd. Specifikt reducerer ΔFosB-medieret transkriptionsdæmpet oplevelsesinduceret lettelse af seksuel motivation og ydeevne, mens overekspression af ΔFosB i NAc'en forårsagede en forbedret tilrettelæggelse af seksuel adfærd i form af øget seksuel ydeevne med mindre erfaring. Sammen støtter de nuværende fund hypotesen om, at ΔFosB er en kritisk molekylær mediator for den langsigtede neurale og adfærdsmæssige plasticitet induceret af seksuel oplevelse.

De nuværende resultater udvider tidligere undersøgelser, der viser sex-erfaringsinduceret ΔFosB i NAc hos hanrotter (Wallace et al. 2008) og kvindelige hamstere (Hedges et al. 2009). Wallace et al. (2008) viste at rAAV-ΔFosB over-ekspression i NAc forbedret seksuel adfærd hos seksuelt naive dyr under den første parringssession, som det fremgår af færre intromisser til ejakulation og kortere post-ejaculatoriske intervaller, men havde ingen effekt hos seksuelt erfarne mænd (Wallace et al. 2008).

I modsætning hertil viste den nuværende undersøgelse ingen virkninger af ΔFosB-overekspression hos seksuelt naive mænd under den første test, men snarere under og efter erhvervelsen af seksuel oplevelse. ΔFosB over-expressorer viste øget seksuel præstation (øget copuleringseffektivitet) sammenlignet med GFP-dyr.

Derudover testede den aktuelle undersøgelse rollen af ΔFosB ved at blokere ΔFosB-medieret transkription ved anvendelse af en ΔJunD-udtrykkende viral vektor. Forebyggelse af erfaringsfremkaldt stigning i ΔFosB-ekspressionsinhiberet oplevelsesinduceret tilrettelæggelse af seksuel motivation (øget mount og intromission latenser) samt seksuel præstation (øget ejakulationslatens og antal mounts) og efterfølgende langsigtet udtryk for letter seksuel adfærd.

Derfor er disse data de første til at indikere en obligatorisk rolle for ΔFosB i erhvervelsen af erfaringsinduceret lettelse af seksuel adfærd. Desuden viser disse data, at ΔFosB også er kritisk involveret i den langsigtede ekspression af erfaringsinduceret faciliteret adfærd. Vi foreslår, at dette langsigtede udtryk for lettet adfærd repræsenterer en form for hukommelse for naturlig belønning, derfor er ΔFosB i NAc en mediator af belønningsminne. Seksuel oplevelse øgede også ΔFosB niveauer i VTA og mPFC, områder involveret i belønning og hukommelse (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Fremtidige undersøgelser er nødvendige for at belyse en potentiel betydning af ΔFosB opregulering på disse områder for belønningshukommelse.

ΔFosB-ekspression er yderst stabilt og har således stort potentiale som en molekylær mediator af vedvarende tilpasninger af hjernen efter kroniske forstyrrelser (Nestler et al. 2001). ΔFosB har vist sig at vokse gradvist i NAc over flere kokaininjektioner og vedvarer i op til flere uger (Håb et al. 1992; Håb et al. 1994). Disse ændringer i NAc ΔFosB-ekspression er forbundet med lægemiddelbelønningsfølsomhed og afhængighed (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). I modsætning hertil er ΔFosB's rolle i formidling af naturlig belønning blevet understudied. Nylige beviser har opstillet, hvilket tyder på, at ΔFosB induktion i NAc er involveret i naturlig belønning. ΔFosB niveauer øges tilsvarende i NAc efter sukroseindtag og hjulløb. Overekspression af ΔFosB i striatumet ved anvendelse af bitransgene mus eller virale vektorer hos rotter forårsager en forøgelse af saccharoseindtag, øget motivation for mad og øget spontan hjulløb (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). De nuværende data tilføjer væsentligt disse rapporter og understøtter endvidere den opfattelse, at ΔFosB er en kritisk mediator til belønningsforstærkning og naturlig belønningshukommelse.

ΔFosB kan formidle erfaringsinduceret forstærkning af seksuel adfærd via induktion af plasticitet i mesolimbic-systemet. Faktisk forårsager seksuel oplevelse en række langvarige ændringer i mesolimbic-systemet (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; Kander et al. 2010). Dent adfærdsniveauet, en sensibiliseret lokomotorisk reaktion på amfetamin og en forbedret amfetaminbelønning er blevet vist hos seksuelt erfarne hanrotter (Kander et al. 2010); et ændret lokomotorisk respons på amfetamin er også blevet observeret hos kvindelige hamstere (Bradley & Meisel 2001). Endvidere er stigninger i antallet af dendritiske rygsøjler og kompleksiteten af dendritiske arbors blevet fundet efter en afholdenhedsperiode fra seksuel erfaring hos hanrotter (Kander et al. 2010). Den nuværende undersøgelse antyder ΔFosB kan være en specifik molekylær mediator af de langsigtede resultater af seksuel oplevelse. Efter aftale er ΔFosB for nylig blevet vist at være vigtigt for at fremkalde dendritiske rygsøjleændringer som reaktion på kronisk kokainadministration (Dietz et al. 2009; Maze et al. 2010).

Det er ikke klart, hvilken upstream-neurotransmitter (er) der er ansvarlig for at fremkalde ΔFosB i NAc'en, men DA er blevet foreslået som en kandidat (Nye et al. 1995). Næsten alle stoffer af misbrug, herunder kokain, amfetamin, opiater, cannabinoider og ethanol samt naturlige belønninger, øger ΔFosB i NAc (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Begge stoffer med misbrug og naturlige belønninger øger synaptisk DA-koncentration i NAc (Damsma et al. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). ΔFosB induktion med misbrugsmedicin er blevet vist i DA-receptor indeholdende celler, og kokaininduceret ΔFosB er blokeret af en D1 DA receptor antagonist (Nye et al. 1995). Derfor frigives DA-frigivelse for at stimulere ΔFosB-ekspression og derved mediere belønningsrelateret neuroplasticitet. Endvidere understøtter ideen om, at ΔFosB niveauer er DA-afhængige, er konstateringen af, at hjerneområder, hvor seksuel oplevelse ændrede ΔFosB niveauer, modtager stærk dopaminerg input fra VTA, herunder medial prefrontal cortex og basolateral amygdala.

I modsætning hertil øges ΔFosB ikke i det mediale preoptiske område, selv om dette område modtager dopaminerg indgang, om end fra hypotalamiske kilder (Miller & Lonstein 2009). Fremtidige undersøgelser er nødvendige for at teste, om parring-induceret ΔFosB-ekspression og virkningerne af seksuel oplevelse på seksuel motivation og ydeevne er afhængige af DA-handling. Den rolle for DA i seksuel belønning hos hanrotter er for øjeblikket ikke helt klar (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Der er rigeligt bevis for, at DA frigives i NAc under eksponering for en kvinde eller parring (Damsma et al. 1992) og DA neuroner aktiveres under seksuel adfærd (Balfour et al. 2004). Systemiske injektioner af DA-receptorantagonist forhindrer imidlertid ikke seksuel belønningsfremkaldt konditioneret præferencetilstedeværelse (Agmo & Berenfeld 1990) og hypotesen om, at DA er kritisk for oplevelsesinduceret forstærkning af parring er uprøvet.

Det er også uklart, hvad der er nedstrøms mediatorer af ΔFosB effekter på seksuel adfærd. ΔFosB har vist sig at fungere som både en transkriptionsaktivator og repressor gennem en AP-1-afhængig mekanisme (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Talrige målgener er blevet identificeret, herunder det umiddelbare tidlige gen c-fos (Håb et al. 1992; Håb et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dynorphin (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), NFκB-underenheder (Ang et al. 2001) Af dend AMPA glutamat receptor GluR2 subunit (Kelz et al. 1999). De nuværende resultater viser, at parringsinducerede c-Fos-niveauer blev reduceret ved seksuel oplevelse i hjerneområder med forøget ΔFosB (NAc og ACA). Undertrykkelsen af c-Fos forekommer afhængig af perioden siden sidste parring og gentagne parringssessioner, som i tidligere undersøgelser, blev der ikke detekteret et sådant fald i c-Fos hos hanrotter, der blev testet 1-uge efter den endelige parringssession (Balfour et al. 2004) eller efter seksuel erfaring bestående af kun en enkelt parringssession (Lopez & Ettenberg 2002). Endvidere er den nuværende fund i overensstemmelse med beviser for, at ΔFosB undertrykker c-fos-genet efter kronisk amfetamineksponering (Renthal et al. 2008). I overensstemmelse med disse fund blev induktionen af flere umiddelbare, tidlige genmRNA'er (c-fos, fosB, c-jun, junB og zif268) reduceret efter gentagne kokaininjektioner i sammenligning med akutte lægemiddelinjektioner (Håb et al. 1992; Håb et al. 1994), og amfetamininduceret c-fos blev undertrykt efter tilbagetrækning fra kronisk amfetaminadministration (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). Den funktionelle relevans af nedreguleringen af c-Fos-udtryk efter kronisk lægebehandling eller seksuel oplevelse forbliver uklar og har været foreslået at være en vigtig homøostatisk mekanisme til regulering af et dyrs følsomhed over for gentagen belønningseksponering (Renthal et al. 2008).

Som konklusion viser den nuværende undersøgelse, at ΔFosB i NAc spiller en integreret rolle i seksuel belønningshukommelse, der understøtter muligheden for, at ΔFosB er vigtig for generel belønning forstærkning og hukommelse. Resultaterne fra den nuværende undersøgelse belyser endvidere vores forståelse af cellulære og molekylære mekanismer, der formidler seksuel belønning og motivation, og tilføjer til en litteraturgruppe, der viser, at ΔFosB er en vigtig aktør i afhængighedsudviklingen ved at demonstrere en rolle for ΔFosB i naturlig belønning forstærkning.

Supplerende materiale

Supp Fig Fig S1-S4 & Tabel S1-S2

Klik her for at se.^{(167K, pdf)}

Anerkendelser

Denne forskning blev støttet af tilskud fra de canadiske institutter for sundhedsforskning til LMC, National Institute of Mental Health til EJN, og Canada's Naturvidenskabelige Forskningsråd til KKP og LMC.

REFERENCER

Agmo A. Mandlig rotte seksuel adfærd. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
Agmo A, Berenfeld R. Forstærkning af ejakulationsegenskaber hos hanrotten: opioids og dopaminers rolle. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Induktion af nuklear faktor kappaB i nucleus accumbens ved kronisk kokain administration. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksuel adfærd og seksuelt forbundne miljøindikatorer aktiverer mesolimbic systemet hos hanrotter. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Effekter af kronisk eksponering for kokain reguleres af neuronproteinet Cdk5. Nature. 2001;410: 376-380. [PubMed]
Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopamin læsioner hos kvindelige hamstere (Mesocricetus auratus) afskaffer de følsomme virkninger af seksuel erfaring på copulatoriske interaktioner med mænd. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
Bradley KC, Meisel RL. Seksuel adfærd induktion af c-Fos i nucleus accumbens og amfetaminstimuleret lokomotorisk aktivitet er sensibiliseret ved tidligere seksuel erfaring hos kvindelige syriske hamstere. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomafhængige og uafhængige mekanismer til FosB destabilisering: identifikation af FosB degron domæner og implikationer for DeltaFosB stabilitet. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
Chao J, Nestler EJ. Molekylær neurobiologi af stofmisbrug. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulering af delta FosB og FosB-lignende proteiner ved elektrokonvulsiv anfald og kokainbehandling. Molekylær farmakologi. 1995;48: 880-889. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatal celletypespecifik overekspression af DeltaFosB øger incitamentet til kokain. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Central regulering af ejakulation. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Seksuel adfærd øger dopaminoverførslen i nucleus accumbens og striatum hos hanrotter: sammenligning med nyhed og lokomotion. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
Dietz DM, Maze I, Mekanik M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Væsentlig rolle for ΔFosB i kokainregulering af dendritiske spines af nucleus accumbens neuroner. Samfund for Neurovidenskab Abstrakt. 2009
Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Blanding fornøjelser: Gennemgang af stoffers virkninger på kønsadfærd hos mennesker og dyremodeller. Horm Behav. 2009 I tryk.
Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB overekspression i kernen accumbens forbedrer seksuel belønning i kvindelige syriske hamstere. Genes Brain Behav. 2009;8: 442-449. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Feeding og hypotalamisk stimulering øger dopaminomsætningen i accumbens. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Fødevarebelønning og kokain øger ekstracellulær dopamin i nucleus accumbens målt ved mikrodialyse. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Væsentlig rolle for fosB-genet i molekylære, cellulære og adfærdsmæssige virkninger af kroniske elektrokonvulsive anfald. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokalt genknockdown i hjernen ved anvendelse af viral-medieret RNA-interferens. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
Håb B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulering af øjeblikkelig tidlig genekspression og AP-1 binding i rottekernen accumbens af kronisk kokain. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Håber BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induktion af et langtidsholdbart AP-1-kompleks bestående af ændrede Fos-lignende proteiner i hjernen ved kronisk kokain og andre kroniske behandlinger. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mandlige seksuelle adfærd. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Akutte og kroniske amfetaminbehandlinger regulerer forskelligt neuropeptid messenger-RNA-niveauer og Fos-immunreaktivitet i råtta-striatale neuroner. Neuroscience. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
Jenkins WJ, Becker JB. Dynamiske stigninger i dopamin under paced copulation i hunrotten. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Ekspression af transkriptionsfaktoren deltaFosB i hjernen styrer følsomheden overfor kokain. Nature. 1999;401: 272-276. [PubMed]
Lopez HH, Ettenberg A. Eksponering for hunrotter producerer forskelle i c-fos induktion mellem seksuelt naive og erfarne hanrotter. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mekaniker M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Væsentlig rolle for histon-methyltransferasen G9a i kokaininduceret plasticitet. Science. 2010;327: 213-216. [PMC gratis artikel] [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Regulering af genekspression og kokainbelønning fra CREB og DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylær switch for langsigtet tilpasning i hjernen. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
Miller SM, Lonstein JS. Dopaminerge fremspring til det mediale preoptiske område af postpartum rotter. Neuroscience. 2009;159: 1384-1396. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkriptionskobling i neuroner: rolle af cellulære umiddelbare tidlige gener. Trends Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
Nestler EJ. Molekylære mekanismer af stofmisbrug. Neurofarmakologi. 2004;47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
Nestler EJ. Neurobiologi af kokainafhængighed. Sci Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Nestler EJ. Anmeldelse. Transkriptionelle afhængighedsmekanismer: DeltaFosBs rolle. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: en vedvarende molekylomskifter til afhængighed. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Nye HE, Håber BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiske undersøgelser af reguleringen af kronisk FOS-relateret antigen induktion med kokain i striatum og nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB i kernen accumbens regulerer fødevareforstærket instrumental adfærd og motivation. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducerbart hjernegionsspecifik ekspression af en dominerende negativ mutant af c-Jun i transgene mus reducerer følsomheden overfor kokain. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB akkumuleres i en GABAergic cellepopulation i den bageste hale af det ventrale tegmentale område efter psykostimulerende behandling. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Induktion af deltaFosB i belønningsrelaterede hjernestrukturer efter kronisk stress. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Forskellige mønstre af DeltaFosB induktion i hjernen af misbrugsmisbrug. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Pfaus JG. Veje af seksuel lyst. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Konditionering og seksuel adfærd: en anmeldelse. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Et top-down perspektiv på dopamin, motivation og hukommelse. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticitet i mesolimbic systemet induceret af naturlig belønning og efterfølgende belønning afholdenhed. Biol Psychiatry. 2010;67: 872-879. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB medierer epigenetisk desensibilisering af c-fos-genet efter kronisk amfetamineksponering. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stak A, Kabbaj M, Nestler EJ. Gennemgående analyse af chromatinregulering af kokain afslører en rolle for sirtuiner. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuel belønning hos hanrotter: Virkninger af seksuel erfaring på betingede sted præferencer forbundet med ejakulation og intromissioner. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylering af DeltaFosB medierer dens stabilitet in vivo. Neuroscience. 2008
Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulering af DeltaFosB stabilitet ved phosphorylering. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. DeltaFosBs indflydelse i kernen accumbens på naturlig belønningsrelateret adfærd. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC gratis artikel] [PubMed]
Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB regulerer hjulløb. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB induktion i orbitofrontal cortex medierer tolerance overfor kokain-induceret kognitiv dysfunktion. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. En afgørende rolle for DeltaFosB i kernen accumbens i morfin handling. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos letter opkøbet og udryddelsen af vedvarende ændringer i kokain. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]